ES2217287T3 - Profarmaco antiviral mejorado. - Google Patents

Profarmaco antiviral mejorado.

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ES2217287T3
ES2217287T3 ES95940014T ES95940014T ES2217287T3 ES 2217287 T3 ES2217287 T3 ES 2217287T3 ES 95940014 T ES95940014 T ES 95940014T ES 95940014 T ES95940014 T ES 95940014T ES 2217287 T3 ES2217287 T3 ES 2217287T3
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Abstract

PROFARMACOS DE LIPIDO DE FOSFONOACIDOS Y SUS ANALOGOS QUE TIENEN ACTIVIDAD ANTIVIRAL INCREMENTADA SOBRE LOS FARMACOS PADRE EN LA INHIBICION DE CITOMEGALOVIRUS Y OTROS VIRUS SUSCEPTIBLES.

Description

Profármaco antiviral mejorado.
La presente invención se refiere generalmente a derivados lipídicos de agentes antivirales. Se refiere particularmente a profármacos lipídicos de fosfonoácidos y a su utilización en el tratamiento de infecciones virales.
El fosfonoacetato y el fosfonoformato se sintetizaron por primera vez en 1924 (Nylén, Chem. Berichte 57:1023); sin embargo, la capacidad de dichos compuestos de inhibir enzimas víricos de manera selectiva no se demostró inmediatamente. Helgstrand et al., Science 201:819-821 (1 de septiembre de 1978) dieron a conocer que tanto el ácido fosfonoacético como el ácido fosfonofórmico inhibían varias ADN polimerasas e inhibían preferentemente varias ADN polimerasas virales. En la actualidad se conoce que el fosfonoformato y el fosfonoacetato inhiben selectivamente la ADN polimerasa de muchos virus, incluyendo el citomegalovirus humano (HCMV), el virus del herpes simplex (HSV) y la transcriptasa inversa del virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). Chrisp y Clissold (1991), Drugs 41:104, examinan la farmacología de estos agentes. El fosfonoacetato es demasiado tóxico para su uso humano, pero está aprobada la utilización en el hombre del fosfonoformato (Foscavir, Astra) en pacientes de SIDA infectados por HCMV. Sin embargo, no es muy potente, requiere una administración intravenosa prolongada y es sustancialmente tóxico en los riñones y en otros órganos. Ericksson et al., patentes U.S. nº 4.215.113, nº 4.339.445, nº 4.665.062, nº 4.771.041, dan a conocer la utilización de ácido fosfonofórmico como agente selectivo en el tratamiento de infecciones virales, incluyendo el virus del herpes tipo I y II y el citomegalovirus, en el tratamiento del cáncer causado por virus, y también dificultando la transformación de células por virus oncogénicos.
Se conocen formas derivatizadas de los fosfonoácidos y formulaciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos. La patente U.S. nº 5.072.032 de McKenna da a conocer tiofosfonoácidos, las patentes nº 4.386.081 y 4.591.583 de Helgstrand et al. dan a conocer ésteres de ácido fosfonofórmico de alquilo, alquileno, alcoxi y grupos cíclicos y aromáticos relacionados, y algunos de dichos grupos se ha demostrado que inhiben el virus del herpes y las funciones y multiplicación intracelular del virus influenza. La patente U.S. nº 5.194.654 de Hosteller et al. da a conocer derivados fosfolipídicos de fosfonoácidos, su incorporación en liposomas y su utilización como agentes selectivos antivirales y antiretrovirales.
Existe una necesidad continuada de profármacos antivirales de los fosfonoácidos que sean menos tóxicos, más selectivos y más efectivos.
Sumario de la invención
Según la invención se proporcionan compuestos con la estructura [I] y los sustituyentes R1, R2, R3, Y, Z, A^{-}, X, m y n según se definen en el presente documento. Según una realización preferida de la invención, m es 0. En todavía otra realización preferida X es oxígeno.
Según otras realizaciones preferidas de la invención, R1 es un grupo O-alquilo; son particularmente preferidos los compuestos en los que R1 es un grupo O-octadecilo. También preferidos son los compuestos en los que R^{2} es un grupo O-bencilo o un grupo OCH_{3}.
En todavía otra realización preferida, Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3, y R3 es un grupo metilo. Son compuestos particularmente preferidos los 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-fosfonoácidos; 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-tio-fosfonoácidos; 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoácidos; 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonoácidos; 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-fosfonoácidos; 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-tiofosfonoácidos; los etil ésteres de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-fosfonoácido, de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido, de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido, de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfonoacido, y de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido.
Según otro aspecto de la invención, se proporcionan compuestos con la estructura general de fórmula [II], en la que R1, R2, R3, Y, Z, A^{-}, m y n son según se define en el presente documento. Los compuestos preferidos entre este grupo son 1-O-octadecil-sn-glicero-3-fosfonoacetatos; y 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-fosfonoformatos.
Según todavía otro aspecto de la invención se proporcionan análogos con 2 carbonos de los compuestos de la invención con la estructura de fórmula III o de fórmula IV. Los compuestos preferidos según esta realización son 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-2-fosfonoacetato; 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-2-fosfonoformato; 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-(C)-fosfonoformato; y 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-(C)-fosfonoacetato.
Según todavía otro aspecto de la invención se proporcionan liposomas u otras vesículas lipídicas formadas en parte a partir de un compuesto según la invención. La invención también proporciona métodos para tratar una infección viral o retroviral en un mamífero, que comprenden la administración de una cantidad efectiva de un compuesto según la invención a un mamífero. Dichos métodos pueden comprender además la coadministración de un análogo de nucleósido antiviral, un inhibidor de proteasa viral u otro agente antiviral.
Es un objetivo de la invención proporcionar profármacos lipídicos de los fosfonoácidos que conserven los efectos farmacológicos de los compuestos originales. Inesperadamente, se ha descubierto que los compuestos de la presente invención tienen efectos farmacológicos ventajosos en comparación con los profármacos previamente conocidos de este tipo. Según lo anterior, la invención proporciona una serie de profármacos mejorados de fosfonoformato y fosfonoacetato y de sus análogos que presentan incrementos sustanciales en actividad antiviral en comparación con los compuestos originales contra el citomegalovirus humano (HCMV), virus del herpes simplex (HSV), y virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1). Esta actividad antiviral mejorada puede demostrarse en cultivo celular, por ejemplo, mediante los ensayos de susceptibilidad in vitro descritos en los Ejemplos 17 a 20.
Los compuestos de la invención tienen la fórmula general [I]:
1
en la que
R1 es un grupo O-alquilo o S-alquilo, en el que el grupo alquilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido con 0 a 6 enlaces dobles; o
R1 es una fracción O-acilo o S-acilo en la que el grupo acilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles;
Y es HC-R2;
m= 0 o un número entero entre 1 y 6;
cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo que consiste en R1; grupos N-acilo, N-alquilo y N-dialquilo C_{1} a C_{24}lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos, teniendo cada grupo acilo o alquilo entre 0 y 6 enlaces dobles; OH; H; OCH_{3}; O-bencilo; SH; SCH_{3}; y NH_{2}; o
R2 se selecciona de entre el grupo que consiste en flúor, cloro, yodo y bromo;
Z_{1} y Z_{2}son independientemente R3; ó O^{-}A^{+}; en los que
R3 se selecciona de entre el grupo de alcoholes que consiste en grupos alquilo C_{1} a C_{6} lineales sustituidos o no sustituidos, grupos alquilo C_{1} a C_{6} ramificados, sustituidos o no sustituidos, CH_{2}Ph; y CH_{1}(CH_{2})_{n}NH_{2}, en el que n es 0 a 8; o
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en (CH_{3})_{3}N^{+}CH_{2}CH_{2}OH, HOCH_{2}CH_{2}NH_{2}, HOCH_{2}CH(NH_{2})CO_{2}H, C_{6}H_{12}O_{6}, CH_{2}OHCHOHCH_{2}OH; pentosas, hexosas y sus alcoholes correspondientes;
A^{+} se selecciona de entre el grupo que consiste en Na^{+}, K^{+}, H^{+}, NH_{4}^{+}, aminas seleccionadas de entre el grupo que consiste en mono, di y trialquilaminas, y otras cationes fisiológicamente aceptables; X es O, S o Se; y
n es 0 ó 1;
con la condición de que cuando X es O, Z^{1} y Z^{2} son O^{-}A^{+} y m=0, R2 no es OH ni un grupo alifático C_{2}-C_{24} con enlace O-acilo, O-alquilo, S-acilo o S-alquilo.
Alternativamente, los compuestos de la invención presentan la fórmula general [II]:
2
en la que R1, R2, R3, Y, Z_{1}, Z_{2} y A^{+}, X, m y n son como se ha definido anteriormente. Los compuestos de fórmula II difieren de los de fórmula I en que la fracción fosfonoácida se encuentra acoplada a la fracción lipídica mediante un enlace carboxi y no mediante un enlace fosfato. La invención también incluye derivados lipídicos de fosfonoácidos que son etanodioles sustituidos de fórmula general [III]:
3
en la que R1, R2, R3, Y, Z_{1}, Z_{2}, X, m y n son según se ha definido anteriormente. Estas especies basadas en etanodiol pueden unirse a los fosfonoácidos a través de un enlace con un carbono, y dichos compuestos presentan la fórmula general [IV]:
4
en la que R1, R2, R3, Y, Z_{1}, Z_{2}, X, m y n son como se ha definido anteriormente.
