EA027670B1

EA027670B1 - ПРИМЕНЕНИЕ 2,3-ДИГИДРОИМИДАЗО[1,2-с]ХИНАЗОЛИНОВОГО СОЕДИНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОТДЕЛЬНЫХ ВИДОВ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Info

Publication number: EA027670B1
Application number: EA201301106A
Authority: EA
Inventors: Ниншу Лю; Клаудиа Шнайдер
Original assignee: Байер Интеллектчуал Проперти Гмбх
Priority date: 2011-04-05
Filing date: 2012-03-29
Publication date: 2017-08-31
Also published as: AU2012238887A1; NZ615502A; MA35015B1; MY169532A; SG193577A1; ECSP13013007A; IL228435A0; JP6013446B2; DOP2013000224A; BR112013025517A2; CA2832120C; CN103608018B; AU2017203474A1; EP2694069A1; UY33984A; TN2013000402A1; PE20140571A1; CL2013002869A1; CA2832120A1; CU20130134A7

Abstract

Изобретение относится к применению 2-амино-N-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-c]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или фармацевтической композиции, которая содержит указанное соединение в качестве единственного активного средства для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики злокачественного новообразования; комбинациям a) указанного соединения и b) Bcl ингибитора и/или ингибитора mTOR пути; фармацевтической композиции, которая содержит комбинацию а) указанного соединения и b) Bcl ингибитора и/или ингибитора mTOR пути; применению комбинации а) указанного соединения и b) Bcl ингибитора и/или ингибитора mTOR пути или фармацевтической композиции, содержащей такую комбинацию, для лечения или профилактики злокачественного новообразования.

Description

(57) Изобретение относится к применению 2-амино-М-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или фармацевтической композиции, которая содержит указанное соединение в качестве единственного активного средства для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики злокачественного новообразования; комбинациям а) указанного соединения и Ь) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК. пути; фармацевтической композиции, которая содержит комбинацию а) указанного соединения и Ь) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК пути; применению комбинации а) указанного соединения и Ь) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК пути или фармацевтической композиции, содержащей такую комбинацию, для лечения или профилактики злокачественного новообразования.

Настоящее изобретение относится к применению 2-амино-Н-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или фармацевтической композиции, которая содержит указанное соединение, в качестве единственного активного средства для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики злокачественного новообразования, например рака молочной железы, который классифицирован на несколько подтипов в клинике, таких как гормон рецептороположительный рак молочной железы, Нег2 рецептороположительный рак молочной железы, рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом и отечно-инфильтративный рак молочной железы;

комбинациям а) указанного соединения и Ъ) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК пути; фармацевтической композиции, которая содержит комбинацию а) указанного соединения и Ъ) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК пути;

применению комбинации а) указанного соединения и Ъ) Вс1 ингибитора и/или ингибитора тТОК пути или фармацевтической композиции, содержащей такую комбинацию, для лечения или профилактики злокачественного новообразования.

Предпосылки создания изобретения

За последние десятилетия концепция разработки противораковых лекарственных средств, которые нацелены на атипично активные протеинкиназы, привела к большим достижениям. Дополнительно к действиям протеинкиназ липидкиназы также играют важную роль в создании чрезвычайно важных регуляторных вторичных мессенджеров. Семейство ΡΙ3Κ липидкиназ генерирует З'-фосфатидилинозитолы, которые связываются с и активируют различные клеточные мишени, инициируя разнообразные каскады передачи сигналов (УапЬаезеЪгоеск и др., 2001; Токег, 2002; Реибапез и др., 2003; Эо\упез и др., 2005). Эти каскады в конечном итоге индуцируют изменения множества клеточных процессов, включая пролиферацию клеток, выживание клеток, дифференциацию, перемещение везикул, миграцию и хемотаксис.

ΡΙ3Κ могут быть разделены на три разные классы на основании различий как в структуре, так и в предпочтениях для субстратов. В то время как представители класса II семейства ΡΙ3Κ вовлечены в регуляцию роста опухоли (Вгота и ЗЬерагб, 2001; Тгаег и др., 2006) основные исследования были сфокусированы на ферментах класса I и их роли при злокачественном новообразовании (УКапсо и За^уегз, 2002; ХУогктап. 2004, СЬеп и др., 2005; Неппеззеу и др., 2005; §!аийег и др., 2005; §!ерЬепз и др., 2005; Си11у и др., 2006).

Класс I ΡΙ3Κ обычно разделяют на два индивидуальных подкласса на основании различий в составе белковой субъединицы. Класс Ц ΡΓ3Κ состоит из каталитической р110 каталитической субъединицы (ρ110α, ρ110β или ρ110γ), гетеродимеризован с представителем семейства р85 регуляторной субъединицы. В отличие от этого каталитическая субъединица φ110γ) класса Ц ΡΓ3Κ гетеродимеризируется с другой р101 регуляторной субъединицей (обзор УапЬаезеЪгоеск и Уа!егйе1б, 1999; Рипак и др., 2000; 1<а!зо и др., 2001). С-концевой участок этих белков содержит каталитический домен, который обладает отдаленной гомологией к протеинкиназам. ΡΒΚγ структура сходна с классом Ц р110з, но отсутствует Νконцевой р85 связывающий сайт (Эот1п и Уа!егйе1б, 1997). Несмотря на сходство в общей структуре гомология между каталитическими р110 субъединицами от низкой к умеренной. Наивысшая гомология между ΡΌΚ изоформами представлена в киназном кармане домена киназы.

Изоформы класса I ΡΓ3Κ связаны с активированными рецепторными тирозинкиназами (КТО) (включая ΡΌΟΡΚ, ЕОРК, УЕСРК, ЮР1-К, с-Ш, С8Р-К и Ме!), рецепторами цитокинов, ΟΡί.’Κ интегринами или с тирозин-фосфорилированными адаптерными белками (такими как ОгЪ2, СЪ1, ГК8-1 или ОаЪ1) посредством их р85 регуляторных субъединиц, что приводит к стимуляции активности липидкиназы. Было показано, что активация активности липидкиназы р110в и ρ110γ происходит в ответ на связывание с активированными формами онкогена газ (1<оба1б и др., 1994). Фактически, для онкогенной активности этих изоформ может потребоваться связывание с газ (Саид и др., 2006). В отличие от этого р110а и р110в изоформы проявляют онкогенную активность независимо от связывания газ посредством конститутивной активации Ак!

Класс I ΡΓ3Κ катализирует превращение Ρ^4,5)Ρ₂ [ΡΨ₂] в Ρ^3,4,5)Ρ₃ [ΡΨ₃]. Продукция Ρ№₃ посредством ΡΓ3Κ оказывает влияние на различные процессы передачи сигналов, которые регулируют и координируют биологические конечные точки пролиферации клеток, выживания клеток, дифференциации и миграции клеток. ΡΓΡ₃ связывается посредством плекстрин-гомологии (ΡΗ) доменсодержащих белков, включая фосфатидилинозитолзависимую киназу, ΡΌΚ1 и Ак! протоонкогенный продукт, локализируя эти белки в участках активной передачи сигналов и также непосредственно способствуя их активации (1<Ирре1 и др., 1997; Р1етшд и др., 2000; ЙоЬ и Такетта, 2002; Ьеттоп, 2003). Эта колокализация ΡΌΚ1 с Ак! способствует фосфорилированию и активации Ак!. Карбоксиконцевое фосфорилирование Ак! на §ег⁴⁷³ стимулирует фосфорилирование ТЬг³⁰⁸ на Ак! активационной петле (СЬап и ТзюЬЪз, 2001; Нобдекшзоп и др., 2002; §сЬе1б и др., 2002; Нгезко и др., 2003). При активации Ак! фосфорилирует и регулирует различные регуляторные киназы каскадов реакции, которые оказывают непосредственное влияние на прохождение клеточного цикла и выживание клеток.

Многие эффекты активации Ак! опосредуются путем ее отрицательной регуляции каскада реакций,

- 1 027670 которые оказывают влияние на выживание клеток и которые обычно разрегулированы при злокачественном новообразовании. Ак! способствует выживанию опухолевых клеток путем регуляции компонентов апоптоза и компонентов клеточного цикла. Ак! является одной из нескольких киназ, которые фосфорилируют и инактивируют про-апоптотические ΒΆΌ белки (йе1 Рако и др., 1997; РакЮппо и др., 1999). Лк! также может способствовать выживанию клеток путем блокирования цитохром С-зависимой активации каспазы путем фосфорилирования каспазы 9 на 8ег¹⁹⁶ (Сагйопе и др., 1998).

Ак! оказывает влияние на транскрипцию генов на нескольких уровнях. Ак-опосредованное фосфорилирование ΜΌΜ2 Е3 убиквитин лигазы на 8ег¹⁶⁶ и 8ег¹⁸⁶ облегчает ядерный импорт ΜΌΜ2 и образование и активацию комплекса убиквитин - лигазы. Ядерный ΜΌΜ2 нацеливает р53 опухолевый супрессор для деградации, процесс, который может быть блокирован с помощью ЬУ294002 (Уар и др., 2000; Одага\\а и др., 2002). Понижающая регуляция р53 посредством ΜΌΜ2 оказывает отрицательное влияние на транскрипцию р53-регулируемых про-апоптотических генов (например, Вах, Рак, ΡυΜΑ и ΌΚ5), ингибитора клеточного цикла, р21^С1р1, и ΡΤΕΝ опухолевого супрессора ВДотапб и др., 2000; Нирр и др., 2000; Μауо и др., 2002; 8и и др., 2003). Аналогичным образом, Ак!-опосредованное фосфорилирование транкрипционных факторов РКНК, РКНКЬ и АРХ семейства РогкЬеай (Корк и др., 1999; Тапд и др., 1999), облегчает их связывание с 14-3-3 белками и экспорт из ядра в цитозоль (Вгипе! и др., 1999). Эта функциональная инактивация активности РогкЬеай также оказывает влияние на транскрипцию проапоптотических и про-ангиогенных генов, включая транскрипцию Рак лиганда (СлесЬоткка и др., 2003) В1т, представителя про-апоптотического семейства Вс1-2 (Эукегк и др., 2000), и антагониста ангиопоэтина-1 (Апд-1), Апд-2 (Эа1у и др., 2004). Транскрипционные факторы семейства РогкЬеай регулируют экспрессию ингибитора циклинзависимой киназы (Сйк) р27^К1р1. Действительно, было показано, что Р13К ингибиторы индуцируют экспрессию р27^К1р1, что приводит к ингибированию Сйк1, остановке клеточного цикла и апоптозу (Эукегк и др., 2000). Описано, что Ак! также фосфорилирует р21^С1р1 на ТЬг¹⁴⁵ и р27^К1р1на ТЬг¹⁵⁷, облегчая их ассоциацию с 14-3-3 белками, что приводит к ядерному экспорту и удерживанию в цитоплазме, предотвращая их ингибирование ядерными Сйкк (2Ьои и др., 2001; Μо!!^ и др., 2004; 8ек1то!о и др., 2004). Дополнительно к этим эффектам Ак! фосфорилирует 1КК (КотакЬкоуа и Μака^оν, 1999), что приводит к фосфорилированию и разложению 1кВ и последующей ядерной транслокации ОТкВ, вызывая экспрессию генов выживания, таких как 1АР и Вс1-Х_ъ.

Р13К/Ак! путь также связан с супрессией апоптоза посредством в Ж и р38^ΜΑΡК ΜΑΡ киназ, которые ассоциированы с индукцией апоптоза. Предполагают, что Ак! подавляет Ж и р38^ΜΑΡК передачу сигналов путем фосфорилирования и ингибирования двух ЖК/р38 регуляторных киназ, киназы, регулирующей сигнал апоптоза 1 (А8К1) (йт и др., 2001: Ыао и Нипд, 2003; Уиап и др., 2003), и киназы смешанного типа 3 (Μυ<3) (Ъоре/-11акаса и др., 1997; Ваг1Ь\уа1 и др., 2003; Р1диегоа и др., 2003). Индукция активности р38ΜΑΡК наблюдается в опухолях, которые лечили с помощью цитотоксических средств и необходима для этих агентов для индуцирования клеточной гибели (обзор О1коп и На11аЬап, 2004). Таким образом, ингибиторы Р13К пути могут способствовать активностям совместно введенных цитотоксических лекарственных средств.

