EA028015B1 - Пробиотические штаммы для улучшения состояния кишечной нервной системы - Google Patents
Пробиотические штаммы для улучшения состояния кишечной нервной системы Download PDFInfo
- Publication number
- EA028015B1 EA028015B1 EA201291441A EA201291441A EA028015B1 EA 028015 B1 EA028015 B1 EA 028015B1 EA 201291441 A EA201291441 A EA 201291441A EA 201291441 A EA201291441 A EA 201291441A EA 028015 B1 EA028015 B1 EA 028015B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- intestinal
- nervous system
- levels
- strains
- group
- Prior art date
Links
- 210000000105 enteric nervous system Anatomy 0.000 title abstract 2
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title description 7
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title description 7
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 51
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 73
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 53
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 36
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 claims description 36
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 35
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 24
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 21
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 17
- 102000055135 Vasoactive Intestinal Peptide Human genes 0.000 claims description 12
- 108010003205 Vasoactive Intestinal Peptide Proteins 0.000 claims description 12
- 101000652292 Homo sapiens Serotonin N-acetyltransferase Proteins 0.000 claims description 11
- 102100030547 Serotonin N-acetyltransferase Human genes 0.000 claims description 11
- VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N invicorp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 8
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 4
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims description 2
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 claims 3
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 claims 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims 3
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 claims 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 claims 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 46
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 44
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 abstract description 22
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 22
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 22
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 abstract description 8
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 41
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 36
- 102100023460 Choline O-acetyltransferase Human genes 0.000 description 29
- 101150054987 ChAT gene Proteins 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 21
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 19
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 19
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 17
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 13
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 13
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 13
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 13
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 12
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 12
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 11
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 11
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 6
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 6
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 6
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 6
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 6
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 6
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 5
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 5
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 4
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 4
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 4
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 4
- 210000000470 submucous plexus Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- 235000014268 sports nutrition Nutrition 0.000 description 3
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010058699 Choline O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 2
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 2
- 102000002808 Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide Human genes 0.000 description 2
- 108010004684 Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide Proteins 0.000 description 2
- 102400000096 Substance P Human genes 0.000 description 2
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 2
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 2
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 210000000268 efferent neuron Anatomy 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000007358 intestinal barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000005026 intestinal epithelial barrier Anatomy 0.000 description 2
- 230000003870 intestinal permeability Effects 0.000 description 2
- 230000036640 muscle relaxation Effects 0.000 description 2
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QEQDLKUMPUDNPG-UHFFFAOYSA-N 2-(7-amino-4-methyl-2-oxochromen-3-yl)acetic acid Chemical compound C1=C(N)C=CC2=C1OC(=O)C(CC(O)=O)=C2C QEQDLKUMPUDNPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000014415 Muscarinic acetylcholine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050003473 Muscarinic acetylcholine receptor Proteins 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- NUNTWTCLCRXIIP-UHFFFAOYSA-N [N].[O-][N+]#N Chemical compound [N].[O-][N+]#N NUNTWTCLCRXIIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 210000003766 afferent neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000008993 bowel inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940121376 cannabinoid receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000003537 cannabinoid receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 210000002932 cholinergic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 239000004020 conductor Substances 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000003086 effect on acetylcholine Effects 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 235000021121 fermented vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- 230000005176 gastrointestinal motility Effects 0.000 description 1
- 210000005095 gastrointestinal system Anatomy 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 210000001153 interneuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000000111 lower esophageal sphincter Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003183 myoelectrical effect Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000003401 opiate antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000036378 peristaltic reflex Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002243 primary neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 230000004648 relaxation of smooth muscle Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012106 screening analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000016160 smooth muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 210000003384 transverse colon Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/10—Laxatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению молочнокислых бактерий для применения при модификации кишечной нервной системы и, предпочтительнее, при лечении и/или профилактике кишечных расстройств, таких как запор и/или болезни раздраженной кишки.
Description
Изобретение относится к композициям, содержащим штаммы молочнокислых бактерий, для применения при модификации кишечной нервной системы. Такие композиции, в частности, подходят для лечения и/или профилактики кишечных расстройств, таких как запор и/или болезнь раздраженной кишки.
Предпосылки изобретения
Синдром раздраженной кишки (ΙΒδ) или спастическая толстая кишка представляет собой функциональное кишечное расстройство, характеризуемое хронической болью в брюшной полости, дискомфортом, метеоризмом и изменением функции опорожнения кишечника в отсутствие какой-либо выявляемой органической причины. В некоторых случаях сообщалось о воспалении кишечника низкой степени. Могут преобладать диарея или запор, или они могут чередоваться (классифицируясь, соответственно, как ΙΒδ-Ό и ΙΒδ-С). ΙΒδ может начаться после инфекции (постинфекционный ΙΒδ-ΡΙ), вызывающей стресс жизненного события или начала созревания организма без каких-либо других медицинских показателей. При ΙΒδ обычные клинические тесты не выявляют отклонений от нормы, хотя кишечник может быть более чувствительным к определенным раздражителям, таким как тестирование с раздуванием баллона.
ΙΒδ представляет собой очень распространенное состояние, поражающее приблизительно 15% населения в любое время. Этим состоянием страдают примерно вдвое больше женщин, чем мужчин. ΙΒδ является источником хронической боли, усталости и других симптомов, и он увеличивает расходы пациента на лечение и связан с периодической потерей трудоспособности. Исследователи сообщили, что высокое распространение ΙΒδ в сочетании с увеличением затрат дает заболевание с высокими социальными затратами. Он также рассматривается как хроническое заболевание и может существенно повлиять на качество жизни страдающего заболеванием индивида.
Ведущей теорией относительно причины ΙΒδ относится к кишечной нервной системе (КНС). Кишечная нервная система (КНС) представляет собой подраздел периферической нервной системы (ПНС), причем КНС непосредственно регулирует желудочно-кишечные (ЖК) функции и залита в выстилку желудочно-кишечной системы. КНС включает эфферентные нейроны, афферентные нейроны и интернейроны. Структурное и физиологическое функционирование КНС осуществляется глиальными клетками (астроцитами). КНС организована в два основных сплетения, играющими функциональные специфические роли.
Миентерическое сплетение, локализующееся между продольной и циркулярной мышцей, содержит нейроны, главным образом участвующие в регуляции кишечной моторики. Посредством кишечных мышц эфферентные или двигательные нейроны регулируют перистальтику и смешивание кишечного содержимого. Двигательные нейроны, регулирующие моторику, составлены из двух основных классов:
возбуждающие миентерические нейроны, освобождающие ацетилхолин (именуемые холинацетилтрансферазо-иммунореактивные нейроны (СНАТ-ΙΚ или СНАТ или СНАТ нейроны или СНАТ нервы) и/или субстанцию Р (δΡ) для сокращений, и ингибиторные миентерические нейроны, освобождающие оксид азота (идентифицируемые как нейроны синтазы оксида азота (ΝΟδ-ΙΚ)) и/или вазоактивый кишечный пептид (νΙΡ) для расслабления.
Холинацетилтрансфераза ЕС 2.3.1.6 представляет собой фермент, который синтезируется внутри тела нейрона и переносится в нервное окончание. Ролью СНАТ является соединение Ацетил-СоА с холином, что приводит к образованию нейромедиатора ацетилхолина. Экспериментально, эффект на продукцию ацетилхолина экстраполируется из определения числа СНАТ нейронов, обычно, увеличение числа СНАТ нервом является показателем увеличения содержания ацетилхолина.
Подслизистое сплетение, локализующееся между круговой мышцей и слизистой оболочкой, содержит нейроны, участвующие в регуляции функций кишечного эпителиального барьера (ΙΕΒ), таких как околоклеточная проницаемость, в частности активация кишечных нейронов в подслизистом сплетении уменьшает околоклеточную проницаемость посредством освобождения νΙΡ, тогда как ацетилхолин (АсН) увеличивает околоклеточную проницаемость, устанавливая основу тонкой настройки проницаемости ΙΕΒ ΕΝδ. Таким образом, относительно нейронной регуляции околоклеточной проницаемости увеличение освобождения νΙΡ подслизистыми нейронами увеличивает целостность ΙΕΒ, в то время как увеличение содержания СНАТ нейронов в подслизистом сплетении уменьшает сопротивление ΙΕΒ.
Хотя в настоящее время нет способов излечения ΙΒδ, существуют способы лечения, которые направлены на попытку облегчения симптомов, включая подбор рациона, медикаментозную терапию и психологические вмешательства.
Сообщается, что пробиотики, в частности штаммы молочнокислых бактерий, благоприятны при лечении и/или профилактике ΙΒδ. Примерами таких сообщений являются Международные патенты νθ 2007/036230, νθ 03/010297 и νθ 2009/080800. Однако бактериальные штаммы выбираются по их воздействию на иммунную систему, на кишечную проницаемость или на кишечную микрофлору, а не по их воздействию на улучшение функции ΕΝδ. В Международном патенте νθ 2008/064489 описано применение пробиотиков для блокировки вызванной кальций-зависимым током калия промежуточной проводимости, приводящей к противовоспалительному эффекту. В Международном патенте νθ 2007/132359 описано применение Ьас1оЬасй1и5 и агониста каннабиноидных рецепторов и/или антагониста опиоидных
- 1 028015 рецепторов в связи с восприятием боли. В Международном патенте \УО 2006/032542 описано применение Ьас1оЬасШи5 в целях анальгезии. В публикации Катт с1 а1., 2004, ΝοπΓΟβαδίΓοίηΙοδΙ. Μοΐίΐ 16: 53-60 описаны эффекты §.Ьои1агйн на уменьшение содержания калбиндина-28 к (САЬВ), но не других нейронных маркеров тощей кишки свиней. В публикации МсЦщпасНик с1 а1., 2006, РсщуспаЦоп Кек. 9: 342-345 указано, что симбиотический препарат, действующий на моторику тонкого и толстого кишечника у старых крыс линии ^1к1аг, значительно увеличивал миоэлектрическую активность тонкого кишечника и ободочной кишки, вызывал увеличенную экспрессию мРНК νΐΡ, но не оказывал значимого эффекта на концентрацию νΐΡ.
Поэтому требуется дополнительное исследование отдельных штаммов пробиотических бактерий с благоприятным эффектом на ΕΝδ для применения при ΙΒδ, запоре и/или других расстройствах.
Краткое изложение сущности изобретения
Заявители использовали новую модельную систему для скрининга и выбора штаммов молочнокислых бактерий и бифидобактерий, которые оказывают улучшенный эффект на кишечную нервную систему (ΕΝδ). Эта модель содержит (моно)слой кишечных эпителиальных клеток из карциномы ободочной кишки человека и на базолатеральной стороне монослоя - смесь первичной культуры клеток кишечной нервной системы, включающих нейроны из миентерического и подслизистого сплетения. Используя эту модель, можно оценить эффекты пищевых компонентов, в частности штаммов молочнокислых бактерий и бифидобактерий, на ΕΝδ измерением эффектов апикального или просветного добавления этих компонентов на экспрессию вазоинтестинального пептида (νΐΡ) и/или нервов, высвобождающих СНАТ, на базолатеральной стороне.
Поэтому данная модель позволила провести скрининг и выбрать новые штаммы молочнокислых бактерий и бифидобактерий для применения при улучшении функции кишечной нервной системы. Такие штаммы улучшают кишечную моторику и перистальтику. Некоторыми штаммами может быть уменьшено время прохождения по кишечнику, что может быть направлено на лечение некоторых состояний, таких как запор. Некоторыми штаммами время прохождения по кишечнику может быть увеличено, что может быть направлено на лечение некоторых состояний, таких как диарея. Штаммы, увеличивающие содержание νΐΡ, также улучшают целостность кишечного эпителиального барьера. Такие штаммы особенно полезны и более эффективны, чем существующие штаммы, при профилактике и/или лечении ΐΒδ и/или запора и других расстройств, связанных со сниженной функцией ΕΝδ.
Увеличение холинергического фенотипа, в частности экспрессии СНАТ нейронов, представляет терапевтический интерес при патологических состояниях ЖК тракта, связанных с ингибированием время прохождения по ободочной кишке. Применение молочнокислых бактерий или бифидобактерий, выбранных для оказания увеличивающегося эффекта на повышение холинергической экспрессии, т.е. СНАТ в нейронах представляют терапевтический интерес для пациентов с запором и пациентов, страдающих ΐΒδ-С. Поэтому одна группа штаммов молочнокислых бактерий или бифидобактерий по настоящему изобретению преимущественно увеличивает число СНАТ нервов, что указывает на улучшенный эффект на кишечную моторику и особенно благоприятно для пациентов с ΐΒδ, в частности пациентов с ΐΒδ-С и пациентов, страдающих запором. Эта группа именуется группой В). Хорошая моторика требует высокого числа СНАТ нервов, которые ответственны за сокращение, и оказывают прокинетический эффект. В некоторых интересных вариантах осуществления для этой группы уровни ТЕЕК не уменьшаются, поскольку функция ΐΕΒ и способность расслаблять мышцы предпочтительно не нарушается. Подгруппа в соответствии с этими вариантами осуществления именуется группой Β3).
Увеличение уровня νΐΡ благоприятно улучшает расслабление мышц ЖК тракта и улучшает ΐΕΒ, что благоприятно для пациентов, страдающих ΐΒδ или воспалительным кишечным заболеванием (ΐΒΌ), а также для пожилых людей, маленьких детей и людей, страдающих ожирением. Для таких индивидов хорошая функция ΐΕΒ предпочтительнее или даже играет основную роль. Хотя у пациентов, страдающих ΐΒδ или ΐΒΌ, имеется избыточная секреция нейропептидов, таких как νΐΡ, предполагается, что это адаптивная реакция ΕΝδ для контроля над кишечным воспалением для восстановления кишечных барьерных функций и для увеличения нейропротекции. Группа продуцирующих молочную кислоту штаммов бактерий, в частности бифидобактерий, по настоящему изобретению преимущественно увеличивает уровень νΐΡ. Эта группа именуется группой А). В одном варианте осуществления уровень СНАТ не увеличен. Группа в соответствии с этим вариантом осуществления именуется группой А3). Соответственно, уровень СНАТ может оставаться, по существу, неизменным или может уменьшаться.
Все бактериальные штаммы, приведенные в настоящем описании, были депонированы в соответствии с указанным выше Будапештским договором, в СЫСМ (СоПссОоп №Цюпа1е бе СиНигек бе Мюгоогдашктск (Национальной Коллекции культур микроорганизмов), 25 гие би Оос1еиг Коих, Банк) в качестве Международного уполномоченного депозитария.
Штаммы, обнаруженные способом скрининга, относились к группе В) и представляют собой ΌΝ_154_0067 (СЫСМ ΐ-4320, депонированный 19 мая 2010 г.), ΌΝ_116_0047 (ΌΝϋΜ ΐ-4317, депонированный 19 мая 2010 г.) и ΌΝ_119_0118 (СЫСМ ΐ-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.). Штаммы, относящиеся к группе А), представляют собой ΌΝ_173_010 (СИСМ ΐ-2494, депонированный 20 июня 2000 г.), ΌΝ_156_0032 (СЫСМ ΐ-4321, депонированный 19 мая 2010 г.), ΌΝ_156_007 (СЫСМ ΐ-2219, де- 2 028015 понированный 31 мая 1999 г.) и ΌΝ_121_03 04 (СЫСМ 1-4318, депонированный 19 мая 2010 г.). Штамм ΌΝ_173_010 (СNСМ Σ-2494, депонированный 20 июня 2000 г.) был описан в Международной патентной заявке \УО 02/02800 и штамм ΌΝ_156_007 (СNСМ 1-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) был описан в Международной патентной заявке \УО 01/01785.
Поэтому композиции, содержащие по меньшей мере один из этих выбранных штаммов, являются частью изобретения. Предпочтительна композиция, содержащая смесь по меньшей мере одного штамма, относящегося к группе В), и по меньшей мере один штамм, относящийся к группе А). Такая смесь преимущественно оказывает улучшенный эффект на моторику улучшением и сокращений, и расслаблений, и дополнительно оказывает преимущественный эффект на функцию ΙΕΒ.
Таким образом, в соответствии с одним аспектом изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере один штамм бактерий, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий, для применения при:
А) увеличении уровней вазоактивного кишечного пептида шстеакшд (УГР) кишечной нервной системы, или
Β) увеличении уровней иммунореактивных нейронов под воздействием холинацетилтрансферазы (СНЛТ) кишечной нервной системы, или
С) уменьшении уровней СНЛТ кишечной нервной системы.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ Ι-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СЫСМ Ι-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ Ι-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированный 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированный 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)], для применения при лечении и/или профилактике кишечного расстройства, предпочтительно лечении и/или профилактике расстройства кишечной моторики, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΙΒδ-С, лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, кишечной инфекции, ΙΒδ-Ό, ΙΒδ-ΡΙ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΙΒδ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройства, обнаруживаемого у пожилых людей, маленьких детей или людей, страдающих ожирением.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ Ι-4321, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СЫСМ Ι-2219, депонированного 31 мая 1999 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ Ι-4318, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированного 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)], для использования при введении индивидам, страдающим расстройством, выбранным из группы, состоящей из запора, ΙΒδ-С, диареи, кишечной инфекции, ΤΒδ-Ό, ΙΒδ-ΡΙ, ΙΒΌ,
ΙΒδ и расстройства, обнаруживаемого у пожилых людей, маленьких детей или людей, страдающих ожирением.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к указанной выше композиции для применения при улучшении желудочно-кишечной моторики, улучшении кишечной перистальтики и/или уменьшении кишечной проницаемости.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к новым штаммам бактерий, выбранных из группы, состоящей из
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ Ι-4321, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ Ι-4318, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)].
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к композициям, содержащим новые штаммы.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из лактобацилл и бифи- 3 028015 добактерий, который В) увеличивает уровни СНАТ в кишечной нервной системе и по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий, который А) увеличивает уровни вазоактивного кишечного пептида (νΐΡ) в кишечной нервной системе.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к способу выбора штаммов бактерий, причем указанный способ включает стадии:
a) получения сокультуры кишечных эпителиальных клеток и кишечных нейронных клеток, где указанные кишечные эпителиальные клетки и кишечные нейронные клетки присутствуют в виде монослоя и где указанные кишечные нейронные клетки присутствуют на базолатеральной стороне монослоя,
b) добавления штаммов бактерий к апикальной или просветной стороне монослоя кишечных эпителиальных клеток, предпочтительно в количестве примерно от 4 до 400 бактериальных клеток на эпителиальную клетку,
c) инкубации сокультуры со штаммом молочнокислых бактерий, ά) предпочтительно, выделения нейронных клеток,
е) измерения количества νΐΡ, СНЛТ. субстанции Р, нервов, активируемых оксидом азота, АТФ и/или пептида, активирующего гипофизарную аденилатциклазу (РАСАР), продуцируемую нейронными клетками, и, необязательно, дополнительно трансэпителиального электрического сопротивления (ТЕЕК) слоя кишечных эпителиальных клеток.
В данном способе штамм бактерий предпочтительно относится к группе, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий.
Подробное описание
Определения.
В настоящей заявке применение соединения или композиции предназначено для охвата самого применения, необязательно, со связанным намерением, но также любой информации, связанной с соединением или композицией с коммерческими или юридическими последствиями, например рекламирования, инструкций или рекомендаций на упаковке композиций, инструкций или рекомендаций на коммерческой поддержке, такой как информационные листы, брошюры, стенды, документация, поданная в подтверждение нормативных регистрационных свидетельств в отношении безопасности, эффективности или защиты прав потребителя, например, в таких административных инстанциях, как ЕР8А (Европейская Ассоциация по безопасности пищевых продуктов) в Европе.
В настоящей заявке группы штаммов относятся к штаммам, которые проявляют специфическое свойство или набор свойств. Таким образом, определенный штамм может относиться к нескольким группам. В настоящей заявке термин или не является исключающим.
