Vorrichtung zum Pipettieren Device for pipetting
Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung nach dem Oberbegriff des Anspruches 1.The invention relates to a device according to the preamble of claim 1.
Vorrichtungen zum Pipettieren mittels einer Pipette werden häufig in sehr fein dosierender Ausführung benötigt, wobei die Ausbringöffnung der Pipette sehr eng sein muss. Solche Vorrichtungen werden benötigt zum Beispiel, um sehr kleine Flüssigkeitsmengen freifallend in ein Reagenzglas zu pipettieren oder bei¬ spielsweise auch zum Aufbringen sehr kleiner Flüssigkeitsmengen auf Träger¬ platten zur Durchführung chemischer, insbesondere biochemischer Reaktionen oder beispielsweise zu Mikroskopierzwecken.Devices for pipetting by means of a pipette are often required in very finely dosing design, wherein the discharge opening of the pipette must be very tight. Such devices are required, for example, to free-pipetting very small quantities of liquid into a test tube or spielsweise also for applying very small amounts of liquid Träger¬ plates for carrying out chemical, especially biochemical reactions or, for example for microscopy purposes.
Ein weiteres Beispiel sind Auftragvorrichtungen für Impflösungen auf Nährbö¬ den. Diese dienen zum Nachweis von in der Impflösung vorhandenen Keimen, wie z.B. Bakterien oder Pilzen, durch Vermehrung mittels Inkubation. Dazu muß die Impflösung in definierter Auftragstärke auf die Oberfläche eines Nährbodens, üblicherweise in einer Petrischale, aufgebracht werden. Die Ausbringöffnung der zum Auftragen verwendeten Pipette muß dazu sehr eng sein.
Die US 5,294,325 A zeigt in Fig. 1 eine Pipettiervorrichtung, bei der eine Pipette in Form einer Spritzennadel an eine Druckerzeugungseinrichtung in Form einer Kolbenspritze ansetzbar ist. Die auszugebende Flüssigkeit wird bei dieser Kon¬ struktion in der Kolbenspritze aufgenommen. Dies hat die nachteilige Folge, dass bei Abgabe kontaminierender Flüssigkeiten, die nicht von einer Probe zur näch¬ sten verschleppt werden dürfen, nach jedem Gebrauch nicht nur die Pipette, son¬ dern auch die Druckerzeugungseinrichtung entsorgt werden muss.Another example is applicators for Impflösungen on Nährbö¬ the. These are used to detect germs present in the seed, such as bacteria or fungi, by propagation by incubation. For this purpose, the seed solution must be applied to the surface of a nutrient medium, usually in a Petri dish, in a defined application thickness. The discharge opening of the pipette used for application must be very narrow. The US Pat. No. 5,294,325 A shows in FIG. 1 a pipetting device in which a pipette in the form of a syringe needle can be attached to a pressure-generating device in the form of a syringe. The liquid to be dispensed is taken up in the syringe in this construction. This has the disadvantageous consequence that, upon delivery of contaminating liquids which may not be carried off by a sample to the next, not only the pipette but also the pressure-generating device must be disposed of after each use.
Bei gattungsgemäßen Vorrichtungen gemäß der heute üblichen Pipettiertechnik nimmt die Pipette die gesamte abzugebende Flüssigkeit auf, so dass die Flüssig¬ keit nicht in Kontakt mit der Druckerzeugungseinrichtung gelangt. Daher kann die Pipette als Einwegartikel ausgebildet sein, während die nichtkontaminierte Druckerzeugungseinrichtung wiederverwendet wird.In generic devices according to the pipetting technique customary today, the pipette absorbs the entire liquid to be dispensed, so that the liquid does not come into contact with the pressure-generating device. Therefore, the pipette may be formed as a disposable while the non-contaminated pressure generating means is reused.
Bekannte gattungsgemäße Vorrichtungen weisen eine einteilige Pipette auf. Sie werden in üblicher Weise durch Ansaugen befüllt, was durch die enge Ausbrin¬ göffnung sehr viel Zeit benötigt. Dies ist störend insbesondere bei Reihenunter¬ suchungen, bei denen Pipetten sehr schnell gefüllt werden sollen.Known generic devices have a one-piece pipette. They are filled in the usual way by suction, which requires a lot of time due to the narrow Ausbrin¬ göffnung. This is disturbing especially in Reihenunter¬ searches in which pipettes are to be filled very quickly.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, eine gattungsgemäße Vorrichtung mit höherer Arbeitsgeschwindigkeit auszubilden.The object of the present invention is to design a generic device with a higher operating speed.
