EA029237B1

EA029237B1 - Вязкие смазки, содержащие хондроитин сульфат и производные гиалуроновой кислоты

Info

Publication number: EA029237B1
Application number: EA201401074A
Authority: EA
Inventors: Анна Мария Занеллато; Винченца Корса; Джанкарло Карпанезе; Моника КАМПИЗИ
Original assignee: Фидиа Фармачеутичи С.П.А.
Priority date: 2012-03-30
Filing date: 2013-03-27
Publication date: 2018-02-28
Also published as: SI2946782T1; CA2868078C; HRP20190131T1; EP2946782B1; TR201901472T4; CN104220078A; PL2946782T3; US10821131B2; US20170216344A1; ES2709799T3; CA2868078A1; ES2887581T3; EP2830636A1; EP3449927B1; US20150072954A1; EP2946782A3; ITPD20120098A1; EA201401074A1; EA201792023A2; EP3449927A1

Abstract

Изобретение относится к фармацевтическим составам, содержащим комбинацию заданных производных гиалуроновой кислоты с высокой молекулярной массой и хондроитинсульфата и использующимся для лечения остеоартрита, субхондральных поражений, остеопороза, синовита, теносиновита, тендинита, тендиноза, а также в качестве внутрисуставной промывочной жидкости и вязкого заменителя синовиальной жидкости после хирургического лечения остеохондральных поражений. Данные составы также применимы для лечения интерстициального цистита.

Description

029237

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим вязким смазкам, использующимся для лечения остеоартрита, субхондральных поражений, остеопороза, синовита, теносиновита, тендинита, тендиноза, интерстициального цистита, а также в качестве внутрисуставной промывочной жидкости и/или вязкого заменителя синовиальной жидкости после хирургического лечения остеохондральных поражений.

Уровень техники

Хрящевая основа содержит трехмерную структуру из молекул коллагена и сложных протеогликановых комплексов, которые, в свою очередь, состоят из опорной структуры на основе гиалуроновой кислоты (ГК), взаимодействующей с молекулами гликозаминогликанов (Г АГ), образующих нековалентную связь с полипептидными цепями, тем самым придавая хрящу биомеханические и вязкоупругие свойства.

Фактически ГК - это молекула, которая проявляет специфические вязкоупругие свойства, преимущественно синтезируется и секретируется синовиоцитами в суставной полости (Акай А. е! а1., АгсН Ηίδΐο1 Су!о1, 1995, 58(1):65-76) и по вышеуказанным причинам является одним из основных компонентов синовиальной жидкости, характеризующейся как вязкими, так и упругими свойствами в зависимости от количества и молекулярной массы (ММ) молекул ГК, содержащихся в ней.

Таким образом, вязкоупругие свойства синовиальной жидкости связаны с содержанием ГК в суставной полости, а концентрация ГК варьируется с возрастом: у людей старше 25 лет она уже начинает снижаться. Вязкоупругие свойства синовиальной жидкости можно определить количественно путем измерения модулей: первый модуль называется С' или модуль упругости, поскольку он представляет собой запас энергии, запасенной в ходе деформационной нагрузки на полисахарид, второй модуль определяется как С'' или модуль вязкости, он представляет собой рассеянную энергию, когда молекула находится под воздействием нагрузки. Вкратце, С' придает упругость синовиальной жидкости, в то время как С'' это коэффициент сопротивления трению между двумя поверхностями в суставе, т.е. сопротивления механическому воздействию, которое способно приводить к деформации суставных хрящей. Во время медленного движения ГК действует как вязкая смазка (свойство, придаваемое ей модулем С''), а во время быстрого движения благодаря упругим свойствам она предотвращает травмы или микротравмы, которым может подвергаться сустав.

Остеоартроз/остеоартрит (ОА) - в высокой степени инвалидизирующее заболевание, характеризующееся прогрессивной эрозией суставных хрящей из-за разрушения хрящевой основы и поражения клеточных компонентов.

Хорошо известно, что первоначальной причиной возникновения вышеуказанного заболевания может быть механический дисбаланс, которому подвержен сустав в целом.

Нестабильность сустава может быть, по существу, вызвана разными факторами (такими как травма, воспаление суставной системы, эрозия хряща, неправильная походка или осанка) и может приводить к изменению хрупкого равновесия между синтезом и разрушением внеклеточного матрикса, синтезируемого хондроцитами и синовиоцитами.

