ES2292529T3 - El uso de rosiglitazona para tratar trastornos squiatricos. - Google Patents

Abstract

Uso de 5-(4-[2-(N-metil-N-(2-piridil)amino)etoxi]bencil)-2, 4-tiazolidin-diona o una de sus formas tautómeras, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus solvatos farmacéuticamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos siquiátricos.

Description

El uso de rosiglitazona para tratar trastornos psiquiátricos.

Esta invención se refiere a un nuevo tratamiento y en particular al tratamiento de trastornos psiquiátricos.

La regeneración incrementada de axones dañados y la plasticidad sináptica intensificada pueden ser beneficiosas en diversos trastornos psiquiátricos en los que se cree que una disminución de la plasticidad sináptica desempeña un papel en la patología de la enfermedad.

Las enfermedades en las que la plasticidad sináptica incrementada puede ser beneficiosa, son los trastornos psiquiátricos, incluyendo esquizofrenia y depresión. Se ha descrito que los pacientes que están sometidos a un tratamiento crónico con antidepresivos eficaces muestran marcadores incrementados de plasticidad sináptica. Los compuestos que intensifican la capacidad de las neuronas para alargar las neuritas y potencialmente incrementar la neuroplasticidad pueden, por tanto, ser eficaces en la profilaxis y el tratamiento de estos trastornos.

La Solicitud de Patente Europea, número de publicación 0306228, describe ciertos derivados de tiazolidindiona que se describen, entre otras cosas, por tener actividad hipoglucémica e hipolipidémica y actividad en el tratamiento de ciertos trastornos de la alimentación. El compuesto del Ejemplo 30 del documento EP 0306228 es 5-(4-[2-(N-metil-N-(2-piridil)amino)etoxi]bencil)-2,4-tiazolidindiona (o "Compuesto (I)").

Se sabe que la isoforma \gamma del receptor activado por el proliferador de peroxisoma (en la presente memoria denominada en los sucesivo PPAR\gamma) es un miembro de una superfamilia de receptores nucleares que incluye receptores para las hormonas esteroideas, tiroideas y retinoideas (Evans, Science 240, 889-895, (1988)).

Se sabe a partir de J. Biol. Chem., 270, 12963-12966, que las tiazolidindionas, tales como el Compuesto (I) son agonistas de PPAR\gamma.

Ahora se indica sorprendentemente que los agonistas de PPAR\gamma, tales como el Compuesto (I) estimulan el crecimiento y/o la reparación de neuronas y, por tanto, están indicados como eficaces en el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades o estados caracterizados por degeneración, lesión o plasticidad deteriorada de las neuronas.

Por consiguiente, la invención proporciona el uso de 5-(4-[2-(N-metil-N-(2-piridil)amino)etoxi]bencil)-2,4-tiazolidindiona o una de sus formas tautómeras, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus solvatos farmacéuticamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos psiquiátricos.

Los trastornos o estados caracterizados por plasticidad incrementada incluyen trastornos psiquiátricos, tales como esquizofrenia y depresión, adecuadamente esquizofrenia, adecuadamente depresión.

El compuesto (I) puede existir en una de diversas formas tautómeras, todas las cuales están abarcadas por la presente invención como formas tautómeras individuales o como sus mezclas. El compuesto (I) también contiene un átomo de carbono quiral, y por tanto existe en una o más formas estereoisómeras. Se apreciará que el método de la invención abarca todas de dichas formas del compuesto (I) ya sea como isómeros individuales o ya sea como mezclas de isómeros, incluyendo racematos.

Cuando se utiliza aquí la expresión "agonista de PPAR\gamma", se refiere a un agonista, tal como un agonista de bajo peso molecular, del receptor activado por proliferadores de peroxisomas del subtipo gamma, siendo este receptor nuclear un miembro de la familia de factores de transcripción activados por ligandos que incluyen los receptores esteroideos, retinoideos y tiroideos.

También se puede determinar actividad agonista de PPAR\gamma por el uso de la metodología descrita por Lehmann et al: Journal of Biological Chem., 270, 12953-12956 (1995).

Derivados adecuados del Compuesto (I) son los derivados farmacéuticamente aceptables, por ejemplo sales y solvatos.

Los derivados adecuados del Compuesto (I) incluyen los descritos en las publicaciones mencionadas anteriormente.

Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen sales derivadas de ácidos apropiados, tales como sales de adición de ácido, o de bases apropiadas.

Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen sales metálicas, tales como por ejemplo sales de aluminio, sales de metales alcalinos tales como litio, sodio o potasio, sales de metales alcalino-térreos, tales como calcio o magnesio y sales de amonio o amonio sustituido, por ejemplo las formadas con alquil inferior-aminas tales como trietilamina, hidroxi-alquilaminas, tales como 2-hidroxietilamina, bis-(2-hidroxietil)amina o tri-(2-hidroxietil)amina, cicloalquilaminas, tales como biciclohexilamina, o con procaína, dibencilpiperidina, N-bencil-b-fenetilamina, deshidroabietilamina, N,N'-bis-deshidroabietilamina, glucamina, N-metilglucamina o bases del tipo piridina, tales como piridina, colidina, quinina o quinolina.

