EA031172B1

EA031172B1 - Состав для лечения вич-инфекции на основе атазанавира и кобицистата

Info

Publication number: EA031172B1
Application number: EA201690594A
Authority: EA
Inventors: Отилия Мей Юе Ку; Фаранак Никфар; Цзин Тао; Ниранйян Кумар Коттала; Сайлеш А. Вариа
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Холдингс Айэрланд
Priority date: 2013-10-07
Filing date: 2014-10-06
Publication date: 2018-11-30
Also published as: RS63570B1; LT3421033T; CL2016000787A1; DK3421033T3; RS57882B1; DK3054926T3; PT3421033T; BR112016007526A8; SI3421033T1; EA201690594A1; HRP20181582T1; BR112016007526A2; CN106029058A; KR102286386B1; JP6574415B2; EP3421033A1; SA516370891B1; AU2014332200B2; MX2016004078A; HUE059757T2

Abstract

Представлена двухслойная таблетка для лечения ВИЧ-инфекции, содержащая атазанавир и кобицистат, и способ приготовления указанной таблетки.

Description

Данное изобретение относится также к способам введения этих составов пациентам, нуждающимся в таком лечении.

Сведения о предшествующем уровне техники

Лечение пациентов, инфицированных ВИЧ-1 (вирусом иммунодефицита человека 1), остаётся важнейшей проблемой в медицине, к концу 2013 г. десятки млн людей во всём мире всё ещё были инфицированы этим вирусом. Количество случаев заболеваний, вызванных ВИЧ и СПИД (синдромом приобретённого иммунодефицита), быстро растёт. В 2005 г. сообщалось о примерно 5 млн новых случаев такой инфекции, а 3,1 млн людей умерли от СПИД. Доступные в настоящее время лекарства для лечения ВИЧинфекции включают ингибиторы нуклеозидной обратной транскриптазы (RT) или одобренные монотерапевтические комбинации: зидовудин (или AZT или RETROVIR®), диданозин (или VIDEX®), ставудин (или ZERIT®), ламивудин (или 3ТС или EPIVIR®), зальцитабин (или DDC или HIVID®), абакавира сукцинат (или ZIAGEN®), соль тенофовир дизопроксил фумарата (или VIREAD®), эмтрицитабин (или FTC - EMTRIVA®), COMBIVIR® (содержит -3ТС плюс AZT), TRIZIVIR® (содержит абакавир, ламивудин и зидовудин), EPZICOM® (содержит абакавир и ламивудин), TRUVADA® (содержит VIREAD® и EMTRIVA®); ингибиторы ненуклеозидной обратной транскриптазы: невирапин (или VIRAMUNE®), делавирдин (или RESCRIPTOR®) и эфавиренц (или SUSTIVA®), ATRIPLA® (TRUVADA® + SUSTIVA®), и этравирин, и пептидомиметические ингибиторы протеазы или одобренные средства: саквинавир, индинавир, ритонавир, нелфинавир, ампренавир, лопинавир, KALETRA® (лопинавир и ритонавир), дарунавир, атазанавир (реатаза, REYATAZ®) и типранавир (APTIVUS®) и кобицистат, и ингибиторы интегразы, такие как ралтегравир (ISENTRESS®) и долутегравир (ещё не одобренный), а также ингибиторы проникновения в клетку, такие как энфувиртид (Т-20) (FUZEON®) и маравирок (SELZENTRY®).

Каждое из этих лекарств, если оно применяется само по себе, может только временно ограничивать репликацию вируса. Однако при использовании в комбинации эти лекарства оказывают сильное воздействие на виремию и развитие болезни. В действительности, в последнее время было подтверждено значительное уменьшение коэффициента смертности среди больных СПИД как следствие широко распространённого применения комбинированной терапии. Однако, несмотря на эти впечатляющие результаты для 30-50% пациентов такая комбинированная терапия не даёт результатов. Недостаточная активность лекарств, их непереносимость, ограниченное проникновение в ткани и ограниченное специфическое действие лекарств для некоторых типов клеток (например, большинство нуклеозидных аналогов не могут фосфорилироваться в оставшихся клетках) могут объяснить неполное подавление чувствительных вирусов. Кроме того, высокая скорость репликации и быстрое обновление ВИЧ-1 вместе с частым введением мутаций приводят к возникновению вариантов, резистентных к лекарству, и к неудачам в лечении при применении субоптимальных концентраций лекарств. Таким образом, существует необходимость в создании новых соединений для лечения ВИЧ-инфекции, характеризующихся другими паттернами сопротивления и благоприятными фармакокинетическими свойствами, а также профилями безопасности.

Одно из упомянутых выше лекарств, атазанавир, является в настоящее время антиретровирусным средством первой линии терапии при лечении ВИЧ- инфекции. Он имеет химическую формулу C₃₈H₅₂N₆O₇, и его название но номенклатуре IUPAC - метил-Л-[(Щ)-1-{[^^)-3-гидрокси-4-[^)-2[(метоксикарбонил)амино]-3,3-диметил-Н'-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метил}бутангидразид]-1-фенилбутан-2-ил]карбамоил}-2,2-диметилпропил]карбамат. Его структурная формула приведена ниже

Это соединение описано и заявлено в патенте США № 5849911, включённом в данную заявку посредством отсылки. Атазанавир отличается от большинства других PIs (ингибиторов протеазы) тем, что

- 1 031172 он может применяться только один раз в день (а не многократно в течение дня) и оказывает меньшее воздействие на липидный профиль пациента (количества холестерина и других жировых веществ в крови). Как и другие ингибиторы протеазы, он используется только в комбинации с другими препаратами для лечения ВИЧ- инфекции.

Атазанавир доступен в компании Bristol-Myers Squibb Company, Princeton, New Jersey, под названием реатаза, REYATAZ® (атазанавира сульфат). Применяемые в данной заявке термины атазанавир и ATV являются синонимами и относятся к атазанавиру. Используемый в данной заявке термин атазанавира сульфат относится к атазанавира сульфату. Химическое название атазанавира сульфата (3S,8S,9S,12S)-3,12-бис-(1,1-диметилэтил)-8-гидрокси-4,11-диоксо-9-(фенилметил)-6-[[4-(2-пиридинил)фенил]метил]-2,5,6,10,13-пентаазатетрадекандионовой кислоты диметилового эфира сульфат (1:1). Его молекулярная формула - C₃₈H₅₂N₆O₇-H₂SO₄, что соответствует молекулярному весу 802.9 (соль серной кислоты).

REYATAZ® представляет собой лекарство, одобренное для применения в комбинации с другими антиретровирусными агентами для лечения ВИЧ-1 инфекции. Он предлагается в виде капсул с концентрацией 100 мг (миллиграмм), 150, 200 и 300 мг. И в США, и в странах Европейского союза (ЕС, EU) одобренная доза ATV составляет 300 мг в комбинации с ритонавиром (RTV), 100 мг, вводится один раз в день вместе с пищей для лечения пациентов, инфицированных ВИЧ, как не получавших лекарственной терапии, так и подвергавшихся лечению. (См. REYATAZ® (атазанавира сульфат), капсулы - инструкция по применению Reyataz, http://packageinserts.bms.com/pi/pi_reyataz.pdf.

Атазанавир быстро абсорбируется (T_max ~2.5 ч) и демонстрирует нелинейную фармакокинетику (PK), с более чем пропорциональным дозе увеличением AUC (определение приведено ниже) и с величинами C_max (определение приведено ниже) в интервале доз от 200 до 800 мг один раз в день (QD). Устойчивое состояние достигается в период от 4 до 8 дн, с кумуляцией лекарства. Атазанавир следует принимать с пищей, потому что это облегчает биодоступность и снижает фармакокинетическую (РК) вариабельность. Средняя величина периода полувыведения ATV, введённого с лёгкой пищей здоровым субъектам и ВИЧ-инфицированным взрослым субъектам, составляет примерно 7 ч с дозой в устойчивом состоянии равной 400 мг ежедневно.

Большое значение имеет также лекарство кобицистат (обозначаемый в данной заявке как COBI). Это лекарство пригодно для лечения ВИЧ-инфекции, но убивает вирус неспецифически. Скорее, оно характеризуется способностью ингибировать печёночные ферменты, которые метаболизируют другие средства, используемые для лечения ВИЧ-инфекции. Кобицистат является активным ингибитором ферментов цитохрома Р450 3А, включая важный подтип CYP3A4. Он также ингибирует интестинальные транспортные белки, увеличивая общую абсорбцию некоторых средств для лечения ВИЧ-инфекции, включая атазанавир. Кобицистат имеет химическую формулу C₄₀H₅₃N₇O₅S₂ и структурную формулу

Это соединение описано и заявлено в патенте США № 8148374, включённом в данную заявку посредством отсылки.

