EA039778B1 - Фармацевтическая композиция, содержащая производные индола, способ ее получения и применение - Google Patents

Фармацевтическая композиция, содержащая производные индола, способ ее получения и применение Download PDF

Info

Publication number
EA039778B1
EA039778B1 EA201891027A EA201891027A EA039778B1 EA 039778 B1 EA039778 B1 EA 039778B1 EA 201891027 A EA201891027 A EA 201891027A EA 201891027 A EA201891027 A EA 201891027A EA 039778 B1 EA039778 B1 EA 039778B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cancer
compound
pharmaceutical composition
dihydrochloride salt
ethanol
Prior art date
Application number
EA201891027A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201891027A1 (ru
Inventor
Стиг Линдер
Original Assignee
Виволюкс Аб
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Виволюкс Аб filed Critical Виволюкс Аб
Publication of EA201891027A1 publication Critical patent/EA201891027A1/ru
Publication of EA039778B1 publication Critical patent/EA039778B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Изобретение относится к хорошо охарактеризованным и стабильным фармацевтическим композициям, содержащим производные индола общей формулы 1, способу получения дигидрохлоридных солей с высоким содержанием фармакологически активного изомера, подходящему для промышленного производства, и их применению в фармацевтических композициях. Изобретение также относится к способу применения указанных соединений для лечения рака. Изобретение также относится к способам применения этих соединений в комбинации с другими терапевтическими средствами, обычно используемыми для лечения раковых заболеваний.

Description

Настоящее изобретение относится к улучшенной и стабильной фармацевтической композиции производных индола с высоким содержанием их фармакологически активного изомера. Настоящее изобретение также относится к способу лечения рака с помощью композиций и к способу их получения. Изобретение, кроме того, относится к обеспечению возможности крупномасштабного синтеза фармакологически активных соединений.
Уровень техники
Производные индола и их фармацевтически приемлемые соли раскрыты в заявках WO 2012/128689 и WO 2014/046589 в виде смесей цис/транс-изомеров (Z/E-изомеры) в N-метилиденовой группе. Эти соединения полезны при лечении солидных злокачественных опухолей. Полагают, что противораковый эффект основан на свойстве соединений образовывать хелаты с железом. Поскольку скорость изомеризации в физиологических условиях представлялась существенной, предположили, что фармакологическое действие изомеров было по существу аналогичным или даже одинаковым.
Eshba et al. раскрывают производные N-(1-пиридин-2-ил-метилиден)-N-(9Н-1,3,4,9-тетразαфлуорен-2-ил)гидразина в качестве противовирусных и противораковых агентов, при этом только одно соединение проявляет цитотоксическую активность. Желательно, чтобы фармацевтическая композиция была четко охарактеризована, в частности, ее фармакологически активные компоненты. Поэтому обязательно, чтобы, если соединение существует в двух изоформах, более активный изомер указанных соединений преобладал в содержащей их фармацевтической композиции. Кроме того, фармацевтическая композиция должна быть достаточно стабильной, чтобы храниться в течение длительного периода времени без заметного изменения ее состава.
Для пациентов, страдающих раком, необходимо разрабатывать новые и эффективные противораковые лекарственные средства. Прежде, чем получен готовый продукт, разработка лекарственного средства в целом сопряжена с множеством трудностей. Изначально многообещающее соединение идентифицируют и экспериментально тестируют в различных моделях in vitro и после этого начинают доклинические исследования, чаще всего с помощью различных мышиных моделей. До этого момента необходимо синтезировать только небольшие количества соединения, а требования к чистоте ниже, чем требуемые в клинических исследованиях, проводимых на людях. В разработке лекарственных средств присутствует много стадий, которые являются критическими, например идентификация и выделение активного соединения, исследование того, является ли конкретный изомер более сильнодействующим, чем другой, дополнительно имеет допустимую степень чистоты, стабильности, а также то, что указанное соединение может производиться в крупных масштабах. Эти стадии не являются тривиальными, и многие многообещающие соединения/лекарственные средства не могут выйти на рынок из-за описанных выше производственных проблем.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение основано на обнаружении того, что смесь Е- и Z-форм формулы 1 может быть преобразована в Е-форму их дигидрохлоридных солей с высокой стерической чистотой:
Формула 1
Е-форма Z-форма
Первой задачей настоящего изобретения является обеспечение хорошо охарактеризованных и стабильных фармацевтических композиций для лечения рака, полученных раскрытым далее способом по настоящему изобретению, содержащих эффективное количество фармацевтически приемлемой дигидрохлоридной соли общей формулы 1а
R2
Формула 1а где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
R1 представляет собой CH3;
- 1 039778
R2 представляет собой Н;
X представляет собой N;
Y представляет собой N, и фармацевтически приемлемый эксципиент;
при этом указанная фармацевтическая композиция находится в виде лиофилизированного порошка;
при этом по меньшей мере 95 мас.% (мас./мас.) фармацевтически приемлемой дигидрохлоридной соли находится в форме Е-изомера; и при этом водный раствор указанной фармацевтической композиции имеет рН 0,5-4.
Фармацевтические композиции предназначены для применения при лечении рака. В одном из аспектов по меньшей мере 96 мас.%, или 97 мас.%, или 98 мас.%, или по меньшей мере 98,5 мас.% указанного соединения находится в Е-форме. В еще одном аспекте по меньшей мере 99 мас.%, предпочтительно по меньшей мере 99,5 мас.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 99,8 мас.% фармакологически активного соединения находится в форме Е-изомера. В идеальном варианте 100 мас.% указанного соединения находится в форме Е-изомера. Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению также может дополнительно содержать по меньшей мере один фармакологически приемлемый эксципиент и/или носитель.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения соединение общей формулы 1 может быть дополнительно замещено линейным или разветвленным С1-С4-алкилом в одном из положений 6, 7, 8, 9 моно-, ди- или триазакарбазолила, не замещенного R1.
Предпочтительные соединения общей формулы 1, а также 1а и 1b перечислены в табл. 1.
В одном из вариантов осуществления R и R1 представляют собой CH3 и R2 представляет собой Н. Предпочтительно R представляет собой CH3, R1 представляет собой 6-CH3 и R2 представляет собой Н. Более предпочтительно X и Y представляют собой N.
В другом варианте осуществления R представляет собой CH2CH3, R1 представляет собой CH3 и R2 представляет собой Н. Предпочтительно R представляет собой CH2CH3, R1 представляет собой 6-CH3 и R2 представляет собой Н. Более предпочтительно X и Y представляют собой N.
В еще одном варианте осуществления R представляет собой CH2C(CH3)3, R1 представляет собой CH3 и R2 представляет собой Н. Предпочтительно R представляет собой CH2C(CH3)3, R1 представляет собой 6-CH3 и R2 представляет собой Н. Более предпочтительно X и Y представляют собой N.
Наиболее предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения А, В и С (см. табл. 1).
В одном из вариантов осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит фармакологически активное соединение общей формулы 1 в форме фармацевтически приемлемой соли в кристаллической форме. Соль может представлять собой любую соль, подходящую для стабилизации свободного основания формулы 1, т.е. кислые соли, такие как, например, хлориды, нитраты и сульфаты. Соль может представлять собой моно- или дисоль. Предпочтительно соль представляет собой моно- или дигидрохлоридную соль. Наиболее предпочтительной является дигидрохлоридная соль.
Эксципиент(ы) может(гут) представлять собой любой из маннита, глюкозы, сахарозы или других подходящих производных сахаров. В предпочтительном варианте осуществления эксципиент представляет собой D-маннит. Концентрация D-маннита может составлять от 0,5 до 20% (мас./об.). Предпочтительно концентрация составляет от 1,0 до 15 мас.% (мас./об.). Более предпочтительно концентрация составляет от 3 до 10% (мас./об.). Наиболее предпочтительно концентрация составляет от 4 до 6% (мас./об.). В другом аспекте более предпочтительно, чтобы концентрация D-маннита составляла приблизительно 5% (мас./об.).
- 2 039778
Таблица 1
Иллюстративные соединения согласно изобретению
Соединение R R1 R2 X Y
А СНз 6-СНз Н N N
В СН2СНз 6-СНз Н N N
С СН2С(СНз)з 6-СНз н N N Ю
D СНз 7-CI н N N
Е СНз 6-CI н N N
F СНз 8-ОСНз н N N
G СНз 8-OCF3 н N N
Н СНз 9-Вг н N N 15
1 СНз 8-CI н N N
J СНз 8-СНз н N N
К Н 6-СНз н СН СН
В настоящем изобретении также предложен способ получения описанной выше фармацевтической композиции в виде лиофилизированного порошка, включающий следующие стадии:
i) обеспечение метанольного раствора соединения общей формулы 1 в виде свободного основания:
R2
R1
Формула 1, где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
R1 представляет собой CH3;
R2 представляет собой Н;
X представляет собой N;
Y представляет собой N;
ii) обеспечение взаимодействия раствора со стадии (i) с соляной кислотой в этаноле в количествах, при которых рН раствора составляет от 0,5 до 4, что является достаточным для превращения соединения общей формулы 1 в его дигидрохлоридную соль, где дигидрохлоридная соль самопроизвольно выпадает в осадок, где содержание остаточного этанола составляет от 2 до 20 мас.% относительно массы осадка дигидрохлоридной соли и где осадок дигидрохлоридной соли содержит соединение общей формулы 1b
где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
R1 представляет собой CH3;
R2 представляет собой Н;
X представляет собой N;
Y представляет собой N;
iii) очистка осадка, содержащего сокристалл дигидрохлоридной соли и этанола, полученного на стадии (ii), от этанола с получением дигидрохлоридной соли общей формулы 1а
- 3 039778
R2
Формула 1а, где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
R1 представляет собой CH3;
R2 представляет собой Н;
X представляет собой N;
Y представляет собой N;
iv) растворение дигидрохлоридной соли со стадии (iii) в водном растворителе, содержащем фармацевтически приемлемый эксципиент; и
v) лиофилизация композиции, полученной на стадии (iv) с получением композиции, содержащей дигидрохлоридную соль общей формулы 1а и фармацевтически приемлемый эксципиент в виде лиофилизированного порошка.
Растворитель для свободного основания общей формулы 1 может представлять собой, например, метанол. Очистка осадка от растворителя, т.е. стадия (iii), может быть проведена, например, в вакууме посредством струи воздуха или инертного газа.
Количество Е-изомера находится в тех же пределах, что и количество описанной выше фармацевтической композиции.
В одном из вариантов осуществления водный растворитель представляет собой воду, предпочтительно стерильную воду.
Эксципиент(ы) может(гут) представлять собой такой(ие), как описано выше. Порядок растворения осадка не является ограничивающим для способа и может быть изменен. Осадок может находиться, например, в твердой форме, может быть смешан с эксципиентом, например, в твердой форме и добавлен в водный растворитель при перемешивании. Или эксципиент может быть растворен в водном растворе, в который добавляют твердый осадок, и растворен при перемешивании.
Еще одной задачей является обеспечение фармацевтического препарата для инъекций или инфузий в форме водного раствора указанной стабильной при хранении фармацевтической композиции.
Путем разведения лиофилизированного порошка со стадии (v) в водном растворителе, например воде для инъекций (WFI), получают фармацевтический препарат.
Концентрация фармакологически активного соединения может составлять от 0,05 до 40 мг/мл. В одном из вариантов осуществления концентрация фармакологически активного соединения составляет от 0,1 до 30 мг/мл. Более предпочтительно фармакологически активное соединение может составлять от 0,5 до 20 мг/мл. Еще более предпочтительно фармакологически активное соединение может составлять от 0,75 до 10 мг/мл. Концентрация указанного фармакологически активного соединения может наиболее предпочтительно составлять приблизительно 1 мг/мл.
рН препарата составляет менее 4. рН указанного препарата зависит от концентрации фармакологически активного соединения и обычно составляет от 0,5 до 4. Например, рН препарата, имеющего концентрацию фармакологически активного соединения 1 мг/мл, составляет от 2 до 3.
Разведение может быть проведено за одну или несколько стадий, таких как растворение лиофилизата путем добавления первого количества растворителя, после чего добавления растворителя до желаемой конечной концентрации.
Водный растворитель для разведения лиофилизированного порошка, содержащего указанное фармацевтически активное соединение, может также содержать фармакологически приемлемый эксципиент, как описано выше.
Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение способа облегчения, уменьшения или лечения рака у субъекта с помощью фармацевтической композиции согласно изобретению, по отдельности или в комбинации с другим противораковым лечением.
Путь введения фармацевтического препарата может представлять собой инфузию или инъекцию. Вместе с тем, может быть использован любой подходящий способ введения препарата или композиции. Препарат или композиция могут быть введены, например, внутриартериально, внутримышечно, внутриплеврально, перорально, ректально, энтерально, внутриочагово или внутриопухолево и интратекально.
Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение осадка, иллюстрируемого общей формулой 1b
- 4 039778
Формула lb где по меньшей мере 95 мас.% (мас./мас.) фармакологически активного соединения общей формулы 1b находится в форме Е-изомера.
Количество Е-изомера может находиться в тех же пределах, что и количество описанной выше фармацевтической композиции.
Соединение общей формулы 1b представляет собой осадок производного индола формулы 1, где заместители R, R1, R2, X и Y являются такими, как определено выше для формулы 1. Предпочтительные соединения общей формулы 1b перечислены в табл. 1. Наиболее предпочтительные соединения общей формулы 1b имеют такие заместители, как в соединениях А, В и С в табл. 1.
Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение способа получения осадка, содержащего указанные соединения или фармацевтически приемлемые соли, описанные выше, где указанный способ соответствует стадиям (i)-(iii) способа, описанным выше для фармацевтической композиции.
В одном из аспектов дихлористоводородную кислоту в этаноле (т.е. стадия (ii)) добавляют за две стадии, где на первой стадии добавляют 1,0-1,15 экв. соляной кислоты в этаноле, а на второй стадии добавляют от 2,0 до 2,5 экв. соляной кислоты в этаноле. В качестве альтернативы добавление может быть проведено за одну или несколько стадий. Соль спонтанно выпадает в осадок на стадии (ii).
Осадок, описанный выше, также может быть использован в фармацевтической композиции.
Осадок может быть использован непосредственно или после сушки перед дальнейшим превращением влиофилизат.
Содержание этанола в указанном осадке составляет от 2 до 15 мас.% относительно массы указанного осадка. Предпочтительно составляет от 4 до 13 мас.% или от 9 до 11 мас.% относительно массы указанного осадка. В одном из вариантов осуществления количество этанола составляет от 10,4 до 10,6 мас.% относительно массы указанного осадка.
Кроме того, настоящее изобретение относится к лиофилизату, содержащему соединение общей формулы 1а
Формула 1а, где по меньшей мере 95 мас.% (мас./мас.) фармакологически активного соединения общей формулы 1b находится в форме Е-изомера.
Количество Е-изомера может находиться в тех же пределах, что и количество описанной выше фармацевтической композиции.
Соединение общей формулы 1а представляет собой дигидрохлоридную соль производных индола, описанных выше для формулы I.
Наиболее предпочтительными соединениями являются замещенные соединения, как описано выше для формул 1 и 1b.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу получения указанного лиофилизата, включающему следующие стадии:
a) растворение осадка общей формулы 1b в водном растворителе,
b) фильтрация полученного раствора,
c) лиофилизация раствора со стадии b) с получением лиофилизата, содержащего соединение общей формулы 1а.
В одном из аспектов осадок может быть растворен в водном растворителе при перемешивании на стадии а). Процесс более детально описан в подробном описании изобретения.
Осадок со стадии а) может быть замещенным, как любое из соединений, описанных для формулы 1
- 5 039778 или 1b. В другом аспекте осадок может содержать одно или комбинацию описанных соединений. В еще одном аспекте отдельные осадки, содержащие различные соединения согласно настоящему изобретению, могут быть смешаны.
Водный растворитель может дополнительно содержать по меньшей мере один фармакологически приемлемый эксципиент. Эксципиент и концентрация эксципиента могут быть такими, как описано выше.
Раствор, полученный на стадии b), предпочтительно может быть отфильтрован по меньшей мере через один стерильный фильтр, в некоторых вариантах осуществления раствор, полученный на стадии b), фильтруют через два стерильных фильтра. Полученный раствор может, например, быть выделен в стерильную нерасфасованную массу перед проведением стадии с). Раствором со стадии b) также могут быть заполнены флаконы, подходящие для лиофилизации.
Еще одной задачей настоящего изобретения является обеспечение осадка или лиофилизата, как описано выше, для применения в фармацевтической композиции.
Фармацевтическая композиция (т.е. лиофилизат) и осадок согласно настоящему изобретению стабильны в течение по меньшей мере 12 месяцев при комнатной температуре. Предпочтительно фармацевтическая композиция (т.е. лиофилизат) и осадок стабильны в течение по меньшей мере 24 месяцев при комнатной температуре.
Еще одной задачей настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции, т.е. лиофилизата, содержащей указанные соединения, для применения при лечении рака.
В одном из аспектов лиофилизат согласно настоящему изобретению может содержать только одно фармакологически активное соединение согласно настоящему изобретению, такое, как, например, соединение А2, В2 или С2. В другом аспекте лиофилизат согласно настоящему изобретению может содержать комбинацию соединений согласно настоящему изобретению. В еще одном аспекте лиофилизат, содержащий указанные соединения или фармацевтически приемлемые соли согласно настоящему изобретению, может содержать по меньшей мере одно из соединений согласно настоящему изобретению в комбинации по меньшей мере с одним другим фармакологически активным соединением для применения при лечении рака.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть введены по отдельности или в виде смеси. Соединения могут также быть введены в одно и то же время или до или после введения другого лекарственного средства или противоракового лечения.
Описанные выше фармацевтическая композиция, осадок или препарат могут, например, применяться для предупреждения или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося патологически пролиферирующими клетками.
Фармацевтический препарат может подходить для инфузий или инъекций путем разведения указанной композиции в водном растворителе. Предпочтительно препарат применяют для инфузий.
Конечная концентрация фармакологически активного соединения может составлять от 0,5 до 30 мг/мл.
Фармацевтическая композиция и препарат могут иметь рН в диапазоне от 0,5 до 4. Предпочтительно рН составляет от 1 до 3. Как упоминалось выше, рН зависит от концентрации фармацевтически активного соединения, и, например, рН препарата с концентрацией 1 мг/мл составляет от 2 до 3.
Фармацевтическая композиция или препарат могут дополнительно содержать дополнительный терапевтический агент.
