ES2254422T3

ES2254422T3 - 4-bencil-1-(2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil)-piperidin-3,4-diol.

Info

Publication number: ES2254422T3
Application number: ES01933833T
Authority: ES
Inventors: Alexander Alanine; Bernd Buettelmann; Marie-Paule Heitz Neidhart; Georg Jaeschke; Emmanuel Pinard; Rene Wyler
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2000-04-25
Filing date: 2001-04-17
Publication date: 2006-06-16
Anticipated expiration: 2021-04-17
Also published as: CN1443166A; MXPA02010573A; EP1278730B1; CA2407345C; US20010047014A1; UY26681A1; DK1278730T3; ATE313527T1; CA2407345A1; AU785153B2; ZA200208134B; JP2004509837A; KR20040007216A; JP3831255B2; PE20011229A1; EP1278730A2; KR100527527B1; DE60116080T2; BR0110233A; DE60116080D1

Abstract

Objeto de la presente invención es el nuevo compuesto de fórmula I, sus enantiómeros R, R- y S, S- y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, su empleo en el tratamiento o profilaxis de enfermedades causadas por la sobreactivación de los respectivos subtipos del receptor NMDA, los cuales incluyen las formas agudas de neurodegeneración causadas, p.ej. por apoplejía o traumas cerebrales; formas crónicas de neurodegeneración tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington o el ALS (esclerosis lateral amiotrófica); neurodegeneración asociada con infecciones bacterianas o víricas, y enfermedades tales como la esquizofrenia, ansiedad, depresión y dolor agudo/crónico, el empleo de estos compuestos para la elaboración de los correspondientes medicamentos, procedimientos para la elaboración de estos nuevos compuestos y medicamentos que los contienen.

Description

4-Bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol.

La presente invención se refiere al compuesto de fórmula

1

a sus enantiómeros R,R- y S,S- y a sus sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de la presente invención son bloqueadores selectivos de subtipos del receptor NMDA (N-metil-D-aspartato).

Los compuestos de la presente invención son bloqueadores selectivos de subtipos del receptor NMDA (N-metil-D-aspartato), los cuales tienen una función clave en la modulación de la actividad neuronal y plasticidad que los hace actores en los procesos de mediación que son la base del desarrollo del SNC incluyendo el aprendizaje y formación y función de la memoria.

En condiciones patológicas de formas agudas y crónicas de neurodegeneración, la sobreactivación de los receptores NMDA es un evento clave para provocar la muerte de las células neuronales. Los receptores NMDA están compuestos de miembros de dos familias de subunidades, a saber, NR-1 (8 distintas variantes de uniones), y la NR-2 (A a D) que se originan de diferentes genes. Los miembros de las dos familias de subunidades muestran una clara distribución en diferentes áreas del cerebro. Combinaciones heteroméricas de miembros de NR-1 con diferentes subunidades NR-2 dan como resultado receptores NMDA que presentan diferentes propiedades farmacológicas. Posibles indicaciones terapéuticas para los bloqueadores específicos del subtipo de receptores NMDA incluyen formas agudas de neurodegeneración causadas por apoplejía o traumas cerebrales; formas crónicas de neurodegeneración elegidas entre la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington o el ALS (esclerosis lateral amiotrófica); neurodegeneración asociada con infecciones bacterianas o víricas, enfermedades tales como la esquizofrenia, ansiedad y depresión y dolor agudo/crónico.

Objeto de la presente invención es el nuevo compuesto de fórmula I, sus enantiómeros R,R- y S,S- y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, su empleo en el tratamiento o profilaxis de enfermedades causadas por la sobreactivación de los respectivos subtipos del receptor NMDA, los cuales incluyen las formas agudas de neurodegeneración causadas, p.ej. por apoplejía o traumas cerebrales; formas crónicas de neurodegeneración tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington o el ALS (esclerosis lateral amiotrófica); neurodegeneración asociada con infecciones bacterianas o víricas, y enfermedades tales como la esquizofrenia, ansiedad, depresión y dolor agudo/crónico, el empleo de estos compuestos para la elaboración de los correspondientes medicamentos, procedimientos para la elaboración de estos nuevos compuestos y medicamentos que los contienen.

El término "sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables" abarca las sales con ácidos ácidos inorgánicos y orgánicos tales como el ácido clorhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido láctico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido acético, ácido succínico, ácido tartárico, ácido metansulfónico, ácido p-toluensulfónico y similares.

En la patente EP 824 098 se describen por ejemplo derivados de la 4-hidroxi-piperidina, en los cuales el anillo de piperidina está substituido por un grupo hidroxilo en la posición 4. Se informa en la misma que estos compuestos poseen actividad sobre el receptor NMDA y son de utilidad en el tratamiento de formas agudas de neurodegeneración causadas por ejemplo, por apoplejía o traumas cerebrales y formas crónicas de neurodegeneración tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la ALS (esclerosis lateral amiotrófica), neurodegeneración asociada con infecciones bacterianas o víricas, y dolor agudo/crónico.

Es conocido por la patente EP 824 098 que estos compuestos son buenos bloqueadores específicos de los subtipos del receptor NMDA con una alta afinidad para los receptores que contiene la subunidad NR2B y una baja afinidad para los receptores que contienen la subunidad NR2A.

La actividad frente a los receptores \alpha_{1}-adrenérgicos es también baja y los compuestos son activos in vivo contra los ataques audiogénicos en ratones en el margen bajo de mg/kg. De forma importante, estos compuestos fueron neuroprotectores en un modelo de apoplejía animal, a saber, una permanente oclusión de la arteria cerebral media. Sin embargo, estudios de cardiotoxicidad in vitro e in vivo, mostraron que estos compuestos tenían la propensión de prolongar la duración potencial de la acción cardíaca in vitro y en consecuencia el intervalo "QT" in vivo, y así tienen una potencial tendencia para producir arritmias cardíacas. La capacidad de dichos compuestos para prolongar la potencial acción cardíaca, se comprobó que era debida a una acción en el canal de potasio tipo hERG, el cual es importante para la potencial acción de repolarización en humanos y otras especies, y la mayoría de compuestos conocidos por prolongar el intervalo QT en el hombre son activos en bloquear este canal. Así pues, los compuestos de la técnica anterior bloquean heterólogamente los canales de potasio ERG humanos recombinantes.

Se ha descubierto ahora sorprendentemente que los siguientes compuestos de fórmula I:

(3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol,

(3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, y

(3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol,

son antagonistas selectivos del subtipo NR2B de NMDA, mientras que comparten las propiedades de bloqueo selectivo de subtipos altamente específicos, de los compuestos de la técnica anterior, por ejemplo, de 1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-4-(4-metil-bencil)-piperidin-4-ol (patente EP 824 098), y son neuroprotectores in vivo, son menos activos como bloqueadores de los canales de potasio hERG, y de esta forma es mucho menos probable que tengan actividad pro-arrítmica en el hombre.

En la siguiente tabla queda demostrada la alta selectividad de los compuestos de la presente invención.

Perfil de selectividad de los antagonistas selectivos del subtipo NR2B de NMDA

Compuesto	Inhibición de la unión	Inhibición de la unión	Inhibición de hERG K
	[3H]-Ro 25-6981 IC_{50}	[3H]-Prazosin IC_{50}	+ corriente IC_{50} (\muM)
	(\muM)^{a}	(\muM)^{b}	(efecto (%) a 10 \muM^{c})
EP 824098	0,010	3,5	0,69 \muM
1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-4-
(4-metil-bencil)-piperidin-4-ol
I (racemato)	0,045	27	> 10 \muM (45%)
I-1 (R,R)	0,038	25	> 10 \muM (44%)
I-2 (S,S)	0,039	30	> 10 \muM (40%)
^{a} \begin{minipage}[t]{155mm} Inhibición de la unión [3H]-Ro 25-6981, que indica afinidad para los receptores que contienen la subunidad NR2B de NMDA. \end{minipage}
^{b} \begin{minipage}[t]{155mm} Inhibición de la unión [3H]-Prazosin que indica la afinidad para los receptores \alpha_{1}\text{-}adrenérgicos. \end{minipage}
^{c} \begin{minipage}[t]{155mm} Indica la potencia para el bloqueo de los canales de potasio ERG humano recombinante en una línea celular de un mamífero (células de ovario de hamster chino, CHO). \end{minipage}

Los nuevos compuestos de fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables pueden prepararse por métodos ya conocidos en la especialidad, por ejemplo mediante un procedimiento descrito más adelante, el cual comprende:

1) reacción de un compuesto de fórmula

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con un compuesto de fórmula

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y desprotección del grupo hidroxilo para dar compuestos de fórmula:

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y si se desea,

conversión de los compuestos obtenidos en sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables.

De acuerdo con una variante del procedimiento descrito, se trata la 4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina, la (3R,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina ó la (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina, con el 1-benciloxi-4-(2-cloro-etoxi)-benceno en presencia de K_{2}CO_{3}. La reacción se efectúa a aproximadamente 80 - 100ºC. El grupo protector del O- se escinde a continuación por uno de los procedimientos convencionales, por ejemplo mediante hidrogenación en presencia de Pd/C.

Las sales de adición ácida de los compuestos de fórmula I son especialmente adecuadas para el uso farmacéutico.

Los siguientes esquemas 1 y 2 describen la preparación del compuesto de fórmula I y sus formas enantioméricas deseadas. Los materiales de partida de fórmula III y 1-benciloxi-4-(2-cloro-etoxi)-benceno son compuestos ya conocidos o pueden prepararse mediante métodos ya conocidos en la especialidad.

En los esquemas 1 y 2 se han utilizado las siguientes abreviaturas:

Z-Cl: cloroformiato de bencilo

MCPBA: ácido meta-cloroperbenzoico

DMAP: dimetilamino piridina

Pd/C: catalizador de paladio sobre/carbón

DMF: dimetilformamida

Bn: bencilo

Esquema 1

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en donde "hal" puede ser cloro o bromo.

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Esquema 2

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La descripción detallada de los procesos mencionados más arriba está descrita en los ejemplos 1 - 17.

Como se ha mencionado anteriormente, los compuestos de fórmula I y sus sales de adición farmacéuticamente aceptables poseen notables propiedades farmacodinámicas. Son bloqueadores selectivos del subtipo de receptores NMDA, los cuales tienen una función clave en la modulación de la actividad y plasticidad neuronal, que los hace actores en la mediación de procesos que sirven de base al desarrollo del SNC así como el aprendizaje y formación de la memoria.

Los compuestos se investigaron de acuerdo con el ensayo que figura a continuación:

Método 1

Unión 3H-Ro 25-6981 (Ro 25-6981 es ([R-(R*,S*)]-\alpha-(4-hidroxi-fenil)-\beta-metil-4-(fenil-metil)-1-piperidina propanol)

Se emplearon ratas albino Füllinsdorf machos con un peso entre 150-200 g. Se prepararon membranas mediante la homogeneización del cerebro completo excepto el cerebelo y la médula oblongata, con un Polytron (10.000 rpm, 30 segundos) en 25 volúmenes de un tampón frío Tris-HCl 50 mM, EDTA 10 mM, pH 7,1. El homogenato resultante se centrifugó a 48.000 g durante 10 minutos a 4ºC. El sedimento en forma de bolita, se resuspendió empleando el Polytron en el mismo volumen de tampón y el homogenato se incubó a 37ºC durante 10 minutos. Después de centrifugar, se homogeneizó el sedimento en el mismo tampón y se congeló a -80ºC durante por lo menos 16 horas pero no más de 10 días. Para el ensayo de unión se descongeló el homogenato a 37ºC, se centrifugó y el sedimento se lavó tres veces como más arriba en tampón Tris-HCl 5 mM, pH 7,4, enfriado. El sedimento final se resuspendió en el mismo tampón y se utilizó con una concentración final de 200 \mug de proteína/ml.

Los experimentos de unión 3H-Ro 25-6981 se realizaron empleando un tampón de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4. Para los experimentos de desplazamiento, se usaron 5 nM de 3H-Ro 25-6981 y no se detectó ninguna unión no específica usando 10 \muM de tetrahidroisoquinolina y esto representa habitualmente el 10% del total. El tiempo de incubación fue de 2 horas a 4ºC y el ensayo se paralizó por filtración sobre filtros de fibra de vidrio Whatmann GF/B (Unifilter-96, Packard, Zürich, Suiza). Los filtros se lavaron 5 veces con tampón frío. La radioactividad sobre el filtro se contó con un contador de centelleo de microplacas Packard Top-count, después de la adición de 40 ml de microscint 40 (Canberra Packard S.A., Zürich, Suiza).

Los efectos de los compuestos se midieron empleando un mínimo de 8 concentraciones y se repitieron por lo menos una vez. Se analizó el conjunto de valores normalizados empleando un programa de cálculo de regresión no lineal que proporciona el IC_{50} con sus límites de confianza relativos superior e inferior 95% (RS1, BBN, USA).

Método 2

Unión 3H - Prazosin

Se utilizaron ratas albino Füllinsdorf macho con un peso entre 150-200 g. Se prepararon membranas mediante la homogeneización del cerebro completo excepto el cerebelo y la médula oblongata con un Polytron (10.000 rpm, 30 segundos) en 25 volúmenes de un tampón frío Tris-HCl 50 mM, EDTA 10 mM, pH 7,1. El homogenato se centrifugó a 48.000 g durante 10 minutos a 4ºC. El sedimento en forma de bolita se resuspendió empleando el Polytron en el mismo volumen de tampón y el homogenato se incubó a 37ºC durante 10 minutos. Después de centrifugar, se homogeneizó el sedimento en el mismo tampón y se congeló a -80ºC durante por lo menos 16 horas pero no más de 10 días. Para el ensayo de unión se descongeló el homogenato a 37ºC, se centrifugó y el sedimento se lavó tres veces como se había hecho más arriba, en tampón Tris-HCl 5 mM, pH 7,4, enfriado. El sedimento final se resuspendió en el mismo tampón y se utilizó con una concentración final de 200 \mug de proteína/ml.

Los experimentos de unión 3H-Prazosin se realizaron empleando un tampón de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4. Para los experimentos de desplazamiento, se usaron 0,2 nM de 3H-Prazosin y no se midió ninguna unión no específica usando 100 mM de Chlorpromazine. El tiempo de incubación fue de 30 minutos a temperatura ambiente y el ensayo se paralizó por filtración sobre filtros de fibra de vidrio Whatmann GF/B (Unifilter-96, Canberra Packard S.A., Zürich, Suiza). Los filtros se lavaron 5 veces con tampón frío. La radioactividad sobre el filtro se contó con un contador de centelleo de microplacas Packard Top-count, después de la adición de 40 ml de microscint 40 (Canberra Packard S.A., Zürich, Suiza). Los efectos de los compuestos se midieron empleando un mínimo de 8 concentraciones y se repitieron por lo menos una vez. Se analizó el conjunto de valores normalizados empleando un programa de cálculo de regresión no lineal que proporciona el IC_{50} con sus límites relativos superior e inferior de confianza 95% (RS1, BBN, USA).

La actividad así determinada, de los compuestos de acuerdo con la invención, está en el margen de 0,039 - 0,045 (en \muM), como se ha descrito en la tabla de más arriba.

Método 3

Métodos para el estudio de la inhibición del canal hERG K^{+}

Se transfectaron establemente células CHO mediante un vector de expresión pcADN3-hERG, que contenía un neo cassette SV40 para la selección. Las células se plaquearon en capa delgada en discos de 35 mm y se emplearon para el experimento electrofisiológico ½ - 3 días más tarde.

Durante el experimento las células estuvieron bañadas continuamente con una solución salina extracelular que contenía (en mM): NaCl 150, KCl 10, MgCl_{2} 1, CaCl_{2} 3, HEPES 10 (pH = 7,3 mediante la adición de NaOH). Se preparó una solución de stock de 10 mM del compuesto de ensayo a partir de DMSO puro. Se preparó la solución de ensayo mediante una solución como mínimo de 1000 veces de la solución de stock en la solución salina extracelular. Las micropipetas de vidrio para el registro del "patch-clamp" ("bloqueo de conexión") de todas las células se llenaron con una mezcla conteniendo (en mM): KCl 110, BAPTA 10, HEPES 10, MgCl_{2} 4,5, Na_{2}ATP 4, Na_{2}-fosfocreatina 20, creatina quinasa 200 \mug/ml (pH = 7,3 mediante la adición de KOH).

La configuración de todas las células de la técnica de "patch-clamp" se empleó para los experimentos. Las células se sometieron a un potencial de mantenimiento de -80 mV y se estimularon repetitivamente (0,1 Hz) mediante un modelo de pulso de voltaje que consistía en una despolarización condicionante de 1 segundo a 20 mV, seguida inmediatamente por una hiperpolarización de 50 ms de duración a -120 mV. La corriente de la membrana se registró por lo menos durante 3 minutos (18 estímulos) antes de la aplicación del compuesto (control), y a continuación durante otros intervalos de 3 minutos en presencia de dos diferentes concentraciones del compuesto. Las amplitudes de las corrientes (I_{ensayo}) al final de cada intervalo de aplicación del compuesto se dividió por la media de las amplitudes de corriente (I_{control}) durante el período de control inicial, para calcular el efecto del compuesto en tanto por ciento.

Efecto \ (%) \ = \ (1 \ - \ I_{ensayo}/I_{control}) \ . \ 100

Las concentraciones del compuesto se escogieron en saltos de decenas (habitualmente 1 y 10 \muM) alrededor del 50% de la concentración inhibitoria esperada (IC_{50}). Si después del primer experimento el IC_{50} cambió para situarse fuera del margen entre las dos concentraciones escogidas, las concentraciones se cambiaron para comprender el IC_{50} en los experimentos siguientes. El compuesto se ensayó sobre por lo menos tres células. A continuación se estimaron sus IC_{50} a partir de la población de todos los valores del tanto por ciento del efecto mediante una regresión no lineal empleando la función

efecto \ = \ 100 \ / \ (1 \ - \ IC_{50}/concentración)^{colina).}

Las concentraciones mayores de 10 \muM no fueron ensayadas. Si 10 \muM del compuesto resultaron producir menos del 50% de efecto, el IC_{50} se designo como ">10 \muM" y el compuesto se caracterizó por el efecto promedio visto a 10 \muM.

Los compuestos de fórmula I y sus sales, como se han descrito aquí, juntamente con excipientes farmacéuticamente inertes, pueden ser incorporados en formas standard de dosificación farmacéutica, por ejemplo, para la aplicación oral o parenteral con los materiales coadyuvantes farmacéuticos habituales, por ejemplo, materiales de carga inerte orgánicos o inorgánicos, tales como el agua, gelatina, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, aceites vegetales, gomas, polialquilenglicoles, y similares. Ejemplos de preparaciones farmacéuticas en forma sólida son los comprimidos, supositorios, cápsulas, o en forma líquida son las soluciones, suspensiones o emulsiones.

Materiales coadyuvantes farmacéuticos incluyen los conservantes, estabilizantes, agentes humectantes o emulsionantes, sales para cambiar la presión osmótica o para actuar como tampones. Las preparaciones farmacéuticas pueden también contener otras substancias terapéuticamente activas.

La dosis diaria de los compuestos de fórmula I que debe administrarse varía con el compuesto particular empleado, la ruta escogida de administración y el recipiente. La ruta de administración de tipo oral y parenteral es representativa de un método para la administración de los compuestos de fórmula I. Una formulación oral de un compuesto de fórmula I se administra de preferencia a un adulto a una dosis en el margen de 1 mg a 1000 mg por día. Una formulación parenteral de un compuesto de fórmula I se administra de preferencia a un adulto a una dosis en el margen de 5 a 500 mg por día.

La invención se ilustra además en los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1 Éster bencílico del ácido 4-bencil-4-hidroxi-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 5,0 g (26,2 mmoles) de 4-hidroxibencilpiperidina en 50 ml de CH_{2}Cl_{2}, se añadieron en atmósfera de argón, 5,5 ml (39,3 mmoles) de Et_{3}N y 3,7 ml (26,2 mmoles) de cloroformiato de bencilo a 0ºC. Después de agitar la mezcla de reacción durante 3 horas a temperatura ambiente, se añadieron 100 ml de HCl 1N y la fase acuosa se extrajo dos veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas combinadas se lavaron con 50 ml de agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar el producto crudo. La purificación mediante cromatografía sobre silica gel (hexano/acetato de etilo 4:1 a 2:1) proporcionó 3,9 g de éster bencílico del ácido 4-bencil-4-hidroxi-piperidin-1-carboxílico (11,9 mmoles, 48%) en forma de un aceite de color amarillo. MS: m/e = 326 (M+1).

Ejemplo 2 Éster bencílico del ácido 4-bencil-3,6-dihidro-2H-piridin-1-carboxílico

A una solución de 40,0 g (123 mmoles) de éster bencílico del ácido 4-bencil-4-hidroxi-piperidin-1-carboxílico en 250 ml de CH_{2}Cl_{2} se añadieron 39,6 ml (492 mmoles) de piridina y a 0ºC 17,8 ml (246 mmoles) de SOCl_{2}. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y a continuación se añadieron 250 ml de HCl acuoso (2N). La fase acuosa se extrajo dos veces con CH_{2}Cl_{2}, las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 36,3 g (118 mmoles, 96%) de éster bencílico del ácido 4-bencil-3,6-dihidro-2H-piridin-1-carboxílico, en forma de un aceite de color naranja.

MS: m/e = 308 (M+1)

Ejemplo 3 Éster bencílico del ácido (1R,6S) y (1S,6R)-6-bencil-7-oxa-3-aza-biciclo[4.1.0]heptano-3-carboxílico

A una solución de 36,0 g (117 mmoles) de éster bencílico del ácido 4-bencil-3,6-dihidro-2H-piridin-1-carboxílico en 250 ml de CH_{2}Cl_{2} se añadieron 40,9 g (166 mmoles, \sim 70%) de MCPBA. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas y se añadió solución 1N de NaOH. La fase acuosa se extrajo dos veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaOH 1N, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 37,6 g (116 mmoles, 99%) de éster bencílico del ácido (1R,6S) y (1S,6R)-6-bencil-7-oxa-3-aza-biciclo[4.1.0]heptano-3-carboxílico, en forma de un aceite.

MS: m/e = 324 (M+1)

Ejemplo 4 Éster bencílico del ácido (3R,4R) y (3S,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 37,6 g (116 mmoles) de éster bencílico del ácido (1R,6S) y (1S,6R)-6-bencil-7-oxa-3-aza-biciclo [4.1.0]heptano-3-carboxílico, en 170 ml de THF se añadieron 37 ml de H_{2}SO_{4} (10%). La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se extrajo con NaHCO_{3} saturado. La fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO_{3} saturado, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 40,8 g (100% de pureza \sim 95%) de éster bencílico del ácido (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, crudo.

MS: m/e = 342 (M+1)

Ejemplo 5 Éster bencílico del ácido (4R,4R),4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoroacetil-ciclopentancarboniloxi)-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 43,0 g (126 mmoles) de éster bencílico del ácido (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, y 23,1 g (189 mmoles) de DMAP en 600 ml de CH_{2}Cl_{2}, se añadieron gota a gota en atmósfera de argón, 500 ml (340 mmoles, 0,70 N) de cloruro de (S)-N-trifluoroacetil-prolina. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente y a continuación se añadió solución saturada de NaHCO_{3}. La fase acuosa se extrajo tres veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO_{3} saturado y HCl 1N, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar el producto crudo. La purificación mediante cromatografía sobre silica gel (hexano: acetato de etilo 4:1 a 1:1) y cristalización con éter dietílico proporcionaron 17,9 g (33 mmoles, 27%) de éster bencílico del ácido (3R,4R), 4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoroacetil-ciclopentancarbonil-oxi)-piperidin-1-carboxílico.

MS: m/e = 535 (M+1), (c = 1,11, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 6 Éster bencílico del ácido (3S,4S),4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoroacetil-ciclopentancarboniloxi)-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 43,0 g (126 mmoles) de éster bencílico del ácido (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, y 23,1 g (189 mmoles) de DMAP en 600 ml de CH_{2}Cl_{2}, se añadieron gota a gota en atmósfera de argón, 500 ml (340 mmoles, 0,70 N) de cloruro de (S)-N-tri-fluoroacetilprolina. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente y a continuación se añadió solución saturada de NaHCO_{3}. La fase acuosa se extrajo tres veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO_{3} saturado y HCl 1N, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar el producto crudo. La purificación mediante cromatografía sobre silica gel (hexano: acetato de etilo 4:1 a 1:1) y cristalización con éter dietílico proporcionaron 14,3 g (27 mmoles, 21%) de éster bencílico del ácido (3S,4S), 4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoroacetil-ciclopentancarboniloxi)-piperidin-1-carboxílico.