Кобицистат был одобрен для продажи Управлением по контролю за продуктами питания и лекарственными средствам (FDA) в США как часть комбинации STRIBILD™ с фиксированной дозой (элвитегравир, кобицистат, эитрицитабинт и тенофовир дизопроксил фумарат) для лечения ВИЧ-инфекции.

Европейская комиссия также одобрила продажу TYBOST™ (таблетки кобицистата, 150 мг, для введения один раз в день), фармакокинетического усилителя, который повышает уровень некоторых средств против ВИЧ в крови. TYBOST™ показан как усилитель для ингибиторов протеазы ВИЧ атазанавира (300 мг один раз в день) и дарунавира (800 мг один раз в день) для антиретровирусной комбинированной терапии для взрослых, инфицированных ВИЧ-1. Подробную информацию можно найти на сайте http://www.ema.europa.eu/ema.

Дополнительным аспектом, связанным со введением средств от ВИЧ- инфекции, включая и атазанавир, и кобицистат, является комплаентность (приверженность пациентов лечению). Поскольку все лекарства против ВИЧ должны применяться при комбинированной терапии, должны быть разработаны новые и более эффективные пути, чтобы обеспечить надлежащий приём пациентом каждого лекарственного вещества, как предписано. Если нужно глотать слишком много отдельных пилюль со многими временными интервалами, тогда дозирование становится неудобным, и следование лечению становится менее вероятным. Точно так же, если пилюли или другие лекарственные средства трудно проглотить, это

- 2 031172 может негативно сказаться на комплаентности.

Таким образом, данный уровень техники нуждается в новых, легко вводимых комбинированных составах, содержащих активные антиретровирусные лекарства, которые пригодны для лечения ВИЧ- инфекции. Эти новые составы на основе двух лекарств должны вводиться удобно и легко, а также быть физически стабильными и содержать небольшое количество продуктов разложения и поэтому обеспечивать эффективное дозирование важных средств для лечения ВИЧ- инфекции.

В частности, желательны стабильные легко вводимые комбинации с фиксированной дозой (FDCs), содержащие атазанавир и кобицистат.

Сущность изобретения

Благодаря настоящему изобретению теперь стало возможно снизить количество принимаемых пациентом единиц дозирования, которое связано с повышенной ответственностью пациента в процессе лечения ВИЧ-инфекции. В соответствии с настоящим изобретением предусмотрена новая FDC (комбинация с фиксированной дозой) таблетка, состоящая из 300 мг ATV и 150 мг COBI. FDC представляет собой двухслойную таблетку, изготовленную из гранулята сульфата ATV, который преимущественно получается методом влажного гранулирования, и гранулята COBI, преимущественно получаемого методом сухого гранулирования.

Согласно первому варианту настоящее изобретение предусматривает состав на основе двух антиретровирусных лекарств, пригодных для лечения ВИЧ-инфекции, содержащий ингибитор протеазы атазанавир и кобицистат.

Данное изобретение предусматривает также комбинацию из двух лекарств, атазанавира и кобицистата, в виде двухслойной таблетки, которая обладает высокой стабильностью, имеет очень благоприятный профиль высвобождения, содержит минимальное количество продуктов разложения и не имеет видимых трещин.

Настоящее изобретение предусматривает также один или более способов лечения пациентов, инфицированных ВИЧ, с использованием состава, который содержит и атазанавир, и кобицистат, этот способ является простым и обеспечивает удобное введение лекарственного вещества.

Согласно ещё одному варианту изобретение направлено также на один или более способов приготовления состава, а также на полученный таким образом состав.

Эти и другие цели настоящего изобретения станут очевидными после ознакомления с описанием и прилагаемой формулой изобретения.

Краткое описание рисунков

На фиг. 1 показана в разрезе сравнительная монолитная (однослойная) таблетка, содержащая атазанавира сульфат и кобицистат.

На фиг. 2 приведён график, показывающий содержание продуктов разложения кобицистата через 8 нед при температуре 40°С и 75%-ной относительной влажности в монолитной таблетке (сравнительной), в двухслойной таблетке согласно изобретению, в трёхслойной таблетке (сравнительной) и в таблетке, содержащей один кобицистат (сравнительной).

Фиг. 3 иллюстрирует схематически окислительное разложение кобицистата.

На фиг. 4 показана в разрезе сравнительная трёхслойная таблетка, содержащая слои атазанавира сульфата и кобицистата со слоем инертного эксципиента, расположенным между двумя указанными слоями.

На фиг. 5 показана в разрезе двухслойная таблетка, содержащая слои атазанавира сульфата и кобицистата согласно данному изобретению.

На фиг. 6 приведён график, показывающий общее количество продуктов разложения кобицистата в таблетке атазанавир/кобицистат после длительной выдержки (12 мес).

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Первым активным компонентом, являющимся частью состава из двух лекарств по изобретению, является атазанавир. Он может быть использован в виде основания, а также в виде соли или пролекарства. В частности, в комбинированном составе по изобретению предпочтительно использовать атазанавира сульфат.

Вторым активным компонентом является кобицистат, который может быть использован в любой из его форм, доступных для специалиста в данной области.

Составы согласно данному изобретению в соответствии со всеми описанными в данной заявке вариантами могут вводиться перорально в виде стандартных лекарственных форм, содержащих нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты и разбавители, известные специалисту в данной области. В составе могут содержаться одно или более вспомогательных веществ.

Фармацевтические составы по изобретению предпочтительно могут быть в виде таблеток, вводимых перорально. При получении таблеток могут быть использованы фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты и разбавители, которые применяются в области фармацевтических препаратов.

В виде таблеток эти составы могут содержать, без ограничения, микрокристаллическую целлюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу (НРС), гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), кросповидон, натриевую соль кроскармеллозы, натрия крахмал гликолят и/или

- 3 031172 другие доступные полимеры в качестве эксципиентов, а также дикальцийфосфат, крахмал, стеариновую кислоту, стеарат магния и лактозу и/или другие эксципиенты, связующие, наполнители, дезинтегранты, разбавители и смазывающие вещества, известные специалисту в данной области. Согласно некоторым вариантам может использоваться также соль соляной кислоты в микронизированной форме.

В частности, согласно данному изобретению предпочтительными являются микрокристаллическая целлюлоза, натрия крахмал гликолят, кросповидон, гидроксипропилцеллюлоза и натриевая соль кроскармеллозы, а также стеариновая кислота и стеарат магния.

Для приготовления состава по изобретению до формования таблеток, содержащих атазанавир и кобицистат, предпочтительно сначала приготовить грануляты атазанавира и кобицистата в отдельности. Для получения гранулята атазанавира активное вещество сначала смешивается с одним или более упомянутыми выше эксципиентами в подходящем для смешения материалов смесителе. Предпочтительно, атазанавир (в виде атазанавира сульфата) смешивается с первым количеством микрокристаллической целлюлозы, натриякрахмала гликолята и кросповидона, а также с гидроксипропилцеллюлозой и стеариновой кислотой. Эта смесь подвергается влажному гранулированию в присутствии воды, затем проводят мокрое измельчение и сушат полученные гранулы. Затем к гранулам добавляют второе количество микрокристаллической целлюлозы, натрия крахмала гликолята и кросповидона и перемешивают. После этого к смеси добавляют стеарат магния и полученный гранулят атазанавира собирают в подходящий контейнер.

Согласно одному из вариантов используемое количество атазанавира должно быть таким, чтобы получить примерно 300 мг лекарства (в виде свободного основания) в составе таблетки.

Для получения части таблеток, содержащих атазанавир и кобицистат, а именно гранулята кобицистата, кобицистат предпочтительно использовать вместе с подходящим носителем, таким как диоксид кремния. Кобицистат (на диоксиде кремния) затем смешивают с первым количеством микрокристаллической целлюлозы, а также натриевой соли кроскармеллозы. Затем добавляется первое количество стеарата магния, и все ингредиенты перемешиваются. Эта смесь затем вальцуется, прессуется и перерабатывается в гранулы. Затем примешивается второе количество микрокристаллической целлюлозы и, наконец, второе количество стеарата магния. Полученные гранулы кобицистата помещаются в подходящий контейнер.

Согласно одному из вариантов используемое количество кобицистата должно быть таким, чтобы получить в составе таблетки примерно 150 мг лекарства в составе таблетки.

Для получения таблеток, содержащих и атазанавир, и кобицистат, гранулы атазанавира и гранулы кобицистата подвергают прессованию для получения двухслойных таблеток, используя подходящий пресс-инструмент. Или же можно применять пресс для изготовления трёхслойных таблеток (с инструментом для двухслойных таблеток), чтобы получать двухслойные таблетки. Предпочтительно также, чтобы таблетки согласно изобретению не были монолитными.

Предпочтительно также, чтобы таблетки по изобретению не имели видимых трещин (при осмотре их невооружённым глазом) при комнатной температуре (~ 25°С и давлении, равном 1 атм) в течение 24 ч после выгрузки этих таблеток из пресса.

Таблетки согласно изобретению имеют твёрдость в интервале от примерно 28 до 39 SCUs (единиц твёрдости по шкале Кобба).

Кроме того, предпочтительно, чтобы таблетки по изобретению содержали общее количество продуктов разложения кобицистата (определение которых приведено ниже) менее примерно 3.5% при измерении примерно через 8 нед при условиях хранения при 40°С и 75%-ной относительной влажности (RH). Более предпочтительно, чтобы таблетки характеризовались общим содержанием продуктов разложения кобицистата, составляющим менее примерно 3% при указанных условиях. Ещё более предпочтительно, чтобы таблетки характеризовались общим содержанием продуктов разложения кобицистата, составляющим менее примерно 2.5% при указанных условиях.

Согласно другому варианту предпочтительно также, чтобы таблетки по изобретению содержали общее количество продуктов разложения кобицистата менее примерно 2.0% при измерении примерно через 12 мес при условиях хранения при 5°С и также при измерении примерно через 12 мес и при 25°С и или при 60%, или при 75% RH, и также при измерении примерно через 12 мес и при 30°С и/или при 60%, или при 75% RH. Ещё более предпочтительно, чтобы таблетки по изобретению характеризовались общим содержанием продуктов разложения кобицистата, составляющим менее примерно 1.4% при хранении при указанных условиях. Ещё более предпочтительно, чтобы таблетки по изобретению характеризовались общим содержанием продуктов разложения кобицистата, составляющим менее примерно 1.2% при хранении при указанных условиях.

Согласно ещё одному варианту предпочтительно также, чтобы таблетки по изобретению удовлетворяли следующим требованиям: общее содержание продуктов разложения кобицистата меньше или равно примерно 4.0%, и содержание индивидуальных деградантов ВМТ-115982 менее или равное примерно 0.2%; и ВМТ-0089290 менее или равно примерно 0.2%.

После получения прессованных таблеток предпочтительно приготовить суспензию для нанесения

- 4 031172 покрытия. С использованием этой суспензии на сердцевину таблеток может быть нанесено плёночное покрытие. Полученные таблетки предпочтительно будут содержать примерно 20-45% (вес./вес.) атазанавира в расчёте на общий вес состава и примерно 15-40% (вес./вес.) кобицистата (с носителем) в расчёте на общий вес состава. Предпочтительно также, чтобы атазанавир и кобицистат вместе составляли примерно 35-85% (вес./вес.) в расчёте на общий вес состава.

Каждый из двухкомпонентных составов, описанных в данной заявке как часть изобретения, может быть введён перорально людям с дозой в интервале от примерно 1 до 100 мг/кг веса один или несколько раз в день, обычно в течение продолжительного периода, такого как несколько дней, недель, месяцев или даже лет. Один из предпочтительных интервалов дозирования при пероральном введении составляет от примерно 1 до 10 мг/кг веса. Другой предпочтительный интервал дозирования составляет от примерно 1 до 20 мг/кг веса. Предпочтительно, чтобы составы, описанные в данной заявке, смешивались один раз ежедневно, один раз еженедельно или даже один раз ежемесячно или в течение более длительного периода с получением лекарственных форм, содержащих комбинацию двух лекарств, атазанавира и кобицистата. Более предпочтительно, чтобы конечный состав таблетки содержал примерно 300 мг атазанавира и примерно 150 мг кобицистата.

Однако следует иметь в виду, что конкретная величина дозы и частота дозирования для конкретного пациента может меняться и зависит от ряда факторов, таких как активность конкретного применяемого соединения, метаболическая стабильность и продолжительность действия этого соединения, возраст, вес пациента, общее состояние здоровья, пол, система питания, способ и время введения, скорость выделения, состав комбинации лекарств, степень серьёзности конкретного состояния больного и терапия для пациента, а также других возможных факторов.

В соответствии с настоящим изобретением предусмотрен также способ лечения вирусных инфекций, таких как ВИЧ-инфекция и СПИД. Этот способ лечения включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, одного или более фармацевтических составов, описанных в данной заявке, которые содержат эффективное для борьбы с вирусами количество двух антиретровирусных соединений, атазанавира и кобицистата, вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами или разбавителями. Используемый в данной заявке термин эффективное для борьбы с вирусами количество означает общее количество каждого активного соединения в композиции, достаточное для обнаружения значимого благоприятного эффекта у пациента, а именно, ингибирования, ослабления или излечивания острых состояний, характеризующихся (?) ингибированием ВИЧ-инфекции. При применении этого термина для комбинации двух лекарств этот термин относится к объединённым количествам активных ингредиентов, которые приводят к терапевтическому эффекту. Термины лечить, лечение, излечение, используемые в данной заявке в описании и в формуле изобретения, означают предотвращение, ослабление или исцеление ВИЧ-инфекции и/или болезней и состояний, связанных с ВИЧ-инфекцией.

Следующие ниже примеры иллюстрируют различные аспекты и варианты настоящего изобретения, но их не следует рассматривать как ограничивающие объём данного изобретения:

Пример 1. Способ изготовления

Изготовление гранулята атазанавира (ATV)

Далее следует описание способа получения гранулята ATV для изготовления таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием. Исходные материалы могут быть предварительно просеяны, если это необходимо.

1. В подходящий смеситель добавляют микрокристаллическую целлюлозу (интрагранулярную часть), атазанавира сульфат, стеариновую кислоту, натрия крахмал гликолят (интрагранулярную часть), кросповидон (интрагранулярную часть) и гидроксипропилцеллюлозу и смешивают эти вещества.

2. Смесь, полученную на стадии 1, подвергают влажному гранулированию в присутствии воды.

3. Гранулы, полученные на стадии 2, измельчают, используя подходящую конусную мельницу.

4. Проводят сушку гранул, полученных на стадии 3, в подходящей сушилке с псевдоожиженным слоем.

5. Сортируют гранулы, полученные на стадии 4, используя подходящую конусную мельницу.

6. Добавляют микрокристаллическую целлюлозу (экстрагранулярную часть), натрия крахмал гликолят (экстрагранулярную часть) и кросповидон (экстрагранулярную часть) к гранулам со стадии 5 и перемешивают эту смесь в подходящем смесителе.

7. Добавляют стеарат магния (экстрагранулярную часть) к смеси, полученной на стадии 6 и перемешивают эту смесь в подходящем смесителе. Помещают гранулят ATV в подходящий контейнер.

Изготовление гранулята кобицистата (COBI)

Ниже следует описание способа получения гранулята кобицистата (COBI) для изготовления таблеток ATV/COBIc плёночным покрытием. Исходные материалы могут быть предварительно просеяны, если это необходимо.

1. В подходящий смеситель добавляют кобицистат на диоксиде кремния, микрокристаллическую целлюлозу (интрагранулярную часть) и натриевую соль кроскармеллозы и перемешивают эти вещества.

2. В подходящий смеситель, который содержит предварительную смесь, полученную на стадии 1, добавляют стеарат магния (интрагранулярную часть). Перемешивают эти вещества.

- 5 031172

3. На вальцах уплотняют предварительную смесь 2 со стадии 2. Измельчают уплотнённый материал для получения гранул.

4. Добавляют микрокристаллическую целлюлозу (экстрагранулярную часть) к гранулам со стадии 3 и перемешивают эту смесь в подходящем смесителе.

5. Добавляют стеарат магния (экстрагранулярную часть) к смеси, полученной на стадии 4, и перемешивают в подходящем смесителе. Помещают гранулят COBI в подходящий контейнер.

