EP3471881A1 - End fitting and device for sampling colonies of microorganisms and sampling process using same - Google Patents

End fitting and device for sampling colonies of microorganisms and sampling process using same

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Publication number
EP3471881A1
EP3471881A1 EP17732843.2A EP17732843A EP3471881A1 EP 3471881 A1 EP3471881 A1 EP 3471881A1 EP 17732843 A EP17732843 A EP 17732843A EP 3471881 A1 EP3471881 A1 EP 3471881A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
sampling
tip
biological material
sampling device
contact
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP17732843.2A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Corinne Beaulieu
Jean-Philippe Charrier
Frédéric FOUCAULT
Cécile PARIS
Philippe Wandels
Bouchra Makrouf
Bruno Colin
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Biomerieux SA
Original Assignee
Biomerieux SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biomerieux SA filed Critical Biomerieux SA
Publication of EP3471881A1 publication Critical patent/EP3471881A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/02—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by impregnation, e.g. using swabs or loops
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/02—Burettes; Pipettes
    • B01L3/0275—Interchangeable or disposable dispensing tips
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/02—Burettes; Pipettes
    • B01L3/0275—Interchangeable or disposable dispensing tips
    • B01L3/0279—Interchangeable or disposable dispensing tips co-operating with positive ejection means
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/02—Devices for withdrawing samples
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/069—Absorbents; Gels to retain a fluid
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/02—Devices for withdrawing samples
    • G01N2001/028—Sampling from a surface, swabbing, vaporising
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/2813—Producing thin layers of samples on a substrate, e.g. smearing, spinning-on
    • G01N2001/2826—Collecting by adsorption or absorption

Definitions

  • the technical field of the present invention is that of devices intended to pick up colonies of microorganisms on agar culture medium for analysis. More particularly, the present invention relates to a sampling tip having in its distal portion a sampling end of polymeric materials. The invention also relates to a sampling device comprising such a tip and a sampling method implementing them.
  • these consumables do not easily allow optimal deposition of the biological material taken from analysis media such as plates for a MALDI-TOF mass spectrometry analysis. Moreover, it is also very important to be able to take a bacterial colony or a fraction of this colony, without taking the culture medium located under the colony. This can indeed distort the results of subsequent analyzes.
  • the quality of the analysis results may also depend on the concentration of the biological deposit, formed from the sample taken, as well as its homogeneity on the support on which it is deposited. This is particularly the case for MALDI-TOF microorganism analyzes, in which the sample must form a thin and uniform layer to allow optimal analysis.
  • the groove having been designed to calibrate a given quantity of microorganisms (generally between ⁇ ⁇ ⁇ and ⁇ ), has at its end a metal or plastic loop which has a diameter generally greater than 1mm.
  • This tip may be larger than the surface on which the deposit is to be made.
  • the rigid nature of the eye is not particularly suitable for spreading on a hard surface of a microbial colony in a uniform thin layer. It is also possible to use other consumables such as swabs, wooden sticks, micropipette tips.
  • US 9,181,522 discloses a method and apparatus for aseptic transfer of biological material.
  • the apparatus consists of a double-walled chamber for accommodating single-sized tips with a ball in the head, for the transfer of biological material from one place to another aseptically.
  • Such a device has the first disadvantage of being of relatively complex design, with an integrated ultraviolet tip sterilization system, its double-walled architecture and its internal loading system and ejection tips. Such complexity undoubtedly affects the cost price and therefore sales.
  • the material used to make the ball has a disposable tip head made of hard material, of the metal or polypropylene type, which is not conducive to the sampling process but especially to the deposit of biological material, such as a bacterial colony, in particular on a mass spectrometry analysis plate of the MALDI-TOF type.
  • the document FR 2 668 495 describes a sterile sampling cone for bacteriological use.
  • Said cone has at its distal end a full protuberance and slightly frustoconical, offset from the longitudinal axis of the cone.
  • This protuberance allows the removal of biological material. It can present for this purpose, according to a particular embodiment, an optional handle.
  • the cone described in this document is nonetheless constituted by a material conventionally used for this kind of product. Namely a hard and smooth plastic material that is not suitable for the collection and deposition of biological material.
  • its particular shape does not make it easy to use for depositing biological material, such as a bacterial colony on a very small surface, such as a MALDI-TOF mass spectrometry analysis plate.
  • the Applicant has previously solved all or some of the disadvantages mentioned above by proposing a method for taking all or part of a sample of biological material grown in contact with an agar culture medium, which uses a probe provided with a termination end.
  • Said sampling method is essentially based on the cooling of the termination end of the probe, allowing all or part of the sample of biological material to be collected by contacting the termination end with the sample of material biological or by the application of a pressure exerted by the terminating end on the sample of biological material, then the release of all or part of the sample of biological material by heating the termination end of the probe . This process is described in the patent application WO 2012/004545.
  • the objectives of the present invention are therefore to respond to these shortcomings by providing a simple design tip, easy to produce, allowing when placed on a biological material removal device to accurately collect and deposit this biological material, in particular on a mass spectrometry analysis plate, MALDI-TOF type.
  • a tip adapted to be fitted on the body of a manual or automated sampling device of biological material of microbial origin comprising:
  • a distal end comprising means for collecting biological material of microbial origin
  • said tip being characterized in that all or part of the distal free end is made of a fibrous material having a porosity of at least 30%.
  • biological material of microbial origin is essentially biological material consisting of bacteria, yeasts or molds.
  • the tip according to the invention consists entirely of a fibrous material having a porosity of at least 30%.
  • the fibrous material has a porosity greater than 50%, preferably greater than 70%.
  • the fibrous material is taken from the group comprising: polyethylene, polyesters, polyethylene terephthalate (PET), PET / polyethylene copolymer, PET / PET copolymer, polyamide, cotton.
  • PET polyethylene terephthalate
  • PET / polyethylene copolymer PET / PET copolymer
  • polyamide cotton
  • the sampling tip has a substantially conical or frustoconical overall shape.
  • the sampling means is advantageously of cylindrical overall shape, frustoconical or spherical.
  • Another subject of the present invention relates to a biological material sampling device of microbial origin comprising:
  • a proximal portion serving at least partially as a gripping area of said device and a distal portion having a free end at the end of which is fixed said tip.
  • This device further comprises a nozzle ejection system.
  • the ejection system comprises a rod positioned inside said body and movable in translation, so as to come to press the tip and thus eject it.
  • said rod is movable in translation by means of a push button.
  • Another subject of the invention relates to a method for sampling biological material of microbial origin comprising the following steps:
  • Another subject of the present invention relates to a method for preparing an analysis plate for a microbiological analysis in MALDI-TOF type mass spectrometry from a sample of biological material comprising the following steps:
  • Microbiological analysis essentially means any analysis that makes it possible to identify a microorganism, such as a bacterium or yeast, but also makes it possible to demonstrate any marker of resistance to an antimicrobial, any characteristic of typing or expression by said microorganism of a virulence factor.
  • Another subject of the invention relates to a process for isolating biological material of microbial origin on an agar culture medium, comprising the following steps:
  • all of the methods described above further comprise an ultimate step of ejection of the sampling tip.
  • the sample of biological material can be obtained from a colony of biological material, according to the sampling method described above.
  • the sample of biological material can be obtained from a suspension of biological material. Such a suspension is obtained traditionally by resuspension of one or more colonies of biological material in a saline solution.
  • the sampling tip is soaked in a fraction of the suspension, to allow the absorption of the liquid by the sampling means, thanks to the absorbency of the fibrous material constituting said sampling means.
  • the biological material is then in contact with said sampling means.
  • concentration of the bacterial suspension is determined by those skilled in the art, according to the growth characteristics of the microorganism considered. This is part of this general knowledge.
  • the fraction of suspension used to charge the tip of biological material is also determined on purpose. It is advantageously from a few microliters to a few tens of microliters.
  • Figure 1A shows a perspective view of a sampling tip according to the present invention, according to a first embodiment.
  • Figure 1B shows a side view of the tip shown in Figure 1 A.
  • FIG. 1C represents a perspective view of a sampling tip according to a second embodiment
  • Figure 2A shows a side view of a biological material removal device according to a first embodiment.
  • Fig. 2B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 2A.
  • Fig. 2C shows a perspective view of the body of the biological material removal device as shown in Fig. 2A.
  • Fig. 2D shows a side view of a biological material removal device as shown in Fig. 2A, in the ejection configuration of the sampling tip.
  • Figure 3A shows a side view of a biological material removal device, according to a second embodiment.
  • Fig. 3B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 3A.
  • Figure 3C is an enlarged, exploded perspective view of the pusher ring fastening system on the shank of the pickup device shown in Figure 3A.
  • Fig. 4A shows a side view of a biological material removal device according to a third embodiment.
  • Fig. 4B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 4A.
  • Fig. 4C is an enlarged view of the ejection mechanism of the tip of the pickup device shown in Fig. 4A.
  • Figure 5A is a perspective view of a biological material removal device according to a fourth embodiment.
  • Fig. 5B is an exploded perspective view of the biological material removal device shown in Fig. 5A.
  • FIG 5C shows a perspective view of the biological material removal device, shown in Figure 5A, in the ejection configuration of the sampling tip.
  • the tip 10 according to a first embodiment is shown in a perspective view. It is shown in side view, in Figure 1B.
  • the tip 10 is of generally frustoconical shape. It is nevertheless quite conceivable that the tip 10 according to the invention is of different shape. It consists of three distinct parts. Firstly, a distal portion 12 of substantially frustoconical shape. This distal portion 12 constitutes the receiving part of a sampling means 14. For this purpose, the distal portion 12 has a free end 16, at the level of which is formed a blind cavity 18, in which the sampling means is positioned. 14.
  • the tip 10 also comprises a part proximal 20, also of frustoconical shape but shorter and wider than the distal portion 12.
  • the end 22 of the proximal portion 20 is free and has a blind cavity 24 inside which is housed the distal end of a sampling device.
  • the tip 10 may be molded into the materials commonly used to mold the pipette tips.
  • the material may for example be a polyolefin polymer. This type of material is generally cheap, sterilizable and adapted to use for the production of disposable product.
  • the material constituting the latter is important.
  • the sampling means has the double technical constraint of having to ensure a collection of biological material, such as a bacterial colony but also a release of said biological material when it is deposited on an analysis device such as a plate mass spectrometry analysis.
  • the inventors have thus discovered that the porosity of the material used to manufacture the sampling means 14 was an essential characteristic to make it possible to find the right compromise between the sampling performance and the release performance of biological material.
  • the biological material to be sampled is a bacterial colony
  • the manner in which the bacterial colony behaves when it is removed or when its deposit may vary from one bacterial species to another. It is well known that bacterial colonies are more or less consistent, more or less viscous, more or less fungal depending on the bacterial species considered. It is therefore essential to have a sampling means that is able to handle any type of bacterial colony, regardless of its properties.
  • a porosity of at least 30% is necessary to obtain the desired properties. Ideally a porosity of at least 70% gives the best results.
  • Porosity of the material means all the voids (pores) of a solid material that can be filled with fluids (liquid or gas). Porosity also means the physical quantity defined as the ratio between the volume of the voids and the total volume of the porous medium studied.
  • the porosity measurement of the material is carried out as follows: A sample of the dry fibrous material is taken.
  • the sample is weighed a first time.
  • the sample is immersed in water, the time necessary for its total impregnation.
  • the impregnated sample is weighed again.
  • the mass of water trapped in the material is deduced by calculating the difference between the mass of the impregnated material and that of the dry material.
  • the density of the water being close to 1, it is deduced the volume of trapped water and thus the volume of the voids in the material.
  • the volume of the impregnated sample is then measured.
  • Materials particularly suitable for producing the sampling means may be fibrous materials.
  • materials such as synthetic materials such as polyethylenes, polyesters and polyamides.
  • polyesters mention may be made of polyethylene terephthalate (PET).
  • PET polyethylene terephthalate
  • copolymers such as polyethylene / polyester polymers, such as a polyethylene / PET copolymer or a PET / PET copolymer.
  • the fibers may consist of a single-component or two-component material.
  • a bi-component fiber may for example consist of a PET core and a polyethylene sheath.
  • Natural fibrous materials can also be used. This is particularly the case with cotton fibers.
  • FIG. 1C A second embodiment of the tip is shown in Figure 1C.
  • This tip 11 consists of three parts: a proximal portion 13 substantially cylindrical or optionally frustoconical. Unlike the first embodiment, the free end 15 of the proximal portion 13 has no blind cavity and is clogged. Indeed, according to this embodiment, the distal end of the sampling device does not fit into the tip 11. It is instead the tip 11 which is inserted into the distal end of the device sampling, and more precisely its end 15. Of course, to do this, the sampling device must have a free distal end capable of receiving the tip 11. It must thus have a receiving cavity of the tip 11 whose dimensions must be slightly greater than the dimensions of the proximal portion 13.
  • the tip 11 also has a flange 17 which allows the ejection of said tip after use. It can also serve as a stop when the tip 11 is inserted into the sampling device.
  • the tip 11 has a distal portion 19 for receiving a sampling means 14, as in the case of the tip 10, according to the first embodiment.
  • the distal portion 19 has a free end 21, at the level of which is formed a blind cavity 23, in which is positioned the sampling means 14.
  • the proximal end 13 may have an orifice for generating a through hole between the distal and proximal ends. It is then possible to use a longer sampling means, positioned in the through hole and secured to the tip at the orifice of the proximal end, or even at both ends. Such a variant is simpler to design and therefore less expensive to produce.
  • sampling means 14 as shown in Figures 1A to 1C is cylindrical. It is possible, however, that the sampling means 14 has a different shape. Thus, the free end of the latter may for example be tapered to further improve the accuracy of sampling and deposition of biological material. The free end of the tip 14 may also have any other form suitable for the removal of biological material.
  • sampling tip which is made entirely of the porous material.
  • the sampling tip would also constitute the sampling means.
  • the sampling means, the sampling tip and the sampling device could be one. Indeed, it can be envisaged a disposable sampling device, which is secured to a porous sampling tip. Alternatively, the sampling device can be entirely made of porous material. To do this, the dimensions of the sampling means must allow easy handling and handling.
  • sampling tip conjugated to the sampling means or the sampling means alone, if it is one with the sampling tip can be adapted for use with an automated biological material sampling system.
  • an automated biological material sampling system Such a system could for example automatically carry out the collection of bacterial colonies on petri dishes and the preparation of analysis plates in mass spectrometry.
  • FIG. 2A shows a sampling device 30 according to a first embodiment.
  • This sampling device 30 comprises a distal portion 32, an intermediate portion 34 and a proximal portion 36.
  • the distal portion 32 substantially frustoconical, has the function of carrying the sampling tip 10 according to the invention.
  • the intermediate portion 34 also cylindrical, has the function of allowing the gripping device 30 to be gripped by its user.
  • the proximal portion 36 has a general cup shape, the inner diameter of which is slightly greater than the outer diameter of the intermediate portion 34, so that the proximal portion may partially overlap the proximal end of the intermediate portion.
  • FIG. 2B shows the sampling device 30 in an exploded view so that each constituent element of this device is shown separately. It is thus found that the distal 32 and intermediate 34 parts are in fact one and the same piece 38 constituting the body of the sampling device.
  • this substantially cylindrical body 38 has three longitudinal and peripheral recesses 382 and a central recess 384.
  • the recesses 382 are formed so as to each receive a blade 401 of the rod 40, as represented in Figure 2B.
  • the recess 384 it is arranged to receive a helical spring 42, as shown in Figure 2B.
  • the rod 40 is therefore mainly composed of three blades 401 whose base is secured to a stop ring 402.