Когда такая ситуация идеального, но хрупкого гомеостаза нарушается, разрушение матрикса происходит интенсивнее, чем его синтез, в результате запускается медленный, но прогрессирующий процесс разрушения, который недостаточно компенсируется процессом синтеза, что приводит к потере хондроцитов.

Фактически чрезмерная и/или неправильная нагрузка на суставы может вызывать реакцию хондроцитов, выражающуюся в синтезе тех ферментов, которые отвечают за разрушение самого хряща (называемых металлопротеазой (матричной металлопротеазой - ММП)) и синтезируются хондроцитами при стимуляции последних воспалительными цитокинами, такими как 1Ь-1 и ΤΝΤ-а, которые генерируются и секретируются в суставную полость, особенно во время возникновения воспалительного заболевания, например, ОА. 1Ь-1 стимулирует синтез большого количества оксида азота и подавляет синтез протеогликанов со стороны самих хондроцитов (Όοζίη В. е! а1., Майтх Вю1о§у, 2002, 21:449-459). Воспаленный хрящ далее вырабатывает значительное количество СОХ-2, что, в свою очередь, обусловливает сверхсинтез и секрецию РСЕ 2 в суставной полости, что способствует обострению воспаления и, таким образом, приводит к повреждению хряща (Атт А. е! а1., 1. С1т 1пуез1, 1997, 99:1231).

При остром и хроническом воспалении и обширных дегенеративных процессах в суставах (ОА) концентрация и молекулярная масса (ММ) ГК в суставной синовиальной жидкости значительно уменьшаются, тем самым снижая смазывающую способность жидкости. Хорошо известно, что функциональные характеристики синовиальной жидкости зависят от концентрации и степени полимеризации ГК, изменение этих параметров может привести к повреждению тканей сустава, характерному для ОА.

Синовиальная жидкость в суставах, пораженных ОА, не может эффективно защищать синовиальную ткань и суставный хрящ от "неблагоприятных" механических воздействий, которым ежедневно подвергается сустав: в синовиальной жидкости без патологий уровень двух модулей обычно увеличивается с повышением частоты нагрузки - при низкой частоте преобладает вязкий компонент, при высокой частоте значение модуля упругости превышает значение модуля вязкости; в синовиальной жидкости суставов, пораженных ОА, наоборот, наблюдаются значительно более низкие значения С' и С" по сравнению с

- 1 029237

нормальными.

Обменные процессы ГК внутри синовиальной жидкости без патологий в целом проходят очень быстро, в то время как в жидкости сустава с АО наблюдается снижение концентрации ГК (связанное со снижением уровня САС), а также уменьшение ее ММ и резкое сокращение интенсивности обменного потока (Вак-ιζδ ЕА. е! а1., 1. ВНеитаЮ1 §ирр1, 1993, 12:75-82; Вс1сНсг С. е! а1., Аппа1з о£ Юс КБеита!Нс Όίδеазе, 1997, 56:299-307).

По этим причинам Балаж (Вак-ιζδ) первым предположил возможность изменения хода развития остеоартроза путем введения экзогенной ГК непосредственно внутрь суставной полости.

На фармацевтическом рынке в настоящее время доступны различные препараты для внутрисуставного введения ГК в пораженные ОА суставы, среди них: Нуа1даи® -очищенная ГК на основе целозии гребенчатой с ММ 5-7,3х10⁵ Да (И85925626), §уиу1зс® (Ну1ап С-Р 20) - ГК с поперечной межмолекулярной связью с формальдегидом и дивинил-сульфоном с ММ 6-7х10⁶ Да (И§ 4713448), Ατίζ® - ГК с ММ 6,2-1,2х10⁵ Да.

Консолидированные клинические данные показали, что вводимая внутрисуставно ГК в значительной степени выполняет функцию восстановления вязкости суставной жидкости, что улучшает функциональные способности конечности, пораженной ОА, с последующим уменьшением суставной боли.

ГК - это гетерополисахарид, состоящий из чередующихся остатков Ό-глюкуроновой кислоты и Νацетил-О-глюкозамина. Это линейный цепной полимер с ММ, варьирующейся от 50000 до 13х10⁶ Да в зависимости от источника, из которого она получена, и используемых способов изготовления. В природе она содержится в околоклеточной жидкости, в основном веществе соединительной ткани позвоночных организмов (в котором она является одним из главных компонентов), в синовиальной жидкости суставов, в стекловидном теле и пупочном канатике. Хорошо известно, что ГК посредством своего мембранного рецептора С.Н44 является модулятором многих разнообразных процессов, относящихся к клеточной физиологии и биологии, например, клеточной пролиферации, миграции, дифференциации и ангиогенеза, а также выполняет другие функции, такие как увлажнение тканей и смазывание суставов.

Недавно был проведен успешный эксперимент с внутрисуставным введением хондроитинсульфата (ХС) в качестве противовоспалительного вещества: это компонент матричных протеогликанов, в условиях отсутствия патологий он обеспечивает увлажнение хрящевой ткани и влияет на устойчивость при механическом сжатии; также была выявлена его способность снижать экспрессию ММП в хондроцитах суставов, пораженных ОА, и вызывать синтез ГК с высокой ММ в синовиальных фибробластах при ОА (ОауИ-РаоиШ М. е! а1., С1усоЫо1оду, 2009, 19:813-815).

Он представляет собой сульфатированный гликозамингликан, состоящий из дисахаридных цепей, которые, в свою очередь, состоят из Ν-ацетил-галактозамина и Ό-глюкуроновой кислоты, где большинство остатков галактозамина сульфированы в положениях 4 или 6 путем придания высокой анионной активности полисахаридам.

Также было доказано, что ХС способен снижать активность остеокластов, таким образом сокращая резорбцию костной ткани в целом и субхондральную резорбцию в частности - процесс, происходящий как на начальной, так и на окончательной стадии развития ОА; активирование остеокластов также имеет критическое значение при "транзиторном регионарном остеопорозе" - потенциально инвалидизирующем заболевании, обусловливающем очаговую остеопению и воспаление (Маззага А. е! а1., Кеитабзто, 2005, 57:5-15). Более того, при испытаниях ХС показал хорошие результаты в лечении таких воспалительных заболеваний, как синовит и тендинит (АНЮ ЬМ. е! а1., Аии Ркеит Όίδ, 2011, 70:982-989).

В отношении вышеупомянутых противовоспалительных свойств ХС был первоначально исследован в офтальмологической хирургии в сочетании с ГК с заданной ММ в составе водных буферных растворов с заданным массовым соотношением (и§ 6051560).

Исследования с применением ХС в сочетании с ГК с ММ в диапазоне от 500 до 700 кДа показали значительные успехи также во внутрисуставной терапии ОА I и II стадии, при этом массовая доля ГК составляла 4:3, в исследованиях использовался буферный раствор с фосфатом и хлористым натрием, общая окончательная вязкость составила от 68 до 115 сП (измерена при градиенте скорости 1 с^-1 при 25°С). В целом курс терапии составил 2-6 инъекций в течение периода терапевтической эффективности от 1 до 3 месяцев (ЕР 1443945).

В конечном итоге, изменения вязкости вязкоупругих жидкостей, состоящих из комбинации ХС и ГК, хорошо известны специалистам: результаты экспериментов показывают, насколько ХС повышает вязкость растворов ГК с низкой ММ (по сравнению с составами, содержащими только ГК в той же концентрации), несмотря на то, что сам ХС обладает очень низкой вязкостью, несущественной по сравнению с вязкостью ГК; однако модули С' и С'' растворов ГК после добавления ХС не изменяются (Νίδΐιίтига М. е! а1., ВюсЫтюа е! ВюрБузюа Ас!а, 1998, 1380:1-9).

Интерстициальный цистит - заболевание мочевого пузыря, проявляющее себя в болезненных или некомфортных ощущениях, частом мочеиспускании, боли в надлобковой области и хронической боли в тазовой области.

Несмотря на свое название, интерстициальный цистит значительно отличается от обычного цистита

- 2 029237

(вызываемого специфическими бактериями), симптомы этих заболеваний сходны, но в первом случае бактериальные инфекции отсутствуют и антибиотическая терапия оказывается неэффективной в его лечении.

Этиология интерстициального цистита неизвестна, полагают, что он вызван отсутствием гликозаминогликанов в слизистом слое, выстилающем мочевой пузырь. Изменение строения стенок мочевого пузыря на клеточном уровне подтверждается повреждением внутреннего эпителия, что вследствие контакта с кислотами в моче вызывает повышенную местную чувствительность нервной системы, регулирующую болевые ощущения, и увеличивает восприимчивость к позыву к мочеиспусканию.

На основании этой гипотезы был проведен курс клинического лечения, заключающийся во введении полисульфата пентозана, гепарина и гиалуроновой кислоты (Цистистат) в полость мочевого пузыря для восстановления и защиты внутреннего эпителия.