Síntesis de profármacos mejorados de los fosfonoácidos
Los compuestos que se sintetizan se indican en el Esquema I con los diversos sustituyentes en C1, C2 y C3 del glicerol, y de manera similar en los Esquemas II y III para los compuestos en los que (Y)_{m} es (CH-R2)_{m} y m\geq1.
Identificación de materiales y productos de partida
Los fosfonoácidos a los que se acoplan diversas fracciones lipídicas durante la preparación de los profármacos lipídicos de la invención se designan mediante acrónimos, de la manera siguiente:
n=0, X=O (PFA) ácido fosfonofórmico
n=0, X=S (PFSA) ácido tiofosfonofórmico
n=0, X=Se (PFSeA) ácido selenofosfonofórmico
n=1, X=O (PAA) ácido fosfonoacético
n=1, X=S (PASA) ácido tiofosfonoacético
n=1, X=Se (PASeA) ácido selenofosfonoacético
Los diversos derivados de profármaco lipídico se designan en el presente documento mediante acrónimos derivados de los indicados anteriormente, y que se definen en las leyendas de las Tablas I a IV.
Procedimientos de síntesis
Los profármacos lipídicos de los fosfonoácidos indicados anteriormente se preparan según los procedimientos descritos en los Ejemplos 1 a 16. El Esquema 1 muestra un diagrama de flujo particularmente relevante a la síntesis de compuestos en los que m = 0 e Y está ausente; en los Esquemas II y III se muestran diagramas de flujo particularmente relevantes a la síntesis química de compuestos en los que m > 0 e Y está presente.
Actividad antiviral
Se determinó la actividad antiviral de diversos derivados lipídicos de fosfonoácidos según la invención en cultivos de líneas celulares humanas infectadas por HCMV, HSV o HIV-1 tal como se describe en el Ejemplo 17. Se muestran los resultados en la Tablas I-IV. El valor predictivo de los ensayos in vitro de susceptibilidad a la infección se discute en Kern, E.R. (1990). La evaluación preclínica de los agentes antivirales: ensayos in vitro y con modelos animales. Galasso, G. et al. eds. Antiviral Agents and Viral Disease of Man, 3ª edición, Raven Press, NY, páginas 87-123.
Los compuestos de mayor preferencia que muestran una actividad antiviral muy incrementada (Tablas I a IV) tienen grupos 1-O-alquil en R1, e hidroxil, hidrógeno, O-metil u O-bencil en R2.
En las Tablas I y II se muestra la actividad antiviral de los profármacos mejorados de fosfonoácido contra las células de fibroblasto pulmonar humano infectado por citomegalovirus MRC5 humano. Los profármacos de mayor preferencia de fosfonoformato (Tabla I) presentan incrementos notables de actividad antiviral. Los intentos anteriores con células de fibroblasto se muestran en las Tablas I y II. Los profármacos de fosfonoformato de mayor preferencia (Tabla I) provocan incrementos notables de actividad antiviral. Los intentos anteriores para producir profármacos de fosfonoformato de mayor actividad han llevado a la identificación de varios compuestos que presentan incrementos muy pequeños de actividad, pero no se ha demostrado para ningún compuesto incrementos de actividad en comparación con PFA mayores de 1,9 veces (Norén, J.O. et al., J. Med. Chem. 26:264-270, 1983). Los profármacos PFA más activos, B-PFA, BB-PFA, y MB-PFA, muestran incrementos de actividad de 107, 72 y 38 veces. El estereoisómero 3B-PFA y (rac)B-PFA, una mezcla de los estereoisómeros, fueron esencialmente equivalentes a B-PFA, indicando que ambos estereoisómeros de glicerol tienen un grado muy elevado de actividad antiviral. Una serie de análogos con hidrógeno en R2 y alquil (oxi)éteres de 16 a 22 carbonos en R1 también fueron muy activos, con incrementos de actividad de 51 a 124 veces en comparación con PFA. El más activo de éstos fue 1-O-oleilpropanodiol-3-PFA, que inhibió la replicación de HCMV en un 50% a 0,37 \muM. Los compuestos indicados anteriormente representan los compuestos con PFA más activos dados a conocer hasta el momento. Dichos compuestos tienen un grupo 1-O-alquilo en la posición R1 del glicerol, y una fracción hidroxil, -O-bencil u -O-metil o hidrógeno en la posición R2. Los profármacos con H, halógeno o amino en R2 también serán altamente activos y la sustitución en X de S o Se por O proporcionará resultados similares.
BB-PFA-OEt y B-PFA-OMe conservan actividad sustancial (un incremento de 16 veces respecto a PFA) con un éster carboxietil o carboximetil en la posición R3. Otros sustituyentes éster en R3 que proporcionarán actividad excelente incluyen bencilo, colina, etanolamina, glicerol e inositol. Dichos compuestos pueden convertirse en fármacos activos dentro de las células diana más fácilmente que los ésteres carboxietil.
Se obtuvieron resultados similares en células infectadas por citomegalovirus humano con la serie fosfonoacetato de compuestos que se muestra en la Tabla II. En este caso, el orden de actividad era ligeramente diferente, mostrando B-PAA, MB-PAA y BB-PAA incrementos de 100, 36 y 25 veces en comparación con el PAA libre. Al unir ácido fosfonoacético con glicerol en el sn-3-hidroxil mediante un enlace carboxiéster, como por ejemplo en BB-(C)-PAA, se conservaba casi toda la actividad antiviral (incremento de 16 veces en comparación con PAA). Los derivados de glicerol-PAA con dos cadenas acilo (DMG-PAA), o dos residuos fósforo y dos ésteres acilo (DMP-PAA y DPP-PAA) no mostraron una actividad sustancialmente mayor (1,2, 0,24 y 0,28 veces la actividad de PAA, respectivamente).
Los profármacos PFA mejorados también mostraron una actividad muy incrementada en comparación con PFA en células de fibroblasto pulmonar humano infectadas por el virus del herpes simplex tipo 1 (Tabla III). MB-PFA, B-PFA y BB-PFA eran 72, 43 y 34 veces más activos que PFA y representan los derivados de PFA más activos dados a conocer hasta el momento. El orden de actividad era ligeramente diferente del observado en el caso del citomegalovirus humano; MB-PFA es el compuesto más activo, seguido de B-PFA y BB-PFA. Se obtuvieron resultados similares con células in vitro infectadas por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (Tabla IV). En el caso de HIV-1, los compuestos más activos fueron MB-PFA y 3B-PFA, seguidos de (rac)B-PFA, tio-ODG-PFA, tio-HDG-PFA y B-PFA; los compuestos fueron 222, 166, 102, 57, 48 y 37 veces más activos que PFA en células HT4-6C infectadas por HIV y representan los derivados de PFA con actividad anti-HIV más activos que se han dado a conocer. MB-PFA era más activo que B-PFA en grado estadísticamente significativo (Tabla IV).
Terapia de las enfermedades virales
Los derivados lipídicos de los fosfonoácidos que se dan a conocer en el presente documento son útiles para tratar enfermedades provocadas por virus tales como el virus influenza, virus del herpes simplex (HSV), virus del herpes humano tipo 6, citomegalovirus (CMV), virus de la hepatitis B, virus Epstein-Barr (EBV), y virus de la varicela-zóster (VZV). Son útiles en el tratamiento del SIDA y también de otras enfermedades retrovirales.
Los derivados lipídicos de los fosfonoácidos antivirales podrían aplicarse tópicamente a la piel, ojos, o membranas mucosas, o en el interior del cuerpo, con el fin de tratar infecciones por virus susceptibles en el hombre y en animales. Pueden introducirse internamente, por ejemplo oralmente, intratraquealmente o de otro modo, por vía pulmonar, enteralmente, rectamente, nasalmente, vaginalmente, lingualmente, intravenosamente, intraarterialmente, intramuscularmente, intraperitonealmente, intradermalmente, o subcutáneamente. Las presentes preparaciones farmacéuticas pueden contener el agente activo solo, o pueden contener sustancias farmacéuticamente valiosas adicionales. Por ejemplo, las formulaciones que comprenden profármacos lipídicos de fosfonoácido de la invención pueden comprender además otro agente antiviral, tal como por ejemplo, un inhibidor de proteasa viral, o un análogo de nucleósido antiviral. Pueden comprender además un portador farmacéuticamente aceptable.
Los derivados lipídicos de agentes antivirales pueden tener un efecto antiviral prolongado en comparación con los agentes libres de lípidos; por lo tanto, proporcionan ventajas terapéuticas como medicamentos incluso cuando no se encuentran incorporados en liposomas. Dichos agentes antivirales profármacos de fosfonoácido pueden utilizarse solos o en combinación con nucleósidos antivirales, tal como se administran convencionalmente. La utilización de terapia de combinación puede reducir en gran medida la tendencia a la aparición de cepas mutantes de HIV resistentes a fármacos y, por lo tanto, podría incrementar la probabilidad de que se detenga la progresión de la infección por HIV. El mismo argumento se sostendría igualmente bien en el tratamiento de las infecciones por citomegalovirus o por virus herpes con respecto a la probabilidad de desarrollo de cepas resistentes.
Formulaciones
Las preparaciones farmacéuticas que contienen derivados lipídicos de fosfonoácidos antivirales se producen mediante procedimientos convencionales de disolución y liofilización para que contengan entre aproximadamente 0,1% y 100%, preferentemente entre aproximadamente 1% y 90% del ingrediente activo. Pueden prepararse como ungüentos, pomadas balsámicas, pastillas, cápsulas, polvos o sprays, junto con excipientes, vehículos, diluyentes, fragancias o aromatizantes efectivos para hacer que sean comibles o de utilización agradable.
