ES2268584T3 - Derivados del acido 3-(4-piridin-2-ilamino)-butiril)-2,3,4, 4a, 9, 9a-hexahidro-1h-3-aza-fluoren-9-il) acetico e indanilos triciclicos relacionados como inhibidores alfav beta3 y alfav y beta5 integrina para el tratamiento del cancer y de la angina inestable. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de Fórmula (I): donde: R se selecciona del grupo formado por heterociclilo y heteroarilo; R1 es de uno a dos sustituyentes seleccionados del grupo formado por hidrógeno, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, hidroxi, -NRARB, y halógeno; donde alquilo y alcoxi están opcionalmente sustituidos en un carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por halógeno, hidroxi, o -NRARB; donde RA y RB son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno o alquilo C1-C6; R2 es de uno a dos sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por hidrógeno, alquilo C1-C4, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, alcoxi C1-C4, -NRCRD, hidroxi, y halógeno; donde alquilo, alquenilo, alquinilo, y alcoxi están opcionalmente sustituidos con en un átomo de carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo de halógeno, hidroxi, alcoxi C1-C4, y RC-RD; donde RC y RD son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-C6; RC y RD se toman opcionalmente junto con los átomos a los cuales están anclados para formar un anillo monocíclico de cinco a siete miembros; Z se selecciona del grupo formado por -CH2- y -CH-; A se selecciona del grupo formado por arilo, - CH(CH2)1-3, y -(CH2)1-3 siempre que cuando A sea - CH(CH2)1-2- y Z sea -CH- se forme un doble enlace entre A y Z; B es -NH- cuando está presente opcionalmente; m y n son enteros de 1 a 3; X se selecciona del grupo formado por O, S, y dos átomos de hidrógeno; U se selecciona independientemente entre -CH-, N, o S, siempre que no más de una U represente S o N; y que U pueda ser solamente S cuando W no esté presente; W se selecciona del grupo formado por -CH- y N cuando esté opcionalmente presente; y los enantiómeros, diastereoisómeros, tautómeros, solvatos, o sales farmacéuticamente aceptables y medicamentos de los mismos.

Description

Derivados del ácido 3-(4-piridin-2-ilamino)-butiril)-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-3-aza-fluoren-9-il)acético e indanilos tricíclicos relacionados como inhibidores \alphaV\beta3 y \alphaV\beta5 integrina para el tratamiento del cáncer y de la angina inestable.

Campo de la invención

La presente invención está dirigida a compuestos novedosos, a composiciones farmacéuticas que los contienen, y a su uso como inhibidores de la integrina \alphaV. Más concretamente, los derivados de indanilo tricíclicos de la presente invención son antagonistas de los receptores de integrina \alphaV\beta3, \alphaV\beta5 o \alphaV\beta3/\alphaV\beta5 duales y son útiles para tratar trastornos mediados por integrinas tales como, pero no limitados a, angina inestable, trastornos tromboembólicos, osteoporosis, metástasis y crecimiento de tumores malignos, retinopatía diabética, artritis, restenosis coronaria, inhibición de enfermedades virales y adherencias quirúrgicas.

Antecedentes de la invención

Se cree que los antagonistas del receptor de integrina \alphaV\beta3 y \alphaV\beta5 pueden ser útiles para el tratamiento de una amplia variedad de estados de enfermedad y pueden representar una nueva clase de fármacos. Las integrinas \alphaV\beta3/\alphaV\beta5 son receptores de adherencia celular que reconocen específicamente proteínas de la matriz que contienen la unidad tripeptídica de adherencia celular arginina-glicina-ácido aspártico (RGD). Ambas integrinas son expresadas en las células endoteliales, células de la musculatura lisa, osteoclastos y células tumorales, comportándose como mediadores de la adherencia celular, la migración, y la supervivencia.

La expresión de estas integrinas es típicamente mínima en los vasos sanguíneos normales pero puede ser sobre-regulada significativamente en respuesta a una variedad de estímulos, conduciendo a condiciones tales como angiogénesis. Basándose en los resultados de los modelos animales in vivo, los antagonistas de las integrinas \alphaV\beta3/\alphaV\beta5 pueden ser útiles para el tratamiento de la osteoporosis, el crecimiento y la metástasis de tumores malignos, la retinopatía diabética, la artritis y la restenosis coronaria (Ref: Miller, W.H., Keenan, R.M.: Willette, T.N.; Lark, M.W., DDT 2000, 5(9), 397-408).

Un objeto de la presente invención es proporcionar derivados de indanilo tricíclicos que son antagonistas de los receptores de integrinas \alphaV\beta3, \alphaV\beta5 o \alphaV\beta3/\alphaV\beta5 dual útiles para el tratamiento de una amplia variedad de estados de enfermedad mediados por integrinas. Otro objeto de la presente invención es proporcionar un procedimiento para preparar compuestos de indanilo tricíclicos, composiciones, intermedios y derivados de los mismos.

Compendio de la invención

La presente invención está dirigida a compuestos de indanilo sustituidos de Fórmula (I):

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donde

R se selecciona del grupo formado por heterociclilo y heteroarilo;

R^{1} es de uno a dos sustituyentes seleccionados del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, hidroxi, -NR^{A}R^{B}, y halógeno;

donde alquilo y alcoxi están opcionalmente sustituidos en un carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por halógeno, hidroxi, o -NR^{A}R^{B};

donde R^{A} y R^{B} son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

R^{2} es de uno a dos sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, -NR^{C}R^{D}, hidroxi, y halógeno;

donde alquilo, alquenilo, alquinilo, y alcoxi están opcionalmente sustituidos con en un átomo de carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo de halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, y R^{C}-R^{D};

donde R^{C} y R^{D} son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6}; R^{C} y R^{D} se toman opcionalmente junto con los átomos a los cuales están anclados para formar un anillo monocíclico de cinco a siete miembros;

Z se selecciona del grupo formado por -CH_{2}- y -CH-;

A se selecciona del grupo formado por arilo, -CH(CH_{2})_{1-3}, y -(CH_{2})_{1-3} siempre que cuando A sea -CH(CH_{2})_{1-2}- y Z sea -CH- se forme un doble enlace entre A y Z;

B es -NH- cuando está presente opcionalmente;

m y n son enteros de 1 a 3;

X se selecciona del grupo formado por O, S, y dos átomos de hidrógeno;

U se selecciona independientemente entre -CH-, N, o S, siempre que no más de una U represente S o N; y que U pueda ser solamente S cuando W no esté presente;

W se selecciona del grupo formado por -CH- y N cuando esté opcionalmente presente;

y los enantiómeros, diastereoisómeros, tautómeros, solvatos, o sales farmacéuticamente aceptables y medicamentos de los mismos.

La presente invención también esta dirigida a métodos para producir los presentes compuestos indanilo tricíclicos y las composiciones farmacéuticas y medicamentos de los mismos.

La presente invención está dirigida adicionalmente a un método para tratar o aliviar un trastorno mediado por receptores de integrina. Entre estos métodos de tratamiento para los trastornos mediados por receptores de integrina se incluyen pero no están limitados a la angina inestable, los trastornos tromboembólicos, la osteoporosis, el tratamiento y/o la inhibición de la restenosis (es decir, la recurrencia de estenosis tras la cirugía correctiva de las válvulas del corazón), la aterosclerosis, la angiogénesis (es decir, la formación de nuevos vasos sanguíneos), la retinopatía diabética, la degeneración macular, el crecimiento y la metástasis de tumores malignos, la artritis, la inhibición de enfermedades virales y las adherencias quirúrgicas.

Definiciones químicas

Según se utiliza aquí, "halógeno" representará cloro, bromo, flúor y yodo.

Según se utiliza aquí, el término "alquilo", se utilice solo o como parte de un grupo sustituido, incluye cadenas lineales y ramificadas. Por ejemplo, entre los radicales alquilo se incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, pentilo y similares.

Según se utiliza aquí, a menos que se indique de otro modo, "alcoxi" indicará un radical éter con oxígeno de los grupos alquilo de cadena lineal o ramificada descritos antes. Por ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, sec-butoxi, t-butoxi, n-hexiloxi y similares.

Según se utiliza aquí el término "cicloalquilo" hace referencia a un anillo alquílico monocíclico saturado o parcialmente insaturado opcionalmente sustituido que consta de 3-8 átomos anulares o un anillo bicíclico saturado o parcialmente insaturado que consta de 9 o 10 átomos de carbono anulares. Entre los ejemplos se incluyen, y no están limitados a, ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo.

El término "heterociclilo" según se utiliza aquí hace referencia a un sistema anular saturado o parcialmente insaturado monocíclico de tres a siete miembros estable no sustituido o sustituido que consta de átomos de carbono y de uno a tres heteroátomos seleccionados entre N, O o S, o un sistema anular saturado o parcialmente insaturado bicíclico de ocho a once miembros estable que consta de átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre N, O, o S. En cualquiera de los anillos monocíclicos o bicíclicos los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden ser oxidados opcionalmente, y el heteroátomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternarizado. Se prefieren los anillos saturados o parcialmente insaturados que tienen cinco o seis miembros de los cuales al menos un miembro es un átomo de N, O o S y que contiene opcionalmente un átomo de N, O o S adicional; los anillos bicíclicos saturados o parcialmente insaturados que tienen nueve o diez miembros de los cuales al menos un miembro es un átomo de N, O o S y que contiene opcionalmente uno o dos átomos de N, O o S adicionales; donde dichos anillos bicíclicos de nueve o diez miembros pueden tener un anillo aromático y un anillo no aromático. El grupo heterociclilo puede estar anclado a cualquier heteroátomo o átomo de carbono del anillo de manera que el resultado sea una estructura estable. Entre los ejemplos preferidos se incluyen, y no están limitados a, tetrahidronaftiridinilo.

El término "arilo" hace referencia a un anillo monocíclico aromático que contiene carbono e hidrógeno, tal como un anillo de carbono que contiene 6 átomos de carbono con átomos de hidrógeno sustituidos en él, un sistema anular bicíclico aromático que contiene 10 átomos de carbono con hidrógeno sustituido en ellos o un sistema anular tricíclico aromático que contiene 14 átomos de carbono con átomos de hidrógeno sustituidos en ellos. También están incluidos en el alcance de la definición de arilo los sistemas anulares bicíclicos y tricíclicos (que contienen carbono e hidrógeno) donde solamente uno de los anillos es aromático tal como tetrahidronaftaleno e indano. Los átomos de hidrógeno de los anillos monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos pueden ser remplazados por otros grupos o sustituyentes según se indique. Entre los ejemplos se incluyen, y no están limitados a, fenilo, naftalenilo, o antracenilo.

El término "heteroarilo" según se utiliza aquí representa un sistema anular heteroaromático monocíclico de cinco a seis miembros estable no sustituido o sustituido o un sistema anular heteroaromático bicíclico de nueve a diez miembros no sustituido o sustituido estable y sistemas anulares tricíclicos de doce a catorce miembros estables no sustituidos o sustituidos que constan de átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre N, O o S, y donde el heteroátomo de nitrógeno de cualquiera de estos heteroarilos puede estar opcionalmente oxidado, o puede estar opcionalmente cuaternarizado. El grupo heteroarilo puede estar anclado a cualquier heteroátomo o átomo de carbono del anillo de manera que el resultado sea una estructura estable.

El término "arilalquilo" representa un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo (v.g., bencilo, fenetilo). El término "arilalcoxi" indica un grupo alcoxi sustituido con un grupo arilo (v.g., benciloxi, fenetoxi, etc.). De un modo similar, el término "ariloxi" indica un grupo oxi sustituido con un grupo arilo (v.g., fenoxi).

Siempre que el término "alquilo" o "arilo" o cualquiera de sus prefijos aparecen en el nombre de un sustituyente (v.g., aralquilo, alquilamino) se debe interpretar que incluye aquellas limitaciones dadas antes para "alquilo" y "arilo". Los números de átomos de carbono designados (v.g., C_{1}-C_{6}) harán referencia independientemente al número de átomos de carbono en un radical alquilo o cicloalquilo o a la porción alquílica de un sustituyente más grande en el cual aparece alquilo como prefijo.

Según se utiliza aquí, la indicación "*" indicará la presencia de un centro estereogénico.

Cuando un grupo concreto está "sustituido" (v.g., Phe, arilo, heteroalquilo, heteroarilo), ese grupo puede tener uno o más sustituyentes, preferiblemente de uno a cinco sustituyentes, más preferiblemente de uno a tres sustituyentes, muy preferiblemente de uno a dos sustituyentes, seleccionados independientemente de la lista de sustituyentes.

Con referencia a los sustituyentes, el término "independientemente" significa que cuando es posible más de uno de tales sustituyentes, tales sustituyentes pueden ser iguales o diferentes entre sí.

En la nomenclatura normalizada utilizada en toda esta descripción, la porción terminal de la cadena lateral designada es descrita primero, seguido de la funcionalidad adyacente hacia el punto de anclaje. De este modo, por ejemplo, un sustituyente "fenilaquil(C_{1}-C_{6})aminocarbonilalquilo C_{1}-C_{6}" hace referencia a un grupo de fórmula

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Un punto de anclaje de un sustituyente también puede estar indicado por una línea discontinua para indicar el punto o los puntos de anclaje, seguido de la funcionalidad adyacente y finalizando con la funcionalidad terminal tal como, por ejemplo, -alquil(C_{1}-C_{6})-C(O)-NH-alquil(C_{1}-C_{6})-fenilo.

Descripción detallada de la invención

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de Fórmula (1):

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donde los compuestos se describen como aquí y R se selecciona del grupo formado por heterociclilo y heteroarilo. Más preferiblemente, R es 1,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilo, piridin-2-ilo, o 5,6,7,8-tetrahidro-[1,8]naftiridin-7-ilo. Muy preferiblemente, R es 1,4,5,6-tetrahidro-pirimidin-2-ilo o 5,6,7,8-tetrahidro-[1,8]naftiridin-2-ilo.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde el compuesto se describe como aquí y R^{1} es de uno a dos sustituyentes seleccionados del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, hidroxi, -NR^{A}R^{B}, y halógeno. Preferiblemente, R^{1} es un sustituyente seleccionado del grupo formado por hidrógeno, alcoxi C_{1}-C_{4}, -NR^{A}R^{B}, e hidroxi; donde R^{A} y R^{B} se definen como antes. Más preferiblemente, R^{1} se selecciona del grupo formado por hidrógeno e hidroxi.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) en los que el compuesto se describe como aquí y R^{2} es de uno a dos sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, -NR^{C}R^{D}, hidroxi, y halógeno; donde alquilo y alcoxi están opcionalmente sustituidos en un carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, y -NR^{C}R^{D}; y R^{C} y R^{D} son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6}; R^{C} y R^{D} se toman opcionalmente junto con los átomos a los cuales están anclados para formar un anillo monocíclico de cinco a siete miembros. Más preferiblemente, R^{2} es un sustituyente seleccionado del grupo formado por alcoxi C_{1}-C_{4}, hidrógeno, y halógeno; donde alquilo está opcionalmente sustituido en un carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado halógeno e hidroxi. Muy preferiblemente, R^{2} se selecciona del grupo formado por hidrógeno, flúor y alcoxi C_{1}-C_{4}.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde y el compuesto se describe como aquí y Z se selecciona del grupo formado por -CH_{2}- y -CH-. Más preferiblemente, Z es -CH_{2}-.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y A se selecciona del grupo formado por arilo, -CH(CH_{2})_{1-2}-, y -(CH_{2})_{1-3}; siempre que cuando A sea -CH(CH_{2})_{1-2} y Z sea -CH- se forme un doble enlace entre A y Z. Más preferiblemente, A es arilo o -(CH_{2})_{1-3}; donde los sustituyentes Z y R (o B si está presente) están anclados en posición meta uno respecto del otro.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y B es -NH- cuando está opcionalmente presente.

