EA026389B1 - Замещенные аналоги (e)-n'-(1-фенилэтилиден)бензогидразида в качестве ингибиторов деметилазы гистонов - Google Patents

Замещенные аналоги (e)-n'-(1-фенилэтилиден)бензогидразида в качестве ингибиторов деметилазы гистонов Download PDF

Info

Publication number
EA026389B1
EA026389B1 EA201490453A EA201490453A EA026389B1 EA 026389 B1 EA026389 B1 EA 026389B1 EA 201490453 A EA201490453 A EA 201490453A EA 201490453 A EA201490453 A EA 201490453A EA 026389 B1 EA026389 B1 EA 026389B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
accordance
compounds
another aspect
mao
Prior art date
Application number
EA201490453A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490453A1 (ru
Inventor
Харипрасад Ванкайалапати
Венкатасвами Сорна
Стив Л. Уорнер
Дэвид Дж. Бирсс
Сунил Шарма
Брет Стефенс
Original Assignee
Юниверсити Оф Юта Рисерч Фаундейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юниверсити Оф Юта Рисерч Фаундейшн filed Critical Юниверсити Оф Юта Рисерч Фаундейшн
Publication of EA201490453A1 publication Critical patent/EA201490453A1/ru
Publication of EA026389B1 publication Critical patent/EA026389B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine only substituted in position 1, e.g. propipocaine, diperodon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/16—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/30—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/45—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the singly-bound nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylaminosulfonamides
    • C07C311/46—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/155—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/26—Sulfur atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к замещенным аналогам (E)-N'-(1-фенилэтилиден)бензогидразида, его производным и родственным соединениям, пригодным в качестве ингибиторов лизин-специфичной деметилазы гистонов, включая LSD1, к синтетическим способам получения указанных соединений; к фармацевтическим композициям, включающим указанные соединения; и к способам применения указанных соединений и композиций для лечения расстройств, связанных с дисфункцией LSD1. Данный реферат предназначен в качестве инструмента сканирования для поиска в данной области техники и его не следует рассматривать как ограничивающий настоящее изобретение.

Description

Сущность изобретения
В соответствии с целью(ями) настоящего изобретения, осуществленного и подробно изложенного в данном описании, настоящее изобретение согласно одному аспекту относится к соединениям, пригодным в качестве ингибиторов лизин-специфичной деметилазы, или Ь8О. В соответствии с другим аспектом раскрытые соединения и продукты раскрытых способов их получения или их фармацевтически приемлемая соль, гидрат, сольват или полиморфная модификация являются модуляторами активности Ь8О, при этом раскрываются способы их получения, содержащие их фармацевтические композиции, а также способы лечения расстройств с использованием указанных соединений, которые связаны с дисфункцией активности Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом настоящее изобретение относится к соединениям, которые связываются с белком Ь8О и снижают активность Ь8О. Раскрытые соединения могут в соответствии с одним аспектом проявлять селективность к подтипам. В соответствии с другим аспектом раскрытые соединения обладают селективностью по отношению к члену Ь8О1 семейства белков Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения обладают селективностью по отношению к члену Ь8О2 семейства белков Ь8О.
Раскрываются также фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество раскрытого соединения и фармацевтически приемлемый носитель.
Раскрываются также синтетические способы получения раскрытых соединений. В соответствии с еще одним аспектом раскрываются продукты раскрытых синтетических способов.
Раскрываются способы лечения расстройства, связанного с дисфункцией активности Ь8О у млекопитающего, которые включают стадию введения указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества раскрытого соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации.
Раскрываются также способы ингибирования активности Ь8О у млекопитающего, которые включают стадию введения указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного раскрытого соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации.
Раскрываются также способы ингибирования активности Ь8О по меньшей мере в одной клетке, которые включают стадию контактирования по меньшей мере одной клетки с эффективным количеством по меньшей мере одного раскрытого соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации.
Раскрываются также применения раскрытого соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или его полиморфной модификации. В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество раскрытого соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации.
Раскрываются также наборы реагентов, содержащие по меньшей мере одно раскрытое соединение или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат, сольват или полиморфную модификацию и один или несколько из следующих: (а) по меньшей мере один агент, который, как известно, усиливает активность деметилазы гистонов, (й) по меньшей мере один агент, который, как известно, снижает активность деметилазы гистонов, (с) по меньшей мере один агент, известный для лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток, (4) по меньшей мере один агент, известный для лечения нейродегенеративного расстройства, (е) инструкции по лечению нейродегенеративного расстройства или (ί) инструкции по лечению расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток.
Раскрываются также способы приготовления лекарственного средства, включающие объединение по меньшей мере одного раскрытого соединения или по меньшей мере одного раскрытого продукта и фармацевтически приемлемого носителя или разбавителя. В соответствии с еще одним аспектом настоящее изобретение относится к применению раскрытого соединения для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения расстройства, связанного с дисфункцией активности Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция активности Ь8О является дисфункцией активности
- 2 026389
Ε8Ό1. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция активности ΕδΌ является дисфункцией активности Ε8Ό2. В соответствии с еще одним аспектом настоящее изобретение относится к использованию раскрытого соединения для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток.
Раскрываются также применения раскрытого соединения или раскрытого продукта при приготовлении лекарственного средства, предназначенного для лечения расстройства, связанного с дисфункцией ΕδΌ у млекопитающего.
Несмотря на то что аспекты настоящего изобретения могут быть описаны и заявлены в конкретном классе патентоспособных объектов изобретения, таком как системный класс патентоспособных объектов изобретения, это сделано лишь для удобства, и специалисту в данной области техники должно быть понятно, что каждый аспект настоящего изобретения может быть описан и заявлен в любом классе патентоспособных объектов изобретения. Если конкретно не указано иное, то ни в коем случае не следует понимать, что любой приведенный в данном описании способ или аспект может быть истолкован как требование того, что его стадии следует осуществлять в определенном порядке. Соответственно в том случае, когда относящийся к способу пункт формулы изобретения в формуле или описании изобретения конкретно не указывает, что стадии должны быть ограничены конкретным порядком, то, во всяком случае, не предполагается, что определенный порядок подразумевается. Указанное верно для любой возможной не выраженной основы для интерпретации, в том числе предметов логики в отношении осуществлении стадий или в отношении порядка проведения операций; общепринятого значения, полученного из грамматического построения или пунктуации; или количества или типов аспектов, приведенных в данном описании.
Описание изобретения
Настоящее изобретение станет более понятным со ссылкой на следующее подробное описание настоящего изобретения и включенных в него примеров.
Перед тем как будут раскрыты и описаны соединения по настоящему изобретению, композиции, изделия, системы, устройства и/или способы необходимо понимать, что они не ограничиваются, если не указано иное, конкретными способами синтеза или не ограничиваются, если не указано иное, конкретными реагентами, поскольку они, конечно, могут меняться. Следует также понимать, что используемая в данном описании терминология предназначена лишь для описания конкретных аспектов и ее не следует рассматривать как ограничивающую настоящее изобретение. Хотя любые способы и вещества, подобные или эквивалентные приведенным в данном описании, могут быть использованы при осуществлении или при тестировании настоящего изобретения, далее будут приведены примеры способов и веществ.
Все упомянутые в данном описании публикации включены в настоящее описание посредством ссылки с тем, чтобы раскрыть и описать способы и/или вещества, в связи с которыми цитируются указанные публикации. Обсуждаемые в данном описании публикации приведены лишь потому, что они раскрыты до даты подачи настоящей заявки. Ничто в данном описании не должно быть истолковано как признание того, что настоящее изобретение не может быть противопоставлено подобной публикации в силу более раннего приоритета изобретения. Кроме того, приведенные в данном описании даты публикации могут отличаться от фактических дат публикации, что может потребовать независимого подтверждения.
А. Определения.
В настоящем описании номенклатура соединений, в том числе органических соединений, может быть указана с использованием обычных названий или же рекомендаций ШРАС, ШВМВ или СА§ для номенклатуры. В том случае, когда присутствуют один или несколько стереохимических признаков, то для обозначения стереохимического приоритета могут быть использованы правила Кана-ИнгольдаПрелога для стереохимии, Ε/Ζ-спецификации и т.п. Специалист в данной области техники сможет легко установить структуру соединения по его названию либо путем системного упрощения структуры соединения с помощью соглашений о наименовании или с помощью коммерчески доступного программного обеспечения, такого как СЬетЭгате™ (СатЪйбдеЗой Согрогайоп, США).
В данном описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если из контекста явно не следует иное. Так, например, ссылка на функциональную группу, алкил или остаток включает смеси двух или нескольких подобных функциональных групп, алкилов или остатков и т. п.
Диапазоны величин в данном описании могут быть выражены от приблизительно одного конкретного значения и/или до приблизительно другого конкретного значения. В том случае, когда приведен подобный диапазон, еще один аспект включает величину от одного конкретного значения и/или до другого конкретного значения. Аналогично, когда значения выражены как приближения с использованием предшествующего термина приблизительно, то следует понимать, что конкретное значение представляет собой еще один аспект. Следует также понимать, что предельные значения каждого из диапазонов являются значимыми как по отношению к другому предельному значению, так и независимо от другого предельного значения. Следует также понимать, что в данном описании раскрыт целый ряд значений, и что каждое значение в данном описании раскрыто также как приблизительная величина указан- 3 026389 ного конкретного значения в дополнение к самой величины. Например, если раскрыто значение 10, то приблизительно 10 также раскрыто. Следует также понимать, что каждая единица между двумя конкретными единицами также раскрыта. Например, если раскрыты 10 и 15, то и 11, 12, 13 и 14 также раскрыты.
Ссылки в данном описании и окончательной формуле изобретения на массовые части конкретного элемента или компонента в композиции обозначают массовое соотношение между элементом или компонентом и любыми другими элементами или компонентами в композиции или изделии, для которых указана массовая часть. Так, в соединении, содержащем 2 массовые части компонента X и 5 массовых частей компонента Υ, X и Υ присутствуют в массовом соотношении 2:5 и они присутствуют в подобном соотношении независимо от того, содержатся ли в соединении дополнительные компоненты.
Массовые проценты (мас.%) компонента, если специально не указано иное, приведены в расчете на общую массу состава или композиции, в которые включен указанный компонент.
В данном описании термин 'ΈδΌ относится совместно к одному или обоим Ь§О1 и Ε8Ό2.
В данном описании термины 'ΈδΌΓ' и лизин-специфичная деметилаза 1 могут использоваться взаимозаменяемо и относятся к деметилазе гистонов, кодируемой геном ΚΌΜ1Α. Ген ΚΌΜ1Α имеет локус на генной карте 1р36.12, как описано цитогенетическим бэндом Еп1гс/ Оепе, цитогенетическим бэндом ЕпкетЫ и цитогенетическим бэндом НСЫС. Термин Ε8Ό1 относится к нативному белку, который содержит 852 аминокислоты с молекулярной массой приблизительно 92903 Да и является членом семейства флавинмоноаминоксидазы. Термин Ь§О1 включает в себя белок, генный продукт и/или ген, на который указывают такие альтернативные обозначения как: ΕδΌ1, ΚΌΜ1; КР1-18419.1; ΆΘΡ2; ВНС110; ΚΙΑΑ0601; Ь§О1; ВКЛЕ35-НОЛС комплекс белка ВНС110; ΡΑΌ-связывающий белковый комплекс ВКЛЕ35-НОЛС. субъединица 110 кДа; домен 2 аминоксидазы (флавинсодержащей); лизин-специфичная деметилаза 1 гистонов; лизин-специфичная деметилаза 1А гистонов; белок 2, содержащий домен флавинсодержащей аминоксидазы; лизин (1<)-специфичная деметилаза 1; домен 2 аминоксидазы (флавинсодержащей); и ΡΑΌ-связывающий белковый комплекс ВКЛЕ35-НОЛС, субъединица 110 кДа, используемые специалистами в данной области техники.
В данном описании термины 'Έ§Ό2 и лизин-специфичная деметилаза 2 могут использоваться взаимозаменяемо и относятся к деметилазе гистонов, кодируемой геном ΚΌΜ1Β. Ген ΚΌΜ1Β имеет локус на генной карте 6р22.3, как описано цитогенетическим бэндом Еп1ге/ Оепе, цитогенетическим бэндом ЕпкетЫ и цитогенетическим бэндом НСЫС. Термин Ό8Ό21 относится к нативному белку, который содержит 822 аминокислоты с молекулярной массой приблизительно 92098 Да и является членом семейства флавинмоноаминоксидазы. Термин Ό8Ό2 включает в себя белок, генный продукт и/или ген, на который указывают такие альтернативные обозначения как: ΡδΌ2, ΑΘΡ1; РЫ33898; РЫ34109; РЫ43328; С6от£193; ΌΚΡΖρ68610412; 0ΤΤΗυΜΡ00000179125; ΐ>Α204Β7.3; Ш298Л5.2; белок 1, содержащий домен флавинсодержащей аминоксидазы; лизин-специфичная деметилаза гистонов 2; лизин (1<)-специфичная деметилаза 1В; домен 1 аминоксидазы (флавинсодержащей); аминоксидаза 1, флавинсодержащая; лизинспецифичная деметилаза 2 гистонов; открытый для считывания участок 193 хромосомы 6 и лизинспецифичная деметилаза 1В гистонов, используемые специалистами в данной области техники.
В данном описании термин деметилаза гистонов относится к той группе ферментов, которые удаляют метильные группы из гистоновых белков. Термин объединяет как лизиндеметилазы гистонов, т. е. ферменты, которые удаляют метильные группы из остатков лизина в гистонах, так и аргининдеметилазы гистонов, т. е. ферменты, которые удаляют метильные группы из остатков аргинина в гистонах.
В данном описании термины лизиндеметилаза гистонов или лизин-специфичная деметилаза гистонов могут использоваться взаимозаменяемо, и оба они относятся к той группе ферментов, которые удаляют метильные группы из остатков лизина гистоновых белков. Лизиндеметилазы гистонов представляют собой группу ферментов, которая включает следующие конкретные формы: Ь§О1, Ь§О2, 1Μ1Ό2Α, 1Μ1Ό2Β, ^Μ^^2С и 1Μ1Ό2Ό.
В данном описании термины необязательный или необязательно означают, что описываемое далее событие или обстоятельство может случиться или может не случиться, и что данное описание включает примеры, когда указанное событие или обстоятельство случаются, и примеры, когда они не случаются.
В данном описании термин субъект может быть позвоночным, таким как млекопитающее, рыба, птица, рептилия или амфибия. Так, субъектом приведенных в данном описании способов может быть человек, отличный от человека примат, лошадь, свинья, кролик, собака, овца, коза, корова, кошка, морская свинка или грызун. Термин не указывает на конкретный возраст или пол. Таким образом, предполагается, что он охватывает взрослых и новорожденных субъектов, а также утробные плоды, независимо от мужского или женского рода. В соответствии с одним аспектом субъектом является млекопитающее. Термин пациент относится к субъекту, страдающему от заболевания или расстройства. Термин пациент включает человека и животных. В соответствии с некоторыми аспектами раскрытых способов у субъекта до стадии назначения лекарственного средства диагностирована необходимость лечения расстройства, вызванного неконтролируемой пролиферацией клеток, которая связана с дисфункцией лизиндеметилазы гистонов. В соответствии с некоторыми аспектами раскрытого способа у субъекта до стадии
- 4 026389 назначения лекарственного средства диагностирована необходимость ингибирования лизиндеметилазы гистонов.
В данном описании термин лечение относится к лечению пациента с целью излечить, облегчить, стабилизировать или предотвратить заболевание, патологическое состояние или расстройство. Указанный термин включает активное лечение, т. е. лечение, направленное непосредственно на излечение заболевания, патологического состояния или расстройства, а также включает этиотропную терапию, т. е. лечение, направленное на устранение причины соответствующего заболевания, патологического состояния или расстройства. Кроме того, указанный термин включает паллиативное лечение, т. е. лечение, направленное на облегчение симптомов заболевания, а не излечение заболевания, патологического состояния или расстройства; профилактическую терапию, т. е. лечение, направленное на минимизацию или полное или частичное подавление развития соответствующего заболевания, патологического состояния или расстройства; и поддерживающее лечение, т. е. лечение, используемое в дополнение к другой конкретной терапии, направленной на улучшение соответствующего заболевания, патологического состояния или расстройства. В соответствии с различными аспектами указанный термин охватывает любое лечение субъекта, в том числе лечение млекопитающих (например, человека), и включает (ί) предотвращение заболевания субъекта, который может быть предрасположен к заболеванию, но у которого оно еще не диагностировано; (ίί) подавление заболевания, т. е. остановку его развития, или (ίίί) облегчение болезни, т. е. ослабление симптомов заболевания. В соответствии с одним аспектом субъектом является млекопитающее, такое как примат, и в соответствии с еще одним аспектом субъектом является человек. Термин субъект также включает в себя домашних животных (в частности, кошек, собак и т. д.), домашний скот (в частности, крупный рогатый скот, лошадей, свиней, овец, коз и т. д.) и лабораторных животных (в частности, мышь, кролика, крысу, морскую свинку, плодовую муху, полосатого данио и т. д.).
В данном описании термин предотвратить или предотвращение относится к устранению, предотвращению, избавлению, предупреждению, остановке или препятствию возможного происшествия, в частности, за счет принятия превентивных мер. Следует понимать, что когда в данном описании используют термин снизить, подавить или предотвратить, то, если специально не указано иное, также используются и два других термина.
В данном описании термин диагностирован означает медицинское обследование субъекта у специалиста, например у врача, и установление наличия состояния, которое может быть диагностировано или излечено с помощью раскрытых в данном описании соединений, композиций или способов. Например, выражение диагностировано расстройство, вызванное неконтролируемой пролиферацией клеток, означает медицинское обследование субъекта у специалиста, например у врача, и установление наличия состояния, которое может быть диагностировано или излечено с использованием соединения или композиции, которые могут ингибировать лизиндеметилазу гистонов. В качестве дополнительного примера выражение установлен диагноз необходимости ингибирования деметилазы гистонов относится к медицинскому обследованию субъекта у специалиста, например у врача, и к установлению наличия состояния, которое характеризуется дисфункцией деметилазы гистонов. Подобный диагноз может относиться к расстройству, такому как расстройство, вызванное неконтролируемой пролиферацией клеток, онкологическое заболевание и т. п., как указано в данном описании. Например, выражение установлен диагноз необходимости ингибирования активности деметилазы гистонов относится к медицинскому обследованию лица у специалиста, например у врача, и к установлению наличия состояния, которое может быть диагностировано или излечено путем ингибирования активности деметилазы гистонов. Например, выражение установлен диагноз необходимости лечения одного или нескольких расстройств, вызванных неконтролируемой пролиферацией клеток, которая связана с дисфункцией деметилазы гистонов, означает медицинское обследование лица у специалиста, например у врача, и установление наличия одного или нескольких расстройств, вызванных неконтролируемой пролиферацией клеток, которая связана с дисфункцией деметилазы гистонов.
В данном описании выражение идентифицирован как нуждающийся в лечении расстройства или т. п. относится к выбору субъекта в соответствии с необходимостью лечения расстройства. Например, субъект может быть идентифицирован как нуждающийся в лечении расстройства (например, расстройства, связанного с дисфункцией активности деметилазы гистонов) на основе ранней диагностики специалистом с последующим лечением расстройства. Предполагается, что указанная идентификация в соответствии с одним аспектом может быть проведена лицом, отличным от лица, устанавливающего диагноз. Предполагается также в соответствии с другим аспектом, что назначение лекарственного средства может быть проведено лицом, которое впоследствии осуществляет введение лекарственного средства.
В данном описании термины введение и назначение относятся к любому способу доставки фармацевтического препарата субъекту. Подобные способы хорошо известны специалистам и включают, однако этим не ограничиваясь, пероральное введение, трансдермальное введение, введение путем ингаляции, интраназальное введение, местное нанесение, интравагинальное введение, внутриглазное введение, внутриушное введение, внутримозговое введение, ректальное введение, сублингвальное введение, трансбуккальное введение, внутриуретральное введение и парентеральное введение, в том числе введение в виде инъекций, такое как внутривенное введение, внутриартериальное введение, внутримышечное
- 5 026389 введение и подкожное введение. Введение может быть непрерывным или прерывистым. В соответствии с различными аспектами лекарственное средство можно вводить терапевтически, т. е. вводить с целью лечения существующего заболевания или состояния. В соответствии с другими различными аспектами лекарственное средство можно вводить профилактически, т. е. вводить с целью предотвращения заболевания или состояния.
Термин контактирование в данном описании относится к объединению раскрытого соединения и клетки, рецептора-мишени или другого биологического объекта таким образом, что соединение может оказать воздействие на активность мишени (например, рецептора, клетки и т. д.) либо непосредственно, т. е. путем взаимодействия с самой мишенью, либо косвенно, т. е. путем взаимодействия с другой молекулой, кофактором, фактором или белком, от которого зависит активность мишени.
В данном описании термины эффективное количество и количество, эффективное для относятся к такому количеству, которое достаточно для достижения желаемого результата либо оказывает влияние на нежелательное состояние. Например, терапевтически эффективное количество относится к количеству, которое достаточно для достижения желаемого терапевтического результата или оказывает влияние на нежелательные симптомы, однако в общем случае недостаточно для того, чтобы вызывать побочные эффекты. Конкретный уровень терапевтически эффективной дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, в том числе от подлежащего лечению расстройства и тяжести заболевания; конкретной используемой композиции; от возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента; от времени введения; пути введения; скорости выведения из организма конкретного используемого соединения; продолжительности лечения; лекарственных препаратов, используемых в комбинации или совместно с конкретным применяемым соединением, и подобных факторов, хорошо известных из области медицины. Например, обычно компетентные специалисты начинают с уровней доз соединения, которые ниже, чем те, которые требуются для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивают дозу, пока не будет достигнут желаемый эффект. Если необходимо, эффективная дневная доза при введении может быть разделена на несколько доз. Соответственно композиции разовых доз могут содержать такие количества или их дольные части, чтобы можно было составить суточную дозу. В случае любых противопоказаний лечащий врач может регулировать дозировку. Дозировка может меняться, и дозы можно вводить в один или несколько приемов ежедневно в течение одного или нескольких дней. В литературе можно найти руководство для соответствующих доз для данных классов фармацевтических продуктов. В соответствии с другими различными аспектами лекарственное средство можно вводить в профилактически эффективном количестве, т. е. в количестве, эффективном для предотвращения заболевания или состояния.
В данном описании ЕС50 обозначает концентрацию вещества (например, соединения или лекарственного средства), которая требуется для 50%-ного агонизма или активации биологического процесса или компонента процесса, в том числе белка, субъединицы, органеллы, рибонуклеопротеина и т. д. В соответствии с одним аспектом ЕС50 может относиться к концентрации вещества, необходимой для 50%ного агонизма или активации в условиях ίη νίνο, как определено далее в настоящем описании. В соответствии с еще одним аспектом ЕС50 относится к концентрации агониста или активатора, который вызывает частичную ответную реакцию между базовым значением и максимальной ответной реакцией.
В данном описании 1С50 обозначает концентрацию вещества (например, соединения или лекарственного средства) которая необходима для 50%-ного ингибирования биологического процесса или компонента процесса, в том числе белка, субъединицы, органеллы, рибонуклеопротеина и т. д. Например, 1С50 может относиться к концентрации вещества, необходимой для 50%-ного ингибирования в условиях ίη νίνο, или же ингибирование определяют в условиях ίη νίΐτο, как указано далее в данном описании. В качестве альтернативы 1С50 относится к половине от максимальной (50%) ингибирующей концентрации (1С) вещества. Ингибирование можно определить в клеточной линии, такой как ΑΝ3 СА, ВТ-20, ВТ-549, НСТ 116, НЕК218, МСР7, ΜΌΑ-ΜΒ-231, ΜΌΑ-ΜΒ-235, ΜΌΑ-ΜΒ-4358, ΜΌΑ-ΜΒ-468, РАЫС-1, РС-3, δΚ-Ν-МС, Τ-47Ό и и-87 ΜΟ. В соответствии с еще одним аспектом ингибирование определяют в клеточной линии, например НЕК-293 или НеЬа, трансфицированной мутантной деметилазой гистонов или деметилазой гистонов млекопитающих дикого типа, в частности Ε8Ό1 или Ε8Ό2.
Термин фармацевтически приемлемый описывает вещество, которое не является биологически или иным образом нежелательным, т. е. не вызывает неприемлемый уровень нежелательных биологических эффектов или не оказывает вредного воздействия.
Термин стабильный в данном описании относится к соединениям, которые не претерпевают существенных изменений в условиях, необходимых для их получения, обнаружения и в соответствии с некоторыми аспектами их извлечения, очистки и использования для одного или нескольких назначений, указанных в данном описании.
В данном описании термин производное соединение относится к соединению, имеющему структуру, полученную из структуры родительского соединения (например, раскрытого в данном описании соединения), строение которого в достаточной степени похоже на структуры, раскрытые в описании, и которое, как может ожидать специалист в данной области техники на основании указанного сходства, демонстрирует ту же самую или аналогичную активность и полезные свойства, что и заявляемые соеди- 6 026389 нения, или индуцирует в качестве предшественника ту же самую или аналогичную активность и полезные свойства, что и заявляемые соединения. Примеры производных соединений включают соли, сложные эфиры, амиды, соли сложных эфиров или амидов, а также Ν-оксиды родительского соединения.
В данном описании термин фармацевтически приемлемый носитель относится к стерильным водным или неводным растворам, дисперсиям, суспензиям или эмульсиям, а также к стерильным порошкам, которые восстанавливают в стерильных растворах или дисперсиях для инъекций непосредственно перед использованием. Примеры подходящих водных и неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т. п.), карбоксиметилцеллюлозу и подходящие ее смеси, растительные масла (такие как оливковое масло) и сложные органические эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Необходимую текучесть можно поддерживать, например, за счет используемых для формирования покрытий веществ, таких как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и с помощью поверхностноактивных веществ. Указанные композиции могут также содержать вспомогательные добавки, такие как консерванты, смачивающие агенты, эмульгаторы и диспергаторы. Предотвращения воздействия микроорганизмов можно добиться путем включения различных антибактериальных и противогрибковых средств, таких как парабен, хлорбутанол, фенол, сорбиновая кислота и т. п. Может также оказаться желательным включать изотонические средства, такие как сахара, хлорид натрия и т. п. Пролонгированное всасывание фармацевтических форм для инъекций можно осуществить за счет включения агентов, таких как моностеарат алюминия и желатин, которые замедляют абсорбцию. Формы препаратов замедленного всасывания для инъекций получают путем формирования микроинкапсулированных матриц лекарственного средства в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид, поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). В зависимости от соотношения лекарственного средства и полимера и вида конкретного используемого полимера можно контролировать скорость высвобождения лекарственного средства. Составы препаратов замедленного всасывания для инъекций получают также путем включения лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма. Составы для инъекций можно стерилизовать, например, путем фильтрования через удерживающий бактерии фильтр или путем включения стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или других стерильных средах для инъекций непосредственно перед использованием. Подходящие инертные носители могут включать сахара, такие как лактоза. Желательно, чтобы по меньшей мере 95 мас.% частиц активного ингредиента имели эффективный размер в диапазоне от 0,01 до 10 мкм.
Остаток химического соединения в данном описании и окончательной формуле изобретения относится к фрагменту, который является продуктом химических соединений в конкретной схеме реакций или в последующей композиции или химическом продукте, независимо от того, получен ли на самом деле указанный фрагмент из указанных химических соединений. Так, остаток этиленгликоля в полиэфире относится к одной или нескольким единицам -ОСН2СН2О- в полиэфире, независимо от того, был ли использован этиленгликоль для получения полиэфира. Аналогично, остаток себациновой кислоты в сложном полиэфире относится к одному или нескольким фрагментам -СО(СН2)8СО- в полиэфире, независимо от того, получен ли остаток при синтезе полиэфира в результате реакции себациновой кислоты или ее сложного эфира.
Предполагается, что в данном описании термин замещенный включает все допустимые заместители органических соединений. В соответствии с широким аспектом допустимые заместители включают ациклические и циклические, разветвленные и неразветвленные, карбоциклические и гетероциклические, а также ароматические и неароматические заместители органических соединений. Иллюстративные примеры заместителей включают, например, те, которые описаны ниже. Для соответствующих органических соединений допустимые заместители могут быть одиночными или многочисленными, одинаковыми или разными. В данном описании гетероатомы, такие как атом азота, могут иметь водородные заместители и/или любые допустимые заместители приведенных в данном описании органических соединений, которые удовлетворяют валентности гетероатомов. Предполагается, что данное описание никак не ограничивается допустимыми заместителями органических соединений. Кроме того, термины замещение или замещенный включают неявное условие, заключающееся в том, что подобное замещение находится в соответствии с разрешенной валентностью замещенного атома и заместителя и что замещение приводит к стабильному соединению, например, соединению, которое не претерпевает спонтанную трансформацию, такую как перегруппировка, циклизация, элиминирование и т. д. В соответствии с некоторыми аспектами, также предполагается, если специально не указано иное, что отдельные заместители необязательно могут быть дополнительно замещены (т. е. могут быть дополнительно замещены или не замещены).
При определении различных терминов обозначения А1, А2, А3 и А4 используются в данном описании в качестве общих символов для представления различных конкретных заместителей. Указанные символы могут быть любыми заместителями, которые не ограничены заместителями, раскрытыми в данном описании, и когда они определены как конкретные заместители в одном случае, они в другом случае могут быть определены как некоторые другие заместители.
- 7 026389
Термин алкил в данном описании представляет собой разветвленную или неразветвленную насыщенную углеводородную группу, имеющую от 1 до 24 атомов углерода, такую как метил, этил, нпропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, втор-пентил, неопентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, додецил, тетрадецил, гексадецил, эйкозил, тетракозил и т. п. Алкильная группа может быть циклической или ациклической. Алкильная группа может быть разветвленной или неразветвленной. Алкильная группа также может быть замещенной или незамещенной. Например, алкильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, амино, простой эфир, атом галогена, гидрокси, нитро, силил, сульфооксо или тиол, как указано в данном описании. Низшая алкильная группа обозначает алкильную группу, содержащую от одного до шести (например, от одного до четырех) атомов углерода.
Например, С1-С3 алкильная группа может быть выбрана из метила, этила, н-пропила, изопропила и циклопропила или из их подмножества. В соответствии с некоторыми аспектами С1-С3 алкильная группа необязательно может быть дополнительно замещена. В качестве дополнительного примера С1С4 алкильная группа может быть выбрана из метила, этила, н-пропила, изопропила, циклопропила, нбутила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила и циклобутила или из их подмножества. В соответствии с некоторыми аспектами С1-С4 алкильная группа необязательно может быть дополнительно замещена. В качестве дополнительного примера С1-С6 алкильная группа может быть выбрана из метила, этила, нпропила, изопропила, циклопропила, н-бутила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, циклобутила, нпентила, изопентила, втор-пентила, трет-пентила, неопентила, циклопентила, н-гексила, изогексила, 3метилпентана, 2,3-диметилбутана, неогексана и циклогексана или из их подмножества. В соответствии с некоторыми аспектами С1-С6 алкильная группа необязательно может быть дополнительно замещена. В качестве дополнительного примера С1-С8 алкильная группа может быть выбрана из метила, этила, нпропила, изопропила, циклопропила, н-бутила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, циклобутила, нпентила, изопентила, втор-пентила, трет-пентила, неопентила, циклопентила, н-гексила, изогексила, 3метилпентана, 2,3-диметилбутана, неогексана, циклогексана, гептана, циклогептана, октана и циклооктана или из их подмножества. В соответствии с некоторыми аспектами С1-С8 алкильная группа необязательно может быть дополнительно замещена. В качестве дополнительного примера С1-С12 алкильная группа может быть выбрана из метила, этила, н-пропила, изопропила, циклопропила, н-бутила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, циклобутила, н-пентила, изопентила, втор-пентила, трет-пентила, неопентила, циклопентила, н-гексила, изогексила, 3-метилпентана, 2,3-диметилбутана, неогексана, циклогексана, гептана, циклогептана, октана, циклооктана, нонана, циклононана, декана, циклодекана, ундекана, циклоундекана, додекана и циклододекана или из их подмножества. В соответствии с некоторыми аспектами С1-С12 алкильная группа необязательно может быть дополнительно замещена.
В данном описании алкил в общем случае используется для обозначения как незамещенных алкильных групп, так и замещенных алкильных групп; тем не менее, замещенные алкильные группы также специально обозначаются в данном описании путем идентификации конкретного(ных) заместителя(ей) в алкильной группе. Например, термин галогензамещенный алкил или галогеналкил, в частности, относится к алкильной группе, которая замещена одним или несколькими атомами галогена, например атомами фтора, хлора, брома или иода. Термин алкоксиалкил, в частности, относится к алкильной группе, которая замещена одной или несколькими алкоксигруппами, как указано ниже. Термин алкиламино, в частности, относится к алкильной группе, которая замещена одной или несколькими аминогруппами, как указано ниже, и т. п. Когда алкил используется в одном случае и конкретный термин, такой как алкилспирт, используется в другом случае, то не следует понимать, что термин алкил не относится также к специфическим терминам, таким как алкилспирт и т. п.
Указанная практика применяется и для других групп, приведенных в данном описании. Это означает, что хотя такой термин, как циклоалкил относится как к незамещенным, так и замещенным циклоалкильным фрагментам, замещенные фрагменты могут быть дополнительно конкретно определены в данном описании; например конкретный замещенный циклоалкил может быть определен, например, как алкилциклоалкил. Аналогично, замещенный алкокси может быть конкретно определен, например, как галогензамещенный алкокси, конкретный замещенный алкенил может быть, например, определен как алкенилспирт, и т. п. Вновь, практика использования общего термина, такого как циклоалкил, и конкретного термина, такого как алкилциклоалкил, не подразумевает, что общий термин не включает также и конкретный термин.
Термин циклоалкил в данном описании обозначает неароматический цикл на основе углерода, который включает по меньшей мере три атома углерода. Примеры циклоалкильных групп включают, однако этим не ограничиваясь, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, норборнил и т. п. Термин гетероциклоалкил обозначает один из типов циклоалкильной группы, определение которой приведено выше, и включен в значение термина циклоалкил, где по меньшей мере один из атомов углерода в кольце замещен гетероатомом, таким как, однако этим не ограничиваясь, атом азота, кислорода, серы или фосфора. Циклоалкильная группа и гетероциклоалкильная группа может быть замещена или не замещена. Циклоалкильная группа и гетероциклоалкильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, амино, про- 8 026389 стой эфир, атом галогена, гидрокси, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании.
Термин полиалкиленовая группа в данном описании обозначает группу, содержащую две или несколько групп СН2, связанных друг с другом. Полиалкиленовая группа может быть представлена формулой -(СН2)а -, где а обозначает целое число от 2 до 500.
Термины алкокси и алкоксил в данном описании обозначают алкильную или циклоалкильную группу, присоединенную через эфирную связь; т. е. алкокси группа может быть определена как -ОА1, где А1 обозначает алкил или циклоалкил, как определено выше. Алкокси включает также полимеры алкоксигрупп, определение которых приведено выше; т. е. алкокси может быть полиэфиром, таким как -ОА -ОА или -ОА -(ОА )а-ОА , где а обозначает целое число от 1 до 200, и А , А и А представляют собой алкильные и/или циклоалкильные группы.
Термин алкенил в данном описании обозначает углеводородную группу, содержащую от 2 до 24 атомов углерода, в структурной формуле которой содержится по меньшей мере одна двойная углеродуглеродная связь. Подразумевается, что асимметричные структуры, такие как (А1А2) С=С (А3А4) включают как Е-изомеры, так и Ζ-изомеры. Указанная особенность может подразумеваться в данном описании в структурных формулах, где имеется асимметричный алкен, или она может быть в явном виде обозначена символом связи С=С. Алкенильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, алкенил, циклоалкенил, алкинил, циклоалкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, атом галогена, гидрокси, кетон, азид, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании.
Термин циклоалкенил в данном описании обозначает неароматический цикл на основе углерода, который состоит по меньшей мере из трех атомов углерода и содержит по меньшей мере одну двойную углерод-углеродную связь, т. е. С=С. Примеры циклоалкенильных групп включают, однако этим не ограничиваясь, циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклопентадиенил, циклогексенил, циклогексадиенил, норборненил и т. п. Термин гетероциклоалкенил представляет собой один из типов циклоалкенильной группы, определение которой приведено выше, и он включен в значение термина циклоалкенил, где по меньшей мере один из атомов углерода цикла замещен гетероатомом, таким как, однако этим не ограничиваясь, атом азота, кислорода, серы или фосфора. Циклоалкенильная группа и гетероциклоалкенильная группа может быть замещенной или незамещенной. Циклоалкенильная группа и гетероциклоалкенильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, алкенил, циклоалкенил, алкинил, циклоалкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, атом галогена, гидрокси, кетон, азид, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании.
Термин алкинил в данном описании обозначает углеводородную группу, содержащую от 2 до 24 атомов углерода, в структурной формуле которой содержится по меньшей мере одна тройная углеродуглеродная связь. Алкинильная группа может быть замещена или не замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, алкенил, циклоалкенил, алкинил, циклоалкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, атом галогена, гидрокси, кетон, азид, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании.
Термин циклоалкинил в данном описании обозначает неароматический цикл на основе углерода, который состоит по меньшей мере из семи атомов углерода и содержит по меньшей мере одну тройную углерод-углеродную связь. Примеры циклоалкинильных групп включают, однако этим не ограничиваясь, циклогептинил, циклооктинил, циклононинил и т. п. Термин гетероциклоалкинил представляет собой один из типов циклоалкинильной группы, определение которой приведено выше, и он включен в значение термина циклоалкинил, где по меньшей мере один из атомов углерода цикла замещен гетероатомом, таким как, однако этим не ограничиваясь, атом азота, кислорода, серы или фосфора. Циклоалкинильная группа и гетероциклоалкинильная группа могут быть замещенными или незамещенными. Циклоалкинильная группа и гетероциклоалкинильная группа могут быть замещены одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, алкенил, циклоалкенил, алкинил, циклоалкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, атом галогена, гидрокси, кетон, азид, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании.
Термин арил в данном описании обозначает группу, которая содержит любую ароматическую группу на основе углерода, включая, однако этим не ограничиваясь, бензол, нафталин, фенил, бифенил, феноксибензол и т. п. Термин арил также включает гетероарил, который определен как группа, содержащая ароматическую группу, имеющую по меньшей мере один гетероатом, который включен в цикл ароматической группы. Примеры гетероатомов включают, однако этим не ограничиваясь, атом азота, кислорода, серы и фосфора. Аналогично, термин не гетероарил, который также включен в термин арил, означает группу, которая включает ароматическую группу, не содержащую гетероатомов.
- 9 026389
Арильная группа может быть замещенной или незамещенной. Арильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включая, однако этим не ограничиваясь, алкил, циклоалкил, алкокси, алкенил, циклоалкенил, алкинил, циклоалкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, атом галогена, гидрокси, кетон, азид, нитро, силил, сульфооксо, нитрил, сульфонамид или тиол, как указано в данном описании. Термин биарил представляет собой специфический тип арильной группы и входит в определение арил. Биарил относится к двум арильным группам, которые связаны друг с другом посредством конденсированной циклической структуры, как в нафталине, или присоединены посредством одной или нескольких углерод-углеродных связей, как в бифениле.
Термин альдегид в данном описании представлен формулой -С(О)Н. В данном описании С(О) представляет собой краткое обозначение карбонильной группы, т. е. С=О.
Термины амин или амино в данном описании обозначены формулой -ΝΑ'Λ2. где А1 и А2 могут независимо представлять собой атом водорода или алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, определение которой приведено в данном описании.
Термин алкиламино в данном описании представлен формулой -NΗ(-алкил), где значение алкила указано в данном описании. Типичные примеры включают, однако этим не ограничиваясь, метиламино группу, этиламино группу, пропиламино группу, изопропиламино группу, бутиламино группу, изобутиламино группу, (втор-бутил)амино группу, (трет-бутил)амино группу, пентиламино группу, изопентиламино группу, (трет-пентил)амино группу, гексиламино группу и т. п.
Термин диалкиламино в данном описании представлен формулой -^-алкил)2, где алкил определен в данном описании. Типичные примеры включают, однако этим не ограничиваясь, диметиламино группу, диэтиламино группу, дипропиламино группу, диизопропиламино группу, дибутиламино группу, диизобутиламино группу, ди(втор-бутил)амино группу, ди(трет-бутил)амино группу, дипентиламино группу, диизопентиламино группу, ди(трет-пентил) амино группу, дигексиламино группу, Ν-3γκτ-Νметиламино группу, Шметил-Шпропиламино группу, Шэтил-Шпропиламино группу и т. п.
Термин карбоновая кислота в данном описании представлен формулой -С(О)ОН.
Термин сложный эфир в данном описании обозначен формулой -ОС(О)А1 или -С(О)ОА1, где А1 может представлять собой алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, как определено в данном описании. Термин полиэфир в данном описании представлен формулой - (А1О(О)С-А2-С(О)О)а- или -(А1О(О)СА2-ОС (О))а-, где А1 и А2 могут независимо друг от друга обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, указанную в данном описании, и а обозначает целое число от 1 до 500. Полиэфир является термином, используемым для описания группы, которую получают путем реакции между соединением, имеющим по меньшей мере две карбоксильные группы, и соединением, имеющим по меньшей мере две гидроксильные группы.
Термин простой эфир в данном описании представлен формулой А1ОА2, где А1 и А2 могут независимо обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, приведенную в данном описании. Термин полиэфир в данном описании представлен формулой - (А1О-А2О)а-, где А1 и А2 могут независимо обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, приведенную в данном описании, и а является целым числом от 1 до 500. Примеры полиэфирных групп включают полиэтиленоксид, полипропиленоксид и полибутиленоксид.
Термины атом галогена, галогенид и галоген в данном описании относятся к атомам галогенов, таким как атом фтора, хлора, брома и иода. Предполагается также, что в соответствии с различными аспектами атом галогена может быть выбран из атома фтора, хлора, брома и иода. Например, атом галогена может быть выбран из атома фтора, хлора и брома. В качестве дополнительного примера атом галогена может быть выбран из атома фтора и хлора. В качестве еще одного примера атом галогена может быть выбран из атома хлора и брома. В качестве еще одного примера атом галогена может быть выбран из атома брома и иода. В качестве еще одного примера атом галогена может быть выбран из атома хлора, брома и иода. В соответствии с одним аспектом атом галогена может быть атомом фтора. В соответствии с еще одним аспектом атом галогена может быть атомом хлора. В соответствии с еще одним аспектом атомом галогена является атом брома. В соответствии с еще одним аспектом атомом галогена является атом иода.
Предполагается также, что в соответствии с некоторыми аспектами вместо атомов галогенов могут использоваться псевдогалогены (например, трифлат, мезилат, тозилат, брозилат и т. д.). Например, в соответствии с некоторыми аспектами атом галогена может быть заменен псевдогалогеном. В качестве еще одного примера псевдогалоген может быть выбран из трифлата, мезилата, тозилата и брозилата. В соответствии с одним аспектом псевдогалогеном является трифлат. В соответствии с другим аспектом псевдогалогеном является мезилат. В соответствии с другим аспектом псевдогалогеном является тозилат. В
- 10 026389 соответствии с другим аспектом псевдогалогеном является брозилат.
Термин гетероцикл в данном описании относится к моноциклическим или полициклическим ароматическим или неароматическим кольцевым системам, в которых по меньшей мере один из членов цикла отличен от атома углерода. Гетероцикл включает азетидин, диоксан, фуран, имидазол, изотиазол, изоксазол, морфолин, оксазол, оксадиазол, в том числе 1,2,3-оксадиазол, 1,2,5-оксадиазол и 1,3,4оксадиазол, пиперазин, пиперидин, пиразин, пиразол, пиридазин, пиридин, пиримидин, пиррол, пирролидин, тетрагидрофуран, тетрагидропиран, тетразин, в том числе 1,2,4,5-тетразин, тетразол, в том числе 1,2,3,4-тетразол и 1,2,4,5-тетразол, тиадиазол, в том числе 1,2,3-тиадиазол, 1,2,5-тиадиазол и 1,3,4тиадиазол, тиазол, тиофен, триазин, в том числе 1,3,5-триазин и 1,2,4-триазин, триазол, в том числе 1,2,3триазол, 1,3,4-триазол и т. п.
Термин гидроксил в данном описании представлен формулой -ОН.
Термин кетон в данном описании представлен формулой А1С(О)А2, где А1 и А2 могут независимо друг от друга обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании.
Термин азид в данном описании представлен формулой -Ν3.
Термин нитро в данном описании представлен формулой -ΝΟ2.
Термин нитрил в данном описании представлен формулой -ΟΝ.
3 12 3
Термин силил в данном описании представлен формулой -8ίΑ А А , где А , А и А независимо могут обозначать атом водорода или алкильную, циклоалкильную, алкокси, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании.
Термин сульфо-оксо в данном описании представлен формулами -δ(Ο)Α'. -8(Ο)2Λ', -Ο8(Ο)2Α' или -Ο8(Ο)2ΟΑ\ где А1 может обозначать атом водорода или алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании. В данном описании 8(О) представляет собой краткое обозначение для 8=0. Термин сульфонил в данном описании обозначает сульфооксо группу, представленную формулой -δ(Ο)2Α\ где А1 может обозначать атом водорода или алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании. Термин сульфон в данном описании представлен формулой ΑΙ8(Ο)2Α2, где А1 и А2 могут независимо друг от друга обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании. Термин сульфоксид в данном описании представлен формулой ΑΙ8(Ο)Α2, где А1 и А2 могут независимо друг от друга обозначать алкильную, циклоалкильную, алкенильную, циклоалкенильную, алкинильную, циклоалкинильную, арильную или гетероарильную группу, которая определена в данном описании.
Термин тиол в данном описании представлен формулой -8Н.
К1, К2, К3, К11, где η обозначает целое число, как указано в данном описании, могут независимо друг от друга включать одну или несколько перечисленных выше групп. Например, если К1 представляет собой неразветвленную алкильную группу, один из атомов водорода алкильной группы необязательно может быть замещен гидроксильной группой, алкоксигруппой, алкильной группой, атомом галогена и т.п. В зависимости от выбранных групп, первая группа может входить в состав второй группы или, в качестве альтернативы, первая группа может быть навесной группой (т. е. присоединенной) ко второй группе. Например, в выражении алкильная группа, включающая аминогруппу аминогруппа может быть включена в основную цепь алкильной группы. В качестве альтернативы аминогруппа может быть присоединена к основной цепи алкильной группы. Тип выбранной группы (выбранных групп) будет определять, будет ли первая группа вставлена во вторую группу или прикреплена ко второй группе.
Как указано в данном описании, соединения по настоящему изобретению могут содержать необязательно замещенные фрагменты. В общем случае термин замещенный, которому может предшествовать или может не предшествовать термин необязательно, означает, что один или несколько атомов водорода в указанном фрагменте заменены подходящим заместителем. Если не указано иное, необязательно замещенная группа может иметь подходящий заместитель в каждой способной к замещению позиции группы, и когда более чем одна позиция в любой данной структуре может быть замещена более чем одним заместителем, выбранным из указанной группы, то заместитель в каждой позиции может быть одинаковым или различным. Комбинации заместителей, которые предусмотрены в настоящем изобретении, предпочтительно являются такими, которые приводят к образованию стабильных или химически возможных соединений. В соответствии с некоторыми аспектами также предполагается, если специально не указано иное, что отдельные заместители необязательно могут быть дополнительно замещены (т. е. дополнительно замещены или не замещены).
Подходящие одновалентные заместители для способного к замещению атома углерода в необязательно замещенной группе независимо представляют собой атом галогена; -(СН2)0-4К°; (ΟΗ^ΟΗ0; ^СНЭсмК0, -О-(СН2) „СДОКО; -(СН2)0-4СН (ΟΡΟ) 2; -(СН2)0-48К0; -(СН2)0-4РЬ, который может быть замещен с помощью К°; - (СН2)0-4О(СН2)0-1РЬ, который может быть замещен с помощью К°; -СН=СНРЬ,
- 11 026389 который может быть замещен с помощью К°; -(СН2)0-4О(СН2)0-1-пиридил, который может быть замещен с помощью К°; -ΝΟ2; -СЫ; -N3; -(С1М У(К::К -(СН;) ;\(Н°)С(0)Н::; -Ы(К°)С(8)К°; -(СШ)О4Ν(Κ°)^Ο)ΝΚ°2; -Ν (К°)С (8)ΝΚ°2; -(СН2)0-4НК°)С(О)ОК°; -Ν(Κ°)Ν(Κ°)^Ο)Κ°; -Ν(Κ°)Ν(Κ°)^Ο)ΝΚ°2; -Ν(Κ°)Ν(Κ°)^Ο)ΟΚ°; (СН2)0-4С(О)К°; -С(8)К°; -(СН2)0-4С(О)ОК°; -(СН2)0-4С(О) ЗК°; (СН2)0-4С(О)О8Ж°3; -(СН2)0-4ОС(О)К°; -ОС(О)(СН2)0-4ЗК-; -8С(8)8К°; -(СН2)0-48С(О)К°; -(СН2)0-4С(ОЖ°2; -С(8)Ж°2; -С(8)8К°; 8С(8)8К°, -(СН^ОСО^Ь; -С(О)НОК°)К°; -С(О)С(О)К°; С(О)СН2С(О)К°; -С^ОК°)К°; -(СН2)0-488К°; -(СН2)0-4З(О)2К°; (СН2)0-48(О)2ОК°; -(СН2)0-4О8(О)2К°; -8(Ο)2ΝΚ°2; -(СН2)0-48(О)К°; -Ν(Κ°)8(Ο)2ΝΚ°2; -Ν(Κ°)8(Ο)2Κ°; -Ν(ΟΚ°)Κ°; ^(ΝΉ)ΝΚ°2; -Р(О)2К°; -Р(О)К°2; -ОР(О)К°2; -ОР(О)(ОК°) 2; 8Ж°3; -(С1-4 линейный или разветвленный алкилен)О-НК°)2 или -(С1-4 линейный или разветвленный алкилен)С(О)О-НК°)2, где каждый К° может быть замещен, как определено ниже, и независимо представляет собой атом водорода, С1-6алифатическую группу, -СН2РЬ, -О(СН2)0-1РЬ, -СН2-(5-6-членное гетероарильное кольцо) или 5-6-членный насыщенный, частично ненасыщенный или арильный цикл, содержащий 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы, или несмотря на приведенные выше определения два независимых заместителя К° вместе с их промежуточными атомами образуют 3-12-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное моно- или бициклическое кольцо, содержащее 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы, которые могут быть замещены, как определено ниже.
Подходящие одновалентные заместители в К° (или в цикле, образованном двумя независимыми К° вместе с их промежуточными атомами) независимо представляют собой атом галогена, -(СН2)0-2К·, (галоген К·) , -(СН2)0-2ОН, -(СН2)0-2ОК·, -(СН2)0-2СН (ОК»)2; -О(галоген Κ·) , -СН -Ν3, -(СН2)0-2С(О) К·, (СН2)0-2С(О)ОН, -(СН2)0-2С(О)ОК·, -(СН2)0-2§К·, -(СН2)0-2§Н, -(СН2)0^2, -(СН2)0^К·, -(СН2)0^^2, ΝΟ2, -8ίΚ·3, -Ο8ίΚ·3, -С(О)8К·, -(С1-4 линейный или разветвленный алкилен)С(О)ОК· или -88К·, где каждый К· не замещен или, когда предшествует приставка галоген, замещен лишь одним или несколькими атомами галогена и независимо выбран из С1-4 алифатической группы, -СН2РЬ, -О(СН2)0-1РЬ, или 5-6членного насыщенного, частично ненасыщенного или арильного цикла, содержащего 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы. Подходящие двухвалентные заместители при насыщенном атоме углерода в К° включают =О и =8.
Подходящие двухвалентные заместители при насыщенном атоме углерода необязательно замещенной группы включают следующие: =О, =8, =ΝΝΚ*2, =NNНС(Ο)К*, =NNНС(Ο)ΟК*, =ΝΝΉ8(Ο)2Κ*, =ΝΚ*, =ΝΟΚ*, -О(С(К*2))2-3О- или -8(С(К*2))2-38-, где в каждом независимом случае К* выбран из атома водорода, С1-6 алифатической группы, которая может быть замещена, как определено ниже, или незамещенного 5-6-членного насыщенного, частично ненасыщенного или арильного цикла, содержащего 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы. Подходящие двухвалентные заместители, которые связаны со способными к замещению вицинальными атомами углерода необязательно замещенной группы, включают -О(СК*2)2-3О-, где в каждом независимом случае К* выбирают из атома водорода, С1-6 алифатической группы, которая может быть замещена, как определено ниже, или незамещенного 5-6-членного насыщенного, частично ненасыщенного или арильного цикла, содержащего 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы.
Подходящие заместители при алифатической группе К* включают атом галогена, -К·, -(галоген К·), -ОН, -ОК·, О(галоген К·), -СН -С(О)ОН, -С(О)ОК·, -ΝΗ, АНК·, -ΝΒ·2 или -ΝΟ2, где каждый К· не замещен или, когда ему предшествует приставка галоген, замещен лишь одним или несколькими атомами галогена и независимо представляет собой С1-4 алифатическую группу, -СН2РЬ, -О(СН2)0-1РЬ или 5-6членный насыщенный, частично ненасыщенный или арильный цикл, содержащий 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы.
Подходящие заместители при способном к замещению атоме азота в необязательно замещенной группе включают -К+, -ΝΗ -. -С(О)К+, -С(О)ОК+, -С(О)С(О)К+, -С(О)СНС(О) К+, -8(О)2К+, δ^Ν^, -ЦЗ^К^, -^ΝΗΝΗ^ или -НК+)З(О)2К+; где каждый К+ независимо обозначает атом водорода, С1-6 алифатическую группу, которая может быть замещена, как определено ниже, незамещенную группу -ОРЬ или незамещенный 5-6-членный насыщенный, частично ненасыщенный или арильный цикл, содержащий 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы, или несмотря на приведенные выше определения два независимых К+ вместе с их промежуточными атомами образуют незамещенное 3-12-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное моно-или бициклическое кольцо, содержащее 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы.
Подходящими заместителями при алифатической группе К+ независимо являются атом галогена, -К·, -(галоген К·) , -ОН, -ОК·, -О(галоген К·) , -€Ν, -С(О)ОН, -С(О)ОК·, -Ν42, ^НК·, -ΝΡ·2 или -ΝΟ2, где каждый К· не замещен или, когда ему предшествует приставка галоген, замещен лишь одним или несколькими атомами галогена и независимо представляет собой С1-4 алифатическую группу, группу -СН2РЬ, -О(СН2)0-1РЬ или 5-6-членный насыщенный, частично ненасыщенный или арильный цикл, содержащий 0-4 гетероатома, независимо выбранных из атома азота, кислорода или серы.
Термин уходящая группа относится к обладающему электроноакцепторной способностью атому (или группе атомов), который может быть замещен в виде стабильных химических образований, забирая с собой связывающие электроны. Примеры подходящих уходящих групп включают атомы галогенов, в
- 12 026389 том числе атом хлора, брома и иода, и псевдогалогениды (эфиры сульфокислот), включая трифлат, мезилат, тозилат и брозилат. Предполагается также, что гидроксильный остаток может быть преобразован в уходящую группу посредством реакции Мицунобу.
Термины способная к гидролизу группа и способный к гидролизу фрагмент относятся к функциональной группе, которая способна претерпевать гидролиз, например, в щелочных или кислых условиях. Примеры способных к гидролизу остатков включают, без ограничений, галогенангидриды, активированные карбоновые кислоты и различные защитные группы, известные в данной области техники (см., например, РгсйесИуе Огоирк ίη Огдашс Зуп!йе818, Т.'ЭД'. Огеепе, Р.О.М. ХУиЬ. ХУПеу-йНегкаепсе, 1999).
Термин защитная группа обозначает группу, которая защищает одну или несколько функциональных групп соединения с образованием защищенного производного указанного соединения. Функциональные группы, которые могут быть защищены, включают, например, аминогруппы, гидроксильные группы и т. п. Защитные группы хорошо известны специалистам в данной области и описаны, например, в Т.^. Огеепе и О.М. ХУШк, РгсйесИуе Огоирк ίη Огдашс Зуп!йек1к, Т1йг4 Εάίίίοη, \УПеу, Ыете ΥοιΈ 1999 и приведенных там ссылках.
Термин аминозащитная группа обозначает защитную группу, пригодную для предотвращения протекания нежелательных реакций по аминогруппе, и включает, однако этим не ограничиваясь, третбутоксикарбонил (ВОС), тритил (Тг), бензилоксикарбонил (СЬх), 9-флуоренилметоксикарбонил (РМОС), формил, триметилсилил (ТМ8), трет-бутилдиметилсилил (ТВЗ), бензил, п-метоксибензил, п-фторбензил, п-хлорбензил, п-бромбензил, дифенилметил, нафтилметил, тетрагидропиран (ТНР) и т. п.
Термин гидроксилзащитная группа обозначает защитную группу, пригодную для предотвращения нежелательных реакций по гидроксильной группе. Типичные гидроксилзащитные группы включают, однако этим не ограничиваясь, силильные группы, в том числе три(1-6С)-алкилсилильные группы, такие как триметилсилил (ТМ8), триэтилсилил (ТЕЗ), трет-бутилдиметилсилил (ТВЗ) и т. п.; сложные эфиры (ацильные группы), включая (1-6С)-алканоильные группы, такие как формил, ацетил и т. п.; арилметильные группы, такие как бензил (Вп), п-метоксибензил (РМВ), 9-флуоренилметил (Рт), дифенилметил (бензгидрил, ОРМ), тетрагидропиран (ТНР), метоксиметил (МОМ), метилтиометил (МТМ), бензилоксиметил (ВОМ), и т. п.
Термин органический остаток определяет углеродсодержащий остаток, т. е. остаток, который содержит по меньшей мере один атом углерода, и включает, однако этим не ограничиваясь, углеродсодержащие группы, остатки или радикалы, определение которых приведено выше. Органические остатки могут содержать различные гетероатомы или могут быть связаны с другой молекулой через гетероатом, в том числе атом кислорода, азота, серы, фосфора и т. п. Примеры органических остатков включают, однако этим не ограничиваясь, алкил или замещенные алкилы, алкокси или замещенный алкокси, моноили дизамещенный амино, амидные группы и т. д. Органические остатки предпочтительно могут содержать от 1 до 18 атомов углерода, от 1 до 15 атомов углерода, от 1 до 12 атомов углерода, от 1 до 8 атомов углерода, от 1 до 6 атомов углерода или от 1 до 4 атомов углерода. В соответствии с еще одним аспектом органический остаток может содержать от 2 до 18 атомов углерода, от 2 до 15 атомов углерода, от 2 до 12 атомов углерода, от 2 до 8 атомов углерода, от 2 до 6 атомов углерода или от 2 до 4 атомов углерода.
Очень близким синонимом термина остаток является термин радикал, который в данном описании и конечной формуле изобретения относится к фрагменту, группе или подструктуре молекулы, приведенной в данном описании, независимо от того, каким образом молекула получена. Например, 2,4тиазолидиндионовый радикал в каждом конкретном соединении имеет структуру
независимо от того, используется ли тиазолидиндион при получении соединения. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения радикал (например, алкил) может быть дополнительно модифицирован (т. е. может представлять собой замещенный алкил) путем соединения с одним или несколькими радикалами-заместителями. Количество атомов в данном радикале не является критичным для настоящего изобретения, если иное не указано где-либо в данном описании.
Органические радикалы, в том виде как данный термин определен и используется в настоящем описании, содержат один или несколько атомов углерода. Органический радикал может содержать, например, 1-26 атомов углерода, 1-18 атомов углерода, 1-12 атомов углерода, 1-8 атомов углерода, 1-6 атомов углерода или 1-4 атома углерода. В соответствии с еще одним аспектом органический радикал может содержать 2-26 атомов углерода, 2-18 атомов углерода, 2-12 атомов углерода, 2-8 атомов углерода, 26 атомов углерода или 2-4 атома углерода. В органических радикалах часто атом водорода связан, по меньшей мере, с некоторыми из атомов углерода органического радикала. Одним из примеров органического радикала, который не содержит неорганические атомы, является 5,6,7,8-тетрагидро-2-нафтил. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения органический радикал может содержать 110 неорганических гетероатомов, связанных с радикалом или содержащихся в радикале, в том числе атомы галогенов, кислорода, серы, азота, фосфора и т. п. Примеры органических радикалов включают,
- 13 026389 однако этим не ограничиваясь, алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, монозамещенный амино, дизамещенный амино, ацилокси, циано, карбокси, карбоалкокси, алкилкарбоксамид, замещенный алкилкарбоксамид, диалкилкарбоксамид, замещенный диалкилкарбоксамид, алкилсульфонил, алкилсульфинил, тиоалкил, тиогалогеноалкил, алкокси, замещенный алкокси, галогеноалкил, галогеноалкокси, арил, замещенный арил, гетероарил, гетероциклические или замещенные гетероциклические радикалы, в которых термины определены в других местах данного описания. Некоторые неограничивающие настоящее изобретение примеры органических радикалов, которые содержат гетероатомы, включают алкокси радикалы, трифторметокси радикалы, ацетокси радикалы, диметиламино радикалы и т. п.
Неорганические радикалы, в том виде как данный термин определен и используется в настоящем описании, не содержат атомов углерода и, таким образом, включают только атомы, отличные от атома углерода. Неорганические радикалы содержат комбинации связанных атомов, выбранных из атома водород, азота, кислорода, кремния, фосфора, серы, селена и атомов галогенов, таких как атом фтора, хлора, брома и иода, которые могут присутствовать по отдельности или могут быть соединены друг с другом в химически устойчивых сочетаниях. Неорганические радикалы содержат 10 или меньше или предпочтительно от одного до шести или от одного до четырех перечисленных выше неорганических атомов, которые соединены друг с другом. Примеры неорганических радикалов включают, однако этим не ограничиваясь, амино, гидрокси, атомы галогенов, нитро, тиол, сульфат, фосфат и т. п. хорошо известные неорганические радикалы. Неорганические радикалы не включают связанные с ними металлические элементы Периодической таблицы (например, щелочные металлы, щелочно-земельные металлы, переходные металлы, металлические лантаниды или актиниды), хотя подобные ионы металлов могут иногда служить в качестве фармацевтически приемлемого катиона для анионных неорганических радикалов, таких как сульфат, фосфат или подобные анионные неорганические радикалы. Неорганические остатки не содержат металлоидные элементы, такие как бор, алюминий, галлий, германий, мышьяк, олово, свинец или теллур, или элементы благородных газов, если иное специально не указано в настоящем описании.
Приведенные в данном описании соединения могут содержать одну или несколько двойных связей и, следовательно, потенциально привести к появлению цис/транс (Е/Ζ) изомеров, а также других конформационных изомеров. Если не указано иное, настоящее изобретение включает все подобные возможные изомеры, а также смеси подобных изомеров.
Если не указано иное, формулы с химическими связями, которые показаны лишь сплошными линиями, а не с помощью клиновидных или пунктирных линий, охватывают все возможные изомеры, например, каждый энантиомер и диастереомер, и смеси изомеров, например, такие как рацемическая или скалемическая смесь. Приведенные в данном описании соединения могут содержать один или несколько асимметрических центров и, таким образом, потенциально привести к диастереомерам и оптическим изомерам. Если не указано иное, настоящее изобретение включает все подобные возможные диастереомеры, а также их рацемические смеси, их практически чистые выделенные энантиомеры, все возможные геометрические изомеры и их фармацевтически приемлемые соли. Смеси стереоизомеров, а также выделенные конкретные стереоизомеры также включены в настоящее изобретение. При осуществлении синтетических методик, которые используют для получения подобных соединений, или при использовании процессов рацемизации или эпимеризации, известных специалистам в данной области техники, продукты подобных методик могут быть смесью стереоизомеров.
Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, обладающих способностью вращать плоскость поляризации плоскополяризованного света. При описании оптически активного соединения приставки Ό и Ь или К и δ используются для обозначения абсолютной конфигурации молекулы по отношению к ее хиральному (ым) центру (ам). Приставки ά и 1 или (+) и (-) используют для обозначения знака вращения плоскополяризованного света соединением, при этом (-) или 1 означает, что соединение является левовращающим. Соединение с приставкой (+) или ά является правовращающим. Для данной химической структуры указанные соединения, которые называют стереоизомерами, идентичны, за исключением того, что они являются неналагающимися зеркальными отображениями друг друга. Конкретный стереоизомер может быть также назван энантиомером, а смесь подобных изомеров часто называют энантиомерной смесью. 50:50 смесь энантиомеров называют рацемической смесью. Многие из приведенных в данном описании соединений могут иметь один или несколько хиральных центров и поэтому могут существовать в различных энантиомерных формах. Если необходимо, хиральный атом углерода может быть обозначен звездочкой (*) . Когда связи к хиральному атому углерода в раскрытых формулах изображены в виде прямых линий, то следует понимать, что указанная формула охватывает как (К)-, так и ^-конфигурации хирального атома углерода и, следовательно, оба энантиомера и их смеси. В данной области техники принято, когда необходимо указать абсолютную конфигурацию хирального атома углерода, одну из связей к хиральному атому углерода изображать в виде клина (связи к атомам над плоскостью), а другую можно изобразить как серию или клин коротких параллельных линий (связи к атомам под плоскостью). Для обозначения (К)- или ^-конфигурации хирального атома углерода можно использовать систему Кана-Ингольда-Прелога.
Соединения, приведенные в данном описании, содержат как атомы с их естественной изотопной
- 14 026389 распространенностью, так и с искусственной изотопной распространенностью. Раскрытые соединения могут содержать изотопные метки или представлять собой изотопнозамещенные соединения, идентичные тем, которые описаны, за исключением того, что один или несколько атомов замещены атомом, атомная масса или массовое число которого отличны от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут содержаться в соединениях по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как Н, Н, С, С, Ν, О, О, 8, Р и С1 соответственно. Соединения включают также пролекарства, и в объем настоящего изобретения входят фармацевтически приемлемые соли указанных соединений или указанных пролекарств, которые содержат вышеуказанные изотопы и/или другие изотопы других атомов. Некоторые меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, например, те, которые включают радиоактивные изотопы, такие как 3Н и 14С, пригодны для использования в анализах распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Тритий, т. е. 3Н, и углерод-14, т. е. 14С, являются наиболее предпочтительными изотопами благодаря легкости их получения и обнаружения. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т. е. 2Н, может предоставить некоторые терапевтические преимущества, которые являются следствием их более высокой метаболической стабильности, например замещенные изотопами соединения обладают увеличенным периодом полувыведения в условиях ίη νίνο или для них требуется меньшая необходимая дозировка лекарственного средства, и, следовательно, подобное замещение может оказаться предпочтительным при определенных обстоятельствах. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению и их пролекарства обычно могут быть получены путем осуществления приведенных ниже процедур и путем использования легкодоступного меченного изотопом реагента вместо реагента, не содержащего изотопную метку.
Описанные в настоящем изобретении соединения могут присутствовать в виде сольвата. В некоторых случаях растворитель, используемый для получения сольвата, представляет собой водный раствор, и в таком случае сольват часто называют гидратом. Соединения могут присутствовать в виде гидрата, который может быть получен, например, путем кристаллизации из растворителя или из водного раствора. В связи с этим один, два, три или любое произвольное количество молекул растворителя или воды может соединяться с соединениями по настоящему изобретению с образованием сольватов и гидратов. Если не указано иное, настоящее изобретение включает все подобные возможные сольваты.
Термин сокристалл обозначает физическое объединение двух или нескольких молекул, стабильность которого обусловлена их нековалентным взаимодействием. Один или несколько компонентов подобного молекулярного комплекса обеспечивают стабильную структуру в кристаллической решетке. В некоторых случаях молекула-гость включена в кристаллическую решетку в виде ангидридов или сольватов, см., например, Сгуйа1 Епдшеегшд οί 1Ье СотромНоп οί РЬагтасеи11са1 РЬа8е8. Όο РЬагтасеи11са1 Сосгу81а15 Рергехет а Ые\у Ра1Ь ίο Iтр^ονеά Мебюшех? Α1та^а88οη О., е1. а1., ТЬе Κοуа1 8οс^еίу οί СЬет181гу, 1889-1896, 2004. Примеры сокристаллов включают п-толуолсульфоновую кислоту и бензолсульфоновую кислоту.
Кроме того, следует понимать, что некоторые соединения, приведенные в данном описании, могут присутствовать в виде равновесия таутомеров. Например, кетоны, содержащие α-водород, могут существовать в виде равновесия кето-формы и енольной формы.
Аналогично, амиды с атомом водорода при атоме азота могут существовать в виде равновесия амидной формы и формы имидной кислоты. Если не указано иное, настоящее изобретение включает все подобные возможные таутомеры.
Известно, что химические вещества образуют твердые вещества, которые присутствуют в состояниях с различным порядком кристаллической структуры и которые называют полиморфными формами или модификациями. Различные модификации полиморфного вещества могут сильно различаться по своим физическим свойствам. Соединения по настоящему изобретению могут присутствовать в различных полиморфных формах, причем конкретные модификации могут быть метастабильными. Если не указано иное, настоящее изобретение включает все подобные возможные полиморфные формы.
В соответствии с некоторыми аспектами структура соединения может быть представлена формулой
которая, как следует понимать, эквивалентна формуле
- 15 026389
где η обычно является целым числом. Таким образом, следует понимать, что Кп представляет собой пять независимых заместителей, Кп(а), Кп(Ь), Кп(с), Кп(б), Кп(е) . Под независимыми заместителями понимают, что каждый заместитель К может быть определен независимо. Например, если в одном случае Кп(а) обозначает атом галогена, то в таком случае Кп(Ь) необязательно является атомом галогена.
Некоторые вещества, соединения, композиции и компоненты, раскрытые в данном описании, могут быть получены коммерческим путем или могут быть легко синтезированы с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Например, исходные вещества и реагенты, которые используют при получении раскрытых соединений и композиций, либо доступны от коммерческих поставщиков, таких как 31дта-А1бгюЬ СЬетюа1 Со, (Мб\уаикее Асгов Огдашсв (Моте Ркипв
N.1), ИвЬег ЗшепбПс (РЛвЬигдЬ Р.А.) или 31дта (δί. Ьошв М.О.), или их получают по способам, известным специалистам в данной области техники, в соответствии с методиками, изложенными в таких ссылках, как Иевег апб Иевег' 5 КеадеШв £ог Огдашс 3упШев1в, Уо1итев 1-17 (боЬп \Убеу апб Зопв, 1991); Кобб'в СНеш151гу о£ СагЬоп Сотроипбв, Уо1итев 1-5 апб Зирр1етеп1а1в (Е1ве\аег Зшепсе РиЬНвЬегв, 1989); Огдатс Кеасбопв, Уо1итев 1-40 (боЬп \Убеу апб Зопв, 1991); МагсЬ'в Абуапсеб Огдашс СНеппвЦу, (боЬп \Убеу апб Зопв, 4ΐ1ι Ебйюп); и Ьагоск' в СотргеЬепв1уе Огдашс ТгапвГогтайопв (УСН РиЬЬвЬегв 1пс., 1989).
Если иное не указано прямо, то ни в коем случае не предполагается, что любой приведенный в данном описании способ следует рассматривать как требующий, чтобы его стадии выполнялись в определенном порядке. Соответственно, когда в формуле изобретения на способ в действительности не указан порядок, которому следует придерживаться при осуществлении стадий способа, и в формуле изобретения или описании специально не оговорено, что стадии должны быть ограничены определенным порядком, то ни в коем случае не следует понимать, что подобный порядок подразумевается. Указанное верно для любой неявно выраженной основы для интерпретации, в том числе предметов логики в отношении организации стадий или порядка проведения операций; общепринятого значения, полученного из грамматического построения или пунктуации; или количества или типов вариантов осуществления настоящего изобретения, приведенных в данном описании.
Раскрываются компоненты, которые следует использовать для получения композиций по настоящему изобретению, а также сами композиции, которые следует использовать в способах, раскрытых в данном описании. Указанные и другие вещества приведены в данном описании, и следует понимать, что когда раскрываются комбинации, подмножества, взаимодействия, группы и т. д. указанных веществ, хотя конкретная ссылка на каждую из различных индивидуальных и коллективных комбинаций и перестановок указанных соединений может быть в явном виде не указана, каждая из комбинаций специально предусмотрена и рассмотрена в данном описании. Например, если конкретное соединение раскрыто и обсуждено, и описан ряд модификаций, которые могут быть осуществлены для ряда молекул, в том числе соединений, то специально предполагается каждая и все возможные комбинации и перестановки соединений и модификаций, если отдельно не указано иное. Так, если класс молекул А, В, С раскрыт, а также описан класс молекул Ό, Е, Р и раскрыт пример комбинированной молекулы, А-Ό, то в таком случае, даже если каждая из них в отдельности не указана, каждая индивидуальная комбинация и имеющие коллективные смысл комбинации А-Е, А-Р, В-Ό, В-Е, В-Р, С-Ό, С-Е, С-Р считаются раскрытыми. Кроме того, раскрыто также любое их подмножество или комбинация. Так, например, считаются раскрытыми подгруппы А-Е, В-Р и С-Е. Указанная концепция относится ко всем аспектам данной заявки на изобретение, включая, однако этим не ограничиваясь, стадии в способах получения и применения композиций по настоящему изобретению. Таким образом, если существует множество дополнительных стадий, которые могут быть осуществлены, то следует понимать, что каждая из указанных дополнительных стадий может быть осуществлена в любом конкретном варианте воплощения настоящего изобретения или комбинации вариантов осуществления способов по настоящему изобретению.
Следует понимать, что составы, раскрытые в данном описании, имеют определенные функции. В данном описании раскрыты определенные структурные требования для осуществления описанных функций, и следует понимать, что существует множество структур, которые могут выполнять ту же функцию, родственных раскрытым структурам, и что указанные структуры, как правило, позволяют достичь того же результата.
В. Соединения.
В соответствии с одним аспектом изобретение относится к соединениям, пригодным в качестве ингибиторов деметилазы гистонов. В соответствии с еще одним аспектом соединения пригодны в качестве ингибиторов лизин-специфичной деметилазы гистонов ('Έ3Ό). Кроме того, в соответствии с одним аспектом соединения по настоящему изобретению пригодны для использования при лечении расстройств, связанных с неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом расстрой- 16 026389 ство, связанное с неконтролируемой пролиферации клеток, является онкологическим заболеванием или опухолью. В соответствии с еще одним аспектом расстройство, вызванное неконтролируемой пролиферации клеток, связано с дисфункцией ЬЕЮ. как указано далее в данном описании.
Предполагается, что каждое раскрытое производное необязательно может быть дополнительно замещено. Также предполагается, что любое одно или любые несколько производных необязательно могут быть исключены из изобретения. Следует понимать, что раскрытое соединение может быть получено с помощью раскрытых способов. Следует также понимать, что раскрытые соединения могут быть использованы в раскрытых способах применения.
1. Структура.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к соединению, которое имеет структуру, представленную формулой (I)
где т обозначает 0 или 1; η обозначает целое число от 0 до 3;
Ζ независимо выбирают из N и СН;
Κι выбирают из атома галогена, С1-С3 галогеноалкила и С1-С3 полигалогеноалкила;
каждый из Κ2, Κ3 и Κ4 независимо выбирают из атома водорода, атома галогена, гидроксила, циано, амино, С2-С6 алкалкокси, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкила, С1-С6 полигалогеноалкила и С1-С6 галогеноалкила;
К5 выбирают из ΝΚ6Κ7, С1-С6 алкила, С3-С6 циклоалкила и Су и замещен 0-3 группами, независимо выбранными из атома галогена, гидроксила, амино, С2-С6 алкалкокси, С1-С6 алкилспирта, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкила, С1-С6 полигалогеноалкила, С1-С6 галогеноалкила, С3-С6 циклоалкила и Су;
Су представляет собой гетероциклоалкил, выбранный из азиридинила, азетидинила, пирролидинила, пиперидинила, азепанила, оксазолидинила, имидазолидинила, пиразолидинила, пиперазинила, оксазинанила, морфолинила, гексагидропиримидинила и гексагидропиридазинила;
и каждый из Кб и К7 независимо выбирают из атома водорода, С1-С6 алкила, С3-С6 циклоалкила и С3-С6 гетероциклоалкила;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения К5 выбирают из
С1-С6 алкила, С3-С6 циклоалкила и Су, где каждый из К8а, К8Ь, К8с, К84 и К8е независимо выбирают из атома водорода, атома галогена, амино, циано, гидроксила, С2-С6 алкоксиалкила, С1-С3 алкокси, С1-С3 галогеноалкила и С1-С3 полигалогеноалкила и С1-С6 алкила, и каждый из К9а, К9Ь, К9с и К94 независимо выбирают из атома водорода, амино, атома галогена, гидроксила, С1-С3 алкила, С1-СЗ алкокси, С1-С3 галогеноалкила, С1-С3 полигалогеноалкила, азиридинила, азетидинила и пирролидинила.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение, выбранное из группы, состоящей из
- 17 026389
или его фармацевтически приемлемая соль.
В других вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение, имеющее структуру, представленную формулой
или его фармацевтически приемлемая соль.
В еще одних вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение, имеющее структуру, представленную формулой
или его фармацевтически приемлемая соль.
В других вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение, имеющее структуру, представленную формулой
или его фармацевтически приемлемая соль.
В настоящем изобретении предлагается также фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество любого из соединений по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.
В настоящем изобретении предлагается также способ лечения расстройства, вызванного неконтролируемой пролиферацией клеток у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества любого из соединений по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение относится также к способу снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества любого из соединений по настоящему изобретению.
2. Ингибирование активности деметилазы гистонов.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения подавляют активность белка Ь8О. В соответствии с другим аспектом раскрытые соединения селективно ингибируют активность белка Ь8Э1. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения селективно ингибируют активность белка Ь8Э2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения подавляют активность деметилазы Ь8Э. В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения способны связываться с доменом ΡΑΌ в Ь8Э. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8О-опосредованное деметилирование гистона 3 (Н3) в позиции Ьук4. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8О-опосредованное деметилирование Н3К3т1 и Н3К4те2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8О-опосредованное деметилирование Н3К9те2 и Н3К9те1.
В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность Ь8Э1 деметилазы. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения связываются с доменом ΡΑΌ в Ь8О1. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8О1-опосредованное деметилирование гистона 3 (Н3) в позиции Ьук4. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8П1-опосредованное деметилирование Н3К3т1 и Н3К4те2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8П1-опосредованное деметилирование Н3К9те2 и Н3К9те1.
В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность Ь8Э2 деме- 19 026389 тилазы. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения связываются с доменом РАИ в Ь8И2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8И2-опосредованное деметилирование гистона 3 (Н3) в позиции Ьу84. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют Ь8И2-опосредованное деметилирование Н3К3т1 и Н3К4те2.
В соответствии с другим аспектом раскрытые соединения препятствуют взаимодействию Ь8И с комплексами, включающими один или несколько из белков НОАС1/2. СоКЕ8Т, С1ВР1. ВКАР35 и ВНС80. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения препятствуют связыванию Ь8И1 с одним или несколькими белками, выбранными из белков НИАС1/2, СоКЕ8Т, С1ВР1. ВКАР35 и ВНС80. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения препятствуют связыванию Ь8И2 с одним или несколько белками, выбранными из белков О9а, Ν8Ό3, НИАС1/2, СоКЕ8Т, С1ВР1, ВКАР35 и ВНС80.
Ингибирование активности Ь8И можно определить как с помощью ίη νίίτο, так и ίη νίνο методов, известных специалистам в данной области техники. Например, ферментативную активность можно определить в ίη νίίτο ферментативных системах анализа. В соответствии с различными аспектами ферментативную активность либо Ь8И1, либо Ь8И2 можно определить с помощью спектрофотометрического анализа. Вкратце, указанный анализ основан на многоступенчатой ферментативной реакции, в которой Ь8И1 или Ь8И2 вначале производит Н2О2 в процессе деметилирования лизина 4 в пептиде, соответствующем первым 21 аминокислотам Ν-концевого хвоста гистона Н3. В присутствии пероксидазы хрена образовавшийся Н2О2 реагирует с АИНР с образованием обладающего сильной флуоресценцией соединения резоруфина, который можно анализировать на длине волны возбуждения 530-540 нм и длине волны испускания 585-595 нм. Для анализа требуется источник фермента Ь8И1 или Ь8И2, полученный либо очисткой из природных источников (например, из ткани или культивированных клеток) и выделенный как рекомбинантно экспрессированный белок, либо полученный в виде неочищенного белка в цельных клеточных экстрактах. В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность белка Ь8И с величиной 1С50 в ЕМ8А анализе меньше чем приблизительно 300 мкМ, меньше чем приблизительно 100 мкМ, меньше чем приблизительно 50 мкМ, меньше чем приблизительно 10 мкМ, меньше чем приблизительно 1 мкМ, меньше чем приблизительно 500 нМ или меньше чем приблизительно 100 нМ. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность белка Ь8И1 с величиной 1С50 в анализе ЕМ8А меньше чем приблизительно 300 мкМ, меньше чем приблизительно 100 мкМ, меньше чем приблизительно 50 мкМ, меньше чем приблизительно 10 мкМ, меньше чем приблизительно 1 мкМ, меньше чем приблизительно 500 нМ или меньше чем приблизительно 100 нМ. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность белка Ь8И2 с величиной 1С50 в анализе ЕМ8А меньше чем приблизительно 300 мкМ, меньше чем приблизительно 100 мкМ, меньше чем приблизительно 50 мкМ, меньше чем приблизительно 10 мкМ, меньше чем приблизительно 1 мкМ, меньше чем приблизительно 500 нМ или меньше чем приблизительно 100 нМ.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения селективны по отношению к Ь8И. В соответствии с другим аспектом селективное ингибирование активности Ь8И определяют с помощью ферментативного анализа. В соответствии с различными другими аспектами соединение ингибирует активность Ь8И в ферментативном анализе с величиной 1С50, меньшей чем 1С50 для МАО А и/или МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ь8И относительно МАО А и/или МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8И с величиной 1С50 приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и приблизительно более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8И с величиной 1С50, приблизительно 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и приблизительно более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения селективны по отношению к Ь8И1. В соответствии с еще одним аспектом селективное ингибирование активности Ь8И1 определяют с помощью ферментативного анализа. В соответствии с другими аспектами соединение ингибирует активность Ь8И1 в ферментативном анализе с величиной 1С50, меньшей, чем 1С50 для одного или нескольких из Ь8И2, МАО А и МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ь8И1 относительно одного или нескольких из Ь8И2, МАО А и МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8И1 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для Ь8И2, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для Ь8И2, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для Ь8И2, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для Ь8И2, или приблизительно в 50 раз меньшей, чем для Ь8И2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может ингибиро- 20 026389 вать Ь8О1 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и приблизительно более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8О1 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и более чем приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения селективны по отношению к Ь8О2. В соответствии с еще одним аспектом селективное ингибирование активности Ь8О2 определяют с помощью ферментативного анализа. В соответствии с различными другими аспектами соединение ингибирует активность Ь8О2 в ферментативном анализе с величиной 1С50, меньшей, чем 1С50, для одного или нескольких из Ρ8Ό1, МАО А и МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ь8О2 относительно одного или нескольких из Ρ8Ό1, МАО А и МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8О2 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для Ρ8Ό1, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для Ρ8Ό1, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для Ρ8Ό1, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для Ρ8Ό1, или приблизительно в 50 раз меньшей, чем для Ь8О1. В соответствии с еще одним аспектом, раскрытое соединение может ингибировать Ь8О2 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и приблизительно более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может ингибировать Ь8О2 с величиной 1С50, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и более чем приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
В соответствии с различными аспектами раскрытые соединения способны связываться с белком Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения способны связываться с доменом ΡΑΌ белка Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения способны связываться с белком Ь8О1. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения способны связываться с белком Ь8О2. Сродство связывания раскрытого соединения для белка Ρ8Ό, например белка Ρ8Ό1, может быть определено различными методами, известными специалисту в данной области техники. В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения способны связываться с белком Ь8О с величиной ΚΒ, меньшей чем приблизительно 50 мкМ, меньшей чем приблизительно 10 мкМ, меньшей чем приблизительно 1 мкМ, меньшей чем приблизительно 500 нМ или меньшей чем приблизительно 100 нМ. В соответствии с еще одним аспектом ΚΒ определяют методом 8РК. В соответствии с еще одним аспектом связывание определяют, используя белок Ь8О1. В соответствии с еще одним аспектом связывание определяют, используя белок Ь8О2.
В соответствии с различными другими аспектами связывание с Ь8О является селективным. В соответствии с еще одни аспектом раскрытые соединения обладают величиной ΚΒ для связывания с Ρ8Ό, меньшей, чем Κ для МАО А и/или МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ь8О относительно белков МАО А и/или МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом раскрытое соединение может связываться с Ь8О с величиной ΚΒ, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, примерно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и более чем приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может связываться с Ь8О с величиной ΚΒ, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
- 21 026389
В соответствии с различными другими аспектами связывание с Ь§О1 является селективным. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения показывают величину Кс для связывания с Ε8Ό1, меньшую, чем Кс для одного или нескольких из Ε8Ό2, МАО А и МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ε8Ό1 относительно одного или нескольких из белков Ε8Ό2, МАО А и МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом раскрытое соединение может связывать Ь§О1 с величиной Кс, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для Ε8Ό2, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для Ε8Ό2, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для Ε8Ό2, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для Ε8Ό2, или приблизительно в 50 раз меньше, чем для Ь§О2. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может связывать Ь§О1 с величиной Кс, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и более чем приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может связывать Ь§О1 с величиной Кс, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
В соответствии с различными другими аспектами связывание с Ь§О2 является селективным. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения показывают величину Кс для связывания с Ε8Ό2, меньшую, чем Кс для одного или нескольких из Ε8Ό1, МАО А и МАО В. Таким образом, раскрытое соединение может обладать селективностью для белка Ε8Ό1 относительно одного или нескольких из белков Ε8Ό1, МАО А и МАО В. Например, в соответствии с одним аспектом, раскрытое соединение может связывать Ь§О2 с величиной Кс, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для Ε8Ό1, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для Ε8Ό1, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для Ε8Ό1, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для Ε8Ό1, или приблизительно в 50 раз меньшей, чем для Ь§О1. В соответствии с еще одним аспектом, раскрытое соединение может связывать Ь§О2 с величиной Кс, приблизительно в 5 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО А, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А, и более чем приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО А. В соответствии с еще одним аспектом раскрытое соединение может связывать Ь§О2 с величиной Кс, приблизительно 5 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 10 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 20 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 30 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 50 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 100 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 250 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 500 раз меньшей, чем для МАО В, приблизительно в 1000 раз меньшей, чем для МАО В, и более чем в 1000 раз меньшей, чем для МАО В.
В качестве альтернативы ингибирование активности белка §ТАТ можно определить в клеточном анализе. Существуют различные клеточные анализы, которые пригодны для определения ингибирования активности белка Ε8Ό, известные специалистам в данной области техники. Например, подавление или остановку роста клеток можно определить, используя клетку, взятую либо из перманентной линии клеток, либо из первичной культуры клеток, у которой наблюдается дисфункция активности белка Ε8Ό. В соответствии с еще одним аспектом белком Ь§О является Ь§О1. В соответствии с еще одним аспектом белком Ь§О является Ь§О2. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция белка Ε8Ό представляет собой такую дисфункцию, при которой у белка Ε8Ό наблюдается мутация приобретения функции. В качестве альтернативы дисфункция белка Ε8Ό имеет фенотип персистентной или конститутивной активности. Например, белок Ь§О может обладать персистентной или конститутивной активностью вследствие дисфункции регуляторного белка, расположенного против хода транскрипции. В соответствии с еще одним аспектом белок Ь§О избыточно экспрессируется вследствие дисфункции в регуляции транскрипции и/или трансляции гена Ε8Ό. В соответствии с еще одним аспектом клетка скрывает активный онкоген, который связан с дисфункцией Ь§О.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения и продукты раскрытых способов получения ингибируют рост клеток. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения и продукты раскрытых способов ингибируют рост клеток в системах ίη νίΐΓΟ анализа. В соответствии с еще одним аспектом в системе ίη νίίτο анализа используют клеточную линию, полученную из онкологического заболевания или опухоли, выбранных из рака молочной железы, рака яичников, рака яичка, рака легких, рака печени, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и саркомы. В соответствии с еще
- 22 026389 одним аспектом клеточная линия получена у человека. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют клеточный рост в клетке с персистентно активным белком Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом клеточная линия включает активированный белок Ь8О. В соответствии с еще одним аспектом клеточная линия выбрана из ΑΝ3 СА, ВТ-20, ВТ-549, НСТ 116, НЕК218, МСР7, ΜΌΆ-ΜΒ231, МОА-МВ-235, ΜΌΆ-ΜΒ-4358, ΜΌΆ-ΜΒ-468, ΡΆΝ^1, РС-3, δΚ-Ν-МС, Τ-47Ό и И-87 МО. В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения ингибируют активность роста клеток в ίη νίίΓΟ клеточном анализе с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 500 мкМ, меньше чем приблизительно 250 мкМ, меньше чем приблизительно 100 мкМ, меньше чем приблизительно 50 мкМ, меньше чем приблизительно 10 мкМ, меньше чем приблизительно 1 мкМ, меньше чем приблизительно 500 нМ, меньше чем приблизительно 100 нМ, меньше чем приблизительно 10 нМ и меньше чем приблизительно 1 нМ.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения и продукты раскрытых способов получения подавляют миграцию клеток. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения и продукты раскрытых способов подавляют миграцию клеток в системах ίη νίίτο анализа. В соответствии с еще одним аспектом в системе ίη νίίτο анализа используют клеточную линию, полученную из онкологического заболевания или опухоли, выбранных из рака молочной железы, рака яичников, рака яичка, рака легких, рака печени, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы и саркомы. В соответствии с еще одним аспектом клеточная линия получена у человека. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения ингибируют клеточный рост в клетке с персистентно активным белком Ρ8Ό. В соответствии с еще одним аспектом клеточная линия включает активированный белок Ρ8Ό. В соответствии с еще одним аспектом клеточная линия выбрана из ΑΝ3 СА, ВТ-20, ВТ-549, НСТ 116, НЕК218, ΜСΡ7, ΜΌΆ-ΜΒ-231, ΜΌΆ-ΜΒ-235, ΜΌΆ-ΜΒ-4358, ΜΌΆ-ΜΒ-468, ΡΆΝ^1, РС-3, 8Κ-Ν-ΜΟ Τ-47Ό и И-87 ΜΟ. В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения подавляют миграцию клеток в ίη νίίτο клеточном анализе с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 300 мкМ, меньше чем приблизительно 100 мкМ, меньше чем приблизительно 50 мкМ, меньше чем приблизительно 10 мкМ, меньше чем приблизительно 1 мкМ, меньше чем приблизительно 500 нМ, меньше чем приблизительно 100 нМ.
С. Способы получения соединений.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способам получения соединений, пригодных в качестве ингибиторов Ό8Ό. В соответствии с еще одним аспектом продукты раскрытых способов получения являются регуляторами активности Ό8Ό. В соответствии с еще одним аспектом продукты раскрытых способов получения связываются с белком 8ΤΆΤ и снижают активность Ό8Ό. В соответствии с одним аспектом соединения могут проявлять селективность к субтипам. В соответствии с еще одним аспектом продукты раскрытых способов получения проявляют селективность к члену семейства Ό8Ό1 белков Ό8Ό. В соответствии с еще одним аспектом продукты раскрытых способов получения проявляют селективность к члену семейства Ό8Ό2 белков Ό8Ό.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способам получения соединений, пригодных в качестве ингибиторов деметилазы гистонов, которые могут быть пригодны для лечения расстройств, связанных с неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом деметилазой гистонов является Ό8Ό1. В соответствии с еще одним аспектом деметилазой гистонов является Ό8Ό2.
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены по реакциям, как показано на следующих схемах, в дополнение к другим стандартным методикам, которые известны в литературе, и их примеры приведены в экспериментальных разделах, и которые известны специалистам в данной области техники. Для простоты приведены примеры, где есть один заместитель, при этом разрешены множественные заместители, соответствующие определениям, раскрытым в данном описании.
Реакции, используемые для получения соединений по настоящему изобретению, осуществляют, как показано на приведенных ниже схемах реакций, в дополнение к другим стандартным методикам, известным из литературы или известным специалистам в данной области техники. Следующие примеры приведены для того, чтобы изобретение стало более понятным, они являются только иллюстративными и их не следует рассматривать как ограничивающие настоящее изобретение.
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения включают продукты синтетических способов, приведенных в данном описании. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения включают соединение, полученное по способу синтеза, приведенному в данном описании. В соответствии с еще одним аспектом настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество продукта раскрытых способов и фармацевтически приемлемый носитель. В соответствии с еще одним аспектом настоящее изобретение включает способ приготовления лекарственного средства, который заключается в объединении по меньшей мере одного соединения из любых раскрытых соединений или по меньшей мере одного продукта раскрытых способов с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.
1. Путь I.
В соответствии с одним аспектом замещенные аналоги (Е)-№-(1-фенилэтилиден)бензогидразида по настоящему изобретению могут быть в общем случае приготовлены по приведенной ниже схеме синтеза.
- 23 026389
Соединения представлены в общей форме с заместителями, определение которых приведено в данном описании. Более конкретный пример приведен ниже.
В соответствии с одним аспектом путь I начинается с подходящего замещенного производного кислоты (1.1). Подходящие замещенные производные кислот (1.1) являются коммерчески доступными или могут быть легко получены специалистом в данной области. В типичной реакции соединение типа 1.1 добавляют к производному соединению амина типа 1.2 в присутствии подходящего основания, в частности, карбоната калия, в подходящем растворителе, таком как ТГФ. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (приблизительно при температуре 15-30°С) в течение времени, достаточного для завершения реакции, например приблизительно в течение 12 ч. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и соединение типа 1.3 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом соединения типа 1.4 могут быть получены по реакции соединений типа 1.3 со спиртом по реакции этерификации. В типичной реакции соединение типа 1.3 нагревают при подходящей температуре (например, при температуре кипения с обратным холодильником, приблизительно 65°С) в подходящем спиртовом растворителе, например метаноле, в присутствии кислотного катализатора, такого как концентрированная серная кислота, в течение времени, достаточного для завер- 24 026389 шения реакции, например оставляют на ночь (приблизительно на 8-18 ч). После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, и соединение типа 1.4 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом из соединений типа 1.4 можно получить соединения типа 1.5 по реакции с соответствующим производным соединением гидразина (N^N4^). В типичной реакции соединение типа 1.4 добавляют к подходящему производному соединению гидразина (NН2NНК4) и нагревают при подходящей температуре (например, при температуре кипения с обратным холодильником, приблизительно 65°С) в подходящем растворителе, например метаноле, в течение времени, достаточного для завершения реакции (например, приблизительно 12 ч). После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и соединение типа 1.5 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом из соединений типа 1.5 можно получить соединения типа 1.7 по реакции с соответствующим карбонилсодержащим соединением (1.6). В типичной реакции соединение типа 1.6 и соответствующее производное соединение гидразина (1.5) растворяют в подходящем растворителе, например метаноле, в присутствии подходящего кислотного катализатора (например, уксусной кислоты), и смесь нагревают в микроволновом реакторе при соответствующей температуре, например приблизительно при 120°С, в течение времени, достаточного для завершения реакции (например, в течение приблизительно 30 мин). После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и соединения типа 1.7 выделяют и очищают хроматографически.
2. Путь II.
В соответствии с одним аспектом замещенные аналоги (Е)-№-(1-фенилэтилиден)бензогидразида по настоящему изобретению могут быть в общем случае приготовлены по приведенной ниже схеме синтеза.
Соединения представлены в общей форме с заместителями, определение которых приведено в данном описании. Более конкретный пример приведен ниже.
В соответствии с одним аспектом путь II начинается с подходящего замещенного производного кислоты (2.1). Подходящие замещенные производные кислот (2.1) являются коммерчески доступными или могут быть легко получены специалистом в данной области. В соответствии с одним аспектом соединения типа 2.2 могут быть получены по реакции соединений типа 2.1 со спиртом по реакции этерификации. В типичной реакции соединение типа 2.1 нагревают при подходящей температуре (например, при температуре кипения с обратным холодильником, приблизительно 70°С) в подходящем спиртовом растворителе, например метаноле, в присутствии кислотного катализатора, такого как концентрированная серная кислота, в течение времени, достаточного для завершения реакции, например оставляют на ночь (приблизительно на 8-18 ч). После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и соединение типа 2.2 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом из соединений типа 2.2 можно получить соединения типа 2.3 по реакции с соответствующим производным соединением гидразина (NН2NНК4). В типичной реакции соединение типа 2.2 добавляют к подходящему производному соединению гидразина (NН2NНК4) и нагревают при подходящей температуре (например, при температуре кипения с обратным холодильником,
- 25 026389 приблизительно 70°С) в подходящем растворителе, например метаноле, в течение времени, достаточного для завершения реакции, например оставляют на ночь (на 8-18 ч). После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и соединение типа 2.3 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом соединение типа 2.3 можно использовать для получения соединений типа 2.5 по реакции с соответствующим карбонилсодержащим соединением (2.4). В типичной реакции соединение типа 2.4 и соответствующее производное соединение гидразина (2.3) растворяют в подходящем растворителе, например метаноле, в присутствии подходящего кислотного катализатора (например, уксусной кислоты), и смесь нагревают в микроволновом реакторе при соответствующей температуре, например приблизительно 120°С, в течение времени, достаточного для завершения реакции (например, в течение приблизительно 30 мин). После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и соединения типа 2.5 выделяют и очищают хроматографически.
В соответствии с одним аспектом полученное соединение ингибирует деметилазу гистонов. В соответствии с еще одним аспектом деметилаза гистонов является членом семейства лизин-специфичных ('Έ8Ό) деметилаз гистонов. В соответствии с еще одним аспектом гистон деметилазой является Ь8Э1. В соответствии с еще одним аспектом гистон деметилазой является Ь8Э2. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение подавляет жизнеспособность клеток.
В соответствии с другим аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-4М. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-5М. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-6М. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-7М. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-8М. В соответствии с еще одним аспектом полученное соединение демонстрирует ингибирование с величиной 1С50 меньше чем приблизительно 1,0х10-9М.
Авторы настоящего изобретения полагают, что каждый раскрытый способ может также включать дополнительные стадии, манипуляции и/или компоненты. Также предполагается, что любая стадия или любые несколько стадий, манипуляций и/или компонентов необязательно могут быть пропущены в настоящем изобретения. Следует понимать, что раскрытые способы могут быть использованы для получения раскрытых соединений. Следует также понимать, что продукты раскрытых способов могут применяться в раскрытых способах использования.
Ό. Фармацевтические композиции.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим раскрытые соединения. Таким образом, можно получить фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного раскрытого соединения или по меньшей мере одного продукта раскрытого способа и фармацевтически приемлемый носитель.
В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество продукта раскрытого способа синтеза. В соответствии с другим аспектом эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой профилактически эффективное количество. В соответствии с еще одним аспектом соединение представляет собой раскрытое соединение.
В соответствии с некоторыми аспектами раскрытые фармацевтические композиции содержат раскрытые соединения (в том числе их фармацевтически приемлемые соли) в качестве активного ингредиента, фармацевтически приемлемый носитель и, необязательно, другие терапевтические ингредиенты или вспомогательные лекарственные средства. Композиции по настоящему изобретению включают такие соединения, которые пригодны для перорального, ректального, местного и парентерального (включая подкожное, внутримышечное и внутривенное) введения, хотя наиболее подходящий путь в любом данном случае будет зависеть от конкретного хозяина и типа и тяжести состояний, для лечения которого назначают активный ингредиент. Фармацевтические композиции удобно готовить в виде стандартной лекарственной формы, и они могут быть получены любыми способами, хорошо известным из области фармации.
В данном описании термин фармацевтически приемлемые соли относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований или кислот. Когда соединение по настоящему изобретению является кислотой, его соответствующую соль удобно получать из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований, в том числе неорганических оснований и органических оснований. Соли, полученные из подобных неорганических оснований, включают соли алюминия, аммония, кальция, меди (одно- и двухвалентной), железа(111), железа(11), лития, магния, марганца (двух- и трехвалентного), калия, натрия, цинка и т. п. Наиболее предпочтительными являются соли аммония, кальция, магния, калия и натрия. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых нетоксичных органических ос- 26 026389 нований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, а также циклических аминов и замещенных аминов, таких как природные и синтетические замещенные амины. Другие фармацевтически приемлемые нетоксичные органические основания, из которых могут быть получены соли, включают ионообменные смолы, такие как, например, аргинин, бетаин, кофеин, холин, Ν,Ν'дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-этилморфолин, Ν-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминовые смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, трометамин и т. п.
В данном описании термин фармацевтически приемлемые нетоксичные кислоты включает неорганические кислоты, органические кислоты и полученные из них соли, например уксусную, бензолсульфоновую, бензойную, камфорсульфоновую, лимонную, этансульфоновую, фумаровую, глюконовую, глутаминовую, бромисто-водородную, хлористо-водородную, изэтионовую, молочную, малеиновую, яблочную, миндальную, метансульфоновую, слизевую, азотную, памовую, пантотеновую, фосфорную, янтарную, серную, винную, п-толуолсульфоновую кислоту и т. п. Предпочтительными являются лимонная, бромисто-водородная, хлористо-водородная, малеиновая, фосфорная, серная и винная кислоты.
На практике соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента можно объединять в виде однородной смеси с фармацевтическим носителем, в соответствии с обычными методиками приготовления фармацевтических композиций. Носитель может принимать разнообразные формы в зависимости от формы, требуемой для введения препарата, например пероральной или парентеральной (включая внутривенную) формы. Таким образом, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть приготовлены в виде дискретных единиц, пригодных для перорального введения, таких как капсулы, облатки или таблетки, каждая из которых содержит определенное количество активного ингредиента. Кроме того, композиции могут быть приготовлены в виде порошка, в виде гранул, в виде раствора, в виде суспензии в водной жидкости, в виде неводной жидкости, в виде жидкой эмульсии типа масло-в-воде или эмульсии типа вода-в-масле.
Помимо приведенных выше общих лекарственных форм соединения по настоящему изобретению и/или их фармацевтически приемлемые соли также можно вводить, используя средства для контролируемого высвобождения и/или устройства для доставки. Композиции можно приготовить любым из применяемых в фармации способов. В общем случае подобные способы включают стадию объединения активного ингредиента с носителем, который содержит один или несколько необходимых ингредиентов. В общем случае композиции получают путем однородного и тщательного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями или с обоими указанными носителями. Полученному продукту затем можно придать желаемую форму.
Так, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут включать фармацевтически приемлемый носитель и соединение или фармацевтически приемлемые соли соединения по настоящему изобретению. Соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли также могут быть включены в фармацевтические композиции в сочетании с одним или несколькими другими терапевтически активными соединениями.
Используемый фармацевтический носитель может быть, например, твердым веществом, жидкостью или газом. Примеры твердых носителей включают лактозу, гипс, сахарозу, тальк, желатин, агар, пектин, камедь, стеарат магния и стеариновую кислоту. Примерами жидких носителей являются сахарный сироп, арахисовое масло, оливковое масло и вода. Примеры газообразных носителей включают диоксид углерода и азот.
При получении композиций для пероральной лекарственной формы могут быть использованы любые удобные фармацевтические среды. Например, вода, гликоли, масла, спирты, отдушки, консерванты, красители и т. п. могут быть использованы для приготовления таких жидких пероральных препаратов как суспензии, эликсиры и растворы; в то же время такие носители, как крахмалы, сахара, микрокристаллическая целлюлоза, разбавители, гранулирующие агенты, лубриканты, связующие вещества, разрыхлители и т. п. могут использоваться для приготовления пероральных твердых препаратов, таких как порошки, капсулы и таблетки. Благодаря легкости их введения таблетки и капсулы являются предпочтительными пероральными лекарственными формами, при этом используют твердые фармацевтические носители. На таблетки необязательно могут быть нанесены покрытия с помощью стандартных водных или неводных способов.
Таблетку, содержащую композицию по настоящему изобретению, можно приготовить прессованием или формованием, необязательно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами или вспомогательными препаратами. Прессованные таблетки могут быть получены прессованием в соответствующей установке, при этом активный ингредиент в сыпучей форме, такой как порошок или гранулы, необязательно смешивают со связующим веществом, лубрикантом, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом или диспергатором. Формованные таблетки могут быть изготовлены формованием в соответствующем устройстве из смеси порошкообразного соединения, которое увлажняют инертным жидким разбавителем.
- 27 026389
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат соединение по настоящему изобретению (или его фармацевтически приемлемые соли) в качестве активного ингредиента, фармацевтически приемлемый носитель и необязательно один или несколько дополнительных терапевтических агентов или вспомогательных соединений. Композиции по настоящему изобретению включают композиции, пригодные для перорального, ректального, местного и парентерального (включая подкожное, внутримышечное и внутривенное) введения, хотя наиболее подходящий путь в любом случае будет зависеть от конкретного хозяина и типа и тяжести состояний, для лечения которого назначают активный ингредиент. Фармацевтические композиции удобно готовить в виде стандартной лекарственной формы, и их можно получить любым способом, хорошо известным из области фармации.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, пригодные для парентерального введения, могут быть приготовлены в виде растворов или суспензий активных соединений в воде.
Может быть добавлено подходящее поверхностно-активное вещество, такое как, например, гидроксипропилцеллюлоза. Могут быть также приготовлены дисперсии в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях в маслах. Кроме того, может быть добавлен консервант с целью предотвращения роста вредных микроорганизмов.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, пригодные для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы или дисперсии. Кроме того, композиции могут быть в форме стерильных порошков для спонтанного приготовления подобных стерильных растворов или дисперсий для инъекций. Во всех случаях конечная форма для инъекции должна быть стерильной и должна быть достаточно жидкой, чтобы ее можно было ввести с помощью шприца. Фармацевтические композиции должны быть стабильными в условиях производства и хранения; так, они предпочтительно должны быть защищены от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носитель может быть растворителем или дисперсионной средой, содержащей, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), растительные масла и подходящие их смеси.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть в форме, подходящей для местного применения, такой как, например, аэрозоль, крем, мазь, лосьон, присыпка, жидкости для полоскания рта, жидкости для полоскания горла и т. п. Кроме того, композиции могут быть в форме, подходящей для применения в трансдермальных устройствах. Указанные препараты можно приготовить, используя соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемые соли, с помощью обычных технологических методов. Например, крем или мазь готовят, смешивая гидрофильное вещество и воду вместе с приблизительно от 5 мас.% до приблизительно 10 мас.% соединения таким образом, чтобы получить крем или мазь с требуемой консистенцией.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть в форме, подходящей для ректального введения, где носитель представляет собой твердое вещество. Предпочтительно смесь должна быть пригодна для изготовления суппозиториев. Подходящие носители включают масло какао и другие вещества, обычно используемые в данной области техники. Суппозитории можно легко сформировать, смешивая вначале композицию с размягченным или расплавленным носителем, с последующим охлаждением и формованием в пресс-формах.
В дополнение к вышеупомянутым ингредиентам-носителям описанные выше фармацевтические композиции могут, в случае необходимости, включать один или несколько дополнительных ингредиентов-носителей, таких как разбавители, буферные добавки, ароматизаторы, связующие, поверхностноактивные вещества, загустители, лубриканты, консерванты (в том числе антиоксиданты) и т. п. Кроме того, могут быть включены другие вспомогательные вещества с тем, чтобы препарат был изотоническим с кровью предполагаемого реципиента. Композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению и/или его фармацевтически приемлемые соли, могут быть получены также в форме порошка или жидкого концентрата.
В условиях проведения лечения, которое требуют ингибирования или снижения активности белка Ь8О, соответствующий уровень дозировки в общем случае обычно составляет от приблизительно 0,01 до 500 мг на кг массы тела пациента в день, и введение можно осуществлять в виде одной или нескольких доз. Уровень дозировки предпочтительно составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 250 мг/кг в день, более предпочтительно, от 0,5 до 100 мг/кг в день. Пригодный уровень дозировок может составлять приблизительно от 0,01 до 250 мг/кг в день, приблизительно от 0,05 до 100 мг/кг в день или приблизительно от 0,1 до 50 мг/кг в день. Внутри указанного диапазона доза может составлять от 0,05 до 0,5, от 0,5 до 5,0 или от 5,0 до 50 мг/кг в день. Для перорального введения композиции преимущественно готовят в форме таблеток, содержащих от 1,0 до 1000 мг активного ингредиента, в частности 1,0, 5,0, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 750, 800, 900 и 1000 мг активного ингредиента, с целью симптоматического подбора дозы для пациента, лечение которого проводят. Соединение можно вводить по схеме дозирования от 1 до 4 раз в день, предпочтительно 1 или 2 раза в день. Указанный режим дозирования можно регулировать с тем, чтобы получить оптимальный терапевтический ответ.
Тем не менее, следует понимать, что конкретный уровень доз для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов. Подобные факторы включают возраст, массу тела, общее состояние
- 28 026389 здоровья, пол и диету пациента. Другие факторы включают время и путь введения, скорость выведения лекарственного средства из организма, комбинацию лекарственных средств, а также тип и тяжесть конкретного заболевания, лечение которого проводят.
Настоящее изобретение также относится к способу изготовления лекарственного средства, предназначенного для ингибирования или снижения активности белка 6δΌ (например, для лечения расстройства, вызванного неконтролируемой пролиферацией клеток, или одного или нескольких нейродегенеративных расстройств, связанных с дисфункцией 6δΌ) у млекопитающих (например, людей), который включает объединение одного или нескольких раскрытых соединений, продуктов или композиций с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способу получения лекарственного средства, при этом указанный способ включает объединение по меньшей мере одного раскрытого соединения или по меньшей мере одного раскрытого продукта с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.
Раскрытые фармацевтические композиции могут дополнительно содержать другие терапевтически активные соединения, которые обычно применяют при лечении вышеуказанных патологических состояний.
Следует понимать, что раскрытые композиции могут быть приготовлены из раскрытых соединений. Следует также понимать, что раскрытые композиции могут быть использованы в раскрытых способах применения.
Е. Способы применения соединений и композиций.
Раскрытые соединения могут быть использованы в виде единственных агентов или в виде комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами с целью лечения, предотвращения, устранения, снижения интенсивности симптомов или уменьшения риска возникновения указанных выше заболеваний, расстройств и состояний, для которых могут применяться соединения формулы I или другие лекарственные средства, при этом сочетание препаратов является более безопасным и более эффективным, чем действие любого препарата в отдельности. Другое(ие) лекарственное(ые) средство (средства) можно вводить по способу и в количестве, обычно используемом в таких случаях, одновременно или последовательно с раскрытым соединением. В том случае, когда раскрытые соединения используют одновременно с одним или несколькими другими лекарственными средствами, то предпочтительной является фармацевтическая композиция в виде стандартной лекарственной формы, содержащей подобные лекарственные средства и раскрытое соединение. Тем не менее, комбинированную терапию можно применять и в виде перекрывающихся режимов дозирования. Авторы настоящего изобретения также полагают, что сочетание одного или нескольких активных ингредиентов и раскрытого соединения будет более эффективно, чем применение любого из указанных агентов в отдельности.
Фармацевтические композиции и способы по настоящему изобретению могут дополнительно содержать другие терапевтически активные соединения, как указано в данном описании, которые обычно применяются при лечении указанных выше патологических состояний.
1. Способы лечения.
Соединения, раскрытые в настоящем описании, пригодны для лечения, предотвращения, снижения интенсивности симптомов, устранения или уменьшения риска возникновения различных расстройств, при которых на пациента или субъекта благотворное воздействие оказывает ингибирование или снижение активности белка 6δΌ. В соответствии с одним аспектом лечение может включать в себя селективное ингибирование 6δΌ в такой степени, что оно влияет на активность деметилирования гистонов. Так, заболевание может быть связано с активностью деметилирования гистонов, например с нарушенной эпигенетической регуляцией генов в раковой клетке. В соответствии с одним аспектом в настоящем изобретении предлагается способ лечения или предотвращения расстройства у субъекта, который включает стадию введения субъекту по меньшей мере одного раскрытого соединения; по меньшей мере одной раскрытой фармацевтической композиции и/или по меньшей мере одного раскрытого продукта в дозировке и количестве, эффективном для лечения расстройства у субъекта.
Предлагается также способ лечения одного или нескольких расстройств у субъекта, при которых по прогнозам будет полезно ингибирование Ь§О, при этом способ включает стадию введения субъекту по меньшей мере одного раскрытого соединения; по меньшей мере одной раскрытой фармацевтической композиции и/или по меньшей мере одного раскрытого продукта в дозировке и количестве, эффективном для лечения расстройства у субъекта.
В соответствии с одним аспектом предлагается способ лечения расстройства, вызванного неконтролируемой пролиферацией клеток, который включает введение субъекту по меньшей мере одного раскрытого соединения; по меньшей мере, одной раскрытой фармацевтической композиция и/или по меньшей мере одного раскрытого продукта в дозировке и количестве, эффективном для лечения расстройства у субъекта. В соответствии с еще одним аспектом предлагается способ лечения или предупреждения нейродегенеративного расстройства, который включает введение субъекту по меньшей мере одного раскрытого соединения; по меньшей мере одной раскрытой фармацевтической композиции и/или по меньшей мере одного раскрытого продукта в дозировке и количестве, эффективном для лечения расстройства у субъекта. Предлагается также способ лечения расстройства у млекопитающего, включающий стадию
- 29 026389 введения млекопитающему по меньшей мере одного раскрытого соединения, композиции или лекарственного средства.
Настоящее изобретение направлено на использование описанных химических составов с целью лечения заболеваний или нарушений у пациентов (преимущественно, у человека), при которых по прогнозам ингибирование БЗЭ приводит к терапевтическому эффекту, например расстройств, вызванных неконтролируемой пролиферацией клеток (например, онкологических заболеваний), и нейродегенеративных расстройств, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона и болезнь Паркинсона, путем введения одного или нескольких раскрытых соединений или продуктов.
Соединения, раскрытые в настоящем описании, пригодны для использования при лечении, предотвращении, снижении интенсивности симптомов, устранении или уменьшении риска возникновения различных расстройств, связанных с неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с одним аспектом расстройство, вызванное неконтролируемой пролиферацией клеток, связано с дисфункцией деметилазы гистонов. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция деметилазы гистонов представляет собой дисрегуляцию БЗЭ. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция деметилазы гистонов представляет собой дисрегуляцию БЗЭ1. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция деметилазы гистонов представляет собой дисрегуляцию БЗЭ2.
Предлагается также способ использования раскрытого соединения, композиции или лекарственного средства. В соответствии с одним аспектом способ использования направлен на лечение расстройства. В соответствии с еще одним аспектом раскрытые соединения могут быть использованы в виде единственных агентов или могут быть использованы в сочетании с одним или несколькими другими лекарственными средствами с целью лечения, предотвращения, устранения, снижения интенсивности симптомов или уменьшения риска возникновения заболеваний, расстройств и состояний, для которых применимы соединение или другие лекарственные средства, при этом сочетание лекарственных средств более безопасно и более эффективно, чем действие любого лекарственного средства в отдельности. Другой(ие) препарат(ы) можно вводить способом и в количестве, обычно используемом для указанных применений, одновременно или последовательно с раскрытым соединением. В том случае, когда раскрытое соединение используют одновременно с одним или несколькими другими лекарственными средствами, предпочтительной является фармацевтическая композиция в виде стандартной лекарственной формы, содержащей указанные лекарственные средства и раскрытое соединение. Тем не менее, комбинированную терапию можно применять и в виде перекрывающихся режимов дозирования. Предполагается также, что сочетание одного или нескольких активных ингредиентов и раскрытого соединения может быть более эффективно, чем применение любого из указанных агентов в отдельности.
Примеры расстройств, связанных с дисфункции деметилазы гистонов, включают расстройства, вызванные неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток, является онкологическое заболевание. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой лейкоз. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является саркома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой солидную опухоль. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лимфома.
Должно быть понятно, что онкологическое заболевание относится или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Онкологическое заболевание может обладать множественной лекарственной устойчивостью (МКЭ) или лекарственной чувствительностью. Примеры онкологического заболевания включают, однако этим не ограничиваясь, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры подобных онкологических заболеваний включают рак молочной железы, рак предстательной железы, рак толстого кишечника, плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, рак шейки матки, рак яичников, рак брюшины, рак печени, в частности карциному печени, рак мочевого пузыря, рак ободочной и прямой кишки, рак эндометрия, рак почки и рак щитовидной железы.
В соответствии с различными аспектами дополнительными примерами онкологических заболеваний являются базально-клеточная карцинома, рак желчных протоков; рак костной ткани; рак мозга и ЦНС; хориокарцинома; рак соединительной ткани; рак пищевода; рак глаза; рак головы и шеи; рак желудка; интраэпителиальное новообразование; рак гортани; лимфома, включая лимфому Ходжкина и неходжкинскую лимфому; меланома; миелома; нейробластома; рак полости рта (например, губы, языка, рта и глотки); ретинобластома; рабдомиосаркома; рак прямой кишки; рак органов дыхательной системы; саркома; рак кожи; рак желудка; рак яичка, рак матки; рак мочеполовой системы, а также другие карциномы и саркомы.
В соответствии с другими аспектами рак представляет собой рак кроветворной системы. В соответствии с еще одним аспектом рак кроветворной системы выбран из острого миелоидного лейкоза (ЛМЬ), острого лимфобластного лейкоза (ЛЬЬ), хронического миелоидного лейкоза (СМЬ), хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ), волосатоклеточного лейкоза, хронического миеломоноцитарного лейкоза (СММЬ), ювенильного миеломоноцитарного лейкоза (ДММЬ), лимфомы Ходжкина, неходжкинской
- 30 026389 лимфомы, множественной миеломы, одиночной миеломы, локализованной миеломы и экстрамедуллярной миеломы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из хронического лимфолейкоза, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, В-клеточной неходжкинской лимфомы и большеклеточной лимфомы.
В соответствии с другим аспектом онкологическим заболеванием является рак мозга. В соответствии с еще одним аспектом рак мозга выбран из глиомы, медуллобластомы, примитивной нейроэктодермальной опухоли (ΡΝΞΤ), акустической невромы, глиомы, менингиомы, аденомы гипофиза, шванномы, лимфомы ЦНС, примитивной нейроэктодермальной опухоли, краниофарингиомы, хордомы, медуллобластомы, церебральной нейробластомы, центральной нейроцитомы, пинеоцитомы, пинеобластомы, атипичной тератоидно-рабдоидной опухоли, хондросаркомы, хондромы, карциномы хориоидного сплетения, папилломы сосудистого сплетения, краниофарингиомы, дисембриопластической нейроэпителиальной опухоли, ганглиоцитомы, герминомы, гемангиобластомы, гемангиоперцитомы и метастатической опухоли мозга. В соответствии с еще одним аспектом глиома выбрана из эпендимомы, астроцитомы, олигодендроглиомы и олигоастроцитомы. В соответствии с еще одним аспектом глиома выбрана из ювенильной волосовидной астроцитомы, субэпендимальной гигантоклеточной астроцитомы, ганглиоглиомы, субэпендимомы, плеоморфной ксантоастроцитомы, анапластической астроцитомы, мультиформной глиобластомы, глиомы ствола мозга, олигодендроглиомы, эпендимомы, олигоастроцитомы, мозжечковой астроцитомы, вызывающей развитие фиброзной ткани инфантильной астроцитомы, субэпендимальной гигантоклеточной астроцитомы клеток, диффузной астроцитомы, смешанной глиомы, оптической глиомы, церебрального глиоматоза, мультифокальной глиоматозной опухоли, многоцентровой мультиформной глиобластомной опухоли, параганглиомы и ганглиоглиомы.
В соответствии с одним аспектом онкологическое заболевание может представлять собой онкологическое заболевание, выбранное из рака крови, мозга, мочеполового тракта, желудочно-кишечного тракта, толстого кишечника, прямой кишки, молочной железы, почки, лимфатической системы, желудка, легкого, поджелудочной железы и кожи. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака предстательной железы, мультиформной глиобластомы, рака эндометрия, рака молочной железы и рака толстого кишечника. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака молочной железы, яичника, предстательной железы, головы, шеи и почек. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака крови, мозга, мочеполового тракта, желудочно-кишечного тракта, толстого кишечника, прямой кишки, молочной железы, печени, почки, лимфатической системы, желудка, легкого, поджелудочной железы и кожи. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака легких и печени. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака молочной железы, яичника, предстательной железы и яичек. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак молочной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичника. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичек.
В соответствии с различными аспектами расстройства, связанные с дисфункции деметилазы гистонов, включают нейродегенеративные расстройства. В соответствии с другим аспектом нейродегенеративное заболевание выбрано из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона и болезни Хантингтона.
Соединения также пригодны в способе предотвращения, лечения, устранения, снижения интенсивности симптомов или уменьшения риска заболеваний, расстройств и состояний, указанных в настоящем описании. Соединения в сочетании с другими агентами также пригодны в способе предотвращения, лечения, устранения, снижения интенсивности симптомов или уменьшения риска возникновения указанных выше заболеваний, расстройств и состояний.
Настоящее изобретение относится также к введению ингибитора Ь8О с целью улучшения результатов лечения на примере нарушений, вызванных неконтролируемой пролиферацией клеток, в том числе онкологического заболевания. Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к комбинированному терапевтическому способу, который включает стадию введения млекопитающему эффективного количества и дозы по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению в связи с терапией онкологического заболевания.
В соответствии с другим аспектом введение лекарственного средства улучшает результаты лечения применительно к терапии онкологического заболевания. Введение лекарственного средства в связи с терапией онкологического заболевания может быть непрерывным или прерывистым. Введение лекарственного средства не обязательно может осуществляться одновременно с терапией, и может осуществляться до, во время и/или после терапии. Например, терапия онкологического заболевания может осуществляться в пределах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 дней до или после введения соединения. В качестве дополнительного примера терапия онкологического заболевания может осуществляться в пределах 1, 2, 3 или 4 недели до или после введения соединения. В качестве еще одного примера когнитивную или поведенческую терапию можно осуществлять до или после введения лекарственного средства в течение периода времени, равного 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 периодам полувыведения вводимого соединения.
- 31 026389
В соответствии с одним аспектом раскрытые соединения могут быть использованы в сочетании с одним или несколькими другими лекарственными средствами с целью лечения, предотвращения, устранения, снижения интенсивности симптомов или уменьшения риска возникновения заболеваний или состояний, для которых пригодны раскрытые соединения или другие лекарственные препараты, при этом сочетание лекарственных средств более безопасно и более эффективно, чем любое лекарственное средство в отдельности. Подобный(ые) другой(ие) препарат(ы) можно вводить способом и в количествах, обычно используемых для указанных целей, одновременно или последовательно с соединением по настоящему изобретению. В том случае, когда соединение по настоящему изобретению используют одновременно с одним или несколькими другими лекарственными средствами, то предпочтительной является фармацевтическая композиция в виде стандартной лекарственной формы, содержащей подобные другие лекарственные средства и раскрытое соединение. Тем не менее, комбинированная терапия также может включать лечение, при котором раскрытое соединение и одно или несколько других лекарственных средств вводят согласно разным перекрывающимся режимам дозирования. Также предполагается, что при использовании в комбинации с одним или несколькими другими активными ингредиентами раскрытые соединения и другие активные ингредиенты могут быть использованы в более низких дозах, чем в том случае, когда каждый из них применяется по отдельности.
Таким образом, фармацевтические композиции включают такие фармацевтические композиции, которые содержат один или несколько других активных ингредиентов в дополнение к соединению по настоящему изобретению.
Приведенные выше комбинации включают комбинации раскрытого соединения не только с одним другим активным соединением, но также с двумя или несколькими другими активными соединениями. Аналогично, раскрытые соединения могут быть использованы в комбинации с другими лекарственными средствами, которые используют с целью предупреждения лечения, устранения, улучшения или уменьшения риска заболеваний или состояний, для которых пригодны раскрытые соединения. Подобные другие лекарственные средства можно вводить способом и в количестве, обычно используемом для указанных целей, одновременно или последовательно с соединением по настоящему изобретению. В том случае, когда соединение по настоящему изобретению используют одновременно с одним или несколькими другими лекарственными средствами, то предпочтительной является фармацевтическая композиция в виде стандартной лекарственной формы, содержащей подобные другие лекарственные средства и раскрытое соединение. Соответственно фармацевтические композиции включают такие фармацевтические композиции, которые также содержат один или несколько других активных ингредиентов в дополнение к соединению по настоящему изобретению.
Массовое отношение раскрытого соединения ко второму активному ингредиенту может меняться и будет зависеть от эффективной дозы каждого ингредиента. В общем случае используют эффективную дозу каждого из ингредиентов. Так, например, когда соединение по настоящему изобретению объединяют с другим агентом, массовое соотношение раскрытого соединения к другому агенту, как правило, меняется в диапазоне от приблизительно 1000:1 до приблизительно 1:1000, предпочтительно меняется от приблизительно 200:1 до приблизительно 1:200. Комбинация соединения по настоящему изобретению и других активных ингредиентов, как правило, также попадает в указанный выше диапазон, однако в каждом случае необходимо использовать эффективную дозу каждого активного ингредиента.
В подобных комбинациях раскрытое соединение и другие активные агенты можно вводить по отдельности или в сочетании друг с другом. Кроме того, введение одного элемента можно осуществить до, одновременно или после введения другого(их) агента(ов).
Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут использоваться самостоятельно или в комбинации с другими агентами, для которых известно, что они оказывают благотворное влияние на симптомы болезни субъекта, или с другими препаратами, оказывающими влияние на рецепторы или ферменты, которые либо повышают эффективность, безопасность, удобство или снижают нежелательные побочные эффекты или токсичность раскрытых соединений. Соединение по настоящему изобретению и другой агент могут вводиться одновременно либо в качестве сопутствующей терапии, либо в виде фиксированной комбинации.
В соответствии с одним аспектом соединение можно применять в сочетании с противоопухолевыми терапевтическими средствами или другими известными терапевтическими агентами.
При лечении состояний, которые требуют ингибирования или снижения активности Ε8Ό, подходящий уровень дозировки обычно составляет приблизительно от 0,01 до 1000 мг на кг массы тела пациента в день, которую можно вводить в виде одной или нескольких доз. Предпочтительно уровень дозировки составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 250 мг/кг в день, более предпочтительно от приблизительно 0,5 до приблизительно 100 мг/кг в день. Подходящий уровень дозировки может составлять приблизительно от 0,01 до 250 мг/кг в день, приблизительно от 0,05 до 100 мг/кг в день или приблизительно от 0,1 до 50 мг/кг в день. Внутри указанного диапазона доза может составлять от 0,05 до 0,5; от 0,5 до 5 или от 5 до 50 мг/кг в день. Для перорального введения композиции предпочтительно представлены в форме таблеток, содержащих от 1,0 до 1000 мг активного ингредиента, в частности 1,0, 5,0, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 750, 800, 900 и 1000 мг активного ингредиента, с це- 32 026389 лью симптоматического подбора дозы для пациента, подлежащего лечению. Соединения могут быть введены по схеме принятия лекарств от 1 до 4 раз в день, предпочтительно 1 или 2 раза в день. Указанную схему принятия лекарственного средства можно регулировать с тем, чтобы вызвать оптимальную терапевтическую реакцию. Тем не менее, следует понимать, что конкретный уровень дозы и частота дозировки для любого конкретного пациента может изменяться и будет зависеть от различных факторов, включающих активность конкретного используемого соединения, метаболическую стабильность и продолжительность действия указанного соединения, возраст, массу тела, общее состояния здоровья, пол, диету, схему и время введения, скорость выведения из организма, комбинацию лекарственных средств, серьезность конкретного состояния и пациента, лечение которого проводится.
Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способам ингибирования или снижения активности Ь8И по меньшей мере в одной клетке, при этом указанные способы включают стадию контактирования по меньшей мере одной клетки по меньшей мере с одним соединением по настоящему изобретению в количестве, эффективном для регулирования или активации ответной активности Ь8И, например Ь8И1 или Ь8И2 по меньшей мере в одной клетке. В соответствии с еще одним аспектом клетка является клеткой млекопитающего, например человека. В соответствии с еще одним аспектом клетку выделяют у субъекта перед стадией контактирования. В соответствии с еще одним аспектом контактирование осуществляют путем введения субъекту лекарственного средства.
a. Лечение расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способу лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток у млекопитающего, при этом указанный способ включает стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества по меньшей мере одного раскрытого соединения или продукта раскрытого способа получения соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или его полиморфной модификации и, тем самым, лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток.
В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой профилактически эффективное количество.
В соответствии с другим аспектом млекопитающим является человек. В соответствии с еще одним аспектом способ дополнительно включает стадию идентификации млекопитающего, нуждающегося в лечении расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом, у млекопитающего диагностируют необходимость лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток, перед стадией введения лекарственного средства.
В соответствии с другим аспектом расстройство, вызванное неконтролируемой пролиферацией клеток, связано с дисфункцией деметилазы гистонов. В соответствии с еще одним аспектом деметилазой гистонов является лизин-специфичная деметилаза гистонов. В соответствии с еще одним аспектом лизин-специфичная деметилаза гистонов представляет собой Ь8И1. В соответствии с еще одним аспектом лизин-специфичная деметилаза гистонов представляет собой Ь8И2.
В соответствии с другим аспектом расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток, является онкологическое заболевание. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лейкоз. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является саркома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой солидную опухоль. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лимфома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из хронического лимфолейкоза, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, В-клеточной неходжкинской лимфомы и большеклеточной лимфомы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака крови, мозга, мочеполового тракта, желудочно-кишечного тракта, толстого кишечника, прямой кишки, молочной железы, печени, почки, лимфатической системы, желудка, легких, поджелудочной железы и кожи. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака легких и печени. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака молочной железы, яичника, яичек и предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак молочной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичника. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичек.
b. Снижение активности деметилазы гистонов.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способу снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества по меньшей мере одного раскрытого соединения или продукта раскрытого способа получения соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или его полиморфной модификации или ее фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации, и тем самым приводит к снижению активности деметилазы гистонов у млекопитающего.
- 33 026389
В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой профилактически эффективное количество.
В соответствии с другим аспектом млекопитающим является человек. В соответствии с еще одним аспектом способ дополнительно включает стадию идентификации млекопитающего, нуждающегося в снижении активности деметилазы гистонов. В соответствии с еще одним аспектом указанному млекопитающему перед стадией введения лекарственного средства диагностирована необходимость снижения активности деметилазы гистонов.
В соответствии с другим аспектом деметилазой гистонов является лизин-специфичная деметилаза гистонов. В соответствии с еще одним аспектом лизин-специфичной деметилазой гистонов является Ь3О1. В соответствии с еще одним аспектом лизин-специфичной деметилазой гистонов является Ь3О2.
В соответствии с другим аспектом необходимость в снижении активности деметилазы гистонов связана с дисфункцией деметилазы гистонов. В соответствии с еще одним аспектом дисфункция деметилазы гистонов связана с расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом способ включает стадию идентификации млекопитающего, нуждающегося в лечении расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом указанному млекопитающему до стадии введения лекарственного средства, диагностирована необходимость лечения расстройства, связанного с неконтролируемой пролиферацией клеток.
В соответствии с другим аспектом расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток, является онкологическое заболевание. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лейкоз. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является саркома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой солидную опухоль. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лимфома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из хронического лимфолейкоза, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, В-клеточной неходжкинской лимфомы и большеклеточной лимфомы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака крови, мозга, мочеполового тракта, желудочно-кишечного тракта, толстого кишечника, прямой кишки, молочной железы, печени, почки, лимфатической системы, желудка, легких, поджелудочной железы и кожи. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака легких и печени. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака молочной железы, яичника, яичек и предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак молочной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичника. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичек.
с. Снижение активности деметилазы гистонов в клетках.
В соответствии с одним из аспектов настоящее изобретение относится к способу уменьшения активности деметилазы гистонов по меньшей мере в одной клетке, причем указанный способ включает стадию контактирования по меньшей мере одной клетки с эффективным количеством по меньшей мере одного раскрытого соединения или продукта раскрытого способа получения соединения или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации или ее фармацевтически приемлемой соли, гидрата, сольвата или полиморфной модификации, и, тем самым, уменьшения активности деметилазы гистонов в клетке.
В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. В соответствии с еще одним аспектом эффективное количество представляет собой профилактически эффективное количество.
В соответствии с другим аспектом клетка является клеткой млекопитающего. В соответствии с еще одним аспектом клетка является клеткой человека. В соответствии с еще одним аспектом контактирование осуществляют путем введения лекарственного средства млекопитающему. В соответствии с еще одним аспектом способ дополнительно включает стадию идентификации млекопитающего, которому необходимо снижение активности деметилазы гистонов в клетке. В соответствии с еще одним аспектом млекопитающему перед стадией введения лекарственного средства диагностирована необходимость снижения активности деметилазы гистонов.
В соответствии с другим аспектом деметилазой гистонов является лизинспецифичная деметилаза гистонов. В соответствии с еще одним аспектом лизинспецифичной деметилазой гистонов является Ь3О1. В соответствии с еще одним аспектом лизинспецифичной деметилазой гистонов является Ь3О2.
В соответствии с другим аспектом потребность в снижении активности деметилазы гистонов в клетке связана с расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток. В соответствии с еще одним аспектом расстройством, вызванным неконтролируемой пролиферацией клеток, является онкологическое заболевание. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лейкоз. В соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является саркома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой солидную опухоль. В
- 34 026389 соответствии с еще одним аспектом онкологическим заболеванием является лимфома. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из хронического лимфолейкоза, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, В-клеточной неходжкинской лимфомы и большеклеточной лимфомы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака крови, мозга, мочеполового тракта, желудочно-кишечного тракта, толстого кишечника, прямой кишки, молочной железы, печени, почки, лимфатической системы, желудка, легких, поджелудочной железы и кожи. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака легких и печени. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание выбрано из рака молочной железы, яичника, яичек и предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак молочной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичника. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак предстательной железы. В соответствии с еще одним аспектом онкологическое заболевание представляет собой рак яичек.
2. Приготовление лекарственного средства.
В соответствии с одним аспектом настоящее изобретение относится к способу приготовления лекарственного средства для ингибирования активности деметилазы гистонов у млекопитающего, который включает объединение терапевтически эффективного количества раскрытого соединения или продукта раскрытого способа с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.
Р. Экспериментальная часть.
Следующие примеры приведены для того, чтобы полностью раскрыть для специалистов в данной области техники и описать, каким образом получаются и оцениваются заявленные в настоящем описании соединения, композиции, изделия, устройства и/или способы, и они приведены лишь в качестве примеров по настоящему изобретению и не предназначены для ограничения объема того, что авторы настоящего изобретения считают своим изобретением. Были предприняты усилия для обеспечения точности в отношении чисел (например, количеств, температуры и т. д.), но следует учитывать некоторые ошибки и отклонения. Если не указано иное, части даны по массе, температура приведена в °С или представляет собой температуру окружающей среды, а давление равно или близко к атмосферному.
В следующих примерах проиллюстрировано несколько способов получения соединений по настоящему изобретению. Исходные вещества и требуемые промежуточные соединения в некоторых случаях коммерчески доступны или же могут быть получены в соответствии с описанными в литературе способами или как указано в настоящем описании.
Синтезируют следующие отдельные соединения по настоящему изобретению. Примеры приведены в настоящем описании для иллюстрации изобретения, и их не следует считать каким-либо образом ограничивающими изобретение. Примеры обычно приведены в форме свободного основания в соответствии с конвенцией IυРΑС о присвоении наименований. Тем не менее, некоторые из примеров были получены или выделены в форме соли.
Как указано, некоторые из примеров получают в виде рацемических смесей одного или нескольких энантиомеров или диастереомеров. Соединения могут быть разделены специалистом в данной области с целью выделить индивидуальные энантиомеры. Разделение можно осуществить путем конденсации рацемической смеси соединений с энантиомерно чистым соединением с образованием смеси диастереомеров, с последующим разделением индивидуальных диастереомеров стандартными методами, такими как дробная кристаллизация или хроматография. Рацемическую или диастереомерную смесь соединений также можно прямо разделить с помощью хроматографических методов, используя хиральные стационарные фазы.
1. Общие химические вещества и способы.
Все чистые для анализа или безводные реагенты приобретают из коммерческих источников и используют без дополнительной очистки. Растворители имеют квалификацию чистый для анализа и не содержат воду (δίβΐηα-ΑΙύπαΙι). Специальные химические вещества и необходимые для построения блоки, которые получают от нескольких поставщиков, имеют наивысший показатель чистоты (всегда >95%).
ЯМР-спектры регистрируют на приборе Уапап ИпИу 400 с 5 мм широкополосным датчиком, используя стандартные последовательности импульсов. Химические сдвиги (8) приведены в миллионных долях (м.д., ррт) в области слабого поля от сигналов растворителей, используемых в качестве стандартов. Константы взаимодействия (величины I) приведены в Гц.
Масс-спектры регистрируют на масс-спектрометре Рштдап ЬСО Оио ЬСМ8, снабженном ионной ловушкой, в режиме электрораспыления (ΕδΙ). Все образцы анализируют методом положительного ΕδΙΜδ; приведены отношения массы к заряду (т/ζ) протонированного молекулярного иона.
ВЧ-активируемые реакции проводят на установке Вю1аде ΙηίΙίαΙοΓ 2.5 при различных значениях мощности.
Реакцию гидрирования проводят на стандартном аппарате гидрирования Парра.
За ходом реакции следят либо с помощью метода ВЭЖХ, либо ТСХ. Когда контроль осуществляют с помощью ТСХ, анализ реакций проводят на гибких пластинках Вакег, покрытых слоем силикагеля, содержащего флуоресцентный индикатор, толщиной 2 00 мкм. Препаративную ТСХ проводят на пласти- 35 026389 нах 20x20 см ЛпаИесЬ ип1р1а1е8. покрытых слоем силикагеля, содержащего флуоресцентный (УФ 254) индикатор, толщиной 1000 или 2000 мкм. Смеси для элюирования представлены в виде отношения об./об. Пятна визуализуют ультрафиолетом.
Флэш-хроматографию проводят на приборе Те1ебупе 18то ΕοιΜίΡΜΗ РР 200, используя С-18 колонки с силикагелем Кеб18ер Κί Οο16 или 8!апбагб с нормальной или обращенной фазой соответствующего размера. Неочищенные соединения адсорбируются на силикагеле 70-230 меш 40А (для нормальной фазы) или СеШе 503 (для обращенной фазы) и помещают в твердые картриджи. Смеси для элюирования представлены в виде отношения об./об.
2. Молекулярное моделирование и методы виртуального скрининга.
При проведении всех расчетов используют ΡΌΒ ГО 2Ζ5υ для структурных координат Ь8О1. Применяют программные методы виртуального докинга 1СМ, ОМе и Οο16. Структуру белка получают путем 3Ό протонирования, удаления молекул воды и минимизации энергии, используя силовое поле 1СМ и зависимый от расстояния диэлектрический потенциал со среднеквадратичным значением градиента, равным 0,1; тяжелые атомы в белке сохраняют фиксированными, а остатки гистидина считают нейтральными. При проведении расчетов методом виртуального скрининга берут параметры по умолчанию (если явно не указано иное), используя в качестве функций оценки показатели 1СМ и ОМе соответственно. В обоих случаях РАО определяют как лиганд, а область активного участка определяют как сферу радиусом 12А вокруг связанного РАО в комплексе с Ь8О1.
Для подтверждения точности и эффективности применяемых для докинга методик в качестве положительного контроля используют динуклеотидный фрагмент аденина кофактора РАО, фрагмент флавина и известные ингибиторы Б8О1 (набор ловушек). Проводят две отдельные серии докинга, используя программы докинга 1СМ и ОМе; для повторной оценки используют докинг ООЬО.
Базу данных для соединений получают с помощью Ыдртер 2.1.23 (8сЬгобш§ет, ЬЬС, Ые\у ΥοιΊν Ые\у ΥοιΊ<). Проводят два цикла виртуального скрининга, включая НТУ8 и докинг стандартной точности (8Р). Первые 10000 соединений, упорядоченных в соответствии с ОМе, сохраняют и используют в дополнительных экспериментах по докингу, используя докинг 1СМ. Окончательный набор из 2000 удачных попыток отбирают на основе показателей 1СМ, и индивидуальные соединения исследуют визуально с целью проверить расположения докинга и взаимодействие между лигандами и Ь8О1. Согласованные функции оценки ООБО используют затем для повторной оценки указанных 2000 удачных попыток, выбранных из ОМе и 1СМ. Наконец, приобретают (если они доступны) или синтезируют 121 соединение для изучения ингибирования Ь8О1.
3. Моделирование молекулярной динамики.
Все расчеты проводят, используя силовое поле АМВЕК ίί998Β (Ήοπκιί V. е! а1. , Рго1еЙ18 2006, 65 (3), 712-25) для Ь8О1, общее силовое поле АтЬет (крюк; см. Уапд ί. е! а1., ί. ί.’οιηριιΙ. СЬет. 2004, 25 (9), 1157-74) для соединения 12, а для воды используют модель Т1Р3Р (Мдете!! У.Ь., Мигей οί СЬенйса1 РЬу8Ю8 1982, (77), 4156-4163). С помощью расчетов аппроксимируют электростатические взаимодействия дальнего порядка, используя методику по методу суммирования электростатических потенциалов Эвальда (РМЕ) (Е88тапп и. е! а1., Шита! οί СЬетюа1 РЬу8Ю8 1995, (103), 8577-8593; Оатбеп Т. е! а1., Мигей οί СЬетюа1 РЬу8Ю8 1993, (98), 1008 9-10092). Используя ЬЕаР, типы связывания, полученные из докинга 1СМ в комплексе с Ь8О1, сольватируют до нейтрального заряда, и вначале проводят минимизацию комплексов с помощью РМЕМО (Са8е Ό.Α. е! а1., АМВЕК11, 8ап Ρππκί8Μ, 2010). После минимизации проводят 200 пс моделирование молекулярной динамики в условиях отсутствия ограничений с использованием отсечки невалентных взаимодействий 9А для обоих режимов связывания, поддерживая постоянное давление в условиях нестационарных границ на уровне 1 атм и изотропное масштабирование координат с временем релаксации 2 пс. Для напряженных связей, включающих атом водорода, используют 8НАКЕ, а динамику Ланжевена используют для регулирования температуры (Са8е Ό.Α. е! а1., АМВЕК11, 8ап Ρππκί8^, 2010), которую поддерживают на уровне 300 К. Относительные свободные энергии связывания с целью сравнений двух моделей связывания рассчитывают, используя ММРВ8А.ру9 с 100 кадров с интервалом 1 пс, начиная либо с 1 пс, либо с 101 пс по линии движения.
4. Результаты виртуального скрининга.
Первые кристаллические структуры Ь8О1, объясняющие критические структурные особенности, недавно были получены 8ΡινΐΌροιι1ο8 и соавт. (Ыа!. 81гнс1. Мο1. Βίο1. 2006, 13(7) :626-32; Рго!еш Эа1а Вапк οτ РОВ ГО 2Н94; см. Μρ://ννν.ννρ6Κοτ§/), Υ-пд и соавт. (^1. Се11 2006, 23 (3), 377-87; РОВ ГО 21У5) и СЬеп и соавт. (Ргос. Ыа!1. Асаб. 8а и8А 2006, 103 (38), 13956-61; РОВ ГО 2НКО). Данные структуры 2,9А, 2,57А и 2,8А соответственно указывают на сильно отрицательно заряженную субстратсвязывающую полость, достаточно большую, чтобы вместить Ν-концевой хвост гистона Н3. Кроме того, было установлено, что Ν-концевой домен 8У1КМ и вставки в основном каталитическом домене, получившем название Шует □οηκ-πιτ представляют собой структурные фрагменты, необходимые для ферментативной активности и взаимодействия с кофакторами, такими как СсКЕ8Т. Для приведенных в настоящем описании исследований была использована структура, РОВ ГО 2Ζ5υ, со связанным транилципромином ингибитора Ь8О1, с целью проведения расчетов, в том числе виртуального скрининга, докинга и молекулярной динамики (М1та8и 8. е! а1., ВюсЬет. ВюрЬу8. Ке8. Сетти. 2008, 366 (1), 15-22). Для
- 36 026389 оценки химического пространства вне транилципромина и полиаминовых производных был использован НТУ8 из библиотеки собственной разработки. Библиотека выстроена из общедоступных библиотек разработчиков, содержащих в общей сложности приблизительно 13 миллионов соединений, с помощью фильтра, разработанного авторами настоящего изобретения. Соединения отфильтровывают, используя правило Липински из пяти, за исключения лишь 62000 соединений. Кроме того, были удалены структурно избыточные соединения, так что полученная библиотека содержит разнообразный, но управляемый набор из приблизительно 2 миллионов соединений. Перед скринингом с помощью модуля ЫдРгер в 8сЬгойшдег 8ш1е получают соединения, а также встроенный препарат Ιί','Μ трехмерных (3Ό) лигандов, так что используют физиологически соответствующие протонированные состояния.
Подготовленные лиганды затем подвергают докингу с тремя различными участками на Б8Э1; участок ΡΑΌ расположен в домене аминоксидазы и адениндинуклеотиде и флавиновых фрагментах указанного кармана. Методики докинга, используемые как в Ιί','Μ. так и в СПйе. осуществляют для ΡΑΌ, адениндинуклеотида, флавиновых фрагментов и известных ингибиторов Б8Э1 с тем, чтобы проверить точность. В дополнение к рейтингам алгоритма докинга используют визуальный контроль результатов докинга с тем, чтобы оценить позиции связывания, соответствующее положение и ориентации. Функции оценки Κ.'Μ и СПйе совместно способны правильно идентифицировать известные ингибиторы из первых 2% использованного набора ловушек. Для повторной оценки используют ΟΟΌΌ, и функция приспособленности ΟΟΌΌ дает аналогичное накопление.
Виртуальный скрининг проводят по отношению к ΡΑΌ-связывающему карману Ό8Ό1, используя разработанную методику докинга и базу данных из 2 миллионов соединений. Первые 10000 соединений отбирают по обеим функциям оценки Ιί','Μ и СПйе для проведения дальнейшего анализа. Несколько сходных соединений оценивают аналогичным образом по двум алгоритмам; указанную избыточность отфильтровывают. Кроме того, проводят визуальный осмотр с целью отфильтровать сходные соединения и увеличить разнообразие окончательного выбора. Визуальный анализ позволяет также идентифицировать ключевые взаимодействия внутри ΡΑΌ-связывающего кармана Ό8Ό1. К ним относятся водородные связи с 8ег289, Лг§310 и Лгд316, ван-дер-Ваальсовы взаимодействия с Уа1590 и Ьеи625 и пвзаимодействия с Тгр756. Кроме того, соединения с гидроксильными и гидрофобными электроноакцепторными группами, видимо, показывают повышенное накопление в первоначальных результатах докинга. ΡΑΌ-связывающий карман Ό8Ό1 представляет собой глубокую и узкую щель во внутренней части белка и окружен гидрофобными аминокислотными остатками. Таким образом, гидрофобный характер соединений может играть важную роль в случайном попадании соединения на активный участок.
На основе указанных выше критериев отбора получают 121 структурно различное соединение и подвергают биохимическому скринингу по отношению к Ό8Ό1. Биохимический анализ, как описано в экспериментальной части, определяет количество Н2О2, образовавшегося при окислительном деметилировании пептидного субстрата. Из 121 соединения идентифицируют серию родственных соединений, которые показывают высокую активность в биохимическом анализе. Оценочные результаты докинга и сопутствующие результаты биохимического анализа для серии представлены в табл. 1, 2 и 6-9.
Из десяти активных соединений в табл. 1 (и связанных с ней таблицах, где представлены биохимические и клеточные данные, табл. 6, 8, и 9), которые были обнаружены с помощью методов виртуального скрининга, соединения 1, 2, 4 и 5, например, показывают сходные типы связывания внутри ΡΑΌсвязывающего участка Ό8Ό1. Кроме того, оценки докинга для соединений 1, 2, 4 и 5 хорошо коррелируют с наблюдаемой биохимической активностью. Указанные результаты свидетельствуют о том, что могут быть получены имеющие лучшие свойства ингибиторы, нацеленные на адениндинуклеотидный карман в области аминоксидазы Ό8Ό1.
Оценки по методу СПйе позволяют делать прогнозы и хорошо коррелирует с соединениями, где арил содержит заместители п-ОН или м-С1 (соединения 1 и 5). Как видно из приведенных исследований, допустимы гидрофобные электроноакцепторные группы, такие как -С1, в то время как небольшие алкильные заместители, такие как метил (например, соединение 8), или содержащее конденсированную бициклическую систему соединение 10 имеют меньшую активность. Введение любых донорных групп, в частности функциональной группы -ОСН3, во вторую позицию приводит к потере активности вследствие отсутствия О1у314 Н-связывающих взаимодействий (примером является соединение 6). Отсутствие биохимической активности у соединения 6 легко предсказуемо из оценок докинга, при этом Κ.'Μ и СПйе дают величины энергии -18,39 и -6,63 ккал/моль соответственно. При последующем анализе докинга была идентифицирована дополнительная серия бензгидразиновых соединений, включающих гидразин -С метил или арил 4-замещенные сульфонсодержащие соединения, примером которых является, видимо, попавшее в цель соединение 9, которое демонстрирует сильную Ь8О1-ингибирующую активность с величиной 1С50, равной 19 нМ. Низкие оценки докинга для соединения 9, в первую очередь, вызваны смещением положения 2-ОН в арильном цикле. Соединение 9 с сульфон/морфолиновым заместителем было выбрано в качестве основы для дальнейшей оптимизации, в частности, благодаря его химической стабильности.
Тип связывания соединения 12 с сульфоном/морфолином с положениями докинга, которые предсказаны с помощью Κ.Μ, показан на фиг. 1. В данной модели фенольная группа хорошо вписывается в
- 37 026389 карман, составленный из остатков 8ег289, О1у314 и Агд316. Центральная карбонильная группа, повидимому, участвует в сильных Н-связывающих взаимодействиях с аминогруппой в А310, а атом кислорода морфолина демонстрирует Н-связывающие взаимодействия с Уа1590. Указанные наборы водородсвязывающих взаимодействий наблюдались также в экспериментах по докингу с использованием ОШе и ООЬЭ. Дополнительные эксперименты показывают, что морфолинзамещенный арильный цикл участвует π-π взаимодействиях с остатками Тгр756, в то время как атом кислорода морфолина сохраняет Н-связь с Уа1590.
Химическая оптимизация нацелена также на разработку соединений, содержащих гетероарильные циклы с любой стороны соединения 12. Расчетные модели, использующие данные результаты, генерируют разнообразные химически возможные структуры, из которых замещенный пиридин идентифицирован как подходящий фрагмент, способный взаимодействовать с 8ег289, О1у314 и Агд316, а также окружающие остатки и идеальные свойства. Отдельным примером является соединение 24, которое обладает потенциальной активностью по отношению к Ρ8Ώ1 (28 нМ), а также демонстрирует тип связывания, аналогичный типу связывания соединения 12 (см. фиг. 2).
Многие из примерных соединений содержат С-алкилзамещенный гидразин для повышения метаболической устойчивости серии. Однако более громоздкая группа, например этильная группа в соединении 21, не очень хорошо подходит к связывающему карману, на что указывает различие в биохимической активности соединений 12 и 21. Замещение арила метилсульфоном (соединение 25) и замещение морфолиновым циклом (соединение 12) увеличивает биохимическую эффективность приблизительно на порядок по сравнению с соединением 11. Добавление лишь морфолинового цикла сохраняет некоторую биохимическую активность, что иллюстрирует соединение 23. Замена сульфоно-морфолина на сульфоно-Νдиметил также поддерживает биохимическую активность, что иллюстрирует соединение 18. Кроме того, было показано, что замещение группы 2-ОН атомом хлора не является удовлетворительным, и значительное снижение активности наблюдается между соединениями 12 и 16. Результаты для соединения 24 показывают, что использование замещенного пиридина удовлетворяет фермент, однако различные другие замещения и гетероциклы обычно приводят к снижению биохимической активности, как установлено для соединений 13, 14, 15, 17, 19, 20 и 22.
Многие из представленных в табл. 2 соединений содержат С-алкил гидразин для повышения метаболической стабильности серии. Однако более громоздкая группа, например этильная группа в соединении 21, не очень хорошо подходит к связывающему карману, на что указывает различие в биохимической активности соединений 12 и 21. Замещение арила метилсульфоном (например, в соединении 25) и замещение морфолиновым циклом (соединение 12) увеличивает биохимическую эффективность приблизительно на порядок по сравнению с соединением 11. Добавление гетероцикла, например морфолинового цикла, сохраняет биохимическую активность, что иллюстрирует соединение 23. Замена сульфономорфолина на сульфоно-^диметил также поддерживает биохимическую активность, что иллюстрирует соединение 18. Кроме того, было показано, что замещение группы 2-ОН атомом хлора не является удовлетворительным, на что указывает значительное снижение активности между соединениями 12 и 16. Как указано выше, результаты для соединения 24 показывают, что использование замещенного пиридина подходит ферменту.
Дальнейший анализ показывает, что гидроксильная группа соединения 12 связана с повышенной биохимической активностью, в частности, когда данный заместитель замещен атомом хлора (соединение 16), активность снижается.
Таблица 1
№ Структура Оценка 1СМ Оценка СЫЗе Соответствие Со13
1 ГГ°Н ° α,ίΛχ -42,25 -8, 14 56, 26
2 ггон ° -42,25 -7,92 58,21
3 гуон ° ^Ά)η -21,91 -7,87 51,29
4 п -37,77 -8, 64 57, 69
- 38 026389
5 ^>х,он ОЦАр С1 -36, 3 -8,84 47, 98
β ,ο _ Κό сХ^-А^ о нРлЛ -18,39 -β, 63 49, 93
7 СТ н? Ч Л с,М-эАМ' 0 НрЛ> -8, 16 -7,21 41, 86
δ ΎΊ « ? т О ЦЦ .Ν/γγ¥/ Й НРХД 0 -8,5 -β, 81 52, 19
9 ,χ,οη _ <'о ПТ Η Η 4 Ν Π ΰ нрХ/ 0 -24 -6,26 43, 26
10 22 ί? ч О От κθχ° -20, 97 -6, 14 46, 64
Таблица 2
- 39 026389
24 ггон г -37,11 -9,23 51, 65
25 Γ¥υΗ ° О -39,14 -8,21 49, 11
5. Результаты моделирования молекулярной динамики.
Моделирование методом молекулярной динамики (ΜΌ) проводят для двух различных положений докинга соединения 12, чтобы определить, наблюдается ли предпочтение одного положения докинга, по сравнению с другим. Эти данные могут дать более полную информацию о том, какие взаимодействия играют роль в результатах, полученных для синтезированных соединений. Результаты докинга показывают более высокий рейтинг положения, когда соединение 12 связано с динуклеотидным связывающим карманом посредством прямых Н-связывающих взаимодействий с 8ег289 или Άγ§316 за счет гидроксильного фрагмента (тип связывания 1, см. фиг. 3 и табл. 3). Тем не менее, существует еще одно положение, имеющее благоприятный рейтинг для морфолинового цикла соединения 12, взаимодействующего с 8ег289 и Άγ§316 (тип связывания 2, см. фиг. 3 и табл. 3).
Для оценки энергетики связывания для обоих предсказанных типов связывания используют моделирование методом молекулярной динамики с учетом соответствия ΆΜΒΕΚ. Моделирование для типа связывания 1 показывает взаимодействие π-сопряженных электронов между соединением 12 и Άγ§ 316, а также потенциальную возможность образования водородных связей между гидроксилом и 8ег289. Анализ типа связывания 2 указывает на потенциально возможное π-π взаимодействие между соединением 12 и Τιρ756 с более благоприятными водородными связями с Άγ§310 и Άγ§316. Кроме того, расчет показывает, что тип связывания 1 должен иметь водородные связи с Уа1590, в то время как второй тип связывания включает ван-дер-Ваальсовы взаимодействия с участием атома хлора. Анализ ΜΜΡΒ8Ά с конечным 100 пс моделированием показывает, что по предварительной оценке тип связывания 2 имеет свободную энергию связывания —40,8 ккал/моль, что приблизительно на 20 ккал/моль более благоприятно, чем —21,0 для типа связывания 1. Первое 100 пс моделирование, вероятно, частично отражает равновесие в комплексе, так что расчетные свободные энергии связывания не столь благоприятны. Этот вывод контрастирует с рейтингом положений связывания в процессе докинга. Возможно, что указанное различие возникает из-за различий в структуре белка во время докинга и ΜΌ, при этом жесткую структуру используют для повышения скорости методики докинга, а гибкую структуру используют для ΜΌ.
Таблица 3
Соединение № 12 (Тип связывания 1) Соединение № 12 (Тип связывания 2)
1-100 пс: ДС-связывание (ккал/моль) -20,2154 -32,9117
101-200 пс: ДО-связывание (ккал/моль) -21,0263 -40,8046
150-200 пс: ΚΜ5Ό лиганда (А) 0,394 1, 560
6. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)бензогидразида
1-(5-Хлор-2-гидроксифенил)этанон (100 мг, 0,586 ммоль) и бензогидразид (80 мг, 0,586 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. После охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (90 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 7,95 (м, 2Н), 7,67-7,62 (м, 2Н), 7,56 (м, 2Н) , 7,35 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,8 Гц), 6,95 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 3,35 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 289,0 [М+Н]+.
7. Получение (Е)-№-(1-(2,6-дигидроксифенил)этилиден)бензогидразида
1-(2,6-Дигидроксифенил)этанон (100 мг, 0,657 ммоль) и бензогидразид (89 мг, 0,657 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового облучения до 120°С в течение 30 мин. После охлаждения
- 40 026389 растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (100 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 7,59 (м, 2Н), 7,49 (м, 1Н), 7,39 (м, 2Н), 7,11 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 6,45 (м, 2Н), 2,35 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 271,1 [М+Н]+.
8. Получение 3-(морфолиносульфонил)бензойной кислоты
3-(Хлорсульфонил)бензойную кислоту (250 мг, 1,133 ммоль) добавляют к морфолину (99 мг, 1,133 ммоль) в присутствии карбоната калия (313 мг, 2,266 ммоль) в ТГФ (5 мл) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивают в течение 12 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (160 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, СО3ОП): δ 8,34 (м, 1Н) , 8,32 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,99 (м, 1Н) , 7,76 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,70 (м, 4Н), 2,98 (м, 4Н). Ε8Ι-Μ8: 272,0 [М+Н]+.
9. Получение метил-3-(морфолиносульфонил)бензоата
3-(Морфолиносульфонил)бензойную кислоту (100 мг, 0,369 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение ночи в метаноле в присутствии концентрированной Н28О4 в качестве катализатора при 65°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества беловатого цвета (60 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,38 (т, 1Н, 1=1,6 Гц), 8,27 (м, 1Н), 7,92 (м, 1Н), 7,64 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,95 (с, 3Н), 3,73 (м, 4Н), 3,00 (м, 4Н). Ε8Ι-Μ8: 286,1 [М+Н]+.
10. Получение 3-(морфолиносульфонил)бензогидразида.
Метил-3-(морфолиносульфонил)бензоат (120 мг, 0,421 ммоль) добавляют к гидразину (17,52 мг, 0,547 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при 65°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения реакционной смеси растворитель удаляют в вакууме, а соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества беловатого цвета (90 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,16 (м, 1Н), 8,12 (м, 1Н) , 8,04 (м, 1Н), 7,85 (м, 1Н), 7,63 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 4,19 (м, 2Н), 3,71 (м, 4Н), 2,97 (м, 4Н). Ε8ΙΜ8: 286,1 [М+Н]+.
11. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(морфолиносульфонил)бензогидразида
1-(5-Хлор-2-гидроксифенил)этанон (20 мг, 0,117 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (33,5 мг, 0,117 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. После охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (16 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, СО3ОП): δ 8,26 (м, 1Н), 8,17 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,92 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,72 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,48 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,22 (м, 1Н), 6,91 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,72 (м, 4Н), 3,01 (м, 4Н), 2,43 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 438,1 [М+Н]+.
12. Получение (Е)-№-(3-хлор-2-фторфенил)этилиден)-3-(морфолиносульфонил)бензогидразида
1-(3-Хлор-2-фторфенил)этанон (20 мг, 0,116 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (33,1 мг, 0,116 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. По- 41 026389 сле охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (22 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 9,43 (с, 1Н), 8,37 (м, 1Н), 8,16 (м, 1Н), 7,87 (д, 1Н, 1=7,2 Гц), 7,65 (м, 1Н), 7,41 (м, 1Н), 7,10 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,71 (м, 4Н), 2,95 (м, 4Н), 2,38 (с, 3Н). ЕЗ1-МЗ: 440,1 [М+Н]+.
13. Получение (Ε)-Ν'-( 1 -(2-хлорпиридин-4-ил)этилиден)-3 -(морфолиносульфонил)бензогидразида С1
1-(2-Хлорпиридин-4-ил)этанон (20 мг, 0,129 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (36,7 мг, 0,129 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. После охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией, получая указанное в заголовке соединение с выходом 60%. Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 9,43 (м, 1Н), 8,39 (м, 2Н), 8,15 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,93 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,70 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,52 (м, 1Н), 3,73 (м, 4Н), 3,02 (м, 4Н), 2,35 (с, 3Н). ЕЗ1-МЗ: 423,1 [М+Н]+.
14. Получение (Е) -№-(1-(2,5-дихлорфенил)этилиден)-3-(морфолиносульфонил)бензогидразида
1-(2,5-Дихлорфенил)этанон (20 мг, 0,106 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (30,2 мг, 0,106 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. После охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией, получая указанное в заголовке соединение с выходом 10 мг. Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,29 (м, 1Н), 8,09 (м, 1Н), 7,81 (м, 1Н), 7,57 (м, 1Н), 7,40 (м, 1Н), 7,26 (м, 2Н), 3,52 (м, 4Н), 2,91 (м, 4Н), 2,28 (с, 3Н). ЕЗ1-МЗ: 456,1 [М+Н]+.
15. Получение метил 4-гидразинил-3-(морфолиносульфонил)бензоата
Метил-4-фтор-3-(морфолиносульфонил)бензоат (30 мг, 0,099 ммоль) добавляют к гидразину (4,44 мг, 0,138 ммоль) в метаноле (8 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч при температуре 65°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. По завершении реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (20 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 8,15 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 8,03 (дд, 1Н, 1=2,4 и 9,2 Гц), 7,48 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 3,86 (с, 3Н), 3,67 (м, 4Н), 3,04 (м, 4Н). ЕЗ1-МЗ: 316,1 [М+Н]+.
16. Получение метил 4-фтор-3-(морфолиносульфонил)бензоата
4-Фтор-3-(морфолиносульфонил)бензойную кислоту (50 мг, 0,173 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение ночи в присутствии концентрированной серной кислоты (1,117 мг, 8,64 ммоль) в метаноле (8 мл) при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и продукт очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (20 мг) . Ή-ЯМР (400 МГц, СО3ОП): δ 8,42 (дд, 1Н, 1=2,0 и 6,4 Гц), 8,33 (м, 1Н), 7,49 (т, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,94 (с, 3Н), 3,71 (м, 4Н), 3,16 (м, 4Н).
17. Получение метил-3-бром-4-хлорбензоата о
3-Бром-4-хлорбензойную кислоту (200 мг, 0,849 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (5,49 мг, 0,042 ммоль) в метаноле (10 мл) при 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (130 мг) . 'Н-ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 8,29 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,91 (дд, 1Н, 1=2,0 и 8,4 Гц), 7,52 (д, 1Н,
- 42 026389
1=8,4 Гц), 3,92 (с, 3Н). Е8ЬМ8: 250,9 [М+Н]+.
18. Получение метил-3-^^-диметилсульфамоил)бензоата
3-^^-Диметилсульфамоил)бензойную кислоту (200 мг, 0,872 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение ночи в присутствии концентрированной серной кислоты (5,64 мг, 0,044 ммоль) в метаноле (10 мл) при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (125 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 8,42 (с, 1Н), 8,27 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,97 (д, 1Н, 1=7,2 Гц), 7,65 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,96 (с, 3Н), 2,74 (с, 6Н). Е8ЬМ8: 244,0 [М+Н]+.
19. Получение 3-бром-4-хлорбензогидразида
Метил-З-бром-4-хлорбензоат (120 мг, 0,481 ммоль) добавляют к гидразину (23,12 мг, 0,721 ммоль) в метаноле (8 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (30 мг). 1Н-ЯМР (400 МГц, С1)С1;): δ 8,02 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 7,60 (дд, 1Н, 1=2,0 и 8,0 Гц), 7,52 (д, 1Н, 1=8,0 Гц). Е8РМ8: 250,9 [М+Н]+.
20. Получение 3-(гидразинкарбонил)-Ц^диметилбензолсульфонамида
Метил-3-^^-диметилсульфамоил)бензоат (150 мг, 0,617 ммоль) добавляют к гидразину (29,6 мг, 0,925 ммоль) в метаноле (10 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения проводят контроль реакционной смеси с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме и продукт очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (60 мг) . Ή-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 8,11 (с, 1Н), 8,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,92 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,65 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 2,73 (с, 6Н). Е8РМ8: 244,0 [М+Н]+.
21. Получение (Е)-3 -бром-4-хлор-№-( 1 -(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)бензогидразида
3-Бром-4-хлорбензогидразид (30 мг, 0,120 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (20,51 мг, 0,120 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (15 мг). 1Н-ЯМР (400 МГц, ацетон-б6): δ 8,30 (с, 1Н), 7,98 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,73 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,61 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,29 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,4 Гц), 6,93 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 2,55 (с, 3Н). Е8РМ8: 402,9 [М+Н]+.
22. Получение (Е)-3-(2-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)гидразинкарбонил)-Ц^диметилбензолсульфонамида
3-(Гидразинкарбонил)-Ц^диметилбензолсульфонамид (50 мг, 0,206 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (35,1 мг, 0,206 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (15 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, ацетон-б6): δ 8,29 (м, 2Н), 8,01 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,83 (т, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,62 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,32 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,8 Гц), 6,96 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 2,73 (с, 6Н), 2,58 (с, 3Н). Е8Р М8: 396,0 [М+Н]+.
23. Получение 5-бром-6-хлорникотиногидразида
- 43 026389
Метил-5-бром-6-хлорникотинат (100 мг, 0,399 ммоль) добавляют к гидразину (19,19 мг, 0,599 ммоль) в метаноле (8 мл) и оставляют нагреваться на ночь при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, и соединение очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (20 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СОзОО): δ 8,33 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,01 (д, 1Н, 1=2,4 Гц).
24. Получение (Е)-5-бром-6-хлор-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)никотиногидразида
5-Бром-6-хлорникотиногидразид (15 мг, 0,060 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (10,22 мг, 0,060 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (8 мг). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,39 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,28 (с, 1Н), 7,63 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,32 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,8 Гц), 7,06 (д, 1Н, 1=6, 8 Гц), 6,92 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 6,81 (д, 1Н, 1=6,8 Гц), 2,47 (с, 3Н). ΕδΙ-Μδ: 404,0 [М+Н]+.
25. Получение метил-5-хлорникотината о
5-Хлорникотиновую кислоту (200 мг, 1,269 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение ночи в присутствии концентрированной серной кислоты (8,20 мг, 0,063 ммоль) в метаноле (10 мл) при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, и продукт очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (120 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 9,07 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 8,72 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 8,26 (м, 1Н), 3,95 (с, 1Н).
26. Получение метил-5-хлорникотината о
5-Хлорникотиновую кислоту (200 мг, 1,269 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение ночи в присутствии концентрированной серной кислоты (8,20 мг, 0,063 ммоль) в метаноле (8 мл) при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а продукт очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (120 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 9,07 (д, 1Н, 1=1,6 Гц), 8,72 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 8,26 (м, 1Н), 3,95 (с, 1Н).
27. Получение 5-хлорникотиногидразида о
С1
Гидразин (17,93 мг, 0,560 ммоль) добавляют к метил-5-хлорникотинату (80 мг, 0,466 ммоль) в метаноле (8 мл) и оставляют на ночь нагреваться при 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, и продукт очищают колоночной хроматографией, получая указанное в заголовке соединение (40 мг) . Ή-ЯМР (400 МГц, СШОЭ): δ 8,85 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 8,70 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 8,22 (т, 1Н, 1=2,0 Гц). Ε8Ι-Μ8: 172,0 [М+Н]+.
28. Получение (Е)-5-хлор-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)никотиногидразида
- 44 026389
5-Хлорникотиногидразид (30 мг, 0,175 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (29,8 мг, 0,175 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН30Н/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (20 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, ацетонά6): δ 9,06 (с, 1Н), 8,77 (с, 1Н), 8,37 (с, 1Н), 7,62 (д, 1Н, 1=2,8 Гц), 7,31 (дд, 1Н, 1=2,0 и 8,4 Гц), 6,95 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 2,58 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 324,0 [М+Н]+.
29. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)пропилиден)-3-(морфолиносульфонил)бензогидразида
3-(Морфолиносульфонил)бензогидразид (40 мг, 0,140 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)пропан1-он (25,9 мг, 0,140 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией (2% СН30Н/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (20 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, ацетонШ6): δ 8,26 (м, 2Н), 8,00 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,84 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,64 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,33 (м, 1Н), 6,98 (д, 1Н, 1=9,2 Гц), 3,69 (м, 4Н), 3,10 (кв, 2Н, 1=7,6 Гц), 2,99 (м, 4Н), 1,26 (т, ЗН, 1=7,6 Гц). Ε8Ι-Μ8: 452,1 [М+Н]+.
0. Получение (Е)-3 -(морфолиносульфонил) -N'-(1 -(пиридин-3 -ил)этилиден)бензогидразида
3-(Морфолиносульфонил)бензогидразид (40 мг, 0,140 ммоль) и 1-(пиридин-3-ил)этанон (16,98 мг, 0,140 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН30Н/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (15 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9,53 (ушир.с, 1Н), 8,87 (с, 1Н), 8,59 (м, 1Н), 8,39 (м, 1Н), 8,17 (м, 1Н), 7,98 (м, 1Н), 7,89 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,67 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,32 (м, 1Н), 3,70 (м, 4Н), 3,00 (м, 4Н), 2,39 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 389,0 [М+Н]+.
31. Получение 3-морфолинобензогидразида
Метил-3-морфолинобензоат (100 мг, 0,452 ммоль) добавляют к гидразину (14,48 мг, 0,452 ммоль) в метаноле (10 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 65°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и продукт очищают колоночной хроматографией (2% СН30Н/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (52 мг). Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 9,69 (с, 1Н), 7,35 (с, 1Н), 7,27 (м, 2Н), 7,07 (м, 1Н), 4,45 (ушир.с, 2Н), 3,74 (м, 4Н), 3,14 (м, 4Н). Ε8Ι-Μ8: 222,1 [М+Н]+.
32. Получение (Ε)-Ν'-( 1 -(5 -хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3 -морфолинобензогидразида
1-(5-Хлор-2-гидроксифенил)этанон (40 мг, 0,234 ммоль) и 3-морфолинобензогидразид (51,9 мг, 0,234 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН30Н/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (60 мг) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 7,65 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,42-7,32 (м, 4Н), 7,20 (м, 1Н), 6,94 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,77 (м, 4Н), 3,19 (м, 4Н), 2,48 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8: 374,1 [М+Н]+.
33. Получение 5-(метилсульфонил)никотингидразида
- 45 026389
Метил-5-(метилсульфонил)никотинат (100 мг, 0,465 ммоль) добавляют к гидразину (17,87 мг, 0,558 ммоль) в метаноле (10 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (83 мг, выход 80%) в виде твердого вещества. ’Н-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9,20 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 9,17 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 8,61 (с, 1Н), 3,11 (с, 3Н). Е31-М3: 216,1 [М+Н]+.
34. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-5-(метилсульфонил)никотингидразида
1-(5-Хлор-2-гидроксифенил)этанон (50 мг, 0,293 ммоль) и 5-(метилсульфонил)никотингидразид (63,1 мг, 0,293 ммоль) растворяют в метаноле (4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэшхроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (70 мг, выход 63,0%) в виде твердого вещества. ’Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,86 (с, 1Н), 9,37 (с, 1Н), 9,27 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 7,68 (с, 1Н), 7,36 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 6,97 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,42 (с, 3Н), 2,53 (с, 3Н). Е31-М3: 368,8 [М+Н]+.
35. Получение 3-(метилсульфонил)бензогидразида
Метил-3-(метилсульфонил)бензоат (100 мг, 0,467 ммоль) добавляют к гидразину (22,44 мг, 0,700 ммоль) в метаноле (10 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 70°С. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (80 мг, выход 80%) в виде твердого вещества. 1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,28 (с, 1Н), 8,07 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 8,01 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,62 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 3,04 (с, 3Н). Е31-М3: 215,1 [М+Н]+.
36. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(метилсульфонил)бензогидразида
1-(5-Хлор-2-гидроксифенил)этанон (55 мг, 0,322 ммоль) и 3-(метилсульфонил)бензогидразид (69,1 мг, 0,322 ммоль) растворяют в метаноле (5 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и последующего охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (75 мг, выход 63,4%) в виде твердого вещества. ’Н-ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 8,49 (с, 1Н), 8,26 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 8,18 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,80 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,60 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,27 (м, 1Н), 6,93 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,19 (с, 3Н), 2,49 (с, 3Н). Е31-М3: 367,8 [М+Н]+.
37. Получение 3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензойной кислоты
4-Метилпиперидин (180 мг, 1,813 ммоль) добавляют к 3-(хлорсульфонил)бензойной кислоте (200 мг, 0,906 ммоль) в присутствии карбоната калия (251 мг, 1,813 ммоль) в ТГФ (объем: 5 мл) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивают в течение 12 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем продукт очищают колоночной хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12), и получают указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества. ’Н-ЯМР (СО3ОО, 400 МГц): δ 8,32 (м, 1Н), 8,27 (м, 1Н), 7,96
- 46 026389 (м, 1Н), 7,72 (т, 1Н, ,1 8,0 Гц), 3,72 (м, 2Н), 2,27 (м, 2Н), 1,68 (м, 2Н), 1,29 (м, 1Н), 1,21 (м, 2Н), 0,88 (д, 3Н, ί=6,4 Гц). Е81-М8: 284,1 [М+Н]+.
38. Получение метил-3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензоата
3-((4-Метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензойную кислоту (120 мг, 0,424 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (2,74 мг, 0,021 ммоль) в метаноле при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил-3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензоат (100 мг, 0,319 ммоль, выход 75%) . 1Н-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 8,39 (м, 1Н), 8,25 (м, 1Н), 7,94 (м, 1Н), 7,62 (т, 1Н, ί=7,6 Гц), 3,95 (с, 3Н), 3,77 (м, 2Н), 2,25 (м, 2Н), 1,67 (м, 2Н), 1,29 (м, 3Н), 0,90 (д, 3Н, Л=4,8 Гц). Е81-М8: 298,1 [М+Н]+.
39. Получение 2-(морфолиносульфонил)бензогидразида
Гидразин (22,46 мг, 0,701 ммоль) добавляют к метил 2-(морфолиносульфонил)бензоату (100 мг, 0,350 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 70°С. После охлаждения реакцию контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией, получают указанное в заголовке соединение 2-(морфолиносульфонил)бензогидразид (40 мг, 0,129 ммоль, выход 36,8%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): δ 7,86 (м, 1Н), 7,66-7,56 (м, 2Н), 7,52 (дд, 1Н, ί=1,2 и 7,6 Гц), 7,40 (м, 1Н), 4,09 (м, 2Н), 3,70 (м, 4Н), 3,15 (м, 4Н). Е81-М8: 286,1 [М+Н]+.
40. Получение 3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензогидразида
Метил-3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензоат (100 мг, 0,336 ммоль) добавляют к гидразину (21,55 мг, 0,673 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией и получают 3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензогидразид (70 мг, 0,217 ммоль, выход 64,4%). Ή-ЯМР (СИзОИ, 400 МГц): δ 8,16 (м, 1Н), 8,05 (м, 1Н), 7,91 (м, 1Н), 7,70 (т, 1Н, >7,6 Гц), 3,74 (м, 2Н), 2,28 (м, 2Н), 1,69 (м, 2Н), 1,32-1,16 (м, 3Н), 0,90 (д, 3Н, >6,0 Гц). Е81-М8: 298,1 [М+Н]+.
41. Получение (Ε)-Ν'-( 1 -(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3 -((4-метилпиперидин-1 -ил)сульфонил)бензогидразида
3-((4-Метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензогидразид (70 мг, 0,235 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (40,2 мг, 0,235 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (Ε)-Ν'-(1-(5хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-((4-метилпиперидин-1-ил)сульфонил)бензогидразид (15 мг, 0,032 ммоль, выход 13,60%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (СИС13, 400 МГц): δ 8,11 (м, 2Н), 7,81 (м, 1Н), 7,59 (м, 1Н), 7,39 (м, 1Н), 7,19 (м, 1Н), 6,89 (м, 1Н), 3,69 (м, 2Н), 2,41 (м, 2Н), 2,24 (м, 2Н), 1,63 (м, 2Н), 1,24 (м, 4Н), 0,87 (д, 3Н, >4,4 Гц). Масс-спектр [М+Н]+: 450,2.
42. Получение (Ε)-Ν'-( 1 -(5 -хлор-2-фторфенил)этилиден)-3 -(морфолиносульфонил)бензогидразида
1-(5-Хлор-2-фторфенил)этанон (20 мг, 0,116 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (33,1
- 47 026389 мг, 0,116 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, и затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-фторфенил)этилиден)-3(морфолиносульфонил)бензогидразид (10 мг, 0,022 ммоль, выход 19,22%) в виде твердого вещества. ΉЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 8,26 (м, 1Н), 8,09 (м, 1Н), 7,80 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,58 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,37 (м, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 6,95 (м, 1Н), 3,61 (м, 4Н), 2,90 (м, 4Н), 2,29 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 440,1.
43. Получение метил-3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензоата
3-(Пирролидин-1-илсульфонил)бензойную кислоту (200 мг, 0,783 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (5,06 мг, 0,039 ммоль) в метаноле при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензоат (150 мг, 0,535 ммоль, выход 68,3%). Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): δ 8,47 (м, 1Н), 8,25 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 8,02 (дт, 1Н, 1=1,2 и 8,0 Гц), 7,63 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 3,96 (с, 3Н), 3,27 (м, 4Н), 1,77 (м, 4Н). Масс-спектр [М+Н]+: 270,1.
44. Получение метил-3-(Ы-метилсульфамоил)бензоата
3-(Ы-метилсульфамоил)бензойную кислоту (200 мг, 0,929 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (6,01 мг, 0,046 ммоль) в метаноле при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил-3-(Ыметилсульфамоил)бензоат (120 мг, 0,497 ммоль, выход 53,5%). Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): δ 8,51 (м, 1Н), 8,25 (м, 1Н), 8,06 (дт, 1Н, 1=1,2 и 8,0 Гц), 7,63 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 3,96 (с, 3Н), 2,69 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 230,1.
45. Получение 3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензогидразида
Метил-3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензоат (150 мг, 0,557 ммоль) добавляют к гидразину (35,7 мг, 1,114 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией, получая 3(пирролидин-1-илсульфонил)бензогидразид (110 мг, 0,396 ммоль, выход 71,1%). Ή-ЯМР (СПСЬ. 400 МГц): δ 8,18 (м, 1Н), 8,03 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,97 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,78 (ушир.с, 1Н), 7,63 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 4,17 (ушир.с, 2Н), 3,25 (м, 4Н), 1,77 (м, 4Н). Масс-спектр [М+Н]+: 270,1.
46. Получение 3-(гидразинкарбонил)-Ы-метилбензолсульфонамида.
Гидразин (43,3 мг, 1,352 ммоль) добавляют к метил-3-(Ы-метилсульфамоил)бензоату (155 мг, 0,676 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией, получая 3(гидразинкарбонил)-Ы-метилбензолсульфонамид (120 мг, 0,502 ммоль, выход 74,3%). Ή-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 8,25 (м, 1Н), 8,01 (м, 2Н), 7,64 (м, 2Н), 4,63 (м, 1Н), 4,17 (м, 2Н), 2,69 (д, 3Н, 1=5,2 Гц). Ε8ΙМ8: 230,0 [М+Н]+.
47. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-2-(морфолиносульфонил)бензогидразида
- 48 026389
2-(Морфолиносульфонил)бензогидразид (30 мг, 0,105 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (17,94 мг, 0,105 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СΗзΟΗ/СΗ2С12), получая указанное в заголовке соединение (Е)-№-(1-(5-хлор-2гидроксифенил)этилиден)-2- (морфолиносульфонил)бензогидразид (10 мг, 0,022 ммоль, выход 21,28%) в виде твердого вещества. 'Н-ЯМР (ΤΌ^ΟΩ, 400 МГц): δ 7,95 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,95-7,70 (м, 2Н), 7,66 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,56 (д, 1Н, 1=2,8 Гц), 7,25 (дд, 1Н, 1=2,8 и 8,8 Гц), 6,91 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 3,66 (м, 4Н), 3,2 (м, 4Н), 2,36 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 438,1.
48. Получение (Е)-3-(2-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)гидразинкарбонил)-Ы-метилбензолсульфонамида
3-(Гидразинкарбонил)-Ы-метилбензолсульфонамид (120 мг, 0,523 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (89 мг, 0,523 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СΗзΟΗ/СΗ2С12), получая указанное в заголовке соединение (Е)-3-(2-(1(5-хлор-2- гидроксифенил)этилиден)гидразинкарбонил)-Ы-метилбензолсульфонамид (75 мг, 0,192 ммоль, выход 36,8%) в виде твердого вещества. 'Н-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 8,21 (м, 1Н), 8,06 (м, 1Н), 7,95 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,59 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,39 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,18 (м, 1Н), 6,90 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 2,56 (с, 3Н), 2,36 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 382,1.
49. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензогидразида
3-(Пирролидин-1-илсульфонил)бензогидразид (105 мг, 0,390 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (66,5 мг, 0,390 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СΗзΟΗ/СΗ2С12), получая указанное в заголовке соединение (Е)-№-(1-(5хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(пирролидин-1-илсульфонил)бензогидразид (70 мг, 0,163 ммоль, 41,7% выход) в виде твердого вещества. 'Н-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 8,18 (м, 1Н), 8,13 (м, 1Н), 7,95 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,65 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,41 (м, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 6,93 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,23 (м, 4Н), 2,39 (с, 3Н), 1,75 (м, 4Н). Масс-спектр [М+Н]+: 422,1.
50. Получение метил-3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензоата о--» о
3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензойную кислоту (100 мг, 0,392 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (2,53 мг, 0,020 ммоль) в метаноле (5 мл) при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил-3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензоат (99 мг, 0,353 ммоль, выход 90%). 'Н-ЯМР (СЭСк 400 МГц): δ 7,58 (м, 2Н), 7,36 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,09 (м, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,89 (м, 4Н), 3,11 (м, 4Н). Массспектр [М+Н]+: 270,1.
51. Получение 3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензогидразида 0=3^, о
Метил-3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензоат (95 мг, 0,353 ммоль) добавляют к гидразину (22,61 мг, 0,705 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч при температуре 65°С.
- 49 026389
После охлаждения реакцию контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение 3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензогидразид (32 мг, 0,109 ммоль, 31,0% выход) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (СЭСк 400 МГц): δ 7,34 (м, 1Н), 7,29 (т, 1Н, 1=8,4 Гц), 7,18 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 6,70 (дд, 1Н, 1=4,8 и 8,0 Гц), 3,85 (м, 4Н), 3,05 (м, 4Н). Масс-спектр [М+Н]+: 270,1.
52. Получение бензогидразида (Ε)-Ν'-( 1 -(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3 -(1,1 -диоксидотиоморфолино)-
3-(1,1-Диоксидотиоморфолино)бензогидразид (30 мг, 0,111 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (19,00 мг, 0,111 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая указанное в заголовке соединение (Ε)-Ν'-(1-(5хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(1,1-диоксидотиоморфолино)бензогидразид (15 мг, 0,035 ммоль, выход 31,3%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (ДМСО-46, 400 МГц): δ 7,65 (д, 1Н, 1=2,0 Гц), 7,47 (м, 1Н), 7,41 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,36-7,27 (м, 3Н), 6,94 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,87 (м, 4Н), 3,17 (м, 4Н), 2,48 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 422,2.
53. Получение (Е) -№-(1-(5-хлор-2-нитрофенил)этилиден)-3- (морфолиносульфонил)бензогидразида
1-(5-Хлор-2-нитрофенил)этанон (30 мг, 0,150 ммоль) и 3-(морфолиносульфонил)бензогидразид (42,9 мг, 0,150 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12) и получают в качестве продукта (Ε)-Ν'-(1-(5- хлор-2-нитрофенил)этилиден)-3(морфолиносульфонил)бензогидразид (15 мг, 0,030 ммоль, выход 20,09%) в виде твердого вещества.
Ή-ЯМР (СБС1з, 400 МГц): δ 8,20 (м, 1Н), 8,07 (м, 1Н), 7,88 (м, 1Н), 7,66 (м, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,39 (м, 1Н), 3,69 (м, 4Н), 2,99 (м, 4Н), 2,29 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 468,0.
54. Получение метил-3-сульфамоилбензоата
3-сульфамоилбензойную кислоту (150 мг, 0,746 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (4,82 мг, 0,037 ммоль) в метаноле (5 мл) при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил-3сульфамоилбензоат (115 мг, 0,524 ммоль, выход 70,2%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): δ 8,53 (м, 1Н), 8,18 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 8,08 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,57 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,92 (с, 3Н). Массспектр [М+Н]+: 216,0.
55. Получение метил 4-(морфолиносульфонил)бензоата
4-(Морфолиносульфонил)бензойную кислоту (150 мг, 0,553 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (3,57 мг, 0,028 ммоль) в метаноле при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией и получают метил 4(морфолиносульфонил)бензоат (135 мг, 0,464 ммоль, выход 84%). Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): 8,21 (м, 2Н), 7,82 (м, 2Н), 3,97 (с, 3Н), 3,4 (м, 4Н), 3,02 (м, 4Н). Масс-спектр [М+Н]+: 286,0.
56. Получение 3-(гидразинкарбонил)бензолсульфонамида
- 50 026389
Метил-3-сульфамоилбензоат (110 мг, 0,511 ммоль) добавляют к гидразину (32,8 мг, 1,022 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией (5% метанол/ОСМ), получая 3(гидразинкарбонил)бензолсульфонамид (57 мг, 0,260 ммоль, выход 50,8%) в виде твердого вещества белого цвета. Ή-ЯМР (С1);О1). 400 МГц): δ 8,32 (м, 1Н), 8,04 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,97 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,63 (т, 1Н, 1=8,0 Гц). Масс-спектр [М+Н]+: 216,0.
57. Получение 4-(морфолиносульфонил)бензогидразида
Метил 4-(морфолиносульфонил)бензоат (135 мг, 0,473 ммоль) добавляют к гидразину (30,3 мг, 0,946 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией (3% метанол/ОСМ), получая 4-(морфолиносульфонил)бензогидразид (102 мг, 0,350 ммоль, выход 74,0%) в виде твердого вещества белого цвета. Ή-ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 7,94 (м, 2Н), 7,79 (м, 2Н), 3,72 (м, 4Н), 2,99 (м, 4Н). Массспектр [М+Н]+: 286,0.
58. Получение (Е)-3-(2-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)гидразинкарбонил)бензолсульфонамида
3-(Гидразинкарбонил)бензолсульфонамид (50 мг, 0,232 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (39,6 мг, 0,232 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая (Е)-3-(2-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)гидразинкарбонил)бензолсульфонамид (36 мг, 0,094 ммоль, выход 40,4%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (ДМСО-46, 400 МГц): δ 8,34 (с, 1Н), 8,15 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 8,02 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,73 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,64 (м, 1Н), 7,51 (ушир.с, 2Н), 7,32 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,4 Гц), 6,92 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 2,49 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 368,0.
59. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-4-(морфолиносульфонил)бензогидразида
4-(Морфолиносульфонил)бензогидразид (100 мг, 0,350 ммоль) и 1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этанон (59,8 мг, 0,350 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12) и получают (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-4-(морфолиносульфонил)бензогидразид (80 мг, 0,177 ммоль, 50,6% выход) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (ДМСО-46, 400 МГц): δ 8,16 (м, 2Н), 7,89 (м, 2Н), 7,67 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,35 (дд, 1Н, 1=2,4 и 8,8 Гц), 6,95 (д, 1Н, 1=8,4 Гц), 3,64 (м, 4Н), 2,92 (м, 4Н), 2,49 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 338,0.
60. Получение 3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензойной кислоты
3-(Хлорсульфонил)бензойную кислоту (200 мг, 0,906 ммоль) добавляют к 1-метилпиперазину (100 мг, 0,997 ммоль) в присутствии карбоната калия (251 мг, 1,813 ммоль) в ТГФ (объем: 5 мл) при комнат- 51 026389 ной температуре, и реакционную смесь перемешивают в течение 12 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают колоночной хроматографией (3% СН3ОН/СН2С12) и получают в качестве продукта 3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензойную кислоту (100 мг, 0,320 ммоль, выход 35,3%) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (СОС13, 400 МГц): δ 7,77 (м, 2Н), 7,63-7,55 (м, 2Н), 3,04 (м, 4Н), 2,46 (м 4Н), 2,31 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 285,1.
61. Получение метил-3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензоата
3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензойную кислоту (250 мг, 0,879 ммоль) кипятят с обратным холодильником в присутствии концентрированной серной кислоты (5,68 мг, 0,044 ммоль) в метаноле при температуре 70°С в течение ночи. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт используют в следующей реакции без дальнейшей очистки.
62. Получение 3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензогидразида
Метил-3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензоат (200 мг, 0,670 ммоль) добавляют к гидразину (43,0 мг, 1,341 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией (3% метанол/ЭСМ) и получают 3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензогидразид (125 мг, 0,406 ммоль, выход 60,6%) в виде твердого вещества белого цвета. Ή-ЯМР (ДМСО-46, 400 МГц): δ 10,08 (с, 1Н), 8,12 (м, 2Н), 7,84 (д, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,72 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 4,57 (м, 1Н), 2,88 (м, 4Н), 2,32 (м, 4Н), 2,10 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 298,9.
63. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-((4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензогидразида
3-((4-Метилпиперазин-1-ил)сульфонил)бензогидразид (85 мг, 0,285 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (48,6 мг, 0,285 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, а полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая (Ε)-Ν'- (1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)3-((4-метилпиперазин-1- ил)сульфонил)бензогидразид (70 мг, 0,152 ммоль, 53,4% выход) в виде твердого вещества. Ή-ЯМР (С1ЮОП- 400 МГц): δ 8,29 (с, 1Н), 8,21 (д, 1Н, 1=7,2 Гц), 7,99 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,78 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 7,59 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,27 (дд, 1Н, 1=2,4 и 9,2 Гц), 6,92 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 3,09 (м, 4Н), 2,54 (м, 4Н), 2,48 (с, 3Н), 2,28 (с, 3Н). Масс-спектр [М+Н]+: 450,9.
64. Получение 3-(пиперидин-1-илсульфонил)бензогидразида
Метил-3-(пиперидин-1-илсульфонил)бензоат (150 мг, 0,529 ммоль) добавляют к гидразину (50,9 мг, 1,588 ммоль) в метаноле и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч при температуре 65°С. После охлаждения реакционную смесь контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции растворитель удаляют в вакууме, а затем соединение очищают флэш-хроматографией (3% метанол/ОСМ) и получают 3-(пиперидин-1-илсульфонил)бензогидразид (70 мг, 0,245 ммоль, 46,2% выход) в виде твердого вещества белого цвета. Ή-ЯМР (СЭзОЭ, 400 МГц): δ 8,17 (т, 1Н, 1=1,2 Гц), 8,05 (дт, 1Н, 1=1,2 и 8,0 Гц), 7,90 (дт, 1Н, 1=1,2 и 8,0 Гц), 7,69 (т, 1Н, 1=7,6 Гц), 2,99 (м, 4Н), 1,62 (м, 4Н), 1,43 (м, 2Н). Массспектр [М+Н]+: 284,1.
65. Получение (Е)-№-(1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)-3-(пиперидин-1-илсульфонил)бензогидразида
- 52 026389
3-(Пиперидин-1-илсульфонил)бензогидразид (65 мг, 0,229 ммоль) и 1-(5-хлор-2гидроксифенил)этанон (39,1 мг, 0,229 ммоль) растворяют в метаноле (объем 4 мл) в присутствии уксусной кислоты в качестве катализатора, а затем реакционную смесь нагревают с помощью микроволнового излучения до 120°С в течение 30 мин. За ходом реакции следят с помощью ТСХ. После завершения реакции и охлаждения растворитель удаляют в вакууме, и полученный сырой продукт очищают колоночной флэш-хроматографией (2% СН3ОН/СН2С12), получая (Е)-№- (1-(5-хлор-2-гидроксифенил)этилиден)3-(пиперидин-1-илсульфонил)бензогидразид (55 мг, 0,124 ммоль, 53,9% выход) в виде твердого вещества. ’Н-ЯМР (СИС13, 400 МГц): δ 8,09 (м, 2Н), 7,85 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,62 (т, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,41 (д, 1Н, 1=2,4 Гц), 7,22 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 6,93 (д, 1Н, 1=8,8 Гц), 2,97 (м, 4Н), 2,41 (с, 3Н), 1,61 (м, 4Н), 1,40 (м, 2Н). Масс-спектр [М+Н]+: 436,9 66.
Общие биохимические и клеточные вещества и способы.
Активность Ь3О1 определяют с помощью аналитического набора ингибиторов для скрининга Ь3О1 (Саутап СНеписа1 Кет ШтЬег 700120), который приобретают в Саутап СНеписа1 Сотрапу (Апп АгЬог, МюЫдап). Рекомбинантную (экспрессированную в инфицированных бакуловирусом клетках насекомых ВТ1) моноаминоксидазу А и моноаминоксидазу В (каталожный номер М7316 и М7441 соответственно) приобретают в компании 31дта-А1бпсЬ Со. ЬЬС. (3ΐ. Ьошв, М1ввоип). Аналитический набор МАО-О1о™ приобретают в компании Рготеда СогрогаКоп (Маб1воп, \У1всопвт). Систему для анализа методом люминесценции АТР1Ке™ (например, каталожный номер У1401) приобретают в компании РегкзиЕ1тег 1пс. (\ν;·ι1ΐ1ι;πη, МаввасЬивеКв).
67. Клеточная культура.
Линии раковых клеток получают из АТСС. Клетки культивируют в соответствии с предоставленными методиками. Используемые клеточные линии включают те, что приведены ниже в табл. 4. В дополнение к добавкам, указанным в табл. 4, среду также дополняют 1% пенициллином/стрептомицином (100 МЕ/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина). Клетки культивируют при 37°С и 5% СО2. АТСС обозначает Американскую коллекцию тканевых культур (Манассас, штат Вирджиния).
Таблица 4
Клеточная линия Номер АТСС® Орган/ткань/патология* Куль турал ь на я среда
ΑΝ3 СА НТВ-111™ матка/эндометрий/ аденокарцинома Минимальная поддерживающая среда Игла, дополненная 10% ГС8+ +
ВТ-20 НТВ-19™ молочная железа/карцинома Минимальная поддерживающая среда Игла, дополненная 10% ГС 5
ВТ-549 НТВ-122™ молочная железа/карцинома протоков Среда ΚΡΜΙ-1640, дополненная 0,023 МЕ/мл инсулина и 10% ГС5
НСТ 116 ССЪ-247™ прямая кишка/карцинома ободочной и прямой кишки Модифицированная среда 5а Маккоя, дополненная 10% ЕС 5
НЕВ218** Стсутст- молочная Среда ΚΡΜΙ-1640,
вует железа/аденокарцинома дополненная 10% ГС 8
МСГ7 НТВ-22™ молочная железа/аденокарцинома Минимальная поддерживающая среда Игла, дополненная 0, 01 мг/мл бычьего инсулина и 10% ГС8
ΜΌΑ-ΜΒ- 231 НТВ-26™ молочная железа/аденокарцинома Среда Лейбовица Ъ- 15, дополненная 10% ГС5
- 53 026389
и высоким уровнем НЕК.2 (Маззаг^еЬ 8, е1 а1. (2008) Сапсег КезеагсЬ 68: 826-33).
68. Исследование деметилазы гистонов Ь8Э1.
Основной анализ ингибиторной активности соединения проводят с помощью аналитического набора ингибиторов для скрининга Γ8Ώ1 (Саутап Сйеш1са1 Сотрапу; Апп АгЬог, МтсЫдап; Саутап СЬетюа1 Нет №тЬег 700120). Вкратце, испытываемые соединения разбавляют в 20 раз до требуемой для испытания концентрации в 100%-ном ДМСО, и образец 2,5 мкл разбавленного лекарственного средства наносят на 384-луночный планшет черного цвета. Маточный раствор фермента 1.81)1 разводят в 17 раз буфером для анализа, и 40 мкМ разбавленного фермента 1.81)1 добавляют в соответствующие лунки. Реакционная смесь включает пероксидазу хрена, диметил-К4-пептид (соответствует первым 21 аминокислотам Νконцевого хвоста гистона Н3) и затем добавляют в лунки 10-ацетил-3,7-дигидроксифеноксазин. Генерирование резоруфина (образуется при взаимодействии с получаемым в реакции Н2О2) анализируют на микропланшете ЕпМзюп с длиной волны возбуждения 530 нм и длиной волны испускания 595 нм.
69. Анализ моноаминоксидазы (МАО).
Ингибирование активности моноаминоксидазы проводят, используя набор для анализа МАО-О1о™ в соответствии с предложенной производителем методикой. Вкратце, 6,25 мкл испытываемого соединения добавляют в каждую лунку 384-луночного планшета. Добавляют фермент (любой из МАО А или В) (12,5 мкл в 2х буфере, содержащем 1 мкг белка) и оставляют инкубироваться на 5 мин. Наконец, в каждую лунку добавляют 6,25 мкл из 4х субстрата МАО. Инкубируют один час, в каждую лунку добавляют 25 мкл реагента для обнаружения люциферина и инкубируют в течение 20 мин. Люминесценцию определяют на ридере микропланшетов ЕпМзюп. Отдельные данные, используемые для определения величин 1С50 для ингибирования каждой изоформы МАО, представлены на фиг. 4, и отдельные данные для нескольких соединений собраны ниже в табл. 8.
70. Анализ жизнеспособности клеток.
Жизнеспособность клеток определяют с помощью люминесцентной системы анализа АТР1йе™ (Регк1пЕ1тег 1пс., УаЙИат, МаззасИизейз), используя различные клеточные линии, которые описаны выше и приведены в табл. 4. Вкратце, клетки высевают на 96-луночные планшеты и затем обрабатывают различными концентрациями ингибитора (конечная концентрация 0,1% в ДМСО). Через 96 ч инкубации непосредственно в ячейку с культурой добавляют реагент для определения АТР1йе. Люминесценцию измеряют спустя 5 мин на ридере микропланшетов ЕпМзюп. Отдельные значения 1С50 для ингибирования роста клеток различных клеточных линий приведены ниже в табл. 6, 7 и 9.
71. ПЦР в реальном масштабе времени.
Вкратце, клетки Τ-47Ώ высевают на 96-луночные планшеты и обрабатывают указанной концентрацией ингибиторов. Получение клеточных лизатов, обратную транскрипцию и одноцветную ПЦР в реальном масштабе времени с 8уЬег Огееп проводят, используя набор Се11з4о-С (Ы£е ТесЬпо1од1ез). Уровни
- 54 026389 транскрипта гемоксигеназы (НМОХ) нормализуют по гипоксантинфосфорибозилтрансферазе (НРКТ) и β-актину. Праймеры, используемые при проведении ПЦР в реальном масштабе времени, приведены ниже в табл. 5, а отдельные данные о влиянии раскрытых соединений на экспрессию НМОХ приведены в табл. 6 и 7.
Таблица 5
Обозначение праймера Мишень для амплификации Последовательность
НМОХ Г Гемоксигеназа ААСТТТСАСААС6СССАССТ
НМОХ_В. Гемоксигеназа 0ТА0АСА6006С6АА6АС Т С
НРКТ Г Гипоксантин фосфориОозилтрасфераза ТССТСАССАТТТССАААСССТС
НРЕТ_К Гипоксантин фосфорибозилтрасфераза СС ТТСАССАСАСАСАСССС ТАС
В-АКТИН Г β-актин СТССААСССТСААССТСАСА
В-Актин В β-актин ААСССАСТТССТСТААСААСССА
72. Расчет величин Ι05ο.
Значения Ιί\0 определяют, используя программное обеспечение СгарЬРай Рпкт 5. Указанные данные вводят как участок графика Х-Υ в программное обеспечение в виде процента ингибирования для каждой концентрации лекарственного средства. Значения концентрации лекарственного средства преобразуют в логарифмы и проводят нелинейную регрессию с использованием опции сигмоидальная ответная реакция от дозы (переменный угол наклона) программного обеспечения СгарЬРай для моделирования данных и расчета значений ΙίΉ Приведенные величины Κ.'50 представляют собой концентрацию лекарственного средства, при которой достигается 50%-ное ингибирование.
73. Активность соединений.
Способность отдельных раскрытых соединений изменять различную биохимическую и клеточную активность определяют с помощью описанных выше анализов. Полученные результаты представлены в приведенных ниже таблицах. Значения Κ.'50 (мкМ) для ингибирования либо активности Ь8О1, либо роста клеток с использованием клеток Τ-47Ό приведены в табл. 6 и 7. Кроме того, влияние отдельных соединений на экспрессию гемоксигеназы (НМОХ) также представлено в табл. 6 и 7. Значения Κ.'50 для ингибирования моноаминоксидазы А (МАО А) и В (МАО В) отдельными соединениями в сравнении с контрольным соединением, транилципромином представлены в табл. 8. Влияние соединения № 12 (со ссылкой на номер соединения, используемого в табл. 7, или (Е)-№-(1-(5-хлор-2гидроксифенил)этилиден)-3-(морфолиносульфонил)бензогидразид) на рост клеток различных клеточных линий указано в табл. 9. Если значение Κ.'50 или другой результат анализа обозначается как ΝΏ, то они не определены в указанном анализе.
Соединение 12 используют для оценки чувствительности в группе линий раковых клеток (табл. 9). Чувствительность клеточной линии к соединению 12 в указанном анализе на жизнеспособность меняется на один логарифм со значениями Ιί\0 приблизительно 300 нМ вплоть до 3 мкМ. С целью сравнения между отдельными соединениями величины Κ.'50 определяют в клетках Т-47Э (см. табл. 6 и 7). За редкими исключениями обнаружено, что клетки Τ-47Ό чувствительны к испытываемым соединениям, которые активны в биохимическом анализе Ь8О1, и менее чувствительны к соединениям, которые показывают меньшую активность в Ь8Ц1 анализе.
Для того чтобы ввести дополнительный уровень в анализ ингибирования Ь8Ц1 указанными соединениями в клеточной культуре, проводят ряд экспериментов по изучению экспрессии, с целью оценки транскрипционных изменений, вызванных соединением 12 (данные не представлены). Указанные данные показывают, что гемоксигеназа 1 (ΗΜ0X1) является одним из наиболее последовательно усиливаемых генов после обработки указанным соединением в нескольких клеточных линиях. Поскольку ΗΜ0X1, как известно, регулируется НЗ метилированием в промоторе (1<г1ед Α. 1. е1 а1., Μο1. Се11. Βίο1. 2010, 30 (1), 344-53), то определяют эффект испытываемых соединений на экспрессию ΗΜ0X1 в клетках Τ-47Ό (см. табл. 6 и 7). Данные показывают, что отдельные соединения, которые связаны с усилением экспрессии ΗΜ0X1, также связаны с ингибиторной активностью в анализе Ь8Ц1 и анализе жизнеспособности клеток.
Ь8Ц1 обладает высокой структурной гомологией с семейством ферментов моноаминоксидазы (17,6% как для моноаминоксидазы А, так и моноаминоксидазы В; МАО А и В соответственно; см., например, Соойеп Ό.Μ. е1 а1., Βίοοτ§. Μеά. СЬет. Ьей 2008, 18 (10), 3047-51). Селективная активность отдельных соединений для Ь8Ц1 в сравнении либо с МАО А, либо с МАО В является необходимой особенностью терапевтических соединений, нацеленных на Ь8Ц1. Специфическое действие соединения 1 и соединения 12 испытывают в биохимических анализах МАО, приведенных в данном описании (см. фиг. 3 для отдельных результатов, которые собраны в табл. 8). В данном анализе известный ингибитор МАО транилципромин проявляет активность как против МАО А, так и МАО В. Напротив, соединение 1 демонстрирует сравнимую с транилципромином активность по отношению к МАО В, но не обладает ак- 55 026389 тивностью по отношению к МАО А. Однако соединение 12 не обладает активностью по отношении к любому из ферментов МАО (>300 мкМ). Испытаны также соединения 18 и 24, и они не проявляют активность по отношению к МАО А или В; результаты представлены в табл. 8. Указанные результаты показывают, что отдельные соединения обладают специфическим действием по отношению к Ь8И1 со значительно сниженным воздействием на ферменты МАО. Следует отметить, что оба МАО А и В отличаются от Ь8И1 тем, что ΡΆΌ ковалентно связан с ферментом посредством тиоэфирной связи с Сух406 и Сух397 соответственно (Кеатеу Е.В. еί а1., Енгореан 1оигиа1 οί Β^οсЬет^8ί^у 1971, (24), 321-327 и БасН Ά.№. еί а1., Ргос. №ί1. Άωά. 8α. υ8Ά 1988, (85), 4934-4938).
- 56 026389
Таблица 7
- 57 026389
Таблица 8
№ Структура МАО А, 1С30 (мкМ) МАО В, 1С5о (мкМ)
- сУ-„. 2, 1 3, 6
1 Гг°н 0 Λ'ΛΌΗ 88,5 1,3
12 >300 >300
18 >300 >300
24 УТ0Н О о >300 >300
Таблица 9
Клеточная линия Рост клеток, 1Сбо (мкМ)
ΑΝ3 Са 0,356
ВТ-20 0,489
ВТ-549 1, 010
НСТ 116 0, 614
НЕК218 0, 612
Ηξ-578-Τ 1,700
НТ29 0, 429
МСВ-7 0, 637
МВА-МВ-2 31 1, 040
ΜϋΑ-ΜΒ-235 0, 728
ΜϋΑ-ΜΒ-435 1, 440
МПА-МВ-468 2,730
ΜΙΑ РаСа-2 0, 468
РАЫС-1 1, 104
РС-3 2, 160
зк-ы-мс 0, 329
Т-47В 0, 649
И87 1, 160
74. Возможное использование противоопухолевых эффектов ΐη νίνο: клеточная линия модели ксенотрансплантата.
В следующем примере показана возможность использования действия раскрытых соединений в условиях ΐη νίνο. В общем случае агенты, которые изменяют регуляцию хроматина, в том числе ингибиторы деметилазы гистонов, эффективны в доклинических моделях онкологического заболевания. Ожидается, что ΐη νίνο воздействия соединений, описанных в предыдущих примерах, будут продемонстрированы в различных животных моделях онкологического заболевания, известных специалисту, таких как модели ксенотрансплантатов опухоли. Указанные модели обычно применяют для грызунов, чаще всего для мышей, но их можно применять и для других видов животных, если это удобно для целей исследования. Ожидается, что соединения, продукты и композиции, раскрытые в данном описании, демонстрируют ΐη νίνο эффекты в различных животных моделях онкологического заболевания, известных специалисту, таких как мышиные модели ксенотрансплантатов опухоли.
Ιη νίνο воздействие соединений можно оценить при изучении ксенотрансплантата опухоли мыши
- 58 026389 одной из возможных методик исследований, приведенных в настоящем описании. Вкратце, клетки (от 2 до 5х106 в 100 мл культуральной среды) имплантируют подкожно, например путем подкожной инъекции, в правый задний бок, бестимусных иммунодефицитных мышей линии пи/пи (в возрасте от 5 до 6 недель, 18-22 г). Для испытываемых соединений по настоящему изобретению типичной клеточной линией, используемой для исследования ксенотрансплантата опухоли, является А№ СА или ВТ-20. Другими подходящими клеточными линиями для подобных исследований являются клетки ВТ-549, НСТ 116, НЕК218, МСР7, МОА-МВ-231, МОА-МВ-235, МОА-МВ-4358, МОА-МВ-468, ΡΛΝ^1, РС-3, 8К^-МС, Τ-47Ό и и-87 МО. Для применения данной методики клетки культивируют перед выращиванием, как указано в настоящем описании.
После имплантации, как правило, в течение приблизительно 6-18 дней после имплантации опухоли дают возможность вырасти приблизительно до размера 100 мм3, а затем животных произвольно делят на группы лечения (например, с использованием носителя, положительного контроля и различных уровней доз испытываемого соединения); количество животных в группе обычно составляет 8-12. День 1 исследований соответствует дню, когда животные получают свою первую дозу. Эффективность испытываемого соединения может быть определена при проведении исследований различной длительности в зависимости от целей исследования. Обычная длительность исследования составляет 14, 21 и 28 дней. Частоту дозирования (например, животным назначают дозировку испытываемого соединения ежедневно, через день, раз в три дня или с другой частотой) определяют для каждого исследования в зависимости от токсичности и действенности испытываемого соединения. Типичное планирование исследования включает ежедневное дозирование (понедельник-пятница) испытываемого соединения с перерывом на выходные дни. В процессе исследования два раза в неделю измеряют объемы опухолей и массу тела. В конце исследования животных умерщвляют, а опухоли выделяют и замораживают для проведения дальнейшего анализа. В качестве альтернативы, опухоли можно сразу подвергнуть анализу, например, зафиксировать в забуференном растворе формалина, покрыть парафином, сделать срезы для окрашивания гематоксилином/эозином и провести другой иммуногистохимический анализ на требуемые онкологические маркеры.
Авторы настоящего изобретения ожидают, например, что соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемая соль, сольват, полиморфная модификация, гидрат и стереохимически изомерные формы демонстрируют подобные эффекты в условиях ш У1уо.
75. Возможное использование противоопухолевых эффектов ш У1уо: модели трансплантата опухоли.
В качестве альтернативы, может оказаться желательным оценить эффективность раскрытых соединений в условиях ш У1уо на животных моделях эксплантата или трансплантата опухоли (см., например, КиЬю-кдиена В. е! а1., Сйп. Сапсег Кее. (2006) 12:4652-4661; Р1еЫд Н.Н., Ма1ег А. апб Вигдег А.М., Еиг.
1. Сапс. (2004) 40:802-820 и ЭеКове Υ.8. е! а1., Райеп!-бейуеб !итог дгайв аи!йепйса11у гейес! !итог ра!йо1оду, дгоМй, те!ав!ав1в апб б1веаве ои!сотев. (2011) Ν;·ιΙ. Меб., в печати). Указанные модели могут обеспечить более полную информацию о воздействии терапевтических соединений в условиях ш У1уо. Авторы настоящего изобретения полагают, что модели трансплантата опухоли более достоверны в ш У1уо моделях многих видов онкологических заболеваний, например рака молочной железы человека, и с их помощью можно изучать биологию опухолей и их метастазы. Вживление опухолевых тканей действительных пациентов (названных трансплантатами опухоли) иммунодефицитным мышам дает лучшие результаты по сравнению с имплантацией клеточных линий, с точки зрения фенокопии опухолей человека и прогнозирования ответной реакции препарата у пациентов (С1агке К., Вгеав! Сапсег Кее. (2009) 11 8ирр1. 3, 822; Ргевв ΓΖ. е! а1., Оупесо1. Опсо1. (2008) 110: 56-264; Кгт М.Р. е! а1., Ν;·ιΙ. Рго!ос. (2009) 4: 6701680; Эаше1 У.С. е! а1., Сапсег Кее. (2009) 69: 3364-3373 и Ошд Ь. е! а1., Νιΐιιιν (2010) 464: 999-1005).
Вкратце, образцы тканей отбирают у информированных пациентов с их согласия в Нип!втап Сапсег Новрйа1/Цшуегвйу о£ И!ай в соответствии с утвержденной ШВ методикой. Образцы собирают и идентифицируют в условиях Нип!втап Сапсег [пвШиЮ Τίββικ Кевоигсе апб Аррйсайоп Соге прежде, чем их подготовят для имплантации. Предполагается, что все первичные опухоли будут получены от индивидов, которые не проходили лечение химиотерапией до отбора тканей, а все метастатические эффузии будут получены от индивидов, которые проходили лечение химиотерапией, гормональной терапией и/или лучевой терапией. Тйе Ишуегвйу о£ И!ай Iηβй!ийоηа1 Атта1 Саге апб Иве СоттШее рассматривает и одобряет все эксперименты на мышах. Предполагается, что в одной опытной группе будут использоваться как минимум три мыши, и лишь самки мышей будут использоваться для исследований, связанных с опухолями молочной железы. Один фрагмент свежей или замороженной опухоли (~8 мм3) или приблизительно 106 клеток в матригеле имплантируют в очищенные паховые жировые подушки молочной железы самок мышей линии НОО/8СЮ в возрасте 3-4 недель. В то же время мышам с опухолями ЕК+ подкожно межлопаточно имплантируют гранулы эстрогена. Рост опухоли измеряют еженедельно с помощью циркулей. Когда опухоли достигают размеров приблизительно 150-2000 мм3, мышей умерщвляют, а фрагменты ткани повторно пересаживают другой группе мышей, замораживают для дальнейшего использования и/или анализируют на гистологию, экспрессию генов и число копий ДНК. Объемы опухолей рассчитываются по формуле 0,5хдлинах(ширина)2 Для экспериментов по определению эстрогеновой зави- 59 026389 симости, опухоли ЕК+ имплантируют мышам, как описано выше, в присутствии или в отсутствие межлопаточных гранул эстрогена и с одновременной или без одновременной хирургической процедуры по удалению яичников, которую проводят в соответствии со стандартными методиками.
Свежесобранные опухолевые ткани человека или мышей разрезают на куски размером ~8 мм3 и хранят в жидком азоте в растворе 95% ΡΒ8 и 5% ДМСО для последующей имплантации. В качестве альтернативы, ткань расщепляют в растворе коллагеназы (1 мг/мл коллагеназы [Туре ГУ, 8|дта| в среде ΚΡΜΙ 1640, дополненной 2,5% ΡΒ8, 10 мМ НЕРЕ8, 10 мкг/мл пенициллина-стрептомицина) при 37°С в течение 40-60 мин, встряхивая со скоростью 250 об/мин. Расщепленные ткани окрашивают для удаления остатков органических веществ и три раза промывают в среде (ΌΜΗΜ Ρ/12, дополненная 10 мМ НЕРЕ8, 5% ΡΒ8, 1 мг/мл Β8Α, 0,5 мкг/мл гидрокортизона, 50 мкг/мл гентамицина, 1 мкг/мл ΙΤ8-Χ100) для эпителиальных клеток молочной железы человека (НВЕС).
Сгусток клеток повторно суспендируют в среде для замораживания (5% ΡΒ8 и 10% ДМСО в среде НВЕС) и хранят в жидком азоте.
Для оценки влияния раскрытого соединения опухоли у мышей дают вырасти до 100 мм3, как правило, приблизительно в течение 6-18 дней после имплантации, прежде чем животных рандомизуют по группам лечения (например, носитель, положительный контроль и различные уровни дозы испытываемого соединения); количество животных в группе, как правило, равно 8-12. День 1 исследований соответствует дню, когда животные получают свою первую дозу. Эффективность испытываемого соединения может быть определена при проведении исследований различной длительности в зависимости от целей исследования. Обычная длительность исследования составляет 14, 21 и 28 дней. Частоту дозирования (например, животным назначают дозировку испытываемого соединения ежедневно, через день, раз в три дня или с другой частотой) определяют для каждого исследования в зависимости от токсичности и действенности испытываемого соединения. Типичное планирование исследования включает ежедневное дозирование (понедельник-пятница) испытываемого соединения с перерывом на выходные дни. В процессе исследования два раза в неделю измеряют объемы опухолей и массу тела. В конце исследования животных умерщвляют, а опухоли выделяют и замораживают для проведения дальнейшего анализа. В качестве альтернативы, опухоли можно сразу подвергнуть анализу, например зафиксировать в забуференном растворе формалина, покрыть парафином, сделать срезы для окрашивания гематоксилином/эозином и провести другой иммуногистохимический анализ на требуемые онкологические маркеры.
Авторы настоящего изобретения предполагают, например, что соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемая соль, сольват, полиморфная модификация, гидрат и стереохимические изомерные формы продемонстрируют подобные эффекты в условиях ίη νίνο.
76. Примеры возможного использования фармацевтических композиций.
Термин активный ингредиент, используемый в настоящих примерах, относится к одному или нескольким соединениям по настоящему изобретению или к их фармацевтически приемлемой соли, сольвату, полиморфной модификации, гидрату и стереохимически изомерной форме. Следующие примеры составов соединений по настоящему изобретению в виде таблеток, суспензий, инъекцией и мазей пригодны для возможного использования.
Типичные примеры рецептов для композиций по изобретению приведены ниже. В настоящем изобретении могут быть применены различные другие лекарственные формы, такие как наполненные желатиновые капсулы, жидкие эмульсии/суспензии, мази, суппозитории или жевательные таблетки, в которых используются раскрытые соединения в требуемых дозировочных количествах в соответствии с настоящим изобретением. Различные обычные методики для приготовления лекарственных форм могут быть применены для получения пригодных для использования фармацевтических композиций, таких как композиции, раскрытые в описании и в стандартных справочниках, например в фармакопее Великобритании и США, Κет^η§ιοη'к Ркагтасеи11са1 8с1енсе5 (Μ;κ1< РиЬПкЬтд Са) и ΜαΠίηύαΚ ТЬе Ех1га РЬагтасοрοе^а (Όοηάοη, ТЬе РЬагтасеийса1 Ргекк).
Содержание указанной ссылки включено в настоящее описание посредством ссылки. а. Фармацевтическая композиция для перорального введения.
Таблетку можно получить следующим образом:
Компонент Количество
Активный ингредиент от 10 до 500 мг
Лактоза 100 мг
Кристаллическая целлюлоза 60 мг
Стеарат магния 5
Крахмал (в частности, Количество для получения общей
картофельный крахмал) массы, указанной ниже
Общее количество (на одну капсулу) 1000 мг
В качестве альтернативы для приготовления одной таблетки используют приблизительно 100 мг раскрытого соединения, 50 мг лактозы (моногидрата), 50 мг кукурузного крахмала (природного), 10 мг
- 60 026389 поливинилпирролидона (РУР 25) (например, полученного от компании ΒΑδΡ, Ьи4у1д8ЬаГеп, Сегтапу) и 2 мг стеарата магния. Смесь активного компонента, лактозы и крахмала гранулируют с 5%-ным раствором (мас./мас.) РУР в воде. После сушки гранулы в течение 5 мин смешивают со стеаратом магния. Указанную смесь формуют под давлением, используя обычный пресс для таблетирования (например, формат таблетки: диаметр 8 мм, радиус кривизны 12 мм). При формовании обычно прикладывают силу приблизительно 15 кН.
В качестве альтернативы раскрытое соединение можно вводить в виде суспензии, приготовленной для перорального применения. Например, приблизительно 100-5000 мг требуемого раскрытого соединения, 1000 мг этанола (96%), 400 мг смолы ксантана и 99 г воды объединяют при перемешивании. Однократная доза, составляющая приблизительно 10-500 мг требуемого раскрытого соединения, может содержаться в 10 мл пероральной суспензии.
В указанных примерах активный ингредиент может быть заменен таким же количеством любого из соединений по настоящему изобретению, в частности тем же количеством любого из приведенных в качестве примеров соединений. В некоторых случаях может оказаться желательным использовать капсулы, например наполненные желатиновые капсулы, а не таблетки. Выбор таблетки или капсулы будет частично зависеть от физико-химических характеристик конкретного используемого раскрытого соединения.
Примерами альтернативных носителей, пригодных для изготовления пероральных препаратов, являются лактоза, сахароза, крахмал, тальк, стеарат магния, кристаллическая целлюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, глицерин, альгинат натрия, гуммиарабик и т. д. Указанные альтернативные носители могут быть заменены приведенными выше носителями, как того требуют растворение, поглощение и технологические характеристики.
Количество раскрытого соединения на одну таблетку для использования в приготовленной для человека фармацевтической композиции определяется как из токсикологических, так и фармакокинетических данных, полученных из подходящих животных моделей, например на крысах и по меньшей мере на одном виде, отличном от грызунов, и корректируется на основе предварительных данных клинических исследований на людях. Например, подходящим может оказаться содержание раскрытого соединения в количестве приблизительно от 10 до 1000 мг на дозированную единицу в виде таблетки.
Ь. Фармацевтическая композиция для применения в виде инъекций.
Парентеральная композиция может быть получена следующим образом:
Компонент Количество
Активный ингредиент от 10 до 500 мг
Карбонат натрия 560 мг*
Гидроксид натрия 80 мг*
Дистиллированная, стерильная Количество, достаточное для
вода получения общего указанного ниже объема,
Общее количество (на капсулу) 10 мл на ампулу
* Количество регулируют по мере необходимости для поддержания физиологического значения рН в соответствии с количеством активного ингредиента и формы активного ингредиента, в частности конкретной солевой формы активного ингредиента.
В качестве альтернативы может использоваться фармацевтическая композиция для внутривенной инъекции, при этом композиция содержит приблизительно 100-5000 мг раскрытого соединения, 15 г полиэтиленгликоля 400 и 250 г воды в солевом растворе, необязательно содержащем приблизительно 15% СгеторЬог ЕЬ, и необязательно используют до 15%-ного этилового спирта и необязательно до 2 экв. фармацевтически пригодной кислоты, такой как лимонная кислота или хлористо-водородная кислота. Приготовление подобной композиции для инъекции можно осуществить следующим образом: раскрытое соединение и полиэтиленгликоль 400 растворяют в воде при перемешивании. Раствор фильтруют для стерилизации (размер пор 0,22 мкм) и помещают в асептических условиях в стерилизованные термической обработкой инфузионные флаконы. Инфузионные флаконы герметично закрывают резиновыми пробками.
В другом примере может быть использована фармацевтическая композиция для внутривенной инъекции, при этом композиция содержит приблизительно 10-500 мг раскрытого соединения, стандартный солевой раствор, необязательно содержащий вплоть до 15 мас.% СгеторЬог ЕЬ и, при необходимости, до 15 мас.% этилового спирта и необязательно до 2 экв. фармацевтически пригодной кислоты, такой как лимонная кислота или хлористо-водородная кислота. Приготовление может быть осуществлено следующим образом: требуемое раскрытое соединение растворяют в солевом растворе при перемешивании. Необязательно добавляют СгеторЬог ЕЬ, этиловый спирт или кислоту. Раствор фильтруют для стерилизации (размер пор 0,22 мкм) и помещают в асептических условиях в стерилизованные термической обработкой инфузионные флаконы. Инфузионные флаконы герметично закрывают резиновыми пробками.
В данном примере активный ингредиент может быть заменен таким же количеством любого из соединений по настоящему изобретению, в частности тем же количеством любого из приведенных в каче- 61 026389 стве примеров соединений.
Количество раскрытого соединения на одну ампулу для использования в приготовленной для человека фармацевтической композиции определяется как из токсикологических, так и фармакокинетических данных, полученных из подходящих животных моделей, например на крысах и по меньшей мере на одном виде, отличном от грызунов, и корректируется на основе предварительных данных клинических исследований на людях. Например, подходящим может оказаться содержание раскрытого соединения в количестве приблизительно от 10 до 1000 мг на стандартную лекарственную форму в виде ампулы.
Носителями, пригодными для парентеральных препаратов, являются, например, вода, физиологический раствор и т. п., которые могут быть использованы вместе с трис(гидроксиметил)аминометаном, карбонатом натрия, гидроксидом натрия или т .п., которые применяют в качестве солюбилизатора или регуляторов рН. Парентеральные препараты предпочтительно содержат от 50 до 1000 мг раскрытого соединения на стандартную лекарственную форму.
Специалистам должно быть понятно, что различные модификации и вариации можно вносить в настоящее изобретение, не выходя за объем или не отступая от сущности настоящего изобретения. Другие варианты осуществления настоящего изобретения станут очевидны специалистам в данной области из описания и практического осуществления раскрытого в данном описании изобретения. Предполагается, что описание и приведенные примеры следует рассматривать только в качестве иллюстрации, при этом истинный объем и сущность изобретения указаны в следующей формуле изобретения.

Claims (17)

1. Соединение, имеющее структуру, представленную формулой где т обозначает 1; п обозначает целое число от 0 до 3;
Ζ независимо выбирают из Ν и СН;
К1 выбирают из атома галогена и С1-С3 галогеноалкила;
каждый из К2, К3 и К4 независимо выбирают из атома водорода, атома галогена, гидроксила, циано, амино, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкила и С1-С6 галогеноалкила;
К5 выбирают из NК6К7 и Су, замещенного 0-3 группами, независимо выбранными из атома галогена, гидроксила, амино, циано, гидрокси-С1-С6 алкила, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкила, С1-С6 галогеноалкила, С3-С6 циклоалкила и Су;
Су представляет собой гетероциклоалкил, выбранный из азиридинила, азетидинила, пирролидинила, пиперидинила, азепанила, оксазолидинила, имидазолидинила, пиразолидинила, пиперазинила, оксазинанила, морфолинила, гексагидропиримидинила и гексагидропиридазинила; и каждый из К6 и К7 независимо выбирают из атома водорода, С1-С6 алкила, С3-С6 циклоалкила и С3-С6 гетероциклоалкила, содержащего гетероатом, выбранный из одного или более атомов Ν и О;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, где К5 выбирают из где каждый из К8а, К8Ъ, К8с, К8<1 и К8е независимо выбирают из атома водорода, атома галогена, амино, циано, гидроксила, С2-С6 алкоксиалкила, С1-С3 алкокси, С1-С3 галогеноалкила и С1-С6 алкила, каждый из К9а, К9Ъ, К9с и К94 независимо выбирают из атома водорода, амино, атома галогена, гидроксила, С1-С3 алкила, С1-С3 алкокси, С1-С3 галогеноалкила, азиридинила, азетидинила и пирролидинила.
3. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать лизин-специфичную деметилазу гистонов (Ъ8Э). содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
4. Способ снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по п.1.
5. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из:
- 62 026389 или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать лизин-специфичную деметилазу гистонов (ЬЗЭ), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.5 и фармацевтически приемлемый носитель.
7. Способ снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по п.5.
8. Соединение, имеюшее структуру, представленную формулой или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать лизин-специфичную деметилазу гистонов (ЬЗЭ), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.8 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Способ снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по п.8.
11. Соединение, имеющее структуру, представленную формулой или его фармацевтически приемлемая соль.
12. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать лизин-специфичную деметилазу гистонов (ЬЗЭ), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.11 и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Способ снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по п.11.
14. Соединение, имеющее структуру, представленную формулой или его фармацевтически приемлемая соль.
15. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать лизин-специфичную деметилазу гистонов (ЬЗЭ), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.14 и фармацевтически приемлемый носитель.
16. Способ снижения активности деметилазы гистонов у млекопитающего, при этом способ включает стадию введения млекопитающему эффективного количества соединения по п.14.
17. Соединение, имеющее структуру, представленную формулой или его фармацевтически приемлемая соль.
EA201490453A 2011-08-15 2012-08-15 Замещенные аналоги (e)-n'-(1-фенилэтилиден)бензогидразида в качестве ингибиторов деметилазы гистонов EA026389B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161523801P 2011-08-15 2011-08-15
PCT/US2012/050948 WO2013025805A1 (en) 2011-08-15 2012-08-15 Substituted (e)-n'-(1-phenylethylidene) benzohydrazide analogs as histone demethylase inhiitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490453A1 EA201490453A1 (ru) 2014-09-30
EA026389B1 true EA026389B1 (ru) 2017-04-28