Las formulaciones para su ingestión oral se encuentran en forma de pastillas, cápsulas, píldoras, ampollas de agente activo pulverizado, o como suspensiones o soluciones aceitosas o acuosas. Las pastillas u otras composiciones orales no líquidas pueden contener excipientes aceptables, conocidos en la técnica de fabricación de composiciones farmacéuticas, comprendiendo diluyentes, tal como lactosa o carbonato cálcico; agentes ligantes, tal como gelatina o almidón; y uno o más agentes seleccionados de entre el grupo que consiste en agentes edulcorantes, aromatizantes, colorantes o conservantes para proporcionar una preparación comible. Además, tales preparaciones orales pueden recubrirse mediante técnicas conocidas para retardar adicionalmente la desintegración y absorción en el tracto intestinal. Las preparaciones también pueden comprender sales biliares y detergentes.
Las suspensiones acuosas pueden contener el ingrediente activo en una mezcla con excipientes farmacológicamente aceptables, que comprenden agentes de suspensión, tal como metil celulosa; y agentes humectantes, tal como lecitina, lisolecitina o alcoholes grasos de cadena larga. Dichas suspensiones acuosas también pueden contener agentes conservantes, colorantes, aromatizantes y edulcorantes de acuerdo con los estándares industriales.
Las preparaciones de aplicación tópica y local comprenden sprays aerosólicos, lociones, geles y ungüentos en vehículos farmacéuticamente apropiados, que pueden comprender alcoholes alifáticos inferiores, poliglicoles, tal como glicerol, polietilenglicol, ésteres de ácidos grasos, aceites y grasas, y siliconas. Las preparaciones pueden comprender además, antioxidantes, tal como ácido ascórbico o tocoferol, y conservantes, tal como ésteres de ácido p-hidroxibenzoico.
Las preparaciones parenterales comprenden productos particularmente estériles o esterilizados. Pueden proporcionarse composiciones inyectables que contienen el compuesto activo y cualquiera de los portadores inyectables bien conocidos. Éstos pueden contener sales para regular la presión osmótica.
Formulaciones liposomales
Si se desea, los compuestos pueden incorporarse en liposomas mediante cualquiera de los métodos que se dan a conocer para preparar liposomas de uso en el tratamiento de enfermedades virales, tal como, pero sin limitación, HCMV, HSV y HIV-1. La presente invención puede utilizar los derivados de fosfonoácido antivirales indicados anteriormente incorporados en liposomas con el fin de dirigir estos compuestos hacia macrófagos, monocitos, y otras células y tejidos que incorporan la composición liposomal. Los derivados de fosfonoácido de la invención incorporados en liposomas pueden utilizarse para tratar pacientes con HCMV, HSV o SIDA mediante administración parenteral, potenciando la llegada de los compuestos antivirales a los macrófagos y monocitos, un reservorio importante de las infecciones virales. Esto permitirá la utilización eficaz de dosis menores de los fosfonoácidos modificados, reduciendo la toxicidad del compuesto. También pueden incorporarse ligandos para incrementar adicionalmente la especificidad de los liposomas.
Los derivados descritos presentan varias ventajas únicas y nuevas sobre los fosfonoformatos liposomales solubles en agua. En primer lugar, pueden formularse en liposomas en proporciones mucho más elevadas de fármaco a lípido debido a que se incorporan en la pared del liposoma en lugar de localizarse en el compartimento acuoso del núcleo. En segundo lugar, los liposomas que contienen los derivados lipofílicos de fosfonoformato indicados anteriormente no tienen pérdidas durante el almacenamiento, proporcionando mejor estabilidad al producto. Además, dichas composiciones pueden liofilizarse, almacenarse secas a temperatura ambiente, y reconstituirse para su utilización, proporcionando una vida útil mejorada. También permiten la incorporación eficiente de compuestos antivirales en formulaciones liposomales sin pérdidas significativas de compuesto activo. Una ventaja adicional es que las composiciones utilizadas en el tratamiento in vivo provocan que un porcentaje mayor de los conjugados lípido-fosfonoácido antivirales que se han administrado alcancen la diana deseada. Al mismo tiempo, la utilización de las composiciones reduce la cantidad incorporada por el riñón y por los huesos, reduciendo de esta manera los efectos secundarios de toxicidad del fármaco fosfonoácido. Los efectos secundarios de toxicidad de los fosfonoformatos pueden reducirse adicionalmente dirigiendo los liposomas en los que están contenidos a sitios actuales o potenciales de infección mediante la incorporación de ligandos en los liposomas. Se administra a los pacientes el conjugado lípido-fosfonoácido incorporado en liposomas a través de cualquiera de los procedimientos conocidos de administración de liposomas. Los liposomas pueden administrarse intravenosamente, intraperitonealmente, intramuscularmente, intravitrealmente o subcutáneamente como solución acuosa tamponada. Puede utilizarse cualquier tampón acuoso u otro vehículo farmacéuticamente aceptables con la condición de que no destruya la estructura de los liposomas o la actividad del análogo lipídico de fosfonoácido. Un tampón acuoso adecuado es el sorbitol isotónico que contiene fosfato sódico 5 mM con un pH de aproximadamente 7,4, u otras soluciones salinas fisiológicamente tamponadas.
La cantidad terapéuticamente efectiva de los derivados lipídicos se determina por referencia a las dosis recomendadas de fosfonoácido antiviral activo, teniendo en cuenta que, al seleccionar la dosis apropiada en cualquier caso específico, debe tenerse en consideración el peso, estado general de salud, metabolismo, edad y otros factores del paciente que influyen sobre la respuesta al fármaco. La dosis para un mamífero, incluyendo un humano, puede variar dependiendo del grado y severidad de la infección, y de la actividad del compuesto administrado. Los niveles de dosis de análogos lipídicos liposomales de fosfonoácidos será aproximadamente la misma que la del fosfonoácido mismo. Los niveles de dosis para los fosfonoácidos a través de la administración convencional mediante infusión intravenosa están bien establecidos (Lambert, R. et al. (1989), J. Med. Chem. 32:367-374; Szoka, F. y Chu, C-J., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 32(6):858-864 (1988); Ericksson et al., patente U.S. nº 4.771.041). El foscarnet se administra mediante infusión i.v. a 200 mg/kg/día para el tratamiento de HCMV en el hombre.
Los profármacos fosfonoácidos de la invención se administran al paciente diariamente en dosis oral comprendida entre aproximadamente 0,1 mg/kilogramo y 1.000 mg/kilogramo, y con mayor preferencia entre aproximadamente 1 mg/kilogramo y aproximadamente 400 mg/kilogramo. La dosis parenteral será apropiadamente 20 a 100% de la dosis oral.
Preparación de liposomas
Después de la síntesis y purificación, el derivado lipídico de fosfonoácido se incorpora en liposomas, u otro portador adecuado. La incorporación puede llevarse a cabo de acuerdo a procedimientos bien conocidos de preparación de liposomas, tal como la sonicación y la extrusión. Los métodos convencionales adecuados de preparación de liposomas incluyen, pero sin limitación, aquéllos que se dan a conocer en Bangham et al. (Bangham, A.D., Standish, M.M. y Watkins, J.C. (1965), J. Mol. Biol. 23:238-252), Olson et al. (Olson, F., Hunt, C.A., Szoka, F.C., Vail, W.J. y Papahadjapoulos, D. (1979), Biochim. Biophys. Acta 557:9-23), Szoka, F. y Papahadjapoulos, D. (1978), Proc. Nat. Acad. Sci. 75:4194-4198, Mayhew, E. et al. (1984) 775:169-175), Kim, S. et al. (1983), Biochim. Biophys. Act 728:339-348, y Mayer et al. (1986), Biochim. Biophys. Acta 858:161-168.
Los liposomas pueden estar preparados a partir de los derivados lipídicos de fosfonoácidos solos o en combinación con cualquiera de los materiales fosfolipídicos convencionales, naturales o sintéticos, de liposoma, incluyendo los fosfolípidos de origen natural, tal como huevo, o de origen vegetal o animal, tal como fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilglicerol, esfingomielina, fosfatidilserina, o fosfatidilinositol. Los fosfolípidos sintéticos que también pueden utilizarse incluyen, pero sin limitación: dimiristoilfosfatidilcolina, dioleilfosfatidilcolina dipalmitoilfosfatidilcolina y diestearoilfosfatidilcolina, y las fosfatidiletanolaminas y fosfatidilgliceroles sintéticos correspondientes. El colesterol u otros esteroles, hemisuccinato de colesterol, glicolípidos, cerebrósidos, ácidos grasos, gangliósidos, esfingolípidos, 1,2-bis(oleoiloxi)-3-(trimetilamonio)propano (DOTAP), cloruro de N-[1-(2,3-dioleoil)pripil]-N,N,N-trimetilamonio (DOTMA), y otros lípidos catiónicos pueden incorporarse en los liposomas, como es conocido por los expertos en la materia. Si se desea, pueden variarse las cantidades relativas de fosfolípido y aditivos utilizados en los liposomas. Los intervalos preferidos se encuentra comprendidos entre 60 y 90 por ciento molar del fosfolípido; puede utilizarse colesterol, hemisuccinato de colesterol, ácidos grasos o lípidos catiónicos en cantidades comprendidas entre 0 y 50 por ciento molar. Las cantidades de fosfonoácidos antivirales incorporados en la capa lipídica de los liposomas puede variar con la concentración de sus lípidos, estando comprendida entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 50 por ciento molar.
Utilizando métodos convencionales, puede atraparse en los liposomas aproximadamente 20 a 30% del fosfonoácido libre presente en la solución; de esta manera, aproximadamente 70 a 80% del compuesto activo se desaprovecha. En contraste, cuando se incorpora el fosfonoácido lipídico en liposomas, virtualmente todo el compuesto antiviral es incorporado en el liposoma, y no se desaprovecha esencialmente nada del compuesto activo.