  • the rod 40 is positioned inside the body of the device 38 by introducing the free ends of the blades 401 into the recesses 382.
  • the lower end of the coil spring 42 is housed in the recess 384, while its upper end is placed in contact with the inner face of the proximal portion 36 of the sampling device, which caps the body 38.
  • This proximal part acts as a pusher, during the ejection of the sampling tip 10, once the latter used.
  • the blades 401 have a length greater than the intermediate portion 34 so that when the rod 40 is positioned inside the body 38, the upper free end of the blades 401 emerges from the recesses 382. These free ends are secured to the pushbutton 36, once the spring in place. This bonding can be mechanical. Thus, it is conceivable to have pins radially projecting near the free end of the blades 401 which are housed in recesses formed in the inner wall of the pusher 36. Alternatively, it is possible to secure the free end blades 401 with the inner face of the pusher 36 by chemical bonding.
  • the spring 42 tends to resume a rest position in which it no longer presses the rod 40. The latter then resumes its initial position by inverse translation, releasing the distal portion 32 which is then available to receive another sampling tip.
  • a tip 10 is positioned on the free end 32 of the sampling device. This step is generally performed by coming positioned the device in a vertical position plumb with a sterile tip, usually positioned on a suitable rack. The end of the distal portion 32 of the sampling device is then fitted into the cavity 24 of the proximal portion 20 of the tip of 10, until it abuts the bottom of the cavity 24.
  • the sampling device is positioned in such a way that the means for sampling the tip come into contact with the colony of microorganisms. All or part of the colony is then removed.
  • the sampling device To carry out the deposition of all or part of the biological material taken from a surface such as the surface of a MALDI-TOF mass spectrometry analysis plate, the sampling device is approached from said surface, so that the end of the sampling means carrying the biological material comes into contact with the surface. Slight circular movements are then made with the sampling device to deposit a layer of biological material on said surface.
  • FIGS. 3A to 3C A second embodiment of the sampling device is shown in FIGS. 3A to 3C.
  • This sampling device 50 consists of a body 52 substantially cylindrical and hollow. This body 52 has in its distal portion a free end 521 of substantially frustoconical shape, intended to carry a sampling tip 10. This free end 521 is secured to the body 52 by three fins (not shown) defining three interstitial spaces.
  • the body 52 also has a hooking system or clip 522 for hooking the sampling device to the pocket of a garment for example, as can be done with a pen.
  • a push button 54 that leaves via the proximal end of the body 52.
  • the push button 54 is integral with a rod 56, taking place inside the body 52.
  • This rod 56 of substantially cylindrical shape terminates at its distal end by three fixing lugs 561, shown in close-up on the enlarged view 3C.
  • the central space between said fixing lugs 561 is intended to receive a helical spring 58, as shown in FIG. 3B.
  • the rod 56 is inserted into the body 52 by the proximal end of the latter, the coil spring 58 being inserted beforehand.
  • Said helical spring 58 is positioned in abutment against the fins and the upper part of the distal end 521.
  • the rod 56 once inserted, is positioned astride the spring so that the 561 fastening tabs are crossing the interstitial spaces defined between the fins and emerge at the base of the body 52 around the free end 521.
  • a ring 60 is inserted around the free end 521. This ring 60 has three recesses 601 for receiving the end 561.
  • the fixing lugs have at their end radial lugs 5611, which once the lugs positioned inside the ring 60, will come to lock in the recesses 601 and thus secure the ring 60 and the rod 56.
  • this mechanical fastening system it is quite possible to replace this mechanical fastening system with a system comprising legs without pins that would be secured to the ring by gluing.
  • the ring 60 bears against the body 52 at the level of the upper part of the free end 521, because of the action of the helical spring 58 which exerts on the rod 56 a force repulsion towards the upper part of the body 52.
  • FIGS. 4A-4C A third embodiment of a sampling device is shown in FIGS. 4A-4C.
  • This sampling device 70 consists of a body 72 substantially cylindrical and hollow.
  • This body 72 has in its distal portion a free end 721 of substantially frustoconical shape, intended to carry a sampling tip 10.
  • This free end 721 is secured to the body 72 by three fins (not shown) defining three interstitial spaces.
  • This rod 76 also comprises a rod 76 which is inserted into the body 72 by its upper end.
  • This rod 76 consists of a one-piece proximal portion 761 of substantially rectangular cross section and a distal portion consisting of three attachment tabs 762. At the interface with the distal portion, the proximal portion 761 has on these two opposite faces an inclined shoulder 7611, intended to cooperate with the push button 74.
  • the rod 76 is inserted into the body 72 of the sampling device 70, by the proximal end thereof. Once the rod 76 inserted, the fixing lugs 762 pass through the interstitial spaces defined between the holding fins of the free end 721 and emerge at the base of the body 72 around said free end 721.
  • a ring 78 is inserted around of the free end 721.
  • This ring 78 is similar to the ring 60 described above and has three recesses for receiving the end of the fixing lugs 762, also provided with radial lugs 7621 and intended to cooperate with the recesses of the rings 78 for securing the rod 76 to the ring 78, as shown in Figure 4C.
  • the push button 74 has an inverted U-shaped cross-section, to allow it to be positioned astride the proximal portion 761 of the stem 76, particularly at the inclined shoulders 7611.
  • the push-button 74 is shown in FIG. each of these two lateral faces three lugs 741 intended to prevent it from emerging, once positioned in the housing 722.
  • the push button 74 bears at its distal portion against the inclined shoulders 7611, preventing the rod 76 from emerging.
  • the interaction between the push button and the inclined shoulders 7611 allows the rod 76 to move between a rest position and an ejection position of the sampling tip 10.
  • the sampling device 80 shown in Figures 5A to 5C consists of a body 82 substantially cylindrical and hollow.
  • This body 82 is integral and has in its distal portion a free end 821 of substantially frustoconical shape. This end 821 is pierced with a circular orifice 822. This orifice is intended to receive the proximal portion 13 of a sampling tip 11, as described in connection with Figure 1C.
  • the sampling tip 11 is pressed into the body of the sampling device 80 until the flange 17 of the tip 11 bears against the end 821 of the body 82.
  • the body 82 also comprises a push button 84 positioned laterally on the body 82, which is inserted into a housing 823 formed in the side wall of the body 82.
  • This rod 86 which is inserted into the body 82 by its upper end.
  • This rod 86 consists of a one-piece proximal portion 861 of substantially rectangular cross-section, of a one-piece distal portion 862 of substantially round cross section ending in a stud 863.
  • proximal portion 861 and the distal portion 862 are formed with inclined shoulders 8611 on either side of the proximal portion 861.
  • the proximal portion 13 which enters the lumen of the body 82 through the orifice 822 pushes the rod 86 in the opposite direction, causing the pushbutton 84 to rise vertical translation thanks to the inclined shoulders 8611 which cooperate with the push button 84.
  • sampling device position at the distal end of the body but on its outer part, a mechanical system intended to bear against the tip to allow its ejection. It may be for example a sleeve movable in translation on the body of the sampling device which is in contact with the sampling tip and which allows to eject the latter when it is moved by the user.
  • sampling device For example, it is possible to prepare a suspension of biological material in an ad hoc solution, such as a saline solution. To do this, it may be envisaged to release the sampling tip carrying the biological material, directly into a tube containing a quantity of resuspension solution. Vortex agitation of the tube containing the tip will then release the biological material retained on the fibrous material.
  • the sampling device can also be used to carry out isolations on agar culture media. These isolations can be made directly from colonies taken with the sampling device according to the invention and then directly reseeded on an agar culture medium. They can also be made from suspensions of biological material, made using the sampling device, as described supra.
  • the sampling means has a spherical end and is of sufficient diameter at its end, to prevent its application against the agar culture medium does not to damage the latter.
  • a suitable diameter is for example between 2 and 7 millimeters (mm) and preferably between 2 and 4 mm.
  • Isolation can be achieved from a bacterial suspension whose concentration is, for example, 10 7 CFU (Colony Forming Unit) / mL (milliliter). With such a concentration, a sample of 5 micro liters ( ⁇ ) of suspension using the sampling means is sufficient to allow isolation of good quality, on the agar culture medium. The suspension 5 are sucked by the material constituting the sampling means. Said removal means loaded in suspension is then able to allow the gradual release of this suspension when it is applied to the agar culture medium. This progressive release is allowed thanks to the absorbency of the material, constituting the means of sampling. The consequence is a better quality of isolation.
  • Isolation can be carried out according to traditional techniques, such as the so-called “dial” technique or the so-called “spiral” technique.
  • Example 1 Use of a sampling device with sampling tips for preparation of a plate for MALDI-TOF analysis.
  • the sampling device used in this example is the device shown in FIGS. 2A to 2D and described above.
  • the sampling tip is made of plastic material, such as those conventionally used to make the disposable pipette tips. It comprises a cylindrical sampling means with a diameter of 2 mm and a length of 6 mm. It is polyethylene terephthalate (PET) / PET copolymer fibers, material marketed by Porex under the reference PSU-832.
  • PET polyethylene terephthalate
  • the body of the sampling device is made of injected polypropylene. It has a length of 120 mm and a section of hexagonal shape with 8.2 mm between the opposite faces of the hexagon, which allows an easy grip as with a pencil, without risk of musculoskeletal disorders.
  • the sampling device is used to collect colonies of different bacterial species, which grew on culture medium Columbia + 5% sheep blood (COS), marketed by the Applicant under the reference 43041.
  • COS Columbia + 5% sheep blood
  • the colonies collected are deposited on a 48-position disposable MALDI-TOF analysis plate, marketed by the Applicant under the reference 410893.
  • a sampling tip is positioned on a sampling device.
  • a bacterial colony is taken on a culture medium COS type, using the sampling device by contacting the sampling means of fibrous material carried on the sampling tip, with the colony.
  • the bacterial sample taken is deposited on the MALDI-TOF analysis plate, in one of the 48 positions provided for this purpose, by putting the collection means carrying the bacterial sample in contact with the MALDI-TOF plate. , exerting pressure and spreading the sample.
  • the pressure exerted on the fibrous material of the sampling means makes it possible to retain the excess sample on said fibrous material. It is possible to make successive deposits on different positions of the analysis plate in the case where it is desired to replicate the analysis. These other deposits can be done with the same tip.
  • the sampling tip is ejected into a bin by exerting pressure on the push button, as described above.
  • Steps 1 to 5 are repeated for each colony that is to be analyzed. 7.
  • the deposit of a strain of E. coli ATCC 8739, used as calibrator and positive control, is also performed according to steps 1 to 5.
  • the analysis plate is stored for the time necessary to dry the matrix.
  • the plate is introduced into the MALDI-TOF VITEK® MS mass spectrometer, marketed by the applicant, the acquisition of the mass spectra is carried out.
  • the identification of microorganisms is obtained by spectral analysis using the expert system and the VITEK® MS database.
  • the method of the invention thus makes it possible to collect and deposit bacterial species forming colonies with an atypical consistency.
  • the method of the invention thus makes it possible to collect and deposit bacterial species forming colonies with an atypical consistency.
  • MALDI-TOF mass spectrometry for powdery and encrusting species such as B. lichenformis or N. farcinica, gooey species such as K. pneumoniae and species diffusing on agar as P. mirabilis.
  • the different species were therefore analyzed in MALDI-TOF mass spectrometry in order to carry out their identification.
  • the analysis protocol is that described in Example 1, including the sampling device.
  • the material PSU892 is a material obtained from two-component fibers, consisting of a polyethylene terephthalate envelope and a polyester core. Such a material is marketed by the company POREX®. It is furthermore described in the patent application WO-A-03/080904.
  • XA-20521-PS is a material made from polyethylene. Such a material is marketed by POREX® under the trade name NIBS.
  • a colony is taken with the sampling device according to the invention and four deposits are made at four contiguous positions of the MALDI-TOF analysis plate.

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Abstract

The present invention relates to an end fitting capable of being fitted to the body of a manual or automated device for sampling biological material of microbial origin, comprising: a) a distal end comprising a means for sampling biological material of microbial origin, b) a proximal free end intended to come into contact with the body of said sampling device and to enable the attachment of said end fitting to said body, said end fitting being characterized in that all or some of the free distal end consists of a fibrous material having a porosity at least equal to 30%.

Description

EMBOUT ET DISPOSITIF POUR LE PRELEVEMENT DE COLONIES DE MICROORGANISMES ET PROCEDE DE PRELEVEMENT LES METTANT EN TIP AND DEVICE FOR COLLECTING COLUMNS FROM MICROORGANISMS AND METHOD OF SAMPLING THEM
OEUVRE ARTWORK
Le domaine technique de la présente invention est celui des dispositifs destinés à venir prélever des colonies de microorganismes sur milieu de culture gélosé aux fins d'analyse. Plus particulièrement, la présente invention concerne un embout de prélèvement présentant dans sa partie distale une extrémité de prélèvement en matériaux polymères. L'invention concerne également un dispositif de prélèvement comportant un tel embout et un procédé de prélèvement les mettant en œuvre. The technical field of the present invention is that of devices intended to pick up colonies of microorganisms on agar culture medium for analysis. More particularly, the present invention relates to a sampling tip having in its distal portion a sampling end of polymeric materials. The invention also relates to a sampling device comprising such a tip and a sampling method implementing them.
Actuellement, le prélèvement d'une colonie de microorganismes (bactéries, moisissures, levures ou similaires) cultivés sur milieu de culture gélosé en boîte de Pétri, ou sur tout autre support, est réalisé à l'aide d'outils stérilisables ou d'outils à usage unique tels qu'œses (ou anses), bâtonnets, tubes ou encore cônes. Currently, the collection of a colony of microorganisms (bacteria, molds, yeasts or the like) grown on agar culture medium in Petri dishes, or on any other support, is carried out using sterilizable tools or tools. for single use such as eoes (or handles), sticks, tubes or cones.
Cependant, ces outils ne permettent pas de prélever de façon sûre et efficace tous les types de microorganismes car ces derniers peuvent revêtir des formes, tailles, consistances, structures ou aspects très divers.  However, these tools do not allow to collect safely and effectively all types of microorganisms because they can take very different shapes, sizes, consistencies, structures or aspects.
D'autre part, ces consommables ne permettent pas facilement un dépôt optimal de la matière biologique prélevée sur des supports d'analyse tels que des plaques destinées à une analyse en spectrométrie de masse de type MALDI-TOF. Par ailleurs, il est également très important de pouvoir prélever une colonie bactérienne ou une fraction de cette colonie, sans prélever le milieu de culture situé sous la colonie. Ceci peut en effet fausser les résultats d'analyses ultérieures.  On the other hand, these consumables do not easily allow optimal deposition of the biological material taken from analysis media such as plates for a MALDI-TOF mass spectrometry analysis. Moreover, it is also very important to be able to take a bacterial colony or a fraction of this colony, without taking the culture medium located under the colony. This can indeed distort the results of subsequent analyzes.
La qualité des résultats d'analyse peut dépendre également de la concentration du dépôt en matière biologique, formé à partir de l'échantillon prélevé, ainsi que de son homogénéité sur le support sur lequel il est déposé. C'est particulièrement le cas pour les analyses de microorganismes en MALDI-TOF, dans lesquelles l'échantillon doit former une couche fine et uniforme pour permettre une analyse optimale.  The quality of the analysis results may also depend on the concentration of the biological deposit, formed from the sample taken, as well as its homogeneity on the support on which it is deposited. This is particularly the case for MALDI-TOF microorganism analyzes, in which the sample must form a thin and uniform layer to allow optimal analysis.