В настоящей заявке такая характеристика как νΐΡ и/или СНАТ, считается, по существу, неизменной, по сравнению с контролем, если дисперсия не превышает 10%, предпочтительно 1%, по сравнению с контролем.
Предпочтительные варианты осуществления.
В предпочтительных вариантах осуществления композиция предназначена для применения при:
А3) увеличении уровня νΐΡ, при условии, что не происходит увеличение уровня СНАТ, или
В3) увеличении уровня СНАТ, при условии, что не происходит увеличение уровня νΐΡ, причем не уменьшается трансэпителиальное электрическое сопротивление (ТЕЕК) слоя кишечных эпителиальных клеток, или
С3) уменьшении уровня СНАТ, при условии, что не происходит уменьшение уровня νΐΡ, или
С2) уменьшении уровня СНАТ и уменьшении уровня νΐΡ.
Например, композиция по изобретению может применяться при лечении и/или профилактике кишечного расстройства, предпочтительно лечении и/или профилактике расстройства кишечной моторики, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΐΒδ-С, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, кишечной инфекции, ΐΒδ-Ό, ΐΒδ-Ρΐ и ΐΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΐΒδ и ΐΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей и людей, страдающих ожирением.
В особенно предпочтительных вариантах осуществления композиции могут:
А) увеличивать уровни νΐΡ в кишечной нервной системе и применяться при лечении и/или профилактике кишечного расстройства, предпочтительно лечении и/или профилактике расстройства кишечной моторики, или
Β) увеличивать уровни СНАТ в кишечной нервной системе и применяться при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΐΒδ-С, или
С) уменьшать уровни СНАТ в кишечной нервной системе и применяться при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, ΐΒδ-Ό, ΐΒδ-Ρΐ, ΐΒΌ.
- 4 028015
Штамм бактерий может быть, например, выбран из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_173_010 (СЫСМ Σ-2494, депонированного 20 июня 2000 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ 1-4321, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СЫСМ 1-2219, депонированного 31 мая 1999 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ 1-4318, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ 1-4317, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ 1-4320, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СЫСМ 1-4279, депонированного 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)].
В одном варианте осуществления штамм бактерий выбран из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ 1-4321, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СЫСМ 1-2219, депонированного 31 мая 1999 г.) [А)-А3)] и
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ 1-4318, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)], и композиция предназначена для применения при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΙΒδ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей и людей, страдающих ожирением.
В одном варианте осуществления штамм бактерий выбран из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированного 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)], и композиция предназначена для применения при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΙΒδ-С.
В одном варианте осуществления штамм бактерий выбран из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ Ι-4321, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СЫСМ Ι-2219, депонированного 31 мая 1999 г.) [А)-А3)] и
ΌΝ_121_0304 (СNСМ Ι-4318, депонированного 19 мая 2010 г.) [А)-А3)], и композиция предназначена для применения при:
A) увеличении уровней вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) кишечной нервной системы, предпочтительно для применения при А3) увеличении уровня νΙΡ, при условии, что не увеличивается уровень СЬАТ.
В конкретном варианте осуществления данного варианта осуществления композиция предназначена для применения при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΙΒδ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей и людей, страдающих ожирением.
В одном варианте осуществления штамм бактерий выбран из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированного 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированного 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)], и композиция предназначена для применения при:
B) увеличении уровней СЬАТ в кишечной нервной системе, предпочтительно В3) увеличении уровней СЬАТ, при условии, что не происходит увеличение уровня νΙΡ.
В конкретном варианте осуществления данного варианта осуществления композиция предназначена для применения при лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΙΒδ-С.
Дополнительные детали штаммов бактерий.
Как указано выше, композиция содержит по меньшей мере один или два определенных штамма бактерий, предпочтительно молочнокислых бактерий. Они предпочтительно выбраны из группы, состоящей из рода Ьас1оЬасШи8 и Β^ί^άоЬасΐе^^ит, Ьас1ососсик и §1тер1ососси8. Было обнаружено, что указанный определенный штамм бактерий способен воздействовать на уровни νΙΡ и/или воздействовать на уровни СЬАТ в нервах на модели сокультуры, представляющей взаимодействие между кишечником и ΕΝδ.
Модель сокультуры, детальнее описанную ниже, использовали для выбора ίη уйго штаммов молочнокислых бактерий или бифидобактерий с этими характеристиками. Провели скрининг 102 штаммов, относящихся к родам ЬасЩЬасШик, 81терШсосси5 или Β^ί^άоЬасΐе^^ит.
Штаммы группы В) с увеличенным воздействием на СЬАТ обычно улучшают кишечную моторику. Штаммы группы В3) с увеличенным воздействием на СЬАТ, исключая штаммы, при которых уровень νΙΡ не увеличивается (т.е. уровень νΙΡ, по существу, не изменяется или уровень νΙΡ уменьшается),
- 5 028015 представляют определенный предпочтительный вариант осуществления. Штаммы этих групп обычно благоприятны для лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и 1В8-С. Это может представлять дополнительный конкретный интерес для лечения и/или профилактики расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, которые могут часто страдать запорами. Относительно увеличения моторики были бы предпочтительны штаммы, увеличивающие экспрессию СНАТ. Эта характеристика представляется очень редкой. Интересно то, что было обнаружено, что только три штамма статистически увеличивали уровень СНЛТ. Они именуются штаммами группы В) или группы В3). Штаммы группы В) или группы В3) включают штаммы ΌΝ_119_0118 (СЫСМ 1-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.), ΌΝ_154_0067 (СNСМ 1-4320, депонированный 19 мая 2010 г.) и ΌΝ_116_0047 (СNСМ 1-4317, депонированный 19 мая 2010 г.). Такие штаммы благоприятно улучшают моторику, в частности сокращения. Предпочтительно, чтобы уменьшалось электрическое сопротивление (ТЕЕК) кишечных эпителиальных клеток. Такая характеристика может быть показателем подходящей барьерной функции. Штамм ΌΝ_119_0118 (СNСМ 1-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) значительно увеличивал уровни νΐΡ, в то время как два других штамма не оказывали значимый эффект на уровни νΐΡ. Поскольку уменьшение уровня νΐΡ может оказывать неблагоприятный эффект на 1ЕВ, то на модели ίη νίίτο с использованием монослоя кишечных эпителиальных клеток было исследовано, приводила ли инкубация этого штамма к уменьшению трансэпителиального электрического сопротивления (ТЕЕК). Оказалось, что это не так, указывая на то, что функция 1ЕВ не нарушена.
В отношении расслабления мышц и усиления функции 1ЕВ, что благоприятно для пациентов с 1В8 и 1ВЭ. были бы предпочтительны штаммы, которые увеличивают экспрессию νΐΡ (которые в дополнение оказывали бы противовоспалительные эффекты). Такие штаммы именуются штаммами группы А). В предпочтительном варианте осуществления штаммы группы А) не увеличивают экспрессию СНЛТ (т.е. уровень СНАТ, по существу, не изменяется или уровень СНАТ снижается). Такие штаммы именуются группой А3). Штаммы этих групп обычно благоприятны для лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из 1В8 и 1ВЭ, или для лечения и/или профилактики расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей или людей, страдающих ожирением. Штаммы группы А) или группы А3) включают штаммы ΌΝ_173_010 (СNСМ ΐ-2494, депонированный 20 июня 2000 г.), ΌΝ_156_0032 (ШСМ ΐ-4321, депонированный 19 мая 2010 г.), ΌΝ_156_007 (С^М ΐ-2219, депонированный 31 мая 1999 г.), ΌΝ_121_0304 (СNСМ ΐ-4318, депонированный 19 мая 2010 г.). Интересно отметить, что все штаммы, имеющие эту характеристику, представляют собой бифидобактерии, за исключением одного: ΌΝ_121_0304 (СNСМ 1-4318, депонированного 19 мая 2010 г.). Кроме того, при использовании другой модели ίη νίίτο с монослоем Т84 и измерения трансэпителиального электрического сопротивления (ТЕЕК), в частности, было обнаружено, что штаммы ΌΝ_173_010 (СNСМ ΐ-2494, депонированный 20 июня 2000 г.), ΌΝ_156_007 (СNСМ ΐ-2219, депонированный 31 мая 1999 г.), ΌΝ_121_0304 (СNСМ ΐ-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) и ΌΝ_156_0032 (СNСМ ΐ-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) из группы А) или А3) оказывают защитный эффект на 1ЕВ в присутствии ΕΡ8. Поэтому, данные конкретные штаммы особенно предпочтительны.
В соответствии с одним вариантом осуществления штаммы обеспечивают возможность снижения уровней СНАТ в кишечной нервной системе. Соответствующая группа штаммов именуется группой С). В конкретном варианте осуществления, штаммы обеспечивают возможность снижения уровней СНАТ, при условии, что не уменьшается уровень νΐΡ (т.е. уровень νΐΡ, по существу, на изменяется или уровень νΐΡ увеличивается). Эта группа именуется группой С3). В конкретном варианте осуществления штаммы обеспечивают возможность снижения уровней СНАТ со снижением уровня νΐΡ. Эти штаммы именуются группой С2). Штаммы группы С3) обычно благоприятны для лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, 1В8-Э. Это может представлять дополнительный определенный интерес для лечения и/или профилактики расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, которые могут часто страдать диареей. Штаммы группы С2) обычно благоприятны для лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, 1В8-О, ΐВ§-Ρΐ и [ВО. Это может представлять дополнительный определенный интерес для лечения и/или профилактики расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, которые могут часто страдать такими состояниями, в частности диареей.
Настоящее изобретение также охватывает применение указанных выше штаммов, но также мутантных штаммов или генетически трансформированных штаммов, происходящих из любого из материнских штаммов, но все же обладающих активностью в отношении νΐΡ и воздействующих на СНАТ нервы. Эти мутантные или генетически трансформированные штаммы могут представлять собой штаммы, где был(и) мутирован(ы) один или более эндогенных ген(ов) материнского штамма, например для модификации некоторых из его метаболических характеристик (например, его способности ферментировать сахара, его устойчивости к кислотности, его выживания при прохождении по желудочно-кишечному тракту, его пост-ацидификации или продукции его метаболитов). Они могут также представлять собой штаммы, полученные в результате генетической трансформации материнского штамма одним или более представляющим(и) интерес геном (генами) для придания указанному штамму дополнительных физиологических признаков, или для обеспечения ему возможности экспрессировать белки, оказывающие те- 6 028015 рапевтический или вакцинный эффект, достижение которого желательно посредством введения указанных штаммов.