Раскрытие изобретения

Заявитель пришел к выводу о том, что теперь возможно преодолеть вышеупомянутые недостатки известных фармацевтических составов, благодаря составам по настоящему изобретению, содержащим комбинацию производных высокомолекулярной гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфата, наилучшим образом охарактеризованные в пунктах приложенной формулы настоящего изобретения, а также более детально описанные в подробном описании изобретения.

Краткий перечень чертежей

На фиг. 1 показаны значения модуля С" в Па в зависимости от ω в рад/с, испытания проводились с использованием веществ, указанных в примере 1.

На фиг. 2 показаны значения модулей С' и С'' в Па в зависимости от ω в рад/с, испытания проводились с использованием веществ, указанных в примере 2.

На фиг. 3 показаны значения модулей С' и С'' в Па в зависимости от ω в рад/с, испытания проводились с использованием веществ, указанных в примере 3.

На фиг. 4 показаны значения модулей С' и С'' в Па в зависимости от ω в рад/с, испытания проводились с использованием веществ, указанных в примере 4.

Осуществление изобретения

Предметом настоящего изобретения являются фармацевтические составы, содержащие ХС в сочетании с производными ГК, выбранными из следующих:

соль ГК и щелочных или щелочно-земельных металлов, со средней ММ от 1500 до 3000 кДа, предпочтительно от 2500 до 3000 кДа (ГК-ВММ (гиалуроновая кислота с высокой молекулярной массой); измерено перед процессом стерилизации, который может проводиться в соответствии со способами, известными в данной области);

ΗΥΆΌΌ®: амиды ГК с аминами алифатического, аралифатического, циклоалифатического, ароматического, циклического и гетероциклического ряда, с (молярной) степенью амидирования от 0,1 до 10% (способ определения - высокоэффективная жидкостная хроматография, НРЬС), предпочтительно амиды ГК с гексадециламином со степенью амидирования от 1 до 8% (ЕР 1095064);

О-сульфированные производные ГК 1-й степени сульфирования - ГКС1 (^095/25751Л1), где 1-я степень сульфирования означает среднее число сульфированных гидроксильных групп на одно полимерное звено гиалуроновой кислоты, т.е. повторяющееся звено дисахарида (Ό-глюкуроновая кислота и Νацетилглюкозамин);

АСР®: внутренние эфиры ГК (определяемые как ГК с внутренней поперечной молекулярной связью) со степенью эстерификации не выше 10%, предпочтительно со степенью эстерификации от 1 до 5% (ЕР 341745);

производные ГК, состоящие из смеси (ί) АСР® и (ίί) НВС (Ъуа1игошс ааб стоккйпкеб χνίΐΗ ΒΌΌΕ) ГК с поперечными сшивками с 1,4-бутандиол-диглицидил-эфиром (ΒΌΌΕ), при этом соотношение (ί)/(ίί) по массе составляет от 10:90 до 90:10, предпочтительное соотношение (ί)/(ίί) по массе - 25:75 (№О 2011/023355).

Эти новые фармацевтические составы проявляют реологические свойства, в корне отличающиеся от свойств начальных производных ГК, а также от свойств смесей ГК и ХС, описанных ранее и, следовательно, известных из уровня техники. Фактически, эти новые составы открывают важные изменения реологических свойств для модулей С' и С'' по сравнению с исходными производными при одинаковой концентрации и тех же условиях анализа.

Такой результат оказался совершенно неожиданным, поскольку, с другой стороны, данные (указанные выше), известные специалистам в данной области, свидетельствовали прямо и однозначно о том, что модули вязкости и упругости ГК при добавлении ХС остаются неизменными (МкЫтита М. е1 а1., Βίοскннса е1 ВюрНумса Ас1а. 1998, 1380: 1-9).

Результаты, полученные заявителем, напротив, показали, что комбинация ХС и ГКС 1-й степени сульфирования обеспечивает весьма значительное увеличение модуля вязкости С" нового фармацевтического состава ГКС1/ХС, придавая ему реологические свойства, характерные для веществ, повышающих вязкость синовиальной жидкости (более выраженные, чем у препарата Нуа1дап®, как показано да- 3 029237

лее), и в то же время синергетически связывает известные противовоспалительные свойства ХС и противовоспалительные способности ГКС1.

Что касается всех других вышеупомянутых производных ГК, их комбинирование с ХС (составы ΗΥΑΌΌ®/ΧΟ, АСР+НВС/ХС, АСР/ХС и ГК-ВММ/ХС) приводило к значительному снижению значения модуля упругости О', при этом модуль вязкости О" оставался неизменным: следовательно, новые фармацевтические составы проявляют реологические свойства, характерные для веществ, повышающих вязкость синовиальной жидкости, при этом элемент вязкости увеличивается пропорционально относительно начального производного; такой новый состав, соответственно, будет обладать большей устойчивостью к трению и более интенсивными способностями к смазыванию, а также одновременно проявлять как известные противовоспалительные свойства ХС, так и противовоспалительные свойства, присущие производным ГК. По этим причинам новые комбинации с производными ГК и ХС могут быть использованы как вязкое или местно-регионарное смазочное вещество для лечения и/или терапии следующих заболеваний путем его внутрисуставного введения:

ОА как на начальной, так и на хронической стадии, а значит, как в состоянии острого воспаления, так и хронического воспаления для обеспечения:

снижения степени воспаления сустава и, таким образом, повреждения хряща, благодаря совместному противовоспалительному действию производного ГК и ХС,

восстановления правильного функционирования синовиальной жидкости для улучшения способности амортизации механической нагрузки благодаря новому фармацевтическому составу, который в данном случае действует как вещество, повышающее вязкость синовиальной жидкости,

более вязкой смазки поверхностей сустава но, что более примечательно, большей способности самого сустава противостоять трению между поверхностями сустава; таким образом, новые составы способны замедлять развитие и/или лечить остеоартроз;

повреждение субхондральной кости, т.е. резорбция кости, вызванная активизацией деятельности остеокластов;

остеопороз, в частности "транзиторный регионарный остеопороз"; остеохондральные поражения вследствие травмы/микротравмы; синовит и теносиновит, тендинит и/или тендиноз;

интерстициальный цистит: в этом случае лечение состоит в капельном введении в мочевой пузырь выбранного состава, поскольку (на основании вышеописанных новых вязких свойств) новые составы проявляют более высокую способность сцепления со стенками мочевого пузыря по сравнению с исходными составами, тем самым обеспечивая защиту эпителия на длительный период времени и достижение лучших клинических результатов.

Заявитель приводит описание и испрашивает охрану для использования такого смазочного вещества в качестве высоковязкой внутрисуставной промывочной жидкости и в качестве вязкого заменителя синовиальной жидкости после хирургического лечения остеохондральных поражений (как, например, при артроскопии или восстановлении связок).

Таким образом, заявитель приводит описание и испрашивает охрану для новых вязких смазочных веществ, содержащих ХС в сочетании с вышеприведенными производными ГК, для использования во внутрисуставном или местно-регионарном лечении ОА, субхондральных поражений, транзиторного регионарного остеопороза, остеохондральных повреждений, в лечении синовита и теносиновита, тендинита и тендиноза.

Кроме того, заявитель испрашивает охрану для новой вязкой внутрисуставной промывочной жидкости и нового вязкого заменителя синовиальной жидкости, содержащих ХС в сочетании с вышеназванными производными ГК, для использования в ходе послеоперационного лечения в остеохондральной хирургии.

Терапевтическое лечение больше не требует единого общего курса из 2-6 инъекций в течение 1-3 месяцев, как известно в данной области; благодаря полученным реологическим и противовоспалительным свойствам существует возможность сократить дозировку до 1-2 инъекций в течение периода терапевтической эффективности, длящегося от 3 до 6 месяцев.

В заключение, заявитель приводит описание и испрашивает охрану для новых вязких фармацевтических составов, содержащих ХС в сочетании с вышеуказанными производными ГК (предпочтительно составами ГК-ВММ/ХС и ΗΥΑΌΌ®/ΧΟ), для использования в лечении интерстициального цистита путем введения препаратов внутрь мочевого пузыря.

ГК, используемая для получения заявленных производных, может происходить из разных источников, например, добываться путем экстракции из целозии гребенчатой (ЕР 138572), ферментации (например, из стрептококка, ЕР0716688) или биосинтеза (из палочковидных бактерий), т.е. известными для специалистов в этой области способами, и иметь среднюю ММ от 400 до 3000 кДа, в частности от 1500 до 3000 кДа и предпочтительно от 2500 до 3000 кДа для солей ГК и щелочных или щелочно-земельных металлов (ГК-ВММ), в частности от 500 до 750 кДа для приготовления производного ΗΥΑΌΌ® и в особенности для гексадециламида ГК со средней степенью амидирования от 1 до 8%, от 200 до 750 кДа для

- 4 029237

приготовления производного НВС, и от 150 до 300 кДа для АСР® и производного ГКС1.

Хондроитинсульфат, используемый в настоящем изобретении, имеет среднюю ММ от 10 до 80 кДа и в настоящее время производится способом экстракции из хрящей животных или рыб (акул и китов) (например, ХС, используемый в описанных далее экспериментах, был произведен компанией §е1кадаки Кодуо, Токио) и содержит как хондроитин 4-сульфат, так и 6-сульфат в соотношении, которое может изменяться в зависимости от характеристик исходного хряща, использованного для экстракции.

ХС добавляется к производному ГК и перемешивается в соотношении по массе производное ГК:ХС от 1:0,1 до 1:6 в зависимости от того, какое из производных было выбрано для приготовления нового фармацевтического состава, в частности, предпочтение отдается следующим соотношениям:

производное ГКС1:ХС - предпочтительно 1:2-1:6, наиболее предпочтительно 1:4; производное ΗΥΑΌΌ®:ΧΟ - предпочтительно 1:0,2-1:1; производное АСР®+НВС:ХС - предпочтительно 1:0,2-1:1,5; производное АСР®:ХС - предпочтительно 1:0,2-1:2;

производное ГК-ВММ:ХС - предпочтительно 1:0,5-1:2, наиболее предпочтительно 1:1.

Новый фармацевтический состав получен путем соединения ХС в порошке или предварительно подготовленном растворе с выбранным производным ГК, последний представлен также в порошковой форме или предварительно разведенным, т.е. в форме геля и/или раствора. В целом концентрация указанных активных ингредиентов, т.е. производного ГК и ХС, в окончательном составе для производного ГК обычно составляет от 10 до 30 мг/мл, предпочтительно от 15 до 20 мг/мл, а для ХС - от 10 до 40 мг/мл, предпочтительно от 20 до 30 мг/мл при общем содержании (в мл) производного ГК от 1 до 3 мл в сочетании с ХС в общем объеме также от 1 до 3 мл.

Два указанных компонента необходимо смешивать в течение такого времени, чтобы образовалась равномерная и однородная смесь, поэтому ее необходимо подвергнуть механическому перемешиванию при температуре от 25 до 80°С (в соответствии с выбранным соотношением и типом подготовленного производного) в течение периода времени от 1 до 24 ч; обычно максимум 8-10 ч для перемешивания достаточно.

В качестве альтернативного варианта заявитель приводит описание и испрашивает охрану для возможного сочетания двух компонентов (производного ГК и ХС) во время их использования, то есть непосредственно перед внутрисуставным, местно-регионарным или внутрипузырным введением, либо (как еще один альтернативный вариант) на отдельное введение обоих компонентов, которые комбинируются непосредственно в месте применения. Такой тип введения возможен при помощи специальных медицинских/хирургических приборов, которые дают возможность одновременного, но раздельного введения двух компонентов посредством одного устройства. Для таких случаев подготовка производных ГК и ХС выполняется отдельно, поскольку оба компонента смешиваются только непосредственно в месте применения.

Для вышеуказанных препаратов предпочтительно использовать буферные растворы, выбранные из следующих:

двухосновный фосфорно-кислый натрий и одноосновный фосфорно-кислый натрий, разведенные в воде с хлоридом натрия, либо обычный хлорид натрия, предпочтительно в концентрации физиологического раствора, при этом рН фармацевтического состава должен быть в пределах от 6,5 до 7,4, а осмотическая концентрация - от 100 до 350 мОс/л. После этого новые препараты с производными ГК/СХ подвергаются стерилизации в соответствии с известными в этой области способами.

Далее приводится неограничивающее описание некоторых примеров приготовления новых фармацевтических составов в соответствии с настоящим изобретением.

Иллюстративный пример 1: состав ГКС1/ХС - 1:4

Для данного эксперимента было использовано производное ГКС1, полученное согласно ЕР 702699 при использовании исходной ГК (в частности ее соли с тетрабутиламмонием) со средней ММ от 150 до 300 кДа.

ГКС1 в количестве 20 г растворили в 1 л водного буферного раствора с рН 7,4, содержащего одноосновный фосфорно-кислый натрий (0,05 г), двухосновный фосфорно-кислый натрий (0,6 г) и хлорид натрия (8,5 г). В получившийся раствор добавили 80 г ХС (производства 8е1кадаки Кодуо, Токио) с ММ 50-60 кДа, после чего смесь подвергли механическому перемешиванию при температуре 40°С в течение 1 ч до полного и однородного растворения обоих компонентов.

Смесь охладили до комнатной температуры, после этого при температуре 20°С посредством реометра ТНегто Нааке Матз II определили модули смеси.

Значения измерялись в Па при частотах от 0,01 до 100 рад/с и фиксированном уровне нагрузки 10%. Все образцы обрабатывали при помощи программного обеспечения Нааке КНеодап 1оЬ Мападег 4.0.

Результаты: на фиг. 1 видно, что модуль вязкости О" смеси ГКС1/ХС в пределах исследованной частоты был значительно выше модуля О'' для исходного производного ГКС1. Модуль вязкости нового состава оказался выше, чем О'' синовиальной жидкости у пациентов с АО (см. Ва1а/5 Ε., ίη О|5огбег5 оГ 1Не кпее, 1974, 63-75), и чем О'' контрольного вещества, повышающего вязкость синовиальной жидкости

- 5 029237

(Нуа1дап®), - для всех исследованных частот, тем самым проявляя удивительную и совершенно неожиданную реологическую картину (характерную для синовиальной жидкости), которая изначально не была выявлена для производного ГКС1 (до его сочетания с ХС).

Пример 2: состав ΗΥΛΌΌ®/ΧΟ - 1:1

Для данного эксперимента использовался гексадециламид ГК (ΗΥ АИИ) со средней степенью амидирования 5%, полученный согласно ЕР 1095064 с использованием исходной ГК со средней ММ от 500 до 750 кДа.

ΗΥΛΏΌ в количестве 8 г растворили в 1 л водного буферного раствора с рН 7,0, содержащего одноосновный фосфорно-кислый натрий (0,11 г), двухосновный фосфорно-кислый натрий (0,45 г) и хлорид натрия (8,5 г). В раствор добавили 8 г ХС (производства 8е1кадаки Кодуо, Токио) с ММ от 50 до 60 кДа, смесь подвергли механическому перемешиванию при температуре 60°С в течение 10-12 ч до полного и однородного растворения обоих компонентов.

Смесь охладили до комнатной температуры, после этого при температуре 20°С посредством реометра ТНегто Нааке Магк II определили модули смеси.

Значения измерялись в Па при частоте от 0,01 до 100 рад/с и фиксированном уровне нагрузки 10%.

Все образцы обрабатывали при помощи программного обеспечения Нааке КНеоуш 1оЬ Мападег 4.0.

Результаты: на фиг. 2 видно, что модуль упругости С' нового состава значительно снижается, в то время как модуль вязкости С'' в основном остается неизменным.

Иллюстративный пример 3: состав АСР®+НВС/ХС - 1:1

Для данного эксперимента для получения 1 л геля, содержащего 25 г АСР+НВС, использовали производное АСР+НВС, полученное в соответствии с примером 12 в АО 2011/023355. После этого в гель добавили 25 г ХС (производства 8е1кадаки Кодуо, Токио) с ММ от 50 до 60 кДа, смесь подвергли механическому перемешиванию при температуре 40°С в течение 1 ч до полного и однородного растворения обоих компонентов.

Результаты: на фиг. 3 видно, что модуль упругости С' нового состава значительно снижается, в то время как модуль вязкости С'', по существу, остается неизменным.

Иллюстративный пример 4: состав ГК-ВММ/ХС - 1:1.

Для данного эксперимента использовали натриевую соль производного ГК-ВММ со средней ММ от 2500 до 3000 кДа, полученного согласно ЕР 0716688.

ГК-ВММ в количестве 20 г растворили в 1 л водного буфера с рН 7,4, содержащего одноосновный фосфорно-кислый натрий (0,05 г), двухосновный фосфорно-кислый натрий (0,6 г) и хлорид натрия (8,5 г). К раствору добавили 20 г ХС (производства 8е1кадаки Кодуо, Токио) с ММ от 50 до 60 кДа, смесь подвергли механическому перемешиванию при температуре 40°С в течение 8 ч до полного и однородного растворения обоих компонентов.

Значения измерялись в Па при частоте от 0,01 до 100 рад/с и фиксированном уровне нагрузки 10%. Все образцы обрабатывали при помощи программного обеспечения Нааке КНеоуш 1оЬ Мападег 4.0.

Результаты: на фиг. 4 видно, что модуль упругости С' нового состава значительно снижается, в то время как модуль вязкости С'' остается неизменным.

Заключение: как указано выше, экспериментальные данные подтверждают, что комбинация ХС с вышеперечисленными испытанными производными ГК приводит к неожиданному снижению модуля упругости в новых составах по сравнению с соответствующими значениями модуля в исходных производных, также подвергнутых анализу, при этом одновременно происходит значительное увеличение модуля вязкости (для некоторых составов, при приготовлении которых использовались определенные производные, как, например, ГКС1) или сохранение упомянутого модуля С'' в целом на том же уровне по сравнению с модулем вязкости исходных производных ГК. Таким образом, были получены фармацевтические составы с реологическими свойствами, характерными для веществ, повышающих вязкость синовиальной жидкости, при этом вязкий компонент увеличивается пропорционально относительно исходного производного. Соответственно, такая комбинация способна обеспечить большую устойчивость к трению, а также большую смазывающую способность для сустава, поэтому ее можно использовать как вязкую смазку, сочетающую в себе высокие противовоспалительные характеристики ХС и противовоспалительные свойства производных ГК, как описано ранее. По этим причинам новые составы можно применять для лечения и/или терапии вышеперечисленных заболеваний, например, для внутрисуставной терапии при ОА и разрушении субхондральной кости, в местно-регионарном лечении и/или терапии таких заболеваний, как остеопороз, в особенности транзиторный регионарный остеопороз, и, наконец, в качестве промывочной жидкости, а значит, как заменитель синовиальной жидкости после хирургического

- 6 029237

лечения остеохондральных поражений.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Вязкие смазки, содержащие хондроитинсульфат (ХС) в сочетании с производными гиалуроновой кислоты (ГК), представляющими собой гексадециламиды ГК со степенью амидирования от 0,1 до 10%, для использования во внутрисуставном или местно-регионарном лечении расстройств и/или заболеваний, выбранных из группы, в которую входят остеоартроз, субхондральные поражения, остеопороз, остеохондральные поражения вследствие травмы/микротравмы, синовит и теносиновит, тендинит и/или тендиноз.
2. Вязкие смазки, содержащие хондроитинсульфат (ХС) в сочетании с производными гиалуроновой кислоты (ГК), представляющими собой гексадециламиды ГК со степенью амидирования от 0,1 до 10%, для использования в качестве высоковязкой внутрисуставной промывочной жидкости или вязкого заменителя синовиальной жидкости после хирургического лечения остеохондральных поражений.
3. Вязкие смазки по п.1 или 2, в которых гексадециламид ГК получен из ГК со средней молекулярной массой от 500 до 750 кДа и имеет среднюю степень амидирования от 1 до 8%, а ХС добавлен к гексадециламиду ГК в соотношении по массе производного ГК от 1:0,1 до 1:6, предпочтительно от 1:0,2 до 1:1.
4. Вязкие фармацевтические составы, содержащие хондроитинсульфат (ХС) в сочетании с производными гиалуроновой кислоты (ГК), представляющими собой гексадециламиды ГК со степенью амидирования от 0,1 до 10%, для использования в лечении интерстициального цистита путем введения внутрь мочевого пузыря.
5. Вязкие фармацевтические составы по п.4, в которых производное ГК имеет среднюю молекулярную массу от 500 до 750 кДа, а гексадециламид имеет среднюю степень амидирования от 1 до 8%.
6. Вязкие смазки по любому из пп.1-3, содержащие буферный раствор, выбранный из следующих: двухосновный фосфорно-кислый натрий и одноосновный фосфорно-кислый натрий, разведенные в

водном растворе хлорида натрия в концентрации физиологического раствора, с рН от 6,5 до 7,4 и осмотической концентрацией от 100 до 350 мОс/л;

хлорид натрия в концентрации физиологического раствора с рН от 6,5 до 7,4 и осмотической концентрацией от 100 до 350 мОс/л.
7. Вязкие фармацевтические составы по любому из пп.4 и 5, содержащие буферный раствор, выбранный из следующих:

двухосновный фосфорно-кислый натрий и одноосновный фосфорно-кислый натрий, разведенные в водном растворе хлорида натрия в концентрации физиологического раствора, с рН от 6,5 до 7,4 и осмотической концентрацией от 100 до 350 мОс/л;

хлорид натрия в концентрации физиологического раствора с рН от 6,5 до 7,4 и осмотической концентрацией от 100 до 350 мОс/л.

- 7 029237

С и С" (Па)

АСР+НАВ/ХС

......-ЙГ......С" АСР+НВС

..........Ή........0' АСР+НАВ/ХС

АСР+НВС