EA030385B1 - Применение комбинации, содержащей баклофен и акампросат или торасемид, для улучшения памяти - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к применению комбинации баклофена и акампросата или торасемида или их солей или производных, обладающих по меньшей мере частью активности родительского лекарственного средства и индексом сходства Танимото больше чем 0,4 с родительским лекарственным средством, или их составов с замедленным высвобождением для улучшения памяти и/или результативности связанных с памятью ментальных функций у здорового субъекта, не испытывающего состояния, которое поражает его память и/или связанные с памятью ментальные функции.

Description

Изобретение относится к применению комбинации баклофена и акампросата или торасемида или их солей или производных, обладающих по меньшей мере частью активности родительского лекарственного средства и индексом сходства Танимото больше чем 0,4 с родительским лекарственным средством, или их составов с замедленным высвобождением для улучшения памяти и/или результативности связанных с памятью ментальных функций у здорового субъекта, не испытывающего состояния, которое поражает его память и/или связанные с памятью ментальные функции.

030385

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к ноотропным композициям и к их применению, например, для стимуляции познавательной способности. Более конкретно, в изобретении предлагаются новые композиции, содержащие по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, применяемых для улучшения памяти и умственных функций, таких как алертность, внимание, способность логически мыслить, концентрация, обучаемость или обработка языковой информации, у субъекта, которому это необходимо.

Предшествующий уровень техники

В быстро развивающемся обществе с постоянно увеличивающимся воздействием насыщающей информации и требованиями к умственной деятельности у здоровых людей растет спрос на лекарственные средства, способные поддерживать умственные функции, такие как память, познавательная способность, ум, мотивация, алертность и концентрация. Такие лекарственные средства, называемые ноотропными средствами, лекарственными средствами, стимулирующими умственные способности, усилителями памяти, усилителями когнитивных функций и усилителями умственной способности, состоят из лекарственных средств, добавок, нутрицевтиков и функционального питания [1]. Основные свойства ноотропных средств представляют собой улучшение обучаемости и обретение памяти, а также устойчивость навыков к агентам, которые имеют тенденцию оказывать на них влияние, а также защита мозга против различных физических или химических повреждений и, наконец, облегчение межполушарного потока информации и эффективный тонизирующий корковый/подкорковый механизм [2]. Также ожидается отсутствие обычных отрицательных фармакологических эффектов психотропных лекарственных средств, так как эти агенты специально разработаны среди прочего для здоровых молодых и возрастных пациентов. Эти лекарственные средства, которые улучшают результативность когнитивных задач у здоровых индивидуумов, как правило, разрабатываются для лечения когнитивной неспособности и для улучшения качества жизни пациентов, страдающих нейропсихиатрическими расстройствами и имеющих повреждение мозга [3].

Сталкиваясь с общественным давлением, все больше и больше людей вынуждены применять лекарственные средства, которые обычно прописываются для лечения инвалидизирующих заболеваний, с единственной целью повысить свой рабочий и эффективный потенциал, не обращая внимания на потенциальные побочные эффекты или зависимость, провоцируемые неправильным применением таких лекарственных средств. Растущий рыночный спрос таких лекарственных средств или добавок делает некоторые лекарственные средства или пищевые добавки доступными потребителю, без рецепта, без какоголибо влияния на память или на связанные с ней умственные функции, которые формально были научно представлены.

Точные механизмы действия ноотропных средств неизвестны. Обширные исследования выявили различные фармакологические эффекты. Предполагается, что они действуют путем изменения доступности снабжения мозга нейрохимическими соединениями, такими как нейромедиаторы, ферменты и гормоны, путем улучшения снабжения мозга кислородом или путем стимуляции роста нервов.

Ноотропные средства принадлежат к множеству различных классов, которые представляют собой следующие: традиционные травы, витамины и добавки, рекреационные препараты, рацетамы, стимуляторы, допаминергические препараты, препараты концентрации и улучшения памяти (холинергические препараты, ОЛБЛ-блокаторы, активаторы глутамата, ингибиторы фосфодиэстеразы, агонисты альфа-2А адренергического рецептора), серотонергические препараты, антидепрессанты, адоптогенные (антистрессовые) препараты и агенты стабилизации настроения, вазодилататоры, улучшающие кровоток и метаболические функции, агонисты гистаминов (экспериментальные), антиоксиданты и нейропротекторы, гормоны и вторичные энхансеры.

Пирацетам, который принадлежит к категории рацетамов, представляет собой первый ноотропный агент, открытый и лицензированный во многих странах как средства от миоклонуса, инсульта и умеренных когнитивных нарушений. Пирацетам представляет собой самое токсикологически безопасное средство из когда-либо разработанных. В качестве примера было опубликовано, что двухнедельный график приема пирацетама улучшал вербальную память у здоровых студентов [4]. Также была продемонстрирована терапевтическая польза для пациентов с шизофренией при объединении с типичными нейролептиками [5]. Другие лекарственные средства среди прочего демонстрировали улучшение когнитивных функций, такие как ά-циклосерин при тревожных расстройствах [6], левитирацетам при эпилепсии [7, 8] и абстинентном алкогольном синдроме [9] и донепезил при умственной отсталости [10]. Но большинство из этих лекарственных средств не лишены вредных побочных эффектов.

Известно, что баклофен, агонист ОАВА_в рецептора, индуцирует антероградную амнезию у грызунов [11]. Совсем недавно были опубликованы данные о периодических приступах амнезии у женщин, подвергнутых интратекальной инстилляции баклофена в рамках лечения дистонии [12]. Аналогично, клиническое исследование эффектов акампосата на субъектах в виде здоровых молодых людей продемонстрировало, что акампосат нарушает свободное воспроизведение, что поддерживает гипотезу о том, что акампосат нарушает функции памяти [13].

- 1 030385

В данном документе показано, что авторы изобретения обнаружили комбинации конкретных лекарственных средств, которые эффективны для стимуляции когнитивной функции ίη νίνο, в частности у здоровых субъектов, и которые представляют собой новые улучшенные безопасные и эффективные ноотропные агенты.

Сущность изобретения

Цель изобретения заключается в применении комбинации (ί) баклофена и (и) акапросата или торасемида, или их солей или производных, обладающих по меньшей мере частью активности родительского лекарственного средства и индексом сходства Танимото больше чем 0,4 с родительским лекарственным средством, или их составов с замедленным высвобождением для улучшения памяти и/или результативности связанных с памятью ментальных функций у здорового субъекта, не испытывающего состояния, которое поражает его память и/или связанные с памятью ментальные функции.

Предпочтительно указанный субъект не страдает от и не обладает известными признаками заболевания, выбранного из слабоумия, сенильного слабоумия, возрастного нарушения памяти, болезни Альцгеймера, болезни диффузных телец Леви или умеренных когнитивных нарушений. Причем связанные с памятью ментальные функции выбирают из обучаемости, способности логически мыслить, алертности, внимания, концентрации, обработки языковой информации и/или способности справляться с социальнопрофессиональной нагрузкой, а память представляет собой кратковременную память и/или долговременную память.

Другая цель изобретения заключается в применении указанной комбинации, которая дополнительно содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из метимазола, прилокаина, дифиллина, хинакрина, карбеноксолона, аминокапроновой кислоты, каберголина, диэтилкарбамазина, цинакальцета, циннаризина, эплеренона, фенолдопама, лефлуномида, левосимендана, сулодексида, тербинафина, зонисамида, этомидата, фенформина, триметазидина, мексилетина, ифенпродила, моксифлоксацина, бромокриптина или торасемида.

Предпочтительно комбинация дополнительно содержит рацетам, выбранный из леветирацетама, пирацетама, прамирацетама, анирацетама или оксирацетама.

Композиции по изобретению могут быть составлены с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем, а соединения, используемые в комбинациях таким образом, чтобы их можно было ввести вместе, отдельно или последовательно. Предпочтительно соединения составлены для повторного введения субъекту.

Предпочтительно комбинация применяется субъекту, которому требуется временное стимулирование результативности памяти, обучаемости или алертности или субъект демонстрирует временную потерю памяти, вызванную гормональными изменениями.

Изобретение может использоваться для любого субъекта-млекопитающего, предпочтительно для человека.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1: Комбинации баклофена и акампосата эффективны для значительного улучшения характеристик обучаемости и кратковременной памяти (в задаче на чередование в Т-образном лабиринте) мышей, какую бы концентрацию не тестировали (см. табл. 1) и независимо от продолжительности обработки (от 7 дней (темно-серые столбцы) или 2 ч (светло-серые столбцы) перед тестом); черный столбец: животным вводили носитель; * : значительное отличие от носителя, ΑΝΟνΑ и критерий Даннета.

Фиг. 2: Баклофен и акампосат, при объединении и введении один раз за 2 ч до теста, действуют синергически на улучшение характеристик обучаемости и кратковременной памяти (в задаче на чередование в Т-образном лабиринте). Значительный положительный эффект комбинаций баклофена (ВСЬ) и акампосата (АСР) наблюдается для очень низких доз (темно-серые столбцы), тогда как при таких концентрациях не наблюдают никакого значительного улучшения для любой из молекул при их индивидуальном использовании (заштрихованные столбцы). (*: значительное отличие от животных, которым вводили носитель (черный столбец), критерий Стьюдента; нз: нет значительного отличия от носителя). Черный столбец: животные, которым вводили носитель.

Фиг. 3: Композиции по изобретению улучшают функционирование обучаемости и кратковременной памяти в модели амнезии, индуцированной скополамином, в схеме длительного (7 дней обработки перед тестом) введения. Потеря памяти предотвращалась от 11 до 37% (светло-серые столбцы) при сравнении животных, которым вводили носитель, с животными, обработанными скополамином (темно-серый столбец). Черный столбец: животные, которым вводили носитель.

Фиг. 4: Улучшение функционирования памяти при амнезии, индуцированной скополамином. Кратковременная память значительно улучшалась у животных, обработанных только накануне теста, при сравнении животных, которым вводили носитель, с животными, обработанными скополамином (темносерый столбец). Потеря функционирования обучаемости и памяти у животных, обработанных скополамином, восстанавливается с 14 до 44%, когда им вводят комбинации баклофен-акампросат (светло-серые столбцы). Черный столбец: животные, которым вводили носитель.

Фиг. 5: В тесте задачи на обнаружение (ИЕТ) молодые субъекты функционировали лучше, чем пожилые. Балльные оценки исходных данных в ИЕТ (Ьтп, Скорость функционирования) молодой группы

- 2 030385

(закрашенные квадраты) и пожилой группы (закрашенные круги), где обеим группам вводили плацебо, наносили на график функции от экспериментального расписания. Лучшее функционирование приводило к самым низким балльным оценкам. Как ожидалось, когнитивное функционирование у молодых субъектов выше, чем у пожилых.

Фиг. 6: Комбинация баклофен-акампросат улучшает когнитивные функции здоровых субъектов. Балльные оценки в изменении относительно исходных данных ΌΕΤ (Ьши, Скорость функционирования, уменьшение соответствует улучшению функционирования) у молодой группы, которым вводили баклофен-акампросат (закрашенные квадраты, сплошная линия) или плацебо (незакрашенные квадраты, пунктирная линия) наносили на график в виде функции от экспериментального расписания. Субъекты, которым вводили комбинацию баклофен-акампросат, функционировали лучше, чем субъекты, которым вводили плацебо. Улучшение функционирования наблюдали у обработанной группы на протяжении всей обработки.

Фиг. 7: Функционирование в когнитивных тестах СодШЦс® коррелировало с плазматической концентрацией смеси соединений. Наблюдали положительную корреляцию (г, коэффициент корреляции Пирсона) между плазматическими концентрациями акампросата на 10 день, через 5 ч после введения лекарственных средств (горизонтальная шкала) в образцах крови субъектов и суммарной балльной оценкой когнитивных тестов на 10 день, через 6 ч после введения лекарственных средств (вертикальная шкала).

Фиг. 8: ΕΚΡ-данные коррелируют с плазматической концентрацией смеси соединений. Наблюдают положительную корреляцию (г, коэффициент корреляции Пирсона) между плазматическими концентрациями баклофена на 10 день, через 1,5 ч после введения лекарственных средств и суммарной бальной оценкой ΕΚΡ на 10 день, через 6 ч после введения лекарственных средств.

Фиг. 9: ΕΚΡ-данные коррелируют с плазматической концентрацией смеси соединений. Обнаружили положительную корреляцию (г, коэффициент корреляции Пирсона) между плазматическими концентрациями акампросата на 10 день, через 1,5 ч после введения лекарственных средств и суммарной бальной оценкой ΕΚΡ на 10 день, когда ΕΚΡ-данные собирают через 6 ч после введения лекарственных средств.

Фиг. 10: Комбинация баклофен-акампросат эффективно восстанавливает когнитивные нарушения, индуцированные скополамином. Балльную оценку исходных данных в тесте на обучение в лабиринте Гротона (СМЬТ) наносили на вертикальную шкалу. Повышение бальной оценки соответствует нарушению функционирования в СМЬТ. Скополамин (вводили в Н3) индуцирует быстрое уменьшение когнитивного функционирования субъектов, обработанных плацебо (круги, пунктирная линия), которое продолжалось приблизительно 6 ч (Н9) после инъекции скополамина. Смесь баклофен-акампросат (квадраты, серая линия) эффективна в течение данного периода в отношении уменьшения вредных эффектов скополамина по части когнитивного функционирования. Значительное улучшение когнитивной балльной оценки наблюдали во временном интервале, соответствующем более высоким плазматическим концентрациям баклофена и акампросата (затемненный столбец ниже горизонтальной шкалы, темный: повышенные плазматические концентрации, светлый: пониженные плазматические концентрации).

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям и способам для улучшения или стимуляции памяти и родственных умственных функций субъекта. Более конкретно, изобретение раскрывает применение композиции, содержащей комбинацию, по меньшей мере:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

в виде ноотропного средства, эффективного в улучшении памяти и родственных умственных функций у млекопитающего.

Память (или более точно явление обучаемости и памяти) представляет собой общий термин комплексных процессов в мозге, с помощью которых различная информация, воспринимаемая мозгом, сохраняется, кодируется и воспроизводится.

