ES2241364T5 - Tratamiento de un material proteico. - Google Patents
Tratamiento de un material proteico. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2241364T5 ES2241364T5 ES99969650T ES99969650T ES2241364T5 ES 2241364 T5 ES2241364 T5 ES 2241364T5 ES 99969650 T ES99969650 T ES 99969650T ES 99969650 T ES99969650 T ES 99969650T ES 2241364 T5 ES2241364 T5 ES 2241364T5
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- protein
- milk
- adsorption resin
- treatment
- cow
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 82
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 82
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 64
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 64
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 55
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 46
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims abstract description 15
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 14
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- -1 acrylic compound Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 claims abstract description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 77
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 47
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 45
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims description 28
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 claims description 19
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 13
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 13
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 238000005352 clarification Methods 0.000 claims description 4
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 239000000428 dust Substances 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims 1
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 35
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 35
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 35
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 27
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 21
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 21
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 21
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 16
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 15
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 14
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 13
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 12
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 6
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 6
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 5
- 108020001775 protein parts Proteins 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 3
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 235000019543 dairy drink Nutrition 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000001904 diabetogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000020124 milk-based beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000006470 autoimmune attack Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940071162 caseinate Drugs 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L disodium selenite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Se]([O-])=O BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004222 ferrous gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000013924 ferrous gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001645 ferrous gluconate Drugs 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 239000002933 immunoreactive insulin Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 1
- VRIVJOXICYMTAG-IYEMJOQQSA-L iron(ii) gluconate Chemical compound [Fe+2].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O VRIVJOXICYMTAG-IYEMJOQQSA-L 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960002635 potassium citrate Drugs 0.000 description 1
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K potassium citrate (anhydrous) Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011082 potassium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000007065 protein hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229940108461 rennet Drugs 0.000 description 1
- 108010058314 rennet Proteins 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011781 sodium selenite Substances 0.000 description 1
- 235000015921 sodium selenite Nutrition 0.000 description 1
- 229960001471 sodium selenite Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 238000012784 weak cation exchange Methods 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C21/00—Whey; Whey preparations
- A23C21/04—Whey; Whey preparations containing non-milk components as source of fats or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C7/00—Other dairy technology
- A23C7/04—Removing unwanted substances other than lactose or milk proteins from milk
- A23C7/043—Removing unwanted substances other than lactose or milk proteins from milk using chemicals in liquid or solid state, e.g. flocculating, adsorbing or extracting agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
- A23C9/1425—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by ultrafiltration, microfiltration or diafiltration of whey, e.g. treatment of the UF permeate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/148—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by molecular sieve or gel filtration or chromatographic treatment
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Un método de separación de insulina bovina desde un material proteínico líquido libre de grasa proveniente de leche de vaca, caracterizado por contacto del material proteínico líquido libre de grasa proveniente de leche de vaca, material que tiene un pH 2 a 8, a una temperatura de menos de 65°C, con una resina de adsorción microporosa a base de estireno o a base de compuesto acrílico, donde la relación de pesos del material proteínico que se va a tratar a resina de adsorción es como máximo 100:1, y combinación con el citado tratamiento de resina de al menos un tratamiento de ultra- y dia-filtración del material proteínoso, y si es necesario, concentración del material líquido así obtenido hasta un concentrado de proteína y secado opcional hasta polvo.
Description
Tratamiento de un material proteico.
La invención se refiere a un método de elaborado
de material proteínico, más exactamente a un método de separación de
insulina bovina de un material proteínico procedente de leche de
vaca. La invención se refiere también a un material proteínico
substancialmente libre de insulina bovina producido por el citado
método y a su utilización como componente proteínico de
formulaciones para niños pequeños o para otra preparación nutritiva
especial o como materia prima para leche de consumo, otras bebidas
lácteas o diferentes preparaciones lácteas. En la producción de esos
productos, se puede utilizar, como componente proteína, el material
proteínico libre de grasa, substancialmente libre de insulina
bovina, procedente de leche de vaca producido por el citado
método.
El material proteínico libre de grasa,
substancialmente libre de insulina bovina, preferiblemente el suero
procedente de leche de vaca y obtenido según la invención, es un
componente proteínico muy adecuado en los anteriores productos, ya
que el procedimiento de la invención no altera substancialmente el
sabor del producto.
La diabetes mellitus dependiente de
insulina (IDDM) es una enfermedad causada por la destrucción de las
células beta que producen insulina en los islotes de Langerhans del
páncreas, mientras que otras células de los islotes permanecen
intactas (Castano L. y Eisenbarth GS. Annu. Rev. Immunol, 8
(1990) 647-79).
Se cree que en el riesgo de que los niños
contraigan la IDDM intervienen tanto factores genéticos como
medioambientales. El factor genético es importante, pero no
suficiente, para explicar el desarrollo de IDDM. El riesgo de
contraer IDDM en la vida es solo de un 30 a un 50% en uno de dos
gemelos monozigóticos, si el otro tiene IDDM. Solamente el 10% de
nuevos casos de IDDM ocurren en familias que tienen IDDM, y el 90%
de nuevos casos son diagnosticados en pacientes sin historia
familiar de IDDM. En otras palabras, los factores del entorno pueden
tener incluso una importancia más significativa que los factores
genéticos en el desarrollo de IDDM.
Varios estudios epidemiológicos muestran que la
exposición a proteínas de leche de vaca en la primera infancia
incrementa el riesgo de contraer IDDM (Gerstein H., Diabetes
Care 17 (1994) 13-19) Se han utilizado
observaciones epidemiológicas para presentar varias hipótesis
concernientes a los mecanismos en los que las proteínas de leche de
vaca podrían actuar como factores diabetogénicos. Uno de las últimas
es una hipótesis según la cual la insulina de la leche de vaca puede
causar una respuesta inmune que se dirige erróneamente contra la
producción de la propia insulina del niño (Vaarala, O., Paronen, J.,
Otonkoski, T., \ring{A}kerblom, H.K., Scand. J. Immunol. 47
(1998) 131-135).
La insulina heteróloga administrada por vía
oral, ligeramente diferente de la insulina autóloga, puede
trastornar la tolerancia inmunológica frente a células beta. La
formación de linfocitos que identifican insulina puede ser nociva en
personas que tienen susceptibilidad hereditaria a IDDM, y la
activación de tal población de linfocitos puede más adelante en la
vida dar lugar a un ataque autoinmune frente a células que producen
insulina. Los autores de la presente invención han demostrado que la
administración de una formulación para niños induce la producción de
anticuerpos para insulina bovina (Vaarala, O., Paronen, J.
Otonkoski, T. \ring{A}kerblom, H.K., Scand. J. Immunol. 47
(1998) 131-135). Estos anticuerpos reaccionan
cruzadamente con insulina humana. Dado que la presencia de
auto-anticuerpos de insulina (IAA) precede y predice
la aparición de IDDM, la inmunización a insulina causada por
productos lácteos puede ser nociva e incrementar el riesgo de
contraer IDDM. Según esto, los productos lácteos que no contienen
insulina bovina inmuno-reactiva pueden considerarse
nutrientes no-diabetogénicos.
Siendo el factor activante de la
auto-inmunización la insulina bovina, que está
presente en pequeñas cantidades en la leche de vaca, sería de
crucial importancia eliminarla de las formulaciones para niños
pequeños con el fin de evitar la aparición de IDDM en niños. Según
esto, existe la necesidad de productos comerciales de leche de vaca
y productos basados en leche de vaca que no contengan la citada
insulina bovina inmunoreactiva. Esto se refiere en particular a
formulaciones para niños pequeños, que son los primeros productos
basados en leche de vaca que consumen los niños pequeños. Además, se
refiere a otras preparaciones nutritivas especiales y diferentes
bebidas lácteas y productos lácteos tales como helados, yogures y
queso.
Sería deseable, además, que la parte de proteína
utilizada en los productos no cambiara substancialmente su sabor
familiar.
Los autores de la presente invención han
demostrado previamente que la insulina bovina puede separarse de un
material proteínico sin grasa proveniente de leche de vaca, tal como
suero o leche desnatada, mediante intercambio catiónico seguido de
hidrólisis opcional y, después de la hidrólisis, tratamiento
cromatográfico opcional, que puede ser tratamiento de adsorción en
resina, por ejemplo (Solicitud de Patente finesa 971872). La Patente
finesa 94089 de los autores de la presente invención también
describe el tratamiento de adsorción en resina de un hidrolizado de
proteína.
Ahora se ha encontrado, sorprendentemente, que
la insulina bovina se puede separar de un material proteínico
líquido sin grasa proveniente de leche de vaca, tal como suero o
leche desnatada, de forma directa por medio de tratamiento de
adsorción en resina. Este nuevo método separa la insulina bovina del
citado material proteínico de forma más completa y económica que el
método anteriormente utilizado.
\newpage
El nuevo método no requiere ni incluso
hidrólisis de la proteína. Esto evita los costes extra debidos a la
etapa de hidrólisis y el cambio de sabor causado por los productos
de hidrólisis. Los productos de hidrólisis obtenidos son proteínas
escindidas que cambian el familiar sabor del producto que se
produce. Por ejemplo la leche, cuya parte proteínica se reemplaza al
menos parcialmente por suero, que se hidroliza y por tanto contiene
proteínas escindidas, no sabe lo mismo que la leche. Por el
contrario, la leche, cuya parte proteínica se reemplaza al menos
parcialmente por suero tratado tratado por el método de la invención
y que contiene las proteínas completas, tiene substancialmente el
mismo sabor que la leche.
La leche de vaca contiene habitualmente pequeñas
cantidades de insulina bovina. El contenido varia dependiendo del
método de ensayo, pero ha sido detectado un contenido de
aproximadamente 1 ng/ml por ejemplo por el método ELISA (Enzime
Linked Inmuno Sorbent Assay) y el método RIA (Radio inmuno
Assay).
En esta invención, la insulina bovina se ensayó
en muestras empleando el método RIA. La solución de muestra se
liofilizó, se disolvió en una solución concentrada y se ensayó por
RIA. El método ELISA se utilizó como un segundo método
independiente, donde los anticuerpos utilizados no eran los mismos
que en el ensayo RIA. El análisis por RIA ha de realizarse antes del
tratamiento por calor para obtener resultados fiables. Los métodos
RIA y ELISA dieron resultados del mismo orden.
La cromatografía de líquidos y una columna de
fase inversa (Kroeff y col. J. Chromatogr. 461 (1989)
45-61; Poll y Harding, J. Chromatogr. 539
(1991) 37-45; Cox, J. Chromatogr. 599 (1992)
195-203; Welinder, J. Chromatogr. 542 (1991)
83-99), filtración de gel o una columna de
intercambio aniónico (WO 90/00176 y WO 90/00177) o una columna de
intercambio de catión débil (DE 3511270 A1 y GB 2173503 A) han sido
habitualmente empleadas en la purificación de insulina a partir de
los licores de producción y extracción. Ninguna de las publicaciones
ha discutido en modo alguno la separación directa de insulina bovina
de leche desnatada o suero, excepto en la Solicitud de Patente
Finesa 971872 de los autores de la presente invención. Como tal, la
cromatografía de fase inversa o cromatografía de filtración por gel
no es adecuada para tratamiento de la leche ya que la leche tratada
deberá ser adecuada para productos alimenticios y de precio
razonable.
La insulina se puede inactivar fácilmente
inmunológicamente con tratamiento por calor. Por ejemplo se puede
inactivar por pasteurización (72ºC) y tratamiento ultra elevado
(tratamiento UHT, 135-140ºC) la mayor parte de la
insulina a una forma no detectable por RIA. Sin embargo, hay que
señalar que los niños pequeños a quienes se les ha dado
preparaciones con estas formulaciones han alcanzado inmunización a
insulina bovina a través de las formulaciones (Vaarala, O., Paronen,
J., Otonkoski, T. \ring{A}kerblom, H.K., Scand. J. Inmunol. 47
(1998) 131-135), en cuya producción la mayor parte
de la insulina ha pasado a no-detectable por el
ensayo RIA en la etapa de calentamiento.
El solicitante ha descubierto ahora cómo separar
la insulina bovina más de forma más eficaz que la anterior a partir
de un material proteínico líquido libre de grasa proveniente de
leche de vaca. En este caso, se obtiene una composición de proteína,
con costes razonables, la cual deriva de leche de vaca y es adecuada
para productos alimenticios y está substancialmente libre de
insulina bovina, siendo por tanto adecuada para utilizarla como la
parte proteínica de una formulación para niños pequeños en
particular, pero también en otras preparaciones nutritivas
especiales, o como materia prima en leche de consumo, otras bebidas
lácteas y varios productos lácteos tales como helados, yogur o
queso, y que no cambia ese sabor que es tan familiar.
El método de la invención para separar la
insulina bovina desde un material proteínico líquido libre de grasa
que proviene de leche de vaca se caracteriza por:
contacto del material proteínico líquido libre
de grasa que proviene de leche de vaca, material que tiene un pH de
2 a 8, a una temperatura por debajo de 65ºC, con una resina de
adsorción, siendo la relación en peso del material proteínico para
ser tratado a resina de adsorción de 100:1 como máximo,
combinación del tratamiento con la citada resina
con al menos un tratamiento de ultra- y
dia-filtración del material proteínico, y
si es necesario, concentración del material
líquido así obtenido hasta un concentrado de proteína y
opcionalmente secado hasta polvo.
La separación de grasa y caseína de la leche da
por resultado un suero que contiene proteínas del suero. De la
proteína total de la leche, aproximadamente un 20 por ciento es
proteína de suero y el resto caseína. El suero obtenido en la
producción del queso se conoce como suero del queso y el suero
obtenido en la producción de caseína es a su vez conocido como suero
de caseína.
La mejor utilización de la invención es para
tratamiento de suero. El suero utilizado en la invención puede ser
cualquier suero proveniente de la leche de vaca, tal como suero de
queso, suero de caseína de cuajo, suero de caseína ácido o suero de
caseína agrio. El suero es, preferiblemente suero de queso.
El material proteínico que se origina de la
leche de vaca puede ser suero ultra- y dia-filtrado,
es decir, un concentrado de proteína de suero. En este caso, el
volumen de líquido que se va a tratar con resina es más pequeño y el
grado de separación de insulina bovina es aproximadamente el mismo
que en el tratamiento de suero.
\newpage
Además de los anteriores, en la invención se
puede utilizar leche desnatada o una solución acuosa hecha de leche
en polvo sin grasa o una solución acuosa hecha de caseína de leche,
es decir, una solución de caseína, como el material proteínico libre
de grasa proveniente de leche de vaca. Sin embargo, en este caso el
grado de separación de insulina bovina no es del mismo orden que en
el tratamiento de suero.
De acuerdo con la invención, se separa la
insulina bovina desde un material proteínico libre de grasa que
deriva de leche de vaca, preferiblemente de suero o un concentrado
de proteína de suero, por contacto del material a tratar con una
resina de adsorción. Una resina de adsorción a base de estireno o a
base de compuesto acrílico, que es preferiblemente microporosa, es
la resina de adsorción a la que se une la insulina bovina. Las
resinas de adsorción adecuadas incluyen Dowex XUS 40285,00 (tamaño
de poro de aproximadamente 50 \ring{A}; fabricante: Dow Inc.
Alemania) y Amberlite XAD 7 (tamaño de poro entre 450 y 500
\ring{A}; fabricante: Rhm & Haas, Francia).
El tratamiento con resina de adsorción se puede
llevar a cabo ya sea haciendo pasar el material proteínico que se va
a tratar a través de una columna rellena con una resina de
adsorción, o por contacto del citado material proteínico con una
resina de adsorción en un recipiente de mezclado. En el tratamiento
con resina de adsorción, el pH es de 2 a 8, adecuadamente 4 a 6,7, y
la temperatura por debajo de 65ºC, normalmente 2 a 30ºC, y
adecuadamente 2 a 10ºC.
Cuando se lleva a cabo el tratamiento con resina
de adsorción en una columna, la columna se rellena con una resina de
adsorción, que es regenerada adecuadamente con NaOH y HCl. El
material proteínico que se va a tratar se hace pasar a través de una
columna, rellena con resina de adsorción, a una velocidad de flujo
de 1 a 20 volúmenes de columna (BV)/h, siendo adecuada una velocidad
de flujo de 6 a 8 BV/h. La relación en peso del material proteínico
que se va a tratar en el citado tratamiento de resina a resina de
adsorción es como máximo 100:1, adecuadamente 10:1 a 40:1.
Cuando el tratamiento con resina de adsorción se
lleva a cabo en un recipiente de mezclado, se introducen la resina
de adsorción regenerada de la manera antes descrita y el material
proteínico que se va a tratar en el recipiente de mezclado en el
cual se ponen en contacto entre sí, adecuadamente bajo mezclado
suave. La relación en peso del material proteínico a tratar en el
citado tratamiento de resina a resina de adsorción es de casi 100:1,
adecuadamente 10:1 a 40:1, y la duración del contacto es inferior a
2 horas, adecuadamente 60 minutos.
Con el anterior tratamiento de adsorción de
resina se combina al menos un tratamiento de ultra o
dia-filtración del material proteínico líquido libre
de grasa proveniente de leche de vaca. Con la ultra- y
dia-filtración, el material líquido se puede
concentrar para secarlo o para someterlo a otro tratamiento, pero,
simultáneamente, la ultra- y dia-filtración se
pueden utilizar para completar la separación de insulina bovina del
material a tratar. En la ultra- y dia-filtración se
emplean membranas semipermeables de interceptación de 5.000 a
25.000 D, adecuadamente membranas de interceptación de 10.000 D. Los
materiales de membrana adecuados para ultrafiltración incluyen
polisulfona, poliétersulfona y materiales recubiertos
hidrofílicamente.
El grado de separación de insulina obtenido por
ultra- y dia-filtración aumenta a medida que se
eleva la relación de concentración. Para cada caso particular se
selecciona una relación de concentración apropiada.
El suero u otro material de partida diluido se
puede concentrar mediante las mencionadas ultra- y
dia-filtración hasta obtener un concentrado de
proteína de suero u otro material de partida concentrado,
respectivamente, antes del tratamiento con resina de adsorción antes
mencionado. Por otra parte, la ultra y
dia-filtración se puede llevar a cabo después del
tratamiento de resina de adsorción previamente mencionado,
obteniéndose un concentrado de proteína que se puede secar hasta un
polvo, mediante pulverización o liofilización
En el tratamiento del material de partida, la
relación de concentración total puede ser, por ejemplo,
aproximadamente 24 (relación de concentración primero 6 y después
4), pero en la concentración del material hasta un concentrado de
proteína, la relación de concentración total puede ser, por ejemplo,
aproximadamente 120 (relación de concentración primero 10 y después
12).
En un modo de realización preferido del método
de la invención, se lleva a cabo ultra y
dia-filtración antes y/o después del tratamiento de
resina de adsorción.
Antes del contacto con una resina de adsorción,
el material proteínico líquido libre de grasa proveniente de leche
de vaca, preferiblemente suero, se puede tratar previamente por
clarificación a una temperatura por debajo de 65ºC, adecuadamente
por microfiltración, ultrafiltración o centrifugación. Dicho
pre-tratamiento se lleva a cabo preferiblemente por
filtración del material que se va a tratar, a través de membranas de
microfiltración, siendo las membranas de 0,05 a 1,4 micras,
preferiblemente membranas de 0,1 micras. En este caso se puede
separar, en particular desde el suero, el polvo de caseína o las
proteínas del suero desnaturalizadas, que opcionalmente están
presentes, y junto con lo cual hay una parte de proteínas
macromoleculares a las que va frecuentemente unida la insulina. En
la ultrafiltración se pueden utilizar a su vez membranas con un
valor de interceptación de 50.000 a 200.000 D, siendo
preferiblemente la velocidad de rotación en la centrifugación entre
1.000 y 10.000 revoluciones por minuto.
El tratamiento de clarificación rebaja también
ligeramente el contenido de insulina bovina del material que se
trata. El contenido de insulina bovina del suero, por ejemplo,
decrece en 6 a 10% en el tratamiento de clarificación antes
mencionado.
En el modo de realización de la invención más
preferido, el suero se trata con resina de adsorción y este
tratamiento de resina se combina con un tratamiento de ultra y día
filtración que se lleva a cabo antes o después del tratamiento con
resina. Se han hecho estudios que han demostrado que el anterior
procedimiento daba lugar a la separación de insulina bovina del
suero por tratamiento de suero de queso o suero de caseína con una
resina de adsorción, tal como Dowex XUS 40285,00 (Dow Inc.,
Alemania) o Amberlite XAD 7 (Rohm & Haas, Francia). Por
tratamiento del suero a pH 2 a 8 a través de resina de adsorción
regenerada con NaOH y HCl, la insulina se unía a la resina. El suero
así tratado se ultrafiltró a pH 6,5 hasta un concentrado de proteína
de suero que se hizo evaporar y se secó hasta un polvo. El
tratamiento se llevó a cabo también por realizar primero una ultra-
y dia-filtración del suero y tratando entonces el
contenido de proteína obtenido por la resina de adsorción. En el
tratamiento, el contenido de insulina del suero se reducía de 21 a 3
ng/g de proteína, definido por el ensayo RIA, es decir,
aproximadamente 85% respecto de la proteína.
El suero tratado de la manera anterior producía
una preparación de proteína de suero que, con respecto a la insulina
bovina, era crucialmente más puro que la correspondiente formulación
en polvo para niños pequeños convencional (aproximadamente 22 a 30
ng/g de proteína), leche en polvo (aproximadamente 30 ng/g de
proteína) o polvo de proteína de suero ultra o diafiltrado
(contenido en proteína 70 a 80%) (15 a 25 ng/g de proteína). La
preparación de proteína de suero sustancialmente libre de insulina
bovina así obtenida es adecuada para su utilización como materia
prima y única fuente de proteína en formulaciones para niños
pequeños, dado que, nutricionalmente, la proteína de suero es de
calidad extremadamente alta y no necesita otras proteínas para
completar el valor nutritivo. Además, el material proteínico
substancialmente libre de insulina bovina obtenido según la
invención es adecuado para su utilización como materia prima y parte
proteínica de diversas preparaciones nutricionales especiales,
diversas bebidas lácteas, tales como leche de consumo y varias otras
preparaciones lácteas, tales como helados, yogur y queso.
Convencionalmente las formulaciones para niños
pequeños, los primeros productos a base de leche de vaca consumidos
por los niños pequeños están compuestas de leche, nata, aceite
vegetal, suero en polvo bajo en sal, minerales y vitaminas, de los
que la leche, nata y suero en polvo bajo en sal contienen insulina
bovina.
El método de la invención permite la reducción
substancial del contenido de insulina bovina en las formulaciones
para niños pequeños y en otras preparaciones nutritivas especiales a
base de leche de vaca, bebidas lácteas y otras preparaciones
lácteas, y en sus materiales de partida.
El método de la invención para la preparación de
una formulación para niños pequeños que está substancialmente libre
de insulina u otra preparación nutritiva especial o leche de
consumo, otra bebida láctea u otra preparación láctea o su materia
prima, se caracteriza por el empleo de material proteínico libre de
grasa, libre de insulina, proveniente de leche de vaca y se prepara
por el método de la invención como la parte proteínica en la
producción de un producto.
(Comparativo)
La resina de adsorción XUS 40285.00 se regeneró
con NaOH al 2% + HCl al 2%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento de una columna de 20 ml. Se hicieron pasar 20
volúmenes de columna (BV), es decir, 400 ml de suero de queso fresco
a través de la columna a un pH 5,8.
En el tratamiento se separó el 45% de la
insulina bovina del suero. El rendimiento en proteína en el
tratamiento era del 93%, es decir, el contenido de insulina decrece
en un 42% respecto a la proteína.
(Comparativo)
La resina de adsorción XUS 40285 se regeneró con
NaOH al 2% + HCl al 2% y se lavó hasta neutralidad. Se
introdujeron 145 ml de suero de queso ajustado a un valor de pH de
4, 5,9 o 6,4 y 25 ml de resina en un matraz Erlenmeyer colocado en
una sacudidora. Al cabo de 60 minutos de agitación por sacudida se
separó la resina desde el suero y se determinó el contenido de
insulina bovina del suero por un ensayo RIA.
En el tratamiento, se separaron 57% de insulina
bovina a pH 4,0, 71% a pH 5,8 y 58% a pH 6,4. El rendimiento en
proteína fue del 69% a pH 4,0, 66% a pH 5,8 y 63% a pH 6,4, es decir
en relación con la proteína, el contenido de insulina había
decrecido 39%, 47% y 37%, respectivamente. El ensayo muestra que la
insulina bovina se puede separar del suero mediante una resina de
adsorción dentro de un amplio intervalo de pH.
(Comparativo)
La resina de adsorción XAD 7 se regeneró con
NaOH al 4% + HCl al 0,09%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento en una columna de 20 ml. Se hicieron pasar a
través de la columna 20 volúmenes de columna (BV), es decir 400 ml
de suero de queso fresco, a pH 6,4.
En el tratamiento se separaron 76% de la
insulina bovina. El rendimiento en proteína en el tratamiento fue de
90%, es decir, el contenido de insulina había decrecido 68% en
relación con la proteína.
La resina de adsorción XUS 40285,00 se regeneró
con NaOH al 4% + HCl al 0,09%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento en una columna de 20 ml. Se hicieron pasar 20
volúmenes de columna (BV), es decir 400 ml de un concentrado de
proteína de suero microfiltrado (1.4 micras) (5% de materia seca,
32% de proteína de la materia seca) a través de la columna a pH 5,8.
En el tratamiento, se separó el 46% de la insulina bovina del
concentrado de proteína de suero. El rendimiento de proteína en el
tratamiento era de 98%, es decir, el contenido de insulina había
decrecido 45% en proporción con la proteína.
La resina de adsorción XAD 7 se regeneró con
NaOH al 4% + HCl al 0,09%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento de una columna de 20 ml. Se hicieron pasar 20
volúmenes de columna (BV), es decir, 400 ml de un concentrado de
proteína de suero fresco (contenido de proteína del 2%) a través de
la columna a pH 6,4.
En el tratamiento, se separaron 86% de insulina
bovina del concentrado de proteína del suero. El rendimiento de
proteína en el tratamiento era de 85%, es decir, el contenido de
insulina había decrecido 73% en relación con el de proteína.
(Comparativo)
La resina de adsorción XAD 7 se regeneró con
NaOH al 4% + HCl al 0,09%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento de una columna de 20 ml. Se hicieron pasar 20
volúmenes de columna (BV), es decir, 400 ml, de leche desnatada
(materia seca 9%, proteína 35% de la materia seca) a través de la
columna a pH 6,7.
En el tratamiento, se separó 40% de la insulina
bovina en relación con la proteína. El ensayo muestra que la
insulina bovina se puede separar también a partir de la leche, pero
el grado de separación de insulina es más bajo que en el tratamiento
de suero.
(Comparativo)
La resina de adsorción XAD 7 se regeneró con
NaOH al 4% + HCl al 0,09%, se lavó hasta neutralidad y se colocó
como empaquetamiento de una columna de 20 ml. Se hicieron pasar 20
volúmenes de columna (BV), es decir 400 ml, de solución de caseinato
de sodio (3% de materia seca, 89% de proteína de la materia seca), a
través de la columna a pH 6,7.
En el tratamiento, se separaron 50% de la
insulina bovina.
\newpage
Se sometieron a ultra- y
dia-filtración 14 litros de suero de queso fresco a
40ºC empleando membranas GR81PP (membranas de interceptación de
6.000 D) con un ultrafiltro Labstack a una relación de concentración
de 6, se diluyó al volumen inicial y volvió a filtrar a una relación
de concentración de 4, es decir, la relación de concentración total
era 24. Se determinó el contenido de insulina bovina por el ensayo
RIA y se ensayó el contenido de proteína del suero de partida y el
concentrado de proteína del suero obtenido como resultado final. El
suero de partida contenía 21,2 ng de insulina bovina por gramo de
proteína, y el concentrado de proteína del suero obtenido después de
ultra- y dia-filtración contenía 14,8 ng de insulina
por gramo de proteína.
Según esto, la ultra- y
dia-filtración reducía el contenido de insulina
bovina en un 30% respecto a la proteína.
(Comparativo)
Se disolvieron, en 60 litros de agua (50ºC),
5.040 kg de proteína de suero en polvo obtenida de suero tratado
según el Ejemplo 1, 11,423 kg de una mezcla de grasa vegetal, 11,232
de lactosa purificada, 12.260 kg de maltodextrina (DE 21), 135 g de
una premezcla de vitaminas y minerales (que contenía vitaminas A, D,
E, K, B1, B2, B6, B12, niacina, ácido fólico, ácido pantoténico,
biotina, ácido ascórbico, colina, inosita, gluconato ferroso,
sulfato de zinc, sulfato de manganeso, selenito de sodio, gluconato
de cobre), y 70 gramos de cloruro de calcio, 300 gramos de fosfato
de calcio, 65 gramos de sulfato de magnesio, 125 gramos de cloruro
de sodio y 620 gramos de citrato de potasio en 60 litros de agua
(50ºC). El contenido en materia seca de la mezcla era de
aproximadamente 40%.
La mezcla así obtenida se llevó a una
homogeneizadora (150/50 bar) y se secó hasta polvo en un secador de
pulverización a temperaturas de secado de 180/75ºC sobre lecho
fluidizado a 70/120/30ºC. La composición, aspecto y sabor del
producto eran iguales a los de una formulación en polvo convencional
para niños pequeños.
Claims (8)
1. Un método de separación de insulina bovina
desde un material proteínico líquido libre de grasa proveniente de
leche de vaca, caracterizado por
contacto del material proteínico líquido libre
de grasa conteniendo insulina bovina proveniente de leche de vaca,
material que tiene un pH 2 a 8, a una temperatura de menos de 65ºC,
con una resina de adsorción microporosa a base de estireno o a base
de compuesto acrílico, donde la relación de pesos del material
proteínico que se va a tratar a resina de adsorción es como máximo
100:1, y
combinación con el citado tratamiento de resina
de al menos un tratamiento de ultra- y
dia-filtración del material proteinoso, y
si es necesario, concentración del material
líquido así obtenido hasta un concentrado de proteína y secado
opcional hasta polvo.
2. Un método según la reivindicación 1,
caracterizado por la utilización de suero, concentrado de
proteína de suero, leche desnatada o una solución de caseína,
preferiblemente suero, como material proteínico líquido libre de
grasa conteniendo insulina bovina proveniente de leche de vaca.
3. Un método según cualquiera de la
reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque la relación en
peso del material proteínico que se va a tratar a resina de
adsorción es, adecuadamente, de 10:1 a 40:1.
4. Un método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por la introducción del
material proteínico a través de una columna, rellena con una resina
de adsorción, a una velocidad de flujo de 1 a 20 volúmenes de
columna (BV)/h, adecuadamente 6 a 8 BV/h, a una temperatura de 2 a
30ºC, adecuadamente 2 a 10ºC.
5. Un método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por el contacto del
material proteínico con la resina de adsorción a una temperatura de
2 a 30ºC, adecuadamente 2 a 10ºC, en una vasija de mezclado, siendo
el tiempo de contacto bajo mezclado suave por debajo de 2 horas,
adecuadamente 60 minutos.
6. Un método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por la ultra- y
dia-filtración del material proteínico líquido libre
de grasa conteniendo insulina bovina proveniente de la leche de
vaca utilizando membranas de una interceptación de 5.000 a 25.000 D,
antes de poner en contacto el material proteínico con la resina de
adsorción y/o después del tratamiento con resina de adsorción.
7. Un método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, caracterizado por el
pre-tratamiento del material proteínico líquido
libre de grasa conteniendo insulina bovina proveniente de leche de
vaca, antes de ponerlo en contacto con la resina de adsorción, por
clarificación del mismo, adecuadamente, por microfiltración,
ultrafiltración o centrifugación, preferiblemente por filtración a
través de membranas de microfiltración de 0,05 a 1,4 micras,
preferiblemente membranas de 0,1 micras.
8. Un método según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7 caracterizado porque se concentra el
material líquido, tratado con resina de adsorción, por ultra- y
dia-filtración utilizando membranas de
interceptación de 5.000 a 25.000 D, adecuadamente membranas de
interceptación de 10.000 D, a un concentrado de proteína, que se
seca opcionalmente hasta un polvo, adecuadamente por pulverización o
liofilización.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI982114 | 1998-09-30 | ||
| FI982114A FI107115B (fi) | 1998-09-30 | 1998-09-30 | Menetelmä naudan insuliinin poistamiseksi |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2241364T3 ES2241364T3 (es) | 2005-10-16 |
| ES2241364T5 true ES2241364T5 (es) | 2008-12-16 |
Family
ID=8552607
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES99969650T Expired - Lifetime ES2241364T5 (es) | 1998-09-30 | 1999-09-29 | Tratamiento de un material proteico. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6866879B1 (es) |
| EP (1) | EP1124436B2 (es) |
| AT (1) | ATE292895T1 (es) |
| AU (1) | AU759834B2 (es) |
| CA (1) | CA2345701C (es) |
| CZ (1) | CZ20011132A3 (es) |
| DE (1) | DE69924746T3 (es) |
| DK (1) | DK1124436T4 (es) |
| EE (1) | EE200100198A (es) |
| ES (1) | ES2241364T5 (es) |
| FI (1) | FI107115B (es) |
| HU (1) | HUP0103862A3 (es) |
| NO (1) | NO321174B1 (es) |
| NZ (1) | NZ510871A (es) |
| PL (1) | PL193409B1 (es) |
| SK (1) | SK287515B6 (es) |
| WO (1) | WO2000018251A1 (es) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7094345B2 (en) * | 2002-09-09 | 2006-08-22 | Cytonome, Inc. | Implementation of microfluidic components, including molecular fractionation devices, in a microfluidic system |
| US20090271021A1 (en) * | 2008-04-28 | 2009-10-29 | Popp Shane M | Execution system for the monitoring and execution of insulin manufacture |
| US9055752B2 (en) | 2008-11-06 | 2015-06-16 | Intercontinental Great Brands Llc | Shelf-stable concentrated dairy liquids and methods of forming thereof |
| UA112972C2 (uk) | 2010-09-08 | 2016-11-25 | Інтерконтінентал Грейт Брендс ЛЛС | Рідкий молочний концентрат з високим вмістом сухих речовин |
| ES2427921T3 (es) * | 2011-03-07 | 2013-11-04 | Molkerei Alois Müller GmbH & Co. KG | Procedimiento para la obtención de un producto enriquecido en albúmina a base de un concentrado de proteínas de suero de la leche |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2575666B1 (fr) * | 1985-01-04 | 1989-08-18 | Centre Nat Rech Scient | Procede et dispositif pour la separation chromatographique de macromolecules biologiques |
| FR2613368B1 (fr) | 1987-03-10 | 1989-06-23 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum, par adsorption et elution |
| FI94089C (fi) | 1992-12-10 | 1995-07-25 | Valio Oy | Menetelmä allergiaa aiheuttavien yhdisteiden poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
| DE4405179A1 (de) | 1994-02-18 | 1995-08-24 | Hoechst Ag | Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken |
| FI104457B (fi) | 1997-04-30 | 2000-02-15 | Valio Oy | Proteiinikoostumus ja sen valmistus ja käyttö sekä sitä sisältävät valmisteet ja näiden valmistus |
-
1998
- 1998-09-30 FI FI982114A patent/FI107115B/fi not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-09-29 WO PCT/FI1999/000800 patent/WO2000018251A1/en active IP Right Grant
- 1999-09-29 PL PL99346978A patent/PL193409B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-09-29 NZ NZ510871A patent/NZ510871A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-09-29 DE DE69924746T patent/DE69924746T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-29 US US09/806,324 patent/US6866879B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-29 ES ES99969650T patent/ES2241364T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-29 HU HU0103862A patent/HUP0103862A3/hu unknown
- 1999-09-29 EE EEP200100198A patent/EE200100198A/xx unknown
- 1999-09-29 SK SK442-2001A patent/SK287515B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-09-29 AU AU59866/99A patent/AU759834B2/en not_active Ceased
- 1999-09-29 CZ CZ20011132A patent/CZ20011132A3/cs unknown
- 1999-09-29 AT AT99969650T patent/ATE292895T1/de active
- 1999-09-29 DK DK99969650T patent/DK1124436T4/da active
- 1999-09-29 CA CA002345701A patent/CA2345701C/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-29 EP EP99969650A patent/EP1124436B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-03-28 NO NO20011585A patent/NO321174B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NZ510871A (en) | 2002-07-26 |
| EP1124436B2 (en) | 2008-07-09 |
| ATE292895T1 (de) | 2005-04-15 |
| US6866879B1 (en) | 2005-03-15 |
| DE69924746T2 (de) | 2006-03-02 |
| WO2000018251A1 (en) | 2000-04-06 |
| AU759834B2 (en) | 2003-05-01 |
| HUP0103862A3 (en) | 2002-04-29 |
| NO321174B1 (no) | 2006-03-27 |
| FI982114A (fi) | 2000-03-31 |
| CZ20011132A3 (cs) | 2001-09-12 |
| DE69924746T3 (de) | 2008-12-04 |
| DK1124436T3 (da) | 2005-06-27 |
| AU5986699A (en) | 2000-04-17 |
| FI982114A0 (fi) | 1998-09-30 |
| SK4422001A3 (en) | 2001-11-06 |
| EE200100198A (et) | 2002-06-17 |
| NO20011585L (no) | 2001-05-28 |
| CA2345701C (en) | 2009-05-12 |
| PL346978A1 (en) | 2002-03-11 |
| CA2345701A1 (en) | 2000-04-06 |
| DK1124436T4 (da) | 2008-10-20 |
| EP1124436A1 (en) | 2001-08-22 |
| FI107115B (fi) | 2001-06-15 |
| DE69924746D1 (de) | 2005-05-19 |
| HUP0103862A2 (hu) | 2002-02-28 |
| SK287515B6 (sk) | 2010-12-07 |
| EP1124436B1 (en) | 2005-04-13 |
| NO20011585D0 (no) | 2001-03-28 |
| PL193409B1 (pl) | 2007-02-28 |
| ES2241364T3 (es) | 2005-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2023895C (en) | Hypoallergenic milk products and process of making | |
| ES2666293T3 (es) | Producto lácteo y método de preparación | |
| Guo | Whey protein production, chemistry, functionality, and applications | |
| CA2827463C (en) | Milk-based product and a method for its preparation | |
| CA1136919A (en) | Process for obtaining an alpha-lactalbumin enriched product from whey, and uses thereof | |
| US20040234666A1 (en) | Method of extracting casein fractions from milk and caseinates and production of novel products | |
| CA2077482C (en) | Hypoallergenic products from natural and/or synthetic components and process of making | |
| ES2241364T5 (es) | Tratamiento de un material proteico. | |
| US5186971A (en) | Hypoallergenic milk products and process of making | |
| KR20050109979A (ko) | 항로타바이러스 감염 조성물 및 그의 제법 | |
| US5747031A (en) | Process for isolating immunoglobulins in whey | |
| FI94089C (fi) | Menetelmä allergiaa aiheuttavien yhdisteiden poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista | |
| US5112636A (en) | Hypoallergenic butter and process of making | |
| WO1998048640A1 (en) | A substantially insulin-free protein composition, preparation and use thereof, and products containing same and preparation thereof | |
| ES2921935T3 (es) | Concentrado o aislamiento de proteínas solubles de leche estable durante tratamientos térmicos y procedimiento de obtención | |
| EP0605219B1 (en) | Products containing active milk protein components and process for producing the same | |
| RU2793406C2 (ru) | Способ получения продуктов для детского питания и молочных продуктов | |
| JPH08214775A (ja) | アミノ酸組成を人乳に類似させた育児用乳製品 |