EP1526896A1 - Antibakterielle ester-makrozyklen - Google Patents

Antibakterielle ester-makrozyklen

Info

Publication number
EP1526896A1
EP1526896A1 EP03766214A EP03766214A EP1526896A1 EP 1526896 A1 EP1526896 A1 EP 1526896A1 EP 03766214 A EP03766214 A EP 03766214A EP 03766214 A EP03766214 A EP 03766214A EP 1526896 A1 EP1526896 A1 EP 1526896A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
hydrogen
alkyl
substituents
amino
cycloalkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP03766214A
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Thomas Lampe
Isabelle Adelt
Dieter Beyer
Nina Brunner
Rainer Endermann
Kerstin Ehlert
Hein-Peter Kroll
Franz Von Nussbaum
Siegfried Raddatz
Joachim Rudolph
Guido Schiffer
Andreas Schumacher
Yolanda Cancho-Grande
Martin Michels
Stefan Weigand
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bayer AG
Original Assignee
Bayer Healthcare AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Healthcare AG filed Critical Bayer Healthcare AG
Publication of EP1526896A1 publication Critical patent/EP1526896A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the invention relates to antibacterial ester macrocycles and processes for their preparation and their use for the manufacture of medicaments for the treatment and / or prophylaxis of diseases, in particular bacterial infections.
  • biphenomycin B (R 1 , R 2 is hydrogen, R 3 ', R 4 , R 7 , R 8 and R 9 is hydrogen, R 3 is 3- Amino-2-hydroxy-prop-1-yl and free carboxyl instead of an ester group) are described as having antibacterial activity. Partial steps of the synthesis of biphenomycin B are in
  • the invention relates to compounds of the formula
  • R 1 is hydrogen, alkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, alkylcarbonyl,
  • R 1 can be substituted, apart from hydrogen, with 0, 1, 2 or 3 substituents R 1 "1 , the substituents R 1" 1 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, nitro, Cyano, amino, AlJ ylarnino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy and carboxyl, R is hydrogen or alkyl,
  • alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 2 "1 , the substituents R 2" 1 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, amino, alkylamino and dialkylamino,
  • R 1 and R 2 together with the nitrogen atom to which they are attached form a heterocycle which can be substituted with 0, 1 or 2 substituents
  • R 1 "2 where the substituents R 1" 2 are selected independently of one another from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl and aminocarbonyl,
  • R 3 is hydrogen, alkyl or the side group of an amino acid, wherein
  • Alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R " , the substituents R 3" 1 being selected independently of one another from the group consisting of trifluoromethyl, nitro, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, Heterocyclyl, hydroxy, alkoxy,
  • cycloalkyl, aryl, heteroaryl and heterocyclyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 3 "2 , the substituents R 3" 2 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl and amino,
  • R 3 ' is hydrogen, -CC 6 - alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 4 is hydrogen, -CC 6 - alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 5 is alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl or a hydroxy-functional amino acid residue, where R 5 can be substituted with
  • substituents R 5 "1 , the substituents R 5" 1 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, cyano, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl , Heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and
  • alkylamino and dialkylamino can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 5 "2 , the substituents R 5" 2 being selected independently of one another from the group consisting of hydroxyl, amino, alkoxy,
  • R 6 is hydrogen, Ci-C 6 alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 7 is hydrogen, -C ⁇ alkyl, alkylcarbonyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R is hydrogen or Ci-C ö alkyl
  • Compounds according to the invention are the compounds of the formula (I) and their salts, solvates and solvates of the salts, the compounds of the formula (I 1 ) mentioned below and their salts, solvates and solvates of the salts and those of the formula (I) I) and or T) comprised compounds hereinafter referred to as exemplary embodiment (s) and their salts, solvates and solvates of the salts, insofar as they included the compounds mentioned below of formula (I) and / or (I ') are not already salts, solvates and solvates of the salts.
  • preferred salts are physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention.
  • Physiologically acceptable salts of compounds (I) include acid addition salts of mineral acids, carboxylic acids and sulfonic acids, e.g. Salts of hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, methanesulfonic acid, emansulfonic acid, toluenesulfonic acid, benzenesulfonic acid, naphthalenedisulfonic acid,
  • Physiologically acceptable salts of the compounds (I) also include salts of conventional bases, such as, for example and preferably, alkali metal salts (e.g. sodium and potassium
  • Potassium salts alkaline earth metal salts (eg calcium and magnesium salts) and ammonium salts, derived from ammonia or organic amines with 1 to 16 carbon atoms, such as, for example and preferably, emylamine, diemylarnine, triemyla in, ethyldiisopropylamine, monoethanolamine, the anolamine, triethanolamine, Dicyclohexylamine, dimethylaminoethanol, procaine, dibenzylamine, N-methylmorpholine, dihydroabietylamine, argfine, lysine, ylenm " amine and methylpiperidine.
  • alkaline earth metal salts eg calcium and magnesium salts
  • ammonium salts derived from ammonia or organic amines with 1 to 16 carbon atoms, such as, for example and preferably, emylamine, diemylarnine, triemyla in, ethyldiisopropyl
  • solvates are those forms of the compounds which form a complex in the solid or liquid state by coordination with solvent molecules. Hydrates are a special form of solvate, in which coordination takes place with water. In the context of the present invention, unless otherwise specified, the substituents have the following meaning:
  • Alkyl and the alkyl parts in substituents such as alkoxy, mono- and dialkylamino,
  • Alkylsulfonyl include linear and branched alkyl, for example Ci-C 2 -, especially dC 6 - and -C-C 4 alkyl.
  • -Cg- alkyl includes methyl, ethyl, n- and i-propyl, n-, i-, sec- and tert-butyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl and hexyl.
  • C -C 4 alkyl includes methyl, ethyl, n- and i-propyl, n-, i-, sec- and tert-butyl.
  • alkylcarbonyl preferably represents a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 6 or 1 to 4 carbon atoms. Examples and preferably mentioned are: methylcarbonyl, ethylcarbonyl, n-propylcarbonyl, isopropylcarbonyl and t-butylcarbonyl.
  • Alkenyl comprises linear and branched C 2 -C 12 -, in particular C 2 -C 6 - and C 2 -C - alkenyl, such as vinyl, allyl, prop-1-en-1-yl, isopropenyl, but-1-enyl , But-2-enyl,
  • Buta-1,2-dienyl and buta-1,3-dienyl are buta-1,2-dienyl and buta-1,3-dienyl.
  • Alkynyl comprises linear and branched C 2 -C 12 -, in particular C 2 -C 6 - and C 2 -C 4 -
  • Alkynyl e.g. Ethynyl, propargyl (2-propynyl), 1-propynyl, but-1-ynyl, but-2-ynyl.
  • Cycloalkyl comprises polycyclic saturated hydrocarbon radicals with up to 14 carbon atoms, namely monocyclic C 3 -C 12 , preferably C 3 -C 8 alkyl, in particular C 3 -C 6 alkyl, such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl , Cyclooctyl, Cyclononyl, and polycyclic alkyl, ie preferably bicyclic and tricyclic, optionally spirocyclic C 7 -C 1 alkyl, such as, for example, bicyclo [2.2.1] -hept-l-yl, bicyclo [2.2.1] -he ⁇ t -2-yl, bicyclo [2.2.1] -hept-7-yl, Bicyclo [2.2.2] oct-2-yl, bicyclo [3.2.1] oct-2-yl, bicyclo [3.2.2] non-2-y
  • aryl stands for an aromatic radical having preferably 6 to 10 carbon atoms.
  • Preferred aryl radicals are phenyl and naphthyl.
  • alkoxy preferably represents a straight-chain or branched alkoxy radical, in particular having 1 to 6, 1 to 4 or 1 to 3 carbon atoms.
  • a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 3 carbon atoms is preferred. The following may be mentioned by way of example and preferably: methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, tert-butoxy, n-pentoxy and n-hexoxy.
  • alkoxycarbonyl preferably represents a straight-chain or branched alkoxy radical having 1 to 6 or 1 to 4 carbon atoms, which is linked via a carbonyl group.
  • a straight-chain or branched is preferred
  • Alkoxycarbonylrest with 1 to 4 carbon atoms The following may be mentioned as examples and preferably: methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, n-propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl and tert-butoxycarbonyl.
  • monoalkylamino (alkylarnino) stands for an amino
  • Group with a straight-chain or branched alkyl substituent which preferably has 1 to 6, 1 to 4 or 1 to 2 carbon atoms.
  • a straight-chain or branched monoall ⁇ lamino radical having 1 to 4 carbon atoms is preferred. Examples and preferably mentioned are: Me yla ino, emylamino, n-propylamino, isopropylamino, tert-butylamino, n-pentylamino and n-hexylamino.
  • dialallamino stands for an amino group with two identical or different straight-chain or branched alkyl substituents, which preferably each have 1 to 6, 1 to 4 or 1 or 2 carbon atoms.
  • Straight-chain or branched dialkylamino radicals each having 1, 2, 3 or 4 carbon atoms per alkyl substituent are preferred.
  • NN-dimemylamino NN-diemylamino, N-emyl-N-me ylamino, N-methyl-Nn-propylamino, N-isopropyl-Nn-propylamino, Nt-butyl-N-memylamino, N-ethyl-Nn-pentylamino and Nn-hexyl-N-memylamino.
  • Monoalkylaminocarbonyl (Al ⁇ laminocarbonyl) or dialkylaminocarbonyl is in
  • Examples and preferably mentioned are: Memylaminocarbonyl, Emylaminocarbonyl, Isopropylaminocarbonyl, t-
  • Bulylaminocarbonyl NN-Dime ylarninocarbonyl, NN-Diemylaminocarbonyl, N-Emyl-N-memylaminocarbonyl and N-t-Butyl-N-memylaminocarbonyl.
  • arylaminocarbonyl stands for an aromatic radical with preferably 6 to 10 carbon atoms, which is linked via an aminocarbonyl group.
  • Preferred radicals are phenylaminocarbonyl and ⁇ aphthylaminocarbonyl.
  • alkylcarbonylamino represents an amino group with a straight-chain or branched alkanoyl substituent which preferably has 1 to 6, 1 to 4 or 1 to 2 carbon atoms and is linked via the carbonyl group.
  • a monoacylarnino radical having 1 to 2 carbon atoms is preferred. Examples include and are preferably: formamido, acetamido, propionamido, n-butyramido and pivaloylamido.
  • Heterocyclyl represents a mono- or polycyclic, heterocyclic radical with 4 to 10 ring atoms and up to 3, preferably 1 heteroatoms or hetero groups from the series ⁇ , O, S, SO, SO 2 . 4- to 8-membered, in particular 5- to 6-membered, heterocyclyl is preferred. Mono- or bicyclic heterocyclyl is preferred. Monocyclic heterocyclyl is particularly preferred.
  • heterocyclyl residues can be saturated or be partially unsaturated. Saturated heterocyclyl residues are preferred.
  • the heterocycly radicals can be bonded via a carbon atom or a hetero atom. 5- to 6-membered, monocyclic saturated heterocyclyl radicals having up to two heteroatoms from the O, N and S series are particularly preferred. Examples and, preferably, are: oxetan-3-yL pyrrolidin-2-yl, pyrrolidin-3- yl,
  • a nitrogen heterocyclyl ring is a heterocycle which has only nitrogen atoms as heteroatoms.
  • Heteroaryl stands for an aromatic, mono- or bicyclic radical with 5 to 10 ring atoms and up to 5 heteroatoms from the series S, O and / or N. 5- to 6-membered heteroaryls with up to 4 heteroatoms are preferred.
  • the heteroaryl radical can be bonded via a carbon or heteroatom.
  • alkoxycarbonylamino represents an amino group with a straight-chain or branched alkoxycarbonyl substituent which preferably has 1 to 6 or 1 to 4 carbon atoms in the alkoxy radical and is linked via the carbonyl group.
  • An alkoxycarbonylamino radical having 1 to 4 carbon atoms is preferred. Examples that may be mentioned are: methoxycarbonyl-a ino, emoxycarbonylamino, n-propoxycarbonylamino and t-butoxycarbonylamino.
  • Carbonyl represents a -C (O) group. Accordingly, arylcarbonyl, heterocyclocarbonyl and heteroarylcarbonyl on the carbonyl group are substituted with the corresponding radicals, ie aryl, heterocyclyl etc.
  • Sulfonyl represents an -S (O) 2 group. Accordingly, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, heterocyclylsulfonyl and heteroarylsulfonyl on the sulfonyl group are substituted with the corresponding radicals, ie alkyl, aryl etc.
  • Aminosulfonyl represents an -S (O) 2 NH 2 group. Accordingly, alkylaminosulfonyl, dialkylaminosulfonyl, arylaminosulfonyl, heterocyclylaminosulfonyl and heteroarylaminosulfonyl on the amino group are substituted with the corresponding radicals, ie alkyl, aryl etc.
  • Halogen in the context of the invention includes fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • Fluorine or chlorine are preferred.
  • the side group of an amino acid is understood to mean that organic residue of an amino acid molecule which is bonded to the ⁇ -carbon atom of the amino acid.
  • the residues of naturally occurring ⁇ -amino acids in the L or in the D configuration are preferred, in particular naturally occurring ⁇ -amino acids in the natural L configuration.
  • Indolyl methyl group (tryptophan), a benzyl group (phenylalanine), a
  • Methylthioethyl group (Met onin), hydroxymethyl (serine), p-hydroxybenzyl
  • Carbonylbound amino acid residue stands for an amino acid residue which is bonded via the carbonyl group of the arm ⁇ oleic acid function.
  • ⁇ -amino acids in the L or D configuration in particular naturally occurring ⁇ -amino acids in the natural L configuration, for example glycine, L-alanine and L-proline.
  • Hydroxyfunction-bound amino acid residue stands for an amino acid residue which is bound via a hyroxy function of the amino acid. These include, for example, serine (-OCH (NH 2 ) COOH) or threonine (-OCH (CH 3 ) CH (NH 2 ) COOH. Preferred are ⁇ -amino acids in the L or in the D configuration, in particular naturally occurring ⁇ Amino acids in the natural L configuration, for example serine or threonine.
  • amino protective groups are understood to be those organic radicals with which amino groups are temporarily against
  • Oxycarbonyl derivatives such as carbamates and in particular the following groups are preferred: benzyloxycarbonyl, 4-bromo-benzyloxycarbonyl, 2-chlorobenzyloxycarbonyl, 3-chlorobenzyloxycarbonyl, dichlorobenzyloxycarbonyl, 3,4-dimethoxybenzyloxycarbonyl, 3,5-dimethoxybenzyloxycarbonyl, 2,4-dimethoxy - benzyloxycarbonyl, 4-methoxybenzyloxycarbonyl, 4-nitrobenzyloxycarbonyl, 2-nitrobenzyloxycarbonyl, 2-nitto-4,5-dimethoxybenzyloxycarbonyl, 3,4,5-tri-methoxybenzyloxycarbonyl, methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, butoxycarbonyl, isobutoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, pentoxycarbonyl, is
  • a symbol * on a bond means a chhality center.
  • R 1 is hydrogen, alkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, alkylcarbonyl,
  • R 1 can be substituted, apart from hydrogen, with 0, 1, 2 or 3 substituents R 1 "1 , the substituents R 1" 1 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, nitro, cyano, Amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy and carboxyl,
  • R 2 is hydrogen or alkyl
  • alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 2 "1 , where the substituents R 2" 1 are independently selected from the
  • R 1 and R 2 together with the nitrogen atom to which they are attached form a heterocycle which can be substituted by 0, 1 or 2 substituents R 1 "2 , the substituents R 1" 2 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, amino, allylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl and aminocarbonyl,
  • R 3 is hydrogen, alkyl or the side group of an amino acid, in which alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R " , the substituents R " being selected independently of one another from the group consisting of trifluoromethyl, nitro, amino, Al lamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy,
  • cycloalkyl, aryl, heteroaryl and heterocyclyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 3 "2 , the substituents R 3" 2 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl and amino,
  • Heteroarylcarbonyl, heterocyclylcarbonyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl, dialkylaminocarbonyl, arylaminocarbonyl, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, heterocyclylsulfonyl or heteroarylsulfonyl may be substituted,
  • R is hydrogen or -Ce-alkyl
  • R 4 is hydrogen, Ci-C ⁇ -alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 5 is alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl or a hydroxy-functional amino acid residue, where R 5 can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R " , the substituents R " being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, cyano, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and dialkylaminocarbonyl,
  • R is hydrogen, Ci-C ö alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 7 is hydrogen or -CC 6 alkyl
  • R is hydrogen or Ci-C 6 alkyl.
  • R 1 is hydrogen, alkyl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl, heterocyclylcarbonyl, heteroarylcarbonyl, alkoxycarbonyl or a carbonyl-bonded
  • R 1 can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 1 "1 , wherein the
  • Substituents R 1 "1 are independently selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, amino, alkylamino, dialkyl a ino, phenyl, 5- to 6-membered heteroaryl, 5- to 6-membered heterocyclyl, hydroxy and alkoxy,
  • R 2 is hydrogen or methyl
  • R 3 is equal to aminocarbonylmethyl, 3-aminopropyl, 2-hydroxy-3-aminopropyl, 3-guanidinopropyl, 2-aminocarbonylethyl, 2-hydroxycarbonylethyl, 4-amino-butyl, hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl or 4-amino-3-hydroxybutane-l -yl is,
  • R 3 is hydrogen
  • R 4 is hydrogen or methyl
  • R 5 is alkyl, C 3 -C 6 -cycloalkyl, phenyl, 5- to 6-membered heteroaryl, 5- to 6-membered heterocyclyl or a hychoxy-functional amino acid residue,
  • R 5 is alkyl, C 3 -C 6 cycloalkyl or 5- to 6-membered heterocyclyl, this can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 5 "2 , where the substituents R 5" 2 are selected independently of one another from the group consisting of alkyl, trifluoromethyl, amino,
  • R 5 is phenyl or 5- to 6-membered heteroaryl
  • this can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R " , the substituents R 5" 3 being selected independently of one another from the group consisting of Halogen, trifluoromethyl, amino, alkylamino, dialkylamino, C 3 -C 6 -cycloalkyl, 5- to 6-membered heteroaryl, 5- to 6-membered heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and dialkylaminocarbonyl,
  • R 6 is hydrogen or methyl
  • R 7 is hydrogen
  • R is hydrogen
  • R 1 is hydrogen, alkyl or alkylcarbonyl
  • R 2 is hydrogen
  • R 3 is alkyl or the side group of an amino acid, in which alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 3- " 1, where the Substituents R 3 "1 are independently selected from the
  • cycloalkyl, aryl, heteroaryl and heterocyclyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 3 "2 , the substituents R 3" 2 being selected independently of one another from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl and amino,
  • R 3 ' is hydrogen, Ci-C ⁇ - alkyl or C 3 -C 8 -cycloalkyl
  • R 4 is hydrogen, -C ⁇ - alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 5 is alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl or heterocyclyl, where R 5 can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 5 "1 , where the
  • Substituents R 5 "1 are independently selected from the group consisting of halogen, alkyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, cyano, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and dialkylaminocarbonyl,
  • alkylamino and diallamino can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 5 "2 , the substituents R 5" 2 being selected independently of one another from the group consisting of hydroxyl, amino, alkoxy, alkylamino and dialkylamino, R 6 is hydrogen,
  • R 7 is hydrogen, -CC 6 alkyl, alkylcarbonyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R is hydrogen
  • R 1 is hydrogen
  • R 2 is hydrogen
  • R 3 is alkyl or the side group of an amino acid, in which alkyl can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 3 "1 , the substituents R 3" 1 being selected independently of one another from the group consisting of amino, al lamino , Dialkylamino, cycloalkyl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl,
  • cycloalkyl, heteroaryl and heterocyclyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 3 "2 , the substituents R 3" 2 being selected independently of one another from the group consisting of alkyl and amino,
  • R is hydrogen
  • R 4 is hydrogen, CC alkyl or C 3 -C 8 cycloalkyl
  • R 5 is alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl or heterocyclyl, where R 5 can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 5 "1 , the substituents R 5" 1 being selected independently of one another from the group consisting of Alkyl, cyano, amino, alkylamino, dialkylamino,
  • alkylamino and dialkylamino can be substituted with 0, 1 or 2
  • Substituents R 5 "2 where the substituents R 5" 2 are selected independently of one another from the group consisting of hydroxyl, amino, alkoxy, alkylamino and dialkylamino,
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen
  • R is hydrogen
  • R 1 is hydrogen
  • R 2 is hydrogen
  • R 3 is aminocarbonylmethyl, 3-aminoprop-l-yl, 2-hydroxy-3-aminoprop-l-yl, l-hydroxy-3-aminoprop-l-yl, 3-guanidinoprop-l-yl, 2-aminocarbonyl- is ethyl, 2-hydroxycarbonylethyl, 4-amino-but-l-yl, hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl, 2-aminoethyl, 4-amino-3-hydroxybut-l-yl or (1-piperidin-3-yl) methyl,
  • R is hydrogen
  • R 4 is hydrogen, methyl, ethyl, isopropyl or cyclopropyl
  • R 5 is alkyl or C 3 -C 6 cycloalkyl, where R 5 can be substituted with 0, 1, 2 or 3 substituents R 5 "1 , the substituents R 5" 1 being selected independently of one another from the group consisting of Alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and dialkylaminocarbonyl,
  • alkylamino and dialkylamino can be substituted with 0, 1 or 2
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen
  • R 8 is hydrogen
  • R 1 is hydrogen
  • R 2 is hydrogen
  • R 3 is 3-amino -rop-l-yl or 2-hydroxy-3-aminoprop-l-yl
  • R 3 is hydrogen
  • R 4 is hydrogen or methyl
  • R 5 is C 1 -C alkyl, where alkyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents independently selected from the group consisting of amino, hydroxy and carboxyl,
  • R 6 is hydrogen
  • R 7 is hydrogen
  • R is hydrogen
  • R 5 is alkyl or C 3 -C 6 cycloalkyl, where R 5 can be substituted by 0,
  • substituents R 5 "1 , the substituents R 5" 1 being selected independently of one another from the group consisting of alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, cycloalkyl, hydroxy, alkoxy, carboxyl, alkoxycarbonyl, aminocarbonyl, alkylaminocarbonyl and dialkylaminocarbonyl .
  • alkylamino and dialkylamino can be substituted with 0, 1 or 2 substituents R 5 "2 , the substituents R 5" 2 being selected independently of one another from the group consisting of hydroxyl and amino.
  • R 5 is C 1 -C 4 -alkyl, where alkyl can be substituted with 0, 1 or 2 substituents independently selected from the group consisting of amino, hydroxy and carboxyl.
  • the invention further relates to a process for the preparation of the compounds of the formula (I) or their salts, compounds of the formula
  • R 1 to R 4 and R 6 to R 8 have the meaning given above, where the
  • R has the meaning given above, are implemented.
  • reactive functionalities for example free ammo functions or hydroxy functions
  • reactive functionalities for example free ammo functions or hydroxy functions
  • compounds of the formula (H) are blocked by protective groups before the reaction of compounds of the formula (JJ) with compounds of the formula (TU).
  • Acid-labile protecting groups on R 1 (or R 2 ) or as substituents in are preferred the radicals R 3 and R 3 ' , particularly preferred is Boc.
  • Reactive functionalities in R 5 of compounds of the formula (UT) are already incorporated in the synthesis with protection.
  • Preference is given to acid-labile protective groups (eg Boc) or hydrogen-ololytically cleavable protective groups (eg benzyl or benzyloxycarbonyl).
  • the protective groups can be removed by deprotection reactions. This is done according to standard protective group chemistry. Deprotection reactions under acidic conditions are preferred.
  • R> 2 in compounds of formula (I) is a selectively removable protective group, can be functionalized after deprotection (for example after hydrogenolysis in the case R 2 is Z) the exposed amino function (R> 2 is hydrogen) with the desired substituent R 2 become.
  • carbodiimides such as e.g. NN'-diethyl, NN-dipropyl, NN'-diisopropyl (DIC) and NN'-dicyclohexylcarbodiimide, ⁇ - (3-dimethylaminoisopropyl) - N'-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC), N-cyclohexylcarbodiimide-N 'propyloxy methyl polystyrene (PS carbodiimide) or carbonyl compounds such as carbonyldimidazole are suitable. If appropriate, the activation takes place in the presence of 4-dimethylaminopyridine.
  • carbodiimides such as e.g. NN'-diethyl, NN-dipropyl, NN'-diisopropyl (DIC) and NN'-dicyclohexylcarbodiimide, ⁇ - (3-dimethylaminoisoprop
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene,
  • Acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane or dimethylformamide It is also possible to use mixtures of the solvents.
  • Anhydrous dichloromethane, dimethylformamide and acetonitrile are particularly preferred.
  • Reactions with activation by EDC or DIC in absolute acetonitrile, dimethylformamide or dichloromethane at low temperature (-10 ° C.) in the presence of 4-dimethylamino ⁇ yridine are preferred.
  • the invention further relates to an alternative process for the preparation of the compounds of the formula (I) or their salts, characterized in that compounds of the formula (II) can also be reacted with compounds of the formula (HI) with acid catalysis.
  • the compounds of the formula (IT) are mixed with an excess of anhydrous alcohol HO-R 5 , if appropriate in the presence of an inert solvent, and at room temperature or up to
  • the boiling point of the solution is mixed with an acid (preferably with a mineral acid) or acid-releasing reagents (e.g. thionyl chloride) and converted into compounds of the formula (I).
  • an acid preferably with a mineral acid
  • acid-releasing reagents e.g. thionyl chloride
  • halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane
  • hydrocarbons such as benzene, toluene, tetahydrofuran and dioxane. It is also possible to use mixtures of the solvents.
  • ester cleavage is preferably carried out with hydrogen in the presence of palladium on carbon.
  • Organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, acetic acid, mixtures of acetic acid and water or alcohols (preferably methanol, ethanol and isopropanol), optionally in the presence of one or more acid equivalents. It is also possible to use mixtures of the solvents. Mixtures of acetic acid, water and ethanol or THF are particularly preferred.
  • the ester cleavage is preferably carried out in the presence of palladium (0) catalysts by standard methods of protective group chemistry.
  • Degassed (oxygen-free) organic solvents that do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as tetrahydrofuran, dioxane and dimethylformamide, optionally in the presence of one or more acid equivalents.
  • esters R 5 equal to benzyl, alkyl
  • esters can also be split into the corresponding carboxylic acids by basic hydrolysis.
  • Aqueous lithium or sodium hydroxide are preferably used as bases.