Las sales de adición de ácido adecuadas incluyen sales inorgánicas farmacéuticamente aceptables, tales como sulfato, nitrato, fosfato, borato, hidrocloruro e hidrobromuro y sales de adición de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables tales como acetato, tartrato, maleato, citrato, succinato, benzoato, ascorbato, metanosulfonato, alfa-ceto-glutarato y alfa-glicerofosfato, especialmente la sal maleato.

Sales farmacéuticamente aceptables adecuadas del Compuesto (I) son las descritas en los documentos EP 0306228 y WO 94/05659, e incluyen las sales maleato.

Los solvatos farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen los hidratos.

Los solvatos farmacéuticamente aceptables adecuados del Compuesto (I) son como se describen en los documentos EP 0306228 y WO 94/05659, e incluyen los hidratos.

El Compuesto (I), o su forma tautómera, y/o su sal farmacéuticamente aceptable, y/o un solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, pueden prepararse utilizando procedimientos descritos en los documentos EP 0306228 y WO 94/05659.

En el tratamiento mencionado anteriormente, el Compuesto (I) o uno de sus tautómeros o una de sus sales farmacéuticamente aceptables o uno de sus solvatos farmacéuticamente aceptables puede ser administrado per se o, preferiblemente, como una composición farmacéutica que comprende también un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En el tratamiento de la invención, el Compuesto (I) o una de sus formas tautómeras se formula y administra de acuerdo con los métodos descritos en las solicitudes de patentes y en las patentes que se han mencionado anteriormente.

Como se utiliza en la presente memoria, la expresión "farmacéuticamente aceptable" abarca compuestos, composiciones e ingredientes tanto para uso humano como veterinario: por ejemplo la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" abarca una sal veterinariamente aceptable.

Los compuestos activos se administran habitualmente como el único agente medicamentoso, pero se pueden administrar en combinación con otros agentes medicamentosos.

La composición, si se desea, puede estar en forma de un envase acompañado por instrucciones escritas o impresas para su utilización.

Habitualmente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se destinarán a la administración oral, aunque también se consideran composiciones para administrarse por otras vías, tales como por inyección y absorción percutánea.

Composiciones particularmente adecuadas para administración oral están en formas de dosificación unitaria tales como comprimidos y cápsulas. También se pueden utilizar otras formas de dosificación unitaria fijas, tales como polvos presentados en sobrecitos.

De acuerdo con la práctica farmacéutica convencional, el vehículo puede comprender un diluyente, carga, disgregante, agente humectante, lubricante, colorante, saborizante u otro agente auxiliar convencional.

Los vehículos típicos incluyen, por ejemplo, celulosa microcristalina, almidón, sal sódica de glicolato de almidón, polivinilpirrolidona, polivinilpolipirrolidona, estearato de magnesio, lauril-sulfato de sodio o sacarosa.

Las dosificaciones adecuadas del Compuesto (I) incluyen las dosis conocidas para estos compuestos que se describen o aluden en textos de referencia tales como las Farmacopeas Británica y Estadounidense, Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co.), Martindale The Complete Drug Reference (Londres, The Pharmaceutical Press, 32ª Edición) o las publicaciones mencionadas anteriormente, o dosis que puedan determinarse por procedimientos clásicos.

Las dosificaciones adecuadas del Compuesto (I) incluyen las descritas en los documentos EP 0306228 y WO 94/05659 y 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ó 12 mg de Compuesto (I).

Dosificaciones particulares del Compuesto (I) son 2 mg, 4 mg y 8 mg.

La composición de la invención se puede administrar 1 a 6 veces al día, pero lo más preferiblemente 1 ó 2 veces al día, o algún otro de los períodos descritos en las publicaciones mencionadas anteriormente.

Las composiciones orales sólidas se pueden preparar por métodos convencionales de mezcla, rellenado o formación de comprimidos. Las operaciones repetidas de mezcla pueden utilizarse para distribuir el agente activo uniformemente en las composiciones que contienen grandes cantidades de cargas. Estas operaciones por supuesto son convencionales en la técnica. Los comprimidos se pueden revestir de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica normal, en particular con un revestimiento entérico.

Las preparaciones orales líquidas pueden estar en forma de, por ejemplo, emulsiones, jarabes o elixires, o pueden presentarse como un producto seco para reconstituirlo con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Tales preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales tales como agentes de suspensión, por ejemplo sorbitol, jarabe, metilcelulosa, gelatina, hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, gel de estearato de aluminio, grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes, por ejemplo lecitina, monooleato de sorbitán o goma arábiga, vehículos no acuosos (que pueden incluir aceites comestibles), por ejemplo aceite de almendra, aceite de coco fraccionado, ésteres oleosos tales como ésteres de glicerina, propilenglicol o alcohol etílico; conservantes, por ejemplo p-hidroxibenzoato de metilo o propilo o ácido sórbico; y si se desea agentes saborizantes o colorantes convencionales.

Para administración parenteral, se preparan formas de dosificación unitaria fluidas utilizando el compuesto y un vehículo estéril y, dependiendo de la concentración utilizada, pueden suspenderse o disolverse en el vehículo. Para preparar soluciones, el compuesto puede disolverse en agua por inyección y esterilizarse por filtración antes de cargarse en un vial o ampolla adecuado y sellarse. Ventajosamente, en el vehículo se pueden disolver agentes auxiliares tales como un anestésico local, un conservante y un tampón. Para intensificar la estabilidad, la composición se puede congelar después de cargarse en el vial y el agua puede separarse a vacío. Las suspensiones parenterales se preparan sustancialmente de la misma manera, excepto que el compuesto se suspende en el vehículo en lugar de disolverse, y la esterilización no puede llevarse a cabo por filtración. El compuesto puede esterilizarse por exposición a óxido de etileno antes de suspenderse en el vehículo estéril. Ventajosamente, se incluye un tensioactivo o agente humectante en la composición para facilitar la distribución uniforme del compuesto.

Las composiciones pueden contener de 0,1 a 99% en peso, preferiblemente de 10 a 60% en peso, del material activo, dependiendo del método de administración.

Las composiciones, si se desea, pueden estar en forma de un paquete acompañado por instrucciones escritas o impresas para su utilización.

Las composiciones se formulan de acuerdo con métodos convencionales, tales como los descritos en textos de referencia clásicos, por ejemplo las Farmacopeas Británica y Estadounidense, Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co.), Martindale The Complete Drug Reference (Londres, The Pharmaceutical Press, 32ª Edición) y Harry's Cosmeticology (Leonard Hill Books).

Un índice de plasticidad sináptica es la transmisión sináptica incrementada. Éste se puede medir en neuronas de hipocampo cultivadas utilizando registros electrofisiológicos como describen Levine E S, Crozier R A, Black I B, Plummer M R. "Brain derived neurotrophic factor modulates hippocampal synaptic transmission by increasing N-methyl-D aspartic acid receptor activity", en Proc. Natl. Acad. Sci USA Vol 95 pp. 10235-10239 (1998). Así, las neuronas serían tratadas con un compuesto de ensayo, tal como el Compuesto (I) y después se determinaría su transmisión sináptica frente a un control tras la exposición al glutamato.

No cabe esperar efectos toxicológicos adversos para las composiciones o métodos de la invención en los intervalos de dosificación mencionados anteriormente.

Las siguientes Descripciones y Ejemplos ilustran la invención aunque sin limitarla.

Descripción y Ejemplos Cultivo primario de células neuronales

Los hipocampos de embriones de ratas en el día 18 de gestación se disecaron, se incubaron en tripsina (0,08%, 30 min a 37ºC) y se disociaron mecánicamente (Skaper et al., 1990). Las células de hipocampo se resuspendieron en medio neurobasal enriquecido con B27, anti-oxidantes, glutamina 1 mM, glutamato 25 \muM, piruvato 1 mM, +/- Compuesto 1 (10 nM a 5 \muM) o vehículo (DMSO) como control.

Para valoraciones de los resultados, las células se cultivaron en placas a una densidad de 3.000 células por pocillo en placas de 96 pocillos que se habían revestido previamente con poli-D-lisina seguida por FCS al 10%. Para el aislamiento del ARN, las células se cultivaron en placas a 1 x 106 células por pocillo en placas de cultivo de tejidos de 35 mm que se habían revestido previamente con poli-D-lisina seguida de FCS al 10%.