De manière traditionnelle, il est fait usage d'œses jetables ou stérilisables à la flamme, pour prélever une colonie de microorganismes sur boite de Pétri et déposer le matériel biologique sur la plaque de MALDI-TOF. Cette opération n'est pas facile et demande une certaine dextérité. La préhension d'un tel outil entre le pouce et l'index peut occasionner des troubles musculo-squelettiques. L'œse est généralement tenue loin de son extrémité pour que la main de l'opérateur ne contamine pas l'échantillon, mais cette position de la main rend plus délicate la précision du mouvement au bout de l'œse, notamment lorsqu'il est nécessaire de réaliser un dépôt fin et homogène sur une petite surface de l'ordre de quelques mm2. Enfin l'œse, ayant été dessinée pour prélever de façon calibrée une quantité donnée de microorganismes (généralement entre Ι μΙ^ et ΙΟμί), comporte à son extrémité une boucle de métal ou de plastique qui a un diamètre généralement supérieur à 1mm. Cette pointe peut être plus grosse que la surface sur laquelle doit être réalisée le dépôt. De plus, la nature rigide de l'œse (métallique ou plastique) n'est pas particulièrement adaptée à l'étalement sur une surface dure d'une colonie microbienne en une fine couche uniforme. II est également possible d'utiliser d'autres consommables tels que des écouvillons, des bâtonnets en bois, des embouts de micropipette. In the traditional way, disposable or flame-sterilizable samples are used to collect a colony of microorganisms on a petri dish and deposit the biological material on the MALDI-TOF plate. This operation is not easy and requires a certain dexterity. Gripping such a tool between thumb and forefinger can cause musculoskeletal disorders. The eye is usually held away from its end so that the hand of the operator does not contaminate the specimen, but this position of the hand makes the precision of the movement at the end of the eye more delicate, especially when it is necessary to achieve a thin and homogeneous deposit on a small surface of the order of a few mm 2 . Finally, the groove, having been designed to calibrate a given quantity of microorganisms (generally between Ι μΙ ^ and ΙΟμί), has at its end a metal or plastic loop which has a diameter generally greater than 1mm. This tip may be larger than the surface on which the deposit is to be made. In addition, the rigid nature of the eye (metal or plastic) is not particularly suitable for spreading on a hard surface of a microbial colony in a uniform thin layer. It is also possible to use other consumables such as swabs, wooden sticks, micropipette tips.
Ainsi, le document US 9,181 ,522 décrit une méthode et un appareil pour le transfert aseptique de matière biologique. L'appareil se compose d'une chambre double-parois pour loger des embouts de taille unique présentant une bille en tête, destinée au transfert du matériel biologique d'un endroit à un autre, de façon aseptique. Un tel dispositif présente comme premier inconvénient d'être de conception relativement complexe, avec un système de stérilisation des embouts par UV intégré, son architecture double-parois et son système de chargement interne et d'éjection des embouts. Un telle complexité se répercute indubitablement sur le prix de revient et donc de vente. Par ailleurs, le matériau utilisé pour réaliser la bille présente en tête d'embout jetable est en matériau dur, du type métal ou polypropylène, qui n'est pas propice au processus de prélèvement mais surtout de dépôt de matériel biologique, telle qu'une colonie bactérienne, notamment sur une plaque d'analyse en spectrométrie de masse, du type MALDI-TOF. Thus, US 9,181,522 discloses a method and apparatus for aseptic transfer of biological material. The apparatus consists of a double-walled chamber for accommodating single-sized tips with a ball in the head, for the transfer of biological material from one place to another aseptically. Such a device has the first disadvantage of being of relatively complex design, with an integrated ultraviolet tip sterilization system, its double-walled architecture and its internal loading system and ejection tips. Such complexity undoubtedly affects the cost price and therefore sales. Moreover, the material used to make the ball has a disposable tip head made of hard material, of the metal or polypropylene type, which is not conducive to the sampling process but especially to the deposit of biological material, such as a bacterial colony, in particular on a mass spectrometry analysis plate of the MALDI-TOF type.
Le document FR 2 668 495 décrit un cône de prélèvement stérile à usage bactériologique. Ledit cône présente à son extrémité distale une protubérance pleine et légèrement tronconique, désaxée par rapport à l'axe longitudinal du cône. Cette protubérance permet le prélèvement de matériel biologique. Elle peut présenter à cette fin, selon un mode particulier de réalisation, une anse optionnelle. Même avec une architecture particulière, le cône décrit dans ce document n'en demeure pas moins constitué par un matériau classiquement utilisé pour ce genre de produit. A savoir un matériau plastique dur et lisse qui n'est pas adapté au prélèvement et au dépôt de matière biologique. Par ailleurs, sa forme particulière ne rend pas son utilisation aisée pour le dépôt de matière biologique, telle qu'un colonie bactérienne sur une surface très réduite, telle qu'une plaque d'analyse de spectrométrie de masse MALDI-TOF. The document FR 2 668 495 describes a sterile sampling cone for bacteriological use. Said cone has at its distal end a full protuberance and slightly frustoconical, offset from the longitudinal axis of the cone. This protuberance allows the removal of biological material. It can present for this purpose, according to a particular embodiment, an optional handle. Even with a particular architecture, the cone described in this document is nonetheless constituted by a material conventionally used for this kind of product. Namely a hard and smooth plastic material that is not suitable for the collection and deposition of biological material. Moreover, its particular shape does not make it easy to use for depositing biological material, such as a bacterial colony on a very small surface, such as a MALDI-TOF mass spectrometry analysis plate.
La demanderesse a précédemment résolue tout ou partie des inconvénients mentionnés ci-dessus en proposant un procédé de prélèvement de tout ou partie d'un échantillon de matière biologique cultivé au contact d'un milieu de culture gélosé, qui utilise une sonde pourvue d'une extrémité de terminaison. Ledit procédé de prélèvement est essentiellement basé sur le refroidissement de l'extrémité de terminaison de la sonde, permettant le collage de tout ou partie de l'échantillon de matière biologique à prélever par contact de l'extrémité de terminaison sur l'échantillon de matière biologique ou par l'application d'une pression exercée par l'extrémité de terminaison sur l'échantillon de matière biologique, puis le relargage de tout ou partie de l'échantillon de matière biologique par réchauffement de l'extrémité de terminaison de la sonde. Ce procédé est décrit dans la demande de brevet WO 2012/004545.  The Applicant has previously solved all or some of the disadvantages mentioned above by proposing a method for taking all or part of a sample of biological material grown in contact with an agar culture medium, which uses a probe provided with a termination end. Said sampling method is essentially based on the cooling of the termination end of the probe, allowing all or part of the sample of biological material to be collected by contacting the termination end with the sample of material biological or by the application of a pressure exerted by the terminating end on the sample of biological material, then the release of all or part of the sample of biological material by heating the termination end of the probe . This process is described in the patent application WO 2012/004545.
Ce procédé présente comme principal inconvénient de nécessiter un appareillage de refroidissement de la sonde relativement encombrant, qui consomme de l'énergie et représente un coût financier important. II ressort de l'analyse de l'état de la technique, qu'il n'existe pas à ce jour de système de prélèvement de matériel biologique, facile à utiliser, simple de conception et mettant en œuvre un embout de prélèvement jetable ayant des propriétés physiques adaptées pour optimiser non seulement le prélèvement mais également le dépôt de matière biologique telle qu'une colonie bactérienne.  This method has the main disadvantage of requiring a relatively bulky probe cooling apparatus, which consumes energy and represents a significant financial cost. The analysis of the state of the art shows that, to date, there is no easy-to-use, easy-to-use biological material sampling system that uses a disposable sampling tip with physical properties adapted to optimize not only the sampling but also the deposition of biological material such as a bacterial colony.
Les objectifs de la présente invention sont donc de répondre à ces manques en proposant un embout simple de conception, facile à produire, permettant lorsqu'il est placé sur un dispositif de prélèvement de matière biologique de prélever et déposer avec précision cette matière biologique, notamment sur une plaque d'analyse de spectrométrie de masse, de type MALDI-TOF. Ces objectifs parmi d'autres sont atteints par la présente invention qui concerne en premier lieu, un embout apte à être emmanché sur le corps d'un dispositif de prélèvement, manuel ou automatisé, de matière biologique d'origine microbienne, comprenant : The objectives of the present invention are therefore to respond to these shortcomings by providing a simple design tip, easy to produce, allowing when placed on a biological material removal device to accurately collect and deposit this biological material, in particular on a mass spectrometry analysis plate, MALDI-TOF type. These objectives, among others, are achieved by the present invention, which concerns first and foremost a tip adapted to be fitted on the body of a manual or automated sampling device of biological material of microbial origin, comprising:
a) une extrémité distale comprenant un moyen de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne,  a) a distal end comprising means for collecting biological material of microbial origin,
b) une extrémité libre proximale destinée à entrer en contact avec le corps dudit dispositif de prélèvement et permettre la fixation dudit embout sur ledit corps,  b) a proximal free end intended to come into contact with the body of said sampling device and allow said attachment to be fixed on said body,
ledit embout étant caractérisé en ce que toute ou partie de l'extrémité libre distale est constitué d'un matériau fibreux présentant une porosité au moins égale à 30 %.  said tip being characterized in that all or part of the distal free end is made of a fibrous material having a porosity of at least 30%.
Par matière biologique d'origine microbienne, on entend essentiellement de la matière biologique constituée par des bactéries, des levures ou des moisissures.  By biological material of microbial origin, is essentially biological material consisting of bacteria, yeasts or molds.
Selon un mode avantageux, l'embout selon l'invention est constitué entièrement d'un matériau fibreux présentant une porosité au moins égale à 30 %.  According to an advantageous embodiment, the tip according to the invention consists entirely of a fibrous material having a porosity of at least 30%.
De façon préférentielle, le matériau fibreux présente une porosité supérieure à 50%, préférentiellement supérieure à 70%.  Preferably, the fibrous material has a porosity greater than 50%, preferably greater than 70%.
Avantageusement, le matériau fibreux est pris dans le groupe comprenant : polyéthylène, polyesters, polytéréphtalate d'éthylène (PET), copolymère PET/polyéthylène, copolymère PET/PET, polyamide, coton.  Advantageously, the fibrous material is taken from the group comprising: polyethylene, polyesters, polyethylene terephthalate (PET), PET / polyethylene copolymer, PET / PET copolymer, polyamide, cotton.
L'embout de prélèvement présente une forme globale sensiblement conique ou tronconique. Le moyen de prélèvement est quant à lui avantageusement de forme globale cylindrique, tronconique ou sphérique.  The sampling tip has a substantially conical or frustoconical overall shape. The sampling means is advantageously of cylindrical overall shape, frustoconical or spherical.
Un autre objet de la présente invention concerne un dispositif de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne comprenant : Another subject of the present invention relates to a biological material sampling device of microbial origin comprising:
un embout selon l'invention  a tip according to the invention
un corps comportant au moins :  a body with at least:
une partie proximale servant au moins partiellement de zone de préhension dudit dispositif et une partie distale présentant une extrémité libre au bout de laquelle est fixé ledit embout. a proximal portion serving at least partially as a gripping area of said device and a distal portion having a free end at the end of which is fixed said tip.
Ce dispositif comporte en outre un système d'éjection de l'embout. Avantageusement, le système d'éjection comporte une tige positionnée à l'intérieur dudit corps et mobile en translation, de manière à venir faire pression sur l'embout et ainsi l'éjecter. This device further comprises a nozzle ejection system. Advantageously, the ejection system comprises a rod positioned inside said body and movable in translation, so as to come to press the tip and thus eject it.
Selon un mode de réalisation particulier, ladite tige est mobile en translation au moyen d'un bouton poussoir.  According to a particular embodiment, said rod is movable in translation by means of a push button.
Un autre objet de l'invention concerne un procédé de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne comprenant les étapes suivantes : Another subject of the invention relates to a method for sampling biological material of microbial origin comprising the following steps:
a) Positionner un embout selon l'invention sur la partie distale du dispositif de prélèvement,  a) Position a tip according to the invention on the distal portion of the sampling device,
b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité d'une colonie de matière biologique d'origine microbienne présente sur un milieu de culture afin de mettre en contact le moyen de prélèvement dudit embout avec la matière biologique,  b) Position the sampling device near a colony of biological material of microbial origin present on a culture medium in order to bring the collection means of said tip into contact with the biological material,
c) Prélever tout ou partie de la matière biologique à l'aide du dispositif de prélèvement, de sorte que la matière biologique prélevée soit solidaire du moyen de prélèvement.  c) Take all or part of the biological material using the sampling device, so that the biological material removed is secured to the sampling means.
Un autre objet de la présente invention concerne un procédé de préparation d'une plaque d'analyse pour une analyse microbiologique en spectrométrie de masse de type MALDI-TOF à partir d'une échantillon de matière biologique comprenant les étapes suivantes : Another subject of the present invention relates to a method for preparing an analysis plate for a microbiological analysis in MALDI-TOF type mass spectrometry from a sample of biological material comprising the following steps:
a) Positionner un embout sur la partie distale du dispositif de prélèvement, selon l'invention  a) Position a tip on the distal portion of the sampling device, according to the invention
b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité d'une colonie de matière biologique d'origine microbienne présente sur un milieu de culture afin de mettre en contact le moyen de prélèvement de l'embout avec la matière biologique, c) Prélever tout ou partie de la matière biologique à l'aide du dispositif de prélèvement, de sorte que la matière biologique prélevée soit solidaire du moyen de prélèvement, b) Position the sampling device near a colony of biological material of microbial origin present on a culture medium in order to bring the means for sampling the tip into contact with the biological material, c) taking all or part of the biological material using the sampling device, so that the biological material removed is secured to the sampling means,
d) Réaliser un dépôt uniforme de matière biologique prélevée sur au moins une zone d'analyse d'une plaque d'analyse de spectrométrie de masse de type MALDI-TOF, par mise en contact du moyen de prélèvement avec la surface de ladite au moins une zone d'analyse.  d) producing a uniform deposition of biological material taken from at least one analysis zone of a MALDI-TOF mass spectrometry analysis plate, by bringing the sampling means into contact with the surface of said at least one an area of analysis.
Par analyse microbiologique, on entend essentiellement toute analyse permettant d'identifier un microorganisme, tel qu'une bactérie ou une levure, mais permettant également de mettre en évidence tout marqueur de résistance à un antimicrobien, toute caractéristique de typage ou d'expression par ledit microorganisme d'un facteur de virulence. Un autre objet de l'invention concerne un procédé d'isolement de matière biologique d'origine microbienne sur un milieu de culture gélosé, comprenant les étapes suivantes : Microbiological analysis essentially means any analysis that makes it possible to identify a microorganism, such as a bacterium or yeast, but also makes it possible to demonstrate any marker of resistance to an antimicrobial, any characteristic of typing or expression by said microorganism of a virulence factor. Another subject of the invention relates to a process for isolating biological material of microbial origin on an agar culture medium, comprising the following steps:
a) obtenir un échantillon de matière biologique en contact avec le moyen de prélèvement de l'embout d'un dispositif de prélèvement selon l'invention,  a) obtaining a sample of biological material in contact with the sampling means of the tip of a sampling device according to the invention,
b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité de la surface du milieu de culture gélosé, de sorte que le moyen de prélèvement soit en contact avec ladite surface, c) Déplacer le dispositif de prélèvement de sorte que le moyen de prélèvement se déplace sur la surface du milieu de culture, tout en restant en contact avec celle-ci, libérant ainsi tout ou partie de l'échantillon de matière biologique en contact avec ledit moyen de prélèvement sur la surface du milieu de culture.  b) Position the sampling device near the surface of the agar culture medium, so that the sampling means is in contact with said surface, c) move the sampling device so that the sampling means moves on the surface of the culture medium, while remaining in contact therewith, thus releasing all or part of the sample of biological material in contact with said sampling means on the surface of the culture medium.