Предпочтительно используется смесь по меньшей мере одного штамма, относящегося к группе В), предпочтительно к группе В3), и по меньшей мере одного штамма, относящегося к группе А), предпочтительно к группе А3). Такая смесь преимущественно оказывает улучшенный эффект на моторику, а также на ΙΕΒ.
Модель сокультуры и скрининговый анализ.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу выбора штаммов молочнокислых бактерий, причем указанный способ включает стадии:
a) использования сокультуры кишечных эпителиальных клеток и кишечных нейронных клеток, где кишечные эпителиальные клетки присутствуют в монослое, и где кишечные нейронные клетки присутствуют на базолатеральной стороне монослоя,
b) добавления молочнокислых бактерий или апикальной или просветной стороны монослоя, предпочтительно, в количестве примерно от 4 до 400 бактериальных клеток на эпителиальную клетку,
c) инкубации сокультуры с молочнокислыми бактериями, ά) предпочтительно, выделения нейронных клеток и
е) измерения количества по меньшей мере одного нейромедиатора, выбранного из группы, состоящей из νΙΡ, СНАТ, субстанции Р и оксида азота, АТФ, РАСАР, продуцируемого нейронными клетками, и, необязательно, трансэпителиального электрического сопротивления (ΤΕΕΚ) слоя кишечных эпителиальных клеток.
В соответствии с перистальтическим рефлексом ΕΝδ содержит проводниковые цепи, которые состоят из восходящих возбуждающих двигательных нейронов, высвобождающих ацетилхолин и субстанцию Р, которые вызывают сокращение гладкой мускулатуры через мускариновые рецепторы, и нисходящие ингибиторные нейроны, высвобождающие смесь нейромедиаторов, подобных N0, АТФ, νΙΡ и РАСАР, которые все ингибируют циркулярную мышцу.
Клеточная культура.
Подходящий способ установления сокультуры с монослоем поляризованных кишечных эпителиальных клеток представлен в примере 1 и также описан в публикации 1. СНегаПег е1 а1., 2008, 1. ΡΗνκίοΙ. 586 1963-1975.
Подходящими являются все культуры кишечных эпителиальных клеток, образующие монослои, такие как Сасо-2, Т84, НТ29 и ТС7. Предпочтительно, используют клетки Т84.
В качестве первичных клеток кишечной нервной системы предпочтительно выделяют фетальные клетки млекопитающих, кроме человека, предпочтительно, грызунов, предпочтительнее, крыс.
Предпочтительно, тестируемые бактериальные штаммы выращивают до поздней экспоненциальной фазы в подходящей ростовой среде и промывают. Предпочтительно, бактерии добавляют к апикальной стороне сокультуры в количестве от 4 до 400 бактерий/эпителиальную клетку, предпочтительнее от 10 до 100 бактерий/эпителиальную клетку, еще предпочтительнее от 30 до 50 бактерий/эпителиальную клетку. Предпочтительно, в качестве контроля, бактерии не добавляют. Предпочтительно, в качестве положительного контроля, используют 1 мМ бутирата или 40 мМ КС1.
Предпочтительно, стадию инкубации выполняют примерно при 37°С. Предпочтительно, стадия инкубации занимает от 1 до 72 ч, предпочтительнее от 2 до 36 ч, еще предпочтительнее от 4 до 12 ч.
Предпочтительно, после совместной инкубации компартмент, содержащий эпителиальные клетки и бактерии, удаляют, и первичные нейронные клетки инкубируют в течение от 12 до 48 ч, предпочтительнее в течение от 20 до 28 ч в увлажненном инкубаторе, содержащем 5% СО2.
Предпочтительно, количество СНАТ нервов относительно общего количества нервов измеряют, используя иммуногистохимическое окрашивание с использованием антинейронной специфической енолазы (ΝδΕ) для подсчета общего числа нейронов и антихолинацетилтрансферазы для подсчета СНАТ нервов.
Предпочтительно, νΙΡ определяют Εί-ΙδΛ (иммуноферментным анализом) после сбора нейронных клеток и экстрагирования белков в присутствии смеси ингибиторов протеазы.
Дополнительные детали относительно композиций.
Изобретение охватывает композиции со штаммами бактерий, которые обеспечивают возможность осуществления указанных выше видов применения или обеспечения указанных свойств. Изобретение также охватывает композиции, содержащие один или более из следующих штаммов (включая происходящие из них мутанты или генетически трансформированные штаммы):
ΌΝ_156_0032 (С^М Ι-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (С^М Ι-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_121_0304 (С^М Ι-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_1 16_0047 (ШСМ Ι-4317, депонированный 19 мая 2010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (С^М Ι-4320, депонированный 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СNСΜ Ι-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)], для применения при лечении и/или профилактике кишечного расстройства, предпочтительно лечении и/или профилак- 7 028015 тике расстройства кишечной моторики или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΙΒδ-С, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, кишечной инфекции, ΙΒδ-Ό, ΙΒδ-ΡΙ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΙΒδ и ΙΒΌ, или лечении и/или профилактике расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей или людей, страдающих ожирением, обычно, при ведении индивиду ίη νίνο.
В композициях по изобретению указанные штаммы могут применяться в форме цельных бактерий, которые могут быть живыми или нет. Альтернативно, они могут применяться в форме бактериального лизата или в форме бактериальных фракций; бактериальные фракции, подходящие для этого применения, могут быть выбраны, например, тестированием их свойств облегчения эффектов на уровни УР и уровни СНАТ нервов модели сокультуры, описанной в настоящем изобретении. Предпочтительно, бактериальные клетки присутствуют в виде живых, жизнеспособных клеток.
Композиции по изобретению могут быть представлены в любой форме, подходящей для введения, в частности, перорального введения. Эта форма включает, например, твердые вещества, полутвердые вещества и порошки. Жидкие композиции являются в целом предпочтительными ввиду более легкого введения, например, в виде напитков.
Композиция может, например, содержать по меньшей мере 105, предпочтительно, по меньшей мере 1х106 КОЕ на 1 г сухой массы по меньшей мере одного штамма бактерий, предпочтительно штаммов бактерий, как указано выше. Они предпочтительно выбраны из группы, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий.
Когда бактерии представлены в форме живых бактерий, композиция может обычно содержать от 105 до 1013 колониеформирующих единиц (КОЕ), предпочтительно по меньшей мере 106 КОЕ, предпочтительнее по меньшей мере 107 КОЕ, еще предпочтительнее по меньшей мере 108 КОЕ и наиболее предпочтительно по меньшей мере 109 КОЕ на 1 г сухой массы композиции. В случае жидкой композиции это в целом соответствует 104-1012 колониеобразующих единиц (КОЕ), предпочтительно по меньшей мере 105 КОЕ, предпочтительнее по меньшей мере 106 КОЕ, еще предпочтительнее по меньшей мере 107 КОЕ и наиболее предпочтительно по меньшей мере 109 КОЕ/мл.
Примерами композиций по изобретению являются питательные композиции, включая пищевые продукты и, в частности, молочные продукты.
Композиция может представлять собой, например, молочный продукт, предпочтительно ферментированный молочный продукт. Введение в форме ферментированного молочного продукта имеет дополнительное преимущество низких уровней лактозы, что дополнительно благоприятно при ΙΒδ. Необязательно, могут присутствовать другие штаммы молочнокислых бактерий. Ферментированный продукт может присутствовать в форме жидкости или присутствовать в форме сухого порошка, полученного сушкой ферментированной жидкости. Предпочтительно, ферментированный продукт представляет собой свежий продукт. Свежий продукт, который не был подвергнут стадиям интенсивной термической обработки, имеет преимущество в том, что присутствующие бактериальные штаммы находятся в живой форме. Предпочтительно, ферментированный продукт представляет собой молочный продукт, предпочтительнее, ферментированное молоко и/или ферментированную сыворотку. Предпочтительно, питательная композиция представляет собой йогурт или ферментированное молоко в свернувшейся, перемешанной или питьевой форме. Предпочтительно, ферментированный продукт представляет собой сыр. Предпочтительно, ферментированный продукт представляет собой ферментированный овощ, такой как ферментированная соя, злаки и/или фрукты в свернувшейся, перемешанной или питьевой формах.
Предпочтительно питательный продукт по настоящему изобретению представляет собой детское питание, молочную смесь для грудных детей или питательную молочную смесь для перехода с грудного кормления на искусственное и для прикорма. Предпочтительно, композиция по настоящему изобретению представляет собой питательный или фармацевтический продукт, питательную добавку или продукт лечебного питания.
Питательные композиции по изобретению также включают пищевые добавки и спортивное питание. Пищевая добавка обозначает продукт, полученный из соединений, обычно используемых в пищевых продуктах, но который представлен в форме таблеток, порошка, капсул, питья или любой другой формы, обычно не связанной с продуктами питания, и который оказывает благоприятные эффекты на здоровье индивида. Спортивное питание представляет собой продукт питания, который оказывает благоприятные эффекты на здоровье индивида. В частности, пищевые добавки и спортивное питание оказывают защитные или лечебные физиологические эффекты против заболевания, например, против хронического заболевания.
Предпочтительна композиция, содержащая смесь по меньшей мере одного штамма молочнокислой бактерии или бифидобактерии, увеличивающей уровень СНЛТ нервов, и по меньшей мере одного штамма молочнокислой бактерии или бифидиобактерии, увеличивающей уровни У!Р. Такая смесь предпочти- 8 028015 тельно оказывает улучшенный эффект на моторику, а также на ΙΕΒ.
Предпочтительна смесь по меньшей мере одного штамма, относящегося к группе В), предпочтительно, В3), и по меньшей мере одного штамма, относящегося к группе А), предпочтительно А3). Такая смесь предпочтительно оказывает улучшенный эффект на моторику, а также на ΙΕΒ.