Изготовление таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием

Ниже следует описание способа изготовления таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием из гранулята ATV и гранулята COBI.

1. Осуществляют прессование гранулята ATV и гранулята COBI с получением таблеток. Полученные сердцевины таблеток помещают в контейнер для насыпных продуктов.

2. Готовят суспензию для нанесения покрытий путём смешения Opadry Pink (краситель для покрытий) с водой.

3. Наносят плёночное покрытие на сердцевины таблеток, полученных на стадии 1, используя суспензию для покрытий со стадии 2.

4. Упаковывают таблетки с плёночным покрытием в подходящие контейнеры.

Пример 2. Объём партии и состав

Объём партии и состав для получения таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием приведены в табл. 1 и 2 соответственно.

Таблица 1. Репрезентативный объём партии при получении таблеток

ATV/COBI с плёночным покрытием

Дозировка Объём партии (кг) Теоретич. количество таблеток

300 мг(в виде свободного основания)

Атазанавира сульфата/

150 мг кобицистата 140 133,333

Объём партии указан для таблеток без покрытия

Таблица 2. Репрезентативный состав при получении таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием

Компонент	Количество в партии
кг	% вес/вес
СЕРДЦЕВИНА ТАБЛЕТКИ Гранулят ATV Интрагранулярная часть
Атазанавира сульфат	45.56	56.95
Стеариновая кислота	2.24	2.80
Микрокристаллическая целлюлоза	5 32	6 65
Натрия крахмал гликолят	1.12	1.40
Кросповидон	1.12	1.40
Г идроксипропилцеллюлоза	1.12	1.40
Вода для инъекций	достаточное количество	н/о
Экстрагцануляоная часть
Микрокристаллическая целлюлоза	18.92	23.65
Натрия крахмал гликолят	2.40	3.00
Кросповидон	1.60	2.00
Стеарат магния	0.60	0.75
Объём партии гранулята ATV	80.00	100.00

- 6 031172

Таблица 2 (продолжение). Репрезентативный состав при получении таблеток ATV/COBI с плёночным покрытием

Компонент Количество в партии кг % вес/вес

Гранулят GOBI

Интрагранулярная часть

Кобицистат на диоксиде кремния	39.22	65.36
Микрокристаллическая целлюлоза	10.88	18.14
Натриевая соль кроскармеллозы	3.00	5.00
Стеарат магния	0.30	0.50

Экстрагранулярная часть

Микрокристаллическая целлюлоза 600

Стеарат магния 0.600

10.00

1.00

Объём партии гранулята COBI 60.00	100.00
Общий объём партии сердцевин таблеток) 140.00
СУСПЕНЗИЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОКРЫТИЯ Opadry 4.20 Вода для инъекций достаточное количество	3.00 Н/О
Общий объём партии таблеток (с плен покрытием) 144 20

Примечания: Количество атазанавира (как свободного основания) теоретически эквивалентно 87.8% соли атазанавира сульфата.

Приведённое количество эквивалентно 150 мг кобицистата (без диоксида кремния). Количество кобицистата на диоксиде кремния подбирается на основе фактора содержания лекарства (DCF) для кобицистата на диоксиде кремния с сопутствующим регулированием количества микрокристаллической целлюлозы.

Н/О = не определялось

Пример 3. Состав таблетки ATV/COBI с плёночным покрытием, содержащей 300 мг (на свободное основание) атазанавира сульфата/150 мг кобицистата приведён ниже в табл. 3.

Таблица 3. Состав таблетки ATV/COBI с плёночным покрытием

Компонент	Стандарт качества	Функция	Количество в таблетке
мг	% вес/вес
Слой атазанавира сульфата Атазанавира сульфат	Внутренний	Активное вещество	341.70	56 95
Стеариновая кислота	Европ фармакопея	Смазка	16.80	2.80
Микрокристаллическая	Европ.	Наполнитель	181.80	30 30
целлюлоза	фармакопея
Na крахмал гликолят	Европ. фармакопея	Дезинтегрант	26.40	4.40
Кросповидон	Европ фармакопея	Дезинтегрант	20.40	3.40
Гидроксипропилцеллюлоза	Европ фармакопея	Связующее	8.40	1.40
Стеарат магния	Европ. фармакопея	Смазка	4.50	0.75
Вода для инъекций	Фармакопея США	Жидкость для гранулирования	NA
Вес слоя атазанавира			600.00	100.00

Слой кобицистата

Кобицистат на диоксиде	294.12	65.36
кремния	Внутренний	Активное вещество
Микрокристаллическая	Европ.	Наполнитель	12663	28 14
целлюлоза	фармакопея
Na соль кроскармеллозы	Европ. фармакопея	Дезинтегрант	22.50	5.00
Стеарат магния	Европ фармакопея	Смазка	6.75	1.50
Вес слоя кобицистата			450,00	100.00

Таблица 3 (продолжение). Состав композиции для плёночного покрытия таблетки ATV/COBI

Компонент Стандарт качества Функция Количество в таблетке

- 7 031172

мг % вес/вес
Opadry Вода для инъекций	NC Фармакопея США	Агент для покрытия Для получения суспензии	31.5 - Н/О -
Общий вес таблетки (с	плёночным покрытием)	1081.50

Количество атазанавира (как свободного основания) теоретически эквивалентно 87.8% соли атазанавира сульфата. Это количество основано на теоретическом содержании как есть, равном 87.8%; 341.7 мг атазанавира эквивалентны 300 мг атазанавира. Можно регулировать содержание как оно есть с партии лекарственного средства, которая будет использована для изготовления лекарства.

Кобицистат представляет собой кобицистат с диоксидом кремния. Указанное количество эквивалентно 150 мг кобицистата (без диоксида кремния). Количество кобицистата на диоксиде кремния регулируется на основе фактора содержания лекарства (DCF) для кобицистата на диоксиде кремния с сопутствующим регулированием количества микрокристаллической целлюлозы.

(NC = ненормативный)

Примеры 3А/3В. Предлагаемые требования для таблетки с фиксированной дозой комбинации ATV/COBI с плёночным покрытием (FCT) приведены в табл. 3А.

Оценивались идентичность и качество таблеток ATV/COBI FCT в каждой партии, подтверждали их соответствие предлагаемым ниже в табл. 3А требованиям. Обозначения G и S после номеров аналитических методов представляют собой сокращения названий общий и специфический методы, соответственно.

Эти требования включают все показатели качества лекарственного продукта (внешний вид, метод анализа, однородность содержания, количество продуктов разложения/деградантов и растворимость), которые влияют на производство и качество лекарственного продукта. Микробная чистота также является требованием, предъявляемым к продукту.

Все методы были валидизированы, чтобы продемонстрировать, что они подходят для достижения поставленной цели мониторинга качества ATV/COBI FCT. Аналитические методы были валидизированы на специфичность, линейность, точность, тщательность и надёжность в соответствии с действующими инструкциями. Тесты на однородность лекарственной формы отражают требования общих гармонизированных статей фармакопеи.

Результаты анализов партий по определению исследуемой стабильности и стабильности в регистрационном досье (включая клинические испытания (исследования биоэквивалентности (BE study)) и промышленных партий ATV/COBI FCT приведены в табл. 3В. Эти парии считаются репрезентативными для предлагаемого промышленного способа.

Данные по анализу партий, приведённые в табл. 3В вместе с данными по стабильности были использованы для обоснования предложенных требований. Обоснование предлагаемых требований и вид аналитического метода приведены ниже.