  • Suitable solvents are organic solvents which are partially or unlimitedly miscible with water. These include alcohols (methanol and ethanol are preferred), tetrahydrofuran, dioxane and dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Methanol, tetrahydrofuran and dimethylformamide are particularly preferred.
  • the invention further relates to an alternative process for the preparation of the compounds of the formulas (I) and (Ia) or their salts, characterized in that compounds of the formula
  • R> 1 - b, i-.s R have the meaning given above, where these are optionally present in activated form, are cyclized under peptide coupling conditions.
  • R 1 to R 8 have the meaning given above
  • R is an amine protecting group (preferably Boc),
  • carbodiimides such as NN'-diethyl, NN'-dipropyl, NN'-diisopropyl, NN-dicyclohexylcarbodiimide, N- (3-dimethylammoisopropyl) -N'-ylcarbom " imide -
  • EDC Hydrochloride
  • PFP pentafluorophenol
  • PS-carbodiimide N-cyclohexylcarbodiimide-N'-propyloxymethyl-polystyrene
  • carbonyl compounds such as carbonyldiimidazole
  • 1,2-oxazolium compounds such as 2-ethyl-5-phenyl-l, 2-oxazohum-3-sulfate or 2-tert-butyl-5-methyl-isoxazolium perchlorate
  • acylamino compounds such as 2-ethoxy-l-ethoxycarbonyl-l, 2 -dihydroquinoline, or propanephosphonic anhydride, or isobutyl chloroformate, or bis (2-oxo-3-oxazolidinyl) phosphoryl chloride or benzotriazolyloxy-tri (dimethylammo) phosphom ⁇ x ⁇ hexafluorophosphate, or O- (benz
  • N-tefra-methyluromum hexafluorophosphate HBTU
  • 2- (2-oxo-l- (2H) -pyridyl) -l, l, 3,3-teframethylx ⁇ roniumtetrafluoroborat TPTU
  • Bases are, for example, alkali carbonates, e.g. Sodium or potassium carbonate, or hydrogen carbonate, or preferably organic bases such as trialkylamines e.g. Triethylamine, N-methylmorpholine, N-methylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • alkali carbonates e.g. Sodium or potassium carbonate
  • hydrogen carbonate e.g. Sodium or potassium carbonate
  • organic bases e.g. Triethylamine, N-methylmorpholine, N-methylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene,
  • Tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide or acetonitrile It is also possible to use mixtures of the solvents. Dichloromethane and dimethylformamide are particularly preferred.
  • the compounds of the formula (I) according to the invention can be prepared according to the following synthesis scheme.
  • R 9 is a silyl protective group, in particular 2- (trimethylsilyl) ethyl, after the protective group on R 10 has been removed, be reacted with fluoride, in particular with tetrabutylammonium fluoride.
  • solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents.
  • solvents include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene, tetrahydrofuran, dioxane and dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents.
  • Preferred solvents are tetrahydrofuran and dimethylformamide.
  • R 9 is a silyl protective group, in particular 2- (trimethylsilyl) ethyl,
  • Carbodiimides such as e.g. NN'-diethyl-, NN'-dipropyl-, NN'-diisopropyl-, NN- dicyclohexylcarbodiimide, N- (3-dimethylaminoisopropyl) -N'-ethylcarbodiimide-
  • EDC Hydrochloride
  • PFP pentafluorophenol
  • PS-carbodiimide N-cyclohexylcarbodiimide-N'-propyloxymethyl-polystyrene
  • carbonyl compounds such as carbonyldiimidazole
  • 1,2-oxazolium compounds such as 2-ethyl-5-phenyl- l, 2-oxazolium-3-sulfate or 2-tert-butyl-5-methyl-isoxazolium perchlorate
  • acylamino compounds such as 2-ethoxy-l-ethoxycarbonyl-l, 2-dihydroquinoline, or propanephosphonic anhydride, or isobutyl- chloroformate, or bis (2-oxo-3-oxazolidinyl) phosphoryl chloride or benzo-1riazolyloxy-tri (dimethylanxmo) phosphomumhexafluorophosphate, or O-
  • Bases are, for example, alkali carbonates, such as sodium or potassium carbonate, or hydrogen carbonate, or preferably organic bases, such as trial lamines, for example triethylamine, N-methylmorpholine, N-memylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • alkali carbonates such as sodium or potassium carbonate
  • hydrogen carbonate or preferably organic bases, such as trial lamines, for example triethylamine, N-methylmorpholine, N-memylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene, acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane or dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Anhydrous dichloromethane and dimethylformamide are particularly preferred.
  • reaction in the presence of HATU and NN-diisopropylethylamine is particularly preferred.
  • R> 9 is a silyl protective group
  • R 11 is an amino protective group, in particular Boc,
  • R ⁇ can be produced by deprotection at R ⁇ . This is done according to standard methods of protecting group chemistry, in the case of R 11 Boc preferably with hydrogen chloride in dioxane.
  • R 4 , R 5 and R 7 have the meaning given above and
  • R 11 is an amino protective group (preferably Boc),
  • R 1 , R 2 and R s have the meaning given above and
  • R 9 is a silyl protective group, in particular 2- (trimethylsilyl) ethyl,
  • Catalysts and a base preferably in the presence of bis (diphenylphosphino) ferrocene palladium (TI) chloride and cesium carbonate
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include hydrocarbons such as benzene, toluene, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide and dimethyl sulfoxide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Dimethylformamide and dimethyl sulfoxide are particularly preferred.
  • R 4 , R 5 and R 7 have the meaning given above and
  • R .11 is an amino protective group (preferably Boc),
  • R 4 and R 7 have the meaning given above and
  • R 11 is an amino protective group (preferably Boc),
  • carbodiimides such as e.g. NN'-diethyl, NN'-dipropyl, NN'-diisopropyl, NN-
  • EDC N-cyclohexylcarbodiimide-N'-propyloxymethyl-polystyrene
  • PS-carbodiimide N-cyclohexylcarbodiimide-N'-propyloxymethyl-polystyrene
  • carbonyl compounds such as carbonyldiimidazole are suitable.
  • Do not change reaction conditions include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene, acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane or dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Anhydrous dichloromethane and acetonitrile are particularly preferred.
  • R 9 -OH preferably 2-trimethylsilylethanol
  • carbodiimides such as e.g. NN'-diethyl, NN'-dipropyl, NN'-diisopropyl, NN'-dicyclohexylcarbodiimide, N- (3-dimemylamoisopropyl) -N'-emylcarbodiimide hydrochloride (EDC) N-cyclohexylcarbodiine and N-propyloxymethyl polystyrene (PS-
  • EDC N-dimemylamoisopropyl
  • Carbodiimide or carbonyl compounds such as carbonyldiimidazole.
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene, acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane or dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Anhydrous dichloromethane and acetonitrile are particularly preferred.
  • R 1 and R 8 have the meaning given above and
  • R .13 is an amino protecting group, in particular Boc,
  • R 13 deprotected in the first stage on R 13 . This is done according to standard methods of protecting group chemistry, in the case of R 13 equal to Boc, preferably with anhydrous hydrogen chloride in dioxane or with trifluoroacetic acid in dichloromethane in the presence of small amounts of water.
  • R 13 equal to Boc
  • amine can optionally be in the form of a salt, preferably hydrochloride or trifluoroacetate,
  • R 2 has the meaning given above and X represents a leaving group, in the presence of a base in inert solvents, if appropriate in the presence of potassium iodide, preferably in a temperature range from 0 ° C. Room temperature until the solvents reflux at normal pressure.
  • Mesylate, tosylate, succinate or halogen are preferred for X, chlorine, bromine or iodine being preferred for halogen.
  • Bases are, for example, alkali carbonates, e.g. Sodium or potassium carbonate, or bicarbonate, or organic bases such as trialkylamines e.g. Triethylamine, N-methylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • alkali carbonates e.g. Sodium or potassium carbonate, or bicarbonate
  • organic bases such as trialkylamines e.g. Triethylamine, N-methylpiperidine, 4-dimethylaminopyridine or diisopropylethylamine.
  • Inert organic solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents. These include halogenated hydrocarbons such as dichloromethane or trichloromethane, hydrocarbons such as benzene, toluene, acetonitrile, tetrahydrofuran, dioxane, acetone or dimethylformamide. It is also possible to use mixtures of the solvents. Dimethylformamide and dichloromethane are particularly preferred.
  • R 2 can optionally be a protective group (eg Z, ie benzyloxycarbonyl or aloe, ie
  • the compounds of formula (Va) can be prepared by using compounds of formula (Va).
  • R 4 , R 5 and R have the meaning given above and
  • R 11 is an amino protective group (preferably Boc),
  • R 1 , R 2 and R 8 have the meaning given above and
  • R 9 is a silyl protective group, in particular 2- (trimethylsilyl) ethyl,
  • the reaction known as the Suzuki reaction (Synlett 1992, 207-210; Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483), takes place in the presence of palladium Catalysts and a base, preferably in the presence of bis (diphenylphosphino) ferrocene palladium (II) chloride and cesium carbonate.
  • solvents which do not change under the reaction conditions are suitable as solvents.
  • hydrocarbons such as
  • Benzene, toluene, tetxahydrofuran, dioxane, dimethylformamide and dimethyl sulfoxide It is also possible to use mixtures of the solvents. Dimethylformamide and dimethyl sulfoxide are particularly preferred.
  • the compounds of the formula (Villa) can be obtained from the compounds of the formula
  • the enantiomerically pure compounds of the formulas (IX) and (IXb) are known or can be obtained from racemic precursors analogously to known processes such as crystallization with chiral amine bases or by chromatography on chiral, stationary phases.
  • R 4 and R 7 and R 1 and R 8 have the meaning given above, R 11 and R 13 are an amino protecting group and
  • R 12 is alkyl (particularly preferably ethyl),
  • This reaction preferably takes place in a basic medium in a water-ethanol mixture.
  • R 7 and R 8 have the meaning given above
  • R> 4 - and A ⁇ R> l have the meaning given above, 1 1 1 ⁇
  • R and R are an amino protecting group
  • R 12 is alkyl (particularly preferably ethyl),
  • This reaction preferably takes place with alkali alcoholate in lower aliphatic alcohols, especially with sodium ethylate in ethanol.
  • R 7 and R 8 have the meaning given above
  • reaction preferably takes place in toluene.
  • X represents a leaving group, are reacted in inert solvents, if appropriate in the presence of a base, if appropriate in the presence of potassium iodide, preferably in a temperature range from room temperature to the reflux of the solvents at atmospheric pressure.
  • a base if appropriate in the presence of potassium iodide
  • X is preferred for X, and halogen is preferred
  • Chlorine, bromine or iodine are preferred.
  • Inert solvents are, for example, halogenated hydrocarbons such as methylene chloride, trichloromethane or 1,2-dichloroethane, ethers such as dioxane, tetrahydrofuran or 1,2-dimethoxyethane, or other solvents such as acetone, dimethylformamide,
  • Dimethylformamide is preferred.
  • Bases are, for example, alkali carbonates such as cesium carbonate, sodium or potassium carbonate, or sodium or potassium methoxide, or sodium or potassium ethanolate or potassium tert-butoxide, or amides such as sodium amide, lithium bis (trimethylsilyl) amide or lithium diisopropylamide, or organometallic compounds such as butyllithium or phenyllithium, tertiary amine bases such as triethylamine or diisopropylethylamine, or other bases such as sodium hydride, DBU, preferably potassium tert-butoxide, cesium carbonate, DBU, sodium hydride, potassium carbonate or sodium carbonate. Potassium carbonate is preferred.
  • alkali carbonates such as cesium carbonate, sodium or potassium carbonate, or sodium or potassium methoxide, or sodium or potassium ethanolate or potassium tert-butoxide
  • amides such as sodium amide, lithium bis (trimethylsilyl) amide or lithium di
  • the compounds of the invention can because of their phaimacological
  • Gram-positive cocci e.g. Staphylococci (Staph. Aureus, Staph. Epidermidis) and streptococci (Strept. Agalactiae, Strept. Faecalis, Strept. Pneumoniae, Strept. Pyogenes); gram-negative cocci (neisseria gonorrhoeae) as well as gram-negative rods such as enterobacteria, e.g. Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Citrobacter (Citrob. Freundii, Citrob. Divernis), Salmonella and Shigella; further Klebsielle (Klebs. pneumoniae, Klebs.
  • Pr. Vulgaris Providencia, Yersinia, and the genus Acinetobacter.
  • the antibacterial spectrum also includes the genus Pseudomonas (Ps. aeruginosa, Ps. maltophilia) and strictly anaerobic bacteria such as Bacteroides fragilis, representatives of the genus Peptococcus, Peptostreptococcus and the genus Clostridium; also mycoplasma (M. pneumoniae, M. hominis, M. urealyticum) and mycobacteria, eg Mycobacterium tuberculosis.
  • Pseudomonas Ps. aeruginosa, Ps. maltophilia
  • strictly anaerobic bacteria such as Bacteroides fragilis, representatives of the genus Peptococcus, Peptostreptococcus and the genus Clostridium
  • mycoplasma M. pneumoniae, M. homini
  • Infectious diseases in humans such as B. septic infections, bone and joint infections, skin infections, postoperative wound infections, abscesses, phlegmon, wound infections, infected burns, burns, infections in the mouth area, infections after dental surgery, septic arthritis, mastitis, tonsillitis, genital infections and eye infections.
  • bacterial infections can also be treated in other species. Examples include:
  • Pig coli diarrhea, enterotoxemia, sepsis, dysentery, salmonellosis, metritis-mastitis-agalaktiae syndrome, mastitis;
  • Ruminants (cattle, sheep, goats): diarrhea, sepsis, bronchopneumonia,
  • Horse bronchopneumonia, foal paralysis, puerperal and postpuerperal infections, salmonellosis; Dog and cat: bronchopneumonia, diarrhea, dermatitis, otitis, urinary tract infections, prostatitis;
  • Poultry (chicken, turkey, quail, pigeon, ornamental birds and others): mycoplasmosis, E. coh infections, chronic respiratory diseases, salmonellosis, pasteurellosis,
  • Bacterial diseases in the rearing and keeping of farmed and ornamental fish can also be treated, the antibacterial spectrum extending beyond the previously mentioned pathogens to other pathogens such as e.g. Pasteurella, brucella,
  • Campylobacter Listeria, Erysipelothris, Corynebacteria, Borellia, Treponema, Nocardia, Rikettsie, Yersinia.
  • the present invention further relates to compounds of the general formula (I) for combating diseases, in particular bacterial diseases,
  • the present invention further relates to a method for combating bacterial infections in humans and animals by administering an antibacterially effective amount of at least one compound of the formula (I).
  • the present invention further relates to medicaments which contain at least one compound according to the invention, preferably together with one or more pharmacologically acceptable auxiliaries or excipients, and to their use for the purposes mentioned above.
  • the active substance can act systemically and / or locally.
  • it can be applied in a suitable manner, such as orally, parenterally, pulmonally, nasally, sublingual, lingual, buccal, rectal, transdermal, conjunctival, otic or as an implant.
  • the active ingredient can be administered in suitable administration forms for these administration routes.
  • Non-coated and coated tablets e.g. tablets coated with enteric coatings or film-coated tablets
  • capsules coated tablets, granules, pellets, powder
  • Emulsions, suspensions, solutions and aerosols Emulsions, suspensions, solutions and aerosols.
  • Parenteral administration can be done by bypassing a resorption step (intravenous, intraarterial, intracardial, intraspinal or intralumbal) or by switching on absorption (intramuscular, subcutaneous, intracutaneous, percutaneous, or intraperitoneal).
  • Suitable forms of application for parenteral administration include: Injection and auxiliary preparations in the form of solutions, suspensions, emulsions, lyophilisates and sterile powders.
  • Inhalation drug forms e.g.
  • the active compounds can be converted into the administration forms mentioned in a manner known per se. This is done using inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients. These include carriers (e.g. microcrystalline cellulose), solvents (e.g. liquid polyethylene glycols), emulsifiers (e.g. sodium dodecyl sulfate), dispersants (e.g. polyvinyl pyrrolidone), synthetic and natural biopolymers (e.g. albumin), stabilizers (e.g. antioxidants such as ascorbic acid), dyes (e.g. inorganic pigments such as iron oxides) or taste and / or odor correctors.
  • carriers e.g. microcrystalline cellulose
  • solvents e.g. liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers e.g. sodium dodecyl sulfate
  • dispersants e.g. polyvinyl pyrrolidone
  • synthetic and natural biopolymers e.g
  • Dilution ratios and concentration data for liquid / liquid solutions each relate to the volume.
  • Method 1 column: Kromasil C18, LR temperature: 30 ° C; Flow: 0.75 ml / min; Eluent A: 0.01 M HClO 4 , eluent B: acetonitrile, gradient: ⁇ 0.5 min 98% A ⁇ 4.5 min 10% A ⁇ 6.5 min 10% A.
  • Method 2 HPLC: column: Kromasil C18 60 * 2 mm, LR temperature: 30 ° C; Flow: 0.75 ml / min, eluent A: 0.01 MH 3 PO 4 , eluent B: acetonitrile, gradient: -> 0.5 min 90% A -> 4.5 min 10% A - »6.5 min 10% A.
  • Method 5 Micromass Quattro LCZ instrument; Syrnmetry C18 column, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 ⁇ m; Temperature: 40 ° C; Flow: 0.5 ml / min; Eluent A: acetonitrile + 0.1% formic acid, Eluent B: water + 0.1% formic acid, gradient:
  • Method 8 HPLC: column: 250 * 4 mm, Kromasil 100, C-18, 5 ⁇ m; Temperature: 40 ° C; Flow: 1 ml / min; Eluent: acetonitrile 15% and 0.2% perchloric acid 85%; UV detection: 210 ⁇ m.
  • Method 9 Instrument: Waters Alliance 2790 LC; Column: Symmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 ⁇ m; Eluent A: water + 0.1% formic acid, eluent B: acetonitrile + 0.1% formic acid; Gradient: 0.0 min 5% B -> 5.0 min 10% B ->
  • Method 12 (LC-MS): TSQ 7000, Finnigan MAT, Bremen; Column: Inertsil ODS3 50 mm x 2.1 mm, 3 ⁇ m; Temperature: 25 ° C; Flow: 0.5 ml / min; Eluent A: water + 0.05% formic acid, eluent B: acetonitrile + 0.05% formic acid, gradient: 0.0 min 15% B ⁇ 15 min ⁇ 100% B ⁇ 30 min 100% B.
  • Method 13 7 Tesla Apex II with external electrospray ion source, Bruker Daltronics; Column: X-terra C18 50 mm x 2.1 mm, 2.5 ⁇ m; Temperature: 25 ° C; Flow: 0.5 ml / min; Eluent A: water + 0.1% formic acid, eluent B: acetonitrile + 0.1% formic acid, gradient: 0.0 min 5% B - 13 min ⁇ 100% B ⁇ 15 min 100% B.
  • Method 14 (HPLC): Column: X-Terra TM from Waters, RP 8 , 5 ⁇ m, 3.9x150 mm; Start: 95% A, 5% B; 12 min: 5% A, 95% B. Eluent A: water + 0.01% trifluoroacetic acid; Eluent B: acetonitrile + 0.01% trifluoroacetic acid; Flow: 1.2 ml / min.
  • Method 15 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: Waters Alliance 2795; Column: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Gradient: 0.0 min 10% B ⁇ 3.0 min 95% B ⁇ 4.0 min 95% B; Oven: 35 ° C; Flow: 0.0 min 1.0 ml / min - 3.0 min 3.0 ml / min ⁇ 4.0 min 3.0 ml / min; UV-
  • Method 16 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: Waters Alliance 2795; Column: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50%
  • Method 18 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: Waters Alliance 2795; Column: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Gradient: 0.0 min 10% B- »3.0 min 95% B- 4.0 min 95% B; Oven:
  • Method 20 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Column: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 ⁇ m; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1, eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Gradient: 0.0 min 0% B - »2.9 min 70% B - ⁇ 3.1 min 90% B - 4.5 min 90% B; Oven: 50 ° C; Flow: 0.8 ml / min; UV detection: 210 mn.
  • Method 21 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: Waters Alliance 2795; Column: Phenomenex Synergi 2 ⁇ Hydro-RP Mercury 20x4 mm; Eluent A: 1 1 water + 0.5 ml 50% formic acid, eluent B: 1 1 acetonitrile + 0.5 ml 50% formic acid; Gradient: 0.0 min 90% A (flow: 1 ml / min) -> 2.5 min 30% A (flow: 2 ml / min) -> 3.0 min 5% A (flow: 2 ml / min) - 4.5 min 5% A (flow:
  • Method 22 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Column: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 ⁇ m; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1, eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50%
  • Method 24 Device type MS: Micromass ZQ; Device type HPLC: Waters Alliance 2790; Column: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 ⁇ m; Eluent A: water + 500 ⁇ l 50% formic acid; Eluent B: acetonitrile + 500 ⁇ l 50% formic acid / 1; Gradient: 0.0 min 5% B- 2.0 min 40% B- 4.5 min 90% B ⁇ 5.5 min 90% B; Oven: 45 ° C; Flow: 0.0 min 0.75 ml / min ⁇ 4.5 min 0.75 ml 5.5 min- 5.5 min
  • Method 25 Instrument: HP 1100 with DAD detection; Column: Kromasil RP-18, 60 mm x 2 mm, 3.5 ⁇ m; Eluent A: 5 ml HClO 4 / l water, eluent B: acetonitrile; Gradient: 0 min 2% B, 0.5 min 2% B, 4.5 min 90% B, 15 min 90% B; Flow:
  • Example 6A [(+/-) - 3- (2-benzyloxy-5-iodophenyl) -2 (S) -tert-butoxycarbonylamino-propionic acid] is based on a chiral stationary silica gel phase, based on the selector from poly (N-methacryloyl-L-leucine-dicyclopropyl-methylamide), separated with a mixture of z ' -hexane / ethyl acetate as the eluent.
  • the first eluted enantiomer (98.9% ee) is clockwise in dichloromethane
  • Method B A solution of 6.99 g (11.06 mmol) of 2 (S) -benzyloxycarbonylamino-3- (2-benzyl-oxy-5-iodophenyl) -propionic acid- (2-trimethylsilyl) -ethyl ester (Example 11 A) and 6.50 g (11.06 mmol) 3- [2-benzyloxy-5- (4,4,5,5-tetramethyl- [l, 3,2] dioxaborolan-2- yl) -phenyl] -2 (S) -tert-butoxycarbonylamino-propionic acid benzyl ester (Example 8A) in 40 ml DMF is degassed by passing argon through (approx.
  • Example 20A 5,17-bis-benzyloxy-14 (S) -benzyloxycarbonylamino-ll (S) - (3-benzyloxycarbonylamino-2 (R) -hydroxy-propyl) -10,13-dioxo-9,12-diaza-tricyclo [14.3.1.1 2 ' 6 ] henicosa-l (19), 2,4,6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S) - benzyl carboxylate
  • Example 16A The preparation is carried out analogously to Example 16A from 0.47 g (0.51 mmol) of the compound from Example 15A and 0.19 g (0.51 mmol) of N ⁇ -Boc-N ⁇ -ZL-ornithine with 0.19 g (0.51 mmol) of HATU and 0.35 ml (1.65 mmol ) N, N-Diisopropylethylamine in 5.55 ml dry DMF.
  • Example 17A The preparation is carried out analogously to Example 17A from 0.82 g (0.68 mmol) of the compound from Example 23 A with 2 equiv. (1.3 ml) tetrabutylammonium fluoride (1 M in THF) in 30 ml dried DMF.
  • Example 29 A (8S, 11S, 14S) -14 - [(tert-butoxycarbonyl) amino-ll- [3 - [(tert-butoxycarbonyl) - amino] propyl ⁇ -5,17-dihydroxy-10,13-dioxo -9,12-diazatricyclo [14.3.1.1 2 ' 6 ] -henicosa-l (20), 2 (21), 3,5,16,18-hexaen-8-carboxylic acid
  • Example 8A Analogously to Example 8A, 380 mg (0.63 mmol) of the compound from Example 31 A are placed in a heated flask in 4 ml of DMF and, with stirring, at room temperature with 184.5 mg (0.73 mmol) of 4,4,4 ', 4', 5 3 5,5 ', 5'-octamethyl-2,2'-bi- 1,3,2-dioxaborolane, 186 mg (1.9 mmol) potassium acetate and 23.15 mg (0.03 mmol) bis (diphenylphosphino) ferrocene palladium (III) chloride added. The mixture is left to react at 80 ° C. for 4 h.
  • Example 12A Metal B
  • Example 12A Metal B
  • 190 mg (0.32 mmol) of the compound from Example 32A 199.5 mg (0.32 mmol) of the compound from Example 11A, 195.5 mg (0.63 mmol) of cesium carbonate and 23.15 mg (0.03 mmol)
  • Bis (diphenylphosphino) Fe ⁇ ocen-palladium ( ⁇ ) chloride in 1.5 ml DMF under an argon atmosphere.
  • Example 15A The preparation is carried out analogously to Example 15A from 930 mg (0.95 mmol) of the compound from Example 33A and 22.14 ml of a 4 M dioxane / hydrogen chloride solution in 15 ml of dioxane.
  • Example 16A The preparation is carried out analogously to Example 16A from 922 mg (1.01 mmol) of the compound from Example 34A, 0.5 g (1.01 mmol) of the compound from Example 14A, 421 mg (1.11 mmol) of HATU and 0.7 ml (518 mg; 3.27 mmol) of DIPEA in 4.2 ml DMF.
  • Example 17A The preparation is carried out analogously to Example 17A from 360 mg (0.27 mmol) of the compound from Example 35A and 0.8 ml (3 equiv.) Of 1 M tetrabutylammonium fluoride solution (THF) in 20 ml of DMF. Yield: 159 mg (53% of theory)
  • Example 37A 2 (S) - [Methyl- (5-benzyloxycarbonylamino) -2 (S) -tert-butoxycarbonylamino-4 (R) -hydroxy-pentanoyl] amino-3- [4,4 * -bis-benzyloxy-3 ' - (2 (S) -benzyloxycarbonyl-amino-2-pentafluorophenyloxycarbonyl-ethyl) -biphenyl-3-yl] -propionic acid benzyl ester
  • Examples 42A to 48A listed in the following table are prepared from the corresponding starting materials:
  • Example 52A (8S, 11S, 14S) -14 - [(tert-Butoxycarbonyl) amino] -ll- ⁇ 3 - [(tert-butoxycarbonyl) - amino] propyl ⁇ -5,17-dihydroxy-10,13-dioxo- 9,12-diazatricyclo [14.3.1.1 2,6 ] - henicosa-l (20), 2 (21), 3,5,16,18-hexaen-8-carboxylic acid
  • Example 49A The preparation is carried out analogously to Example 49A from 20 mg (0.03 mmol) of the compound from Example 52A and 9.4 mg (0.06 mmol) of tert-butyl-2-hydroxyethyl carbonate
  • Example 5 The preparation is carried out analogously to Example 5 from 1.2 mg of the compound from Example 40A with 0.3 ml of absolute methanol and 3 drops of 4M dioxane / hydrogen chloride solution.
  • Example 5 The preparation is carried out analogously to Example 5 from 10 mg (0.02 mmol) of the compound from Example 19A and 1 ml of isopropanol with 10 drops of 4M dioxane / hydrogen chloride solution.
  • cAMP 11.25 mg / ml
  • 50 ⁇ l reaction mix 1 ⁇ l cAMP (11.25 mg / ml) per 50 ⁇ l reaction mix are added to the reaction mix of the in vitro transcription-translation test.
  • the test batch is 105 ⁇ l, with 5 ⁇ l of the substance to be tested being presented in 5% DMSO.
  • IC50 indicates the concentration of an inhibitor which leads to a 50% inhibition of the translation of Firefly luciferase.
  • the plasmid pBESTluc (Promega Corporation, USA) is used to construct a reporter plasmid which can be used in an in vitro S. aureus transcription-translation assay.
  • the CAPFor ' primer contains the capAl promoter, the ribosome binding site and the 5' region of the luciferase gene.
  • PCR product can be isolated, which contains the Firefly luciferase gene with the fused capAl promoter. After restriction with Clal and Hindm, this is ligated into the vector pBESTluc, also digested with Clal and Hindlü. The resulting plasmid pla can be replicated in E. coli and used as a template in the S. aureus in vitro transcription-translation test.
  • BHI medium Six liters of BHI medium are inoculated with a 250 ml overnight culture of a S. aureus strain and grown at 37 ° C to an OD600nm of 2-4. The cells are harvested by centrifugation and placed in 500 ml of cold buffer A
  • lysostaphin 0.8 mg / ml
  • buffer B 1.5 ml lysostaphin (0.8 mg / ml) in buffer B are placed in 3 pre-cooled centrifuge beakers and mixed with 33 ml of the cell suspension each. The samples are incubated for 45 to 60 min at 37 ° C with occasional shaking before adding 150 ⁇ l of a 0.5 M DTT solution. The lysed cells are centrifuged at 30,000 xg for 30 min at 4 ° C. After being taken up in buffer B, the cell pellet is centrifuged again under the same conditions and the collected supernatants are combined.
  • the supernatants are centrifuged again under the same conditions and 0.25 volumes of buffer C (670 mM tris-acetate, pH 8.0, 20 mM Mg-acetate, 7 mM Na 3 -phosphoenolpyruvate, 7 ) are added to the upper 2/3 of the supernatant mM DTT, 5.5 mM ATP, 70 ⁇ M amino acids (complete from Promega), 75 ⁇ g pyruvate kinase (Sigma,
  • the samples are incubated for 30 min at 37 ° C.
  • the supernatants are overnight at 4 ° C against 2 1 dialysis buffer (10 mM Tris-acetate, pH 8.0, 14 mM Mg-acetate, 1 mM DTT, 60 mM K-acetate) with a buffer change in a dialysis tube with 3500 Da Exclusion dialyzed.
  • the dialysate is concentrated to a protein concentration of about 10 mg / ml by the
  • Dialysis tubing is covered with cold PEG 8000 powder (Sigma, Germany) at 4 ° C.
  • the S30 extracts can be stored aliquoted at -70 ° C.
  • Transcription-translation assay can be shown.
  • the assay is based on cell-free transcription and translation of Firefly Luciferase using the reporter plasmid pla as a template and cell-free S30 extracts derived from S. aureus. The activity of the resulting luciferase can be demonstrated by luminescence measurement.
  • the amount of S30 extract or plasmid pla to be used must be re-tested for each preparation in order to ensure an optimal concentration in the test. 3 ⁇ l of the substance to be tested dissolved in 5% DMSO are placed in an MTP. Then 10 ⁇ l of a suitably concentrated plasmid solution p1 are added.
  • the IC 50 is the concentration of an inhibitor which leads to a 50% inhibition of the translation of Firefly luciferase.
  • the minimum inhibitory concentration is the minimum concentration of an antibiotic with which a test germ is inhibited in its growth over 18-24 h.
  • the inhibitor concentration can be determined using standard microbiological methods (see e.g. The National Committee for Clinical Laboratory Standards. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; approved standard-fifth edition. NCCLS document M7-A5 [ISBN 1-56238-394 -9]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania
  • the MIC of the compounds according to the invention is determined in the liquid dilution test on a 96-microtiter plate scale.
  • the bacterial germs were in a minimal medium (18.5 mM Na 2 HPO 4 , 5.7 mM KH 2 PO 4 , 9.3 mM NH 4 C1, 2.8 mM MgSO 4 , 17.1 mM NaCl, 0.033 ⁇ g / ml Thiamine hydrochloride, 1.2 ⁇ g / ml nicotinic acid, 0.003 ⁇ g / ml biotin, 1% glucose, 25 ⁇ g / ml of any proteinogenic amino acid with the exception of phenylalanine; [H.-P.
  • the lowest substance concentration at which no visible bacterial growth occurred is defined as the MIC.
  • the MIC values in ⁇ M of some compounds according to the invention compared to a number of test germs are listed in the table below as examples. The compounds show a graded antibacterial effect against most of the test germs.
  • the suitability of the compounds according to the invention for the treatment of bacterial infections can be shown in various animal models.
  • the animals are generally infected with a suitable virulent germ and then treated with the compound to be tested, which is present in a formulation adapted to the particular therapy model.
  • the suitability of the compounds according to the invention for the treatment of bacterial infections in a sepsis model in mice after infection with S. aureus can be demonstrated.
  • S. aureus 133 cells are grown overnight in BH broth (Oxoid, Germany). The overnight culture was diluted 1: 100 in fresh bra broth and turned up for 3 hours.
  • the bacteria in the logarithmic growth phase are centrifuged off and washed twice with buffered, physiological saline solution.
  • the animal model is set so that untreated animals die within 24 hours of infection.
  • the compounds according to the invention can be converted into pharmaceutical preparations as follows:
  • Example 2 100 mg of the compound from Example 2, 50 mg lactose (monohydrate), 50 mg corn starch (native), 10 mg polyvinylpyrolidone (PVP 25) (from BASF, Ludwigshafen, Germany) and 2 mg magnesium stearate.
  • the mixture of active ingredient, lactose and starch is granulated with a 5% solution (m m) of the PVP in water.
  • the granules are dried with the magnesium stearate for 5 min. mixed.
  • This mixture is compressed with a conventional tablet press (tablet format see above).
  • a pressing force of 15 kN is used as a guideline for the pressing.
  • Rhodigel is suspended in ethanol, the active ingredient is added to the suspension. The water is added with stirring. The swelling of the Rhodigel is stopped for about 6 hours.

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Abstract

Die Erfindung betrifft antibakterielle Ester-Makrozyklen der Formel (I) und Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen. Formula (I):

Description

Antibakterielle Ester-Makrozyklen
Die Erfindung betrifft antibakterielle Ester-Makrozyklen und Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen.
In US 3,452,136, Dissertation R. U. Meyer, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Dissertation V. Leitenberger, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Synthesis (1992), (10), 1025-30, J. Chem. Soc, Perlon Trans. 1 (1992), (1), 123-30, J. Chem. Soc, Chem. Commun. (1991), (10), 744, Synthesis (1991), (5), 409-13, J. Chem.
Soc, Chem. Commun. (1991), (5), 275-7, J. Antibiot. (1985), 38(11), 1462-8, J. Antibiot. (1985), 38(11), 1453-61, wird der Naturstoff Biphenomycin B (R1, R2 gleich Wasserstoff, R3', R4, R7, R8 und R9 gleich Wasserstoff, R3 gleich 3-Amino-2- hydroxy-prop-1-yl und freies Carboxyl statt einer Estergruppe) als antibakteriell wirksam beschrieben. Teilschritte der Synthese von Biphenomycin B werden in
Synlett (2003), 4, 522-525 beschrieben.
Chirality (1995), 7(4), 181-92, J. Antibiot. (1991), 44(6), 674-7, J. Am. Chem. Soc. (1989), 111(19), 7323-7, J. Am. Chem. Soc (1989), 111(19), 7328-33, J. Org. Chem. (1987), 52(24), 5435-7, Anal. Biochem. (1987), 165(1), 108-13, J. Org. Chem.
(1985), 50(8), 1341-2, J. Antibiot. (1993), 46(3), C-2, J. Antibiot. (1993), 46(1), 135- 40, Synthesis (1992), (12), 1248-54, Appl. Environ. Microbiol. (1992), 58(12), 3879- 8, J. Chem. Soc, Chem. Commun. (1992), (13), 951-3 beschreiben einen strukturell verwandten Naturstoff, Biphenomycin A, der am Makrozyklus eine weitere Substitution mit einer Hydroxygruppe aufweist.
Die Naturstoffe entsprechen hinsichtlich ihrer Eigenschaften nicht den Anforderungen, die an antibakterielle Arzneimittel gestellt werden. Auf dem Markt sind zwar strukturell andersartige antibakteriell wirkende Mittel vorhanden, es kann aber regelmäßig zu einer Resistenzentwicklung kommen. Neue Mittel für eine gute und wirksamere Therapie sind daher wünschenswert. Eine Aufgäbe der vorliegenden Erfindung ist es daher, neue und alternative Verbindungen mit gleicher oder verbesserter antibakterieller Wirkung zur Behandlung von bakteriellen Erkrankungen bei Menschen und Tieren zur Verfügung zu stellen.
Überraschenderweise wurde gefunden, dass Derivate dieser Naturstoffe, worin die Carboxylgruppe des Naturstoffs gegen eine Estergruppe ausgetauscht wird, antibakteriell wirksam sind.
Gegenstand der Erfindung sind Verbindungen der Formel
worin
R1 gleich Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl,
Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, AminocarbonyL Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl, Heteroarylsulfonyl oder ein carbonyl- gebundener Aminosäurerest ist,
wobei R1 ausser Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R1"1, wobei die Substituenten R1"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluor- methyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, AlJ ylarnino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy und Carboxyl, R gleich Wasserstoff oder Alkyl ist,
wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R2"1, wobei die Substituenten R2"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Amino, Alkylamino und Dialkylamino,
oder
R1 und R2 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten
R1"2, wobei die Substituenten R1"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl und Aminocarbonyl,
R3 gleich Wasserstoff, Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin
Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R " , wobei die Substituenten R3"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkyl- amino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy,
Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkyl- aminocarbonyl, Guanidino und Amidino,
worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3"2, wobei die Substituenten R3"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino,
und worin eine oder mehrere freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl,
Heterocyclyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Hetero- cyclylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Arninocarbonyl, Ali laminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Arylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl oder Heteroarylsulfonyl substituiert sein können,
R3' gleich Wasserstoff, Cι-C6- Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R4 gleich Wasserstoff, Cι-C6- Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl oder ein hydroxy- funktion-gebundener Aminosäurerest ist, wobei R5 substituiert sein kann mit
0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und
Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander aus- gewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Alkoxy,
Alkylamino und Dialkylamino,
R6 gleich Wasserstoff, Ci-C6-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R7 gleich Wasserstoff, -Cθ-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R gleich Wasserstoff oder Ci-Cö-Alkyl ist,
und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze. Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formel (I1) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) und oder T) umfassten, nachfolgend als Ausfuhrungsbei- spiel(e) genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) und/oder (I') umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.
Als Salze sind im Rahmen der Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt.
Physiologisch unbedenkliche Salze der Verbindungen (I) umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Emansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphmalfndisulfonsäure,
Essigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumar- säure, Maleinsäure, Trifluoressigsäure und Benzoesäure.
Physiologisch unbedenkliche Salze der Verbindungen (I) umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und
Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Arninen mit 1 bis 16 C- Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Emylamin, Diemylarnin, Triemyla in, Ethyldiiso- propylamin, Monoethanolamin, Die anolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methylmorpholin, Dihydroabietyl- arnin, Argfnin, Lysin, E ylenm"amin und Methylpiperidin.
Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungs- mittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt. Im Rahmen der vorhegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:
Alkyl sowie die Alkylteile in Substituenten wie Alkoxy, Mono- und Dialkylamino,
Alkylsulfonyl umfassen lineares und verzweigtes Alkyl, z.B. Ci-C 2-, insbesondere d-C6- und Cι-C4-Alkyl.
-Cg- Alkyl umfasst Methyl, Ethyl, n- und i-Propyl, n-, i-, sek.- und tert.-Butyl, n- Pentyl, Isopentyl, Neopentyl und Hexyl.
C -C4-Alkyl umfasst Methyl, Ethyl, n- und i-Propyl, n-, i-, sek.- und tert.-Butyl.
Alkylcarbonyl steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkyhest niit 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methylcarbonyl, Ethylcarbonyl, n-Propylcarbonyl, Isopropylcarbonyl und t-Butylcarbonyl.
Alkenyl umfasst lineares und verzweigtes C2-C12-, insbesondere C2-C6- und C2-C - Alkenyl, wie z.B. Vinyl, Allyl, Prop-1-en-l-yl, Isopropenyl, But-1-enyl, But-2-enyl,
Buta-1.2-dienyl und Buta-1.3-dienyl.
i,
Älkinyl umfasst lineares und verzweigtes C2-C12-, insbesondere C2-C6- und C2-C4-
Alkinyl, wie z.B. Ethinyl, Propargyl (2-Propinyl), 1-Propinyl, But-1-inyl, But-2-inyl.
Cycloalkyl umfasst polycyclische gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit bis zu 14 Kohlenstoffatomen, nämlich monocyclisches C3-C12-, vorzugsweise C3-C8-Alkyl, insbesondere C3-C6- Alkyl wie z.B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclo- hexyl, Cycloheptyl, Cyclooctyl, Cyclononyl, und polycyclisches Alkyl, d.h. vorzugs- weise bicyclisches und tricyclisches, gegebenenfalls spirocyclisches C7-C1 -Alkyl, wie z.B. Bicyclo[2.2.1]-hept-l-yl, Bicyclo[2.2.1]-heρt-2-yl, Bicyclo[2.2.1]-hept-7-yl, Bicyclo[2.2.2]-oct-2-yl, Bicyclo[3.2.1]-oct-2-yl, Bicyclo[3.2.2 ]-non-2-yl und Adamantyl.
Aryl steht im Rahmen der Erfindung für einen aromatischen Rest mit vorzugsweise 6 bis 10 Kohlenstoffatomen. Bevorzugte Arylreste sind Phenyl und Naphthyl.
Alkoxy steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxyrest, insbesondere mit 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 bis 3 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxyrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, Isopropoxy, tert-Butoxy, n-Pentoxy und n-Hexoxy.
Alkoxycarbonyl steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxyrest mit 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, der über eine Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter
Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, n-Propoxycarbonyl, Isopropoxy- carbonyl und tert-Butoxycarbonyl.
Monoalkylamino (Alkylarnino) steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-
Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkylsubstituenten, der vorzugsweise 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 bis 2 Kohlenstoffatome aufweist. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Monoall< lamino-Rest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Me yla ino, Emylamino, n-Propyl- amino, Isopropylamino, tert-Butylamino, n-Pentylamino und n-Hexylamino.
Diallgylamino steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe mit zwei gleichen oder verschiedenen geradkettigen oder verzweigten Alkylsubstituenten, die vorzugsweise jeweils 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatome aufweisen. Be- vorzugt sind geradketfige oder verzweigte Dialkylamino-Reste mit jeweils 1, 2, 3 oder 4 Kohlenstoffatomen pro Alkylsubstituent. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: NN-Dimemylamino, NN-Diemylamino, N-Emyl-N-me ylamino, N-Methyl- N-n-propylamino, N-Isopropyl-N-n-propylamino, N-t-Butyl-N-memylamino, N-Ethyl- N-n-pentylamino und N-n-Hexyl-N-memylamino.
Monoalkylaminocarbonyl (Al^laminocarbonyl) oder Dialkylaminocarbonyl steht im
Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe, die über eine Carbonylgruppe verknüpft ist und die einen geradkettigen oder verzweigten bzw. zwei gleiche oder verschiedene geradkettige oder verzweigte Alkylsubstituenten mit vorzugsweise jeweils 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatomen aufweist. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Memylaminocarbonyl, Emylaminocarbonyl, Isopropylaminocarbonyl, t-
Bulylaminocarbonyl, NN-Dime ylarninocarbonyl, NN-Diemylaminocarbonyl, N- Emyl-N-memylaminocarbonyl und N-t-Butyl-N-memylaminocarbonyl.
Arylaminocarbonyl steht im Rahmen der Erfindung für einen aromatischen Rest mit vorzugsweise 6 bis 10 Kohlenstoffatomen, der über eine Aminocarbonyl-Gruppe verknüpft ist. Bevorzugte Reste sind Phenylaminocarbonyl und Νaphthylamino- carbonyl.
Alkylcarbonylamino (Acylamino) steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino- Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkanoylsubstituenten, der vorzugsweise 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 bis 2 Kohlenstoffatome aufweist und über die Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein Monoacylarnino-Rest mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Formamido, Acetamido, Propionamido, n-Butyramido und Pivaloylamido.
Heterocyclyl (Heterocyclus) steht für einen mono- oder polycyclischen, hetero- cyclischen Rest mit 4 bis 10 Ringatomen und bis zu 3, vorzugsweise 1 Heteroatomen bzw. Heterogruppen aus der Reihe Ν, O, S, SO, SO2. 4- bis 8-gliedriges, insbesondere 5- bis 6-gliedriges Heterocyclyl ist bevorzugt. Mono- oder bicyclisches Heterocyclyl ist bevorzugt. Besonders bevorzugt ist monocyclisches Heterocyclyl.
Als Heteroatome sind Ν und O bevorzugt. Die Heterocyclyl-Reste können gesättigt oder teilweise ungesättigt sein. Gesättigte Heterocyclyl-Reste sind bevorzugt. Die Heterocyclyheste können über ein Kohlenstoffatom oder ein Heteroatom gebunden sein. Besonders bevorzugt sind 5- bis 6-gliedrige, monocyclische gesättigte Heterocyclyheste mit bis zu zwei Heteroatomen aus der Reihe O, N und S. Beispiels- weise und vorzugsweise seien genannt: Oxetan-3-yL Pyrrolidin-2-yl, Pyrrolidin-3-yl,
Pyrrolinyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydrothienyl, Pyranyl, Piperidin-1-yl, Piperidin- 2-yl, Piperidin-3-yl, Piperidin-4-yl, Thiopyranyl, Morpholin-1-yl, Morpholin-2-yl, Morpholin-3-yl, Perhydroazepinyl, Piperazin-1-yl, Piperazin-2-yl. Ein Stickstoff- Heterocyclylring ist dabei ein Heterocyclus, der als Heteroatome nur Stickstoffatome aufweist.
Heteroaryl steht für einen aromatischen, mono- oder bicyclischen Rest mit 5 bis 10 Ringatomen und bis zu 5 Heteroatomen aus der Reihe S, O und/oder N. Bevorzugt sind 5- bis 6-gliedrige Heteroaryle mit bis zu 4 Heteroatomen. Der Heteroarylrest kann über ein Kohlenstoff- oder Heteroatom gebunden sein. Beispielsweise und vorzugsweise seien genannt: Thienyl, Furyl, Pyrrolyl, Thiazolyl, Oxazolyl, Imidazolyl, Pyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, Indolyl, Indazolyl, Benzofuranyl, BenzothiophenyL Ctanolinyl, Isochinolinyl.
Alkoxycarbonylamino steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkoxycarbonylsubstituenten, der vorzugsweise im Alkoxyrest 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist und über die Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein Alkoxycarbonylamino-Rest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxycarbonyl- a ino, Emoxycarbonylamino, n-Propoxycarbonylamino und t-Butoxycarbonylamino.
Carbonyl steht für eine -C(O)-Gruppe. Dementsprechend sind Arylcarbonyl, Hetero- cyclylcarbonyl und Heteroarylcarbonyl an der Carbonylgruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d.h. Aryl, Heterocyclyl etc. Sulfonyl steht für eine -S(O)2-Gruppe. Dementsprechend sind Alkylsulfonyl, Aryl- sulfonyl, Heterocyclylsulfonyl und Heteroarylsulfonyl an der Sulfonylgruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d.h. Alkyl, Aryl etc.
Aminosulfonyl steht für eine -S(O)2NH2-Gruppe. Dementsprechend sind Alkyl- aminosulfonyl, Dialkylaminosulfonyl, Arylaminosulfonyl, Heterocyclylamino- sulfonyl und Heteroarylaminosulfonyl an der Aminogruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d.h. Alkyl, Aryl etc.
Halogen schließt im Rahmen der Erfindung Fluor, Chlor, Brom und Iod ein.
Bevorzugt sind Fluor oder Chlor.
Unter der Seitengruppe einer Aminosäure wird im Rahmen der Erfindung derjenige organische Rest eines -Aminosäuremoleküls verstanden, der an das α-Kohlen- stoffatom der Aminosäure gebunden ist. Bevorzugt sind dabei die Reste natürlich vorkommender α-Aminosäuren in der L- oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende α-Aminosäuren in der natürlichen L-Konfiguration.
Hierzu zählen beispielsweise Wasserstoff (Glycin), Methyl (Alanin), Propan-2-yl (Valin), 2-Methyl-propan-l-yl (Leucin), 1-Methyl-propan-l-yl (Isoleucin), eine (3-
Indolyl)-methylgruppe (Tryptophan), eine Benzylgruppe (Phenylalanin), eine
Methylthioethylgruppe (Met onin), Hydroxymethyl (Serin), p-Hydroxybenzyl
(Tyrosin), 1-Hydroxy-ethan-l-yl (Threonin), Mercaptomethyl (Cystein), Carbamoyl- methyl (Asparagin), Carbamoylethyl (Glutamin), Carboxymethyl (Asparaginsäure), Carboxyethyl (Glutaminsäure), 4-Aminobutan-l-yl (Lysin), 3-Guanidinoρropan-l-yl
(Arginin), Imidazol-4-ylmethyl (Histidin), 3-Ureidopropan-l-yl (Citrullin),
Mercaptoethyl (Homocystein), Hydroxyethyl (Homoserin), 4-A mino-3-hydroxy- butan-1-yl (Hydroxylysin), 3-Amino-propan-l-yl (Orrύthin), 2-Hydroxy-3-amino- prop-1-yl (Hydroxyornithin). Carbonylgebundener Aminosäurerest steht für einen Aminosäurerest, der über die Carbonylgruppe der Arm^osäure-Säurefunktion gebunden ist. Bevorzugt sind dabei α-Aminosäuren in der L- oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende α-Aminosäuren in der natürlichen L-Konfiguration, z.B. Glycin, L- Alanin und L-Prolin.
Hydroxyfunktion-gebundener Aminosäurerest steht für einen Aminosäurerest, der über eine Hyάroxyfunktion der Aminosäure gebunden ist. Hierzu zählen z.B. Serin (-OCH(NH2)COOH) oder Threonin (-OCH(CH3)CH(NH2)COOH. Bevorzugt sind dabei α-Aminosäuren in der L- oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende α-Aminosäuren in der natürlichen L-Konfiguration, z.B. Serin oder Threonin.
Unter Arninoschutzgruppen werden im Rahmen der vorliegenden Erfindung solche organischen Reste verstanden, mit denen Aminogruppen vorübergehend gegen den
Angriff von Reagenzien geschützt werden können, so dass Reaktionen wie Oxidation, Reduktion, Substitution und Kondensation nur an den gewünschten (ungeschützten) Stellen stattfinden. Sie sind für die Dauer des Schutzes unter allen Bedingungen der durchzuführenden Reaktionen und Reinigungsoperationen stabil und wieder unter milden Bedingungen selektiv und mit hoher Ausbeute abspaltbar
(Römpp Lexikon Chemie - Version 2.0, Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1999; T. W. Greene, P. G. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed., John Wiley, New York, 1999).
Bevorzugt sind hierbei Oxycarbonylderivative wie Carbamate und insbesondere die folgenden Gruppen: Benzyloxycarbonyl, 4-Brom-benzyloxycarbonyl, 2-Chlor- benzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, Dichlorbenzyloxycarbonyl, 3,4-Di- methoxybenzyloxycarbonyl, 3,5-DimethoxybenzyloxycarbonyL 2,4-Dimethoxy- benzyloxycarbonyl, 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 2- Nitrobenzyloxycarbonyl, 2-Nitto-4,5-dimethoxybenzyloxycarbonyl, 3,4,5-Tri- methoxybenzyloxycarbonyl, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Isobutoxycarbonyl, tert-Butoxycarbonyl, Pent- oxycarbonyl, Isopentoxycarbonyl, Hexoxycarbonyl, Cyclohexoxycarbonyl, Octoxy- carbonyl, 2-Ethylhexoxycarbonyl, 2-Iodhexoxycarbonyl, 2-Bromethoxycarbonyl, 2- Chlorethoxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2,2,2-Trichlor-tert-butoxy- carbonyl, Benzhydryloxycarbonyl, Bis-(4-methoxyphenyl)methoxycarbonyl,
Phenacyloxycarbonyl, 2-Trimethylsilylethoxycarbonyl, Phenacyloxycarbonyl, 2-Tri- methylsilylethoxycarbonyl, 2-(Di-n-butyl-methyl-silyl)ethoxycarbonyl, 2-Triphenyl- silylethoxycarbonyl, 2-(Dimethyl-tert-butylsilyl)ethoxycarbonyl, Methyloxy- carbonyl, Vniyloxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, Phenoxycarbonyl, Tolyloxycarbonyl, 2,4-Dinitrophenoxycarbonyl, 4-Nitrophenoxycarbonyl, 2,4,5-Trichlorphenoxy- carbonyl, Naphthyloxycarbonyl, Fluorenyl-9-methoxycarbonyl, Valeroyl, Isovaleroyl, Butyryl, Ethylthiocarbonyl, Methylthiocarbonyl, Butylthiocarbonyl, tert- Butylthiocarbonyl, Phenylthiocarbonyl, Benzylthiocarbonyl, Methylaminocarbonyl, Ethylaminocarbonyl, Propylaminocarbonyl, iso-Propylaminocarbonyl, Formyl, Acetyl, Propionyl, Pivaloyl, 2-Chloracetyl, 2-Bromacetyl, 2-Iodacetyl, 2,2,2-
Trifluoracetyl, 2,2,2-Trichloracetyl, Benzoyl, 4-Chlorbenzoyl, 4-Methoxybenzoyl, 4- Nitrobenzyl, 4-Nitrobenzoyl, Naphthylcarbonyl, Phenoxyacetyl, Adamantylcarbonyl, Dicyclohexylphosphoryl, Diphenylphosphoryl, Dibenzylphosphoryl, Di-(4-nitro- benzyl)-phophoryl, Phenoxyphenylphosphoryl, Diethylphosphinyl, Diphenyl- phosphinyl, Phthaloyl, Phthalimido oder Benzyloxymethylen.