MS: m/e = 535 (M+1), (c = 1,11, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 7 Éster bencílico del ácido (3R,4R),4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 17,9 g (33,5 mmoles) de éster bencílico del ácido (3R),(4R),4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoroacetil-ciclopentancarboniloxi)-piperidin-1-carboxílico, en 500 ml de EtOH, se añadieron 250 ml (250 mmoles) de NaOH 1N. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas y a continuación se añadió agua. La fase acuosa se extrajo tres veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 11,2 g (32,8 mmoles, 98%) de éster bencílico del ácido (3R,4R),4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, en forma de un aceite.

MS: m/e = 342,3 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = -36,75 (c = 1,02, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 8 Éster bencílico del ácido (3S,4S),4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico

A una solución de 14,3 g (27 mmoles) de éster bencílico del ácido (3S,4S)-4-bencil-4-hidroxi-3-((2S)-trifluoro-acetil-ciclopentancarboniloxi)-piperidin-1-carboxílico, en 500 ml de EtOH, se añadieron 250 ml (250 mmoles) de NaOH 1N. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas y se añadió agua. La fase acuosa se extrajo tres veces con CH_{2}Cl_{2} y las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 8,4 g (25 mmoles, 92%) de éster bencílico del ácido (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, en forma de un aceite.

MS: m/e = 342,3 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = 35,30 (c = 1,02, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 9 (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina

Se disolvieron 1,46 (4,3 mmoles) del éster bencílico del ácido (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico en 30 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 400 mg de Pd/C (10%) a presión atmosférica de H_{2} y a temperatura ambiente. Después de 16 horas se dio por terminada la reacción y se eliminó el catalizador por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 796 mg (3,8 mmoles, 89%) de (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en forma de un aceite.

MS: m/e = 207,1 (M).

Ejemplo 10 (3R,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina

Se disolvieron 11,0 g (32 mmoles) de éster bencílico del ácido (3R,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carbolico, en 250 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 1,1 g de Pd/C (10%) a presión atmosférica de H_{2} a temperatura ambiente. Después de 16 horas se consideró terminada la reacción y el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 6,6 g (32 mmoles, 100%) de (3R,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en forma de un aceite.

MS: m/e = 207,1 (M), [\alpha]_{D}^{20} = -42,3 (c = 1,00, etanol).

Ejemplo 11 (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina

Se disolvieron 8,2 g (24 mmoles) de éster bencílico del ácido (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidin-1-carboxílico, en 250 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 1,1 g de Pd/C (10%) a presión atmosférica a temperatura ambiente. Después de 16 horas se consideró terminada la reacción y el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 5,5 g (cuantitativa, \sim95% de pureza) de (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en forma de un aceite.

MS: m/e = 207,1 (M), [\alpha]_{D}^{20} = +42,57 (c = 1,05, etanol).

Ejemplo 12 (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

A una solución de 0,2 g (1,0 mmoles) de (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en 10 ml de DMF, se añadieron 297 mg (1,0 mmoles) de 1-benciloxi-4-(2-cloro-etoxi)-benceno y 0,2 g (1,5 mmoles) de K_{2}CO_{3} y la mezcla de reacción se calentó a 90ºC durante 16 horas. Después de añadir agua, la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 551 mg (100%, \sim80% de pureza) de (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en forma de un sólido.

MS: m/e = 434,5 (M+1).

Ejemplo 13 (3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

A una solución de 5,0 g (24 mmoles) de (3R,4R)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en 150 ml de DMF, se añadieron 7,4 g (24 mmoles) de 1-benciloxi-4-(2-cloro-etoxi)-benceno y 5,0 g (36 mmoles) de K_{2}CO_{3} y la mezcla de reacción se calentó a 90ºC durante 72 horas. Después de añadir agua, la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 10,5 g (24 mmoles, 100%) de (3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en forma de un sólido.

MS: m/e = 434,5 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = -27,5 (c = 0,95, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 14 (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

A una solución de 5,0 g (24 mmoles) de (3S,4S)-4-bencil-3,4-dihidroxi-piperidina en 150 ml de DMF, se añadieron 7,4 g (24 mmoles) de 1-benciloxi-4-(2-cloro-etoxi)-benceno y 5,0 g (36 mmoles) de K_{2}CO_{3} y la mezcla de reacción se calentó a 90ºC durante 72 horas. Después de añadir agua, la fase acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo y las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua, se secaron con MgSO_{4} y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose 10,9 g (cuant., \sim 95% de pureza) de (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en forma de un sólido.