Поэтому настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_116_0047 (СМСМ Ι-4317, депонированный 19 мая 2 010 г.) [В)-В3)],
ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированный 19 мая 2010 г.) [В)-В3)] и
ΌΝ_119_0118 (СNСМ Ι-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) [В)-В3)]; и по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:
ΌΝ_173_010 (СNСМ Ι-2494, депонированный 20 июня 2000 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_0032 (СЫСМ Ι-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)],
ΌΝ_156_007 (СNСМ Ι-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) [А)-А3)] и
ΌΝ_121_0304 (СЫСМ Ι-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) [А)-А3)].
Композиции по изобретению могут также содержать один или более других штамм(ов) молочнокислых бактерий, пробиотических или нет, например один или более бактериальных штамм(ов), выбранных из родов БасЮЪасШиз, БасЮсосснз, 5>1гсрЮсоссиз. и Бифидобактерий. В частности, этот (эти) другой (другие) штамм(ы) могут включать один или более штамм(ов) 31гер1ососсиз ШегторЬПиз и/или один или более штамм(ов) ЬаОоЪасЫиз Ъи1дапсиз.
Применение.
В одном варианте осуществления было обнаружено, что штаммы по настоящему изобретению увеличивают число СЬАТ нервов. Холинацетилтрансфераза ЕС 2.3.1.6 представляет собой фермент, который синтезируется внутри тела нейрона и переносится к нервному окончанию. Ролью холинацетилтрансферазы является соединение ацетил-СоА с холином, что приводит к образованию нейромедиатора ацетилхолина. Он используется в качестве иммуногистохимического маркера для двигательных нейронов. Воздействия на СЬАТ нерв приводят к улучшенным сокращениям, приводя к улучшенной перистальтике. Поэтому штаммы и композиции по настоящему изобретению, способные увеличивать число СЬАТ нервов, преимущественно вводятся для улучшения ΕΝδ, для улучшения или усиления перистальтики, для улучшения кишечной моторики и/или для уменьшения времени прохождения по желудочнокишечному тракту. Увеличение холинергического фенотипа представляет терапевтический интерес при патологиях ЖК тракта, связанных с ингибированием времени прохождения по ободочной кишке. В частности, различные исследования показали, что медленное прохождение может быть связано со сниженной экспрессией СЬАТ нейронов. В частности, (ί) у пациентов с выраженными запорами в целом имеется меньшее количество СЬАТ нервов, (ίί) продукция миентерического АСЬ значительно уменьшена и во время инфекции, и после инфекции (ΡΙ), (ίίί) сообщалось об уменьшении доли холинергических нейронов во время старения.
В данном контексте применение бактерий, предпочтительно, молочнокислых бактерий или бифидобактерий, для усиления холинергической экспрессии в нейронах, может в будущем представить терапевтический интерес для пациентов с тяжелыми запорами и ΙΒδ-С. Поэтому штаммы и композиции по настоящему изобретению преимущественно вводятся пациентам, страдающим ΙΒδ-С и/или запором. Наиболее полезными штаммами являются указанные выше штаммы группы В) или В3).
В одном конкретном варианте осуществления штаммы и композиции по настоящему изобретению применяются людьми пожилого возраста или предназначены для них. Пожилые люди в настоящем изобретении определяются как люди в возрасте старше 65 лет, предпочтительно старше 70 лет, предпочтительно старше 75 лет, предпочтительно старше 80 лет, предпочтительно старше 85 лет. У пожилых людей обычно уменьшено число СЬАТ нейронов в кишечной нервной системе, локализующейся в ободочной кишке, наиболее предпочтительно в поперечно-ободочной кишке. Поэтому штаммы и композиции по настоящему изобретению преимущественно вводятся для лечения и/или профилактики ΙΒδ, предпочтительно, ΙΒδ-С и/или запора у пожилых людей. Штаммы, способные увеличить содержание СЬАТ нервов, относятся к группе В), такие как штамм ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированный 19 мая 2010 г.), ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированный 19 мая 2010 г.) и ΌΝ_119_0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.). Они предпочтительно не увеличивают уровень νΙΡ, поскольку νΙΡ необходим для функции ΙΕΒ и для расслабления ЖК тракта, другой важной части моторики ЖК тракта, такой как перистальтика. Штаммами, соответствующими этому критерию, представляли собой ΌΝ_154_0067 (СЫСМ Ι-4320, депонированный 19 мая 2010 г.), и ΌΝ_116_0047 (СЫСМ Ι-4317, депонированный 19 мая 2010 г.). Однако также штамм ΌΝ 119 0118 (СЫСМ Ι-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) не оказывал негативного воздействия на функцию ΙΕΒ, по данным определения экспериментами ТЕЕК, поскольку ТЕЕК не уменьшалось.
В одном варианте осуществления было обнаружено, что штаммы по настоящему изобретению увеличивают уровни νΙΡ. В отношении пищеварительной системы νΙΡ вызывает расслабление гладких мышц (нижнего пищеводного сфинктера, желудка, желчного пузыря), стимулирует секрецию воды в панкреатический сок и желчь и вызывает ингибирование секреции желудочной кислоты и всасывания их
- 9 028015 кишечного просвета. Его ролью в кишечнике является значительная стимуляция секреции воды и электролитов, а также расширение кишечной гладкой мускулатуры, расширение периферических кровеносных сосудов, стимуляция панкреатической секреции бикарбоната и ингибирование стимулируемой гастрином секреции желудочной кислоты. Эти эффекты работают вместе для увеличения моторики. Поэтому эти данные указывают на то, что данные штаммы оказывают улучшенный эффект на кишечную моторику, в частности на ту часть моторики, которая относится к расслаблению. νΙΡ также благоприятно увеличивает функцию ΙΕΒ. Поэтому штаммы и композиции по настоящему изобретению преимущественно вводятся для улучшения ΕΝ8, для улучшения или усиления перистальтики, для уменьшения проницаемости, для улучшения кишечной моторики и/или для уменьшения времени прохождения по желудочнокишечному тракту. Поэтому штаммы и композиции по настоящему изобретению преимущественно вводятся пациентам, страдающим следующими расстройствами, для лечения и/или профилактики кишечного расстройства, предпочтительно лечения и/или профилактики расстройства кишечной моторики, или лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из запора и ΙΒδ-С, или лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из диареи, кишечной инфекции, ΙΒ8-Ό, ΙΒ8-ΡΙ и ΙΒΌ, или лечения и/или профилактики расстройства, выбранного из группы, состоящей из ΙΒ8 и ΙΒΌ, или лечения и/или профилактики расстройств, обнаруживаемых у пожилых людей, маленьких детей и людей, страдающих ожирением.
Штаммы, которые наиболее полезны, представляют собой указанные выше штаммы группы А) или
А3).
Детали или преимущества настоящего изобретения можно найти в приведенных ниже не ограничивающих примерах.
Примеры
Пример 1. Скрининг пробиотиков на модели сокультуры, включающей эпителиальные клетки и кишечные нейронные клетки.
Клеточная культура.
Закупали беременных крыс 8ргадие-ОаМеу (СЕЮ, Ье Сепек! 81 Ые, Ргапсе апй ΡιηνίοΓ-ΒΐΌοάίηβ Сеп1ет, Βе1д^ит) и умерщвляли передозировкой СО2 с последующим иссечением сонных артерий. Эмбрионов (35-45 на выделение из 3 беременных крыс) удаляли и умерщвляли декапитацией. Тонкие кишечники эмбрионов удаляли и мелко нарезали в ΗΒ88 (8фта, Ргапсе). Тканевые фрагменты собирали в 5 мл среды (среды ΌΜΕΜ-Ρ12 1:1) и расщепляли при 37°С в течение 15 мин в 0,1% трипсине (8фта). Реакцию на трипсин останавливали добавлением 10 мл среды, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку, и затем обрабатывали ДНКазой Ι (0,01%, 8щша) в течение 10 мин при 37°С. После приготовления смеси с индифферентным веществом 10-миллилитровой пипеткой клетки центрифугировали при 750 об/мин в течение 10 мин. Клетки подсчитывали и затем высевали при плотности 2,4х105 клеток/см2 на 24-луночные планшеты, предварительно покрытые в течение 6 ч раствором желатина (0,5%, 8щша) в стерильном солевом растворе, забуференном фосфатом (ΡΒ8). Через 24 ч среду замещали бессывороточной средой (ΌΜΕΜ-Ρ12 1:1, содержащей 1% добавки Ν-2 (ЫГс 1есЬпо1од1е8, Ргапсе). Клетки поддерживали в культуре в течение 14 дней для получения первичной культуры кишечной нервной системы (ΕΝ8). Половину среды замещали через день. Через 14 дней первичные нейронные клетки были готовы для установления модели сокультуры.
Линию клеток Т84 (ЕАТСС) культивировали в ΌΜΕΜ-Ρ12 (1:1, СШСО) с добавлением инактивированным нагреванием 10% ΡΒ8 и 50 МЕ/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина. Клетки высевали в 12-луночные фильтры Ттапк№е11® (Сотшпд, ΝΥ И8А) при плотности 2х105 клеток/вкладыш и культивировали для получения слияния.
Через один день после наступления слияния эпителиальных клеток фильтры Ттапк№е11® переносили в 12-луночные планшеты, засеянные на дне кишечными нервными клетками. Эпителиальные и нейронные клетки сокультивировали в среде для эпителиальных клеток.
Выращивание штаммов бактерий.
Бактерии выращивали в течение 16 ч в бульонной среде ТСΥΗ для бифидобактерий и лактобацилл, за исключением штамма ΌΝ_173_010 (ΠΝΠΜ Ι-2494, депонированного 20 июня 2000 г.), который выращивали на агаризованной жидкой среде ΜΚ.8 + цистеин, дважды промывали в ΡΒ8 и доводили до 4х108 КОЕ/мл для постоянного добавления одинакового объема бактериальной суспензии на фильтр. Штаммы добавляли в фильтровом отсеке при ΜΟΙ (множественности заражения) 40 бактерий/эпителиальную клетку. В качестве контроля бактерии не добавляли.