Aislamiento de ARN y transcripción inversa

Se preparó ARN a partir de células lisadas en reactivo Tri (Sigma, Dorset, Reino Unido) utilizando 1 ml de reactivo Tri por placa de 10 cm^{2}. Se extrajo ARN total del tejido de acuerdo con el protocolo sugerido por el fabricante, con la adición de una etapa de extracción con cloroformo extra y separación de fases y un lavado extra del ARN aislado en etanol al 70%. El ARN se resuspendió en agua destilada dos veces y tratada en autoclave, y se calculó la concentración por medición de A260. La calidad del ARN se determinó por electroforesis en un gel de agarosa al 1%. Se sintetizó la primera cadena del ADNc utilizando oligo(dT)15 y 500 ng de cada muestra de ARN; ditiotreitol 0,01 M, cada uno de los dNTP 0,5 mM, 0,5 \mug de cebador de oligo (dT)15, 40 unidades de inhibidor de ribonucleasa RNAsaOUT (Life Technologies, Paisley, RU), 200 unidades de transcriptasa inversa SuperscriptII (Life Technologies, Paisley, Reino Unido). Las reacciones de transcripción inversa se realizaron por duplicado junto con una reacción adicional en la cual se omitió la enzima transcriptasa inversa para permitir la determinación de la contaminación del ARN por ADN genómico. Se llevó a cabo la PCR Taqman utilizando un detector de secuencias ABI prism 7700 (Perkin Elmer, Cheshire, Reino Unido) en las siguientes condiciones: 50ºC durante 2 minutos, 95ºC durante 10 minutos seguido por cuarenta ciclos de 95ºC durante 15 segundos, 60ºC durante 1 minuto. La mezcla de reacción contenía muestras de ADNc (5 \mul de reacción RT 20 \mul); MgCl2 2,5 mM, dATP, dCTP, dGTP y dUTP 0,2 mM, 0,1 \muM de cada cebador, sonda Taqman 0,05 \muM, 0,01 unidades de uracil-N-glicosilasa AmpErase (Perkin Elmer, Cheshire, Reino Unido), 0,0125 unidades de ADN-polimerasa Amplitaq Gold (Perkin Elmer, Cheshire, Reino Unido). El cebador Taqman y el conjunto de sondas para PPAR-gamma de rata fueron diseñados utilizando el programa informático Primer Express (Perkin Elmer, Cheshire, Reino Unido). Las secuencias de cebador y sonda (5' a 3') (cebador directo, cebador inverso y sonda Taqman);

100

(Amplicon tiene un tamaño de 80 pb (pares de bases) y las coordenadas de amplicon dentro del ARNm de PPAR-gamma de rata (acceso AB011365) son 176-255).

Se llevaron a cabo amplificaciones por triplicado, y después de la amplificación un amplicon representativo de cada muestra (2 \mul) se sometió a electroforesis en un gel de agarosa al 4% para determinar su peso molecular.

Valoraciones de los resultados en neuritas

El Compuesto (I) se solubilizó en DMSO y se añadió al medio de cultivo en el momento de cultivar las células en placas a una dilución de 1:1.000. Se añadió vehículo solamente (1:1.000) al medio de cultivo de los controles no tratados. Después de 48 horas, las células se fijaron con paraformaldehído al 4% durante 1 hora en hielo, se lavaron con PBS y se tiñeron utilizando Coomassie. Los ensayos se cuantificaron utilizando un sistema de análisis de imágenes KS300 (Imaging Associates, Reino Unido). Para cada célula medida, se midió la longitud desde el borde de la célula hasta el extremo de la neurita más larga para 100 células/pocillo para cada tratamiento por triplicado. Todos los datos son valores medios y SEM reunidos de tres experimentos diferentes*. Los resultados se expresan como porcentaje de la longitud de neuritas de células tratadas con vehículo a solas.

* El Compuesto (I) a 0,01 y 0,05 \muM ha sido analizado en un experimento solamente (n = 3).

Resultados: los resultados se expresan en las Figuras 1(a), 1(b) y 2 adjuntas, que se definen como sigue:

Figura 1(a): PPAR-gamma es expresado por neuronas primarias de hipocampo de rata. (a) Gráfica de amplificación PCR (Taqman) a tiempo real de PPAR-gamma en ADNc derivado de neuronas primarias de hipocampo de rata;

Figura 1(b): Amplicones de análisis Taqman separados en gel de agarosa al 4%. Como control positivo, se utilizó ADNc derivado de adiposa. El peso molecular fue el previsto; y

Figura 2: El Compuesto (I) incrementa la longitud de las neuritas en neuronas primarias de hipocampo de rata de un modo dependiente de la dosis. El Compuesto (I) a concentración 100 nM incrementa el nacimiento si se compara con los controles no tratados en aproximadamente 50%.

Referencias

Skaper SD, Facci L, Milani D, Leon A, y Toffano G (1990). In Methods in Neurosciences, Vol 2, Academic Press, San Diego.

Claims (6)

1. Uso de 5-(4-[2-(N-metil-N-(2-piridil)amino)etoxi]bencil)-2,4-tiazolidin-diona o una de sus formas tautómeras, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, o uno de sus solvatos farmacéuticamente aceptables para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos psiquiátricos.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que las sal farmacéuticamente aceptable es una sal maleato.

3. Uso según la reivindicación 1 ó 2, en el que el solvato farmacéuticamente aceptable es un hidrato.

4. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que los trastornos se seleccionan de esquizofrenia y depresión.

5. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el trastorno psiquiátrico es esquizofrenia.

6. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el trastorno psiquiátrico es depresión.