Selon un mode de réalisation particulier, l'ensemble des procédés décrits supra, comportent en outre une étape ultime d'éjection de l'embout de prélèvement. L'échantillon de matière biologique peut être obtenu à partir d'une colonie de matière biologique, selon le procédé de prélèvement décrit supra. Alternativement, l'échantillon de matière biologique peut être obtenu à partir d'une suspension de matière biologique. Une telle suspension est obtenue traditionnellement par remise en suspension d'une ou plusieurs colonies de matière biologique dans une solution saline. Selon cette alternative, l'embout de prélèvement est trempé dans une fraction de la suspension, afin de permettre l'absorption du liquide par le moyen de prélèvement, grâce au pouvoir absorbant du matériau fibreux, constituant ledit moyen de prélèvement. La matière biologique se retrouve alors au contact dudit moyen de prélèvement. La concentration de la suspension bactérienne est déterminée par l'homme du métier, selon les caractéristiques de croissance du microorganisme considéré. Ceci fait partie de ces connaissance générales. De même, la fraction de suspension servant à charger l'embout en matière biologique est également déterminée à dessein. Il est avantageusement de quelques microlitres à quelques dizaines de microlitres. According to a particular embodiment, all of the methods described above, further comprise an ultimate step of ejection of the sampling tip. The sample of biological material can be obtained from a colony of biological material, according to the sampling method described above. Alternatively, the sample of biological material can be obtained from a suspension of biological material. Such a suspension is obtained traditionally by resuspension of one or more colonies of biological material in a saline solution. According to this alternative, the sampling tip is soaked in a fraction of the suspension, to allow the absorption of the liquid by the sampling means, thanks to the absorbency of the fibrous material constituting said sampling means. The biological material is then in contact with said sampling means. The concentration of the bacterial suspension is determined by those skilled in the art, according to the growth characteristics of the microorganism considered. This is part of this general knowledge. Similarly, the fraction of suspension used to charge the tip of biological material is also determined on purpose. It is advantageously from a few microliters to a few tens of microliters.
Les buts et avantages de la présente invention seront mieux compris à la lumière de la description détaillée et nullement limitative de l'invention, qui suit, faite en référence au dessin dans lequel :  The objects and advantages of the present invention will be better understood in the light of the detailed and in no way limiting description of the invention, which follows, with reference to the drawing in which:
La figure 1 A représente une vue en perspective d'un embout de prélèvement selon la présente invention, selon un premier mode de réalisation.  Figure 1A shows a perspective view of a sampling tip according to the present invention, according to a first embodiment.
La figure 1B représente une vue de côté de l'embout représenté sur la figure 1 A. Figure 1B shows a side view of the tip shown in Figure 1 A.
La figure 1C représente une vue en perspective d'un embout de prélèvement selon un second mode de réalisation FIG. 1C represents a perspective view of a sampling tip according to a second embodiment
La figure 2A représente une vue de côté d'un dispositif de prélèvement de matière biologique, selon un premier mode de réalisation.  Figure 2A shows a side view of a biological material removal device according to a first embodiment.
La figure 2B représente une vue éclatée de côté du dispositif de prélèvement de matière biologique, représenté sur la figure 2A.  Fig. 2B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 2A.
La figure 2C représente une vue en perspective du corps du dispositif de prélèvement de matière biologique tel que représenté sur le figure 2A.  Fig. 2C shows a perspective view of the body of the biological material removal device as shown in Fig. 2A.
La figure 2D représente une vue de côté d'un dispositif de prélèvement de matière biologique tel que représenté sur le figure 2A, dans la configuration d'éjection de l'embout de prélèvement.  Fig. 2D shows a side view of a biological material removal device as shown in Fig. 2A, in the ejection configuration of the sampling tip.
La figure 3A représente une vue de côté d'un dispositif de prélèvement de matière biologique, selon un deuxième mode de réalisation. La figure 3B représente une vue éclatée de côté du dispositif de prélèvement de matière biologique, représenté sur la figure 3A. Figure 3A shows a side view of a biological material removal device, according to a second embodiment. Fig. 3B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 3A.
La figure 3C représente une vue en perspective, agrandie et éclatée du système de fixation de Γ anneau-poussoir sur la tige du dispositif de prélèvement représenté sur la figure 3A.  Figure 3C is an enlarged, exploded perspective view of the pusher ring fastening system on the shank of the pickup device shown in Figure 3A.
La figure 4A représente une vue de côté d'un dispositif de prélèvement de matière biologique, selon un troisième mode de réalisation.  Fig. 4A shows a side view of a biological material removal device according to a third embodiment.
La figure 4B représente une vue éclatée de côté du dispositif de prélèvement de matière biologique, représenté sur la figure 4A.  Fig. 4B shows an exploded side view of the biological material removal device, shown in Fig. 4A.
La figure 4C représente une vue agrandie du mécanismes d'éjection de l'embout du dispositif de prélèvement représenté sur la figure 4A.  Fig. 4C is an enlarged view of the ejection mechanism of the tip of the pickup device shown in Fig. 4A.
La figure 5A représente une vue en perspective d'un dispositif de prélèvement de matière biologique, selon un quatrième mode de réalisation.  Figure 5A is a perspective view of a biological material removal device according to a fourth embodiment.
La figure 5B représente une vue éclatée en perspective du dispositif de prélèvement de matière biologique, représenté sur la figure 5 A.  Fig. 5B is an exploded perspective view of the biological material removal device shown in Fig. 5A.
La figure 5C représente une vue en perspective du dispositif de prélèvement de matière biologique, représenté sur la figure 5A, en configuration d'éjection de l'embout de prélèvement. Sur la figure 1A, l'embout 10 selon un premier mode de réalisation est représenté selon une vue en perspective. Il est représenté en vue de côté, sur la figure 1B. Selon ce mode de réalisation, l'embout 10 est de forme générale tronconique. Il est néanmoins tout à fait envisageable que l'embout 10 selon l'invention soit de forme différente. Il est constitué de trois parties distinctes. En premier lieu, une partie distale 12 de forme sensiblement tronconique. Cette partie distale 12 constitue la partie de réception d'un moyen de prélèvement 14. A cette fin, la partie distale 12 présente une extrémité libre 16, au niveau de laquelle est ménagée une cavité borgne 18, dans laquelle est positionné le moyen de prélèvement 14. Dans ce but, la forme de la cavité 18 et celle du moyen de prélèvement 14 doivent être complémentaires. Idéalement, les dimensions du moyen de prélèvement 14 doivent être légèrement inférieures à celle de la cavité 18 pour permettre son insertion. Toutefois, il est préférable qu'elles soient assez proches pour éviter que le moyen de prélèvement ne se désolidarise de la cavité. L'embout 10 comporte par ailleurs une partie proximale 20, également de forme tronconique mais moins longue et plus large que la partie distale 12. L'extrémité 22 de la partie proximale 20 est libre et présente une cavité borgne 24 à l'intérieur de laquelle vient se loger l'extrémité distale d'un dispositif de prélèvement. Figure 5C shows a perspective view of the biological material removal device, shown in Figure 5A, in the ejection configuration of the sampling tip. In Figure 1A, the tip 10 according to a first embodiment is shown in a perspective view. It is shown in side view, in Figure 1B. According to this embodiment, the tip 10 is of generally frustoconical shape. It is nevertheless quite conceivable that the tip 10 according to the invention is of different shape. It consists of three distinct parts. Firstly, a distal portion 12 of substantially frustoconical shape. This distal portion 12 constitutes the receiving part of a sampling means 14. For this purpose, the distal portion 12 has a free end 16, at the level of which is formed a blind cavity 18, in which the sampling means is positioned. 14. For this purpose, the shape of the cavity 18 and that of the sampling means 14 must be complementary. Ideally, the dimensions of the sampling means 14 must be slightly smaller than that of the cavity 18 to allow its insertion. However, it is preferable that they be close enough to prevent the sampling means from separating from the cavity. The tip 10 also comprises a part proximal 20, also of frustoconical shape but shorter and wider than the distal portion 12. The end 22 of the proximal portion 20 is free and has a blind cavity 24 inside which is housed the distal end of a sampling device.
L'embout 10 peut être moulé dans les matériaux habituellement utilisés pour mouler les embouts de pipettes. Le matériau peut être par exemple un polymère de type polyoléfme. Ce type de matériau est généralement bon marché, stérilisable et adapté à une utilisation pour la réalisation de produit à usage unique.  The tip 10 may be molded into the materials commonly used to mold the pipette tips. The material may for example be a polyolefin polymer. This type of material is generally cheap, sterilizable and adapted to use for the production of disposable product.
Concernant le moyen de prélèvement 14, le matériau constituant ce dernier a toute son importance. En effet, le moyen de prélèvement a comme double contrainte technique de devoir assurer un prélèvement de matière biologique, telle qu'une colonie bactérienne mais également un relargage de ladite matière biologique lors de son dépôt sur un dispositif d'analyse tel qu'une plaque d'analyse de spectrométrie de masse. Les inventeurs ont ainsi découvert que la porosité du matériau utilisé pour fabriquer le moyen de prélèvement 14 était une caractéristique essentielle pour permettre de trouver le bon compromis entre les performances de prélèvement et les performances de relargage de matière biologique.  Regarding the sampling means 14, the material constituting the latter is important. Indeed, the sampling means has the double technical constraint of having to ensure a collection of biological material, such as a bacterial colony but also a release of said biological material when it is deposited on an analysis device such as a plate mass spectrometry analysis. The inventors have thus discovered that the porosity of the material used to manufacture the sampling means 14 was an essential characteristic to make it possible to find the right compromise between the sampling performance and the release performance of biological material.
Par ailleurs, au-delà des caractéristiques intrinsèques du moyen de prélèvement, il est important d'avoir à l'esprit que lorsque la matière biologique à prélever est une colonie bactérienne, la façon dont cette dernière se comporte lors de son prélèvement ou lors de son dépôt peut varier d'une espèce bactérienne à l'autre. Il est en effet bien connu que les colonies bactériennes sont plus ou moins consistantes, plus ou moins visqueuses, plus ou moins fïleuses selon l'espèce bactérienne considérée. Il est donc indispensable de disposer d'un moyen de prélèvement qui soit apte à manipuler n'importe quel type de colonie bactérienne, quel que soit ses propriétés.  Moreover, beyond the intrinsic characteristics of the sampling medium, it is important to bear in mind that when the biological material to be sampled is a bacterial colony, the manner in which the bacterial colony behaves when it is removed or when its deposit may vary from one bacterial species to another. It is well known that bacterial colonies are more or less consistent, more or less viscous, more or less fungal depending on the bacterial species considered. It is therefore essential to have a sampling means that is able to handle any type of bacterial colony, regardless of its properties.
Ainsi les inventeurs ont identifié qu'une porosité au moins égale à 30% était nécessaire pour obtenir les propriétés recherchées. Idéalement une porosité au moins égale à 70% permet d'obtenir les meilleurs résultats.  Thus, the inventors have identified that a porosity of at least 30% is necessary to obtain the desired properties. Ideally a porosity of at least 70% gives the best results.
Par porosité du matériau, on entend l'ensemble des vides (pores) d'un matériau solide pouvant être remplis par des fluides (liquide ou gaz). Nous entendrons également par porosité la grandeur physique définie comme le rapport entre le volume des vides et le volume total du milieu poreux étudié.  Porosity of the material means all the voids (pores) of a solid material that can be filled with fluids (liquid or gas). Porosity also means the physical quantity defined as the ratio between the volume of the voids and the total volume of the porous medium studied.
La mesure de porosité du matériau est réalisée de la façon suivante : Un échantillon du matériau fibreux sec est prélevé. The porosity measurement of the material is carried out as follows: A sample of the dry fibrous material is taken.
L'échantillon est pesé une première fois.  The sample is weighed a first time.
L'échantillon est immergé dans l'eau, le temps nécessaire à son imprégnation totale. The sample is immersed in water, the time necessary for its total impregnation.
L'échantillon imprégné est un nouvelle fois pesé. The impregnated sample is weighed again.
La masse de l'eau emprisonnée dans le matériau est déduite par calcul de la différence entre la masse du matériau imprégné et celle du matériau sec.  The mass of water trapped in the material is deduced by calculating the difference between the mass of the impregnated material and that of the dry material.
La masse volumique de l'eau étant proche de 1, il en est déduit le volume d'eau emprisonnée et ainsi le volume des vides dans le matériau.  The density of the water being close to 1, it is deduced the volume of trapped water and thus the volume of the voids in the material.
Le volume de l'échantillon imprégné est alors mesuré.  The volume of the impregnated sample is then measured.
En divisant la valeur de vides dans l'échantillon de matériau, obtenue ci-dessus par le volume mesuré de l'échantillon imprégné, il est ainsi possible d'obtenir la valeur de la porosité du matériau.  By dividing the value of voids in the material sample obtained above by the measured volume of the impregnated sample, it is thus possible to obtain the value of the porosity of the material.
Les matériaux particulièrement adaptés pour réaliser le moyen de prélèvement peuvent être des matériaux fibreux. Parmi les matériaux, on peut citer les matériaux synthétiques tel que les polyéthylènes, les polyesters, les polyamides. Parmi les polyesters, on peut citer le polytéréphtalate d'éthylène (PET). Il peut s'agir également de copolymères, tels que des polymères de polyéthylène/polyester, tel qu'un copolymère de polyéthylène/ PET ou encore un copolymère PET/PET. Lorsqu'il s'agit d'un matériau fibreux, les fibres peuvent être constituées d'un matériau mono-composant ou bi-composant. Une fibre bi- composant peut être par exemple constituée d'un cœur en PET et d'une gaine en polyéthylène. Materials particularly suitable for producing the sampling means may be fibrous materials. Among the materials, mention may be made of synthetic materials such as polyethylenes, polyesters and polyamides. Among the polyesters, mention may be made of polyethylene terephthalate (PET). It may also be copolymers, such as polyethylene / polyester polymers, such as a polyethylene / PET copolymer or a PET / PET copolymer. When it is a fibrous material, the fibers may consist of a single-component or two-component material. A bi-component fiber may for example consist of a PET core and a polyethylene sheath.
Des matériaux fibreux naturels peuvent également être utilisés. C'est le cas notamment des fibres de coton.  Natural fibrous materials can also be used. This is particularly the case with cotton fibers.
