EA026863B1 - Способ получения кавказосапонина из купены гладкой - Google Patents

Способ получения кавказосапонина из купены гладкой Download PDF

Info

Publication number
EA026863B1
EA026863B1 EA201501076A EA201501076A EA026863B1 EA 026863 B1 EA026863 B1 EA 026863B1 EA 201501076 A EA201501076 A EA 201501076A EA 201501076 A EA201501076 A EA 201501076A EA 026863 B1 EA026863 B1 EA 026863B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
ethanol
water
butanol
caucasosaponin
precipitate
Prior art date
Application number
EA201501076A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201501076A1 (ru
Inventor
Гаибверди Башир оглы Искендеров
Сара Агакиши кызы Пашаева
Original Assignee
Азербайджанский Медицинский Университет
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Азербайджанский Медицинский Университет filed Critical Азербайджанский Медицинский Университет
Priority to EA201501076A priority Critical patent/EA026863B1/ru
Publication of EA201501076A1 publication Critical patent/EA201501076A1/ru
Publication of EA026863B1 publication Critical patent/EA026863B1/ru

Links

Landscapes

  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к технологии получения лекарственных препаратов фармации и способу получения кавказосапонина из купены гладкой, являющегося основным действующим веществом антисклеротического препарата диоспонина, широко используемого в свое время для лечения и профилактики атеросклероза. Способ получения кавказосапонина из купены гладкой заключается в том, что высушенные и измельченные корневища полностью экстрагируют 70%-ным этанолом, этанол упаривают, водный остаток разбавляют водой, осадок отделяют, сапонины экстрагируют из водного фильтрата н-бутанолом, промывают н-бутанольное извлечение 10%-ным раствором аммиака, н-бутанол отгоняют полностью, остаток растворяют в 70%-ном этаноле, добавляют 95%-ный этанол, оставляют, осадок отделяют, водно-спиртовой раствор упаривают досуха, растворяют в 70%-ном этаноле, пропускают через слой активированного угля, фильтрат упаривают досуха и высушивают. Выход целевого вещества составляет 2,96%. Целевой продукт представляет собой белый аморфный порошок, хорошо растворимый в воде, водно-спиртовых растворах, нерастворимый в 95%-ном этаноле, хлороформе, бензоле, ацетоне. Имеет химический состав CHO, мол. масса 1046, температура плавления 220-222°С, удельное вращение [α]- 62,6° (с 0,2; 60%-ный этанол).