Los liposomas con las formulaciones anteriores pueden hacerse todavía más específicos de sus dianas deseadas con la incorporación de anticuerpos monoclonales u otros ligandos específicos de una diana. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales del receptor CD4 (T4) pueden incorporarse en el liposoma mediante unión con fosfatidiletanolamina (PE) incorporada en el liposoma mediante el método de Leserman, L. et al. (1980), Nature 288:602-604.
Procedimientos experimentales
Las reacciones químicas descritas posteriormente en general se dan a conocer en términos de su aplicación general en la preparación de los profármacos lipídicos de la invención. Ocasionalmente, la reacción puede no ser aplicable según se describe a cada profármaco dentro del alcance dado a conocer. Los compuestos para los que esto ocurre serán fácilmente reconocidos por los expertos en la materia. En todos estos casos, las reacciones pueden llevarse a cabo con éxito mediante modificaciones convencionales conocidos por los expertos en la materia, es decir, cambiando a reactivos convencionales alternativos, o mediante modificación rutinaria de las condiciones de reacción. Alternativamente, otras reacciones que se dan a conocer en el presente documento u otras convencionales serán aplicables a la preparación de los compuestos de la invención. En todos los métodos de preparación, todos los materiales de partida son conocidos o fáciles de preparar a partir de materiales de partida conocidos.
Sin ir más lejos, se cree que un experto en la materia puede, utilizando la descripción anterior, utilizar la invención en la medida de lo posible. Las realizaciones preferidas a continuación deben, por lo tanto, interpretarse como meramente ilustrativas, y no como limitativas, en modo alguno del resto de la descripción. Todas las temperaturas indicadas en los ejemplos están en grados Celsius y no están corregidas.
Posteriormente se describe en detalle la presente invención utilizando los ejemplos siguientes, pero los métodos que se dan a conocer son aplicables a la preparación de todos los fosfonoácidos cubiertos por el alcance de la invención y no se limitan a los ejemplos.
Ejemplo 1 Síntesis de análogos de 1-O-alquil-2-halo-1,3-propanodiol-3-fosfonoformato y de análogos de 1-O-alquil-2-amino-1,3-propanodiol-3-fosfonoformato
En el Esquema 1 se resume la síntesis estereocontrolada de análogos de 1-O-alquil-2-halo-1,3-propanodiol-3-fosfonoformato. El 2,3-isopropilidin-sn-glicerol tratado con el alquilmetano sulfonato apropiado produce el intermediario 2. La eliminación del grupo isopropilidino mediante el tratamiento con ácido acético seguido por tritilación con cloruro de tritilo y piridina resulta en el compuesto 3, con un grupo 2-hidroxilo libre. El tratamiento de 3 con n-halosuccinimida y trifenil fosfina según el procedimiento de Bose y Lal [(1973, Tetrahedron. Lett. 40:3937)] producirá el intermediario 4. La sustitución del grupo hidroxilo con halógeno tiene lugar con la inversión completa (desplazamiento de SN_{2}) y rendimientos de 65 a 95%. La eliminación del grupo tritilo con ácido trifluoroacético en diclorometano produce el compuesto halo 5. La reacción de 5 con carbetoxifosfodicloridato resulta en el análogo de ácido fosfonofórmico 6.
Mientras que dicho procedimiento funciona cuando X es Cl, Br e I, se requiere un enfoque ligeramente diferente para el análogo cuando X=F. El tratamiento del intermediario 3 con difeniltrifluorofosforano según un procedimiento dado a conocer por Kobayashi y colaboradores (1968, Chem. Pharm. Bull. 16(9):1784) lleva a la conversión del alcohol 3 en el compuesto fluorado 4 con un buen rendimiento. Las etapas posteriores para producir los análogos fluoro de 6 son idénticas a las descritas anteriormente.
El tratamiento con amonio líquido del intermediario 4 con bromo descrito en el Esquema I en una bomba de acero resultará en la aminación en posición 2. El tratamiento del compuesto 2-amino resultante con bromuro de bencilo protegerá el grupo 2-amino. Las etapas posteriores serán las mismas que las descritas en el Esquema I hasta el intermediario 6. El grupo protector bencilo puede eliminarse en este punto mediante hidrogenolisis con Pd/C.
El tratamiento del intermediario amino con cloruro de acilo resultará en el compuesto N-acilo. Alternativamente, el tratamiento del intermediario bromo 4 con mono o dialquilamina resultará en los derivados monoalquilamino y dialquilamino.
Los procedimientos descritos anteriormente pueden llevarse a cabo con materiales de partida fácilmente disponibles, la metodología está bien documentada y los expertos en la materia reconocerán las modificaciones necesarias en los materiales de partida y métodos para sintetizar los análogos de 2-amino que se han indicado.
Ejemplo 2 Síntesis de tiofosfonoácidos y sus profármacos lipídicos
El ácido tiosfosfonofórmico se sintetiza de acuerdo con el procedimiento de McKenna (patente U.S. nº 5.072.032) mediante la reacción del ácido trimetil fosfonofórmico con reactivo de Lawesson [2,4-bis(4-metoxifenil)-1,3-ditio-2,4-difosfetan-2,4-disulfuro]. El ácido tiofosfonoacético también se sintetiza de una manera similar.
El ácido selenofosfonofórmico puede sintetizarse mediante tratamiento con ácido trimetilfosfonofórmico con selenio elemental adaptando los procedimientos que dan a conocer Stec y colaboradores (1976, Stec, W.J., Okruszek, A. y Michalski, J.J. Org. Chem. 41, 233), y Buina et al. (1979, Buina, N.A.; Sibgatullina, F.G.; Neureldinor, I.A., Izv. Akad. Nauksssr., Ser. Khim. 10, 2362). El ácido selenofosfonoacético también puede sintetizarse de una manera similar. Los selenoácidos pueden convertirse después a los profármacos lipídicos correspondientes mediante procedimientos iguales a los utilizados para los análogos oxo y tio.
La síntesis de ácido batil-tiofosfonofórmico (PFSA) se llevó a cabo de una manera similar a la síntesis de ácido batilfosfonofórmico, con algunas modificaciones. El 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicerol, adquirido en Bachem (Basel, Suiza), se acopló a etil éster de ácido tiofosfonofórmico utilizando diciclohexilcarbodiimida. Tras purificar mediante cromatografía en gel de sílice, el etil éster de PFSA se desbenciló con Pd/C y ciclohexeno. Este procedimiento, dado a conocer en (1977, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 490) puede utilizarse para la hidrogenolisis de compuestos que contienen azufre. El PFSA se obtuvo mediante hidrólisis básica del éster desbencilado. Se sintetizó ácido batil-tiofosfonoacético de una manera similar.
Ejemplo 3 Síntesis de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-fosfonoformato y de 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-2-fosfonoformato Preparación de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol
El 1-O-tritil-1,3-propanodiol, sintetizado de acuerdo con el procedimiento de Sela et al. (1987), Nucleic Acids Research 15:3124, se trató con octadecilmetanosulfonato (NuChek Prep, Inc.) en presencia de hidruro sódico en dimetilformamida. El producto, 1-O-octadecil-3-O-tritil propanodiol, se aisló y purificó mediante cromatografía flash. El grupo protector tritilo se eliminó mediante tratamiento con ácido trifluoroacético en diclorometano, rindiendo 1-O-octadecil-1,3-propanodiol.
Se añadió a una solución de carbetoxifosfodicloridato (1,6 mmoles) en cloroformo (25 ml) enfriada a 0ºC en un baño salino helado, una solución de 1-O-octadecilpropanodiol (1 mmol) en piridina (15 ml), gota a gota bajo agitación. Se dejó que la mezcla se calentase hasta temperatura ambiente y se agitó a dicha temperatura durante una noche. Se enfrió la mezcla, y se añadió 1 ml de agua. Tras agitar a 0ºC durante 2h, la mezcla se concentró en el vacío. El aceite residual se sometió a cromatografía flash con cloroformo-metanol 95:5 como eluyente, rindiendo el producto: 1-O-octadecilpropanodiol-3-etilfosfonoformato.
Se disolvió el etil éster en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml) y se sonicó durante 15 minutos. La mezcla resultante se agitó a 60ºC en un baño de aceite durante 2h. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró hasta la sequedad en el vacío. El sólido resultante se resuspendió en agua, se enfrió y liofilizó, rindiendo el compuesto deseado.
El análogo 1,2-etanodiol correspondiente puede prepararse como se ha descrito en el método anterior, mediante la sustitución de 1-O-tritil-1,2-etanodiol como el material de partida.
Ejemplo 4 Síntesis de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-fosfonoacetato y 1-O-octadecil-1,2-etanodiol-2-fosfonoacetato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol (1 mmol) y etil éster de ácido fosfonoacético (1,1 mmoles) en piridina, (50 ml) enfriados a 0ºC en un baño de hielo, una solución de diciclohexilcarbodiimida (DCC; 3 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (20 ml) gota a gota bajo agitación. La mezcla se agitó a 0ºC durante 2h y a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentró hasta la sequedad y el residuo se sometió a cromatografía flash con cloroformo-metanol 95:5 como eluyente, rindiendo etil éster de 1-O-octadecilpropanodiol-3-fosfonoacetato.
El etil éster se disolvió en una mezcla 1:1 de NaOH 0,1N y etanol (50 ml). La mezcla se sonicó durante 15 minutos y se calentó en un baño de aceite a 60ºC durante 2h. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró en el vacío. El residuo resultante se disolvió en agua, se enfrió y se liofilizó, rindiendo el producto en forma de sólido blanco floculado.
El análogo 1,2-etanodiol correspondiente puede prepararse como se ha descrito en el método anterior mediante la sustitución de 1-O-tritil-1,2-etanodiol como el material de partida.
Ejemplo 5 Síntesis de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-tiofosfonoformato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol (1 mmol) y etiltiofosfonoformato (1,1 mmoles) en piridina (50 ml) enfriado a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diciclohexilcarbodiimida (DCC; 3 mmoles) en diclorometano, gota a gota bajo agitación. La mezcla resultante se agitó a 0ºC durante 2h y a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtró, y se concentró hasta la sequedad en el vacío. El residuo se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con un gradiente creciente de metanol en cloroformo como eluyente, rindiendo el producto en forma pura.
El producto se disolvió en una mezcla de etanol:NaOH 0,1N (1:1, 50 ml) y se sonicó durante 15 minutos. La mezcla resultante se calentó a 60ºC durante 2h, se filtró y se concentró hasta la sequedad. El residuo se disolvió en una cantidad mínima de agua y se liofilizó, rindiendo el compuesto deseado en forma de sólido floculado.
Ejemplo 6 Síntesis de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-tiofosfonoacetato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol (1 mmol) y etil tiofosfonoacetato (1,1 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml) enfriado a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diciclohexilcarbodiimida (3,3 moles), gota a gota, bajo agitación. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente. La mezcla se concentró hasta la sequedad y se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con cloroformo-metanol (95:5) como eluyente, rindiendo el producto en forma pura.
Se disolvió el etil éster en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml) y se sonicó durante 15 minutos. La mezcla resultante se calentó a 60ºC durante 2h, se filtró y se concentró hasta sequedad. El residuo se disolvió en una cantidad mínima de agua y se liofilizó, rindiendo el compuesto puro en forma de sólido floculado.
Ejemplo 7 Síntesis de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoformato
Se añadió a una solución de carbetoxifosfodicloridato (1,6 mmoles) en cloroformo (20 ml), enfriada a 0ºC en un baño salino helado, una solución de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicerol (1,0 mmoles) en piridina (15 ml) gota a gota. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se enfrió, se añadieron 2 ml de agua y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2h. A continuación, la mezcla de reacción se concentró en el vacío, y el residuo se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con cloroformo:metanol como eluyente.
El etil éster se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N y se sonicó durante 15 minutos. La mezcla se calentó bajo agitación a 60ºC durante 2h, se filtró y el filtrado se evaporó hasta la sequedad. El residuo se recristalizó con etanol acuoso al 25%, rindiendo el producto en forma pura.
Ejemplo 8 Síntesis de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoacetato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicerol (1 mmol) e hidrocloruro de etil éster de ácido fosfonoacético (1 mmol) en piridina (50 ml), enfriado a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diciclohexilcarbodiimida (3,0 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (20 ml) gota a gota bajo agitación. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Después de concentrar en el vacío, el residuo se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con un gradiente de metanol en cloroformo como eluyente, rindiendo etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoacético.
El etil éster se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol:NaOH 0,1N (50 ml), y la solución resultante se sonicó durante 15 minutos. A continuación, la solución se calentó en un baño de aceite a 70ºC durante 3h. La solución se enfrió, el sólido resultante se retiró por filtración y se lavó con etanol frío. El sólido se secó en el vacío, rindiendo el producto en forma pura.
Ejemplo 9 Síntesis de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonoformato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicerol (1 mmol) y etil tiofosfonoformato (1,1 mmoles) en diclorometano (50 ml) enfriada a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diclohexilcarbodiimida (3 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (20 ml), gota a gota, bajo agitación. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se filtró y se concentró hasta la sequedad en el vacío. El residuo se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con un gradiente creciente de metanol en cloroformo como disolvente de elución, rindiendo etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonofórmico.
El etil éster se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml) y se sonicó durante 15 minutos. La solución se calentó durante 2h a 60ºC, se filtró, y el filtrado se concentró hasta la sequedad. El residuo se disolvió en una cantidad mínima de éster y se liofilizó, rindiendo el compuesto deseado en forma de sólido floculado.
Ejemplo 10 Síntesis de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonoacetato
Se añadió a una mezcla de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicerol (1 mmol) y etil tiofosfonoacetato (1 mmol) en piridina (50 ml), una solución de diciclohexilcarbodiimida (DCC; 3,0 mmoles) gota a gota bajo agitación. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se retiró en el vacío, y el residuó se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice con un gradiente creciente de metanol en cloroformo como eluyente, rindiendo etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonoacético puro.
El etil éster se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml). La solución se sonicó durante 15 minutos y se agitó a 65ºC durante 2h. La solución se filtró y el filtrado se enfrió en el congelador. El sólido resultante se retiró por filtración, se lavó con etanol frío y se secó en el vacío, rindiendo el producto en forma pura.
Ejemplo 11 Síntesis de etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-tiofosfonofórmico
Se añadió a una solución de 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicerol (1 mmol) y etil tiofosfonoformato (1 mmol) en piridina (50 ml), enfriada a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diciclohexilcarbodiimida (3 mmoles) en diclorometano (20 ml) gota a gota bajo agitación. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Después de concentrar en el vacío, el residuo se sometió a cromatografía flash sobre gel de sílice, rindiendo el compuesto deseado en forma pura.
Ejemplo 12 Síntesis de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-tiofosfonoformato
Se disolvió etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-tiofosfonofórmico (1 mmol) en etanol (25 ml). Se añadieron Pd/C (100 mg) y ciclohexeno (5 ml) a la solución y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró en el vacío. La purificación del residuo resultante mediante cromatografía flash con un gradiente de metanol en cloroformo resultó en etil éster desbencilado. Este éster se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml) y la solución se sonicó durante 15 minutos. Después de calentar a 60ºC durante 2h, la solución se filtró y el filtrado se concentró en el vacío. El residuo se suspendió en agua, se enfrió y se liofilizó, rindiendo el compuesto deseado.
Ejemplo 13 Síntesis de etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-tiofosfonoacético
Se añadió a una solución de 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicerol (1 mmol) y etil tiofosfonoacetato (1 mmol) en piridina (50 ml), enfriada a 0ºC en un baño salino helado, una solución de diciclohexilcarbodiimida (3 mmoles) en diclorometano (20 ml) gota a gota bajo agitación. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, y se concentró hasta la sequedad en el vacío. El residuo se sometió a cromatografía flash con un gradiente de metanol en cloroformo como eluyente, rindiendo el compuesto deseado en forma pura.
Ejemplo 14 Síntesis de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-tiofosfonoacetato
Se combinó una solución de etil éster de ácido 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-fosfonoacético (1 mmol) en etanol (50 ml) con Pd/C (100 mg) y ciclohexeno (5 ml) y la mezcla se hidrogenó a 60 psi de hidrógeno durante una noche.
La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró en el vacío. El residuo se sometió a cromatografía flash con un gradiente de metanol en cloroformo como eluyente, rindiendo el etil éster desbencilado. Éste se disolvió en una mezcla 1:1 de etanol y NaOH 0,1N (50 ml), y se sonicó durante 15 minutos. La mezcla se calentó a 60º durante 2h. La solución se filtró y se concentró en el vacío. El producto se recristalizó a partir de etanol acuoso.
Los ejemplos siguientes se refieren a los compuestos intermediarios y finales numerados según se muestran en los Esquemas II y III de síntesis.
Ejemplo 15 Síntesis de especies de fosfonoácido en las que Y=CH-OH, m=1, R1=octadecil (compuesto nº 8 en el Esquema II)
La D-eritrosa, 1, (adquirida de Aldrich Chemical Company), tras su tratamiento con NaH y bromuro de bencilo en DMF a -70ºC proporcionará la especie selectivamente protegida 4-O-bencil-eritrosa, 2. El tratamiento de este intermediario con dimetoxipropano y acetona con cantidades traza de ácido perclórico producirá 2,3-di-O-isopropilidin-4-O-bencil eritrosa 3. La reducción del compuesto 3 con borohidruro sódico produce el eritritol protegido, 4. El tratamiento de 4 con octadecilmetanosulfonato rinde el 1-O-octadecil-2,3-di-O-isopropilidin-4-O-bencil eritritol 5. La desbencilación con Pd/C e hidrógeno seguido del acoplamiento con DCC con etil fosfonoformato rendirá el intermediario 7. El desbloqueo de 1 con TFA al 10% en CH_{2}Cl_{2} seguido de hidrólisis básica rinde el compuesto deseado 8.
Ejemplo 16 Síntesis de derivado fosfonoformato en el que R_{2}=H, Y=CH-OH, R=octadecil, m=2 (compuesto 17 en el Esquema III)
La D-ribosa comercialmente disponible, 9, (Sigma Chemical Co.), tras su tratamiento con trimetilsilil metilmercaptano mediante la adaptación de un procedimiento de Evans y colaboradores (Evans, D.A., Truesdale, L.K., Gimm, K.G., Nesbitt, S.L., J. Am. Chem. Soc. 99:5009, 1977) resultará en el dimetilditioacetal 10. Éste bloquea la ribosa en la conformación de cadena abierta. El tratamiento de la ribosa protegida con bromuro de bencilo en DMF a -70º resultará en el bloqueo selectivo del grupo 5-hidroxilo primario de la ribosa, produciendo el compuesto 11. Tal bloqueo selectivo se ha dado a conocer en la literatura (1987, Fukuzawa, A., Sato, H., Masamune, T., Tetrahedron Lett. 28:4303). Los grupos hidroxilo 2,3 y 4 en la ribosa 1,5-derivatizada pueden protegerse mediante tratamiento con cloruro de metoximetilo (1972, Stark, G., Takashi, T., J. Am. Chem. Soc. 94:7827), rindiendo el intermediario ribosa completamente protegido 12.