Предпочтительно фармацевтическую композицию и препарат согласно настоящему изобретению применяют для лечения рака.
Рак может представлять собой солидную, жидкую и гематологическую опухоль.
Кроме того, описанные выше лекарственное средство, фармацевтический препарат, композиция, осадок или лиофилизат могут применяться в комбинации с другим противораковым лечением, таким как химиотерапия, иммунологическая или иммуномодулирующая терапия, гормональная терапия, хирургическое удаление опухоли, фотодинамическая терапия, лазерная терапия, гипертермия, криотерапия, ингибирование ангиогенеза, радиационная терапия или их комбинацией.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или расстройства, характеризующегося патологически пролиферирующими клетками, такого как рак, где субъекту, нуждающемуся в таком лечении, вводят эффективное количество фармакологически активного соединения согласно настоящему изобретению.
Эффективное количество указанного фармакологически активного соединения или соединений различается в зависимости от пациента и формы рака. Например, количество составляет приблизительно от 0,1 до 10 мг/кг массы тела, предпочтительно от 0,5 до 5 мг/кг и более предпочтительно от 1 до 4 мг/кг массы тела. Общая доза, вводимая субъекту, может составлять от 5 до 800 мг, в зависимости от состояния субъекта и формы рака, и независимо от массы тела указанного субъекта. В одном из аспектов доза, вводимая субъекту, составляет от 30 до 300 мг. Доза может быть еще ниже при назначении в комбинации с другим противораковым лечением, как показано ниже.
В другом аспекте изобретение относится к способу лечения рака, описанному выше, в комбинации
- 6 039778 с другим противораковым лечением.
Различные варианты осуществления, описанные выше, могут быть объединены друг с другом или использованы по отдельности.
Детали одного или более вариантов осуществления изобретения изложены в подробном описании изобретения, приведенном ниже. Другие признаки, задачи и преимущества изобретения будут очевидны из описания и графических материалов и из прилагаемой формулы изобретения, включенной в настоящий документ посредством ссылки.
Краткое описание графических материалов
Следующие графические материалы иллюстрируют аспекты изобретения и не предназначены для ограничения его объема, определенного формулой изобретения.
На фиг. 1 показан путь синтеза осадка (А1) соединения А и стадия превращения осадка в соответствующую соль, т.е. лиофилизат (А2).
На фиг. 2А показана хроматограмма ВЭЖХ, демонстрирующая 99,8% чистоту соединения А1, а на фиг. 2B показана структура Е-изомера соединения А1, подтвержденная рентгеновской хроматографией.
На фиг. 3 показаны кривые доза-эффект для соединения А в различных линиях клеток.
На фиг. 4A-D показаны кривые доза-эффект для соединений А, В и С в клетках НСТ116 (А) и в клетках HepG2, клетках RKO, клетках HeLa, клетках СЕМ и клетках ТНР-1 для соединения А (B), для соединения В (С) и для соединения С (D).
Подробное описание изобретения
Следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается конкретными раскрытыми в настоящем документе конфигурациями, стадиями способа и материалами, поскольку такие конфигурации, стадии способа и материалы могут в некоторой степени различаться. Также следует понимать, что используемая в настоящем документе терминология предназначена исключительно для описания конкретных вариантов осуществления и не является ограничивающей, так как объем настоящего изобретения ограничен только прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.
Все цитированные источники включены в данный документ посредством ссылки в полном объеме и для всех целей в такой же степени, как если бы каждая отдельная публикация, или патент, или патентная заявка были специально и индивидуально указаны как включенные посредством ссылки в полном объеме для всех целей.
Настоящее изобретение можно наилучшим образом понять со ссылкой на следующие приведенные в настоящем документе определения, графические материалы и примеры.
В настоящем описании подразумевается, что соединение общей формулы 1 включает любой его фармацевтически приемлемый осадок, сольват, соль или пролекарство.
В настоящем описании термин осадок означает сокристаллические соединения дигидрохлорида и этанола, или этанолат дигидрохлорида, или сольват дигидрохлорида этанола, полученные осаждением, например, продукт стадии осаждения в реакции 4 на фиг. 1. Соединения могут представлять собой осадок любого соединения формулы 1 согласно настоящему изобретению.
В настоящем описании термин фармацевтически приемлемые соединения включает осадки, сольваты и лиофилизаты соединений, описанных в настоящем документе.
В настоящем описании термин изомер относится к соединениям, имеющим одинаковый состав и молекулярную массу, но отличающимся физическими и/или химическими свойствами. Такие вещества имеют одинаковое количество и вид атомов, но различаются по структуре. Структурная разница может заключаться в строении (геометрические изомеры) или в способности вращать плоскость поляризованного света (стереоизомеры). Термин стереоизомер относится к изомерам одинакового строения, которые отличаются расположением своих атомов в пространстве.
В настоящем описании, если не указано иное, термин фармацевтически приемлемый эксципиент означает нетоксичный, инертный твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующее вещество или вспомогательный компонент препарата любого типа.
В настоящем описании, если не указано иное, термин фармацевтически активное соединение охватывает любое вещество, которое будет обеспечивать терапевтически полезный фармакологический эффект при введении реципиенту, включая как человека, так и животных.
В настоящем описании термин вводить или введение означает предоставление лекарственного средства субъекту способом, который является фармакологически полезным.
В настоящем описании, если не указано иное, термин цитотоксическое соединение относится к соединению, обладающему способностью останавливать рост клеток или уничтожать их, т. е., имеющему высокую цитотоксическую активность.
В настоящем описании, если не указано иное, термин производное относится к соединению, образованному из исходной структуры, либо напрямую, путем химического взаимодействия исходной структуры, либо модификацией, представляющей собой частичную замену исходной структуры, или путем дизайна и синтеза de novo. Производные могут быть синтетическими или могут представлять собой продукты метаболизма клетки или in vitro ферментативной реакции.
В настоящем описании подразумевается, что термин рак означает любое злокачественное неопла- 7 039778 стическое заболевание, т.е. любой злокачественный рост или опухоль, вызванные патологическим и неконтролируемым делением клеток. В частности, подразумевается, что термин рак включает как солидные, локализованные опухоли, так и несолидные формы рака. Например, указанные формы рака могут быть выбраны из группы, состоящей из лейкоза (ALL (острого лимфобластного лейкоза), AML (острого миелобластного лейкоза), CLL (хронического лимфоцитарного лейкоза), CML (хронического миелоидного лейкоза), CMML (хронического миеломоноцитарного лейкоза)), Т-клеточного лейкоза, множественной миеломы, карциномы яичника, рака предстательной железы, аденокарциномы шейки матки, плоскоклеточной карциномы, рака молочной железы, колоректального рака, рака тонкой кишки, рака анального канала, рака желудочно-кишечного тракта, рака почки, злокачественной меланомы, рака почечной лоханки и мочеточника, рака уретры, рака мочевого пузыря, рака печени, рака аппендикса, рака поджелудочной железы, рака легкого, рака пищевода, рака губы/ротовой полости, рака носа, рака гортани, рака головного мозга/центральной нервной системы, рака кожи, рака щитовидной железы и вилочковой железы, саркомы, рака головы и шеи, неходжкинской лимфомы (НХЛ), лимфомы Ходжкина и псевдомиксомы брюшной полости.
Настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции с преобладающим содержанием Е-изомера. Монокристальный рентгеноструктурный анализ подтвердил, что Еизомер преобладал в твердом состоянии.
С помощью способа согласно настоящему изобретению получают хорошо охарактеризованную и стабильную фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере 95 мас.% (подтверждено ВЭЖХ, см. фиг. 2) фармацевтически активного соединения (Е-изомера).
Примеры
Пример 1. Синтез соединения А.
В первых экспериментах соединение А (свободное основание) разбавляли в ацетоне/ацетилате/ацетонитриле, в этой комбинации растворителей был растворим и легко отфильтровывался Е-изомер, но не Z-изомер. Конечное содержание Е-изомера при использовании этой комбинации растворителей составляло приблизительно 92%. Описанная комбинация растворителей хорошо работала во время маломасштабного производства, но не подходила для увеличения его масштабов из-за большого количества требуемого растворителя. Поэтому авторами был разработан синтез соединения А, основанный на синтезе производных 1,2,4-триазино[5,6-b]индола, описанном Kgokong, et al., 2005 (см. фиг. 1). Авторы разработали методику с использованием метанола (МеОН) в качестве растворителя и соляной кислоты в этаноле (HCl/EtOH) в качестве носителя HCl (EtOH также служит в качестве антирастворителя). При последующей разработке увеличения масштабов процесса была улучшена эффективность реакционного объема. Кроме того, также был разработан подходящий способ превращения свободного основания (А) в конечный осадок гидрохлорида (А1) в больших масштабах (см. фиг. 1, примеры 1 и 2). Свободное основание (А) было нерастворимо в одном МеОН, но после добавления приблизительно 1 экв. HCl/EtOH был получен прозрачный раствор.
Из-за наблюдаемых дисульфидных соединений реакцию можно проводить в атмосфере азота, чтобы избежать окисления кислородом воздуха. Влажный осадок, полученный на стадии 1 реакции, может также быть высушен в вакууме, или влажный осадок может быть дополнительно обработан без предварительной сушки. При сушке в вакууме образование примесей сводится к минимуму, так как примеси могут образовываться при сушке на воздухе. Взаимодействие продукта стадии 2 реакции с небольшим избытком 2-ацетилпиридина (1,5 экв.) в этаноле (20 мл/г соединения) при 50°С по прошествии 5 ч привело к образованию продукта, но слишком медленному превращению (приблизительно 8%).