После 8 ч соинкубации фильтровой отсек, содержащий эпителиальные клетки и бактерии, удаляли. И первичные нейронные клетки инкубировали в течение 24 ч в увлажненном инкубаторе, содержащем 5% СО2. В контрольных лунках нейронные клетки стимулировали 1 мМ бутиратом и 40 мМ КС1, когда выполняли измерения соответственно С'НАТ и νΙΡ.
- 10 028015
Иммуногистохимическое окрашивание.
Измерение количества СйАТ нервов.
После инкубации выполняли иммуногистохимическое окрашивание для выявления популяций нейронных клеток. После фиксации клеток (в 0,1М ΡΒδ, содержащем 4% параформальдегид, в течение 1 ч при комнатной температуре), клетки промывали 3 раза в ΡΒδ, затем пермеабилизировали в течение 30 мин в смеси ΡΒδ/ΝαΝ3, содержащей 0,5% Ίπΐοη Х-100 и 4% лошадиную сыворотку. Первичное антитело: кроличью антинейронную специфическую енолазу (ΝδΕ) (1:2000; Вюуайеу, Егапсе) и кроличью антихолинацетилтрансферазу разбавляли ΡΒδ/ΝαΝ3, 0,5% Τπΐοη Х-100 и 4% лошадиной сывороткой и инкубировали в течение ночи при комнатной температуре. После инкубации с первичной антисывороткой клетки промывали 3 раза ΡΒδ и инкубировали в течение 3 ч с ослиным антикроличьим КО, конъюгированным соответственно с флуоресцеином изотиоцианатом (Е1ТС) (1:200 IттиηοΐесЬ, Егапсе) и 7-амино4-метил-кумарин-3-ацетатом. Образцы осматривали под флуоресцентным микроскопом О1ушри§ 1x50, снабженным белой видеокамерой (модель 4910, Сойи 1пс., Оегшапу), соединенной с компьютером Масшΐο§Ε посредством карты ввода и регистрации кадрового изображения (δ^οη 1таде, δΕ М^с^οΐе§ΐ).
Измерения νΐΡ.
Для определения νΐΡ нейронные клетки собирали из 12-луночных планшетов, белки экстрагировали с использованием литического буфера Κ4ΡΆ (МППрс^ге, Егапсе), содержащего смесь ингибиторов протеазы (КюсЬе Ι)ίΗ2ηοδΙί^, Егапсе), и уровни νΐΡ измеряли ΕΕΙδΑ (Васйет, Оегтапу).
Результаты.
Дифференциальные реакции первичных кишечных нейронов на маркерах νΐΡ и СйАТ после взаимодействия некоторых из 102 пробиотических штаммов, включая молочнокислые бактерии и бифидобактерии, показаны в табл. 1. Показаны только некоторые штаммы, относящиеся к группе А3) или В3) или С3). Дополнительно упомянуто, что, как было показано, 26 штаммов не оказывали значимого эффекта на νΐΡ и СйАТ (включая штаммы Β^ί^ύοЪасΐеπит Ьпдит ИСС 2705 (СИСМ Ι-2618), РасЮЪасШиз ^Ьатηοзиз ОО (АТСС 53103) и ЕасФЪасШиз сазе1 δЬ^^οΐа), было показано, что 11 штаммов, относящихся к группе С2), уменьшают и νΐΡ, и СЬАТ (включая штамм Β^ί^ύοЪасΐеπит Ьпдит А11 ο£ А11а-А১ (ЕМО Ρ-21586)), 10 штаммов уменьшали νΐΡ и не оказывали эффект на СйАТ (включая контрольные штаммы ВНкЕЪасЩгшт ткпИы ИСС 3564, Β^ί^άοЪасΐе^^ит кишит ВЪ536, Β^ί^άοЪасΐе^^ит аштаПз зрр 1асПз ВЪ12 (ΌδΜ 15954), и Β^ί^ύοЪасΐеπит аштаПз зрр 1асйз Βΐ-07 (АТСС δΌ5220) и 41 штамм, относящийся к группе С3) уменьшают СйАТ и не оказывают эффект на νΐΡ, включая штаммы ЕасФЪасШиз )οΗηδοηΐΐ Еа1 (СИСМ ΐ-1225), Ьас^ЪасШиз р1аи1агит 299ν (ΌδΜ 9843) Ьас^ЪасШиз Γβυΐβή δΌ 2122 (АТСС 55730)).
Таблица 1
Воздействие инкубации с молочнокислыми бактериями и бифидобактериями на уровни νΐΡ и СйАТ на модели сокультуры с монослоем эпителиальных клеток и первичными клетками ΕΝδ
| ΥΙΡ | СНАТ | ||||||
| Группа | Номер ΌΝ вида (номер СИСМ) | Определенная разность* в сравнении с контролем | Вели- чина Р | Эмпири- ческая средняя | Определенная разность* в сравнении с контролем | Вели- чина Р | Эмпири- ческая средняя |
| 1 | Ш_154_0067 (СИСМ 1-4320, депонированный 19 мая 2010 г.) ВИ:1с1оЪас:Ёег1и1п ЫВасИит | -0,0097 | 0,9 | 0,0790 | 0,2709 | 0,09 | 0,1796 |
| 1 | Ш_116_0047 (СИСМ 1-4317, депонированный 19 мая 2010 г.) ЬасЁоЬасШиз гВатпозиз | -0,0389 | 0,7 | 0,0397 | 0,3151 | 0,10 | 0,2535 |
| 1 | ΌΝ 119 0118 (СИСМ 1-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) ЬасШ>асП1из ас10.орВИиз | -0,1329 | 0, 09 | -0,2221 | 0,2847 | 0,02 | 0,2796 |
| 2 | Ш_173_010 (СИСМ 1-2494, депонированный 20 июня 2000 г.) ВИ:1с1оЪас:1зег1и1п 1асЁ13 | 0,2345 | 0, 01 | 0,2001 | -0,2615 | 0,05 | -0,0825 |
| 2 | ΌΝ 156 0032 (СИСМ 1-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) ВИИаоЪасХегаит Ъгехге | 0,2248 | 0, 01 | 0,2020 | -0,5450 | 0,00 | -0,5723 |
- 11 028015
| 2 | ϋΝ_156_007 (СЫСМ 1-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) ВИИВоЪасЁегаит ΒΓθνθ | 0,2715 | 0, 02 | 0,3552 | -0,3632 | 0,01 | -0,1281 |
| 2 | ϋΝ_121_0304 (СЫСМ 1-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) ЬасЁоЪасШиз р1апЁагит | 0,5976 | 0, 00 | 0,6813 | -0,6269 | 0,00 | -0,3918 |
* Величины представлены в виде разности по сравнению с контролем, где бактериальные штаммы не добавляли.
Хотя штамм ΌΝ_119_0118 (СХСМ 1-4279, депонированный 25 февраля 2010 г.) уменьшает уровни У1Р, на модели с ТЕЕК оказалось (Нйо1аш е1 а1., 2008, Уакидаки ΖαδδΕΐ Зер.; 128(9): 1363-8), что инкубация со штаммом в течение 4 или 6 ч значимо не снижала величины ТЕЕК, даже в присутствии повреждения, в сравнении с контролем. Вкратце, бактерии культивировали в среде ТОУН. Культуральные суспензии промывали РВЗ. В последующем, бактерии (100 КОЕ/клетку) добавляли к апикальной стороне монослоев клеток Т84. После 2-часовой инкубации БРЗ (Б4516, -ЕРЕС - 0127:В8) добавляли на апикальную сторону в концентрации 40 нг/мл или не добавляли. Затем после инкубации в течение 2 и 4 ч измеряли величины ТЕЕК для оценки эпителиальной барьерной функции. Все эксперименты выполняли три раза независимо и в трех повторениях в присутствии и в отсутствие ЕРЗ. Величина Т84 в 1=0 была установлена на 100%. В отсутствие БРЗ ТЕЕК в Т4 составило 98,7%, а в Т6 - 100,2% со штаммом Ι)Ν_119_0118 (СХСМ 1-4279, депонированным 25 февраля 2010 г.); для одних Т84, она еще составляла 100%. В присутствии ЕРЗ контроль Т84 в Т4 составил 56,2%, по сравнению с 1=0 и со штаммом Ι)Ν_119 0118 (С^М 1-4279, депонированным 25 февраля 2010 г.) - 47,9%; В Т6 контроль Т84 составил 46,7% и со штаммом Ι)Ν_119_0118 (С^М 1-4279, депонированным 25 февраля 2010 г.) -52,2%.
Используя ту же модель ТЕЕК, в частности штамм ΌΝ_173_010 (С^М 1-2494, депонированный 20 июня 2000 г.), 156 007 (СЖМ 1-2219, депонированный 31 мая 1999 г.), ΌΝ_121_0304 (СЖМ I4318, депонированный 19 мая 2010 г.) и ΌΝ_156_0032 (С^М 1-4321, депонированный 19 мая 2010 г.), все относящиеся к группе А3), показали хорошие результаты действия на кишечную барьерную функцию, по данным оценки ТЕЕК в присутствии ЕРЗ. См. табл. 2.
Таблица 2
Результаты измерения ТЕЕК в присутствии выбранных бактерий, проявляющих наилучшие результаты
| ТЕЕК Т4/ТЕЕК ТО (%) | ТЕЕК Тб/ТЕЕК ТО (%) | ||||
| Штамм | Значи- мость | Эмпири- ческая средняя | Значи- мость | Эмпири- ческая средняя | |
| Т8 4 контроль | 56, 20 | 46,76 | |||
| ΌΝ 173 010 (СЫСМ 1-2494, депонированный 20 июня 2000 г- ) | В. 1асНз | Ά- 9т | 71,27 | * * * | 51, 03 |
| ΌΝ 156 007 (СЫСМ 1-2219, депонированный 31 мая 1999 г.) | В. Β>Γθνθ | 70,70 | Эг | 55, 87 | |
| ΌΝ 121 0304 (СЫСМ 1-4318, депонированный 19 мая 2010 г.) | Б. р1ап£агит | *** | 65,84 | * * * | 64,37 |
| ЭЫ_156_0032 (СЫСМ 1-4321, депонированный 19 мая 2010 г.) | В. | Ά- Έ | 84,44 | Έ Έ | 80,38 |
*** Величина р<0,05.
Claims (11)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Штамм бактерий ΒίΓίύο^ιΛοπιιιη Ьгеуе (СNСΜ Ι-4321), способный увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе.
- 2. Штамм бактерий ЬасйЬасШик р1ап1агит (СNСΜ Ι-4318), способный увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе.
- 3. Штамм бактерий ЬасйЬасШик гНатпокик (СNСΜ Ι-4317), способный увеличивать уровни холинацетилтрансферазо-иммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе.
- 4. Штамм бактерий ΒίΓίύο^κΗπιιιη Ыййит (СNСΜ Ι-4320), способный увеличивать уровни холинацетилтрансферазо-иммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе.
- 5. Питательная композиция, нутрицевтический или фармацевтический продукт, питательная добавка или продукт лечебного питания, содержащие по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей изΒίΠύο^κΗπιιιη Ьгеуе СNСΜ Ι-4321, способного увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе,ЬасйЬасШик р1айагит СNСΜ Ι-4318, способного увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе,ЬасйЬасШик гНатпокик СЖ.’М Ι-4317, способного увеличивать уровни холинацетилтрансферазоиммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе, иΒίΠύοΗ;κΗπιιιη Ыййит СNСΜ Ι-4320, способного увеличивать уровни холинацетилтрансферазоиммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе.
- 6. Питательная композиция, нутрицевтический или фармацевтический продукт, питательная добавка или продукт лечебного питания, содержащие по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:ЬасйЬасШик гНатпокик (СЖ.’М Ι-4317), способного увеличивать уровни холинацетилтрансферазоиммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе, иΒ^йάοЬасΐе^^ит Ыййит (СNСΜ Ι-4320), способного увеличивать уровни холинацетилтрансферазоиммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе, и по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов:способного увеличивать уровни вазоактивного кишечного способного увеличивать уровни вазоактивного кишечного способного увеличивать уровни вазоактивного кишечногоΒ^йάοЬасΐе^^ит 1асйк (СЖ.’М Ι-2494), пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе,Β^йάοЬасΐе^^ит Ьгеуе (СNСΜ Ι-4321), пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе,Β^йάοЬасΐе^^ит Ьгеуе (СNСΜ Ι-2219), пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе,ЬасйЬасШик р1айагит (СNСΜ Ι-4318), способного увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе.
- 7. Питательная композиция, нутрицевтический или фармацевтический продукт, питательная добавка или продукт лечебного питания, содержащие по меньшей мере один штамм бактерий, выбранный из группы, состоящей из следующих штаммов: Β^йάοЬасΐе^^ит Ьгеуе (СNСΜ Ι-4321), способный увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе и штамм бактерий ЬасйЬасШик р1ап!агит (СNСΜ Ι-4318), способный увеличивать уровни вазоактивного кишечного пептида (νΙΡ) в кишечной нервной системе, и штамм бактерий ЬасйЬасШик асйорНШик (СNСΜ Ι-4279), способный увеличивать уровни холинацетилтрансферазо-иммунореактивных нейронов (СНАТ) в кишечной нервной системе.
- 8. Композиция по любому из пп.5-7, где композиция представляет собой молочный продукт, детское питание, молочную смесь для грудных детей или питательную молочную смесь для перехода с грудного кормления на искусственное и для прикорма.
- 9. Композиция по любому из пп.5-8, где композиция представляет собой ферментированный молочный продукт.
- 10. Композиция по любому из пп.5-8, где композиция содержит по меньшей мере 105 КОЕ по меньшей мере одного штамма бактерий, выбранного из группы, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий на 1 г сухой массы.
- 11. Композиция по п.10, где композиция содержит по меньшей мере 106 КОЕ по меньшей мере одного штамма бактерий, выбранного из группы, состоящей из лактобацилл и бифидобактерий на 1 г сухой массы.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IB2010/001534 WO2011148219A1 (en) | 2010-05-28 | 2010-05-28 | Probiotic strains for use in improving the enteric nervous system |
| PCT/IB2011/052344 WO2011148355A1 (en) | 2010-05-28 | 2011-05-27 | Probiotic strains for use in improving the enteric nervous system |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201291441A1 EA201291441A1 (ru) | 2013-05-30 |
| EA028015B1 true EA028015B1 (ru) | 2017-09-29 |
Family
ID=43302705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201291441A EA028015B1 (ru) | 2010-05-28 | 2011-05-27 | Пробиотические штаммы для улучшения состояния кишечной нервной системы |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9198940B2 (ru) |
| EP (2) | EP2857027B1 (ru) |
| JP (1) | JP5923492B2 (ru) |
| KR (1) | KR101779832B1 (ru) |
| CN (1) | CN103209698B (ru) |
| BR (1) | BR112012030359B1 (ru) |
| CA (1) | CA2800768C (ru) |
| EA (1) | EA028015B1 (ru) |
| ES (2) | ES2508566T3 (ru) |
| MX (1) | MX345063B (ru) |
| PL (1) | PL2575837T3 (ru) |
| PT (1) | PT2575837E (ru) |
| WO (2) | WO2011148219A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201208977B (ru) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2609813A1 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-03 | Nestec S.A. | Lactobacillus reuteri DSM 17938 for the development of the enteric nervous system |
| UA118339C2 (uk) * | 2012-09-03 | 2019-01-10 | Біогайа Аб | Бактеріальний штам lactobacillus gasseri для лікування порушення моторики кишечнику (варіанти) |
| RU2015122728A (ru) | 2012-11-12 | 2017-01-10 | Компани Жервэ Данон | Штамм lactobacillus rhamnosus для уменьшения накопления жира в организме |
| WO2014096901A1 (en) * | 2012-12-18 | 2014-06-26 | Compagnie Gervais Danone | Strain of bifidobacterium animalis ssp. animalis |
| FR3004621B1 (fr) | 2013-04-19 | 2015-05-15 | Gervais Danone Sa | Souche de lactobacillus rhamnosus regulatrice du metabolisme lipidique |
| CN103898007B (zh) * | 2014-02-21 | 2016-08-17 | 刘洛贤 | 一株有活性的双歧杆菌菌株 |
| JP6402016B2 (ja) * | 2014-12-10 | 2018-10-10 | 国立大学法人岐阜大学 | 神経機能改善剤 |
| CN107847483A (zh) * | 2015-04-30 | 2018-03-27 | 益生菌股份公司 | 具有特定治疗活性的抗生素与具有相同治疗适应证的具有不可转移抗生素抗性的乳酸杆菌和/或双歧杆菌同时联用的应用 |
| US9730969B2 (en) | 2015-11-06 | 2017-08-15 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions for promoting gut barrier function and ameliorating visceral pain |
| CA3063669C (en) * | 2017-09-29 | 2023-08-01 | University-Industry Cooperation Group Of Kyung Hee University | Lactobacillus reuteri strain and uses thereof |
| CN108753670A (zh) * | 2018-05-28 | 2018-11-06 | 西北工业大学 | 多功能复合微生态制剂纳米硒-重组表达血管活性肠肽-乳酸乳球菌及制备方法 |
| KR102238519B1 (ko) * | 2018-12-28 | 2021-04-13 | (주)메디톡스 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| KR102635553B1 (ko) * | 2018-12-28 | 2024-02-13 | 주식회사 리비옴 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| CA3161418C (en) * | 2019-12-17 | 2024-05-21 | Noelle Marie PATNO | Multi-strain probiotic composition and its use |
| KR20210129516A (ko) | 2020-04-20 | 2021-10-28 | 주식회사 리비옴 | 혈관 작동성 장 펩티드를 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| KR102527954B1 (ko) * | 2021-03-29 | 2023-05-03 | 주식회사 리비옴 | 외래 단백질을 발현하는 미생물, 및 그의 용도 |
| CN113248520A (zh) * | 2021-04-07 | 2021-08-13 | 浙江华显光电科技有限公司 | 一种有机化合物及使用该化合物的有机发光器件 |
| WO2024080918A1 (en) * | 2022-10-13 | 2024-04-18 | Baylor College Of Medicine | Secretin inducing bacteria |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010008272A1 (en) * | 2008-07-15 | 2010-01-21 | N.V. Nutricia | Treatment of gut motility disorders |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07173188A (ja) * | 1993-12-17 | 1995-07-11 | Tsumura & Co | 新規アリソールおよびアリソール類を有効成分とする脳機能改善剤 |
| ID29150A (id) * | 1999-01-15 | 2001-08-02 | Entpr Ireland Cs | Penggunaan lactobacillus salivarius |
| FR2795917B1 (fr) | 1999-07-06 | 2001-08-31 | Gervais Danone Sa | Procede de preparation d'un produit lacte immunostimulant et ses applications |
| FR2811333B1 (fr) | 2000-07-04 | 2003-01-10 | Gervais Danone Sa | Microorganismes ayant une action modulatrice de la glycosylation de surface des cellules intestinales et methode de selection desdits microorganismes |
| PE20030284A1 (es) | 2001-07-26 | 2003-05-01 | Alimentary Health Ltd | Cepas de bifidobacterium |
| FR2875406B1 (fr) | 2004-09-21 | 2007-01-05 | Danisco | Souche de lactobacillus acidophilus ayant des proprietes analgesiques au niveau du systeme gastro-intestinal |