Besonders bevorzugt sind tert-Butyloxycarbonyl (Boc), 9-Fluorenylmethyloxy- carbonyl (FMOC), Benzyloxycarbonyl (Cbz- / Z-) und Allyloxycarbonyl (Aloe).
Ein Symbol * an einer Bindung bedeutet ein Chhalitätszentrum.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen, welche der Formel
entsprechen, worin R1 bis R8 die gleiche Bedeutung wie in Formel (I) haben,
und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl,
Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl, Heteroarylsulfonyl oder ein carbonylge- bundener Aminosäurerest ist,
wobei R1 ausser Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R1"1, wobei die Substituenten R1"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy und Carboxyl,
R2 gleich Wasserstoff oder Alkyl ist,
wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R2"1, wobei die Substituenten R2"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der
Gruppe bestehend aus Halogen, Amino, Alkylamino und Dialkylamino, oder
R1 und R2 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R1"2, wobei die Substituenten R1"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Allylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl und Aminocarbonyl,
R3 gleich Wasserstoff, Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R " , wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Al lamino, Dialkyl- amino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy,
Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3"2, wobei die Substituenten R3"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino,
und worin eine oder mehrere freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl,
Heteroarylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Arylaminocarbonyl, Alkyl- sulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl oder Heteroarylsulfonyl substituiert sein können,
R gleich Wasserstoff oder -Ce-Alkyl ist, R4 gleich Wasserstoff, Ci-Cβ-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl oder ein hydroxyfunktion-gebundener Aminosäurerest ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R " , wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
R gleich Wasserstoff, Ci-Cö-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R7 gleich Wasserstoff oder Cι-C6-Alkyl ist,
und
R gleich Wasserstoff oder Ci-C6- Alkyl ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff, Alkyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heterocyclyl- carbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl oder ein carbonylgebundener
Aminosäurerest ist,
wobei R1 substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R1"1, wobei die
Substituenten R1"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkyl- a ino, Phenyl, 5- bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5- bis 6-ghedriges Heterocyclyl, Hydroxy und Alkoxy,
R2 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
R3 gleich Aminocarbonylmethyl, 3-Aminopropyl, 2 -Hydroxy-3-aminoproρyl, 3- Guanidinopropyl, 2-Aminocarbonylethyl, 2-Hydroxycarbonylethyl, 4-Amino- butyl, Hydroxymethyl, 2-Hydroxyethyl oder 4-Amino-3-hydroxybutan-l-yl ist,
und worin freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, C3-C6-Cycloalkyl, Alkylcarbonyl, Phenylcarbonyl, 5- bis 6- gliedriges Heteroarylcarbonyl, 5- bis 6-ghedriges Heterocyclylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylamino- carbonyl, Phenylarninocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, 5- bis 6- ghedriges Heterocyclylsulfonyl oder 5- bis 6-gliedriges Heteroarylsulfonyl substituiert sein können,
R3 . gleich Wasserstoff ist,
R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
R5 gleich Alkyl, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, 5- bis 6-ghedriges Heteroaryl, 5- bis 6-ghedriges Heterocyclyl oder ein hychoxyfunktion-gebundener Aminosäure- rest ist,
wobei für den Fall, dass R5 gleich Alkyl, C3-C6-Cycloalkyl oder 5- bis 6- gliedriges Heterocyclyl ist, dieses substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander aus- gewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Trifluormethyl, Amino,
Alkylamino, Dialkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, 5- bis 6-ghedriges Heteroaryl, 5- bis 6-ghedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Allcylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
und
wobei für den Fall, dass R5 gleich Phenyl oder 5- bis 6-gliedriges Heteroaryl ist, dieses substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R " , wobei die Substituenten R5"3 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, 5- bis 6-ghedriges Heteroaryl, 5- bis 6-ghedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
R6 gleich Wasserstoff oder Methyl ist
R7 gleich Wasserstoff ist,
und
R gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff, Alkyl oder Alkylcarbonyl ist,
R2 gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R 3-"1 , wobei die Substituenten R3"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der
Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkyl- ' amino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy,
Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkyl- aminocarbonyl, Guanidino und A idino,
worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3"2, wobei die Substituenten R3"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino,
und worin eine oder mehrere freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl substituiert sein können,
R3' gleich Wasserstoff, Ci-Cθ-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R4 gleich Wasserstoff, -Cβ- Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die
Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dial lamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Alkoxy, Alkylamino und Dialkylamino, R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff, Cι-C6-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
und
R gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff ist,
R2 gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3"1, wobei die Substituenten R3"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Amino, Al lamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl,
Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Guanidino und Amidino,
worin Cycloalkyl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3"2, wobei die Substituenten R3"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl und Amino,
R gleich Wasserstoff ist,
R4 gleich Wasserstoff, C C Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino,
Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2
Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Alkoxy, Alkylamino und Dialkylamino,
R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff ist,
und
R gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff ist,
R2 gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich Aminocarbonylmethyl, 3-Aminoprop-l-yl, 2-Hydroxy-3-aminoprop-l- yl, l-Hydroxy-3-aminoprop-l-yl, 3-Guanidinoprop-l-yl, 2-Aminocarbonyl- ethyl, 2-Hydroxycarbonylethyl, 4-Ajtninobut-l-yl, Hydroxymethyl, 2- Hydroxyethyl, 2-Aminoethyl, 4-Amino-3-hydroxybut-l-yl oder (1-Piperidin- 3-yl)-methyl ist,
R gleich Wasserstoff ist,
R4 gleich Wasserstoff, Methyl, Ethyl, iso-Propyl oder Cyclopropyl ist,
R5 gleich Alkyl oder C3-C6-Cycloalkyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2
Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy und Amino,
R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff ist,
und
R8 gleich Wasserstoff ist.
Besonders bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R1 gleich Wasserstoff ist, R2 gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich 3-Aminoρrop-l-yl oder 2-Hydroxy-3-aminoprop-l-yl ist,
R3 gleich Wasserstoff ist,
R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
R5 gleich C1-C -Alkyl ist, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Amino, Hydroxy und Carboxyl,
R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff ist,
und
R gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R1 gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Ver- bindungen, bei denen R2 gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R3 gleich 3-Aminoprop-l-yl oder 2-Hydroxy-3-arninoprop-l-yl ist. Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Ver- bindungen, bei denen R gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Ver- bindungen, bei denen R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen
R5 gleich Alkyl oder C3-C6-Cycloalkyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0,
1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy und Amino.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße
Verbindungen, bei denen R5 gleich Cι-C4-Alkyl ist, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Amino, Hydroxy und Carboxyl.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R6 gleich Wasserstoff ist.
Bevorzugt im Rahmen der vorhegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R7 gleich Wasserstoff ist. Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R8 gleich Wasserstoff ist.
Gegenstand der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) beziehungsweise ihrer Salze, wobei Verbindungen der Formel
worin R1 bis R4 und R6 bis R8 die oben angegebene Bedeutung haben, wobei die
Verbindungen der Formel (II) gegebenenfalls in aktivierter Form (Acyldonor) vorliegen können,
mit Verbindungen der Formel
HO-R5 (111),
worin
R die oben angegebene Bedeutung hat, umgesetzt werden.
Gegebenenfalls werden vor der Umsetzung von Verbindungen der Formel (JJ) mit Verbindungen der Formel (TU) reaktive Funktionahtäten (z.B. freie Ammofunktionen oder Hydroxyfunktionen) in Verbindungen der Formel (H) durch Schutzgrappen blockiert. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind säurelabile Schutzgruppen an R1 (oder R2), oder als Substituenten in den Resten R3 und R3', insbesondere bevorzugt ist Boc. Reaktive Funktionalitäten in R5 von Verbindungen der Formel (UT) werden bereits geschützt mit in die Synthese eingebracht. Bevorzugt sind säureläbile Schutzgruppen (z.B. Boc) oder hydrogen- olytisch spaltbare Schutzgruppen (z.B. Benzyl oder Benzyloxycarbonyl). Nach erfolgter Umsetzung zu Verbindungen der Formel (I) können die Schutzgruppen durch Entschützungsreaktionen abgespalten werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind Entschützungsreaktionen unter sauren Bedingungen.
Stellt z. B. R >2 in Verbindungen der Formel (I) eine selektiv abspaltbare Schutzgruppe dar, kann nach Entschützung (z.B. nach Hydrogenolyse im Fall R 2 gleich Z) die frei gelegte Aminofunktion (R >2 gleich Wasserstoff) mit dem gewünschten Substituenten R2 funktionalisiert werden.
Zur Überführung der Carbonsäurefunktion in Formel (JJ) in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbodiimide wie z.B. NN'-Diethyl-, NN-Dipropyl-, NN'-Diiso- propyl- (DIC) und NN'-Dicyclohexylcarbodiimid, Ν-(3-Dimethylaminoisopropyl)- N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC), N-Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxy- methyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldi- imidazol geeignet. Gegebenenfalls erfolgt die Aktivierung in Gegenwart von 4-Di- methylaminopyridin.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol,
Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan, Dimethylformamid und Acetonitril. Bevorzugt sind Umsetzungen mit Aktivierung durch EDC oder DIC in absolutem Acetonitril, Dimethylformamid oder Dichlormethan bei tiefer Temperatur (-10°C) in Gegenwart von 4-Dimethylaminoρyridin.
Die Erfindung betrifft weiterhin ein alternatives Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) beziehungsweise ihrer Salze, dadurch gekennzeichnet, dass Verbindungen der Formel (II) mit Verbindungen der Formel (HI) auch säurekatalysiert umgesetzt werden können. Dazu werden die Verbindungen der Formel (IT) mit einem Überschuss wasserfreien Alkohols HO-R5, gegebenenfalls in Gegen- wart eines inerten Lösungsmittels, versetzt und bei Raumtemperatur oder bis zur
Siedetemperatur der Lösung mit einer Säure (vorzugsweise mit einer Mineralsäure) oder säurefreisetzenden Reagentien (z.B. Thionylchlorid) versetzt und zu Verbindungen der Formel (I) umgesetzt.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den
Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetτahydrofuran, Dioxan. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen.
Die Verbindungen der Formel (Tfl) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (H) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem die Esterfunktion in Verbindungen der Formel
worin
R » 1 biirs R und R bis R die oben angegebene Bedeutung haben und
gleich Benzyl, Alkyl oder Allyl ist,
hydrolysiert werden.
Die Esterspaltung erfolgt im Fall von R5 gleich Benzyl vorzugsweise mit Wasserstoff in Gegenwart von Palladium auf Kohle.
Als Lösemittel eignen sich hierbei organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid, Essigäure, Gemische von Essigsäure und Wasser oder Alkohole (bevorzugt sind Methanol, Ethanol und Isopropanol), gegebenenfalls in Gegenwart von einem oder mehreren Säureäquivalenten. Ebenso ist es möglich, Ge- mische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Gemische aus Essigsäure, Wasser und Ethanol oder THF.
Die Esterspaltung erfolgt im Fall von R5 gleich Allyl vorzugsweise in Gegenwart von Palladium(0)-Katalysatoren nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Als Lösemittel eigen sich entgaste (von Sauerstoff befreite) organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Tetrahydrofuran, Dioxan und Dimethylformamid, gegebenenfalls in Gegenwart von einem oder mehreren Säureäquivalenten.
Alternativ köimen die Ester (R5 gleich Benzyl, Alkyl) auch durch basische Hydrolyse in die entsprechenden Carbonsäuren gespalten werden.
Als Basen werden bevorzugt wässriges Lithium- oder Natriumhydroxid eingesetzt.
Als Lösemittel eignen sich hierbei organische Lösemittel, die teilweise oder unbegrenzt mit Wasser mischbar sind. Hierzu gehören Alkohole (bevorzugt sind Methanol und Ethanol), Tetrahydrofuran, Dioxan und Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Methanol, Tetrahydrofuran und Dimethylformamid.
Die Erfindung betrifft weiterhin ein alternatives Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formeln (I) sowie (Ia) beziehungsweise ihrer Salze, dadurch gekennzeichnet, dass Verbindungen der Formel
worin
R > 1 - b,i-.s R die oben angegebene Bedeutung haben, wobei diese gegebenenfalls in aktivierter Form vorliegen, unter Peptidkupplungs- bedingungen zyklisiert werden.
Alternativ kann ein mehrstufiger Prozess erfolgen, bei dem Verbindungen der Formel
worin
R1 bis R8 die oben angegebene Bedeutung haben,
R ,9 nach Aktivierung gleich Pentafluorphenol ist und
R gleich eine Aminschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist,
durch Schutzgruppenabspaltung der Airnnschutzgruppe (zu R10 gleich Wasserstoff) und anschließende Zyklisierung unter basischen Bedingungen zu Verbindungen der Formel (I) sowie (Ia) umgesetzt werden.
Zur Überführung der Verbindungen in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbodiimide wie z.B. NN'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, NN'-Diisopropyl-, NN- Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimethylammoisopropyl)-N'-e ylcarbom"imid-
Hydrochlorid (EDC) (gegebenenfalls in Gegenwart von Pentafluorphenol (PFP)), N- Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-l,2-oxazohum-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl-5-methyl- isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-l-ethoxy- carbonyl-l,2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Isobutyl- chloroformat, oder Bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphorylchlorid oder Benzo- triazolyloxy-tri(dimethylammo)phosphomιxπιhexafluorophosphat, oder O-(Benzo- triazol-l-y^-NNN'.N-tefra-methyluromumhexafluorophosphat (HBTU), oder 2-(2- Oxo-l-(2H)-pyridyl)-l,l,3,3-teframethylxιroniumtetrafluoroborat (TPTU), oder O-(7- Aτ;aberιzotriazol-l-yl)-NNN'N-teframemyteoniun exafluorophosphat (HATU), oder Berιzotriazol-l-yloxytris(dimethylammo)-phosphom'ιxmhexafluorophosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen mit Basen, gegebenenfalls in Gegenwart von 1-
Hydroxybenzotriazol (HOBt), geeignet.
Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder -hydrogencarbonat, oder bevorzugt organische Basen wie Trialkylamine z.B. Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogehkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol,
Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid oder Acetonitril. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dichlormethan und Dimethylformamid.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) kann nach folgendem Syntheseschema erfolgen.
(IV) (la)
(I) (II) Schema 1: Synthese der Ausführungsbeispiele
Die Verbindungen der Formel (TV) sind bekannt, können analog bekannten Ver- fahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R > 1 ! b,.i;„s τ R> 8 , u,n„d J R TJ IO die oben angegebene Bedeutung haben und
R9 gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2-(Trimethylsilyl)-ethyl, ist, nach Abspaltung der Schutzgruppe an R10, mit Fluorid, insbesondere mit Tetrabutyl- ammoniumfluorid, umgesetzt werden.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan und Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Bevorzugte Lösungsmittel sind Tetrahydrofuran und Dimethylformamid.
Die Verbindungen der Formel (IVb) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R ,ι , R , R , R , R und R die oben angegebene Bedeutung haben und
R9 gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2-(Trimethylsilyl)-ethyl, ist,
mit Verbindungen der Formel (VT)
worin
R »3 , τ R»3' , R und R »ιo die oben angegebene Bedeutung haben,
wobei die Verbindungen gegebenenfalls in aktivierter Form vorliegen können, umgesetzt werden.
Zur Überführung der Verbindungen in die aktivierte Form sind beispielsweise
Carbodiimide wie z.B. NN'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, NN'-Diisopropyl-, NN- Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-
Hydrochlorid (EDC) (gegebenenfalls in Gegenwart von Pentafluorphenol (PFP)), N- Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-l,2-oxazolium-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl-5-methyl- isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-l-ethoxy- carbonyl-l,2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Isobutyl- chloroformat, oder Bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphorylchlorid oder Benzo- 1riazolyloxy-tri(dimethylanxmo)phosphomumhexafluorophosphat, oder O-(Benzo- triazol-l-yl)-NNN'N'-tetra-methylurorιium-hexafluorophosphat (HBTU), 2-(2-Oxo- l-(2H)-pvridyl)-l,l,3,3-tetramethyluroniumtetrafluoro-borat (TPTU) oder O-(7-Aza- benzotriazol-l-yl)-NNN'N'-teframe yl-uromurrmexafluorophosphat (HATU), oder Benzotriazol-l-yloxytris(dimethylammo)-phosphomun exafluoro-phosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen mit Basen, gegebenenfalls unter Zusatz von Kupplungsadditiven wie 1-Hydroxybenzotriazol (HOBt), geeignet. Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder -hydrogencarbonat, oder bevorzugt organische Basen wie Trial lamine z.B. Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Memylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Dimethylformamid.
Besonders bevorzugt ist die Umsetzung in Gegenwart von HATU und NN-Diiso- propylethylamin.
Die Verbindungen der Formel (VI) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (V) beziehungsweise ihre Salze (z.B. Hydrochloride), sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem
Verbindungen der Formel
worin R ,ι , R , R , R , R und R die oben angegebene Bedeutung haben,
R >9 gleich eine Silylschutzgruppe ist und
R11 gleich eine Aminoschutzgruppe, insbesondere Boc, ist,
durch Entschützung an Rπ hergestellt werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie, im Falle von R11 gleich Boc bevorzugt mit Chlorwasserstoffin Dioxan.
Schema 2: Synthese der Cyclisierungsvorläufer
Die Verbindungen der Formel (Va) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
woπn
R4, R5 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben und
R11 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist,
mit Verbindungen der Formel
worin
R1, R2 und Rs die oben angegebene Bedeutung haben und
R9 gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2-(Trimethylsilyl)-ethyl, ist,
umgesetzt werden. Die Umsetzung, bekannt als Suzuki-Reaktion (Synlett 1992, 207- 210; Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483), erfolgt in Gegenwart von Palladium-
Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis(diphenyl- phosphino)ferrocen-palladium(TI)chlorid und Cäsiurncarbonat Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.
Die Verbindungen der Formel (VH) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R4, R5 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben und
R .11 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist,
mit Bis(ρinacolato)diboron umgesetzt werden. Die Umsetzung, bekannt als spezielle Variante der Suzuki-Reaktion (J Org. Chem. 1995, 7508-7510; Tetrahedron Lett.,
1997, 3841-3844), erfolgt in Gegenwart von Palladium-Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis(diphenylphosphino)ferrocen-palladium(II)- chlorid und von Kaliumacetat.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den
Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.
Die Verbindungen der Formel (Vila) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R4 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben und
R11 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist,
nach Aktivierung der freien Carboxylatfunktion mit Alkoholen R5-OH vorzugsweise in Gegenwart von 4-Dimethylaminopyridin umgesetzt werden.
Zur Überführung der Carbonsäuren in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbodiimide wie z.B. NN'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, NN'-Düsopropyl-, NN-
Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-
Hydrochlorid (EDC) N-Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS- Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol geeignet.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den
Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Acetonitril.
Bevorzugt sind Umsetzungen mit Aktivierung durch EDC oder DIC in absolutem Acetonitril oder Dichlormethan bei tiefer Temperatur (- 10°C) in Gegenwart von 4- Dimethylaminopyridin.
Die Verbindungen der Formel (VS ) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R . 1 , τ R>2 und R die oben angegebene Bedeutung haben
nach Aktivierung der freien Carboxylatfunktion mit R9-OH (bevorzugt 2-Tri- methylsilylethanol) in Gegenwart von 4-Dimethylaminopyridin umgesetzt werden.
Zur Überführung der Carbonsäuren in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbodiimide wie z.B. NN'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, NN'-Diisopropyl-, NN'- Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimemylam oisopropyl)-N'-emylcarbodiimid- Hydrochlorid (EDC) N-Cyclohexylcarbodiinüd-N-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-
Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol geeignet. Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Acetonitril.
Bevorzugt sind Umsetzungen mit Aktivierung durch EDC oder DIC in absolutem Acetonitril oder Dichlormethan bei tiefer Temperatur (- 10°C) in Gegenwart von 4- Dimethylaminopyridin.
Die Carbonsäuren der Formel (IXa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel
worin
R1 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und
R .13 gleich eine Aminoschutzgruppe, insbesondere Boc, ist,
in der ersten Stufe an R13 entschützt werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie, im Falle von R13 gleich Boc bevorzugterweise mit wasserfreiem Chlorwasserstoff in Dioxan oder mit Trifluoressigsäure in Dichlormethan in Gegenwart geringer Mengen Wasser. Das erhaltene freie Amin
woπn
R und R die oben angegebene Bedeutung haben,
wobei das Amin gegebenenfalls in Form eines Salzes, vorzugsweise Hydrochlorid oder Trifluoracetat, vorliegen kann,
wird in der zweiten Stufe mit R2-X, worin R2 die oben angegebene Bedeutung hat und X für eine Abgangsgruppe steht, in Gegenwart einer Base in inerten Lösungsmitteln umgesetzt, gegebenenfalls in Gegenwart von Kaliumiodid, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C über Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck. Bevorzugt für X sind Mesylat, Tosylat, Succinat oder Halogen, wobei für Halogen Chlor, Brom oder Iod bevorzugt ist.
Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder -hydrogencarbonat, oder organische Basen wie Trialkylamine z.B. Triethylamin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan, Aceton oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dichlormethan.
Schema 3: Synthese von Biphenyl-bisaminosäurederivaten
R2 kann optional eine Schutzgruppe (z.B. Z, d.h. Benzyloxycarbonyl oder Aloe, d.h.
Allyloxycarbonyl) darstellen.
In einem Altematiwerfahren können die Verbindungen der Formel (Va) hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel
worin
R4, R5 und R die oben angegebene Bedeutung haben und
R11 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist,
mit Verbindungen der Formel
(Villa),
worin
R1, R2 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und
R9 gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2-(Trimethylsilyl)-ethyl, ist,
umgesetzt werden. Die Umsetzung, bekannt als Suzuki-Reaktion (Synlett 1992, 207- 210; Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483), erfolgt in Gegenwart von Palladium- Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis(diphenylphosphino)- ferrocen-palladium(II)chlorid und Caesiumcarbonat.
Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie
Benzol, Toluol, Tetxahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.
Die Verbindungen der Formel (Villa) können aus den Verbindungen der Formel
(Vπi) nach dem für die Verbindungen (VII) beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Die enantiomerenreinen Verbindungen der Formeln (IX) und (IXb) sind bekannt oder können aus racemischen Vorläufern analog bekannten Verfahren wie Kristallisation mit chiralen Aminbasen oder durch Chromatograpie an chiralen, stationären Phasen erhalten werden.
Die Verbindungen der Formeln (IX) und (IXb) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln
(X) und (Xa),
worin
R4 und R7 und R1 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben, R11 und R13 gleich eine Aminoschutzgruppe sind und
R12 gleich Alkyl (besonders bevorzugt Ethyl) ist,
decarboxyliert werden. Diese Reaktion findet bevorzugt in basischem Medium in einem Wasser-Ethanol-Gemisch statt.
Die Verbindungen der Formel (X) und (Xa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln
(XTT) und (XTIa),
worin
R7 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben,
mit Verbindungen der Formeln
(XI) beziehungsweise (XIa),
worin
R >4 — und A τ R> l die oben angegebene Bedeutung haben, 1 1 1 ^
R und R gleich eine Aminoschutzgruppe sind und
R12 gleich Alkyl (besonders bevorzugt Ethyl) ist,
umgesetzt werden. Diese Reaktion findet bevorzugt mit Alkalialkoholat in niederigen aliphatischen Alkoholen, besonders mit Natriumethylat in Ethanol statt.
Die Verbindungen der Formeln (XII) und (XTIa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln
(xπb) und (xπc),
worin
R7 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben,
mit Phosphortribromid umgesetzt werden. Bevorzugt findet die Reaktion in Toluol statt.
Die Verbindungen der Formeln (Xllb) und (XIIc) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln
(XHd) und (XEe), worin
7 o
R und R die oben angegebene Bedeutung haben,
reduziert werden. Die Reduktion findet bevorzugt mit Diisobutylaluminiumhydrid-
Lösung in Dichlormethan unter nachfolgender Zugabe einer gesättigten Kalium- natriumtartrat-Lösung statt.
Die Verbindungen der Formeln (Xüd) und (XTIe) sind bekannt, können analog be- kannten Verfahren hergestellt werden oder indem 2-Hydroxy-5-iod-benzaldehyd mit
Verbindungen der Formeln
R7-X beziehungsweise R8-X
worin
7 R
R und R die oben angegebene Bedeutung haben und
X für eine für eine Abgangsgruppe steht, in inerten Lösungsmitteln umgesetzt werden, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, gegebenenfalls in Gegenwart von Kaliumiodid, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck. Bevorzugt für X sind Mesylat, Tosylat oder Halogen, wobei für Halogen
Chlor, Brom oder Iod bevorzugt sind.
Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylenchlorid, Trichlormethan oder 1,2-Dichlorethan, Ether wie Dioxan, Tetrahydrofuran oder 1,2-Dimethoxyethan, oder andere Lösemittel wie Aceton, Dimethylformamid,
Dimethylacetamid, 2-Butanon oder Acetonitril, bevorzugt Tetrahydrofuran, Methylenchlorid, Aceton, 2-Butanon, Acetonitril, Dimethylformamid oder 1,2- Dimethoxyethan. Bevorzugt ist Dimethylformamid.
Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder Natrium- oder Kaliummethanolat, oder Natrium- oder Kaliurn- ethanolat oder Kahum-tert.-butylat, oder Amide wie Natriumamid, Lithium-bis- (trimethylsilyl)amid oder Lithiumdiisopropylamid, oder metallorganische Verbindungen wie Butyllithium oder Phenyllithium, tertiäre Aminbasen wie Triethylamin oder Diisopropylethylamin, oder andere Basen wie Natriurnhydrid, DBU, bevorzugt Kalium-tert.-butylat, Cäsiumcarbonat, DBU, Natriurnhydrid, Kaliumcarbonat oder Natriumcarbonat. Bevorzugt ist Kaliumcarbonat.
Die Verbindungen der Formeln (XIII) und (Xffla) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch folgendes Syntheseschema verdeutlicht werden. Hierbei ist der besseren Übersichtlichkeit halber die in der Beschreibung verwendete lateinische Nummerierung beibehalten, das Schema zeigt jedoch teilweise spezielle Ausführungsformen, insbesondere R12 in (XI) und (XIa) gleich Ethyl und R11 und R13 gleich Boc.
(IX)*, (IXb)* (IX), (IXb) (X). (Xa) (XII), (Xlla) Schema 4: Synthese von Phenylalaninderivaten
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches und pharmakokinetisches Wirkspektrum. Bevorzugterweise werden dazu Verbindungen der Formel (I) verwendet, die eine maximale
Hemmkonzentration (MHK) gegenüber den entsprechenden Bakterien von weniger als 100, msbesondere 50, ganz besonders weniger als lOμM aufweisen. Ebenso werden bevorzugterweise Verbindungen der Formel (I) verwendet, die einen IC50- Wert in den entsprechenden Tests von weniger als 100, insbesondere 50, ganz besonders weniger als lOμM aufweisen.
Sie eignen sich daher zur Verwendung als Arzneimittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten bei Menschen und Tieren.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können aufgrund ihrer phaimakologischen
Eigenschaften allein oder in Kombination mit anderen Wirkstoffen zur Behandlung und/oder Prävention von Infektionskrankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen, eingesetzt werden.
Beispielsweise können lokale und/oder systemische Erl ankungen behandelt und/oder verhindert werden, die durch die folgenden Erreger oder durch Mischungen der folgenden Erreger verursacht werden:
Gram-positive Kokken, z.B. Staphylokokken (Staph. aureus, Staph. epidermidis) und Streptokokken (Strept. agalactiae, Strept. faecalis, Strept. pneumoniae, Strept. pyogenes); gram-negative Kokken (neisseria gonorrhoeae) sowie gram-negative Stäbchen wie Enterobakteriaceen, z.B. Escherichia coli, Hämophilus influenzae, Citrobacter (Citrob. freundii, Citrob. divernis), Salmonella und Shigella; femer Klebsiellen (Klebs. pneumoniae, Klebs. oxytocy), Enterobacter (Ent. aerogenes, Ent. agglomerans), Hafhia, Serratia (Serr. marcescens), Proteus (Pr. mirabilis, Pr. rettgeri,
Pr. vulgaris), Providencia, Yersinia, sowie die Gattung Acinetobacter. Darüber hinaus umfaßt das antibakterielle Spektrum die Gattung Pseudomonas (Ps. aeruginosa, Ps. maltophilia) sowie strikt anaerobe Bakterien wie z.B. Bacteroides fragilis, Vertreter der Gattung Peptocokkus, Peptostreptocokkus sowie die Gattung Clostridium; ferner Mykoplasmen (M. pneumoniae, M. hominis, M. urealyticum) sowie Mycobakterien, z.B. Mycobacterium tuberculosis.
Die obige Aufzählung von Erregem ist lediglich beispielhaft und keineswegs beschränkend aufzufassen. Als Krankheiten, die durch die genannten Erreger oder Mischinfektionen verursacht und durch die erfindungsgemäßen topisch anwendbaren Zubereitungen verhindert, gebessert oder geheilt werden können, seien beispielsweise genannt:
Infektionskrankheiten beim Menschen wie z. B. septische Infektionen, Knochen- und Gelenkinfektionen, Hautinfektionen, postoperative Wundinfektionen, Abszesse, Phlegmone, Wundinfektionen, infizierte Verbrennungen, Brandwunden, Infektionen im Mundbereich, Infektionen nach Zahnoperationen, septische Artl ritis, Mastitis, Tonsillitis, Genital-Infektionen und Augeninfektionen.
Außer beim Menschen können bakterielle Infektionen auch bei anderen Spezies behandelt werden. Beispielhaft seien genannt:
Schwein: Coli-diarrhoe, Enterotoxamie, Sepsis, Dysenterie, Salmonellose, Metritis- Mastitis-Agalaktiae-Syndrom, Mastitis;
Wiederkäuer (Rind, Schaf, Ziege): Diarrhöe, Sepsis, Bronchopneumonie,
Salmonellose, Pasteurellose, Mykoplasmose, Gemtalinfektionen;
Pferd: Bronchopneumonien, Fohlenlähme, puerperale und postpuerperale Infektionen, Salmonellose; Hund und Katze: Bronchopneumonie, Diarrhöe, Dermatitis, Otitis, Hamwegsinfekte, Prostatitis;
Geflügel (Huhn, Pute, Wachtel, Taube, Ziervögel und andere): Mycoplasmose, E. coh-Infektionen, chronische Luftwegserkrankungen, Salmonellose, Pasteurellose,
Psittakose.
Ebenso können bakterielle Erkrankungen bei der Aufzucht und Haltung von Nutz- und Zierfischen behandelt werden, wobei sich das antibakterielle Spektrum über die vorher genannten Erreger hinaus auf weitere Erreger wie z.B. Pasteurella, Brucella,
Campylobacter, Listeria, Erysipelothris, Corynebakterien, Borellia, Treponema, Nocardia, Rikettsie, Yersinia, erweitert.
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin Verbindungen der allgemeinen Formel (I) zur Bekämpfung von Erkrankungen, insbesondere bakterieller Erkrankungen,
Arzneimittel, enthaltend Verbindungen der Formel (I) und Hilfsstoffe sowie die Verwendung von Verbindungen der Formel (I) zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von bakteriellen Erkrankungen.
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Bekämpfung von bakteriellen Infektionen in Menschen und Tieren durch Verabreichung einer antibakteriell wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel (I).
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, vorzugsweise zusammen mit einem oder mehreren pharmakologisch unbedenklichen Hilfs- oder Trägerstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.
Der Wirkstoff kann systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck kann er auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat.
Für diese Applikationswege kann der Wirkstoff in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.
Für die orale Applikation eignen sich bekannte, den Wirkstoff schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, wie z.B. Tabletten (nicht überzogene sowie überzogene Tabletten, z.B. mit magensaftresistenten Überzügen versehene Tabletten oder Filmtabletten), Kapseln, Dragees, Granulate, Pellets, Pulver,
Emulsionen, Suspensionen, Lösungen und Aerosole.
Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan, oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und hifüsionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten und sterilen Pulvern.
Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a.
Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen/-lösungen, Sprays; lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- und Augen-präparationen, Vaginalkapseln, wässrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, Milch, Pasten, Streupuder oder Implantate.
Die Wirkstoffe können in an sich bekannter Weise in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies geschieht unter Verwendung inerter nichttoxischer, pharmazeutisch geeigneter Hilfsstoffe. Hierzu zählen u.a. Träger- Stoffe (z.B. mikrokristalline Cellulose), Lösungsmittel (z.B. flüssige Polyethylen- glycole), Emulgatoren (z.B. Natriumdodecylsulfat), Dispergiermittel (z.B. Polyvinyl- pyrrolidon), synthetische und natürliche Biopolymere (z.B. Albumin), Stabihsatoren (z.B. Antioxidantien wie Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie Eisenoxide) oder Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.
Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation
Mengen von etwa 5 bis 250 mg/kg Körpergewicht je 24 h zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Menge etwa 5 bis 100 mg/kg Körpergewicht je 24 h.
Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszu- kommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. hn Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse,
Verdünnungsyerhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.
A. Beispiele
Verwendete Abkürzungen:
Aloe Allyloxycarbonyl aq. Wässrig
Bn Benzyl
Boc tert. -Butoxycarbonyl
CDC13 Chloroform
CH Cyclohexan d dublett (im 1H-NMR) dd dublett von dublett
DCM Dichlormethan
DCC Dicyclohexylcarbodiimid
DIC Diisopropylcarbodiimid
DΓPEA Diisopropylethylamin
DMSO Dimethylsulfoxid
DMAP 4-N N-Dimethylaminopyridin
DMF Dimethylformamid d. Th. der Theorie'
EDC N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid x HCl
EE Ethylacetat (Essigsäureethylester)
ESI Elektrospray-Ionisation (bei MS)
EtOH Ethanol ges. gesättigt
HATU O-(7-Azabenzotriazol-l-yl)-NNN',N-tetramethyluronium- hexafluorphosphat
HBTU O-(Benzotriazol-l-yl)-NNN'N'-tetramethyluronium- hexafluorphosphat
HOBt 1 -Hydroxy- lH-benzotriazol x H2O h Stunde(n)
HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie LC-MS Flüssigchromatograpliie-gekoppelte Massenspektroskopie m multiplett (im 1H-NMR) min Minute
MS Massenspektroskopie
MeOH Methanol
NMR Kernresonanzspektroskopie
MTBE Methyl-tert. -buxylether
Pd/C Palladium/Kolile proz. Prozent q quartett (im 1H-NMR)
Rf Retentionsindex (bei DC) RT Raumtemperatur
Rt Retentionszeit (bei HPLC) s singulett (im !H-NMR) t triplett (im 1H-NMR)
TBS tert. -Butyldimethylsilyl
THF Tetrahydrofuran
TMSE 2-(Trimethylsilyl)-ethyl
TPTU 2-(2-Oxo-l(2H)-pyridyl)-l,l,3,3- tetramethyluroniumtetrafluoroborat
B enzyloxycarbonyl
Allgemeine Methoden LC-MS und HPLC
Methode 1 (HPLC): Säule: Kromasil C18, L-R Temperatur: 30°C; Fluss: 0.75 ml/min; Eluent A: 0.01 M HClO4, Eluent B: Acetonitril, Gradient: → 0.5 min 98%A → 4.5 min 10%A → 6.5 min 10%A. Methode 2 (HPLC): Säule: Kromasil C18 60*2 mm, L-R Temperatur: 30°C; Fluss: 0.75 ml/min, Eluent A: 0.01 M H3PO4, Eluent B: Acetonitril, Gradient: -> 0.5 min 90%A -> 4.5 min 10%A -» 6.5 min 10%A.
Methode 3 (HPLC): Säule: Kromasil C18 60*2 mm, L-R Temperatur: 30°C; Fluss:
0.75 ml/min; Eluent A: 0.005 M HClO4, Eluent B: Acetonitril, Gradient: → 0.5 min 98%A → 4.5 min 10%A → 6.5 min 10%A.
Methode 4 (HPLC): Säule: Symmetry C18 2.1x150 mm; Säulenofen: 50°C; Fluss: 0.6 ml/min; Eluent A: 0.6 g 30%ige Salzsäure/ 1 Wasser, Eluent B: Acetonitril,
Gradient: 0.0 min 90%A → 4.0 min 10%A → 9 min 10%A.
Methode 5 (LC-MS): Instrument Micromass Quattro LCZ; Säule Syrnmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Temperatur: 40°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Acetonitril + 0.1% Ameisensäure, Eluent B: Wasser + 0.1% Ameisensäure, Gradient:
0.0 min 10%A → 4 min 90%A → 6 min 90%A
Methode 6 (LC-MS): Instrument Micromass Platform LCZ; Säule Syrnmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Temperatur: 40°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Acetonitril + 0.1% Ameisensäure, Eluent B: Wasser + 0.1% Ameisensäure, Gradient:
0.0 min 10%A → 4 min 90%A → 6 min 90%A.
Methode 7 (LC-MS): Instrument Micromass Quattro LCZ; Säule Syrnmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Temperatur: 40°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Acetonitril + 0.1% Ameisensäure, Eluent B: Wasser + 0.1% Ameisensäure, Gradient:
0.0 in 5%A → 1 min 5%A → 5 min 90%A → 6 min 90%A
Methode 8 (HPLC): Säule: 250*4 mm, Kromasil 100, C-18, 5 μm; Temperatur: 40°C; Fluss: 1 ml/min; Eluent: Acetonitril 15% und 0.2 %ige Perchlorsäure 85%; UV-Detektion: 210 um. Methode 9 (LC-MS): Instrument: Waters Alliance 2790 LC; Säule: Symmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 μm; Eluent A: Wasser + 0.1% Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.1% Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 5%B -> 5.0 min 10%B ->
6.0 min 10%B; Temperatur: 50°C; Fluss: 1.0 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 10 (LC-MS): ZMD Waters; Säule: Inertsil ODS3 50 mm x 2.1 mm, 3 μm;
Temperatur: 40°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Wasser + 0.05 % Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.05 % Ameisensäure, Gradient: 0.0 min 5%B - 12 min -> 100 %B → 15 min 100%B.
Methode 11 (LC-MS): MAT 900, Finnigan MAT, Bremen; Säule: X-terra 50mm x
2.1 mm, 2.5 μm; Temperatur: 25°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Wasser + 0.01 % Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.01 % Ameisensäure, Gradient: 0.0 min 10 %B → 15 min -» 90 %B → 30 min 90%B.
Methode 12 (LC-MS): TSQ 7000, Finnigan MAT, Bremen; Säule: Inertsil ODS3 50 mm x 2.1 mm, 3 μm; Temperatur: 25°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Wasser + 0.05 % Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.05 % Ameisensäure, Gradient: 0.0 min 15%B → 15 min → 100%B → 30 min 100%B.
Methode 13 (LC-MS): 7 Tesla Apex II mit externer Elektrospray-Ionenquelle, Bruker Daltronics; Säule: X-terra C18 50 mm x 2.1 mm, 2.5 μm; Temperatur: 25°C; Fluss: 0.5 ml/min; Eluent A: Wasser + 0.1 % Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.1 % Ameisensäure, Gradient: 0.0 min 5%B - 13 min → 100%B → 15 min 100%B.
Methode 14 (HPLC): Säule: X-Terra™ der Firma Waters, RP8, 5 μm, 3.9x150 mm; Start: 95%A, 5%B; 12 min: 5%A, 95%B. Eluent A: Wasser + 0.01% Trifluoressigsäure; Eluent B: Acetonitril + 0.01 % Trifluoressigsäure; Fluss: 1.2 ml/min. Methode 15 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 10%B^ 3.0 min 95%B^ 4.0 min 95%B; Ofen: 35°C; Fluss: 0.0 min 1.0 ml/min- 3.0 min 3.0 ml/min^ 4.0 min 3.0 ml/min; UV-
Detektion: 210 nm.
Methode 16 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige
Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 10%B^ 2.0 min 95%B^ 4.0 min 95%B; Ofen: 35°C; Fluss: 0.0 min 1.0 ml/min^ 2.0 min 3.0 ml/min- 4.0 min 3.0 ml/min; UV- Detektion: 210 nm.
Methode 17 (LC-MS): Instrument: Micromass Platform LCZ mit HPLC Agilent
Serie 1100; Säule: Grom-SIL120 ODS-4 HE, 50 mm x 2.0 mm, 3 μm; Eluent A: 1 1 Wasser + 1 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 1 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 100%A - 0.2 min 100%A -» 2.9 min 30%A -» 3.1 min 10%A -> 4.5 min 10%A; Ofen: 55°C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 210 n.
Methode 18 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4.6mm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 10%B-» 3.0 min 95%B- 4.0 min 95%B; Ofen:
35°C; Fluss: 0.0 min 1.0 ml/min-» 3.0 min 3.0 ml/min^ 4.0 min 3.0 ml/min; UV- Detektion: 210 nm.
Methode 19 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2790; Säule: Uptisphere C 18, 50 mm x 2.0 mm, 3.0 μm; Eluent B:
Acetonitril + 0.05% Ameisensäure, Eluent A: Wasser + 0.05% Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 5%B -_ 2.0 min 40%B - 4.5 min 90%B^ 5.5 min 90%B; Ofen: 45°C; Fluss: 0.0 min 0.75 ml/min -> 4.5 min 0.75 ml/min-^ 5.5 min 1.25 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 20 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Säule: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 μm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1, Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 0%B -» 2.9 min 70%B -^ 3.1 min 90%B - 4.5 min 90%B; Ofen: 50 °C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 210 mn.
Methode 21 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Phenomenex Synergi 2μ Hydro- RP Mercury 20x4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90%A (Fluss: 1 ml/min) -> 2.5 min 30%A (Fluss: 2 ml/min)-> 3.0 min 5%A (Fluss: 2 ml/min) - 4.5 min 5%A (Fluss:
2 ml/min); Ofen: 50°C; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 22 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Säule: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 μm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1, Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige
Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 70%B -» 4.5 min 90%B; Ofen: 50 °C, Fluss: 0.8 ml/min, UV-Detektion: 210 nm.
Methode 23 (LC-MS): Instrument: Micromass Quattro LCZ, mit HPLC Agilent Serie 1100; Säule: Grom-SIL120 ODS-4 HE, 50 mm x 2.0 mm, 3 μm; Eluent A: 1 1
Wasser + 1 ml 50%ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 1 ml 50%ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 100%A -_ 0.2 min 100%A -> 2.9 min 30%A -> 3.1 in 10%A -» 4.5 min 10%A; Ofen: 55°C; Fluss: 0.8 ml/min; UV-Detektion: 208-400 nm. Methode 24 (LC-MS): Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2790; Säule: Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 μm; Eluent A: Wasser + 500 μl 50%ige Ameisensäure; Eluent B: Acetonitril + 500 μl 50%ige Ameisensäure / 1; Gradient: 0.0 min 5%B- 2.0 min 40%B- 4.5 min 90%B^ 5.5 min 90%B; Ofen: 45°C; Fluss: 0.0 min 0.75 ml/min^ 4.5 min 0.75 ml 5.5 min- 5.5 min
1.25 ml; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 25 (HPLC): Instrmnent: HP 1100 mit DAD-Detektion; Säule: Kromasil RP-18, 60 mm x 2 mm, 3.5 μm; Eleuent A: 5 ml HClO4/l Wasser, Eluent B: Acetonitril; Gradient: 0 min 2%B, 0.5min 2%B, 4.5 min 90%B, 15 min 90%B; Fluß:
0.75 ml/min; Temp.: 30°C; UV-Detektion: 210 nm.
Chemische Synthese der Beispiele
Synthese der Ausgangsverbindungen:
Synthese von substituierten Phenylalaninderivaten am Beispiel von (-)-3-(2-
Benzyloxy-5-iodophenyl)-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure [(-)-6A]
Synthese von geschützten Biphenyl-bisaminosäuren am Beispiel von 2(5)-
Benzyloxycarbonylamino-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxycarbonyl- 2(S)-ter -butoxycarbonyl-amino-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2(S)- trimethylsilanyl-ethylester (12A)
Synthese geschützter Hydroxyornithinderivate am Beispiel von
Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-4(R)-(t'e/*t- butyldimethylsilyloxy)-pentansäure (14A)
Synthese der Ausführungsbeispiele 1 und 2:
BocHNv LOH _OTBSi4A
NHZ
Ausgangsverbindungen und Ausführungsbeispiele
Beispiel 1A 2-Hydroxy-5-iod-benzaldehyd
Zu einer Lösung von 188 g (1.54 mol) Salicylaldehyd in 1 1 wasserfreiem Dichlormethan in einem ausgeheizten Kolben wird eine Lösung von 250 g (1.54 mol) Iod- chlorid in 600 ml wasserfreiem Dichlormethan unter Argon über 2 h zugetropft.
Nach 3 Tagen Rühren bei RT wird eine gesättigte wässrige Natriumsulfit-Lösung unter kräftigem Rühren hinzugegeben. Die organische Phase wird abgetrennt, einmal mit Wasser und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester umkristallisiert. Man erhält 216 g (57% d. Th.) des
Produktes.
LC-MS (ESI, Methode 10): m/z = 246 (M-H)".
1H-NMR (400 MHz, CDC13): δ = 6.7 (d, ITT), 7.77 (dd, ITT), 7.85 (d, 1H), 9.83 (s, 1H), 10.95 (s, 1H).
Beispiel 2A 2-Benzyloxy-5-iodbenzaldehyd
Zu einer Lösung von 100 g (0.40 mol) 2-Hydroxy-5-iodbenzaldehyd (Beispiel 1A) in
1.5 1 Dimethylformamid werden 67.2 g (0.48 mol) Kaliumcarbonat und nach wenigen Minuten 51 ml (0.44 mol) Benzylchlorid hinzugegeben. Das Reaktionsge- isch wird 24 h bei 120°C unter Rückfluss gerührt. Nach weiteren 24 h Rühren bei
RT und Zugabe von 1.5 1 Wasser kristallisiert ein Feststoff aus. Der Niederschlag wird abgesaugt, zweimal mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Der
Feststoff wird aus 230 ml Ethanol umkristallisiert. Man erhält 122.9 g (90% d. Th.) des Produktes.
LC-MS (ESI, Methode 10): m/z = 338 (M+H) +.
1H-NMR (400 MHz, CDC13): δ = 5.18 (s, 2H), 6.84 (d, ITT), 7.33-7.45 (m, 5H), 7.78
(dd, 1H), 8.12 (d, 1H), 10.4 (s, ITT).
Beispiel 3A (2-Benzyloxy-5-iod-phenyI)-methanol
Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 33.98 g (100.5 mmol) 2-Benzyloxy-5-iod- benzaldehyd (Beispiel 2A) in 200 ml Dichlormethan werden 100 ml einer
1 M Diisobutylalximiniumhydrid-Lösung in Dichlormethan zugegeben. Nach 2 h Rühren bei 0°C wird unter Kühlung eine gesättigte Kaliumnatriumtartrat-Lösung hinzugegeben (stark exotherme Reaktion) und das Reaktionsgemisch 2 h weiter gerührt. Nach Abtrennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über
Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft. Man erhält 31.8 g (93% d. Th.) des Produktes. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): δ = 2.17 (t, ITT), 4.68 (d, 2H), 5.1 (s, 2H), 6.72 (d, ITT), 7.32-7.42 (m, 5H), 7.54 (dd, ITT), 7.63 (d, ITT).
Beispiel 4A l-Benzyloxy-2-brommethyl-4-iodbenzol
Zu einer Lösung von 35 g (103 mmol) (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-methanol (Beispiel 3A) in 350 ml Toluol werden bei 40°C 3.3 ml (35 mmol) Phosphortribromid hinzugetropft. Innerhalb von 15 min wird die Temperatur des Reaktionsgemisches auf 100°C erhöht und weitere 10 min bei dieser Temperatur gerührt. Nach Abkühlung werden die beiden Phasen getrennt. Die organische Phase wird zweimal mit destilliertem Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid- Lösung gewaschen. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Die Ausbeute beträgt 41 g (99% d. Th.). 1H-NMR (300 MHz, CDC13): δ = 4.45 (s, 2H), 5.06 (s, 2H), 7.30 (m, 8H).
Beispiel 5A 2-(2-Benzyloxy-5-iod-benzyl)-2-te 't-butoxycarbonylamino-malonsäure- diethylester
Zu einer Lösung von 28 g (101.7 mmol) 2-[N-(tert-Butoxycarbonyl)amino]malon- säure-diethylester und 7.9 ml (101.7 mmol) Νatriumethylat in 300 ml Ethanol werden 41 g (101.7 mmol) von l-Benzyloxy-2-brommethyl-4-iodbenzol (Beispiel 4A) hinzugegeben. Nach 3 h Rühren bei RT saugt man das ausgefallene Produkt ab. Nach Trocknung im Vakuum werden 55 g (90% d. Th.) Produkt isoliert. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): δ = 1.12 (t, 6 H), 1.46 (s, 9H), 3.68 (s, 2H), 3.8-3.9 (m, 2H), 4.15-4.25 (m, 2TT), 5.0 (s, 2TT), 5.7 (s, ITT), 6.58 (d, IH), 7.28-7.4 (m, 6H), 7.4 (dd, IH).
Beispiel 6A (+/-)-3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure
Zu einer Suspension von 58 g (97 mmol) 2-(2-Benzyloxy-5-iod-benzyι)-2-tert- butoxycarbonylamino-malonsäurediethylester (Beispiel 5A) in 800 ml eines Gemisches von Ethanol und Wasser (7:3) werden 400 ml 1 N Natronlauge hinzugegeben. Nach 3 h unter Rückfluss wird der pH- Wert der Reaktionsmischung nach Ab- kühlung auf Raumtemperatur mit konz. Salzsäure auf ca. pH 2 eingestellt. Die
Reaktionsmischung wird eingedampft. Der Rückstand wird in MTBE und Wasser aufgenommen. Die wässrige Phase wird dreimal mit MTBE extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Trocknung im Vakuum erhält man 47 g (97% d. Th.) des Produkts. 1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 1.32 (s, 9TT), 2.68 (dd, IH), 3.18 (dd, IH), 4.25 ( ,
ITT), 5.15 (s, 2H), 6.88 (d, 1 H), 7.08 (d, IH), 7.30-7.40 (m, 3 H), 7.45-7.55 (m, 3 H). Beispiel (-V6A 3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-te/,t-butoxycarbonylamino-propionsäure
Das Racemat aus Beispiel 6A [(+/-)-3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-tert-butoxy- carbonylamino-propionsäure] wird an einer chiralen stationären Kieselgelphase, basierend auf dem Selektor aus Poly(N-Methacryloyl-L-Leucin-dicyclopropyl- methylamid), mit einem Gemisch aus z'-Hexan/Ethylacetat als Elutionsmittel ge- trennt. Das zuerst eluierte Enantiomer (98.9% ee) ist in Dichlormethan rechtsdrehend
([α] D : + 3.0°, c = 0.54, Dichlormethan) und entspπcht dem (i?)-Enantiomer Beispiel (+)-6A, wie durch Einlαistalhöntgenstπikturanalyse bestimmt wurde. Die Reinheit des zweiten, linksdrehenden Enantiomers Beispiel (-)-6A, d.h. des (S)- Enantiomers, beträgt > 99% ee.
Beispiel 7A
3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure benzylester
Unter Argon werden 10 g (20.11 mmol) (-)-3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-tert- butoxycarbonylamino-propionsäure [Beispiel (-)-6A] in 200 ml Acetonitril gelöst. Dazu werden 246 mg (2.01 mmol) 4-Dimethylammopyridin und 4.16 ml (40.22 mmol) Benzylalkohol hinzugefügt. Die Mischung wird auf -10°C abgekühlt und mit 4.63 g (24.13 mmol) EDC versetzt. Man lässt alles langsam auf RT kommen und rührt über Nacht. Nach ca. 16 h wird das Gemisch im Vakuum einrotiert und der Rückstand säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel: Dichlormethan) gereinigt. Ausbeute: 10.65 g (88% d. Th.).
HPLC (Methode 3): Rt = 6.03 min; LC-MS (Methode 9): Rt = 4.70 min MS (DCI): m/z = 605 (M+NH4) +.
1H-NMR (200 MHz, CDC13): δ = 1.38 (s, 9H), 2.97 (dd, IH), 3.12 (dd, IH), 4.50- 4.70 (m, IH), 5.00-5.10 (m, 4H), 5.22 (d, IH), 6.64 (d, IH), 7.28-7.36 (m, 7H), 7.37- 7.52 (m, 5H).
Beispiel 8A
3-[2-BenzyIoxy-5-(4,4,5,5-tetramethyl-[l,3,2]dioxaborolan-2-yl)-phenyl]-2(S)- te/'t-butoxycarbonylamino-propionsäurebenzylester
Zu einer Lösung von 10.30 g (17.53 mol) 3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-tert- butoxycarbonylaniino-propionsäurebenzylester (Beispiel 7A) in 70 ml DMSO werden 5.15 g (52.60 mmol) Kaliumacetat zugegeben. Die Mischung wird deoxy- geniert, indem durch die kräftig gerührte Lösung 15 min lang Argon durchgeleitet wird. Dann werden 5.17 g (20.16 mmol) Bis(pinacolato)diboran und 515 mg (0.70 mmol) Bis(dlphenylphosph o)feπocenpalladium(π)chlorid zugegeben. Unter leichtem Argonstrom wird nun auf 80°C erhitzt und nach 6 h wieder abgekühlt. Die Mischung wird säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel: Dichlormethan) gereinigt. Vorhandene Reste an DMSO werden per Kugelrohrdestillation abgetrennt. Der Rückstand wird erneut säulenchromatographisch an Silicagel (Lauf mittel: Cyclo- hexan:Ethylacetat 4:1) gereinigt.
Ausbeute: 8.15 g (79% d. Th.). HPLC (Methode 3): Rt = 6.26 min. LC-MS (Methode 6): Rt = 5.93 und 6.09 min. MS (EI): m/z - 588 (M+H) +. 1H-NMR (200 MHz, CDC13): δ = 1.26 (s, 6TT), 1.33 (s, 9H), 1.36 (s, 6H), 2.91-3.10
(m, IH), 3.12-3.28 (m, IH), 4.49-4.68 (m, IH), 5.05 (dd, 2H), 5.11 (dd, 2H), 5.30 (d, IH), 6.90 (d, IH), 7.27-7.37 (m, 7H), 7.38-7.42 (m, 3H), 7.55-7.62 (m, IH), 7.67 (dd, IH).
Beispiel 9A
2(S)-Amino-3-(2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure Hydrochlorid
12 g (24.13 mmol) 3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2(S)-tert-butoxycarbonylamino- propionsäure [Beispiel (-)-6A] werden unter Argon in 60 ml 4 M Salzsäure-Lösung in Dioxan gegeben und 2 h bei RT gerührt. Die Reaktionslösung wird eingeengt und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 10.47 g (100 % d. Th.). HPLC (Methode 3): Rt = 4.10 min.
MS (EI): m/z = 398 (M+H-HC1) +. 1H-NM (200 MHz, CDC13): δ = 3.17-3.31 (m, IH), 3.33-3.47 ( , IH), 4.22 (t, IH), 5.13 (s, 2TT), 6.69 (d, 1 TT), 7.24-7.40 (m, 2H), 7.41-7.45 (m, 2TT), 7.48 (d, IH), 7.52 (d, IH), 7.60 (d, IH), 8.66 (br.s, 2H).
Beispiel 10A
2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure
Eine Lösung aus 10.46 g (24.13 mmol) 2(S)-Amino-3-(2-benzyloxy-5-iod- phenyl)-propionsäure Hydrochlorid (Beispiel 9A) in DMF wird mit 9.25 ml (53.09 mol) NN-Diisopropylethylamin versetzt. Dazu gibt man 6.615 g (26.54 mmol) N-(Benzyloxycarbonyl)succinimid (Z-OSuc) zu. Die resultierende Lösung wird über Nacht gerührt und dann im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird in Dichlormethan aufgenommen und jeweils zweimal mit 0.1 N Salzsäurelösung und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Mischung wird durch Säulenchromatographie an Silicagel (Laufmittel: Cyclohexan Diethylether 9:1 bis 8:2) gereinigt. Ausbeute: 8.30 g (65% d. Th.). HPLC (Methode 3): Rt = 5.01 min.
MS (EI): m/z = 532 (M+H) +.
Η-NMR (200 MHz, DMSO): δ - 3.14-3.3 ( , 2 TT), 4.25-4.45 ( , IH), 4.97 (s, 2H), 5.14 (s, 2H), 6.88 (d, 1 H), 7.20-7.56 (m, 12 H), 7.62 (d, 1 H), 12.73 (br.s, IH). Beispiel 11A
2(S)-BenzyloxycarbonyIamino-3-(2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure-(2- trimethylsilyl)-ethylester
8.35 g (15.7 mmol) 2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyloxy-5-iod- ρhenyl)-ρroρionsäure (Beispiel 10A) werden in 150 ml THF vorgelegt und mit 2.14 g (18.07 mmol) 2-Trimethylsilylethanol und 250 mg (2.04 mmol) 4-Dimethyl- aminopyridin versetzt. Die Mischung wird auf 0° abgekühlt und mit 2.38 g (2.95 ml,
18.86 mmol) N,N-Diisopropylcarboddiimid, gelöst in 40 ml THF, versetzt. Es wird über Nacht bei RT gerührt und zur Aufarbeitung im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird in Dichlormethan aufgenommen und jeweils zweimal mit 0.1 N Salzsäurelösung und gesättigter wässriger Natπumchlorid-Lösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Mischung wird säulenchromatographisch (Silicagel, Laufmittel: Cyclohexan/Diethylether 9:1 bis 8:2) gereinigt.
Ausbeute: 8.2 g (83% d. Th.). HPLC (Methode 3): Rt = 6.42 min MS (EI): m/z = 532 (M+H) +.
1H-NMR (300 MHz, CDC13): δ = 0.01 (s, 9H), 0.88 (t, 2H), 2.96 (dd, IH), 3.13 (dd, IH), 4.04-4.17 (m, 2H), 4.51-4.62 (m, IH), 4.95-5.05 (m, 4H), 5.44 (d, IH), 6.64 (d, IH), 7.25-7.33 (m, 7 TT), 7.37 (dd, 4TT), 7.45 (dd, IH). Beispiel 12A
2(S)-BenzyIoxycarbonyIamino-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)- benzyloxycarbonyl-2-tert'-butoxycarbonylamino-ethyl)-biphenyl-3-yl]- propionsäure-2-(trimethylsilyl)-ethylester
Methode A:
Zu einer Lösung von 0.316 g (0.5 mmol) 2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyl- oxy-5-iod-phenyl)-propionsäure-(2-trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel HA) in
2.5 ml entgastem DMF werden unter Argon bei RT 45.8 mg (0.05 mmol) Bis(di- phenylphosphino)ferrocen-palladium(II)chlorid (PdCl (dppf)) und 0.325 g (1.0 mmol) Cäsiumcarbonat hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf 40°C erhitzt. Innerhalb von 30 min wird eine Lösung von 0.294 g (0.5 mmol) 3-[2-Benzyl- oxy-5 -(4,4, 5 , 5 -tetramethyl-[ 1,3,2] dioxaborolan-2-yl)-phenyl] -2(<S)-tert-butoxy- carbonylamino-propionsäurebenzylester (Beispiel 8A) in 2.5 ml entgastem DMF zugetropft. Das Reaktionsgemisch wird 4 h bei 40°C und weitere 2 h bei 50°C gerührt. Das Lösungsmittel wird eingedampft und der Rückstand in Essigsäureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird zweimal mit Wasser ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Dichlormethan/Essigsäureethylester (30/1) gereinigt. Man erhält 0.320 g (66% d. Th.) des Produktes.
Methode B: Eine Lösung von 6.99 g (11.06 mmol) 2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyl- oxy-5-iod-phenyl)-propionsäure-(2-trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel 11 A) und 6.50 g (11.06 mmol) 3-[2-Benzyloxy-5-(4,4,5,5-tetramethyl-[l,3,2]dioxaborolan-2- yl)-phenyl]-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäurebenzylester (Beispiel 8A) in 40 ml DMF wird entgast, indem Argon durchgeleitet wird (ca. 30 min). Anschließend gibt man 812 mg (1.11 mmol) Bis(diphenylphosphino)ferrocen- palladium(π)chlorid (PdCl (dppf)) und 7.21 g (22.13 mmol) Cäsiumcarbonat dazu. Das Reaktionsgemisch wird mit Argon leicht überströmt und für 2.5 h auf 80°C erhitzt. Die Mischung wird abgekühlt und säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel: Cyclohexan/Ethylacetat 7:3) gereinigt. Vor der kompletten Einengung zur Trockne wird die Mischung mit Diisopropylether versetzt. Die entstandenen Kristalle werden abgesaugt und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 6.54 g (61% d. Th.).
HPLC (Methode 3): Rt = 7.65 min
MS (EI): m/z = 987 (M+Na), 965 (M+H)+.
1H-NMR (200 MHz, CDC13): δ = 0.00 (s, 9H), 0.90 (t, 2H), 1.37 (s, 9H), 3.02-3.35
(m, 4H) 4.06-4.25 (m, 2H), 4.55-4.73 (m, 2H), 4.98-5.18 (m, 8H), 5.40 (d, ITT), 5.63 (d, IH), 6.88-7.00 (m, 2H), 7.19-7.39 (m, 20H), 7.42-7.53 (m, 4H).
Beispiel 13A
Na-(ϊert-Butoxycarbonyl)-7Λ?ε(benzyloxycarbonyl)-(2S,4i?)-hydroxyornithin- lacton
Eine Lösung von 7.60 g (17.3 mmol) 5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-te7't-butoxy- carbonylamino-4(i?)-hydroxy-pentansäure-tert-butylester (Darstellung beschrieben in Org. Leu., 2001, 3, 20, 3153-3155) in 516 ml Dichlormethan und 516 ml Trifluoressigsäure wird 2 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird eingedampft. Das zurückbleibende Rohprodukt wird in 2.6 1 wasserfreiem Methanol gelöst, und unter Rühren bei 0°C werden 6.3 g (28.8 mmol) Di-tert-Butyldicarbonat und 7.3 ml (52.43 mmol) Triethylamin hinzugegeben. Nach 15 h wird die Reaktionslösung eingedampft und der Rückstand in 1 1 Essigsäureethylester aufgenommen. Nach Trennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit einer 5%-igen Zitronensäure-Lösung, zweimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt.
Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Toluol/Aceton (5/1) gereinigt. Man erhält 4.92 g (78% d. Th.) des Produktes. LC-HR-FT-ICR-MS (Methodel3): ber. für C18H28N3O6 (M+NH4)+ 382.19726 gef. 382.19703. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): δ = 1.45 (s, 9H), 2.3-2.4 (m, IH), 2.45-2.55 (m, IH),
3.3-3.4 (m, IH), 3.5-3.6 (m, IH), 4.17-4.28 (m, IH), 4.7-4.8 (m, IH), 5.0-5.15 (m, 4H), 7.3-7.4 (m, 5H).
Beispiel 14A 5-BenzyloxycarbonyIamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-4(R)-(tert-butyl- dimethyl-silanyloxy)~pentansäure
Methode A:
Zu einer Lösung von 0.73 g (2 mmol) ^-(tert-Butoxycarbony -^benzyloxy- carbonyl)-(2S,4^)-hydroxyornithinlacton (13A) in 50 ml 1,4-Dioxan werden bei 0°C 2 ml 1 M Natronlauge hinzugegeben. Die Reaktionslösung wird 2 h gerührt und dann eingedampft. Der Rückstand wird in 50 ml Dichlormethan aufgenommen. Zu dieser Lösung werden 1.12 ml (8 mmol) Triemylamin hinzugegeben und nach einer kurzen
Zeit 1.38 ml (6 mmol) Trifluormethansulfonsäure-tert-butyl-dimethylsilylester zugetropft. Nach 3 h Rühren bei RT wird das Reaktionsgemisch mit Dichlormethan verdünnt. Die organische Phase wird mit 1 N Natriumbicarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird in 7.4 ml 1,4- Dioxan gelöst und mit 36.2 ml 0.1 N Natronlauge versetzt. Nach 3 h Rühren bei RT wird die Reaktionslösung eingedampft und der Rückstand in Wasser und Essigsäureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird dreimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 0.90 g (90% d. Th.) des Produktes.
Methode B:
Eine Lösung von 14.0 g (38 mmol) 2(S)-tert-Butoxycarbonylamino-4(i?)-hydroxy-5- nitro-pentansäure-benzylester in 840 ml Ethanol/Wasser 9/1 wird mit 1.96 g
Palladium auf Kohle (10%ig) versetzt und unter Normaldruck 24 h bei RT hydriert. Es wird über Kieselgur filtriert, und das Filtrat wird mit 14.7 g (114 mmol) Diiso- propylethylamin versetzt. Anschließend werden 11.4 g (45.6 mmol) N-(Benzyloxy- carbonyloxy)-succinimid hinzugegeben, und es wird 4 h bei RT gerührt. Die Lösung wird eingeengt, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und zweimal mit
0.1 Ν Salzsäure ausgeschüttelt. Die organische Phase wird abgetrennt und mit 14.7 g (114 mmol) Diisopropylamin alkalisch gestellt. Die Lösung wird auf 0°C gekühlt, mit 30.1 g (114 mmol) Trifluormethansulfonsäure-dimethyl-tert-butylsilylester versetzt und bei RT 2.5 h gerührt. Die organische Phase wird mit gesättigter Νatrium- hydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und einrotiert.
Der Rückstand wird in 50 ml Dioxan gelöst, mit 200 ml 0.1N Natronlauge versetzt und 3 h bei RT gerührt. Es wird mehrmals mit Essigsäureethylester extrahiert, die gesammelten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Dichlormethan/Ethanol 20/1, 9/1). Man erhält 8.11 g (43% d. Th.) des Produkts. MS (ESI): m/z = 497 (M+H)+.
1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 0.00 (s, 6H), 0.99 (s, 9H), 1.33 (s, 9H), 1.59 (m, ITT), 1.80 (m, IH), 2.75-3.15 (m, 2H), 3.81 (m, IH), 3.98 (m, IH), 4.96 (m, 2H), 7.04 (d, IH), 7.19 ( , IH), 7.30 (m, 5H), 12.37 (br. s, IH). Beispiel 15A
3-[3'-(2(<S)-Amino-2-benzyloxycarbonyl-ethyl)-4,4'-bis-benzyloxy-biphenyl-3-yl]- 2(S)-benzyloxycarbonylamino-propionsäure-2-(trimethylsilyl)-ethylester Hydrochlorid
x HCI
Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 2.65 g (2.75 mmol) 2(S)-Benzyloxy- carbonyl nino-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxycarbonyl-2-tert-butoxy- carbonylanrn o-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2-(trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel 12A) in 50 ml wasserfreiem Dioxan werden 50 ml einer 4 M Salzsäure-
Dioxan-Lösung über ca. 20 min hinzugegeben. Nach 3 h Rühren wird die Reaktionslösung eingedampft und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 100% d. Th. HPLC (Methode 3): Rt = 5.96 min. MS (EI): m/z = 865 (M+H)+.
Beispiel 16A
2(S)-[5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonyϊanιino-4(R)-(ter - butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)- benzyloxycarbonylamino-2-(2-trimethylsiIyI-ethoxycarbonyl)-ethyI]-biphenyl-3- yl}-propionsäurebenzylester
Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 0.520 g (0.58 mmol) 3-[3'-(2(S)-Amino-2- benzyloxycarbonyl-ethyl)-4,4'-bis-benzyloxy-biphenyl-3-yl]-2(S)-benzyloxy- carbonyl-amino-propionsäure-(2-trimethylsilyl)-ethylester Hydrochlorid (Beispiel 15A) und 0.287 g (0.58 mmol) 5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxy- carbonylamino-4(i-)-(te7't-butyldimethylsilyloxy)-pentansäure (Beispiel 14A) in 7.3 ml wasserfreiem DMF werden 0.219 g (0.58 mmol) HATU und 0.082 g (0.63 mmol) NN-Diisopropylemylamin hinzugegeben. Nach 30 min Rühren bei 0°C werden zusätzliche 0.164 g (1.26 mmol) NN-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 15 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird dann eingedampft und der Rückstand in Essigsäureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird dreimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Νatriumchlorid- Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Dichlormethan/Essigsäureethylester (Gradient 30/l→20/l->10/l) gereinigt. Man erhält 533 mg (66% d. Th.) des Produktes. LC-MS (ESI, Methode 12): m/z = 1342 (M+H)+, 1365 (M+Na)+. Beispiel 17A
2(S)-BenzyIoxycarbonylamino-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)- benzyIoxycarbonyl-2-(5-benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert- butoxycarbonylamino-4(iϊ)-hydroxy-pentanoylamino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}- propionsäure
Methode A:
Zu einer Lösung von 0.360 g (0.27 mmol) 2(S)-[5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)- tert-butoxycarbonylan ino-4(i?)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3- {4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxycarbonylammo-2-(2-trimethylsilyl- ethoxycarbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäurebenzylester (Beispiel 16A) in 22.5 ml wasserfreiem DMF werden 0.80 ml einer 1.0 M Lösung von Tetrabutyl- ammoniumfluorid in THF hinzugegeben. Nach 1 h Rühren bei RT wird das Reaktionsgemisch auf 0°C gekühlt und mit Wasser versetzt. Nach Zugabe von Essigsäureethylester werden die Phasen getrennt. Die organische Phase wird mit einer 1.0 M Lösung Kaliumhydrogensulfat gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 0.331 g des Rohproduktes. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt. LC-MS (ESI, Methode 10): m/z = 1129 (M+H)+. LC-HR-FT-ICR-MS: ber. für C65H69N4O14 (M+H)+ 1129.48048 gef. 1129.48123. Methode B:
Zu einer Lösung von 800 mg (0.6 mmol) 2(S)-[5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert- butoxycarbonylamino-4(i?)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3-{4,4'- bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxycarbonylamino-2-(2-trimethylsilyl-ethoxy- carbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäurebenzylester (Beispiel 16A) in 26 ml absolutem DMF werden bei RT tropfenweise 1.8 ml IN Tetrabutylammoniumfluorid in THF hinzugegeben. Nach 25 min bei RT wird auf 0°C gekühlt und mit viel Eiswasser versetzt. Es wird sofort mit Ethylacetat und etwas IN Salzsäure-Lösung versetzt. Die organische Phase wird mit Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und 1 h im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
Beispiel 18A
2(S)-(5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-4(R)-hydroxy- pentanoylamino)-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxycarbonylamino-2- pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäurebenzylester
Methode A:
Zu einer auf -25°C gekühlten Lösung von 104 mg (92 μmol) 2(S)-Benzyloxy- carbonylamino-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxycarbonyl-2-(5-benzyl- oxycarbonylamino-2(S)-te7 -butoxycarbonylamino-4(i?)-hydroxy-pentanoyl-amino)- ethyl]-biphenyl-3-yl} -propionsäure (Beispiel 17A) in 3 ml Dichlormethan werden unter Argon 90 mg Pentafluorphenol (0.49 mmol), in wenig Dichlormethan gelöst, 1.1 mg 4-Dimethylaminopvridin (10 μM) und 19.4 mg (0.10 mmol) EDC hinzugegeben. Nach 15 h Rühren wird das Reaktionsgemisch eingeengt. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
LC-MS (ESI, Methode 11): m/z = 1317 (M+Na)+, 1295 (M+H)+. LC-HR-FT-ICR-MS: ber. für C7ιH68F5N4O14 (M+H)+ 1295.46467 gef. 1295.46430.
Methode B:
691 mg (Rohgemisch, ca. 0.6 mmol) .2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-{4,4'-b^s- benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxycarbonyl-2-(5-benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert- butoxycarbonylannno-4(i?)-hydroxy-pentanoylanτino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}- propionsäure (Beispiel 17A) werden in 25 ml Dichlormethan vorgelegt und mit 547.6 mg (2.98 mmol) Pentafluorphenol, gelöst in 6 ml Dichlormethan, versetzt.
Man fügt 7.3 mg (0.06 mmol) DMAP hinzu und kühlt auf -25°C (Ethanol/Kohlendioxid-Bad). Bei -25°C werden 148 mg (0.774 mmol) EDC hinzugefügt. Die Mischung erwärmt sich über Nacht langsam auf RT. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum kurz getrocknet. Das , Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.
Beispiel 19A
14(S)-Amino-ll(S)-(3-amino-2(R)-hydroxy-propyl)-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo- 9512-diaza-tricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(19),2,4,6(21)516(20)517-hexaen-8(S)- carbonsäure Dihydrochlorid
Methode A:
Eine Lösung von 10 mg (9.9 μM) 5,17-Bis-benzyloxy-14(S)-benzyloxycarbonyl- amino- 11 (S)-(3 -benzyloxycarbonylamino-2(i?)-hydroxy-propyι)- 10,13 -dioxo-9, 12- diaza-tricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-l(19),2,4,6(21),16(20),17-hexaen-8(S)-carbon- säurebenzylester (Beispiel 20A) und 50 μl Ameisensäure in 10 ml Ethanol wird in Gegenwart von 10 mg Pd/C über 16 h unter Wasserstoff bei Nonnaldruck kräftig gerührt. Die Reaktionslösung wird eingedampft, der Rückstand in 1 N Salzsäure- Lösung aufgenommen und filtriert. Das Rohprodukt wird über eine RP 18 Kartusche mit Acetomtril/Wasser gereinigt. Man erhält 2 mg (42.8% d. Th.) des Produktes.
Methode B:
Es werden 200 mg (0.20 mmol) 5,17-Bis-benzyloxy-14(S)-benzyloxycarbonylamino- ll(S)-(3-benzyloxycarbonylamino-2(i-)-hydroxy-propyl)-10,13-dioxo-9,12-diaza- tricyclo[14.3.1.12j6]henicosa-l(19),2,4,6(21),16(20)317-hexaen-8(S)-carbonsäure- benzylester (Beispiel 20A) in einem Gemisch aus 220 ml Essigsäure/Wasser Ethanol 4:1:1 gegeben (Ethanol kann durch THF substituiert werden). Dazu gibt man 73 mg 10 %ige Palladium/Kohle (10 % Pd/C) und hydriert anschließend 15 h bei Normal- druck. Das Reaktionsgemisch wird über vorgewaschenem Kieselgur filtriert und das Filtrat im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird mit 4.95 ml 0.1 N wässriger Salzsäure versetzt und eingeengt. Man verrührt den Rückstand mit 10 ml Diethylether und dekantiert ab. Der zurückgebliebene Feststoff wird im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 103 mg (95 % d. Th.).
HPLC (Methode 3): Rt = 3.04 min; LC-MS (Methode 6): Rt = 0.38 min MS (EI): m/z = 473 (M+H)+.
1H-NMR (400 MHz, D2O): δ - 2.06-2.20 (m, IH), 2.74-2.89 (m, IH), 2.94-3.05 (m, IH), 3.12-3.25 (m, 2H), 3.53 (d, IH), 3.61-3.72 (m, IH), 3.97-4.07 (m, IH), 4.53 (s,
IH), 4.61 (d, ITT), 4.76-4.91 (m, 12H), 7.01-7.05 (m, 2TT), 7.07 (s, IH), 7.40-7.45 (m, 2H), 7.51 (d, IH).
Beispiel 20A 5,17-Bis-benzyloxy-14(S)-benzyloxycarbonylamino-ll(S)-(3- benzyloxycarbonylamino-2(R)-hydroxy-propyl)-10,13-dioxo-9,12-diaza- tricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(19),2,4,6(21),16(20),17-hexaen-8(S)- carbonsäurebenzylester
Methode A:
Zu einer Lösung von 119.3 mg 2(S)-(5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxy- carbonylamino-4(i-)-hydroxy-pentanoylamino)-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)- benzyloxycarbonylamino-2-pentafiuorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]- propionsäurebenzylester (Beispiel 18A) in 2.7 ml 1,4-Dioxan werden 4 ml einer 4 M Salzsäure-Lösung in 1,4-Dioxan hinzugegeben. Bis zum Reaktionsende werden weitere 1.5 ml 4 M Salzsäure-Lösung in 1,4-Dioxan zugegeben. Die Reaktionslösung wird eingedampft und zweimal mit Chloroform codestilliert. Das Rohprodukt (LC- HR-FT-ICR-MS, Methode 13: ber. für C66H6oF5N4Oι2 (M+H)+ 1195.41224, gef. 1195.41419) wird in 100 ml Chloroform gelöst und über 3 h zu einer sehr gut ' gerührten Suspension von 200 ml Chloroform und 100 ml gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung hinzugetropft. Die Reaktionsmischung wird 2 h kräftig gerührt. Nach Trennung der zwei Phasen wird die wässrige Phase mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit 5%-iger wässriger Zitronensäure-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Das Rohprodukt wird mit Acetonitril gewaschen und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 60.5 mg (65% d. Th.)
LC-MS (ESI, Methoden): m/z = 1011 (M+H)+.
Methode B;
Circa 0.595 mmol 2(S)-(5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonyl- amino-4(i?)-hychoxy-pentanoylamino)-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxy- carbonyl-amino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-proρionsäure- benzylester (Beispiel 18A) werden in 8 ml Dioxan gelöst und dann bei 0°C mit 16 ml 4 N Salzsäure-Lösung in Dioxan tropfenweise versetzt. Nach 45 min erfolgt erneute Zugabe von 6 ml 4 N Salzsäure-Lösung in Dioxan und nach 15 min nochmals 8 ml. Die Mischung wird 30 min bei 0°C gerührt, bevor die Reaktionslösung schonend eingeengt, mit Chloroform codestilliert (zweimal) und kurz im Hochvakuum getrocknet wird. Das Rohprodukt (732 mg, 0.59 mmol) wird in 1000 ml Chloroform gelöst und tropfenweise mit einer Lösung von 6 ml Triethylamin in 50 ml Chloroform versetzt. Es wird über Nacht bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird das Ge- misch schonend im Vakuum einrotiert und der Rückstand in Acetonitril verrührt. Die entstandenen Kristalle werden abgesaugt, mit Acetonitril gewaschen und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 360 mg (60 % d. Th.). MS (EI): m/z = 1011 (M+H)+. HPLC (Methode 3): Rt = 5.59 min.
1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 1.52-1.65 (m, IH), 1.73-1.84 (m, IH), 2.82- 3.01 ( , 3H), 3.02-3.11 (m, IH), 3.46 (s, IH), 3.57-3.68 (m, IH), 4.47-4.56 (m, ITT), 4.64-4.71 (m, IH), 4.73-4.85 (m, 2H), 4.88-5.00 (m, 4H), 5.09 (s, 2H), 5.14-5.20 (m, 4H), 6.29 (d, IH), 7.00-7.11 (m, 4H), 7.21-7.40 (m, 20H), 7.41-7.48 (m, 9H), 8.77 (d, IH), 8.87 (d, IH).
Beispiel 21A 2(5)-tert-Butoxycarbonylamino-5-nitro-4-oxo-pentansäure-benzylester
Eine Lösung A von 10 g (30.9 mmol) 2(S)-tert-Butoxycarbonylamino-bernstein- säure-1-benzylester und 5.27 g (32.5 mmol) l,r-Carbonyldiimidazol in 100 ml Tetrahydrofuran wird 5 h bei RT gerührt. Zu einer Lösung B von 3.2 g (34.2 mmol) Kalium-tert-butylat in 100 ml Tetrahydrofuran werden bei 0°C 18.8 g (30.9 mmol)
Nitromethan zugetropft. Die Lösung B wird unter Erwärmen auf RT nachgerührt, und anschließend wird bei RT Lösung A zugetropft. Die resultierende Mischung wird 16 h bei RT gerührt und mit 20%iger Salzsäure auf pH 2 eingestellt. Das Lösungsmittel wird eingedampft. Das zurückbleibende Rohprodukt wird in Essig- säureethylester/Wasser aufgenommen. Nach Trennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit Wasser ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Man erhält 13 g (99% d. Th.) des Produkts.
MS (ESI): m z = 334 (M+H)+
1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 1.37 (s, 9H), 2.91 (m, IH), 3.13 (m, IH), 4.44
(m, IH), 5.12 (s, 2H), 5.81 (m, 2H), 7.2-7.5 (m, 5H).
Beispiel 22A 2(S)-tert-Butoxycarbonylamino-4(R)-hydroxy-5-nitro-pentansäure-benzylester
Eine Lösung von 11.3 g (30.8 mmol) 2(S)-tert-Butoxycarbonylamino-5-nitro-4-oxo- pentansäure-benzylester in 300 ml Teixahydrofuran wird auf — 78°C gekühlt, mit 30.8 ml einer IM Lösung von L-Selectrid® in Tetrahydrofuran tropfenweise versetzt und 1 h bei -78°C nachgerührt. Nach Erwärmen auf RT wird die Lösung vorsichtig mit gesättigter Ammoniumchlόrid-Lösung versetzt. Die Reaktionslösung wird eingeengt und der Rückstand in Wasser und Essigsäureethylester aufgenommen. Die wässrige Phase wird dreimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird an Kieselgel 60 vorgereinigt (Laufmittel: Cyclohexan/Essigsäure- ethylester 10/1), die gesammelten Fraktionen werden eingeengt und mit Cyclo- hexan/Essigsäureethylester 5/1 ausgerührt. Die zurückbleibenden Kristalle werden abgesaugt und getrocknet. Man erhält 2.34 g (21% d. Th.) des gewünschten Diastereomers. Aus der Mutterlauge erhält man durch chromatographische Trennung an Lichrospher Diol 10 μM (Laufmittel: Ethanol/wo-Hexan 5/95) weitere 0.8 g
(6.7% d. Th.) des Produkts. MS (ESI): m/z = 369 (M+H)+.
1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 1.38 (s, 9H), 1.77 (m, IH), 1.97 (m, IH), 4.10-
4.44 (m, 3H), 4.67 (m, IH), 5.12 (m, 2H), 5.49 (d, IH), 7.25-7.45 (m, 5H).
Beispiel 23A
2(S)-[S-BenzyIoxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino- pentanoylamino]-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxycarbonylamino-2-(2- trimethylsilyl-ethoxy-carbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäureben2ylester
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 16A aus 0.47 g (0.51 mmol) der Verbindung aus Beispiel 15A und 0.19 g (0.51 mmol) Nα-Boc-Nδ-Z-L-Ornithin mit 0.19 g (0.51 mmol) HATU und 0.35 ml (1.65 mmol) N,N-Diisopropylethylamin in 5.55 ml trockenem DMF.
Ausbeute: 0.58 g (92% d.Th.) LC-MS (Methode 18): Rt = 3.46 min MS: m z = 1212 (M+H)+ Beispiel 24A
2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxy- carbonyl-2-(5-benzyloxycarbonylamino)-2(S)-tert-butoxycarbonylamino- pentanoylamino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 17A aus 0.82 g (0.68 mmol) der Verbindung aus Beispiel 23 A mit 2 Äquiv. (1.3 ml) Tetrabutylammoniumfiuorid (1 M in THF) in 30 ml getrocknetem DMF.
Ausbeute: 772 mg (94% d.Th.) LC-MS (Methode 19): Rt= 1.62 min. MS: m/z = 1112 (M+H)+ Beispiel 25A
2(S)-(5-BenzyloxycarbonyIamino-2(S)-tert.-butoxycarbonylamino-pentanoyl- amino)-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3,-(2(S)-benzyloxycarbonylamino-2-pentafluor- phenyloxycarbonylethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäurebenzylester
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 18A (Methode A) aus 422 mg (0.38 mmol) der Verbindung aus Beispiel 24A und 349 mg (1.9 mmol) Pentafluorphenol mit 80 mg (0.42 mmol) EDC und 4.63 mg (0.04 mmol) DMAP in 4 ml Dichlormethan.
Ausbeute: 502 mg (95% d.Th.) LC-MS (Methode 19): Rt = 3.13 min. MS: m/z = 1278 (M+H)+ Beispiel 26A
2(S)-(5-Benzyloxycarbonylamino-2(S)-amino-pentanoylamino)-3-[4,4'-bis- benzyloxy-3'-(2-(S)-benzyloxycarbonylamino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl- ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäurebenzylester-Hydrochlorid
215 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 25A werden in einem Eisbad unter Rühren mit 5 ml 4 M Dioxan / Chlorwasserstoff-Lösung versetzt. Man lässt eine Stunde rühren und dampft alles im Vakuum bis zur Gewichtskonstanz ein.
Ausbeute: 200 mg (92% d.Th.) LC-MS (Methode 19): Rt = 4.25 min. MS: m/z = 1178 (M+H)+
Beispiel 27A
5,17-Bis-benzyloxy-14(S)-benzyIoxycarbonyl-amino-ll(S)-(3-benzyloxy- carbonylamino-propyl)-10,13-dioxo-9,12-diaza-tricyclo[14.3.1.12'6]-henicosa- l(19),2,4,6(21),16(20),17-hexaen-8(S)-carbonsäurebenzyIester
1.35 g (0.91 mmol) der Verbindung aus Beispiel 26A werden in 3 1 Chloroform vorgelegt und unter kräftigem Rühren innerhalb von 20 min bei RT mit 2.54 ml (18.2 mmol) Triethylamin in 50 ml Chloroform versetzt. Man lässt über Nacht nachrühren und dampft alles im Vakuum zur Trockne ein. Den Rückstand verrührt man mit 5 ml Acetonitril, filtriert und trocknet den Rückstand bis zur Gewichtskonstanz. Ausbeute: 890 mg (93% d.Th.) LC-MS (Methode 19): Rt = 5.10 min. MS: m/z = 994 (M+H)+
Beispiel 28A
(8S,HS,14S)-14-Amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo-9.12- diazatricyclo[14.3.1.12'6]-henicosa-l(20),2(21),3,5,6,18-hexaen-8-carbonsäure- Dihydrochlorid
50 mg (0.05 mmol) der Verbindung aus Beispiel 27A werden in 50 ml Eisessig /
Wasser / Ethanol (4 / 1 / 1) suspendiert, mit 30 mg Pd/C (10%-ig)-Katalysator ver- setzt und 20 Stunden bei RT hydriert. Nach Abfiltrieren des Katalysators über
Kieselgur dampft man das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein und versetzt unter
Rühren mit 2.5 ml 0.1 N Salzsäure. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und trocknet bis zur Gewichtskonstanz.
Ausbeute: 17 mg (63% d. Th.) DC (Methanol / Dichlormethan / 25%-iger Ammoniak = 5 / 3 / 2): Rf = 0.6
LC-MS (Methode 9): Rt = 0.28 min.
MS: m/z = 457 (M+H)+
Beispiel 29 A (8S,llS,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)-amino-ll-[3-[(tert-butoxycarbonyl)- amino]propyl}-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12'6]- henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
225 mg (0.42 mmol) der Verbindung aus Beispiel 28A werden in 2.25 ml Wasser und 2.25 ml 1 N Natronlauge gelöst, im Eisbad gekühlt und unter Rühren mit 278 mg. (1.27 mmol) Di-tert-butyl-dicarbonat versetzt. Man erwärmt nach der Zugabe kurz auf 30°C und lässt über Nacht bei RT weiterreagieren. Man säuert mit 0.1 N Salzsäure bis etwa pH = 5 an und dampft alles vorsichtig im Vakuum bei RT zur Trockne ein. Den Rückstand rührt man mit Diethylether aus, filtriert und trocknet ihn bis zur Gewichtskonstanz. Ausbeute: 259 mg (93% d.Th.) LC-MS (Methode 18): Rt = 1.96 min. MS: m/z = 656 (M+H)+
Beispiel 30A 2-(Benzyloxy)-N-(tert-butoxycarbonyl)-iod-N-methyl-L-phenylalanin
Unter Argonatmosphäre werden 500 mg (1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 6A in 20 ml THF gelöst, mit 90.5 mg (3.02 mmol) Natriumhydrid und 0.51 ml (1141.6 mg; 8.04 mmol) Methyliodid (80%-ig) versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Man verdünnt mit 25 ml Essigsäureethylester und 25 ml Wasser und stellt mit 0.1 N Salzsäure auf pH = 9 ein. Man engt im Vakuum auf ein kleines Volumen ein. Man versetzt mit 10 ml Essigsäureethylester und 10 ml Wasser, schüttelt alles heftig und trennt die organische Phase ab. Nach Trocknen mit Natriumsulfat und Einengen im Vakuum erhält man 140 mg Produkt (19% d. Th.). Die wässrige Phase säuert man an (pH = 3) und schüttelt sie dreimal mit 20 ml Essigsäureethylester aus. Nach Einengen im Vakuum und Trocknen im Vakuum erhält man 351 mg Produkt (68% d. Th.). LC-MS (Methode 17): Rt = 3.9 min. MS (EI): m z = 511 (M+H)+
Beispiel 31A Benzyl-2-(benzyloxy)-N-(tert-butoxycarbonyl)-5-iod-N-methyl-L-phenyIalaninat
Die Herstellung erfolgt analog zu Beispiel 7A aus 350 mg (0.68 mmol) der Verbindung aus Beispiel 30A, 8.29 mg (0.07 mmol) DMAP, 148 mg (1.37 mmol) Benzylalkohol und 157.46 mg (0.82 mmol) EDC in 3 ml Acetonitril. Ausbeute: 382 mg (93% d. Th.) LC-MS (Methode 17): Rt = 4.8 min. MS (EI): m/z = 601 (M+H)+
Beispiel 32A
Benzyl-2-(benzyloxy)-N-(tert-butoxycarbonyl)-N-methyl-5-(4,4,5,5-tetramethyl- l,3,2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat
Analog zu Beispiel 8A werden 380 mg (0.63 mmol) der Verbindung aus Beispiel 31 A in einem ausgeheizten Kolben in 4 ml DMF vorgelegt und unter Rühren bei Raumtemperatur mit 184.5 mg (0.73 mmol) 4,4,4',4',535,5',5'-Octamethyl-2,2'-bi- 1,3,2-dioxaborolan, 186 mg (1.9 mmol) Kaliumacetat und 23.15 mg (0.03 mmol) Bis(diphenylphosphino)-ferrocen-palladium(lI)chlorid versetzt. Man lässt 4 h bei 80°C reagieren. Nach der Aufarbeitung und Chromatographie (Kieselgel 60, Laufmittel: Cyclohexan/Essigsäureethylester = 4/1) erhält man das Produkt. Ausbeute: 196 mg LC-MS (Methode 17): Rt = 4.9 min. MS (EI): m/z = 601 (M+H)+ Beispiel 33A
2(S)-BenzyloxycarbonyIamino-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxy- carbonyl-(2-tert-butoxycarbonyl-2-methyl)amino-ethyl)-biphenyl-3-yl]- propionsäure-2-(trimethylsilyl)-ethylester
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 12A (Methode B) aus 190 mg (0.32 mmol) der Verbindung aus Beispiel 32A, 199.5 mg (0.32 mmol) der Verbindung aus Bei- spiel 11A, 195.5 mg (0.63 mmol) Cäsiumcarbonat und 23.15 mg (0.03 mmol) Bis(di- phenylphosphino)feπocen-palladium(π)chlorid in 1.5 ml DMF unter Argonatmosphäre.
Ausbeute: 212 mg (66% d. Th.) LC-MS (Methode 22): Rt= 4.86 min. MS (EI): m/z - 978 (M+H)+
Beispiel 34A
2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-[4,4'-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxy- carbonyl-2-methylaminoethyl-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2-(trimethylsilyl)- ethylester-Hydrochlorid
Die Herstellxmg erfolgt analog Beispiel 15A aus 930 mg (0.95 mmol) der Verbindung aus Beispiel 33A und 22.14 ml einer 4 M Dioxan/Chlorwasserstofflösung in 15 ml Dioxan.
Ausbeute: 915 mg (78% d. Th.) LC-MS (Methode 22): Rt = 2.53 min. MS (EI): m/z = 878 (M+H)+
Beispiel 35A
2(S)-{Methyl-[5-benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonylamino-4(R)- (tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoyl]amino}-3-{4,4'-bis-ben2yloxy-3'-[2(S)- benzyloxycarbonylamino-2-(2-trimethylsilyl-ethoxycarbonyl)ethyl]-biphenyl-3- yl}-propionsäurebenzylester
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 16A aus 922 mg (1.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 34A, 0.5 g (1.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 14A, 421 mg (1.11 mmol) HATU und 0.7 ml (518 mg; 3.27 mmol) DIPEA in 4.2 ml DMF.
Ausbeute: 703 mg (51% d. Th.) LC-MS (Methode 16): Rt = 3.17 min. MS (EI): m/z = 1356 (M+H)+
Beispiel 36A
2(S)-Benzyloxycarbonylamino-3-{4,4'-bis-benzyloxy-3'-[2(S)-benzyloxy- carbonyl-2-{methyl-(5-benzyloxycarbonylamino-2(S)-tert-butoxycarbonyl- amino-4(R)-hydroxy-pentanoyl)amino}-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 17A aus 360 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 35A und 0.8 ml (3 Äquiv.) 1 M Tetrabutylammoniumfluorid- Lösung (THF) in 20 ml DMF. Ausbeute: 159 mg (53% d. Th.)
LC-MS (Methode 21): Rt = 3.19 min. MS (EI): m/z = 1142 (M+H)+
Beispiel 37A 2(S)-[Methyl-(5-benzyIoxycarbonylamino)-2(S)-tert-butoxycarbonyIamino-4(R)- hydroxy-pentanoyl]amino-3-[4,4*-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxycarbonyl- amino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäure- benzylester
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 18A (Methode A) aus 330 mg (0.29 mmol) der Verbindung aus Beispiel 36A, 265.6 mg (1.44 mmol) Pentafluoφhenol, 3.53 mg (0.03 mmol) DMAP und 60.87 mg (0.32 mmol) EDC in 10 ml Dichlormethan. Ausbeute: 271 mg (69% d. Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 3.38 min. MS (EI): m/z = 1308 (M+H)+ Beispiel 38A
2(S)-[Methyl-(5-benzyloxycarbonylamino)-2(S)-amino-4(R)-hydroxy- pentanoyl]amino-3-[4,4,-bis-benzyloxy-3'-(2(S)-benzyloxycarbonylamino-2- pentafluor-phenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäurebenzylester-
Hydrochlorid
130 mg (0.1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 37A werden in 0.5 ml Dioxan gelöst und vorsichtig mit 5 ml 4 M Dioxan-Chlorwasserstoff-Lösung versetzt (Eisbad). Nach 30 Minuten lässt man bei Raumtemperatur noch 2 h weiterreagieren. Man dampft alles im Vakuum zur Trockne ein und trocknet im Hochvakuum bis zur Gewichtskonstanz.
Ausbeute: 130 mg (70% d. Th.) LC-MS (Methode 15): Rt = 2.68 min. MS (EI): m/z = 1208 (M+H)+
Beispiel 39A
Benzyl-(8S, HS, 14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-ll-
((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl-9-methyl-10,13-dioxo-
, 2.6
9,12-diazatricyclo[14.3.1.1^°]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat
130 mg (0.1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 38A werden in 220 ml trockenem Chloroform vorgelegt. Bei Raumtemperatur versetzt man unter Rühren innerhalb von 20 Minuten mit 23 ml (20 Äquiv.) Triethylamin in 5 ml Dichlormethan. Man lässt über Nacht nachrühren. Anschließend wird alles im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird mit Acetonitril ausgerührt. Nach dem Trocknen des Rückstandes gewinnt man 44 mg Produkt. Aus der Mutterlauge wird durch RP- HPLC noch weiteres Produkt gewonnen (30 mg). Ausbeute: 74 mg (69% d. Th.)
LC-MS (Methode 15): Rt = 3.13 min. MS (EI): m/z = 1024 (M+H)+
Beispiel 40A
(8S, HS, 14S)-14-Amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17-dihydroxy-9- methyl-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18- hexaen-carbonsäure-Di-trifiuoracetat
33 mg (0.032 mmol) der Verbindung aus Beispiel 39A werden mit verdünnter Trifluoressigsäure vorsichtig behandelt. Die entstandene klare Lösung wird an- schließend lyophilisiert.
Ausbeute: 23 mg (quantitativ) LC-MS (Methode 15): Rt = 0.92 min. MS (EI): m/z = 486 (M+H)+
Beispiel 41A
(8S, HS, 14S)-5,17-B.is(benzyloxy)-14-{[benzyloxycarbonyl]amino}-ll-(2R)-3-
{[benzyloxycarbonyl]-amino}-2-hydroxypropyl-9-methyl-10,13-dioxo-9,12- diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
37 mg (0.04 mmol) der Verbindung aus Beispiel 39A werden in 2 ml THF gelöst, mit 0.14 ml 1 N Lithiumhydroxid-Lösung versetzt und 3 h bei Raumtemperatur ge- rührt. Anschließend säuert man mit 1 N Salzsäure an und dampft alles im Hochvakuum zur Trockne ein. Ausbeute: 33 mg (71% d. Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 2.90 min. MS (EI): m/z = 934 (M+H)+
Analog zu den oben aufgeführten Vorschriften der Beispiele 35A bis 41 A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 42A bis 48A aus den entsprechenden Edukten hergestellt:
Beispiel 49A
2-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]ethyl (8S,llS,14S)-14-[(tert- butoxycarbonyl)amino]-ll-{3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]propyl}-5,17- dihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.1 '6]henicosa- l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat
133 mg (0.2 mmol) der Verbindung aus Beispiel 29A werden in 2 ml Dichlormethan vorgelegt, mit 97.9 mg (0.61 mmol) tert-Butyl-2-hydroxyethylcarbamat und 12.37 mg (0.1 mmol) DMAP versetzt und auf 0°C abgekühlt. Man versetzt mit 47.3 mg (0.37 mmol) DIC und rührt alles 1 h bei 0°C und danach 4 h bei Raumtemperatur. Anschließend dampft man alles im Vakuum zur Trockne ein und trennt den Rückstand mittels HPLC. Ausbeute: 18 mg (11 % d.Th.) LC-MS (Methode 24): Rt = 3.8 min. MS (EI): m/z = 799 (M+H)+
1.0
Beispiel 50A
(8S,llS,14S)-5,17-Bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-ll-(3- {[(benzyloxy)carbonyl]amino}propyl)-10,13-dioxo-9,12-diazatri- cyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
15
200 mg (0.2 mmol) der Verbindung aus Beispiel 27A werden in 8 ml THF und 4 ml DMF vorgelegt und unter Rühren mit 0.8 ml einer 1 M wässrigen Lithiumhydroxid- Lösung (4 Equivalente) versetzt. Nach 2 h Rühren bei Raumtemperatur entsteht ein Gel. Man versetzt mit 0.8 ml 1 N Salzsäure und noch etwas Wasser. Anschließend dampft man alles im Vakuum zur Trockne ein, rührt mit Wasser aus, filtriert den Niederschlag und trocknet ihn. Ausbeute: 140 mg (77% d.Th.) LC-MS (Methode 18): Rt = 2.83 min. MS (EI): m/z = 904 (M+H)+
1.0
Beispiel 51A
2-(Benzyloxy)-2-oxoethyl-(8S,HS,14S)-5,17-bis(benzyloxy)-14-{[(benzyloxy)- carbonyl]amino}-ll-(3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}propyl)-10,13-dioxo-9,12- diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat
15
20 mg (0.02 mmol) der Verbindung aus Beispiel 50A werden in 2 ml DMF aufgeschlämmt und erwärmt (Ölbadtemperatur 50°C). Zu der feinen Suspension gibt man nach 50 Minuten 9.16 mg (0.07 mmol) fein gepulvertes Kaliumcarbonat. Nach 1 h Rühren versetzt man mit 10.12 mg (0.04 mmol) Bromessigsäurebenzylester und lässt über Nacht unter Rühren bei 50-60°C Badtemperatur reagieren. Nach dem Abkühlen versetzt man mit Wasser und rührt den Niederschlag aus. Nach Filtration und Trocknen erhält man das Produkt. Ausbeute: 11 mg (36% d.Th.)
LC-MS (Methode 24): Rt = 4.2 min. MS (EI): m/z = 1052 (M+H)+
Beispiel 52A (8S,llS,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]-ll-{3-[(tert-butoxycarbonyl)- amino]propyl}-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]- henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carbonsäure
90 mg (0.16 mmol) der Verbindung aus Beispiel 4.0A werden in 2.5 ml Wasser gelöst, mit 85.3 mg (0.8 mmol) Natriumcarbonat versetzt, im Eisbad gekühlt und mit 105.3 mg (0.48 mmol) Di-(tert-butyl)-dicarbonat in 1.2 ml Methanol versetzt. Man lässt über Nacht bei Raumtemperatur rühren, engt im Vakuum auf ein kleines Volumen ein und säuert mit 1 N Salzsäure bis pH = 2 an. Der anfallende Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet.
Ausbeute: 89 mg (73% d.Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 1.8 min. MS (EI): m/z = 686 (M+H)+ Beispiel 53A
2-[(tert-Butoxycarbonyl)amino]ethyl-(8S,llS,14S)-14-[(tert-butoxycarbonyl)- amino]-H-{(2S)-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxypropyl}-5,17-dihy- droxy-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18- hexaen-8-carboxylat
Die, Herstellung erfolgt analog Beispiel 49A aus 20 mg (0.03 mmol) der Verbindung aus Beispiel 52A und 9.4 mg (0.06 mmol) tert-Butyl-2-hydroxyethylcarbonat mit
6.7 mg (0.03 mmol) EDC in 1 ml Acetonitril.
Ausbeute: 4 mg (15% d.Th.)
LC-MS (Methode 21): Rt = 2.19 min. MS (EI) : m/z = 829 (M+H)+ Ausführungsbeispiele
Beispiel 1
(8S,llS,14S)-14-Amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17-dihydroxy- 10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen- 8-carbonsäuremethylester Dihydrochlorid
2.2 mg (4.0 μmol) 14(S)-Amino-l l(S)-(3-aπιino-2(i2)-hydroxy-propyl)-5,17-dihy- droxy-10, 13-dioxo-9, 12-diaza-tricyclo[14.3.1. l2'6]henicosa- l(19),2,4,6(21),16(20),17-hexaen-8(S)-carbonsäure Dihydrochlorid (Beispiel 19A) werden unter Argonschutzgasatmosphäre in trockenem Methanol (p.a., 1.2 ml) gelöst. Unter starkem Rühren werden bei RT 50 μl (0.2 μmol) einer 4M Dioxan / Chlorwasserstoff-Lösung zugetropft. Man rührt bei RT und verfolgt die Reaktion mittels HPLC-Chromatographie. Nach etwa ein bis zwei Tagen ist vollständiger Umsatz erreicht. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingedampft und im Hochvakuum getrocknet, wobei man das Produkt in 4.4 mg (97 % d.Th.) Ausbeute erhält. HPLC/UV-Vis (Methode 14): Rt = 3.6 min. λmax (qualitativ) = 204 nm (s), 269 (m), 285 (sh) (H2O/Acetonitril + 0.01 % TFA [7:3]).
LC-MS (ESI): m/z ( %) = 487 (35) [M + H]+, 285 (45), 265 (100). LC-HR-FT-ICR-MS ber. für C24H31N4O7 [M+H]+ 487.2187 gef. 487.2189. Beispiel 2
(8S,llS,14S)-14-Amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17-dihydroxy- 10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen- 8-carbonsäureethylester Dihydrochlorid
1.6 mg (2.9 μmol) 14(S)-Amino-ll(S)-(3-amino-2(i?)-hydroxy-propyl)-5,17-di- hydroxy-10,13-dioxo-9,12-diaza-tricyclo[14.3.1.12'6]henicosa- l(19),2,4,6(21),16(20),17-hexaen-8(S)-carbonsäure Dihydrochlorid (Beispiel 19A) werden unter Argonschutzgasatmosphäre in absolutem Ethanol (1.0 ml) gelöst. Unter starkem Rühren werden bei RT 40 μl (0.15 μmol) einer 4M Dioxan / Chlorwasserstoff-Lösung zugetropft. Man rührt bei Raumtemperatur und verfolgt die Reaktion mittels HPLC-Chromatographie. Nach etwa ein bis zwei Tagen ist voll- ständiger Umsatz erreicht. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingedampft und im Hochvakuum getrocknet. Man erhält das Produkt in 1.4 mg (85 % d.Th.) Ausbeute.
HPLC/UV-Vis (Methode 14): Rt = 3.9 min., λmax (qualitativ) = 206 nm (s), 270 (m), 285 (sh) (H2O/Acetonitril + 0.01 % TFA [7:3]).
LC-MS (ESI): m/z (%) = 501 (90) [M + H]+. LC-HR-FT-ICR-MS ber. für C25H33N4O7 [M+H]+ 501.2344 gef. 501.2347. Beispiel 3
(8S, HS, 14S)-14-Amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo-9,12- diazatricyclo[14.3.1.1 ,6]-henicosa-l(20),2(21),3,15,16,18-hexaen-8-carbonsäure- methylester-Dihydrochlorid
30 mg (0.057 mmol) der Verbindung aus Beispiel 28A werden unter Argonatmosphäre in 15 ml Methanol vorgelegt, mit 0.5 ml 4M Dioxan / Chlorwasserstoff- Lösung versetzt und 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend dampft man alles im Vakuum zur Trockne ein und trocknet den Rückstand bis zur Gewichtskonstanz.
Ausbeute: 25.2 mg (82% d.Th.) LC-MS (Methode 23): Rt = 2.9 min. MS (EI): m/z = 470 [M+H]+
Beispiel 4
(8S, HS, 14S)-14-Amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-10,13-diόxo-9,12- diazatricyclo[14.3.1.12,6]-henicosa-l(20),2(21),3,15,16,18-hexaen-8-carbon- säure2-methylester-Trihydrochlorid
9 mg (0.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 49A werden unter Kühlung in einem Eisbad mit 1 ml 4 M Dioxan / Chlorwasserstoff-Lösung versetzt. Nach zwei Stunden Rühren fällt ein Niederschlag an. Er wird abfiltriert und im Hochvakuum bis zur Gewichtskonstanz getrocknet. Ausbeute: 7 mg (73% d.Th.) LC-MS (Methode 20): Rt = 0.27 min. MS (EI): m/z = 499 [M+H]+
Beispiel 5
Isobutyl-(8S,llS,14S)-14-amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyI]-5,17- dihydroxy-9-methyl-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo [14.3.1.1 ' jhenicosa- l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Dihydrochlorid
10 mg (0.02 mmol) der freien Säure (Beispiel 19A) werden in 1.25 ml Isobutanol aufgeschlämmt und mit 10 Tropfen Dioxan / 4M Chlowasserstoff-Lösung versetzt. Unter Rühren lässt man 3 Tage bei RT reagieren. Man dampft alles im Vakuum zur Trockne ein und trocknet den Rückstand bis zur Gewichtskonstanz. Ausbeute: 11 mg (90% d.Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 1.14 min. MS (EI): m/z = 542 (M+H)+
Beispiel 6
Methyl-(8S,llS,14S)-14-amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17- dihydroxy-9-methyl-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa- l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Bis(trifluoracetat)
Bei der Hydrierung von 65 mg (0.06 mmol) der Verbindung aus Beispiel 39A analog Beispiel 40 A wird die freie Säure in Gegenwart von Chlorwasserstoff mit etwas Methanol behandelt und bei 50°C Badtemperatur im Vakuum zur Trockne einge- dampft. Dabei entsteht der Methylester. Nach Zusatz einiger Tropfen Trifluoressigsäure wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und bis zur Gewichtskonstanz getrocknet.
Ausbeute: 46.2 mg (quantitativ) LC-MS (Methode 18): Rt = 1.19 min. MS (EI): m/z = 500 (M+H)+
Beispiel 7
Methyl-(8S,HS,14S)-14-amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-9-methyl- 10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.1 ,6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen- 8-carboxylat Dihydrochlorid
X 2 HCI
Die Herstellimg erfolgt analog Beispiel 5 aus 1.2 mg der Verbindung aus Beispiel 40A mit 0.3 ml absolutem Methanol und 3 Tropfen 4M Dioxan / Chlorwasserstoff- Lösung.
Ausbeute: 1.2 mg (quantitativ) . LC-MS (Methode 21): Rt = 0.89 min. MS (EI): m/z = 484 (M+H)+
Beispiel 8
({[(8S,llS,14S)-14-Amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-10,13-dioxo-9,12- diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-yl]carbonyl}- oxy)carbonsäure Dihydrochlorid
X 2 HCI
11 mg (0.01 mmol) der Verbindung 51A werden in Ethanol/Wasser/Eisessig suspendiert, mit 6 mg Pd/C (10%-ig)-Katalysator versetzt und 6 h bei RT und Normal- druck hydriert. Man dampft alles im Vakuum zur Trockne ein, rührt das gewünschte
Produkt mit Acetonitril aus und fällt es mit 0.1 N Salzsäure aus. Man löst es in wenig Methanol und trennt das Produkt auf einer Dickschichtplatte, Laufinittel: Eisessig / Ethanol / Wasser = 4/1/1. Nach Extraktion des Kieselgels mit Methanol dampft man im Vakuum zur Trockne ein und erhält das Produkt. Ausbeute: 4 mg (41 % d.Th.)
LC-MS (Methode 18): Rt = 1.11 min. MS (EI): m/z = 514 (M+H)+ Beispiel 9
Isopropyl-(8S,HS,14S)-14-amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17- dihydroxy-9-methyl-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12,6]henicosa- l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Dihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 5 aus 10 mg (0.02 mmol) der Verbindung aus Beispiel 19A und 1 ml Isopropanol mit 10 Tropfen 4M Dioxan / Chlorwasserstoff- Lösung.
Ausbeute: 1.2 mg (11% d.Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 1.10 min.
MS (EI): m/z = 528 (M+H)+
Beispiel 10
2-Aminoethyl-(8S,llS,14S)-14-amino-ll-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5,17- dihydroxy-9-methyl-10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.1 '6]henicosa- l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen-8-carboxylat Trihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt analog zu Beispiel 4 aus 4 mg der Verbindung aus Beispiel 53A mit 1 ml 4M Dioxan / Chlorwasserstoff-Lösung, Reaktionszeit: 60 Minuten. ■ ■ Ausbeute: 3 mg (97% d.Th.)
HPLC (Methode 25):Rt = 3.0 min. MS (EI): m/z = 528 (M+H)+
Beispiel 11 Isobutyl-(8S,HS,14S)-14-amino-ll-(3-aminopropyl)-5,17-dihydroxy-9-methyI-
10,13-dioxo-9,12-diazatricyclo[14.3.1.12'6]henicosa-l(20),2(21),3,5,16,18-hexaen- 8-carboxyIat Dihydrochlorid
X 2 HCI Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 5 aus 5 mg (0.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 28 A und 2 ml Isobutanol mit 10 Tropfen 4M Dioxan / Chlorwasserstoff- Lösung.
Ausbeute: 5 mg (89% d.Th.) LC-MS (Methode 21): Rt = 1.14 min. MS (EI): m/z = 526 (M+H)+
B. Bewertung der physiologischen Wirksamkeit
Die in vztro-Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden:
In vitro Transkription-Translation mit E. coli Extrakten
Zur Herstellung eines S30-Extraktes werden logaritiirnisch wachsende Escherichia coli MRE 600 (M. Müller; University Freiburg) geerntet, gewaschen und wie für den in vitro Transkriptions-Translations-Test beschrieben eingesetzt (Müller, M. and
Blobel, G. Proc Natl Acad Sei U S A (1984) 81, pp.7421-7425).
Dem Reaktionsmix des in vitro Transkriptions-Translations-Tests werden zusätzlich' 1 μl cAMP (11,25 mg/ml) je 50 μl Reaktionsmix zugegeben. Der Testansatz beträgt 105 μl, wobei 5 μl der zu testenden Substanz in 5 %igem DMSO vorgelegt werden.
Als Transkriptionsmatrize werden 1 μg/lOOμl Ansatz des Plasmides pBESTLuc (Promega, Deutschland) verwendet. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 μl Luziferinlösung (20 mM Tricine, 2,67 mM MgSO4, 0,1 M EDTA, 33,3 mM DTT pH 7,8, 270 μM CoA, 470 μM Luziferin, 530 μM ATP) zugegeben, und die entstehende Biolumineszenz wird für 1 Minute in einem Luminometer gemessen. Als
IC50 wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50 %igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt.
In vitro Transkription-Translation mit S. aureus Extrakten
Konstruktion eines S. aureus Luziferase Reporterplasmids
Zur Konstruktion eines Reporterplasmids, welches in einem in vitro Transkriptions- Translations-Assay aus S. aureus verwendet werden kann, wird das Plasmid pBESTluc (Promega Corporation, USA) verwendet. Der in diesem Plasmid vor der Firefly Luziferase vorhandene E. coli tac Promoter wird gegen den capAl Promoter mit entsprechender Shine-Dalgarno Sequence aus S. aureus ausgetauscht. Dazu werden die Primer CAPFor 5'-CGGCC-
AAGCTTACTCGGATCCAGAGTTTGCAAAATATACAGGGGATTATATATAA TGGAAAACAAGAAAGGAAAATAGGAGGTTTATATGGAAGACGCCA-S' und CAPRev 5'-GTCATCGTCGGGAAGACCTG-3' verwendet. Der Primer CAPFor' enthält den capAl Promotor, die Ribosomenbindestelle und die 5'-Region des Luziferase Gens. Nach PCR unter Verwendung von pBESTluc als Template kann ein
PCR-Produkt isoliert werden, welches das Firefly Luziferase Gen mit dem fusionierten capAl Promotor enthält. Dieses wird nach einer Restriktion mit Clal und Hindm in den ebenfalls mit Clal und Hindlü verdauten Vektor pBESTluc ligiert. Das entstandene Plasmid pla kann in E. coli repliziert werden und als Template im S. aureus in vitro Transkriptions-Translations-Test verwendet werden.
Herstellung von S30 Extrakten aus S. aureus
Sechs Liter BHI Medium werden mit einer 250 ml Übernachtkultur eines S. aureus Stammes inokuliert und bei 37°C bis zu einer OD600nm von 2-4 wachsen gelassen. Die Zellen werden durch Zentrifugation geemtet und in 500 ml kaltem Puffer A
(lO mM Tris-acetat, pH 8,0, 14 mM Mg-acetat, 1 mM DTT, 1 M KC1) gewaschen. Nach erneutem Abzentrifugieren werden die Zellen in 250 ml kaltem Puffer A mit 50 mM KC1 gewaschen und die erhaltenen Pellets bei -20°C für 60 min eingefroren. Die Pellets werden in 30 bis 60 min auf Eis aufgetaut und bis zu einem Gesamtvolumen von 99 ml in Puffer B (10 mM Tris-acetat, pH 8,0, 20 mM Mg- acetat, 1 mM DTT, 50 mM KC1) aufgenommen. Je 1,5 ml Lysostaphin (0,8 mg/ml) in Puffer B werden in 3 vorgekühlte Zentrifugenbecher vorgelegt und mit je 33 ml der Zellsuspension vermischt. Die Proben werden für 45 bis 60 min bei 37°C unter gelegentlichem Schütteln inkubiert, bevor 150 μl einer 0,5 M DTT Lösung zugesetzt werden. Die lysierten Zellen werden bei 30 000 x g 30 min bei 4°C äbzentrifugiert. Das Zellpellet wird nach Aufnahme in Puffer B unter den gleichen Bedingungen nochmals zentrifugiert und die gesammelten Überstände werden vereinigt. Die Überstände werden nochmals unter gleichen Bedingungen zentrifugiert und zu den oberen 2/3 des Überstandes werden 0,25 Volumen Puffer C (670 mM Tris-acetat, pH 8,0, 20 mM Mg-acetat, 7 mM Na3-Phosphoenolpyruvat, 7 mM DTT, 5,5 mM ATP, 70 μM Aminosäuren (complete von Promega), 75 μg Pyruvatkinase (Sigma,
Deutschland)/ml gegeben. Die Proben werden für 30 min bei 37°C inkubiert. Die Überstände werden über Nacht bei 4°C gegen 2 1 Dialysepuffer (10 mM Tris-acetat, pH 8,0, 14 mM Mg-acetat, 1 mM DTT, 60 mM K-acetat) mit einem Pufferwechsel in einem Dialyseschlauch mit 3500 Da Ausschluss dialysiert. Das Dialysat wird auf eine Proteinkonzentration von etwa 10 mg/ml konzentriert, indem der
Dialyseschlauch mit kaltem PEG 8000 Pulver (Sigma, Deutschland) bei 4°C bedeckt wird. Die S30 Extrakte können aliquotiert bei -70°C gelagert werden.
Bestimmung der ICsn im S. aureus in vitro Transcriptions-Translations-Assay Die Inhibition der Proteinbiosynthese der Verbindungen kann in einem in vitro
Transkriptions-Translations-Assay gezeigt werden. Der Assay beruht auf der zellfreien Transkription und Translation von Firefly Luziferase unter Verwendung des Reporterplasmids pla als Template und aus S. aureus gewoimenen zellfreien S30 Extrakten. Die Aktivität der entstandenen Luziferase kann durch Lumineszenz- messung nachgewiesen werden.
Die Menge an einzusetzendem S30 Extrakt bzw. Plasmid pla muss für jede Präparation erneut ausgetestet werden, um eine optimale Konzentration im Test zu gewährleisten. 3 μl der zu testenden Substanz gelöst in 5 % DMSO werden in eine MTP vorgelegt. Anschließend werden 10 μl einer geeignet konzentrierten Plasmid- lösung pla zugegeben. Dann werden 46 μl eines Gemisches aus 23 μl Premix (500 mM K-acetat, 87,5 mM Tris-acetat, pH 8,0, 67,5 mM Ammoniumacetat, 5 mM DTT, 50 μg Folsäure/mL 87,5 mg PEG 8000/ml, 5 mM ATP, 1,25 mM je NTP, 20 μM je Aminosäure, 50 mM PEP (Na3-Salz), 2,5 mM cAMP, 250 μg je E. coli tRNA/ml) und 23 μl einer geeigneten Menge S. aureus S30 Extrakt zugegeben und vermischt. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 μl Luziferinlösung
(20 mM Tricine, 2,67 mM MgSO4, 0,1 mM EDTA, 33,3 mM DTT pH 7,8, 270 μM CoA, 470 μM Luziferin, 530 μM ATP) und die entstehende Biolumineszenz für 1 min in einem Luminometer gemessen. Als IC50 wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50 %igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt.
Bestimmung der Minimalen Hemmkonzentration (MHK):
Die minimale Hemmkonzentration (MHK) ist die minimale Konzentration eines Antibiotikums, mit der ein Testkeim in seinem Wachstum über 18-24 h inhibiert wird. Die Hemmstoffkonzentration kann dabei nach mikrobiologischen Standardverfahren bestimmt werden (siehe z.B. The National Committee for Clinical Laboratory Standards. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; approved standard-fifth edition. NCCLS document M7-A5 [ISBN 1-56238-394-9]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania
19087-1898 USA, 2000). Die MHK der erfmdungsgemäßen Verbindungen wird im Flüssigdilutionstest im 96er-Mikrotiter-Platten-Maßstäb bestimmt. Die Bakterienkeime wurden in einem Minimalmedium (18,5 mM Na2HPO4, 5,7 mM KH2PO4, 9,3 mM NH4C1, 2,8 mM MgSO4, 17,1 mM NaCl, 0,033 μg/ml Thiaminhydrochlorid, 1,2 μg/ml Nicotinsäure, 0,003 μg/ml Biotin, 1 % Glucose, 25 μg/ml von jeder proteinogenen Aminosäure mit Ausnahme von Phenylalanin; [H.-P. Kroll; unveröffentlicht]) unter Zusatz von 0,4 % BH Bouillon kultiviert (Testmedium). Im Fall von Enterococcus faecalis ICB 27159 wird dem Testmedium hitzeinaktiviertes fötales Kälberserum (FCS; GibcoBRL, Deutschland) in einer Endkonzentration von 10 % zugesetzt. Übernachtkulturen der Testkeime werden auf eine OD578 von 0,001
(im Falle der Enterokokken auf 0,01) in frisches Testmedium verdünnt und 1:1 mit Verdünnungen der Testsubstanzen (Verdünnungsstufen 1 :2) in Testmedium inkubiert (150 μl Endvolunien). Die Kulturen werden bei 37°C für 18-24 Stunden inkubiert; Enterokokken in Gegenwart von 5 % CO2.
Die jeweils niedrigste Substanzkonzentration, bei der kein sichtbares Bakterienwachstum mehr auftrat, wird als MHK definiert. Die MHK- Werte in μM einiger erfindungsgemäßer Verbindungen gegenüber einer Reihe von Testkeimen sind in der nachstehenden Tabelle beispielhaft aufgeführt. Die Verbindungen zeigen eine abgestufte antibakterielle Wirkung gegen die meisten der Testkeime.
Tabelle A
Alle Konzentrationsangaben in μM.
Systeπrische Infektion mit S. aureus 133
Die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen kann in verschiedenen Tiermodellen gezeigt werden. Dazu werden die Tiere im Allgemeinen mit einem geeigneten virulenten Keim infiziert und an- schließend mit der zu testenden Verbindung, die in einer an das jeweilige Therapiemodell angepassten Formulierung vorliegt, behandelt. Speziell kann die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen in einem Sepsismodell an Mäusen nach Infektion mit S. aureus demonstriert werden. Dazu werden S. aureus 133 Zellen über Nacht in BH-Bouillon (Oxoid, Deutschland) angezüchtet. Die Übernachtkultur wurde 1:100 in frische BH-Bouillon verdünnt und für 3 Stunden hochgedreht. Die in der logarithmischen Wachstumsphase befindlichen Bakterien werden abzentrifugiert und 2 x mit gepufferter, physiologischer Kochsalz- lösung gewaschen. Danach wird am Photometer (Dr. Lange LP 2W) eine Zellsuspension in Kochsalzlösung mit einer Extinktion von 50 Einheiten eingestellt. Nach einem Verdünnungsschritt (1:15) wird diese Suspension 1:1 mit einer 10 %- igen Mucinsuspension gemischt. Von dieser Infektionslösung wird 0,2 ml/20 g Maus i.p. appliziert. Dies entspricht einer Zellzahl von etwa 1-2 x 10E6 KeimenMaus. Die i.v.-Therapie erfolgt 30 Minuten nach der Infektion. Für den Infektionsversuch werden weibliche CFWl-Mäuse verwendet. Das Überleben der Tiere wird über I 6
1
Tage protokolliert. Das Tiermodell ist so eingestellt, daß unbehandelte Tiere innerhalb von 24 h nach der Infektion versterben.
C. Ausftihrungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überfuhrt werden:
Tablette:
Zusammensetzung:
100 mg der Verbindung von Beispiel 2, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.
Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm.
Herstellung:
Die Mischung aus Wirkstoff, Lactose und Stärke wird mit einer 5 %-igen Lösung (m m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat für 5 min. gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet.
Oral applizierbare Suspension:
Zusammensetzung:
1000 mg der Verbindung von Beispiel 2, 1000 mg Ethanol (96 %), 400 mg Rhodigel (Xanthan gum der Fa. FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.
Herstellung:
Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, der Wirkstoff wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluss der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt.

Claims

Patentansprüche
Verbindung der Formel
wonn
R1 gleich Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Diallylamino- carbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl, Hetero- arylsulfonyl oder ein carbonylgebundener Aminosäurerest ist,
wobei R1 ausser Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R1"1, wobei die Substituenten R1"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy und Carboxyl,
R2 gleich Wasserstoff oder Alkyl ist,
wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R2"1, wobei die Substituenten R2"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, A ήno, AJkylamino und Dialkylamino, oder
1
R und R zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2
Substituenten R " , wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxy- carbonyl und Aminocarbonyl,
R gleich Wasserstoff, Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten'
R " , wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino,
Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Guanidino und Amidino,
worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R " , wobei die Substituenten R3"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino,
und worin eine oder mehrere freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heteroaryl- carbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Al laminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Arylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl oder Heteroaryl- sulfonyl substituiert sein können, R3' gleich Wasserstoff, Ci-Cδ-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R4 gleich Wasserstoff, Ci-Cö-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl oder ein hydroxyfunktion-gebundener Aminosäurerest ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluor- methoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylamino-' carbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Alkoxy, Alkylamino und Dialkylamino,
R6 gleich Wasserstoff, Cι-C6-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R7 gleich Wasserstoff, C Ce-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-C8- Cyclo alkyl ist,
R8 gleich Wasserstoff oder d -C6- Alkyl ist,
oder eines ihrer Salze, ihrer Solvate oder der Solvate ihrer Salze. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie der Formel
entspricht,
1 o worin R bis R die gleiche Bedeutung wie in Formel (I) haben.
Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass
R gleich Wasserstoff, Alkyl oder Alkylcarbonyl ist,
R gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3"1, wobei die Substituenten R3"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Guanidino und Amidino,
worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3"2, wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino, und worin eine oder mehrere freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl substituiert sein können,
R >3' gleich Wasserstoff, CrCö-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R >4 gleich Wasserstoff, C Ce-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist,
R5 gleich Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cyclo-' alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R " , wobei die Substituenten R " unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus
Hydroxy, Amino, Alkoxy, All^lamino und Dialkylamino,
R gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff, Ci-Cβ-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-C8-Cyclo- alkyl ist,
und
R gleich Wasserstoff ist. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass
R1 gleich Wasserstoff ist,
R2 gleich Wasserstoff ist,
R3 gleich Aminocarbonylmethyl, 3-Aminoprop-l-yl,
2-Hydroxy-3- aminoprop-1-yl, l-Hydroxy-3-aminoprop-l-yl,
3-Guanidinoprop-l-yl,
2-Aminocarbonyl-ethyl, 2-Hydroxycarbonylethyl, 4-Aminobut-l-yl, Hydroxymethyl, 2-Hydroxy ethyl, 2-Aminoethyl,
4-Amino-3-hydroxy- but-l-yl oder (l-Piperidin-3-yl)-methyl ist,
R >3' gleich Wasserstoff ist,
R >4 gleich Wasserstoff, Methyl, Ethyl, iso-Propyl oder Cyclopropyl ist,
R5 gleich Alkyl oder C3-C6-Cycloalkyl ist, wobei R5 substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5"1, wobei die Substituenten
R5"1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe be- stehend aus Alkyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl,
Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,
worin Alkylamino und Dialkylamino substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5"2, wobei die Substituenten R5"2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy und Amino,
R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff ist, und
R gleich Wasserstoff ist.
5. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass
R1 gleich Wasserstoff ist,
R2 gleich Wasserstoff ist,
R gleich 3-Aminoprop-l-yl oder 2-Hydroxy-3-ammoprop-l-yl ist,
R3 gleich Wasserstoff ist,
R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist,
R5 gleich C1-C4-Alkyl ist, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Amino, Hydroxy und Carboxyl,
R6 gleich Wasserstoff ist,
R7 gleich Wasserstoff ist,
und
R8 gleich Wasserstoff ist.
6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass R1 gleich Wasserstoff ist.
7. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 und 6, dadurch gekennzeichnet, dass R2 gleich Wasserstoff ist.
8. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, 6 und 7, dadurch gekennzeichnet, dass R3 gleich 3-Aminoprop-l-yl oder 2-Hydroxy-3-aminoprop-l-yl ist.
9. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 oder 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass R3' gleich Wasserstoff ist.
10. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 oder 6 bis 9, dadurch gekenn-' zeichnet, dass R4 gleich Wasserstoff oder Methyl.
11. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 oder 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass R5 gleich C1-C4-Alkyl ist, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Amino, Hydroxy und Carboxyl.
12. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 bis 11, dadurch gekennzeichnet, dass R6 gleich Wasserstoff ist.
13. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 oder 6 bis 12, dadurch gekenn- zeichnet, dass R7 gleich Wasserstoff ist.
14. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 6 bis 13, dadurch gekennzeichnet, dass R8 gleich Wasserstoff ist.
15. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Verbindung der Formel
wonn
,5
R1 bis R4 und R6 bis R8 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung haben,
mit einer Verbindung der Formel
10 HO-R5 (in),
worin
R >5 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, umgesetzt wird.
15
16. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 14 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten.
17. Arzneimittel enthaltend mindestens eine Verbindung nach einem der An- 0 Sprüche 1 bis 14 in Kombination mit mindestens einem pharmazeutisch verträglichen, pharmazeutisch unbedenklichen Träger oder sonstigen Exzipienten.
18. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 14 zur Her- 5 Stellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prophylaxe von bakteriellen Erkrankungen.
19. Arzneimittel nach Anspruch 17 zur Behandlung und/oder Prophylaxe von bakteriellen Infektionen.
20. Verfahren zur Bekämpfung von bakteriellen Infektionen in Menschen und Tieren durch Verabreichung einer antibakteriell wirksamen Menge mindestens einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 14.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10226921A1 (de) * 2002-06-17 2003-12-24 Bayer Ag Antibakterielle Amid-Makrozyklen
ES2338789T3 (es) 2003-06-18 2010-05-12 Tranzyme Pharma Inc. Antagonistas macrociclicos del receptor de motilina.
DE10358824A1 (de) 2003-12-16 2005-07-21 Bayer Healthcare Ag Antibakterielle Makrozyklen mit substituiertem Biphenyl
DE102004025731A1 (de) * 2004-05-26 2005-12-15 Bayer Healthcare Ag Antibakterielle Amid-Makrozyklen III
DE102005014240A1 (de) * 2004-09-24 2006-03-30 Bayer Healthcare Ag Antibakterielle Amid-Makrozyklen IV
DE102005014245A1 (de) * 2005-03-30 2006-10-05 Aicuris Gmbh & Co. Kg Antibakterielle Amid-Makrozyklen V
DE102005014247A1 (de) * 2005-03-30 2006-10-05 Aicuris Gmbh & Co. Kg Antibakterielle Amid-Makrozyklen VI
DE102005032781A1 (de) * 2005-07-14 2007-01-18 Aicuris Gmbh & Co. Kg Antibakterielle Amid-Markozyklen VII
ES2684821T3 (es) 2005-12-29 2018-10-04 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Derivados de aminoácidos multicíclicos y métodos de su uso
WO2017072062A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Peptide macrocycles against acinetobacter baumannii
US11505573B2 (en) 2018-03-28 2022-11-22 Hoffmann-La Roche Inc. Peptide macrocycles against Acinetobacter baumannii
US11819532B2 (en) 2018-04-23 2023-11-21 Hoffmann-La Roche Inc. Peptide macrocycles against Acinetobacter baumannii
AU2019284746B2 (en) * 2018-06-15 2023-08-17 Yokogawa Electric Corporation Method for producing amide
WO2019239879A1 (ja) * 2018-06-15 2019-12-19 国立大学法人東京工業大学 アミドの製造方法
EP3904317A4 (de) * 2018-12-25 2022-09-21 Tokyo Institute of Technology Verfahren zur herstellung von amid

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2801591B1 (fr) * 1999-11-30 2002-03-01 Aventis Pharma Sa Derives macrocycliques de l'acide hydroxamique, leur preparation et les compositions qui les contiennent
DE10358824A1 (de) * 2003-12-16 2005-07-21 Bayer Healthcare Ag Antibakterielle Makrozyklen mit substituiertem Biphenyl

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
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WO2004012816A1 (de) 2004-02-12
DE10234422A1 (de) 2004-02-12

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