Дополнительная роль для Р13К/Ак! передачи сигналов включает регуляцию осуществления клеточного цикла путем модуляции активности киназы гликогенсинтазы 3 (О8К3). Активность О8К3 повышена в покоящихся клетках, где она фосфорилирует циклин Ό! на 8ег²⁸⁶, нацеливая белок для убиквитинизации и разложения (ЖеЫ и др., 1998) и блокируя вхождения в 8-фазу. Ак! ингибирует О8К3 активность путем фосфорилирования на 8ег⁹ (Сгокк и др., 1995). Это приводит к повышению уровней циклина Όι, который способствует осуществлению клеточного цикла. Ингибирование активности О8К3 также оказывает влияние на пролиферацию клеток путем активации пути передачи сигналов \уп1/в-катенин (АЬЬокЬ и №рЬе\у, 2005; №-Шо и др., 2005; ХУПкег и др., 2005; К1т и др., 2006; 8едге11ек и др., 2006). Ак! опосредует фосфорилирование О8К3, что приводит к стабилизации и ядерной локализации белка β-катенин, что, в свою очередь, приводит к повышению экспрессии с-тус и циклин мишеней пути βкатенин/ТсГ.

Несмотря на то, что Р13К передача сигналов используется многими системами передачи сигналов, связанными как с онкогенами, так и с опухолевыми супрессорами, Р13К и ее активность связаны непосредственно со злокачественным новообразованием. Сверхэкспрессия обеих изоформ р110а и р110в наблюдается в опухолях мочевого пузыря и толстой кишки и клеточных линиях, и сверхэкспрессия обычно коррелирует с повышенной активностью Р13К (Вешк!ап! и др., 2000). Сверхэкспрессия р110а также описана в опухолях яичника и шейки матки и опухолевых клеточных линиях, а также в плоскоклеточных карциномах легких. Сверхэкспрессия р110а в опухолевых линиях шейки матки и яичников связана с повышенной активностью Р13К (8Ьауек!еЬ и др., 1999; Μа и др., 2000). Повышенная активность Р13К наблюдается в колоректальных карциномах (РЫШрк и др., 1998), и повышенная экспрессия наблюдается в карциномах молочной железы (ОегкЫеш и др., 1999).

В течение последних нескольких лет в различных злокачественных новообразованиях были идентифицированы соматические мутации в гене, кодирующем р110а (Р1К3СА). Данные, собранные до настоящего времени, свидетельствуют о том, что Р1К3СА мутирована приблизительно в 32% случаев коло- 2 027670 ректального рака (8атие15 и др., 2004; 1кепоие и др., 2005), 18-40% случае рака молочной железы (ВасЬтап и др., 2004; СатрЬе11 и др., 2004; Ьеуше и др., 2005; §аа1 и др., 2005; \Уи и др., 2005), 27% глиобластом (§атие18 и др., 2004; Найтапп и др., 2005, Са1Ьа и др., 2006), 25% случаев рака желудка (Вуип и др., 2003; §атие18 и др., 2004; Ы и др., 2005), 36% печеночно-клеточных карцином (Ьее и др., 2005), 4-12% рака яичника (Ьеуше и др., 2005; \Уапд и др., 2005), 4% рака легких (§атие18 и др., 2004; \УЬу1е и Но1Ьеск, 2006), и вплоть до 40% рака эндометрия (Оба и др., 2005). Р1К3СА мутации были описаны в олигодендроме, астроцитоме, медуллобластоме, а также опухолях щитовидной железы (Вгобейск и др., 2004; Сагаа-Ройап и др., 2005). Согласно наблюдаемой высокой частоте мутаций Р1К3СА представляет собой один из двух наиболее часто мутированных генов, связанных со злокачественным новообразованием, другим таким геном является К-газ. Более чем 80% мутаций Р1К3СА кластеризуются в пределах двух участков белка, спиральном (Е545К) и каталитическом (Н1047К) доменах. При биохимическом анализе и исследованиях экспрессии белка было показано, что обе мутации приводят к повышенной конститутивной р110а каталитической активности и фактически являются онкогенными (Вабег и др., 2006; Капд и др., 2005; §атиек и др., 2005; ЗатнеЕ и Епсюп. 2006). Недавно было описано, что фибробласты эмбрионов мышей с нокаутным Р1К3СА были лишены нижерасположенной передачи сигналов от различных рецептором факторов роста (ЮР-1, инсулин, РЭСЕ ЕСР), и были устойчивы к трансформации различными онкогенными ВТК (ЮРК, ЕСРК дикого типа и соматические активированные мутанты ЕСРК, Нег2/\еи)(/Ьао и др., 2006).

В функциональных исследованиях Р13К ш νί\Ό было показано, что опосредованная миРНК нижерасположенная регуляция ρ110β ингибирует как фосфорилирование Акб так и рост клеток НеЬа у бесшерстых мышей (С/аибегпа и др., 2003). В аналогичных экспериментах было показано, что опосредованная миРНК нижерасположенная регуляция ρ110β ингибирует рост злокачественных глиомных клеток ш νΐίΐΌ и ш νί\Ό (Ри и др., 2006). Ингибирование функции Р13К с помощью доминатно-отрицательных р85 регуляторных субъединиц может блокировать митогенез и трансформацию клеток (Ниапд и др., 1996; РаЬиш и др., 1996). Также в различных злокачественных клетках были идентифицированы несколько соматических мутаций в генах, кодирующих р85а и р856 регуляторные субъединицы Р13К, которые приводят к повышенной активности липидкиназы (1ап88еп и др., 1998; Ьтепе/ и др., 1998; РЬПр и др., 2001; .Тискег и др., 2002; §Ьекаг и др., 2005). Нейтрализирующие Р13К антитела также блокируют мутагенез и могут индуцировать апоптоз ш νΐίΐΌ (КосЬе и др., 1994: КосЬе и др., 1998; Веп18ТапТ и др., 2000). В контрольно-проверочных исследованиях ш νί\Ό с использованием Р13К ингибиторов ЬУ294002 и вортманнина было показано, что ингибирование передачи сигналов с помощью Р13К замедляет рост опухоли ш νί\Ό (Ро\\а8 и др., 1994; 81шЬ/ и др., 1995; ЗетЬа и др., 2002; 1Ь1е и др., 2004).

Сверхэкспрессия активности класса I Р13К или стимуляция их активностей липидкиназ ассоциирована с резистентностью как с целевым (таким как иматиниб и трастузумаб) и цитотоксическим химиотерапевтическим подходами, а также к лучевой терапии (\Уе51 и др., 2002; СирТа и др., 2003; Озак1 и др., 2004; №ща1а и др., 2004; Сой8сЬа1к и др., 2005; Кат и др., 2005). Также было показано, что активация Р13К приводит к экспрессии белка-1, резистентного ко многим лекарственным средствам (МКР-1), в клетках рака предстательной железы и последующей индукции резистентности к химиотерапии (Ьее и др., 2004).

Важность передачи сигналов с помощью Р13К в опухолегенезе дополнительно подчеркивается полученными данными, согласно которым РТЕЫ опухолевый супрессор, Р1(3)Р фосфатаза, является одним из наиболее часто инактивированных генов при злокачественных новообразованиях у людей (Ы и др., 1997, §Теск и др., 1997; АЬ и др., 1999; Ιδίιίί и др., 1999). РТЕЫ дефосфорилирует Р1(3,4,5)Р₃ То Р1(4,5)Р₂, таким образом антагонизируя Р13К-зависимой передачи сигналов. Клетки, содержащие функционально неактивный РТЕН имеют повышенные уровни Р1Р₃, более высокие уровни активности Р13К передачи сигналов (Нааз-Кодап и др., 1998; Муегз и др., 1998; Тау1ог и др., 2000), повышенный пролиферативный потенциал и сниженную чувствительность к про-апоптотическим стимулам (§ТатЬоЬс и др., 1998). Восстановление функционирования РТЕЫ подавляет Р13К передачу сигналов (Тау1ог и др., 2000), ингибирует рост клеток и возвращает чувствительность клеток к про-апоптотическим стимулам (Муегз и др., 1998; 2Ьао и др., 2004). Аналогичным образом, возобновление функционирования РТЕЫ в опухолях, в которых отсутствует функциональная РТЕЫ, ингибирует рост опухоли (§ТаЬ1 и др., 2003; §ц и др., 2003; Тапака и Сгоззтап, 2003) и сенсибилизирует клетки к цитотоксическим компонентам (Тапака и Сгоззтап, 2003).

Класс I семейства Р13К, несомненно, играет важную роль в регуляции различных путей передачи сигналов, которые способствуют выживанию клеток и пролиферации клеток, и активация их липидкиназной активности значительно способствует развитию злокачественных новообразований у людей. Кроме того, ингибирование Р13К потенциально может обмануть клеточные механизмы, которые лежат в основе резистентности к химиотерапевтическим средствам. Таким образом, сильнодействующий ингибитор активностей класса I Р13К будет иметь потенциал не только относительно ингибирования роста опухоли, но также и сенсибилизировать опухолевые клетки к про-апоптотическим стимулам ш νί\Ό.

Пути передачи сигналов, имеющие происхождение из рецепторов хемоаттрактантов, рассматрива- 3 027670 ются как важные мишени контролирования подвижности лейкоцитов при воспалительных заболеваниях. Направленная миграция лейкоцитов контролируется хемоаттрактантными факторами, которые активируют гетеротримерные ОРСК и таким образом запускают нижерасположенные внутриклеточные события. Передача сигналов с помощью одного из этих путей, который приводит к мобилизации свободного Са²'. перестройкам цитоскелета и направленному движению, зависит от липид-производных вторичных мессенджеров, продуцируемых с помощью активности Р13К (Аутапп и др., 2000; δΐβίη и Аа1сгПс1й. 2000).

ΡΙ3Κγ модулирует базовые уровни цАМФ и контролирует сокращаемость в клетках. Недавние исследования свидетельствуют о том, что изменения базовых уровней цАМФ способствует повышению сокращаемости у мутантных мышей. Таким образом, в этом исследовании продемонстрировано, что ΡΙ3Κγ ингибиторы обладают потенциальными терапевтическими возможностями при застойной сердечной недостаточности, ишемии, легочной гипертонии, почечной недостаточности, гипертрофии миокарда, атеросклерозе, тромбоэмболии и диабете.

Полагают, что ΡΙ3Κ ингибиторы будут блокировать передачу сигналов от ОРСК и блокировать активацию различных иммунных клеток, что вызывает широкий противоспалительный профиль с потенциалом для лечения воспалительных и иммунорегуляторных заболеваний, включая астму, атопический дерматит, ринит, аллергические заболевания, хроническое обструктивное заболевание легких (ХОЗЛ), септический шок, заболевания суставов, аутоиммунные патологии, такие как ревматоидный артрит и диффузный токсический зоб, диабет, злокачественное новообразование, нарушение сократительной способности миокарда, тромбоэмболию и атеросклероз.

Рак молочной железы является заболеванием, распространенным во всем мире, и в США эта болезнь является второй наиболее распространенной причиной смерти от злокачественного новообразования у женщин. У приблизительно 1 из 8 женщин в США (12%) будет развиваться инвазивный рак молочной железы в течение времени жизни. В 2010 предполагают диагностировать примерно 207 тысяч 90 новых случаев инвазивного рака молочной железы наряду с 54 тыс. 10 новых случаев неинвазивного рака молочной железы. Предполагают, что около 39 тыс. 840 женщин умрет в 2010 году от рака молочной железы. Варианты классификации и лечения обычно основываются на состоянии рецептора. Тремя наиболее важными в настоящей классификации являются рецептор эстрогена (ЕК), рецептор прогестерона (РК) и НЕК2/пеи. Клетки с или без этих рецепторов называются ЕК положительными (ЕК+), ЕК отрицательными (ЕК-), РК положительными (РК+), РК отрицательными (РК-), НЕК2 положительными (НЕК2+) и НЕК2 отрицательными (НЕК2-). Клетки, не имеющие ни одного из этих рецепторов, называются базальноподобными или тройными отрицательными. В последнее время в клинике также используется классификация на основе ДНК. Профили специфических ДНК мутаций или экспрессии генов идентифицированы в злокачественных клетках, эта классификация может являться руководством для отбора лечения, либо путем нацеливания этих изменений, или путем предсказания из ДНК профиля, какие из ненацеленных терапий будут наиболее эффективными.

Было обнаружено, что путь Р13К/РТЕЫ/АКТ часто активирован и/или мутирован при раке молочной железы у людей, что способствует развитию и прогрессированию рака молочной железы, а также резистентности к лекарственным средствам. В связи с тем, что генетические изменения Р1К3СА и РТЕЫ, а также активация пути Р13К наблюдается практически при всех подтипах рака молочной железы, таких как НЕК2 положительный, гормон рецептороположительный или рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, то чрезвычайно важным является определение стратегии для разработки ингибиторов Р13К пути при раке молочной железы. Таким образом, в настоящем изобретении идентифицированы молекулярные маркеры, которые предсказывают чувствительность и/или резистентность пациентов со злокачественными новообразованиями к Р13К ингибиторам, описанным в настоящей заявке. Кроме того, настоящее изобретение также относится к идентификации механизмов резистентности и, следовательно, обеспечивает рационально обоснованную синергетическую комбинацию для преодоления резистентности.

Насколько известно заявителю в известном уровне техники отсутствуют специфические раскрытия относительно того, что 2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолиновые соединения будут являться эффективными для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы, гормон рецептороположительного рака молочной железы.

Было обнаружено, и это составляет основу настоящего изобретения, что 2,3-дигидроимидазо[1,2с]хиназолиновые соединения, как описано и определено в настоящей заявке, проявляют благоприятное влияние для лечения или профилактики рака молочной железы, в особенности отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы, гормон рецептороположительного рака молочной железы.

Таким образом, в соответствии с первым аспектом настоящее изобретение относится к применению 2-амино-Н-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера в

- 4 027670 качестве единственного активного средства, или фармацевтической композиции, которая содержит такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер в качестве единственного активного средства для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормонрецептороположительного рака молочной железы.

В соответствии со вторым аспектом настоящее изобретение относится к комбинациям:

a) 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтической композиции, содержащей такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, и

b) Вс1 ингибитор, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитор тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус).

В соответствии с третьим аспектом настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые содержат комбинацию:

В соответствии с четвертым аспектом настоящее изобретение относится к применению комбинаций:

a) 2-амино-Ы-[7 -метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5 ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтической композиции, содержащей такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, и

b) Вс1 ингибитор, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитор тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус);

или фармацевтической композиции, содержащей такую комбинацию, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы, гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой отечно-инфильтративный рак молочной железы.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой Нег2 рецептороположительный рак молочной железы.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой гормонрецептороположительный рак молочной железы.

Подробное описание изобретения

Первый аспект настоящего изобретения относится к применению 2-амино-Л-[7-метокси-8-(3морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера в качестве единственного активного средства или комбинаций:

a) 2-амино-Л-[7-метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; и

b) Вс1 ингибитора, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитора тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус); или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, или фармацевтических композиций, которые содержат такие комбинации, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

В предпочтительном варианте осуществления изобретение охватывает применение соединения,

- 5 027670 имеющего формулу

2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамид или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера;

в качестве единственного активного средства, или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормонрецептороположительного рака молочной железы.

В предпочтительном варианте осуществления изобретение охватывает применение комбинаций:

a) 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; и

a) 2-амино-Ы-[7 -метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5 ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; и

b) Вс1 ингибитора, такого как АВТ-737; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, или фармацевтических композиций, которые содержат такие комбинации, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

b) АВТ-737; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, или фармацевтических композиций, которые содержат такие комбинации, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

a) 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5 ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; и

b) ингибитора тТОК пути, такого как рапамицин (сиролимус); или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, или фармацевтических композиций, которые содержат такие комбинации, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

b) рапамицина (сиролимус); или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, или фармацевтических композиций, которые содержат

- 6 027670 такие комбинации, для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.

Если присутствует несоответствие между химическим названием и представленной химической структурой, то представленная химическая структура имеет преимущество по отношению к приведенному химическому названию.

Не желая ограничиваться теорией или механизмом, соединения согласно настоящему изобретению проявляют неожиданную активность относительно ингибирования фосфатидилинозитол-3-киназы и химически и структурно стабильны по сравнению с соединениями, известными из уровня техники. Полагают, что эта неожиданная активность основывается на химической структуре соединений, в особенности основности соединений вследствие того, что К¹ представляет собой амино, необязательно замещенный К⁵ и К⁵. Кроме того, соответствующий выбор К³ и К² обеспечивает необходимую активность по отношению к соответствующим изоформам для предоставления возможности активности в условиях ίη νίνο.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой отечно-инфильтративный рак молочной железы.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой Нег2 рецептороположительный рак молочной железы.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой гормон-рецептороположительный рак молочной железы.

Определения.

Если используется форма множественного числа соединений, солей, полиморфов, гидратов, сольватов и других в настоящем изобретении, то это также охватывает единственное соединение, соль, полиморф, изомер, гидрат, сольват или другие.

Соединения согласно настоящему изобретению могут содержать один или несколько ассиметричных центров в зависимости от расположения и природы различных желательных заместителей. Ассиметричные атомы углерода могут присутствовать в (К) или (§) конфигурации, что приводит к получению рацемических смесей в случае единственного ассиметричного центра и диастереомерных смесей в случае множества ассиметричных центров. В определенных случаях ассиметрия также может присутствовать вследствие ограниченного вращения вокруг данной связи, например центральная связь, прилегающая к двум замещенным ароматическим кольцам указанных соединений. Заместители на кольце также могут присутствовать либо в цис- или транс-форме. Подразумевается, что все такие конфигурации (включая энантиомеры и диастереомеры) подпадают под объем настоящего изобретения. Предпочтительными соединениями являются те соединения, которые продуцируют более желательную биологическую активность. Разделенные, чистые или частично очищенные изомеры и стереоизомеры или рацемические или диастереомерные смеси соединений согласно настоящему изобретению также охватываются объемом настоящего изобретения. Очистка и разделение таким материалов может осуществляться с помощью стандартных техник, известных в данной области.

Настоящее изобретение также относится к полезным формам соединений, как раскрыто в настоящей заявке, таким как фармацевтически приемлемые соли, копреципитаты, метаболиты, гидраты, сольваты и пролекарства всех соединений из примеров. Термин фармацевтически приемлемая соль относится к относительно нетоксичной соли присоединения неорганической или органической кислоты соединения согласно настоящему изобретению. Например, см. δ.Μ. Вегде и др. РЬагшасеийса1 δαίίκ, ί. РЬатш. §с1. 1977, 66, 1-19. Фармацевтически приемлемые соли включают те соли, которые получены путем взаимодействия основного соединения, действующего в качестве основания, с неорганической или органической кислотой с образованием соли, например соли соляной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, метансульфоновой кислоты, камфор сульфоновой кислоты, щавелевой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты и лимонной кислоты. Фармацевтически приемлемые соли также включают те соли, в которых основное соединение действует в качестве кислоты и взаимодействует с подходящим основанием с образованием, например, солей натрия, калия, кальция, магния, аммония и хлора. Для специалиста в данной области техники также будет понятным, что соли присоединения кислоты заявленных соединений могут быть получены путем взаимодействия соединений с подходящей неорганической или органической кислотой с помощью любого из известных различных методов. Альтернативно, соли щелочных и щелочно-земельных металлов кислотных соединений согласно изобретению приготавливают путем взаимодействия соединений согласно изобретению с подходящим основанием с помощью

- 7 027670 различных известных методов.

Репрезентативные соли соединений согласно настоящему изобретению включают общепринятые нетоксичные соли и соли четвертичного аммония, которые образованы, например, из неорганических или органических кислот или оснований с помощью методов, известных в данной области техники. Например, такие соли присоединения кислот включают ацетат, адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циннамат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, хлорид, бромид, йодид, 2-гидроксиэтансульфонат, итаконат, лактат, малеат, манделат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, сульфонат, сульфат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат.

Основные соли включают соли щелочных металлов, такие как соли калия и натрия, соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и магния, и соли аммония с органическими основаниями, такими как дициклогексиламин и Ν-метил-О-глюкамин. Дополнительно, основные азотсодержащие группы могут быть кватернизированы с такими агентами, как низшие алкилгалогениды, такие как метил, этил-, пропил- или бутилхлориды, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил-, диэтил-, дибутилсульфат или диамилсульфаты, длинноцепочечные галогениды, такие как децил, лаурил, миристил и стерарилхлориды, бромиды и йодиды, аралкилгалогениды, такие как бензил и фенетилбромиды и другие.

Сольват для целей настоящего изобретения представляет собой комплекс растворителя и соединения согласно изобретению в твердом состоянии. Примеры сольватов будут включать, но не ограничиваясь только ими, комплексы соединения согласно изобретению с этанолом или метанолом. Гидраты представляют собой специфическую форму сольвата, где растворителем является вода.

Синтез соединений, представленных выше, описан в международной патентной заявке № РСТ/ЕР 2003/010377, опубликованной как \УО 2004/029055 А1, и в международной патентной заявке № РСТ/ϋδ 2007/024985, опубликованной как \УО 2008/070150, обе таким образом полностью включены в настоящую заявку в качестве ссылки.

В соответствии с другим вариантом осуществления настоящее изобретение относится к 2,3дигидроимидазо[1,2-с]хиназолинового соединения, как определено в настоящей заявке, в особенности 2амино-^[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамиду, или его физиологически приемлемой соли, сольвату, гидрату или стереоизомеру, в качестве единственного агента для лечения злокачественного новообразования, например рака молочной железы, в особенности отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы, гормонрецептороположительного рака молочной железы.

Комбинированные терапии.

Как было указано выше, настоящее изобретение относится к комбинациям:

a) 2-амино-^[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида, как определено выше, или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер; и

b) Вс1 ингибитора, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитора тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус).

В предпочтительном варианте осуществления изобретение охватывает комбинации:

a) 2-аминок-|7 -метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5 ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер; и

b) Вс1 ингибитора, такого как АВТ-737.

- 8 027670

a) 2-амино-М-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер; и

b) АВТ-737.

a) 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер; и

b) ингибитора тТОК пути, такого как рапамицин (сиролимус).

b) рапамицина (сиролимус).

Соединения согласно настоящему изобретению могут вводиться в виде единственного фармацевтического компонента или в комбинации с одним или несколькими другими фармацевтическими компонентами (или дополнительными активными компонентами), где комбинация не вызывает нежелательных побочных действий. Например, соединения согласно настоящему изобретению могут комбинироваться с известными антиангиогенезными, антигиперпролиферативными, противовоспалительными, обезболивающими, иммунорегулирующими, диуретическими, антиаритмическими, антигиперхолестеринемическими, антидислипидемическими, противодиабетическими или противовирусными средствами и другими, а также с их смесями и комбинациями.

Дополнительный фармацевтический компонент или компоненты (или дополнительный активный компонент) может представлять собой, но не ограничиваясь только ими, альдеслейкин, алендроновую кислоту, альфаферон, алитретиноин, аллпуринол, алоприм, алокси, алтретамин, аминоглутетимид, аминофостин, амрубицин, амсакрин, анастрозол, анзмет, аранесп, арглабин, триокись мышьяка, аромазин, 5азацитидин, азатиоприн, ВСО или приманка ВСО, бестатин, бетаметазон ацетат, бетаметазон натрий фосфат, бексаротен, блеомицин сульфат, броксуридин, бортезомиб, бусульфан, кальцитонин, кампат, капецитабин, карбоплатин, казодекс, цефезон, цельмолейкин, церубидин, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, кладрибин, клодроновую кислоту, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, дауноксом, декадрон, декадронфосфат, делестроген, денилейкин дифтитокс, депомедрол, деслорелин, дексометазон, дексазоксан, диэтилстилбестрол, дифлюкан, доцетаксел, доксифлуридин, доксорубицин, дронабинол, ЭЩ-166НС, элигард, элитек, элленс, эменд, эпирубицин, эпоэтин α, эпоген, эптаплатин, эргамизол, эстрас, эстрадиол, эстрамустин фосфат натрия, этинилэстрадиол, этиол, этидроновую кислоту, этопофос, этопозид, фадрозол, фарстон, филграстим, финастерид, флигастим, флоксуридин, флуконазол, флударабин, 5-фтордезоксиуридин монофосфат, 5-фторурацил (5-РИ), флуоксиместерон, флутамид, форместан, фостеабин, фотемустин, фульвестрант, гаммагард, гемцитабин, гемтузумаб, гливек, глиадел, гозерелин, гранисетрон НС1, герцептин, гистрелин, гикамтин, гидрокортон, эритрогидроксинониладенин, гидроксимочевина, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, ифосфамид, интерферон α, интерферон-α 2, интерферон а-2А, интерферон а-2В, интерферон α-η1, интерферон α-η3, интерферон β, интерферон у-1а, интерлейкин-2, интрон А, ирессу, иринотекан, китрил, лапатиниб, лентинан сульфат, летрозол, лейковорин, лейпролид, лейпролид ацетат, леналидомид, левамизол, кальциевую соль левофолиновой кислоты, левотроид, левоксил, ломустин, лонидамин, маринол, мехлоретамин, мекобаламин, медроксипрогестерон ацетат, мегестрол ацетат, мельфалан, менест, 6-меркаптопурин, месну, метотрексат, метвикс, милтефозин, миноциклин, митомицин С, митотан, митоксантрон, модренал, миоцет, недаплатин, неуласту, неумегу, неупоген, нилутамид, нолвадекс, Ы§С-631570, ОСТ-43, октреотид, ондансетрон НС1, орапред, оксалиплатин, паклитаксел, педиапред, пегаспаргаза, регазис, пентостатин, пицибанил, пилокарпин НС1, пирарубицин, пликамицин, порфимер натрия, преднимустин, преднизолон, преднизон, премарин, прокарбазин, прокрит, КЭБА 119, ралтитрексед, ребиф, рений-186 этидронат, ритуксимаб, роферон-А, ромуртид, салаген, сандостатин, сарграмостим, семустин, сихофиран, собизоксан, солу-медрол, спарфозиевую кислоту, терапию стволовыми клетками, стрептозоцин, стронций-89 хлорид, сунитиниб, синтроид, тамоксифен, тамсулозин, тазонермин, тастолактон, таксотер, тецелейкин, темозоломид, тенипозид, тестростерон пропионат, тестред, тиогуанин, тиотепа, тиротропин, тилудроновую кислоту, топотекан, торемифен, тозитумомаб, трастузумаб, треосульфан, третиноин, трексалл, триметилмеламин, триметрексат, трипторелин ацетат, трипторелин памоат, ИРТ, уридин, валрубицин, веснаринон, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин, вирулизин, зинекард, зиностатин стималамер, зофран, АВ1-007, аколбифен, актиммун, аффинитак, аминоптерин, арзоксифен, азоприснил, атаместан, атрасентан, ВАУ 43-9006 (сорафениб), авастин, СС1-779, СЭС-501, целебрекс, цетуксимаб, криснатол, ци- 9 027670 протерон ацетат, децитабин, ΌΝ-101, доксорубицин-МТС, Й8ЫМ, дутастерид, эдотекарин, эфлорнитин, эксатекан, фенренитид, гистамин дигидрохлорид, гистрелин гидрогель имплант, гольмий-166 ΌΘΤΜΡ, ибандроновую кислоту, интерферон γ, интрон-ΡΕΟ, иксабепилон, гемоцианин лимфы улитки, Ь-651582, ланреотид, лазофоксифен, либру, ланафарниб, мипроксифен, минодронат, М8-209, липосомный МТР-РЕ, МХ-6, нафарелин, неморубицин, неовастат, нолатрексед, облимерсен, онко-ТС8, озидем, паклитаксел полиглутамат, памидронат динатрий, ΡΝ-401, 08-21, квазепам, К-1549, ралоксифен, ранпирназа, 13-цисретиноевую кислоту, сатраплатин, зеокальцитол, Т-138067, трацеву, тамопрексин, талидомид, тимозин α 1, тиазофурин, типифарниб, тирапазамин, ТЬК-286, торемифен, Тгаи8МГО-107К, валсподар, вапреотид, ваталаниб, вертепорфин, винфлунин, Ζ-100, золедроновую кислота или их комбинации.

Дополнительный фармацевтический компонент или компоненты (или дополнительный активный компонент) также выбирают из группы, включающей 1311-οΗΤΝΤ, абареликс, абиратерон, акларубицин, альдеслейкин, алемтузумаб, алитретиноин, алтретамин, аминоглутетимид, амрубицин, амсакрин, анастрозол, арглабин, триокись мышьяка, аспарагиназа, азацитидин, базиликсимаб, ΒΑΥ 80-6946, ΒΑΥ 1000394, ΒΑΥ 86-9766 (ΚΌΕΑ 119), белотекан, бендамустин, бевацизумаб, бексаротен, бикалутамид, бисантрен, блеомицин, бортезомиб, бузерелин, бусульфан, кабацитаксел, фолинат кальция, левофолинат кальция, капецитабин, карбоплатин, кармофур, кармустин, катумаксомаб, целекоксиб, цельмолейкин, цетуксимаб, хлорамбуцил, хлормадинин, хлорметин, цисплатин, кладрибин, клодроновую кислоту, клофарабин, кризантаспаза, циклофосфамид, ципротерон, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, дарбепоэтин α, дазатиниб, даунорубицин, децитабин, дегареликс, денилейкин дифтитокс, денозумаб, деслорелин, диброспидий хлорид, доцетаксел, доксифлуридин, доксорубицин, доксорубицин+эстрон, экулизумаб, эдреколомаб, эллиптиний ацетат, элтромбопаг, эндостатин, эноцитабин, эпирубицин, эпитиостанол, эпоэтин α, эпоэтин β, эптаплатин, эрубилин, эрлотиниб, эстрадиол, эстрамустин, этопозид, эверолимус, эксеместан, фадрозол, филграстим, флударабин, фторурацил, флутамид, форместан, фотемустин, фульвестрант, нитрат галлия, ганиреликс, гефитиниб, гемцитабин, гемтузумаб, глутоксим, гозерелин, гистамин дигидрохлорид, гистрелин, гидроксикарбамид, 1-125 семя, ибандроновую кислоту, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, ифосфамид, иматиниб, имиквимод, импросульфан, интерферон α, интерферон β, интерферон γ, ипилимумаб, иринотекан, иксабепилон, ланреотид, лапатиниб, леналидомид, ленограстим, лентинан, летрозол, лейпрорелин, левамизол, лизурид, лобаплатин, ломустин, лонидамин, мазопрокол, медроксипрогестерон, мегестрол, мельфалан, мепитиостан, меркаптопурин, метотрексат, метоксален, метиламинолевулинат, метилтестростерон, мифамуртид, милтефозин, мириплатин, митобронитол, митогуазон, митолактол, митомицин, митотан, митоксантрон, недаплатин, неларабин, нилотиниб, нилутамид, нимотузумаб, нимустин, нитракрин, офатумумаб, омепразол, опрелвекин, оксалиплатин, р53 генотерапия, паклитаксел, палифермин, палладий-103 семя, памидроновую кислоту, панитумумаб, пазопаниб, пегаспаргазу, ΡΕΟ-эпоэтин β (метокси ΡΕΟ-эпоэтин β), пэгилграстим, пэгинтерферон а-2Ь, пеметрексед, пентазоцин, пентостатин, пепломицин, перфосфамид, пицибанил, пирарубицин, плериксафор, пликамицин, полиглузам, полиэстрадиол фосфат, полисахарид-К, порфимер натрия, пралатрексат, преднимустин, прокарбазин, хинаголид, ралоксифен, ралтитрексед, ранимустин, разоксан, регорафениб, ризедроновую кислоту, ритуксимаб, ромидепсин, ропиплостим, сарграмостим, сипулейцел-Т, сихофиран, собизоксан, глицидидазол натрия, сорафениб, стрептозоцин, сунитиниб, талапорфин, тамибаротен, тамоксифен, тазонермин, тецелейкин, тегафур, тегафур+гимерацил+отерацил, темопорфин, темозоломид, темсиролимус, тенипозид, тестростерон, тетрофосмин, талидомид, тиотепа, тимальфазин, тиогуанин, тоцилизумаб, топотекан, торемифен, тозитумомаб, трабектедин, трастузумаб, треосульфан, третиноин, трилостан, трипторелин, трофосфамид, триптофан, убенимекс, валрубицин, вандетаниб, вапреотид, вемурафениб, винбластин, винкристин, виндезин, винфлунин, винорелбин, вориностат, ворозол, стеклянные микросферы иттрия-90, зиностатин, зиностатин стималамер, золедроновую кислоту, зорубицин.

Дополнительный фармацевтический компонент также может представлять собой гемцитабин, паклитаксел, цисплатин, карбоплатин, бутират натрия, 5-РИ, доксирубицин, тамоксифен, этопозид, трастумазаб, гефитиниб, интрон А, рапамицин, 17-ΑΑΟ, И0126, инсулин, производное инсулина, ΡΡΑΚ лиганд, сульфонилмочевинное лекарственное средство, ингибитор α-глюкозидазы, бигуанид, ингибитор РТР-1В, ингибитор ΌΡΡ-ΐν, ингибитор Η-β-Η8Ό, ΟΕΡ-1, производное ΟΕΡ-1, ΟΙΡ, производное ΟΙΡ, РАСАР, производное РАСАР, секретин или производное секретина.

Необязательные антигиперпролиферативные средства, которые могут быть добавлены в композицию, включают, но не ограничиваясь только ими, соединения, перечисленные в схемах приема химиотерапевтических противораковых лекарственных средств в 11-м издании Мегск 1ийех, (1996), который таким образом включен в качестве ссылки, такие как аспарагиназа, блеомицин, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, коласпаза, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин (адриамицин), эпирубицин, этопозид, 5-фторурацил, гексаметилмеламин, гидроксимочевина, ифосфамид, иринотекан, лейковорин, ломустин, мехлоретамин, 6-меркаптопурин, месна, метотрексат, митомицин С, митоксантрон, преднизолон, преднизон, прокарбазин, ралоксифен, стрептозоцин, тамоксифен, тиогуанин, топотекан, винбластин, винкристин и виндезин.

Другие антигиперпролиферативные средства, пригодные для применения с композицией, согласно

- 10 027670 изобретению включают, но не ограничиваясь только ими, те соединения, которые являются общепризнанными для применения для лечения опухолевых заболеваний в Сообщай аиб Сйтаи'в ТЬе РЬагтасо1ощса1 Ва818 о£ ТЬегареибсз (9-е изд.), под ред. Мо1шо£Т и др., опубл. МсСгаге-НШ, с. 1225-1287, (1996), которое таким образом включено в качестве ссылки, такие как аминоглутетимид, Ь-аспарагиназа, азатиоприн, 5-азацитидин кладрибин, бусульфан, диэтилстилбестрол, 2',2'-дифтордезоксицитидин, доцетаксел, эритрогидроксинонил аденин, этинилэстрадиол, 5-фтордезоксиуридин, 5-фтордезоксиуридин монофосфат, флударабинфосфат, флуоксиместерон, флутамид, гидроксипрогестерон капроат, идарубицин, интерферон, медроксипрогестерон ацетат, мегестролацетат, мельфалан, митотан, паклитаксел, пентостатин, Ν-фосфоноацетил-Ь-аспартат (РАГА), пликамицин, семустин, тенипозид, тестростерон пропионат, тиотепа, триметилмеламин, уридин и винорелбин.

Другие антигиперпролиферативные средства, пригодные для применения с композицией, согласно изобретению включают, но не ограничиваясь только ими, другие противораковые средства, такие как эпотилон и его производные, иринотекан, ралоксифен и топотекан.

В целом, применение цитотоксических и/или цитостатических средств в комбинации с соединением или композицией согласно настоящему изобретению будет служить для:

1) получения лучшей эффективности относительно уменьшения роста опухоли или даже уничтожения опухоли по сравнению с введением любого средства отдельно,

2) обеспечения для введения меньших количеств вводимых химиотерапевтических средств,

3) обеспечения химиотерапевтического лечения, которое лучше переносится пациентом с меньшим количеством нежелательных патологических осложнений, которые наблюдаются для химиотерапии с одним средством и определенных других комбинированных терапий,

4) обеспечения лечения более широкого спектра различных типов злокачественных новообразований у млекопитающих, в особенности у людей,

5) обеспечения более высокого показателя ответной реакции для леченных пациентов,

6) обеспечения более длительного времени выживания для леченных пациентов по сравнению со стандартными химиотерапевтическими лечениями,

7) обеспечения более длительного времени для прогрессирования опухоли, и/или

8) получения результатов эффективности и переносимости, по меньшей мере, таких хороших, как и для этих средств, используемых отдельно, по сравнению с известными случаями, где другие комбинации противораковых средств продуцируют антагонистические эффекты.

В соответствии с вариантом осуществления изобретение относится к комбинациям, где указанный дополнительный активный компонент представляет собой рапамицин или АВТ-737.

В соответствии с вариантом осуществления изобретение относится к комбинациям 2-амино®-|7метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [ 1,2-с]хиназолин-5 -ил]пиримидин-5-карбоксамида и рапамицина или АВТ-737.

Фармацевтические композиции соединений согласно изобретению.

Как указано в настоящей заявке выше, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям которые содержат 2-амино-^[7 -метокси-8-(3 -морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо [1,2с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамид или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер в качестве единственного активного средства для лечения или профилактики отечноинфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы, и которые содержат фармацевтическую композицию, содержащую комбинацию:

a) 2-амино-^[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; и

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществлени настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой отечно-инфильтративный рак молочной железы.

- 11 027670

Такие фармацевтические композиции можно использовать для достижения желательного фармакологического эффекта путем введения пациенту, который в этом нуждается. Пациент для целей настоящего изобретени, представляет собой млекопитающего, включая человека, нуждающегося в лечении конкретного состояния или заболевания. Таким образом, настоящее изобретение включает фармацевтические композиции, которые содержат фармацевтически приемлемый носитель и фармацевтически эффективное количество соединения или его соли, согласно настоящему изобретению. Фармацевтически приемлемый носитель предпочтительно представляет собой носитель, который является относительно нетоксичным и безопасным для пациента при концентрациях, которые соответствуют эффективной активности активного средства, таким образом какие-либо побочные действия, связанные с носителем, не будут искажать положительные эффекты активного средства. Фармацевтически эффективное количество соединения предпочтительно представляет собой то количество, которое продуцирует или оказывает влияние на конкретное состояние, подвергаемое лечению. Соединения согласно настоящему изобретению могут вводиться с фармацевтически приемлемыми носителями, хорошо известными в данной области, используя любые эффективные общепринятые дозированные формы, включая препараты для незамедлительного, медленного и отстроченного высвобождения, перорально, парентерально, местно, назально, офтальмологически, оптически, подъязычно, ректально, вагинально и др.

Для перорального введения соединения могут быть приготовлены в виде твердых или жидких препаратов, таких как капсулы, пилюли, таблетки, пастилки, лепешки, расплавы, порошки, растворы, суспензии или эмульсии, и могут быть приготовлены в соответствии с методами, хорошо известными в данной области, для приготовления фармацевтических композиций. Твердые единичные дозированные формы могут представлять собой капсулу, которая может иметь твердую или мягкую оболочку желатинового типа, содержащую, например, поверхностно-активные вещества, смазывающие вещества, и инертные наполнители, такие как лактоза, сахароза, фосфат кальция и кукурузный крахмал.

В другом варианте осуществления соединения согласно настоящему изобретению могут быть таблетированы с общепринятыми основаниями таблеток, такими как лактоза, сахароза и кукурузный крахмал, в комбинации со связующими, такими как гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин, дезинтеграторами, предназначенными для облегчения распада и растворения таблетки после введения, такими как картофельный крахмал, альгиновая кислота, кукурузный крахмал и гуаровая смола, трагакантовая камедь, гуммиарабик, смазывающими веществами, предназначенными для улучшения текучести таблеточного гранулята и для предотвращения адгезии таблеточного материала к поверхности таблеточных штампов и пуансонов, например тальк, стеариновая кислота или стеарат магния, кальция или цинка, красителями, окрашивающими веществами и ароматизаторами, такими как мятное масло, масло гаультерии, или вишневый ароматизатор, предназначенными для улучшения эстетических качеств таблеток и превращения их в более приемлемые для пациента. Подходящие наполнители для применения в жидких пероральных дозированных формах включают дикальций фосфат и разбавители, такие как вода и спирты, например этанол, бензиловый спирт и полиэтиленовые спирты, либо с или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества, суспендирующего агента или эмульгирующего агента. Другие различные материалы могут присутствовать в качестве покрытий или для модификации иным способом физической формы дозированной единицы. Например, таблетки, пилюли или капсулы могут быть покрыты шеллаком, сахаром или обеими веществами.

Диспергируемые порошки и гранулы являются пригодными для приготовления водной суспензии. Они обеспечивают активный компонент в смеси с диспергирующим или смачивающим агентом, суспендирующим агентом и одним или несколькими консервантами. Примерами подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующим агентов являются те вещества, которые уже были указаны выше. Также могут присутствовать дополнительные наполнители, например, такие как подсластители, ароматизаторы и красители, описанные выше.

Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению также могут присутствовать в форме эмульсий масло-в-воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, такое как жидкий парафин или смесь растительных масел. Подходящими эмульгирующими агентами могут быть 1) встречающиеся в природе смолы, такие как гуммиарабик и трагакантовая камедь, 2) встречающиеся в природе фосфатиды, такие как соевый и лецитин, 3) сложные эфиры или неполные сложные эфиры, имеющие происхождение из жирных кислот и ангидридов гексита, например сорбитан моноолеат, 4) продукты конденсации указанных неполных сложных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтилен сорбитан моноолеат. Эмульсии также могут содержать подсластители и ароматизаторы.

Масляные суспензии могут быть приготовлены путем суспендирования активного компонента в растительном масле, таком как, например, арахисовое масло, оливковое масло, кунжутное масло или кокосовое масло, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Масляные суспензии могут содержать загуститель, такой как, например, пчелиный воск, твердый парафин, или цетиловый спирт. Суспензии также могут содержать один или несколько консервантов, например этил или н-пропил пгидроксибензоат; один или несколько красителей; один или несколько ароматизаторов и один или несколько подсластителей, таких как сахароза или сахарин.

Сиропы и эликсиры также могут быть приготовлены с подсластителями, такими как, например,

- 12 027670 глицерин, пропиленгликоль, сорбит или сахароза. Такие препараты также могут содержать смягчающее средство и консервант, такой как метил- и пропилпарабены, ароматизаторы и красители.

Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить парентерально, то есть подкожно, внутривенно, интраокулярно, интрасиновиально, внутримышечно или внутрибрюшинно, в виде дозировок для инъекций соединения в предпочтительно физиологически приемлемом разбавителе с фармацевтическим носителем, который может представлять собой стерильную жидкость или смесь жидкостей, таких как вода, солевой раствор, водная декстроза и связанные растворы сахаров, спирт, такой как этанол, изопропанол или гексадециловый спирт, гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, глицеринкетали, такие как 2,2-диметил-1,1-диоксолан-4-метанол, простые эфиры, такие как поли(этиленгликоль) 400, масло, жирная кислота, сложный эфир жирной кислоты, или глицерид жирной кислоты, или ацетилированный глицерид жирной кислоты, с или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества, такого как мыло или детергент, суспендирующего агента, такого как пектин, карбомеры, метицеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза или карбоксиметилцеллюлоза, или эмульгирующий агент и других фармацевтических адъювантов.

Иллюстративными примерами масел, которые можно использовать в парентеральных препаратах согласно настоящему изобретению, являются масла нефти, животного, растительного или синтетического происхождения, например арахисовое масло, соевое масло, кунжутное масло, хлопковое масло, кукурузное масло, оливковое масло, вазелин и минеральное масло. Подходящие жирные кислоты включают олеиновую кислоту, стеариновую кислоту, изостеариновую кислоту и миристиновую кислоту. Подходящие сложные эфиры жирных кислот представляют собой, например, этилолеат и изопропилмиристат. Подходящие мыла включают соли щелочного металла, аммония и триэтаноламина с жирными кислотами, и подходящие детергенты включают катионные детергенты, например диметилдиалкил аммоний галогениды, алкилпиридиний галогениды и алкиламин ацетаты; анионные детергенты, например алкил-, арил- и олефинсульфонаты, алкил, олефин, простой эфир и моноглицерид сульфаты и сульфосукцинаты; неионные детергенты, например оксиды жирных кислот, алканоламиды жирных кислот, и поли(оксиэтилен-оксипропилен)ы или сополимеры этиленоксида или пропиленоксида; и амфотерные детергенты, например алкил-в-аминопропионаты, и соли 2-алкилимидазолина и четвертичного аммония, а также их смеси.

Парентеральные композиции согласно настоящему изобретению обычно будут включать от приблизительно 0,5 вес.% до приблизительно 25 вес.% активного компонента в растворе. Также благоприятно можно использовать консерванты и буферы. Для минимизации или элиминации раздражения в участке инъекции такие композиции могут содержать неионное поверхностно-активное вещество, которое имеет гидрофильно-липофильный баланс (НТВ) предпочтительно от приблизительно 12 до приблизительно 17. Количество поверхностно-активное вещество в таком препарате предпочтительно находится в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 15 вес.%. Поверхностно-активное вещество может быть единственным компонентом, имеющим вышеуказанный НЬВ, или может представлять собой смесь двух или более компонентов, имеющих желательный НЬВ.

Иллюстративными примерами поверхностно-активных веществ, которые используются в парентеральных препаратах, являются класс сложных эфиров жирных кислот и полиэтиленсорбитана, например сорбитанмоноолеат, и высокомолекулярные аддукты этиленоксида с гидрофобным основанием, образованные путем конденсации пропиленоксида с пропиленгликолем.

Фармацевтические композиции могут быть представлены в форме стерильных водных суспензий для инъекций. Такие суспензии могут быть приготовлены в соответствии с известными методами, используя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты, такие как, например, натрий карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик; диспергирующие или смачивающие агенты, которые могут представлять собой встречающийся в природе фосфатид, такой как лецитин, продукт конденсации алкиленоксида с жирной кислотой, например, полиоксиэтилен стеарат, продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом, например гептадекаэтиленоксицетанол, продукт конденсации этиленоксида с неполным сложным эфиром, имеющим происхождение из жирной кислоты и гексита, такой как полиоксиэтилен сорбит моноолеат, или продукт конденсации этиленоксида с неполным сложным эфиром, имеющим происхождение из жирной кислоты и ангидрида гексита, например полиоксиэтилен сорбитан моноолеат.

Стерильный препарат для инъекции также может представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом буфере или растворителе. Разбавители и растворители, которые могут применяться, представляют собой, например, воду, раствор Рингера, изотонические растворы хлорида натрия и изотонические растворы глюкозы. Дополнительно, стерильные жирные масла обычно применяются в качестве растворителей или суспендирующих сред. Для этой цели можно применять любое слабое жирное масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Дополнительно, в препаратах для инъекций можно использовать жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Композицию согласно изобретению также можно вводить в форме суппозиториев для ректального

- 13 027670 введения лекарственного средства. Эти композиции могут быть приготовлены путем смешивания лекарственного средства с подходящим нераздражающим наполнителем, который является твердым при обычных температурах, но жидким при ректальной температуре и, таким образом, будет расплавляться в прямой кишке для высвобождения лекарственного средства. Такие материалы представляют собой, например, масло какао и полиэтиленгликоль.

Другим препаратом, который применяется в способах согласно настоящему изобретению, является устройства для трансдермальной доставки (пластыри). Такие трансдермальные пластыри можно использовать для обеспечения продолжительной или непрерывной инфузии соединений согласно настоящему изобретению в контролируемых количествах. Конструкция и использование трансдермальных пластырей для доставки фармацевтических агентов хорошо известна в данной области (см., например, патент США № 5023252, выданный 11 июня 1991 г., который включен в настоящую заявку в качестве ссылки). Такие пластыри могут быть сконструированы для непрерывной пульсирующей доставки или доставки по требованию фармакологических компонентов.

Препараты с контролируемым высвобождением для парентерального введения включают липосомные препараты, препараты с полимерной микросферой и препараты с полимерным гелем, которые известны в данной области.

Может являться желательным или необходимым интродуцировать фармацевтическую композицию пациенту с помощью механического устройства для доставки. Конструкция и использование механических устройств для доставки фармацевтических компонентов хорошо известна в данной области техники. Прямые техники, например, для введения лекарственного средства непосредственно в головной мозг включает установку катетера для доставки лекарственного средства в желудочковую систему пациента для обхождения гематоэнцефалического барьера. Одна из таких имплантируемых систем доставки, используемая для транспорта компонентов в специфические анатомические участки тела, описана в патенте США № 5011472, выданном 30 апреля 1991 г.

Композиции согласно изобретению также могут содержать другие общепринятые фармацевтически приемлемые составные компоненты, которые обычно обозначаются как носители или разбавители, если это является необходимым или желательным. Можно использовать общепринятые процедуры для приготовления таких композиций в подходящих дозированных формах. Такие ингредиенты и процедуры включают те, которые описаны в следующих ссылках, каждая из которых включена в настоящую заявку в качестве ссылки: Ро\\е11 М.Р. и др., Сотреибшт оГ Е.\ар1еп15 £ог Рагеи1ега1 Рогти1аДои8 РОА 1оита1 оГ РЬагтасеиДса1 8аеисе & ТесЬио1оду 1998, 52(5), 238-311; 81пск1еу К.О. Рагеи1ега1 Рогти1айои8 оГ 8та11 Мо1еси1е ТЬегареиДск Магке1еД ш 1ке ИикеД 51а1ез (1999)-РаД-1 РОА 1оита1 оГ РкагтасеиДса1 8сТ еисе & Тескио1оду 1999, 53(6), 324-349; и Дета 8. и др., Е\с1р1еи1к аиб Ткеи Ике ш 1и)ес1аЬ1е РгоДис1к РОА 1оита1 оГ РкагтасеиДса1 8с1еисе & Тескио1оду 1997, 51(4), 166-171.

Обычно используемые фармацевтические ингредиенты, которые можно использовать, если это является подходящим, для приготовления композиции в виде препарата для его предназначенного пути введения включают подкисляющие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, уксусную кислоту, лимонную кислоту, фумаровую кислоту, соляную кислоту, азотную кислоту);

подщелачивающие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, раствор аммония, карбонат аммония, диэтаноламин, моноэтаноламин, гидроксид калия, борат натрия, карбонат натрия, гидроксид натрия, триэтаноламин, троламин);

адсорбирующие вещества (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, порошкообразную целлюлоза и активированный уголь);

пропелленты для аэрозоля (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, углекислый газ, СС12Р2, Р2С1С-СС1Р2 и СС1Р₃);

агенты для вытеснения воздуха (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, азот и аргон);

противогрибковые консерванты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, бензойную кислоту, бутилпарабен, этилпарабен, метилпарабен, пропилпарабен, натрий бензоат);

противомикробные консерванты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, бензалконий хлорид, бензетоний хлорид, бензиловый спирт, цетилпиридиний хлорид, хлорбутанол, фенол, фенилэтиловый спирт, нитрат фенилртути и тимеросал);

антиоксиданты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, аскорбиновую кислоту, аскорбил пальмитат, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, фосфорноватистую кислоту, монотиоглицерин, пропил галлат, аскорбат натрия, бисульфит натрия, формальдегид сульфоксилат натрия, метабисульфит натрия);

связующие материалы (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, блок-полимеры, природные и синтетические резины, полиакрилаты, полиуретаны, силиконы, полисилоксаны и сополимеры стирол-бутадиен);

буферные агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, метафосфат калия, дикалий фосфат, натрий ацетат, безводный цитрат натрия и дигидрат цитрат натрия);

- 14 027670 носители (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, сироп гуммиарабика, ароматический сироп, ароматический эликсир, вишневый сироп, кокосовый сироп, апельсиновый сироп, сироп, кукурузное масло, минеральное масло, арахисовое масло, кунжутное масло, бактериостатический хлорид натрия для инъекций и бактериостатическую воду для инъекций);

хелатообразующие вещества (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, динатрий эдетат и этилендиаминтетрауксусную кислоту);

красители (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, ΡΌ&ί'.' красный № 3, РЭ&С красный № 20, РЭ&С желтый № 6, РЭ&С синий № 2, Э&С зеленый № 5, Э&С оранжевый № 5, Э&С красный № 8, карамель и красный оксид железа);

осветляющие вещества (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, бентонит); эмульгирующие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, гуммиарабик, цетомакрогол, цетиловый спирт, глицерил моностеарат, лецитин, сорбитан моноолеат, полиоксиэтилен 50 моностеарат);

инкапсулирующие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, желатин и целлюлоза ацетатфталат);

ароматизаторы (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, анисовое масло, коричное масло, какао, ментол, апельсиновое масло, мятное масло и ванилин);

увлажняющие вещества (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, глицерин, пропиленгликоль и сорбит);

агенты для отмучивания (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, минеральное масло и глицерин);

масла (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, масло земляного ореха, минеральное масло, оливковое масло, арахисовое масло, кунжутное масло и растительное масло);

мазевые основы (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, ланолин, мазь-эмульсия, полиэтиленгликоль мазь, вазелин, гидрофильный вазелин, белую мазь, желтую мазь и мазь розовой воды);

вещества, способствующие проникновению внутрь (трансдермальная доставка) (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, моногидрокси или полигидрокси спирты, моно- или поливалентные спирты, насыщенные или ненасыщенные жирные спирты, насыщенные или ненасыщенные жирные спирты, насыщенные или ненасыщенные дикарбоновые кислоты, эфирные масла, производные фосфатидила, цефалин, терпены, амиды, простые эфиры, кетоны и мочевины);

пластификаторы (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, диэтилфталат и глицерин); растворители (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, этанол, кукурузное масло, хлопковое масло, глицерин, изопропанол, минеральное масло, олеиновая кислота, арахисовое масло, очищенную воду, воду для инъекций, стерильную воду для инъекций и стерильную воду для орошения);

вещества, повышающие жесткость (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, цетиловый спирт, воск цетиловых эфиров, микрокристаллический воск, парафин, стеариловый спирт, белый воск и желтый воск);

суппозиторная основа (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, масло какао и полиэтиленгликоли (смеси));

поверхностно-активные вещества (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, бензалконий хлорид, ноноксинол 10, окстоксинол 9, полисорбат 80, натрий лаурил сульфат и сорбитан монопальмитат);

суспендирующие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, агар, бентонит, карбомеры, натрий карбоксиметилцеллюлоза, гидроксиэтил целлюлозу, гидроксипропил целлюлозу, гидроксипропил метилцеллюлозу, каолин, метилцеллюлозу, трагакантовую камедь и вигум);

подсластители (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, аспартам, декстроза, глицерин, маннит, пропиленгликоль, сахарин натрий, сорбит и сахарозу);

антиадгезивы таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, стеарат магния и тальк);

связующие таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, гуммиарабик, альгиновую кислоту, натрий карбоксиметилцеллюлозу, сжимаемый сахар, этилцеллюлозу, желатин, жидкую глюкозу, метилцеллюлозу, не перекрестносшитый поливинилпирролидон и прежелатинизированный крахмал);

разбавители таблеток и капсул (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, двухосновный фосфат кальция, каолин, лактозу, маннит, микрокристаллическую целлюлозу, порошкообразную целлюлозу, осажденный карбонат кальция, карбонат натрия, фосфат натрия, сорбит и крахмал);

средства для оболочек таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, жидкую глюкозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, целлюлозу ацетат фталат и шеллак);

наполнители для прямого прессования таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, двухосновный фосфат кальция);

средства, вызывающие дезинтеграцию таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только

- 15 027670 ими, альгиновую кислоту, кальций карбоксиметилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, полакриллин кальция, перекрестносшитый поливинилпирролидон, альгинат натрия, натрий крахмал гликолят и крахмал);

вещества, способствующие скольжению, для таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, коллоидный кремнезем, кукурузный крахмал и тальк);

смазывающие вещества для таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, стеарат кальция, стеарат магния, минеральное масло, стеариновую кислоту и стеарат цинка);

светонепроницаемые вещества для таблетки/капсулы (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, диоксид титана);

полирующие средства для таблеток (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, карнубский воск и белый воск);

загустители (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, пчелиный воск, цетиловый спирт и парафин);

вещества, регулирующие тоничность (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, декстрозу и хлорид натрия);

вещества, повышающие вязкость (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, альгиновую кислоту, бентонит, карбомеры, натрий карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, альгинат натрия и трагакант); и смачивающие агенты (примеры включают, но не ограничиваясь только ими, гептадекаэтилен оксицетанол, лецитины, сорбит моноолеат, полиоксиэтилен сорбит моноолеат и полиоксиэтиленстеарат).

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть проиллюстрированы следующим образом.

Стерильный в/в раствор.

Раствор 5 мг/мл желательного соединения согласно настоящему изобретению может быть приготовлен с использованием стерильной воды для инъекций, и значением рН регулируют при необходимости. Раствор разводят для введения до 1-2 мг/мл с помощью стерильной 5%-ной декстрозы и вводят в виде в/в инфузии в течение около 60 мин.

Лиофилизированный порошок для в/в введения.

Стерильный препарат может быть приготовлен с (ί) 100-1000 мг желательного соединения согласно настоящему изобретению в виде лиофилизированного порошка, (ίί) 32-327 мг/мл цитрата натрия и (ίίί) 300-3000 мг декстрана 40. Препарат восстанавливают с помощью стерильного солевого раствора для инъекций или декстрозы 5% до концентрации 10-20 мг/мл, который в дальнейшем разводят с помощью физиологического раствора или декстрозы 5% до 0,2-0,4 мг/мл и вводят либо с помощью в/в болюса или в/в инфузии в течение 15-60 мин.

Внутримышечная суспензия.

Следующий раствор или суспензию можно приготовить для внутримышечной инъекции:

мг/мл желательного водонерастворимого соединения согласно настоящему изобретению, мг/мл натрий карбоксиметилцеллюлозы, мг/мл Т\УЕЕК 80, мг/мл хлорида натрия, мг/мл бензилового спирта,

Капсулы с твердой оболочкой.

Большое количество капсул приготавливают путем заполнения стандартных твердых капсул галантина, состоящих из двух частей, каждую с помощью 100 мг порошкообразного активного компонента, 150 мг лактозы, 50 мг целлюлозы и 6 мг стеарата магния.

Мягкие желатиновые капсулы.

Приготавливают смесь активного компонента с легко усваиваемым маслом, таким как соевое масло, хлопковое масло или оливковое масло, и инъецируют с помощью нагнетательного поршневого насоса в расплавленный желатин с образованием мягких желатиновых капсул, содержащих 100 мг активного компонента. Капсулы промывают и высушивают. Активный компонент можно растворяли в смеси полиэтиленгликоля, глицерина и сорбита для приготовления смешивающейся с водой медицинской смеси.

Таблетки.

Большое количество таблеток приготавливают с помощью общепринятых процедур таким образом, что дозированная единица представляет собой 100 мг активного компонента, 0,2 мг коллоидного диоксида кремния, 5 мг стеарата магния, 275 мг микрокристаллической целлюлозы, 11 мг крахмала и 98,8 мг лактозы. Можно применять подходящие водные и неводные покрытия для повышения вкусовых качеств, улучшенного стиля и стабильности или замедленной абсорбции.

Таблетки/капсулы с быстрым высвобождением.

Они представляют собой твердые пероральные дозированные формы, приготовленные с помощью общепринятых и новых процессов. Эти единицы принимают перорально без воды для немедленного растворения и доставки лекарственного средства. Активный компонент смешан с жидкостью, содержащий ингредиент, такой как сахар, желатин, пектин и подсластители. Эти жидкости отвердевают в твердые

- 16 027670 таблетки или каплеты путем лиофильной сушки и техник твердофазной экстракции. Лекарственные соединения можно прессовать с вязкоупругими и термоупругими сахарами и полимерами или шипучими компонентами для получения пористых матриц, предназначенных для быстрого высвобождения, для которых не нужна вода.

Способ лечения рака молочной железы.

Способ лечения или профилактики злокачественного новообразования, например рака молочной железы, который классифицирован на несколько подтипов в клинике, таких как гормон рецептороположительный рак молочной железы, Нег2 рецептороположительный рак молочной железы, рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом и отечно-инфильтративный рак молочной железы, у млекопитающего, включает введение 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или фармацевтической композиции, которая его содержит, в качестве единственного активного средства, или введение комбинации а) указанного соединения или фармацевтической композиции, которая содержит указанное соединение и Ь) один или несколько дополнительных активных компонентов, как определено в настоящей заявке.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспекто, или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов или их вариантов осуществления настоящего изобретения, указанный рак молочной железы представляет собой гормон-рецептороположительный рак молочной железы.

Варианты осуществления способов лечения или профилактики злокачественного новообразования, например рака молочной железы, как определено выше, описаны в вариантах осуществления применения соединения/комбинаций, как описано выше.

Способ использования 2-амино-Ы-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида и его композиций применяют также для лечения рака молочной железы у млекопитающего. Соединение можно использовать для ингибирования, блокирования, уменьшения, снижения и т.д., пролиферации клеток или деления клеток и/или продуцирования апоптоза, для лечения или профилактики рака молочной железы. Этот способ включает введение млекопитающему, которое в этом нуждается, включая человека, количества соединения или комбинации согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемой соли, изомера, полиморфа, метаболита, гидрата, сольвата или сложного эфира и др., которое эффективно для лечения или профилактики рака молочной железы.

Это нарушение хорошо охарактеризовано у людей, но также существует со сходной этиологией у других млекопитающих, и их можно лечить путем введения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению.

Термин лечить или лечение, как указано во всем настоящем документе, используется стандартно, например управление или ведение субъекта для облегчения, уменьшения, ослабления, улучшения состояния и т.д., заболевания или нарушения, такого как раковое новообразование.

Доза и введение.

На основе стандартных лабораторных техник, известных для оценки соединений, пригодных для лечения или профилактики рака молочной железы, путем стандартных определений токсичности и путем стандартных фармакологических исследований для определения лечения состояний, идентифицированных выше, у млекопитающих, и путем сравнения этих результатов с известными лекарственными средствами, которые используются для лечения этих состояний, легко может быть определена эффективная дозировка соединений согласно настоящему изобретению для лечения показания. Количество активного компонента, которое вводят для лечения состояния, может изменяться в широких пределах в соответствии с такими факторами, как конкретное соединение и применяемая дозированная единица, способ введения, период лечения, возраст и пол пациента, подлежащего лечению, и природа и тяжесть состояния, подвергаемого лечению.

Общее вводимое количество активного компонента в целом будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,001 мг/кг до приблизительно 200 мг/кг веса тела в сутки и предпочтительно от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 20 мг/кг веса тела в сутки. Клинически пригодные схемы дозировки будут находиться в диапазоне от дозирования одного до трех раз в сутки до дозирования один раз каждые четыре недели. Дополнительно, лекарственные каникулы, при которых пациент не получает дозу лекарственного средства в течение определенного периода времени, могут быть благоприятными для суммарного баланса между фармакологическим эффектом и переносимостью. Дозированная единица

- 17 027670 может содержать от приблизительно 0,5 мг до приблизительно 1500 мг активного компонента, и может вводиться один или несколько раз в сутки или меньше одного раза в сутки. Среднесуточная доза для введения путем инъекции, включая внутривенные, внутримышечные, подкожные и парентеральные инъекции, и применения инфузионных техник, будет предпочтительно составлять от 0,01 до 200 мг/кг общего веса тела. Среднесуточная схема ректального дозирования будет предпочтительно составлять от 0,01 до 200 мг/кг общего веса тела. Среднесуточная схема вагинального дозирования будет предпочтительно составлять от 0,01 до 200 мг/кг общего веса тела. Среднесуточная схема местного дозирования будет предпочтительно составлять от 0,1 до 200 мг, которую вводят от одного до четырех раз в сутки. Трансдермальная концентрация предпочтительно будет такой, которая необходима для поддержания суточной дозы от 0,01 до 200 мг/кг. Среднесуточная схема ингаляционного дозирования будет предпочтительно составлять от 0,01 до 100 мг/кг общего веса тела.

Очевидно, что специфическая начальная и продолжающаяся схема дозирования для каждого пациента будет изменяться в соответствии с природой и тяжестью состояния, как определяется лечащим специалистом, активностью конкретного применяемого соединения, возрастом и общим состоянием пациента, временем введения, путем введения, скоростью экскреции лекарственного средства, комбинациями лекарственных средств и др. Желательный способ лечения и количество доз соединения согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемой соли, или сложного эфира, или композиции могут быть определены квалифицированным специалистом в данной области техники, используя общепринятое экспериментальное лечение.

Биомаркеры.

Биомаркеры, которые используют для стратификации пациента, представляют собой, например, Вс1 экспрессию, экспрессию и/или активацию НЕК семейства, Р1К3СА передачу сигналов и/или потерю ΡΤΕΝ для предсказания чувствительности и/или устойчивости пациента со злокачественным новообразованием к указанному соединению, таким образом обеспечивая логически обоснованную синергетическую комбинацию, для преодоления резистентности.

Примеры.

Изобретение иллюстрируется в последующих примерах, которые никоим образом не предназначены для ограничения объема изобретения.

Пример 1.

В соответствии с изобретением соединение оценивали в клеточном анализе, в котором определяли способность соединений ингибировать пролиферацию опухолевых клеток после 72-часового воздействия лекарственного средства. Жизнеспособность клеток анализировали с помощью 1пуйгодеп (Опсорапе1 молочной железы, 1пуЦгодеп. И8А) или определяли с использованием люминесцентного анализа жизнеспособности клеток Се11ТПег-С1о® (Рготеда) следующим образом. Клетки помещали при плотности 3005000 клеток/лунку в зависимости от клеточных линий или микротитровальных планшет (96- или 384лунки) в 100 мкл ростовой среды в 96-луночном и 20 мкл ростовой среды в 384-луночном микротитровальном планшете. Для анализа каждой клеточной линии клетки помещали в отдельный планшет для определения люминесценции во временные точки ΐ=0 ч и ΐ=72 ч. После инкубирования в течение ночи при 37°С определяли значения люминесценции образцов для ί=0. Дозовые планшеты для временных точек ΐ=72 ч обрабатывали соединениями, разведенными в ростовой среде. После этого клетки инкубировали в течение 72 ч при 37°С. Определяли значения люминесценции образцов для ΐ=72 ч. Для анализа данных, вкратце, значения ΐ=0 отнимали от значений, определенных для временных точек ΐ=72 ч, как для леченных, так и для нелеченных образцов. Процент отличия люминесценции между обработанными лекарственным средством и контрольными значениями использовали для определения процента ингибирования роста.

Опухолевые клетки высевали в планшеты на 384 лунки при концентрации 1000-2500 клеток/лунку/25 мкл в зависимости от клеточных линий. После инкубирования в течение ночи клетки обрабатывали соединениями (5 мкл). После этого определяли активности Каспазы 3/7 через 24-48 ч после лечения, используя наборы для анализа Са8ра§е-01о3/7 (№ каталога Рготеда 08212).

Эффекты комбинаций Р13К ингибиторов и другого компонента оценивали с помощью показателя аддитивности анализа изоболограммы (Сйои и др. Рйагтасо1оду Ке\зе\\'5 2006). Параметрами эффективности были медианный эффект в 72-часовом анализе клеточной пролиферации и 24- или 48-часовых анализах активности Каспазы 3/7, описанных выше. Вкратце, клетки помещали в планшет на 384 лунки с 25 мкл среды. Через 24 ч 5 мкл экспериментальной среды, содержащей либо лекарственное средство 1 (Ό1), или лекарственное средство 2 (Ό2), или комбинацию Ό1 плюс Ό2 в различных соотношениях (0,8χΌ1+0,2χΌ2, 0,6χΌ1+0,4χΌ2, 0,4χΌ1+0,6χΌ2, 0,2χΌ1+0,8χΌ2, 0,1χΌ1+0,9χΌ2) использовали для получений серийных трехкратных разведений для создания 7 дозовых кривых. Эксперименты осуществляли в трех повторах.

Для определения ЕС₅₀₃ и 1С₅₀8 линейный регрессионный анализ использовали для определения концентрации лекарственного средства, которая приводит к 50% ингибированию или эффективности. Рассчитывали соответствующие составные дозы Ό1 и Ό2 для Е(1)С₅₀/Е(1)С₉₀ и использовали для построения

- 18 027670 изоболограмм. Эффект нескольких лекарственных средств анализировали, как описано СНои и др. (РНагшасо1о§у НеУ1е\\ъ 2006), и показатель аддитивности рассчитывали согласно формуле

Показатель аддитивности = [ϋ1χ]/ ϋ1’ + [ϋ2χ]/ ϋ2’ где Ώ1χ и Ι)2χ относится к концентрации лекарственного средства 1 и лекарственного средства 2 при ЕС₅₀/1С₅₀ или ЕС₉₀/1С₉₀ соответственно в комбинации; и Ώ1' и Ώ2' относится к значениям ЕС₅₀/1С₅₀или ЕС₉₀/1С₉₀ Ώ1 и 1)2 соответственно в качестве отдельных компонентов. В этом анализе значения меньше 1,0 указывали на синергетические взаимодействия, значения больше 1,0 указывали на антагонистические взаимодействия и значения около 1,0 указывали на аддитивные взаимодействия.

В дальнейшем соединение формулы I относится к 2-амино-К-[7-метокси-8-(3-морфолин-4илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамиду структуры

или его сольвату, гидрату или стереоизомеру.

В дальнейшем соединение А относится к 2-амино-К-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамид дигидрохлориду структуры

Синтез соединения А описан в Европейской патентной заявке № ЕР 11161111.7, которая таким образом полностью включена в настоящую заявку в качестве ссылки.

Синтез соединения А.

К суспензии соединения формулы I (400 г) в воде (1,1 л) при комнатной температуре добавляли 32% водного раствора соляной кислоты при перемешивании, дозированном при комнатой температуре к суспензии 400 г соединения формулы (I) в 1,1 л воды, до тех пор, пока не достигали значения рН 3-4. Добавляли дополнительно 90 мл воды (90 мл) и 32% соляной кислоты до тех пор, пока не получали значение рН 1,8 - 2,0. 160 мл этанола (160 мл) дозировали и добавляли к смеси с последующими затравочными кристаллами. После перемешивания в течение 30 мин 1740 г дополнительного этанола (2,2 л) дозировали в течение 5 ч, добавляли в смесь в течение 5 ч, и полученную смесь впоследствии перемешивали в течение 1 ч. Суспензию фильтровали и остаток промывали сначала смесью 130 г воды и 215 г этанола, затем смесью 80 г воды и 255 г этанола и после этого 320 г чистого этанола. Осадок на фильтре высушивали при 40°С в вакууме, получая 457 г продукта (99% теории).

Характеристика соединения А.

Химическую структуру соединения А подтверждали с использованием методов структурного анализа.

ИК и рамановская спектроскопия. Приборы и условия измерения.

ГТ-ИК / ГТ-Раман-Спектрометр Спектральное разрешение Число интерферограмм Диапазон волнового числа Мощность лазерного излучения Приготовление образца

Распределение характеристичных полос.

Вгикег ΙΓ5 66ν	/	Вгикег КР5 100
2 см'¹	/	2 см'¹
32	/	64
4000 - 500 см ¹	/	3500- 100 см'¹
-	/	350 мВт
КВг пеллеты	/	твердый в пробирке

- 19 027670

Распределение характеристичных активных колебаний к спектрус ν - валентные колебания; δ - изгибные колебания; о.о.р. - вне плоскости

Установленная структура	ИК положение [см’¹]	полосы Рамановское положение полосы [см'¹]
ν Ν-Η	3336	-
ν =С-Н	3176	3090
уС-Н	2942	2990 - 2963
ν ΝΗ⁺	2687 - 2474	-
ν Амид I	1669	1664
ν С=С, ν ί=Ν, δ Ν-Н, Амид 1618 -1477	1619 - 1476
II
ν С-0	1285	1291
б =С-Н о.о.р.	812	-

Уап'ап Сагу 4 (ДиаПг, 1 см 200-800 нм

4,67 мг / 500 мл воды 309 нм ν - валентные колебания; δ - изгибные колебания; о.о.р. - вне плоскости

ИК-спектр представлен на фиг. 7.

Спектр рамановского рассеяния представлен на фиг. 8.

У Ф/ВИД-спектроскопия.

Приборы и условия измерения.

УФ/ВИД спектрометр Кювета

Диапазон волнового числа Приготовление образца Полосы

УФ/ВИД-спектр представлен на фиг. 9.

ЯМР-спектроскопия.

¹Н-ЯМР-спектроскопия.

Оборудование и экспериментальные параметры ЯМР спектрометр Рабочая частота Растворитель

Внутреннее эталонное соединение Концентрация

Диаметр трубки для образцов Температура Техника Ширина спектра Вес младшего разряда Длительность импульса

Вгикег, модель Ауапсе 500,13 МГц

Диметилсульфоксид (ДМСО-б₆) Тетраметилсилан (ТМС)

3,08 мг/мл раствора 5 мм прибл.25°С

Метод преобразований Фурье 20,65 част, на млн 0,079 Гц/Р1

30° Импульсный угол

Время обнаружения Время релаксации

Число затуханий свободной индукции

4,5 мкс, отклонения

6,34 с 0,5 с 32

Структурная формула для распределения ЯМР-сигналов

Химический сдвиг, усиление сигнала, относительная величина ядра

- 20 027670

Н-атом (ы)	Химический сдвиг δ (част, на млн)	Мультиплетность и константы взаимодействия (Ь)	количество ядер Н/молекулу
Н-26	2,32	М	2
Н-29; Н-33	3,11; 3,48	Μ; М	2; 2
Н-30; Н-32	3,83; 3,98	Μ; М	2; 2
Н-27	3,29	М	2
-ОСНз	4,00	5	3
Н-25	4,37	Т	2
Н-2; Н-3	4,47; 4,19	Τ; τ	2; 2
Н-9	7,39	ϋ	1
νη₂	7,54	5	2
Н-10	8,21	ϋ	1
Н-16; Н-20	8,97	5	1; 1
НС1	11,1; 12,6	Ь5; Ь5	1; 1
Н-12	13,4	Ь$	1

a) Нумерация относится к структурной формуле для распределения ЯМР-сигналов.

b) 8 - синглет, Ь8 - широкий синглет, Ό - дублет, Т - триплет, М - мультиплет.

¹Н-ЯМР спектр соединения А представлен на фиг. 10.

¹³С-ЯМР-спектроскопия.

Оборудование и экспериментальные параметры.

ЯМР спектрометр	Вгикег, модель Ауапсе
Рабочая частота	125,76 МГц
Растворитель	Диметилсульфоксид-с1б (ДМСО)
Внутреннее эталонное соединение	Тетраметилсилан (ТМС)
Концентрация	37,2 мг/мл раствора
Диаметр трубки для образцов	5 мм
Температура	Прибл. 27°С
Техника	Метод преобразований Фурье
Ширина спектра	240,95 част, на млн
Вес младшего разряда	0,4624 Гц/Р1
Длительность импульса	11,0 мкс, 90° Импульсный отклонения
Время обнаружения	1,08 с
Время релаксации	4 с
Число затуханий свободной индукции	256

Химический сдвиг, усиление сигнала, отн. количество ядер

С-атом (ы)

Химический сдвиг δ (част, на млн)

Мультиплетность и константы взаимодействия (Ь)

количество ядер С/молекулу

С-26	22,73	Т 1
С-2; С-3	44,96; 45,65	Т;Т 1; 1
С-29; С-33	50,84	Т 1; 1
С-27	53,01	Т 1
ОСНз	61,24	0 1
С-30; С-32	63,03	Т 1; 1
С-25	66,81	Т 1
С-10а	100,79	5 1
С-9	112,17	ϋ 1
С-15	118,16	5 1
С-10	123,86	ϋ 1
С-ба	132,43	5 1
С-7	133,95	5 1
С-5	148,58	5 1
С-11	156,29	5 1
С-8	156,89	5 1
С-16; С-20	160,20	ϋ 1; 1
С-18	164,61	5 1
С=О	175,65	5 1

a) Нумерация относится к структурной формуле для распределения ЯМР-сигналов;

b) 8 -одиночный (С), Ό - дублет (СН), Т - триплет (СН2), 9 - квадруплет (СН3).

- 21 027670

Интерпретация спектра.

¹³С-ЯМР-спектры соединения А представлены на фиг. 11 и 12. Масс-спектрометрия.

Параметры прибора.

Масс-спектрометр \Уа1егз Ζ0.

Режим ионизации Ε5Ι (Электрораспыление-Ионизация) Растворитель СИзСИ/Н₂О

Значение массы (т/ζ)	Отн. интенсивность(%)	Образование иона
481,2	46	(М + Н)⁺
354,1	5	(С16 Н16 N7 О3)⁺
261,7	26	(Μ + 2Н + ΟΗ₃ΟΝ)⁺²
241,2	100	(М + 2Н)⁺²

Масс-спектр соединения А представлен на фиг. 13. Ссылка на спектр для относительных интенсивностей пиков.

Элементный анализ.

Элементный анализ осуществляли с помощью Вауег 1пби§1гу 8егу1сез, Беуегкизеп, Оегтапу. Результаты.

Элемент	Измеренный [%]	Рассчитанный [%]	Рассчитанный, включая 7,0 % воду [%]	Отличие
С	47,5	49,9	46,4	1,1
Н	5,7	5,5	5,9	0,2
N	19,1	20,3	18,8	0,3
0	18,1	11,6	17,0	1,1
С1	11,9	12,8	11,9	0,0
Сумма	102,3	100,1	100,0	-

Элементный анализ сопоставим с соединением А с 7% воды.

Другой способ получения соединения А.

К суспензии 366 г соединения формулы (I) в 1015 г воды добавляли 183 г водного раствора соляной кислоты (32%), при этом поддерживая температуру при 20°С (+-2°) до достижения значения рН 3-4. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение более чем 10 мин, фильтровали, и осадок на фильтре промывали дополнительно с помощью 82 г воды. Значения рН фильтрата доводили до рН 1,8-2,0, используя водный раствор соляной кислоты (32%). Смесь перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре, добавляли 146 г этанола (100%) и перемешивали дополнительно в течение 10 мин. Добавляли 1 г затравочных кристаллов, после этого - 1592 г этанола в течение 5 ч. Полученную субстанцию удаляли путем фильтрации, промывали смесью вода-этанол и высушивали в вакууме, получая 410 г (97%) соединения А с чистотой >99% согласно ВЭЖХ.

Определение молекулярного профиля соединения А в 24 клеточных линиях рака молочной железы свидетельствует о том, что опухолевые клетки либо с Р1К3СА мутацией и/или НЕК2 экспрессией чрезвычайно чувствительны к соединению А со средним 1С₅₀ значением 17 (п=7) и 19 нМ (п=8) соответственно. В отличие от этого клетки дикого типа Р1К3СА и НЕК2 отрицательного рака молочной железы (п=12) было относительно нечувствительны или резистентны к соединению А со средним 1С₅₀ значением 773 нМ (~40 раз выше). Используя набор клеточных линий рака молочной железы, представляющих различное состояние экспрессии рецептора и генетические изменения Р1К3СА и ΡΤΕΝ, исследовали антипролиферативные и апоптотические эффекты соединения А. По отношению к индукции апоптоза соединение А проявляло сильную активность у Р1К3СА мутированных и или НЕК2 положительных опухолевых клетках молочной железы (таких как ВТ20, ВТ474).

Затем идентифицировали молекулярные характерные особенности, ответственные за чувствительность и/или резистентность к соединению А, опосредующие индукцию апоптоза. Было обнаружено, что экспрессия Вс1-2, но не Мс1-1 ни выживания, определяют чувствительность к апоптозу. Таким образом, опухолевые клетки, в которых отсутствует Вс1-2 экспрессия (такие как КРБ-4, ВТ-474, и ВТ-20), даже в присутствии высоких уровней ЕОРК и фосфо-ЕКК в ВТ-20 клетках, сразу подвергаются апоптозу после воздействия соединения А. С другой стороны, клетки, экспрессирующие высокие уровни Вс1-2, такие как Т47И (Р1К3СА^ти), были резистентны к апоптозу, индуцированному соединением А, несмотря на сильную антипролиферативную активность соединения А (одноразрядная нМ 1С₅₀). Комбинирование соединения А с АВТ-737 ингибитором Вс1-2 сенсибилизирует Т47И клетки к апоптозу, дополнительно подтверждая гипотезу о том, что одновременное ингибирование Р13К и Вс1-2 может синергетически повы- 22 027670 шать эффект уничтожения опухоли в Вс1-2 положительном раке молочной железы.

С другой стороны, ΡΊΈΝ™¹¹, ЕОРР^1|1?|1 и Вс1-2 отрицательные МИА-МВ-468 опухолевые клетки не только нечувствительны к ингибированию пролиферации, но также резистентны к индукции апоптоза с помощью соединения А. Ингибирование тТОКС1 рапамицином и/или ингибирование тТОКС2 путем нокдауна Риктор сенсибилизирует МИА-МВ468 клетки к соединению А по отношению к ингибированию пролиферации и индукции апоптоза.

В заключение, соединение А чрезвычайно эффективно для индуцирования апоптоза в клетках рака молочной железы, экспрессирующих НЕК2 и/или Р1К3СА мутацию при отсутствии Вс1-2. Соединение А в комбинации с анти-Вс1 агентами или тТОК ингибиторами может представлять собой перспективный подход для получения опухолевых ответов у Вс1-2 положительных опухолях или ЕОРК экспрессирующих/РТЕ®¹ ¹¹ опухолях молочной железы соответственно. Эти данные обеспечивают логическое обоснование для развития персонализированных терапий для лечения молекулярных подтипов рака молочной железы.

На фиг. 1 показана корреляция 1С₅₀8 соединения А в анализе пролиферации и генетического статуса клеточных линий рака молочной железы.

На фиг. 2 показана кинетика ингибирования роста клеток с помощью соединения А. Технологию ХсеШдепсе (КосЬе, Оеттаиу) использовали для наблюдения за эффектами на рост опухолевых клеток после лечения с помощью соединения А. Определяли клеточный индекс (С1), который коррелирует с количеством клеток, присоединенных к дну планшета (Оюгбапо С., Маш А., Р1//ий А., Заизоие А., Соп8а1у1 V., СЫата1исе К., Ьисейе О. 8уп1Ье818 апб асбуЬу оГ йЬтШодепе818 рерйбе 1пЫЬбог8 ге1а1еб Ю 1Ье 1721 Ье!а-ату1о1б кециепсе. Еиг 1 Меб СЬет. 2009;44:179-189), каждые 15 мин в течение 80-часового периода лечения. С1 нормализовали к моменту времени лечения (при 24 ч С1=1).

На фиг. 3 показана индукция РАКР расщепления с помощью соединения А в ВТ-20, ВТ-474, 2К-751, Т47И и МИА-МВ468 клетках, исследуемая в указанные моменты времени с помощью анализа вестернблоттинга с использованием ОАРИН в качестве внутреннего белкового контроля.

На фиг. 4 показаны способствующие выживанию молекулы Вс1 семейства, исследованные в нелеченных клетках (А). Клетки лизировали и анализ вестерн-блоттинга осуществляли для обнаружения Вс12, Мс1-1 и сурвивина. ОАРИН использовали в качестве внутреннего белкового контроля.

На фиг. 5 показан количественный анализ эффекта комбинации соединения А и АВТ-737 на индукцию Каспазы 3 и 7 в Т47И клетках (С). Индукцию апоптоза соединением А и АВТ-737 в качестве единственного средства и в комбинации исследовали с помощью Са8ра§е-О1о ® 3/7 (Рготеда, И8А) и анализировали с помощью программного обеспечения Апа1у/е 5 (Вауег НеаЪЬСате, Оегтапу). Эффекты комбинации представлены с помощью изоболограммы, и показатель аддитивности рассчитан согласно формуле, описанной СЬои (СЬои и др., 2006).

Показатель аддитивности <1, =1, и >1 указывает на синергетические, аддитивные и антагонистические эффекты соответственно.

На фиг. 6 показаны МИА-МВ-468 клетки, трансфектированные лентивирусом, экспрессирующим мшРНК к Риктор. Клеточную экспрессию тТОКС2 компонента Риктор оценивали с помощью анализа вестерн-блоттинг (А). Индукция РАКР расщепления с помощью лечения соединением А в комбинации с ингибированием тТОКС1 или тТОКС2 (В). Клетки мшКонтроль и мшРиктор МИА-МВ468 обрабатывали указанными средствами в течение 48 ч, и анализировали расщепление РАКР. ОАРИН использовали в качестве внутреннего белкового контроля.

Контрольные вещества.

Рапамицин, полученный от §1§та (δΐ Ьошк, МО, υδΛ). использовали в качестве эталонного ингибитора. АВТ-737 получали от δе11еск СЬетюак (Нои81оп, ТХ, ^А).

В заключение, соединение А является чрезвычайно эффективным для индуцирования апоптоза в клетках рака молочной железы, экспрессирующих НЕК2 и/или Р1К3СА мутацию при отсутствии Вс1-2. Соединение А в комбинации с анти-Вс1 агентами или тТОК ингибиторами будет обеспечивать перспективный подход для достижения опухолевых ответов у Вс1-2 положительных опухолей или ЕОРК экспрессирующих /РТЕ®¹ ¹¹ опухолей молочной железы. Эти данные обеспечивают логическое обоснование для развития персонализированных терапий для лечения молекулярных подтипов рака молочной железы.

Следовательно, как указано выше, настоящее изобретение относится к комбинациям:

a) 2-амино-^[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера; или фармацевтических композиций, которые содержат такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер; и

b) Вс1 ингибитора, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитора тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус), как определено выше.

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления любого из вышеуказанных аспектов

- 23 027670 или их вариантов осуществления настоящего изобретения указанный рак молочной железы представляет собой рак молочной железы с тройным отрицательным фенотипом.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Применение 2-амино-М-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2с]хиназолин-5-ил]пиримидин-5-карбоксамида или его физиологически приемлемой соли, сольвата, гидрата или стереоизомера в качестве единственного активного средства или фармацевтической композиции, которая содержит такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер в качестве единственного активного средства для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы.
2. Комбинация для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы или гормон-рецептороположительного рака молочной железы, содержащая

a) 2-амино-М-[7-метокси-8-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидроимидазо[1,2-с]хиназолин-5ил]пиримидин-5-карбоксамид или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер или фармацевтическую композицию, содержащую такое соединение или его физиологически приемлемую соль, сольват, гидрат или стереоизомер, и

b) Вс1 ингибитор, который представляет собой АВТ-737; и/или ингибитор тТОК пути, который представляет собой рапамицин (сиролимус).
3. Комбинация по п.2, где компонент Ь) представляет собой рапамицин.
4. Комбинация по п.2, где компонент Ь) представляет собой АВТ-737.
5. Фармацевтическая композиция, которая содержит комбинацию по п.2.
6. Применение комбинации по п.2 или фармацевтической композиции по п.5 для приготовления лекарственного средства для лечения или профилактики отечно-инфильтративного рака молочной железы, рака молочной железы с тройным отрицательным фенотипом, Нег2 рецептороположительного рака молочной железы, гормон-рецептороположительного рака молочной железы.