Память проистекает из хранения всех видов информации, которые получает организм: моторная, языковая, визуальная, эмоции, запахи и т.д. Физиологически, эти процессы заключаются в усилении синаптических реакций (посредством модуляции синаптической прочности и явления образования синапса, называемого долговременной потенциацией) и в уплотнении сети нейронов посредством создания нейронных связей. Ученые делают различие между кратковременной (также называемой рабочей памятью) и долговременной памятью. Кратковременная память представляет собой краткое запоминание информации (продолжающееся от минут до часов) и ограничена по своей способности. Долговременная память дает возможность хранения гораздо большего количества информации и в течение неопределенного срока (не менее длины жизни). Долговременная память, как было обнаружено, сама состоит из различных подтипов памяти, которые часто взаимосвязаны. Переход между двумя типами памяти называют консолидацией памяти, и он является результатом упрочнения связей между различными областями мозга и результатом интеграции информации, приходящей из этих различных областей. Переход от кратковре- 3 030385

менной к долговременной памяти обычно происходит при повторной стимуляции нейронов. Было продемонстрировано, что гиппокамп играет ключевую роль в процессе консолидации: изменение в объеме гиппокампа, наблюдаемое у алкоголиков, коррелировало с когнитивными нарушениями и нарушениями памяти, которые часто проявлялись.

Потеря воспоминаний обычно способствовала активность-зависимому уменьшению прочности нейрональных синапсов, которые менее стимулированы или активны. Избыток новой информации, необходимый для упрочнения предшествующих синапсов, может также ослаблять другие, более старшие синапсы, предполагая забывание ранее сохраненной информации. Напротив, неспособность сохранять дополнительную информацию может быть связана с избытком более старой информации. Следовательно, факторы окружающей среды в виде интенсивного потока данных для сохранения или для ее преобразования могут влиять на память и родственные умственные способности.

Другие факторы типа сна, стресса, эмоциональных состояний, психиатрических заболеваний, наркомания или прием лекарственных средств, как известно, влияют на память и на связанные умственные способности, в частности, путем наличия эффекта в отношении сохранения информации путем ослабления прочности синапсов.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что композиции, содержащие по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из комбинации баклофена, акампросата, цинакальцета, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, особенно эффективны, ίη νΐνο, для улучшения функционирования памяти различных задач, предполагая кратковременную или долговременную память, а также связанные умственные способности.

В контексте изобретения термин "память" охватывает кратковременную и долговременную память.

В контексте данного изобретения термин "ментальные функции" включает когнитивные задачи, которые заключают в себе или могут поддерживать процессы памяти типа концентрации, алертности, внимания, обучаемости, способности логически мыслить или способности обрабатывать языковую информацию.

Хотя композиции по изобретению могут использоваться с целью улучшения памяти и/или ментальных функций у млекопитающего, следует предусмотреть, что такое улучшение может быть особенно целесообразным у здоровых людей, столкнувшихся с требованиями высоких результатов, побуждающих их улучшать или поддерживать их функции и их когнитивные способности. Такие люди представляют собой, например, людей, в установленный срок или постоянно нуждающихся в повышении функций их памяти, обучаемости или алертности, таких как студенты, опекуны больных, линейные пилоты, или в более общем смысле людей, столкнувшихся с умственным утомлением, потерей сна, ежедневным умственным напряжением или имеющих дело с многофункциональными активностями. Другими словами, композиции по изобретению предназначены людям, столкнувшимся с социально-профессиональной нагрузкой. Они также касаются других людей с жалобами на память, например женщин, испытывающих потерю памяти, вызванную гормональными изменениями или дисбалансом, такими как беременность, послеродовое состояние, перименопаузой или менопаузой. Обычно считается, что даже небольшой процент возрастания когнитивной функции может приводить к значительному улучшению функционального результата (см. "Вгаш хсюпес. аДШсОоп апД Дгидк", доклад Академии медицинских наук (Великобритания), 2008). Поскольку эти люди являются здоровыми людьми, то они не страдают слабоумием, сенильным слабоумием, возрастным нарушением памяти, болезнью Альцгеймера, болезнью диффузных телец Леви или умеренными когнитивными нарушениями.

Другие люди, нуждающиеся в таком стимулировании или улучшении, представляют собой людей, перенесших или имеющих риск состояния, которое нарушает их память и/или связанные с ней умственные функции. Таким образом, цель настоящего изобретения заключается не в лечении этиологических причин указанного состояния, нарушающего память, а в обеспечении людей, испытывающих или имеющих риск испытать такое состояние или расстройство, улучшением их самочувствия посредством улучшения их памяти и/или связанных с ней умственных функций.

Такими людьми являются, например:

люди, подвергнутые лечению или воздействию токсичных агентов, которые оказывают отрицательное влияние на память, как, например, при наркотической зависимости (например, от кокаина, героина, гашиша, амфетаминов, ...), при воздействии тяжелых металлов (например, свинца, алюминия или ртути, ...), лекарственных средств, таких как барбитураты, бензодиазепины, антихолинергических средств (типа скополамина), анестетиков (типа пропофола), статинов (типа аторвастатина, росувастатина или симвастатина), или некоторых противосудорожных лекарственных средств (например, карбамазепина), антигистаминных лекарственных средств первого поколения... Некоторые из лекарственных средств, описанных как индуцирующих потерю памяти, перечислены, в частности, ТаппепЬаит с1 а1. [14];

люди, испытывающие отмену лекарственного средства;

люди с патологическим состоянием щитовидной железы, которое приводит к гипотиреозу или к гипертиреозу, преимущественно к гипотиреозу;

люди, страдающие расстройствами, ассоциированными с умственной отсталостью и выбранными из синдрома Рубинштейна-Тайби, синдрома Грейга, синдрома Аперта, синдрома Ангельмана, синдрома

- 4 030385

Коффин-Лоури, синдрома Ретта, синдрома ломкой Х-хромосомы или синдрома Уильяма;

люди, в частности дети, страдающие патологическими трудностями обучения, овладения языком,

счета и/или чтения, например дискалкулии, дизорфографии или дислексии;

люди, страдающие психическими расстройствами, такими как депрессия, психотическими расстройствами (типа аутизма или шизофрении), дефицитом внимания, расстройствами, связанные с гиперактивностью, тревогой или навязчивыми компульсивными состояниями;

люди, страдающие от дефицита питания (в результате, например, бариатрической хирургии, хронического недоедания или нарушения питания, неполного парентерального питания, диуретической терапии, приема лекарственных средств) или от хронического заболевания (например, инфекции, хронической диареи, глютеиновой болезни, болезни Крона), отвечающего за метаболический дефицит железа, дефицит витаминов, например дефицит тиамина (витамин В1) (например, корсаковский синдром, энцефалопатия Вернике), дефицита витамина В6, дефицита витамина В12 или наследственного дефицита метаболизма (например, фенилкетонурия, которая приводит в результате к умственной отсталости).

При использовании в данном документе, такие люди не страдают слабоумием, сенильным слабоумием, возрастным нарушением памяти, болезнью Альцгеймера, болезнью диффузных телец Леви или умеренными когнитивными нарушениями.

При использовании в данном документе термин "улучшение" означает улучшение памяти и/или связанных с ней умственных функций по сравнению с предыдущим измерением эталонных данных. Такие функции памяти и/или связанных с ней умственных функций могут быть измерены с использованием некоторых тестов на память и когнитивных тестов, хорошо известных в данной области. Следует понимать, что "улучшение" также может представлять собой поддержание указанных функций по сравнению с предшествующим уровнем у субъекта, испытывающего какое-либо из указанных выше патологических состояний или активностей, которые, напротив, как ожидается, могут приводить к ослаблению указанных функций памяти и/или связанных с ней умственных функций.

При использовании в данном документе термин "лечение" нарушения памяти указанного субъекта, страдающего или страдавшего патологическим состоянием или расстройством когнитивной неспособности, включает терапию, предотвращение, профилактику, замедлением или уменьшением нарушений памяти и/или связанного с ней дефицита умственных функций у субъекта, нуждающегося в лечении, такое, как определено выше.

В контексте данного изобретения назначение конкретного лекарственного средства или соединения означает, что они включают не только молекулу с конкретным названием, но также фармацевтически приемлемую соль, гидрат, производное, изомер, рацемат, конъюгат, пролекарственное средство или его производное любой степени химической чистоты.

Термин "комбинация или комбинированное лечение/терапия" означает лечение, где соединение(я) и/или лекарственное(ые) средство(а) вводятся совместно субъекту для вызова биологического эффекта. В объединенной терапии согласно данному изобретению по меньшей мере два лекарственных средства могут вводиться вместе или отдельно, одновременно или последовательно. Кроме того, соединение(я) и/или лекарственное(ые) средство(а) по изобретению может(гут) вводиться посредством различных путей и протоколов. В результате, хотя они могут быть составлены вместе, лекарственные средства комбинации также могут быть составлены по отдельности.

Термин "пролекарственное средство" при использовании в данном документе означает любое функциональное производное (или предшественник) соединения по настоящему изобретению, которое при введении в биологическую систему генерирует указанное соединение в результате, например, спонтанной химической(их) реакции(й), химической(их) реакции(й), катализируемой ферментом и/или метаболической(их) химической(их) реакции(й). Пролекарственные средства, как правило, имеют структуру Х-лекарственного средства, где Х представляет собой компонент инертного носителя и лекарственное средство представляет собой активное соединение. Как правило, пролекарственное средство лишено активности или менее активно, чем лекарственное средство, и лекарственное средство высвобождается из носителя ίη νίνο. Пролекарственные средства, как правило, не активны или менее активны, чем получающееся в результате лекарственное средство, и оно может использоваться, например, для улучшения физико-химических свойств лекарственного средства, для направления лекарственного средства в конкретную ткань, для улучшения фармакокинетических и фармакодинамических свойств лекарственного средства и/или для уменьшения нежелательных побочных эффектов. Некоторые из распространенных функциональных групп, которые часто включают при разработке пролекарственного средства, включают, в частности, карбоксильную, гидроксильную, аминогруппу, фосфат/фосфонат и карбонильную группу. Пролекарственные средства, которые, как правило, получают посредством модификации этих групп, включают, в частности, эфиры, карбонаты, карбаматы, амиды и фосфаты. Конкретное техническое руководство для выбора подходящих пролекарственных средств известно из области общих знаний [15-19]. Кроме того, приготовление пролекарственных средств может быть осуществлено с помощью обычных методов, известных специалистам в данной области. Методы, которые могут использоваться для синтеза пролекарственных средств, описаны в многочисленных обзорах по данной теме [15, 20-25]. Например, арбаклофен плакарбил приведен в базе данных "СЬетГО р1и8 Айапсе"

- 5 030385

ОеЪ8Йе:сЬет.818.п1т.тЬ.доу/сЬеш1Йр1и8/), и арбаклофен плакарбил представляет собой хорошо известное пролекарственное средство баклофена [26, 27]).

Термин "производное" соединения включает любую молекулу, которая функционально или структурно связана с указанным соединением, такую как кислота, амид, сложный эфир, простой эфир, ацетилированный вариант, гидроксилированный вариант или алкилированный (С_г-С₆) вариант такого соединения. Термин "производное" также включает структурно связанное соединение с потерей одного или нескольких заместителей, приведенных выше. Например, гомотаурин представляет собой деацитилированное производное акампросата. Предпочтительные производные соединения представляют собой молекулы, обладающие существенной степенью сходства с указанным соединением, как определено с помощью известных методов. Похожие соединения наряду с их индексом сходства с родительской молекулой могут быть обнаружены в многочисленных базах данных, таких как "РиЪСйеш" (Ьйр://риЪсЬет.псЫ.п1т.шй.доу/8еагсЬ/) или "ИтидВапк" (1и1р://\\у\уу.бгидЪапк.са/). В более предпочтительном воплощении производные должны обладать индексом сходства Танимото выше чем 0,4, предпочтительно выше чем 0,6, еще более предпочтительно выше чем 0,7 с родительским лекарственным средством. Индекс сходства Танимото широко используется для измерения структурного сходства между двумя молекулами. Индекс сходства Танимото может быть рассчитан с помощью программного обеспечения, такого как "8та11 Мо1еси1е 8иЪдтарй Эе1ес1ог" [28,29], доступного онлайн (1Шр://\\у\уу.еЫ.ас.ик/11югп1оп-8Гу/8оП\уаге/8М8О/). Предпочтительные производные должны быть родственны одновременно структурно и функционально с родительским соединением, т.е. они также должны сохранять по меньшей мере часть активности родительского лекарственного средства.

Термин "производные" также включает метаболиты лекарственного средства, например молекулу, которая получена в результате (биохимической) модификации(й) или процессинга указанного лекарственного средства после введения в организм, как правило, посредством специализированных ферментативных систем, и которые демонстрируют или сохраняют биологическую активность лекарственного средства. Метаболиты были раскрыты как ответственные за большую часть терапевтического действия родительского лекарственного средства. В конкретном воплощении "метаболит" при использовании в данном документе означает модифицированное или обработанное лекарственное средство, которое сохраняет по меньшей мере часть активности родительского лекарственного средства.

Термин "соль" относится к фармацевтически приемлемой и относительно нетоксичной неорганической или органической соли добавления кислоты соединения по настоящему изобретению. Состав фармацевтической соли состоит из пары кислой, основной или цвиттерионной молекулы лекарственного средства с противоионом для создания соли лекарственного средства. Широкий спектр химических образцов может использоваться в реакции нейтрализации. Фармацевтически приемлемые соли по изобретению, таким образом, включают полученные с помощью реакции главного соединения, функционирующего в виде основания, с неорганической или органической кислотой с образованием соли, например солей уксусной кислоты, азотной кислоты, тартаровой кислоты, соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, метансульфокислоты, камфорной сульфокислоты, щавелевой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты или лимонной кислоты. Фармацевтически приемлемые соли по изобретению также включают те, в которых главное соединение функционирует как кислота и реагирует с подходящим основанием с образованием солей, например, натрия, калия, кальция, магния, аммония или холина. При этом большинство из данных активных веществ являются биоэквивалентами, некоторые могут среди прочего обладать свойствами повышенной растворимости или биодоступности. Выбор соли представляет собой в данный момент стандартную операцию в процессе разработки лекарственного средства, как раскрыто у Н. 81аШ и С.С. ХУегтШН в их руководстве [30].

В предпочтительном воплощении разработка соединения означает разработку самого соединения, а также его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, изомера, рацемата, сложного эфира или простого эфира.

В более предпочтительном воплощении разработка соединения означает разработку самого соединения, а также его фармацевтически приемлемой соли.

В конкретном воплощении используется состав с замедленным высвобождением соединения.

Как обсуждалось выше, изобретение относится к конкретной композиции лекарственного средства, которое обладает неожиданно сильным эффектом в отношении памяти и связанных с ней умственных функций, вовлеченных в процесс памяти. Эти комбинации лекарственных средств представляют собой, таким образом, новые средства для улучшения памяти субъекта, нуждающегося в этом. Более конкретно, в изобретении раскрыты композиции, содержащие по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, которые обеспечивают значительный и синергический эффект ίη У1уо в отношении памяти и связанных с ней умственных функций.

Фактически, как представлено в экспериментальной части, комбинированные терапии по изобретению могут, по существу, улучшать обучаемость и память субъектов. Конкретно, авторы изобретения неожиданно обнаружили, что комбинации по изобретению обладают сильным, неожиданным положительным эффектом в отношении кратковременной и долговременной памяти как у здоровых субъектов, так и

- 6 030385

у субъектов, испытывающих состояния когнитивного расстройства. Они демонстрируют также такой эффект для амнезии, индуцированной лекарственными средствами. Хотя они эффективны индивидуально в дозах, обнаруженных авторами изобретения, при этом примеры также демонстрируют, что комбинированные терапии по изобретению могут быть эффективны при очень низких дозах, при которых лекарственное средство индивидуально не дает никакого улучшения функций обучаемости и памяти. Эти результаты являются замечательными и особенно предпочтительными, так как при таких низких дозах можно избежать любого побочного эффекта, если он есть.

Иллюстративные номера СЛ8 для описанных выше лекарственных средств представлены в табл. 1. В табл. 1 приведены также, в частности, стандартные соли, рацематы, пролекарственные средства, метаболиты или производные для этих соединений, используемых в композициях по изобретению.

Таблица 1

Лекарственное средство	Номера САБ	Класс или индекс сходства Танимото
Акампросат и родственные соединения
Акампросат	77337-76-9 ; 77337-73-6	ΝΑ
Гомотаурин	3687-18-1	0,73
Этилдиметил аммоний пропан сульфонат	/	0,77
Таурин	107-35-7	0,5
Баклофен и родственные соединения „ *) ‘ /
Баклофен	1134-47-0; 66514-99-6; 69308-378; 70206-22-3; 63701-56-4; 63701-553	ΝΑ
3-(р-хлорфенил)-4-гидроксимасляная кислота	/	Метаболит
Арбаклофен плакарбил	847353-30-4	Пролекарственно е средство
Мексилетин и родственные соединения * ,
Мексилетин	31828-71-4 ; 5370-01-4
6-Г идроксиметилмексилетин	53566-98-6	Метаболит
4-Г идроксимексилетин	53566-99-7	Метаболит
З-Гидроксимексилетин (МНМ)	129417-37-4	Метаболит
Ν-Гидроксимексилетин глукуронид	151636-18-9	Метаболит
Сульиксазол и родственные соединения ‘
Сульфисоксазол	127-69-5 ; 4299-60-9
М(4)-Ацетилсульфисоксазол	4206-74-0	Метаболит
Сульфисоксазол ацетил	80-74-0	Пролекарственно е средство
Сульфаметоксазол	723-46-6	0,52
Цинакальцет и родственные соединения
Цинакальцет	226256-56-0 ; 364782-34-3
Гидрокоричная кислота	501-52-0	Метаболит
Торасемид и родственные еоединениЯ1
Торасемид	56211-40-6 ;72810-59-4
Г идрокситорасемид	99300-68-2 ; 99300-67-1	Метаболиты
Карбокситаросемид		Метаболит
Толбутамид	64-77-7	0,55

Конкретные примеры для пролекарственных средств баклофена представлены в Иапай е! а1. [31], где продемонстрированы эфиры баклофена и эфир карбаминовой кислоты и баклофена в качестве особо интересных средств для направленного воздействия на ЦНС. Следовательно, такие пролекарственные средства особенно подходят для композиций по изобретению. Арбаклофен плакарбил, упомянутый ранее, также представляет собой хорошо известное пролекарственное средство и, таким образом, может использоваться вместо баклофена в композициях по изобретению. Другие пролекарственные средства для баклофена могут быть обнаружены в следующих патентных заявках: \\'О 2010/102071, ϋδ 2009/197958, \\'О 200/9096985, \\'О 2009/061934, \\'О 2008/086492, ϋδ 2009/216037, \\'О 2005/066122, ϋδ 2011/021571, \\'О 2003/077902, \\'О 2010/120370.

Применяемые пролекарственные средства для акампросата, такие как сложный эфир пантоевой кислоты неопентилсульфониловые эфиры, неопентил сульфонил эфирные пролекарственные средства или защищенные карбоксилатом неопентил сульфонил эфирные пролекарственные средства акампросата приведены, в частности, в \\'О 2009/033069, \\'О 2009/033061, \\'О 2009/033054 \\'О 2009/052191, \\'О 2009/033079, ϋδ 2009/0099253, ϋδ 2009/0069419, ϋδ 2009/0082464, ϋδ 2009/0082440 и ϋδ 2009/0076147.

В одном воплощении изобретение относится к применению по меньшей мере двух лекарственных средств, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасе- 7 030385

мида для производства лекарственного средства для улучшения памяти и/или связанных с ней умственных функций нуждающегося в этом субъекта.

В конкретном воплощении изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере два лекарственных средства, выбранные из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида для применения для улучшения памяти и связанных с ней умственных функций нуждающегося в этом субъекта.

В другом воплощении изобретение относится к способу улучшения памяти и/или связанных с ней умственных функций, причем такой метод включает введение указанному субъекту по меньшей мере двух лекарственных средств, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида.

В предпочтительном воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, для улучшения функций памяти, обучаемости, внимания, логического мышления, концентрации, обработки языковой информации или алертности у нуждающегося в этом субъекта.

В другом предпочтительном воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, для улучшения кратковременной и/или долговременной памяти у нуждающегося в этом субъекта.

В другом воплощении изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере два лекарственных средства, выбранные из цинакальцета, баклофена, акампросата, мексилетина, сульфисоксазола и торасемида, для применения для улучшения памяти и связанных с ней умственных функций у субъекта, страдающего, перенесшего или имеющего риск патологического состояния когнитивного нарушения или расстройства, как определено выше.

В конкретном воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для улучшения памяти и умственных функций у нуждающегося в этом субъекта.

В конкретном воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для улучшения кратковременной и/или долговременной памяти у нуждающегося в этом субъекта.

В следующем воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для улучшения функций памяти, обучаемости, внимания, логического мышления, концентрации, обработки языковой информации или алертности у нуждающегося в этом субъекта.

В другом воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из

следующих: баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для применения в профилактике или в лечении нарушений памяти и/или умственных функций у субъекта, страдающего патологическим состоянием щитовидной железы, приводящим к гипотериозу или к гипертериозу.

В другом воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

- 8 030385

для применения для профилактики или для лечения нарушений памяти и/или умственных функций у субъекта, страдающего, перенесшего или имеющего риск психиатрических расстройств, таких как депрессия, психических расстройств (типа аутизма или шизофрении), дефицит внимания, расстройства, связанные с гиперактивностью, тревога или навязчивые компульсивные состояния.

В другом воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для применения для профилактики нарушений памяти и/или умственных функций у субъекта, страдающего расстройствами, ассоциированными с умственной отсталостью и выбранными из: синдрома Рубинштейна-Тайби, синдрома Грейга, синдрома Аперта, синдрома Ангельмана, синдрома Коффин-Лоури, синдрома Ретта, синдрома ломкой Х-хромосомы или синдрома Уильяма.

В другом воплощении изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранную из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для применения для профилактики или для лечения нарушений памяти и/или умственных функций у субъекта, страдающего пищевым или метаболическим дефицитом, подвергающегося лечению или воздействию токсичных веществ.

Изобретение также относится к композиции, содержащей по меньшей мере одну комбинацию лекарственных средств, выбранных из следующих:

баклофен и акампросат, мексилетин и цанакальцет, баклофен им торасемид или сульфисоксазол и торасемид,

для применения для профилактики или для лечения нарушений памяти и/или умственных функций у субъекта, страдающего патологическими трудностями обучаемости, способности к языкам, счету и/или чтению таких как, например, дискалькулия, дизорфография или дислексия.

Вышеописанные композиции могут использоваться индивидуально или могут дополнительно объединяться с дополнительными соединениями. В этой связи в конкретном воплощении композиции по изобретению могут дополнительно содержать по меньшей мере одно соединение, выбранное из метимазола, прилокаина, дифиллина, хинакрина, карбеноксолона, аминокапроновой кислоты, каберголина, диэтилкарбамазина, цинакальцета, циннаризина, эплеренона, фенолдопама, лефлуномида, левосимендана, сулодексида, тербинафина, зонисамида, этомидата, фенформина, триметазидина, мексилетина, ифенпродила, моксифлоксацина, бромокриптина или торасемида. Иллюстративные номера СА§ для каждого из этих соединений, представлены, в частности, в табл. 2.

- 9 030385

Таблица 2

Название лекарственного средства	НОМЕР СА8
Аминокапроновая кислота	60-32-2
Бромокриптин	25614-03-3
Каберголин	81409-90-7
Карбеноксолон	5697-56-3
Циннаризин	298-57-7
Диэтилкарбамазин	90-89-1
Дифиллин	479-18-5
Эплеренон	107724-20-9
Этомидат	33125-97-2
Фенолдопам	67227-57-0
Ифенпродил	23210-56-2 или 23210-58-4
Лнфлуномид	75706-12-6
Левосимендан	141505-33-1
Метимазол	60-56-0
Моксифлоксацин	354812-41-2
Фенформин	114-86-3
Прилокаин	721-50-6 или 14289-31-7 или 14289-32-8
Квинакрин	83-89-6
Сулодексид	57821-29-1
Тербинафин	91161-71-6
Триметазидин	5011-34-7 или 13171-25-0
Зонисамид	68291-97-4

Следовательно, композиции по изобретению могут содержать 2, 3, 4, 5 или более активных соединений, которые могут вводиться одновременно в единой дозированной форме, отдельно или последовательно с целью придания более существенного эффекта. Как представлено в разделе экспериментов, улучшение памяти и связанных с ней умственных функций замечено даже в первые часы после инъекции композиций по изобретению.

Вышеописанные композиции также могут дополнительно объединяться с дополнительными соединениями, о которых известно или предполагается, что они оказывают полезное воздействие на память и/или связанные с ней умственные функции субъекта. Эти дополнительные соединения могут быть улучшены растительными экстрактами (например, экстрактами Стдко Ы1оЬа), натуральными соединениями (такими как витамины, жирные кислоты, изофлавоны), лекарственным средством, исходно разработанным для лечения когнитивного расстройства, таким как рацетам (например, леветирацетам, пирацетам, прамирацетам, анирацетам или оксирацетам), или ингибитором ацетилхолин эстеразы (например, донепезил, ривастигмин, галантамин).

Таким образом, композиции по изобретению могут дополнительно содержать 1, 2, 3, 4, 5 или более дополнительных ингредиентов, экстрактов или лекарственных средств, о которых известно или предполагается, что они оказывают какой-то полезный эффект на функции памяти. Установленные ранее соединения композиций могут вводиться субъекту одновременно в единой дозированной форме, отдельно или последовательно с целью придания более существенных эффектов.

Более предпочтительно одно указанное дополнительное соединение представляет собой рацетам, выбранный из леветриацетама, пирацетама, анирацетама или оксирацетама. Еще более предпочтительно рацетам выбран из леветриацетама или пирацетама.

С этой точки зрения одно предпочтительное воплощение изобретения представляет собой комбинацию, содержащую по меньшей мере два лекарственных средства, выбранных из баклофена, акампросата, цинакальцета, мексилетина, сульфисоксазола или торасемида, в комбинации по меньшей мере с леветриацетамом или с пирацетамом для применения для улучшения памяти и умственных функций нуждающегося в этом субъекта.

Предпочтительное воплощение изобретения конкретно относится к композиции, содержащей баклофен и акампросат, в комбинации по меньшей мере с одним соединением, выбранным из леветриацетама или пирацетама.

В другом конкретном предпочтительном воплощении указанное дополнительное соединение представляет собой ингибитор ацетилхолинэстеразы, выбранный из донепезила, ривастигмина или галантамина. Среди ингибиторов ацетилхолинэстеразы донепезил является особенно предпочтительным.

Следовательно, в предпочтительном воплощении изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере два соединения, выбранных из баклофена, акампросата, цинакальцета, мексилетина, сульфисоксазола или торасемида, в комбинации с донепезилом, для применения для профилактики или лечения нарушений функции памяти и/или умственных функций у нуждающегося в этом субъекта.

- 10 030385

Иллюстративные номера СЛ8 для каждого из этих соединений, представлены, в частности, в табл. 3.

Таблица 3

Название лекарственного средства	НОМЕР СА8
Донепезил	120014-06-4 ; 142057-79-2 ; 120011-70-3 ; 142057-77-0
Ривастигмин	123441-03-2 ; 129101-54-8
Галатамин	357-70-0 ; 1953-04-4
Леветирацетам	102767-28-2
Пирацетам	7491-74-9
Прамирацетам	68497-62-1 ; 72869-16-0
Анирацетам	72432-10-1
Оксирацетам	62613-82-5

Сессии восстановительного обучения памяти представляют собой интенсивные упражнения на память и/или когнитивный тренинг, цель которых противодействовать дефициту кратковременной памяти или реорганизовать процессы памяти с использованием интактных областей мозга для компенсации поврежденных. Такое лечение конкретно используют для улучшения памяти и связанных с ней умственных функций субъекта, испытавшего повреждение мозга или хирургическую операцию на мозге. С этой точки зрения композиции по изобретению конкретно подходят для цели стабилизации и усиления синаптических процессов, инициируемых во время этих упражнений. Следовательно, в конкретном воплощении изобретение, таким образом, относится к применению композиций по изобретению для усиления эффективности указанных сессий восстановительного обучения памяти. В более конкретном воплощении композиции по изобретению вводятся непосредственно перед указанной сессией обучения или постоянно на протяжении всего периода восстановления.

В конкретном воплощении профилактики потенциального вредного эффекта токсичных соединений или лекарственных средств на функции памяти введение композиций по изобретению осуществляли по меньшей мере за 2 ч, предпочтительно за 24 ч перед экспонированием с указанными токсичными соединениями или лекарственными средствами. В другом воплощении введение композиций по изобретению продолжается на протяжении всего экспонирования с указанными токсичными соединениями или с лекарственными средствами с регулярными интервалами с целью поддержания эффективного уровня активных соединений указанной композиции у субъекта.

В зависимости от потребности пациента, подвергающегося лечению по изобретению, указанное лечение может осуществляться дома, в кабинете врача, в клинике, в амбулаторном отделении больницы или в больнице так, чтобы врач мог непосредственно наблюдать за эффектами терапии и делать любые необходимые замечания.

Продолжительность лечения также зависит от потребностей пациента, возраста и состояния и от того, как он отвечает на лечение. Дозировка, частота и способ введения каждого компонента комбинации могут контролироваться независимо. Например, одно лекарственное средство может вводиться перорально, в то время как второе лекарственное средство может вводиться внутримышечно. Комбинированная терапия может даваться периодическими циклами, которые включают периоды отдыха так, чтобы организм пациента имел возможность восстановиться от все еще присутствующих непредвиденных побочных эффектов. Лекарственные средства также могут быть составлены вместе так, чтобы одним введением доставлялись все лекарственные средства.

Введение каждого лекарственного средства комбинации может осуществляться любым подходящим средством, которое приводит к концентрации лекарственного средства, которое при объединении с другим компонентом способно улучшать память и связанные с ней умственные функции.

В то время как для лекарственных средств возможно введение комбинации в виде чистого химического вещества, предпочтительно представить их в виде фармацевтической композиции, также обозначаемой в данном контексте как фармацевтический состав. Возможные композиции включают те, которые подходят для перорального, ректального, местного (включая чрескожное, буккальное и подъязычное) или парентерального (включая подъязычное, внутримышечное, внутривенное и внутрикожное) введения.

Чаще эти фармацевтические составы прописываются в "упаковках для пациента", содержащих дозированные единицы или другие средства для введения отмеренных единичных доз для применения в ходе отдельного периода лечения в одиночной упаковке, как правило, в блистерной упаковке. "Упаковки для пациента" имеют преимущество над традиционными рецептурами, когда фармацевт отделяет фармацевтическое средство для обеспечения пациента из нерасфасованного продукта, в том смысле, что пациент всегда имеет доступ к листку-вкладышу в упаковке пациента, как правило, отсутствующему в традиционных рецептах. Было показано, что включение вкладыша улучшает соблюдение инструкций врача. Таким образом, изобретение дополнительно включает фармацевтический состав, как ранее было описано в данном документе, в комбинации с упаковочным материалом, подходящим для указанных составов. В такой упаковке для пациента целевое применение состава для комбинированного лечения может быть указано с помощью инструкций, приспособлений, предписаний, адаптации и/или других средств для по- 11 030385

мощи при использовании состава наиболее подходящего для лечения. Такие меры делают упаковку для пациента особенно подходящей и адаптированной для применения при лечении комбинацией настоящего изобретения.

Лекарственное средство может содержаться в любом соответствующем количестве, в любом подходящем веществе-носителе. Лекарственное средство может присутствовать в количестве вплоть до 99 мас.% от общей массы композиции. Композиция может быть представлена в дозированной форме, которая подходит для перорального, парентерального (например, внутривенного, внутримышечного), ректального подкожного, назального, вагинального, ингаляционного, кожного (пластырь) или глазного пути введения. Таким образом, композиция может быть в форме, например, таблеток, капсул, пилюль, порошков, гранулятов, суспензий, эмульсий, растворов, гелей, включая гидрогели, пасты, мази, кремы, пластыри, дозаторы для перорального введения, осмотические устройства для доставки, суппозитории, клизмы, лекарственные формы для инъекций, импланты, спреи и аэрозоли.

Фармацевтические композиции могут быть составлены согласно стандартной фармацевтической практике (см., например, РетйщЮп: ТЬе 8с1епсе апй РгасЬсе о£ РЬагтаеу (20* ей.), ей. Ά.Κ. Оеииаго, Ырршсой Аййатз & ΑίΙΚίηχ. 2000 и Епсус1орей1а о£ РЬагтасеийса1 ТесЬио1оду, ей§. 1. 8\\агЬпск апй ТС. Воу1ап, 1988-1999, Магсе1 Эеккег, №ν Уогк).

Фармацевтические композиции согласно изобретению может быть составлены для высвобождения активного лекарственного средства фактически сразу же после введения или в любое заданное время или период времени после введения.

Составы для контролируемого высвобождения включают (ί) составы, которые создают фактически постоянную концентрацию лекарственного средства в организме в течение длительного периода времени; (ΐΐ) составы, которые после предварительно определенного лаг-периода, создают фактически постоянную концентрацию лекарственного средства в организме в течение длительного периода времени; (ίίί) составы, которые поддерживают действие лекарственного средства в течение предварительно определенного периода времени путем поддержания сравнительно постоянного эффективного уровня лекарственного средства в организме с сопутствующей минимизацией нежелательных побочных эффектов, связанных с флуктуациями в уровне плазмы вещества активного лекарственного средства; (ίν) составы, которые локализуют действие лекарственного средства, например, пространственным расположением композиции с контролируемым высвобождением вблизи к или в больной ткани или органе; и (ν) составы, которые направляют действие лекарственного средства с помощью носителей или химических производных для доставки лекарственного средства в конкретный тип целевых клеток.

Введение лекарственных средств в форме состава для контролируемого высвобождения особенно предпочтительно в случаях, при которых лекарственное средство обладает (ί) узким терапевтическим диапазоном (т.е. незначительное различие между концентрацией в плазме, приводящей к вредным побочным эффектам или токсическим реакциям и концентрацией в плазме, приводящей к терапевтическому эффекту; в общем, терапевтический диапазон, ТД, определяется как соотношение дозы половинной смертности (ЕЭ₅₀) к средней эффективной дозе (ΕΌ₅₀)); (ίί) узким окном абсорбции в желудочнокишечном тракте или (ίίί) очень коротким периодом полужизни для того, чтобы частое дозирование в ходе дня потребовалось для поддержания уровня в плазме на терапевтическом уровне.

Любое количество стратегий может быть осуществлено для получения контролируемого высвобождения, при котором скорость высвобождения превосходит скорость метаболизма рассматриваемого лекарственного средства. Контролируемое высвобождение может быть получено соответствующим отбором различных параметров состава и ингредиентов, включая, например, различные типы композиций и покрытий для контролируемого высвобождения. Таким образом, лекарственное средство составлено с соответствующими наполнителями в фармацевтическую композицию, которая при введении высвобождает лекарственное средство контролируемым образом (одно- или многоэлементная таблетки или композиции капсул, масляные растворы, суспензии, эмульсии, микрокапсулы, микросферы, наночастицы, пленки и липосомы).

Твердые дозированные формы для перорального применения.

Составы для перорального применения включают таблетки, содержащие композицию изобретения в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми наполнителями. Эти наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители или наполнители (например, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал, карбонат кальция, хлорид натрия, фосфат кальция, сульфат кальция или фосфат натрия); гранулирующие и разрыхляющие агенты (например, производные целлюлозы, включая микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал, кроскармеллозу натрия, альгинаты, или альгиновую кислоту); связующие агенты (например, акациевую камедь, альгиновую кислоту, альгинат натрия, желатин, крахмал, прежелатинизированный крахмал, микрокристаллическую целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, поливинилпирролидон, или полиэтиленгликоль); и смазывающие агенты, глиданты и антиадгезивы (например, стеариновую кислоту, оксид кремния или тальк). Другие фармацевтически приемлемые наполнители могут быть красителями, вкусовыми агентами, пластификаторами, увлажнителями, буферными агентами и т.п.

- 12 030385

Таблетки могут быть непокрытыми или они могут быть покрытыми известными способами, необязательно для задержки разрыхления и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, что обеспечивает замедленное действие в течение более длительного периода. Покрытие может быть адаптировано для высвобождения активного вещества лекарственного средства в предварительно определенном паттерне (например, для получения состава с контролируемым высвобождением) или покрытие может быть адаптировано не высвобождать активное вещество лекарственного средства до прохождения через желудок (кишечное покрытие). Покрытие может представлять собой сахарное покрытие, пленочное покрытие (например, основанное на гидроксипропилцеллюлозе, метилцеллюлозе, метилгидроксиэтилцеллюлозе, гидроксипропилцеллюлозе, карбоксиметилцеллюлозе, акрилатных кополимерах, полиэтиленгликолях и/или поливинилпиролидоне) или кишечное покрытие (например, основанное на кополимере метакриловой кислоты, ацетате фталате целлюлозы, фталате гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетате сукцинате гидроксипропилметилцеллюлозы, поливинил ацетате фталате, шеллаке и/или этилцеллюлозе). Может быть использован материал для задержки по времени, такой как, например, глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат.

Твердые таблетированные композиции могут включать покрытие, адаптированное для защиты композиции от нежелательных химических изменений (например, химической деградации перед высвобождением активного вещества лекарственного средства). Покрытие может быть нанесено на твердую дозированную форму так же, как описано в энциклопедии фармацевтической технологии.

Лекарственные средства могут быть смешаны вместе в таблетке или могут быть разделены. Например, первое лекарственное средство содержится внутри таблетки, а второе лекарственное средство содержится снаружи таблетки, так что существенная часть второго лекарственного средства высвобождается перед высвобождением первого лекарственного средства.

Составы для перорального применения также могут быть представлены в виде жевательных таблеток, или виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым растворителем (например, картофельным крахмалом, микрокристаллической целлюлозой, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином), или в виде мягких желатиновых капсулах, где активный ингредиент смешан с водой или масляной средой, например жидким парафином, или оливковым маслом. Порошки и грануляты могут быть получены обычным образом с помощью ингредиентов, упомянутых выше для таблеток и капсул.

Композиции контролируемого высвобождения для перорального применения могут быть, например, сконструированы для высвобождения активного лекарственного средства путем контроля растворения и/или диффузии активного вещества лекарственного средства.

Высвобождение, контролируемое растворением или диффузией, может быть достигнуто соответствующим покрытием таблетки, капсулы, пеллеты или гранулированного состава лекарственных средств или путем включения лекарственного средства в соответствующую матрицу. Покрытие с контролируемым высвобождением может включать одно или несколько веществ для покрытия, упомянутых выше, и/или, например, шеллак, пчелиный воск, С1усо\уа\, касторовый воск, карнаубский воск, стеариловый спирт, моностеарат глицерина, дистеарат глицерина, глицерин пальмитостеарат, этилцеллюлоза, полиакрилаты, БЬ-молочная кислота, ацетат-бутират целлюлозы, поливинилхлорид, поливинилацетат, винилпирролидон, полиэтилен, полиметакрилат, метилметакрилат, 2-гидроксиметакрилат, гидрогели метакрилата, 1,3 бутиленгликоль, этиленгликоль метакрилата и/или полиэтиленгликоли. В составе матрицы с контролируемым высвобождением материал матрицы может включать, например, гидрированную метилцеллюлозу, карнаубский воск и стеариловый спирт, карбопол 934, силикон, глицерил тристеарат, метил акрилат - метил метакрилат, поливинил хлорид, полиэтилен и/или галогенированный фтороуглеводород.

Композиция с контролируемым высвобождением, содержащая одно или несколько лекарственных средств заявленных комбинаций, также может находиться в виде всплывающей таблетки или капсулы (т.е. таблетки или капсулы, которая при пероральном введении плавает на поверхности желудочного содержимого в течение определенного периода времени). Состав вплывающей таблетки лекарственного(ых) средства(в) может быть получен грануляцией смеси лекарственного(ых) средства(в) с наполнителями и 20-75% мас./мас., гидроколлоидов, таких как гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, или гидроксипропилметилцеллюлоза. Полученные гранулы затем могут быть спрессованы в таблетки. При контакте с желудочным соком таблетка образует фактически водонепроницаемый гелевый барьер вокруг своей поверхности. Этот гелевый барьер принимает участие в поддержании плотности менее чем единица, тем самым позволяя таблетке оставаться плавучей в желудочном соке.

Липиды для перорального введения.

Порошки, диспергируемые порошки или гранулы, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, являются обычными дозированными формами для перорального введения. Состав в виде суспензии обеспечивает активный ингредиент в смеси с диспергируемым или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или несколькими консервантами. Подходящими суспендирующими агентами являются, например, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, метилцеллюлоза, альгинат натрия и т.п.

- 13 030385

Парентеральные композиции.

Хотя пероральное введение является особенно предпочтительным, фармацевтическая композиция также может быть введена парентерально в зависимости от состояния здоровья пациента. Возможны инъекция, инфузия или имплантация (внутривенная, внутримышечная, подкожная или т.п.) в дозированных формах, составах или через подходящие устройства или импланты для доставки, содержащие обычные, нетоксичные фармацевтически приемлемые носители и адъюванты. Составление и приготовление таких композиций хорошо известны специалистам в области фармацевтических составов.

Композиции для парентерального применения могут быть представлены в единичных дозированных формах (например, в однодозовых ампулах) или во флаконах, содержащих несколько доз и в которые может быть добавлен подходящий консервант (см. ниже). Композиция может быть в форме раствора, суспензии, эмульсии, инфузионного устройств, или имплантируемого устройства доставки или может быть представлена в виде сухого порошка, восстанавливаемого водой или другим подходящим носителем перед применением. Кроме активных(ого) лекарственных(ого) средств(а) композиция может включать подходящие парентерально приемлемые носители и/или наполнители. Активное(ые) лекарственное(ые) средство(а) может быть введено в микросферы, микрокапсулы, наночастицы, липосомы или т.п. для контролируемого высвобождения. Композиция может включать суспендирование, солюбилизацию, стабилизацию, рН-корректирующие агенты и/или диспергирующие агенты.

Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть в форме, подходящей для стерильной инъекции. Для подготовки такой композиции подходящее активное(ые) лекарственное(ые) средство(а) растворено(ы) или суспендировано(ы) в парентерально приемлемом жидком носителе. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, - вода, вода, скорректированная до подходящего рН путем добавления соответствующего количества соляной кислоты, гидроксида натрия или подходящий буфер, 1,3-бутандиол, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Водный состав также может содержать один или несколько консервантов (например, метил, этил или н-пропил п-гидроксибензоат). В случаях, когда одно из лекарственных средств только незначительно или слабо растворимо в воде, агент, усиливающий растворение, или солюбилизирующий агент может быть добавлен или растворитель может включить 10-60% пропиленгликоля или т.п.

Парентеральные композиции с контролируемым высвобождением могут быть в форме водных суспензий, микросфер, микрокапсул, магнитных микросфер, масляных растворов, масляных суспензий или эмульсий. В ином случае активное(ые) лекарственное(ые) средство(а) может быть включено в биосовместимые носители, липосомы, наночастицы, импланты или устройства для инфузии. Материалами для применения при изготовлении микросфер и/или микрокапсул являются, например, биодеградируемые/биоразлагаемые полимеры, такие как полиглактин, поли(изобутил цианоакрилат), поли(2-гидроксиэтил-Ь-глутамин). Биосовместимые носители, которые могут быть использованы при составлении парентеральных составов с контролируемым высвобождением, являются углеводами (например, декстранами), белками (например, альбумином), липопротеинами или антителами. Материалы для применения в имплантах могут быть небиодеградируемыми (например, полидиметилсилоксаном) или биодеградируемыми (например, поли(капролактоном), поли(гликолевой кислотой) или поли(ортоэфирами)).

Альтернативные пути.

Могут рассматриваться и другие пути введения и, следовательно, другие составы, хотя и менее предпочтительные и менее удобные. Они могут быть использованы, например, в случае, когда пероральное введение соединения является сложным в отношении общего состояния здоровья пациента. В связи с этим для ректального применения подходящие дозированные формы для композиции включают суппозитории (типа эмульсии или суспензии) и ректальные желатиновые капсулы (растворы и суспензии). В составе типичного суппозитория активное(ые) лекарственное(ые) средство(а) объединяется(ются) с соответствующей фармацевтически приемлемой основой для суппозиториев, такой как масло какао, этерифицированные жирные кислоты, глицериновокислый желатин и различные водорастворимые или диспергируемые основы, подобные полиэтиленгликолям. Могут быть введены различные добавки, усилители или поверхностно-активные вещества.

Фармацевтические композиции также могут быть введены местно на кожу для чрескожной абсорбции в дозированных формах или составах, содержащих обычно нетоксичные фармацевтически приемлемые носители и наполнители, включая микросферы и липосомы. Составы включают кремы, мази, лосьоны, линименты, гели, гидрогели, растворы, суспензии, палочки, спреи, пасты, пластыри и другие виды систем трансдермальной доставки лекарственных средств. Фармацевтически приемлемые носители или наполнители могут включать эмульгирующие агенты, антиоксиданты, буферные агенты, консерванты, увлажнители, усилители проникновения, хелатирующие агенты, гель-формирующие агенты, основы мазей, парфюмерию и агенты для защиты кожи.

Консерванты, увлажнители, усилители проникновения могут быть парабенами, такими как метил или пропил р-гидроксибензоат и хлорид бензалкония, глицерин, пропилен гликоль, мочевина и т.п.

Фармацевтические композиции, описанные выше, для местного введения на кожу также могут быть использованы в сочетании с местным введением на или около части тела, которая подлежит лечению.

- 14 030385

Композиции могут быть адаптированы для прямого применения или для применения посредством специальных устройств для доставки лекарственных средств, таких как повязки или в ином случае пластыри, прокладки, губки, ленты или другие формы подходящего гибкого материала.

Дозировки и длительность обработки.

Следует иметь в виду, что лекарственные средства комбинаций могут быть введены либо одновременно либо в одном, либо в различных фармацевтических составах, либо последовательно. Если существует последовательное введение, задержка при введении второго (или дополнительного) активного ингредиента не должна быть таковой, чтобы потерять преимущество действенного эффекта комбинации активных ингредиентов. Минимальное требование для комбинации по этому описанию заключается в том, что комбинация должна быть предназначена для объединенного применения с преимуществом действенного эффекта комбинации активных ингредиентов. Целевое применение комбинации может быть установлено с помощью приспособлений, предписаний, адаптации и/или других средств, чтобы помочь с использованием комбинации в соответствии с изобретением.

Терапевтически эффективные количества лекарственных средств в комбинации изобретения включают, например, количества, которые являются эффективными для усиления результативности обучения и памяти или предотвращения или снижения ослабления этих результативностей.

Хотя активные лекарственные средства настоящего изобретения могут быть введены в дробных дозах, например два или три раза в день, одиночная ежедневная доза каждого лекарственного средства в комбинации является предпочтительной, с одиночной ежедневной дозой для всех лекарственных средств в одиночной фармацевтической композиции (единичная дозированная форма), являющейся наиболее предпочтительной.

Введение может быть осуществлено от одного до нескольких раз ежедневно в течение от нескольких дней до нескольких лет и может даже происходить в течение жизни пациента. Хроническое или, по меньшей мере, периодически повторяемое введение указано в большинстве случаев.

Термин "единичная дозированная форма" относится к физически дискретным единицам (таким как капсулы, таблетки или загруженные цилиндры шприцев), подходит в качестве унитарных дозировок для испытуемых людей, каждая единица, содержащая предварительно определенное количество активного материала или материалов, рассчитанных для получения искомого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем.

Количество каждого лекарственного средства в предпочтительной композиции единичной дозировки зависит от нескольких факторов, включая способ введения, массу тела и возраст пациента, потребность пациента, риск потенциальных побочных эффектов, принимая во внимание статус здоровья указанного субъекта. Кроме того, фармакогеномная (влияние генотипа на фармакокинетический, фармакодинамический профиль или профиль эффективности терапевтического средства) информация о конкретном субъекте может влиять на используемую дозировку.

За исключением ответа на конкретные ситуации, когда могут быть необходимы более высокие дозировки, предпочтительная дозировка каждого лекарственного средства в комбинации будет лежать в диапазоне доз не выше дозировки, обычно прописываемой для долгосрочного поддерживающего лечения или являющейся доказано безопасной в фазе 3 клинических исследований.

Одно значительное преимущество изобретения заключается в том, что каждое соединение может быть использовано в низких дозировках в комбинированной терапии, при этом продуцируя, в комбинации, существенную клиническую пользу для пациента. Комбинированная терапия действительно может быть эффективной в дозах, при которых соединения индивидуально имеют слабый эффект или при которых эффект отсутствует. Соответственно, конкретным преимуществом изобретения является возможность применения каждого из соединений в субоптимальных дозах, т.е. дозах, которые ниже, чем обычно прописываемые терапевтические дозы, предпочтительно 1/2 от терапевтических доз, более предпочтительно 1/3, 1/4, 1/5 или даже еще более предпочтительно 1/10 от терапевтических доз. В конкретных примерах используются дозы вплоть до 1/20, 1/30, 1/50, 1/100 или даже ниже от терапевтических доз.

При таких субтерапевтических дозировках соединения не будут демонстрировать побочных эффектов, хотя комбинация(и) по изобретению является полностью эффективной в плане улучшения памяти и связанных ментальных функций, как определено выше.

Предпочтительная дозировка соответствует количествам от 1 вплоть до 50% от тех, что обычно прописывают для долгосрочного поддерживающего лечения.

Наиболее предпочтительная дозировка может соответствовать количествам от 0,1 вплоть до 10% от тех, что обычно прописывают для долгосрочного поддерживающего лечения.

Специфические примеры дозировок лекарственных средств (относительно фактического активного составляющего, вне зависимости от используемой соли) для применения в изобретении представлены ниже.

Акампросат от 0,1 до 500 мг/день, предпочтительно меньше чем 250 мг/день, более предпочтительно меньше чем 100 мг/день, еще более предпочтительно меньше чем 10 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

- 15 030385

Баклофен от 0,01 до 200 мг/день, предпочтительно меньше чем 150 мг/день, более предпочтительно меньше чем 70 мг/день, еще более предпочтительно меньше чем 35 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

Миксилетин перорально от около 6 до 120 мг/день, предпочтительно меньше чем 60 мг/день, более предпочтительно меньше чем 30 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

Торасемид перорально от около 0,05 до 4 мг/день, предпочтительно меньше чем 2 мг/день, более предпочтительно меньше чем 1 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

Сульфисоксазол перорально от около 20 до 800 мг/день, предпочтительно меньше чем 400 мг/день, более предпочтительно меньше чем 200 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

Цинакальцет перорально от около 0,3 до 36 мг/день, предпочтительно меньше чем 20 мг/день, более предпочтительно меньше чем 10 мг/день, такие дозировки особенно подходят для перорального введения.

Аминокапроновая кислота перорально от около 0,1г до 2,4 г/день.

Бромокриптин перорально от около 0,01 до 10 мг/день.

Диэтилкарбамазин перорально от около 0,6 до 600 мг/день.

Каберголин перорально от около 1 до 10 мг/день.

Циннаризин от около 0,6 до 23 мг/день.

Дифилин перорально от около 9 до 320 мг/день.

Эплеренон перорально от около 0,25 до 10 мг/день.

Ифенпродил перорально от около 0,4 до 6 мг/день.

Лефлуномид перорально от около 0,1 до 10 мг/день.

Левосимендан перорально от около 0,04 до 0,8 мг/день.

Моксифлоксацин перорально от около 4 до 40 мг/день.

Фенформин перорально от около 0,25 до 15 мг/день.

Квинакрин перорально от около 1 до 30 мг/день.

Сулодексид перорально от около 0,05 до 40 мг/день.

Тербинафин перорально от около 2,5 до 25 мг/день.

Триметазидин перорально от около 0,4 до 6 мг/день.

Зонисамид перорально от около 0,5 до 50 мг/день.

Когда композиция включает в качестве активных ингредиентов только баклофен и акампросат, эти два соединения могут быть использованы в различных соотношениях, например с массовым соотношением акампросата кальция/баклофена от 0,05 до 1000 (мас./мас.), предпочтительно от 0,05 до 100 (мас./мас.), более предпочтительно от 0,05 до 50 (мас./мас.). В предпочтительном воплощении соотношение акампросат кальция/баклофен составляет 1/15. В другом воплощении соотношение акампросат кальция/баклофен составляет 4/3 или даже 8/3.

В одном воплощении 1 мг акампросат кальция дают в качестве суточной дозы. В другом воплощении 40 мг акампросат кальция дают в качестве суточной дозы. Еще в одном воплощении такая суточная доза составляет 80 мг.

Следует понимать, что количество фактически вводимого лекарственного средства будет определяться врачом в свете сопутствующих обстоятельств, включая условие или условия, подлежащие лечению, точную вводимую композицию, возраст, масса и ответ индивидуального пациента, тяжесть симптомов пациента и выбранный путь введения. Следовательно, вышеуказанные диапазоны дозировок предназначены для обеспечения общего руководства и поддержки изложенного в данном документе, но не предназначены для ограничения рамок изобретения.

Следующие примеры представлены для иллюстрации и никоим образом для ограничения.

Примеры

Все процедуры на животных были проведены в соответствии с действующим законодательством и нормативными актами (Эесгее № 87-848 от 19 октября 1987 г. имплементирован в апреле 1988 г., включенная директива 86/609/ЕС во французское законодательство, измененное Эесгее № 2001-464 от 29 мая 2001 г. и Постановлением от 20 июня 2001 г.).

I. Улучшение памяти у животных.

Краткосрочная и долгосрочная память оценивалась в здоровых животных с помощью различных тестов, как правило, используемых для измерения результативности обучения и памяти.

А. Улучшение у здоровых животных краткосрочной и долгосрочной памяти.

Использовали 11-месячных мышей С57В1/6. Их размещали по группам (5-10 мышей/клетку) и держали в комнате с контролируемой температурой (21-22°С), обратным циклом свет-темнота (12 ч/12 ч; свет включен: 17:30 - 05:30; свет выключен: 05:30 - 17:30) и доступом к пище и воде ай йЪйит.

- 16 030385

1) Введение соединений.

Лекарственные средства солюбилизировали в воде, готовили заново перед каждым зондовым или в.б. введением и сохраняли при перемешивании.

Дозы лекарственных средств изобретения проиллюстрированы в табл. 4. Что касается акампросата кальция, то указанные дозы относятся к дозам соли молекулы.

Таблица 4

дозы смесей, использованные на мышах	(+/-)Баклофен (мг/кг)	Акампросаг кальций (мг/кг)
доза смеси 1	1,2	0,08
доза смеси 2	3	0,2
доза смеси 3	7,5	0,5
доза смеси 4	0,48	0,032
доза смеси 5	0,192	0,0128

Донепезил, ингибитор ацетилхолинестеразы, использовали в качестве внутреннего положительного контроля. Как правило, его вводили единожды, внутрибрюшинно, за 30 мин до теста памяти.

Хроническое введение соединений, за 7 дней до теста.

Между днем 0 и днем 7 комбинации лекарственных средств или раствора носителя вводили дважды в день (в 8:00 утра и 6:00 вечера). Одна группа животных получала донепезил (эталонное соединение 0,3 мг/кг) в 8:00 утра и носитель в 6:00 вечера.

На 8 день всех животных тестировали для % чередования результативности в Т-образном лабиринте, через 2 ч после введения комбинации лекарственных средств или раствора носителя.

Введение соединений за 1 день перед тестом.

Накануне теста комбинации лекарственных средств или раствора носителя вводили в 8:00 утра и 6:00 вечера. Одна группа животных получала донепезил (эталонное соединение 0,3 мг/кг) в 8:00 утра и носитель в 6:00 вечера. В день теста животным вводили комбинации лекарственных средств или носитель за 2 ч перед осуществлением теста.

Острое введение соединений: единожды, за 2 ч перед тестом.

В день теста животным вводили одну дозу комбинаций лекарственных средств, лекарственные средства отдельно или носитель за 2 ч перед проведением теста.

2) Улучшение краткосрочной памяти.

% изменения в тесте с Т-образным лабиринтом.

Спонтанное чередование является врожденной тенденцией грызунов к чередованию свободных выборов в Т-образном лабиринте в течение всей серии последовательных прогонов [32]. Эта последовательная процедура опирается на краткосрочную память.

Эффект введения комбинаций на краткосрочную память оценивали на протяжении различных периодов обработки (7 дней, 1 день, 2 ч перед тестом).

Эксперимент осуществляли между 8:00 утра и 3:00 вечера в условиях освещения красным светом, поскольку мышей держали на обращенном световом цикле. В течение данных испытаний работу с животными и видимость оператора минимизировали, насколько это было возможно.

Устройство Т-образного лабиринта изготовлено из серого плексигласа с основным стволом (55 см в длину х 10 см в ширину х 20 см в высоту) и двумя ответвлениями (30 см в длину х 10 см в ширину х 10 см в высоту), расположенными под углом 90° относительно основного ствола. Стартовый бокс (15 см в длину х 10 см в ширину) отделен от основного ствола с помощью выдвижной двери. Выдвижные двери также были предоставлены для закрытия конкретных ответвлений в ходе проведения задачи по принудительному чередованию выбора [33].

Экспериментальный протокол состоит из одной одиночной сессии, которая начинается с 1 испытания с "принудительным выбором", за которым следуют 14 испытаний со "свободным выбором". В первом испытании со "свободным выбором" животное запирается на 5 с в стартовом ответвлении и затем его освобождают, при этом либо левое, либо правое целевое ответвление блокируется путем закрывания выдвигающейся двери. Затем животное исследует открытое ответвление и возвращается в стартовое ответвление. В этот момент животное заканчивает испытание с принудительным выбором. Сразу после этого возвращения животного к стартовой позиции, левая или правая целевая дверь открывается и животному позволяется свободно выбирать между левым и правым ответвлением (испытания "свободного выбора"). Каждый раз, когда животное выбирает целевое ответвление, противоположное ответвление закрывается для того, чтобы заставить животное вернуться в стартовое ответвление. Как только животное возвращается в стартовое ответвление, все целевые двери открываются, что позволяет начать другой раунд испытания свободного выбора. Животное считается вошедшим в выбранное ответвление, когда оно помещает в ответвление свои четыре лапы. Сессия останавливается, и животное удаляется из лабиринта сразу после проведения 14 испытаний свободного выбора или истечения 15 мин, в зависимости от того, что случается первым.

Устройство очищали между животными с помощью спирта (70°). Из лабиринта удаляли мочу и кал.

- 17 030385

Результаты.

Процент спонтанного чередования рассчитывали как количество спонтанных чередований, разделенное на количество испытаний свободного выбора. Чередование определяется как смена двух различных ответвлений в ходе последовательных выборов (т.е. последовательность право-лево-право представляет собой два чередования).

Дисперсионный анализ (ΑΝΟνΑ) осуществляли на полученных данных. Критерии Даннетта или Стьюдента применяли для определения значимости различий.

Комбинации изобретения эффективны при улучшении спонтанного чередования у получивших дозу животных (табл. 5).

Таблица 5

Животным давали:	Улучшение спонтанного чередования
Баклофен и акампросат	+
Баклофен и торасемид	+
Мексилетин и цинакальцет	+
Сульфисоксазол и торасемид,	+
Носитель	-

+: улучшение;

-: нет улучшения.

Фиг. 1 ясно демонстрирует, что комбинации изобретения эффективны при усилении продуктивности памяти у животных, в любой из протестированных доз (см. также табл. 4) комбинации баклофена и акампросата. Значимое усиление в обучении и продуктивности памяти вплоть до 62% наблюдается при хроническом лечении и 57% для мышей, подвергнутых острой обработке.

Более того, композиции, содержащие баклофен и акампросат, являются эффективными при улучшении продуктивности обучения и памяти у мышей при очень низких дозах смешанных доз 4 и 5, как показано на фиг. 2.

Примечательно, что комбинации изобретения действуют очень быстро, поскольку улучшение в результативности памяти заметно, даже когда лекарственные средства вводят однократно, за 2 ч перед тестом и в концентрациях не больше дозы 5 (0,0128 мг/кг акампросата кальция и 0,192 мг/кг баклофена, фиг. 2).

Удивительно, но существенный синергический эффект между лекарственными средствами наблюдается даже в очень низких дозах (фиг. 2), тогда как в этих дозах лекарственные средства при введении отдельно не демонстрируют какого-либо положительного влияния на результативность животных.

Задержка нахождения места в водном лабиринте (пространственная рабочая память).

Применялась такая же схема введения лекарственного средства. Всех животных тестировали на обучение и на пространственную кратковременную память.

Водный лабиринт является круглым бассейном (диаметр, 140 см, высота 40 см). Температура воды, 23±1°С, интенсивность света, внешние сигналы в комнате (раковина, контрастные постеры, полки) и непрозрачность воды тщательно воспроизводились для каждого теста. Прозрачную плексиглазовую нескользкую платформу (диаметр 10 см) погружали под поверхность воды в течение сбора данных. Этот тест измеряет способность животного получать и сохранять выученную информацию, которой является расположение платформы как функции от ориентиров вне бассейна.

Плавание записывали с помощью программного обеспечения '%’10ео1гаек" (У1е\\рош1. Шампань-оМон-д'Ор, Франция) с траекториями, анализируемыми как задержки и расстояния. Программное обеспечение делит бассейн на четыре квадранта.

Пространственную рабочую память специально тестировали путем изменения расположения платформы каждый день путем применения межтренировочного интервала 2 мин. Тренировка состоит из четырех заплывов в день в течение 3 дней, с 2-минутными интервалами между испытаниями. Стартовые позиции, установленные на каждой границе между квадрантами, выбирали случайно и каждому животному позволяли плавать 90 с для поиска платформы. Как только животное находило платформу, его оставляли на ней на 20 с. Среднюю задержку рассчитывали в течение 3 дней для каждого плавательного испытания. Она является индикатором результативности обучения и пространственной краткосрочной памяти у животного.

Отмечаются положительные результаты, касающиеся результативности пространственной рабочей памяти животных, обработанных композициями изобретения.

3) Улучшение долгосрочной памяти.

а) Обучение месту в водном лабиринте (референтная память, [33]).

Содержание животных и схема введения лекарственных средств такие же, как и ранее подробно описанные. Водный лабиринт является круглым бассейном (диаметр 140 см, высота 40 см). Тщательно воспроизводились температура воды (23±1°С), интенсивность света, внешние сигналы в комнате (раковина, контрастные постеры, полки) и непрозрачность воды (достигнутая с помощью суспензии карбоната кальция). Четыре позиции отправной точки определяли по кардиальным точкам бассейна (С, В, Ю, З).

- 18 030385

Прозрачную плексиглазовую нескользкую платформу (диаметр 10 см) погружали под поверхность воды в течение сбора данных. Платформу помещали в центр С3 квадранта в течение всей процедуры референтной памяти. Тренировка состоит из трех заплывов в день в течение 5 дней с 20-минутными интервалами между испытаниями. Животных тестировали партиями по 10 индивидуумов (что соответствует одной клетке). Стартовые позиции случайно выбирали каждый день и животным давали плавать 90 с для обнаружения платформы. Длительности плавания измеряли с помощью секундомера. После обнаружения платформы животное оставляли на платформе на 20 с. Если животное не достигало платформы в течение 90 с, то его осторожно помещали на платформу и оставляли на ней на 20 с. Медианную задержку рассчитывали для каждого тренировочного дня и выражали как среднее ± 8.Е.М. для всей обрабатываемой группы.

Для определения результативности обучения и долговременной памяти животных осуществляли зондовый тест через 24 ч после последнего плавания. Платформу удаляли и каждому животному позволяли свободно плавать в течение 60 с. На голову животных наносили пятно черной нетоксичной краски для обнаружения с помощью видеотрекинга. Плавание записывали с помощью программного обеспечения "УЫеоЕаек" (Л'1е\\ропИ, Шампань-о-Мон-д'Ор, Франция), с траекториями, анализируемыми как задержки и расстояния. Программное обеспечение делит бассейн на четыре квадранта в соответствии со стартовыми позициями. Каждая мышь начинает с одной или двух позиций, удаленных от расположения платформы в позиционно уравненной последовательности. Определяли время, потраченное в каждом квадранте. Время, потраченное в квадранте, который содержит платформу в ходе сбора данных, является мерой результативности долговременной памяти у животных.

Улучшение долговременной памяти наблюдается для композиций изобретения (табл. 6).

Таблица 6

Животные получали:	Увеличение времени, проведенного в секторе, который содержит платформу
Баклофен и акампросат	+
Баклофен и торасемид	+
Мексилетин и цинакальцет	+
Сульфисоксазол и торасемид,	+
Носитель	-

+: время увеличивается; время не увеличивается.

Тест "Мер 1йгоидй" латентности.

Тест "з1ер ФгоидИ" латентности является усугубленным страхом тестом, используемым для оценки обучения и памяти. В данном тесте субъекты обучались избегать среды, в которую ранее был введен отрицательный стимул (например, электроболевое раздражение лап животных). Поскольку тест удерживания осуществляли через 24 ч после тренировочной (обучающей) сессии, то он является индикатором результативности долговременной памяти у животного.

Устройство является двухкамерной (15x20x15 см в высоту) коробкой с одной камерой, освещаемой белыми поливинилхлоридными стенками, и с другой камерой, затемненной черным поливинилхлоридными стенками и сетчатым полом. Подъемная дверь отделяет камеры. 60-ваттная лампа, расположенная в 40 см над устройством, освещала белую камеру в ходе эксперимента. Рандомизированные электроболевые раздражения лап животных (0,3 мА в течение 3 с) могли быть осуществлены на сетчатом полу с помощью генератора шока с перемешивателем (ЬаГауейе 1п81гишеп18, Лафейетт, США). Подъемная дверь в ходе тренировочной сессии была изначально закрыта. Каждую мышь помещали в белую камеру. Через 5 с дверь поднимали. Когда мышь входила в затемненную камеру и помещала все свои лапы на сетчатый пол, дверь закрывалась и в течение 3 с осуществлялось электроболевое раздражение. Записывали данные теста "з1ер ФгоидИ" латентности, то есть, латентности, потраченной на вход в затемненную камеру, и количество вокализаций. Тест удерживания проводили через 24 ч после тренировки. Каждую мышь опять помещали в белую камеру. Через 5 секунд дверь поднимали, записывали "з1ер ФгоидИ" латентность и латентность спасения, т.е. время, потраченное на возвращение в белую камеру, вплоть до 300 секунд.

Задержку при входе в затемненную камеру интерпретировали как меру способности животного к обучению и запоминанию.

Ь) Результаты

Положительные результаты наблюдали для животных, обработанных баклофеном и акампросатом, тем самым демонстрируя, что композиция изобретения эффективна для улучшения долгосрочной памяти.

В. Улучшение памяти в ходе амнезии, индуцированной лекарственным средством

Индуцированная лекарственным средством амнезия, провоцируется инъекцией мышам сильного амнестического лекарственного средства, скополамина. Данное лекарственное средство индуцирует временную амнезию: память в ходе активного окна лекарственного средства постоянно теряется или, по меньшей мере, существенно уменьшается, но сразу после того, как прием лекарственного средства прекращается, память больше не поражается.

- 19 030385

Тестировали способность композиций изобретения защищать краткосрочную память от индуцированной скополамином амнезии, в % чередования в тесте с Т-образным лабиринтом, в частности, как описано выше, с 4-5 недельными мышами СЭ-1.

Тест осуществляли для оценки защитного эффекта комбинаций по отношению к индуцированной амнезии для продолжительной (фиг. 3, дважды в день в течение 7 дней и 2 ч перед тестом) и более короткая превентивная дозировка (дважды за день до и за 2 ч перед тестом; фиг. 4).

Скополамин получали в солевом растворе в концентрации 0,1 мг/мл и инъецировали в.б. в дозированном объеме 10 мл/кг. Это дает дозу 1 мг/кг. Эта доза относится к дозе солевой формы (т.е. гидрохлорида скополамина) лекарственного средства, а не к дозам упомянутой молекулы как таковой.

В день теста животным дозировано вводили комбинации лекарственных средств изобретения, за 2 ч перед тестом. За 30 мин до осуществления теста скополамин вводили животным.

Результаты.

Процент спонтанного чередования рассчитывали, как указано ранее. Результаты представлены в табл. 7 и на фиг. 3 и 4.

Таблица 7

Животным, обработанным скополамином, дозировано вводили:	Улучшение спонтанного чередования
Баклофен и акампросат	+
Баклофен и торасемид	+
Мексилетин и цанакальцет	+
Сульфисоксазол и торасемид,	+
Носитель	-

+: улучшение;

-: нет улучшения.

Результаты демонстрируют, что комбинации изобретения являются эффективными при увеличении результативности животных, обработанных скополамином, который дозировано вводили либо длительно (табл. 7, фиг. 3), либо за день перед индукцией амнезии (табл. 7, фиг. 4).

Более того, улучшение результативности отмечено для всех протестированных концентраций комбинации баклофен-акампросат.

II. Тесты памяти и когнитивные тесты на испытуемых людях.

Композиции изобретения эффективны при улучшении памяти у здоровых испытуемых людей. Эффективность комбинации баклофена и акампросата при улучшении памяти или связанных с памятью ментальных функций в настоящее время оценивается с помощью клинических испытаний. Исследование осуществляли в соответствии с рекомендациями нормативов Европейского Медицинского Агентства 1СН-Е6 (Е1) и законом Франции № 2004-806 от 9 августа 2004 г. об общественном здравоохранении.

А. Измерение когнитивной функции у здоровых субъектов.

Исследование проводили на когорте 12 молодых здоровых мужчин-волонтеров в возрасте от 18 до 45 лет ("молодая когорта"). Когорту рандомизировали так, что 8 субъектов получают активные лекарственные средства, а 4 субъекта - плацебо.

Когорту из 4 пожилых субъектов ("возрастная когорта"), которым вводили плацебо, использовали для валидации экспериментальных условий.

1) График дозирования.

Продолжительность обработки составила 10 дней. Баклофен и акампросат давали перорально одновременно в виде комбинированной терапии.

Хотя протестированные в данном тесте низкие дозы сравнивали с обычными терапевтическими дозами, режим дозирования с повышением дозы является желательным, для прогрессивного повышения ежедневно вводимой дозы баклофена и, таким образом, для ограничения возможных побочных эффектов, индуцируемых баклофеном, даже когда они маловероятны.

Затем в качестве режима дозирования, каждому субъект пероральным путем вводится обработка: день -1: нет введения ни лекарственного средства, ни плацебо; день 1: 6 мг баклофена и 0,4 мг акампросата или плацебо утром;

день 2: 6 мг баклофена и 0,4 мг акампросата или плацебо дважды каждый день (утром и вечером);

день 3: 6 мг баклофена и 0,4 мг акампрсата или плацебо утром и 12 мг баклофена и 0,8 мг акампросата или плацебо вечером;

день 4: 12 мг баклофена и 0,8 мг акампросата или плацебо дважды ежедневно (утром и вечером); день 5-день 9: 15 мг баклофена и 1 мг акмпрсата или плацебо дважды в день (утром и вечером); день 10: 15 мг баклофен и 1 мг акампрсата или плацебо утром.

2) Когнитивные тесты и электрофизиологические измерения.

Тесты, представленные ниже, позволяют оценить влияние композиций изобретения на память субъектов. Четыре когнитивных теста, разработанных Сод§1а1е®, и электрофизиологическое измерение когнитивных событийно-связанных потенциалов (ЕКР) использовали в течение всего данного испытания. Эти тесты проводили в день -1 (без введения лекарственного средства и плацебо), день 1 (через 6 ч

- 20 030385

после дозы), день 9 (перед дозой) и день 10 (через 6 ч после дозы). Что касается когнитивных тестов, то их результаты представлены в виде среднего изменения продуктивности между базовым уровнем и каждой временной точкой исследования. Такие тесты легко могут быть осуществлены на персональном компьютере.

a) Оценка характеристик активного внимания и зрительного внимания.

Идентификационный тест.

В предварительной задаче экранных инструкций спрашивается: "Является ли карта красной?" Руководитель теста читает полные инструкции субъекту из сценария руководителя теста. Для того чтобы начать задачу, руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет". Игральная карта появляется в центре экрана. Карта будет перевернута так, чтобы она находилась лицевой стороной вверх. Как только это происходит, субъект должен решить, является карта красной или нет. Если карта является красной, он/она должны нажать "Да", если карта не является красной, - он/она должны нажать "Нет".

Субъекты практикуются до тех пор, пока они не достигнут требуемого количества ответов или пока не истечет период тренировки. Затем появляются экранные инструкции для реального теста. Руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет" для начала реального теста.

Субъектам рекомендуется работать так быстро, как они могут, и быть точными, насколько это возможно. Например, субъекты должны попробовать не нажать либо кнопку "Да", либо кнопку "Нет", перед тем как карта будет перевернута. Если он/она сделают ошибку, они услышать звук ошибки. Определяется процент корректных ответов.

b) Визуальное обучение и память.

Тест обучения с одной картой.

Экранные инструкции перед задачей спрашивают: "Видели ли Вы эту карту ранее в этой задаче?" Руководитель теста читает полные инструкции субъекту из сценария руководителя теста. Для того чтобы начать задачу, руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет". Игральная карта появляется в центре экрана. Как только это происходит, субъект должен решить, появлялась ли такая же карта ранее в данной задаче. Следовательно, первый ответ всегда "Нет".

Каждый раз, когда появляется карта, субъекты должны решить, показывалась ли данная карта ранее в данной задаче, и ответить, нажимая кнопку "Да" или "Нет". Если дается неправильный ответ (например, "Нет" нажимается, когда карта была представлена ранее), слышится шум ошибки.

После окончания тренировки (требуемое количество ответов или окончание времени) экранные инструкции и руководитель теста говорят субъекту, что теперь начинается реальный тест. Руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет" для начала реального теста.

Субъектам рекомендуется работать так быстро, как они могут, и быть точными, насколько это возможно. Субъекту рекомендуется работать так быстро, как он может, или быть точным, насколько это возможно. Например, ему необходимо попробовать не нажимать кнопку "Да" или "Нет" перед тем, как карта будет перевернута, и запомнить все карты, которые были представлены в данной задаче. Если он сделает ошибку, то услышит звук ошибки.

Определяется процент корректных ответов.

c) Психомоторные функции и скорость обработки.

Задача обнаружения (ΌΕΤ).

Экранные инструкции перед задачей спрашивают: "Была ли перевернута данная карта?" Руководитель теста читает полные инструкции субъекту из сценария руководителя теста. Для того чтобы начать задачу, руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет". Игральная карта появляется в центре экрана. Карта будет перевернута так, чтобы она находилась лицевой стороной вверх. Как только это произойдет, субъект должен нажать кнопку "Да". Карта будет возвращена в колоду, и субъект должен нажать кнопку "Да", как только переворачивается следующая карта и т.д.

Субъекты практикуются до тех пор, пока они не достигнут требуемого количества ответов или пока не истечет период тренировки. Затем появляются экранные инструкции для реального теста. Руководитель теста или субъект должны нажать кнопку "Еи1ет" для начала реального теста.

Субъектам рекомендуется работать так быстро, как они могут, и быть точными, насколько это возможно. Субъекту рекомендуется работать так быстро, как он может, или быть точным, насколько это возможно. Например, ему необходимо попытаться не нажать кнопку "Да" до того, как карта перевернется. Если субъект делает это или не отвечает на карту, которая переворачивается с течением времени, он услышит звук ошибки.

Результаты выражены в виде среднего скорости продуктивности ((Ьши, среднее Ьод10 трансформированного времени реакции для правильных ответов).

б) Исполнительная функция и решение пространственной задачи.

Задача Гротона на обучение в лабиринте (СМЬТ).

Субъекту показывали сетку плиток 10x10 на компьютерном сенсорном экране. 28-шаговый путь скрыт среди этих 100 возможных локаций. Начало указано синей плиткой сверху слева, а финишная локация является плиткой с красными кругами внизу справа сетки. Субъект получал инструкции двигаться на один шаг от начального положения и затем продолжать, по одной плитке одновременно, по направле- 21 030385

нию к концу (вправо вниз).

Субъект двигается, трогая плитку рядом с его текущим расположением с помощью стилуса. После того как каждое движение сделано, компьютер указывает, является ли это правильным - появлением зеленой галочки (т.е. что это следующий шаг в пути) или неправильным - появлением красного креста (т.е. что это не следующий шаг в пути или субъект нарушил правило, см. ниже). Если выбор неправильный (т.е. появился красный крест), субъект должен притронуться к последнему правильному расположению (т.е. последней появившейся зеленой галочки) и затем выбрать другую плитку для продвижения к концу.

При движении через скрытый лабиринт субъекту требуется придерживаться двух правил. Вопервых, субъект не может двигаться диагонально или притрагиваться к одной и той же плитке дважды подряд. Во-вторых, субъект не может двигаться назад вдоль пути (например, двигаться обратно в локацию, которая демонстрирует зеленую отметку, но из которой он/она только что двинулись).

Если субъект выбирает плитку, которая не является частью скрытого пути, но выбор плитки проходит по правилам, это записывается как другой тип ошибки (например, не нарушение правила). Это может быть случайным (первый раз через лабиринт) или из-за неправильного запоминания пути последующих попыток.

Субъект изучает 28-шаговый путь через лабиринт на основании данного испытания и обратной связи по ошибкам. После завершения он возвращается к начальной локации и повторяют задачу, как правило, 4 и более раз, пытаясь запомнить путь, который он закончил.

Существует 20 удачно подобранных альтернативных форм для данной задачи, и их выбирают в псевдослучайном порядке для гарантии того, что ни один субъект не закончит один и тот же скрытый путь в ходе любых двух различных сессий тестирования на протяжении всего исследования.

Критериями, которые измеряются средствами теста СМЬТ для настоящего исследования, являются:

эффективность продуктивности: трк;

длительность задачи: биг:

общее количество ошибок: 1ег

рег (персеверация),

гег (ги1е Ьгеак еггогк ошибки нарушения правил),

1ег (разрешенные количества ошибок); количество правильных движений: сту; ге!ит Ю Неаб еггогк: ПН.

Данные из этих 4 когнитивных тестов (см. также а, Ь, с, б) анализируются каждый независимо и объединяются вместе в "суммарном" балле Содк!а!е®.

е) Внимание, отражающее сенсорное событие.

Связанные с событиями потенциалы мозга (ΕΚΡ).

ΕΚΡ имеют большое применение при оценке когнитивных процессов, потому что результаты не зависят от стимулов, которые используются, и потому что они обеспечивают информацию по обработке стимула, даже если никаких поведенческих изменений не заметно. Они часто рассматриваются как более субъективные тесты при сравнении с поведенческими когнитивными тестами.

Записи трех отведений в волосистой части головы (фронтальное: Ρζ, центральное: Сζ, теменное: Ρζ) собирали согласно международным стандартам 10/20 с помощью в качестве эталона двух связанных электродов, прикрепленных к правой и левой мочкам ушей (А1-А2). Когнитивная задача требует обратить внимание на нечетные стимулы и подсчитать их согласно конкретному протоколу.

Субъект подвергается случайной последовательности звуковых стимулов, и ΕΚΡ измеряют волны Ρ300, вызванной оддболл (с субкомпонентами задержки и амплитуды N200 и Ρ300), которые отражают внимание. Субъекты с нарушенной когнитивной деятельностью демонстрируют задержанные сигналы с меньшей амплитудой.

Данные, суммирующие баллы, для этих трех отведений даны в виде "суммарного" балла ΕΚΡ.

3) Результаты.

a) Валидационное исследование.

Экспериментальные параметры когнитивных поведенческих тестов были проверены путем сравнения результатов, полученных на необработанных возрастных и молодых когортах. Отмечено ясное различие в когнитивной деятельности между молодой когортой и возрастной когортой, как проиллюстрировано в ΌΕΤ-тесте, представленном на фиг. 5. Молодая когорта демонстрирует повышенную когнитивную деятельность по сравнению с возрастной когортой, что согласуется с нормальным возрастным снижением когнитивных способностей.

b) Комбинации изобретения эффективны при улучшении когнитивной деятельности у здоровых молодых субъектов.

Улучшения продуктивности в когнитивных тестах.

Было обнаружено, что комбинации изобретения эффективны при улучшении когнитивных функций у обрабатываемых здоровых молодых субъектов по сравнению с необработанными субъектами. Субъекты, обработанные баклофеном-акампросатом, демонстрируют улучшение их когнитивной результативности, что продемонстрировано в ΌΕΤ-тесте на фиг. 6; это улучшение длится в течение всей обработки.

- 22 030385

Улучшение памяти и связанных с памятью ментальных функций коррелирует с плазматическими концентрациями лекарственных средств.

Фармакодинамика баклофена и акампросата была установлена в рамках клинического испытания. "Время наступления максимальной концентрации в плазме" (Ттах) было определено как происходящее через 1,5-2 ч после введения для акампросата и 1,5 ч для баклофена. Вследствие этого можно считать, что Ттах комбинации составляет 1,5-2 ч после одновременного введения каждого лекарственного средства.

На 10 день лекарственная комбинация была введена, и тесты Содк1а1е® были проведены через 6 ч после введения лекарственных средств. Как показано на фиг. 7, наблюдается положительная и значимая корреляция (коэффициент корреляции Пирсона) между концентрациями в плазме акампросата (5 ч после введения лекарственного средства) с уровнем суммарного балла Содк1а1е®, зарегистрированного в молодой когорте (фиг. 7, коэффициент корреляции = 0,706; р-значение = 0,003).

Такая корреляция также наблюдалась при изучении электрофизиологического компонента памяти и связанных ментальных функций. Действительно, как представлено на фиг. 8 и 9, особенно значимая корреляция между концентрациями в плазме (коэффициент корреляции Пирсона) баклофена и акампросата через 1,5 ч после введения (что примерно соответствует Ттах) с соответствующим суммарным баллом задержек ЕКР (измеренным через 6 ч после введения лекарственных средств) наблюдалась на 10 день: концентрация в плазме обоих лекарственных средств положительно коррелирует с более короткими задержками ЕКР (для акампросата, фиг. 9, коэффициент корреляции = 0,735; р-значение = 0,002; для баклофена, фиг. 8, коэффициент корреляции = 0,57; р-значение = 0,027). Субъектами, демонстрирующими наилучшую эффективность, являются те, у которых через 1,5 ч наблюдалась более высокая концентрация в плазме.

Эти корреляции подчеркивают тот факт, что улучшение когнитивной продуктивности обработанных здоровых молодых субъектов фактически связано с композициями изобретения.

Поэтому вышеуказанные результаты демонстрируют эффективность комбинации баклофена и акампросата при улучшении когнитивной деятельности у здорового молодого субъекта.

В. Улучшение памяти и связанных функций у человека, подвергнутого химически индуцированному когнитивному нарушению.

Скополамин-индуцированное снижение когнитивных способностей является моделью, используемой для имитации дефицитов, которые могут быть индуцированы при экспонировании некоторых веществ. Как утверждалось выше для животных, это лекарственное средство индуцирует временное и обратимое когнитивное повреждение при введении волонтерам [34].

Когнитивная результативность субъектов тестируется с помощью когнитивного теста на обучение в лабиринте Гротона, как объяснено в части А.

1) График дозирования.

20 молодых здоровых мужчин-добровольцев в возрасте от 20 до 45 лет были вовлечены в исследование.

Осуществляли двустороннее перекрестное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Исследование имеет две различные части, каждая из которых состоит из 40 ч госпитализации с 7-дневным перерывом между ними в качестве периода очистки. Баклофен и акампросат вводят перорально и одновременно.

В качестве режима дозирования каждый субъект получал обработку пероральным путем: каждый субъект получал смесь баклофена (6 мг) и акампросата (0,4 мг) или плацебо, перорально,

подострым введением, дважды в день в день 1 и в виде одиночной дозы в тестовый день (день 2) при Н3, перед инъекцией скопаламина;

на день 2, Н3, осуществляли подкожную инъекцию 0,5 мг скопаламина.

2) План эксперимента.

Эффекты ослабленной познавательной способности исследовали путем измерения следующих признаков в тесте ОМЬТ:

эффективность продуктивности: трк; общее количество ошибок: 1ег; длительность задачи: бит.

Когнитивный тест Гротона на обучение в лабиринте проводили в день 1 (тренировка), и день 2 Н0, Н2.5, Н4, Н5.5, Н7 и Н9, и день 3 Н24.

3) Комбинация баклофена и акампросата улучшает когнитивный дефицит, индуцированный скополамином.

Схожие данные получены для каждого компонента трк, 1ег и бит теста ОМЬТ. Данные из теста на обучение в лабиринте Гротона (ОМЬТ) объединены вместе в "суммарном" балле ОМЬТ, который представлен на фиг. 10.

Известно, что скополамин действует уже через 30 мин после введения, и его эффект длится в течение примерно 6 ч. Его Ттах, как известно, составляет около 4 ч [34]. Эти данные соответствуют времен- 23 030385

ному коллапсу результативности в тесте СЛ11.Т, наблюдаемом у не подвергнутых обработке субъектов (фиг. 10, кружки, пунктирная линия).

Улучшение когнитивной результативности наблюдалось для субъектов, обработанных баклофеномакампросатом, по сравнению с субъектами, которым вводили плацебо. Улучшение особенно значимо во временной период около Н5,5, который соответствует Ттах баклофена и акампросата (фиг. 10, серая область).

Следовательно, композиция баклофена и акампросата является эффективной при противодействии нарушению когнитивных функций, индуцированному скополамином.

Комбинации изобретения, таким образом, являются эффективными при обращении нарушения памяти, являющейся результатом экспонирования токсинам или лекарственным веществам, нарушающим память.

Список литературы

1 Ьапш С, Ьепгкеп 8С, Разса1е А, ϋεΐ УессЫо I, КассЫ М, РхзТспа Р & Οονοηϊ δ

(2008) Οο§ηίίίοη епЬапсегз ΡεΕνεεη Ргеайпд апс1 άορίη§ 1Ье ιηίηά. Ркагтасо1о%гса1 гезеагск :

(ке ο/βάαΐ]оигпа1 о/(ке ΙίαΙΐαη Ркагтасо1о%гса1 8осге(у 57, 196-213.

2 Ва1агатап (2002) ΝοοίΓορίεδ. Ιηάΐαη Иоитсй о/Ркагтасо1о%у 34, 439.

3 ЗаЬаЫап Β.Ι & ΜοΓείη-ΖαιηΪΓ 8 (2011) №игое1Ыса115зиез ϊη εο§ηϊίϊνε епЬапсетей.

Иоита1 о/рзускоркагтасо1о£у (Οχβπά, Εηβαηά) 25, 197-204.

4 ϋϊιηοηά 81 & ΒΐΌΐηνετδ ЕМ (1976) Ысгеазе ϊη 1Ье ρον/ег оРЬитап тетогу ϊη погта1 тап 1Ьгои§Ь Йе изе оР 0ги§з. Рзускоркагтасо1оуу 49, 307-9.

5 ЫоогЪак АА, АкЬопбгадеЬ 8, Оауап-АзЬйаш К. & Атпм-МоозЬаЪасИ Н (1999)

Ркасерат ϊη РНе РгеаГтепР оР зсЫгорЬгета: 1трНсаПопз Рог РЬе §1иРатаРе ЬурорЬез1з оР зсЫгорЬгета. Аоигпа1 о/сИтса1 ркагтасу αηά (кегареиксз 24, 369-74.

6 НоРтапп 80, Рап§ А & ОиРпег СА (2013) Οο§ηΐΡΐνε епЬапсегз Рог РНе РгеаРтепР оР апх1о!у άϊδΟΓάεΓδ. КезЮгаИуе пеиго1о%у αηά пеигозсгепсе.

7 СЬо У\У, Κΐιη ϋΗ & Мо1атосН ОК (2011) ТЬе εΡΡεεί оР 1еуеР1гасеРат топоРЬегару оп зиЪ]есЙуе δίεερ циаНРу апЬ оЬ)есЙуе δίεερ рагатеРегз ϊη раОоп1з χνΐίΗ ерйерзу: сотрагед χνϊίΗ ίΗε εΡΡεεί оР сагЪатагерте-СК. топоРЬегару. Зеггиге: (ке βιίΓηαΙ о/ (ке Вггкзк ЕрИерзу АззосгаИоп 20, 336-9.

8 ΡίηΡο А & ЗапЬег 1\У (2003) ЕеуеР1гасеРат: а ηε\ν РЬегареиР1с орйоп Рог геРгасГогу ерЬерзу. 1п1ета(юпа1 )оигпа! о/сИтса1 ргасксе 57, 616-21.

9 ΜϋΙΙεΓ СА, ЗсЬаРег Μ, ЗсЬпе10ег 8, Не1тапп РРМ, ΗϊηζρεΐεΓ А, Уо1ктаг К, Рбг§ А,

ΡΙεΐηζ А & Нет I (2010) ЕРйсасу апс1 заРеРу оР 1еуеР1гасеРат Рог ойраОоп! а1соЬо1 0о1ох1р1са0оп. РкагтасорзусЫаку 43, 184-9.

10 КопбоЬ Т, Каппо Α, ΙίοΗ Н, ЯаказЫта М, Нопда К, Кодта М, Ыо§исЫ М,

Шкапе Н, ЫогаЫ Н, 8азак1 Н, Ш§а1 Т, Козак! К, Какее Ν, Окиуата Т, Рикиба М, 1кеЬа М,

8ЫЪа1а Υ & МописЫ Н (2011) ϋοηερεζίΐ 31§тйсай1у тргоуез аЬШйез ΐη ЬаПу Ιϊνεδ оР Решай ϋολνη зупбготе райейз ννϊΡΗ зеуеге εο§ηΐύνε траншей: а 24-\+еек гапЬопкгеЬ, ёоиЫе-ЬЬпд, р1асеЬо-сойго11еЬРпа1. 1п(егпаИопа1]оигпа1 о/рзусЫа(гу ΐη теАгсте 41, 71-89.

11 31асктап КЛУ & АУа1зЬ ТО (1994) ВасйРеп ргоЬисез 0озе-ге1аРеЬ \уогкт§ тетогу 1тра1гтейз айег тказерРа! т)есйоп. Векауюга1 апАпеига1 Ыо!о%у 61, 181-5.

12 ОгапЬе ЬА, Ьоезег ГО & 8атп А (2008) Кесиггей Ргапз1епР §1оЬа1 атпез1а χνΐίΗ тРгаРЬеса1 ЬасйРеп. Апез(кез1а αηά апа1%ез1а 106, 1284-7,1аЫе оР сойейз.

13 δεΗηείάεΓ и, \УоЫРагГЬ К, ЗсЬЫге-ВопЬаде А, Нааскег Т, Ми11ег-УаЫ КК, ΖεάΙεΓ М, Вескег Н, Оеп§1ег К. & ЕтпсЬ НМ (1999) ЕРРес1з оР асатргозаРе оп тетогу ίη ЬеаЬЬу уоип§ зй^есРз. Иоита! о/з(иАгез оп а1соко160, 172-5.

- 24 030385

14 ТаппепЬаит С, Радиеке А, НПтег 8, Но1гоуд-Ьес1ис 1 & СатаЬап К. (2012) А 5уз1етаПс τενίενν оГ атпезПс апс! поп-атпезПс тПд содпЫуе 1тра1гтеп1 тдисед Ьу ап11сЬо1тег£1с, апПЫз1атте, ОАВАегд1с апд ορϊοΐύ дгидз. Огиух & а§гп§ 29, 639-58.

15 ЕИтауег Р, АтЫоп ОЬ, С1етеп1 В & Тез1а В (2004) Ьеззопз 1еагпед Ггот тагке1ед апд 1пуезрдаропа1 ргодгидз. Лигпсй о/тесИсгпсй скетЕРу 47, 2393-404.

16 Веаитоп! К, \УеЬз1ег К., Оагдпег I & Оаск К (2003) ϋβ3ΐ§η оГ ез1ег ргодтдз ίο епЬапсе ога1 аЬзогрПоп оГ роог1у регтеаЫе сотроипдз: сЬаПепдез ίο Ле Лзсоуегу 3θίεηίΪ8ί. СиггеШ άηΐ£ теюЬоИзт 4, 461-85.

17 Не1тЬасЬ Т, ОЬ ϋΜ, Ы ЬУ, Кодп'диег-Ногпедо Ν, Оагта О & Р1е1зЬег ϋ (2003) Епгуте-тесПа1ес1 ргес1рИаПоп оГ рагеп! дгидз Ггот Леи рЬозрЬа1е ргодгидз. 1п1егпаИопа1 ]оигпа1 о/ркагтасеиИсз 261, 81-92.

18 Уапд СУ, ОаМг^д АН & РЫдеоп С (1999) 1п1ез1та1 реркде ИапзроЛ зуз1етз апд ога1 дгид ауаПаЬППу. Ркагтасеикса1 геяеагск 16, 1331-43.

19 31еГГапзеп В, №е1зеп СЫ, Вгодт В, Епкззоп АН, Апдегзеп К. & Ргок)аег 8 (2004) 1п1езПпа1 зо1и!е сатегз: ап ονεΓνίενν оГ кепдз апд зкаГед1ез Гог Ьпргоутд ога1 дгид аЬзогрПоп. Еигореап ]оита1 о/ ркагтасеиИссй хсгепсея: ο/ββίαΐ ]оигпа1 о/ 1ке Еигореап ЕедегаНоп/ог РкагтасеиИса1 Еаепсех 21, 3-16.

20 81е11а VI (2007) Ргос1ги§$: скаИеп^ех αηά ге\\>агсЕ. Зрппдег Зтдароге Ρίε. ЫтПед.

21 \СегтиЛ СО (2011) Тке РгасИсе о/МесИста1 СкетгхНу ΕΕενίεΓ δεΐεηεε.

22 ΡεζΓοη I, МИга АК, Оиууип 8 & Т1гиеЬега1 08 (2002) Ргодгид зка1ед1ез ϊη паза1 дгид деЬуегу. Ехрег1 Ορίηϊοη оп ТкегареиИс Ραίβηίχ 12, 331-340.

23 81е11а VI (2004) Ргодгидз аз ЛегареиРсз. Ехрег1 Ορίηϊοη оп ТкегареиИс Ра1еп1х 14, 277-280.

24 81е11а VI & Νίϊ-Аддае К\С (2007) Ргодгид з1га1ед1ез 1о оуегеоте роог \уа1ег зо1иЫН1у. Αάναηοβά Иги§ Ие1Еегу гечгемх 59, 677-94.

25 КосЬе ЕВ (1977) ϋβχίβη о/ ЫоркагтасеиИса1 ргорегПех 1кгои§к ргоИги§х αηά апа1о§х: а хутрохшт, Атепсап Р ТЬе Асадету, \УазЫпд1оп, ОС.

26 Ьа1 К., ЗикЬипЛегпд I, Та1 ЕНЬ, ирадЬуау 8, Уао Р, ХСаггеп М3, Ьио Ψ, Ви Ь, 1Чдиуеп 8, 2атога I, Репд О, О1аз Т, Вао У, ЬидМкозу М, РЬап Т, ЗсЬеиегтап КА, Уап Η, Оао М, \Уи рр, АппатаЫ Т, КаШагд ЗР, Ко11ег К, Оа11ор МА & Сипду КС (2009) АгЬас1оГеп р1асагЫ1, а ηονεί К-Ьас1оГеп ргодгид: тргоуед аЬзогрдоп, сЬзЫЬиЬоп, те1аЬоНзт, апд еНттаРоп ргорегРез сотрагед ννϊίΐι К.-Ьас1оГеп. Тке Лита1 о/ ркагтасо1оуу αηά ехрегкпеп1а1НгегареиПсх 330, 911-21.

27 Хи Р, Репд О, РЬап Τ, ϋίΐΐρ и, СЬеп 1Ь, СЬетоу-Кодап Т, 2Ьапд X, Оппдз1аГГ К, АппатаЫ Т, Ко11ег К, Оа11ор МА & \Уиз1гоА ΏΙ (2011) О1зсоуегу оГ а ηονεί ροΐεηΐ

- 25 030385

ОАВА(В) гесерЮг адошз!. Вюогуатс & тесИста1 скет'иРгу 1еПегз 21, 6582-5.

28 ЬеасЬ АК & Οίΐΐβί V.! Ап 1п1гос1исИоп ίο Скето Ш/огтаВсз (8рпп§ег-Уег1а§ Νε\ν Уогк 1пс, ед.).

29 Какшап 8А, ВазкГоп М, НоШдау ОЬ, ЗсЬгадег К & ТЬопйоп ΙΜ (2009) 8та11 Мо1еси1е ЗиЪдгарЬ Ое1ес1ог (3Μ3ϋ) 1оо1кк. άοκτηαΐ о/сЬетт/огтаВсз 1,12.

30 ЗкаЫ РН & ХУегтиШ СО (2008) РкагтасеиИса18αΙί$ \УПеу.

31 Напай К, Мозад 8, АЪоигИ К, №езз К & ЗраЬп-ЬапддЩк Η (2011) Вас1оГеп езГег апд сагЬата!е ргодгид сапд!да1ез: а зтикапеоиз скгота1о§гарЫс аззау, гезо1ийоп орйгшгед ννΐίΗ ЭгуЬаЬ. ,/оигпа! о/ркагтасеиИса1 αηά ЫотесИса1 апа1узВ: 56, 569-76.

32 ϋΕΜΒΕΚ \νΝ & ΡΟλνΕΕΚ Η (1958) Зрогкапеоиз акетайоп Ъекауюг.

Рзуско1оу1са1 ЪиНеВп 55, 412-28.

33 ϋε Вгит ΝΜν/1, РпскаеЛз I, Ьапде ШМ, Аккегтап 8, АпдпашЬе1озоп Е, ϋε Наап М, ν/упеп I, Уап ЭпттеКп М, Шззтк Е, Негрпк Ь & Кгизе СО (2010) 8ЬУ330, а саппаЫпоМ СВ1 гесерЮг аШадошз!, атекога1ез дейскз ίη Ше Т-таге, оЬ)ес1 гесодшйоп апд 8ос1а1 Кесодтйоп Тазкз ίη годеп1з. ХеигоЫоШуу о/1еагтп§ αηά тетогу 93, 522-31.

34 Зпудег ΡΙ, Ведпаг ММ, Сгошег Ж & Магий^- Р (2005) Кеуегза1 οί^- зсоро!аттетдисед дейсЬз ννίϋι а зт§1е дозе оГ доперегй, ап асе1у1сЬойпез1егазе хпЫЪИог. АДкегтег’з &

АетепИа: Ше]оигпа1 о/Ше АНкегтег'з АззосгаИоп 1, 126-35.

Claims (11)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Применение комбинации, содержащей (ί) баклофен и (ίί) акампросат или торасемид, или их солей или производных, обладающих по меньшей мере частью активности родительского лекарственного средства и индексом сходства Танимото больше чем 0,4 с родительским лекарственным средством, или их составов с замедленным высвобождением, для улучшения памяти и/или результативности связанных с памятью ментальных функций у здорового субъекта, не испытывающего состояния, которое поражает его память и/или связанные с памятью ментальные функции.
2. 2. Применение по п.1, при котором субъект не страдает от и не обладает известными признаками заболевания, выбранного из слабоумия, сенильного слабоумия, возрастного нарушения памяти, болезни Альцгеймера, болезни диффузных телец Леви или умеренных когнитивных нарушений.
3. 3. Применение по п.1 или 2, при котором связанные с памятью ментальные функции выбирают из обучаемости, способности логически мыслить, алертности, внимания, концентрации, обработки языковой информации и/или способности справляться с социально-профессиональной нагрузкой.
4. 4. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором память представляет собой кратковременную память и/или долговременную память.
5. 5. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором указанная комбинация дополнительно содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из метимазола, прилокаина, дифиллина, хинакрина, карбеноксолона, аминокапроновой кислоты, каберголина, диэтилкарбамазина, цинакальцета, циннаризина, эплеренона, фенолдопама, лефлуномида, левосимендана, сулодексида, тербинафина, зонисамида, этомидата, фенформина, триметазидина, мексилетина, ифенпродила, моксифлоксацина, бромокриптина или торасемида.
6. 6. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором указанная комбинация дополнительно содержит рацетам, выбранный из леветирацетама, пирацетама, прамирацетама, анирацетама или оксирацетама.
7. 7. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором указанные соединения составлены с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем.
8. 8. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором соединения составлены для введения вместе, отдельно или последовательно.
9. 9. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором соединения составлены для повторного введения субъекту.
10. 10. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором субъекту требуется временное стимулирование результативности памяти, обучаемости или алертности.
11. 11. Применение по любому из предыдущих пунктов, при котором субъект демонстрирует временную потерю памяти, вызванную гормональными изменениями.

    - 26 030385