MS: m/e = 434,5 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = +26,2 (c = 1,04, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 15 (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

Se disolvieron 550 mg (1,3 mmoles) de (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en 10 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 100 mg de Pd/C (10%) a la presión atmosférica a 50ºC. Después de 4 horas se consideró terminada la reacción y el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose el producto crudo. La purificación mediante cromatografía (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 9:1) proporcionó 249 mg (0,73 mmoles, 56%) de (3R,4R) y (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol en forma de un sólido.

MS: m/e = 344,4 (M+1).

Ejemplo 16 (3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

Se disolvieron 10,3 g (24 mmoles) de (3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en 300 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 1,1 mg de Pd/C (10%) a presión atmosférica y a 50ºC. Después de 4 horas se consideró terminada la reacción y el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose el producto crudo. La purificación mediante cromatografía (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 10:1) y cristalización con acetato de etilo y hexano, proporcionó a continuación 4,6 mg (10,6 mmoles, 45%) de (3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol en forma de un sólido.

MS: m/e = 344,4 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = -36,2 (c = 1,03, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo 17 (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

Se disolvieron 10,3 g (24 mmoles) de (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-benciloxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol, en 300 ml de EtOH y se hidrogenaron en presencia de 1,1 mg de Pd/C (10%) a la presión atmosférica y a 50ºC. Después de 4 horas se consideró terminada la reacción y el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se eliminó a presión reducida obteniéndose el producto crudo. La purificación mediante cromatografía (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 10:1) y cristalización con acetato de etilo y hexano, proporcionó a continuación 5,7 mg (16,6 mmoles, 69%) de (3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol en forma de un sólido.

MS: m/e = 344,3 (M+1), [\alpha]_{D}^{20} = +37,1 (c = 1,04, CH_{2}Cl_{2}).

Ejemplo A Formulación de comprimidos (granulación en húmedo)

Ingredientes	mg/comprimido

1. Compuesto activo	5	25	100	500
2. Lactosa anhidra DTG	125	105	30	150
3. Sta.Rx 1500	6	6	6	30
4. Celulosa microcristalina	30	30	30	150
5. Estearato de magnesio	1	1	1	1
\hskip2cm Total	167	167	167	831

Procedimiento de elaboración

1. Mezclar los productos 1, 2, 3 y 4 y granular con agua purificada.

2. Secar el granulado a 50ºC.

3. Pasar el granulado a través de un equipo de molienda adecuado.

4. Añadir el producto 5 y mezclar durante tres minutos, comprimir en una prensa adecuada.

Formulación de cápsulas

Ingredientes	mg/cápsula

1. Compuesto activo	5	25	100	500
2. Lactosa hidratada	159	123	148	- - -
3. Almidón de maíz	25	35	40	70
4. Talco	10	15	10	25
5. Estearato de magnesio	1	2	2	5
\hskip2cm Total	200	200	300	600

Procedimiento de elaboración

1. Mezclar los productos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 30 minutos.

2. Añadir los productos 4 y 5 y mezclar durante 3 minutos.

3. Llenar en una cápsula adecuada.

Claims

1. Un compuesto de fórmula:

11

sus enantiómeros R,R- y S,S- y sus sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables.

2. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es el

(4R,3R) y (4S,3S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol.

3. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es el

(3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol.

4. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es el

(3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol.

5. Un medicamento que contiene uno o más compuestos de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 4,

(4R,3R) y (4S,3S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol.

(3R,4R)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol y

(3S,4S)-4-bencil-1-[2-(4-hidroxi-fenoxi)-etil]-piperidin-3,4-diol

y excipientes farmacéuticamente inertes.

6. Un medicamento de acuerdo con la reivindicación 5 para el tratamiento de enfermedades que incluyen las formas agudas de neurodegeneración causadas por apoplejía o traumas cerebrales; formas crónicas de neurodegeneración elegidas entre la enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, o ALS (esclerosis lateral amiotrófica); neurodegeneración asociada con infecciones bacterianas o víricas, y enfermedades elegidas entre la esquizofrenia, ansiedad, depresión y dolor crónico/agudo.