На фиг. 1 показаны стадии 1-3 синтеза соединения А (смесь Е- и Z-изомеров; систематическое название по ИЮПАК: 2-[(1Е,Z)-1-(2-{6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-ил}гидразин-1илиден)этил]пиридин).
Стадия 1. К водной суспензии 7-метилизатина (4,75 кг, 29,5 моль) добавляли 2,85 кг (31,3 моль) тиосемикарбазида и 6,15 кг (44,5 моль) карбоната калия. Перемешиваемую смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Медленно добавляли уксусную кислоту (100%, 3,3 кг, 55,0 моль) до достижения рН, равного 7,1. Суспензию фильтровали через фильтр под давлением и промывали фильтровальный осадок водой (19,4 кг) с получением 7,6 кг мокрого 6-метил-2Н,3Н,5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-тиона.
Стадия 2. Влажный фильтровальный осадок с предыдущей стадии, соответствующий приблизительно 4,6 кг сухого 6-метил-2Н,3Н,5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-тиона, суспендировали в 57,1 кг моногидрата гидразина и перемешивали смесь при 89°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выделяли продукт центрифугированием, промывали водой (15,9 кг) и этанолом (18,4 кг) и осушали при 1450 об/мин. Влажный фильтровальный осадок (7,8 кг, соответствующий 3,8 кг сухой массы) 3-гидразинил-6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индола, переносили обратно в очищенный реактор и сушили в вакууме.
Стадия 3. К высушенному 3-гидразинил-6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индолу со стадии 2 добавляли воду (76,85 кг), уксусную кислоту (100%, 6,70 кг, 111,6 моль) и 2-ацетилпиридин (10,75 кг,
- 8 039778
88,7 моль). Смесь перемешивали в течение 3 ч при 48,5°С, охлаждали до комнатной температуры и медленно добавляли NaOH (27%, 6,3 кг, 110 моль) до достижения рН, равного 7,0, поддерживая температуру между 20 и 25°С. Смесь перемешивали в течение еще 1 1/4 часа при этой температуре и выделяли продукт центрифугированием. После промывки смесью воды (7,3 кг) и этанола (5,8 кг) осадок осушали при 1450 об/мин, затем сушили в вакуумном сушильном шкафу при 47°С в течение 66 ч с получением 5,82 кг указанного в заголовке соединения в виде бежевого/зеленоватого твердого вещества.
На стадии 4 на фиг. 1 показан синтез соединения А1, этанольного сокристалла соединения А (систематическое название по ИЮПАК: 2-[(1Е)-1-(2-{6-метил-5Н-[1,2,4]триαзино[5,6-Ь]индол-3ил}гидразин-1 -илиден)этил]пиридина дигидрохлорид).
К 2-[(1Е,Z)-1-(2-{6-метил-5Н-[1,2,4]триαзино[5,6-Ь]индол-3-ил}гидрαзин-1-илиден)этил]nиридинα (5,80 кг) добавляли HCl в этаноле (12,4 кг, 1,05 экв.) и перемешивали смесь при 28-30°С в течение 0,5 ч до получения прозрачного раствора. Раствор фильтровали и добавляли дополнительную HCl в этаноле (28,95 кг, 2,45 экв.) при 25°С в течение 1 ч и 40 мин при перемешивании. Во время первого добавления 1,05 экв. HCl/EtOH большая часть присутствующего Z-изомера превращается в Е-изомер, и образуется некоторое количество моногидрохлоридной соли. Дигидрохлоридная соль спонтанно осаждается при добавлении 2,45 экв. HCl в EtOH. Молярная концентрация HCl в EtOH, определенная путем титрования с 0,1 М NaOH и индикатором фенолофталеином, составила от 1,1 до 1,4 М HCl. Перемешивание продолжали при той же температуре в течение 15 мин и с добавлением этанола (45,8 кг). Полученную таким образом суспензию охлаждали приблизительно до температуры от 0 до -5°С и перемешивали в течение 1 ч. Продукт, выделенный центрифугированием, промывали этанолом (0-5°С, 45 кг), затем осушали при 1450 об/мин. Осадок высушивали в вакууме при 37°С в течение 42 ч с получением 7,57 кг указанного в заголовке соединения (приблизительно 108%, исходя из отсутствия остаточного растворителя, или 98% исходя из моноэтилового эфира), дигидрохлорида в виде твердого вещества, имеющего цвет от желтого до оранжевого.
Полученный осадок сокристалла дигидрохлорида и этанола имеет содержание этанола от приблизительно 2 до приблизительно 20 мас.%.
На стадии 5 реакции на фиг. 1 показано образование лиофилизированной композиции, содержащей соединение общей формулы 1а.
Анализ содержания изомеров с помощью ВЭЖХ.
Во время разработки процесса анализ соединения А и соединения А1 вызывал аналитические проблемы, связанные, например, с нестабильностью образца, плохой растворимостью, изомеризацией, ВЭЖХ и т.д. Поэтому авторы разработали более надежный метод ВЭЖХ на основе колонки XBridge C18, 3,5 мкм, 150x4,6 мм. Проблема была также решена путем использования 2% муравьиной кислоты в МеОН в качестве разбавителя и перехода от стандартных флаконов для образца для ВЭЖХ без покрытия к покрытым (силанизированным) флаконам от Agilent.
Использовалась хроматографическая система Agilent 1200/1260 или ее эквивалент.
При использовании ВЭЖХ в кислой среде для анализа соединения А было обнаружено, что прибл изительно 7% находилось в форме Z-изомера (образец приготовлен в 0,1% TFA/H2O). Через 2 дня тот же самый образец повторно анализировали, анализ показал прибл. 2% Z-изомера и начало гидролиза в соединение А1 (обнаружено прибл. 1%). Это показало, что кислотные условия (рН в диапазоне от 1 до 4) превращают нежелательный Z-изомер в желаемый Е-изомер. После проведения последующего образования соли (стадия 4 реакции) (с использованием HCl в этаноле) содержание изомера было снижено до <0,5%. Это означает, что можно допускать относительно большое содержание нежелательного изомера (такое как 5%) в соединении А, В или С, поскольку оно превращается в желаемый изомер при добавлении HCl в этаноле. Добавление HCl в этаноле приводит к образованию дигидрохлоридного осадка (такого, как соединения А1, В1 и С1).
Чистота по ВЭЖХ.
Чистоту по ВЭЖХ рассчитывали как 100% - общее содержание примесей. Все пики ниже 0,05% и пики, присутствующие в матрице, исключаются из расчетов. Содержание каждой примеси рассчитывали как процент от общей площади пика (% площади). Общее содержание примесей равно сумме примесей >0,05%.
Примеси.
Конечным результатом для каждой примеси является среднее значение четырех результатов. Общие количества примесей представлены в виде суммы примесей >0,05%.
Остаточные растворители.
Анализ соединения А1 показал, что оно представляет собой композицию сокристалла дигидрохлорида и этанола (осадок). Теоретическое содержание этанола в соединении А1 составляет 10,6%, что согласуется с образованием сокристалла этанола (осадка), как описано выше.
Во время процесса разработки композиций, содержащих соединение А, было неожиданно показано, что сокристалл дигидрохлорида и этанола (например, А1) является менее гигроскопичным и значительно более стабильным в отношении гидролиза и снижения изомерной чистоты.
- 9 039778
Был сделан вывод о том, что высокие уровни этанола могут быть допустимы в лекарственном веществе (осадке), поскольку он удаляется во время последующей лиофилизации, которая является частью процесса производства готового лекарственного продукта (лиофилизата).
Уровни метанола были относительно высокими; в основном содержание метанола в композиции А1 составляло 1,4-1,8%. Длительные циклы сушки не привели к значительному снижению содержания метанола. Однако, как и в случае с этанолом, последующий цикл лиофилизации, используемый при производстве готового лекарственного продукта (например, А2), эффективно удаляет метанол до уровней ниже директивы ICH Q3B.
Заключение.
Исходя из того факта, что уровни как этанола, так и метанола в готовом лекарственном продукте значительно ниже директивы ICH Q3C, и учитывая то, что они тщательно контролируются, был сделан вывод о том, что более высокие уровни могут быть допустимы в лекарственном веществе (т.е. соединении А1). Все остальные ограничения, указанные в описании, соответствуют стандартам Европейской фармакопеи или Фармакопеи США.
Идентификация.
Идентификация образца основывалась на визуальном осмотре основного пика подготовленного образца и основного пика образца, подготовленного для идентификации. Соединение А1 представлено одним пиком на хроматограмме (см. фиг. 2А).
Пример 2. Стабильность.
Исследование стабильности осадка сокристалла дигидрохлорида и этанола и лиофилизированной дигидрохлоридной соли проводили в соответствии с директивой Международной конференции по гармонизации (ICH) Q1A (R2) Испытание новых лекарственных веществ и лекарственных препаратов на стабильность. Все аналитические инструменты, используемые для анализа образцов стабильности во время исследования, квалифицируются в соответствии с действующими cGMP (текущими правилами организации производства и контроля качества лекарственных средств).
Исследование стабильности состоит из двух частей: одного длительного (5°С, 24, 36 месяцев) и одного ускоренного исследования (25°С/ОВ 60%, 6 месяцев).
Осадок сокристалла дигидрохлорида и этанола соединения А (А1) упаковывали в запаянные двойные полиэтиленовые пакеты, находящиеся в запаянном мешке, ламинированном фольгой, помещенном в закрытый контейнер из HDPE (полиэтилена высокой плотности). Образцы хранили в условиях 5°С для длительного исследования и в условиях 25°С/ОВ 60% для ускоренного исследования. Внешне образцы представляли собой твердое вещество цветом от желтого до оранжевого в течение всего периода испытаний. Анализ, проведенный ввиду результата порошковой рентгеновской дифрактометрии для образца 25°С/ОВ 60%, показал неожиданный низкий уровень кристалличности. Степень кристалличности не оказывает прямого влияния на качество или стабильность лекарственного вещества, но контролируется как часть исследовательской работы. Полученные за 36 месяцев данные в отношении стабильности приведены в табл. 2а.
В табл. 2b приведены данные в отношении стабильности осадка сокристалла дигидрохлорида и этанола при 25°С и ОВ 60% в течение 6 месяцев. Внешне образцы представляли собой твердое вещество цветом от желтого до оранжевого в течение всего периода испытаний.
Заключение.
Настоящая композиция, содержащая соединение А1, стабильна в течение по меньшей мере 24 месяцев (табл. 2а). В течение этого периода не наблюдалось значительного разложения соединения А1 ни при 2-8°С, ни при 25°С/ОВ 60% (6 месяцев). Рекомендуется хранить и транспортировать композицию, содержащую соединение А1, при 2-8°С. Тем не менее 24 ч хранения при температуре до 25°С не должны вызывать беспокойства.
Пример 3. Производство фармацевтической композиции осадка сокристалла этанола и 2-[(1)-1-(2{6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-ил}гидразин-1-илиден)этил]пиридина дигидрохлорида.
Несколько осадков сокристалла этанола, главным образом с 2-[(1Е)-1-(2-{6-метил-5Н[ 1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-ил} гидразин-1 -илиден)этил]пиридина дигидрохлоридом (А1), (соответствует 160 мг свободного основания, А), по 225,6 мг, растворяли в растворе маннита (500 мг) в воде для инъекций (Европейская фармакопея, 10 мл), раствор стерилизовали фильтрацией через два 0,2 мкм фильтра и заполняли им соответствующее количество стерилизованных флаконов, затем лиофилизировали (с получением соли соединения А2).
- 10 039778
Таблица 2а
Время (месяцы) 0 1 3 6 9 12 18 24 36
RRT <1,0 0,92- 0,93 RRT 0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 0,07 <0,05 0-07
1,13 RRT <0,05 <0,05 <0,06 <0,06 <0,05 0,05 0,05 0,05 <0,05
1.23- <1/0 1,24 RRT 0,05 0,05 0,06 0,06 0,05 0,06 0,06 0,06 0,06
1,39 ^'° RRT <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 0,05 <0,05 <0,05
1,47- <1,0 1,51 0,17 0,10 0,10 0,362 0,09 <0,05 0,06 0,05 0,06
ОбЩе <2,0 е содер жание приме сей 0,26 0,15 0,16 0,42 0,14 0,10 0,29 0,16 0,18
Содер 2,53 2,34 2,18 2,50 2,88 2.65 2,73 3,37 2,46
жание воды (масс. %)
Относительная площадь для примеси при RRT (относительное время удерживания) = 1,47-1,51 выше, чем ожидалось.
Подготовка образца и анализ ВЭЖХ были повторены другим аналитиком, который подтвердил результат. Во время проверки метода испытания для этой примеси наблюдалась переменчивая площадь пика.
Авторы разработали новый способ лиофилизации, поскольку обычные способы, используемые в уровне техники, требовали более 300 ч сушки. Новый способ является более агрессивным и описан в табл. 3.
Таблица 2b
Время (месяцы) 0 1 3 6
RRT 0,92-0,93 < 1,0 0,05 <0,05 0,05 0,07
RRT 1,12 <1,0 <0,05 <0,05 <0,05 0,05
RRT 1,24 < 1,0 0,05 0,05 0,06 0,05
RRT 1,38 <1,0 <0,05 <0,05 0,05 <0,05
RRT 1,49-1,51 < 1,0 0,17 0,10 0,06 0,362
Итого
примесей <2,0 0,26 0,16 0,22 0,52
Содержание 2,53 2,41 2,30 2,45
воды (масс.%) 10
Относительная площадь для примеси при RRT = 1,47-1,51 выше, чем ожидалось.
Подготовка образца и анализ ВЭЖХ были повторены другим аналитиком, который подтвердил результат. Во время проверки метода испытания для этой примеси наблюдалась переменчивая площадь пика.
При использовании наибольшего отрицательного давления и относительно высокой температуры, температуры отжига, приведенных в табл. 3, продолжительность стадии лиофилизации сократили до 19 ч.
- 11 039778
Контакта с металлическими поверхностями избегали. Этанол и небольшие присутствовавшие количества метанола были удалены в процессе лиофилизации.
Флаконы укупоривали путем обжима крышки в атмосфере азота и хранили при 5°С; после хранения в течение 24 месяцев не наблюдалось разложения.
Глюкозу и маннит оценивали в качестве эксципиентов как по отдельности, так и в комбинации с NaCl. Наилучший результат в отношении растворимости, консистенции лиофилизированного осадка и подавления образования примесей был получен с использованием 5% (мас./об.) маннита в качестве добавки. Более высокая степень распада лиофилизированного осадка наблюдалась при использовании глюкозы в качестве наполнителя. Добавление NaCl вызывало проблемы с растворимостью, поскольку повышение рН, создаваемое NaCl, уменьшало растворимость соединения А2.
Лиофилизированный порошок для разведения и инъекций (соответствующий 160 мг свободного основания соединения А) хранили при 2-8°С вплоть до 24 месяцев. Внешне лиофилизированный осадок имел цвет от желтого до оранжевого в течение всего периода испытаний, и раствор после разведения имел цвет от желтого до оранжевого без видимых частиц.
Таблица 3
Тип стадии Температура (Т °C) Время (ч) Вакуум (мбар)
Загрузка на полки 5 / /
Стадия заморозки 5 0,30 /
Изменение температуры для заморозки -45 0,50 /
Стадия заморозки -45 4 /
Изменение температуры для заморозки (отжига) -25 1 /
Стадия заморозки (отжиг) -25 2 /
Изменение температуры для заморозки (отжига) -45 1 /
Стадия заморозки -45 4 /
Вакуумная камера -45 / 0,200
Первичная сушка -45 0,10 0,200
Изменение температуры для первичной сушки 25 3 0,200
Стадия первичной сушки 25 XX* 0,200
Изменение температуры для вторичной сушки 25 10 максимально
Конец цикла
Анализ, проведенный ввиду результата порошковой рентгеновской дифрактометрии для образца 25°С/ОВ 60%, показал неожиданный низкий уровень кристалличности. Степень кристалличности не оказывает прямого влияния на качество или стабильность лекарственного вещества, но контролируется как часть исследовательской работы. Время разведения составляло до 3 мин. Никакого бактериального роста не было обнаружено, и стерильность продукта не была нарушена в течение 24 месяцев при комнатной температуре. Полученные данные в отношении стабильности кратко представлены в табл. 4а.
- 12 039778
Таблица 4а
Время (месяцы) 0 1 3 6 12 18 24
pH 1,6 1,6 1,6 1,5 1,6 1,6 1.7
Содержание воды (%) 0,33 0,41 0,47 0,37 0,53 0,43 0,39
Анализ (масс.%)1 97,8 98,4 95,9 97,3 93,9 94,6 94,2
Общее содержание примесей (%) 0,7 0,5 0,3 0,4 0,2 0,3 0,34
Любая индивидуальна я чистота (%) 0,4 0,3 0,1 0,1 0,1 0,1 0,10
Установленная примесь* (%) <0,5 <0,05 <0,05 0,08 0,08 0,10 0,09
Z-изомер (%) RRT 0,92-0,93 0,1 0,1 0,1 0,1 <0,05 <0,05 0,05
RRT 1,13 0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 0,05 <ПКО
RRT 1,23-1,24 RRT 1,39 0,06 0,05 0,08 0,05 0,06 0,05 0,05
RRT 1,47-1,51 0,37 0,32 0,05 <0,05 <0,05 0,05 0,10
*Примесь, являющаяся результатом гидролиза, 3-гидразинил-6-метил-5Н[ 1,2,4]триазинол[5,6-Ъ]индол.
ПКО (предел количественного определения) составляет 0,05%, пики <ПКО были зарегистрированы как<0,05%.
Лиофилизированный порошок для разведения и инъекций (соответствующий 160 мг свободного основания соединения А) хранили в условиях 25°С/ОВ 60% для ускоренного исследования (см. табл. 4Ъ). Внешне лиофилизированный осадок имел цвет от желтого до оранжевого в течение всего периода испытаний, и раствор после разведения имел цвет от желтого до оранжевого без видимых частиц. Анализ, проведенный ввиду результата порошковой рентгеновской дифрактометрии для образца 25°С/ОВ 60%, показал неожиданный низкий уровень кристалличности. Степень кристалличности не оказывает прямого влияния на качество или стабильность лекарственного вещества, но контролируется как часть исследовательской работы. Время разведения составляло до 3 мин. Никакого бактериального роста не было обнаружено, и стерильность продукта не была нарушена в течение 24 месяцев при комнатной температуре. Неожиданно, лиофилизат продемонстрировал стабильность в течение по меньшей мере 24 месяцев при комнатной температуре. Полученные данные в отношении стабильности кратко представлены в табл. 4Ъ.
Таблица 4Ъ
Время (месяцы) 0 1 3 6 12 18 24
pH 1,6 1,6 1,6 1,5 1,6 1,5 1,6
Содержание воды (%) 0,33 0,39 0,55 0,45 0,59 0,49 0,45
Анализ (масс.%)1 97,8 97,2 95,4 98,3 94,6 93,9 94,5
Общее 0,7 0,3 0,7 0,4 0,2 0,20 0,36
- 13 039778 содержание примесей (%)
Любая 0,4 0,1 0,2 0,1 0,1 0,1 0,10
индивидуальна я чистота(%) Установленная <0,5 0,1 <0,05 0,08 0,08 0,10 0,10
примесь* (%) Z-изомер (%) 0,1 <0,05 0,1 0,1 0,10 <0,05 0,05
RRT 0,92-0,93 RRT 1,13 0,05 <0,05 <0,05 <0,05 <0,05 н.о. <ПКО
RRT 1,23-1,24 0,06 0,05 0,08 0,06 0,06 0,06 0,06
RRT 1,39 RRT 1,47-1,51 0,37 0,13 0,05 <0,05 <0,05 н.о. 0,09
*Примесь, являющаяся результатом гидролиза, 3-гидразинил-6-метил-5Н[1,2,4]триазинол[5,6-Ь]индол.
ПКО составляет 0,05%, пики <ПКО были зарегистрированы как <0,05%. Значение рН должно составлять от 0,5 до 4, в примере выше концентрация составляет приблизительно 16 мг/мл, а рН составляет от 1,3 до 2,3, и содержание воды составляет менее 1%. Z-изомер предпочтительно составляет менее 2%, однако авторы неожиданно обнаружили, что кислотные условия благоприятствуют Е-изомеру.
Лиофилизат, содержащий соединение А2, неожиданно продемонстрировал меньшую растворимость в воде после лиофилизации, чем до нее. В связи с этим было проведено исследование структуры, показавшее, что соединение А2 меняет свою кристаллическую форму в ходе лиофилизации. Новая кристаллическая форма была менее растворима в воде, что объясняет разницу в растворимости между осадком сокристалла дигидрохлорида и этанола (А1) и дигидрохлоридной солью (А2). Эксперименты показали, что это истощение осадков вызывало изменение морфологической формы.
Результаты экспериментов также показали, что эксципиент (D-маннит) не оказывает никакого влияния на образование новой морфологической формы. Наилучший результат в отношении образования примесей и консистенции лиофилизированного осадка получали с помощью цикла лиофилизации, описанного в табл.3, и содержания маннита на уровне 5%.
Пример 4. Получение фармацевтического препарата.
Было обнаружено, что может быть получен препарат соединения А2 в водных средах для подавления образования побочных продуктов вплоть до 24 ч при 1 мг/мл. Также ясно, что рН имеет значение для стабильности соединения А2 в водных средах, при этом наилучшая стабильность достигается при рН, составляющем приблизительно 1-4, более высокая концентрация вещества приводит к снижению рН. 1 мг/мл указанного водного раствора имеет рН, составляющий приблизительно 2-3.
Полученное соединение А2 получают в виде стерильного лиофилизированного порошка, и раствор для инъекций или инфузий получали путем растворения описанного выше лиофилизированного порошка в водном растворителе, таком как вода для инъекций. Каждый флакон содержит количество фармакологически активного соединения, соответствующее 160 мг свободного основания (А), полученного из раствора 225,6 мг лекарственного вещества (А1) и 5% маннита (мас./об.). Лиофилизат может быть разведен в 10 мл водного растворителя и затем разбавлен до 1 мг/мл водным растворителем, необязательно содержащим фармакологически приемлемый эксципиент, предпочтительно 5% маннита (мас./об.), для инфузий.
Пример 5.
Синтез соединения В; 2-[(1Е)-1-(2-{6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-Ь]индол-3-ил}гидразин-1илиден)пропил]пиридин.
1-(Пиридин-2-ил)пропан-1-он (35 мг, 0,26 ммоль) растворяли в смеси вода-уксусная кислота (20:1, 10 мл), затем добавляли 3-гидразинил-6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-Ь]индол (50 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 50°С. После выпаривания растворителей получали темно-зеленое твердое вещество (70 мг). ЖХ показала чистый продукт с соотношением изомеров 95:5.
- 14 039778
Пример 6.
Синтез соединения С; 2-(3,3-диметил-N-{6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-b]индол-3-ил}бутангидразоноил)пиридин.
3,3-Диметил-1-(пиридин-2-ил)бутан-1-он (46 мг, 0,26 ммоль) отмеряли в смесь вода-уксусная кислота (20:1, 10 мл), затем добавляли 3-гидразинил-6-метил-5Н-[1,2,4]триазино[5,6-Ь]индол (48 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После выпаривания растворителей получали зеленовато-желтое твердое вещество (78 мг). ЖХ показала чистый продукте соотношением изомеров 92:8.
Пример 7.
Соединение В1 превращали в его дигидрохлорид (В2) по следующей методике.
2-[(1Е)-1-(2-{6-Метил-5Н-[ 1,2,4]триазино[5,6-Ь]индол-3-ил}гидразин-1 -илиден)пропил]пиридин (30 мг, 0,09 ммоль) суспендировали в метаноле (0,6 мл), затем по каплям добавляли HCl в этаноле (1,04 экв., 1,25 М, 75 мкл). После растворения всего твердого вещества вновь добавляли HCl в этаноле (2,08 экв., 1,25 М, 150 мкл) и этанол (0,6 мл). Появился светло-коричневый осадок. Суспензию выдерживали при -10°С в течение 3 ч, затем твердое вещество отфильтровывали, промывали холодным этанолом и сушили. Продукт представлял собой ярко-желтое твердое вещество (10 мг). ЖХ показала только один изомер, второстепенный изомер не обнаруживается после превращения продукта в его соль с HCl.
Пример 8.
Соединения С1 превращали в его дигидрохлорид С2 по следующей методике.
2-[(1Е)-1-(2-{6-Метил-5Н-[ 1,2,4]триазино[5,6-Ь]индол-3-ил}гидразин-1 -илиден)пропил]пиридин (30 мг, 0,09 ммоль) суспендировали в метаноле (0,6 мл), затем по каплям добавляли HCl в этаноле (1,04 экв., 1,25 М, 75 мкл). После растворения всего твердого вещества вновь добавляли HCl в этаноле (2,08 экв., 1,25 М, 150 мкл) и этанол (0,6 мл). Продукт не выпадал в осадок немедленно, а только после выдерживания суспензии при -10°С в течение 3 ч. Твердое вещество отфильтровывали, промывали холодным этанолом и сушили. Продукт представлял собой ярко-желтое твердое вещество (20 мг). ЖХ показала только один изомер (Е), второстепенный изомер (Z) не обнаруживается после превращения продукта в его соль с HCl.
Описание характеристик.
Монокристальный рентгеноструктурный анализ показал, что Е-изомер преобладает в твердом состоянии.
Монокристальный рентгеноструктурный анализ проводили в SARomics Biostructures AB, Швеция. Кристаллы соединения А1 размером приблизительно 100x30 мкм собирали в стандартных криопетлях типа, обычно используемого для кристаллов белка, погружали в парафиновое масло и мгновенно охлаждали в жидком азоте. Данные собирали при 100 К на станции I911-3 в MAX-lab (λ=0,9198 А), оснащенной детектором mar CCD 225 мм. Размер луча составлял 50x50 мкм. Результаты рентгенеструктурного анализа подтверждают, что соединение А1 представляет собой Е-изомер гидразона. Прогнозируемая структура показана на фиг. 2Ь, где N обозначает атомы азота, Н обозначает атомы водорода, CL обозначает хлорид-ионы и Н2О обозначает молекулы воды.
Все испытания проводились с использованием эталонного стандарта, и все анализы согласуются с предполагаемой структурой.
Заключение.
Содержание воды в исходном соединении А, составлявшее 4-7%, было приемлемым, несмотря на то, что соединение продукта А2 легко гидролизуется в водных растворителях.
В маточном растворе отсутствовали следы изомера, что показывает, что применяемое условие осаждения превращает Z-изомер в целевой Е-изомер. Предпочтительно образование соли должно проводиться в течение нескольких часов, так как продукт чувствителен к действию кислоты.
Работа по разработке композиции была начата с испытания на стабильность в водном растворителе и оценки эксципиентов, обсуждаемых выше. Исходя из этих результатов, разработка композиции продолжилась в отношении оптимизации состава (т.е. лекарственное вещество - осадок сокристалла этанола - концентрация и тип и количество наполнителя) в отношении воздействия на образование примеси и растворимость лекарственного продукта (т.е. дигидрохлоридной соли, например соединения А2). В результате оптимизации количество свободного основания (соединение А) на флакон было увеличено со 100 до 160 мг.
Пример 9. Цитотоксическая активность.
Цитотоксическая активность, выраженная как коэффициент выживаемости (IC50), соединения А показана в различных линиях клеток (фиг. 3) и первичных культурах опухолей человека (табл. 5). Флуориметрический анализ цитотоксичности в микрокультурах (FMCA), (Lindhagen et al., 2008) использовали для измерения цитотоксического действия соединений в различных линиях клеток и первичных культурах опухолей человека. Клетки высевали в содержащие лекарственное средство 384-луночные планшеты с использованием пипетирующего робота Precision 2000 (Bio-Tek Instruments Inc., Уинуски, Вермонт). Планшеты инкубировали в течение 72 ч и затем переносили в интегрированную систему HTS SAGIAN
- 15 039778
Core System, состоящую из робота ORCA (Beckman Coulter) с инкубатором в СО2 (Cytomat 2C, Kendro, Соллентуна, Швеция), модуля дозатора (Multidrop 384, Titertek, Хантсвилл, Алабама), промывочного модуля (ELx405, Bio-Tek Instruments Inc), станции для снятия крышек, модуля для хранения планшета, считывателя штрих-кодов (Beckman Coulter), жидкостного манипулятора (Biomek 2000, Beckman Coulter) и многофункционального считывателя (FLUOstar Optima, BMG Labtech GmbH, Оффенбург, Германия) для автоматизированного FMCA.
Анализировали различные линии клеток (например, клетки Т-клеточного лейкоза CCRF-СЕМ, множественной миеломы RPMI-8226, карциномы яичника А2780, рака головы и шеи FaDu (плоскоклеточная карцинома), колоректального рака НТ29, рака молочной железы MCF7 и лейкоза HL-60), а также панели первичных культур опухолевых клеток человека (табл.5) (рака толстой кишки, желудочнокишечного тракта, почки, аппендикса, тонкой кишки и поджелудочной железы, а также псевдомиксомы брюшной полости). Результаты показывают противораковую активность широкого спектра соединения А, как показано на графике зависимости действия от концентрации (фиг. 3).
Пример 10.
Авторы также поставили задачу охарактеризовать активность соединений А, В и С в линиях клеток, представляющих рак разного происхождения. Конкретные использованные анализы и выводы в отношении оценки механизма были ранее подробно описаны (Zhang et al. 2014). Соединения А, В и С (см. фиг. 4) оценивали на цитотоксичность, выраженную как коэффициент выживаемости (SI), в шести линиях опухолевых клеток человека, используя флуориметрический анализ цитотоксичности в микрокультурах (FMCA) на основе клеток, как было подробно описано ранее (Lindhagen et al, 2008). Метод основан на измерении флуоресцентного флуоресцеина, образуемого при гидролизе FDA (диацетата флуоресцеина) жизнеспособными клетками с интактной плазматической мембраной. Флуоресценция пропорциональна числу интактных жизнеспособных клеток.
Материалы и методы.
Культура клеток.
Линии клеток культивировали в соответствующей клеточной среде, рекомендованной поставщиком. Среда содержала добавки 10% инактивированной теплом фетальной бычьей сыворотки, 2 ммоль/л L-глутамина, 100 мкг/мл стрептомицина и 100 ед./мл пенициллина (все от Sigma-Aldrich). Линию клеток культивировали при 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5% СО2.
Измерение цитотоксической активности.
Анализ FMCA кратко: 2500 клеток на лунку высевали в 384-луночные микропланшеты и инкубировали в течение ночи перед обработкой соединениями. Соединения добавляли с помощью акустического переноса жидкости (Echo 550, LabCyte). Планшеты инкубировали при 37°С в течение 72 ч, затем промывали и добавляли FDA в лунки с последующей инкубацией в течение 50 мин при 37°С. Флуоресценцию, пропорциональную количеству живых клеток в каждой лунке, измеряли при 485/520 нм в приборе Fluoroskan (Labsystems, GMI, Рамси, Миннесота). Выживаемость клеток представлена в виде коэффициента выживаемости (SI), определяемого как значение флуоресценции в обработанных соединением лунках, анализируемое как процент от значения в контрольных лунках за вычетом значений для холостой пробы. Критерии качества включали соотношение сигнал/холостая проба >10 и коэффициент вариации (CV) в контрольных лунках и лунках с холостой пробой <30%. Graph Pad Prism (Сан-Диего, Калифорния, США). Все эксперименты выполнялись дважды, и каждую концентрацию оценивали четырежды в каждом эксперименте. Соединения (А, В и С) разбавляли ДМСО (диметилсульфоксидом), 5 мМ.
- 16 039778
Таблица 5
IC50 в панелях различных первичных культур опухолевых клеток человека
Заболевание Количество проанализированных пациентов 1Сбо мкМ
РМР* 50 9,4
Колоректальный** 25 11
Желудочнокишечного тракта 9 6,9
Почки 13 164
Мезотелиома 7 12
Аппендикса 4 21
Тонкой кишки 1 5,4
Яичника 30 5,7
Поджелудочной железы 1 6,0
*Псевдомиксома брюшной полости.
**Колоректальный рак, хирургические образцы, полученные при максимальной циторедуктивной хирургии и перитонэктомий.
Результаты и обсуждение.
Исследованные соединения (А, В и С) показали сильную активность в отношении широкого спектра линий раковых клеток, см. табл. 6 и фиг. 4. Были выбраны линии клеток, охватывающие широкий спектр типов рака, представляющие как гематологические, так и солидные опухоли (табл. 6).
Эти результаты ясно показывают, что соединения А, В и С эффективны против нескольких различных линий опухолевых клеток, включая карциному толстой кишки, аденокарциному шейки матки, гепатоклеточную карциному, острый лимфобластный лейкоз и острый моноцитарный лейкоз.
Представленные в настоящем документе результаты ясно показывают, что соединения А, В и С эффективны против нескольких различных линий опухолевых клеток, включая карциному толстой кишки, аденокарциному шейки матки, гепатоклеточную карциному, острый лимфобластный лейкоз и острый моноцитарный лейкоз.
- 17 039778
Таблица 6
IC50 для соединений А, В и С в шести линиях опухолевых клеток человека
Линия Происхождение IC50 IC50 IC50
Соединение Соединение Соединение АВС
НСТ116 Карцинома кишки толстой прибл. мкМ 1 прибл. мкМ 1 прибл. мкМ 51
RKO Карцинома толстой < 250 нМ < 250 нМ < 250 нМ
кишки
HeLa Аденокарцинома прибл. 20 прибл. 20 прибл. 10
шейки матки мкМ мкМ мкМ
HepG2 Гепатоклеточная < 250 нМ < 250 нМ < 250 нМ
карцинома 10
CCRF- Острый лимфобластный < 250 нМ < 250 нМ < 250 нМ
СЕМ лейкоз
ТНР-1 Острый моноцитарный < 250 нМ < 250 нМ < 250 нМ
лейкоз
Хотя конкретные варианты осуществления подробно обсуждаются в настоящем документе, такое обсуждение приводится в качестве примера исключительно в иллюстративных целях и не предназначено для ограничения объема прилагаемой формулы изобретения, которая приведена ниже. В частности, автор предполагает, что в изобретение могут быть внесены различные замены, изменения и модификации без отклонения его от сущности и объема, как определено формулой изобретения.
Цитируемые источники
Eshba et al. Synthesis of some substituted-l,2,4-triazino[5,6-b]indole derivatives as potential
I antiviral and anticancer agents. Pharmazie Vol. 42, No. 10,1987; 664-666.
Lindhagen E, Nygren P, Larsson R (2008) The fluorometric microculture cytotoxicity assay. Nature
Protocis 3: 1364-1369.
Kgokong JL, Smith PP, Matsabisa GM (2005) Bioorg Med Chem. 13(8):2935-42).
Zhang X et al. (2014) Induction of mitochondrial dysfunction as a strategy for targeting tumor cells in metabolically compromised microenvironments. Nature communications 5:3295.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ получения фармацевтической композиции в виде лиофилизированного порошка, включающий следующие стадии:
    i) обеспечение метанольного раствора соединения общей формулы 1 в виде свободного основания:
    R2
    Формула 1 где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
    R1 представляет собой CH3;
    R2 представляет собой Н;
    X представляет собой N;
    Y представляет собой N;
    - 18 039778 ii) обеспечение взаимодействия раствора со стадии (i) с соляной кислотой в этаноле в количествах, при которых рН раствора составляет от 0,5 до 4, что является достаточным для превращения соединения общей формулы 1 в его дигидрохлоридную соль, где дигидрохлоридная соль самопроизвольно выпадает в осадок, где содержание остаточного этанола составляет от 2 до 20 мас.% относительно массы осадка дигидрохлоридной соли и где осадок дигидрохлоридной соли содержит соединение общей формулы 1b
    где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
    R1 представляет собой CH3;
    R2 представляет собой Н;
    X представляет собой N;
    Y представляет собой N;
    iii) очистка осадка, содержащего сокристалл дигидрохлоридной соли и этанола, полученного на стадии (ii), от этанола с получением дигидрохлоридной соли общей формулы 1 а
    R2
    R
    Формула 1а, где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
    R1 представляет собой CH3;
    R2 представляет собой Н;
    X представляет собой N;
    Y представляет собой N;
    iv) растворение дигидрохлоридной соли со стадии (iii) в водном растворителе, содержащем фармацевтически приемлемый эксципиент; и
    v) лиофилизация композиции, полученной на стадии (iv), с получением композиции, содержащей дигидрохлоридную соль общей формулы 1а и фармацевтически приемлемый эксципиент в виде лиофилизированного порошка.
  2. 2. Фармацевтическая композиция, полученная способом по п.1, для лечения рака, содержащая эффективное количество фармацевтически приемлемой дигидрохлоридной соли общей формулы 1а
    R2
    R
    •2 HCI
    H
    Формула 1а где R представляет собой CH3, CH2CH3 или CH2C(CH3)3;
    R1 представляет собой CH3;
    R2 представляет собой Н;
    X представляет собой N;
    Y представляет собой N, и фармацевтически приемлемый эксципиент;
    при этом указанная фармацевтическая композиция находится в виде лиофилизированного порошка;
    при этом по меньшей мере 95 мас.% (мас./мас.) фармацевтически приемлемой дигидрохлоридной соли находится в форме Е-изомера; и
    - 19 039778 при этом водный раствор указанной фармацевтической композиции имеет рН 0,5-4.
  3. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, в которой концентрация фармацевтически приемлемого эксципиента составляет от 0,1 до 10% (мас./об.).
  4. 4. Применение фармацевтической композиции по п.2, разведенной в водном растворителе с конечной концентрацией, составляющей от 0,5 до 30 мг/мл, для инфузий субъекту, нуждающемуся в лечении рака.
  5. 5. Применение фармацевтической композиции по п.2 для лечения рака.
  6. 6. Применение по любому из пп.4, 5, в котором рак представляет собой солидную опухоль или лейкоз.
  7. 7. Способ лечения рака у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтической композиции по любому из пп.2, 3.
  8. 8. Способ по п.7, включающий введение дополнительного противоракового агента.
  9. 9. Способ по п.7 или 8, в котором эффективная доза фармацевтически приемлемой дигидрохлоридной соли общей формулы 1а составляет от 0,01 до 10 мг/кг массы тела, предпочтительно от 0,1 до 5 мг/кг массы тела и более предпочтительно от 1 до 4 мг/кг массы тела.
  10. 10. Способ по любому из пп.7-9, в котором рак представляет собой солидную опухоль или лейкоз.
EA201891027A 2015-12-18 2016-12-10 Фармацевтическая композиция, содержащая производные индола, способ ее получения и применение EA039778B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE1500520 2015-12-18
PCT/EP2016/025175 WO2017102097A1 (en) 2015-12-18 2016-12-10 Pharmaceutical composition comprising indole derivatives, process for preparation and use thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201891027A1 EA201891027A1 (ru) 2019-02-28
EA039778B1 true EA039778B1 (ru) 2022-03-14

Family

ID=58231562

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201891027A EA039778B1 (ru) 2015-12-18 2016-12-10 Фармацевтическая композиция, содержащая производные индола, способ ее получения и применение

Country Status (14)

Country Link
US (1) US10668056B2 (ru)
EP (1) EP3390403B1 (ru)
JP (2) JP6929299B2 (ru)
CN (1) CN108431003A (ru)
AU (1) AU2016371541B2 (ru)
CA (1) CA3008084A1 (ru)
DK (1) DK3390403T3 (ru)
EA (1) EA039778B1 (ru)
ES (1) ES2925690T3 (ru)
HK (1) HK1257129A1 (ru)
HU (1) HUE059610T2 (ru)
PL (1) PL3390403T3 (ru)
PT (1) PT3390403T (ru)
WO (1) WO2017102097A1 (ru)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE059610T2 (hu) * 2015-12-18 2022-12-28 Vivolux Ab Gyógyszerészeti készítmény, amely indolszármazékokat tartalmaz, valamint eljárás annak elõállítására és felhasználására
WO2021044608A1 (ja) * 2019-09-06 2021-03-11 シミックホールディングス株式会社 ダントロレン水性製剤及びその調製方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012128689A1 (en) * 2011-03-21 2012-09-27 Vivolux Ab Treatment of solid tumours
WO2014046589A1 (en) * 2012-09-21 2014-03-27 Vivolux Ab Means and method for treating solid tumours

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6660737B2 (en) * 2001-05-04 2003-12-09 The Procter & Gamble Company Medicinal uses of hydrazones
US20060217437A1 (en) * 2005-03-17 2006-09-28 Burmester James K TGF-beta modulators and methods for using the same
WO2009035534A2 (en) * 2007-09-07 2009-03-19 The Cleveland Clinic Foundation Treatment of ischemic eye disease by the systematic pharmaceutical activation of hypoxia inducible factor (hif)
HUE059610T2 (hu) * 2015-12-18 2022-12-28 Vivolux Ab Gyógyszerészeti készítmény, amely indolszármazékokat tartalmaz, valamint eljárás annak elõállítására és felhasználására

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012128689A1 (en) * 2011-03-21 2012-09-27 Vivolux Ab Treatment of solid tumours
WO2014046589A1 (en) * 2012-09-21 2014-03-27 Vivolux Ab Means and method for treating solid tumours

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ESHBA N H, ET AL: "Synthesis of some substituted 1,2,4-triazino[5,6-b]indole derivatives as potential antiviral and anticancer agents", PHARMAZIE, GOVI VERLAG PHARMAZEUTISCHER VERLAG GMBH, DE, vol. 42, no. 10, 1 January 1987 (1987-01-01), DE , pages 664 - 666, XP009029588, ISSN: 0031-7144 *
XIAONAN ZHANG, MÅRTEN FRYKNÄS, EMMA HERNLUND, WALID FAYAD, ANGELO DE MILITO, MARIA HÄGG OLOFSSON, VLADIMIR GOGVADZE, LONG DANG, SV: "Induction of mitochondrial dysfunction as a strategy for targeting tumour cells in metabolically compromised microenvironments", NATURE COMMUNICATIONS, vol. 5, XP055264964, DOI: 10.1038/ncomms4295 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP3390403B1 (en) 2022-06-29
HK1257129A1 (zh) 2019-10-11
PT3390403T (pt) 2022-09-06
PL3390403T3 (pl) 2022-10-24
JP2021130673A (ja) 2021-09-09
US10668056B2 (en) 2020-06-02
CN108431003A (zh) 2018-08-21
AU2016371541A1 (en) 2018-06-07
ES2925690T3 (es) 2022-10-19
WO2017102097A1 (en) 2017-06-22
JP6929299B2 (ja) 2021-09-01
DK3390403T3 (da) 2022-08-29
JP2019505571A (ja) 2019-02-28
US20180280366A1 (en) 2018-10-04
EP3390403A1 (en) 2018-10-24
EA201891027A1 (ru) 2019-02-28
AU2016371541B2 (en) 2021-07-08
CA3008084A1 (en) 2017-06-22
HUE059610T2 (hu) 2022-12-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7057798B2 (ja) ｍＴＯＲＣ１阻害剤
JP6946194B2 (ja) キナーゼを調節する化合物の固体形態
CN109563100B (zh) 三唑并嘧啶化合物的晶体形式
JP4053073B2 (ja) 選択的ｃｄｋ４阻害剤のイセチオン酸塩
US9371387B2 (en) Composition for prevention or treatment of ischemic cardiac disease, comprising inhibitor against age-albumin synthesis or release of mononuclear phagocyte system cells as active ingredient
WO2018218963A1 (zh) 一种egfr抑制剂的药用盐及其晶型、制备方法和应用
JP2020536917A (ja) キナーゼを調節するための化合物の固体形態
KR102342776B1 (ko) (S)-2-((2-((S)-4-(다이플루오로메틸)-2-옥소옥사졸리딘-3-일)-5,6-다이하이드로벤조[f]이미다조[1,2-d][1,4]옥사제핀-9-일)아미노)프로판아미드의 다형체 및 고체 형태, 및 이의 제조 방법
AU2017335648B2 (en) Method for treating cancer using a combination of DNA-damaging agents and DNA-PK inhibitors
JP2018531280A6 (ja) 改善された特性を有するβ−グアニジノプロピオン酸の薬学的に許容される塩及びその使用
JP2018531280A (ja) 改善された特性を有するβ−グアニジノプロピオン酸の薬学的に許容される塩及びその使用
JP2023526054A (ja) ４－アミノ－５－（６－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）チエノ［２，３－ｂ］ピリジン－６（７ｈ）－オンの塩及び結晶形
JP2021130673A (ja) インドール誘導体を含む医薬組成物、その調製方法及びその使用
AU2018329152A1 (en) Substituted imidazoquinolines as agonists of TLR7
WO2011025805A1 (en) Alkyl indole-3-carbinol-derived antitumor agents
KR20230069983A (ko) Cdk4 억제제의 고체 형태
Li et al. Solubility-driven optimization of benzothiopyranone salts leading to a preclinical candidate with improved pharmacokinetic properties and activity against Mycobacterium tuberculosis
EP3476843A1 (en) Pyrimidine compound, chloride salt thereof, and manufacturing and application of same
KR20130130802A (ko) 보르트만닌 유사체의 결정질 형태의 조성물 및 이의 사용 방법
CN106995368B (zh) 一种非atp竞争性fgfr1抑制剂及其应用
WO2024040241A1 (en) Pharmaceutical formulations, processes for preparation, and methods of use
JP2015531779A (ja) ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤
WO2023166531A1 (en) Amyloid and associated pathology modulators and methods thereof