Dies wird mit den Merkmalen des Anspruches 1 sowie mit dem Verfahren nach Anspruch 5 gelöst.This is achieved with the features of claim 1 and with the method according to claim 5.
Erfindungsgemäß ist ein Endstück der Pipette mit der Ausbringöffnung an eine Kupplungsöffnung eines Hauptteiles der Pipette ankuppelbar. Im angekuppelten Zustand ist die Pipette in üblicher Weise zum Aufbringen von Flüssigkeit ver¬ wendbar. Im abgekuppelten Zustand kann das Hauptteil der Pipette durch die
sehr viel größere Kupplungsöffnung sehr schnell durch das übliche Ansaugen befüllt werden. Es läßt sich dadurch ein erheblich größeres Arbeitstempo errei¬ chen, insbesondere bei Massenuntersuchungen.According to the invention, an end piece of the pipette with the discharge opening can be coupled to a coupling opening of a main part of the pipette. When coupled, the pipette can be used in a conventional manner for applying liquid. In the uncoupled state, the main part of the pipette through the much larger coupling opening can be filled very quickly by the usual suction. This makes it possible to achieve a considerably greater speed of operation, especially in mass examinations.
Die Kupplung kann auf weitgehend beliebige Weise, beispielsweise als Schraub¬ kupplung oder dergleichen, ausgebildet sein. Vorteilhaft sind jedoch die Merk¬ male des Anspruches 2 vorgesehen. Konussteckkupplungen bilden eine auf die¬ sem technischen Gebiet weitgehend übliche einfache und präzise Kupplung.The coupling can be designed in a largely arbitrary manner, for example as a screw coupling or the like. Advantageously, however, the features of claim 2 are provided. Conical plug couplings form a simple and precise coupling which is largely customary in this technical field.
Das Endstück der Pipette kann in bekannter Weise starr ausgebildet sein. Vorteil¬ haft ist es jedoch nach Anspruch 3 langgestreckt und biegeflexibel ausgebildet. Dadurch kann es der Oberfläche eines Nährbodens berührend angelegt werden, wobei seine Flexibilität Beschädigungen und Abstandsänderungen ausgleicht. Dies ist insbesondere von Vorteil bei Vorrichtungen, bei denen zum linienweisen Auftragen die Pipette gegenüber der Oberfläche eines Nährbodens relativ bewegt wird. Es ergibt sich eine höhere Auftragpräzision und eine geringere Beschädi¬ gungsgefahr für die Oberfläche des Nährbodens.The end of the pipette may be rigid in a known manner. Advantageously, however, according to claim 3, it is elongated and flexurally flexible. As a result, it can be applied touching the surface of a nutrient medium, its flexibility compensating for damage and changes in distance. This is particularly advantageous in devices in which the pipette relative to the surface of a nutrient medium is relatively moved for line-wise application. This results in a higher application precision and a lower risk of damage to the surface of the culture medium.
Ein biegeflexibles Endstück kann z.B. in für Pipetten üblicher Weise konisch spitz zulaufend ausgebildet sein, ist vorzugsweise jedoch gemäß Anspruch 4 aus¬ gebildet. Die Verwendung eines Schlauchstückes als Endstück ermöglicht eine besonders einfache Konstruktion, bei der durch Wahl des Schlauchstückes die Elastizitätseigenschaften und die Größe der Ausbringöffnung präzise wählbar sind.A flexible end piece may e.g. in tapered tapered manner for pipettes, however, is preferably formed aus¬ according to claim 4. The use of a piece of tubing as an end piece allows a particularly simple construction in which the elasticity properties and the size of the discharge opening can be precisely selected by selecting the piece of tubing.
Das Verfahren nach Anspruch 5 beschreibt die vorteilhafte Verwendung der er¬ findungsgemäßen Vorrichtung.
In den Zeichnungen ist die Erfindung beispielsweise und schematisch dargestellt. Es zeigenThe method according to claim 5 describes the advantageous use of the device according to the invention. In the drawings, the invention is shown for example and schematically. Show it
Fig. 1 eine Draufsicht auf eine erfindungsgemäße Vorrichtung mit Nährbo¬ den und Pipette;1 is a plan view of a device according to the invention with Nährbo¬ the and pipette.
Fig. 2 einen Schnitt nach Linie 2-2 in Fig. 1;Figure 2 is a section along line 2-2 in Fig. 1.
Fig. 3 eine Seitenansicht eines Racks mit Pipettenhauptteilen vor deren Ent¬ nahme;3 shows a side view of a rack with pipette main parts before their removal;
Fig. 4 die Seitenansicht eines entnommenen Pipettenhauptteiles bei seiner Befüllung;4 shows the side view of a pipette main part removed during its filling;
Fig. 5 die Seitenansicht eines Racks mit Pipettenendstücken und5 shows the side view of a rack with Pipettenendstücken and
Fig. 6 die Seitenansicht einer komplett gehaltenen Pipette.Fig. 6 is a side view of a completely held pipette.
Die Fig. 1 und 2 zeigen eine erfindungsgemäße Vorrichtung zur Auftragung einer Impflösung auf die Oberfläche 2 eines Nährbodens 1, der auf dem Boden 3 a einer Petrischale 3 angeordnet ist, welche aus ihrem Boden 3a und einem umlaufenden Rand 3b gebildet ist. Üblicherweise gehört zu einer solchen Petrischale 3 noch ein Deckel, der zum keimdichten Verschluß während der nachfolgenden Inkuba¬ tion dient.Figs. 1 and 2 show a device according to the invention for applying a Impflösung on the surface 2 of a nutrient medium 1, which is arranged on the bottom 3 a of a Petri dish 3, which is formed from its bottom 3a and a peripheral edge 3b. Usually, such a Petri dish 3 still includes a lid which serves for the germ-proof closure during the subsequent incubation.
Die Petrischale 3 steht mit ihrem Boden 3a auf einem Drehteller 4 eines im Übri¬ gen nicht dargestellten Antriebssystemes, mit dem die Petrischale 3 und der Nährboden 1 um eine lotrechte Achse 5 in Richtung des Pfeiles 6 antreibbar sind.
Auf die Oberfläche 2 des Nährbodens 1 soll Impflösung 7 aufgebracht werden, die in einer Pipette 8 bereitgehalten wird. Die Pipette 8 wird von ihrem einen En¬ de her über einen Anschlußschlauch 9 z.B. mit Luft druckbeaufschlagt und bringt an ihrem anderen Ende durch eine enge Ausbringöffnung 10 die Impflösung 7 in einer Linie 11 aus, die sich auf die Oberfläche 2 des Nährbodens 1 legt.The Petri dish 3 stands with its base 3a on a turntable 4 of a drive system, not shown in the drawing, with which the Petri dish 3 and the nutrient medium 1 can be driven about a vertical axis 5 in the direction of the arrow 6. Impflösung 7 is to be applied to the surface 2 of the culture medium 1, which is kept ready in a pipette 8. The pipette 8 is pressurized by its one end via a connection hose 9, for example with air, and brings at its other end through a narrow discharge opening 10, the Impflösung 7 in a line 11, which lays on the surface 2 of the culture medium 1.
Die Pipette 8 wird dabei von einem Haltearm 12 gehalten, der von einer nicht dargestellten Antriebsrichtung derart bewegt und eingestellt wird, daß er die Pipette 8 in definierter Höhenlage über der Oberfläche 2 des Nährbodens 1 hält und während der Umdrehung des Nährbodens 1 die Ausbringöffnung 10 in Richtung des Pfeiles 13 radial nach außen bewegt. Die auf der Oberfläche 2 des Nährbodens 1 aufgebrachte Linie 11 von Impflösung bildet sich daher, wie Fig.l zeigt, als Spirallinie aus.The pipette 8 is held by a holding arm 12 which is moved and adjusted by a drive direction, not shown, that he holds the pipette 8 in a defined height above the surface 2 of the culture medium 1 and during the rotation of the culture medium 1, the discharge opening 10 in Direction of the arrow 13 moves radially outward. The line 11 of seed solution applied to the surface 2 of the nutrient medium 1 therefore forms, as shown in FIG. 1, a spiral line.
Der Anschlußschlauch 9 ist an eine nicht dargestellte Druckerzeugungseinrich¬ tung angeschlossen, die für die Druckbeaufschlagung der Pipette zum Ausstoßen der Impflösung 7 sorgt. Der Ausstoß kann dabei variabel geregelt werden, z.B. so, daß die Linie 11 von einem Ende zum anderen Ende hin mit immer geringe¬ rem Auftrag ausgebildet wird, um die aufgebrachte Konzentration an Keimen zu verdünnen.The connection hose 9 is connected to a pressure generating device, not shown, which ensures the pressurization of the pipette for ejecting the injection solution 7. The output can be variably controlled, e.g. so that the line 11 is formed from one end to the other end with ever smaller order to dilute the applied concentration of germs.
Anstelle der in Fig. 1 dargestellten Ausbildung der Vorrichtung mit Drehantrieb für den Nährboden 1 und Linearvorschub für die Pipette 8 kann beispielsweise auch die Pipette 8 spiralförmig über den stillstehenden Nährboden 1 bewegt wer¬ den, oder es können durch entsprechende Antriebsausbildung andere Formen für die Linie 11, z.B. mehrere parallele gerade Linien, gewählt werden.Instead of the embodiment shown in Fig. 1 of the device with rotary drive for the culture medium 1 and linear feed for the pipette 8, for example, the pipette 8 spiral over the stationary culture medium 1 moves wer¬, or it can by appropriate drive training other forms for the line 11, eg several parallel straight lines can be chosen.
Die Pipette 8 weist einen Halter 14 auf, an dem der Haltearm 12 und der An¬ schlußschlauch 9 angreifen. Dieser Halter 14 kann auch als Pumpeinrichtung zur
Druckbeaufschlagung der Pipette 8 ausgebildet sein, wobei dann anstelle des An¬ schlußschlauches 9 elektrische Steuerleitungen zur Steuerung des Pumpvorgan¬ ges vorgesehen wären.The pipette 8 has a holder 14, on which the holding arm 12 and the An¬ closing hose 9 attack. This holder 14 can also be used as a pumping device for Be pressurized the pipette 8 may be formed, in which case would be provided instead of the An¬ circuit hose 9 electrical control lines for controlling the Pumpvorgan¬ ges.
Die in den Fig. 1 und 2 dargestellte Pipette 8 besteht im wesentlichen aus einem Hauptteil 15, das mit seinem größeren Innenvolumen die gesamte aufzubringende Menge an Impflösung 7 aufnehmen kann. Im Ausführungsbeispiel ist das Haupt¬ teil 15 über eine Konussteckkupplung üblicher Bauart mit dem Halter 14 kuppel¬ bar.The pipette 8 shown in FIGS. 1 and 2 consists essentially of a main part 15, which can accommodate with its larger internal volume, the entire amount applied to 7 Impflösung. In the exemplary embodiment, the main part 15 is couplable to the holder 14 via a conventional type cone plug coupling.
An dem dem Halter 14 gegenüberliegenden Ende ist das Hauptteil 15 über eine ebenfalls in üblicher Weise ausgebildete Konussteckkupplung mit einem End¬ stück 16 verbunden, welches aus einem Kupplungsstück 17 und einem Schlauch 18 besteht.At the end opposite the holder 14, the main part 15 is connected to an end piece 16 via a cone plug coupling, which is likewise designed in the usual way, and consists of a coupling piece 17 and a hose 18.
Mit dem Kupplungsstück 17 ist das Endstück an das Hauptteil 15 ankuppelbar, wobei dort das Hauptteil 15 eine Kupplungsöffnung 19 aufweist, die wesentlich größer ist als die sehr enge Ausbringöffnung 10 am Ende des Endstückes 16.With the coupling piece 17, the tail can be coupled to the main part 15, where there the main part 15 has a coupling opening 19 which is substantially larger than the very narrow discharge opening 10 at the end of the end piece 16th
In alternativer, nicht dargestellter Bauweise kann das Endstück 16 der Pipette 8 auch in üblicher konisch spitzer Form ausgebildet sein, soll dabei jedoch biege¬ flexibel sein, was beispielsweise durch geeignete Materialstärke oder Material¬ auswahl erreichbar wäre. Das Endstück kann auch einstückig mit dem Hauptteil 15 ausgebildet sein.In an alternative, not shown construction, the end piece 16 of the pipette 8 may also be formed in the usual conical pointed shape, but should be flexurally flexible, which could be achieved, for example, by suitable material thickness or material selection. The tail may also be formed integrally with the main part 15.
Durch die biegeflexible Ausbildung des Endstückes 16, die im dargestellten Aus¬ führungsbeispiel durch das dünne Schlauchstück 18 erreicht wird, kann, wie Fig. 2 zeigt, bei entsprechender Höhensteuerung mit dem Haltearm 12 die Pipette 8 in die in Fig. 2 dargestellte Lage gebracht werden. Dabei legt sich das Schlauch-
stück 18 im Bogen federnd der Oberfläche 2 des Nährbodens 1 an, so daß der Endbereich des Schlauchstückes 18 parallel zur Oberfläche des Nährbodens 1 liegt.As a result of the flexurally flexible design of the end piece 16, which is achieved in the illustrated embodiment by the thin tube piece 18, the pipette 8 can be brought into the position shown in FIG. 2, with the holding arm 12, as shown in FIG , In doing so, the hose piece 18 in the sheet resilient the surface 2 of the culture medium 1, so that the end portion of the tube piece 18 is parallel to the surface of the culture medium 1.
Wie Fig. 2 zeigt, ergibt sich daraus eine hochdefinierte Lage der Ausbringöff¬ nung 10 gegenüber der Oberfläche des Nährbodens 1. Treten während des An¬ triebes Höhenabweichungen auf, die beispielsweise durch ungenaue Bewegung des Haltearmes 12 entstehen können oder z.B. durch unterschiedliche Dicke des Nährbodens 1, so werden diese Höhenabweichungen in der Biegung des elasti¬ schen Schlauchstückes 18 federnd abgefangen, ohne daß sich dabei die Lage der Ausbringöffnung 10 gegenüber der Oberfläche des Nährbodens 1 verändert.As shown in FIG. 2, this results in a highly defined position of the dispensing opening 10 with respect to the surface of the culture medium 1. If height deviations occur during the drive, which may arise, for example, due to inaccurate movement of the holding arm 12 or e.g. by different thickness of the culture medium 1, these height deviations are intercepted resiliently in the bend of the elastic tube piece 18, without the position of the discharge opening 10 being changed relative to the surface of the culture medium 1.
Auch bei hoher Fahrgeschwindigkeit der Pipette 8 über der Oberfläche des Nähr¬ bodens 1 kommt es bei der dargestellten Konstruktion nicht zu Abweichungen der Aufbringung und auch nicht zu Verletzungen der empfindlichen Oberfläche des Nährbodens 1.Even at high speeds of the pipette 8 above the surface of the Nähr¬ soil 1 it comes in the illustrated construction not to deviations of the application and not to violations of the sensitive surface of the culture medium. 1
In der dargestellten Ausführungsform ist das Endstück 16 vom Hauptteil 15 der Pipette 8 abnehmbar, und zwar im dargestellten Ausführungsbeispiel mit einer Konuskupplung, an deren Stelle auch andere Kupplungsarten möglich sind.In the illustrated embodiment, the end piece 16 from the main part 15 of the pipette 8 is removable, in the illustrated embodiment with a cone clutch, in place of other types of coupling are possible.
Für Reihentests, bei denen sehr viele Impflösungen auf sehr viele Nährböden aufzutragen sind, kann daher ein in Fig. 3 dargestelltes Rack 20 verwendet wer¬ den, in dem mehrere leere Hauptteile 15 aufgestellt sind. Der Halter 14 der Pipette 18 kann mit dem Haltearm 12 in Position über das jeweils nächste Hauptteil 15 auf dem Rack 20 gebracht und nach Absenken mit diesem verkup¬ pelt werden.
Anschließend kann durch entsprechende Bewegung des Haltearmes 12 der Halter 14 mit daran gekuppeltem, noch leerem, Hauptteil 15, wie in Fig. 4 dargestellt, über ein Probegefäß 21 mit der nächsten zu verarbeitenden Impflösung 7 ge¬ bracht und abgesenkt werden, bis die Kupplungsöffnung 19 des Hauptteiles 15 eintaucht. Durch entsprechende Unterdruckbeaufschlagung über den Anschlu߬ schlauch 9 wird das Hauptteil 15 befüllt.For series tests in which a large number of seed solutions are to be applied to a large number of nutrient media, therefore, a rack 20 shown in FIG. 3 can be used, in which a plurality of empty main components 15 are set up. The holder 14 of the pipette 18 can be brought to the holding arm 12 in position on the respective next main part 15 on the rack 20 and verkup¬ pelt after lowering this. Subsequently, by appropriate movement of the holding arm 12, the holder 14 with coupled, still empty main body 15, as shown in FIG. 4, can be brought and lowered via a sample vessel 21 with the next injection solution 7 to be processed until the coupling opening 19 of the main part 15 dips. By appropriate negative pressure via the Anschlu߬ hose 9, the main part 15 is filled.
Im nächsten Schritt gemäß Fig. 5 wird das befüllte Hauptteil 15 durch entspre¬ chende Bewegung des Haltearmes 12 über ein Rack 22 mit darin bevorrateten Endstücken 16 gebracht und verkuppelt. Nach Wiederanheben des Haltearmes 12 befindet sich die komplett zusammengesteckte und befüllte Pipette 8 in Stellung gemäß Fig. 6 und kann nun durch entsprechende Höhen- und Winkelsteuerung über einer Petrischale 3 mit Nährboden 1 in Arbeitsstellung gemäß Fig. 1 und 2 gebracht werden.In the next step according to FIG. 5, the filled main part 15 is brought and coupled by corresponding movement of the holding arm 12 via a rack 22 with end pieces 16 stored therein. After lifting the holding arm 12 is the completely assembled and filled pipette 8 in the position shown in FIG. 6 and can now be brought by appropriate height and angle control on a Petri dish 3 with nutrient medium 1 in the working position shown in FIG. 1 and 2.
Im dargestellten Ausführungsbeispiel wird die Pipette 8 in einer in den Figuren 1 und 2 beschriebenen Vorrichtung zum Auftragen einer Impflösung auf die Ober¬ fläche 2 eines Nährbodens 1 eingesetzt. Die in Figur 6 dargestellte Pipette 8 kann jedoch auch zu anderen Zwecken verwendet werden.In the illustrated embodiment, the pipette 8 is used in a device described in FIGS. 1 and 2 for applying a seed solution to the surface 2 of a nutrient medium 1. However, the pipette 8 shown in Figure 6 can also be used for other purposes.
Sie kann beispielsweise zum Pipettieren sehr kleiner Flüssigkeitsmengen in Rea¬ genzgefäße, z.B. in Mikrotiterplatten, verwendet werden. Sie kann ferner ver¬ wendet werden, um kleine Flüssigkeitsmengen auf Trägerplatten aufzubringen, z.B. sogenannte Spots für anschließende biochemische Reaktionen. Außerdem kann sie verwendet werden, um beispielsweise kleine Flüssigkeitsmengen zu Mi¬ kroskopierzwecken auf Objektträger aufzubringen. Auch weitere Anwendungs¬ zwecke sind möglich, bei denen sehr kleine Flüssigkeitsmengen zu pipettieren sind und hohe Arbeitsgeschwindigkeiten gefordert werden.
Bei allen solchen Anwendungsfällen ist es nicht erforderlich, daß die Pipetten¬ spitze, wie in den Figuren dargestellt, mit einem langen dünnen Endstück 16 ver¬ sehen ist. Die Pipettenspitze kann auch kurz sein, sofern nur die Austragöffnung 10 sehr eng ist.
It can be used for example for pipetting very small quantities of liquid in reagent vessels, for example in microtiter plates. It can also be used to apply small quantities of liquid to carrier plates, for example so-called spots for subsequent biochemical reactions. In addition, it can be used, for example, to apply small amounts of liquid to microscope slides for microscopy purposes. Other Anwendungs¬ purposes are possible in which very small amounts of liquid to be pipetted and high operating speeds are required. In all such applications, it is not necessary that the pipette tip, as shown in the figures, be seen ver¬ with a long thin end 16. The pipette tip can also be short, provided that only the discharge opening 10 is very narrow.