| ITMI20042189A1 (it) * | 2004-11-16 | 2005-02-16 | Anidral Srl | Composizione a base di batteri probiotici e suo uso nella prevenzione e-o nel trattamento di patologie e-o infezioni respiratorie e nel miglioramento della funzionalita' intestinale |
| AU2006296837B2 (en) | 2005-09-28 | 2012-12-13 | Nordic Rebalance A/S | Treatment of IBD and IBS using both probiotic bacteria and fermented cereal as treatment effectors |
| US20090311227A1 (en) | 2006-05-12 | 2009-12-17 | Danisco A/S | Composition |
| CN101095698B (zh) * | 2006-06-26 | 2010-12-01 | 青岛东海药业有限公司 | 酪酸梭菌防治便臭毒素引起的相关症状和疾病的用途 |
| WO2008064489A1 (en) | 2006-12-01 | 2008-06-05 | Mcmaster University | Probiotics to inhibit inflammation |
| FR2921795B1 (fr) * | 2007-10-03 | 2011-04-29 | Gervais Danone Sa | Utilisation d'une souche de bifidobacterium,pour la preparation d'une composition destinee a la prevention et/ou au traitement de manifestations de type allergique |
| EP2072053B1 (en) | 2007-12-21 | 2012-11-07 | Compagnie Gervais Danone | Method for decreasing abdominal girth by administering a bifidobacterium bacteria |
| EA021890B1 (ru) * | 2009-11-02 | 2015-09-30 | Компани Жервэ Данон | Способ предотвращения и/или лечения болезни воспаленного кишечника, язвенного колита и болезни крона |
| WO2011148220A1 (en) * | 2010-05-28 | 2011-12-01 | Compagnie Gervais Danone | Probiotic strains for use in improving transepithelial resistance |
-
2010
- 2010-05-28 WO PCT/IB2010/001534 patent/WO2011148219A1/en active Application Filing
-
2011
- 2011-05-27 JP JP2013511783A patent/JP5923492B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-05-27 WO PCT/IB2011/052344 patent/WO2011148355A1/en active Application Filing
- 2011-05-27 BR BR112012030359A patent/BR112012030359B1/pt active IP Right Grant
- 2011-05-27 EP EP14173452.5A patent/EP2857027B1/en active Active
- 2011-05-27 CA CA2800768A patent/CA2800768C/en active Active
- 2011-05-27 MX MX2012013834A patent/MX345063B/es active IP Right Grant
- 2011-05-27 US US13/700,485 patent/US9198940B2/en active Active
- 2011-05-27 EP EP11731504.4A patent/EP2575837B1/en active Active
- 2011-05-27 EA EA201291441A patent/EA028015B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2011-05-27 PT PT117315044T patent/PT2575837E/pt unknown
- 2011-05-27 PL PL11731504T patent/PL2575837T3/pl unknown
- 2011-05-27 ES ES11731504.4T patent/ES2508566T3/es active Active
- 2011-05-27 ES ES14173452T patent/ES2744274T3/es active Active
- 2011-05-27 KR KR1020127034391A patent/KR101779832B1/ko active IP Right Grant
- 2011-05-27 CN CN201180036975.4A patent/CN103209698B/zh not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-11-28 ZA ZA2012/08977A patent/ZA201208977B/en unknown
-
2015
- 2015-10-29 US US14/927,333 patent/US20160045557A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010008272A1 (en) * | 2008-07-15 | 2010-01-21 | N.V. Nutricia | Treatment of gut motility disorders |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| AGRAWAL ANURAG; HOUGHTON LESLEY A; MORRIS JULIE; GUYONNET DENIS; FEUILLERAT NATHALIE GOUPIL; SCHLUMBERGER ARMELLE; JAKOB STEFAN; W: "Fermented milk containing the probiotic bifidobacterium animalis, DN-173 010 (FM) improves abdominal distension, bloating and transit in irritable bowel syndrome with constipation (IBS-C)", GASTROENTEROLOGY, ELSEVIER, US, vol. 134, no. 4, Suppl. 1, 1 April 2008 (2008-04-01), US, pages A546, XP009107533, ISSN: 0016-5085, DOI: 10.1016/S0016-5085(08)62549-4 * |
| BIXQUERT JIMÉNEZ M: "Treatment of irritable bowel syndrome with probiotics. An etiopathogenic approach at last?", REVISTA ESPANOLA DE ENFERMEDADES DIGESTIVAS, GARSI, MADRID, ES, vol. 101, no. 8, 1 August 2009 (2009-08-01), ES, pages 553 - 564, XP002614983, ISSN: 1130-0108 * |
| CHEVALIER J, ET AL: "Activity-dependent regulation of tyrosine hydroxylase expression in the enteric nervous system.", THE JOURNAL OF PHYSIOLOGY, WILEY-BLACKWELL PUBLISHING LTD., GB, vol. 586, no. 7, 1 April 2008 (2008-04-01), GB, pages 1963 - 1975, XP002614984, ISSN: 0022-3751, DOI: 10.1113/JPHYSIOL.2007.149815 * |
| GUYONNET D ET AL: "Effect of a fermented milk containing Bifidobacterium animalis DN-173 010 on the health-related quality of life and symptoms in irritable bowel syndrome in adults in primary care: a multicentre, randomized, double-blind, controlled trial", ALIMENTARY PHARMACOLOGY & THERAPEUTICS., BLACKWELL SCIENTIFIC PUBLICATIONS LTD., CAMBRIDGE., GB, vol. 26, no. 3, 1 August 2007 (2007-08-01), GB, pages 475 - 486, XP002479503, ISSN: 0269-2813 * |
| HEUVELIN ELISE; LEBRETON CORINNE; GRANGETTE CORINNE; POT BRUNO; CERF-BENSUSSAN NADINE; HEYMAN MARTINE: "Mechanisms involved in alleviation of intestinal inflammation by bifidobacterium breve soluble factors.", PLOS ONE, PUBLIC LIBRARY OF SCIENCE, US, vol. 4, no. 4, 1 January 2009 (2009-01-01), US, pages e5184 - e5184-8, XP009142801, ISSN: 1932-6203 * |
| MOAYYEDI P; FORD A C; TALLEY N J; CREMONINI F; FOXX-ORENSTEIN A E; BRANDT L J; QUIGLEY E M M: "The efficacy of probiotics in the treatment of irritable bowel syndrome: a systematic review", GUT, BRITISH MEDICAL ASSOCIATION, LONDON,, UK, vol. 59, no. 3, 1 March 2010 (2010-03-01), UK, pages 325 - 332, XP009142658, ISSN: 0017-5749 * |
| PARKES G C; SANDERSON J D; WHELAN K: "Treating irritable bowel syndrome with probiotics: the evidence.", PROCEEDINGS OF THE NUTRITION SOCIETY, LONDON, GB, vol. 69, no. 2, 1 May 2010 (2010-05-01), GB, pages 187 - 194, XP009142663, ISSN: 0029-6651 * |
| THIBAULT H, AUBERT-JACQUIN C, GOULET O: "EFFECTS OF LONG-TERM CONSUMPTION OF A FERMENTED INFANT FORMULA (WITH BIFIDOBACTERIUM BREVE C50 AND STREPTOCOCCUS THERMOPHILUS 065) ON ACUTE DIARRHEA IN HEALTHY INFANTS", JOURNAL OF PEDIATRIC GASTROENTEROLOGY AND NUTRITION, LIPPINCOTT WILLIAMS WILKINS, INC., US, vol. 39, no. 02, 1 August 2004 (2004-08-01), US, pages 147 - 152, XP009043383, ISSN: 0277-2116, DOI: 10.1097/00005176-200408000-00004 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20130195822A1 (en) | 2013-08-01 |
| EP2857027A1 (en) | 2015-04-08 |
| EP2575837A1 (en) | 2013-04-10 |
| KR101779832B1 (ko) | 2017-09-19 |
| MX2012013834A (es) | 2013-04-08 |
| KR20140000620A (ko) | 2014-01-03 |
| US9198940B2 (en) | 2015-12-01 |
| ES2744274T3 (es) | 2020-02-24 |
| CA2800768C (en) | 2020-07-21 |
| WO2011148355A1 (en) | 2011-12-01 |
| CN103209698B (zh) | 2015-09-02 |
| BR112012030359B1 (pt) | 2020-05-05 |
| MX345063B (es) | 2017-01-16 |
| ZA201208977B (en) | 2014-04-30 |
| PL2575837T3 (pl) | 2015-03-31 |
| JP2013528053A (ja) | 2013-07-08 |
| PT2575837E (pt) | 2014-10-01 |
| BR112012030359A2 (pt) | 2016-08-09 |
| JP5923492B2 (ja) | 2016-05-24 |
| CN103209698A (zh) | 2013-07-17 |
| EP2857027B1 (en) | 2019-06-12 |
| CA2800768A1 (en) | 2011-12-01 |
| EP2575837B1 (en) | 2014-06-25 |
| WO2011148219A1 (en) | 2011-12-01 |
| US20160045557A1 (en) | 2016-02-18 |
| EA201291441A1 (ru) | 2013-05-30 |
| ES2508566T3 (es) | 2014-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA028015B1 (ru) | Пробиотические штаммы для улучшения состояния кишечной нервной системы | |
| EP2123168B1 (en) | Lactobacillus paracasei and weight control | |
| TWI572354B (zh) | 抑制發炎之組成物 | |
| JP6197045B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・アニマリスｓｓｐ．アニマリスの株 | |
| DK2478910T3 (en) | ANTI-ADIPOSITY AGENT, ANTI-ADIPOSITA NUTRITION OR DRINK, GLUCOSE TOLERANCE EFFECTIVE AGENT, AND NUTRITION OR DRINK FOR IMPROVING GLUCOSE TOLERANCE | |
| Zhao et al. | Lactobacillus plantarum YS-3 prevents activated carbon-induced constipation in mice | |
| US20150182566A1 (en) | Lactic acid bacterium-containing preparation | |
| EP2482829A1 (en) | Bifidobacterium longum atcc baa-999 (bl999) and weight control | |
| JP5816273B2 (ja) | 経上皮抵抗の改善に用いるためのプロバイオティクス株 | |
| TWI782550B (zh) | 具減少脂肪與提升運動表現的乳酸菌組合物及其用途 | |
| ES2763874B2 (es) | Phascolarctobacterium faecium para su uso en la prevencion y tratamiento de la obesidad y sus comorbilidades | |
| TW202207957A (zh) | 具有優異的耐酸性和耐膽汁性且對血脂異常症具有預防或治療效果的新型短雙歧桿菌idcc 4401菌株及其死菌體id-bbr4401 | |
| CN117643379A (zh) | 动物双歧杆菌乳亚种i797在制备护眼产品中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |