ES2222763T3

ES2222763T3 - Derivados de benzoxazol y farmacos que contienen los mismos como el ingrediente activo.

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Publication number: ES2222763T3
Application number: ES99972633T
Authority: ES
Inventors: Sojiro Pharm. Res. Ctr. Meiji S. K. Ltd SHIOKAWA; Yasuo Pharm. Res. Ctr. Meiji S. K. Ltd. SATO; Masaaki Pharm. Res. Ctr. Meiji S. K. Ltd. IZUMI; Satoshi Pharm. Res. Ctr. Meiji S. K. Ltd YOSHIDA; Hiroshi Meiji Seika Kaisha Ltd. MURAKAMI; Tomoko Pharm. Res. Ctr. Meiji S. K. Ltd. ITO; Tetsutaro Phar. R. Ctr. Meiji S. K.Ltd. NIISATO
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1998-11-20
Filing date: 1999-11-19
Publication date: 2005-02-01
Anticipated expiration: 2019-11-19
Also published as: IL143178A0; KR100675033B1; CA2351446A1; EP1134220B1; AU753797B2; DE69919575D1; EP1134220A1; JP4557112B2; TR200101945T2; SK6772001A3; US7045516B1; TW520370B; CZ20011700A3; BR9916793A; RU2204558C2; ATE273974T1; ID30143A; ZA200104620B; HUP0104238A3; KR20010086448A

Abstract

5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol o una sal del mismo. Un objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto útil como ingrediente activo de medicamentos tales como los destinados a tratamiento preventivo y/o terapéutico de afecciones resultantes del síndrome de colon irritable y trastorno funcional del tracto digestivo (en particular, anormalidades de la defecación, dolor abdominal, incomodidad abdominal, borborigmo, eructos, ardor de estómago, etc.) y afección de diarrea, así como agentes antieméticos. Más específicamente, el objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto útil como ingrediente activo de medicamentos, que tiene la acción activadora del receptor 5-HT3 además de la actividad antagonista de los receptores 5-HT3, y se metaboliza difícilmente en los cuerpos vivos, con objeto de evitar el estreñimiento causado como efecto secundario por la administración de un compuesto que tenga únicamente la actividad antagonista de los receptores 5-HT3 como agente controlador de la función de los órganos digestivos.

Description

Derivados de benzoxazol y fármacos que contienen los mismos como el ingrediente activo.

Campo técnico

La presente invención se refiere a 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol y sales del mismo que tienen actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} de serotonina y acción activadora parcial de los receptores 5-HT_{3} de serotonina. La presente invención se refiere también a medicamentos que comprenden los derivados de benzoxazol mencionados anteriormente o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y son útiles para tratamiento preventivo y/o terapéutico de afecciones de síndrome de colon irritable, trastorno funcional del tracto digestivo, o diarrea, y como agente antiemético.

Antecedentes de la técnica

La serotonina [5-hidroxitriptamina (abreviada en ocasiones en lo sucesivo como "5-HT")] es un neurotransmisor en los cuerpos vivos, y ha llegado a saberse que existen siete clases de subtipos del mismo (5-HT_{1} a 5-HT_{7}). Entre ellos, se ha esclarecido que el receptor 5-HT_{3} está involucrado en las náuseas y vómitos como los efectos secundarios de agentes carcinostáticos tales como cisplatino y radioterapia, y los antagonistas de los receptores 5-HT_{3} se han utilizado clínicamente como agentes antieméticos. Específicamente, ejemplos incluyen Granisetron [Sanger, G.J. et al., Eur. J. Pharmacol., 159, 113-124 (1989)], Ondansetron (GR38032F) [Butler, A. et al., Br. J. Pharmacol., 94, 387-412 (1988)], y Tropisetron [Richardson, B.P. et al., Nature, 316, 116-131 (1985)]. Recientemente se ha comunicado que compuestos que tienen actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} son eficaces para tratamiento preventivo y/o terapéutico del síndrome de colon irritable y análogos [Greenshaw, A.J. et al., Drugs, 53, 20-39 (1997), Greenshaw, A.J. et al., Trends Pharmacol. Sci., 14, 265-270 (1993)], y actualmente se encuentra en fase de desarrollo el Alosetron (Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 1-151578/1989). Además, se ha preparado y evaluado una serie de benzoxazoles con un sustituyente heterocíclico que contiene nitrógeno en la posición 2 en cuanto a actividad agonista parcial de 5-HT_{3} en el íleon aislado del cobayo [Soito, Y. et al., J. Med. Chem. 1998, 41, 3015]. El documento EP 621271 A1 informa sobre derivados de benzoxazol y su uso como antagonistas de los receptores 5-HT_{3} de serotonina.

Sin embargo, cuando un compuesto que tiene únicamente la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} se administra al tracto digestivo como medicamento preventivo y/o terapéutico par el síndrome de colon irritable o trastorno funcional del tracto digestivo, la administración puede causar probablemente un problema de estreñimiento como efecto secundario, aunque se inhibe la diarrea. Como uno de los medios para resolver este problema, los autores de la presente invención proporcionaron derivados de benzoxazol que tienen acción activadora del receptor 5-HT_{3} además de la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} (Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998). Como compuestos que tienen análogamente a la vez actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} y acción activadora del receptor 5-HT_{3}, se describen también MKC-733 (Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 5-310747/1993) y RS-056812-198 [J.A. VanHooft et al., Eur. J. Pharmacol., 322, 229-233 (1997)].

No se ha informado de ningún compuesto que exhiba acción inhibidora potente contra la diarrea sin causar efecto secundario de estreñimiento y que no se metaboliza fácilmente en los cuerpos vivos, cuando se utiliza como medicamento preventivo y/o terapéutico para el síndrome de colon irritable o trastorno funcional del tracto digestivo. Por esta razón, se ha hecho deseable desarrollar compuestos que tengan tales cualidades características.

Descripción de la invención

Un objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto útil como ingrediente activo de medicamentos tales como los destinados a tratamiento preventivo y/o terapéutico de afecciones resultantes del síndrome de colon irritable y trastorno funcional del tracto digestivo (en particular, anormalidades de la defecación, dolor abdominal, incomodidad abdominal, borborigmo, eructos, ardor de estómago, etc.) y afección de diarrea, así como agentes antieméticos. Más específicamente, el objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto útil como ingrediente activo de medicamentos, que tiene la acción activadora del receptor 5-HT_{3} además de la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3}, y se metaboliza difícilmente en los cuerpos vivos, con objeto de evitar el estreñimiento causado como efecto secundario por la administración de un compuesto que tenga únicamente la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} como agente controlador de la función de los órganos digestivos.

Los autores de la presente invención encontraron ya derivados de benzoxazol que tienen la acción activadora del receptor 5-HT_{3} además de la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} (Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998). Continuando sus intensas investigaciones, los inventores encontraron que los compuestos representados por la fórmula general siguiente (1) tienen las características mencionadas anteriormente. La presente invención se ha culminado de este modo.

Los autores de la presente invención realizaron diversos ensayos sobre los benzoxazoles representados por la fórmula general siguiente (1), con inclusión de ensayos metabólicos in vitro en hígados humanos y ensayos de seguridad (ensayo de mutación inversa), así como experimentos para evaluaciones de la acción constrictora sobre el íleon extraído del cobayo, que sirve como índice de la acción activadora del receptor 5-HT_{3}, la acción inhibidora de la diarrea en las ratas causada por la carga de tensión que sirve como índice de tratamiento terapéutico de la diarrea, y la determinación del efecto sobre la defecación normal del ratón (capacidad de transporte del intestino grueso) que sirve como índice de evitación del estreñimiento como efecto secundario. Como resultado, han encontrado que el compuesto 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol tenía una actividad antagonista sobre el receptor 5-HT_{3} y acción activadora del receptor 5-HT_{3} notablemente mayores en comparación con los compuestos ya descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 6-345744/1994, y daba resultados más sobresalientes en ensayos in vitro, es decir, acción inhibidora contra la diarrea y efecto sobre la defecación normal del ratón (capacidad de transporte del intestino grueso) en comparación con los compuestos ya descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998, así como una estabilidad más sobresaliente del metabolismo.

Así pues, la presente invención proporciona el compuesto representado por la fórmula general siguiente (1) o sales del mismo:

1

en donde R^{1} representa cloro, R^{2} representa átomo de hidrógeno, y R^{3} representa metilo.

Por esta razón, 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol o una sal del mismo se proporciona por la presente invención.

Como otro aspecto de la presente invención, se proporcionan medicamentos que comprenden, como ingrediente activo, una sustancia seleccionada del grupo constituido por compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos. Estos medicamentos son útiles para tratamiento preventivo y/o terapéutico de afecciones resultantes del síndrome de colon irritable y trastorno funcional del tracto digestivo (en particular, anormalidades de la defecación, dolor abdominal, incomodidad abdominal, borborigmo, eructos, ardor de estómago, etc.) y afección de diarrea, así como agentes antieméticos y análogos. De acuerdo con realizaciones preferidas de estos medicamentos, los medicamentos mencionados anteriormente se proporcionan en la forma de composiciones farmacéuticas que comprenden la sustancia mencionada anteriormente como ingrediente activo junto con uno o más aditivos farmacéuticos.

Como un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de una sustancia seleccionada del grupo constituido por compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos para la fabricación de los medicamentos mencionados anteriormente. De acuerdo con la presente invención, se proporcionan además métodos para tratamiento preventivo y/o terapéutico de afecciones resultantes del síndrome de colon irritable y trastorno funcional del tracto digestivo o afección de diarrea, que comprenden un paso de administración de una cantidad preventiva y/o terapéuticamente eficaz de una sustancia seleccionada del grupo constituido por compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos a un mamífero con inclusión de un humano, preferiblemente humano.

Como otros aspectos adicionales de la presente invención, se proporcionan agentes antagonistas de los receptores 5-HT_{3} de la serotonina que comprenden una sustancia seleccionada del grupo constituido por compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos, y activadores parciales del receptor 5-HT_{3} de la serotonina que comprende una sustancia seleccionada del grupo constituido por compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente y sales farmacéuticamente aceptables, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos.

Modo óptimo de realización de la invención

El compuesto de acuerdo con la presente invención es 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol.

Los compuestos de la presente invención representados por la fórmula general (1) pueden existir en forma de base libre o en forma de una sal de adición de ácido. Ejemplos de la sal incluyen sales con un hidrácido halogenado tal como ácido fluorhídrico, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico y ácido yodhídrico; ácidos inorgánicos tales como ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, peróxido de hidrógeno, y ácido carbónico; ácidos orgánicos carboxílicos tales como ácido acético, ácido tricloroacético, ácido trifluoroacético, ácido hidroxiacético, ácido láctico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido oxálico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido butírico, ácido maleico, ácido propiónico, ácido fónico, y ácido málico; aminoácidos de carácter ácido tales como ácido aspártico y ácido glutámico; ácidos alquilsulfónicos o ácidos arilsulfónicos tales como ácido metanosulfónico y ácido p-toluenosulfónico y análogos.

Sustancias ópticamente activas y diastereoisómeros basados en la presencia de uno o más carbonos asimétricos, y mezclas de los mismos, racematos de los mismos y análogos caen dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la presente invención o sales de los mismos pueden existir también como un hidrato o un solvato. Además, cualesquiera sustancias en cualquier forma cristalina caen también dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención pueden producirse por diversos métodos. Por ejemplo, dichos compuestos se producen por los dos métodos típicos siguientes (Método A y Método B).

2

En el esquema, R^{1}, R^{2} y R^{3} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente, Y representa un grupo lábil tal como un átomo de halógeno, grupo tiol, grupo p-toluenosulfonilo, o grupo trifluorometanosulfonilo, y R^{4} representa un grupo protector para el grupo amino.

Método A

Un compuesto de la fórmula (1) se puede obtener por reacción de un compuesto de la fórmula (2) con homopiperazina de la fórmula (3) en un disolvente. El disolvente puede ser diclorometano, cloroformo, benceno, tolueno, xileno, tetrahidrofurano, dietil-éter, dimetoxietano, N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido o análogos. Una temperatura de reacción puede seleccionarse de un intervalo de -50 a 200ºC, preferiblemente 0 a 150ºC, y la reacción se lleva a cabo durante 5 minutos a 48 horas, preferiblemente 30 minutos a 20 horas. Con objeto de acelerar la reacción, o de realizar la reacción en condiciones suaves, puede añadirse un aditivo (v.g., trietilamina) al sistema de reacción.

Método B

Un compuesto de la fórmula (5) se puede obtener por reacción de un compuesto de la fórmula (2) en un disolvente con homopiperazina de la fórmula (4) en la cual uno de los grupos amino está protegido. El grupo protector para el grupo amino puede seleccionarse, por ejemplo, de los descritos en T.V. Green, "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1991. El disolvente, la temperatura de reacción, el tiempo de reacción, y los aditivos pueden ser similares a los mencionados para el Método A. A continuación, un compuesto de la fórmula (1) se obtiene por eliminación de R^{4} como el grupo protector por un método apropiado.

Los compuestos de las fórmulas (1) o (5) producidos por el Método A o el Método B pueden someterse a conversión de un grupo funcional en el sustituyente R^{1}, R^{2} o R^{3} para preparar compuestos diferentes que caen dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos representados por la fórmula general (1) mencionada anteriormente presentan ventajas en el sentido de que exhiben la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} y la acción activadora del receptor 5-HT_{3}, y son escasamente metabolizados en el hígado humano. Por esta razón, los compuestos representados por la fórmula (1) pueden ser utilizados como ingrediente activo de medicamentos, como antagonista de los receptores 5-HT_{3} y activador del receptor 5-HT_{3}, para tratamiento preventivo y/o terapéutico de enfermedades en las cuales participa 5-HT_{3}. Las enfermedades en las cuales participa 5-HT_{3} incluyen síndrome de colon irritable, trastorno funcional del tracto digestivo, dolor de cabeza, neuralgia, ansiedad, depresión, enfermedades mentales, o vómitos causados por agentes cancerígenos tales como cisplatino o radioterapia. Dado que los compuestos representados por la fórmula (1) tienen acción activadora parcial sobre el receptor 5-HT_{3} exhibida como la acción activadora del receptor 5-HT_{3} además de la actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3}, aquéllos son útiles también como medicamento preventivo o medicamento terapéutico sin causar el efecto secundario de estreñimiento para mejorar las condiciones del síndrome de colon irritable, trastorno funcional del tracto digestivo, o diarrea, o como agente antiemético.

Como el ingrediente activo de los medicamentos de la presente invención, puede utilizarse una sustancia seleccionada del grupo constituido por los compuestos mencionados anteriormente en forma libre, sales farmacéuticamente aceptables no tóxicas de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos. Los medicamentos de la presente invención se pueden administrar a humanos así como a mamíferos distintos de los humanos. La presente invención proporciona también composiciones farmacéuticas que comprenden una o más clases de sustancias seleccionadas del grupo constituido por los compuestos mencionados anteriormente en forma libre, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, e hidratos de los mismos y solvatos de los mismos, junto con una o más clases de aditivos farmacéuticos, y son adecuadas para administración oral o administración parenteral.

De modo más específico, ejemplos de las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración oral incluyen, por ejemplo, tabletas, cápsulas, píldoras, polvos, gránulos, gránulos finos, jarabes, emulsiones, suspensiones, soluciones, soluciones acuosas y análogas. Ejemplos de las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración parenteral incluyen, por ejemplo, inyecciones tales como inyecciones intravenosas, intramusculares o subcutáneas, implantes, supositorios para administración rectal, ungüentos, emplastos, cintas adhesivas para absorción transdérmica y análogas. Las inyecciones pueden ir añadidas de agentes tampón (v.g., acetato, citrato, fosfato), modificadores del pH (v.g., hidrogenocarbonato de sodio, hidróxido de sodio, ácido clorhídrico), agentes estabilizadores tales como antioxidantes (v.g., ácido ascórbico, sulfito de sodio, pirosulfito de sodio), conservantes (v.g., alcohol bencílico, clorobutanol, éster metílico del ácido p-hidroxibenzoico, fenol) y análogos, en caso requerido. Estas preparaciones farmacéuticas se pueden producir por métodos convencionales utilizando aditivos farmacéuticos empleados ordinariamente tales como excipientes, agentes desintegrantes, aglomerantes, lubricantes, colorantes y análogos.

Ejemplos de excipientes no tóxicos utilizables incluyen, por ejemplo, lactosa, glucosa, almidón de maíz, sorbitol, celulosa cristalina y análogos. Ejemplos de desintegrantes incluyen, por ejemplo, almidón, alginato de sodio, gelatina, carbonato de calcio, dextrina y análogos. Ejemplos de aglomerantes incluyen, por ejemplo, dimetilcelulosa, poli(alcohol vinílico), poli(vinil-éter), metilcelulosa, etilcelulosa, goma arábiga, hidroxipropilcelulosa, polivinilpirrolidona y análogos. Ejemplos lubricantes incluyen, por ejemplo, talco, estearato de magnesio, polietilenglicol, aceite hidrogenado y análogos. Ejemplos de colorantes incluyen, por ejemplo, Azul Brillante, eritrosina, Tartracina y análogos.

Los compuestos representados por la fórmula (1) de acuerdo con la presente invención pueden administrarse también en combinación con otros medicamentos terapéuticos. Por ejemplo, cuando se utilizan para tratamiento del síndrome de colon irritable, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en combinación con opioides (Loperamida, Trimebutina y análogos), agentes anti-colina (Bromuro de Prifinio, Bromuro de Tiquizio y análogos), antagonistas de la dopamina (Domperidona, Sulpirida, y análogos), antiflatulentos, agentes anti-ansiedad (medicamentos de benzodiazepinas y análogos), agentes antidepresivos (Desipramina, Amitriptilina, Tripramina y análogos), etcétera. Para el control de la función de los órganos digestivos, o el tratamiento de los trastornos de la motilidad gastrointestinal, náuseas y vómitos, los compuestos representados por la fórmula (1) de acuerdo con la presente invención pueden utilizarse adecuadamente en combinación con antagonistas de los receptores H_{2} de la histamina (Cimetidina, Ranitidina, Famotidina, Sufotidina, Nizatidina, Roxatidina y análogos), agentes anti-secreción (inhibidores de la H^{+}K^{+} ATPasa tales como Omeprazol) y análogos.

El contenido de los compuestos de la presente invención en las composiciones farmacéuticas puede variar dependiendo de la forma de dosificación, y puede ser usualmente del orden de 0,05 a 50% en peso, preferiblemente 0,1 a 20% en peso del peso de las composiciones.

La dosis puede seleccionarse adecuadamente por consideración individual de la edad, el peso corporal, la sexualidad de un paciente, la naturaleza de una enfermedad, la gravedad de las condiciones y análogos. No obstante, cuando los compuestos se utilizan como agente profiláctico o terapéutico para el tratamiento del síndrome de colon irritable o trastorno funcional del tracto digestivo, aquéllos se administran usualmente en una cantidad de 0,001 a 100 mg, preferiblemente 0,01 a 50 mg/dosis unitaria como ingrediente activo por día para adultos una sola vez al día o varias veces como porciones divididas.

Ejemplos

La presente invención se explicará en detalle con referencia a los ejemplos siguientes. Sin embargo, las descripciones se dan únicamente como ejemplos.

Los datos NMR mencionados en los ejemplos se obtuvieron por medio de un espectrómetro NMR de 400 MHz, y los datos se muestran como valores d utilizando DMS como patrón. Los métodos para producir las materias primas utilizadas en los ejemplos y los ejemplos de control para evaluación se muestran en los Ejemplos de Referencia.

Ejemplo de Referencia 1

5-Cloro-2-mercapto-7-metoxibenzoxazol (a) 4-Cloro-2-metoxifenol

Se agitaron 2-metoxifenol (5,0 g), 2-aminopiridina (0,3 g), y cloruro de tionilo (3,24 ml) a 70ºC en tolueno (100 ml) durante 19 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y después de ello se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título como un aceite (6,6 g):

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,86 (3H, s), 5,20 (1H, br), 6,83 (3H, m).

MS (EI): m/z 158 (M^{+}).

(b) 4-Cloro-2-nitro-6-metoxifenol

Se disolvió 4-cloro-2-metoxifenol (1,77 g) en ácido acético (18 ml). Se añadió a esta solución una solución de ácido nítrico preparada por separado (mezcla de ácido nítrico al 70% (1,88 ml) y ácido acético (5 ml)) bajo enfriamiento con hielo mientras se agitaba. La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante una hora, se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua. La capa de acetato de etilo se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y después de ello se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener un producto bruto. Este producto se purificó por cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano = 4:1 v/v) para obtener el compuesto del título (1,8 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,95 (3H, s), 7,10 (1H, t, J = 3,0 Hz), 7,70 (1H, d, J = 3,0 Hz).

MS (TPS): m/z 203 (M^{+}).

(c) 5-Cloro-2-mercapto-7-metoxibenzoxazol

En corriente de argón, se suspendió platino sobre sulfuro de carbono (0,18 g) en una solución de 4-cloro-2-nitro-6-metoxifenol (1,77 g) en acetato de etilo (17 ml). Se reemplazó el interior del sistema de reacción con hidrógeno gaseoso, y la suspensión se agitó enérgicamente durante 24 horas. El platino sobre sulfuro de carbono se separó por filtración utilizando Celita, y después de ello se evaporó el disolvente a presión reducida. El producto bruto resultante se disolvió en etanol (30 ml) y la mezcla se agitó con disulfuro de carbono (15 ml) e hidróxido de potasio (0,58 g), y la mezcla se agitó a 60ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, se añadió agua (30 ml), y se ajustó a pH 4 con ácido clorhídrico concentrado. El sólido depositado se recogió por filtración, y se secó a 40ºC a presión reducida durante 5 horas para obtener el compuesto del título (1,87 g).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,88 (3H, s), 6,72 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,82 (1H, d, J = 2,0 Hz).

MS (TPS): m/z 216 (M^{+}+1).

Ejemplo de Referencia 2

5-Cloro-7-hidroximetil-2-mercaptobenzoxazol (a) Éster etílico del ácido 5-cloro-3-nitrosalicílico

Se añadió ácido sulfúrico concentrado (2,0 ml)a una solución de ácido 5-clorosalicílico (5,0 g) en etanol (50 ml), y se calentó a reflujo durante 24 horas. Después de evaporar el etanol a presión reducida, el aceite resultante se disolvió en acetato de etilo, y la solución se lavó con solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa de acetato de etilo se lavó sucesivamente con agua y salmuera saturada, y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. A continuación, se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener éster etílico del ácido 5-clorosalicílico toscamente purificado (5,3 g). Este producto se trató con ácido nítrico al 70% (7,2 ml, d=1,42) en anhídrido acético (40 ml) bajo enfriamiento con hielo. La mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 6 horas, se vertió en agua con hielo, y los cristales depositados se recogieron por filtración. Los cristales se lavaron con agua, y se secaron a presión reducida para obtener el compuesto del título (1,48 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,39 (3H, t, J = 7,1 Hz), 4,42 (2H, q, J = 7,1 Hz), 8,03 (1H, d, J = 2,7 Hz), 8,07 (1H, d, J = 2,7 Hz), 11,93 (1H, s).

(b) 5-Cloro-7-etoxicarbonil-2-mercaptobenzoxazol

Se disolvió éster etílico del ácido 5-cloro-3-nitrosalicílico (1,0 g) en una mezcla de acetato de etilo (10 ml) y etanol (10 ml), y se añadió a la mezcla platino sobre sulfuro de carbono (100 ml). La mezcla se agitó enérgicamente en atmósfera de hidrógeno durante 20 horas. Se separó por filtración el platino sobre sulfuro de carbono utilizando Celita, y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se añadió una solución de hidróxido de potasio (338 mg) en etanol (30 ml) a una solución del producto resultante en disulfuro de carbono (30 ml), y la mezcla se calentó a 70ºC durante 5 horas. Se evaporó el disolvente a presión reducida, se añadió al residuo dietil-éter, se ajustó a pH 9,0 con hidróxido de potasio acuoso 0,5 L y se extrajo luego. La capa acuosa separada se lavó de nuevo con dietil-éter, se ajustó a pH 5,0 con ácido clorhídrico 1,0 N, y se extrajo 3 veces con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título (982 mg).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,41 (3H, t, J = 7,0 Hz), 3,40 (1H, br), 4,45 (2H, q, J = 7,0 Hz), 7,60 (1H, d, J = 2,2 Hz), 7,71 (1H, d, J = 2,2 Hz).

MS (EI): m/z 257 (M^{+}).

(c) 5-Cloro-7-hidroximetil-2-mercaptobenzoxazol

Se disolvió 5-cloro-7-etoxicarbonil-2-mercaptobenzoxazol (280 mg) en dietil-éter (20 ml), y se añadió a la mezcla tetrahidruro-borano de litio (100 mg). La mezcla se agitó a 35ºC durante 2 horas. Se añadieron a la mezcla de reacción metanol y ácido clorhídrico 1 N, y se evaporaron a presión reducida los componentes volátiles. Este procedimiento se repitió 3 veces. El producto resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (metanol:cloruro de metileno = 1:20) para obtener el compuesto del título (163 mg).

^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 4,64 (2H, s), 5,53 (1H, br), 7,18 (1H, s), 7,26 (1H, s), 14,0 (1H, br).

MS (EI): m/z 215 (M^{+}).

Ejemplo de Referencia 3

7-Acetamino-5-cloro-2-mercaptobenzoxazol (a) 2-Acetamino-4-clorofenol

Bajo enfriamiento con hielo, se añadieron trietilamina (3,89 ml) y anhídrido acético (1,5 ml) con agitación a una solución de 2-acetamino-4-clorofenol (2,0 g, 14 mmol) en cloruro de metileno (12 ml). Después de agitar la mezcla durante 30 minutos, se evaporaron el disolvente y la trietilamina a presión reducida. La mezcla de reacción resultante se disolvió en dietil-éter, y la mezcla se lavó sucesivamente con hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado y salmuera saturada. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título (2,6 g, 100%).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,20 (3H, s), 6,81 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,95 (1H, dd, J = 8,6, 2,6 Hz), 7,72 (1H, d, J = 2,6 Hz).

(b) 2-Acetamino-4-cloro-6-nitrofenol

Bajo enfriamiento con hielo, se añadió ácido nítrico al 70% (0,38 ml, d=1,42) con agitación a una solución de 2-acetamino-4-clorofenol (1,0 g, 5,4 mmol) en anhídrido acético (90 ml). Después de agitar durante 2 horas, se añadió agua (100 ml) a la mezcla, y la mezcla se agitó ulteriormente durante una hora. La mezcla se extrajo por adición de dietil-éter, y se lavó dos veces con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida. La mezcla resultante se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano = 5:1 v/v) para obtener el compuesto del título (0,38 g, 31%).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,28 (3H, s), 7,80 (1H, d, J = 2,5 Hz), 8,80 (1H, d, J = 2,5 Hz), 10,98 (1H, s).

MS (EI): m/z 230 (M^{+}).

(c) 7-Acetamino-5-cloro-2-mercaptobenzoxazol

En corriente de argón, se suspendió platino sobre sulfuro de carbono (0,1 g) en una solución de 2-acetamino-4-cloro-6-nitrofenol (100 mg, 0,43 mmol) en una mezcla de etanol (5 ml) y acetato de etilo (5 ml). El interior del sistema de reacción se reemplazó con hidrógeno gaseoso, y la mezcla se agitó enérgicamente durante 24 horas. Después de separar el platino sobre sulfuro de carbono por filtración utilizando Celita, se evaporó el disolvente a presión reducida. El producto bruto resultante se disolvió en etanol (5,4 ml), se añadieron a la solución disulfuro de carbono (5,4 ml) e hidróxido de potasio (0,29 g), y la mezcla se agitó luego a 60ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y se evaporaron a presión reducida los componentes volátiles. La mezcla de reacción resultante se disolvió en acetato de etilo (10 ml), y se lavó sucesivamente con cloruro de amonio acuoso saturado (10 ml) y salmuera saturada. La mezcla de reacción se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título (104 mg, 99%).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 2,11 (3H, s), 6,87 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,77 (1H, d, J = 1,9 Hz).

MS (EI): m/z 242 (H^{+}).

Ejemplo de Referencia 4

5-Cloro-7-metil-2-(1-piperazinil)benzoxazol

Se añadió piperazina (4,3 g, 0,05 mol) a una suspensión de 5-cloro-2-mercapto-7-metilbenzoxazol (5,0 g, 0,25 mol) en tolueno (100 ml) con agitación. La mezcla de reacción se agitó durante 7 horas a reflujo, se enfrió luego, y se añadió la mezcla a una mezcla de acetato de etilo (45 ml) y agua (80 ml). La mezcla se ajustó a pH 7,5 por adición gradual de ácido clorhídrico 5 N. La capa orgánica separada se lavó con agua (80 ml), se añadió agua (80 ml) nuevamente, y se ajustó a pH 1-1,5 con ácido clorhídrico 5 N. La capa orgánica se separó por separación de fases. Se añadió acetato de etilo a la capa acuosa remanente, se ajustó a pH 8,0 con hidróxido de sodio acuoso 5 N, y se extrajo luego. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera saturada, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título (4,3 g). Este compuesto puede convertirse en hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(1-piperazinil)benzoxazol por tratamiento con ácido clorhídrico 4 N/acetato de etilo en acetato de etilo.

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,83 (1H, br), 2,37 (3H, m), 2,99 (4H, m), 3,68 (4H, m), 3,00 (2H, m), 6,81 (1H, J = 1,2 Hz), 7,13 (1H, d, J = 1,2 Hz).

MS (EI): m/z 252 (M^{+}+1).

Ejemplo de Referencia 5

7-(terc-Butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-mercaptobenzoxazol (a) 4-Cloro-2,6-dinitrofenol

Se añadió gradualmente tetrafluoroborato de nitronio en polvo (4,9 g) a una solución de 4-cloro-2-nitrofenol (4 g, 23 mmol) en acetonitrilo (100 ml) enfriada a -26ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas mientras la temperatura se elevaba a -10ºC, y la reacción se paró por adición de 10 ml de agua. Se evaporó el acetonitrilo a presión reducida, y el residuo se diluyó con dietil-éter. La capa de éter se lavó con agua, se lavó luego dos veces con salmuera saturada, y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se evaporó el disolvente por concentración a vacío para obtener el compuesto del título como cristales en placas amarillas (5,1 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,06 (2H, brs).

MS (EI): m/z: 218 (M^{+}).

(b) 2-Amino-4-cloro-6-nitrofenol

El compuesto del Ejemplo de Referencia 5 (a) (4-cloro-2,6-dinitrofenol, 5,1 g, 23,7 mmol) se disolvió en etanol anhidro (106 ml), y se añadió a la solución ácido clorhídrico 5 N (28,4 ml), después de lo cual se añadió gradualmente a la mezcla cloruro estannoso hidratado (16 g) a 25ºC. Después de agitar durante 15 minutos, se evaporó el disolvente a presión reducida, y el residuo se diluyó con n-hexano. La solución se lavó dos veces con agua, y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, después de lo cual se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título como un polvo pardo rojizo (2 g).

MS (EI): m/z: 188 (M^{+}).

(c) 2-(terc-Butiloxicarbonilamino)-4-cloro-6-nitrofenol

El compuesto del Ejemplo de Referencia 5 (b) (2-amino-4-cloro-6-nitrofenol, 0,376 g) se disolvió en 1,2-dicloroetano (12 ml), y a continuación se añadieron a la solución trietilamina (3 ml), dicarbonato de di-terc-butilo (2 ml), e hidrocloruro de hidroxilamina (0,07 g). Después de agitar durante 3 horas a reflujo, la reacción se paró por adición de agua (10 ml). La mezcla de reacción se diluyó con n-hexano (30 ml), y la capa orgánica se lavó con 20 ml de agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y el disolvente se evaporó a presión reducida para obtener un producto bruto aceitoso (1,2 g). El producto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano = 5:95) para obtener el compuesto del título como cristales amarillos (0,45 g).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 1,44 (9H, s), 7,63 (1H, m), 8,18 (1H, br).

MS (TPS): m/z 287 (M^{+}-1).

(d) 7-(terc-Butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-mercapto-benzoxazol

El compuesto del Ejemplo de Referencia 5 (c) (2-(terc-butiloxicarbonilamino)-4-cloro-6-nitrofenol, 1,0 g) se disolvió en etanol anhidro (20 ml), y se suspendió en la solución platino sobre sulfuro de carbono (0,1 g) en corriente de gas inerte. La atmósfera se reemplazó con hidrógeno gaseoso a 20ºC, y se agitó la mezcla durante aproximadamente 2 horas. Una vez completada la reacción, el catalizador se separó rápidamente por filtración utilizando Celita. Se añadieron al filtrado disulfuro de carbono (10 ml) e hidróxido de potasio (0,97 g), y se agitó a 60ºC durante aproximadamente 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y el disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se disolvió en agua (20 ml). Se añadió poco a poco ácido clorhídrico 1 N a la solución acuosa, y los sólidos depositados cuando se ajustó el pH a 7,0 se recogieron por filtración, y se secaron a presión reducida para obtener el compuesto del título (1,5 g).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 1,45 (9H, s), 6,78 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,03 (1H, d, J = 1,9 Hz).

Ejemplo de Referencia 6

5,7-Dicloro-2-mercapto-6-metilbenzoxazol (a) 2,4-Dicloro-3-metil-6-nitrofenol

Se disolvió 1,4-dicloro-3-metilfenol (5 g) en ácido acético (12,5 ml), y se añadió a la solución ácido sulfúrico concentrado (d = 1,86, 50 ml). Se añadió a la mezcla gradualmente un ácido mixto (2,5 ml de ácido nítrico al 70% + 10 ml de ácido sulfúrico concentrado) durante 30 minutos o más bajo enfriamiento con hielo, se calentó luego a la temperatura ambiente, y se continuó la agitación durante 2 horas aproximadamente. Esta mezcla de reacción se vertió en agua con hielo (50 ml), y los sólidos depositados se recogieron por filtración y se secaron para obtener el compuesto del título como un sólido amarillo rojizo (5,92 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,06 (2H, brs).

MS (EI) m/z: 218 (M^{+}).

(b) 5,7-Dicloro-2-mercapto-6-metilbenzoxazol

El compuesto del Ejemplo de Referencia 6 (a) (2,4-dicloro-3-metil-6-nitrofenol, 2,1 g) se disolvió en una mezcla de etanol (40 ml) y acetato de etilo (40 ml), y se suspendió platino sobre sulfuro de carbono (0,2 g) en la solución en corriente de gas inerte. La atmósfera se reemplazó con hidrógeno gaseoso a 25ºC, y se mantuvo el sistema de reacción en reacción durante aproximadamente 20 horas. Se separó de la mezcla de reacción el catalizador de platino por filtración, y se añadieron al filtrado etanol anhidro (40 ml) y sulfuro de carbono (20 ml). Se añadió luego a la mezcla hidróxido de potasio (0,6 g), y se dejó reaccionar la mezcla a 60ºC durante 8 horas. Después de enfriar la mezcla de reacción a la temperatura ambiente, se evaporó el disolvente a presión reducida, y el residuo se disolvió en agua (20 ml). Esta solución acuosa se acidificó débilmente (pH = 4) por adición de ácido clorhídrico. El precipitado se recogió por filtración, y se secó a presión reducida para obtener el compuesto del título (0,73 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,50 (3H, s), 7,15 (1H, s).

MS (EI) m/z: 233 (M^{+}-1).

Ejemplo de Referencia 7

5-Cloro-2-mercapto-6,7-dimetilbenzoxazol (a) 4-Cloro-2,3-dimetil-6-nitrofenol

Se disolvió 2,3-xilenol (5 g, 40,9 mmol) en tolueno (100 ml), y se añadió a la solución 2-aminopiridina (0,3 g, 3,2 ml). Se añadió a la mezcla cloruro de tionilo (3,3 ml) a la temperatura ambiente con agitación, y se agitó luego a 70ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y se evaporaron luego el exceso de reactivos y del disolvente a presión reducida para obtener una sustancia aceitosa. La sustancia se disolvió en ácido acético (12,5 ml), y se añadió a la solución ácido sulfúrico concentrado (50 ml), después de lo cual se añadió gota a gota un ácido mixto (2,5 ml de ácido nítrico al 70% + 10 ml de ácido sulfúrico concentrado) a la temperatura ambiente durante 30 minutos o más. La mezcla se agitó ulteriormente durante 2 horas, y se vertió en agua con hielo (500 ml). El precipitado se recogió por filtración, y se secó para obtener un producto bruto (3,8 g). El producto se purificó por cromatografía en columna de sílice (n-hexano:acetato de etilo = 2/1 v/v) para obtener el compuesto del título (1,5 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,18 (3H, s), 2,24 (3H, s), 6,72 (1H, s).

MS (EI) m/z: 201 (M^{+}), 203 (M^{+}+2).

(b) 5-Cloro-2-mercapto-6,7-dimetilbenzoxazol

El compuesto del Ejemplo de Referencia 7 (a) (4-cloro-2,3-dimetil-6-nitrofenol, 1,51 g, 7,52 mmol) se disolvió en una mezcla de etanol (15 ml) y acetato de etilo (25 ml), después de lo cual se suspendió platino sobre sulfuro de carbono (0,15 g) en la solución en corriente de gas inerte. Subsiguientemente, se sustituyó la atmósfera por hidrógeno gaseoso, y se agitó la mezcla de reacción durante 3 horas. Se separó el catalizador de platino por filtración, y se añadieron a la solución resultante etanol anhidro (40 ml) y disulfuro de carbono (20 ml), se añadió luego hidróxido de potasio (1,24 g), y la mezcla se agitó a 60ºC durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y después de ello se evaporó el disolvente a presión reducida. El residuo se diluyó con cantidades apropiadas de acetato de etilo e hidróxido de sodio acuoso 1 N. Se separó la capa acuosa de la solución, y se acidificó débilmente (pH = 4) con ácido clorhídrico concentrado. El precipitado se recogió por filtración, y se secó a presión reducida para obtener el compuesto del título (1,01 g).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 2,39 (3H, s), 2,43 (3H, s), 7,09 (1H, s).

MS (EI) m/z: 213 (M^{+}), 215 (M^{+}+2).

Ejemplo de Referencia 8

5,7-Dicloro-2-mercaptobenzoxazol

Se disolvió 4,6-dicloro-2-nitrofenol (5 g) en una mezcla de etanol (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y se suspendió platino sobre sulfuro de carbono (0,5 g) en la solución en corriente de gas inerte. Se sustituyó la atmósfera por hidrógeno gaseoso a 20ºC, y la suspensión se agitó durante aproximadamente 4 horas. Se separó el catalizador de platino de la mezcla de reacción por filtración, se añadieron a la solución resultante etanol anhidro (100 ml), disulfuro de carbono (50 ml), e hidróxido de potasio (1,6 g) sucesivamente, y después de ello la mezcla se agitó a 60ºC durante aproximadamente 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y a continuación se evaporó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con cantidades apropiadas de acetato de etilo y agua. La capa acuosa de la solución se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico concentrado. El precipitado se recogió por filtración, y se secó a presión reducida para obtener el compuesto del título como un sólido blanco (4,7 g).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,09 (1H, m), 7,26 (1H, m).

Ejemplo 1

Preparación de 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-6-metil.-benzoxazol, hidrocloruro, sulfato, y metanosulfonato del mismo (a) 5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol

En atmósfera de nitrógeno, se añadió homopiperazina (70 g, 0,35 mol) con agitación a una suspensión de 5-cloro-2-mercapto-7-metilbenzoxazol (70 g, 35 mol) en tolueno (1,4 l), y a continuación la mezcla se calentó a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a la temperatura ambiente, y se vertió en una mezcla de acetato de etilo (0,7 l) y agua (0,7 l). Se añadió a la mezcla gota a gota ácido clorhídrico 6 N (55 ml) con agitación para ajustar su pH a 7,5. La capa orgánica separada se lavó con agua (1,2 l). Se añadió a agua (1,2 l) la capa orgánica restante, y a continuación se añadió gota a gota ácido clorhídrico 6 N con agitación para ajustar el pH a 1-1,5. Se añadió a la capa acuosa separada acetato de etilo (1,4 l), y se añadió luego hidróxido de sodio acuoso 5 N (180 ml) con agitación para ajustar su pH a 8,0. La capa orgánica separada se lavó con agua (1,4 l), y se secó con sulfato de magnesio anhidro, después de lo cual se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título como un producto bruto (59 g). Se añadió carbono activado (1,5 g) a una solución del producto bruto en acetato de etilo (1,2 l) y la mezcla se agitó durante 30 minutos a la temperatura ambiente. A continuación, se separó por filtración el carbono activado, y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se añadió acetonitrilo (177 ml) al sólido resultante, y se disolvió por calentamiento de la mezcla a 60ºC con agitación. La solución uniforme resultante se dejó en reposo para enfriamiento a la temperatura ambiente durante 1 hora, y se enfrió luego adicionalmente a 5ºC. Los cristales depositados se recogieron por filtración, y se secaron a presión reducida a 40ºC durante 4 horas para obtener el compuesto del título (34 g).

pf: 93-94ºC

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,81 (1H, s), 1,90 (2H, m), 2,30 (3H, s), 2,90 (2H, t, J = 6,5 Hz), 3,0 (2H, m), 3,71 (4H, m), 6,70 (1H, d, J = 1,2 Hz), 7,00 (1H, d, J = 1,2 Hz).

Análisis elemental:

Encontrado: C, 58,5; H, 6,1; N, 15,7

Calculado para C_{13}H_{16}N_{3}OCl (%): C, 58,7; H, 6,1; N, 15,8.

(b) Hidrocloruro de 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol

Se disolvió 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol (12 g) en acetato de etilo (200 ml), y se añadió gota a gota a la solución ácido clorhídrico 4N/acetato de etilo (16,9 ml, Kokusan Kagaku Co., Ltd.) a la temperatura ambiente con agitación. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 30 minutos enfriando con hielo, y el precipitado incoloro producido se recogió por filtración. El precipitado se secó a 35ºC a presión reducida durante 4 horas para obtener el compuesto del título (14,5 g).

^{1}H-NMR (D_{2}O) \delta: 2,11 (2H, m), 2,16 (3H, s), 3,27 (2H, m), 3,35 (2H, m), 3,69 (2H, m), 3,88 (2H, m), 6,78 (1H, s), 6,90 (1H, s).

(c) Sulfato de 5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol

A una solución de 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol (2,5 g) en acetato de etilo (75 ml) se añadió gota a gota una solución ácido sulfúrico/metanol preparada por separado [preparada por adición de metanol a ácido sulfúrico de 95% (0,53 ml) hasta un volumen total de 12,5 ml] a la temperatura ambiente con agitación. La mezcla se agitó durante 1 hora enfriando con hielo, y el precipitado incoloro producido se recogió por filtración. El precipitado se secó a 35ºC a presión reducida durante 5 horas para obtener el compuesto del título (3,3 g).

Ejemplo 1 (c)

Método Alternativo 1

El compuesto del Ejemplo 1 (a) [5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol, 2900 g] se disolvió en ácido sulfúrico 1 N (5,8 l), y se añadieron a la solución acuosa etanol (145 l) y acetato de etilo (99 l) sucesivamente. La mezcla se agitó a 5ºC durante una noche, y el producto depositado se recogió por filtración, y se secó a vacío a 40ºC durante aproximadamente 6 horas para obtener el compuesto del título como cristales blancos (3200
g).

Ejemplo 1 (c)

Método Alternativo 2

Se añadió etanol (20 l) una solución en acetato de etilo (13,4 l) del producto bruto, obtenido del proceso del ejemplo 1 (a), que contenía 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol (824 g), y se añadió luego ácido sulfúrico acuoso 2 N (2,98 l). Se añadió a la solución acetato de etilo (6,6 l), y se agitó a 5ºC durante una noche. El precipitado depositado se recogió por filtración, y se secó a vacío a 40ºC para obtener el compuesto del título como un polvo blanco (1010 g).

^{1}H-NMR (D_{2}O) \delta: 2,19 (2H, m), 2,19 (3H, s), 3,30 (2H, m), 3,41 (2H, m), 3,76 (2H, m), 3,98 (2H, m), 6,89 (1H, s), 6,99 (1H, s).

Análisis elemental:

Encontrado (%): C, 40,5; H, 5,5; N, 10,5

Calculado para C_{13}H_{18}N_{3}O_{5}S_{1}Cl_{1} (%): C, 42,92; H, 4,99; N, 11,55.

(d) Metanosulfonato de 5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol

A una solución de 5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol (2,5 g) en acetato de etilo (75 ml) se añadió gota a gota una solución ácido metanosulfónico/metanol preparada separadamente [preparada por adición de metanol a ácido metanosulfónico (0,61 ml) hasta un volumen total de 12,5 ml] a la temperatura ambiente con agitación. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 1 hora a la temperatura ambiente y durante 1 hora enfriando con hielo, después de lo cual el precipitado incoloro producido se recogió por filtración. El precipitado se secó a presión reducida a 40ºC durante 5 horas para obtener el compuesto del título (3,0 g).

^{1}H-NMR (D_{2}O) \delta: 2,09 (2H, m), 2,12 (3H, s), 2,66 (3H, m), 3,26 (2H, m), 3,33 (2H, m), 3,64 (2H, m), 3,82 (1H, s), 3,69 (1H, s), 6,82 (1H, s).

Ejemplo Comparativo 2

5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metoxibenzoxazol

El compuesto del título (127 mg) se obtuvo a partir de 5-cloro-2-mercapto-7-metoxibenzoxazol (250 mg, 1,16 mmol) y homopiperazina (232 mg) del mismo modo que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,95 (2H, m), 2,10 (1H, br), 2,92 (2H, t, J = 5,8 Hz), 3,07 (2H, m), 3,0 (2H, m), 3,79 (4H, m), 3,94 (3H, s), 6,58 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,96 (1H, d, J = 2,0 Hz).

MS (TSP): m/z 282 (M^{+}+1).

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Ejemplo Comparativo 3

5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-6-metilbenzoxazol

El compuesto del título (115 mg) se obtuvo a partir de 5-cloro-2-mercapto-6-metilbenzoxazol (200 mg, 1,16 mmol) y homopiperazina (200 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,95 (4H, m), 2,39 (3H, s), 2,92 (2H, t, J = 5,6 Hz), 3,07 (2H, m), 3,0 (2H, m), 3,78 (4H, m), 7,10 (1H, s), 7,30 (1H, s).

MS (TSP): m/z 266 (M^{+}+1).

Ejemplo Comparativo 4

5-Cloro-7-etil-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del título (177 mg) se obtuvo a partir de 5-cloro-7-etil-2-mercaptobenzoxazol (200 mg, 1,16 mmol) y homopiperazina (188 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,29 (3H, t, J = 7,6 Hz), 1,97 (2H, m), 2,10 (1H, br), 2,75 (2H, q, J = 8,4 Hz), 2,93 (2H, d, J = 5,8 Hz), 3,08 (2H, m), 3,80 (4H, m), 6,81 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,14 (1H, d, J = 1,9 Hz).

Ejemplo Comparativo 5

5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-hidroximetilbenzoxazol

Se obtuvo el compuesto del título (177 mg) a partir de 5-cloro-7-hidroximetil-6-metilbenzoxazol (20 mg, 0,23 mmol) y homopiperazina (46 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 2,11 (2H, br), 3,22 (2H, br), 3,33 (1H, br), 3,44 (2H, br), 3,77 (2H, m), 3,94 (2H, m), 4,65 (2H, s), 7,05 (1H, s), 7,23 (1H, s), 9,18 (br).

Ejemplo Comparativo 6

7-Acetamino-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del título (173 mg, 46%) se obtuvo a partir del compuesto del Ejemplo de Referencia 3 (7-acetamino-5-cloro-2-mercaptobenzoxazol, 292 mg, 1,20 mmol) y homopiperazina (482 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,95 (2H, m), 2,25 (3H, s), 2,93 (2H, t, J = 5,6 Hz), 3,07 (2H, m), 3,78 (4H, m), 7,08 (1H, br), 7,71 (1H, br).

MS (EI) m/z: 308 (M^{+}).

Ejemplo Comparativo 7

7-(terc-Butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del título (1,34 g) se obtuvo a partir del compuesto del Ejemplo de Referencia 5 (7-(terc-butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-mercaptobenzoxazol, 1,15 g, 3,82 mmol) y homopiperazina (1,91 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,56 (9H, s), 1,96 (2H, m), 2,93 (2H, m), 3,09 (2H, m), 3,78 (2H, m), 3,81 (2H, m), 6,58 (1H, br), 7,01 (1H, d, J = 2 Hz), 7,65 (0,8H, br).

MS (TSP) m/z: 367 (M^{+}+1).

Ejemplo Comparativo 8

Hidrocloruro de 7-(amino-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)-benzoxazol

Se añadieron 10 ml de ácido clorhídrico 5 N al compuesto del Ejemplo 7 (7-(terc-butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol, 0,68 g, 1,87 mmol), y la mezcla se dejó reaccionar a 5ºC durante 1 hora. Después de evaporar el exceso de ácido clorhídrico y agua por concentración a vacío, el residuo se suspendió en etanol, y el producto depositado se recogió por filtración y se secó para obtener el compuesto del título como hidrocloruro (0,45 g).

^{1}H-NMR (D_{2}O) \delta: 2,14 (2H, m), 3,29 (2H, m), 3,41 (2H, m), 3,75 (2H, m), 3,94 (2H, m), 6,67 (1H, d, J = 2 Hz), 6,81 (1H, d, J = 1,40 Hz).

MS (EI) m/z: 266 (M^{+}).

Ejemplo Comparativo 9

5,7-Dicloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del título (0,18 g) se obtuvo a partir del compuesto del Ejemplo de Referencia 8 (5,7-dicloro-2-mercaptobenzoxazol, 0,17 g, 0,59 mmol) y homopiperazina (0,89 g) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,98 (2H, m), 2,95 (2H, m), 3,10 (2H, m), 3,82 (2H, m), 3,83 (2H, m), 6,98 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,18 (1H, d, J = 1,7 Hz).

Ejemplo Comparativo 10

5,7-Dicloro-2-(1-homopiperazinil)-6-metilbenzoxazol

El compuesto del título (77 mg) se obtuvo a partir del compuesto del Ejemplo de Referencia 6 (5,7-dicloro-2-mercapto-6-metilbenzoxazol, 90 mg, 0,384 mmol) y homopiperazina (115 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,97 (2H, m), 2,46 (3H, s), 2,94 (2H, m), 3,09 (2H, m), 3,79 (2H, m), 3,82 (2H, m), 7,24 (1H, s).

Ejemplo Comparativo 11

5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-6,7-dimetilbenzoxazol

El compuesto del título (103 mg) se obtuvo a partir del compuesto del Ejemplo de Referencia 7 (5-cloro-2-mercapto-6,7-dimetilbenzoxazol, 100 mg, 0,468 mmol) y homopiperazina (141 mg) de la misma manera que en el Ejemplo 1 (a).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,95 (2H, m), 2,33 (3H, s), 2,36 (3H, s), 2,92 (2H, m), 3,08 (2H, m), 3,77 (2H, m), 3,80 (2H, m), 7,19 (1H, s).

Ejemplo Comparativo 12

7-(Bencilamino)-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol (a) [7-Amino-5-cloro-2-[1-(4-benciloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol

El compuesto del Ejemplo 7 [7-(terc-butiloxicarbonilamino)-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol, 0,2 g,
0,545 mmol] se disolvió en cloruro de metileno (4 ml), y se añadió a la mezcla trietilamina (0,153 ml), y posteriormente cloroformiato de bencilo (0,094 ml) a 5ºC. Después de agitar durante aproximadamente 3 horas, se añadió a la mezcla de reacción hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (3 ml) para detener la reacción. La solución se diluyó con dietil-éter (10 ml) para la separación de fases. La capa acuosa se extrajo con dietil-éter (10 ml). Se añadió agua (10 ml) a una solución combinada del extracto y la capa orgánica anterior, y se acidificó fuertemente el todo por adición de ácido clorhídrico 5 N. Se separó la capa acuosa, y se añadió dietil-éter (10 ml), después de lo cual se alcalinizó con hidróxido de sodio acuoso 5 N. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada (20 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (282 mg).

(b) 7-(Bencilamino)-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

Se añadió ácido acético (0,067 ml) a una solución del compuesto del ejemplo 12 (a) [7-amino-5-cloro-2-[1-(4-benciloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol, 47 mg, 0,117 mmol] en 1,2-dicloroetano (12 ml), y se añadió la mezcla a triacetoxiborohidruro de sodio (50 mg) enfriando con hielo. Después de agitar durante aproximadamente 3 horas, se añadió a la mezcla de reacción hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado para detener la reacción, y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, y se secó luego sobre sulfato de magnesio anhidro. Se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener un producto bruto como un aceite (55 mg). El aceite se disolvió en cloruro de metileno (2 ml), y la solución se añadió a 0ºC a una solución 1 M de tricloruro de boro en cloruro de metileno (0,26 ml) disponible comercialmente, después de lo cual se agitó la mezcla durante 3 horas. A continuación, se paró la reacción utilizando hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, y la capa orgánica se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó luego el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título como un producto bruto. El producto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (cloruro de metileno:metanol = 5:1 v/v) para obtener el compuesto del título (7 mg).

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 1,87 (2H, m), 2,86 (2H, m), 2,98 (2H, m), 3,69 (2H, m), 3,70 (2H, m), 4,36 (2H, s), 6,30 (1H, d, J = 1,9 Hz), 6,69 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,22-7,34 (5H, m).

MS (TSP) m/z: 357 (M^{+}+1).

Ejemplo Comparativo 13

5-Cloro-7-etilamino-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del Ejemplo 8 (7-acetamino-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol, 23 mg) se disolvió en THF (2 ml) y se añadió a la solución hidruro de litio y aluminio (13 mg) a 0ºC, se agitó luego la solución durante aproximadamente 3 horas. La reacción se paró con agua (1 ml) y se diluyó la solución con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título (4 mg).

^{1}H-NMR (D_{2}O) \delta: 1,15 (3H, t, J = 7,3 Hz), 2,14 (2H, m), 3,29 (2H, m), 3,31 (2H, m), 3,40 (2H, m), 3,75 (2H, t, J = 5 Hz), 3,94 (2H, t, J = 5,1 Hz), 6,85 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,02 (1H, d, J = 1,4 Hz).

MS (FAB) m/z: 295 (M^{+}+1).

Ejemplo Comparativo 14

5-Cloro-7-metanosulfonilamino-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol (a) 7-Amino-5-cloro-2-[1-(4-terc-butiloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol

El compuesto del Ejemplo 8 (7-amino-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol, 0,12 g) se disolvió en cloruro de metileno (12 ml), y se añadió a la solución tri-etilamina (0,25 ml). La solución se enfrió con hielo, se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (0,170 ml), y la mezcla se agitó luego durante aproximadamente 3 horas. Se paró la reacción por la adición de hidrogenocarbonato de sodio acuoso saturado (5 ml), y la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (20 ml). La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada (20 ml), y la capa orgánica resultante se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener el compuesto del título como un aceite negro grisáceo (0,272 g).

(b) Hidrocloruro de 5-cloro-7-metanosulfonilamino-2-(1-homopiperazinil)-benzoxazol

El compuesto del ejemplo 14 (a) (7-amino-5-cloro-2-[1-(4-terc-butiloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol, 45 mg, 123 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (2 ml), y se añadieron sucesivamente a la solución trietilamina (0,052 ml) y cloruro de metanosulfonilo (0,01 ml) a 0ºC. Después de agitar la mezcla de reacción durante 3 horas, se paró la reacción utilizando solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, y la capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se añadió a la solución ácido clorhídrico 4 N en acetato de etilo (1 ml), y los sólidos depositados se recogieron por filtración para obtener el compuesto del título (20 mg).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 2,22 (2H, m), 3,05 (3H, s), 3,35 (2H, m), 3,47 (2H, m), 3,86 (2H, t, J = 6,1 Hz), 4,04 (2H, t, J = 5,6 Hz), 7,10 (2H, m).

MS (FAB) m/z: 345 (M^{+}+1).

Ejemplo Comparativo 15

Hidrocloruro de 7-benzoilamino-5-cloro-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del ejemplo 14 (a) (7-amino-5-cloro-2-[1-(4-terc-butiloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol, 48 mg, 0,130 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (2 ml), y se añadieron sucesivamente a la solución trietil-amina (0,056 ml), y cloruro de benzoílo (0,031 ml) a 0ºC. Después de agitar la mezcla de reacción durante 3 horas, la reacción se paró utilizando solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, y la capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se añadió a la solución ácido clorhídrico 4 N en acetato de etilo (1 ml), y los sólidos depositados se recogieron por filtración para obtener el compuesto del título (20 mg).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 2,28 (2H, m), 3,42 (2H, m), 3,53 (2H, m), 3,92 (2H, t, J = 6,1 Hz), 4,09 (2H, m), 7,25 (1H, d, L = 2,0 Hz), 7,37 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,55 (2H, t, J = 7,3 Hz), 7,64 (1H, t, J = 7,5 Hz), 7,98 (2H, m).

MS (FAB) m/z: 371 (M^{+}+1).

\newpage

Ejemplo Comparativo 16

Hidrocloruro de 5-cloro-7-isobutirilamino-2-(1-homopiperazinil)benzoxazol

El compuesto del Ejemplo 14 (a) (7-amino-5-cloro-2-[1-(4-terc-butiloxicarbonil)homopiperazinil]benzoxazol, 58 mg, 0,159 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (2 ml), y se añadieron sucesivamente a la solución trietil-amina (0,067 ml) y cloruro de isobutiroílo (0,013 ml) a 0ºC. Después de agitar la mezcla de reacción durante 3 horas, se paró la reacción utilizando solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, y la capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se añadió a la solución ácido clorhídrico 4 N en acetato de etilo (1 ml), y los sólidos depositados se recogieron por filtración para obtener el compuesto del título (45 mg).

^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 1,24 (6H, d, J = 7,1 Hz), 2,32 (2H, m), 2,79 (1H, m), 3,44 (2H, m), 3,57 (2H, m), 3,94 (2H, m), 4,15 (2H, m), 7,19 (1H, d, J = 1,9 Hz), 7,54 (1H, d, J = 1,9 Hz).

MS (FAB) m/z: 337 (M^{+}+1).

Ejemplo de Formulación 1

Preparación de tabletas

Se mezclaron hidrocloruro del compuesto del Ejemplo 1 (3,0 g), lactosa (83,0 g), sodio-carboximetil almidón (10,0 g) e hidroxipropilcelulosa (3,0 g), se añadió a la mezcla agua purificada (6,0 g) y se amasó el todo. La mezcla se granuló, se secó, y se tamizó para ajuste de la granulometría. Los gránulos resultantes se mezclaron con estearato de magnesio (1,0 g) y se comprimieron en tabletas de 100 mg para obtener tabletas, cada una de las cuales contenía 3,0 mg de hidrocloruro del compuesto del Ejemplo 1.

Ejemplo de Formulación 2

Preparación de gránulos

Se mezclaron sulfato del compuesto del Ejemplo 1 (5,0 g), lactosa (759,5 g), eritritol (200,0 g), e hidroxipropilcelulosa (13,0 g), se añadió la mezcla a agua purificada (70,0 g) y se amasó el todo. La mezcla se granuló, se secó, y se tamizó para ajuste de la granulometría. Los gránulos resultantes se mezclaron con estearato de magnesio (5,0 g) y un agente saborizante (0,5 g) para obtener gránulos que contenían 5,0 mg de sulfato del compuesto del Ejemplo 1 por 1,0 g.

Ejemplo de Formulación 3

Preparación de inyección

Se disolvió hidrocloruro del compuesto del Ejemplo 1 (60,0 mg) en agua destilada para inyección de acuerdo con la Farmacopea Japonesa (90 ml), y se completó hasta 100,0 ml con agua destilada para inyección de acuerdo con la Farmacopea Japonesa. La solución resultante se filtró, se introdujo en viales (5,0 ml por cada vial), y se liofilizó de una manera convencional, después de lo cual se cerraron herméticamente los viales para obtener una preparación para inyección que contenía 3,0 mg de hidrocloruro del compuesto del Ejemplo 1 por vial. Esta preparación puede disolverse en solución salina fisiológica de acuerdo con la Farmacopea Japonesa (5,0 ml), inyección de glucosa de acuerdo con la Farmacopea Japonesa (5%, 5,0 ml), etcétera para su utilización, y la solución resultante puede administrarse directamente por vías intravenosa, subcutánea o análogas. Alternativamente, la solución resultante puede administrarse por incorporación de la misma en una solución inyectable para utilización en una infusión de goteo.

Ejemplo de Formulación 4

Preparación de supositorios

El metanosulfonato del compuesto del Ejemplo 1 (150,0 mg) se mezcló con una base para supositorios grasa fundida en caliente (Witepsol H15, 499,85 g), y la mezcla se introdujo en un molde (1,0 g por cada supositorio), y se enfrió para obtener supositorios que contenían 3,0 mg de metanosulfonato del compuesto del Ejemplo 1 por cada supositorio.

Ejemplo de Ensayo 1

Ensayo para la acción activadora del receptor 5-HT_{3}

La actividad antagonista de los receptores 5-HT_{3} de la serotonina y la acción activadora del receptor 5-HT_{3} de la serotonina de los compuestos típicos siguientes que caen dentro de los compuestos de benzoxazol de la presente invención:

2-(1-homopiperazinil)benzoxazol (a) (compuesto descrito en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 6-345744/1994), 5,7-dimetil-2-(4-metil-1-piperazinil)benzoxazol (b), 5,7-dimetil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (c), 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-piperazinil)benzoxazol (D), y 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-homopiperazinil)benzoxazol
(E) (compuestos descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998), y 5-cloro-7-metil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (F) (compuesto del Ejemplo de Referencia 3 de la presente memoria descriptiva), se midieron como sigue. Los resultados se muestran en la Tabla 1.

A partir del íleon de cobayos machos Hartley (500 g a 800 g), se prepararon muestras de músculo longitudinal de aproximadamente 20 mm. Las muestras se suspendieron a una tensión en reposo de aproximadamente 0,5 g en tubos Magnus, y se midió la reacción de contracción isométrica. Las muestras se trataron previamente dos veces con 0,3 \muM de 5-HTdurante 1 hora para desensibilizar los receptores 5-HT_{4}, y se administró luego 5-HT a una concentración de 0,1 a 30 \muM para examinar la reacción de contracción dependiente de la dosis por los receptores 5-HT_{3}. La reacción máxima se observó a una concentración de 10 \muM. El índice de la acción activadora de los receptores 5-HT_{3}, i.a., se representa como una relación de la reacción máxima obtenida por cada compuesto con relación a la reacción de contracción máxima obtenida con 10 \muM de 5-HT, que se define como 1. El índice de fuerza de fijación con el receptor 5-HT_{3}, pD_{2}, se representa con un valor logarítmico negativo de una concentración (concentración molar) que daba 50% de la reacción de contracción máxima para cada compuesto. En cuanto a la actividad antagonista de cada compuesto contra el receptor 5-HT_{3}, se calculó la relación inhibidora, que representa una relación de la contracción obtenida por aplicación de 10 \muM de 5-HTa una muestra tratada previamente con 10 \muM de cada compuesto con relación a la contracción obtenida por aplicación de 10 \muM de 5-HTa una muestra sin tratar.

Ensayo de la acción activadora del receptor 5-HT_{3}

Compuesto de ensayo	Antagonismo (10 \muM, %)	Acción activadora
		i.a.	pD_{2}
Compuesto del Ejemplo 1 (a)	95	0,12	7,48
Compuesto del Ejemplo Comparativo 2	88	0,36	6,53
Compuesto del Ejemplo Comparativo 3	88	0,08	6,72
Compuesto del Ejemplo Comparativo 4	89	0,07	7,75
Compuesto del Ejemplo Comparativo 6	90	0,35	5,40
Compuesto del Ejemplo Comparativo 7	83	0,31	5,70
Compuesto del Ejemplo Comparativo 8	83	0,55	6,36
Compuesto del Ejemplo Comparativo 9	97	0,13	7,25
Compuesto del Ejemplo Comparativo 10	96	0,09	7,25
Compuesto del Ejemplo Comparativo 11	89	0,14	7,45
Compuesto del Ejemplo Comparativo 12	88	0,05	6,72
Compuesto del Ejemplo Comparativo 14	46	0,13	5,47
Compuesto del Ejemplo Comparativo 16	15	0,10	5,25
A	- -	0,32	5,77
B	- -	0,62	6,32
C	91	0,12	7,15
D	94	0,27	6,79
E	98	0,17	7,67
F	90	0,14	7,56

Ejemplo de Ensayo 2

Ensayo para la Acción Inhibidora de la diarrea de la rata bajo tensión de restricción

La acción inhibidora de la diarrea de la rata bajo tensión de restricción del compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva, hidrocloruro de 5,7-dimetil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (c) e hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-homopiperazinil)benzoxazol (E) (compuestos descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998), y Granisetron (G) de acuerdo con el método de C.L. Williams et al. [GASTROENTEROLOGY, 94, 611-621 (1988)] se determinó como sigue, y los resultados se analizaron por el método no lineal de mínimos cuadrados. Los resultados se muestran en la Tabla 2.

Ratas Wistar macho de 8 semanas se privaron de alimento desde la tarde del día anterior al ensayo. Cada compuesto de ensayo se administró por vía oral a las ratas. Después de 30 minutos, las ratas se constriñeron por fijación con alambres de sus extremidades anteriores y sus extremidades posteriores. Las ratas se mantuvieron en jaulas individuales sobre láminas blancas bajo lámparas luminiscentes durante 3 horas. Cuando el pelo próximo a sus anos se ensució con heces, o sus heces no tenían formas sólidas, se determinó que las ratas sufrían diarrea. El ensayo se realizó con grupos de ratas cada uno de los cuales estaba constituido por 8 ratas.

Acción inhibidora de la diarrea de la rata bajo tensión de restricción

Compuesto de ensayo	Valor DE_{50}(mg/kg)
Compuesto del Ejemplo 1 (b)	0,00025
Hidrocloruro de C	0,0272
Hidrocloruro de E	0,0041
G	0,025

Ejemplo de Ensayo 3

Efecto sobre la capacidad de transporte del intestino grueso de los ratones normales

El efecto sobre la capacidad de transporte del intestino grueso de los ratones normales del compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva, hidrocloruro de 5,7-dimetil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (c) e hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-homopiperazinil)benzoxazol (E) (compuestos descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998), y Granisetron (G) de acuerdo con el método de Pendleton R.G. et al. [Drug. Dev. Res., 9, 241-247 (1986)] se determinó como sigue. Los resultados se muestran en la Tabla 3.

Cada compuesto de ensayo se administró por vía oral a ratones macho ddY de 5 a 7 semanas que se privaron de alimento durante aproximadamente 4 horas. Después de 30 minutos, se insertó una bolita de vidrio que tenía un diámetro de aproximadamente 3 mm desde el ano en el colon de cada ratón, y se colocó en una posición distante 3 cm del ano. Después de la inserción de la bolita de vidrio, se midió el tiempo (segundos) desde la inserción hasta la excreción de la bolita por ano, y se utilizó el tiempo como índice de la capacidad de transporte del intestino grueso. El ensayo se realizó utilizando grupos de ratones cada uno de los cuales estaba constituido por 9 a 11 ratones, y todos los procedimientos se realizaron sin anestesia.

Efecto sobre la capacidad de transporte del intestino grueso de ratones normales

Compuesto de ensayo	Dosis (mg/kg)
	0	3	10	30
Compuesto del Ejemplo 1 (b)	199,18	218,39	313,60	239,11
Hidrocloruro de C	225,87	234,01	251,00	357,08
Hidrocloruro de E	225,87	271,91	318,95	248,56
G	199,18	206,44	258,47	475,93

Ejemplo de Ensayo 4

Ensayo de actividad metabólica en el hígado humano con sistema in vitro

La actividad metabólica en el hígado humano del compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva, hidrocloruro de 5,7-dimetil-2-(1-piperazinil)-benzoxazol (c), hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-piperazinil)benzoxazol (D) e hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-homopiperazinil)benzoxazol (E) (compuestos descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998), se determinó utilizando un sistema de ensayo in vitro que utilizaba la fracción humana S9 como sigue. Los resultados se muestran en la Tabla 4.

El ensayo se realizó en un sistema in vitro que utilizaba la fracción S9 de hígado humano en presencia de un sistema de producción de NADPH descrito a continuación. Se preparó una mezcla de reacción de un volumen total de 125 \mul que contenía componentes en concentraciones finales dadas (50 \mumol/l de compuesto de ensayo, 6 mmol/l de MgCl_{2}\cdot6H_{2}O, 1 mmol/l de \beta-NADP^{+}, 10 mmol/l de glucosa-6-fosfato (G-6-P), 0,7 U/ml de G-6-P-deshidrogenasa, 100 mmol/l de fosfato de potasio (pH 7,4), 0,1 mmol/l de ED-TANa_{2}, y 1 mg/l de S9 de hígado humano), y se incubó a 37ºC durante 15 minutos. La reacción se paró por la adición de 125 \mul de N,N-dimetilformamida que contenía una sustancia como patrón interno. Se centrifugó la mezcla de reacción (2.000 x g, 10 minutos), y el sobrenadante se sometió a análisis por HPLC para determinar la concentración de sustancia inalterada. La cantidad consumida se calculó a partir de la concentración de sustancia inalterada, y la tasa de metabolismo se representó como actividad por cantidad unitaria de proteína. Para la medida del compuesto del Ejemplo 1, compuestos C y E, se utilizó el Compuesto D como sustancia patrón interna. Para la medida del Compuesto D, se utilizó como sustancia patrón interna un compuesto descrito en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998, 5,7-dicloro-2-(4-metil-1-piperazinil)benzoxazol.

Ensayo para la actividad metabólica en hígado humano utilizando un sistema in vitro

Compuesto de ensayo	Actividad metabólica^{1)}
Compuesto del Ejemplo 1 (b)	N.D.^{2)}
Hidrocloruro de C	0,06
Hidrocloruro de D	0,87
Hidrocloruro de E	0,50
1) Unidad: nmol/min/mg proteína
2) N.D. significa que la concentración de compuesto de ensayo en una muestra no se modificó
antes y después de la incubación.

Ejemplo de Ensayo 5

Ensayo de mutación inversa

Se realizó un ensayo de mutagenicidad inversa utilizando el compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva, hidrocloruro de 5,7-dimetil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (c), hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-piperazinil)benzoxazol (D), e hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(4-metil-1-homopiperazinil)-benzoxazol (E) (compuestos descritos en la Publicación de Patente Japonesa (KOKAI) No. 10-29987/1998), y el compuesto descrito en el Ejemplo de Referencia 4 de la presente memoria descriptiva, es decir, hidrocloruro de 5-cloro-7-metil-2-(1-piperazinil)benzoxazol (F) de acuerdo con el método de T. Matsushima et al. (Noropoth K.H., Springer, Berlin-Heidelberg-Nueva York, "Short-Term Test Systems for Detecting Carcinogens", pp. 273-285, 1980) mencionado por la directriz 471 de la ORGANIZACIÓN PARA LA COOPERACIÓN Y EL DESARROLLO ECONÓMICO.

Como resultado, se determinó que el compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva, hidrocloruro del Compuesto (C), hidrocloruro del Compuesto (D), e hidrocloruro del Compuesto (E) eran negativos respecto a la mutagenicidad inversa, y se determinó que el hidrocloruro del Compuesto (F) era positivo para la mutagenicidad inversa.

Ejemplo 6

Ensayo de toxicidad

El compuesto del Ejemplo 1 (b) de la presente memoria descriptiva suspendido en agua destilada se administró oralmente a ratones macho de 7 semanas (cinco ratones). El compuesto del Ejemplo 1 (b) no dio lugar a muerte alguna de los animales a una dosis de 300 mg/kg.

Aplicabilidad industrial

Los derivados de benzoxazol de la presente invención son activadores parciales de los receptores 5-HT_{3} que tienen a la vez actividad antagonista fuerte sobre los receptores 5-HT_{3} y acción activadora de los receptores 5-HT_{3} (véase el Ejemplo de Ensayo 1), y mostraban un efecto inhibidor potente contra la diarrea inducida por la tensión de restricción (véase el Ejemplo de Ensayo 2). Adicionalmente, los compuestos de la presente invención no afectan a la capacidad de transporte del intestino grueso de los ratones normales (véase el Ejemplo de Ensayo 3). Además, los compuestos de la presente invención se metabolizan escasamente en el hígado humano (véase el Ejemplo de Ensayo 4), y exhiben una mutagenicidad inversa baja (véase el Ejemplo de Ensayo 5).

A partir de los hechos arriba mencionados, puede llegarse a la conclusión de que los activadores parciales de los receptores 5-HT_{3} que contienen los compuestos de la presente invención como ingrediente activo son útiles como agentes para tratamiento preventivo o terapéutico del síndrome de colon irritable, trastorno funcional del tracto digestivo, o diarrea.

Claims

1. 5-Cloro-2-(1-homopiperazinil)-7-metilbenzoxazol o una sal del mismo.

2. Un medicamento que comprende, como ingrediente activo, una sustancia seleccionada del grupo constituido por los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 y una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un hidrato del mismo y un solvato del mismo.

3. El medicamento de acuerdo con la reivindicación 2, que se utiliza para tratamiento preventivo y/o terapéutico de la afección de síndrome de colon irritable o trastorno funcional del tracto digestivo, o afección de diarrea.

4. El medicamento de acuerdo con la reivindicación 2, que se utiliza como agente antiemético.

5. Uso de los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 o una sal de los mismos para la fabricación del medicamento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4.

6. Un método para tratamiento preventivo y/o terapéutico de la afección del síndrome de colon irritable o trastorno funcional del tracto digestivo, o afección de diarrea, que comprende un paso de administrar a un mamífero con inclusión de un humano, una cantidad preventiva y/o terapéuticamente eficaz de una sustancia seleccionada del grupo constituido por los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, un hidrato de los mismos y un solvato de los mismos.

7. Un agente antagonista de los receptores 5-HT_{3} de la serotonina que comprende una sustancia seleccionada del grupo constituido por los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un hidrato de los mismos y un solvato de los mismos.

8. Un activador parcial del receptor 5-HT_{3} de la serotonina que comprende una sustancia seleccionada del grupo constituido por los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un hidrato de los mismos y un solvato de los mismos.