ES2250627T3 - Ensayo de orina para reserva ovarica. - Google Patents
Ensayo de orina para reserva ovarica.Info
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Abstract
Un dispositivo de flujo lateral para indicar la reserva ovárica, que tiene una zona de aplicación para recibir una muestra de orina, una zona de marcación que contiene un marcador que se une a la FSH de la muestra, y una zona de detección donde se retiene el marcador unido a la FSH para dar una señal, en el que la señal dada por una muestra de una paciente con un nivel de FSH sérico menor que una concentración umbral es diferente de la señal dada por una muestra de una paciente con un nivel sérico de FSH igual o mayor a una concentración umbral y en el que dicha concentración umbral se encuentra entre 5 mUI/ml y 20 mUI/mL.
Description
Ensayo de orina para reserva ovárica.
Esta invención se refiere a ensayos para analizar
la reserva ovárica en las mujeres premenopáusicas.
La reducción de la reserva ovárica generalmente
refleja los procesos de reducción folicular y deterioro de la
calidad de los ovocitos, y una mujer con disminución de la reserva
ovárica tiene una probabilidad muy reducida de
concebir.
concebir.
Se sabe que el nivel de la hormona
foliculoestimulante (FSH) en la sangre medida el día 3 del ciclo
menstrual es un buen predictor de la reserva ovárica. Las pruebas
séricas son el método de referencia; sin embargo, no son adecuadas
para el uso doméstico y, por conveniencia, son preferibles las
pruebas de orina.
Hay pruebas de orina para la FSH disponibles
comercialmente (p. ej., la prueba Serono Maiaclone SFH, Amersham
Amerlex FSH) pero estas pruebas tienen varias desventajas.
Las pruebas Serono y Amersham requieren ambas la
recogida de muestras de orina en momentos establecidos (normalmente
dos muestras separadas 3 horas entre sí) y deben calibrarse para
tener en cuenta el volumen total de la muestra para dar un resultado
como cantidad de FSH por hora. La necesidad de medir el volumen de
orina (equivalente a dilución) y la incertidumbre acerca de la
precisión del intervalo de tiempo medido de 3 horas entre micciones
son ventajas claras.
Como alternativa para compensar el intervalo de
tiempo entre micciones, se dispone de pruebas que trabajan con
muestras de orina aleatorias. Sin embargo, estas pruebas requieren
mediciones de la concentración de creatinina de la muestra y
calculan el resultado como la relación entre la cantidad de FSH y la
cantidad de creatinina. En este caso, es una desventaja la necesidad
de medir la concentración de creatinina además de la concentración
de
FSH.
FSH.
Se dispone de pruebas que miden directamente los
niveles de FSH de la orina, pero tienen dificultades técnicas en
relación con las mediciones de la reserva ovárica. Las pruebas están
diseñadas para indicar el inicio de la menopausia e indican sí/no
basándose en un valor umbral de 25 mUI/ml (normalizada en
comparación con el Segundo criterio internacional de la OMS IS
80/552), pero los presentes inventores han encontrado que este valor
umbral es demasiado alto para medir la reserva ovárica.
Un objetivo de la presente invención es
proporcionar determinaciones que puedan distinguir entre una reserva
ovárica normal y una reducida basándose en muestras de orina. Otro
objetivo es proporcionar pruebas que permitan una medición directa
en la orina, que eviten los pasos de calibración complejos y que
sean adecuadas para el uso doméstico. En particular, un objetivo es
proporcionar pruebas que eviten el pretratamiento de las muestras,
la necesidad de efectuar mediciones precisas del tiempo, las
comparaciones con concentraciones normalizadas de creatinina o la
medición de volúmenes.
Sorprendentemente, se ha encontrado que es
posible proporcionar una prueba de orina para la reserva ovárica con
un resultado de sí/no que tenga una sensibilidad equivalente a los
métodos actuales de laboratorio basada en los niveles de FSH
séricos. Además, la prueba puede realizarse sin necesidad de ajustes
para contemplar el momento más adecuado, la dilución, la
concentración de creatinina, etc.
La invención proporciona un dispositivo de flujo
lateral para indicar la reserva ovárica. Este dispositivo tiene una
zona de aplicación para recibir una muestra de orina, una zona de
marcación que contiene un marcador que se une a la FSH de la muestra
y una zona de detección en la que se retiene el marcador unido a
FSH.
El marcador retenido en la zona de detección da
una señal y la señal difiere dependiendo de si los niveles de FSH
son menores o iguales/mayores que una concentración umbral dada. En
el dispositivo de la invención, esta concentración umbral representa
una concentración sérica de FSH de 5 mUI/ml a 20 mUI/ml,
preferiblemente de 8 mUI/ml a 12 mUI/ml y más preferiblemente
aproximadamente 10 mUI/ml.
Por lo tanto, en los dispositivos preferidos, la
señal dada para una muestra de pacientes con un nivel de FSH sérico
menor de 10 mUI/ml (reserva ovárica y calidad de óvulos
satisfactorias) es diferente de la señal dada para una muestra de
pacientes con un nivel de FSH sérico igual o mayor de 10 mUI/ml
(asociado a una reducción de la reserva ovárica y una mala calidad
de óvulos). Para medir la reserva ovárica, los estudios recientes
que investigan el nivel límite adecuado de los niveles de FSH
séricos sugieren el uso de un nivel inferior al utilizado
históricamente [por ej., Trout and Seifer (2000) Fertility and
Sterility 74(2): 355-7; Ahmed Ebbiary
et al. (1994) Human Reproduction 9:
245-52)]. Basándose en esos datos, el criterio
actual para las pruebas que utilizan los niveles de FSH para
predecir los problemas de fertilidad es utilizar un valor límite de
10 mUI/ml (Trout and Seifer, referido más arriba]. Así, mientras que
algunos trabajos han utilizado umbrales para los niveles basales de
FSH tan altos como 40 mUI/ml [por ej., Goldenberg et al.
(1973) American Journal of Obstetetrics and Gynecology
116:1003; Fauser et al. (1986) Geburtsh Frauenheilkd
46: 735], los trabajos más recientes con los criterios IRP de la OMS
disponibles en la actualidad y la tecnología inmunométrica de
determinación se centran en valores inferiores y las cifras de
10-15 mUI/ml tienen ahora un respaldo amplio como
umbrales de disminución de la reserva ovárica [por ej. Seifer et
al. (1996) Fertility and Sterility 66:
593-8; Scott et al. (1989) Fertility and
Sterility 51: 651-4; Torner et al. (1991)
Fertility and Sterility 55: 784-91; Ahmed
Ebbiary et al., mencionado más arriba]. Oosterhuis et
al. (1997) Journal of clinical ligand assay 20(4):
316-324 y Oosterhuis et al. (1990)
Fertility and Sterility 70(3): 544-548
describen un método para medir la reserva ovárica en el que se mide
la FSH en la orina y sérica en un analizador de inmunoanálisis AxSYM
que implica la medición de la creatinina en todas las muestras de
orina para corregir por la
dilución.
dilución.
En la discusión siguiente, una muestra de orina
de una paciente que tiene un nivel sérico de FSH igual a la
concentración umbral se denomina "muestra umbral de orina".
Los principios y la tecnología de los
dispositivos de flujo lateral son bien conocidos, pero más abajo se
proporcionan detalles adicionales de los aspectos específicos de la
invención.
La zona de aplicación del dispositivo es adecuada
para recibir una muestra de orina. Su composición típica es un
material absorbente como el papel secante.
La zona de marcación contiene el marcador que se
une a cualquier FSH de la muestra de orina. Por razones de
especificidad, el marcador es típicamente un anticuerpo. Para
facilitar la detección, el marcador es preferiblemente visible con
ojo desnudo, por ejemplo, se marca con un marcador fluorescente o,
preferiblemente, un marcador coloreado como oro coloidal conjugado
que se visualiza como un color rosado.
La zona de detección retiene la FSH a la cual se
ha unido el marcador. Esto se logrará típicamente utilizando un
reactivo de captura inmovilizado, como un anticuerpo. Si el reactivo
de captura y el marcador son ambos anticuerpos, reconocerán
diferentes epítopos en la hormona. (por ejemplo, en subunidades
diferentes). Esto permite la formación de un "sándwich"
comprendido por
anticuerpo-FSH-anticuerpo.
La zona de detección está aguas abajo de la zona
de aplicación, estando la zona de marcación típicamente situada
entre ambas. Por lo tanto, una muestra de orina migra desde la zona
de aplicación a la zona de marcación, donde cualquier FSH de la
muestra se une al marcador. Los complejos
FSH-marcador siguen migrando dentro de la zona de
detección junto con el exceso de marcador. Cuando el complejo
FSH-marcador encuentra el reactivo de captura, se
retiene el complejo mientras que la muestra y el exceso de marcador
siguen migrando. Al aumentar los niveles de FSH de la muestra, la
cantidad de marcador (en la forma del complejo
FSH-marcador) retenida en la zona de detección
aumenta proporcionalmente.
Una característica clave del dispositivo de la
invención es la capacidad de distinguir entre dos muestras conforme
a la concentración umbral. Esto puede lograrse de varias
maneras.
Un tipo de dispositivo incluye una zona de
referencia que incluye una señal de la intensidad fija contra la
cual es posible comparar la cantidad de marcador retenida en la zona
de detección -cuando la señal de la zona de detección es igual a la
señal de la zona de referencia, la muestra es una muestra de orina
umbral; cuando la señal de la zona de detección es menos intensa que
la zona de referencia, la muestra contiene menos FSH que la muestra
de orina umbral; cuando la señal de la zona de detección es más
intensa que la zona de referencia, la muestra contiene más FSH que
la muestra de orina umbral. Por lo tanto, en un dispositivo
preferido, la zona de referencia tiene una señal que es la misma que
la señal dada en la zona de detección para una muestra de una
paciente con un nivel sérico de FSH de 10 mUI/ml. Es posible
preparar una zona de referencia adecuada y calibrarse sin
dificultad. Para este tipo de dispositivo, habrá generalmente
marcador en exceso con respecto al FSH de la muestra de orina y la
zona de referencia puede estar aguas arriba o, preferiblemente,
aguas abajo de la zona de detección. Es evidente que la señal de la
zona de referencia será del mismo tipo que la señal de la zona de
detección, es decir, típicamente ambas serán visibles a ojo desnudo,
por ejemplo, utilizarán el mismo marcador. Una zona de referencia
preferida en un dispositivo de este tipo comprende una proteína
inmovilizada (por ejemplo, albúmina sérica bovina) que está marcada
con oro
coloidal.
coloidal.
En otro dispositivo, la zona de referencia está
aguas abajo de la zona de detección e incluye un reactivo que
captura el marcador (por ejemplo, un anticuerpo inmovilizado
anti-marcador). El marcador que fluye a través del
dispositivo no está presente en exceso sino que está a una
concentración tal que el 50% del mismo está unido a una muestra que
tiene FSH a la concentración umbral. Por lo tanto, en una muestra de
orina umbral, el 50% del marcador será retenido en la zona de
detección y el 50% en la zona de referencia. Si el nivel de FSH de
la muestra es mayor que una muestra de orina umbral, menos del 50%
del marcador alcanzará la zona de referencia y la zona de detección
dará una señal más intensa que la zona de referencia; en cambio, si
el nivel de FSH de la muestra es menor que en una muestra de orina
umbral, se retendrá menos del 50% del marcador en la zona de
detección y la zona de referencia dará una señal más intensa que la
zona de detección.
En otro dispositivo que funciona de acuerdo con
principios similares, la zona de referencia está aguas abajo de la
zona de detección e incluye una cantidad limitante de un reactivo
que captura marcador (por ejemplo, un anticuerpo antimarcador
inmovilizado). El reactivo está presente a un nivel tal que retiene
la misma cantidad de marcador que se uniría a la zona de detección
para una muestra de orina umbral, mientras que el exceso de marcador
continúa migrando más allá de la zona de referencia.
Por lo tanto, en estos tres tipos de dispositivo,
se utiliza una comparación entre la zona de detección y la zona de
referencia para comparar la muestra con la concentración umbral. La
relación de unión de detección:referencia puede determinarse
preferiblemente a ojo desnudo. Se prefiere la yuxtaposición estrecha
de las zonas de detección y referencia para facilitar la comparación
visual de las intensidades de señal en las dos zonas. Esto es típico
de, por ejemplo, los kits predictores de la ovulación.
En un cuarto tipo de dispositivo, no se necesita
zona de referencia, sino que se configura de modo tal que da una
respuesta esencialmente de tipo sí/no, es decir, no da señal por
debajo de una concentración umbral pero en el umbral o por encima
del umbral da señal.
En un quinto tipo de dispositivo no se requiere
zona de referencia, sino que se utiliza una referencia externa que
corresponde a la concentración umbral. Esta puede tomar varias
formas, por ejemplo, una tarjeta impresa con la cual se compara la
señal de la zona de detección o una máquina lectora que compara un
valor absoluto medido en la zona de detección (por ejemplo, una
señal colorimétrica) contra un valor de referencia almacenado en
la
máquina.
máquina.
En algunas realizaciones de la invención, el
dispositivo incluye una zona de control aguas abajo de la zona de
detección. Esta zona se utilizará generalmente para capturar el
exceso de marcador que pasa a través de las zonas de detección y/o
referencia (por ejemplo, utilizando un anticuerpo antimarcador
inmovilizado). Cuando se retiene el marcador en la zona de control,
este confirma que se han producido tanto la movilización del
marcador como la migración a través del dispositivo. Se apreciará
que esta función pueda lograrse en la zona de referencia.
Las zonas de detección, referencia y control
preferiblemente se forman sobre nitrocelulosa.
La migración desde la zona de aplicación a la
zona de detección generalmente será facilitada por una mecha aguas
abajo de la zona de detección para facilitar el movimiento capilar.
Esta mecha está constituida típicamente por material absorbente como
papel secante o cromatrográfico.
El dispositivo de la invención puede producirse
de forma simple y económica, convenientemente en la forma de una
varilla indicadora. Además puede utilizarse muy fácilmente, por
ejemplo por una usuaria en su domicilio. Por lo tanto, la invención
proporciona un dispositivo que puede utilizarse domésticamente como
detector de la reserva ovárica.
La invención también proporciona un proceso para
medir la reserva ovárica, que comprende los siguientes pasos: (a)
obtener una muestra de orina de una mujer; (b) poner en contacto la
muestra con un marcador que se une a cualquier FSH de la muestra;
(c) separar el marcador unido a FSH; (d) detectar una señal asociada
al marcador separado del paso (c); y (e) comparar la señal detectada
en el paso (d) con la señal de referencia que corresponde a la señal
dada por una muestra de orina de una paciente con un nivel sérico de
FSH igual a una concentración umbral, en la cual dicha concentración
umbral se encuentra entre 5 mUI/ml y 20 mUI/ml. Este proceso
preferiblemente utiliza un dispositivo de la invención.
La muestra de orina aplicada al dispositivo
normalmente será obtenida el día 3 \pm 1 del ciclo menstrual (una
muestra del "día 3"). Se prefieren las muestras del día 3.
[Hansen et al. (1997) Evaluating ovarian reserve: follicle
stimulating hormone and oestradiol variability during cicle days
2-5. Hum. Reprod. 12:
486-9].
Para lograr la aceptabilidad diagnóstica, la
medición de la FSH urinaria debe minimizar las fluctuaciones de
concentración que se producen como resultado de las variaciones de
la ingesta de líquido y el tiempo transcurrido entre la última
micción y la toma de la muestra. Se ha encontrado que las muestras
de la primera de orina de la mañana son ventajosas para medir los
niveles de FSH ya que (a) hay el tiempo transcurrido desde la última
micción es más uniforme, típicamente 6 a 8 horas y (b) durante el
sueño no se produce ingesta de liquido. Al minimizar la variación
del tiempo y la ingesta de líquido, y proporcionar efectivamente una
muestra integrada durante un periodo de tiempo más prolongado que
las 3 horas utilizadas por las pruebas del estado anterior de la
técnica, se evita la necesidad de compensar por volumen o por
concentración de creatinina.
Por consiguiente, la muestra de orina aplicada al
dispositivo es preferiblemente una muestra de la primera orina de la
mañana.
El término "primera orina de la mañana"
significa la primera micción después de un periodo normal de sueño
(por ejemplo, 6 a 8 horas). Se ha encontrado que estas muestras
presentan una buena consistencia de las concentraciones de FSH y una
buena correlación con los niveles séricos de FSH.
\newpage
El uso de muestras de la primera orina de la
mañana permite la medición directa de los niveles de FSH, sin
tratamiento previo de la muestra, sin compensar por la dilución (o
concentración) de la orina ajustando el resultado de acuerdo con la
concentración de creatinina y sin necesidad de medir el volumen de
orina para presentar el resultado como cantidad de FSH por hora.
Actualmente no hay pruebas para la medición
directa de los niveles de FSH en la orina que sean adecuadas para
determinar la reserva ovárica. Para otras hormonas femeninas (por
ejemplo hCG, LH), hay pruebas disponibles que utilizan la medición
directa de la orina sin necesidad de medir el volumen de orina. Sin
embargo, en el caso de las pruebas de hCG, la cantidad de hormona
presente en las muestras positivas es alta y la interpretación de
los resultados no es afectada significativamente por las variaciones
relativamente grandes de la concentración de hormonas. Para las
pruebas de LH, el resultado se interpreta en relación a cambio
diario importante de la concentración y no con respecto a una
concentración particular de la hormona. Ninguna de estas pruebas
tiene los mismos problemas que la FSH en la necesidad de minimizar
las fluctuaciones de la ingesta variable de líquido y la variación
en el momento de obtención de la muestra ya que sus niveles
decisivos para el diagnóstico son mayores tanto en términos
absolutos como en relación con la concentración de hormona presente
en las condiciones de prueba negativa. El nivel decisivo para el
diagnóstico para las pruebas de FSH, es relativamente bajo en
comparación con las concentraciones de las otras hormonas que se
miden en la orina y, por lo tanto, hay una mayor necesidad de lograr
la consistencia de la muestra, tanto entre individuos como
intraindividual.
Se comprenderá que el término "anticuerpo"
puede incluir anticuerpos policlonales y monoclonales, además de
fragmentos de anticuerpos (p. ej., F(ab)_{2}, Fc,
etc.), Fvs de cadena única, etc., siempre que mantenga la necesaria
actividad de enmascaramiento y especificidad biológica.
La figura 1 muestra la organización de las tiras
en un dispositivo de la invención. La figura 2 muestra una vista en
planta de las tiras agrupadas y la figura 3 muestra lo mismo cuando
está colocado dentro de una carcasa.
La tira de prueba (1) de la figura 2 se realizó
sobre una hoja protectora de plástico (10) con dimensiones de 8 mm x
59 mm, como se ve en la figura 1. Sobre la hoja protectora (10) se
colocó una tira de membrana de nitrocelulosa (20) que mide 8 mm x 25
mm (Millipore Corporation, Código del producto HF135). Una mecha
(30) superior que mide 8 mm x 18 mm, formada a partir material de
grado papel secante (Ahlstrom Filtration, Código del producto 222),
se colocó sobre la nitrocelulosa en un extremo, con una
superposición parcial. En el otro extremo, se colocó una almohadilla
de poliéster (40) que mide 8 mm x 13 mm sobre la nitrocelulosa (20)
y una pieza de papel absorbente (50) que mide 8 mm x 14 mm sobre la
almohadilla (40). El papel (50) y la almohadilla (40) se
superponen
en 6 mm.
en 6 mm.
El papel absorbente (50) fue material de grado
papel secante (Ahlstrom Filtration, Código del producto 222; 14 mm x
8 mm) que había sido embebido previamente en 250 mM Tris, 0,5% Tween
20, pH 8,2 y luego seca-
do.
do.
La almohadilla de poliéster (40) era una
almohadilla de conjugado de poliéster (Ahlstrom Filtration, Código
de producto 6615 de Reemay; 13 mm x 8 mm) que fue previamente
embebida en 250 mM Tris, 0,5% Tween 20, pH 8,2 y luego secada. Un
extremo (45) se pulverizó con oro coloidal (40 nm) conjugado con un
anticuerpo monoclonal murino anti-\alpha FSH (Medix
Biochemica, Código de producto 6601). Se aplicaron 3 \muL de
conjugado de oro DO10 por tira de prueba. Para medir la
concentración de partículas de oro en una muestra dada de reactivo,
se diluye el conjugado de prueba para dar una DO_{520\ nm} de
\sim1,0 y esto se multiplica por el factor de dilución para dar un
equivalente de DO para la muestra del reactivo original.
El extremo (45) que contiene el anticuerpo no es
cubierto por el papel (50) y se superpone 1 mm con la nitrocelulosa
(20).
La tira de nitrocelulosa (20) contiene tres
bandas de anticuerpo inmovilizado. La primera bandas (21) está 11 mm
aguas abajo del área (45) y consiste en FSH monoclonal
anti-\beta (Medix Biochemica, Código del producto
6602), aplicada por bandeado (1 \muL/cm DO objetivo 3,5). La
segunda banda (22) está 14 mm aguas abajo del área (45) y consiste
en oro coloidal (40 nm) conjugado con BSA, aplicado por bandeado (1
\muL/cm DO objetivo 3,5).La tercera banda (23) está 17 mm aguas
abajo del área (45) y consiste en anticuerpo de cabra antirratón
(Jackson Immunoresearch Labs Inc., Código del producto
115-005-062) aplicado por bandeado
(1 \muL/cm de 1,5 mg/ml de anticuerpo). De este modo, el
dispositivo tiene un exceso de marcador libre.
La tira ensamblada (1) se montó en una carcasa
plástica (60; casete de 8 mm de Advanced Microdevices) que tiene una
ventana (65) a través de la cual puede aplicarse una muestra de
orina al papel absorbente (50) y una ventana (68) a través de la
cual son visibles las bandas (21), (22) y (23) (Figuras 1 y 3).
Por lo tanto, durante el uso de este dispositivo,
se aplica una muestra de orina al papel absorbente (50). Comienza el
flujo lateral a lo largo del dispositivo (10) y la muestra pasa
dentro de la almohadilla (40) y a través del área (45), donde
cualquier FSH de la muestra se une al anti-FSH. El
flujo continúa dentro de la tira de nitrocelulosa (20). En la banda
(21), se retiene el complejo anticuerpo-FSH, pero el
anticuerpo libre sigue hasta la banda (23), donde se une y
retiene.
Durante el diseño inicial, el dispositivo (10) no
incluía la banda (22). El día 3 se aplicaron a los dispositivos las
muestras de la primera orina de la mañana de pacientes con un nivel
sérico de FSH de 10 mUI/ml y se apuntó la intensidad de color de la
banda (21). Esta intensidad de color se replica en la banda (22).
Durante el uso, por lo tanto, la comparación de la intensidad de
color de las bandas (21) y (22) indica el nivel de FSH en la muestra
de orina relativa al estándar de 10 mUI/ml, si la intensidad de la
banda (21) es mayor o igual que la intensidad de la banda (22), el
resultado se considera positivo, es decir una concentración de FSH
en la orina que corresponde al nivel sérico de FSH de 10 mUI/l o
mayor.
Para más de 100 pacientes, se obtuvieron una
muestra de la primera de orina de la mañana y una muestra de sangre
el día 3 del ciclo menstrual. Se midieron los niveles de FSHA de las
muestras de sangre utilizando las pruebas Abbott Imx^{TM} o Chiron
ACS180 y se aplicaron las muestras de orina (160 \mul) al
dispositivo descrito más arriba. Los resultados de la tira de prueba
de orina se leyeron después de 20 minutos de forma
"enmascarada", es decir, sin conocimiento de los resultados de
las pruebas séricas.
Los resultados de las pruebas de orina y séricas
se presentan en la tabla siguiente, en la cual se han ordenado las
pacientes en orden descendente basado en los niveles de FSH
séricos.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
Los resultados obtenidos utilizando la tira de
prueba de orina son particularmente interesantes. No se detectaron
falsos negativos (es decir, cuando los niveles de FSH séricos fueron
\geq 10 mUI/ml, la tira de prueba siempre dio un resultado
positivo) y el nivel de falsos positivos fue muy bajo (cuando los
niveles de FSH sérico fueron < 10 mUI/ml, sólo se dieron 7/88
resultados positivos (8%)). Es importante el hecho de que pudieran
distinguirse las muestras de orina que corresponden a niveles de FSH
séricos de 9,9 mUI/ml y 10 mUI/ml.
Por lo tanto, el dispositivo de la invención
muestra una sensibilidad del 100%, una especificidad del 92% y una
precisión del 94,4%.
Se comprenderá que la invención se ha descrito
sólo mediante el ejemplo y que es posible hacer modificaciones
manteniéndose aún dentro del alcance de las reivindicaciones.
Claims (12)
1. Un dispositivo de flujo lateral para indicar
la reserva ovárica, que tiene una zona de aplicación para recibir
una muestra de orina, una zona de marcación que contiene un marcador
que se une a la FSH de la muestra, y una zona de detección donde se
retiene el marcador unido a la FSH para dar una señal, en el que la
señal dada por una muestra de una paciente con un nivel de FSH
sérico menor que una concentración umbral es diferente de la señal
dada por una muestra de una paciente con un nivel sérico de FSH
igual o mayor a una concentración umbral y en el que dicha
concentración umbral se encuentra entre 5 mUI/ml y 20 mUI/mL.
2. El dispositivo de la reivindicación 1, en el
cual el dispositivo tiene una zona de referencia que da una señal
que tiene la misma intensidad que la señal dada en la zona de
detección para una muestra de una paciente que tiene un nivel de FSH
sérico igual a la concentración umbral.
3. El dispositivo de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que la concentración umbral es 10
mUI/ml de FSH en el suero.
4. El dispositivo de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que el marcador es un anticuerpo
marcado.
5. El dispositivo de la reivindicación 4, en el
que el anticuerpo está marcado con oro coloidal.
6. El dispositivo de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que la zona de detección
comprende un anticuerpo inmovilizado.
7. El dispositivo de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que el dispositivo tiene una zona
de control aguas abajo de la zona de detección que retiene el
marcador y pasa a través de la zona de detección.
8. El dispositivo de la reivindicación 7, en el
que la zona de control y la zona de referencia son la misma
zona.
9. El dispositivo de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que el anticuerpo que se utiliza
es un anticuerpo monoclonal.
10. Un procedimiento para medir la reserva
ovárica que comprende los siguientes pasos: (a) poner en contacto
una muestra de la primera orina de la mañana obtenida de una mujer
con un marcador que se une a cualquier FSH de la muestra; (b)
separar el marcador unido a FSH; (c) detectar una señal asociada al
marcador separado del paso (b); y (d) comparar la señal detectada en
el paso (c) con una señal de referencia que corresponde a la señal
dada por una muestra de orina de una paciente con un nivel sérico de
FSH igual a una concentración umbral, en el que dicha concentración
umbral está entre 5 mUI/ml y 20 mUI/ml, y en el que el proceso
utiliza un dispositivo de cualquiera de las reivindicaciones 1 a
9.
11. El procedimiento de la reivindicación 10, en
el que la concentración umbral es 10 mUI/ml en el suero.
12. El procedimiento de la reivindicación 10 o la
reivindicación 11, en el que la muestra de orina es una muestra de
orina del día 3.
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