El aldehído en la posición C_{1} se regenera mediante tratamiento del intermediario 12 con AgNO_{3}/Ag_{2}O (1977, Corey, E.J., Shibasaki, M., Knolle, J., Sugahara, T., Tetrahedron Lett. 785), rindiendo el compuesto 13. La reducción con borohidruro sódico, seguida de alquilación con octadecilmetanosulfonato rinde el 1-O-octadecil-2,3,4-tri-O-metoximetil-5-O-bencil ribosa 15.
La eliminación del grupo bencilo mediante hidrogenación con Pd/C seguido del acoplamiento con etil fosfonoformato utilizando diciclohexil carbodiimida rinde el intermediario 16. El tratamiento con ácido acético elimina los grupos protectores metoximetilo, y el tratamiento con base produce el compuesto deseado 17.
Esquema I
5
R1= -(CH_{2})_{n}CH_{3}, n= 7, 9, 11, 13, 15, 17
Z=Cl, Br, I, -OCH_{3}, -NH_{2}, -NH-R2, -N-(R2)_{2}
R3= -CH_{3}, -CH_{2}CH_{3} y -CH_{2}CH_{2}CH_{3}
a: NaH, DMF, R1-OSO_{2}Me; b: Ácido acético; c: Cloruro de tritilo, piridina,
d: NaH, DMF, R_{2}-Br; e: TFA, CH_{2}Cl_{2}; f: Cl_{2}POCOOR_{3}; H_{2}O
\newpage
Esquema II
Ejemplo Síntesis de análogo de ácido fosfonofórmico Y=CHOH, m=1, R2=OH, R1=Octadecil
6
i. BnBr, NaH; ii. DMP, H^{+}; iii. NaBH_{4}; iv. ROSO_{2}Me (R=Octadecil), NaH;
v. H_{2}, Pd/C; vi. DCC, etil fosfonoformato; vii. TFA, CH_{2}Cl_{2};
\newpage
Esquema III
Ejemplo Síntesis de análogo de ácido fosfonofórmico Y=CHOH, m=2, R2=OH, R1=Octadecil
7
i.MeSSiMe_{3}, ZnI_{2}; ii. BnBr, NaH; iii. CH_{3}OH_{2}Cl (cloruro de MOM), NaH, THF;
iv. AgNO_{3}, Ag_{2}O; v. NaBH_{4}; vi. ROSO_{2}Me, NaH; vii. H_{2}, Pd/C; viii. DCC, etil fosfonoformato; ix. Ácido acético; x. NaOH, etanol
Ejemplo 17 Actividad antiviral en cultivo celular de profármacos fosfonoácido
Se ensayó la actividad antiviral de derivados fosfonoácido con estructuras de acuerdo con la fórmula I en fibroblastos pulmonares de embrión humano (MRC-5) o en células de carcinoma cervical epiteloide humano (HeLa) que expresaban el receptor CD4 (HT4-6C). Se utilizaron HCMV (cepa AD-169) y HSV-1 (tipo salvaje) para infectar las células MRC-5 y se midió el ADN específico de HCMV o de HSV mediante métodos con sondas de ADN (Hybriwix^{TM}, Diagnostic Hybrids, Inc., Athens, OH) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se tuvo acceso a la replicación del HIV en células HT4-6C infectadas por HIV-1 mediante un ensayo de reducción de placas (Larder, B. et al. (1990), Antimicrobial Agents Chemother. 34:436).
Se evaluó la citotoxicidad de B-PFA y B-PAA en células MRC-5 subconfluyentes mediante exclusión de azul tripán. La dosis tóxica, TD_{50} era >1000 \muM, y para B-PAA era de 32 a 100 \muM, indicando que los compuestos tienen índices de selectividad de 300 o mayores.
Ejemplo 18 Ensayo de susceptibilidad antiviral del CMV
Se pretrataron células MRC-5 subconfluyentes en placas de cultivo de 24 pocillos durante 24 horas con diversas concentraciones de fármaco en medio MEM que contenía FBS al 2% y antibióticos. Se retiró el medio y se añadió el virus a una dilución que resultase en un efecto citopático (CPE) de 3 a 4+ en los pocillos sin fármaco en cinco días. Se absorbió el virus durante 1 hora a 37ºC, se aspiró y se sustituyó con las diluciones de fármaco. Tras cinco días de incubación, se cuantificó el ADN de HCMV por triplicado mediante hibridación de ácidos nucleicos utilizando un kit de ensayo de susceptibilidad antiviral del CMV de Diagnostic Hybrids, Inc. (Athens, OH). Se eliminó el medio y las células se lisaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Tras la absorción del lisado, se hibridaron los filtros Hybriwix^{TM} durante una noche a 60ºC. Se lavaron los Hybriwix^{TM} durante 30 minutos a 73ºC y se contaron en un contador Gamma. Los resultados se expresan como porcentaje de las células de control no tratadas e infectadas por HCMV.
Ejemplo 19 Ensayo de susceptibilidad antiviral del HSV
Se inocularon células MRC-5 subconfluyentes en placas de cultivo de 24 pocillos retirando el medio y añadiendo virus HSV-1 a una dilución que resultase en una CPE de 3 a 4+ en los pocillos sin fármaco en 20 a 24 horas. Se absorbió el virus durante 1 hora a 37ºC, y se sustituyó con diferentes concentraciones de fármacos en medio MEM que contenía FBS al 2% y antibióticos. Después de aproximadamente 24 horas de incubación, se cuantificó el ADN de HSV por triplicado mediante hibridación de ácidos nucleicos utilizando un kit de ensayo de susceptibilidad antiviral del CMV de Diagnostic Hybrids, Inc. (Athens, OH). Se retiró el medio y las células se lisaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Después de absorber el lisado, se hibridaron los filtros Hybriwix^{TM} durante una noche a 60ºC. Los Hybriwix^{TM} se lavaron durante 30 minutos a 73ºC y se contaron en un contador gamma. Los resultados se expresan como porcentaje de las células de control no tratadas infectadas por HSV.
Ejemplo 20 Células HT4-6C
Se obtuvieron las células HT4-6C y ensayo de reducción de placa, células HeLa que expresan CD4 y células HT4-6C (Chesebro, B. y K. Wehrly (1988), J. Virology 62:3779-3788), de Bruce Chesebro, Hamilton, Mont. Se midió el efecto de los compuestos antivirales sobre la replicación del HIV mediante un ensayo de reducción de placa. Brevemente, se infectaron monocapas de células HT4-6C con 100 a 300 PFU de virus por pocillo en placas de microdilución de 24 pocillos. Se añadieron diferentes concentraciones de fármaco al medio de cultivo, medio Eagle modificado por Dulbecco que contenía suero de feto bovino al 5% y antibióticos, tal como se ha indicado anteriormente. Después de 3 días a 37ºC, se fijaron las monocapas con solución de formaldehído al 10% en solución salina tamponada con fosfato y se tiñeron con cristal violeta al 0,25% para visualizar las placas de virus (Larder, B. et al. (1989), Science 243:1731-1734). Se evaluó la actividad antiviral como el porcentaje de placas de control medidas en muestras tratadas con fármaco.
TABLA I
8
TABLA II
9
TABLA III
10
TABLA IV
11
TABLA IV (continuación)
12

Claims (50)

1. Compuesto de fórmula
13
en la que
R1 es un grupo O-alquilo o S-alquilo, en el que el grupo alquilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles; o
R1 es una fracción O-acilo o S-acilo en la que el grupo acilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles;
Y es HC-R2;
m= 0 o un número entero entre 1 y 6;
cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo que consiste en R1; grupos N-acilo, N-alquilo y N-dialquilo C_{1} a C_{24} lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos, presentando cada grupo acilo o alquilo 0 a 6 enlaces dobles; OH; H; OCH_{3}; O-bencilo; SH; SCH_{3}; y NH_{2}; ó
R2 se selecciona de entre el grupo que consiste en flúor, cloro, yodo y bromo;
Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3; o O^{-}A^{-}; en el que
R3 se selecciona de entre el grupo de alcoholes que consiste en grupos alquilo C_{1} a C_{6} lineales sustituidos o no sustituidos, grupos alquilo ramificados C_{3} a C_{6} sustituidos o no sustituidos, CH_{2}Ph; y CH_{3}(CH_{2})_{n}NH_{2}, en la que n es 0 a 8; o
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en (CH_{3})_{3}N-CH_{2}CH_{2}OH, HOCH_{2}CH_{2}NH_{2}, HOCH_{2}CH(NH_{2})CO_{2}H, C_{4}H_{12}O_{6}, CH_{2}OHCHOHCH_{2}OH; pentosas, hexosas y sus alcoholes correspondientes;
A^{+} se selecciona de entre el grupo que consiste en Na^{+}, K^{+}, H^{+}, NH_{4}^{+}, aminas seleccionadas de entre el grupo que consiste en mono, di y trialquilaminas, y otros cationes fisiológicamente aceptables; X es O, S o Se; y
n es 0 ó 1;
con la condición de que cuando X es 0, Z^{1} y Z^{2} son O^{-}A^{+} y m=0, R2 no es OH o un grupo alifático C_{2}-C_{24} con enlace O-acilo, O-alquilo, S-acilo o S-alquilo.
