ES2212487T3 - Utilizacion de al menos un hidroxiestilbeno en una composicion reafirmante. - Google Patents
Utilizacion de al menos un hidroxiestilbeno en una composicion reafirmante.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE A LA UTILIZACION DE AL MENOS UN HIDROXIESTILBENO EN O PARA LA PREPARACION DE UNA COMPOSICION COMO AGENTE REAFIRMANTE DE LA PIEL. LA INVENCION SE REFIERE TAMBIEN A UNA COMPOSICION REAFIRMANTE QUE SE COMPRENDE AL MENOS UN HIDROXIESTILBENO.
Description
Utilización de al menos un hidroxiestilbeno en
una composición reafirmante.
La invención se refiere a la utilización de al
menos un hidroxiestilbeno en o para la preparación de una
composición reafirmante. En particular, las composiciones de la
invención están destinadas para estimular la reestructuración de la
piel y/o de las mucosas por el estímulo de la síntesis del colágeno
y/o el estímulo de la proliferación de los fibroblastos de la
dermis.
La invención tiene igualmente por objeto una
composición reafirmante que comprende al menos un
hidroxiestilbeno.
La piel humana está constituida por dos
compartimientos a saber un compartimiento superficial, la
epidermis, y un compartimiento profundo, la dermis.
La epidermis humana natural está compuesta
principalmente por tres tipos de células que son los
queratinocitos, muy mayoritarios, los melanocitos y las células de
Langerhans. Cada uno de estos tipos celulares contribuye por sus
funciones propias al papel esencial jugado en el organismo por la
piel.
La dermis proporciona a la epidermis un soporte
sólido. Es igualmente su elemento nutridor. Está principalmente
constituido por fibroblastos y por una matriz extracelular
compuesta por si misma por diferentes proteínas extracelulares
entre las cuales figuran particularmente las fibras de colágeno, la
elastina y diferentes glicoproteínas. El conjunto de estos
componentes extracelulares se sintetiza por el fibroblasto. Se
encuentran igualmente en la dermis leucocitos, mastocitos o también
macrofagos tisulares. Por último la dermis contiene vasos sanguíneos
y fibras nerviosas.
El fibroblasto, por su actividad en la síntesis
de las proteínas extracelulares matriciales (proteoglicanos, fibras
de colágeno y otras glicoproteínas de estructura) es el actor
principal de la elaboración estructural de la dermis.
Las fibras de colágeno aseguran la solidez de la
dermis. Las mismas son muy resistentes pero sensibles a ciertas
enzimas denominadas generalmente colagenasas. En la dermis, las
fibras de colágeno están constituidas por fibrillas selladas las
unas a las otras, formando así más de diez tipos de estructuras
diferentes. La estructura de la dermis se debe en gran parte al
enmarañamiento de las fibras de colágeno amontonadas. Las fibras de
colágeno participan en la tonicidad de la piel. Las fibras de
colágenos se renuevan regularmente pero esta renovación disminuye
con la edad lo cual produce particularmente una reducción de la
dermis. Se admite igualmente que factores extrínsecos como los
rayos ultravioleta o el tabaco tienen igualmente un efecto sobre la
piel y sobre su porcentaje de colágeno.
Sin embargo, diversos factores producen la
degradación del colágeno, con todas las consecuencias que se pueden
considerar sobre la estructura y/o la firmeza de la piel y/o de las
mucosas.
Aunque muy resistentes, las fibras de colágeno
son sensibles a ciertas enzimas denominadas colagenasas. Una
degradación de las fibras de colágeno produce la apariencia de piel
floja y arrugada que el ser humano, prefiriendo la apariencia de
una piel lisa y tensa, trata desde siempre combatir.
Las colagenasas forman parte de una familia de
enzimas denominadas metaloproteinasas (MMPs) que son por si mismas
los miembros de una familia de enzimas proteolíticas
(endoproteasas) que tienen un átomo de zinc coordenado con 3
restos de cisteína y una metionina en su emplazamiento activo y que
degradan los componentes macromoleculares de la matriz extracelular
y lamas basales a un pH neutro (colágeno, elastina, etc...). Muy
ampliamente extendidas en el mundo vivo, estas enzimas se
encuentran presentes, pero débilmente expresadas, en situaciones
fisiológicas normales como el crecimiento de los órganos y la
renovación de los tejidos.
La familia de las metaloproteinasas está
constituida por varios grupos bien definidos basados en sus
parecidos en términos de estructura y de especificidad de substrato
(ver Woessner J.F., Faseb Journal, vol. 5, 1991, 2145). Entre estos
grupos, se pueden citar las colagenasas destinadas para degradar
los colágenos fibrilares (MMP-1 o colagenasa
intersticial, MMP-8 o colagenasa de neutrófilo,
MMP-13 o colagenasa 3), las gelatinazas que degradan
el colágeno de tipo IV o cualquier forma de colágeno
desnaturalizados (MMP-2 o gelatinasa A (72 kDa),
MMP-9 o gelatinasa B (92 kDa)), las estromelisinas
(MMP-3) cuyo amplio espectro de actividad se dirige
a las proteínas de la matriz extracelular tales como las
glicoproteínas (fibronectina, laminina), los proteoglicanos, etc.,
o también las metaloproteinasas membranares.
La exposición prolongada a las radiaciones
ultravioletas, particularmente a las radiaciones ultravioletas de
tipo A y/o B, tiene por efecto un estímulo de la expresión de las
colagenasas, particularmente de la MMP-1. Se trata
de una de las componentes del envejecimiento cutáneo
fotoinducido.
Por otro lado, en la menopausia, las principales
modificaciones respecto a la dermis son una disminución del
porcentaje de colágeno y del espesor dérmico. Ello produce en la
mujer con menopausia una reducción de la piel. La mujer experimenta
entonces una sensación de "piel seca" o de piel que tira y se
observa una acentuación de las finas arrugas y pequeñas arrugas de
superficie. La piel presenta un aspecto rugoso en la palpación. Por
último la piel presenta una flexibilidad disminuida.
Está demostrado que las mujeres pierden
progresivamente su porcentaje de colágeno por año después de la
menopausia y que el 30% del porcentaje global se pierde en los
cinco primeros años posmenopáusicos.
Se comprende por consiguiente la importancia que
reviste la presencia de fibras de colágeno en la piel y la
importancia que existe en mantener, incluso reforzar, su
presencia.
Por consiguiente, es importante poder disponer de
productos cuyos efectos traten de mantener el porcentaje de
colágeno en la piel y darle una apariencia lisa y tensa
A este respecto la Firma solicitante ha
descubierto de forma sorprendente e inesperada que los
hidroxiestilbenos presentan la propiedad de estimular la síntesis
del colágeno y/o de estimular la proliferación de los fibroblastos
de la dermis y/o inhibir la expresión de las proteasas de la matriz
extracelular, particularmente metaloproteinasas y también más
particularmente la metaloproteinasa de tipo 1.
Los hidroxiestilbenos son compuestos que
responden a la fórmula general I:
en la cual n es un número entero comprendido
entre 0 y 4 inclusive y m es un número entero comprendido entre 0 y
5 inclusive. Estos compuestos pueden encontrase bajo una forma Cis
o
Trans.
Según la invención, el término hidroxiestilbeno
cubre tanto los compuestos de fórmula I como sus derivados
hidroxialquilados.
Los hidroxiestilbenos son compuestos que se
encuentran en estado natural en los vegetales de la clase de los
espermatofitos y particularmente en la viña. Se encuentran tales
compuestos como por ejemplo el resveratrol en la uva y en el
vino.
En la técnica anterior los hidroxiestilbenos se
utilizan entre otros como agentes despigmentantes
(JP87-192040), como agentes vasodilatadores (EP
96-830517), como agentes antitrombóticos (JP
05016413), en el tratamiento de diversas afecciones
cardiovasculares (CA 2187990), como agentes inhibidores de
mutagénesis y de carcinogénesis (JP 06024967), o también descritos
como antioxidantes.