Entre las realizaciones preferidas de la invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y m y n son enteros de 1 a 3. Más preferiblemente, m y n son enteros de 1 a 2, siempre que m y n no sean 2 en el mismo caso.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y X se selecciona del grupo formado por O y S. Más preferiblemente, X es O.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y U se selecciona independientemente entre -CH-, N, y S; siempre que no más de una U represente S o N; y que U solamente pueda ser S cuando W no esté presente. Más preferiblemente, U se selecciona independientemente entre -CH- y N; siempre que no más de una U represente N.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y W se selecciona del grupo formado por -CH- y N cuando está opcionalmente presente.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de fórmula (1) donde se describe como aquí y los enantiómeros, diastereoisómeros, tautómeros, solvatos, o sales farmacéuticamente aceptables y medicamentos de los mismos.

Entre las realizaciones preferidas de la presente invención se incluyen aquellos compuestos de Fórmula (II) mostrados en la Tabla I. La estereoquímica definida en la Tabla I describe la orientación relativa del sustituyente hidrógeno en el estereocentro 1 con respecto al sustituyente hidrógeno en los estereocentros 2 y 3 (los centros 2 y 3 son siempre cis uno respecto del otro). Racémico indica que hay una mezcla de isómeros en el estereocentro 1 y que la estereoquímica absoluta en los estereocentros 2 y 3 no está definida.

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Los compuestos de la presente invención también pueden estar presentes en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Para su uso en medicina, las sales de los compuestos de esta invención son referidas como "sales farmacéuticamente aceptables" no tóxicas. Entre las formas salinas farmacéuticamente aceptables aprobadas por la FDA (Ref. International J. Pharm. 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1997, Enero, 66(1), p1) se incluyen las sales ácidas/ aniónicas o alcalinas/catiónicas farmacéuticamente aceptables. Entre las sales ácidas/aniónicas farmacéuticamente aceptables se incluyen, y no están limitadas a acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartrato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gliceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, hidrobromuro, hidrocloruro, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromurometilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tannato, tartrato, teoclato, tosilato y trietioduro. Entre las sales alcalinas/catiónicas farmacéuticamente aceptables se incluyen, y no están limitadas a aluminio, benzatina, calcio, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, litio, magnesio, meglumina, potasio, procaína, sodio y cinc. No obstante, pueden ser útiles otras sales en la preparación de los compuestos según esta invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Entre las sales orgánicas o inorgánicas también se incluyen, y no están limitadas a, ácido yodhídrico, perclórico, sulfúrico, fosfórico, propiónico, glicólico, metanosulfónico, hidroxietanosulfónico, oxálico, 2-naftalenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclohexanosulfámico, sacarínico, o trifluoroacético.

La presente invención incluye en su alcance profármacos de los compuestos de esta invención. En general, tales profármacos serán derivados funcionales de los compuestos que son fácilmente convertibles in vivo en el compuesto requerido. De este modo, en los métodos de la presente invención, el término "administrar" abarcará el tratamiento de los diversos trastornos descritos con el compuesto descrito específicamente o con un compuesto que puede no estar específicamente descrito, pero que se convierte en el compuesto especificado in vivo tras la administración al sujeto. Los procedimientos convencionales para la selección y preparación de derivados profármaco adecuados se describen por ejemplo, en "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

Cuando los compuestos según esta invención tienen al menos un centro quiral, pueden existir por consiguiente en forma de enantiómeros. Cuando los compuestos poseen dos o más centros quirales, pueden existir adicionalmente en forma de diastereoisómeros. Cuando los procedimientos para la preparación de los compuestos según la invención dan lugar a mezclas de estereoisómeros, estos isómeros pueden ser separados mediante mecanismos convencionales tales como la cromatografía preparativa. Los compuestos pueden ser preparados en forma racémica o se pueden preparar enantiómeros individuales mediante mecanismos normalizados conocidos por los expertos en la técnica, por ejemplo, síntesis enantioespecífica o resolución, formación de pares diastereoisoméricos mediante formación de sales con un ácido ópticamente activo, seguido de cristalización fraccionada y regeneración de la base libre. Los compuestos también pueden ser resueltos mediante formación de ésteres o amidas diastereoisoméricos, seguido de separación cromatográfica y eliminación del coadyuvante quiral. Alternativamente, los compuestos pueden ser resueltos utilizando una columna de HPLC quiral. Se debe entender que todos estos isómeros y mezclas de los mismos están abarcados dentro del alcance de la presente invención.

Durante cualquiera de los procedimientos para la preparación de los compuestos de la presente invención, puede ser necesario y/o deseable proteger los grupos sensibles o reactivos de cualquiera de las moléculas implicadas. Esto se puede lograr por medio de grupos protectores convencionales, tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991. Los grupos protectores pueden ser separados en una fase posterior conveniente utilizando métodos conocidos en la técnica.

Además, algunas de las formas cristalinas para los compuestos pueden existir como formas polimorfas y como tales se pretende que estén incluidas en la presente invención. Por añadidura, algunos de los compuestos pueden formar solvatos con agua (es decir, hidratos) o disolventes orgánicos comunes y también se pretende que tales solvatos están incluidos dentro del alcance de esta invención.

Las integrinas son una familia ampliamente expresada de receptores de la superficie celular \alpha o \beta heterodiméricos dependientes de calcio o magnesio que se unen a las proteínas adherentes de la matriz extracelular tales como el fibrinógeno, la fibronectina, la vitronectina y la osteopontina. Los receptores de integrina son glicoproteínas transmembrana (GP) conocidas por sus grandes dominios extracelulares y se clasifican por al menos 8 subunidades \beta y 14 subunidades \alpha conocidas (S.A. Mousa, y col., Engineering Therapeutic Targets, 2000, 4,(2), 143-153).

Por ejemplo, la subfamilia \beta1 tiene el número más grande de integrinas donde las diversas subunidades \alpha se asocian con diversas subunidades \beta: \beta3, \beta5, \beta6 y \beta8 (S.A. Mousa, y col., Emerging Therapeutic Targets, 2000, 4,(2), 144-147). Algunos de los estados de enfermedad que tienen un fuerte componente de integrina \alphav\beta3, \alphav\beta5 y \alphaIIb\beta3 (también referido como GPIIb/IIIa) en sus etiologías son la angina inestable, los trastornos tromboembólicos o la aterosclerosis (GPIIb/IIIa); la trombosis o la restenosis (GPIIb/IIIa o \alphav\beta3); la restenosis (\alphav\beta3/GPIIb/IIIa dual); la artritis reumatoide, los trastornos vasculares o la osteoporosis (\alphav\beta3); la angiogénesis tumoral, la metástasis tumoral, el crecimiento de tumores, la esclerosis múltiple, los trastornos neurológicos, el asma, la lesión vascular o la retinopatía diabética (\alphav\beta3 o \alphav\beta5); y la angiogénesis (\alphav\beta3/\alphav\beta5 dual) (S.A. Mousa, y col., Emerging Therapeutic Targets, 2000, 4,(2), 148-149; W.H. Miller, y col., Drug Discovery Today 2000, 5(9), 397-407; y S.A. Mousa, y col., Exp. Opin. Ther. Patents, 1999, 9(9), 1237-1248). La subunidad \beta3 ha recibido una atención significativa en los recientes esfuerzos de descubrimiento de fármacos. (W.J. Hoekstra, Current Medicinal Chemistry 1998, 5, 195). Los anticuerpos y/o los compuestos antagonistas de \alphav\beta3 de bajo peso molecular han mostrado eficacia en modelos animales (J. Samanen, Current Pharmaceutical Design 1997, 3, 545) y, de ese modo, prometen como agentes en
medicina.

Los antagonistas de integrinas han sido diseñados típicamente según la conformación de péptidos arginina-glicina-aspartato (RGD) bioactivos derivada del ligando primario vitronectina. La unidad RGD es la secuencia de anclaje celular general de muchas proteínas de la matriz extracelular, de la sangre y de la superficie extracelular, ya que la mitad de las aproximadamente 20 integrinas conocidas se unen a los ligandos de adherencia que contienen RGD. Para descubrir péptidos RGD con selectividad por las integrinas, se han estudiado péptidos tanto con conformaciones restringidas como con alteraciones de los restos limítrofes. En particular, se han descrito los requerimientos estructurales para la interacción de la secuencia RGD con GPIIb/IIIa y el potencial inhibidor de una serie de miméticos no peptídicos sobre la agregación de las plaquetas y las interacciones con la matriz extracelular (D. Varon, y col., Thromb. Haemostasis, 1993, 70(6), 1030-1036). La síntesis iterativa de péptidos cíclicos y alicíclicos y la creación de modelos por ordenador han proporcionado agentes selectivos, potentes como plataforma para el diseño de antagonistas de integrinas \alphav no peptídicas (como en \alphaV\beta3).

Los antagonistas de integrinas han sido implicados por ser útiles para inhibir la resorción ósea (S.B. Rodan y G.A. Rodan, Integrin Function In Osteoclasts, Journal of Endocrinology, 1997, 154:S47-S56). En vertebrados, la resorción ósea está mediada por la acción de células conocidas como osteoclastos, grandes células multinucleadas de hasta aproximadamente 400 mm de diámetro que resorben el tejido mineralizado, sobretodo carbonato de calcio y fosfato de calcio. Los osteoclastos son células activamente móviles que migran a lo largo de la superficie del hueso y se pueden unir al hueso, secretar ácidos y proteasas necesarios, causando de ese modo la resorción real del tejido mineralizado del hueso. Más específicamente, se cree que los osteoclastos existen al menos en dos estados fisiológicos, esto es, el estado secretor y el estado migratorio o móvil. En el estado secretor, los osteoclastos son planos, se anclan a la matriz del hueso vía una íntima zona de anclaje (zona de sellado), que se vuelve altamente polarizada, forman un límite fruncido y secretan enzimas lisosómicas y protones para resorber el hueso. La adherencia de los osteoclastos a las superficies del hueso es una importante etapa inicial en la resorción ósea. En el estado migratorio o móvil, los osteoclastos migran a través de la matriz del hueso y no toman parte en la resorción hasta que se anclan de nuevo al hueso.

Las integrinas están implicadas en el anclaje, la activación y la migración del osteoclasto. El receptor de integrinas más abundante en los osteoclastos (v.g., en osteoclastos de rata, pollo, ratón y humano) es el receptor de integrina \alphav\beta3, que se piensa que interacciona en el hueso con las proteínas de la matriz que contienen la secuencia RGD. Los anticuerpos para \alphav\beta3 bloquean la resorción ósea in vitro, indicando que esta integrina juega un papel clave en el procedimiento de resorción. Existe una evidencia creciente para sugerir que los ligandos de \alphav\beta3 pueden ser utilizados eficazmente para inhibir la resorción ósea mediada por osteoclastos in vivo en mamíferos.

Las principales enfermedades óseas actuales tienen que ver con la osteoporosis, la hipercalcemia de las malignidades, la osteopenia debida metástasis óseas, la enfermedad periodontal, el hiperparatiroidismo, las erosiones periarticulares en la artritis reumatoide, la enfermedad de Paget, la osteopenia inducida por la inmovilización y la osteoporosis inducida por glucocorticoides. Todas estas condiciones están caracterizadas por pérdida de hueso, resultante de un desequilibrio entre la resorción ósea, es decir la rotura y la formación de hueso, que continúa durante toda la vida a una tasa de aproximadamente el 14% por año de media. No obstante, la tasa de recambio óseo difiere de sitio a sitio; por ejemplo, es superior en el hueso trabecular de las vértebras y el hueso alveolar de las mandíbulas que en los córtices de los huesos largos. El potencial para la pérdida de hueso está directamente relacionado con el recambio y puede representar más del 5% por año en las vértebras inmediatamente después de la menopausia, un estado que conduce a un aumento del riesgo de fracturas.

En los Estados Unidos, existen en la actualidad aproximadamente 20 millones de personas con fracturas detectables de las vértebras debidas a osteoporosis. Además, existen aproximadamente 250.000 fracturas de cadera al año atribuidas a osteoporosis. Esta situación clínica está asociada con una tasa de mortalidad del 12% en los primeros dos años, mientras el 30% de los pacientes requieren atención a domicilio por una enfermera tras la fractura. Los individuos que padecen todas estas condiciones enumeradas antes serían beneficiados por un tratamiento con agentes que inhiben la resorción ósea.

Adicionalmente, se ha encontrado que los ligandos de \alphav\beta3 son útiles en el tratamiento y/o la inhibición de la restenosis (es decir la recurrencia de estenosis tras la cirugía correctiva de las válvulas del corazón), la aterosclerosis, la retinopatía diabética, la degeneración macular y la angiogénesis (es decir la formación de nuevos vasos sanguíneos) y la inhibición de enfermedades virales.

Por otra parte, se ha postulado que el crecimiento de los tumores depende de un suministro de sangre adecuado, que a su vez depende del crecimiento de los nuevos vasos en el tumor; así, la inhibición de la angiogénesis puede ocasionar la regresión del tumor en modelos animales (Harrison's Principles of Internal Medicine, 1991, 12ª ed.). Por lo tanto, los antagonistas de \alphav\beta3 que inhiben la angiogénesis pueden ser útiles en el tratamiento del cáncer mediante la inhibición del crecimiento tumoral (Brooks y col., Cell, 1994, 79, 1157-1164). Asimismo se han presentado evidencias que sugieren que la angiogénesis es un factor central en el inicio y la persistencia de la enfermedad artrítica y de que la integrina vascular \alphav\beta3 puede ser una diana preferida en la artritis inflamatoria. Por lo tanto, los antagonistas de \alphav\beta3 que inhiben la angiogénesis pueden representar un enfoque terapéutico novedoso para el tratamiento de la enfermedad artrítica, tal como la artritis reumatoide (C.M. Stogard, y col., Decreased Angiogenesis and Arthritic Disease in Rabbits Treated with \alphav\beta3 Antagonist, J. Clin. Invest., 1999, 103, 47-54).

La inhibición del receptor de integrina \alphav\beta5 también puede evitar la neovascularización. Se ha demostrado que un anticuerpo monoclonal para \alphav\beta5 inhibe la angiogénesis inducida por VEGF en córnea de conejo y en el modelo de membrana corioalantoica de pollo (M.C. Friedlandler, y col., Science, 1995, 270, 1500-1502). De este modo, los antagonistas de \alphav\beta5 son útiles para tratar y prevenir la degeneración macular, la retinopatía diabética, el cáncer y el crecimiento de tumores metastásicos.

La inhibición de los receptores de integrinas \alphav también puede evitar la angiogénesis y la inflamación actuando como antagonistas de otras subunidades \beta, tales como \alphav\beta6 y \alphav\beta8 (Melpo Christofidou-Solomidou, y col., Expression and Function of Endothelial Cell on Integrin Receptors in Wound-Induced Human Angiogenesis in Human Skin/SCID 25 Mice Chimeras, American Journal of Pathology, 1997, 151, 975-83; y Xiao-Zhu Huang, y col., Inactivation of the Integrin \beta6 Subunit Gene Reveals a Role of Epithelial Integrins in Regulation Inflammation in the Lungs and Skin, Journal of Cell Biology, 1996, 133, 921-28).

Un aspecto de la invención es una composición o medicamento que comprende un portador farmacéuticamente apropiado y cualquiera de los compuestos de la presente invención. Es ilustrativa de la invención una composición o medicamento elaborados mezclando uno de los presentes compuestos y un portador farmacéuticamente apropiado. Otra ilustración de la invención es un procedimiento para elaborar una composición o medicamento que comprende mezclar cualquiera de los compuestos descritos antes y un portador farmacéuticamente apropiado. Son adicionalmente ilustrativos de la presente invención las composiciones o medicamentos que comprende uno o más compuestos de esta invención asociado con un portador farmacéuticamente aceptable.

Según se utiliza aquí, se pretende que el término "composición" abarque un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de combinaciones de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas para tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav o para su uso como medicamento.

Los compuestos de la presente invención son inhibidores de integrinas \alphav útiles para tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas. En un aspecto de la invención se incluyen compuestos que son inhibidores selectivos de un receptor de integrina \alphav, o un subtipo del mismo. En otro aspecto de la presente invención, el inhibidor es independientemente selectivo para el receptor de integrina \alphav\beta3 o el inhibidor de integrina \alpha\nub5. En un aspecto de la invención también se incluyen compuestos que son inhibidores de una combinación de receptores de integrinas \alphav, o subtipos de los mismos. En otro aspecto de la invención, el compuesto inhibidor tiene un efecto antagónico simultáneamente para los subtipos de receptores de integrina \alphav\beta3 y de integrina \alphav\beta5.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav en un sujeto que lo necesite que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

El término "cantidad terapéuticamente eficaz" o "cantidad eficaz", según se utiliza aquí, significa aquella cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que logra la respuesta biológica o médica en un sistema tisular, animal o humano, que está siendo observado por un investigador, veterinario, doctor en medicina, u otro clínico, que incluyen el alivio de los síntomas de la enfermedad o trastorno que esté siendo tratado.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método profiláctico para prevenir un trastorno mediado por integrina \alphav en un sujeto que lo necesite que comprende administrar al sujeto una cantidad profilácticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

En otro aspecto de la presente invención se incluye la preparación de un medicamento que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) para su uso en la prevención, el tratamiento o el alivio de un trastorno mediado por integrina \alphav en un sujeto que lo necesite.

Se debe interpretar el término "administrar" según los métodos de la presente invención por medio de los cuales un compuesto individual de la presente invención o una composición del mismo puede ser administrado terapéuticamente por separado en momentos diferentes durante el transcurso de la terapia o concurrentemente en formas de combinación divididas o individuales. La administración profiláctica puede producirse antes de la manifestación de los síntomas característicos de una enfermedad o trastorno mediado por integrinas \alphav de manera que la enfermedad o el trastorno sea evitado o, alternativamente, retardado en su progreso. Se debe entender por lo tanto que la presente invención abarca todos estos regímenes de tratamiento terapéutico o profiláctico simultáneo o alter-
nante.

El término "sujeto" según se utiliza aquí, hace referencia a un animal, preferiblemente un mamífero, muy preferiblemente un humano que ha sido objeto del tratamiento, observación o experimento y está en riesgo (o es susceptible de) desarrollar una enfermedad o trastorno o que tiene una enfermedad o trastorno relacionado con la expresión de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma.

El término "trastorno mediado por integrina \alphav" hace referencia a trastornos y enfermedades asociados con la proliferación celular no regulada o des-regulada patológica resultante de la expresión de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma.

El término "no regulada" hace referencia a una interrupción en el proceso de regulación de la proliferación celular, como en un tumor celular. El término "des-regulada" hace referencia a un crecimiento celular inapropiado como resultado de la patogénesis. El término "subtipo" hace referencia a un receptor de integrina \alphav concreto seleccionado entre los receptores que forman la clase de integrinas \alphav, tal como un receptor de integrina \alphav\beta3 o un receptor de integrina \alphav\beta5.

El término "trastornos y enfermedades asociados con la proliferación celular no regulada o des-regulada" hace referencia a trastornos en los que la proliferación celular por uno o más subgrupos de células en un organismo multicelular produce un perjuicio (incomodidad o disminución de la esperanza de vida) para el organismo. Tales trastornos pueden ocurrir en diferentes tipos de animales y humanos e incluyen, y no están limitados a, cánceres, patologías asociadas con el cáncer, aterosclerosis, vasculopatías inducidas por transplantes, formación de neoíntima, papiloma, fibrosis en el pulmón, fibrosis pulmonar, glomerulonefritis, glomeruloesclerosis, displasia renal multiquística congénita, fibrosis renal, retinopatía diabética, degeneración macular, psoriasis, osteoporosis, resorción ósea, artritis inflamatoria, artritis reumatoide o restenosis.

Los términos "cánceres" hacen referencia a, y no están limitados a, cánceres de glioma, cánceres de pulmón, cánceres de mama, cánceres colorrectales, cánceres de próstata, cánceres gástricos, cánceres esofágicos, leucemias, melanomas, carcinomas de las células basales y linfomas. El término "patologías asociadas con el cáncer" hace referencia a, y no está limitado a, proliferación celular no regulada o des-regulada, crecimiento tumoral, vascularización tumoral, angiopatía y angiogénesis. El término "angiogénesis" hace referencia a, y no está limitado a, la proliferación de nuevos tejidos vasculares no regulada o des-regulada incluyendo, pero no limitada a, células endoteliales, células de la musculatura lisa, pericitos y fibroblastos. El término "osteoporosis" hace referencia a, y no está limitado a, formación o actividad de osteoclastos que da como resultado la resorción ósea. El término "restenosis" hace referencia a, y no está limitado a, estenosis en el stent y restenosis vascular de injertos.

El término "expresión de integrina \alphav" hace referencia a la expresión de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma, que conduce a la proliferación celular no regulada o des-regulada:

1. por células que normalmente no expresan una integrina \alphav, o un subtipo de la misma,

2. por células neoplásicas,

3. en respuesta a la estimulación por un factor de crecimiento, hipoxia, neoplasia o un proceso de enfermedad,

4. como resultado de mutaciones que conducen a la expresión constitutiva de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma.

La expresión de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma, incluye la expresión selectiva de una integrina \alphav o un subtipo de la misma, la expresión selectiva de los subtipos de integrina \alphav\beta3 o de integrina \alphav\beta5. La detección de la expresión de una integrina \alphav, o un subtipo de la misma, en niveles inapropiados o anómalos es determinada mediante procedimientos bien conocidos en la técnica.

En otro aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o aliviar un trastorno mediado por integrina \alphav\beta3 selectivo en un sujeto que lo necesite que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

En otro aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o aliviar un trastorno mediado por integrina \alphav\beta5 selectivo en un sujeto que lo necesite que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

En otro aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o aliviar un trastorno mediado simultáneamente por integrina \alphav\beta3 y \alphav\beta5 en un sujeto que lo necesite que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para inhibir la actividad neoplásica mediada por integrina \alphav que comprende administrar a un neoplasma o al microentorno alrededor del neoplasma una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo.

El término "actividad neoplásica" hace referencia a la proliferación celular no regulada o des-regulada y al procedimiento de angiogénesis o formación de nueva vasculatura que soporta al neoplasma en el microentorno endotelial próximo al neoplasma.

El término "neoplasma" hace referencia a células tumorales que son células que tienen una proliferación no regulada o des-regulada como resultado de una inestabilidad genética o una mutación y un endotelio donde las células endoteliales tienen una proliferación no regulada o des-regulada como resultado de una condición patogénica. Dentro del alcance de la presente invención, no se requiere un neoplasma para expresar la integrina \alphav, o un subtipo de la misma, por si misma y no está limitado a un tumor primario de origen sino también a los tumores secundarios que se producen como resultado de metástasis del tumor primario. El término "administrar a un neoplasma" hace referencia a la administración de un compuesto de Fórmula (I) o de una composición del mismo a la superficie de un neoplasma, a la superficie de una célula neoplásica o al microentorno endotelial alrededor del neoplasma.

En el término "inhibir la actividad neoplásica mediada por integrina \alphav" se incluye atenuar un crecimiento tumoral limitando su suministro de sangre y, adicionalmente, evitando la formación de nueva vasculatura fortalecedora evitando el proceso de angiogénesis.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o aliviar una enfermedad mediada por células que expresan patológicamente una integrina \alphav, o un subtipo de la misma.

El término "enfermedad mediada por células que expresan patológicamente una integrina \alphav" hace referencia a, y no está limitado a, trastornos seleccionados entre cánceres, patologías asociadas con el cáncer, retinopatía diabética, degeneración macular, osteoporosis, resorción ósea, artritis inflamatoria, artritis reumatoide o restenosis.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para el uso de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo ventajosamente administrado simultáneamente de manera ventajosa en una o más terapias anti-proliferación tumoral o celular incluyendo quimioterapia, terapia con radiación, terapia génica o inmunoterapia para prevenir, tratar o aliviar un trastorno mediado por integrina.

La terapia combinada puede incluir:

1.

co-administración de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo y un agente quimioterapéutico para prevenir, tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav,

2.

administración sucesiva de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo y un agente quimioterapéutico para prevenir, tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav,

3.

administración de una composición que contiene un compuesto de Fórmula (I) y un agente quimioterapéutico para prevenir, tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav, o

4.

administración simultánea de una composición separada que contiene un compuesto de Fórmula (I), y una composición separada que contiene un agente quimioterapéutico para prevenir, tratar o aliviar un trastorno mediado por integrinas \alphav.

Por ejemplo, los compuestos de esta invención son útiles en terapias combinadas con al menos otro agente quimioterapéutico para el tratamiento de numerosos cánceres diferentes y parecen facilitar ventajosamente el uso de una dosis reducida del agente quimioterapéutico que está recomendado para un cáncer concreto o un trastorno de proliferación celular. Por lo tanto se contempla que los compuestos de esta invención puedan ser utilizados en un régimen de tratamiento antes de la administración de un agente quimioterapéutico concreto recomendado para el tratamiento de un cáncer concreto, durante la administración del agente quimioterapéutico o tras el tratamiento con un agente quimioterapéutico concreto.

En el término "agentes quimioterapéuticos" se incluyen, y no están limitados a, agentes anti-angiogénicos, agentes anti-tumorales, agentes citotóxicos, inhibidores de la proliferación celular y similares. En el término "tratar o aliviar" se incluye, y no está limitado a, facilitar la erradicación de, la inhibición del progreso de o la promoción de la estasis de una malignidad. Por ejemplo, un compuesto inhibidor de la presente invención, que actúa como agente anti-angiogénico puede ser administrado en un régimen de dosificación con al menos otro compuesto citotóxico, tal como un agente alquilante del ADN.

Los agentes anti-tumorales preferidos son seleccionados del grupo formado por cladribrina (2-cloro-2'-desoxi-(beta)-D-adenosina), clorambucil (ácido 4-(bis(2-cloroetil)amino)bencenobutanoico), DTIC-Dome (5-(3,3-dimetil-1-triazeno)-imidazolo-4-carboxamida), agentes quimioterapéuticos de platino y agentes quimioterapéuticos no de platino. Entre los agentes anti-tumorales que contienen platino se incluyen, y no están limitados a, cisplatino (CDDP) (cis-diclorodiamino-platino). Entre los agentes anti-tumorales que no contienen platino se incluyen y no están limitados a, adriamicina (doxorrubicina), aminopterina, bleomicina, camptotecina, carminomicina, combrestatinas, ciclofosfamida, citosinarabinósido, dactinomicina, daunomicina, epirrubicina, etoposido (VP-16), 5-fluorouracilo (5FU), herceptin-actinomicina-D, metotrexato, mitomicina C, tamoxifeno, taxol, taxótero, tiotepa, vinblastina, vincristina, vinorelbina y derivados y profármacos de los mismos. Cada agente antitumoral es administrado en una cantidad terapéuticamente eficaz, que varía basándose en el agente utilizado, el tipo de malignidad que se vaya a tratar o aliviar y otras condiciones según los métodos bien conocidos en la técnica.

Como comprenderá un experto en la técnica, las dosis apropiadas de los agentes quimioterapéuticos estarán generalmente entorno a las ya empleadas en las terapias clínicas en las que se administran agentes quimioterapéuticos solos o combinados con otros agentes quimioterapéuticos. A modo de ejemplo solamente, los agentes tales como cisplatino y otros agentes alquilantes de ADN son utilizados ampliamente para tratar el cáncer. La dosis eficaz de cisplatino utilizada en las aplicaciones clínicas es de aproximadamente 20 mg/m^{2} durante 5 días cada tres semanas para un total de tres series. El cisplatino no es absorbido oralmente y por lo tanto debe ser liberado vía inyección intravenosamente, subcutáneamente, intratumoralmente o intra-peritonealmente. Entre los agentes adicionalmente útiles se incluyen los compuestos que interfieren en la replicación del ADN, la mitosis y la segregación cromosómica. Entre tales agentes quimioterapéuticos se incluyen adriamicina (doxorrubicina), etoposido, verapamil o podofilotoxina y similares y son ampliamente utilizados en entornos clínicos para el tratamiento tumoral. Estos compuestos son administrados a través de inyecciones de bolo intravenosamente a dosis que oscilan de aproximadamente 25 a aproximadamente 75 mg/m^{2} a intervalos de 21 días (para la adriamicina) o de aproximadamente 35 a aproximadamente 50 mg/m^{2} (para el etoposido) intravenosamente o al doble de la dosis intravenosa oralmente. Los agentes que desorganizan la síntesis y la fidelidad de los precursores polinucleotídicos tales como el 5-fluorouracilo (5-FU) son utilizados preferentemente para dirigirlos a los tumores. Aunque es bastante tóxico el 5-FU es utilizado comúnmente vía administración intravenosa con dosis que oscilan entre aproximadamente 3 y aproximadamente 15 mg/kg/día.

En otro aspecto de la presente invención se incluye un método para administrar un compuesto de la presente invención combinado con terapia de radiación. Según se utiliza aquí, "terapia de radiación" hace referencia a una terapia que comprende exponer al sujeto que lo necesite a radiación. Semejante terapia es conocida por los expertos en la técnica. El esquema apropiado de la terapia de radiación será similar a los ya empleados en terapias clínicas donde la terapia de radiación es utilizada sola o combinada con otros agentes quimioterapéuticos.

La angioplastia coronaria es un procedimiento altamente eficaz utilizado para reducir la gravedad de la oclusión coronaria, no obstante, su éxito a largo plazo está limitado por una alta tasa de restenosis. La activación, la migración y la proliferación de las células de la musculatura lisa vascular, son responsables en gran parte de restenosis siguiente a la angioplastia (Ross, R., Nature, 1993, 362, 801-809).

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para el uso de un compuesto inhibidor de integrina \alphav de Fórmula (I) o una composición del mismo para tratar o aliviar la restenosis arterial o venosa; donde el compuesto es impregnado sobre la superficie de un dispositivo terapéutico. El término "dispositivo terapéutico" hace referencia a, y no está limitado a, balones de angioplastia, stent arterial, stet venoso, sutura, articulaciones artificiales, prótesis implantadas u otros dispositivos médicos similares, dirigiendo de ese modo la liberación del fármaco al
neoplasma.

En un aspecto de la presente invención se incluye un método para el uso de un compuesto inhibidor de integrina \alphav de Fórmula (I) o una composición del mismo para tratar o aliviar adherencias post-operatorias asociadas con los procedimientos quirúrgicos. En esta realización de la invención un paciente recibiría a una dosis terapéutica o bien antes de la operación, durante la operación o después de la operación los compuestos de Fórmula (I) para aliviar la formación de adherencias asociadas por ejemplo con la cirugía abdominal.

En un aspecto de la presente invención se incluye una composición que comprende un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, asociado con un portador farmacéuticamente aceptable. Las composiciones contempladas en esta invención pueden ser preparadas según los mecanismos farmacéuticos convencionales. Un portador farmacéuticamente aceptable también puede (pero no necesita necesariamente) ser utilizado en la composición de la invención.

El término "farmacéuticamente aceptable" hace referencia a entidades moleculares y a composiciones que no producen una reacción adversa, alérgica u otra desfavorable cuando se administra a un animal, o un humano, según sea apropiado. Los usos veterinarios están igualmente incluidos en la invención y entre las formulaciones "farmacéuticamente aceptables" se incluyen las formulaciones para uso clínico o para uso veterinario a para ambos.

La composición puede adoptar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración incluyendo, pero no limitada a, intravenosa (tanto bolo como infusión), oral, nasal, transdérmica, tópica con o sin oclusión, e inyección intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, intratumoral o parenteral, utilizando todas formas bien conocidas por los expertos normales en las técnicas farmacéuticas. La composición puede comprender una unidad de dosificación tal como una tableta, píldora, cápsula, polvo, gránulo, solución o suspensión parenteral estéril, aerosol o líquido de pulverización medido, gota, ampolla, dispositivo auto-inyector o supositorio; para la administración oral, parenteral, intranasal, sublingual o rectal o mediante inhalación o insuflación. Entre las composiciones adecuadas para la administración oral se incluyen formas sólidas tales como píldoras, tabletas, comprimidos oblongos, cápsulas (incluyendo cada una formulaciones de liberación inmediata, de liberación con el tiempo y de liberación sostenida), gránulos y polvos; y, formas líquidas tales como soluciones, jarabes, elixires, emulsiones y suspensiones. Alternativamente, la composición puede ser presentada en una forma adecuada para la administración una vez a la semana o una vez al mes; por ejemplo, una sal soluble del compuesto activo, tal como la sal decanoato, puede ser adaptada para proporcionar una preparación de depósito para la inyección intramuscular. Al preparar las composiciones en forma de dosificación oral, se pueden emplear uno o más de los portadores farmacéuticos habituales, incluyendo excipientes farmacéuticos necesarios e inertes, tales como agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes, agentes colorantes, jarabe y similares; en el caso de las preparaciones líquidas orales se pueden emplear portadores tales como almidones, azúcares, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares.

La unidad de dosificación (tableta, cápsula, polvo, inyección, supositorio, dosificación líquida medida y similares) que contiene las presentes composiciones farmacéuticas contendrá una cantidad del ingrediente activo necesaria para liberar una cantidad terapéuticamente eficaz como se ha descrito antes. La composición puede contener de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 5.000 mg del compuesto activo o profármaco del mismo y puede estar constituida en cualquier forma adecuada para el modo de administración seleccionado para un sujeto que lo
necesite.

En un aspecto de la presente invención se contempla una cantidad terapéuticamente eficaz en un intervalo de aproximadamente 0,001 mg a 1.000 mg de peso corporal por día. En otro aspecto de la presente invención se incluye un intervalo de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 500 mg/kg de peso corporal por día. En un aspecto adicional de la presente invención se incluye un intervalo de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 300 mg/kg de peso corporal por día. Los compuestos pueden ser administrados según un régimen de dosificación de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 veces por día y aún más preferiblemente de 1, 2 o 3 veces al día.

Para la administración oral, las composiciones son proporcionadas preferiblemente en forma de tabletas que contienen 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250 y 500 miligramos del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente que se vaya a tratar. Las dosis óptimas que se van a administrar pueden ser fácilmente determinadas por los expertos en la técnica y variarán dependiendo de los factores asociados con el paciente concreto que esté siendo tratado (edad, peso, dieta y tiempo de administración), la gravedad de la afección que esté siendo tratada, el compuesto que se esté empleando, el modo de administración y la fuerza de la preparación. Se puede emplear el uso de la administración diaria o de la dosificación post-periódica.

Para preparar composiciones sólidas tales como tabletas, se mezcla el ingrediente activo principal con un portador farmacéutico, v.g., ingredientes para tabletas convencionales tales como almidón de maíz, lactosa, sacarosa, sorbitol, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio, fosfato dicálcico o cauchos y otros diluyentes farmacéuticos, v.g., agua, para formar una composición de preformulación sólida conteniendo una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se quiere significar que el ingrediente activo está dispersado uniformemente por toda la composición de manera que la composición pueda ser fácilmente subdividida en formas de dosificación igualmente eficaces tales como tabletas, píldoras y cápsulas. Esta composición de preformulación sólida es subdividida después en formas de dosificación unitarias del tipo descrito antes conteniendo de 0,001 a aproximadamente 5000 mg del ingrediente activo de la presente invención. Las tabletas o píldoras de la composición pueden ser recubiertas o compuestas de otro modo para proporcionar una forma de dosificación que permita e ventaja de la acción prolongada. Por ejemplo, la tableta o píldora puede comprender un componente de dosificación interna y un componente de dosificación externo, estando el último en forma de una envuelta sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir a la disgregación en el estómago y permite que el componente interno pase intacto al duodeno o se retrase la liberación. Se pueden utilizar una variedad de materiales para semejantes capas entéricas o recubrimientos, incluyendo tales materiales numerosos ácidos poliméricos con materiales tales como goma laca, alcohol acetílico y acetato de celulosa.

Para la administración oral en forma de una tableta o una cápsula, el componente de fármaco activo puede ser combinado opcionalmente con un portador inerte farmacéuticamente aceptable, no tóxico, oral tal como etanol, glicerol, agua y similares. Por otra parte, cuando se desea o es necesario, también se pueden incorporar a la mezcla aglutinantes adecuados; lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes. Entre los aglutinantes adecuados se incluyen, sin limitación, almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, cauchos naturales y sintéticos tales como acacia, tragacanto u oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Entre los disgregantes se incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares.

Entre las formas líquidas en las cuales puede ser incorporado el compuesto de fórmula (I) para la administración oralmente o mediante inyección se incluyen, soluciones acuosas, jarabes adecuadamente aromatizados, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles tales como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares. Entre los agentes de dispersión o suspensión adecuados para las suspensiones acuosas se incluyen cauchos naturales y sintéticos tales como tragacanto, acacia, alginato, dextrano, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, polivinilpirrolidona o gelatina. Entre las formas líquidas en los agentes suspensores o dispersantes adecuadamente aromatizados se pueden incluir también los cauchos sintéticos y naturales, por ejemplo, tragacanto, acacia, metilcelulosa y similares. Para la administración parenteral, se desean suspensiones y soluciones estériles. Cuando se desea la administración intravenosa se emplean preparaciones isotónicas que contienen generalmente conservantes adecuados.

Como también es sabido en la técnica, los compuestos pueden ser administrados alternativamente parenteralmente por medio de inyectables de una formulación que conste del ingrediente activo disuelto en un portador líquido inerte. La formulación inyectable puede incluir el ingrediente activo mezclado con un portador líquido apropiado. Entre los portadores líquidos aceptables se incluyen aceites vegetales tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo y similares, así como disolventes orgánicos tales como "solketal", glicerol y similares. Como alternativa, también se pueden utilizar formulaciones parenterales acuosas. Por ejemplo, entre los disolventes acuosos aceptables se incluyen agua, solución de Ringer y una solución salina acuosa isotónica. Adicionalmente, se puede emplear normalmente un aceite no volátil estéril como disolvente o agente suspensor en la formulación acuosa. Las formulaciones se preparan disolviendo o suspendiendo el ingrediente activo en el portador líquido de manera que la formulación final contenga del 0,005% al 10% en peso del ingrediente activo. Se pueden emplear adecuadamente otros aditivos incluyendo un conservante, un agente isotónico, un solubilizante, un estabilizador y un agente analgésico para el dolor.

Ventajosamente, los compuestos de Fórmula (I) pueden ser administrados en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día. Además, los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en forma intranasal vía uso tópico de vehículos intranasales adecuados, o vía rutas transdérmicas, utilizando aquellas formas de parches para la piel transdérmicos bien conocidos por los expertos normales en la técnica. Al ser administrada en forma de un sistema de liberación transdérmica, la administración será, por supuesto, continua en lugar de intermitente a lo largo de todo el régimen de dosificación.

Debido a su fácil administración, las tabletas y las cápsulas representan una unidad de dosificación oral ventajosa, cuando se emplean portadores farmacéuticos sólidos. Si se desea, las tabletas pueden ser recubiertas con azúcar o con recubrimiento entérico mediante mecanismos normalizados. Si se desea, las tabletas pueden ser recubiertas con azúcar o con recubrimiento entérico mediante mecanismos normalizados. Para el uso parenteral, el portador comprenderá normalmente agua estéril, aunque se pueden incluir otros ingredientes, por ejemplo, con el fin de ayudar a la solubilidad o para la conservación. También se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear portadores líquidos apropiados, agentes suspensores y similares.

Las composiciones de la presente invención también incluyen una composición para la liberación lenta del compuesto de la invención. En la composición se incluye un portador de liberación lenta (típicamente, un portador polimérico) y un compuesto de la invención. En la preparación para la liberación lenta, se disuelven o se dispersan primero un portador de liberación lenta, típicamente un portador polimérico y un compuesto de la invención en un disolvente orgánico. La solución orgánica obtenida es añadida después a la solución acuosa para obtener una emulsión de tipo aceite-en-agua. Preferiblemente, en la solución acuosa se incluyen uno o varios agentes tensioactivos. Con posterioridad, el disolvente orgánico es evaporado de la emulsión de tipo aceite-en-agua para obtener una suspensión coloidal de partículas conteniendo el portador de liberación lenta y el compuesto de la invención. Los portadores de liberación lenta son también bien conocidos en la técnica. Estos son materiales que pueden formar partículas que capturan en ellas uno o varios compuestos activos y se degradan/disuelven lentamente en un entorno adecuado (v.g., acuoso, ácido, alcalino, etc.) y de ese modo se degradan/disuelven en los fluidos corporales y liberan el compuesto o los compuestos activos en ellos. Las partículas son preferiblemente nanopartículas (es decir, en el intervalo de aproximadamente 1 a 500 nm de diámetro, preferiblemente aproximadamente 50-200 nm de diámetro y muy preferiblemente aproximadamente 100 nm de diámetro).

La presente invención también proporciona métodos para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención. Un compuesto de Fórmula (I) como ingrediente activo es mezclado íntimamente con un portador farmacéutico según los mecanismos de composición farmacéutica convencional, cuyo portador puede tener una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Al preparar las composiciones en una forma de dosificación oral, se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos habituales. Para las formas de dosificación orales sólidas, entre los portadores y aditivos adecuados se incluyen almidones, azúcares, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares. Para las preparaciones orales líquidas, entre los portadores y aditivos adecuados se incluyen agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes, agentes colorantes y similares. Adicionalmente, las formas líquidas del componente fármaco activo pueden ser combinadas en agentes de suspensión o dispersión adecuadamente aromatizados tales como los cauchos sintéticos y naturales, incluyendo, por ejemplo, tragacanto, acacia, metilcelulosa y similares. Entre otros agentes dispersantes que pueden ser empleados se incluyen glicerina y similares.

Aunque se podría utilizar cualquier radical de conexión que sea razonablemente estable en la sangre para unir el compuesto de la invención al agente de redireccionamiento, se prefieren aquellos con enlaces biológicamente liberables y/o espaciadores o conectores selectivamente escindibles. "Enlaces biológicamente liberables" y "espaciadores o conectores selectivamente escindibles" hace referencia a aquellos radicales de unión que tienen una estabilidad razonable en la circulación y son liberables, escindibles o hidrolizables solamente o preferentemente en ciertas condiciones, (es decir, en un cierto entorno o en contacto con un agente concreto). Entre tales enlaces se incluyen, por ejemplo, enlaces disulfuro y trisulfuro y enlaces lábiles a los ácidos (como se describe en la Patente de los Estados Unidos 5.474.765 y 5.762.918) y enlaces sensibles a las enzimas, incluyendo enlaces peptídicos, ésteres, amidas, fosfodiésteres y glicósidos (como se describe en la Patente de los Estados Unidos 5.474.765 y 5.762.918). Tales características de liberación selectiva facilitan la liberación sostenida de los compuestos desde los productos conjugados en el sitio diana pretendido.

La cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención conjugado con un agente de redireccionamiento depende del individuo, del tipo de enfermedad, del estado de enfermedad, del método de administración y de otras variables clínicas. La cantidad eficaz es fácilmente determinable utilizando datos de un modelo animal. Los animales experimentales que portan tumores sólidos son utilizados frecuentemente para optimizar las cantidades terapéuticamente eficaces antes de su traslado a un entorno clínico. Tales modelos son conocidos por ser muy fiables al pronosticar estrategias anti-cancerosas eficaces. Por ejemplo, los ratones que portan tumores sólidos son ampliamente utilizados en los ensayos pre-clínicos para determinar los intervalos de trabajo de los agentes terapéuticos que producen efectos anti-tumorales beneficiosos con una toxicidad mínima.

La presente invención proporciona adicionalmente una composición que comprende una cantidad eficaz del compuesto de la invención conjugado con un agente de redireccionamiento y un portador farmacéuticamente aceptable. Cuando se utilizan proteínas tales como anticuerpos o factores de crecimiento, o polisacáridos como agentes de redireccionamiento, éstas son administradas preferiblemente en forma de composiciones inyectables. La solución de anticuerpos inyectable será administrada en una vena, arteria o en el fluido espinal en el transcurso de aproximadamente 2 minutos a aproximadamente 45 minutos, preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 20 minutos. En ciertos casos, son ventajosas las administraciones intradérmica e intracavital para los tumores restringidos a áreas próximas a regiones concretas de la piel y/o cavidades corporales concretas. Además se pueden utilizar las administraciones intratecales para tumores localizados en el cerebro.

En otro aspecto de la presente invención se incluye un método para tratar o los trastornos relacionados con la expresión de las integrinas \alphav (en particular, la restenosis, la hiperplasia de la íntima o la inflamación de las paredes de los vasos) en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto mediante liberación controlada una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una composición del mismo recubriendo un dispositivo médico intraluminal (en particular un globo-catéter o stent). Tales dispositivos son útiles para evitar la aparición de restenosis inhibiendo la actividad de la integrina \alphav y evitando de ese modo la hiperproliferación del
endotelio.

El término "dispositivo médico intraluminal" hace referencia a cualquier dispositivo de liberación, tal como los catéteres de reparto de fármacos intravasculares, los alambres, los stents farmacológicos y la pavimentación endoluminal. En el alcance de la presente invención se incluyen dispositivos de reparto que comprenden un stent arterial o venoso que tienen un recubrimiento o funda que eluye o libera una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente. El término "liberación controlada" hace referencia a la liberación de un ingrediente activo de una manera dirigida al sitio y dependiente del tiempo. Alternativamente, el sistema de reparto para semejante dispositivo puede comprender un catéter de infusión local que libera el compuesto a una velocidad variablemente
controlada.

El término "stent" hace referencia a cualquier dispositivo capaz de ser liberado por un catéter. Un stent es rutinariamente utilizado para evitar la obturación vascular debida a anomalías físicas tales como el crecimiento interno no deseado de un tejido vascular debido a un trauma quirúrgico. A menudo un stent tiene una estructura de tipo entramado dilatable, tubular apropiado para ser dejado en el interior del lúmen de un conducto para aliviar una obstrucción. El stent tiene una superficie de contacto con la pared del lúmen y una superficie expuesta al lúmen. La superficie de contacto con la pared del lúmen es la superficie externa del tubo y la superficie expuesta al lúmen es la superficie interna del tubo. El material del stent puede ser un material polimérico, metálico o una combinación polimérico-metálico y puede ser opcionalmente biodegradable.

Comúnmente, un stent es insertado en el lúmen en una forma no dilatada y después se dilata autónomamente, o con la ayuda de un segundo dispositivo in situ. Un método típico de dilatación se produce por medio del uso de un balón de angioplastia montado en un catéter que se infla dentro del vaso estenosado o pasaje corporal con el fin de cortar y desorganizar las obstrucciones asociadas con los componentes de la pared del vaso y para obtener un lumen agrandado. También se pueden utilizar stents auto-dilatables como los descritos en la solicitud de Patente de los Estados Unidos 2002/0016625 A1 (Falotico, y col.). La combinación de stents con fármacos, agentes o compuestos que eviten la inflamación y la proliferación puede proporcionar el tratamiento más eficaz para la restenosis post-angio-
plastia.

Los compuestos de la presente invención pueden ser incorporados en o fijados al stent de varias maneras. Una solución del compuesto de la invención y un material o polímero biocompatible pueden ser incorporados en o sobre el stent de varias maneras. Por ejemplo, se puede pulverizar una solución del presente compuesto sobre el stent o el stent puede ser sumergido en la solución y, en cada caso, dejar que se seque. Otro método de recubrimiento carga eléctricamente una solución del presente compuesto a una polaridad y carga el stent con la polaridad opuesta. De esta manera, la solución y el stent se atraerán entre sí. Otro método recubre el stent con una solución del presente compuesto utilizando condiciones de temperatura y presión supercríticas. El recubrimiento del stent utilizando condiciones supercríticas reduce las pérdidas y permite más control sobre el grosor de la capa que se puede lograr. El compuesto se fija normalmente solo sobre la superficie externa del stent (la superficie que está en contacto con el tejido), pero para algunos compuestos se puede recubrir el stent completo.

Se puede utilizar un producto combinado que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del presente compuesto recubriendo el stent y sobre o en una capa o capas de un recubrimiento polimérico donde el recubrimiento polimérico controla la velocidad de liberación del fármaco cuando la eficacia del fármaco resulta afectada. Por consiguiente, el compuesto puede ser liberado del stent a lo largo de un período de al menos seis meses; en otro aspecto, a lo largo de un período de aproximadamente 3 días a aproximadamente 6 meses; y en otro aspecto a lo largo de un período de aproximadamente 7 a aproximadamente 30 días. Se puede utilizar cualquier número de materiales poliméricos biocompatibles, no erosionable para la capa o las capas de recubrimiento polimérico junto con el compuesto de la invención.

En una ilustración, el compuesto es incorporado directamente a una matriz polimérica, tal como el polímero polipirrol y recubierto con posterioridad sobre la superficie externa del stent. Esencialmente, el compuesto eluye desde la matriz por difusión a través de las moléculas de polímero. Los stents y los métodos para recubrir los fármacos sobre los stents se discuten con detalle en la solicitud PCT WO 96/32907. En otro aspecto, el stent es recubierto primero con una capa base que comprende una solución del compuesto, etilen-co-acetato de vinilo y poli(metacrilato de butilo). Después el stent es recubierto adicionalmente con una capa externa que comprende poli(metacrilato de butilo). La capa externa actúa como una barrera de difusión para evitar que el compuesto eluya demasiado rápidamente y entre el los tejidos circundantes. El grosor de la capa externa o capa superior determina la velocidad a la cual el compuesto eluye desde la matriz. Los stents y métodos de recubrimiento se discuten con detalle en la solicitud de Patente de los Estados Unidos pendiente 2002/0016625.

Es importante observar que se pueden utilizar diferentes polímeros para diferentes stents. Por ejemplo, la matriz de etileno-co-acetato de vinilo y poli(metacrilato de butilo) descrita antes funciona bien con stents de acero inoxidable. Se pueden utilizar otros polímeros más eficazmente con stents formados por otros materiales, incluyendo materiales que muestran propiedades superelásticas tales como aleaciones de níquel y titanio o materiales poliméricos que conservan la forma que recuerdan y vuelven a su forma original tras la activación a la temperatura corporal.

Los métodos para introducir un stent en el lúmen de un organismo son bien conocidos. En un aspecto de esta invención, se introduce un stent recubierto con un compuesto utilizando un catéter. Como apreciará un experto normal en la técnica, los métodos variarán ligeramente basándose en la localización de implantación del stent. Para la implantación coronaria del stent, el catéter balón que porta el stent es insertado en la arteria coronaria y es stent es situado en el lugar deseado. El balón se infla, se dilata y se separa. A medida que el stent se dilata, el stent entra en contacto con la pared del lúmen. Una vez que el stent está situado, el balón se desinfla y se separa. El stent permanece en el lugar con la superficie de contacto con el lúmen que porta el compuesto directamente en contacto con la superficie de la pared del lúmen. La implantación del stent puede estar acompañada de terapia anti-coagulación si fuera
necesario.

Las condiciones óptimas para la liberación de los compuestos para su uso en el stent de la invención pueden variar con los diferentes sistemas de liberación local, así como con las propiedades y concentraciones de los compuestos utilizados. Entre las condiciones que pueden ser optimizadas se incluyen, por ejemplo, las concentraciones de los compuestos, el volumen de liberación, la tasa de liberación, la profundidad de penetración de la pared del vaso, la presión de inflación proximal, la cantidad y tamaño de las perforaciones y el ajuste del catéter balón de liberación de fármaco. Las condiciones pueden ser optimizadas para la inhibición de la proliferación de las células de la musculatura lisa en el lugar de la lesión de manera que no se produzca un bloqueo arterial significativo debido a la restenosis, medido, por ejemplo, mediante la capacidad proliferativa de las células de la musculatura lisa o mediante los cambios en la resistencia vascular o el diámetro del lúmen. Las condiciones óptimas pueden ser determinadas basándose en los datos de estudios de modelos animales utilizando los métodos computacionales rutinarios.

Los compuestos de la presente invención también pueden ser administrados en forma de sistemas de liberación de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Los sistemas de liberación que contienen liposomas que son bien conocidos en la técnica están formados a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Las abreviaturas utilizadas en esta memoria, concretamente en los Esquemas y Ejemplos, son las siguientes:

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(Tabla pasa a página siguiente)

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Métodos sintéticos generales

Los compuestos representativos de la presente invención pueden ser sintetizados según los métodos sintéticos generales descritos más abajo y se ilustran más concretamente en los siguientes esquemas. Puesto que estos esquemas son una ilustración, la invención no debe considerarse limitada por las reacciones químicas y condiciones expresadas. La preparación de las diversas sustancias de partida utilizadas en los esquemas está dentro del alcance de las personas versadas en la técnica.

Los siguientes esquemas describen los métodos sintéticos generales por medio de los cuales se pueden preparar los compuestos intermedios y diana de la presente invención. Los compuestos representativos adicionales de la presente invención y los estereoisómeros, mezclas racémicas, diastereoisómeros y enantiómeros de los mismos pueden ser sintetizados utilizando los intermedios preparados según el Esquema AA y el Esquema BB, y otras sustancias, compuestos y reactivos conocidos por los expertos en la técnica. Se pretende que todos estos compuestos, estereoisómeros, mezclas racémicas, diastereoisómeros y enantiómeros de los mismos estén abarcados dentro del alcance de la presente invención. Puesto que los esquemas son una ilustración, la invención no debe ser considerada limitada por las reacciones químicas y las condiciones expresadas. La preparación de las diversas sustancias de partida utilizadas en el esquema está dentro del alcance de las personas versadas en la técnica.

En el Esquema AA se describe un método general para preparar los compuestos de la invención. El sistema anular tricíclico 6-5-6 del Compuesto AA3 donde x es 2 e y es 1 fue construido en tres etapas según un método de la literatura (Paragamian, Vasken; Patente de los Estados Unidos 3.462.443, 19 de Agosto de 1969 y Cook, C.E.; Wani, M.C.; Jump, J.M.; Lee, Y-W; Fail, P.A.; Anderson, S.A.; Gu, Y-Q.; Petrow, V.; J. Med. Chem. 1995, 38, 753-763). Otros compuestos de la presente invención que tienen un triciclo 6-5-6 donde x es 1 e y es 2 fueron preparados utilizando reactivos apropiados y sustancias de partida conocidas por los expertos en la técnica según el método de la literatura (Clark, R.L.; Gambino, A.J.; Daum, S.J.; J. Med. Chem. 1974, 17(10), 1040-1046; Booth, T.G.; Trevor, A; Singer, T.P. Castagnoli, N; J. Med. Chem. 1989, 32(2), 473-477). Los sistemas anulares tricíclicos 6-5-6 descritos supra se hicieron reaccionar de un modo similar para preparar los compuestos de la presente invención descritos más abajo.

El Compuesto AA3 fue tratado con un reactivo de Horner-Emmons, fosfonoacetato de trimetilo AA4, para proporcionar el Compuesto AA5 en forma de una mezcla de isómeros E,Z. El Compuesto AA5 fue reducido mediante hidrogenación para rendir el Compuesto AA6 con un isómero predominante, que se supone que es el sistema anular con todos los hidrógenos en cis. El Compuesto AA6 fue N-desmetilado mediante tratamiento con ACE-Cl para rendir el Compuesto AA7. Los compuestos de la presente invención fueron preparados anclando una variedad de ácidos carboxílicos, Compuesto AA8, a la amina del Compuesto AA7 utilizando un agente de acoplamiento, un álcali, un agente activador, y un disolvente apropiados para proporcionar el Compuesto AA9. Entre los agentes de acoplamiento apropiados se pueden incluir, y no están limitados a HTBU, DCC, y similares; entre los álcalis apropiados se pueden incluir, y no están limitados a NMM; entre los agentes activadores apropiados se pueden incluir, pero no están limitados a, HOBt; y entre los disolventes apropiados se pueden incluir, pero no están limitados a, DMF o CH_{2}Cl_{2}. Para los compuestos de la presente invención, el Compuesto AA7 fue acilado en presencia de HOBt, HTBU, NMM y DMF.

El Compuesto AA9 fue saponificado con hidróxido de litio para dar los ácidos libres AA10 y AA11 en forma de una mezcla de diastereoisómeros. Estos isómeros fueron separados mediante HPLC cuando fueron alcanzables.

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En el Esquema BB se describe un método general para la preparación de compuestos de la presente invención que contienen un sistema anular tricíclico 5-5-6. Si bien se encontraba disponible un método de la literatura para elaborar semejante sistema anular, (Helvetica Chemica Acta 1981, 64, (7), 2203-2218), se utilizó una ruta más conveniente y novedosa en la presente invención, como se ilustra en el Esquema BB.

El Compuesto BB1 se hizo reaccionar con TFA para formar un iluro que experimento una cicloadición 1,3-dipolar con éster metílico de ácido trans-cinámico para proporcionar el Compuesto BB2. El Compuesto BB2 fue hidrolizado en condiciones alcalinas al ácido carboxílico BB3. El Compuesto BB3 fue tratado con PPA para proporcionar el producto ciclado Compuesto BB4. El Compuesto BB4 también fue preparado mediante reacción del derivado iluro del Compuesto BB1 con indenona. El Compuesto BB4 fue llevado inicialmente a través de la secuencia sintética en forma de una mezcla de enantiómeros, pero el Compuesto BB4 también fue preparado en sus dos enantiómeros, los Compuestos BB5 y BB6. Por ejemplo, el Compuesto BB5 (que se suponía que era predominantemente el enantiómero cis) fue tratado con el reactivo de Horner-Emmons, fosfonoacetato de trimetilo Compuesto AA4 para proporcionar el Compuesto BB7 en forma de una mezcla de isómeros E,Z. El Compuesto BB7 fue reducido mediante hidrogenación a temperaturas elevadas para rendir los compuestos amina BB8 en forma de una mezcla de isómeros a una proporción aproximada de 1:1. Los compuestos de la presente invención fueron preparados anclando una variedad de ácidos carboxílicos Compuesto AA8 a la amina del Compuesto BB8 utilizando un agente de acoplamiento, álcali, agente activador, y disolvente apropiados para proporcionar el Compuesto BB9. Entre los agentes de acoplamiento apropiados se pueden incluir, y no están limitados a HTBU, DCC, y similares; entre los álcalis apropiados se pueden incluir, y no están limitados a NMM; entre los agentes activadores apropiados se pueden incluir, pero no están limitados a, HOBt; y entre los disolventes apropiados se pueden incluir, pero no están limitados a, DMF o CH_{2}Cl_{2}. Para los compuestos de la presente invención, el Compuesto BB8 fue acilado en presencia de HOBt, HTBU, NMM y DMF. El Compuesto BB9 fue saponificado con hidróxido de litio para dar los ácidos libres BB10 y BB11 en forma de una mezcla de diastereoisómeros, que fueron separados mediante HPLC.

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Ejemplos

Si bien la memoria anterior ilustra los principios de la presente invención, con los ejemplos proporcionados con fines ilustrativos, se comprenderá que la práctica de la invención abarca todas las variaciones, adaptaciones y/o modificaciones habituales que caen dentro de las siguientes reivindicaciones y sus equivalentes.

Ejemplo 1 Ácido (3-{2-[3-(1,4,5,6-tetrahidro-pirimidin-2-ilamino)-fenil]acetil}-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-3-aza-fluoren-9-il)acético Comp. 1 Ácido (3-{2-[3-(1,4,5,6-tetrahidro-pirimidin-2-ilamino)-fenil]acetil}-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-3-aza-fluoren-9-il)acético Comp. 2

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(el Compuesto 1c fue elaborado mediante una adaptación del procedimiento descrito en Paragamian, Vasken; Patente de los Estados Unidos 3.462.443, 19 de Agosto de 1969). Una solución de bromuro de manganeso 3M Compuesto 1b en éter dietílico (50 ml) fue enfriada a -10ºC antes de añadir gota a gota carboxilato de etil-1-metil-1,2,3,6-tetrahidro-4-piridina Compuesto 1a (12 ml, 75 mmoles) en éter dietílico (48 ml) a lo largo de un período de 40 minutos. La mezcla se continuó agitando en un baño de hielo durante 1 hora y 20 minutos antes la reacción se vertió lentamente en 200 ml de NH_{4}Cl acuoso enfriado con hielo (cloruro de amonio). La mezcla acuosa se extrajo con éter dietílico (2 x 100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron, y se concentraron para dar 17 g (92%) de un aceite de color pardo, que se utilizó para la siguiente etapa sin purificación adicional. MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 248,6 ((M + H)^{+}, 100), 289,5 (M + H MeCN)^{+}), 60).

El aceite de color pardo se recogió en éter dietílico (100 ml) y se lavó con HCl 6N (200 ml).La capa ácida se calentó a 130ºC durante 3 horas, se enfrió a la temperatura ambiente, y se concentró hasta un aceite de color pardo, que se recogió en MeCN y se concentró para dar 17,22 g de un sólido de color tostado en un rendimiento del 98% del Compuesto 1c en forma de la sal de HCl. RMN H^{1} (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 7,31-7,23 (m, 5H), 3,55 (t, 0,5H, J=5 Hz), 3,61-3,30 (m, 3,5H), 3,29-2,94 (m, 2H), 2,91 (s, 1,5H), 2,84 (s, 1,5H), 2,31-2,01 (m, 2H); RMN C^{13} (CD_{3}OD, 300 MHz) ppm 176,4, 140,0, 130,3, 129,4, 128,8, 59,6, 54,8, 46,5, 44,8, 42,9, 42,6, 28,6,, 27,5; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 220,2 ((M + H)^{+}, 100); Análisis Calculado para C_{13}H_{17}NO_{2} 0,32 H_{2}O HCl: C, 60,18; H, 7,16; N, 5,72; Cl, 13,16; H_{2}O, 2,14; Encontrado: C, 60,52; H, 7,25; N, 5,71; Cl, 13,54; H_{2}O, 2,51.

(El Compuesto 1d fue elaborado mediante una adaptación del procedimiento descrito en Paragamian, Vasken; Patente de los Estados Unidos 3.462.443, 19 de Agosto de 1969). En un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 500 ml equipado con un agitador mecánico, entrada de argon, y en tapón, se calentó ácido polifosfórico (PPA, 119 g) a 80ºC durante 1 hora. El sólido de color tostado 1c (7,0 g, 28 mmoles) se vertió a cucharadas a lo largo de un período de 10 minutos y el calor se incrementó a 135ºC durante 3 horas. La solución espesa se vertió en agua con hielo (300 ml) y el pH se ajustó a 13 con KOH sólido. La solución alcalina se extrajo con CHCl_{3} (3 x 200 ml), y los extractos se combinaron, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron. El aceite de color pardo bruto se purificó sobre SiO_{2} utilizando CH_{2}Cl_{2}/MeOH 95/5 para dar 3,9 g (19 mmoles, 68%) del Compuesto 1d en forma de un sólido de color pardo claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,77 (d, 1H, J=7 Hz), 7,56 (d, 1H, J=7 Hz), 7,47-7,36 (m, 2H), 3,36 (c, 1H, J=3 Hz), 3,08-3,03 (m, 2H), 2,79-2,74 (m, 1H), 2,60-2,57 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,01-1,88 (m, 2H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 248,6 ((M + H)^{+}, 100), 289,5 (M + MeCN)^{+}, 60).

Una solución de THF (40 ml) y fosfonoacetato de trimetilo Compuesto 1c (3,9 ml, 24 mmoles) fue enfriada a -78ºC antes de añadir gota a gota LDA 2M en THF (9,7 ml, 19 mmoles). Esta solución fue agitada a -78ºC durante 30 minutos, templada a la rt, y calentada a 40ºC durante 1 hora. La solución se dejó volver a la temperatura ambiente antes de añadir una solución del Compuesto 1d (2,44 g, 12,1 mmoles) en THF (40 ml) a lo largo de un período de 30 minutos. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 24 horas, se enfrió a la rt, y se concentró a alto vacío. El aceite de color pardo se recogió en EtOAc (100 ml) y se lavó con NaOH 1N (50 ml). La capa alcalina se lavó con EtOAc adicional (2 x 75 ml), y las capas orgánicas se combinaron, se lavaron 1 vez con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron. El aceite de color pardo se purificó sobre SiO_{2} con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (95:5) para dar 2,02 g (7,86 mmoles, 62%) del Compuesto 1f en forma de una mezcla de isómeros (razón 60/40). RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,65 (d, 0,5H, J=8Hz), 7,75 (d, 0,5H, J=8 Hz), 7,42-7,27 (m, 3H), 6,23 (s, 0,4H), 5,88 (s, 0,6H), 3,96-3,92 (m, 0,5H), 3,83-3,78 (m, 0,5H), 3,77 (s, 3H), 3,31-3,25 (m, 1H), 2,97 (c, 0,5H, J=5 Hz), 2,96 (c, 0,5H, J=5 Hz), 2,46-2,31 (m, 2H), 2,29 (s, 1,2H(, 2,24 (s, 1,8H), 2,17-2,14 (m, 0,5H), 2,05-1,90 (m, 1H), 1,82-1,76 (m,0,5H), 1,46-1,22 (m, 1H); RMN C13 (CDCl3, 300 MHz) ppm 167,6, 166,9, 165,6, 161,3, 150,6, 149,0, 139,4, 137,3, 131,6, 131,1, 129,4, 127,4, 127,3, 123,7, 123,6, 122,9, 111,1, 107,9, 58,3, 55,2, 53,8, 53,1, 51,5, 51,4, 47,2, 46,8, 46,0, 43,1, 42,6, 41,8, 28,3, 27,7; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 258,1 ((M + H)^{+}, 100), 299,1 (M + MeCN)^{+}, 20).

La hidrogenación de 1f (990 mg, 3,85 moles) se llevó a cabo a 2,99 atm (44 psi) de H_{2} con 20% en moles de PtO_{2} (172 mg, 0,758 mmoles) en EtOH (30 ml) a lo largo de un período de 24 horas. La reacción se filtró a través de un lecho de Celite, se concentró, y se purificó con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (93/7) sobre SiO_{2} para dar (830 mg, 83%) de un Compuesto 1g en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,24-7,20 (m, 3H), 7,18 (d, 1H, J=4 Hz), 3,75 (s, 3H), 3,40 (d, 1H, J=10 Hz), 3,16 (t, 1H, J=10 Hz), 2,90 (d, 0,5H, J=6 Hz), 2,85 (d, 0,5H, J=6 Hz), 2,65 (d, 1H, J=7 Hz), 2,58-2,47 (m, 2H), 2,41-2,27 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,85 (t, 1H, J=2 Hz), 1,47-1,41 (m, 1H), 1,26-1,12 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 260,5 ((M + H)^{+}, 100), 301,3 ((M + MeCN)^{+}, 20).

El Compuesto 1g (830 mg, 3,20 mmoles) fue disuelto en 1,2-dicloroetano (32 ml) y enfriado a 4ºC antes de añadir cloroformiato de 1-cloroetilo (ACE-C1) (675 \mul,6,40 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 4ºC durante 15 minutos y se dejó calentar a la rt antes de calentar a reflujo durante 24 horas. La solución se concentró y el residuo se disolvió en MeOH seco (32 ml). La mezcla calentada se concentró para dar 748 mg del Compuesto 1h (305 mmoles, 95%) en forma de un sólido de color tostado claro que se utilizó sin purificación adicional. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,35-7,23 (m, 3H), 7,12 (d, 1H, J=6 Hz), 3,76 (s, 3H), 3,75-3,67 (m, 2H), 3,44-3,40 (m, 2H), 2,93-2,82 (m, 3H), 2,52 (m, 1H), 1,87-1,26 (m, 4H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 246,1 ((M + H)^{+}, 100), 287,1 (M + MeCN)^{+}, 20).
Análisis Calculado para C_{15}H_{19}NO_{2}; C, 59,20; H,7,47; N, 4,37. Encontrado: C,59,19; H, 7,47; N, 4,03.

El Compuesto 1h (217 mg, 0,813 mmoles) fue disuelto en DMF (5 ml) y tratado con NMM (N-metilmorfolina) (178 \mul, 1,63 mmoles) antes de enfriar la mezcla a 0ºC. La mezcla de reacción se trató con 20% en moles de HOBt(1-hidroxibenzotriazol) (22 mg), y se agitó en un baño de hielo durante 10 minutos adicionales, antes de añadir una suspensión del Compuesto 1i (200 mg, 0,813 mmoles) y NMM (178 \mul, 1,63 mmoles) en DMF (5 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y se trató con HBTU (463 mg, 1,22 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante 36 horas a la rt, y la suspensión se concentró a alto vacío. La purificación con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (90/10) sobre SiO_{2} dio 240 mg del Compuesto 1j (0,522 mmoles, 64%) en forma de un sólido de color blanco MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 461,5 ((M + H)^{+}, 100).

Una mezcla de LiOH\cdotH_{2}O (44,2 mg, 1,04 mmoles) en H_{2}O (3 ml) se añadió a una solución del Compuesto 1j (240 mg, 0,522 mmoles) en THF (3 ml). Esta mezcla se agitó durante 3 horas a la rt antes de ajustar la mezcla a pH 1 con TFA. La mezcla de reacción se concentró, se purificó mediante Gilson Prep, y se secó para dar 142 mg del Compuesto 1 cis enriquecido (0,318 mmoles, 60%) y 28,1 mg del Compuesto 2 trans (0,063mmoles, 12%). Comp. 1: RMN H^{1} (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 7,43-7,34 (m, 1H), 7,28-7,16 (m, 4H), 7,03 (t, 1H, J=8 Hz), 6,86-6,84 (m,1H), 6,80 (s, 1H), 5,18 (d, 1H, J=14 Hz), 4,55 (d, 0,5H, J=14 Hz), 4,33 (d, 0,5H, J=13 Hz), 3,91-3,56 (m, 5H), 3,38 (s ancho, 5H), 3,17-3,03 (m, 2H), 2,89-2,78 (m, 2H), 2,41-2,32 (m, 1H), 2,00 (s, 2H), 1,42 (d, 1H, J=13 Hz), 0,78-0,67 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 447 ((M + H)^{+}, 100). Análisis Calculado para C_{26}H_{30}N_{4}O_{3} 0,84 H_{2}O 1,8 TFA: C, 35,25; H, 5,05; N, 8,39; F, 15,44; H_{2}O, 2,27. Encontrado: C,52,91; H, 4,75; N, 8,49; F, 15,09; H_{2}O, 1,98. HRMS (FAB^{+}) m/z Calculado para C_{26}H_{31}N_{4}O_{3}: 447,2396; Encontrado 447,2403. Comp. 2: RMN H^{1} (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 7,43-6,88 (m, 9H), 4,39 (d, 1H, J=14 Hz), 3,9-3,34 (m,10H), 330-3,21 (m, 2H), 2,61-2,40 (m, 2H), 2,00 (s, 2H), 1,85-1,78 (m, 1H), 1,76-1,61 (m, 1H), 1,32-1,25 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 447,2 ((M + H)^{+}, 100). HRMS (FAB^{+}) m/z Calculado para C_{26}H_{31}N_{4}O_{3}: 447,2396; Encontrado 447,2409.

Utilizando el procedimiento del Ejemplo 1, otros compuestos de la presente invención pueden ser preparados por los expertos en la técnica variando las sustancias de partida, los reactivos y las condiciones utilizadas:

Comp.	MS (MH^{+})
3	434,3
Comp.	MS (MH^{+})
4	420,3
5	463,4

Ejemplo 2 Ácido {3-[4-(piridin-2-ilamino)butiril]-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-aza-fluoren-9-il}acético y

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El compuesto 2b fue sintetizado utilizando una adaptación del procedimiento descrito para la síntesis del Compuesto 1j, sustituyendo el Compuesto 2a por el Compuesto 1i.

El Compuesto 2b (471 mg, 0,904 mmoles) fue disuelto en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y TFA (5 ml). La reacción se agitó durante 4 horas y se concentró hasta un aceite de color amarillo claro. La sustancia bruta fue purificada en el Gilson Prep, para dar 283 mg de los Compuestos 2c/2d en forma de la sal del éster de TFA (0,528 mmoles, 60%) en forma de un aceite vítreo; RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,86-7,83 (m,2H), 7,32-7,19 (m, 4H), 6,90-6,87 (m, 1H), 6,80 (t, 1H, J=7 Hz), 5,19 (d, 0,5H, J=14 Hz), 4,44 (t, 0,5H, J=13 Hz), 3,82-3,48 (m, 5H), 3,35-3,08 (m, 5H), 2,96-2,84 (m, 2H), 2,72-2,39 (m,4H), 1,61 (s ancho, 4H), 1,11-1,07 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 422,2 ((M + H)^{+}, 100).

Los Compuestos 6 y 7 fueron sintetizados utilizando una adaptación del procedimiento descrito para la síntesis de los Compuestos 1 y 2, sustituyendo los Compuestos 2c/2d por el Compuesto 1j. Compuesto 6 (101 mg, 35%): RMN H^{1} (CD_{3}OD, 500 MHz) \delta 7,80 (d, 1H, J=1 Hz), 7,35-7,06 (m, 5H), 6,94-6,77 (m, 2H), 5,16 (d, 1H, J=14 Hz), 4,46-4,35 (m, 0,5H), 4,19-4,00 (m, 1,5H), 3,75-3,54 (m, 2H), 3,21-2,97 (m, 2H), 2,94-2,60 (m, 3H), 2,53-2,33 (m, 2H), 2,28-2,23 (m, 1H), 2,10-1,90 (m, 2H), 1,63-1,58 (m, 2H), 0,99 (c, J=1H, J=4 Hz); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 394,4 ((M + H)^{+}, 100). HRMS (FAB^{+}) m/z Calculado para C_{23}H_{27}N_{3}O_{3}: 394,2131; Encontrado 394,2119.

Compuesto 7 (14 mg, 10%): RMN H^{1} (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 7,91-7,84 (m, 1H), 7,32-7,06 (m, 6H), 6,88-6,81 (m, 1H), 4,30 (d, 0,5H, J=5 Hz), 4,26 (d, 0,5H, J=5 Hz), 4,07-3,96 (m, 2H), 3,78-3,57 (m, 3H), 3,49-3,34 (m, 4H), 2,89-2,34 (m, 4H), 2,05-1,93 (m, 3H), 1,56-1,48 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 394,4 ((M + H)^{+}, 100).

Utilizando el procedimiento del Ejemplo 2, otros compuestos de la presente invención pueden ser preparados por los expertos en la técnica variando las sustancias de partida, los reactivos y las condiciones utilizadas.

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Comp.	MS (MH^{+})
8	408,2

Ejemplo 3 Ácido [2-(4-5,6,7,8-Tetrahidro[1,8]nafiridin-2-il-butiril)-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-indeno[2,1-c]piridin-9-il]acético, Comp. 9 y Comp.

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Se disolvió hidrobromuro de arecolina Compuesto 3a (2,06 g, 8,73 mmoles) en tolueno (40 ml) y se enfrió a -10ºC. Se añadió lentamente hidruro de sodio (239 mg de 90%, 9,70 mmoles) a la solución mientras se mantenía la temperatura a -10ºC. Después de agitar durante 15 minutos, se añadió gota a gota una solución 3M de Compuesto 1b en Et_{2}O (6 ml). La mezcla de reacción se agitó a -10ºC durante 1 hora después se trató con HCl 2N (200 ml) para neutralizar. La mezcla de reacción se vertió en tolueno (100 ml) y se volvió alcalina con K_{2}CO_{3}. La capa alcalina se extrajo con tolueno (3x), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró. La mezcla de reacción bruta se purificó mediante cromatografía en SiO_{2} con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (9:1) para dar 1,74 g del Compuesto 3b (7,25 mmoles, 83%) en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,31-7,19 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 3,19-3,18 (m, 3H), 3,05-2,95 (m, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,88-1,84 (m, 2H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 234,2 ((M + H)^{+}, 100).

El Compuesto 3b (1,74 g, 7,25 mmoles) se recogió en HCl 6N (25 ml) y se calentó a 130ºC durante 17 horas. La mezcla de reacción se enfrió, se concentró, y se secó durante la noche para dar 1,30 g (80%) del ácido libre en forma de un sólido de color blanco. RMN H^{1} (CD_{3}OD, 300 MHz) \delta 7,32-7,07 (m, 5H), 3,80-3,59 (m, 3H), 3,43-3,06 (m, 3H), 3,00 (s, 3H), 2,67-2,58 (m, 2H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 220,0 ((M + H)^{+}, 100).

En un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 500 ml equipado con un agitador mecánico, entrada de argon, y tapón se calentó PPA (40 g) a 110ºC durante 1 hora. El ácido libre del Compuesto 3b, anterior, se vertió a cucharadas en el PPA caliente y el calor se incrementó a 130ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo, y se añadió KOH sólido hasta alcanzar el pH 10. La capa alcalina se extrajo con CHCl_{3} (3 x 500 ml) y las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera (500 ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron para dar el Compuesto 3c en forma de un aceite de color pardo (1,1 g, 75%) que se utilizó sin purificación adicional para posteriores reacciones. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 500 MHz) \delta 7,68 (d, 1H, J=7 Hz), 7,57 (t, 1H, J=7 Hz), 7,48 (d, 1H, J=7 Hz), 7,36 (t, 1H, J=7 Hz), 3,58 (c, 1H, J=7 Hz), 3,31 (d, 1H, J=7 Hz), 2,73-2,72 (m, 1H), 2,55-2,40 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,16-1,96 (m, 2H), ,47-1,35 (m, 1H); RMN C^{13} (CDCl_{3}, 500 MHz) ppm 204,6, 156,5, 126,5, 123,8, 123,3, 1134,3, 113,4, 52,4, 52,0, 48,0, 45,4, 35,0, 30,7; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 202,1 ((M + H)^{+}, 100), 203,1 ((M +2H)^{+}, 30).

Una solución de THF con manto de argon (40 ml) y el Compuesto 1e (1,7 ml, 11 mmoles) se enfrió a -78ºC durante 45 minutos antes de añadir gota a gota LDA en THF 2 M (4,0 ml, 8,0 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a -78ºC durante 10 minutos, se templó a la rt durante 1 hora, y se calentó a 60ºC durante 30 minutos. Se añadió a la mezcla de reacción una solución del Compuesto 3c (1,1 g, 5,47 mmoles) en THF (40 ml) a la rt, y se calentó a reflujo durante 24 horas. La mezcla concentrada se recogió en EtOAc (100 ml), se lavó con NaOH (3 x 50 ml), salmuera (50 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. La purificación mediante cromatografía en SiO_{2} con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (94:6) dio el Compuesto 3d (300 mg, 22%) con una proporción de diastereoisómeros (7:3) en forma de un aceite claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 8,67 (d, 0,5H, J=8 Hz), 7,76 (d, 0,5H, J=8 Hz), 7,76 (d, 0,5H, J=8 Hz), 7,57-7,27 (m, 3H), 6,25 (s, 0,3H), 5,94 (s, 0,7H), 4,27-4,18 (m, 0,3H), 3,78 (s, 0,9H), 3,76 (s, 2,1H), 3,41-3,12 (m, 2,7H), 2,85-2,78 (m, 0,7H), 2,68-2,62 (m, 1H), 2,60-2,46 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,10-1,83 (m, 2,3H), 1,80-1,71 (m, 0,7H); HPLC R_{f}=4,84 (70%) y 5,13 (30%) 0.30.

La hidrogenación del Compuesto 3d (300 mg, 1,17 mmoles) se llevó a cabo a 2,9 atm (44 psi) de H_{2} con 20% en moles de PtO_{2} (80 mg, 0,35 mmoles) en EtOH (18 ml) a lo largo de un período de 24 horas. La reacción se filtró, se concentró y se purificó con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (93/7) sobre SiO_{2} para dar 300 mg del Compuesto 3e (98%) en forma de un aceite de color amarillo claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,32-7,14 (m,4H), 3,78 (s, 1,5H), 3,71 (s, 1,5H), 3,29-3,27 (m, 2H), 2,99-2,45 (m, 4H), 2,36 (s, 1,5H), 2,33 (s, 1,5H), 2,26-2,04 (m, 2H), 1,67-1,12 (m, 2H), 0,95-0,84 (m,1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 260,5 ((M + H)^{+}, 100).

El Compuesto 3e (300 mg, 1,17 mmoles) se disolvió en 1,2-dicloroetano (12 ml) y se enfrió a 4ºC en un baño de hielo antes de añadir ACE-Cl (495 \mul, 4,68 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 4ºC durante 15 minutos y se dejó que se templara a la rt antes de calentar a reflujo durante 36 horas. La solución se enfrió, se concentró, y el residuo se disolvió en MeOH seco (32 ml) y se calentó a 50ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la rt y se concentró para dar 264 mg del Compuesto 3f en forma de un sólido de color tostado claro que se utilizó en reacciones posteriores sin purificación adicional.

El Compuesto 3g (264 mg, 1,17 mmoles) se disolvió en DMF (10 ml) y se añadieron 3 equivalentes de NMM (385 \mul, 3,51 mmoles). La mezcla de reacción se enfrió a 4ºC y se trató con HOBt (33 mg, 20% en moles). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos más antes de añadir una solución del Compuesto 3f (287 mg,1,17 mmoles) en DMF (10 ml) y NMM (385 \mul, 3,5 1 mmoles). Esta mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos en un baño de hielo antes de tratar con HBTY (666 mg, 1,76 mmoles). La solución se agitó en un baño de hielo durante 1,5 horas antes de verter la mezcla en NaOH 1N (40 ml) y EtOAc (50 ml). La capa orgánica se lavó con NaOH 1N (3 x 50 ml), se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró. La purificación se llevó a cabo en el Gilson Prep utilizando 30 a 90 (MeCN/H_{2}O). Se recuperaron un total de 300 mg de Compuestos 3h y 3i (0,671 mmoles, 57%) en forma de una mezcla de diastereoisómeros (proporción 1:1) en forma de un aceite claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,34-7,19 (m, 6H), 6,49 (t, 1H, J=3 Hz), 4,51-4,29 (m, 0,5H), 3,83 (s, 1,5H), 3,75 (s, 1,5H), 3,57-3,30 (m, 5,5H), 2,83-2,49 (m, 11H), 2,14-1,97 (m, 6H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 448,4 ((M + H)^{+}, 100).

La mezcla de los Compuestos 3h y 3i (0,671 mmoles) se recogió en THF/H_{2}O (12 ml) (1:1) y se trató con LiOH\cdotH_{2}O (141 mg, 3,36 mmoles) a 4ºC. Una vez completada al cabo de 1,5 horas, la reacción se aciduló con TFA a pH 1 y se concentró. La sustancia bruta se purificó en Gilson Prep con MeCN/H_{2}O del 20 al 90% para dar el Compuesto 9 (105 mg, 36%) y el Compuesto 10 (108 mg, 37%). Compuesto 9: RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 13,8 (s ancho, 1H), 7,37 (d, 0,5H, J=7 Hz), 7,26-7,14 (m, 5H), 6,47 (d, 0,5H, J=7 Hz), 4,37 (d, 1H, J=13 Hz), 3,86 (d, 1H, J=13 Hz), 3,61-3,50 (m, 4H), 3,34 (s ancho, 2H), 3,14 (d, 0,5H, J=5 Hz), 3,09 (d, 0,5H, J=5 Hz), 3,00-1,94 (m, 13H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 434,1 ((M + H)^{+}, 100). Compuesto 10: RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,37 (d, 0,5H, J=8 Hz), 7,29-7,21 (m, 5H), 6,46 (d, 0,5H, J=8 Hz), 3,73-3,63 (m, 1H), 3,52-3,22 (m, 6H), 3,14 (d, 0,5H, J=5 Hz), 3,09 (d, 0,5H, J=5 Hz), 2,80-2,71 (m, 4H), 2,58-2,39 (m, 4H), 2,06-1,94 (m, 5H), 1,62-1,59 (m, 1H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 434,1 ((M + H)^{+}, 100); HPLC, R_{f} = 3,025 a 220 nm; HRMS (FAB^{+}) m/z Calculado para C_{26}H_{32}N_{3}O_{3}; 434,2444; Encontrado 434,2436.

Utilizando el procedimiento del Ejemplo 3, otros compuestos de la presente invención pueden ser preparados por los expertos en la técnica variando las sustancias de partida, los reactivos y las condiciones utilizadas:

Comp.	MS (MH^{+})
11	420,2

Ejemplo 4 Ácido [2-(3-5,6,7,8-Tetrahidro[1,8]nafiridin-2-il-propionil)-1,2,3,3a,8,8a-hexahidro-2-aza-ciclopenta[\alpha]iden-8-il] acético, Comp. 13 y 14

19

Un matraz de 4 cuellos fue equipado con un agitador mecánico, un depósito termométrico, un tapón y una entrada de nitrógeno colocados todos en un recipiente secundario lleno con agua del grifo que iba a ser utilizado como foco frío. Se añadieron bencil-metoximetil-trimetilsilanilmetil-amina Compuesto 4a (36 g, 0,152 moles) y éster metílico de ácido trans-cinámico Compuesto 4b (25 g, 0,154 moles) a tolueno (500 ml). Se añadió cuidadosamente ácido trifluoroacético (5 g, 0,044 moles) a la mezcla en porciones de 1 g. Precaución: reacción EXOTERMICA. Se añadió la cantidad completa de de TFA en 30 minutos. La reacción se agitó durante 5 horas, se sofocó con solución de NaHCO_{3} saturada (400 ml), y se extrajo con EtOAc (2 x 500 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (500 ml), salmuera (500 ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron a 150ºC, 200 mTorr para dar 10 g del Compuesto 4c (22%) en forma de un aceite claro. RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,3-7,1 (m, 10H), 3,8-3,7 (m, 3H), 3,6 (s, 3H), 3,1-3,0 (m, 3H), 2,9-2,8 (m, 1H), 2,8-2,7 (m, 1H); RMN C^{13} (CDCl_{3}, 300 MHz) ppm 174,8, 144,5, 139,0, 128,9, 128,8, 128,6, 127,7, 127,3, 126,8, 62,2, 60,3, 57,9, 52,3, 52,1, 47,4; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 296,3 ((M + H)^{+}, 100); Análisis Calculado para C_{19}H_{21}NO_{2}: C, 77,26; H, 7,17; N, 4,74; Encontrado: C, 77,26; H, 7,49; N, 4,82.

El Compuesto 4c (2,06 g, 6,98 mmoles) fue disuelto en THF/H_{2}O (100 ml, 1:1) a 4ºC y tratado con LiOH\cdotH_{2}O (0,89 g, 21 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 4ºC y se aciduló con HCl concentrado a pH 1. Los sólidos se filtraron, y el producto filtrado se concentró para dar el Compuesto 4d en forma de un sólido de color blanco (2,0 g) en un rendimiento cuantitativo. El Compuesto 4d fue utilizado sin purificación adicional. RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,65-7,63 (m, 1H), 7,41-7,30 (m, 9H), 4,57 (s, 2H), 3,88-3,80 (m, 4H), 3,32-3,30 (m, 2H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 282,1 ((M + H)^{+}, 100).

Se calentaron juntos PPA (60 g), y P_{2}O_{5} (6 g) en un matraz de 3 cuellos equipado con un agitador mecánico, entrada de argon, y tapón, a 100ºC durante 1 hora. El Compuesto 4c (2,0 g, 7,0 mmoles) fue vertido a cucharadas a lo largo de un período de 10 minutos y el calor se incrementó a 130ºC durante 3 horas. La solución espesa se vertió en agua enfriada con hielo (300 ml) y el pH se ajustó a 13 con KOH sólido. La solución alcalina se extrajo con CHCl_{3} (3 x 200 ml), los extractos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron para dar 1,3 g del Compuesto 4e (70%) en forma de un aceite de color pardo. Los enantiómeros del Compuesto 4e se separaron en una columna quiral; Chiralpak® AD, Amylose tris-(3,5-dimetilfenilcarbamato) recubierto sobre gel de sílice de 20 \mum, 500 g; 5 cm ID; 41 cm de longitud y utilizando como eluyente una mezcla isocrática de hexano/etanol: 80/20 vol/vol% a 80 ml/min; longitud de onda 220 nM. El enantiómero 4f (compuesto que eluía primero) tenía una \alpha_{[D]} = +14 y el enantiómero 4g tenía una \alpha_{[D]} = -14; RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,63 (d, 1H, J=8 Hz), 7,50 (d de d, 1H, J=7,7 y 7,0 Hz), 7,39-6,85 (m, 7H), 3,70 (t, 1H, J=7,0 Hz), 3,44 (s, 2H), 3,12 (d, 1H, J=9,0 Hz), 3,00 (d de d, 1H, J=8,0 y 7,0 Hz), 2,83 (d, 1H, J=9 Hz), 2,54 (t, 1H, J=17 Hz), 2,42 (t, 1H, J=17 Hz); HPLC R_{f} = 2,444 min, 220 nm y 254 nm; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 264,1 ((M + H)^{+}, 100).

Una solución de THF (50 ml) y el Compuesto 1e (2 ml, 12 mmoles) se enfrió a 0ºC antes de añadir gota a gota NaHMDS 1M en THF (12 ml, 12 mmoles). Esta solución se agitó a 0ºC durante 30 minutos, después se dejó que se templara a la rt antes de añadir el Compuesto 4f (1,04 g, 3,80 mmoles) en THF (40 ml) gota a gota a lo largo de un período de 30 minutos. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 36 horas, se enfrió a la rt, y se concentró a alto vacío. El aceite de color pardo se recogió en EtOAc (100 ml), se lavó con NaOH 1N (50 ml) y se separó. La capa alcalina se extrajo con Et_{2}O (2 x 75 ml) y las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron. El aceite de color pardo se purificó sobre SiO_{2} con hexanos/EtOAc (70:30) para dar el Compuesto 4h (1,01 g, 84%) en forma de una mezcla de isómeros E,Z (razón 1:1). RMN H^{1} (CDCl_{3},_{ }300 MHz) \delta 7,68 (d, 1H, J=7 Hz), 7,50 (m, 1H), 7,40-7,31 (m, 2H), 7,22-7,06 (m, 5H), 6,27 (s, 0,5H), 5,83 (s, 0,5H), 3,70 (s, 1,5H), 3,69 (s, 1,5H), 3,78-3,69 (m solapante, 1H), 3,47 (s, 2H), 3,16 (d,1H, J=9,0 Hz), 3,01 (m, 1H), 2,88 (d, 1H, J=9 Hz), 2,62-2,48 (m,2H); HPLC R_{f} = 3,202 min, 220 nm; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 320,2 ((M + H)^{+}, 100).

El Compuesto 4h (1,01 g, 3,20 mmoles) se recogió en MeOH (40 ml), y se añadió Pd/C al 5% (140 mg). La mezcla de reacción se colocó a 2,72 (40 psi) de H_{2} y se calentó a 50ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la rt y se filtró a través de un lecho de Celite®. El producto filtrado se concentró y se colocó a alto vacío durante la noche hasta sequedad. Se utilizó el Compuesto 4i sin purificación adicional (720 mg, 98%). MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 232,0 ((M + H)^{+}, 100).

Se disolvió el Compuesto 4j (760 mg, 3,13 mmoles) en DMF (20 ml) y se añadieron 3 equivalentes de NMM (1,03 ml, 9,39 mmoles). La mezcla de reacción se enfrió a 4ºC y se añadió HOBt (86 mg). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos más antes de añadir una solución del Compuesto 4i (720 mg, 3,13 mmoles) y NMM (1,03 ml, 9,39 mmoles) en DMF (20 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos en un baño de hielo antes de tratar con HBTU y EtOAc (50 ml). La capa orgánica se separó y se lavó con NaOH 1N (3 x 50 ml), se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró. El Compuesto se purificó en el Gilson Prep gradiente 15 a 90% (MeCN). Los Compuestos éster 4k y 4l (600 mg, 1,43 mmoles) fueron recuperados en forma de una mezcla de diastereoisómeros (razón 1:1) con un rendimiento del 46% en forma de un aceite claro. RMN H^{1} (CDCl_{3}, 300 MHz) \delta 7,33-7,13 (m, 5H), 6,49-6,43 (m, 1H), 4,11-3,97 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,49 (s ancho, 2H), 3,29 (t, 0,5H, J=17 Hz), 3,13 (t, 0,5H, J=17 Hz), 2,99-2,83 (m, 3H), 2,79-2,62 (m, 3H), 2,60-2,43 (m, 2H), 1,93 (s ancho, 2H); MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 420,1 ((M + H)^{+}, 100).

Los Compuestos éster 4k y 4l (600 mg, 1,43 mmoles) fueron disueltos en THF/H_{2}O (30 ml, 1:1) y tratados con LiOH\cdotH_{2}O (300 mg,7,15 mmoles). La mezcla de reacción fue agitada durante 1 hora y sofocada con TFA para ajustar el pH a 1. El ácido fue purificado utilizando 10:90 (MeCN/H_{2}O) para dar los Compuestos 13 y 14 (545 mg, 73%, razón de estereoisómeros 1:1) en forma de la sal de TFA. RMN H^{1} (CD_{3}OD, 500 MHz) \delta 7,51-7,44 (m, 1H), 7,29-7,21 (m, 4H), 6,56-6,49 (m, 1H), 3,97-3,63 (m, 5H), 3,45 (s ancho, 3H), 3,27 (t, 0,5H, J=13 Hz), 3,14 (t, 0,5H, J=11 Hz), 3,03-2,85 (m, 4H), 2,79-2,44 (m, 5H), 1,94-1,89 (m, 2H); RMN C^{13} (CD_{3}OD, 500 MHz) ppm 176,1, 172,1, 152,4, 148,8, 145,8, 142,6, 130,2, 129,1, 128,8, 126,1, 125,6, 124,9, 120,8, 111,7, 53,0, 47,6, 46,5, 42,4, 33,8, 33,6, 28,6, 26,4; HPLC R_{f} = 2,794 min, 220 nm; MS (ES^{+}) m/z (intensidad relativa) 406,4 ((M + H)^{+}, 100); HRMS (FAB^{+}) m/z Calculado para C_{24}H_{28}N_{3}O_{3}: 406,2126; Encontrado: 406,2131.

El par de diastereoisómeros Compuesto 13 y 14 fue separado utilizando una columna Chiralpak® OD, Cellulose tris-(3,5-dimetilfenilcarbamato) recubierta sobre gel de sílice de 20 \mum, 500 g; 5 cm ID; 41 cm de longitud y utilizando como eluyente una mezcla isocrática de hexano (etanol +5% +TFA 0,1% `TEA 0,02%)/metanol/etanol: 85/9,75/5,25 vol/vol/vol% a 80 ml/min y una longitud de onda de 215 nM. La rotación óptica del Compuesto 13 que eluía primero [\alpha]_{D} = -18,2 y del Compuesto 14 [\alpha]_{D} 0 +18,7.

Utilizando el procedimiento del Ejemplo 4, otros compuestos de la presente invención pueden ser preparados por los expertos en la técnica variando las sustancias de partida, los reactivos y las condiciones utilizadas:

Comp.	MS (MH^{+})
12	406,4
15	420,4
16	424,2

Ejemplo 5

21

El Compuesto 4e fue preparado mediante un método alternativo como se describe más abajo, y fue convertido con posterioridad en los Compuestos 12-16 siguiendo el procedimiento proporcionado en el Ejemplo 4.

A una solución del Compuesto 5a (1,6 g,6,9 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} a 0ºC se añadió el Compuesto 5b (Preparado en una etapa a partir de indanona; Nicolau, K.C.; Montagnon, T.; Baran, P.S. Angewandte Chemie, Intl. Ed. 2002, 41(8), 1386-1389) (750 mg, 5,8 mmoles) en CH_{2}Cl_{2}, seguido de TFA (0,5 ml, solución 1 M en CH_{2}Cl_{2}). Se dejó que la reacción se templara a la rt y se agitó durante la noche. La solución se sofocó con bicarbonato de sodio saturado y después se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y el disolvente se separó para dar un aceite de color amarillo. La purificación utilizando Biotage 40S (heptanos/EtOAc 8:1) proporcionó el Compuesto 4e (470 mg, 31%) en forma de un aceite de color amarillo claro. Análisis Calculado para C_{18}H_{17}NO-0,5H_{2}O: C, 79,38; H, 6,66; N, 5,14; Encontrado: C, 79,67; H, 6,59; N, 5,31.

Ejemplo biológico experimental

Como se demuestra mediante los estudios biológicos descritos más adelante, como se muestra en la Tabla II, los compuestos de la presente invención son antagonistas del receptor de integrina \alphav\beta3 y \alphav\beta5 útiles en el tratamiento de los trastornos mediados por integrinas.

Ejemplo 1 Análisis de Unión a \alphav\beta3 Purificada en Fase Sólida In Vitro

Los métodos de análisis de unión a vitronectina/\alphav\beta3 estaban derivados de Mehta y col. (Biochem J. 1998, 330, 861). Se inmovilizó \alpha_{v}\beta_{3} humana (Chemicon International Inc. Temecula, CA), a una concentración de 1 \mug/ml disuelto en tampón Tris (Tris 20 mM, CaCl_{2} 1 mM, MgCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 10 \muM, NaCl 150 mM) sobre placas de 96 pocillos Immulon (Dynex Technologies, Chantilly, VA) durante la noche a 4ºC. Las placas fueron lavadas y tratadas con tampón bloqueador (BSA al 3% en tampón Tris) durante 2 horas a 37ºC. Las placas fueron enjuagadas después 2 veces con tampón de análisis formado por tampón Tris. Los compuestos sintetizados fueron añadidos a los pocillos por duplicado inmediatamente antes de la adición de vitronectina 2 nM (Sigma, St. Louis, MO). Tras una incubación de 3 horas a 37ºC, las placas fueron lavadas 5 veces en tampón de análisis. Se añadió un anticuerpo policlonal IgG de conejo anti-vitronectina humana (Calbiochem, San Diego, CA) (1:2000) y las placas fueron incubadas durante 1 hora a la temperatura ambiente. Se utilizaron reactivos del estuche VectaStain ABC (Vector Laboratories, Burlingame, CA) que empleaban un anti-IgG de conejo marcado con biotina para la detección del anticuerpo unido. Las placas fueron leídas a 490 nm en un lector de microplaca de Molecular Devices (Sunnyvale, CA). En la Tabla 1 se muestran los resultados del análisis de unión de \alphav\beta3 purificada en fase sólida in vitro para los compuestos representativos de la presente invención.

Ejemplo 2 Análisis de Unión a GP IIb/IIIa Purificada en Fase Sólida In Vitro

Se recubrió una placa de microtitulación de 96 pocillos Immulon-2 (Dynatech-Immulon) con 50 \mug/pocillo de GP IIb/IIIa purificado por afinidad con RGD (intervalo eficaz 0,5-10 \mug/ml) en HEPES 10 mM, NaCl 150 mM, MgCl_{2} 1 mM a pH 7,4. La placa fue cubierta e incubada durante la noche a 4ºC. La solución de GP IIb/IIIa fue descartada y se añadieron 150 \mul de BSA al 5% y se incubó a la RT durante 1-3 horas. La placa se lavó extensamente con tampón Tyrodes modificado. Se añadió fibrinógeno biotinilado (25 \mul/pocillo) a 2 x concentración final a los pocillos que contienen los compuestos de ensayo (25 \mul/pocillo). La placa se recubrió y se incubó a la RT durante 2-4 horas. Veinte minutos antes de completarse la incubación, se añadieron una gota de Reactivo A (estuche VectaStain ABC Horseradish Peroxidase, Vector Laboratories Inc.) y una gota de Reactivo B mezclando con 5 ml de mezcla de tampón Tyrodes modificado y se dejaron estar. La solución de ligando fue descartada y la placa fue lavada (5 x 200 \mul/pocillo) con tampón Tyrodes modificado. Se añadió reactivo Vecta Stain HRP-Biotin-Avidin (50 \mul/pocillo, preparado como antes) y se incubó a la RT durante 15 minutos. La solución de Vecta Stain fue descartada y los pocillos lavados (5 x 200 \mul/pocillo) con tampón Tyrodes modificado. Se añadió tampón de desarrollo (10 ml de tampón citrato/fosfato 50 mM @ pH 5,3, 6 mg de o-fenilendiamina, 6 \mul de H_{2}O_{2} al 30%; 50 \mul/pocillo) y se incubó a la RT durante 3-5 minutos y después se añadió H_{2}SO_{4} 2N (50 \mul/pocillo). Se leyó la absorbancia a 490 nM. En la Tabla 1 se muestran los resultados del análisis de unión a GP IIb/IIIa purificada en fase sólida in vitro para los compuestos representativos de la presente invención.

Ejemplo 3 Análisis de Unión a \alphav\beta5 Purificada en fase Sólida In Vitro

Se realizó el método de análisis de unión a vitronectina/\alpha_{v}\beta_{5} de la misma manera que el análisis de unión a vitronectina/\alphav\beta3 del Ejemplo 2, con la diferencia de que se inmovilizó 1 \mug/ml de \alpha_{v}\beta_{5} humana purificada (Chemicon International, Inc.) sobre placas de 96 pocillos Immulon (Dynex Technologies) en lugar de \alpha_{v}\beta_{3}. Todos los demás aspectos del análisis incluyendo los tampones, reactivos y tiempos de incubación permanecen sin cambios.

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(Tabla pasa a página siguiente)

22

Claims (10)

1. Un compuesto de Fórmula (I):

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23

donde:

R se selecciona del grupo formado por heterociclilo y heteroarilo;

R^{1} es de uno a dos sustituyentes seleccionados del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, hidroxi, -NR^{A}R^{B}, y halógeno;

donde alquilo y alcoxi están opcionalmente sustituidos en un carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por halógeno, hidroxi, o -NR^{A}R^{B};

donde R^{A} y R^{B} son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{6};

R^{2} es de uno a dos sustituyentes seleccionados independientemente del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, -NR^{C}R^{D}, hidroxi, y halógeno;

donde alquilo, alquenilo, alquinilo, y alcoxi están opcionalmente sustituidos con en un átomo de carbono terminal con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo de halógeno, hidroxi, alcoxi C_{1}-C_{4}, y R^{C}-R^{D};

donde R^{C} y R^{D} son sustituyentes seleccionados independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6}; R^{C} y R^{D} se toman opcionalmente junto con los átomos a los cuales están anclados para formar un anillo monocíclico de cinco a siete miembros;

Z se selecciona del grupo formado por -CH_{2}- y -CH-;

A se selecciona del grupo formado por arilo, -CH(CH_{2})_{1-3}, y -(CH_{2})_{1-3} siempre que cuando A sea -CH(CH_{2})_{1-2}- y Z sea -CH- se forme un doble enlace entre A y Z;

B es -NH- cuando está presente opcionalmente;

m y n son enteros de 1 a 3;

X se selecciona del grupo formado por O, S, y dos átomos de hidrógeno;

U se selecciona independientemente entre -CH-, N, o S, siempre que no más de una U represente S o N; y que U pueda ser solamente S cuando W no esté presente;

W se selecciona del grupo formado por -CH- y N cuando esté opcionalmente presente;

y los enantiómeros, diastereoisómeros, tautómeros, solvatos, o sales farmacéuticamente aceptables y medicamentos de los mismos.

2. El compuesto de la reivindicación 1, donde R^{1} se selecciona del grupo formado por hidrógeno, alcoxi C_{1}-C_{4}, -NR^{A}R^{B}, e hidroxi.

3. El compuesto de la reivindicación 1, donde R^{2} se selecciona del grupo formado por hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, alcoxi C_{1}-C_{4}, y halógeno.

4. El compuesto de la reivindicación 1, donde Z se selecciona del grupo formado por -CH_{2}- y -CH-; siempre que Z sea -CH- solamente cuando A es -CH(CH_{2})_{1-2}-, y tomados juntos forman un doble enlace entre A y Z.

5. El compuesto de la reivindicación 1, donde A se selecciona del grupo formado por arilo, -CH(CH_{2})_{1-2}-, y
-(CH_{2})_{1-3}-; siempre que A sea -CH(CH_{2})_{1-2}- solamente cuando Z es -CH-, tomados juntos para formar un doble enlace entre A y Z.

6. Los Compuestos de Fórmula (II):

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donde R, R^{1}, B, A, m, n, y R^{2} se seleccionan independientemente del grupo formado por:

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TABLA (continuación)

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7. El compuesto de Fórmula (II) que es uno cualquiera de los compuestos 1 a 4 y 12 a 16 definidos en la reivindicación 6.

8. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y un portador farmacéuticamente aceptable.

9. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o una composición de la reivindicación 8 para su uso en el tratamiento o alivio de un trastorno mediado por integrinas \alphav.

10. El compuesto o la composición para su uso de la reivindicación 9, donde el trastorno es un cáncer, una patología asociada con el cáncer, la aterosclerosis, vasculopatía inducida por transplante, formación de neo-íntima, papiloma, fibrosis del pulmón, fibrosis pulmonar, glomerulonefritis, glomeruloesclerosis, displasia renal multiquística congénita, fibrosis renal, retinopatía diabética, degeneración macular, psoriasis, osteoporosis, resorción ósea, artritis inflamatoria, artritis reumatoide, restenosis coronaria y adherencias quirúrgicas.