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que m es 0.
3. Compuesto según la reivindicación 1, en el que X es oxígeno.
4. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 es un grupo O-alquilo.
5. Compuesto según la reivindicación 4, en el que R1 es un grupo O-octadecilo.
6. Compuesto según la reivindicación 4, en el que R1 es un grupo O-oleilo.
7. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R2 es H.
8. Compuesto según la reivindicación 7, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-3-fosfonoácido.
9. Compuesto según la reivindicación 7, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-oleil-1,3-propanodiol-3-fosfonoácido.
10. Compuesto según la reivindicación 7, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-1,3-propanodil-3-tiofosfonoácido.
11. Compuesto según la reivindicación 7, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-1,3-propanodil-3-selenofosfonoácido.
12. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R2 es un grupo OCH_{3}.
13. Compuesto según la reivindicación 12, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-oleil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoácido.
14. Compuesto según la reivindicación 12, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-fosfonoácido.
15. Compuesto según la reivindicación 12, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido.
16. Compuesto según la reivindicación 12, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-metil-sn-glicero-3-selenofosfonoácido.
17. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R2 es un grupo O-bencilo.
18. Compuesto según la reivindicación 17, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-fosfonoácido.
19. Compuesto según la reivindicación 17, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido.
20. Compuesto según la reivindicación 17, que es una sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-selenofosfonoácido.
21. Compuesto según la reivindicación 1, en el que Z_{1} es un grupo metoxi.
22. Compuesto según la reivindicación 21, que es un metil éster de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-fosfonoácido.
23. Compuesto según la reivindicación 21, que es un metil éster de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido.
24. Compuesto según la reivindicación 21, que es un metil éster de 1-O-octadecil-sn-glicero-3-selenofosfonoácido.
25. Compuesto según la reivindicación 1, en el que Z_{1} es un grupo etoxi.
26. Compuesto según la reivindicación 25, que es un etil éster de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfonoácido.
27. Compuesto según la reivindicación 25, que es un etil éster de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-tiofosfonoácido.
28. Compuesto según la reivindicación 25, que es un etil éster de 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-selenofosfonoácido.
29. Compuesto de fórmula
14
en la que
R1 es un grupo O-alquilo o S-alquilo, en el que el grupo alquilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles; o
R1 es una fracción O-acilo o S-acilo en la que el grupo acilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dboels;
Y es HC-R2;
m= 0 o un número entero entre 1 y 6;
cada R2 se selecciona independientemente de entre el grupo que consiste en R1, grupos N-acilo o N-alquilo o N-dialquilo C_{1} a C_{24} lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos, presentando cada grupo acilo o alquilo entre 0 y 6 enlaces dobles; OH; H; OCH_{3}; O-bencilo; SH; SCH_{3}; y NH_{2}; o de entre el grupo que consiste en flúor, cloro, yodo y bromo;
Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3 o O^{-}A^{+}; en el que
R3 se selecciona de entre el grupo de alcoholes que consiste en grupos alquilo C_{1} a C_{6} lineales, sustituidos o no sustituidos, grupos alquilo C_{3} a C_{6} ramificados, sustituidos o no sustituidos, -CH_{2}Ph y -CH_{2}(CH_{2})_{n}NH_{2}, en el que n es 0 a 8; o
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en (CH_{3})_{3}N^{+}CH_{2}CH_{2}OH, HOCH_{2}CH_{2}NH_{2}, HOCH_{2}CH(NH_{2})CO_{2}H, C_{6}H_{12}O_{6}, CH_{2}OHCHOHCH_{2}OH; CH_{2}Ph; y pentosas y hexosas y sus alcoholes correspondientes;
A^{+} se selecciona de entre el grupo que consiste en H^{+}, K^{+}, Na^{+}, NH_{4}^{+}, aminas seleccionadas de entre el grupo que consiste en mono, di y trialquilaminas; y otros cationes fisiológicamente aceptables;
X es O, S o Se; y
n= 0 ó 1;
con la condición de que cuando X es O, Z^{1} y Z^{2} son O^{-}A^{2} y m=0, R2 no es OH o un grupo alifático C^{2}-C^{24} con enlace O-acilo, O-alquilo, S-acilo o S-alquilo.
30. Compuesto según la reivindicación 29, que es un 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-(C)-fosfonoacetato.
31. Compuesto según la reivindicación 29, que es un 1-O-octadecil-1,3-propanodiol-(C)-fosfonoformato.
32. Compuesto según la reivindicación 29, que es un 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-(C)-fosfonoacetato.
33. Compuesto según la reivindicación 29, que es un 1-O-octadecil-2-O-bencil-sn-glicero-3-(C)-fosfonoformato.
34. Compuesto de fórmula
15
en la que
R1 es un grupo O-alquilo o S-alquilo en el que el grupo alquilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles; o
R1 es una fracción O-acilo o S-acilo en la que el grupo acilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles;
X es O, S o Se;
Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3 o O^{-}A^{+}; en el que
R3 se selecciona independientemente de entre el grupo de alcoholes que consiste en grupos alquilo C_{1} a C_{6} lineales sustituidos o no sustituidos, grupos alquilo C_{3} a C_{6}ramificados sustituidos o no sustituidos, -CH_{2}Ph y -CH_{3}(CH_{2})_{n}NH_{2}; en el que n es 0 a 8; o
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en (CH_{3})_{3}N^{+}CH_{2}CH_{3}OH, HOCH_{2}CH_{2}NH_{2}, HOCH_{2}CH(NH_{2})CO_{2}H, C_{6}H_{12}O_{6}, CH_{2}OHCHOHCH_{2}OH; CH_{2}Ph; y pentosas y hexosas y sus alcoholes correspondientes;
A^{+} se selecciona de entre el grupo que consiste en H^{+}, K^{+}, Na^{+}, NH_{4}^{+}, aminas seleccionadas de entre el grupo que consiste en mono, di y trialquilaminas, y otros cationes fisiológicamente aceptables;
X es O, S o Se; y
n= 0 ó 1.
35. Compuesto según la reivindicación 34, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-fosfonoácido.
36. Compuesto según la reivindicación 34, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-fosfonoacetato.
37. Compuesto según la reivindicación 34, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-fosfonoformato.
38. Compuesto de fórmula
16
en la que
R1 es un grupo O-alquilo o S-alquilo en el que el grupo alquilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles; o
R1 es una fracción O-acilo o S-acilo en la que el grupo acilo comprende un grupo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado, sustituido o no sustituido, con 0 a 6 enlaces dobles;
Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3, OR3 o O^{-}A^{+}; en el que
R3 se selecciona independientemente de entre el grupo de alcoholes que consiste en grupos alquilo C_{1} a C_{6} lineales sustituidos o no sustituidos, grupos alquilo C_{3} a C_{6} ramificados, sustituidos o no sustituidos, -CH_{2}Ph y -CH_{3}(CH_{2})_{n}
NH_{2}; en el que n es 0 a 8; o
R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en (CH_{3})_{3}N^{+}CH_{2}CH_{2}OH, HOCH_{2}CH_{2}NH_{2}, HOCH_{2}CH(NH_{2})CO_{2}H, C_{6}H_{12}O_{6}, CH_{2}OHCHOHCH_{2}OH; CH_{2}Ph; y pentosas y hexosas y sus alcoholes correspondientes;
A^{+} se selecciona de entre el grupo que consiste en H^{+}, K^{+}, Na^{+}, NH_{4}^{+}, aminas seleccionadas de entre el grupo que consiste en mono, di y trialquilaminas, y otros cationes fisiológicamente aceptables;
X es O, S o Se; y
n= 0 ó 1.
39. Compuesto según la reivindicación 38, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-(C)-fosfonoácido.
40. Compuesto según la reivindicación 38, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-(C)-fosfonoacetato.
41. Compuesto según la reivindicación 38, que es un 1-O-alquil-1,2-etanodiol-2-(C)-fosfonoformato.
42. Sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-hexadecil-propanodiol-3-fosfonoformato.
43. Sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-octadecil-propanodiol-3-fosfonoformato.
44. Sal farmacéuticamente aceptable de 1-O-docosil-propanodiol-3-fosfonoformato.
45. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 44, en el que R1 es un grupo O-alquilo, y Z_{1} y Z_{2} son independientemente R3, en los que por lo menos un grupo R3 se selecciona de entre el grupo que consiste en colina, etanolamina, glicerol e inositol.
46. Liposoma formado en parte a partir de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 44.
47. Formulación farmacéutica que comprende cualquiera de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 44.
48. Formulación farmacéutica que comprende por lo menos uno de los compuestos según las reivindicaciones 1 a 44 y un segundo agente antiviral, proteasa viral o análogo de nucleósido antiviral.
49. Utilización de cualquiera de los compuestos según las reivindicaciones 1 a 44, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad viral o retroviral.
50. Utilización de una formulación según la reivindicación 47 ó 48, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad viral o retroviral.
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Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6458772B1 (en) 1909-10-07 2002-10-01 Medivir Ab Prodrugs
US20020120130A1 (en) 1993-09-10 2002-08-29 Gilles Gosselin 2' or 3' -deoxy and 2', 3' -dideoxy-beta-L-pentofuranonucleo-side compounds, method of preparation and application in therapy, especially as anti- viral agents
US5696277A (en) * 1994-11-15 1997-12-09 Karl Y. Hostetler Antiviral prodrugs
DE69636734T2 (de) 1995-06-07 2007-10-18 Emory University Nucleoside mit anti-hepatitis b virus wirksamkeit
TW343975B (en) * 1995-12-15 1998-11-01 Boehringer Mannheim Gmbh New phospholipid derivatives of phosphonocarboxylic acids, the production thereof as well as their use as antiviral pharmaceutical agents
SE9603726D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab Novel compounds
SE9604582D0 (sv) * 1996-12-13 1996-12-13 Astra Ab Novel compounds
US6686462B2 (en) 1997-02-28 2004-02-03 The Regents Of The University Of California Antiviral compounds and methods of administration
US7262173B2 (en) * 1997-03-21 2007-08-28 Georgetown University Chemosensitizing with liposomes containing oligonucleotides
US20030229040A1 (en) * 1997-03-21 2003-12-11 Georgetown University Cationic liposomal delivery system and therapeutic use thereof
US6559129B1 (en) * 1997-03-21 2003-05-06 Georgetown University Cationic liposomal delivery system and therapeutic use thereof
US6126965A (en) * 1997-03-21 2000-10-03 Georgetown University School Of Medicine Liposomes containing oligonucleotides
EA200700564A1 (ru) 1998-02-25 2007-08-31 Эмори Юниверсити 2`-фторнуклеозиды
WO1999051613A1 (en) * 1998-04-03 1999-10-14 Medivir Ab Prodrugs of phosphorous-containing pharmaceuticals
US6444837B1 (en) * 1998-07-13 2002-09-03 University Of Southern California Synthesis and antiviral activity of a series of pyrophosphate analogs
DK2415776T3 (en) 1998-08-10 2016-07-04 Novartis Ag Beta-L-2'-deoxy nucleosides for the treatment of Hepatitis B
US6444652B1 (en) 1998-08-10 2002-09-03 Novirio Pharmaceuticals Limited β-L-2'-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B
CN1666742A (zh) 1998-11-02 2005-09-14 三角药物公司 对乙型肝炎病毒的联合治疗
AU2453901A (en) * 1999-12-29 2001-07-09 Regents Of The University Of California, The Treatment of drug-resistant human immunodeficiency virus infection
KR20080059679A (ko) 2000-03-29 2008-06-30 조지타운 유니버시티 델타형 간염 바이러스 감염의 치료방법
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
KR20030036189A (ko) 2000-05-26 2003-05-09 이데닉스(케이만)리미티드 플라비바이러스 및 페스티바이러스의 치료방법 및 조성물
US6787526B1 (en) 2000-05-26 2004-09-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides
US6875751B2 (en) 2000-06-15 2005-04-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′-prodrugs of 2′-deoxy-β-L-nucleosides
PT1411954E (pt) 2000-10-18 2011-03-16 Pharmasset Inc Nucleosídeos modificados para o tratamento de infecções virais e proliferação celular anormal
WO2002087500A2 (en) * 2001-04-27 2002-11-07 Newbiotics, Inc. Viral enzyme activated prototoxophores and use of same to treat viral infections
DE14169110T1 (de) 2002-06-28 2022-05-12 Centre National De La Recherche Scientifique -Cnrs- Modifizierte 2'- und 3'-Nukleosid-Prodrugs zur Behandlung von Flaviridae-Infektionen
CN101172993A (zh) 2002-06-28 2008-05-07 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 用于治疗黄病毒感染的2′－c－甲基－3′－o－l－缬氨酸酯核糖呋喃基胞苷
US7608600B2 (en) * 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
AU2003248748A1 (en) * 2002-06-28 2004-01-19 Idenix (Cayman) Limited 2'-c-methyl-3'-o-l-valine ester ribofuranosyl cytidine for treatment of flaviviridae infections
TWI244393B (en) 2002-08-06 2005-12-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Crystalline and amorphous forms of beta-L-2'-deoxythymidine
BR0314259A (pt) 2002-09-13 2005-07-26 Idenix Cayman Ltd ß-l-2'-desoxinucleosìdeos para o tratamento de cepas de hbv resistentes e terapias combinadas
CA2499036A1 (en) * 2002-09-24 2004-04-08 Koronis Pharmaceuticals, Incorporated 1,3,5-triazines for treatment of viral diseases
US20070207973A1 (en) * 2002-09-24 2007-09-06 Koronis Pharmaceuticals, Incorporated 1,3,5-Triazines for Treatment of Viral Diseases
KR20050088079A (ko) 2002-11-15 2005-09-01 이데닉스 (케이만) 리미티드 2'-분지형 뉴클레오시드 및 플라비비리다에 돌연변이
EP2319853B1 (en) 2002-12-12 2014-03-12 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Process for the production of 2'-branched nucleosides
RU2005123395A (ru) * 2002-12-23 2006-01-27 Айденикс (Кайман) Лимитед (Ky) Способ получения 3-нуклеозидных пролекарств
US7429572B2 (en) 2003-05-30 2008-09-30 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
US20050075309A1 (en) 2003-07-25 2005-04-07 Richard Storer Purine nucleoside analogues for treating Flaviviridae including hepatitis C
US20070211471A1 (en) * 2003-10-27 2007-09-13 Wimberly Randal L Dual Reflector System
WO2005090370A1 (en) 2004-02-05 2005-09-29 The Regents Of The University Of California Pharmacologically active agents containing esterified phosphonates and methods for use thereof
EP1737472B1 (en) 2004-03-29 2014-08-13 University Of South Florida Effective treatment of tumors and cancer with triciribine
BRPI0512360A (pt) * 2004-06-23 2008-03-11 Idenix Cayman Ltd derivados de 5-aza-7-deazapurina para o tratamento de flaviviridae
WO2006031725A2 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Pharmasset, Inc. Preparation of 2'­fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
TW200628161A (en) * 2004-11-12 2006-08-16 Panacos Pharmaceuticals Inc Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof
JP4516863B2 (ja) * 2005-03-11 2010-08-04 株式会社ケンウッド 音声合成装置、音声合成方法及びプログラム
JP2008535862A (ja) 2005-04-08 2008-09-04 キメリクス，インコーポレイテッド ポックスウイルス感染の治療のための化合物、組成物および方法
US20070003608A1 (en) * 2005-04-08 2007-01-04 Almond Merrick R Compounds, compositions and methods for the treatment of viral infections and other medical disorders
EP1937825B1 (en) 2005-09-26 2016-12-21 Gilead Pharmasset LLC Modified 4'-nucleosides as antiviral agents
US7781576B2 (en) 2005-12-23 2010-08-24 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Process for preparing a synthetic intermediate for preparation of branched nucleosides
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
US20080039428A1 (en) * 2006-06-29 2008-02-14 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Antiretroviral combination therapy
US7950880B2 (en) * 2006-10-18 2011-05-31 Kennametal Inc. Spiral flute tap
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
EP3085377A1 (en) 2008-01-25 2016-10-26 Chimerix, Inc. Methods of treating viral infections
WO2009129120A2 (en) 2008-04-15 2009-10-22 Rfs Pharma, Llc Nucleoside derivatives for treatment of caliciviridae infections, including norovirus infections
US8551973B2 (en) 2008-12-23 2013-10-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside analogs
EA019295B1 (ru) 2008-12-23 2014-02-28 Джилид Фармассет, Ллс. Соединения пуриновых нуклеозидов и способ их получения
EP2376088B1 (en) 2008-12-23 2017-02-22 Gilead Pharmasset LLC 6-O-Substituted-2-amino-purine nucleoside phosphoramidates
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
WO2011011519A1 (en) 2009-07-21 2011-01-27 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating ocular conditions
WO2011100698A2 (en) 2010-02-12 2011-08-18 Chimerix, Inc. Methods of treating viral infection
WO2011139709A2 (en) 2010-04-26 2011-11-10 Chimerix, Inc. Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
AR084044A1 (es) 2010-11-30 2013-04-17 Pharmasset Inc Compuestos 2’-espiro-nucleosidos
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
AU2012345732B2 (en) 2011-11-30 2016-07-14 Emory University Antiviral JAK inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
SG10201800188SA (en) 2013-03-15 2018-02-27 Univ California Acyclic nucleoside phosphonate diesters
PL3650014T3 (pl) 2013-08-27 2022-01-31 Gilead Pharmasset Llc Preparat złożony dwóch związków przeciwwirusowych
ES2915381T3 (es) 2014-09-15 2022-06-22 Univ California Análogos de nucleótidos
EP3350191B9 (en) 2015-09-15 2021-12-22 The Regents of the University of California Nucleotide analogs
WO2018023054A1 (en) * 2016-07-28 2018-02-01 Kansas State University Research Foundation Protease transition state inhibitor prodrugs
CA3105038A1 (en) * 2018-06-26 2020-01-02 Tsrl, Inc. Metabolically stable prodrugs

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE7607496L (sv) * 1976-07-01 1978-01-02 Astra Laekemedel Ab Sett for bekempning av virusinfektioner
CA1144937A (en) * 1977-12-22 1983-04-19 Dke J.E. Helgstrand Aromatic derivatives, pharmaceutical compositions and methods for combatting virus infections
US5072032A (en) * 1989-06-21 1991-12-10 Mckenna Charles E Preparation and use of thiophosphonates and thio-analogues of phosphonoformic acid
US5194654A (en) * 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5411947A (en) * 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
EP0673256A4 (en) * 1992-12-09 1997-01-29 Indiana University Foundation SUPPRESSION OF MYELOID CELLS.
US5696277A (en) * 1994-11-15 1997-12-09 Karl Y. Hostetler Antiviral prodrugs

Also Published As

Publication number Publication date
PT792275E (pt) 2004-09-30
AU4163596A (en) 1996-06-06
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DE69532642T2 (de) 2005-06-30
WO1996015132A1 (en) 1996-05-23
US6002029A (en) 1999-12-14
AU700651B2 (en) 1999-01-14

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