Family

ID=47715455

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490453A EA026389B1 (ru) 2011-08-15 2012-08-15 Замещенные аналоги (e)-n'-(1-фенилэтилиден)бензогидразида в качестве ингибиторов деметилазы гистонов

Country Status (25)

Country Link
US (2) US8987335B2 (ru)
EP (1) EP2744330B1 (ru)
JP (1) JP6122006B2 (ru)
KR (1) KR101983537B1 (ru)
CN (1) CN103929960B (ru)
AU (1) AU2012296639B2 (ru)
BR (1) BR112014003382B1 (ru)
CA (1) CA2843609C (ru)
CY (1) CY1123345T1 (ru)
DK (1) DK2744330T3 (ru)
EA (1) EA026389B1 (ru)
ES (1) ES2821548T3 (ru)
HK (1) HK1200052A1 (ru)
HR (1) HRP20201433T1 (ru)
HU (1) HUE050962T2 (ru)
IL (1) IL230728A (ru)
IN (1) IN2014CN00961A (ru)
LT (1) LT2744330T (ru)
MX (1) MX356486B (ru)
PL (1) PL2744330T3 (ru)
PT (1) PT2744330T (ru)
SG (1) SG2014009609A (ru)
SI (1) SI2744330T1 (ru)
WO (1) WO2013025805A1 (ru)
ZA (1) ZA201400881B (ru)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9266838B2 (en) 2011-08-15 2016-02-23 University Of Utah Research Foundation Substituted (E)-N′-(1-phenylethylidene)benzohydrazide analogs as histone demethylase inhibitors
PL2903968T3 (pl) 2012-10-02 2017-05-31 Gilead Sciences, Inc. Inhibitory demetylaz histonowych
CN105263906B (zh) * 2013-02-27 2018-11-23 吉利德科学公司 组蛋白脱甲基酶的抑制剂
JP6320506B2 (ja) * 2013-03-12 2018-05-09 セルジーン クオンティセル リサーチ，インク． ヒストンデメチラーゼ阻害剤
CN105555784B (zh) 2013-06-19 2019-03-15 犹他大学研究基金会 作为组蛋白去甲基化酶抑制剂的被取代的(e)-n’-(1-苯亚乙基)苯甲酰肼类似物
WO2015123424A1 (en) 2014-02-13 2015-08-20 Incyte Corporation Cyclopropylamines as lsd1 inhibitors
EP3392244A1 (en) 2014-02-13 2018-10-24 Incyte Corporation Cyclopropylamines as lsd1 inhibitors
CN106164066B (zh) 2014-02-13 2020-01-17 因赛特公司 作为lsd1抑制剂的环丙胺
WO2015123437A1 (en) 2014-02-13 2015-08-20 Incyte Corporation Cyclopropylamines as lsd1 inhibitors
US10807944B2 (en) 2014-04-04 2020-10-20 University Of Florida Research Foundation, Inc. HDAC inhibitor compounds and methods of treatment
JP2017518312A (ja) * 2014-06-05 2017-07-06 ユニバーシティ・オブ・カンザス マルメリン類似体および癌治療における使用方法
US9695167B2 (en) 2014-07-10 2017-07-04 Incyte Corporation Substituted triazolo[1,5-a]pyridines and triazolo[1,5-a]pyrazines as LSD1 inhibitors
US9758523B2 (en) 2014-07-10 2017-09-12 Incyte Corporation Triazolopyridines and triazolopyrazines as LSD1 inhibitors
TWI687419B (zh) 2014-07-10 2020-03-11 美商英塞特公司 作為ｌｓｄ１抑制劑之咪唑并吡啶及咪唑并吡嗪
WO2016007736A1 (en) 2014-07-10 2016-01-14 Incyte Corporation Imidazopyrazines as lsd1 inhibitors
MA40470A (fr) 2014-08-27 2016-03-03 Gilead Sciences Inc Composés et procédés d'inhibition des histones déméthylases
EP2993175A1 (en) 2014-09-05 2016-03-09 IEO - Istituto Europeo di Oncologia Srl Thienopyrroles as histone demethylase inhibitors
CN106146361A (zh) * 2015-03-16 2016-11-23 四川大学 茚-1-亚基磺酰基苯甲酰肼衍生物及其制备方法和用途
ES2757948T3 (es) 2015-04-03 2020-04-30 Incyte Corp Compuestos heterocíclicos como inhibidores LSD1
US20180284095A1 (en) 2015-06-12 2018-10-04 Oryzon Genomics, S.A. Biomarkers associated with lsd1 inhibitors and uses thereof
WO2017013061A1 (en) 2015-07-17 2017-01-26 Oryzon Genomics, S.A. Biomarkers associated with lsd1 inhibitors and uses thereof
CR20180152A (es) 2015-08-12 2018-08-09 Incyte Corp Sales de un inhibidor de lsd1
CN109195593A (zh) 2016-03-15 2019-01-11 奥莱松基因组股份有限公司 用于治疗实体瘤的lsd1抑制剂的组合
EP3430015A1 (en) 2016-03-16 2019-01-23 Oryzon Genomics, S.A. Methods to determine kdm1a target engagement and chemoprobes useful therefor
KR102664509B1 (ko) * 2016-04-22 2024-05-10 인사이트 코포레이션 Lsd1 억제제의 제제
EP3246330A1 (en) 2016-05-18 2017-11-22 Istituto Europeo di Oncologia S.r.l. Imidazoles as histone demethylase inhibitors
US11427543B2 (en) 2016-07-19 2022-08-30 The General Hospital Corporation Compounds for targeting cancer stem cells
WO2018083138A1 (en) 2016-11-03 2018-05-11 Oryzon Genomics, S.A. Pharmacodynamic biomarkers for personalized cancer care using epigenetic modifying agents
US20190256930A1 (en) 2016-11-03 2019-08-22 Oryzon Genomics, S.A. Biomarkers for determining responsiveness to lsd1 inhibitors
US20200069677A1 (en) 2016-12-09 2020-03-05 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Markers for personalized cancer treatment with lsd1 inhibitors
CN106831489B (zh) * 2017-03-23 2018-04-17 郑州大学 苯环丙胺酰腙类化合物、制备方法及其应用
MX2020001323A (es) 2017-08-03 2020-03-20 Oryzon Genomics Sa Metodos para tratar alteraciones del comportamiento.
US10980777B2 (en) 2017-08-18 2021-04-20 Istituto Europeo Di Oncologia S.R.L. Indole derivatives as histone demethylase inhibitors
WO2019068326A1 (en) 2017-10-05 2019-04-11 Université D'aix-Marseille INHIBITORS OF LSD1 FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF CARDIOMYOPATHIES
LT3762368T (lt) 2018-03-08 2022-06-10 Incyte Corporation Aminopirazindiolio junginiai, kaip pi3k-γ inhibitoriai
WO2020010003A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Incyte Corporation AMINOPYRAZINE DERIVATIVES AS PI3K-γ INHIBITORS
US10968200B2 (en) 2018-08-31 2021-04-06 Incyte Corporation Salts of an LSD1 inhibitor and processes for preparing the same
CN109793742A (zh) * 2019-03-04 2019-05-24 四川大学华西医院 一种药物化合物应用
CN109758442B (zh) * 2019-03-20 2021-08-17 武汉大学 二芳基酰肼类化合物在制备抗流感病毒药物中的应用
JP2022526755A (ja) 2019-03-20 2022-05-26 オリソン ヘノミクス，ソシエダ アノニマ 化合物バフィデムスタット（ｖａｆｉｄｅｍｓｔａｔ）などｋｄｍ１ａ阻害剤を使用した注意欠陥多動性障害の処置方法
AU2020242302A1 (en) 2019-03-20 2021-09-16 Oryzon Genomics, S.A. Methods of treating borderline personality disorder
CN114341366A (zh) 2019-07-05 2022-04-12 奥莱松基因组股份有限公司 用于使用kdm1a抑制剂个体化治疗小细胞肺癌的生物标志物和方法
WO2022020804A1 (en) * 2020-07-24 2022-01-27 Salarius Pharmaceuticals Llc Methods of inhibiting lysine-specific demethylase 1 (lsd-1)
EP3964204A1 (en) 2020-09-08 2022-03-09 Université d'Aix-Marseille Lsd1 inhibitors for use in the treatment and prevention of fibrosis of tissues
CA3231846A1 (en) 2021-04-08 2022-10-13 Tamara Maes Combinations of lsd1 inhibitors for treating myeloid cancers
WO2023217758A1 (en) 2022-05-09 2023-11-16 Oryzon Genomics, S.A. Methods of treating malignant peripheral nerve sheath tumor (mpnst) using lsd1 inhibitors
WO2023217784A1 (en) 2022-05-09 2023-11-16 Oryzon Genomics, S.A. Methods of treating nf1-mutant tumors using lsd1 inhibitors
CN116077661A (zh) * 2022-08-22 2023-05-09 沈阳药科大学 Kdm1a抑制剂在制备治疗dnmt3a基因缺失癌症的药物中的用途
WO2024110649A1 (en) 2022-11-24 2024-05-30 Oryzon Genomics, S.A. Combinations of lsd1 inhibitors and menin inhibitors for treating cancer

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040110963A1 (en) * 2001-01-22 2004-06-10 Kaspar Burri Novel hydrazones
US20080269206A1 (en) * 2007-04-02 2008-10-30 Institute For Oneworld Health Cftr inhibitor compounds and uses thereof
US20090247641A1 (en) * 2005-08-26 2009-10-01 Lee Roy Morgan Hydrazone agents to treat cutaneous lesions
US20100247543A1 (en) * 2007-08-24 2010-09-30 Oryzon Genomics, S.A. Treatment and prevention of neurodegenerative diseases

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002302472A (ja) * 2001-01-31 2002-10-18 Meiji Seika Kaisha Ltd メイラード反応阻害剤
KR20060054308A (ko) 2003-07-16 2006-05-22 가부시키가이샤 이야쿠 분지 셋케이 겐쿠쇼 피부 색소침착의 치료제
WO2006136008A1 (en) 2005-05-24 2006-12-28 University Health Network Salicylic acid hydrazones as inhibitors of the erk mapkinase pathway and for the treatment of cancer
KR20080070848A (ko) 2005-11-03 2008-07-31 레드포인트 바이오 코포레이션 히드라존 유도체 및 이의 용도
WO2008066887A2 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Small molecule inhibitors of bcl6
WO2008097504A2 (en) 2007-02-02 2008-08-14 Redpoint Bio Corporation Use of a trpm5 inhibitor to regulate insulin and glp-1 release
AR070898A1 (es) * 2008-03-18 2010-05-12 Solvay Pharm Bv Derivados de arilsulfonil pirazolin carboxamidina como antagonistas de 5-ht6
CA2729766A1 (en) 2008-07-01 2010-01-07 Zacharon Pharmaceuticals, Inc. Heparan sulfate inhibitors
EP2376440A2 (en) * 2009-01-14 2011-10-19 Dow AgroSciences LLC Fungicidal compositions including hydrazone derivatives and copper
US20110189306A1 (en) * 2010-01-13 2011-08-04 Norbert Kartner COMPOUNDS, COMPOSITIONS AND TREATMENTS FOR V-ATPase RELATED DISEASES

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040110963A1 (en) * 2001-01-22 2004-06-10 Kaspar Burri Novel hydrazones
US20090247641A1 (en) * 2005-08-26 2009-10-01 Lee Roy Morgan Hydrazone agents to treat cutaneous lesions
US20080269206A1 (en) * 2007-04-02 2008-10-30 Institute For Oneworld Health Cftr inhibitor compounds and uses thereof
US20100247543A1 (en) * 2007-08-24 2010-09-30 Oryzon Genomics, S.A. Treatment and prevention of neurodegenerative diseases

Also Published As

Publication number Publication date
BR112014003382B1 (pt) 2022-03-15
PL2744330T3 (pl) 2020-12-14
AU2012296639A1 (en) 2014-03-06
DK2744330T3 (da) 2020-09-07
EP2744330B1 (en) 2020-07-15
KR20140077887A (ko) 2014-06-24
AU2012296639B2 (en) 2016-06-09
US9555024B2 (en) 2017-01-31
HRP20201433T1 (hr) 2020-12-11
CY1123345T1 (el) 2022-03-24
ZA201400881B (en) 2015-07-29
US20140094445A1 (en) 2014-04-03
MX2014001842A (es) 2014-07-24
HK1200052A1 (en) 2015-07-31
HUE050962T2 (hu) 2021-01-28
IL230728A (en) 2017-05-29
CN103929960A (zh) 2014-07-16
ES2821548T3 (es) 2021-04-26
KR101983537B1 (ko) 2019-05-29
SI2744330T1 (sl) 2020-11-30
JP2014527531A (ja) 2014-10-16
US20150150864A1 (en) 2015-06-04
NZ621078A (en) 2015-10-30
CN103929960B (zh) 2016-08-17
LT2744330T (lt) 2020-10-26
IN2014CN00961A (ru) 2015-04-10
BR112014003382A2 (pt) 2017-11-21
EP2744330A1 (en) 2014-06-25
JP6122006B2 (ja) 2017-04-26
CA2843609C (en) 2020-12-08
EP2744330A4 (en) 2015-03-25
WO2013025805A1 (en) 2013-02-21
IL230728A0 (en) 2014-03-31
CA2843609A1 (en) 2013-02-21
EA201490453A1 (ru) 2014-09-30
MX356486B (es) 2018-05-30
SG2014009609A (en) 2014-05-29
PT2744330T (pt) 2020-10-01
US8987335B2 (en) 2015-03-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA026389B1 (ru) Замещенные аналоги (e)-n&#39;-(1-фенилэтилиден)бензогидразида в качестве ингибиторов деметилазы гистонов
KR102288648B1 (ko) 히스톤 데메틸라제 억제제로서의 치환된 (e)-n′-(1-페닐에틸리덴)벤조하이드라지드 동족체
US8569511B2 (en) Substituted 3-(1H-benzo[d]imidazol-2-yl)-1H-indazole analogs as inhibitors of the PDK1 kinase
RU2753056C2 (ru) Бициклические гетероарильные производные в качестве стимуляторов cftr
BR112018001469B1 (pt) Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
JP2013544891A (ja) ｍＧＬＵＲ５受容体のアロステリック調節剤としての二環式ピラゾール化合物
US9552457B2 (en) Reprogramming effector protein interactions to correct epigenetic defects in cancer
US20170119795A1 (en) Fused triterpene compounds and uses thereof
US9642857B2 (en) Substituted (E)-N′-(1-phenylethylidene)benzohydrazide analogs as histone demethylase inhibitors
NZ621078B2 (en) Substituted (e)-n&#39;-(1-phenylethylidene) benzohydrazide analogs as histone demethylase inhibitors