Un second mode de réalisation de l'embout est représenté sur la figure 1C. Cet embout 11 est constitué de trois parties : une partie proximale 13 sensiblement cylindrique ou éventuellement tronconique. Contrairement au premier mode de réalisation, l'extrémité libre 15 de la partie proximale 13 ne présente pas de cavité borgne et est bouchée. En effet, selon ce mode de réalisation, l'extrémité distale du dispositif de prélèvement ne vient pas s'insérer dans l'embout 11. C'est au contraire l'embout 11 qui vient s'insérer dans l'extrémité distale du dispositif de prélèvement, et plus précisément son extrémité proximale 15. Bien entendu, pour ce faire, le dispositif de prélèvement doit présenter une extrémité distale libre susceptible de recevoir l'embout 11. Il doit ainsi présenter une cavité de réception de l'embout 11 dont les dimensions doivent être légèrement supérieures aux dimensions de la partie proximale 13. L'embout 11 présente également une collerette 17 qui permet l'éjection dudit embout après utilisation. Elle peut également servir de butée lorsque l'embout 11 est inséré dans le dispositif de prélèvement. Enfin l'embout 11 présente une partie distale 19 destinée à recevoir un moyen de prélèvement 14, comme dans le cas de l'embout 10, selon le premier mode de réalisation. A cette fin, la partie distale 19 présente une extrémité libre 21, au niveau de laquelle est ménagée une cavité borgne 23, dans laquelle est positionné le moyen de prélèvement 14. A second embodiment of the tip is shown in Figure 1C. This tip 11 consists of three parts: a proximal portion 13 substantially cylindrical or optionally frustoconical. Unlike the first embodiment, the free end 15 of the proximal portion 13 has no blind cavity and is clogged. Indeed, according to this embodiment, the distal end of the sampling device does not fit into the tip 11. It is instead the tip 11 which is inserted into the distal end of the device sampling, and more precisely its end 15. Of course, to do this, the sampling device must have a free distal end capable of receiving the tip 11. It must thus have a receiving cavity of the tip 11 whose dimensions must be slightly greater than the dimensions of the proximal portion 13. The tip 11 also has a flange 17 which allows the ejection of said tip after use. It can also serve as a stop when the tip 11 is inserted into the sampling device. Finally the tip 11 has a distal portion 19 for receiving a sampling means 14, as in the case of the tip 10, according to the first embodiment. For this purpose, the distal portion 19 has a free end 21, at the level of which is formed a blind cavity 23, in which is positioned the sampling means 14.
Selon une variante de réalisation de l'embout de prélèvement 11, l'extrémité proximale 13 peut présenter un orifice permettant de générer un trou traversant entre les extrémités distale et proximale. Il est alors possible d'utiliser un moyen de prélèvement plus long, positionnée dans le trou traversant et solidaire de l'embout au niveau de l'orifice de l'extrémité proximale, voire au niveau des deux extrémités. Une telle variante est plus simple de conception et donc moins coûteuse à produire.  According to an alternative embodiment of the sampling tip 11, the proximal end 13 may have an orifice for generating a through hole between the distal and proximal ends. It is then possible to use a longer sampling means, positioned in the through hole and secured to the tip at the orifice of the proximal end, or even at both ends. Such a variant is simpler to design and therefore less expensive to produce.
Le moyen de prélèvement 14, tel qu'il est représenté sur les figures 1A à 1C est de forme cylindrique. Il est néanmoins possible que le moyen de prélèvement 14 présente une forme différente. Ainsi, l'extrémité libre de ce dernier peut être par exemple conique pour améliorer encore la précision de prélèvement et de dépôt du matériel biologique. L'extrémité libre de l'embout 14 peut également présenter toute autre forme adaptée au prélèvement de matière biologique.  The sampling means 14, as shown in Figures 1A to 1C is cylindrical. It is possible, however, that the sampling means 14 has a different shape. Thus, the free end of the latter may for example be tapered to further improve the accuracy of sampling and deposition of biological material. The free end of the tip 14 may also have any other form suitable for the removal of biological material.
Selon une variante de l'invention, il pourrait être envisagé d'avoir un embout de prélèvement qui soit constitué intégralement du matériau poreux. Selon cette variante de réalisation, l'embout de prélèvement constituerait également le moyen de prélèvement. According to a variant of the invention, it could be envisaged to have a sampling tip which is made entirely of the porous material. According to this variant embodiment, the sampling tip would also constitute the sampling means.
Selon une autre variante de l'invention, le moyen de prélèvement, l'embout de prélèvement et le dispositif de prélèvement pourraient ne faire qu'un. En effet, il peut être envisagé un dispositif de prélèvement à usage unique, auquel est solidarisé un embout de prélèvement poreux. Alternativement, le dispositif de prélèvement peut être entièrement fabriqué en matériau poreux. Pour ce faire, les dimensions du moyen de prélèvement doivent permettre une préhension et une manipulation aisées. According to another variant of the invention, the sampling means, the sampling tip and the sampling device could be one. Indeed, it can be envisaged a disposable sampling device, which is secured to a porous sampling tip. Alternatively, the sampling device can be entirely made of porous material. To do this, the dimensions of the sampling means must allow easy handling and handling.
L'embout de prélèvement conjugué au moyen de prélèvement ou le moyen de prélèvement seul, s'il ne fait qu'un avec l'embout de prélèvement, peuvent être adaptés pour être utilisés avec un système automatisé de prélèvement de matière biologique. Un tel système pourrait par exemple réaliser de manière automatique le prélèvement de colonies bactériennes sur des boites de Pétri et la préparation de plaques d'analyse en spectrométrie de masse. The sampling tip conjugated to the sampling means or the sampling means alone, if it is one with the sampling tip, can be adapted for use with an automated biological material sampling system. Such a system could for example automatically carry out the collection of bacterial colonies on petri dishes and the preparation of analysis plates in mass spectrometry.
Sur la figure 2 A, est représenté un dispositif de prélèvement 30 selon un premier mode de réalisation. Ce dispositif de prélèvement 30 comporte une partie distale 32, une partie intermédiaire 34 et une partie proximale 36. La partie distale 32, sensiblement tronconique, a pour fonction de porter l'embout de prélèvement 10 selon l'invention. La partie intermédiaire 34, également cylindrique, a pour fonction de permettre la préhension du dispositif de prélèvement 30 par son utilisateur. Enfin, la partie proximale 36 a une forme générale de godet, dont le diamètre intérieure est légèrement supérieur au diamètre extérieur de la partie intermédiaire 34, de tel sorte que la partie proximale peut partiellement recouvrir l'extrémité proximale de la partie intermédiaire. FIG. 2A shows a sampling device 30 according to a first embodiment. This sampling device 30 comprises a distal portion 32, an intermediate portion 34 and a proximal portion 36. The distal portion 32, substantially frustoconical, has the function of carrying the sampling tip 10 according to the invention. The intermediate portion 34, also cylindrical, has the function of allowing the gripping device 30 to be gripped by its user. Finally, the proximal portion 36 has a general cup shape, the inner diameter of which is slightly greater than the outer diameter of the intermediate portion 34, so that the proximal portion may partially overlap the proximal end of the intermediate portion.
La figure 2B représente le dispositif de prélèvement 30 en vue éclatée de telle sorte que chaque élément constitutif de ce dispositif est représenté séparément. On constate ainsi que les parties distale 32 et intermédiaire 34 sont en fait une seule et même pièce 38 constituant le corps du dispositif de prélèvement.  Figure 2B shows the sampling device 30 in an exploded view so that each constituent element of this device is shown separately. It is thus found that the distal 32 and intermediate 34 parts are in fact one and the same piece 38 constituting the body of the sampling device.
Tel que représenté sur le figure 2C, ce corps 38 sensiblement cylindrique présente trois évidements 382 longitudinaux traversants et périphériques, ainsi qu'un évidement central 384. Les évidements 382 sont ménagés afin de recevoir chacun une lame 401 de la tige 40, tel que représenté sur la figure 2B. Quant à l'évidement 384, il est ménagé pour recevoir un ressort hélicoïdal 42, comme représenté sur la figure 2B. La tige 40 est donc constituée principalement de trois lames 401 dont la base est solidarisée à un anneau-butoir 402. La tige 40 vient se positionner à l'intérieur du corps du dispositif 38 en introduisant les extrémités libres des lames 401 dans les évidements 382, jusqu'à ce que Γ anneau-butoir 402 vienne en appuie contre l'extrémité distale de la partie intermédiaire 34, alors que la partie distale 32 vient traverser la lumière dudit anneau-butoir 402. A l'extrémité opposée du corps 38, l'extrémité inférieure du ressort hélicoïdal 42 vient se loger dans l'évidement 384, alors que son extrémité supérieure est placée en contact de la face intérieure de la partie proximale 36 du dispositif de prélèvement, qui vient coiffer le corps 38. Cette partie proximale joue le rôle de poussoir, lors de l'éjection de l'embout de prélèvement 10, une fois ce dernier utilisé. As shown in FIG. 2C, this substantially cylindrical body 38 has three longitudinal and peripheral recesses 382 and a central recess 384. The recesses 382 are formed so as to each receive a blade 401 of the rod 40, as represented in Figure 2B. As for the recess 384, it is arranged to receive a helical spring 42, as shown in Figure 2B. The rod 40 is therefore mainly composed of three blades 401 whose base is secured to a stop ring 402. The rod 40 is positioned inside the body of the device 38 by introducing the free ends of the blades 401 into the recesses 382. , until Γ stop ring 402 presses against the distal end of the intermediate portion 34, while the distal portion 32 passes through the lumen of said stop ring 402. At the opposite end of the body 38, the lower end of the coil spring 42 is housed in the recess 384, while its upper end is placed in contact with the inner face of the proximal portion 36 of the sampling device, which caps the body 38. This proximal part acts as a pusher, during the ejection of the sampling tip 10, once the latter used.
Les lames 401 présentent une longueur supérieure à la partie intermédiaire 34 de telle sorte que lorsque la tige 40 est positionnée à l'intérieur du corps 38, l'extrémité libre supérieure des lames 401 émerge des évidements 382. Ces extrémités libres sont solidarisés avec le poussoir 36, une fois le ressort en place. Cette solidarisation peut être mécanique. Ainsi, il est envisageable de disposer d'ergots en saillie radiale à proximité de l'extrémité libre des lames 401 qui viennent se loger dans des évidements ménagés dans la paroi interne du poussoir 36. Alternativement, il est possible de solidariser l'extrémité libre des lames 401 avec la face interne du poussoir 36 par collage chimique.  The blades 401 have a length greater than the intermediate portion 34 so that when the rod 40 is positioned inside the body 38, the upper free end of the blades 401 emerges from the recesses 382. These free ends are secured to the pushbutton 36, once the spring in place. This bonding can be mechanical. Thus, it is conceivable to have pins radially projecting near the free end of the blades 401 which are housed in recesses formed in the inner wall of the pusher 36. Alternatively, it is possible to secure the free end blades 401 with the inner face of the pusher 36 by chemical bonding.
Comme représenté sur la figure 2D, lorsqu'une pression dans l'axe longitudinal du dispositif de prélèvement est exercée sur le poussoir 36, ce dernier vient coulisser sur le corps 38. Cette action de coulissement se répercute sur la tige 40 qui est solidaire du poussoir 36 et coulisse à l'intérieur du corps 38. Ce coulissement se manifeste à l'extrémité distale du dispositif de prélèvement par une translation de Γ anneau-poussoir 402. Comme ce dernier est en appui contre l'extrémité proximale de l'embout 10, il entraîne en translation ledit embout de telle sorte que ce dernier est désolidarisé de l'extrémité distale 32 du dispositif de prélèvement 30. La pression exercée par le poussoir 36 sur le ressort hélicoïdal 42 entraîne la compression de ce dernier. Cette compression se répercute sur la tige 40, qui coulisse tel qu'expliqué supra. Lorsque la pression sur la partie proximale 36 est relâchée, le ressort 42 tend à reprendre une position de repos dans laquelle il ne fait plus pression sur la tige 40. Cette dernière reprend alors sa position initiale par translation inverse, libérant la partie distale 32 qui est alors disponible pour recevoir un autre embout de prélèvement.  As shown in FIG. 2D, when a pressure in the longitudinal axis of the sampling device is exerted on the pusher 36, the latter slides on the body 38. This sliding action is reflected on the rod 40 which is integral with the push member 36 and slides inside the body 38. This sliding is manifested at the distal end of the sampling device by a translation of Γ pusher ring 402. As the latter bears against the proximal end of the tip 10, it drives in translation said tip so that the latter is disengaged from the distal end 32 of the sampling device 30. The pressure exerted by the pusher 36 on the coil spring 42 causes the compression of the latter. This compression is reflected on the rod 40, which slides as explained supra. When the pressure on the proximal portion 36 is released, the spring 42 tends to resume a rest position in which it no longer presses the rod 40. The latter then resumes its initial position by inverse translation, releasing the distal portion 32 which is then available to receive another sampling tip.
Les différentes étapes du procédé de mise en œuvre du dispositif de prélèvement 30 avec un embout de prélèvement 10 peuvent donc être résumées ainsi :  The various steps of the method of implementing the sampling device 30 with a sampling tip 10 can therefore be summarized as follows:
Un embout 10 est positionné sur l'extrémité libre 32 du dispositif de prélèvement. Cette étape est généralement réalisée en venant positionné le dispositif en position vertical en aplomb d'un embout stérile, généralement positionnée sur un portoir adapté. L'extrémité de la partie distale 32 du dispositif de prélèvement est alors emmanchée dans la cavité 24 de la partie proximale 20 de l'embout de 10, jusqu'à ce qu'elle soit en butée au fond de la cavité 24. A tip 10 is positioned on the free end 32 of the sampling device. This step is generally performed by coming positioned the device in a vertical position plumb with a sterile tip, usually positioned on a suitable rack. The end of the distal portion 32 of the sampling device is then fitted into the cavity 24 of the proximal portion 20 of the tip of 10, until it abuts the bottom of the cavity 24.
Pour réaliser un prélèvement de matière biologique telle qu'une colonie de microorganismes sur un milieu de culture gélosé, le dispositif de prélèvement est positionné de telle manière que le moyen de prélèvement de l'embout vienne en contact de la colonie de microorganismes. Tout ou partie de la colonie est alors prélevée.  To take a sample of biological material such as a colony of microorganisms on an agar culture medium, the sampling device is positioned in such a way that the means for sampling the tip come into contact with the colony of microorganisms. All or part of the colony is then removed.
Pour réaliser le dépôt de tout ou partie de la matière biologique prélevée, sur une surface telle que la surface d'une plaque d'analyse de spectrométrie de masse MALDI- TOF, le dispositif de prélèvement est approché de ladite surface, de telle sorte que l'extrémité du moyen de prélèvement portant la matière biologique vienne en contact de la surface. De légers mouvements circulaires sont alors réalisés avec le dispositif de prélèvement pour déposer une couche de matière biologique sur ladite surface.  To carry out the deposition of all or part of the biological material taken from a surface such as the surface of a MALDI-TOF mass spectrometry analysis plate, the sampling device is approached from said surface, so that the end of the sampling means carrying the biological material comes into contact with the surface. Slight circular movements are then made with the sampling device to deposit a layer of biological material on said surface.
Une fois le dépôt réalisé, l'embout de prélèvement est éjecté en actionnant le moyen d'éjection et jeté dans une poubelle. Dans le cas du dispositif de prélèvement tel que représenté sur les figures 3 à 5, l'éjection est réalisée en exerçant une pression sur la partie proximale 36. Un second mode de réalisation du dispositif de prélèvement est représenté sur les figures 3A à 3C. Ce dispositif de prélèvement 50 est constitué d'un corps 52 sensiblement cylindrique et creux. Ce corps 52 présente en sa partie distale une extrémité libre 521 de forme sensiblement tronconique, destinée à porter un embout de prélèvement 10. Cette extrémité libre 521 est solidarisée au corps 52 par trois ailettes (non représentées) définissant trois espaces interstitiels. Le corps 52 présente également un système d'accrochage ou agrafe 522 permettant d'accrocher le dispositif de prélèvement à la poche d'un vêtement par exemple, comme on peut le faire avec un stylo. Enfin, sur la figure 3 A, on observe également un bouton poussoir 54 qui sort par l'extrémité proximale du corps 52. Comme on peut le voir sur la figure 3B, le bouton poussoir 54 est solidaire d'une tige 56, prenant place à l'intérieur du corps 52. Cette tige 56 de forme sensiblement cylindrique se termine à son extrémité distale par trois pattes de fixation 561, représentées en gros plan sur le vue agrandie 3C. L'espace central entre lesdites pattes de fixation 561 est destiné à recevoir un ressort hélicoïdal 58, tel que montré sur la figure 3B. Once the deposit is made, the sampling tip is ejected by operating the ejection means and thrown into a bin. In the case of the sampling device as represented in FIGS. 3 to 5, the ejection is carried out by exerting a pressure on the proximal portion 36. A second embodiment of the sampling device is shown in FIGS. 3A to 3C. This sampling device 50 consists of a body 52 substantially cylindrical and hollow. This body 52 has in its distal portion a free end 521 of substantially frustoconical shape, intended to carry a sampling tip 10. This free end 521 is secured to the body 52 by three fins (not shown) defining three interstitial spaces. The body 52 also has a hooking system or clip 522 for hooking the sampling device to the pocket of a garment for example, as can be done with a pen. Finally, in FIG. 3A, there is also a push button 54 that leaves via the proximal end of the body 52. As can be seen in FIG. 3B, the push button 54 is integral with a rod 56, taking place inside the body 52. This rod 56 of substantially cylindrical shape terminates at its distal end by three fixing lugs 561, shown in close-up on the enlarged view 3C. The central space between said fixing lugs 561 is intended to receive a helical spring 58, as shown in FIG. 3B.
La tige 56 est insérée dans le corps 52 par l'extrémité proximale de ce dernier, le ressort hélicoïdal 58 étant préalablement inséré. Ledit ressort hélicoïdal 58 vient se positionner en appui contre les ailettes et la partie supérieure de l'extrémité distale 521. La tige 56, une fois insérée, vient se positionner à cheval sur le ressort de telle sorte que les pattes de fixation 561 viennent traverser les espaces interstitiels définis entre les ailettes et ressortir à la base du corps 52 autour de l'extrémité libre 521. Une bague 60 est insérée autour de l'extrémité libre 521. Cette bague 60 dispose des trois évidements 601 destinés à recevoir l'extrémité des pattes de fixation 561. Les pattes de fixation disposent à leur extrémité d'ergots radiaux 5611, qui une fois les pattes positionnées à l'intérieur de la bague 60, vont venir se verrouiller dans les évidements 601 et ainsi solidariser la bague 60 et la tige 56. A titre d'alternative et dans un souci de simplifier le mécanisme, il est tout à fait possible de remplacer ce système de solidarisation mécanique par un système comportant des pattes sans ergots qui seraient solidarisées à la bague par collage. Comme représenté sur le figure 3A, la bague 60 vient en appui contre le corps 52 au niveau de la partie supérieure de l'extrémité libre 521, du fait de l'action du ressort hélicoïdal 58 qui vient exercer sur la tige 56, une force de répulsion vers la partie supérieure du corps 52.  The rod 56 is inserted into the body 52 by the proximal end of the latter, the coil spring 58 being inserted beforehand. Said helical spring 58 is positioned in abutment against the fins and the upper part of the distal end 521. The rod 56, once inserted, is positioned astride the spring so that the 561 fastening tabs are crossing the interstitial spaces defined between the fins and emerge at the base of the body 52 around the free end 521. A ring 60 is inserted around the free end 521. This ring 60 has three recesses 601 for receiving the end 561. The fixing lugs have at their end radial lugs 5611, which once the lugs positioned inside the ring 60, will come to lock in the recesses 601 and thus secure the ring 60 and the rod 56. As an alternative and for the sake of simplifying the mechanism, it is quite possible to replace this mechanical fastening system with a system comprising legs without pins that would be secured to the ring by gluing. As shown in FIG. 3A, the ring 60 bears against the body 52 at the level of the upper part of the free end 521, because of the action of the helical spring 58 which exerts on the rod 56 a force repulsion towards the upper part of the body 52.
Comme dans le cas du premier mode de réalisation du dispositif de prélèvement 30, lorsqu'une pression dans l'axe longitudinal du dispositif de prélèvement est exercée sur le bouton poussoir 54, cette pression se répercute sur la tige 56, solidaire du bouton poussoir 54. Cette dernière vient alors coulisser à l'intérieur du corps 52, comprimant alors le ressort hélicoïdal 58. Ce coulissement se manifeste à l'extrémité distale du dispositif de prélèvement par une translation de la bague 60, de sorte que cette dernière vient appuyer sur l'extrémité proximale de l'embout 10 et entraîner ce dernier en translation jusqu'à ce qu'il soit désolidarisé de l'extrémité distale 521 du dispositif de prélèvement 50. Lorsque la pression exercée par la tige 56 sur le ressort hélicoïdal 58 est relâchée, du fait du relâchement de la pression sur le bouton poussoir 54, ce dernier reprend sa position de repos. La tige 56 est entraînée en translation inverse par pression du ressort, jusqu'à ce que la bague 60 revienne en appui contre le corps 52, rendant la partie distale 521 à nouveau accessible pour recevoir un autre embout de prélèvement 10. Un troisième mode de réalisation d'un dispositif de prélèvement est représenté sur les figure 4A à 4C. Ce dispositif de prélèvement 70 est constitué d'un corps 72 sensiblement cylindrique et creux. Ce corps 72 présente en sa partie distale une extrémité libre 721 de forme sensiblement tronconique, destinée à porter un embout de prélèvement 10. Cette extrémité libre 721 est solidarisée au corps 72 par des trois ailettes (non représentées) définissant trois espaces interstitiels. On observe également un bouton poussoir 74 positionné latéralement sur le corps 72, qui vient s'insérer dans un logement 722 ménagé dans la paroi latérale du corps 72, comme on peut le voir sur la figure 4B. Il comporte également une tige 76 qui est insérée dans le corps 72 par son extrémité supérieure. Cette tige 76 est constituée d'une partie proximale monobloc 761 de section transversale sensiblement rectangulaire et d'une partie distale constituée de trois pattes de fixation 762. A l'interface avec la partie distale, la partie proximale 761 présente sur ces deux faces opposées un épaulement incliné 7611, destiné à venir coopérer avec le bouton poussoir 74. La tige 76 est insérée dans le corps 72 du dispositif de prélèvement 70, par l'extrémité proximale de ce dernier. Une fois la tige 76 insérée, les pattes de fixation 762 viennent traverser les espaces interstitiels définis entre les ailettes de maintien de l'extrémité libre 721 et ressortir à la base du corps 72 autour de ladite extrémité libre 721. Une bague 78 est insérée autour de l'extrémité libre 721. Cette bague 78 est similaire à la bague 60 décrite supra et dispose des trois évidements destinés à recevoir l'extrémité des pattes de fixation 762, également pourvus d'ergots radiaux 7621 et destinés à coopérer avec les évidements de la bagues 78 pour solidariser la tige 76 à la bague 78, tel que montrés sur la figure 4C. As in the case of the first embodiment of the sampling device 30, when a pressure in the longitudinal axis of the sampling device is exerted on the push button 54, this pressure is reflected on the rod 56, integral with the push button 54 The latter then slides inside the body 52, then compressing the coil spring 58. This sliding is manifested at the distal end of the sampling device by a translation of the ring 60, so that the latter presses on the proximal end of the tip 10 and drive the latter in translation until it is disengaged from the distal end 521 of the sampling device 50. When the pressure exerted by the rod 56 on the coil spring 58 is released, because of the release of the pressure on the push button 54, the latter resumes its rest position. The rod 56 is driven in reverse translation by spring pressure, until the ring 60 rests against the body 52, making the distal portion 521 again accessible to receive another sampling tip 10. A third embodiment of a sampling device is shown in FIGS. 4A-4C. This sampling device 70 consists of a body 72 substantially cylindrical and hollow. This body 72 has in its distal portion a free end 721 of substantially frustoconical shape, intended to carry a sampling tip 10. This free end 721 is secured to the body 72 by three fins (not shown) defining three interstitial spaces. There is also a push button 74 positioned laterally on the body 72, which is inserted into a housing 722 formed in the side wall of the body 72, as can be seen in Figure 4B. It also comprises a rod 76 which is inserted into the body 72 by its upper end. This rod 76 consists of a one-piece proximal portion 761 of substantially rectangular cross section and a distal portion consisting of three attachment tabs 762. At the interface with the distal portion, the proximal portion 761 has on these two opposite faces an inclined shoulder 7611, intended to cooperate with the push button 74. The rod 76 is inserted into the body 72 of the sampling device 70, by the proximal end thereof. Once the rod 76 inserted, the fixing lugs 762 pass through the interstitial spaces defined between the holding fins of the free end 721 and emerge at the base of the body 72 around said free end 721. A ring 78 is inserted around of the free end 721. This ring 78 is similar to the ring 60 described above and has three recesses for receiving the end of the fixing lugs 762, also provided with radial lugs 7621 and intended to cooperate with the recesses of the rings 78 for securing the rod 76 to the ring 78, as shown in Figure 4C.
Le bouton poussoir 74 a une section transversale en forme de « U » inversé, destinée à lui permettre de se positionner à cheval autour de la partie proximale 761 de la tige 76, particulièrement au niveau des épaulements inclinés 7611. Le bouton poussoir 74 présente sur chacune de ces deux faces latérales trois ergots 741 destinés à l'empêcher de ressortir, une fois positionné dans le logement 722. Lorsque le tige 76 et le bouton poussoir 74 sont positionnés dans le corps 72 du dispositif de prélèvement 70, le bouton poussoir 74 vient en appui au niveau de sa partie distale contre les épaulements inclinés 7611, empêchant la tige 76 de ressortir. L'interaction entre le bouton poussoir et les épaulements inclinés 7611 permet le déplacement de la tige 76 entre une position de repos et une position d'éjection de l'embout de prélèvement 10. En effet, lorsqu'un embout 10 est positionné sur l'extrémité distale 721 du dispositif de prélèvement 70, ce dernier vient en appui contre la bague 78. Cette dernière est alors positionnée en position haute, contre le corps 72, tel que montré sur le figure 4A. La tige est alors en position de repos, dans laquelle le bouton poussoir 74 se retrouve en position haute. The push button 74 has an inverted U-shaped cross-section, to allow it to be positioned astride the proximal portion 761 of the stem 76, particularly at the inclined shoulders 7611. The push-button 74 is shown in FIG. each of these two lateral faces three lugs 741 intended to prevent it from emerging, once positioned in the housing 722. When the rod 76 and the push button 74 are positioned in the body 72 of the sampling device 70, the push button 74 bears at its distal portion against the inclined shoulders 7611, preventing the rod 76 from emerging. The interaction between the push button and the inclined shoulders 7611 allows the rod 76 to move between a rest position and an ejection position of the sampling tip 10. Indeed, when a tip 10 is positioned on the distal end 721 of the sampling device 70, the latter bears against the ring 78. The latter is then positioned in the up position, against the body 72, as shown in Figure 4A. The rod is then in the rest position, in which the push button 74 is in the up position.
Lorsque l'utilisateur du dispositif de prélèvement 70 souhaite éjecter l'embout de prélèvement 10, il exerce une pression sur le bouton poussoir 74. Cette pression entraine l'enfoncement du bouton poussoir dans le logement 722, qui glisse alors sur les épaulements inclinés 7611. Le bouton poussoir ne pouvant se mouvoir latéralement, son glissement sur les épaulements inclinés 7611 entraîne le déplacement de la tige 76 en translation horizontale vers l'extrémité distale du corps 72. La tige passe alors de sa position de repos vers sa position d'éjection de l'embout, dans laquelle la bague d'éjection 78 se retrouve en position basse après avoir exercé une pression sur l'embout et entraîner l'éjection de ce dernier, comme représenté sur la figure 4C. Un quatrième mode de réalisation est représenté sur les figures 5 A et 5C. Ce mode de réalisation est très similaire au troisième mode de réalisation pour ce qui concerne le fonctionnement du dispositif de prélèvement. En effet, le dispositif de prélèvement 80 représenté sur les figures 5 A à 5C est constitué d'un corps 82 sensiblement cylindrique et creux. Ce corps 82 est monobloc et présente en sa partie distale une extrémité libre 821 de forme sensiblement tronconique. Cette extrémité 821 est percée d'un orifice circulaire 822. Cet orifice est destiné à recevoir la partie proximale 13 d'un embout de prélèvement 11, tel que décrit en lien avec la figure 1C. Dans cette configuration, l'embout de prélèvement 11 est enfoncé dans le corps du dispositif de prélèvement 80 jusqu'à ce que la collerette 17 de l'embout 11 vienne en appui contre l'extrémité 821 du corps 82. Le corps 82 comporte également un bouton poussoir 84 positionné latéralement sur le corps 82, qui vient s'insérer dans un logement 823 ménagé dans la paroi latérale du corps 82. Il comporte enfin une tige 86 qui est insérée dans le corps 82 par son extrémité supérieure. Cette tige 86 est constituée d'une partie proximale monobloc 861 de section transversale sensiblement rectangulaire, d'une partie distale monobloc 862 de section transversale sensiblement ronde se terminant par un téton 863. A l'interface entre la partie proximale 861 et la partie distale 862 sont ménagées de épaulements inclinées 8611 de part et d'autre de la partie proximale 861. Ces épaulements 8611 et le bouton poussoir 84 sont amenés à coopérer selon un mécanisme identique à celui qui a été décrit supra en lien avec le dispositif de prélèvement 70 représenté sur les figures 4A à 4C, de sorte que lorsque l'utilisateur appuie sur le bouton poussoir 84, il déclenche le déplacement en translation de la tige 86 dans la lumière du corps 82, vers l'extrémité distale de ce dernier. Le téton 863 vient alors en appui contre l'extrémité libre 15 de la partie proximale 13 de l'embout 11 et exerce une pression sur ce dernier de sorte que l'embout 11 est éjecté du dispositif de prélèvement 80 par translation. Ceci est bien montré sur la figure 5C. Lors du positionnement d'un nouvel embout 11 sur le dispositif de prélèvement 80, la partie proximale 13 qui pénètre dans la lumière du corps 82 par l'orifice 822 vient pousser la tige 86 en sens opposé, entraînant la remontée du bouton poussoir 84 par translation verticale grâce aux épaulements inclinés 8611 qui coopèrent avec le bouton poussoir 84. When the user of the sampling device 70 wishes to eject the sampling tip 10, it exerts a pressure on the push button 74. This pressure causes the depression of the push button in the housing 722, which then slides on the inclined shoulders 7611 The push button being unable to move laterally, its sliding on the inclined shoulders 7611 causes the rod 76 to move in horizontal translation towards the distal end of the body 72. The rod then moves from its rest position to its position. ejection of the tip, wherein the ejection ring 78 is in the low position after exerting a pressure on the tip and cause the ejection thereof, as shown in Figure 4C. A fourth embodiment is shown in Figures 5A and 5C. This embodiment is very similar to the third embodiment with respect to the operation of the sampling device. Indeed, the sampling device 80 shown in Figures 5A to 5C consists of a body 82 substantially cylindrical and hollow. This body 82 is integral and has in its distal portion a free end 821 of substantially frustoconical shape. This end 821 is pierced with a circular orifice 822. This orifice is intended to receive the proximal portion 13 of a sampling tip 11, as described in connection with Figure 1C. In this configuration, the sampling tip 11 is pressed into the body of the sampling device 80 until the flange 17 of the tip 11 bears against the end 821 of the body 82. The body 82 also comprises a push button 84 positioned laterally on the body 82, which is inserted into a housing 823 formed in the side wall of the body 82. It finally comprises a rod 86 which is inserted into the body 82 by its upper end. This rod 86 consists of a one-piece proximal portion 861 of substantially rectangular cross-section, of a one-piece distal portion 862 of substantially round cross section ending in a stud 863. At the interface between the proximal portion 861 and the distal portion 862 are formed with inclined shoulders 8611 on either side of the proximal portion 861. These shoulders 8611 and the push button 84 are made to cooperate according to a mechanism identical to that described above in connection with the sampling device 70 shown in Figures 4A to 4C, so that when the user presses the push button 84, it triggers the translational movement of the rod 86 in the body lumen 82, towards the distal end thereof. The pin 863 then abuts against the free end 15 of the proximal portion 13 of the nozzle 11 and exerts a pressure on the latter so that the tip 11 is ejected from the sampling device 80 by translation. This is well shown in Figure 5C. When positioning a new tip 11 on the sampling device 80, the proximal portion 13 which enters the lumen of the body 82 through the orifice 822 pushes the rod 86 in the opposite direction, causing the pushbutton 84 to rise vertical translation thanks to the inclined shoulders 8611 which cooperate with the push button 84.
D'autres modes de réalisation du dispositif de prélèvement sont envisageables. Ainsi, un autre mode de réalisation possible consiste à positionner à l'extrémité distale du corps mais sur sa partie extérieure, un système mécanique destiné à venir en appui contre l'embout pour permettre son éjection. Il peut s'agir par exemple d'un manchon mobile en translation sur le corps du dispositif de prélèvement qui est en contact avec l'embout de prélèvement et qui permet d'éjecter ce dernier quand il est déplacé par l'utilisateur.  Other embodiments of the sampling device are conceivable. Thus, another possible embodiment is to position at the distal end of the body but on its outer part, a mechanical system intended to bear against the tip to allow its ejection. It may be for example a sleeve movable in translation on the body of the sampling device which is in contact with the sampling tip and which allows to eject the latter when it is moved by the user.
D'autres protocoles de préparation d'échantillons de matière biologique en vue d'une analyse peuvent être envisagés avec le dispositif de prélèvement. Ainsi, une fois le prélèvement de matière biologique effectué, il est possible de préparer une suspension de matière biologique dans une solution ad hoc, telle qu'une solution saline. Pour ce faire, il peut être envisagé de libérer l'embout de prélèvement portant la matière biologique, directement dans un tube contenant une quantité de solution de remise en suspension. Une agitation sous vortex du tube contenant l'embout permettra alors la libération de la matière biologique retenue sur le matériau fibreux. Other protocols for preparing samples of biological material for analysis may be considered with the sampling device. Thus, once the collection of biological material is carried out, it is possible to prepare a suspension of biological material in an ad hoc solution, such as a saline solution. To do this, it may be envisaged to release the sampling tip carrying the biological material, directly into a tube containing a quantity of resuspension solution. Vortex agitation of the tube containing the tip will then release the biological material retained on the fibrous material.
Le dispositif de prélèvement peut également être utilisé pour réaliser des isolements sur milieux de culture gélosés. Ces isolements peuvent être réalisés directement à partir de colonies prélevées avec le dispositif de prélèvement selon l'invention puis directement réensemencées sur un milieu de culture gélosé. Ils peuvent être également réalisés à partir de suspensions de matière biologique, réalisées à l'aide du dispositif de prélèvement, tel que décrit supra. The sampling device can also be used to carry out isolations on agar culture media. These isolations can be made directly from colonies taken with the sampling device according to the invention and then directly reseeded on an agar culture medium. They can also be made from suspensions of biological material, made using the sampling device, as described supra.
Dans le cas où le dispositif de prélèvement est utilisé pour réaliser un isolement, il est préférable que le moyen de prélèvement présente une extrémité sphérique et soit d'un diamètre suffisant à son extrémité, pour éviter que son application contre le milieu de culture gélosé ne vienne endommager ce dernier. Un diamètre adapté est par exemple compris entre 2 et 7 millimètres (mm) et avantageusement entre 2 et 4 mm.  In the case where the sampling device is used to achieve isolation, it is preferable that the sampling means has a spherical end and is of sufficient diameter at its end, to prevent its application against the agar culture medium does not to damage the latter. A suitable diameter is for example between 2 and 7 millimeters (mm) and preferably between 2 and 4 mm.
Un isolement peut être réalisé à partir d'une suspension bactérienne dont la concentration est de, par exemple, 107 UFC(Unité Formant Colonie)/mL (millilitre). Avec une telle concentration, un prélèvement de 5 micro litres (μί) de suspension à l'aide du moyen de prélèvement est suffisant pour permettre un isolement de bonne qualité, sur le milieu de culture gélosé. Les 5 de suspension sont aspirés par le matériau constituant le moyen de prélèvement. Ledit moyen de prélèvement chargé en suspension est ensuite apte à permettre la libération progressive de cette suspension lorsqu'il est appliqué sur le milieu de culture gélosé. Cette libération progressive est permise grâce au caractère absorbant du matériau, constituant le moyen de prélèvement. La conséquence en est une meilleure qualité de l'isolement. Isolation can be achieved from a bacterial suspension whose concentration is, for example, 10 7 CFU (Colony Forming Unit) / mL (milliliter). With such a concentration, a sample of 5 micro liters (μί) of suspension using the sampling means is sufficient to allow isolation of good quality, on the agar culture medium. The suspension 5 are sucked by the material constituting the sampling means. Said removal means loaded in suspension is then able to allow the gradual release of this suspension when it is applied to the agar culture medium. This progressive release is allowed thanks to the absorbency of the material, constituting the means of sampling. The consequence is a better quality of isolation.
L'isolement peut être réalisé selon les techniques traditionnelles, telles que la technique dite « en cadran » ou la technique dite « spirale ».  Isolation can be carried out according to traditional techniques, such as the so-called "dial" technique or the so-called "spiral" technique.
EXEMPLES : EXAMPLES
Exemple 1 : Utilisation d'un dispositif de prélèvement avec des embouts de prélèvement pour la préparation d'une plaque en vue d'une analyse par MALDI- TOF. Example 1: Use of a sampling device with sampling tips for preparation of a plate for MALDI-TOF analysis.
Le dispositif de prélèvement mis en œuvre dans cet exemple est le dispositif représenté sur les figures 2 A à 2D et décrit supra.  The sampling device used in this example is the device shown in FIGS. 2A to 2D and described above.
L'embout de prélèvement est en matériau plastique, tel que ceux utilisés classiquement pour réaliser les embouts de pipette jetable. Il comporte un moyen de prélèvement de forme cylindrique d'une diamètre 2 mm et d'une longueur de 6mm. Il est fibres de copolymère polytéréphtalate d'éthylène (PET)/PET, matériau commercialisé par la société Porex sous la référence PSU-832. Le corps du dispositif de prélèvement est réalisé en polypropylène injecté. Il présente une longueur de 120 mm et une section de forme hexagonale avec 8,2 mm entre les faces opposées de l'hexagone, ce qui permet une préhension aisée comme avec un crayon, sans risque de troubles musculo-squelettiques. The sampling tip is made of plastic material, such as those conventionally used to make the disposable pipette tips. It comprises a cylindrical sampling means with a diameter of 2 mm and a length of 6 mm. It is polyethylene terephthalate (PET) / PET copolymer fibers, material marketed by Porex under the reference PSU-832. The body of the sampling device is made of injected polypropylene. It has a length of 120 mm and a section of hexagonal shape with 8.2 mm between the opposite faces of the hexagon, which allows an easy grip as with a pencil, without risk of musculoskeletal disorders.
Le dispositif de prélèvement est utilisé pour prélever des colonies de différentes espèces bactériennes, qui ont poussé sur milieu de culture Columbia + 5% sang de mouton (COS), commercialisé par la demanderesse sous la référence 43041.  The sampling device is used to collect colonies of different bacterial species, which grew on culture medium Columbia + 5% sheep blood (COS), marketed by the Applicant under the reference 43041.
Les colonies prélevées sont déposées sur une plaque d'analyse MALDI-TOF jetable à 48 positions, commercialisée par la demanderesse sous la référence 410893.  The colonies collected are deposited on a 48-position disposable MALDI-TOF analysis plate, marketed by the Applicant under the reference 410893.
Parmi les espèces choisies, certaines sont connues pour former des colonies qui sont difficiles à prélever. C'est le cas par exemple de Bacillus lichenformis, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis ou encore Nocardia astéroïdes.  Of the selected species, some are known to form colonies that are difficult to collect. This is the case, for example, with Bacillus lichenformis, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis or Nocardia asteroids.
Le procédé est réalisé selon les étapes suivantes :  The process is carried out according to the following steps:
1. Un embout de prélèvement est positionné sur un dispositif de prélèvement.  1. A sampling tip is positioned on a sampling device.
2. Une colonie bactérienne est prélevée sur un milieu de culture de type COS, à l'aide du dispositif de prélèvement en mettant en contact le moyen de prélèvement en matériau fibreux porté sur l'embout de prélèvement, avec la colonie.  2. A bacterial colony is taken on a culture medium COS type, using the sampling device by contacting the sampling means of fibrous material carried on the sampling tip, with the colony.
3. L'échantillon bactérien prélevé est déposé sur la plaque d'analyse MALDI-TOF, sur l'une des 48 positions prévues à cet effet, en mettant en contact le moyen de prélèvement portant l'échantillon bactérienne avec la plaque MALDI-TOF, en exerçant une pression et en étalant l'échantillon. La pression exercée sur le matériau fibreux du moyen de prélèvement permet de retenir l'excès d'échantillon sur ledit matériau fibreux. Il est possible de réaliser des dépôts successifs sur différentes positions de la plaque d'analyse dans le cas où l'on souhaite répliquer l'analyse. Ces autres dépôts peuvent se faire avec le même embout.  3. The bacterial sample taken is deposited on the MALDI-TOF analysis plate, in one of the 48 positions provided for this purpose, by putting the collection means carrying the bacterial sample in contact with the MALDI-TOF plate. , exerting pressure and spreading the sample. The pressure exerted on the fibrous material of the sampling means makes it possible to retain the excess sample on said fibrous material. It is possible to make successive deposits on different positions of the analysis plate in the case where it is desired to replicate the analysis. These other deposits can be done with the same tip.
4. Une fois l'ensemble des dépôts réalisé, l'embout de prélèvement est éjecté dans une poubelle en exerçant une pression sur le bouton poussoir, tel que décrit supra.  4. Once all the deposits have been made, the sampling tip is ejected into a bin by exerting pressure on the push button, as described above.
5. 1 de matrice (acide alpha cyano 4-hydroxycinnamique prêt à l'emploi, bioMérieux référence 411071) est déposé sur chaque dépôt de matière biologique, à l'aide d'une micropipette. 5. 1 matrix (alpha cyano 4-hydroxycinnamic acid ready-to-use, bioMérieux reference 411071) is deposited on each deposit of biological material, using a micropipette.
6. Les étapes 1 à 5 sont renouvelées pour chaque colonie que l'on souhaite analyser. 7. Le dépôt d'une souche d'E. coli ATCC 8739, utilisée comme calibrant et contrôle positif, est également réalisé conformément aux étapes 1 à 5. 6. Steps 1 to 5 are repeated for each colony that is to be analyzed. 7. The deposit of a strain of E. coli ATCC 8739, used as calibrator and positive control, is also performed according to steps 1 to 5.
8. La plaque d'analyse est stockée le temps nécessaire au séchage de la matrice. 8. The analysis plate is stored for the time necessary to dry the matrix.
9. Une fois la plaque entièrement sèche, celle-ci est introduite dans le spectromètre de masse MALDI-TOF VITEK® MS, commercialisé par la demanderesse, l'acquisition des spectres de masse est réalisée. 9. Once the plate is completely dry, it is introduced into the MALDI-TOF VITEK® MS mass spectrometer, marketed by the applicant, the acquisition of the mass spectra is carried out.
10. L'identification des microorganismes est obtenue par analyse des spectres à l'aide du système expert et de la base de données VITEK® MS.  10. The identification of microorganisms is obtained by spectral analysis using the expert system and the VITEK® MS database.
L'analyse des mêmes colonies bactériennes est réalisée en mettant en œuvre le procédé traditionnel de préparation de plaque d'analyse MALDI-TOF mettant en œuvre une œse et bien connu de l'homme du métier. The analysis of the same bacterial colonies is carried out by implementing the traditional method of preparation of MALDI-TOF analysis plate implementing an eye and well known to those skilled in the art.
Les résultats obtenus avec les deux procédés de préparation de plaque d'analyse sont regroupés dans le TABLEAU 1 et comparés.  The results obtained with the two methods of preparing the analysis plate are grouped in TABLE 1 and compared.
Le symbole « ^ » signifie que le spectre est de bonne qualité et a permis l'identification de l'espèce attendue.  The symbol "^" means that the spectrum is of good quality and has allowed the identification of the expected species.
Le symbole « X » signifie que le spectre n'est pas de qualité suffisante pour pemettre l'identification de l'espèce.  The symbol "X" means that the spectrum is not of sufficient quality to allow identification of the species.
Protocole de référence Protocole utilisant leProtocol of reference Protocol using the
Espèce Species
utilisant une oese dispositif selon l'invention using a device according to the invention
B. lichenformis B. lichenformis
X ✓  X ✓
(souche API 0608016)  (strain API 0608016)
E. aerogenes  E. aerogenes
✓  ✓
(souche ATCC 13048)  (strain ATCC 13048)
E. coli  E. coli
X ✓  X ✓
(souche ATCC 25922)  (ATCC strain 25922)
E. faecalis  E. faecalis
✓ ✓  ✓ ✓
(souche API 1006023)  (strain API 1006023)
K. oxytoca  K. oxytoca
X ✓  X ✓
(souche API 1006024)  (strain API 1006024)
K. pneumoniae  K. pneumoniae
X ✓  X ✓
(souche ATCC 13883)  (strain ATCC 13883)
K. pneumoniae ssp ozaenae  K. pneumoniae ssp ozaenae
X ✓  X ✓
(souche API 1006025)  (strain API 1006025)
N. astéroïdes ✓ (souche API 1201096) N. asteroids ✓ (API strain 1201096)
N. farcinica  N. farcinica
X  X
(souche API 1201094)  (API strain 1201094)
P aeruginosa  P aeruginosa
✓  ✓
(souche ATCC 27853)  (strain ATCC 27853)
P. mirabilis  P. mirabilis
X ✓  X ✓
(souche ATCC 12453)  (strain ATCC 12453)
S. aureus  S. aureus
✓  ✓
(souche ATCC 29213)  (strain ATCC 29213)
S. epidermidis  S. epidermidis
✓  ✓
(souche ATCC 12228)  (strain ATCC 12228)
Temps nécessaire au  Time required
prélèvement et au dépôt 16 minutes 12 minutes  collection and deposit 16 minutes 12 minutes
des échantillons  some samples
TABLEAU 1 TABLE 1
Il ressort de l'analyse du tableau 1 qu'en utilisant le protocole mettant en œuvre le dispositif de prélèvement selon l'invention, toutes les espèces analysées sont correctement identifiées en spectrométrie de masse avec le VITEK® MS. It emerges from the analysis of Table 1 that using the protocol implementing the sampling device according to the invention, all the species analyzed are correctly identified in mass spectrometry with VITEK® MS.
Par comparaison, avec le protocole traditionnel mettant en œuvre une œse pour prélever les colonies bactériennes, seules 6 espèces sur 13 analysées sont correctement identifiées. Parmi les espèces non identifiées, une majorité sont celles connues pour former des colonies difficiles à manipuler.  By comparison, with the traditional protocol implementing an assay to collect bacterial colonies, only 6 out of 13 species analyzed are correctly identified. Among the unidentified species, a majority are those known to form colonies difficult to handle.
De façon particulièrement avantageuse, le procédé de l'invention permet donc de prélever et de déposer des espèces bactériennes formant des colonies avec une consistance atypique. Ainsi, il est possible d'obtenir facilement d'excellent résultats d'identification par spectrométrie de masse MALDI-TOF pour des espèces pulvérulentes et incrustantes comme B. lichenformis ou N. farcinica, des espèces gluantes comme K. pneumoniae et des espèces diffusant sur la gélose comme P. mirabilis.  In a particularly advantageous manner, the method of the invention thus makes it possible to collect and deposit bacterial species forming colonies with an atypical consistency. Thus, it is possible to easily obtain excellent identification results by MALDI-TOF mass spectrometry for powdery and encrusting species such as B. lichenformis or N. farcinica, gooey species such as K. pneumoniae and species diffusing on agar as P. mirabilis.
On constate par ailleurs que le temps nécessaire au dépôt de 48 échantillons est plus court avec le dispositif de prélèvement selon l'invention (12 min) qu'avec une œse (16 min). Ainsi le procédé de la présente invention est plus ergonomique, plus facile à mettre en œuvre, plus rapide et permet d'obtenir de meilleurs résultats que le procédé de référence de l'art antérieur. Exemple 2 : Comparaison de la performance d'identification des différentes espèces bactériennes par analyse en spectrométrie de masse, avec différents matériaux fibreux It is also noted that the time required for depositing 48 samples is shorter with the sampling device according to the invention (12 min) than with a minute (16 min). Thus the method of the present invention is more ergonomic, easier to implement, faster and provides better results than the reference method of the prior art. Example 2 Comparison of the Identification Performance of the Different Bacterial Species by Mass Spectrometry Analysis with Different Fibrous Materials
Dans cet exemple, plusieurs matériaux fibreux présentant des porosités différentes ont été testés, notamment dans leur capacité à permettre un prélèvement efficace de matière biologique provenant de colonies de différentes espèces bactériennes ; mais également dans leur capacité à réaliser un dépôt homogène sur plaque d'analyse MALDI-TOF. En effet, la performance d'identification des espèces bactériennes en spectrométrie de masse MALDI- TOF est directement liée à la qualité du dépôt de matière biologique sur la plaque d'analyse que ce soit en quantité de matière ou en homogénéité du dépôt. In this example, several fibrous materials having different porosities have been tested, in particular in their ability to allow efficient removal of biological material from colonies of different bacterial species; but also in their ability to achieve homogeneous deposition on MALDI-TOF analysis plate. In fact, the identification performance of bacterial species in MALDI-TOF mass spectrometry is directly related to the quality of the deposition of biological material on the analysis plate, whether in quantity of material or homogeneity of the deposit.
Les différentes espèces ont donc fait l'objet d'une analyse en spectrométrie de masse MALDI-TOF afin de réaliser leur identification.  The different species were therefore analyzed in MALDI-TOF mass spectrometry in order to carry out their identification.
Le protocole d'analyse est celui décrit à l'exemple 1, incluant le dispositif de prélèvement.  The analysis protocol is that described in Example 1, including the sampling device.
Les matériaux testés sont présentés dans le TABLEAU 2 ci-dessous The tested materials are shown in TABLE 2 below
TABLEAU 2 Dans le TABLEAU 2, sont indiquées les dimensions des échantillons de matériaux utilisés. Par ailleurs, les valeurs permettant de calculer la porosité, conformément à la méthode indiquée supra, ont également été indiquées. TABLE 2 In TABLE 2, the dimensions of the samples of materials used are indicated. In addition, the values for calculating the porosity, in accordance with the method indicated above, have also been indicated.
Le matériau PSU892 est un matériau obtenu à partir de fibres bicomposants, constituées d'une enveloppe en polytéréphtalate d'éthylène et d'un cœur en polyester. Un tel matériau est commercialisé par la société POREX®. Il est par ailleurs décrit dans la demande de brevet WO-A-03/080904. The material PSU892 is a material obtained from two-component fibers, consisting of a polyethylene terephthalate envelope and a polyester core. Such a material is marketed by the company POREX®. It is furthermore described in the patent application WO-A-03/080904.
Le matériau XA-20521-PS est un matériau à partir de polyéthylène. Un tel matériau est commercialisé par la société POREX®, sous la dénomination commerciale NIBS. XA-20521-PS is a material made from polyethylene. Such a material is marketed by POREX® under the trade name NIBS.
Afin de réaliser les essais, trois espèces bactériennes différentes ont été utilisées :In order to carry out the tests, three different bacterial species were used:
• Staphylococcus epidermidis (souche ATCC 12228) • Staphylococcus epidermidis (strain ATCC 12228)
• Klebsiella pneumoniae (souche ATCC 13883)  • Klebsiella pneumoniae (strain ATCC 13883)
• Escherichia coli (souche ATCC 25922)  Escherichia coli (strain ATCC 25922)
Ces espèces ont été ensemencées chacune, sur une milieu de culture gélosé Columbia contenant 5% de sang de mouton (COS), commercialisée par la demanderesse sous la référence 43041. These species were each seeded on a Columbia agar culture medium containing 5% sheep blood (COS), marketed by the Applicant under the reference 43041.
Pour chaque espèce, une colonie est prélevée avec le dispositif de prélèvement selon l'invention et quatre dépôts sont réalisés sur quatre positions contiguës de la plaque d'analyse MALDI-TOF. For each species, a colony is taken with the sampling device according to the invention and four deposits are made at four contiguous positions of the MALDI-TOF analysis plate.
Les résultats sont présentés dans le TABLEAU 3 ci-dessous : The results are presented in TABLE 3 below:
Résultat Pourcentage Result Percent
Matériau Espèce  Material Species
d'analyse d'identification  identification analysis
100  100
Staphylococcus 100  Staphylococcus 100
PSU 892 Aureus 100 100%  PSU 892 Aureus 100 100%
100  100
Klebsiella 99.99 pneumoniae 99.99 Klebsiella 99.99 pneumoniae 99.99
99.99  99.99
99.99  99.99
99.99  99.99
Escherichia coli 99.99  Escherichia coli 99.99
89.43  89.43
95.14  95.14
99.99  99.99
Staphylococcus 99.99  Staphylococcus 99.99
Aureus 99.99  Aureus 99.99
99.99  99.99
99.99  99.99
Klebsiella  Klebsiella
Coton 99.99 100%  Cotton 99.99 100%
pneumoniae 99.99  pneumoniae 99.99
99.99  99.99
99.48  99.48
Escherichia coli 98.41  Escherichia coli 98.41
99.76  99.76
99.91  99.91
99.99  99.99
Staphylococcus 99.99  Staphylococcus 99.99
Aureus 99.99  Aureus 99.99
99.99  99.99
XA- 99.99  XA- 99.99
Klebsiella  Klebsiella
20521- 99.99 83, 33%  20521- 99.99 83, 33%
pneumoniae 99.99  pneumoniae 99.99
PS  PS
99.99  99.99
- -
Escherichia coli 97.53 Escherichia coli 97.53
- -
80.23 80.23
TABLEAU 3 TABLE 3
On constate que pour les matériaux présentant une valeur élevée de porosité (supérieure à 70%), les performances d'identification sont excellentes, dans la mesure où l'ensemble des espèces sont correctement identifiées. C'est le cas avec le coton ou le matériau PSU 892.  It is noted that for the materials having a high value of porosity (greater than 70%), the identification performances are excellent, insofar as all the species are correctly identified. This is the case with cotton or PSU 892 material.
Par contre, lorsqu'on utilise des matériaux présentant de plus faibles valeurs de porosité, les performances d'identification se trouvent impactées. Ainsi, avec le matériau XA-20521-PS qui a porosité de 39%, on constate que deux des quatre dépôts d' Escherichia coli n'ont pas permis l'identification de cette bactérie. Il ressort ainsi un taux d'identification de seulement 83,3%.  On the other hand, when materials with lower porosity values are used, the identification performance is affected. Thus, with the material XA-20521-PS which has porosity of 39%, it is found that two of the four deposits of Escherichia coli did not allow the identification of this bacterium. This shows an identification rate of only 83.3%.

Claims

REVENDICATIONS
1. Embout apte à être emmanché sur le corps d'un dispositif de prélèvement, manuel ou automatisé, de matière biologique d'origine microbienne, comprenant : 1. Tip capable of being fitted onto the body of a device for sampling, manual or automated, biological material of microbial origin, comprising:
a) une extrémité libre distale comprenant un moyen de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne, a) a free distal end comprising a means for sampling biological material of microbial origin,
b) une extrémité libre proximale destinée à entrer en contact avec le corps dudit dispositif de prélèvement et permettre la fixation dudit embout sur ledit corps, b) a proximal free end intended to come into contact with the body of said sampling device and allow said tip to be fixed on said body,
ledit embout étant caractérisé en ce que toute ou partie de l'extrémité libre distale est constituée d'un matériau fibreux présentant une porosité au moins égale à 30 %. said tip being characterized in that all or part of the distal free end is made of a fibrous material having a porosity at least equal to 30%.
2. Embout selon la revendication 1, étant constitué entièrement d'un matériau fibreux présentant une porosité au moins égale à 30 %. 2. Tip according to claim 1, being made entirely of a fibrous material having a porosity at least equal to 30%.
3. Embout selon la revendication 1 ou 2, dans lequel le matériau fibreux présente une porosité supérieure à 50%, préférentiellement supérieure à 70% 3. End piece according to claim 1 or 2, in which the fibrous material has a porosity greater than 50%, preferably greater than 70%
4. Embout selon l'une des revendications précédentes, dans lequel le matériau fibreux est pris dans le groupe comprenant : polyesters, polyéthylène, polytéréphtalate d'éthylène (PET), copolymère de PET et polyétylène, copolymère de PET/PET polyamide, coton. 4. Tip according to one of the preceding claims, in which the fibrous material is taken from the group comprising: polyesters, polyethylene, polyethylene terephthalate (PET), copolymer of PET and polyethylene, copolymer of PET/PET polyamide, cotton.
5. Embout selon l'une des revendications précédentes, présentant une forme globale sensiblement conique ou tronconique. 5. End piece according to one of the preceding claims, having a substantially conical or frustoconical overall shape.
6. Embout selon l'une des revendications précédentes, dans lequel le moyen de prélèvement est de forme globale cylindrique, tronconique ou sphérique. 6. Tip according to one of the preceding claims, in which the sampling means is of overall cylindrical, frustoconical or spherical shape.
7. Dispositif de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne comprenant : • un embout selon l'une des revendications 1 à 6 7. Device for sampling biological material of microbial origin comprising: • a tip according to one of claims 1 to 6
• un corps comportant au moins : • a body comprising at least:
o une partie proximale servant au moins partiellement de zone de o a proximal part serving at least partially as a zone of
préhension dudit dispositif et gripping said device and
o une partie distale présentant une extrémité libre au bout de laquelle est fixé ledit embout. o a distal part having a free end at the end of which said tip is fixed.
8. Dispositif selon la revendication précédente, comprenant en outre un système d'éjection de l'embout. 8. Device according to the preceding claim, further comprising a tip ejection system.
9. Dispositif selon la revendication précédente, dans lequel le système d'éjection comporte une tige positionnée à l'intérieur dudit corps et mobile en translation. 9. Device according to the preceding claim, wherein the ejection system comprises a rod positioned inside said body and movable in translation.
10. Dispositif selon la revendication précédente, dans lequel ladite tige est mobile en translation au moyen d'un bouton poussoir. 10. Device according to the preceding claim, wherein said rod is movable in translation by means of a push button.
11. Procédé de prélèvement de matière biologique d'origine microbienne comprenant les étapes suivantes : 11. Process for sampling biological material of microbial origin comprising the following steps:
a) Positionner un embout selon la revendication 1 à 6 sur la partie distale du dispositif de prélèvement selon l'une des revendications 7 ou 8, b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité d'une colonie de matière biologique d'origine microbienne présente sur un milieu de culture afin de mettre en contact le moyen de prélèvement dudit embout avec la matière biologique, a) Position a tip according to claim 1 to 6 on the distal part of the sampling device according to one of claims 7 or 8, b) Position the sampling device near a colony of biological material of microbial origin present on a culture medium in order to bring the sampling means of said tip into contact with the biological material,
c) Prélever tout ou partie de la matière biologique à l'aide du dispositif de prélèvement, de sorte que la matière biologique prélevée soit solidaire du moyen de prélèvement. c) Collect all or part of the biological material using the sampling device, so that the biological material collected is attached to the sampling means.
12. Procédé de préparation d'une plaque d'analyse pour une analyse microbiologique en spectrométrie de masse de type MALDI-TOF à partir d'une échantillon de matière biologique comprenant les étapes suivantes : a) Positionner un embout selon la revendication 1 à 5 sur la partie distale du dispositif de prélèvement selon la revendication 6 ou 7, 12. Process for preparing an analysis plate for microbiological analysis in MALDI-TOF type mass spectrometry from a sample of biological material comprising the following steps: a) Position a tip according to claim 1 to 5 on the distal part of the sampling device according to claim 6 or 7,
b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité d'une colonie de matière biologique d'origine microbienne présente sur un milieu de culture afin de mettre en contact le moyen de prélèvement de l'embout avec la matière biologique, b) Position the sampling device near a colony of biological material of microbial origin present on a culture medium in order to bring the sampling means of the tip into contact with the biological material,
c) Prélever tout ou partie de la matière biologique à l'aide du dispositif de prélèvement, de sorte que la matière biologique prélevée soit solidaire du moyen de prélèvement, c) Collect all or part of the biological material using the sampling device, so that the biological material collected is attached to the sampling means,
d) Déposer de manière uniforme la matière biologique prélevée sur au moins une zone d'analyse d'une plaque d'analyse de spectrométrie de masse de type MALDI-TOF, par mise en contact du moyen de prélèvement avec la surface de ladite au moins une zone d'analyse. d) Uniformly deposit the biological material sampled on at least one analysis zone of a MALDI-TOF type mass spectrometry analysis plate, by bringing the sampling means into contact with the surface of said at least an analysis area.
13. Procédé d'isolement de matière biologique d'origine microbienne sur un milieu de culture gélosé, comprenant les étapes suivantes : 13. Process for isolating biological material of microbial origin on an agar culture medium, comprising the following steps:
a) obtenir un échantillon de matière biologique en contact avec le moyen de prélèvement de l'embout d'un dispositif de prélèvement selon la revendication 6 ou 7, a) obtain a sample of biological material in contact with the sampling means of the tip of a sampling device according to claim 6 or 7,
b) Positionner le dispositif de prélèvement à proximité de la surface du milieu de culture gélosé, de sorte que le moyen de prélèvement soit en contact avec ladite surface, b) Position the sampling device close to the surface of the agar culture medium, so that the sampling means is in contact with said surface,
c) Déplacer le dispositif de prélèvement de sorte que le moyen de prélèvement se déplace sur la surface du milieu de culture, tout en restant en contact avec celle-ci, libérant ainsi tout ou partie de l'échantillon de matière biologique en contact avec ledit moyen de prélèvement sur ladite surface du milieu de culture. c) Move the sampling device so that the sampling means moves on the surface of the culture medium, while remaining in contact with it, thus releasing all or part of the sample of biological material in contact with said sampling means from said surface of the culture medium.
14. Procédé de préparation selon la revendication 11, 12 ou 13, comportant en outre une étape ultime d'éjection de l'embout de prélèvement. 14. Preparation method according to claim 11, 12 or 13, further comprising a final step of ejection of the sampling tip.
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