Description

Изобретение относится к технологии получения лекарственных препаратов фармации и способу получения кавказосапонина из купены гладкой, являющегося основным действующим веществом антисклеротического препарата диоспонина, широко используемого в свое время для лечения и профилактики атеросклероза [1, 2].
Кавказосапонин впервые был выделен из корневищ диоскореи кавказской Июксогеа саисамса [3]. Представляет собой стероидный сапонин спиростанового ряда и является тетраозидом диосгенина, в состав углеводной цепи которого входят 3 моль Ό-глюкозы и 1 моль Ь-рамнозы.
Кавказосапонин является главным биологически активным веществом диоспонина - первого сапониносодержащего препарата, предложенного в качестве антисклеротического средства, производство которого временно приостановлено из-за отсутствия сырья - корневищ диоскореи кавказской с условием восстановления производства препарата при наличии достаточного количества сырья [4]. Был предложен аналогичный препарат противосклеротического действия полиспонин из другого вида Июксогеа [5, 6]. Не случайно, что первый сапониносодержащий антисклеротический препарат диоспонин из диоскореи кавказской описан в предыдущем пособии по лекарственным средствам [1], а в последующих [7] нет, ввиду снятия с производства.
С другой стороны, диосгенин, который является стероидным сапогенином кавказосапонина, является надежным источником сырья для получения препаратов стероидных гормонов [8].
Поиск новых источников сырья, содержащих кавказосапонин и имеющих достаточное количество сырьевых ресурсов, а также разработка способов выделения кавказосапонина из них, является актуальной задачей и привлекает внимание многих специалистов - ботаников, биологов, фармацевтов, химиков, фармакологов, технологов и т.д.
Известен способ получения (прототип) кавказосапонина [3] из воздушно-сухих, измельченных и обезжиренных хлороформом корневищ Июксогеа еаиса81са, включающий максимально исчерпывающую экстракцию сырья (700 г) 80%-ным метанолом в аппарате типа Сокслета, отгонку метанола, выделение осадка водонерастворимых сапонинов (с примесью водорастворимых), подщелачивание аммиаком водного фильтрата, извлечение бутанолом, концентрирование бутанольного экстракта в вакууме при температуре не выше 50°, получение окрашенного осадка смеси водорастворимых двух сапонинов, просушивание в вакууме, извлечение хлороформом для освобождения от окрашенных и парафинообразных примесей, растворение 3,78 г смеси водорастворимых сапонинов при нагревании 17 мл метанола, постепенное осаждение сапонинов ацетоном, отделение первых осадков, представляющих собой кавказосапонин. Недостатками способа являются:
1) отсутствие сырьевых ресурсов - корней и корневищ растения Июксогеа саисамса. необходимых для получения кавказосапонина, следовательно, и лекарственного препарата диоспонина;
2) использование в качестве экстрагентов хлороформа и метилового спирта, а также ацетона в качестве осаждающего вещества, являющихся высокотоксичными, труднодоступными и дорогими растворителями, а ацетон представляет собой прекурсор, использование которого подлежит контролю;
3) способ многоэтапный, требующий предварительного обезжиривания сырья хлороформом, а также освобождения от окрашенных и парафинообразных веществ хлороформом;
4) выход очень низкий (0,54%) вследствие малого содержания целевого вещества в сырье с одной стороны, потери водорастворимого кавказосапонина в виде примесей при осаждении водонерастворимых сапонинов - с другой;
5) не обеспечивается высокая степень чистоты целевого вещества, так как в продуктах гидролиза диосгенин присутствует с примесью геко- и гитогенинов, а также молекула кавказосапонина С382О22х3 Н2О содержит 3 молекулы воды;
6) трудность уточнения образования первых осадков, соответствующих кавказосапонину, о которых говорится в самой последней стадии способа. Ведь целевое вещество в этом случае сопровождается с примесью другого водорастворимого сапонина.
Задача изобретения заключается в правильном подборе нового, более подходящего растительного сырья, имеющего широкий ареал распространения и богатую сырьевую базу, для получения кавказосапонина, упрощении, сокращении многоэтапности, удешевлении, устранении токсичности, вредности и опасности способа, повышении выхода и степени чистоты целевого вещества.
Задача решается тем, что в способе получения кавказосапонина, включающем исчерпывающее экстрагирование растворителем воздушно-сухого измельченного сырья, отгонки растворителя, удаление осадка, экстрагирование водного раствора бутанолом, концентрирование бутанольного экстракта, растворение водорастворимых сапонинов в растворителе, предусмотрены следующие отличия: в качестве исходного сырья используют в отличие от ранее используемого собственного рода растения Июксогеа совершенно новый род и вид - купену гладкую Ро1удоиа1ит §1аЪеттит, в качестве растворителя используют 70%-ный этанол, высушенные и измельченные корневища купены гладкой полностью экстрагируют 70%-ным этанолом, этанол упаривают, водный остаток разбавляют водой, осадок отделяют, сапонины экстрагируют из водного фильтрата н-бутанолом, промывают н-бутанольное извлечение 10%ным раствором аммиака, н-бутанол отгоняют полностью, остаток растворяют в 70%-ном этаноле, добавляют 95%-ный этанол, оставляют, осадок отделяют, водно-спиртовой раствор упаривают досуха, раство- 1 026863 ряют в 70%-ном этаноле, пропускают через слой активированного угля, фильтрат упаривают досуха и высушивают. Выход целевого вещества составляет 2,96%. Чистоту, однородность и идентичность целевого продукта с кавказосапонином устанавливали методом хроматографии в тонких слоях сорбента. Целевой продукт представляет собой белый аморфный порошок, хорошо растворимый в воде, водноспиртовых растворах, не растворимый в 95%-ном этаноле, хлороформе, бензоле, ацетоне. Имеет химический состав С51Н82О22, мол. масса 1046, температура плавления 220-222°С, удельное вращение [а]2% 62,6° (с 0,2; 60% этанол).
На основании классических химических методов, хроматографии и ИК-спектроскопии установлено, что целевое вещество представляет собой тетраозид диосгенина, содержащий три молекулы Ό-глюкозы и одну молекулу Ь-рамнозы, и является кавказосапонином.
Преимущества предложенного нами способа:
1) в качестве исходного сырья для получения кавказосапонина, в отличие от собственного родного рода растения Ою^согса. сырьевая база которого в настоящее время не имеется, предлагается совершенно другой, новый вид и род растения - купена гладкая Ро1удоиа1ит д1аЬеттит, имеющая широкий ареал распространения, богатый сырьевой ресурс, а также содержащий необходимое количество кавказосапонина;