- 8 031172

Таблица 3А. Предлагаемые требования к качеству ATV/COBI FCT

Тест Номер метода Критерий приемлемости (описание)

Описание Не применим Овальная, двояковыпуклая таблетка с розовым пленочным покрытием с гравировкой 3641 с одной стороны и плоской поверхностью с другой стороны

Идентификация HPLC	95015164 (S)	Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме образца соответствует величинам на стандартной хроматограмме
IR - ATR (метод Фурьеспектроскопия)	ИК- 95015471 (S)	Спектры образца соответствуют референсным спектрам

Однородность лекарственной формы
Атазанавир	95015164 (S)HPLC 356X(G)	Удовлетворяет гармонизированным нормативным требованиям
Кобицистат	95015164 (S) HPLC 356X(G)	(USP/EP/JP/C11P)

Колич. содержание (% от данных, заявленных на этикетке)

Атазанавир	95015164 (S)HPLC	90.0%- 110.0%
Кобицистат	95015164 (S) HPLC	90.0%- 110.0%

Продукты разложения/деград. 95015319 (S) HPLC

GS-9612

GS-465430

GS-9398

GS-445739

GS-9454

GS-344433

ВМТ-111068 & ВМТ-111069

ВМТ-115982

ВМТ-089290

Индивидуальный неопределённый деградант < 0.8 % <1.2% < 0.5 % <0.5% < 0.4 % <0.4% <1.5% < 0.2 % <0.2% < 0.2 %

Общее сод. продуктов разложения < 4.0 % кобицистата < 1.0 %

Общее сод. продуктов разложения атазанавира

Растворимость

Атазанавир Кобицистат	0311(G), 95015163 (S) 0311(G), 95015163 (S)	> 75(Q) через 30 мин >80(Q) через 15 мин
Микробиологическая	чистота
Общее количество	аэробных 5450A(G), 95015304(S)	< 1000 КОЕ/г
микроорганизмо в
Общее количество дрожжевого и 5450A(G). 95015304(S)	< 100 КОЕ/г
плесневого грибка
E.coli	5450A(G), 95015304(S)	В 1 г нет

- 9 031172

Таблица 3В. Информация об анализе партий ATV/COBIFCT

Тест Результаты ________________________________________________________________________(п~ 13)__________________

Внешний ВИД (описание) Овальная двояковыпуклая тайлетка с розовым плёночным покрытием с гравировкой BMS на одной стороне и 468 на другой стороне*.

Овальная двояковыпуклая таблетка с розовым плёночным покрытием с гравировкой 3641 на одной стороне и плоской поверхностью на другой стороне*¹

Идентификация HPLC	Результаты для всех партий “удовлетворяли требованиям’
Колич. содержание (% от данных, заявленных на
этикетке)
ATV	97.3-101.7
COBI	98.7-103.6
Однородность лекарственной формы
ATV
Однородность содержания	Удовлетворяет
Фактор приемлемости	1.8-86
% RSD (отн. станд. откл.)	1.0-3.6
COBI
Однородность содержания	Удовлетворяет
Фактор приемлемости	2,0-10.8
% RSD	0.8-3.8
Продукты разложения/деграданты (%)
GS-9612	<0.05-0.10
GS-465430	<0.05-0.11
GS-9398	<0.05
GS-445739	<0.05
GS-9454	<0.05-0 05
GS-344433	<0.05
ВМТ-111068 & В МТ-111069	<0.05-0.16
ВМТ-115982	<0.05
ВМТ-089290	<0.05
Индивид. Неопределённый продукт' (%)	<0.1

Общее содержание продуктов	<0.05
разложения/деградантов^ ATV (%)
Общее содержание продуктов	0.78-1.38
разложения/деградантов СОВ1^е (%)
Растворимость ATV (Среднее количество в % за 30	>84
мин)
COBI (среднее количество, % за 15 мин)	>96
Микробиологическая чистота
Общее количество аэробных микроорганизмов	NT - < 100
Общее колич дрожжевого и плесневого грибка	NT - < 100
E.coli	NT - отсутств.

Три величины определяемой стабильности, три величины регистрационной стабильности и семь промышленных партий. Предлагаемые требования были основаны на данных по стабильности, полученных для десяти испытуемых партий, данных по трём величинам регистрационной стабильности и данных для четырёх промышленных партий. Все партии удовлетворяли предложенным критериям приемлемости.

^а Внешний вид/описание партий с испытуемой и регистрационной стабильностью.

^b Внешний вид/описание промышленного продукта.

^с Любой индивидуальный неопределённый продукт разложения неизвестного происхождения указан по сравнению с пиком COBI.

^d Сумма продуктов разложения при получении ATV и продуктов разложения ATV; Продукты разложения, получаемые в процессе получения, не установлены, однако их содержание показано в графе Общее содержание продуктов разложения/деградантов ATV.

^е Сумма продуктов разложения, образующихся при получении COBI и продуктов разложения COBI; продукты разложения, получаемые в процессе получения, не установлены, однако, их содержание показано в графе Общее содержание продуктов разложения/деградантов ATV.

Характеристика продуктов разложения

В ATV/COBIFCT продукты разложения/деграданты не содержатся. GS-465430, GS-9612, GS445739, GS-9398, GS-344433, GS-9454 применяют для определения продуктов разложения кобицистата. ВМТ-111068, ВМТ-111069, ВМТ-115982 и ВМТ-089290 используют для определения дополнительных продуктов разложения, связанных с кобицистатом.

Обоснование требований

Обоснование предлагаемых требований (представленных в табл. 3А) опирается на следующее.

Всего для обоснования (подтверждения) предлагаемых требований к ATV/COBI FCT использовали 10 партий (серий), которые включают 3 партии (серии) для исследования стабильности (экспериментального) препарата, 3 регистрационных партии (партии, приготовленных для регистрации ЛС) для проверки стабильности (включая партию, используемую в исследовании биоэквивалентности, 2J73499) и 4 промышленных партии (партия # МТХХ, MTXY, MYVB и MYVC), полученных с использованием предлагаемого продажного препарата и с применением промышленного способа и упакованных в предлагаемую продажную упаковку (флакон HDPE (ПВД)). Результаты посерийного анализа представлены в табл. 3В.

Для подтверждения предлагаемых требований к ATV/COBI FCT использовали данные о стабильно

- 10 031172 сти в течение девяти месяцев трёх регистрационных партий препарата, данные о стабильности в течение 15 месяцев двух партий исследуемого (экспериментального) препарата и данные о стабильности в течение 12 месяцев одной партии исследуемого (экспериментального) препарата при 30°C/75%RH. Стабильность. Полученные данные показывают, что лекарственный препарат ATV/COBI FCT, упакованный в FIDPE флакон, устойчив при долговременном (5°С, 25°C/60%RH и 30°C/75%RH) хранении, а также в условиях ускоренного старения (40°C/75%RH), применявшихся в данном исследовании.

В процессе приготовления лекарственного препарата было неожиданно обнаружено, что двухслойный препарат очень хорош с точки зрения стабильности, возможности производства (технологичности) и предполагаемой простоты применения (введения). Сам способ приготовления не был ни очевидным, ни простым. Он явился результатом значительных совместных усилий.

Первая попытка включала приготовление монолитной (однослойной) таблетки, причём как активные вещества, так и эксципиенты были равномерно распределены по всей таблетке (за исключением покрытия таблетки). Схематически это показано На фиг. 1. Данная разработка представляла собой очень трудную проблему. Атазанавира сульфат имеет кислую реакцию, тогда как кобицистат чувствителен к кислотному расщеплению. Однако степень влияния атазанавира сульфата на кобицистат в матрице монолитного препарата с эксципиентами была неизвестна. Несмотря на это, мы ни секунды не сомневались, что два API (активных фармацевтических ингредиента), атазанавир и кобицистат, совместно с микрокристаллической целлюлозой и другими перечисленными эксципиентами можно приготовить в виде стабильной монолитной таблетки.

Было протестировано несколько монолитных смесей, в значительной степени эквивалентных, все они содержали требуемое соотношение доз активного соединения атазанавира к кобицистату, примерно 300 мг/150 мг. Однако оказалось, что в готовых препаратах в виде монолитных таблеток стабильность кобицистата была значительно хуже, чем ожидалось, несмотря на присутствие эксципиентов. Как показано на графике На фиг. 2, при измерении общего процентного содержания продуктов разложения кобицистата в зависимости от времени было обнаружено, что общее содержание продуктов разложения кобицистата в % достигало примерно 3.50% через 8 недель в закрытых флаконах при 40°С/75% относительной влажности. Это значение было расценено как неприемлемое, так как оно более чем в 2-3 раза превышала уровень в таблетке с кобицистатом в качестве единственного агента (также показан На фиг. 2), использовавшейся в качестве эталона. Большой угол наклона восходящей кривой примесей На фиг. 2 показывает, что неблагоприятным также является сам тренд, если представить, что произойдёт при хранении препарата при нормальной комнатной температуре. Этот результат показал, что монолитные таблетки не следует применять в качестве готового препарата. (Продукты разложения кобицистата количественно определяли как пики примесей/продуктов разложения выше порогового уровня 0.05%, либо определяли как примеси или продукты разложения кобицистата по сравнению со стандартным образцом, или любые другие пики (неизвестные), не идентифицированные как пики примесей в атазанавире. Например, На фиг. 3 показано, как из кобицистата образуются стандартные продукты разложения.)

Таким образом, оставалась проблема, как приготовить лекарственную форму с приемлемой стабильностью кобицистата. Также было высказано предложение разделить два слоя лекарств посредством введения третьего слоя между двумя соответствующими слоями активных соединений. Схематически это показано На фиг. 4. Итак, был разработан трёхслойный препарат, в котором примерно 250 мг инертного материала эксципиента помещали в качестве среднего или второго слоя между слоями композиции атазанавира сульфата (600 мг) и композиции кобицистата (на SiO₂) (450 мг). Были проверены различные композиции среднего слоя, такие как композиции на основе пластифицированной микрокристаллической целлюлозы (МСС) и МСС с силикагелем SYLOID® в количествах вплоть до 20 вес.% соответственно (масса силикагеля относительно массы среднего слоя). Другая композиция среднего слоя была приготовлена из смеси примерно равных частей пластифицированной микрокристаллической целлюлозы и лактозы моногидрата. Также в состав входило небольшое количество (около 0.5-1 вес.%) магния стеарата для смазывания композиций среднего слоя. В основном инертный слой служит для разделения и, вследствие этого, значительного уменьшения или исключения взаимодействий между двумя основными соединениями.

Затем готовили таблетки, используя стандартное оборудование и применяя стандартные методы изготовления трёхслойных таблеток. Как можно видеть На фиг. 2, в трёхслойных таблетках наблюдается значительно более высокая стабильность кобицистата и значительно пониженный спектр продуктов разложения (профиль разложения), поскольку после 8 недель хранения в закрытых флаконах при 40°С/75% относительной влажности образуется только около 2% продуктов разложения (примесей) кобицистата. Это вполне сравнимо с показателями для таблетки кобицистата с одним агентом и значительно лучше показателей для монолитных таблеток из комбинации фиксированных доз атазанавира/кобицистата, в которых уровни продуктов разложения (примесей) кобицистата после 8-недельного хранения составлял примерно 3.50%.

Однако в случае трёхслойных таблеток возникла неожиданная проблема. Несмотря на то, что применяли общепринятый метод и протокол, в инертном слое между слоем атазанавира и средним инертным

- 11 031172 слоем часто наблюдались трещины. Обычно эти трещины обнаруживались при выгрузке из таблеточного пресса. Трещины часто были видны непосредственно невооружённым глазом. Однако проблемой являлось то, что появление трещин, так же как их размер и общее число трещин в таблетке, было совершенно непредсказуемо при переходе от одной партии (серии) трёхслойных таблеток к другой.

Затем применяли оборудование с большей площадью поверхности, и этот метод обычно давал трёхслойные таблетки без трещин при тех же усилиях прессования, что объясняется, по-видимому, большей площадью и/или меньшей глубиной лунки. Но это создавало дополнительную проблему. Таблетки с большей площадью поверхности были шире, и поэтому возникала проблема, что это вызовет больший риск при проглатывании, несмотря на то, что общий вес трёхслойной таблетки был таким же. Многие пациенты, которые принимают лекарственные препараты против ВИЧ, не только обладают пониженным иммунитетом, но также могут быть физически слабыми и обессиленными. Кроме того, предполагается, что это лечение является продолжительным (вплоть до нескольких лет). Может потребоваться слишком много усилий, и, при этом слишком велик риск, чтобы эти пациенты попытались проглотить эти трёхслойные таблетки с более широкой поверхностью. Если пациенты не будут соблюдать режим лечения, тогда лечение не будет отвечать своему назначению.

Поэтому после попыток приготовить подходящую трёхслойную композицию мы пришли к заключению, что различные способы не дали приемлемую лекарственную форму.

Наконец, неожиданно было обнаружено, что двухслойные таблетки, приготовленные в соответствии с методами, представленными выше как методы по изобретению, оказались высокоэффективными, и цель была достигнута в настоящем изобретении. Двухслойная таблетка (вариант без покрытия) схематично представлена На фиг. 5. Даже несмотря на то, что на поверхности раздела слоев в таблетке между двумя химически несовместимыми соединениями, атазанавира сульфатом и кобицистатом, имелся контакт, результаты показали, что профиль разложения был очень похож на профиль разложения трёхслойных таблеток. Как показано На фиг. 2, профиль разложения двухслойной композиции очень близок к профилю разложения трёхслойной композиции через 8 недель. Профиль разложения для двухслойной таблетки также значительно лучше, чем профиль разложения монолитной таблетки атазанавира/кобицистата и сравним с профилем таблетки кобицистата в качестве единственного агента. Это также показывает, что внутри матрицы определённой композиции с выбранными эксципиентами атазанавир и кобицистат были вполне совместимы. Также важно, что отсутствовали трещины, которые наблюдались в двухслойных таблетках, в отличие от трёхслойных таблеток. Точно так же важно, как это подробнее показано ниже, в Примере 4, что эта двухслойная композиция обеспечивала биоэквивалентное действие атазанавира и кобицистата по сравнению с применяемыми в качестве монотерапевтического средства капсулой атазанавира и таблеткой кобицистата. Итак, двухслойная таблетка неожиданно оказалась формой, которая является наиболее перспективной и подходящей для разработки по настоящему изобретению. Как показано также на фиг. 6, таблетки по изобретению были высокоустойчивы при долговременном хранении, общее содержание продуктов разложения кобицистата после 12-месячного хранения, определённое при различной температуре и различной относительной влажности, составляло менее примерно 2% (и ниже), как показано на графике.

Пример 4. Исследование биоэквивалентности комбинации фиксированных доз атазанавира/кобицистата

Исследование проводили с целью продемонстрировать биоэквивалентность ATV в FDC ATV/COBI (300/150 мг) по сравнению с капсулой 300 мг ATV, принимаемой совместно с таблеткой 150 мг COBI, при приёме (введении) вместе с лёгкой пищей.

Исследование проводили как открытое, однодозовое, 5-периодное, 5-последовательное, рандомизированное перекрёстное исследование на здоровых людях (ABCDE, ABDCE, BACDE, BADCE, ABCD, ABDC, BACD или BADC). В течение 21 дня перед рандомизацией этих людей (субъектов) подвергали скрининговой проверке на соответствие критериям отбора. Участники эксперимента поступали в клиническое учреждение за 1 день до приёма дозы в 1 День. Участники получали капсулу ATV 300 мг, вводимую совместно с таблеткой COBI 150 мг, или FDC таблетку ATV/COBI (300/150 мг) после приёма лёгкой пищи (Вариант (препарат/вид пищи или её отсутствие) А или В соответственно) на 1 День и на 8 День, согласно предписанной последовательности вариантов. На 15 День и на 22 День участники исследования получали капсулу ATV 300 мг, вводимую совместно с таблеткой COBI 150 мг, или FDC таблетку ATV/COBI (300/150 мг) натощак (Вариант С или D соответственно), согласно предписанной последовательности вариантов. На 29 День некоторые участники, согласно предписанной последовательности, получали FDC таблетку ATV/COBI (300/150 мг) после приёма жирной (калорийной) пищи (Вариант Е). Между каждыми вариантами был 7 -дневный период вымывания препарата.

Пробы крови для фармакокинетического (PK) анализа отбирали в запланированное время в ходе всего исследования. Безопасность препарата проверяли на участниках исследования с помощью физикального обследования (PEs), электрокардиограммы (ECGs), измерения физических параметров, показателей жизненно важных функций, клинических лабораторных исследований и сообщений о побочных явлениях (АЕ), и некоторых участников, согласно предписанной последовательности, выводили из исследования в конце Периода 4 (на 24 День), а остальные продолжали участвовать до Периода 5 и иссле

- 12 031172 довании прекращали в конце Периода 5 (на 31 День). Участники оставались в отделении клинической фармакологии (CPU) с 1 Дня до момента выхода (исключения) из исследования.

Дизайн исследования схематически представлен ниже.

Схема дизайна исследования

Дни с-21 до -1	Период 1 и Период 2“	Вымы ванне ДО Дня 14	Периоды 3 и 4”	Вымы ванне ДО Дня 28	Период 5^е
День 1	Вымы ванне ДО Дня 7	День 8	День 15	Вымы ванне до Дня 21	День 22	День 29	День 31
S& E^d	Вариант А или В	Вариант В или А	Вариант CorD	Вариант D или С	Вариант Е	Прекращение экспери мента

^а Субъектов рандомизировали перед Днём 1 приёма (введения) дозы препарата ^b Субъектов исключали в конце Периода 4 (День 24) на основании предписанной последовательности вариантов ^с Субъектов исключали в конце Периода 5 (День 31) на основании предписанной последовательности вариантов ^d Скрининг и включение в исследование

Вариант (препарат/вид пищи или её отсутствие) А: Атазанавир 300 мг (Капсула) + 150 мг Кобицистат (Таблетка), принимаемые (вводимые) совместно после лёгкой пищи

Вариант В: Атазанавир 300 мг/150 мг Кобицистат - FDC (Таблетка), принимаемые (вводимые) после приёма лёгкой пищи

Вариант С: Атазанавир 300 мг (Капсула) + 150 мг Кобицистат (Таблетка), принимаемые (вводимые) совместно натощак

Вариант D: Атазанавир 300 мг/150 мг Кобицистат - FDC (Таблетка), принимаемые (вводимые) натощак

Вариант Е: Атазанавир 300 мг/150 мг Кобицистат - FDC (Таблетка), принимаемые (вводимые) после приёма жирной (калорийной) пищи

В данном исследовании атазанавир, капсулу 300 мг, (Вариант А и С) вводили в виде реатаза (Reyataz, атазанавира сульфата), полученного от Bristol-Myers Squibb Company, Princeton, NJ, а кобицистат, таблетку 150 мг, (Вариант А и С) вводили в виде кобицистата на диоксиде кремния, полученного от компании Gilead Sciences, Foster City, CA. Таблетки FDC (Варианты В, D и Е), готовили, как описано выше, в Примерах 1-3.

В этой Фазе III клинического испытания сравнивали эффективность и безопасность препарата ATV 300 мг + COBI 150 мг по отношению к препарату ATV 300 мг + RTV (ритонавир) 100 мг (подавление виремии 85% против 87% соответственно). Оценивали биоэквивалентность ATV и относительную биодоступность COBI в FDC по сравнению с ATV и COBI, вводимыми индивидуально после лёгкой пищи.

В этом рандомизированном, открытом перекрёстном исследовании, проводимом на 64 здоровых субъектах, определяли профиль кривой зависимости концентрации ATV и COBI в плазме в течение 48 ч после однократного приёма FDC ATV 300 мг/COBI 150 мг или ATV 300 мг и COBI 150 мг в виде индивидуальных агентов. Препараты вводили после лёгкой пищи с последующим 7-дневным периодом вымывания (препарата) перед каждым периодом. Определяли следующие фармакокинетические (PK) параметры: C_max, максимальную концентрацию в плазме (плазматическую концентрацию); AUC(INF), площадь под кривой зависимости концентрация-время до бесконечности; и AUC(0-T), площадь под кривой от нуля до последней временной точки с концентрацией, поддающейся измерению. Биоэквивалентность для ATV устанавливали, если 90%-ные доверительные интервалы (CIs) для отношения средних геометрических (GMRs) FDC к индивидуальным препаратам попадали в заданные предельные значения 0.801.25 для всех PK параметров. Типичная лёгкая пища и тяжёлая пища представлены ниже, в табл. 4а и 4b.

- 13 031172

Таблица 4а. Типичная лёгкая пища

Пищевой продукт	Калории (ккал) Жир (г)	Углеводы (г)	Белок (г)
2 ломтика белого хлеба	129	1.8	24.0	4.0
1 чайная ложка низкокалорийного майонеза	24	2.8	следы	следы
1 столовая ложка джема	56	следы	13.8	следы
5 унций (150 мл) яблочного сока	73	0.2	18.1	0.1
5 унций (150 мл) снятого (обезжиренного) молока	54	0.3	7.4	5.2
Общее количество грамм (г)	--	5.1	63.3	9.3
Общее количество калорий (ккал)	336	46	253	37
% от общего количества калорий	100	14	75	11

Источник: US Department of Agriculture Nutrient Database for Standard Reference, Release 25 (2012)

Таблица 4b. Типичная жирная и калорийная пища

Пищевой продукт	Калории (ккал)	“Жир	Углеводы (г)	^аБелок (г)
Яичница из 2 яиц	180	14.1	0.8	125
2 ломтика поджаренного белого хлеба	129	1.8	240	4.0
1 столовая ложка масла	102	11.5	Следы	0.1
1 столовая ложка джема	56	Следы	13.8	Следы
3 полоски жареного бекона	126	9.6	0.4	9.1
4 унции хэша картофельного	299	14.1	39.7	3.4
8 жидких унций (237 мл) цельного молока	146	7.9	11.0	7.9
Всего (г)	-	59.0	89.7	37.0
Общее количество калорий (ккал)	1038	531	359	148
% от общего количества калорий	100	51	35	14

^а Источник: US Department of Agriculture Nutrient Database for Standard Reference, Release 25 (2012).

Варианты приёма препаратов/пищи представлены ниже, в табл. 5.

Таблица 5. Варианты приёма препаратов/пищи

Варианты приема	Общая суточная доза	Дозировка капсулы/таблетки	Число капсул/таблеток
	капсула 300 мг ATV	300 мг	1 капсула
А и С	таблетка 150 мг кобицистата	150 мг	1 таблетка
В, D и Е	таблетка 300 мг АТУ/150мг кобицистата	300 мг/150 мг	1 таблетка

Фармакокинетику ATV и COBI получали из данных зависимости концентрации в плазме от времени. Определяемые фармакокинетические параметры включали

Стах	Максимальная полученная концентрация в плазме
Ттах	Время достижения максимальной концентрации в плазме
AUC(O-T)	Площадь под кривой концентрация в плазме - время” от момента ноль до последней поддающейся количественному определению концентрации
AUC(INF)	Площадь под кривой “концентрация в плазме - время” от момента ноль, экстраполированной до бесконечности
С24	Концентрация, полученная через 24 часа после приема дозы (только для ATV)
T-HALF	Кажущийся конечный период полувыведения

Значения отдельных фармакокинетических параметров субъекта получали некомпартментными методами с применением программы валидированного фармакокинетического анализа. В анализах использовали фактическое время.

В табл. 6 приводится порядок отбора проб с последующим определением фармакокинетики.

- 14 031172

Таблица 6. Порядок отбора фармакокинетических образцов

День исследования	Время (Событие) Час	Время (Относительно дозирования) Час: Мин	РК Проба крови на ATV	РК Проба крови на COBI
Таблица 6: 1 О к то .. то	0 (перед дозой)	00:00	X	X
1	01:00	X	X
2	02:00	X	X
2.5	02:30	X	X
Поряд	ок отбора фармак ЛЛ-АА	окинетических	образцов:
День исследования	Время (Событие) Час	Время (Относительно дозирования) Час: Мин	РК Проба крови на ATV	РК Проба крови на COBI
2, 9, 16, 23, и 30	24	24:00	X	X
30	30:00	X
36	36:00	X
3, 10, 17, 24 и 31	48	48:00	X

Образцы плазмы анализировали на ATV и COBI с помощью валидированных LC-MS/MS анализов, подробности которых известны специалистам в данной области техники.

Для демонстрации биоэквивалентности для ATV между испытуемой (Вариант В) и эталонной композициями (Вариант А) линейную модель со смешанными эффектами применяли к натуральным логарифмам ATV C_max, AUC(0-T) и AUC(INF) с вариантом (препарат/вид (отсутствие) пищи), периодом и последовательностью в качестве фиксированных эффектов, а субъекта (последовательность) в качестве случайного эффекта. Точечные оценки и 90%-ные доверительные интервалы для разностей на логарифмической (log) шкале потенцировали, чтобы получить величины отношений средних геометрических в исходной шкале. Решение о биоэквивалентности принимали, если 90%-ные доверительные интервалы для отношений средних геометрических испытуемого препарата (FDC таблетки 300/150 мг ATV/COBI) к эталонному препарату (капсуле 300 мг ATV, принимаемой совместно со 150 мг COBI) находились в пределах от 0.80 до 1.25 для ATV Cmax, AUC(0-T) и AUC(INF).

Аналогичную линейную модель со смешанными эффектами применяли для оценки относительной биодоступности ATV при приёме натощак (Вариант D против Варианта С). Точечные оценки и 90%-ные доверительные интервалы для отношений средних геометрических получали с применением линейной модели со смешанными эффектами для C_max, AUC(0-T) и AUC(INF).

Также для оценки влияния жирной (калорийной) пищи и лёгкой пищи на экспозицию (площадь под AUC) ATV при приёме в виде FDC применяли упрощённую линейную модель смешанных эффектов с вариантом в качестве фиксированных эффектов и субъектом в качестве случайного эффекта. Отдельные модели применяли для сравнения экспозиции при приёме FDC с жирной (калорийной) пищей с экспозицией при приёме FDC натощак (Вариант Е против Варианта D), экспозиции в случае жирной пищи с экспозицией в случае лёгкой пищи (Вариант Е против Варианта В) и экспозиции в случае лёгкой пищи с экспозицией натощак (Вариант В против Варианта D).

Аналогично линейную модель со смешанными эффектами применяли к натуральным логарифмам COBI C_max, AUC(0-T) и AUC(INF) для сравнения Варианта В с Вариантом А и для сравнения Варианта D с Вариантом С. Точечные оценки и 90%-ные доверительные интервалы для отношений средних геометрических были получены для C_max, AUC(0-T) и AUC(INF). Влияние жирной (калорийной) пищи и лёгкой пищи на экспозицию (площадь под AUC) COBI оценивали способом, аналогичным способу, описанному выше для экспозиции ATV.

Результаты исследования показали, что GMR 90% CIs для всех PK параметров ATV находились в заданных пределах, что указывает на биоэквивалентность FDC вводимым совместно отдельным препаратам ATV 300 мг и COBI 150 мг (табл. 7, см. ниже). Хотя это предварительно не указывалось (не устанавливалось), COBI в FDC также отвечал критериям биоэквивалентности совместно принимаемым индивидуальным агентам. У пяти участников исследования, получавших препарат/вид (отсутствие) пищи согласно протоколу, наблюдалось повышение уровня общего билирубина (1.2-2.1 х ULN (верхняя граница нормы)), этот показатель улучшался или корректировался при исключении из исследования.

Однократная доза ATV 300 мг и COBI 150 мг была безопасна и хорошо переносилась при приёме либо в виде FDC, либо в виде отдельных веществ.

- 15 031172

Таблица 7

Фармакокинетические параметры	Скорректированное среднее геометрическое*	GMR (90% CI)* [В vs. А1
ATV + COBI (Вариант А)	ATV/COBIFDC (Вариант В)
ATV,n	63^т	62^
Стах (НГ/МЛ) (нанограммы на миллилитр)	3822	4101	1.073 (1.012, 1.137)
AUC(INF) (нг.час/мл) (нанограммы.час на миллилитр)	33475	35623	1.064(1.011, 1.120)
AUC(O-T) (нг час/мл)	32723	34848	1.065 (1.012, 1.120)
COBI, η	63^т	62^
Стах (НГ/МЛ)	1320	1351	1.023 (0.991, 1.057)
AUC(INF) (нг час/мл)	9053	9225	1.019(0.982, 1.058)
AUC(O-T) (нг час/мл)	8745	8912	1.019(0.983, 1.057)
*С использованием	линейной модели	смешанных эффектов с помощью
натуральных логарифмов ATV или COBI в качестве отклика и	вариантов, периода и

последовательности в качестве фиксированных эффектов и субъекта (последовательности) в качестве случайного эффекта. Точечные оценки и 90%- ные доверительные интервалы (CI) для разностей в логарифмической (log) шкале потенцировали, чтобы получить величины отношений средних геометрических (GMR) в исходной шкале. Решение о биоэквивалентности принимали, если GMR 90% Cis В vs. А находились в пределах от 0.80 до 1.25 для РК параметров. ЧЭдин участник был исключён ввиду ошибочного приёма обоих вариантов препаратов/пищи, А и В. Юдин участник был исключён, так как у него началась рвота вскоре после приёма препарата/пищи по варианту В._______________________

Итак, в одном аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации атазанавира в крови, по определению с помощью AUC(INF) (площадь под кривой концентрация-время), от примерно 80 до 125% от 35623 нг-ч/мл. В другом аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации атазанавира в крови, по определению с помощью AUC(0-T), от примерно 80 до 125% от 34848 нг-ч/мл. В другом аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации атазанавира в крови, по определению с использованием C_max, от примерно 80 до 125% от 4101 нг/мл.

В одном аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации кобицистата в крови, по определению с помощью AUC(INF) (площадь под кривой концентрация-время), от примерно 80% до 125% от 9225 нг-ч/мл. В другом аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации кобицистата в крови, по определению с помощью AUC(0-T), от примерно 80% до 125% от 8912 нг-ч/мл. В другом аспекте изобретения предусматривается таблетированная композиция, содержащая атазанавира сульфат, кобицистат и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанная композиция обеспечивает профиль концентрации кобицистата в крови, по определению с использованием Cmax, от примерно 80 до 125% от 1351 нг/мл.

В одном аспекте изобретения предусматриваются способы лечения ВИЧ (Н1У)-инфекции у пациента, который включает введение указанному пациенту композиции, имеющей описанные выше профили концентрации препаратов в крови.

Вышеприведённое описание является лишь иллюстративным, и следует понимать, что оно никоим образом не ограничивает объём или основные принципы изобретения. На самом деле различные модификации изобретения, помимо модификаций, показанных и описанных в настоящей заявке, станут очевидными специалистам в данной области техники из вышеприведённых примеров и вышеприведённого описания. Предполагается, что такие модификации также входят в объём прилагаемой Формулы изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Двухслойная таблетка для лечения ВИЧ-инфекции, представляющая собой:

а) первый слой, содержащий композицию атазанавира и эксципиента, и

- 16 031172

b) второй слой, содержащий композицию кобицистата на диоксиде кремния и эксципиента.
2. Таблетка по п.1, в которой указанный атазанавир находится в виде атазанавира сульфата.
3. Таблетка по п.2, где указанная таблетка не является трёхслойной таблеткой, содержащей слой инертного эксципиента в виде среднего слоя.
4. Таблетка по п.1, в которой указанная двухслойная таблетка доставляет примерно 300 мг свободного основания атазанавира в виде атазанавира сульфата и примерно 150 мг кобицистата.
5. Таблетка по п.1, дополнительно содержащая по меньшей мере один эксципиент, выбранный из группы, включающей стеариновую кислоту, магния стеарат, микрокристаллическую целлюлозу, натрия крахмал гликолят, кросповидон, гидроксипропилцеллюлозу и натрия кроскармеллозу.
6. Таблетка по п.1, в которой указанный атазанавир и указанный кобицистат совместно составляют примерно 35-85% (вес./вес.) указанной композиции.
7. Способ приготовления таблетки по п.1, который включает:

a) раздельное смешение атазанавира с одним или более эксципиентами, при этом по меньшей мере один из указанных эксципиентов представляет собой микрокристаллическую целлюлозу и указанный атазанавир сначала смешивают с первой порцией указанных одного или более эксципиентов, получая первую смесь атазанавира, а затем указанную первую смесь увлажняют водой, подвергают влажной грануляции, затем осуществляют мокрое измельчение, сушат и сортируют по размеру, а потом вторую порцию указанных эксципиентов смешивают с указанной высушенной первой смесью, получая вторую смесь атазанавира;

b) раздельное смешение кобицистата на диоксиде кремния с одним или более эксципиентами, при этом по меньшей мере один из указанных эксципиентов представляет собой микрокристаллическую целлюлозу и указанный кобицистат сначала смешивают с первой порцией указанных одного или более эксципиентов, получая первую смесь кобицистата, а затем указанную первую смесь вальцуют и измельчают в гранулы, а потом вторую порцию указанных эксципиентов смешивают с указанной гранулированной первой смесью, получая вторую смесь кобицистата; и

c) прессование указанной второй смеси атазанавира и указанной второй смеси кобицистата в виде двухслойной таблетки.
8. Способ по п.7, в котором на стадии а) указанная первая порция указанных эксципиентов представляет собой интрагранулярные эксципиенты, а указанная вторая порция указанных эксципиентов представляет собой экстрагранулярные эксципиенты; а также на стадии b) указанная первая порция указанных эксципиентов представляет собой интрагранулярные эксципиенты, а указанная вторая порция указанных эксципиентов представляет собой экстрагранулярные эксципиенты.

Монолитная таблетка для сравнения (Однослойная)

X = Кобицистат

О ⁼ Атазанавира сульфат