ES2265007T3

ES2265007T3 - Preparado de combinacion para la terapia de enfermedades inmunologicas.

Info

Publication number: ES2265007T3
Application number: ES02013275T
Authority: ES
Inventors: Juergen Dr. Lindner
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 2001-07-06
Filing date: 2002-06-18
Publication date: 2007-02-01
Anticipated expiration: 2022-06-18
Also published as: CA2392187A1; DK1275638T3; US20030017166A1; DE50207168D1; EP1275638A1; JP2003063995A; DE10132308A1; EP1275638B1; ATE329898T1; KR20030005042A; PT1275638E

Abstract

Preparado de combinación farmacéutico, caracterizado porque contiene a) al menos un inhibidor de la síntesis de pirimidina del grupo Brequinar, compuesto de las fórmulas I o II formas estereoisómeras de compuestos de la fórmula (I) o (II) y una sal fisiológicamente compatible del compuesto de la fórmula (II), en la que los sustituyentes tienen el siguiente significado: R1 esa) -alquilo (C1-C4), b) -cicloalquilo (C3-C5), c) -alquenilo (C2-C6), o d) -alquinilo (C2-C6); R2 esa) -CF3, b) -O-CF3, c) -S-CF3, d) -OH, e) -NO2, f) halógeno, g) bencilo, h) fenilo, i) -O-fenilo, el cual no está sustituido, j) -CN, o k) -O-fenilo, que está mono- o poli-sustituido con un grupo seleccionado de 1) alquilo (C1-C4), 2) halógeno, 3) -O-CF3 y 4) -O-CH3; R3 esa) -alquilo (C1-C4), b) halógeno, o c) un átomo de hidrógeno; o X es a) un grupo CH, b) un átomo de nitrógeno, o una mezcla de Brequinar y compuestos de las fórmulas (I) y (II) o de sales de compuestos de la fórmula (II) y b) al menos un antígeno del grupo de asociaciones celulares naturales o artificialmente modificadas, células, fragmentos de células, proteínas, fragmentos de proteínas, precursores de antígenos u otros compuestos que son activos como antígenos.

Description

Preparado de combinación para la terapia de enfermedades inmunológicas.

Objeto de la invención es un preparado farmacéutico de combinación con el cual se pueden tratar una reacción inmunológica nociva excesiva, así como procesos degenerativos mediante la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora.

Reacciones inmunológicas nocivas excesivas son reacciones inmunológicas contra sustancias propias del cuerpos y/o ajenas al cuerpo que dañan más que favorecen al organismo. Reacciones inmunológicas nocivas excesivas contra sustancias ajenas al cuerpo pueden ser reacciones alérgicas, rechaces de trasplantes o reacciones inmunológicas contra células modificadas por tecnología genética o sus productos, tal como el factor VIII o insulina. Ejemplos de reacciones nocivas excesivas contra sustancias propias del cuerpo son enfermedades autoinmunes tales como esclerosis múltiple, artritis reumatoide, pénfigo vulgar y tireoiditis Hashimoto. En el caso de algunas enfermedades tales como colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, psoriasis y arteriosclerosis aparecen reacciones inmunológicas tanto contra sustancias propias del cuerpo como contra sustancias ajenas al cuerpo, que dañan más que favorecen al organismo. En el caso de las denominadas alergias por contacto aparecen reacciones inmunológicas contra antígenos ajenos al cuerpo y/o estructuras propias del cuerpo modificadas por compuestos químicos, por ejemplo en el caso de las alergias por contacto contra níquel o cromo.

Por procesos degenerativos se entienden enfermedades que se distinguen por un desequilibrio entre la constitución de tejido y la degradación de tejido. A ellos pertenecen, por ejemplo, artrosis, enfermedades de demencia y colitis ulcerosa.

Por una actividad del efector, específica para el antígeno, del sistema inmune se entiende la reacción inmunológica reforzada del sistema inmune contra un antígeno específico, la mayoría de las veces ya conocido. Con ello, se desencadenan intensas reacciones que conducen a una destrucción de células o que aumentan considerablemente una reacción inmunológica contra el antígeno reconocido.

Por una actividad del supresor específica para el antígeno se entiende una reacción del sistema inmune, en la que las células del supresor reaccionan con un antígeno específico, la mayoría de las veces conocido, de modo que la reacción inmunológica contra la estructura reconocida es regulada hacia abajo. Si la actividad del supresor predomina sobre la actividad del efector, entonces ya no son posibles reacciones del sistema inmune contra las estructuras reconocidas por las células del supresor.

Normalmente, el sistema inmune del organismo reacciona sobre el antígeno con una respuesta inmunitaria reguladora, en la que una actividad supresora, específica para el antígeno, predomina sobre la actividad proinflamatoria o citotóxica del sistema inmune. No obstante, el equilibrio, así resultante, entre actividad supresora y proinflamatoria del sistema inmune sólo puede ser perturbado de manera decisiva cuando se manifiesta una reacción inflamatoria adicional. Esta reacción desplaza entonces el equilibrio desde la actividad del supresor específica para el antígeno a una actividad del efector proinflamatoria o citotóxica específica para el antígeno. Tan pronto como se haya eliminado la reacción inflamatoria, mediante la respuesta inmune reguladora el equilibrio entre actividad de supresor y actividad del efector se desplaza de nuevo hacia una preponderancia de la actividad del supresor.

La terapia de enfermedades, hasta ahora habitual, que son provocadas por reacciones inmunológicas nocivas excesivas, se realiza, por norma general, de forma sintomática. En este caso se suprimen de manera relativamente inespecífica la reacción inmunológica y sus manifestaciones acompañantes indeseadas. Medicamentos inmunosupresores tales como ciclosporina A, corticoides o ciclofosfamida suprimen enfermedades de este tipo de forma ciertamente muy eficaz, pero están ligados a efectos secundarios considerables. Además, tienen el inconveniente de que después de interrumpir la administración de estos medicamentos, la enfermedad se manifiesta de nuevo y, en este caso, en el marco del progreso de la enfermedad se producen muy a menudo lesiones irreparables. Los métodos de tratamiento, hasta ahora existentes, de enfermedades que son provocadas por reacciones del sistema inmune nocivas excesivas contra determinados antígenos son, por lo tanto, poco eficaces o están ligados con considerables efectos secundarios. Por lo tanto, existe una gran demanda de preparados medicamentosos que impidan reacciones nocivas excesivas del sistema inmune y que, con ello, presenten al mismo tiempo pocos efectos secundarios. El tratamiento con un preparado medicamentoso de este tipo no debe, no obstante, conducir a ningún deterioro del sistema inmune, ya que bajo determinadas condiciones patológicas son fisiológicamente muy convenientes reacciones autoinmunológicas, por ejemplo en el caso de una reacción autoinmunológica contra células tumorales propias del cuerpo o células infestadas con virus. No obstante, esta reacción autoinmunológica debe paralizarse por sí misma después de la destrucción de las células tumorales o de las células infestadas con virus y no debe destruir tejido sano propio del cuerpo. Dado que es conocido de las células inmunosupresoras que, entre otros, producen el factor inmunosupresor TGF\beta (Tissue Growth Factor \beta - factor de crecimiento tisular \beta), estas células pueden estimular también la regeneración de tejido.

Se ha encontrado ahora un preparado de combinación farmacéutico que posibilita la formación de una respuesta inmunitaria reguladora para la terapia de una reacción inmunológica nociva excesiva, así como una terapia de procesos degenerativos evitando una reacción inflamatoria aguda, cuando contiene

\newpage

a) al menos un inhibidor de la síntesis de pirimidina del grupo Brequinar, compuesto de las fórmulas I o II

\vskip1.000000\baselineskip

1

\vskip1.000000\baselineskip

2

formas estereoisómeras de compuestos de la fórmula (I) o (II) y una sal fisiológicamente compatible del compuesto de la fórmula (II), en la que los sustituyentes tienen el siguiente significado:

R^{1} es

\hskip0,12cm

a) -alquilo (C_{1}-C_{4}),

b): -cicloalquilo (C_{3}-C_{5}),

c): -alquenilo (C_{2}-C_{6}), o

d): -alquinilo (C_{2}-C_{6});

\vskip1.000000\baselineskip

R^{2} es

\hskip0,12cm

a) -CF_{3},

b): -O-CF_{3},

c): -S-CF_{3},

d): -OH,

e): -NO_{2},

f): halógeno,

g): bencilo,

h): fenilo,

i): -O-fenilo, el cual no está sustituido,

j): -CN, o

k): -O-fenilo, que está mono- o poli-sustituido con un grupo seleccionado de

1): alquilo (C_{1}-C_{4}),

2): halógeno,

3): -O-CF_{3} y

4): -O-CH_{3};

\vskip1.000000\baselineskip

R^{3} es

\hskip0,12cm

a) -alquilo (C_{1}-C_{4}),

b): halógeno, o

c): un átomo de hidrógeno; o

\vskip1.000000\baselineskip

X es

\hskip0,21cm

a) un grupo CH,

b): un átomo de nitrógeno,

o una mezcla de Brequinar y compuestos de las fórmulas (I) y (II) o de sales de los compuestos de la fórmula (II) y

b) al menos un antígeno del grupo de asociaciones celulares naturales o artificialmente modificadas, células, fragmentos de células, proteínas, fragmentos de proteínas, precursores de antígenos u otros compuestos que son activos como antígenos.

Para el preparado de combinación de acuerdo con la invención es muy particularmente preferido cuando como inhibidor de la síntesis de pirimidina se emplea la N-(4-trifluorometilfenil)-5-metilisoxazol-4-carboxamida de la fórmula (I) o N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-5-hidroxicrotonamida, (4-cianofenil)amida del ácido 2-ciano-3-ciclopropil-3-hidroxiacrílico o N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxihept-2-en-6-incarboxamida en calidad de compuestos de la fórmula (II).

Compuestos de las fórmulas I o II pueden prepararse según procedimientos que son conocidos por las solicitudes de patente europea 484 223, 529 500, 538 783 y 551 230, así como por la memoria de patente de EE.UU. 4 061 767.

Muy particularmente adecuado es leflunomida, que hasta ahora se emplea como agente antirreumático. Éste, al ser administrado como sustancia individual, puede reducir el progreso de la artritis reumatoide, pero no puede curarla. En la medida en que en algunas publicaciones se ha informado sobre el empleo de leflunomida en el caso de enfermedades autoinmunológicas en experimentos con animales que debe ser posible una curación de estas enfermedades autoinmunológicas, se ha demostrado, sin embargo, que en las citadas investigaciones leflunomida fue administrada de forma preventiva y, por consiguiente, sólo podía impedir la formación de una enfermedad autoinmunológica y podía evitar de forma efectiva los síntomas de una enfermedad autoinmunológica y, por consiguiente, aumentó la tasa de supervivencia de los animales de ensayo. El hecho de que mediante la administración de leflunomida se impidiera el desarrollo de una enfermedad autoinmunológica, se designó como efecto terapéutico curativo. Este tipo de efecto "curativo" no tiene, sin embargo, nada que ver con una terapia curativa de una enfermedad autoinmunológica en la que, después de interrumpir la administración del medicamento, ya no se manifiesta más la enfermedad. Los informes hasta ahora aportados sobre el efecto de leflunomida en pacientes con artritis reumatoide no han dado ningún indicio de que después de interrumpir la toma de leflunomida ya no se produzca ningún progreso de la enfermedad y que los pacientes estén curados durante largo tiempo. El conocimiento actual sobre el mecanismo de acción de leflunomida puede resumirse diciendo que, in vitro, leflunomida muestra efectos inmunosupresores clásicos (inhibición de la biosíntesis de pirimidina, inhibición de la fosforilación de tirosina e inhibición de la vía de transducción del factor nuclear kappa B). In vivo, leflunomida transmite aparentemente su efecto a través de linfocitos. La inducción del fenómeno de una tolerancia específica del antígeno por parte de leflunomida sólo se observa de forma individualizada, pero esta inducción sólo se manifiesta de forma esporádica y, por lo tanto, no es adecuada para una aplicación clínica preestablecida. Tanto en la investigación clínica como también en la experimental con animales se ha demostrado que leflunomida no aumenta la propensión a la infección.

Dado que una proliferación de células del sistema inmune sólo se produce hasta que se haya detenido la reacción inmunológica en la que se basa, en el caso de la administración clínica normal de leflunomida solamente se produce una expansión de células del sistema inmune supresoras, específicas para el antígeno, hasta que se detenga la respuesta inmunitaria indeseada. Una expansión relativamente selectiva de las células inmunosupresoras bajo leflunomida sólo se produce hasta que el efecto directamente inmunosupresor de leflunomida y el efecto supresor de las células supresoras recien formadas paralicen la reacción inmunológica indeseada. Si en esta situación se interrumpe la administración de leflunomida, entonces el efecto remanente de las células de acción supresora no es suficiente para controlar la reacción inmunológica indeseada.

Por lo tanto, en el caso del empleo, actualmente usual, de leflunomida en la clínica no se produce un resultado terapéutico curativo, en el que se pueda interrumpir la administración de leflunomida sin que brote de nuevo la enfermedad inmunológica en que se basa.

El preparado de combinación de acuerdo con la invención contiene, como otro componente esencial, uno o varios antígenos que participan en la reacción inmunológica indeseada o en el proceso degenerativo. Como antígeno, el preparado de combinación de acuerdo con la invención contiene asociaciones celulares naturales o artificialmente modificadas, células, fragmentos de células, proteínas, fragmentos de proteínas u otros compuestos que son activos como antígenos. Mediante la administración simultánea del antígeno, contra el cual debe constituirse la respuesta inmunitaria reguladora, y un inhibidor de la síntesis de pirimidina tal como leflunomida, se inhiben en su proliferación las células del efector del sistema inmunológico rápidamente proliferantes, proinflamatorias/citotóxicas y permanecen en la fase G1 tardía. En contraposición a las células del efector, probablemente las células del supresor de proliferación más lenta no son perturbadas en su proliferación por parte de leflunomida. Con ello, después de algún tiempo se produce una preponderancia de la actividad de las células del supresor frente a las células del efector.

Debido a que el antígeno que provoca/participa en la reacción inmunológica indeseada o bien en el proceso degenerativo es administrado adicionalmente a leflunomida, la proliferación de células supresoras, específicas para el antígeno del sistema inmune se mantiene también cuando ya ha finalizado la reacción inmunológica indeseada en que se basa. Por lo tanto, mediante la administración combinada del antígeno provocante y leflunomida se puede incrementar la población de células de acción supresora, específica para el antígeno, de modo que permanezca un cierto exceso de actividad supresora, también cuando se haya interrumpido la administración de leflunomida, y se impida un rebrote de la reacción inmunológica nociva indeseada o bien se liberen además factores que fomenten el proceso de regeneración.

La situación de la reacción del sistema inmune, provocada por el preparado de combinación de acuerdo con la invención, con una preponderancia de la actividad del supresor específica para el antígeno puede derrumbarse durante breve plazo por parte de reacciones inflamatorias inespecíficas, pero se vuelve a constituir después de desaparecer la reacción inflamatoria inespecífica sin intervenciones medicamentosas adicionales. Sin embargo, se ha encontrado que el aumento de la actividad de células inmunosupresoras, específicas para el antígeno, sólo se consigue cuando se evitan procesos inflamatorios agudos. Por ello, es eventualmente necesario que el preparado de combinación de acuerdo con la invención contenga un principio activo que suprima una reacción inflamatoria aguda. Para la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora deben controlarse, por lo tanto, reacciones inflamatorias agudas, por ejemplo mediante la administración de esteroides u otras sustancias de acción anti-inflamatoria. A ellas pertenecen antihistamínicos, estabilizadores de células cebadas tales como ácido cromoglicínico, sustancias que actúan, directa o indirectamente como mediadores anti-inflamatorios, por ejemplo TGF\beta, y prostaglandina E2, o sustancias que suprimen o antagonizan los mediadores tóxicos que son liberados en el marco del proceso de inflamación. No obstante, mediante el empleo de estos principios activos inhibidores de la inflamación no debe suprimirse por completo la reacción inmunológica, ya que, de lo contrario, no es posible una formación de una reacción inmunológica reguladora.

Por lo tanto, una respuesta inmunitaria reguladora, específica para el antígeno, para el tratamiento curativo de reacciones inmunológicas nocivas excesivas, y para el tratamiento de procesos degenerativos se constituye de acuerdo con la invención debido a que se añaden principios activos inmunomoduladores simultáneamente limitados en el tiempo o desplazados en el tiempo y aquel o aquellos antígenos contra los cuales discurre la reacción inmunológica indeseada o aquellos antígenos los cuales juegan un papel en procesos degenerativos. Es importante que durante la constitución de la reacción inmunológica no discurran reacciones inflamatorias agudas, ya que, de lo contrario, no se puede constituir ninguna respuesta inmunitaria. Manteniendo la administración de las sustancias inmunomoduladoras y la administración regular del/de los antígenos se ha manifestado ventajoso reducir escalonadamente la administración de principios activos antiinflamatorios, por ejemplo mediante la lenta supresión de la medicación de esteroides para evitar reacciones inflamatorias agudas.

Tan pronto como puedan retirarse todas las medidas para evitar reacciones inflamatorias agudas durante la administración del preparado de combinación, es aconsejable proseguir con el tratamiento medicamentoso todavía durante varias semanas, con el fin de que se pueda constituir una respuesta inmunitaria reguladora estable, la cual, también después de retirar todas las medidas terapéuticas, impide la aparición renovada de la respuesta inmunitaria perturbadora indeseable. En el caso de reacciones inmunológicas progresivas indeseadas, que se mantienen durante largo tiempo, por ejemplo esclerosis múltiple de rápido desarrollo, puede ser ventajoso prolongar este espacio de tiempo (por ejemplo 6 meses), con el fin de que se pueda formar un número suficiente de células supresoras del sistema inmune, las cuales mantienen todavía controladas a las células del efector, también en condiciones ligeramente inflamatorias, por ejemplo en el caso de un efecto gripal.

Después de este espacio de tiempo de la administración del preparado de combinación de antígeno e inhibidor de la biosíntesis de proteínas puede ser ventajoso administrar los antígenos todavía a lo largo de un breve espacio de tiempo como monoterapia, es decir sin inhibidor de la biosíntesis de proteínas, antes de que pueda terminarse con todas las medidas terapéuticas.

En el caso de las medidas que evitan una reacción inflamatoria aguda durante la constitución de la respuesta inmunitaria reguladora se puede tratar de principios terapéuticos que están física o químicamente acoplados directamente al inhibidor de la síntesis de pirimidina, al antígeno o a un precursor del antígeno, o que se administran por separado de ellos. En el caso de los principios terapéuticos puede tratarse, por ejemplo, de sustancias con un efecto de esteroides (por ejemplo fluocortolona o dexametasona), antiflogísticos no esteroides (por ejemplo diclofenac, indometacina, ibuprofeno, en general sustancias inhibidoras de la ciclooxigenasa I y/o de la ciclooxigenasa 2), antagonistas de leucotrienos o sustancias inhibidoras de la formación de leucotrienos, antagonistas de citoquinas o sustancias inhibidoras de la formación de citoquinas, estabilizadores de las células cebadas (por ejemplo ácido cromoglicínico), antihistamínicos (por ejemplo terfenadina), ciclosporina A, FK506, citoquinas antiinflamatorias (por ejemplo TGF\beta, IL-10, etc.), sustancias que provocan la liberación de mediadores antiinflamatorios (por ejemplo ciclosporina A), ácidos grasos antiinflamatorios, sus precursores o sustancias inhibidoras de la degradación de los ácidos grasos antiinflamatorios. Como principios terapéuticos antiinflamatorios en el marco de la terapia de combinación se quieren dar a entender también medidas que impiden una reacción inflamatoria aguda, provocada por la administración del antígeno. A ellas pertenecen, por ejemplo, la envoltura de los antígenos con anticuerpos o fragmentos de anticuerpos, medidas galénicas que evitan una reacción inflamatoria aguda, pero que permiten una presentación suficiente del antígeno. A las medidas adicionales para evitar reacciones inflamatorias agudas, que influyen negativamente sobre la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora, pertenecen también medidas terapéuticas para combatir y evitar infecciones o reacciones inflamatorias inespecíficas. A ellas pertenece también el empleo de antibióticos, agentes quimioterapéuticos, inmunoglobulinas polivalentes, medidas para evitar una isquemia de los tejidos, agentes virostáticos y el empleo de principios terapéuticos que de una forma muy general combaten las infecciones (también quirúrgicos).

La administración de las sustancias puede realizarse por vía intravenosa, por inhalación, por vía subcutánea, epicutánea, rectal, intratecal, transdermal o a través de demás vías de aplicación.

En general, se ha manifestado ventajoso retirar el inhibidor de la síntesis de pirimidina y el antígeno 2 a 3 días después de la desaparición de todos los síntomas de una reacción inmunológica auto-limitante (por ejemplo, infección tal como una bronquitis) o algunos días después del desencadenamiento preeestablecido de una reacción inmunológica auto-limitante (por ejemplo, desencadenada por suero anti-D en el caso de pacientes de factor Rhesus
positivo).

Infecciones que no pueden combatir con éxito el sistema inmune deben eliminarse por vía medicamentosa mediante antibióticos, agentes quimioterapéuticos, inmunoglobulinas polivalentes, estimulantes inmunes, intervenciones quirúrgicas o medidas físicas. También debe evitarse una re-infección con los gérmenes problemáticos mediante medidas medicamentosas (por ejemplo antibióticos, agentes quimioterapéuticos o inmunoglobulinas polivalentes) o medidas físicas (por ejemplo profilaxis por exposición mediante protección bucal), ya que reacciones inflamatorias crónicas conducen a un desmoronamiento de reacciones inmunológicas reguladoras existentes y, por consiguiente, a una nueva formación o a la reaparición de reacciones inmunológicas nocivas indeseadas.

El objeto de la invención se constató mediante los siguientes ensayos: los ensayos se llevaron a cabo en pacientes voluntarios que padecían una dermatitis por contacto contra uno o varios metales o una reacción alérgica contra polen de gramíneas.

La dermatitis por contacto fue elegida como enfermedad modelo para la pluralidad de reacciones inmunológicas inducidas por células T (en general: reacciones inmunológicas nocivas excesivas), ya que se puede desencadenar fácilmente mediante la aplicación de los alergenos de contacto sobre la piel y la gravedad de la reacción inflamatoria e inmunológica se puede juzgar fácilmente observando los síntomas en la piel.

Se investigó el efecto de la terapia de combinación en la alergia de tipo I (conjuntivitis y rinitis alérgica), ya que en el caso de la alergia de tipo I se trata de una enfermedad provocada por anticuerpos que es regulada por células T. En el caso de la rinitis y de la conjuntivitis pudieron administrarse por vía tópica local adicionalmente los principios activos neomicina y dexametasona, ya que en el caso de las superficies se trata de mucosas que posibilitan muy bien la resorción de los principios activos, y los componentes relevantes del sistema inmune (órganos linfáticos secundarios) están en contacto directo con la mucosa. En el caso de las investigaciones de alergia el contacto con el antígeno se realizó por vía aerógena mediante exposición al polen del avellano o al polen de las
gramíneas.

El preparado de combinación de acuerdo con la invención puede abarcar también composiciones o envases de combinación en los cuales están contenidos unos junto a otros los componentes y se ponen a disposición al cuerpo humano o animal para la terapia simultánea, separada o escalonada en el tiempo de reacciones inmunológicas nocivas excesivas y/o procesos degenerativos. Se prefiere la aplicación del compuesto de la fórmula I y/o II antes, al mismo tiempo, separada en el tiempo o escalonada en el tiempo de la aplicación del antígeno (por ejemplo desmogleína 3) o del precursor del antígeno (por ejemplo que codifica la producción de insulina o factor VIII), el cual juega un papel en las reacciones inmunológicas nocivas excesivas, así como en los procesos degenerativos (por ejemplo fragmentos del cartílago articular, antígenos específicos de tejido secretor que degeneran con la edad tal como, por ejemplo, células productoras de testosterona). Para ello, por ejemplo, se aplica primeramente amida del ácido N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxi-crotónico. Al mismo tiempo se administra, por vía subcutánea o intravenosa, por ejemplo desmogleína 3, un antígeno el cual juega un papel principal en el pénfigo vulgar. Mediante la administración de desmogleína 3 se estimula una proliferación de las células del sistema inmune, las cuales actúan tanto de forma creciente como inhibidora sobre la enfermedad pénfigo vulgar. Mediante la administración simultánea o desplazada en el tiempo de amida del ácido N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxi-crotónico se inhibe preferiblemente la proliferación de células del sistema inmune que provocan las enfermedades autoinmunológicas, mientras que aquellas células que suprimen la enfermedad autoinmunológica proliferan de forma relativamente no afectada. Con ello se produce, pasado un determinado tiempo de la administración de desmogleína 3 y ácido N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxi-crotónico, una preponderancia de la actividad de células del sistema inmune que suprimen la enfermedad autoinmune pénfigo vulgar. Tan pronto como aparece este estado, puede finalizarse con la administración de los preparados de combinación de acuerdo con la invención sin que después se manifieste de nuevo la
enfermedad.

El preparado de acuerdo con la invención puede presentarse como unidad de dosificación en forma de formas medicamentosas tales como sistemas de inhalación, cápsulas (incluidas microcápsulas que, en general, no contienen ningún soporte farmacéutico), comprimidos, incluidas grageas y píldoras, o supositorios, en donde, en el caso de utilizar cápsulas, el material de la cápsula percibe la función del soporte y el contenido puede presentarse, por ejemplo, en forma de polvo, gel, solución, emulsión o dispersión.

Sin embargo, es especialmente ventajoso y sencillo preparar formulaciones orales (perorales) del inhibidor de la síntesis de proteínas/inhibidor de la síntesis de nucleótidos y del antígeno, que contengan las cantidades calculadas de los principios activos junto con el soporte farmacéutico deseado. En especial, es ventajoso para el antígeno o precursores del antígeno llevar a cabo medidas tales como, por ejemplo, el tratamiento con polietilenglicol que facilitan y posibilitan, en especial, la resorción y, en general, el transporte al lugar de acción. También puede emplearse una formulación correspondiente (supositorio) para la terapia rectal. Asimismo, es posible la aplicación transdermal/epicutánea/bucal/escleral/nasal/pulmonar/intratecal/ocular/por inhalación en forma de pomadas, cremas, soluciones, emulsiones y polvos que contienen el preparado de acuerdo con la invención. Además, es posible la aplicación parenteral, intravenosa, intraarterial, subcutánea, intramuscular, intravesical, intratecal, ocular, por inhalación e intravaginal de formulaciones que contienen el preparado de acuerdo con la invención.

Pomadas, pastas, cremas y polvos pueden contener, junto al principio activo, las sustancias de soporte habituales, p. ej. grasas animales y vegetales, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilenglicoles, siliconas, ácido silícico, hidróxido de aluminio, talco, óxido de zinc, lactosa, bentonita, silicato de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Los comprimidos, píldoras o cuerpos granulados pueden prepararse según procedimientos tales como procedimientos de prensado, inmersión o de lecho fluido o grageado en caldera, y contienen agentes de soporte y otros coadyuvantes habituales tales como gelatina, agarosa, almidón (por ejemplo almidón de patata, maíz o trigo), celulosa tal como etilcelulosa, dióxido de silicio, carbonato de magnesio, diferentes azúcares tales como lactosa y/o fosfatos de calcio. La solución para grageado consiste habitualmente en azúcar y/o jarabe de almidón y, la mayoría de las veces, contiene además gelatina, ésteres de celulosa sintéticos, goma arábiga, polivinilpirrolidona, pigmentos, sustancias tensioactivas, plastificantes y aditivos similares, de manera correspondiente al estado conocido de la técnica. Para la preparación de las formas de preparados puede utilizarse todo agente de regulación de flujo, lubricante o deslizante habitual tal como estearato de magnesio, y agentes de separación. Preferiblemente, los preparados tienen la forma de comprimidos con envolvente/núcleo o comprimidos de varias capas, en donde el inhibidor de la síntesis de proteínas/inhibidor de la síntesis de nucleótidos se encuentra en la envolvente o en el núcleo o en una capa, mientras que el antígeno o los precursores del antígeno se encuentran en el núcleo, en la envolvente o en otra capa. Los componentes de los principios activos pueden presentarse también en forma retardada o estar adsorbidos a material de liberación lenta o pueden estar incluidos en el material de liberación lenta (por ejemplo base de resina de celulosa o poliestireno, por ejemplo hidroxietilcelulosa). También se puede conseguir una liberación retardada de los principios activos proveyendo a la capa o al compartimiento en cuestión de habituales revestimientos insolubles en los jugos gástricos.

Se prefiere una aplicación, en la que el antígeno o precursores del antígeno acceden al entorno local en el que discurre la reacción inmunológica que ha de ser tratada. Sin embargo, el antígeno también se puede administrar por vía sistémica. El inhibidor de la síntesis de proteínas/inhibidor de la síntesis de nucleótidos se puede administrar eficazmente tanto de forma local como sistémica.

La dosificación a aplicar depende, naturalmente, de diversos factores tal como del ser vivo a tratar (es decir hombre o animal), de la edad, peso, estado general de salud, del grado de gravedad de los síntomas, de la enfermedad a tratar, de eventuales enfermedades concomitantes, (caso de estar presente) del tipo de tratamiento concomitante con otros medicamentos o de la frecuencia del tratamiento. Las dosificaciones se administran, en general, varias veces al día y, preferiblemente, una a tres veces al día. Las cantidades utilizadas de principio activo individual se orientan en este caso a la dosis diaria aconsejada del respectivo principio activo individual y deben encontrarse, por lo general, en el preparado de combinación en un 10% a 300% de la dosis diaria aconsejada, preferiblemente en un 50% a 150%, en particular en un 80%. La terapia adecuada con las combinaciones de acuerdo con la invención consiste, por consiguiente, por ejemplo en la administración de una, dos o tres dosis individuales del preparado consistente en N-(4-trifluorometilfenil)-5-metilisoxazol-4-carboxamida o amida del ácido N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxi-crotónico en una cantidad de 2 mg a 250 mg, preferiblemente 5 mg a 150 mg, en particular 10 mg a 50 mg, de manera particularmente preferida de 10 mg a 20 mg, y del antígeno en una cantidad de 100 mg a 10.000 mg, en particular de 1500 mg a 3000 mg.

Además, los preparados de acuerdo con la invención pueden emplearse también junto con otros principios activos adecuados, por ejemplo agentes antiuricopáticos, analgésicos, antiflogísticos esteroides o no esteroides, inhibidores de la agregación de trombocitos, citoquinas, agonistas de citoquinas, antagonistas de citoquinas o compuestos inmunosupresores tales como, por ejemplo, ciclosporina A, FK 506 o rapamicina.

Patogénesis de la dermatitis por contacto

Durante la fase de sensibilización la mayoría de las sustancias extrañas de bajo peso molecular penetran a través de la piel, son absorbidas, directamente o después de una unión precedente, a proteínas de células dendríticas de Langerhans, son transportadas a los nódulos linfáticos regionales y allí son presentadas a linfocitos T restringidos a la clase HLA-II. En el plazo de unos pocos días su activación conduce a una subpoblación de células T específica para alergenos de contacto expandida, en parte localizada, en parte distribuida en el organismo. En virtud de la dependencia de las células T, la dermatitis por contacto puede servir como enfermedad modelo para todas las reacciones inmunológicas nocivas excesivas que son provocadas por células T y/o que están justificadas por una deficiente autorregulación del sistema inmune.

Desencadenamiento de la dermatitis por contacto

Las alergias por contacto se desencadenan mediante la aplicación de preparados en vaselina blanca. Estos preparados de vaselina contenían cloruro de cobalto-II al 1% o sulfato de níquel-II al 5%.

\newpage

Para el desencadenamiento de la dermatitis por contacto el preparado de vaselina se aplicó una vez al día, la mayoría de las veces en el brazo o antebrazo, en una superficie de aprox. 2 x 2 cm^{2}.

Con el fin de aliviar el prurito, los voluntarios pudieron aplicar, a su libre albedrío, una pomada con contenido en anestésicos locales sobre las correspondientes superficies de la piel (p. ej. pomada EMLA).

Cuadro patológico de la dermatitis por contacto y clasificación en función de la gravedad de la reacción inflamatoria

Mediante la aplicación de los preparados de vaselina se desencadenan, en el espacio de un tiempo de latencia desde varias horas hasta dos días, las siguientes reacciones de la piel:

enrojecimiento, hinchazón edematosa de la piel, ampollitas o formación de ampollas, erosiones humectantes, formación de costra.

De manera correspondiente a la envergadura de la reacción inflamatoria, la dermatitis por contacto se clasificó en las siguientes etapas:

Etapa 1

Reacción inflamatoria muy ligera, ligero enrojecimiento de la piel;

Etapa 2

Reacción inflamatoria escasa, enrojecimiento de la piel y eventual prurito;

Etapa 3

Reacción inflamatoria ligera, enrojecimiento de la piel e hinchazón edematosa de la piel, prurito;

Etapa 4

Reacción inflamatoria media, enrojecimiento, hinchazón edematosa, ampollitas o formación de ampollas, prurito;

Etapa 5

Reacción inflamatoria acusada: enrojecimiento, hinchazón edematosa de la piel, ampollitas y formación de ampollas, erosiones humectantes y eventual formación de costra.

Control del grado de la reacción inflamatoria mediante corticoides

Mediante la administración sistémica de comprimidos Ultralan® se controló la gravedad de la reacción inflamatoria que se manifestaba. En el caso de la inducción de la respuesta inmunitaria reguladora, específica para antígenos, la reacción inflamatoria se mantuvo en el intervalo de las etapas 1 y 2 mediante la administración de fluocortolona (Ultralan®). Si, a pesar de la administración de Ultralan® se desarrollaba una dermatitis por contacto de la etapa 3 o superior, la dosis de Ultralan® se aumentó a la etapa de dosificación siguiente. En caso necesario, se realizó un aumento adicional de la dosis 2 días después del último aumento de la dosis. Por norma general, bastaban dosificaciones de como máximo 10 mg/día para limitar los síntomas de la alergia por contacto a las etapas 1 a 2.

Tan pronto como ya no se pudieron comprobar síntomas de la dermatitis por contacto en el caso de una etapa de dosificación de Ultralan®, la dosis se redujo al día siguiente y, a continuación, se mantuvo de nuevo hasta que habían desaparecido todos los síntomas de la alergia por contacto, para reducir entonces de nuevo la dosis de Ultralan hasta que, finalmente, ya no debía administrarse más Ultralan®.

Por norma general, se emplearon las siguientes cantidades de las dosificaciones diarias de Ultralan®: 20 mg, 15 mg, 10 mg, 7,5 mg, 5 mg, 2,5 mg, 0 mg.

Aplicación de leflunomida para la constitución de la respuesta inmunitaria reguladora

Se consiguió un correspondiente nivel en sangre de leflunomida mediante una dosis de carga de 100 mg en los tres primeros días consecutivos de la terapia con leflunomida y, a continuación, se redujo la dosis de leflunomida a 20 mg al día. Esta dosis de leflunomida se mantuvo, caso de que no se describa de otro modo, hasta 30 días después del momento en el que finalizó la administración de flucortolona.

A continuación, se eliminó leflunomida aceleradamente del cuerpo mediante la administración durante 3 veces al día de 8 gramos de colestiramina a lo largo de 10 días.

Administración del antígeno durante la constitución de la respuesta inmunitaria reguladora mediante leflunomida en el caso de dermatitis por contacto

Tal como se ha descrito antes, el antígeno se aplica 1 vez al día por vía dérmica a través de un preparado a base de vaselina blanca. El antígeno se administró, por norma general, hasta el día 10 después de la última administración de leflunomida.

Ensayos de provocación

En el caso de los análisis para la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora en el caso de la dermatitis por contacto se efectuó una exposición renovada con respecto al antígeno, contra el que se constituyó una respuesta inmunitaria reguladora, a lo más pronto 1 mes después del último contacto con el antígeno.

Serie de ensayos 1

Ensayo 1.1

En 4 voluntarios que presentaban una alergia por contacto tanto frente a níquel como frente a cobalto, se provocó primeramente en cada caso una alergia por contacto contra los dos alergenos y, a continuación, se calculó la dosis de Ultralan® con la cual se podía ajustar la alergia por contacto al grado de gravedad 1 a 2. A continuación, la dosis de Ultralan® se aumentó todavía durante 3 días hasta que ya no se podía observar ningún tipo de reacción en la piel. Después se redujo escalonadamente Ultralan® cada día hasta la supresión completa de Ultralan®. En todos los pacientes, la dermatitis por contacto apareció de nuevo durante la reducción de Ultralan®. Tan pronto como se hubo desarrollado una nueva dermatitis por contacto del grado de gravedad 3, se concluyó con la exposición al alergeno de contacto.

A continuación, se hizo una pausa de 1 mes en la que no existía contacto alguno con los correspondientes alergenos ni tampoco se añadió ningún tipo de medicamento que afectara al sistema inmune.

Al cabo de un mes, los voluntarios recibieron una dosis de carga de en cada caso 100 mg de leflunomida en 3 días consecutivos. A continuación, los voluntarios recibieron constantemente una dosis diaria de 20 mg de leflunomida.

Al 4º día de la administración de leflunomida se aplicó en 2 voluntarios una vaselina con contenido en níquel y en los otros dos voluntarios una vaselina con contenido en cobalto para provocar la dermatitis por contacto.

En el espacio de 2 días se desarrolló en todos los voluntarios, a pesar de la administración de leflunomida, una reacción de la piel de las etapas 3 a 4. Inmediatamente después de que la reacción de la piel había alcanzado la etapa 3, se comenzó con la administración de esteroides (Ultralan®) y la alergia por contacto se ajustó al grado 1-2. En el espacio de unos pocos días (por norma general 3 a 5 días) desaparecieron por completo los síntomas de la alergia por contacto. A continuación, se realizó, como se ha descrito antes, una reducción escalonada de la dosis de esteroides evitando una reacción inflamatoria aguda hasta que, finalmente, ya no se administró ningún esteroide (Ultralan®). Después de la supresión completa de los esteroides, se aplicó durante los siguientes 30 días diariamente leflunomida y el antígeno. Durante esta fase no podían observarse síntomas de la alergia por contacto ni en el caso de los voluntarios que recibieron la vaselina con contenido en níquel, ni en aquellos pacientes que recibieron la vaselina con contenido en cobalto. Al cabo de 30 días se terminó también con la administración de leflunomida y se efectuó la eliminación acelerada de leflunomida por medio de colestiramina a lo largo de 10 días. Durante esta eliminación acelerada se efectuó en todos los voluntarios, además, la exposición con el alergeno de contacto. En ninguno de los voluntarios se observaron en esta fase síntomas de alergia por contacto.

Después de este espacio de tiempo se concluyó también la exposición al alergeno de contacto.

4 semanas después de finalizar este ciclo de tratamiento se efectuó una exposición renovada al antígeno el cual se administró durante la administración de leflunomida.

En ninguno de los voluntarios se manifestaron síntomas de una alergia por contacto en el espacio de 2 semanas en la que fueron provocados con el alergeno de contacto.

Ensayo 1.2

A continuación, se esperó 4 semanas en las que los voluntarios no tuvieron contacto alguno con los alergenos de contacto.

Al cabo de 4 semanas los voluntarios fueron expuestos al antígeno con el que no habían tenido contacto alguno durante la terapia con leflunomida.

Todos los voluntarios desarrollaron en el espacio de 2 días una dermatitis por contacto de la etapa 3 a 4.

\newpage

Ensayo 1.3

En el día 3 se retiró a todos los voluntarios el alergeno con el que no tenían ningún contacto durante la terapia con leflunomida; para ello, se aplicó el alergeno al que habían estado expuestos los voluntarios durante la terapia con leflunomida. En el instante en el que se comenzó la administración del segundo alergeno de contacto, las zonas de la piel afectadas mostraban todavía reacciones inflamatorias desde medias a claras. De manera sorprendente, los síntomas de la alergia por contacto se mantuvieron durante el tiempo en el que se administró el alergeno de
contacto.

Ensayo 1.4

Después de estos ensayos se hizo una pausa de 4 semanas. Después de estas 4 semanas los voluntarios fueron expuestos al antígeno al que habían estado expuestos durante la terapia con leflunomida y contra el cual no habían reaccionado aproximadamente 4 semanas después de la terapia con leflunomida, pero que aproximadamente 4 semanas antes habían reaccionado mediante una reacción inflamatoria de media a clara.

En esta ocasión los voluntarios no reaccionaron con ninguna alergia por contacto durante el tiempo de exposición total de 2 semanas.

Ensayo 1.5

Directamente después de estas 2 semanas, se administró el antígeno al que no había estado expuestos los voluntarios durante la terapia con leflunomida. Los voluntarios desarrollaron de nuevo, en el espacio de 2 días, síntomas de una alergia por contacto de las etapas 3 a 4. Tan pronto como se había desarrollado la reacción inflamatoria, se retiró el antígeno y se comenzó con la administración del antígeno el cual fue administrado durante la administración de leflunomida.

De nuevo, los síntomas de la alergia por contacto se mantuvieron a lo largo de un espacio de tiempo de 2 semanas. Después de este espacio de tiempo de 2 semanas, se siguió administrando el alergeno de contacto, pero Ultralan® fue dado en una dosificación de manera que desaparecieron por completo los síntomas de la alergia por contacto. Tan pronto como habían desaparecido los síntomas de la alergia por contacto bajo Ultralan®, se redujo diariamente, de forma escalonada, la administración de Ultralan® y, finalmente, se retiró por completo. A pesar de que después de retirar Ultralan® el alergeno se administró por vía dermal todavía durante 2 semanas, no aparecieron síntomas de una alergia por contacto.

Ensayo 1.6

4 semanas más tarde se realizó de nuevo una exposición contra el alergeno de contacto el cual había sido administrado durante la administración de leflunomida. Durante las primeras dos semanas de la exposición al alergeno no se observaron síntomas de ningún tipo de una alergia por contacto.

Después de estas 2 semanas se efectuó una irradiación de la superficie de la piel con una lámpara de UV-A bajo exposición prolongada al alergeno de contacto. Al mismo tiempo, se realizó en el otro brazo del voluntario una irradiación idéntica de una zona de la piel equiparable sobre la que se aplicó la vaselina sin alergeno de contacto. Mediante la irradiación UV-A se provocó una ligera reacción inflamatoria con enrojecimiento (sin edema) sobre el brazo, sobre la que no se aplicó ningún alergeno de contacto. En el brazo en el que se aplicó el alergeno de contacto los síntomas de la inflamación eran algo más intensos, a pesar de que se eligieron exactamente las mismas condiciones de irradiación y los mismos tiempos de exposición para los dos brazos. En el brazo, en el que no se aplicó alergeno de contacto, el enrojecimiento desapareció a lo más tardar después de 4 días. Frente a ello, las reacciones inflamatorias en la zona sobre la que se aplicó el alergeno de contacto, habían desaparecido después de 7 días como muy
pronto.

Serie de ensayos 2

Ensayo 2.1

En el ensayo 2 se intentó en el caso de 2 voluntarios, al igual que en el ensayo 1, constituir una respuesta inmunitaria reguladora.

En contraposición al ensayo 1 se eligió, sin embargo, una dosis de Ultralan® en la que ya no se observaba síntoma alguno de una alergia por contacto. No se efectuó una reducción de la administración de Ultralan® durante las primeras 4 semanas. Al cabo de 4 semanas se retiró por completo Ultralan® y se intentó seguir administrando leflunomida y el alergeno de contacto. Ya un día después de la retirada de Ultralan se desarrollaron masivamente síntomas de la alergia por contacto, de modo que no se llevaron a cabo otros ensayos.

\newpage

Ensayo 2.2

4 semanas más tarde se comenzó a tratar a los voluntarios de manera correspondiente a la terapia de combinación del ensayo 1. En los dos voluntarios se pudo constituir, mediante el esquema de tratamiento del ensayo 1, una respuesta inmunitaria reguladora que, también en el caso de la exposición subsiguiente al antígeno, impedía que aparecieran síntomas de una alergia por contacto.

Serie de ensayos 3

Ensayo 3.1

En el ensayo 3 se llevó a cabo en otros 2 voluntarios con alergia por contacto el intento de la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora de manera correspondiente al esquema de tratamiento del ensayo 1. Sin embargo, en contraposición al ensayo 1, la fase de tratamiento con alergenos de contacto y leflunomida sin esteroides se acortó de 30 días a 2 semanas.

4 semanas después de retirar leflunomida se efectuó una exposición al alergeno. Tres a cuatro días después del comienzo de la exposición al antígeno se desarrolló primero un ligero enrojecimiento con síntomas de una alergia por contacto que aumentaban en los días siguientes.

Ensayo 3.2

Mediante una administración única de 5 mg de Ultralan® y de la administración simultánea de leflunomida desaparecieron los síntomas en el espacio de un día.

Ensayo 3.3

La administración de leflunomida y del alergeno de contacto se prolongó a continuación a lo largo de 20 días, con el fin de eliminar luego aceleradamente leflunomida como en el ensayo 1 y finalizar la administración del alergeno de contacto.

4 semanas después se pudo demostrar, como en el ensayo 1, que se había constituido una respuesta inmunitaria reguladora, estable y específica para el antígeno.

Serie de ensayos 4

Ensayo 4.1

En la serie de ensayos 4 se constituyó, en el caso de 2 pacientes en los que se presentaba una rinitis/conjuntivitis alérgica contra dos antígenos diferentes (polen del avellano y polen de gramíneas), una respuesta inmunitaria reguladora específica para el antígeno con ayuda de leflunomida de forma selectiva contra uno de los dos antígenos.

Primeramente, se expuso a los voluntarios al polvo de los alergenos con el fin de confirmar la existencia de la alergia. A continuación, se hizo una pausa de 1 mes en la que los voluntarios no tenían contacto alguno con los correspondientes alergenos ni tampoco se añadió ningún tipo de medicamento que afectara al sistema inmune.

Al cabo de un mes, los dos voluntarios recibieron una dosis de carga de en cada caso 100 mg de leflunomida en 3 días consecutivos. A continuación, los voluntarios recibieron constantemente una dosis diaria de 20 mg de leflunomida.

Al 4º día de la administración de leflunomida se expuso a los voluntarios a uno de los dos alergenos. Los voluntarios reaccionaron inmediatamente con síntomas de alergia. Los síntomas de la alergia se suprimieron mediante la administración de 10 mg de Ultralan® y de vasoconstrictores (gotas nasales Otriven® y gotas oculares Yxin®) hasta que ya sólo se manifestaban ligeros síntomas de una reacción alérgica, tal como débil prurito y flujo de secreción nasal ligeramente incrementado, inmediatamente después de la exposición al antígeno.

En el espacio de 4 días desaparecieron por completo los síntomas de la alergia directamente después de la exposición al antígeno bajo terapia constante con Ultralan® y leflunomida. A continuación, se realizó una reducción escalonada de la dosis de esteroides manteniendo la dosis de leflunomida y evitando una reacción inflamatoria aguda hasta que, finalmente, ya no se administró ningún esteroide (Ultralan®). Después de la supresión completa de los esteroides, se administró durante los siguientes 30 días diariamente leflunomida y el antígeno.

Al cabo de estos 30 días se eliminó la leflunomida aceleradamente del cuerpo mediante la administración durante 3 veces al día de colestiramina a lo largo de 10 días. Durante esta eliminación acelerada se prosiguió con la exposición diaria al antígeno.

En el caso de los dos pacientes no se manifestaron con ello síntomas de una alergia.

\newpage

Después de este ciclo de tratamiento, se hizo un mes de fase de reposo en el que los voluntarios no recibieron medicamento alguno para el tratamiento de la alergia.

Al cabo de un mes, se expuso a los voluntarios al alergeno (polen) al que habían estado expuestos durante el ciclo de tratamiento con leflunomida. A pesar de la exposición diaria prolongada al alergeno a lo largo de 2 semanas los voluntarios no desarrollaron síntomas alguno de una reacción alérgica.

Ensayo 4.2

4 semanas más tarde, en las cuales los voluntarios no tuvieron contacto alguno con los alergenos, se expusieron al antígeno (1 vez al día polvo del polen de gramíneas) con el que no habían tenido contacto alguno durante la terapia con leflunomida.

Los dos voluntarios desarrollaron en el espacio de 2 días síntomas de una alergia.

Ensayo 4.3

Tan pronto como los voluntarios presentaban síntomas de una alergia con los síntomas de una reacción inflamatoria, se expusieron durante otros 2 días tanto al alergeno que fue administrado en combinación con leflunomida, como también al alergeno que no fue añadido en combinación con leflunomida. Al 3^{er} día y al 4º día ya sólo se administró el antígeno que fue administrado originalmente en combinación con leflunomida. Tanto al 3^{er} como al 4º día se desarrollaron síntomas de una alergia. En los dos siguientes días se administró, antes de la exposición del antígeno, esprai nasal y gotas oculares de dexametasona, con el fin de que no se pudieran desarrollar reacciones inflamatorias. Estas medidas servían también para consumir los anticuerpos que se pueden encontrar a lo largo de un espacio de tiempo prolongado sobre la superficie de células del sistema inmune.

Ensayo 4.4

Después de nuevamente 4 semanas se expuso a los voluntarios otra vez al antígeno al que habían estado expuestos durante la administración de leflunomida. Incluso 2 semanas después de la exposición diaria con el antígeno no se han desarrollado síntomas algunos de una alergia.

Serie de ensayos 5

Ensayo 5.1

En la serie de ensayos 5 se constituyó, al igual que en la serie de ensayos 4, en el caso de 2 pacientes en los que se presentaba una rinitis/conjuntivitis alérgica contra dos antígenos diferentes (polen del avellano y polen de gramíneas), una respuesta inmunitaria reguladora específica para el antígeno contra uno de los dos antígenos.

Durante la exposición al alergeno la reacción inmunológica se redujo, mediante esprais nasales y gotas oculares con contenido en dexametasona, la reacción inmunológica hasta que ya no se podían observar síntomas de inflamación aguda. Adicionalmente, los voluntarios podían emplear vasoconstrictores tales como gotas nasales Otriven® y gotas oculares Yxin® para aliviar los síntomas agudos. No obstante, podía aparecer una formación, ligeramente incrementada, de secreción nasal y ligero prurito de los ojos bajo exposición a los alergenos.

Como sustancia inmunomoduladora se empleó sulfato de neomicina en una concentración de 50 mg/ml en solución salina fisiológica como gotas oculares y como esprai nasal dosificador. Durante la exposición al alergeno (época de polen en suspensión) se administró a lo largo del día, primeramente cada 3 horas, la solución de neomicina. Tan pronto como se manifestaban síntomas de una reacción alérgica tal como fuerte prurito, lágrimas, flujo de secreción nasal o excitación al estornudo, se suprimió esta reacción inflamatoria en el espacio de los 5 primeros días mediante el empleo de las gotas oculares de dexametasona, del esprai nasal de dexametasona, de gotas nasales de xilometazolina y gotas oculares Yxin®. La administración de los esteroides y de los vasoconstrictores se realizó según
demanda.

En el espacio de los 5 primeros días se redujo la demanda de administraciones de dexametasona desde una administración media de 4 veces al día a una administración de 2 veces al día por la mañana y por la tarde.

En los 4 días siguientes se administró ácido cromoglicínico en lugar de dexametasona y, al mismo tiempo, pudo reducirse la administración de solución de neomicina a por la mañana, tarde y noche. Después de estos 4 días no se requirió de nada de ácido cromoglicínico. La administración de solución de neomicina se prolongó sin variar durante otras dos semanas. Después de una semana se expuso de forma intensificada a los voluntarios durante dos veces al día al antígeno (exposición directa al polen del avellano). En el caso de los dos pacientes no se manifestaron con ello síntomas de una alergia.

Al cabo de un mes, se expuso a los voluntarios al alergeno (polen) al que habían estado expuestos durante el ciclo de tratamiento con neomicina.

Los voluntarios no mostraron síntomas algunos de una alergia durante esta exposición al alergeno diaria de 2 semanas de duración.

Ensayo 5.2

4 semanas más tarde, en las cuales los voluntarios no tuvieron contacto alguno con los alergenos, se expusieron al antígeno (1 vez al día polvo del polen de gramíneas) con el que no habían tenido contacto alguno durante la terapia con neomicina.

Ensayo 5.3

Tan pronto como los voluntarios presentaban síntomas de una alergia con los síntomas de una reacción inflamatoria, se expusieron durante otros 2 días tanto al alergeno que fue administrado en combinación con neomicina, como también al antígeno que no fue añadido en combinación con neomicina. Al 3^{er} día y al 4º día ya sólo se administró el antígeno que fue administrado originalmente en combinación con neomicina. Tanto al 3^{er} como al 4º día se desarrollaron síntomas de una alergia. En los dos siguientes días se administró, antes de la exposición del antígeno, dexametasona, con el fin de que no se pudieran desarrollar reacciones inflamatorias. Estas medidas servían también para consumir los anticuerpos que se encuentran a lo largo de un espacio de tiempo prolongado sobre la superficie de células del sistema inmune.

Ensayo 5.4

Después de nuevamente una pausa de 4 semanas se expuso a los voluntarios otra vez al antígeno al que habían estado expuestos durante la administración de neomicina. Incluso 2 semanas después de la exposición diaria con el antígeno no se habían desarrollado síntomas algunos de una alergia.

Manifestaciones de los ensayos

La serie de ensayos 1.1. demuestra que mediante una terapia de combinación consistente en leflunomida y el alergeno desencadenante se puede provocar una no reactividad permanente con respecto al antígeno administrado. Esta no reactividad se constituyó en el caso de una reacción inmunológica ya activa. Asimismo, se demostró que la no reactividad del sistema inmune no se puede alcanzar solamente mediante la reducción escalonada de la administración de Ultralan®. El ensayo 1.2. confirma que esta no reactividad se conserva sólo con respecto al antígeno administrado durante la terapia con leflunomida y el sistema inmune no fue dañado de forma no específica en su capacidad de reacción. Los ensayos 1.2. demuestran que mediante la terapia de combinación se provocó una no reactividad específica para el antígeno.

El ensayo 1.3. confirma que se pierde la no reactividad específica para el antígeno bajo condiciones inflamatorias. De ello, se puede concluir que mediante la terapia de combinación de leflunomida con un antígeno el sistema inmune no pierde posibilidades de reacción algunas, sino que éstas se encuentran de nuevo a disposición en el marco de reacciones inflamatorias. Por lo tanto, el ensayo 1.3. confirma también que mediante una terapia de combinación del antígeno con leflunomida se constituyó una respuesta inmunitaria reguladora específica para el antígeno. El ensayo 1.4. confirma que tras la retroformación de la reacción inflamatoria se ajusta de nuevo la no reactividad del sistema inmune, específica para el antígeno, sin otras medidas terapéuticas. El ensayo 1.5 confirma que la no reactividad específica para el antígeno se ajusta también de nuevo cuando la reacción inflamatoria se suprime durante corto plazo con ayuda de medicamentos.

El ensayo 1.6. confirma que el desmoronamiento de la no reactividad específica para el antígeno no sólo puede ser provocado por reacciones inflamatorias desencadenadas por vía inmunológica, sino, de manera muy general, por reacciones inflamatorias inespecíficas. Además, este ensayo confirma que en el caso de reacciones inflamatorias ligeras, a pesar del contacto con el antígeno, una vez suprimida la causa de la reacción inflamatoria, se constituye automáticamente de nuevo la no reactividad.

La serie de ensayos 2.1. confirma que durante la constitución de la respuesta inmunitaria reguladora, específica para el antígeno, no debe suprimirse por completo la reacción inmunológica. El ensayo 2.2. confirma que en el caso de los voluntarios tratados en 2.1. no se trata de casos resistentes a la terapia.

La serie de ensayos 3 confirma que también después de la retirada completa de la terapia con esteroides se constituye de nuevo por sí sola en función del tiempo, bajo la administración simultánea de leflunomida y el antígeno, la respuesta inmunitaria reguladora específica para el antígeno. Estos ensayos confirman también que mediante la administración única de leflunomida durante una reacción inmunológica no se constituye ninguna respuesta inmunitaria reguladora, específica para el antígeno, lo suficientemente estable. Confirman que también después de la desaparición de todos los síntomas de la enfermedad se debe seguir administrando antígeno en combinación con leflunomida, con el fin de que se establezca una reacción inmunológica reguladora, específica para el antígeno, lo suficientemente estable que, también después de la retirada de leflunomida impida la aparición de las reacciones inmunológicas nocivas excesivas indeseadas.

En la serie de ensayos 4 se demostró que la constitución de una respuesta inmunitaria reguladora, específica para el antígeno, con ayuda de la terapia de combinación de leflunomida y un antígeno es también posible en el caso de reacciones inmunológicas inducidas por anticuerpos.

En la serie de ensayos 5 se confirmó que, bajo el empleo limitado en el tiempo de gotas oculares de neomicina y de un esprai nasal de neomicina, evitando reacciones inflamatorias agudas y bajo contacto con el respectivo antígeno, se puede constituir una respuesta inmunitaria reguladora, específica para el antígeno. Al igual que en el caso de la respuesta inmunitaria reguladora, la cual se constituyó con ayuda de leflunomida, la respuesta inmunitaria reguladora, constituida con ayuda de neomicina, demuestra también que la no reactividad del sistema inmune puede desmoronarse mediante reacciones inflamatorias inespecíficas, pero se constituye automáticamente de nuevo después de desaparecer la causa de la inflamación inespecífica.

Claims

1. Preparado de combinación farmacéutico, caracterizado porque contiene

3

4

R^{1} es

\hskip0,12cm

a) -alquilo (C_{1}-C_{4}),

b): -cicloalquilo (C_{3}-C_{5}),

c): -alquenilo (C_{2}-C_{6}), o

d): -alquinilo (C_{2}-C_{6});

\vskip1.000000\baselineskip

R^{2} es

\hskip0,12cm

a) -CF_{3},

b): -O-CF_{3},

c): -S-CF_{3},

d): -OH,

e): -NO_{2},

f): halógeno,

g): bencilo,

h): fenilo,

i): -O-fenilo, el cual no está sustituido,

j): -CN, o

1): alquilo (C_{1}-C_{4}),

2): halógeno,

3): -O-CF_{3} y

4): -O-CH_{3};

\newpage

R^{3} es

\hskip0,12cm

a) -alquilo (C_{1}-C_{4}),

b): halógeno, o

c): un átomo de hidrógeno;

\vskip1.000000\baselineskip

o X es a) un grupo CH,

b): un átomo de nitrógeno, o una mezcla de Brequinar y compuestos de las fórmulas (I) y (II) o de sales de compuestos de la fórmula (II) y

2. Preparado de combinación según la reivindicación 1, caracterizado porque como inhibidor de la síntesis de nucleótidos contiene la N-(4-trifluorometilfenil)-5-metilisoxazol-4-carboxamida de la fórmula (I) o N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-5-hidroxicrotonamida, (4-cianofenil)amida del ácido 2-ciano-3-ciclopropil-3-hidroxiacrílico o N-(4-trifluorometilfenil)-2-ciano-3-hidroxihept-2-en-6-incarboxamida en calidad de compuestos de la fórmula (II).

3. Preparado de combinación según las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque como un principio activo supresor de una reacción inflamatoria aguda contiene un esteroide, un antiflogístico no esteroide, un antagonista de leucotrienos, un antagonista de citoquinas, un estabilizador de células cebadas, un antihistamínico, una ciclosporina, FK 506, una citoquina antiinflamatoria o un ácido graso antiinflamatorio o sus precursores o sustancias inhibidoras.

4. Preparado de combinación según las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque en él se disponen los principios activos individuales para la terapia simultánea, separada o escalonada en el tiempo de reacciones inmunológicas nocivas excesivas y/o procesos degenerativos.

5. Preparado de combinación según las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque contiene al menos otro principio activo, un coadyuvante galénico y/o una sustancia de soporte.

6. Uso del preparado de combinación según las reivindicaciones 1 a 5, para la producción de un medicamento para la terapia de reacciones inmunológicas nocivas excesivas y/o procesos degenerativos.

7. Uso según la reivindicación 6, caracterizado porque se trata de reacciones alérgicas, rechaces de trasplantes o reacciones inmunológicas contra células modificadas por tecnología genética o sus productos tal como factor VIII o insulina, o de enfermedades autoinmunes tal como esclerosis múltiple, artritis reumatoide, pénfigo vulgar y tireoiditis Hashimoto o de una enfermedad tal como colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, psoriasis o arteriosclerosis o artrosis, enfermedades de demencia o colitis ulcerosa.