2) промывание н-бутанольного экстракта 10%-ным раствором аммиака позволяет полностью освободиться от фенольных соединений, красящих, пектиновых веществ и других побочных примесей, а также пропускание водно-спиртового раствора кавказосапонина через слой активированного угля обеспечивает высокую степень чистоты и индивидуальность целевого продукта. Все вышеуказанные процессы обеспечивают максимальный выход всего целевого вещества, имеющегося в сырье;
3) осаждение более полярных гликозидов из спирто-водного раствора 95%-ным этанолом значительно ускоряет способ получения кавказосапонина в индивидуальном чистом виде без применения сложных трудоемких и длительных процессов, таких как адсорбционное колоночное хроматографическое разделение, элюирование веществ, контроль за элюированием, исследование отдельных фракций, удаление растворителей из фракций и т.д., которые могут быть причиной частичной потери целевого продукта;
4) не применяются высокотоксичные, канцерогенные, опасные для здоровья растворители;
5) достаточно простой, легковыполнимый, не требующий длительного времени, дорогих, труднодоступных растворителей, реактивов и приборов;
6) достаточная четкость формулирования всех стадий способа.
Между совокупностью существенных признаков и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь: в качестве исходного сырья для получения кавказосапонина, в отличие от Оюксотеа, сырьевая база которого в настоящее время не имеется, предлагается купена гладкая Ро1удоиа!ит ЦаЬегптит имеющая широкий ареал распространения, богатый сырьевой ресурс, а также содержащий необходимое количество кавказосапонина; промывание н-бутанольного экстракта 10%-ным раствором аммиака позволяет полностью освободиться от фенольных соединений, красящих, пектиновых веществ и других побочных примесей, а также пропускание водно-спиртового раствора кавказосапонина через слой активированного угля обеспечивает высокую степень чистоты и индивидуальность продукта, данные процессы обеспечивают максимальный выход всего целевого вещества, имеющегося в сырье; осаждение более полярных гликозидов из спирто-водного раствора 95%-ным этанолом значительно ускоряет способ получения кавказосапонина в индивидуальном чистом виде; не применяются высокотоксичные, канцерогенные, опасные для здоровья растворители.
Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующим примером.
Пример.
Способ получения кавказосапонина проводили следующим образом: 400 г высушенных и измельченных корневищ купены гладкой помещали в стеклянную банку емкостью 3 л. Заливали 70%-ным этанолом до полного покрытия сырья и оставляли. Через сутки добавляли 70%-ный этанол до прежнего уровня, чтобы дополнить поглощенную сырьем часть 70%-ного этанола. На следующий день спиртовое извлечение сливали. Остаток сырья заливали новой порцией 70%-ного этанола до полного покрытия сырья, оставляли на сутки. Спиртовое извлечение сливали. Повторяли экстрагирование 70%-ным этанолом еще два раза (всего 4 раз). Все спиртовые извлечения объединяли, спирт упаривали на водяной бане при помощи водоструйного насоса до водного остатка. Добавляли 150 мл очищенной воды и оставляли в течение 3 ч до полного остывания. Выпавший осадок отделяли с помощью бумажного фильтра. Водный фильтрат переносили в делительную воронку, добавляли 100 мл н-бутанола, смесь взбалтывали в течение 10 мин и оставляли на сутки для полного расслоения фаз. Органическую фазу отделяли от водной. К водной фазе добавляли новую порцию н-бутанола (100 мл), взбалтывали, оставляли для полного расслоения, н-бутанольную фазу отделяли. Аналогичным образом экстракцию н-бутанолом проводили всего 4 раз. Все н-бутанольные экстракты объединяли, трижды промывали 10%-ным раствором аммиака (по 200 мл). Из органического экстракта н-бутанол отгоняли полностью. Густой остаток растворяли в 50 мл 70% этанола. Добавляли 150 мл 95% этанола и оставляли 3 ч. Выпавший осадок более полярного гликозида отделяли с помощью бумажного фильтра. Водно-спиртовой раствор упаривали досуха. Сухой оста- 2 026863 ток растворяли в 100 мл 70%-ного этанола и пропускали через слой активированного угля (толщиной 3 см, предварительно смоченного 70%-ным этанолом). Спиртовой фильтрат упаривали досуха и высушивали в сушильном шкафу при 80°С до постоянной массы. Выход 11,84 г (2,96%). Чистоту и однородность целевого продукта доказали методом тонкослойной хроматографии. Вещество представляет собой белый аморфный порошок, хорошо растворимый в воде и водно-спиртовых растворах, не растворяется в 95%-ном этаноле, хлороформе, бензоле и др. органических растворителях. Имеет химический состав С51Н82О22, мол. масса 1046, температура плавления 220-222°С, удельное вращение [а]2% - 62,6° (с 0,2; 60%-ный этанол). Идентичность целевого вещества и кавказосапонина установлена на основании выше указанных физико-химических свойств, а также результатами хроматографического исследования и ИКспектроскопией.
Литература.
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства, ч. II. - 8-е изд. - М., 1977, с. 11.
2. Соколова Л.Н., Киченко В.И., Ростоцкий Б.К., Губина Г.П. Диоспонин - новое лекарственное средство для лечения больных атеросклерозом// Медицинская промышленность СССР, 1961, № 7, с. 4345.
3. Мадаева О.С., Рыжкова В.К., Панина В.В. Кавказосапонин и кавказопросапогенин из И.саиса81са XV. Сапонины Июксогеа// Химия природных соединений, 1967, № 4, с. 237-241.
4. Шретер А.И., Задорожный А.М. Итоги работ ВИЛР по созданию новых лечебных препаратов растительного происхождения// Растительные ресурсы, 1982, № 4, с. 539-547.
5. Соколова Л.Н., Турова А.Д., Шретер А.И. Диоскорея ниппонская - источник сырья для получения полиспонина - препарата противосклеротического действия// Растительные ресурсы, 1968, № 1, с. 43-45.
6. Лесков А.И., Мартынова Р.Г., Соколов С.Я. Полиспонин - новый лечебный препарат антисклеротического действия// Химико-фармацевтический журнал, 1976, № 1, с. 147-150.
7. Машковский М.Д. Лекарственные средства, ч. II. - 10-е изд. - М., 1985, с. 92.
8. Киченко В.И. Диоскорея как источник сырья для синтеза стероидных гормонов// Медицинская промышленность СССР, 1961, № 3, с. 17-20.
Использованные материалы и устройства
1. Колбы различной вместимости: 2 л (1аЬ\уаге 8&Н ^IN|I§О|А|Βо^о 3.3, 29/32), 1 л (ОО-17, 29/32).
2. Стеклянная воронка.
3. Делительная воронка.
4. Пульверизатор.
5. Стеклянный баллон (ем. 3 л).
6. Фарфоровые чашки.
7. Сушильный шкаф (ООГИТЕРМ Р-40).
8. Пластинки для тонкослойной хроматографии: §11иРо1 (Чехия), §огЬй1 (РшЬа. Кгакиокаг 350072).
9. Водяная баня (НН-§).
10. Установка для перегонки.
11. Поляриметр (П-161).
12. Аналитический вес.
13. Корневища купены гладкой Ро1удопа1иш ДаЬеггшшт (0,4 кг).
14. 70%-ный этанол.
15. н-Бутанол.
16. 10%-ный раствор аммиака.
17. Активированный уголь.
18. Фильтровальная бумага.