Entre estos compuestos el resveratrol (o 3, 5,
4'-trihidroxiestilbeno) es particularmente estudiado
por las actividades anteriormente descritas principalmente porque
se trata de un compuesto natural que se encuentra en la piel de las
pepitas de uva y en el vino. A este respecto se puede consultar la
revista de Soleas y colaboradores (Clinical Biochemistry, vol. 30,
Nº 2, páginas 91-113, 1997) que resume
perfectamente el estado de los conocimientos referentes a este
compuesto y los hidroxiestilbenos.
Pero, la capacidad de los hidroxiestilbenos a
estimular la síntesis del colágeno y/o la proliferación de los
fibroblastos de la dermis y/o la inhibición de la expresión de las
proteasas de la matriz extracelular, nunca ha sido descrita hasta
ahora.
La invención tiene por consiguiente por objeto la
utilización, como principio activo, en o para la preparación de una
composición, de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para estimular la síntesis del colágeno y/o la
proliferación de los fibroblastos de la dermis y/o para inhibir la
expresión de las protesas de la matriz extracelular,
particularmente metaloproteinasas y también más particularmente la
metaloproteinasa de tipo 1.
Entre los hidroxiestilbenos, se pueden citar los
mono, di, tri, tetra, penta, hexa, hepta, octo,
nonahidroxiestilbenos, o también sus derivados
hidroxialquilados.
Según la invención los hidroxiestilbenos pueden
ser utilizados solos o en mezclas de cualquier naturaleza y pueden
ser de origen natural o sintética.
Los hidroxiestilbenos que se pueden utilizar
según la invención son elegidos entre:
el 4'-hidroxiestilbeno,
el 2',4'-dihidroxiestilbeno,
el 3',4'-dihidroxiestilbeno,
el 4,4'-dihidroxiestilbeno,
el
2',4',4-trihidroxiestilbeno,
el
3',4',4-trihidroxiestilbeno,
el
2,4,4'-trihidroxiestilbeno,
el
3,4,4'-trihidroxiestilbeno,
el
3,4',5'-trihidroxiestilbeno,
el
2',3,4-trihidroxiestilbeno,
el
2,3',4-trihidroxiestilbeno,
el
2',2,4'-trihidroxiestilbeno,
el
2,4,4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2',3,4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2,3',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4',5,5'-pentahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4',6-pentahidroxiestilbeno,
el
2,3',4,4',6-pentahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4',6,6'-hexahidroxiestilbeno.
Preferentemente, se utiliza según la invención
3,4',5-trihidroxiestilbeno o resveratrol.
Particularmente el hidroxiestilbeno o la
composición que lo contiene se utilizan según la invención en
aplicación tópica sobre la piel.
Se ha visto anteriormente que el colágeno está
implicado en la solidez de la dermis, por consiguiente en la
firmeza de la piel y/o de las mucosas y que los fibroblastos son
responsables de la síntesis de las proteínas de la matriz
extracelular de la dermis, particularmente del colágeno.
Así, uno de los aspectos de la invención es por
consiguiente proponer la utilización como principio activo en o
para la preparación de una composición de una cantidad eficaz de al
menos un hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la
composición destinados a tratar, de forma preventiva o curativa,
los signos cutáneos del envejecimiento, más particularmente a
tratar, de forma preventiva o curativa, la piel floja y/o
arrugada.
Otro aspecto de la invención es proponer la
utilización como principio activo en o para la preparación de una
composición de una cantidad eficaz de al menos un hidroxiestilbeno,
estando este hidroxiestilbeno o la composición destinados para
estimular el reafirmamiento de la piel.
Según también otro aspecto, la invención tiene
por objeto la utilización como principio activo en o para la
preparación de una composición de una cantidad eficaz de al menos
un hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para favorecer el alisado de la piel y/o para estirar la
piel.
Según también otro aspecto, la invención tiene
por objeto la utilización como principio activo en o para la
preparación de una composición de una cantidad eficaz de al menos
un hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para combatir los efectos cutáneos de la menopausia, más
particularmente los efectos de la menopausia sobre el colágeno y/o
los fibroblastos.
La cantidad de hidroxiestilbeno utilizable según
la invención depende desde luego el efecto buscado y debe
encontrarse en una cantidad eficaz para estimular la síntesis del
colágeno y/o la proliferación de los fibroblastos de la dermis y/o
para inhibir la expresión de las proteasas de la matriz
extracelular.
A título de ejemplo la cantidad de
hidroxiestilbeno utilizable según la invención puede llegar por
ejemplo del 0,001% al 10% y de preferencia del 0,005% a 5% del peso
total de la composición.
Por medio cosméticamente aceptable se entiende un
medio compatible con la piel, las mucosas, las uñas, los
cabellos.
La composición según la invención comprende desde
luego un soporte cosméticamente aceptable y puede presentarse bajo
cualquier forma galénica normalmente utilizada para una aplicación
tópica, particularmente en forma de una solución acuosa,
hidroalcohólica o aceitosa, de una emulsión de
aceite-en-agua o
agua-en-aceite o múltiple, de un gel
acuoso o aceitoso, de un producto anhidro líquido, pastoso o
sólido, de una dispersión de aceite en una fase acuosa con la
ayuda de esférulas, pudiendo estas esférulas ser nanopartículas
poliméricas tales como las nanoesferas y las nanocápsulas o mejor
de las vesículas lipídicas de tipo iónico y/o no iónico.
Esta composición puede ser más o menos fluida y
tener el aspecto de una crema blanca o coloreada, una pomada, una
leche, una loción, un suero, una pasta, una espuma. La misma puede
eventualmente aplicarse sobre la piel en forma de aerosol. La misma
puede igualmente presentarse en forma sólida, y por ejemplo en
forma de barra. La misma puede ser utilizada como producto de
tratamiento, como producto de limpieza, como producto de maquillaje
o también como simple producto desodorante.
De forma conocida, la composición de la invención
puede contener igualmente los adyuvantes habituales en los ámbitos
cosméticos y dermatológico, tales como los gelificantes hidrófilos
o lipófilos, los agentes activos hidrófilos o lipófilos, los
conservantes, los antioxidantes, los disolventes, los perfumes, las
cargas, los filtros, los pigmentos, los agentes queladores, los
absorbedores de olor y las materias colorantes. Las cantidades de
estos diferentes adyuvantes son las clásicamente utilizadas en los
ámbitos considerados, y por ejemplo del 0,01% al 20% del peso total
de la composición. Estos adyuvantes, según su naturaleza, pueden
ser introducidos en la fase grasa, en la fase acuosa, en las
vesículas lipídicas y/o en las nanopartículas.
Cuando la composición de la invención es una
emulsión, la proporción de la fase grasa puede oscilar entre un 5%
y un 80% en peso, y de preferencia entre un 5% y un 50% del peso
total de la composición. Los aceites, los emulsionantes y los
coemulsionantes utilizados en la composición en forma de emulsión
son elegidos entre los clásicamente utilizados en el ámbito
considerado.
El emulsionante y el coemulsionantes están
presentes, en la composición, en una proporción que oscila entre el
0,3% y el 30% en peso, y de preferencia entre el 0,5% y el 20% del
peso total de la composición.
Como aceites utilizables en la invención, se
pueden citar los aceites minerales, los aceites de origen vegetal
(aceite de albaricoque, aceite de girasol), los aceites de origen
animal, los aceites de síntesis, los aceites siliconados y los
aceites fluorados (perfluoropoliéteres). Se pueden también utilizar
como materias grasas alcoholes grasos (alcohol cetílico), ácidos
grasos, ceras (cera de abejas).
Como emulsionantes y coemulsionantes que se
pueden utilizar en la invención, se pueden citar por ejemplo los
ésteres de ácido graso y de polietilenglicol tales como el
estearato de PEG-40, el estearato de
PEG-100, los ésteres de ácido graso y de poliol
tales como el estearato de glicerilo y el triestearato de
sorbitano.
Como gelificantes hidrófilos, se pueden citar en
particular los polímeros carboxivinílicos (carbomero), los
copolímeros acrílicos tales como los copolímeros de
acrilatos/alquilacrilatos, las poliacrilamidas, los polisacáridos,
las gomas naturales y las arcillas, y, como gelificantes lipófilos,
se pueden citar las arcillas modificadas como las bentonas, las
sales metálicas de ácidos grasos, la sílice hidrófoba y los
polietilenos.
La composición puede contener otros agentes
activos hidrófilos como las proteínas o los hidrolizados de
proteína, los ácidos aminados, los polioles, la urea, la alantoína,
los azúcares y los derivados de azúcar, las vitaminas
hidrosolubles, los extractos vegetales y los hidroxi-ácidos.
Como agentes activos lipófilos, se pueden
utilizar el retinol (vitamina A) y sus derivados, el tocoferol
(vitamina E) y sus derivados, los ácidos grasos esenciales, las
ceramidas, los aceites esenciales, el ácido salicílico y sus
derivados.
Resulta igualmente posible utilizar en asociación
con el hidroxiestilbeno utilizado según la invención de los
compuestos seleccionados entre
- las hormonas vegetales;
- captadores de radicales OH, tales como el
dimetilsulfóxido;
- abridores de canales cloro;
- extractos de vegetales tales como las
Iridáceas, Rosáceas o de soja, extractos que pueden entonces
contener o no isoflavonas;
- extractos de micro-organismos
de los cuales en particular de los extractos bacterianos como los
de las bacterias filamentosas no fotosintéticas;
A la lista indicada anteriormente, otros
compuestos pueden igualmente añadirse, a saber por ejemplo
fosfolípidos como la lecitina, los ácidos linoléico y linolénico,
el ácido salicílico y sus derivados descritos en la patente
francesa FR 2.581.542, como los derivados del ácido salicílico
portadores de un grupo alcanoilo que tiene de 2 a 12 átomos de
carbono en posición 5 del ciclo bencénico, ácidos
hidroxicarboxílicos o cetocarboxílicos y sus ésteres, lactonas y
sus sales correspondientes, carotenóides, los ácidos
eicosatetraenóico y eicosatrienóico o sus ésteres y amidas, la
vitamina D y sus derivados.
Según la invención, no puede, entre otros,
asociar al menos un hidroxiestilbeno a otros agentes activos. Entre
estos agentes activos, se pueden citar a título de ejemplo:
- los agentes que modulan la pigmentación cutánea
tales como el ácido cojico o la hidroquinona;
- los agentes que modulan la adhesión bacteriana
sobre la piel y/o las mucosas tales como la miel, particularmente
la miel de acacias y algunos derivados de azúcar;
- los agentes queratolíticos tales como los
ácidos alfa- y beta-hidroxicarboxílicos o
beta-cetocarboxílicos, sus sales, amidas o ésteres y
más particularmente los hidroxiácidos tales como el ácido
glicólico, el ácido láctico, el ácido salicílico, el ácido cítrico
y de forma general los ácidos de frutas, y el ácido
n-octanoil-5-salicílico;
- los agentes anti-radicales
libres, tales como el alfa-tocoferol o sus ésteres,
las superóxido dismutasas, algunos quelatantes de metales o el ácido
ascórbico y sus ésteres;
- los antipeliculares como el octopirox o la
piritiona de zinc;
- los antiacnéicos como el peróxido de
benzoilo.
- substancias tales como los antagonistas de
substancia P, de CGRP o bradiquinina o los inhibidores de NO
sintasa o también los inhibidores de canales sódicos, compuestos
descritos como agentes activos en el tratamiento de las pieles
sensibles y como presentadores de efectos
anti-irritantes, en particular respecto a
compuestos irritantes eventualmente presentes en las
composiciones.
Como agentes activos, se pueden utilizar
particularmente los hidratantes tales como los polioles (por
ejemplo la glicerina), las vitaminas (por ejemplo el
D-pantenol), los agentes espesantes (alantoína, agua
de aciano), los filtros UVA y UVB, los agentes matificantes (por
ejemplo los polidimetilorganosiloxanos parcialmente reticulados
vendidos bajo el nombre de KSG® por Shin Etsu) y sus mezclas.
Se pueden también añadir agentes activos
antiarrugas, y particularmente productos tensores tales como las
proteínas vegetales y sus hidrolizados, en particular el extracto
de proteínas de soja vendidas bajo el nombre de Eleseryl® por la
Sociedad LSN o el derivado de avena vendido bajo la denominación
Reductine® por la Sociedad Silab.
La piel que está constituida por otros
componentes del colágeno y los fibroblastos, se muestra
interesante, cuando se utiliza un hidroxiestilbeno según la
invención, favorecer al mismo tiempo la síntesis de estos otros
componentes como por ejemplo los lípidos y/o favorecer la
proliferación de otros componentes celulares como por ejemplo los
queratinocitos.
Así, la invención tiene por objeto una
composición cosmética que comprende en un medio cosméticamente
aceptable al menos un hidroxiestilbeno y al menos otro producto que
estimula la síntesis de los lípidos y/o la proliferación de los
queratinocitos.
A este respecto se puede citar como producto
estimulante la síntesis de los lípidos, las hormonas vegetales,
como las auxinas, o compuestos de origen vegetal, como el ácido
cinámico y como producto que estimula la proliferación de los
queratinocitos de los compuestos de origen vegetal, como el
floroglucinol.
Así, las composiciones según la invención pueden
comprender además del hidroxiestilbeno, del ácido cinámico o sus
derivados y/o una hormona vegetal, particularmente una auxina
seleccionada entre el ácido indolacético (IAA), el ácido
4-cloroindol-3-acético
(4-Cl-IAA), el ácido fenilacético
(PAA), el ácido indol-3-butírico
(IBA), el ácido 2,4-diclorofenoxiacético
(2,4-D), el ácido
\alpha-naftalenoacético
(\alpha-NAA), el ácido
\beta-naftoxiacético, el indol etanol, el indol
acetaldehído y el indol acetonitrilo y/o un compuesto vegetal como
el floroglucinol.
Bien entendido, los hidroxiestilbenos pueden ser
utilizados en la preparación de composiciones cosméticas y/o
farmacéuticas, particularmente dermatológicas, destinadas para
estimular la síntesis del colágeno y/o la proliferación de los
fibroblastos de la dermis.
Otras características y ventajas de la invención
se desprenderán mejor de los ejemplos que siguen, dados a título
ilustrativo y no limitativo. En lo que sigue o lo que antecede, las
proporciones se facilitan en porcentaje ponderal, salvo
indicaciones contrarias.
El estudio se realizó mediante la medición de la
incorporación de prolina radioactiva en las proteínas
neosintetizadas por cultivos de fibroblastos dérmicos humanos
normales. Estas proteínas neosintetizadas son mayoritariamente
fibras colágenas.
Los cultivos de fibroblastos se realizan según
los métodos clásicos de cultivo celular, a saber en medio MEM/M199
vendido por la Sociedad Gibco, en presencia de bicarbonato de sodio
(1,87 mg/ml) de L-glutamina (2 mM), de penicilina
(50 Ul/ml) y del 10% de suero de ternera fetal (Gibco).
El ensayo se realizó sobre cultivos de células al
80% de confluencia en placa 24 orificios. El resveratrol, a la
concentración de 10^{-4}M, se puso en contacto con las células
durante 48 horas. El marcado con prolina tritiada
(L-[2,3-^{3}H]-prolina vendida por Amersham, 33 \muCi/ml) se realizó durante 24 horas.
(L-[2,3-^{3}H]-prolina vendida por Amersham, 33 \muCi/ml) se realizó durante 24 horas.
El porcentaje de prolina tritiada incorporada se
midió al final del ensayo por precipitación ácida de las proteínas
sobre filtros y recuento por centelleo líquido.
Los resultados se evaluaron con relación a un
testigo constituido por células que no han sido tratadas con
resveratrol.
Un testigo positivo (vitamina C en 20\mug/ml)
conocido por estimular la síntesis del colágeno se introdujo en el
ensayo como referencia.
Los resultados de este ensayo se indican en la
tabla siguiente.
| Tratamiento | Cpm | d.s; | % | P |
| No tratado | 22528 | 1918 | 100 | - |
| Resveratrol 1,25 \muM | 27164 | 502 | 121 | <0,01 |
| Resveratrol 5,00 \muM | 25769 | 1112 | 114 | <0,05 |
| Vitamina C (referencia del ensayo) | 36431 | 417 | 162 | <0,01 |
| Cpm: veces por minuto. | ||||
| d.s.: desvio standard | ||||
| p: intervalo de confianza calculado según el método de Dunett |
Estos resultados muestran que el resveratrol
estimula de forma significativa la incorporación de prolina en el
colágeno y por consiguiente que activa la neosintesis de proteínas,
particularmente de colágeno.
Es estudio se realizó por medición de la
incorporación de timidina radioactiva en cultivos de fibroblastos
dérmicos humanos normales.
Los cultivos de fibroblastos se realizan según
los métodos clásicos de cultivo celular, a saber en medio MEM/M199
vendido por la Sociedad Gibco, en presencia de bicarbonato de sodio
(1,87 mg/ml) de L-glutamina (2 mM), de penicilina
(50 Ul/ml) y de 10% de suero de ternera fetal (Gibco).
El ensayo se realizó en cultivos de células al
80% de confluencia en placa de 24 orificios. El resveratrol, a la
concentración de 1,25 \muM y 5 \muM, se puso en contacto con
las células durante 48 horas. El marcado con timidina tritiada
([metil-3H]timidina vendida por la Sociedad
Amersham, 82 Ci/mmoles) se realizó durante 24 horas.
El porcentaje de timidina tritiada incorporada se
midió al final del ensayo por precipitación ácida de las proteínas
sobre filtros y recuento por centelleo líquido.
Los resultados se evaluaron con relación a un
testigo constituido por células que no han sido tratadas con
resveratrol.
Un testigo positivo (Suero de ternera fetal al
20%) conocido para estimular la síntesis del colágeno se introdujo
en el ensayo como referencia.
Los resultados de este ensayo se indican en la
tabla siguiente.
| Tratamiento | Cpm | d.s; % | p | |
| No tratado | 13649 | 1076 | 100 | - |
| Resveratrol 1,25 \muM | 15055 | 831 | 110 | <0,05 |
| Resveratrol 5,00 \muM | 19229 | 1407 | 141 | <0,01 |
| SVF 20% (referencia del ensayo) | 17186 | 1426 | 126 | <0,05 |
| Cpm: veces por minuto. | ||||
| d.s.: desvio standard | ||||
| p: intervalo de confianza calculado según el método de Dunett |
El efecto del resveratrol sobre la producción de
la colagenasa intersticial fue evaluado en un modelo de cultivo de
células A2058 (procedentes de melanomas humano: Templeton N.S. y
col. 1990; Cancer Res., 50: 5431-5431).
Las células se incubaron en un medio MEM sin rojo
fenol contenido ácidos aminoácidos a la concentración de 2 mM, de
piruvato de sodio a la concentración de 1 mM y del suero de ternera
carbonado al 10%. Las mismas se pusieron seguidamente en cultivo a
la densidad de 20000 células por pocillo en los 24 pocillos de
placa de pocillos múltiples.
Veinticuatro horas después de la puesta en
cultivo, las células se pusieron en contacto con el resveratrol. La
producción de la colagenasa intersticial se evaluó 96 horas más
tarde en el medio de cultivo. Esta se realiza con la ayuda de un
kit Elisa (Biotrack human MMP1; Amersham)
El resveratrol se sometió a ensayo a las
concentraciones 2.10^{-}7 M y 2.10^{-6}M
Los resultados expresados en porcentaje
representan la disminución de la producción de la colagenasa
intersticial con relación al control, es decir mediante aporte a un
cultivo realizado en las mismas condiciones en ausencia de
resveratrol.
| Resveratrol 0,2\muM | Resveratrol 2\muM | |
| % de inhibición | 14% | 57% |
Los resultados muestran que el resveratrol
disminuye la producción de la colagenasa intersticial por las
células A 2058 y esto de forma
dosis-dependiente.
Ejemplo
4
Estas composiciones se obtienen por las técnicas
habituales corrientemente utilizadas en cosmética o en farmacia.
Composición
1
| Cera de abeja | 1,50% |
| Aceite de almendras de albaricoque | 13,00% |
| Perfume | 0,40% |
| Resveratrol | 1,00% |
| Xantano | 0,50% |
| Ciclopentadimetilsiloxano | 5,00% |
| Mono-di-palmitoestearato de sucrosa | 3,00% |
| Sesquiestearato de metilglucosa | 3,00% |
| Acido esteárico | 1,00% |
| Alcohol cetílico | 3,00% |
| Conservantes | 0,30% |
| Agua desmineralizada esterilizada \hskip1,5cm csp | 100,00% |
Composición
2
| Aceite de vaselina | 47,99% |
| Aceite de almendras de albaricoque | 6,00% |
| Perfume | 1,00% |
| Resveratrol | 0,50% |
| Ciclopenta dimetilsiloxano | 45,00% |
Composición
3
| Palmitato de 2-etil hexilo | 10,50% |
| Fracción líquida de manteca de caridad | 16,50% |
| Conservantes | 0,30% |
| Perfume | 0,15% |
| Resveratrol | 0,10% |
| Hidróxido de sodio | 0.04% |
| Polímero carboxivinilico | 0,20% |
| Agua desmineralizada esterilizada | 69,80% |
Claims (12)
1. Utilización en una composición cosmética o
para la preparación de una composición cosmética y/o dermatológica
como principio activo de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para estimular la síntesis de colágeno.
2. Utilización en una composición cosmética o
para la preparación de una composición cosmética y/o dermatológica
como principio activo de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para estimular la proliferación de los fibroblastos de la
dermis.
3. Utilización en una composición cosmética o
para la preparación de una composición cosmética y/o dermatológica
como principio activo de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para inhibir la expresión de las proteasas de la matriz
extracelular.
4. Utilización en una composición cosmética o
para la preparación de una composición cosmética y/o dermatológica
como principio activo de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para inhibir la expresión de las metaloproteinasas.
5. Utilización en una composición cosmética o
para la preparación de una composición cosmética y/o dermatológica
como principio activo de una cantidad eficaz de al menos un
hidroxiestilbeno, estando este hidroxiestilbeno o la composición
destinados para inhibir la expresión de la metaloproteinasa de tipo
1.
6. Utilización según una de las reivindicaciones
1 a 5, caracterizada por el hecho de que el hidroxiestilbeno
o la composición están destinados para estimular el reafirmamiento
de la piel.
7. Utilización según una de las reivindicaciones
1 a 5, caracterizada por el hecho de que el hidroxiestilbeno
o la composición están destinados para combatir los efectos
cutáneos de la menopausia.
8. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de
que el hidroxiestilbeno o la composición se utiliza en aplicación
tópica sobre la piel y/o las mucosas.
9. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de
que se elige el hidroxiestilbeno entre:
el 4'-hidroxiestilbeno,
el 2',4'-dihidroxiestilbeno,
el 3',4'-dihidroxiestilbeno,
el 4,4'-dihidroxiestilbeno,
el
2',4',4-trihidroxiestilbeno,
el
3',4',4-trihidroxiestilbeno,
el
2,4,4'-trihidroxiestilbeno,
el
3,4,4'-trihidroxiestilbeno,
el
3,4',5'-trihidroxiestilbeno,
el
2',3,4-trihidroxiestilbeno,
el
2,3',4-trihidroxiestilbeno,
el
2',2,4'-trihidroxiestilbeno,
el
2,4,4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2',3,4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4',5-tetrahidroxiestilbeno,
el
2,3',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4,4'-tetrahidroxiestilbeno,
el
3,3',4',5,5'-pentahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4',6-pentahidroxiestilbeno,
el
2,3',4,4',6-pentahidroxiestilbeno,
el
2,2',4,4',6,6'-hexahidroxiestilbeno.
10. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de
que el hidroxiestilbeno es el
3,4',5-trihidroxiestilbeno o resveratrol.
11. Utilización según una cualquiera de las
reivindicaciones anteriores,caracterizada por el hecho de
que el hidroxiestilbeno está presente en una cantidad que oscila
entre el 0,001% y el 10% del peso total de la composición.
12. Utilización según la reivindicación anterior,
caracterizada por el hecho de que el hidroxiestilbeno está
presente en una cantidad que oscila entre el 0,005% y el 5% del
peso total de la composición.
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