Claims (1)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    Способ получения кавказосапонина из купены гладкой, включающий экстрагирование растворителем воздушно-сухого измельченного сырья, отгонку растворителя, удаление осадка, экстрагирование водного раствора бутанолом, концентрирование бутанольного экстракта, растворение водорастворимых сапонинов в растворителе, отличающийся тем, что в качестве исходного сырья используют купену гладкую Ро1удоиа1ит д1аЬсгптит. высушенные и измельченные корневища которой четырежды экстрагируют растворителем - 70%-ным этанолом, экстракты объединяют, этанол упаривают, водный остаток разбавляют водой, осадок отделяют, сапонины четырежды экстрагируют из водного фильтрата нбутанолом, н-бутанольные извлечения объединяют, трижды промывают 10%-ным раствором аммиака, нбутанол отгоняют полностью, остаток растворяют в 70%-ном этаноле, добавляют 95%-ный этанол, оставляют, осадок отделяют, водно-спиртовой раствор упаривают досуха, растворяют в 70%-ном этаноле, пропускают через слой активированного угля, фильтрат упаривают досуха, высушивают и получают целевой продукт в виде белого аморфного порошка.
EA201501076A 2015-07-03 2015-07-03 Способ получения кавказосапонина из купены гладкой EA026863B1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201501076A EA026863B1 (ru) 2015-07-03 2015-07-03 Способ получения кавказосапонина из купены гладкой

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA201501076A EA026863B1 (ru) 2015-07-03 2015-07-03 Способ получения кавказосапонина из купены гладкой

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201501076A1 EA201501076A1 (ru) 2017-01-30
EA026863B1 true EA026863B1 (ru) 2017-05-31

Family

ID=57881902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201501076A EA026863B1 (ru) 2015-07-03 2015-07-03 Способ получения кавказосапонина из купены гладкой

Country Status (1)

Country Link
EA (1) EA026863B1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101837091A (zh) * 2010-03-17 2010-09-22 安徽师范大学 一种连续提取黄精皂甙和黄精多糖的工艺
CN102488839A (zh) * 2011-11-15 2012-06-13 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精总皂苷的提取方法
CN104069347A (zh) * 2014-06-30 2014-10-01 吉林化工学院 一种玉竹总皂苷分散片的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101837091A (zh) * 2010-03-17 2010-09-22 安徽师范大学 一种连续提取黄精皂甙和黄精多糖的工艺
CN102488839A (zh) * 2011-11-15 2012-06-13 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精总皂苷的提取方法
CN104069347A (zh) * 2014-06-30 2014-10-01 吉林化工学院 一种玉竹总皂苷分散片的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МАДАЕВА O.C. и др. Кавказосапонин и кавказосапогенин из D. Caucasica XV. Сапонины Diubcorea// Химия природных соединений, 1967, ''Фан", № 4, с. 237-241 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201501076A1 (ru) 2017-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2007137890A5 (ru)
CN107998212B (zh) 一种地黄环烯醚萜苷类提取物的制备方法
CN102697839A (zh) 双水相萃取分离黄芪黄酮、皂苷和多糖的方法
CN104666368B (zh) 高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法
CN104523771A (zh) 一种银杏叶总黄酮及其制备方法
MX2012001747A (es) Extracto de picrorhiza kurroa para la prevencion, eliminacion y tratamiento de virus a base de adn en humanos y en la industria biotecnologica.
CN109694366B (zh) 一种分离提纯甘木通有效成分的方法
CN107056913A (zh) 一种制备蜂毒肽的方法
CN109400665B (zh) 从毛冬青中制备四种三萜类化合物对照品的方法
EA026863B1 (ru) Способ получения кавказосапонина из купены гладкой
CZ306293B6 (cs) Způsob purifikace betulinu a lupeolu, betulin a lupeol připravitelné tímto způsobem
CN103044253B (zh) 一种藏丹参中迷迭香酸的提取分离方法
CN102382156A (zh) 一种地黄苷d标准物质的制备方法
CN102670935B (zh) 一种从藠头中提取总皂苷的方法
CN104906191A (zh) 宽筋藤乙酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的医药用途和制备方法
CN114656515A (zh) 一种枇杷叶三萜酸提取物的制备方法
CN103819518A (zh) 杜仲松脂醇二葡萄糖苷标准提取物的制备方法
CN109970838B (zh) 一种长梗冬青苷的制备方法
CN103288898B (zh) 新芒果苷对照品提取纯化分离方法
EA026930B1 (ru) Способ получения диосцинина из якорцев стелющихся
CN111150739A (zh) 扁蓄苷的用途以及从珠芽蓼中提取扁蓄苷的方法
CN103483410B (zh) 一种文冠果壳苷的制备方法
Abdul–Alim A chemical study of the leaves of Clerodendron inerme
Misgiati et al. Anti-breast cancer potency of multistage extraction from jamur dewa (Agaricus blazei Murill) solvents on MCF-7 cells
RU2591081C1 (ru) Способ получения суммы сапонинов из корней аралии маньчжурской

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU