MX2014001842A - Analogos sustituidos de la (e)-n' -(1-feniletiliden)benzohidrazida como inhibidores de la histona desmetilasa. - Google Patents

Abstract

En un aspecto, la invención se relaciona con análogos de (E)-N'-(1 -feniletiliden)benzohidrazida sustituidos, derivados de los mismos, y compuestos relacionados, que son útiles como inhibidores de la histona desmetilasa específica de la lisina, incluyendo LSD1; métodos sintéticos para hacer los compuestos; composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos; y métodos para utilizar los compuestos y composiciones para tratar trastornos asociados con la disfunción de la LSD1; este resumen se pretende como una herramienta de exploración para los propósitos de investigación en la técnica particular, y no pretende ser limitante de la presente invención.

Description

ANÁLOGOS SUSTITUIDOS DE LA (E)-N'-M- FENILETILIDEN)BENZOHIDRAZIDA COMO INHIBIDORES DE LA HISTONA DESMETILASA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Durante la década pasada se ha vuelto claro que los cambios epigenéticos, que alteran la actividad del gen sin alterar la secuencia del ADN, colaboran con los errores genéticos para fomentar el desarrollo y progresión del cáncer (Tsai, H. C. y Baylin, S. B. Cell Res 2011 , 21 (3), 502-17; y Fullgrabe, J., Kavanagh, E., y Joseph, B. Oncogene 201 1). La regulación de las modificaciones del ADN y las proteínas asociadas con el ADN se han vuelto un área de intenso interés, y las enzimas involucradas en estos procesos se han sugerido como una nueva clase de objetivos de proteínas para el desarrollo de fármacos. Las proteínas principales asociadas con el ADN son las proteínas de histona. Las colas de histona se someten a una variedad de modificaciones postraduccionales, tales como fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, y estas modificaciones, especialmente la acetilación y metilación en los residuos de lisina, juegan un papel principal en la regulación de la expresión del gen, y con frecuencia están desreguladas en el cáncer (Fullgrabe, J., Kavanagh, E., y Joseph, B. Oncogene 2011).

Recientemente, se encontró que una enzima llamada Desmetilasa 1 Específica de la Lisina (LSD1), catalizaba la desmetilación oxidativa de la historia H3 monometilada y dimetilada en la lisina 4 (H3K4me1 y H3K4me2) y la lisina 9 (H3K9me1 y H3K9me2), a través de una reacción dependiente del dinucleótido de flavina-adenina (FAD) (Shi, Y., et al. Cell 2004, 1 19 (7), 941-53; y Metzger, E., et al. Nature 2005, 437 (7057), 436-9). Mientras que la acetilación de la histona está asociada con la cromatina suelta y la activación del gen, la metilación de las histonas es menos directa. Utilizando los residuos de lisina regulados por la LSD1 como un ejemplo, la metilación en H3K4 está asociada generalmente con la activación del gen, mientras que la metilación de H3K9 está asociada con la represión transcripcional.

Actualmente, hay un homólogo de mamífero conocido de LSD1 , que es una proteína designada de manera variada como LSD2, KDM1b y AOF1. Comparte una homología del dominio similar, pero exhibe menos de 31 % de identidad de la secuencia (Fang, R. et al. Molecular Cell 2010, 39:222-233). Se ha mostrado que LSD2 es una desmetilasa de H3K4me1/2 que regula de manera específica la metilación H3K4 de la histona dentro de regiones intragénicas de sus genes objetivo (ibid.). Tanto LSD1 como LSD2, contienen un dominio SWIRM, un motivo que se une a la coenzima del FAD, y un dominio de oxidasa de la amina C terminal, todos los cuales son críticos para la actividad enzimática. Sin embargo, a diferencia de la LSD1 , la proteína LSD2 contiene un dominio del dedo de zinc del tipo CW, en su dominio N terminal, una región que no está estructurada en la LSD1. Además, la LSD2 carece del "dominio de torre" de la LSD1. A un nivel celular, se ha sugerido que la LSD2 tiene un papel en la regulación transcripcional (ibid.). Como se esperaba, la LSD2 parece jugar también un papel en la regulación de la metilación del ADN, aunque el papel de la metilación del ADN puede ser específico de la etapa del desarrollo (ibid.; Ciccone, D.N., et al. Nature 2009 461 :415-418; Karytinos, A., et al. J. Biol. Chem. 2009 284:17775-17782; y Yang, Z., et al. Cell Res. 2010 20:276-287).

Varias líneas de evidencia apuntan a la LSD1 como que es un posible objetivo terapéutico en el cáncer. Supuestamente, la LSD1 se sobreexpresa en una variedad de tumores, incluyendo neuroblastoma, tumores de mama negativos a ER, de vejiga, pulmón y colorrectales (Schulte, J. H., et al. Cáncer Res 2009, 69 (5), 2065-71 ; Lim, S., et al. Carcinogenesis 2010, 31 (3), 512-20; y Hayami, S., et al. Int J Cáncer 2011 , 128 (3), 574-86). La metilación incrementada en la marca de H3K4 permisiva por la inhibición de LSD1 , ha mostrado reactivar la expresión de los genes supresores del tumor en los modelos del cáncer (Huang, Y., et al. Clin Cáncer Res 2009, 15 (23), 7217-28). Además, se ha encontrado que la LSD1 se asocia con los receptores del estrógeno y el andrógeno conduciendo a la desmetilación específica de la marca de H3K9 represiva, incrementando por lo tanto, la expresión del gen objetivo (Metzger, E., et al. Nature 2005, 437 (7057), 436-9; y Garcia-Bassets, I., et al. Cell 2007, 128 (3), 505-18). Así, dependiendo de los cofactores unidos a la LSD1 , la desmetilación mediante LSD1 puede contribuir al cáncer a través de la marca de H3K4 permisiva y de H3K9 represiva. Por lo tanto, la inhibición de LSD1 puede ser una estrategia efectiva para la reexpresión de los genes supresores del tumor silenciados epigenéticamente, así como la desregulación de trayectorias importantes del cáncer en varios tipos de cáncer. Se han reportados varios inhibidores de LSD1 , pero han mostrado una selectividad y/o propiedades farmacológicas deficientes, haciendo difícil la exploración adicional de la biología de la LSD1.

Los inhibidores de la monoamina oxidasa (MAO), tales como la tranilcipromina y la pargilina, se han reportado como inhibidores de la LSD1 , y ha habido varios reportes con respecto a intentos de descubrir derivados con selectividad incrementada para la LSD1 sobre la MAO (Mimasu, S., et al. Biochemistry 2010, 49 (30), 6494-503; Binda, C, et al. J Am Chem Soc 2010, 132 (19), 6827-33; Culhane, J. C, et al. J Am Chem Soc 2006, 128 (14), 4536-7; Culhane, J. C, et al. J Am Chem Soc 2010, 132 (9), 3164-76; y Ueda, R., et al. J Am Chem Soc 2009, 131 (48), 17536-7). Estos compuestos inactivan de manera irreversible la LSD1 mediante unión covalente al cofactor del FAD. Los derivados de poliamina también se han evaluado como inhibidores de la LSD1 , en donde se han descrito compuestos con actividad en el intervalo µ? (Huang, Y., et al. Clin Cáncer Res 2009, 15 (23), 7217-28; Sharma, S. K., et al. J Med Chem 2010, 53 (14), 5197-212; y Huang, Y., et al. Proc Nati Acad Sci U S A 2007, 104 (19), 8023-8). En general, éstos y otros inhibidores reportados de la LSD1 no son selectivos de manera adecuada y suficientemente potentes para interactuar de manera óptima con los residuos de aminoácidos cruciales del sitio de unión al sustrato presente en la LSD1.

En resumen, las proteínas de la LSD juegan un papel clave en la regulación epigenética y transcripcional, y están frecuentemente alteradas en los cánceres de mamífero, haciéndolas un objetivo atractivo para la intervención terapéutica. A pesar de los avances en el descubrimiento de fármacos dirigidos para identificar los inhibidores de la actividad de la proteína LSD1 y/o LSD2, todavía hay una escasez de compuestos que sean tanto inhibidores potentes como eficaces y selectivos de la LSD1 o la LSD2. Además, hay una escasez de compuestos efectivos en el tratamiento del cáncer y otras enfermedades asociadas con la disfunción de la LSD1 y/o la LSD2. Estas necesidades y otras necesidades se satisfacen por la presente invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con los propósitos de la invención, como se incorpora y describe ampliamente en la presente, la invención, en un aspecto, se relaciona con compuestos útiles como inhibidores de la desmetilasa específica de la lisina o LSD. En un aspecto adicional, los compuestos descritos y los productos de los métodos descritos para hacerlos, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable de los mismos, son moduladores de la actividad de la LSD, métodos para hacer los mismos, composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos, y métodos para tratar los trastornos asociados con una disfunción de la actividad de la LSD utilizando los mismos. En un aspecto todavía adicional, la presente invención se relaciona con compuestos que se unen a una proteína de la LSD y modula de manera negativa la actividad de la LSD. Los compuestos descritos pueden, en un aspecto, exhibir una selectividad por el subtipo. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben selectividad para el miembro LSD1 de la familia de proteínas LSD. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben selectividad para el miembro LSD2 de la familia de proteínas LSD.

También se describen composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto descrito y un portador farmacéuticamente aceptable.

También se describen métodos sintéticos para hacer los compuestos descritos. En un aspecto adicional, se describen los productos de los métodos sintéticos descritos.

Se describen métodos para el tratamiento de un trastorno asociado con una disfunción de la actividad de la LSD en un mamífero, que comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se describen métodos para la inhibición de la actividad de la LSD en un mamífero, que comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se describen métodos para inhibir la actividad de la LSD en al menos una célula, que comprende el paso de poner en contacto al menos una célula con una cantidad efectiva de al menos un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se describen usos de un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo. En un aspecto adicional, la invención se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad efectiva de un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo.

También se describen kits que comprenden al menos un compuesto descrito, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más de: (a) al menos un agente conocido por incrementar la actividad de la histona desmetilasa; (b) al menos un agente conocido por disminuir la actividad de la histona desmetilasa; (c) al menos un agente conocido por tratar un trastorno de proliferación celular no controlada; (d) al menos un agente conocido por tratar un trastorno neurodegenerativo; (e) instrucciones para tratar un trastorno neurodegenerativo; o (f) instrucciones para tratar un trastorno asociado con la proliferación celular no controlada.

También se describen métodos para fabricar un medicamento, que comprenden combinar al menos un compuesto descrito o al menos un producto descrito con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto adicional, la invención se relaciona con el uso de un compuesto descrito en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno asociado con una disfunción de la actividad de la LSD. En aún otro aspecto adicional, la disfunción de la actividad de la LSD es una disfunción de la actividad de la LSD1. En aún otro aspecto, la disfunción de la actividad de la LSD es una disfunción de la actividad de la LSD2. En un aspecto todavía adicional, la invención se relaciona con el uso del compuesto descrito en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada.

También se describen usos de un compuesto descrito, o un producto descrito en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno asociado con una disfunción de la LSD en un mamífero.

Aunque los aspectos de la presente invención pueden describirse y reclamarse en una clase establecida particular, tal como clase establecida del sistema, esto es para conveniencia únicamente, y alguien con experiencia en la técnica entenderá que cada aspecto de la presente invención puede describirse y reclamarse en cualquier clase establecida. A menos que se indique de expresamente de otra manera, de ninguna forma se pretende que algún método o aspecto expuesto en la presente, se interprete como que requiere que sus pasos se realicen en un orden específico. En consecuencia, en donde el método reclamado no indica de manera en las reivindicaciones o descripciones que los pasos deben limitarse a un orden específico, de ninguna manera se pretende que se infiera un orden, en ningún respecto. Esto se mantiene para cualesquier posibles bases no expresadas para la interpretación, incluyendo cuestiones de lógica con respecto al arreglo de los pasos o flujo de operación, el significado simple derivado de la organización o puntuación gramatical, o el número o tipo de aspectos descritos en la especificación.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención puede entenderse más fácilmente con referencia a la siguiente descripción detallada de la invención y los Ejemplos incluidos en la misma.

Antes de que se revelen y describan los presentes compuestos, composiciones, artículos, sistemas, dispositivos y/o métodos, se entenderá que no están limitados a métodos sintéticos específicos, a menos que se especifique de otra manera, o a reactivos particulares, a menos que se especifique de otra manera, puesto que tales pueden variar, por supuesto.

También se entenderá que la terminología utilizada en la presente es para describir aspectos particulares únicamente, y no pretende ser limitante.

Aunque cualquiera de los métodos y materiales similares o equivalentes a aquéllos descritos en la presente pueden utilizarse en la práctica o prueba de la presente invención, se describen ahora los métodos y materiales ejemplares.

Todas las publicaciones mencionadas en la presente se incorporan en la presente como referencia para revelar y describir los métodos y/o materiales con relación a los cuales se citan las publicaciones. Las publicaciones discutidas en la presente se proporcionan únicamente para su descripción antes de la fecha de presentación de la presente solicitud. Nada en la presente debe interpretarse como una admisión de que la presente invención no tiene el derecho a la prefecha de tal publicación, en virtud de la invención previa. Además, las fechas de publicación proporcionadas en la presente, pueden ser diferentes de las fechas de publicación reales, lo que puede requerir una confirmación independiente.

A. Definiciones Como se utiliza en la presente, la nomenclatura para los compuestos, incluyendo los compuestos orgánicos, puede proporcionarse utilizando los nombres comunes, las recomendaciones de la IUPAC, IUBMB o CAS para la nomenclatura. Cuando una o más características estereoquímicas están presentes, pueden emplearse las reglas de Cahn-Ingold-Prelog para la estereoquímica para designar la prioridad estereoquímica, especificación E/Z, y lo similar. Alguien con experiencia en la técnica puede determinar fácilmente la estructura de un compuesto si se proporciona un nombre, ya sea por la reducción sistémica de la estructura del compuesto utilizando las convenciones en el nombrado, o por el programa comercialmente disponible, tal como ChemDraw™ (CambrkJgesoft Corporation, E.U.A.).

Como se utiliza en la especificación y las reivindicaciones anexas, las formas en singular "un, una" y "el, la", incluyen los referentes en plural, a menos que el contexto lo indique claramente de otra manera. Así, por ejemplo, la referencia a "un grupo funcional", "un alquilo" o "un residuo", incluyen mezclas de dos o más de tales grupos funcionales, alquilos o residuos y lo similar.

Los intervalos pueden expresarse en la presente como de "aproximadamente" un valor particular, y/o a "aproximadamente" otro valor particular. Cuando se expresa tal intervalo, un aspecto adicional incluye de un valor particular y/o al otro valor particular. De manera similar, cuando los valores se expresan como aproximaciones, mediante el uso del antecedente "aproximadamente", se entenderá que el valor particular forma un aspecto adicional. Se entenderá además, que los puntos finales de cada uno de los intervalos son significativos tanto con relación al otro punto final como de manera independiente del otro punto final. También se entenderá que hay varios valores descritos en la presente, y que cada valor también se describe en la presente como "aproximadamente" ese valor particular, además del valor mismo. Por ejemplo, si se describe el valor "10", entonces también se describe "aproximadamente 10". También se entenderá que cada unidad entre dos unidades particulares también está descrita. Por ejemplo, si se describen 10 y 15, entonces 11 , 12, 13 y 14 también se describen.

Las referencias en la especificación y las reivindicaciones concluyentes para las partes en peso de un elemento o componente particular en una composición, denotan la relación en peso entre el elemento o componente y cualesquier otros elementos o componentes en la composición o artículo, para la cual se expresa una parte en peso. Así, en un compuesto que contiene 2 partes en peso del componente X y 5 partes en peso del componente Y, X y Y están presentes en una relación en peso de 2:5, y están presentes en tal relación sin importar si los componentes adicionales están contenidos en el compuesto.

Un por ciento en peso (% en peso) de un componente, a menos que se indique de manera específica lo contrario, se basa en el peso total de la formulación o composición en la cual se incluye el componente.

Como se utiliza en la presente, el término "LSD" se refiere de manera colectiva a cualquiera o ambas de LSD1 y LSD2.

Como se utiliza en la presente, los términos "LSD1" y "desmetilasa 1 específica de la lisina", pueden utilizarse de manera indistinta, y se refieren a una histona desmetilasa codificada por el gen KDM1A. El gen KDM1A tiene un sitio en el mapa del gen de 1 p36.12 como se describe por la banda citogenética del Gen Entrez, la banda citogenética Ensembl, y la banda citogenética HGNC. El término LSD1 se refiere a una proteína nativa que tiene 852 aminoácidos con un peso molecular de aproximadamente 92903 Da, y es un miembro de la familia de la flavina monoamina oxidasa. El término LSD1 es inclusivo de la proteína, el producto génico y/o el gen referido por designaciones alternativas tales como: LSD1 , KDM1 ; RP1-184J9.1; AOF2; BHC110; KIAA0601 ; LSD1 ; proteína del complejo BRAF35-HDAC BHC110; complejo BRAF35-HDAC de la proteína que se une a FAD, subunidad de 110 kDa; dominio 2 de la amina oxidasa (que contiene flavina); histona desmetilasa 1 específica de la lisina; histona desmetilasa 1A específica de la lisina; proteína 2 que contiene el dominio de la amina oxidasa que contiene flavina; desmetilasa 1 específica de la lisina (K); dominio 2 de la amina oxidasa (que contiene flavina); y complejo BRAF35-HDAC de la proteína que se une a FAD, subunidad de 110 kDa, como se utilizan por aquellos con experiencia en la técnica.

Como se utiliza en la presente, los términos "LSD2" y "desmetilasa 2 específica de lisina" pueden utilizarse de manera indistinta y se refieren a una histona desmetilasa codificada por el gen KDM1B. El gen KDM1B tiene un locus del mapa del gen de 6p22.3 como se describe por la banda citogenética del Gen Entrez, la banda citogenética Ensembl y la banda citogenética HGNC. El término LSD21 se refiere a una proteína nativa que tiene 822 aminoácidos con un peso molecular de aproximadamente 92098 Da, y es un miembro de la familia de la flavina monoamina oxidasa. El término LSD2 es inclusivo de la proteína, el producto génico y/o el gen referidos por designaciones alternas tales como: LSD2, AOF1; FLJ33898; FLJ34109; FLJ43328; C6orf193; DKFZp686l0412; OTTHUMP00000179125; bA204B7.3; dJ298J15.2; proteína 1 que contiene el dominio de la amina oxidasa que contiene flavina; de histona desmetilasa 2 específica de la lisina; desmetilasa 1B específica de la lisina (K); dominio 1 de la amina oxidasa (que contiene flavina); amina oxidasa, que contiene flavina 1 ; histona desmetilasa 2 específica de la lisina; marco de lectura abierto 193 del cromosoma 6; e histona desmetilasa 1B específica de la lisina, como se utilizan por aquellos con experiencia en la técnica.

Como se utiliza en la presente, el término "histona desmetilasa" se refiere a ese grupo de enzimas que elimina los grupos metilo de las proteínas de histona. El término es inclusivo de la histona lisina desmetilasas, es decir, enzimas que eliminan los grupos metilo de los residuos de lisina en las histonas, e histona arginina desmetilasas, es decir, enzimas que eliminan los grupos metilo de los residuos de arginina en las histonas.

Como se utiliza en la presente, el término "histona lisina desmetilasa" o "histona desmetilasa específica de la lisina", pueden utilizarse de manera indistinta y ambos se refieren a ese grupo de enzimas que eliminan los grupos metilo de los residuos de lisina de las proteínas de histona. Las histona lisina desmetilasas son un grupo de enzimas que comprenden las siguientes formas específicas: LSD1 , LSD2, JMJD2A, J JD2B, JMJD2C y JMJD2D.

Como se utiliza en la presente, los términos "opcional" u "opcionalmente", significan que el evento o circunstancia descrito posteriormente puede o no ocurrir, y que la descripción incluye los casos en donde el evento o circunstancia ocurre, y los casos en donde no.

Como se utiliza en la presente, el término "sujeto" puede ser un vertebrado, tal como un mamífero, un pez, un pájaro, un reptil o un anfibio. Así, el sujeto de los métodos descritos en la presente puede ser un humano, un primate no humano, caballo, cerdo, conejo, perro, oveja, cabra, vaca, gato, cobayo o roedor. El término no denota una edad o sexo particular. Así, los adultos y sujetos recién nacidos, así como fetos, ya sean machos o hembras, pretenden estar cubiertos. En un aspecto, el sujeto es un mamífero. Un paciente se refiere a un sujeto afligido con una enfermedad o trastorno. El término "paciente" incluye sujetos humanos y veterinarios. En algunos aspectos de los métodos descritos, el sujeto puede diagnosticarse con una necesidad para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada, asociada con una disfunción de la histona lisina desmetilasa antes del paso de administración. En algunos aspectos del método descrito, el sujeto se ha diagnosticado con la necesidad para la inhibición de una histona lisina desmetilasa antes del paso de administración.

Como se utiliza en la presente, el término "tratamiento", se refiere al manejo médico de un paciente con la intención de curar, aliviar, estabilizar o prevenir una enfermedad, condición patológica o trastorno. Este término incluye el tratamiento activo, que es, el tratamiento dirigido de manera específica hacia la mejora de una enfermedad, condición patológica o trastorno, y también incluye el tratamiento causal, esto es, el tratamiento dirigido hacia la eliminación de la causa de la enfermedad, condición patológica o trastorno. Además, este término incluye un tratamiento paliativo, esto es, el tratamiento diseñado para el alivio de los síntomas, más que para curar la enfermedad, condición patológica o trastorno; tratamiento preventivo, esto es, tratamiento dirigido a reducir al mínimo o inhibir parcial o completamente el desarrollo de la enfermedad, condición patológica o trastorno asociado; y tratamiento de apoyo, esto es, tratamiento empleado para suplementar otra terapia específica dirigida hacia la mejora de la enfermedad, condición patológica o trastorno asociado. En varios aspectos, el término cubre cualquier tratamiento de un sujeto, incluyendo un mamífero (por ejemplo, un humano), e incluye: (i) prevenir que ocurra la enfermedad en un sujeto que puede estar predispuesto a la enfermedad, pero que aún no se ha diagnosticado como que la tiene; (ii) inhibir la enfermedad, es decir, detener su desarrollo; o (iii) aliviar la enfermedad, es decir, causar la regresión de la enfermedad. En un aspecto, el sujeto es un mamífero tal como un primate, y en un aspecto adicional, el sujeto es un humano. El término "sujeto" también incluye animales domesticados (por ejemplo, gatos, perros, etc.), ganado (por ejemplo, reses, caballos, cerdos, ovejas, cabras, etc.), y animales de laboratorio (por ejemplo, ratón, conejo, rata, cobayo, mosca de la fruta, pez cebra, etc.).

Como se utiliza en la presente, el término "prevención" o "prevenir", se refiere a excluir, evitar, obviar, contrarrestar, detener o impedir que pase algo, especialmente mediante una acción de antemano. Se entiende que en donde se utilice reducir, inhibir o prevenir en la presente, a menos que se indique de manera específica de otra forma, el uso de las otras dos palabras también se describe de manera expresa.

Como se utiliza en la presente, el término "diagnosticado", significa haber sido sometido a un examen físico por una persona con experiencia, por ejemplo, un médico, y encontrado que se tiene una condición que puede diagnosticarse o tratarse por los compuestos, composiciones o métodos descritos en la presente. Por ejemplo, "diagnosticado con un trastorno de proliferación celular no controlada", significa haber sido sometido a un examen físico por una persona con experiencia, por ejemplo, un médico, y encontrado que tiene una condición que puede diagnosticarse o tratarse por un compuesto o composición que puede inhibir una histona lisina desmetilasa. Como un ejemplo adicional, "diagnosticado con una necesidad para la inhibición de una histona desmetilasa", se refiere a haber sido sometido a un examen físico por una persona con experiencia, por ejemplo, un médico, y encontrado que se tiene una condición caracterizada por una disfunción de la histona desmetilasa. Tal diagnóstico puede ser con referencia a un trastorno, tal como un trastorno de proliferación celular no controlada, cáncer y lo similar, como se discute en la presente. Por ejemplo, el término "diagnosticado con una necesidad para la inhibición de la actividad de la histona desmetilasa", se refiere a haber sido sometido a un examen físico por una persona con experiencia, por ejemplo, un médico, y encontrado que se tiene una condición que puede diagnosticarse o tratarse por la inhibición de la actividad de la histona desmetilasa. Por ejemplo, "diagnosticado con una necesidad para el tratamiento de uno o más trastornos de proliferación celular no controlada asociada con una disfunción de la histona desmetilasa", significa haber sido sometido a un examen físico por una persona con experiencia, por ejemplo, un médico, y encontrado que se tiene uno o más trastornos de proliferación celular no controlada asociada con una disfunción de la histona desmetilasa.

Como se utiliza en la presente, la frase "identificado como tener la necesidad de tratamiento por un trastorno", o lo similar, se refiere a la selección de un sujeto basándose en la necesidad para el tratamiento del trastorno. Por ejemplo, un sujeto puede identificarse como que tiene una necesidad para el tratamiento de un trastorno (por ejemplo, un trastorno relacionado con una disfunción de la actividad de la histona desmetilasa), basándose en un diagnóstico anterior por una persona con experiencia y posteriormente, sometido al tratamiento para el trastorno. Está contemplado que la identificación puede realizarse, en un aspecto, por una persona diferente de la persona que hace el diagnóstico. También está contemplado, en un aspecto adicional, que la administración puede realizarse por alguien que realizó posteriormente la administración.

Como se utiliza en la presente, los términos "administrar" y "administración", se refieren a cualquier método para proporcionar una preparación farmacéutica a un sujeto. Tales métodos son bien conocidos por aquellos con experiencia en la técnica e incluyen, de manera no exclusiva, administración oral, administración transdérmica, administración mediante inhalación, administración nasal, administración tópica, administración intravaginal, administración oftálmica, administración intraaural, administración ¡ntracerebral, administración rectal, administración sublingual, administración bucal, administración intrauretral y administración parenteral, incluyendo administración inyectable, tal como administración intravenosa, administración intraarterial, administración intramuscular y administración subcutánea. La administración puede ser continua o intermitente. En varios aspectos, una preparación puede administrarse terapéuticamente; esto es, administrarse para tratar una enfermedad o condición existente. En varios aspectos adicionales, una preparación puede administrarse profilácticamente; esto es, administrarse para la prevención de una enfermedad o condición.

El término "poner en contacto", como se utiliza en la presente, se refiere a poner juntos un compuesto descrito y una célula, receptor objetivo y otra entidad biológica, de tal manera que el compuesto pueda afectar la actividad del objetivo (por ejemplo, receptor, célula, etc.), ya sea directamente; es decir, interactuando con el objetivo mismo, o de manera indirecta; es decir, interactuando con otra molécula, cofactor, factor o proteína del cual es dependiente la actividad del objetivo.

Como se utiliza en la presente, el término "cantidad efectiva", se refiere a una cantidad que es suficiente para lograr el resultado deseado o para tener un efecto en una condición no deseada. Por ejemplo, una "cantidad terapéuticamente efectiva", se refiere a una cantidad que es suficiente para lograr el resultado terapéutico deseado o para tener un efecto en los síntomas no deseados, pero generalmente es insuficiente para causar efectos secundarios adversos. El nivel de dosis terapéuticamente efectivo específico para cualquier paciente particular, dependerá de una variedad de factores, incluyendo el trastorno siendo tratado y la severidad del trastorno; la composición específica empleada; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente; la hora de la administración; la ruta de administración; la velocidad de excreción del compuesto específico empleado; la duración del tratamiento; los fármacos utilizados en combinación o coincidentes con el compuesto específico empleado y factores similares bien conocidos en la técnica médica. Por ejemplo, está dentro de la experiencia de la técnica, empezar con dosis de un compuesto a niveles menores que aquéllos requeridos para lograr el efecto terapéutico deseado, e incrementar gradualmente la dosificación hasta que se alcance el efecto deseado. Si se desea, la dosis diaria efectiva puede dividirse en múltiples dosis para propósitos de administración. En consecuencias, las composiciones de dosis única pueden contener cantidades o submúltiplos de los mismas para constituir la dosis diaria. La dosificación puede ajustarse por el médico del individuo en el caso de cualesquier contraindicaciones. La dosificación puede variar, y puede administrarse en una o más administraciones diarias de la dosis, durante uno o varios días. Puede encontrarse una guía en la literatura para las dosificaciones apropiadas para las clases dadas de productos farmacéuticos. En varios aspectos adicionales, una preparación puede administrarse en una "cantidad profilácticamente efectiva"; esto es, una cantidad efectiva para la prevención de una enfermedad o condición.

Como se utiliza en la presente, "EC50", pretende referirse a la concentración de una sustancia (por ejemplo, un compuesto o un fármaco), que se requiere para el 50% de agonismo o activación de un proceso biológico, o un componente de un proceso, incluyendo una proteína, subunidad, organelo, ribonucleoproteína, etc. En un aspecto, una EC50 puede referirse a la concentración de una sustancia que se requiere para el 50% de agonismo o activación in vivo, como se define además en algún otro lugar en la presente. En un aspecto adicional, EC50 se refiere a la concentración del agonista o activador que provoca la mitad de la respuesta entre la línea basal y la respuesta máxima.

Como se utiliza en la presente, "IC50", pretende referirse a la concentración de una sustancia (por ejemplo, un compuesto o un fármaco), que se requiere para 50% de inhibición de un proceso biológico, o un componente de un proceso, incluyendo una proteína, subunidad, organelo, ribonucleoproteína, etc. Por ejemplo, una IC50 puede referirse a la concentración de una sustancia que se requiere para el 50% de inhibición in vivo o la inhibición se mide in vitro, como se define adicionalmente en algún otro lugar en la presente. De manera alterna, la IC50 se refiere a la concentración inhibidora (IC) máxima a la mitad (50%) de una sustancia. La inhibición puede medirse en una línea celular tal como AN3 CA, BT-20, BT-549, HCT 116, HER218, MCF7, MDA-MB-23 , MDA-MB-235, MDA-MB-435S, MDA-MB-468, PANC-1 , PC-3, SK-N-MC, T-47D y U-87 MG. En aún otro aspecto adicional, la inhibición se mide en una línea celular, por ejemplo, HEK-293 o HeLa, transfectada con una histona desmetilasa de mamífero muíante o del tipo silvestre, por ejemplo, LSD1 o LSD2.

El término "farmacéuticamente aceptable", describe un material que no es biológicamente indeseable o indeseable de otra manera, es decir, no causa un nivel inaceptable de efectos biológicos indeseables o interactúa de una manera dañina.

El término "estable", como se utiliza en la presente, se refiere a los compuestos que no son alterados sustancialmente cuando se someten a condiciones para permitir su producción, detección y, en ciertos aspectos, su recuperación, purificación y uso para uno o más de los propósitos descritos en la presente.

Como se utiliza en la presente, el término "derivado", se refiere a un compuesto que tiene una estructura derivada de la estructura de un compuesto original (por ejemplo, un compuesto descrito en la presente) y cuya estructura es suficientemente similar a aquéllas descritas en la presente, y basándose en esta similitud, se esperaría por alguien con experiencia en la técnica, que exhibiera las mismas o similares actividades y utilidades que los productos reclamados, o que induzca, como un precursor, las mismas o similares actividades y utilidades que los compuestos reclamados. Los derivados ejemplares incluyen sales, ésteres, amidas, sales de ésteres o amidas, y N óxidos de un compuesto original.

Como se utiliza en la presente, el término "portador farmacéuticamente aceptable", se refiere a soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas estériles, así como polvos estériles para la reconstitución en soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes del uso. Los ejemplos de portadores, diluyentes, solventes o vehículos acuosos y no acuosos adecuados incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol y lo similar), carboximetilcelulosa y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales (tales como aceite de oliva) y ésteres orgánicos inyectables tales como oleato de etilo. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tales como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones y mediante el uso de agentes tensoactivos. Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservadores, agentes humectantes, agentes emulsificantes y agentes de dispersión. La prevención de la acción de los microorganismos puede asegurarse mediante la inclusión de varios agentes antibacterianos y antimicóticos, tales como parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico y lo similar. También puede ser deseable incluir agentes ¡sotónicos tales como azúcares, cloruro de sodio y lo similar. La absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable puede lograrse mediante la inclusión de agentes, tales como monoestearato de aluminio y gelatina, que retrasan la absorción. Las formas de depósito inyectables se hacen formando matrices microencapsuladas del fármaco en polímeros biodegradables, tales como polilactida-poliglicólido, poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Dependiendo de la relación del fármaco al polímero y la naturaleza del polímero particular empleado, la velocidad de liberación del fármaco puede controlarse. Las formulaciones inyectables de depósito también son preparadas atrapando el fármaco en liposomas o microemulsiones que son compatibles con los tejidos corporales. Las formulaciones inyectables pueden esterilizarse, por ejemplo, mediante filtración a través de un filtro que retiene las bacterias o incorporando agentes esterilizantes en la forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse o dispersarse en agua estéril u otro medio inyectable estéril justo antes del uso. Los portadores inertes adecuados pueden ser azúcares tales como lactosa. De manera deseable, al menos 95% en peso de las partículas del ingrediente activo, tienen un tamaño de partícula efectivo en el intervalo de 0.01 a 10 micrómetros.

Un residuo de una especie química, como la utilizada en la especificación y reivindicaciones concluyentes, se refiere a la porción que es el producto que resulta de las especies químicas en un esquema de reacción particular, o la formulación o producto químico subsiguiente, sin importar si la porción se obtiene realmente de las especies químicas. Así, un residuo de etilenglicol en un poliéster, se refiere a una o más unidades -OCH2CH2O- en el poliéster, sin importar si el etilenglicol se utilizó para preparar el poliéster. De manera similar, un residuo de ácido sebácico en un poliéster, se refiere a una o más porciones -CO(CH2)8CO- en el poliéster, sin importar si el residuo se obtuvo haciendo reaccionar ácido sebácico o un éster del mismo para obtener el poliéster.

Como se utiliza en la presente, el término "sustituido", está contemplado para incluir todos los sustituyentes permisibles de los compuestos orgánicos. En un amplio aspecto, los sustituyentes permisibles incluyen sustituyentes acíclicos y cíclicos, ramificados y no ramificados, carbocíclicos y heterocíclicos, y aromáticos y no aromáticos de los compuestos orgánicos. Los sustituyentes ilustrativos incluyen, por ejemplo, aquéllos descritos a continuación. Los sustituyentes permisibles pueden ser uno o más y los mismos o diferentes para los compuestos orgánicos apropiados. Para los propósitos de esta descripción, los heteroátomos, tales como nitrógeno, pueden tener sustituyentes de hidrógeno y/o cualesquier sustituyentes permisibles de los compuestos orgánicos descritos en la presente, que satisfagan las valencias de los heteroátomos. Esta descripción no pretende estar limitada de ninguna manera por los sustituyentes permisibles de los compuestos orgánicos. También, los términos "sustitución" o "sustituido con", incluyen la condición implícita de que tal sustitución está de acuerdo con la valencia permitida del átomo sustituido y el sustituyente, y que la sustitución resulta en un compuesto estable, por ejemplo, un compuesto que no se somete de manera espontánea a transformación, tal como mediante rearreglo, ciclización, eliminación, etc. También está contemplado que, en ciertos aspectos, a menos que se indique de manera expresa lo contrario, los sustituyentes individuales pueden sustituirse opcionalmente de manera adicional (es decir, sustituidos o no sustituidos adicionalmente).

En la definición de varios términos, "A1", "A2", "A3" y "A4", se utilizan en la presente como símbolos genéricos para representar varios sustituyentes específicos. Estos símbolos pueden ser cualquier sustituyente, no limitado a aquéllos descritos en la presente, y cuando son definidos para ciertos sustituyentes en un caso, pueden, en otro caso, definirse como algún otro sustituyente.

El término "alquilo" como se utiliza en la presente, es un grupo de hidrocarburo ramificado o no ramificado saturado, de 1 a 24 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, f-butilo, n-pentilo, ¡sopentilo, s-pentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, dodecilo, tetradecilo, hexadecilo, eicosilo, tetracosilo y lo similar. El grupo alquilo puede ser cíclico o acíclico. El grupo alquilo puede estar ramificado o no ramificado. El grupo alquilo también puede estar sustituido o no sustituido. Por ejemplo, el grupo alquilo puede estar sustituido con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, amino, éter, haluro, hidroxi, nitro, sililo, sulfo-oxo o tiol, como se describe en la presente. Un grupo "alquilo inferior", es un grupo alquilo que contiene de uno a seis (por ejemplo, de uno a cuatro) átomos de carbono.

Por ejemplo, un grupo "alquilo de C1-C3", puede seleccionarse de metilo, etilo, n-propilo, ¡-propilo y ciclopropilo, o de un subconjunto de los mismos. En ciertos aspectos, el grupo "alquilo de C1-C3" puede estar sustituido opcionalmente de manera adicional. Como un ejemplo adicional, un "grupo alquilo de C1-C4" puede seleccionarse de metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, ciclopropilo, n-butilo, /-butilo, s-butilo, í-butilo y ciclobutilo, o de un subconjunto de los mismos. En ciertos aspectos, el grupo "alquilo de C1-C4" puede estar sustituido opcionalmente de manera adicional. Como un ejemplo adicional, un grupo "alquilo de C1-C6" puede seleccionarse de metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, ciclopropilo, n-butilo, -butilo, s-butilo, f-butilo, ciclobutilo, n- pentilo, /-pentilo, s-pentilo, f-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, -hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano y ciclohexano, o de un subconjunto de los mismos. En ciertos aspectos, el grupo "alquilo de C1-C6" puede estar sustituido opcionalmente de manera adicional. Como un ejemplo adicional, un grupo "alquilo de C1-C8" puede seleccionarse de metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, ciclopropilo, n-butilo, /-butilo, s-butilo, f-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, /-pentilo, s-pentito, f-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, /-hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano, ciclohexano, heptano, cicloheptano, octano y ciclooctano, o de un subconjunto de los mismos. En ciertos aspectos, el grupo "alquilo de C1-C8" puede estar sustituido opcionalmente de manera adicional. Como un ejemplo adicional, un grupo "alquilo de C1-C12" puede seleccionarse de metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, ciclopropilo, n-butilo, /-butilo, s-butilo, /-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, /-pentilo, s-pentilo, f-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, /-hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano, ciclohexano, heptano, cicloheptano, octano, ciclooctano, nonano, ciclononano, decano, ciclodecano, undecano, cicloundecano, dodecano y ciclododecano, o de un subconjunto de los mismos. En ciertos aspectos, el grupo "alquilo de C1-C12" puede estar sustituido opcionalmente de manera adicional.

A través de la especificación "alquilo", se utiliza generalmente para referirse a grupos alquilo no sustituidos y grupos alquilo sustituidos; sin embargo, los grupos alquilo sustituidos también son referidos de manera específica en la presente, para identificar los sustituyentes específicos en el grupo alquilo. Por ejemplo, el término "alquilo halogenado" o "haloalquilo", se refiere de manera específica a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más haluros, por ejemplo, flúor, cloro, bromo o yodo. El término "alcoxialquilo", se refiere de manera específica a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más grupos alcoxi, como se describe a continuación. El término "alquilamino", se refiere de manera específica a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más grupos amino, como se describe a continuación, y lo similar. Cuando "alquilo" se utiliza en un caso, y un término específico tal como "alcohol alquílico" se utiliza en otro, no significa que implique que el término "alquilo" no se refiere también a los términos específicos tales como "alcohol alquílico" y lo similar.

Esta práctica también se utiliza para otros grupos descritos en la presente. Esto es, mientras que un término tal como "cicloalquilo" se refiere a porciones de cicloalquilo no sustituidas y sustituidas, las porciones sustituidas pueden, además, identificarse de manera específica en la presente; por ejemplo, un cicloalquilo sustituido particular puede referirse como, por ejemplo, un "alquilcicloalquilo". De manera similar, un alcoxi sustituido puede referirse de manera específica como, por ejemplo, un "alcoxi halogenado", un alquenilo sustituido particular puede ser, por ejemplo, un "alcohol alquenílico" y lo similar. Nuevamente, la práctica de utilizar un término general, tal como "cicloalquilo", y un término específico, tal como "alquilcicloalquilo", no pretende implicar que el término general tampoco incluye el término específico.

El término "cicloalquilo", como se utiliza en la presente, es un anillo basado en carbono no aromático, compuesto de al menos tres átomos de carbono. Los ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, de manera no exclusiva, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, norbornilo y lo similar. El término "heterocicloalquilo" es un tipo de grupo cicloalquilo como se definió anteriormente, y está incluido dentro del significado del término "cicloalquilo", en donde al menos uno de los átomos de carbono del anillo está reemplazado con un heteroátomo tal como, de manera no exclusiva, nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. El grupo cicloalquilo y el grupo heterocicloalquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos. El grupo cicloalquilo y el grupo heterocicloalquilo pueden estar sustituidos con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, amino, éter, haluro, hidroxi, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente.

El término "grupo polialquileno", como se utiliza en la presente, es un grupo que tiene dos o más grupos CH2 enlazados unos con otros. El grupo polialquileno puede representarse por la fórmula— (CH2)a— , en donde "a" es un entero de 2 a 500.

Los términos "alcoxi" y "alcoxilo", se utilizan en la presente para referirse a un grupo alquilo o cicloalquilo unidos a través de un enlace éter; esto es, un grupo "alcoxi" puede definirse como— OA1, en donde A1 es alquilo o cicloalquilo como se definió anteriormente. "Alcoxi" también incluye polímeros de grupos alcoxi como se acaba de describir, esto es, un alcoxi puede ser un poliéter tal como— OA1— OA2 o— OA1— (OA2)a— OA3, en donde "a" es un entero de 1 a 200 y A1, A2 y A3 son grupos alquilo y/o cicloalquilo.

El término "alquenilo" como se utiliza en la presente, es un grupo de hidrocarburo de 2 a 24 átomos de carbono, con una fórmula estructural que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono. Las estructuras asimétricas tales como (A1A2)C=C(A3A4), pretenden incluir tanto los isómeros E como Z. Esto puede suponerse en las fórmulas estructurales en la presente, en donde un alqueno asimétrico está presente, o puede indicarse de manera explícita por el símbolo de enlace C=C. El grupo alquenilo puede estar sustituido con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehido, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente.

El término "cicloalquenilo", como se utiliza en la presente, es un anillo basado en carbono no aromático, compuesto de al menos tres átomos de carbono, y que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono, es decir, C=C. Los ejemplos de grupos cicloalquenilo incluyen, de manera no exclusiva, ciclopropenilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclopentadienilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, norbornenilo y lo similar. El término "heterocicloalquenilo" es un tipo de grupo cicloalquenilo como se definió anteriormente, y está incluido dentro del significado del término "cicloalquenilo", en donde al menos uno de los átomos de carbono del anillo está reemplazado con un heteroátomo tal como, de manera no exclusiva, nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. El grupo cicloalquenilo y el grupo heterocicloalquenilo pueden estar sustituidos o no sustituidos. El grupo cicloalquenilo y el grupo heterocicloalquenilo, pueden estar sustituidos con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehido, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente.

El término "alquinilo" como se utiliza en la presente, es un grupo de hidrocarburo de 2 a 24 átomos de carbono, con una fórmula estructural que contiene al menos un enlace triple carbono-carbono. El grupo alquinilo puede estar no sustituido o sustituido con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehido, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente.

El término "cicloalquinilo" como se utiliza en la presente, es un anillo basado en carbono no aromático, compuesto de al menos siete átomos de carbono, y que contiene al menos un enlace triple carbono-carbono. Los ejemplos de los grupos cicloalquinilo incluyen, de manera no exclusiva, cicloheptinilo, ciclooctinilo, ciclononinilo y lo similar. El término "heterocicloalquinilo" es un tipo de grupo cicloalquenilo como se definió anteriormente, y se incluye dentro del significado del término "cicloalquinilo", en donde al menos uno de los átomos de carbono del anillo está reemplazado con un heteroátomo tal como, de manera no exclusiva, nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. El grupo cicloalquinilo y el grupo heterocicloalquinilo pueden estar sustituidos o no sustituidos. El grupo cicloalquinilo y el grupo heterocicloalquinilo pueden estar sustituidos con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehido, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente.

El término "arilo" como se utiliza en la presente, es un grupo que contiene cualquier grupo aromático basado en carbono incluyendo, de manera no exclusiva, benceno, naftaleno, fenilo, bifenilo, fenoxibenceno y lo similar. El término "arilo" también incluye "heteroarilo", que se define como un grupo que contiene un grupo aromático que tiene al menos un heteroátomo incorporado en el anillo del grupo aromático. Los ejemplos de los heteroátomos incluyen, de manera no exclusiva, nitrógeno, oxígeno, azufre y fósforo. De igual manera, el término "no heteroarilo", que también está incluido en el término "arilo", define un grupo que contiene un grupo aromático que no contiene un heteroátomo. El grupo arilo puede estar sustituido o no sustituido. El grupo arilo puede estar sustituido con uno o más grupos, incluyendo, de manera no exclusiva, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehido, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en la presente. El término "biarilo" es un tipo específico de grupo arilo, y está incluido en la definición de "arilo". Biarilo se refiere a dos grupos arilo que están unidos juntos vía una estructura anular fusionada, como en el naftaleno, o que están unidos vía uno o más enlaces carbono-carbono, como en el bifenilo.

El término "aldehido", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— C(0)H. A través de esta especificación, "C(O)" es una notación abreviada para un grupo carbonilo, es decir, C=0.

Los términos "amina" o "amino", como se utilizan en la presente, están representados por la fórmula— NA1 A2, en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, hidrógeno o un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo, como se describe en la presente.

El término "alquilamino", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— NH(-alquilo), en donde alquilo es como se describe en la presente. Los ejemplos representativos incluyen, de manera no exclusiva, un grupo metilamino, un grupo etilamino, un grupo propilamino, un grupo isopropilamino, un grupo butilamino, un grupo isobutilamino, un grupo (sec-butil)amino, un grupo (ter-butil)amino, un grupo pentilamino, un grupo isopentilamino, un grupo (ter-pentil)amino, un grupo hexilamino y lo similar.

El término "dialquilamino", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula — N(-alquilo)2, en donde alquilo es como se describe en la presente. Los ejemplos representativos incluyen, de manera no exclusiva, un grupo dimetilamino, un grupo dietilamino, un grupo dipropilamino, un grupo diisopropilamino, un grupo dibutilamino, un grupo diisobutilamino, un grupo di(sec-butil)amino, un grupo di(ter-butil)amino, un grupo dipentilamino, un grupo diisopentilamino, un grupo di(ter-pentil)amino, un grupo dihexilamino, un grupo N-etil-N-metilamino, un grupo N-metil-N-propilamino, un grupo N-etil-N-propilamino y lo similar.

El término "ácido carboxílico", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— C(0)OH.

El término "éster", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— OC(0)A1 o— C(0)OA1, en donde A1 puede ser un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente. El término "poliéster", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— (A10(0)C-A2-C(0)0)a— o— (A10(0)C-A2-OC(0))a— , en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo descrito en la presente, y "a" es un entero de 1 a 500. "Poliéster" es el término utilizado para describir un grupo que es producido mediante la reacción entre un compuesto que tiene al menos dos grupos de ácido carboxílico con un compuesto que tiene al menos dos grupos hidroxilo.

El término "éter", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula A1OA2, en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo descrito en la presente. El término "poliéter", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula — (A10-A20)a— , en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo descrito en la presente, y "a" es un entero de 1 a 500. Los ejemplos de los grupos poliéter incluyen óxido de polietileno, óxido de polipropileno y óxido de polibutileno.

Los términos "halógeno", "haluro" y "halo", como se utilizan en la presente, se refieren a los halógenos flúor, cloro, bromo y yodo. También está contemplado que en varios aspectos, el halógeno puede seleccionarse de flúor cloro, bromo y yodo. Por ejemplo, el halógeno puede seleccionarse de flúor, cloro y bromo. Como un ejemplo adicional, el halógeno puede seleccionarse de flúor y cloro. Como un ejemplo adicional, el halógeno puede seleccionarse de cloro y bromo. Como un ejemplo adicional, el halógeno puede seleccionarse de bromo y yodo. Como un ejemplo adicional, el halógeno puede seleccionarse de cloro, bromo y yodo. En un aspecto, el halógeno puede ser flúor. En un aspecto adicional, el halógeno puede ser cloro. En un aspecto todavía adicional, el halógeno es bromo. En aún otro aspecto adicional, el halógeno es yodo.

También está contemplado que, en ciertos aspectos, puedan utilizarse seudohalógenos (por ejemplo, triflato, mesilato, tosilato, brosilato, etc.) en lugar de los halógenos. Por ejemplo, en ciertos aspectos, el halógeno puede reemplazarse por un seudohalógeno. Como un ejemplo adicional, el seudohalógeno puede seleccionarse de triflato, mesilato, tosilato y brosilato. En un aspecto, el seudohalógeno es triflato. En un aspecto adicional, el seudohalógeno es mesilato. En un aspecto adicional, el seudohalógeno es tosilato. En un aspecto adicional, el seudohalógeno es brosilato.

El término "heterociclo", como se utiliza en la presente, se refiere a sistemas anulares únicos y multicíclicos, aromáticos o no aromáticos, en los cuales al menos uno de los miembros del anillo es diferente al carbono. El heterociclo incluye azetidina, dioxano, furano, imidazol, isotiazol, isoxazol, morfolina, oxazol, oxazol, incluyendo, 1 ,2,3-oxadiazol, 1 ,2,5-oxadiazol y 1,3,4-oxadiazol, piperacina, pipendina, piracina, pirazol, piridacina, piridina, pirimidina, pirrol, pirrolidina, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, tetracina, incluyendo 1 ,2,4,5-tetracina, tetrazol, incluyendo 1,2,3,4-tetrazol y 1 ,2,4,5-tetrazol, tiadiazol, incluyendo, 1 ,2,3-tiadiazol, 1 ,2,5-tiadiazol, y 1 ,3,4-tiadiazol, tiazol, tiofeno, triacina, incluyendo 1,3,5-triacina y 1 ,2,4-triacina, triazol, incluyendo, 1,2,3-triazol, 1 ,3,4-triazol, y lo similar.

El término "hidroxilo", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— OH.

El término "cetona", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula A1C(O)A2, en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente.

El término "azida", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— N3.

El término "nitro", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— NO2.

El término "nitrilo", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— CN.

El término "sililo", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— SiA1A2A3, en donde A1, A2 y A3 pueden ser, de manera independiente, hidrógeno o un grupo alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente.

El término "sulfo-oxo", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmulas — S(0)A1, — S(0)2A1, — OS(0)2A1, o -OS(0)20A1, en donde A1 puede ser hidrógeno o un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente. A través de esta especificación, "S(O)" es una notación abreviada para S=O. El término "sulfonilo", se utiliza en la presente para referirse al grupo sulfo-oxo representado por la fórmula -S(0)2A1, en donde A1 puede ser hidrógeno o un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente. El término "sulfona", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula A1S(0)2A2, en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente. El término "sulfóxido", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula A1S(0)A2, en donde A1 y A2 pueden ser, de manera independiente, un grupo alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo o heteroarilo como se describe en la presente.

El término "tiol", como se utiliza en la presente, está representado por la fórmula— SH.

"R1", "R2", "R3", "Rn", en donde n es un entero, como se utiliza en la presente pueden, de manera independiente, poseer uno o más de los grupos listados anteriormente. Por ejemplo, si R1 es un grupo alquilo de cadena lineal, uno de los átomos de hidrógeno del grupo alquilo puede sustituirse opcionalmente con un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo alquilo, un haluro y lo similar. Dependiendo de los grupos que se seleccionen, un primer grupo puede incorporarse dentro del segundo grupo o, de manera alterna, el primer grupo puede estar pendiente (es decir, unido) al segundo grupo. Por ejemplo, con la frase "un grupo alquilo que comprende un grupo amino", el grupo amino puede incorporarse dentro de la cadena principal del grupo alquilo. De manera alterna, el grupo amino puede unirse a la cadena principal del grupo alquilo. La naturaleza de los grupos que son seleccionados, determinará si el primer grupo está incluido o unido al segundo grupo.

Como se describe en la presente, los compuestos de la invención pueden contener porciones "sustituidas opcionalmente". En general, el término "sustituido", ya sea precedido por el término "opcionalmente" o no, significa que uno o más hidrógenos de la porción designada se reemplazan con un sustituyente adecuado. A menos que se indique de otra manera, un grupo "sustituido opcionalmente" puede tener un sustituyente adecuado en cada posición sustituible del grupo, y cuando más de una posición en cualquier estructura dada pueda estar sustituida con más de un sustituyente seleccionado del grupo especificado, el sustituyente puede ser el mismo o diferente en cada posición. Las combinaciones de sustituyentes considerados por esta invención, son de manera preferida aquéllas que resultan en la formación de compuestos estables o químicamente factibles. También está contemplado que en ciertos aspectos, a menos que se indique de manera expresa de otra forma lo contrario, los sustituyentes individuales pueden estar sustituidos opcionalmente de manera adicional (es decir, sustituidos o no sustituidos de manera adicional).

Los sustituyentes monovalentes adecuados en un átomo de carbono sustituible de un grupo "sustituido opcionalmente", son de manera independiente halógeno; -(CH2)o^R0; -(CH2)o-40R°; -0(CH2)o-4R0, -O-(CH2)o-4C(0)OR°; -(CH2)C CH(OR°)2; -(CH2)O^SR°; -(CH2)o^Ph, que pueden estar sustituidos con R°; -(CH2)c O(CH2)o_iPh, que puede estar sustituido con R°; -CH=CHPh, que puede estar sustituido con R°; -(CH2)o_ 40(CH2)o-.i-p¡rid¡lo, que puede estar sustituido con R°; -N02; -CN; -N3; -(CH2)<^N(R°)2; -(CH2)^N(R°)C(0)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)o^N(R°)C(0)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)o^N(R°)C(0)OR°; -N(R°)N(R°)C(0)R°; -N(R°)N(R°)C(0)NR°2; -N(R°)N(R°)C(0)OR°; -(CH2)o-4C(0)R°; -C(S)R°; -(CH^CMCÍOJOR0; -(CH2)CMC(0)SR0; -(CH2)o-4C(0)OSiR03; -(CH2)(^0C(0)RO; -OC(0)(CH2)O^SR-, SC(S)SR°; -(CH2)o^SC(0)R°; -(CH2)o-4C(0)NR02; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)c^0C(0)NRo2; -C(0)N(OR°)R°¡ -C(0)C(0)R°; -C(0)CH2C(0)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)c^SSR0; -(CH2)o^S(0)2R°; -(CH2)o-4S(0)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2RO; -S(0)2NR°2; -(CH2)MS(0)R°; -N(RO)S(0)2NRO2¡ -N(R°)S(0)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -P(0)2R°; -P(0)R°2; -OP(0)R°2; -OP(0)(OR°)2; SiR°3; -(alquileno de d_4 lineal o ram¡ficado)0-N(R°)2; o -(alquileno de C1- lineal o ramificado)C(0)0-N(R°)2, en donde cada R° puede sustituirse como se define a continuación, y es de manera independiente hidrógeno, alifático de C1-6 , -CH2Ph, -0(CH2)o-iPh, -CH2-(anillo de heteroarilo de 5-6 miembros), o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre, o sin perjuicio de la definición anterior, dos apariciones independientes de R°, tomadas junto con sus átomos intervinientes, forman un anillo de 3-12 miembros, saturado, parcialmente no saturado, o de arilo mono o bicíclico, que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre, que puede estar sustituido como se define a continuación.

Los sustituyentes monovalentes adecuados en R° (o el anillo formado tomando dos apariciones independientes de R° junto con sus átomos intervinient.es), son de manera independiente halógeno, -(CH2)o-2R*, -(haloR*), -(CH2)o-2OH, -(CH2)o_2OR*, -(CH2)o-2CH(ORe)2; -O(haloR-), -CN, -N3, -(CH2)o-2C(0)R*, -(CH2)o_2C(0)OH, -(CH2)o-2C(0)ORe, -(CH2)o_2SRe, -(CH2)c^2SH, -(CH2)o_2NH2, -(CH2)^2NHR#, -(CH2)o-2NRe2, -N02, -S¡R 3, -OSiR#3, -C(0)SR* -(alquileno de d_4 lineal o ramificado)C(0)ORe o -SSR*. en donde cada R* está no sustituida, en donde está precedida por "halo", está sustituida únicamente con uno o más halógenos, y se selecciona de manera independiente de alifático de Ci_4 , -CH2Ph, -0(CH2)o-iPh, o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes divalentes adecuados en un átomo de carbono saturado de R° incluyen =0 y =S.

Los sustituyentes divalentes adecuados en un átomo de carbono saturado de un grupo "sustituido opcionalmente", incluyen los siguientes: =0, =S, =NNR"2, =NNHC(0)R*. =NNHC(0)OR*, =NNHS(0)2R*, =NR*, =NOR*. -0(C(R*2))2_30- o -S(C(R*2))2_3S-, en donde cada aparición independiente de R* se selecciona de hidrógeno, alifático de Ci_6 que puede estar sustituido como se define a continuación, o un anillo no sustituido de 5-6 miembros, saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre. Los sustituyentes divalentes adecuados que están unidos a los carbonos sustituibles vecinos de un grupo "sustituido opcionalmente" incluyen: -0(CR*2)2_30-, en donde cada aparición independiente de R* se seleccionada de hidrógeno, alifático de Ci_6 que puede estar sustituido como se define a continuación, o un anillo no sustituido de 5-6 miembros, saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre.

Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R* incluyen halógeno, -R', -(haloR*), -OH, -ORe, -O(haloRe), -CN, -C(O)OH, -C(O)ORe, -NH2, -NHR*, -NR*2 o -NO2, en donde cada R* está no sustituida, en donde se precede por "halo" está sustituida con sólo uno o más halógenos, y es de manera independiente, alifático de Ci_ , -CH2Ph, -O(CH2)o-iPh, o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre.

Los sustituyentes adecuados en un nitrógeno sustituible de un grupo "sustituido opcionalmente" incluyen -R†, -NR†2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2NR†2, -C(S)NR†2, -C(NH)NR†2 o -N(R†)S(O)2R†; en donde cada R† es de manera independiente hidrógeno, alifático de Ci_6, que puede estar sustituido como se define a continuación, -OPh no sustituido, o un anillo no sustituido de 5-6 miembros, saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0—4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre o, sin perjuicio de la definición anterior, dos apariciones independientes de R†, tomadas junto con sus átomos intervinientes forman un anillo no sustituido de 3-12 miembros saturado, parcialmente no saturado o de arilo, mono o bicíclico, que tiene 0-4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre.

Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R† son de manera independiente halógeno, -R*. -(haloR*), -OH, -OR*. -O(haloRe), -CN, -C(O)OH, -C(O)ORe, -NH2| -NHR*, -NR"2 o -NO2, en donde cada R' está no sustituida, o en donde está precedida por "halo", se sustituye sólo con uno o más halógenos, y es de manera independiente alifático de C1-4, -CH2Ph, -O(CH2)o-iPh, o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente no saturado o de arilo, que tiene 0-4 heteroátomos de seleccionados de manera independiente de nitrógeno, oxígeno o azufre.

El término "grupo saliente", se refiere a un átomo (o un grupo de átomos) con la capacidad para extraer electrones que pueden desplazarse como una especie estable, tomándolos con los electrones del enlace. Los ejemplos de los grupos salientes adecuados incluyen haluros, incluyendo cloro, bromo y yodo, y seudohaluros (ésteres de sulfonato), incluyendo triflato, mesilato, tosilato y brosilato. También está contemplado que una porción hidroxilo pueda convertirse a un grupo saliente vía la reacción de Mitsunobu.

Los términos "grupo hidrolizable" y "porción hidrolizable", se refieren a un grupo funcional capaz de someterse a hidrólisis, por ejemplo, bajo condiciones básicas o ácidas. Los ejemplos de residuos hidrolizables incluyen, de manera no exclusiva, haluros de ácido, ácidos carboxílicos activados y varios grupos protectores conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, P. G. M.

Wuts, Wiley-lnterscience, 1999).

El término "grupo protector", significa un grupo que protege uno o más grupos funcionales de un compuesto, dando lugar a un derivado protegido del compuesto especificado. Los grupos funcionales que pueden protegerse incluyen, a manera de ejemplo, grupos amino, grupos hidroxilo y lo similar. Los grupos protectores son bien conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, y se describen, por ejemplo, en T. W. Greene y G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Tercera Edición, Wiley, Nueva York, 1999, y las referencias citadas en la presente.

El término "grupo protector de amino", significa un grupo protector adecuado para prevenir las reacciones indeseables en un grupo amino, que incluye, de manera no exclusiva, ter-butoxicarbonilo (BOC), tritilo (Tr), benciloxicarbonilo (Cbz), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (FMOC), formilo, trimetilsililo (T S), ter-butildimetilsililo (TBS), bencilo, p-metoxibencilo, p-fluorobencilo, p-clorobencilo, p-bromobencilo, difenilmetil naftilmetilo, tetrahidropirano (THP) y lo similar.

El término "grupo protector de hidroxilo", significa un grupo protector adecuado para prevenir las reacciones indeseables en un grupo hidroxilo. Los grupos protectores de hidroxilo representativos incluyen, de manera no exclusiva, grupos sililo, incluyendo grupos de trialquilsililo de (1-6C), tales como trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), ter-butildimetilsililo (TBS), y lo similar; ásteres (grupos acilo) incluyendo grupos de alcanoilo de (1-6C), tales como formilo, acetilo y lo similar; grupos de arilmetilo, tales como bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 9-fluorenilmeti'lo (Fm), difenilmetilo (benzhidrilo, DPM), tetrahidropirano (THP), metoxilmetilo (MOM), metiltiometilo (MTM), benciloximetilo (BOM) y lo similar.

El término "residuo orgánico" define un residuo que contiene carbono, es decir, un residuo que comprende al menos un átomo de carbono, y que incluye de manera no exclusiva, los grupos, residuos o radicales que contienen carbono definidos aquí anteriormente. Los residuos orgánicos pueden contener varios heteroátomos, o pueden estar unidos a otra molécula a través de un heteroátomo, incluyendo oxígeno, nitrógeno, azufre, fósforo o lo similar. Los ejemplos de residuos orgánicos incluyen, de manera no exclusiva, alquilo o alquilo sustituidos, alcoxi o alcoxi sustituido, grupos amino, amida, mono o disustituidos, etc. Los residuos orgánicos pueden comprender, de manera preferida, 1 a 18 átomos de carbono, 1 a 15, átomos de carbono, 1 a 12 átomos de carbono, 1 a 8 átomos de carbono, 1 a 6 átomos de carbono, o 1 a 4 átomos de carbono. En un aspecto adicional, un residuo orgánico puede comprende 2 a 18 átomos de carbono, 2 a 15 átomos de carbono, 2 a 12 átomos de carbono, 2 a 8 átomos de carbono, 2 a 4 átomos de carbono o 2 a 4 átomos de carbono.

Un sinónimo muy cercano del término "residuo" es el término "radical", que como se utiliza en la especificación y las reivindicaciones concluyentes, se refiere a un fragmento, grupo o subestructura de una molécula descrita en la presente, sin importar como se prepara la molécula. Por ejemplo, un radical de 2,4-tiazolidindiona en un compuesto particular, tiene la estructura: sin importar si la tiazolidindiona se utiliza para preparar el compuesto. En algunas modalidades, el radical (por ejemplo, un alquilo), puede modificarse además (es decir, alquilo sustituido), al tener unido al mismo uno o más "radicales sustituyentes". El número de átomos en un radical dado no es crítico para la presente invención, a menos que se indique lo contrario en algún otro lugar en la presente.

Los "radicales orgánicos", como se define y utiliza el término en la presente, contienen uno o más átomos de carbono. Un radical orgánico puede tener, por ejemplo, 1-26 átomos de carbono, 1-18 átomos de carbono, 1-12 átomos de carbono, 1-8 átomos de carbono, 1-6 átomos de carbono o 1-4 átomos de carbono. En un aspecto adicional, un radical orgánico puede tener 2-26 átomos de carbono, 2-18 átomos de carbono, 2-12 átomos de carbono, 2-8 átomos de carbono, 2-6 átomos de carbono, ó 2-4 átomos de carbono. Con frecuencia, los radicales orgánicos tienen hidrogeno unido a al menos algunos de los átomos de carbono del radical orgánico. Un ejemplo de un radical orgánico que no comprende átomos inorgánicos es un radical de 5,6,7,8-tetrahidro-2-naftilo. En algunas modalidades, un radical orgánico puede contener 1-10 heteroátomos inorgánicos unidos al mismo o en el mismo, incluyendo halógenos, oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo y lo similar. Los ejemplos de radicales orgánicos incluyen de manera no exclusiva, un radical alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, amino monosustituido, amino disustituido, aciloxi, ciano, carboxi, carboalcoxi, alquilcarboxamida, alquilcarboxamida sustituida, dialquilcarboxamida, dialquilcarboxamida sustituida, alquilsulfonilo, alquilsulfinilo, tioalquilo, tiohaloalquilo, alcoxi, alcoxi sustituido, haloalquilo, haloalcoxi, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heterocíclico o heterocíclico sustituido, en donde los términos se definen en algún otro lugar en la presente. Unos cuantos ejemplos no limitantes de los radicales orgánicos que incluyen heteroátomos, incluyen radicales alcoxi, radicales trifluorometoxi, radicales acetoxi, radicales dimetilamino y lo similar.

Los "radicales inorgánicos", como se define y utiliza el término en la presente, no contienen átomos de carbono y por lo tanto, comprende sólo átomos diferentes al carbono. Los radicales inorgánicos comprenden combinaciones de átomos unidos, seleccionados de hidrógeno, nitrógeno, oxígeno, silicio, fósforo, azufre, selenio y halógenos tales como flúor, cloro, bromo y yodo, que pueden estar presentes de manera individual, o unidos juntos en sus combinaciones químicamente estables. Los radicales inorgánicos tienen 10 o menos, o de manera preferida, uno a seis o uno a cuatro átomos inorgánicos como se listó anteriormente, unidos juntos. Los ejemplos de radicales inorgánicos incluyen, de manera no exclusiva, radicales inorgánicos conocidos comúnmente, amino, hidroxi, halógenos, nitro, tiol, sulfato, fosfato y lo similar. Los radicales inorgánicos no tienen unidos en el mismo los elementos metálicos de la tabla periódica (tales como los metales alcalinos, metales alcalinotérreos, metales de transición, metales lantánidos o metales actínidos), aunque tales iones metálicos pueden servir algunas veces, como un catión farmacéuticamente aceptable para los radicales inorgánicos aniónicos tales como sulfato, fosfato, o un radical inorgánico aniónico o similar. Los radicales inorgánicos no comprenden elementos metaloides tales como boro, aluminio, galio, germanio, arsénico, estaño, plomo o telurio, o los elementos de los gases nobles, a menos que se indique de manera específica de otra forma en algún otro lugar en la presente.

Los compuestos descritos en la presente pueden contener uno o más enlaces dobles y así, dar lugar potencialmente a isómeros cis/trans (E/Z), así como otros isómeros conformacionales. A menos que se indique lo contrario, la invención incluye todos de tales posibles isómeros, así como mezclas de tales isómeros.

A menos que se indique lo contrario, una fórmula con enlaces químicos mostrados sólo como líneas sólidas y no como cuñas o líneas punteadas, contempla cada isómero posible, por ejemplo, cada enantiómero y diastereómero, y una mezcla de isómeros, tal como una mezcla racémica o escalémica. Los compuestos descritos en la presente pueden contener uno o más centros asimétricos y, por lo tanto, dar lugar potencialmente a los diastereómeros e isómeros ópticos. A menos que se indique lo contrario, la presente invención incluye todos los posibles diastereómeros, así como sus mezclas racémicas, sus enantiómeros resueltos sustancialmente puros, todos los posibles isómeros geométricos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Las mezclas de estereoisómeros, así como los estereoisómeros específicos aislados, también están incluidos. Durante el curso de los procedimientos sintéticos utilizados para preparar tales compuestos, o en el uso de los procedimientos de racemización o epimerización conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, los productos de tales procedimientos pueden ser una mezcla de estereoisómeros.

Muchos compuestos orgánicos existen en formas ópticamente activas que tienen la capacidad de girar el plano de la luz polarizada en el plano. Al describir un compuesto ópticamente activo, los prefijos D y L o R y S se utilizan para denotar la configuración absoluta de la molécula alrededor de sus centros quirales. Los prefijos d y / o (+) y (-), se emplean para designar el signo de la rotación de la luz polarizada en el plano por el compuesto, con (-) o / significando que el compuesto es levogiratorio. Un compuesto con el prefijo (+) o d es dextrogiratorio. Para una estructura química dada, estos compuestos, llamados estereoisómeros, son idénticos, excepto que no son imágenes especulares superponibles uno del otro. Un estereoisómeros específico también puede referirse como un enantiómero, y una mezcla de tales isómeros se llama con frecuencia una mezcla enantiomérica. Una mezcla 50:50 de enantiómeros, se refiere como una mezcla racémica. Muchos de los compuestos descritos en la presente, pueden tener uno o más centros quirales, y por lo tanto, pueden existir en diferentes formas enantioméricas. Si se desea, un carbono quiral puede designarse con as asterisco (*). Cuando los enlaces al carbono quiral se describen como líneas rectas en las fórmulas descritas, se entiende que tanto las configuraciones (R) como (S) del carbono quiral, y por lo tanto, ambos enantiómeros y mezclas de los mismos, están abarcados dentro de la fórmula. Como se utiliza en la técnica, cuando se desea especificar la configuración absoluta alrededor de un carbono quiral, uno de los enlaces del carbono quiral puede describirse como una cuña (enlaces a átomos por encima del plano), y el otro puede describirse como una serie o cuña de líneas paralelas cortas (enlaces a átomos por debajo del plano). El sistema de Cahn-Inglod-Prelog puede utilizarse para asignar la configuración (R) o (S) a un carbono quiral.

Los compuestos descritos en la presente comprenden átomos tanto en su abundancia isotópica natural, como en la abundancia no natural. Los compuestos descritos pueden ser compuestos marcados isotópicamente o sustituidos isotópicamente, idénticos a aquéllos descritos, menos por el hecho de que uno o más átomos son reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa encontrado típicamente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invención, incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180, 70, 35S, 18F y 36CI, respectivamente. Los compuestos comprenden además, profármacos de los mismos, y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos o los profármacos que contienen los isótopos mencionados anteriormente y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos marcados isotópicamente de la presente invención, por ejemplo, aquéllos en los cuales se incorporan los isótopos radioactivos tales como 3H y 14C, son útiles en los ensayos de distribución del fármaco y/o el sustrato en el tejido. Los isótopos tritiados, es decir, 3H, y de carbono 14, es decir, 14C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, vida media in vivo incrementada o requisitos de dosificación reducidos, y por lo tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos marcados isotópicamente de la presente invención y los profármacos de los mismos, pueden prepararse generalmente llevando a cabo los procedimientos siguientes, sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible, por un reactivo marcado no isotópicamente.

Los compuestos descritos en la invención pueden estar presentes como un solvato. En algunos casos, el solvente utilizado para preparar el solvato es una solución acuosa, y el solvato es referido entonces con frecuencia como un hidrato. Los compuestos pueden estar presentes como un hidrato, que puede obtenerse, por ejemplo, mediante cristalización de un solvente o de solución acuosa. Con relación a esto, uno, dos, tres o cualquier número arbitrario de moléculas de solvato o agua, pueden combinarse con los compuestos de acuerdo con la invención, para formar solvatos e hidratos. A menos que se indique lo contrario, la invención incluye todos de tales posibles solvatos.

El término "cocristal", significa una asociación física de dos o más moléculas que deben su estabilidad a la interacción no covalente. Uno o más componentes de este complejo molecular proporcionan un marco estable en la red cristalina. En ciertos casos, las moléculas alojadas se incorporan en la red cristalina como hidratos o solvatos, véase, por ejemplo, "Crystal Engineering of the Composition of Pharmaceutical Phases. Do Pharmaceutical Co-crystals Represent a New Path to Improved Medicines?" Almarasson, O., et. al., The Royal Society of Chemistry, 1889-1896, 2004. Los ejemplos de cocristales incluyen, ácido p-toluensulfónico y ácido bencensulfónico.

También se apreciará que ciertos compuestos descritos en la presente, pueden presentarse como un equilibrio de tautómeros. Por ejemplo, las cetonas con un hidrógeno a pueden existir en un equilibrio de la forma ceto y la forma enol. forma ceto forma enol forma amida forma de ácido imídico De igual manera, las amidas con un N-hidrógeno pueden existir en un equilibrio de la forma amida y la forma de ácido imídico. A menos que se indique lo contrario, la invención incluye todos de tales posibles tautómeros.

Se conoce que las sustancias químicas formas sólidos que están presentes en diferentes estados de orden, que se denominan formas o modificaciones polimórficas. Las diferentes modificaciones de una sustancia polimérica pueden diferir en gran medida en sus propiedades físicas. Los compuestos de acuerdo con la invención pueden estar presentes en diferentes formas polimórficas, siendo posible que las modificaciones particulares sean metaestables. A menos que se indique lo contrario, la invención incluye todas de tales posibles formas polimórficas.

En algunos aspectos, una estructura de un compuesto puede representarse por una fórmula: que se entiende que es equivalente a la fórmula: en donde n es típicamente un entero. Esto es, R" se entiende que representa cinco sustituyentes independientes, Rn(a), R"(b), R"(c), Rn(d), Rn(e). Por "sustituyentes independientes", se quiere decir que cada sustituyente R pueden definirse de manera independiente. Por ejemplo, si un caso de R"(a) es halógeno, entonces R"(b) no es necesariamente halógeno en ese caso.

Ciertos materiales, compuestos, composiciones y componentes descritos en la presente, pueden obtenerse comercialmente o sintetizarse fácilmente utilizando técnicas conocidas generalmente por aquellos con experiencia en la técnica. Por ejemplo, las materias primas y reactivos utilizados para preparar los compuestos y composiciones descritos, están disponibles de proveedores comerciales tales como Sigma-Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wl.), Acros Organics (Morris Plains, NJ), Fisher Scientific (Pittsburgh, PA ), o Sigma (St. Louis, MO.) o se preparan mediante métodos conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, siguiendo los procedimientos expuestos en las referencias tales como Fieser and Fíeseos Reagents for Organic Synthesis, Volúmenes 1-17 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd's Chemistry of Carbón Compounds, Volúmenes 1-5 y Suplementos (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactíons, Volúmenes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991); March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4a Edición); y Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989).

A menos que se indique de manera expresa de otra forma, de ninguna manera se pretende que el método expuesto en la presente se interprete como que requiera que los pasos deban realizarse en un orden específico. En consecuencia, en donde una reivindicación del método no exponga realmente un orden a ser seguido por sus pasos o no se indica de manera específica de otra manera en las reivindicaciones o descripciones que los pasos deben limitarse a un orden específico, de ninguna manera se pretende que se infiera un orden, en ningún respecto. Esto se mantiene para cualesquier posibles bases no expresadas para la interpretación, incluyendo: cuestiones de lógica con respecto al rearreglo de los pasos o flujo de operación; significado simple derivado de la organización o puntuación gramatical y el número o tipo de modalidades descritas en la especificación.

Se describen componentes a ser utilizados para preparar las composiciones de la invención, así como las composiciones mismas a ser utilizadas dentro de los métodos descritos en la presente. Éstos y otros materiales se describen en la presente, y se entiende que cuando se describen las combinaciones, subconjuntos, interacciones, grupos, etc., de estos materiales, aunque una referencia específica de cada una de las varias combinaciones individuales y colectivas y la permutación de estos compuestos, no puedan describirse de manera explícita, cada una está contemplada y descrita de manera específica en la presente. Por ejemplo, si un compuesto particular se describe y discute, y un número de modificaciones que pueden hacerse a varias moléculas que incluyen los compuestos se discuten, todas y cada una de las combinaciones y permutaciones del compuesto y las modificaciones que son posibles, están contempladas de manera específica, a menos que se indique de manera específica lo contrario. Así, si se describe una clase de moléculas A, B y C, así como una clase de moléculas D, E y F y se describe un ejemplo de una molécula en combinación A-D, entonces incluso si cada una no se expone de manera individual, cada una está contemplada de manera individual y colectiva, significando que las combinaciones A-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E y C-F, se consideran descritas. De igual manera, cualquier subconjuto o combinación de esto, también se describe. Asi, por ejemplo, el subgrupo de A-E, B-F y C-E se consideraría descrito. Este concepto se aplica a todos los aspectos de esta solicitud incluyendo, de manera no exclusiva, los pasos en los métodos para hacer y utilizar las composiciones de la invención. Así, si hay una variedad de pasos adicionales que puede realizarse, se entiende que cada uno de estos pasos adicionales puede realizarse con cualquier modalidad específica o combinación de modalidades de los métodos de la invención.

Se entenderá que las composiciones descritas en la presente, tienen ciertas funciones. Se describen en la presente ciertos requisitos estructurales para realizar las funciones descritas, y se entiende que hay una variedad de estructuras que pueden realizar la misma función, que están relacionadas con las estructuras descritas, y que estas estructuras lograrán típicamente el mismo resultado.

B. Compuestos En un aspecto, la invención se relaciona con compuestos útiles como inhibidores de la histona desmetilasa. En un aspecto adicional, los compuestos son útiles como inhibidores de la histona desmetilasa específica de la lisina ("LSD"). Además, en un aspecto, los compuestos de la invención son útiles en el tratamiento de trastornos de proliferaciones celulares no controladas. En un aspecto adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada es un cáncer o un tumor. En un aspecto todavía adicional, el trastorno de proliféración celular no controlada está asociado con una disfunción de la LSD, como se describe adicionalmente en la presente.

Está contemplado que cada derivado descrito pueda estar sustituido opcionalmente de manera adicional. También está contemplado que cualquiera de uno o más derivados, puede omitirse opcionalmente de la invención. Se entiende que un compuesto descrito puede proporcionarse por los métodos descritos. También se entiende que los compuestos descritos pueden emplearse en los métodos descritos de uso.

. Estructura En un aspecto, la invención se relaciona con un compuesto que tiene una estructura representada por la Fórmula (I): en donde m es 0 ó 1 ; n es un entero de 0 a 3; Z se selecciona de manera independiente de N y CH; Ri se selecciona de halo, haloalquilo de C1-C3 y polihaloalquilo de C1-C3; cada uno de R2, R3 y R4 se selecciona de manera independiente de hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, amino, alcalcoxi de C2-C6, alcoxi de C1-C6, alquilo de C1-C6, polihaloalquilo de C1-C6 y haloalquilo de C1-C6; R5 se selecciona de NR6 R7, alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy, y se sustituye con 0-3 grupos seleccionados de manera independiente de hala, hidroxilo, amino, alcalcoxi de C2-C6, alcohol alquílico de C1-C6, alcoxi de C1-C6, alquilo de C1-C6, polihaloalquilo de C1-C6, haloalquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy; Cy es un heterocicloalquilo seleccionado de aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo, oxazolidinilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, piperacinilo, oxazinanilo, morfolinilo, hexahidropirimidinilo y hexahidropiridacinilo; y cada uno de R6 y R7 se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y heterocicloalquilo de C3-C6; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En algunas modalidades, R5 se selecciona de: alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy, en donde cada uno de Rea, Ret», Rec, ea y Ree se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, halo, amino, ciano, hidroxilo, alcoxialquilo de C2-C6, alcoxi de C1-C3, haloalquilo de C1-C3 y polihaloalquilo de C1-C3 y alquilo de C1-C6, y cada uno de Rga, Rgt,, Rgc y 9d se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, amino, halo, hidroxilo, alquilo de C1-C3, alcoxi de C1-C3, haloalquilo de C1-C3, polihaloalquilo de C1-C3, aziridinilo, azetidinilo, y pirrolidinilo.

En algunas modalidades, la invención proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste de: 61 o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En aún otras modalidades, la invención proporciona un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En aún otras modalidades, la invención proporciona un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En aún otras modalidades, la invención proporciona un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquiera de un compuesto de la invención y un portador farmacéuticamente aceptable.

La invención también proporciona un método para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero, el método comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad efectiva de cualquiera de los compuestos de la invención.

La invención también proporciona un método para disminuir la actividad de la histona desmetilasa en un mamífero, el método comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad efectiva de cualquiera de los compuestos de la invención. 2. Inhibición de la actividad de la histona desmetilasa En un aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la actividad de la proteína LSD. En aún otro aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben inhibición selectiva de la actividad de la proteína LSD1. En aún otro aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición selectiva de la actividad de la proteína LSD2. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos inhiben la actividad de la desmetilasa LSD. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben unión al dominio del FAD de la LSD. En aún otro aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la desmetilación mediada por la LSD de la histona 3 (H3) en la posición Lys4. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la desmetilación mediada por la LSD de H3K3m1 y H3K4me2. En aún otro aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de desmetilación mediada por la LSD de H3K9me2 y H3K9me1.

En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos inhiben la actividad de la desmetilasa LSD1. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la unión al dominio de la FAD de la LSD1. En aún otro aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la desmetilación mediada por la LSD1 de la histona 3 (H3) en la posición Lys4. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de desmetilación mediada por la LSD1 de H3K3m1 y H3K4me2. En aún otro aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de desmetilación mediada por la LSD1 de H3K9me2 y H3K9me1.

En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos inhiben la actividad de la desmetilasa LSD2. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la unión al dominio de la FAD de la LSD2. En aún otro aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la desmetilación mediada por la LSD2 de la histona 3 (H3) en la posición Lys4. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de desmetilación mediada por la LSD2 de H3K3m1 y H3K4me2.

En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben la ruptura de la interacción de la interacción de la LSD con un complejo que comprende uno o más de las proteínas HDAC1/2, CoREST, CtBP1 , BRAF35 y BHC80. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos rompen la unión de la LSD1 a una o más proteínas seleccionadas de las proteínas HDAC1/2, CoREST, CtBP1 , BRAF35 y BHC80. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos rompen la unión de la LSD2 a una o más proteínas seleccionadas de las proteínas G9a, NSD3, HDAC1/2, CoREST, CtBP1, BRAF35 y BHC80.

La inhibición de la actividad de la LSD puede determinarse mediante una variedad de métodos in vitro e in vivo conocidos por alguien con experiencia en la técnica. Por ejemplo, la actividad enzimática puede determinarse en sistemas de ensayo de enzimas in vitro. En varios aspectos, la actividad enzimática de la LSD1 o LSD2 puede determinarse en un ensayo espectrofotométrico. Brevemente, el ensayo se basa en la reacción enzimática de múltiples pasos en la cual la LSD1 o la LSD2 produce primero H202 durante la desmetilación de la lisina 4 en un péptido que corresponde a los primeros 21 aminoácidos de la cola N terminal de la histona H3. En la presencia de peroxidasa de rábano picante, el H2O2 producido, reacciona con ADHP para producir el compuesto altamente fluorescente resorufina, que puede analizarse con una longitud de onda de excitación de 530-540 nm y una longitud de onda de emisión de 585-595 nm. El ensayo requiere una fuente de la enzima LSD1 o LSD2, ya sea purificada de fuentes naturales (por ejemplo, un tejido o células cultivadas), aislado como una proteína expresada de manera recombinante, o como una proteína no purificada en los extractos celulares completos. En un aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la actividad de la proteína LSD con una IC50 en un ensayo EMSA de menos que aproximadamente 300 µ?, menos que aproximadamente 100 µ?, menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 500 n , o de menos que aproximadamente 100 nM. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la actividad de la proteína LSD1 con una IC50 en un ensayo EMSA de menos que aproximadamente 300 µ?, menos que aproximadamente 100 µ?, menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 500 nM, o de menos que aproximadamente 100 nM. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la actividad de la proteína LSD2 con una IC50 en un ensayo EMSA de menos que aproximadamente 300 µ?, menos que aproximadamente 100 µ , menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ , menos que aproximadamente 500 nM, o de menos que aproximadamente 100 nM.

En un aspecto, los compuestos descritos son selectivos para la LSD. En un aspecto adicional, la inhibición selectiva de actividad de la LSD se determina utilizando un ensayo con enzimas. En varios aspectos adicionales, los compuestos inhiben la actividad de la LSD en un ensayo con enzimas con una IC5o menor que la IC50 para la MAO A y/o MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener una selectividad para la proteína LSD frente a frente la MAO A y/o la MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede inhibir la LSD con una IC5o de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede inhibir la LSD con una IC50 de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

En un aspecto, los compuestos descritos son selectivos para la LSD1. En un aspecto adicional, la inhibición selectiva de la actividad de la LSD1 se determinó utilizando un ensayo con enzimas. En varios aspectos adicionales, el compuesto inhibe la actividad de la LSD1 en un ensayo con enzimas con una IC5o menor que la IC50 para una o más de la LSD2, MAO A, y MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener selectividad para la proteína LSD1 frente a frente uno o más de la LSD2, MAO A y MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede inhibir la LSD1 con una IC50 de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la LSD2, o de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la LSD2. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede inhibir la LSD1 con una IC5o de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede inhibir la LSD1 con una IC50 de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

En un aspecto, los compuestos descritos son selectivos para la LSD2. En un aspecto adicional, la inhibición selectiva de la actividad de la LSD2 se determina utilizando un ensayo con enzimas. En varios aspectos adicionales, el compuesto inhibe la actividad de la LSD2 en un ensayo con enzimas con una IC5o menor que la IC50 para una o más de la LSD1 , MAO A y MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener selectividad para la proteína LSD2 frente a frente a uno o más de la LSD1, MAO A y MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede inhibir la LSD2 con una IC5o de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la LSD1, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la LSD1 , de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la LSD1 , de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la LSD1 , o de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la LSD1. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede inhibir la LSD2 con una IC50 de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede inhibir la LSD2 con una IC50 de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

En varios aspectos, los compuestos descritos exhiben la unión a una proteína LSD. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben la unión al dominio de la FAD de una proteína LSD. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos exhiben la unión a la proteína LSD1. En aún otro aspecto, los compuestos descritos exhiben la unión a la proteína LSD2. La afinidad de unión de un compuesto descrito para una proteína LSD, por ejemplo, la proteína LSD1 , puede determinarse mediante varios métodos conocidos por alguien con experiencia en la técnica. En un aspecto, los compuestos descritos exhiben la unión a la proteína LSD con una KD de menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 500 nM, o de menos que aproximadamente 100 nM. En un aspecto adicional, la KD se determina utilizando un método SPR. En un aspecto todavía adicional, la unión se determina utilizando la proteína LSD1 . En aún otro aspecto adicional, la unión se determina utilizando la proteína LSD2.

En varios aspectos adicionales, la unión a la LSD es selectiva. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben una KD para la unión a la LSD menor que la KD de la MAO A y/o MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener una selectividad para la proteína LSD frente a frente las proteínas MAO A y/o MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede unirse a la LSD con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede unirse a la LSD con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

En varios aspectos adicionales, la unión a la LSD1 es selectiva. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben una KD para la unión a la LSD1 menor que la KD para una o más de la LSD2, MAO A y MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener selectividad para la proteína LSD1 frente a frente una o más de las proteínas de la LSD2, MAO A y MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede unirse a la LSD1 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la LSD2, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la LSD2, o de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la LSD2. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede unirse a la LSD1 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede unirse a la LSD1 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

En varios aspectos adicionales, la unión a la LSD2 es selectiva. En un aspecto adicional, los compuestos descritos exhiben una KD para la unión a la LSD2 menor que la KD para una o más de la LSD1, MAO A y MAO B. Esto es, un compuesto descrito puede tener selectividad para la proteína LSD2 frente a frente una o más de las proteínas LSD1 , MAO A y MAO B. Por ejemplo, en un aspecto, un compuesto descrito puede unirse a la LSD2 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la LSD1, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la LSD1 , de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la LSD1 , de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la LSD1 , o de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la LSD1. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede unirse a la LSD2 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO A, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO A. En un aspecto adicional, un compuesto descrito puede unirse a la LSD2 con una KD de aproximadamente 5 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 10 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 20 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 30 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 50 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 100 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 250 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 500 veces menor que aquélla para la MAO B, de aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B, y de más que aproximadamente 1000 veces menor que aquélla para la MAO B.

De manera alterna, la inhibición de la actividad de la proteína STAT puede determinarse en un ensayo basado en células. Existe una variedad de ensayos basados en células que son adecuados para la determinación de la inhibición de la actividad de la proteína LSD, conocidos por alguien con experiencia en la técnica. Por ejemplo, la inhibición del crecimiento celular o detención celular puede determinarse utilizando una célula, ya sea una línea celular permanente o un cultivo celular primario que tiene una proteína LSD con una actividad disfuncional. En un aspecto adicional, la proteína LSD es la LSD1. En un aspecto todavía adicional, la proteína LSD es la LSD2. En aún otro aspecto adicional, la disfunción de la proteína LSD es una en donde la proteína LSD ha adquirido una ganancia de la mutación de la función. De manera alterna, la disfunción de la proteína LSD tiene un fenotipo de actividad persistente o constitutiva. Por ejemplo, la proteína LSD puede tener una actividad persistente o constitutiva debida a la disfunción en una proteína regulatoria corriente arriba. En un aspecto adicional, la proteína LSD se sobreexpresa debido a una disfunción en la regulación de la transcripción y/o la traducción del gen LSD. En un aspecto adicional, la célula aloja un oncogén activo que está asociado con la disfunción de la LSD.

En un aspecto, los compuestos descritos y los productos de los métodos descritos para hacerlos, inhiben el crecimiento celular. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos y los productos de los métodos descritos, inhiben el crecimiento celular en un sistema de ensayos in vitro. En aún otro aspecto, el sistema de ensayos in vitro hace uso de una línea celular derivada del cáncer o un tumor seleccionado de cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, cáncer de próstata, cáncer pancreático y un sarcoma. En aún otro aspecto adicional, la línea celular se deriva de una fuente humana. En aún otro aspecto adicional, los compuestos descritos inhiben el crecimiento celular en una célula con una proteína LSD activa de manera persistente. En aún otro aspecto, la línea celular tiene una proteína LSD activada. En un aspecto todavía adicional, la línea celular se selecciona de AN3 CA, BT-20, BT-549, HCT 116, HER218, MCF7, MDA-MB-231 , MDA-MB-235, MDA-MB^35S, MDA-MB-468, PANC-1 , PC-3, SK-N-MC, T-47D y U-87 MG. En un aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la actividad del crecimiento celular en un ensayo basado en células in vitro con una IC50 de menos que aproximadamente 500 µ?, de menos que aproximadamente 250 µ?, menos que aproximadamente 100 µ?, menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 500 nM, de menos que aproximadamente 100 nM, de menos que aproximadamente 10 nM, y de menos que aproximadamente 1 nM.

En un aspecto, los compuestos descritos y los productos de los métodos descritos para hacerlos, inhiben la migración celular. En un aspecto todavía adicional, los compuestos descritos y los productos de los métodos descritos, inhiben la migración celular en un sistema de ensayos in vitro. En aún otro aspecto, el sistema de ensayos in vitro hace uso de una línea celular derivada de un cáncer o un tumor, seleccionado de cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, cáncer de próstata, cáncer pancreático y un sarcoma. En aún otro aspecto adicional, la línea celular se deriva de una fuente humana. En aún otro aspecto adicional, los compuestos descritos inhiben el crecimiento celular en una célula con una proteína LSD activa de manera persistente. En aún otro aspecto, la línea celular tiene una proteína LSD activada. En un aspecto todavía adicional, la línea celular se selecciona de AN3 CA, BT-20, BT-549, HCT 116, HER218, MCF7, MDA-MB-231 , MDA-MB-235, MDA-MB-435S, MDA-MB-468, PANC-1 , PC-3, SK-N- C, T-47D y U-87 MG. En un aspecto, los compuestos descritos exhiben la inhibición de la migración celular en un ensayo basado en células in vitro, con una IC5o de menos que aproximadamente 300 µ?, menos que aproximadamente 100 µ?, menos que aproximadamente 50 µ?, menos que aproximadamente 10 µ?, menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 500 nM, o de menos que aproximadamente 100 nM.

C. Métodos para hacer los compuestos En un aspecto, la invención se relaciona con métodos para hacer los compuestos útiles como inhibidores de la LSD. En un aspecto adicional, los productos de los métodos descritos para hacerlos, son moduladores de la actividad de la LSD. En aún otro aspecto adicional, los productos de los métodos descritos para hacerlos, se unen a una proteína STAT y modulan de manera negativa la actividad de la LSD. Los compuestos pueden, en un aspecto, exhibir selectividad por el subtipo. En un aspecto todavía adicional, los productos de los métodos descritos para hacerlos, exhiben selectividad por el miembro LSD1 de la familia de proteínas LSD. En aún otro aspecto, los productos de los métodos descritos para hacerlos, exhiben selectividad para el miembro LSD2 de la familia de proteínas LSD.

En un aspecto, la invención se relaciona con métodos para hacer los compuestos útiles como inhibidores de la histona desmetilasa, que pueden ser útiles en el tratamiento de los trastornos de la proliferación celular no controlada. En un aspecto adicional, la histona desmetilasa es la LSD1. En aún otro aspecto adicional, la histona desmetilasa es la LSD2.

Los compuestos de esta invención pueden prepararse empleando las reacciones mostradas en los siguientes esquemas de reacción, además de otras manipulaciones estándar que son conocidas en la literatura, ejemplificadas en las secciones experimentales o claras para alguien con experiencia en la técnica. Por claridad, los ejemplos que tienen un solo sustituyente se muestran en donde se permiten múltiples sustituyentes bajo las definiciones descritas en la presente.

Las reacciones utilizadas para generar los compuestos de esta invención se preparan empleando las reacciones como se muestran en los siguientes Esquemas de Reacción, además de otras manipulaciones estándar conocidas en la literatura o por alguien con experiencia en la técnica. Los siguientes ejemplos se proporcionan, de manera que la invención pueda entenderse más completamente, son ilustrativos únicamente y no deben interpretarse como limitantes.

En un aspecto, los compuestos descritos comprenden los productos de los métodos sintéticos descritos en la presente. En un aspecto adicional, los compuestos descritos comprenden un compuesto producido mediante un método sintético descrito en la presente. En un aspecto todavía adicional, la invención comprende una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del producto de los métodos descritos y un portador farmacéuticamente aceptable. En un aspecto todavía adicional, la invención comprende un método para fabricar un medicamento, que comprende combinar al menos un compuesto de cualquiera de los compuestos descritos, o al menos un producto de los métodos descritos, con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 1. Ruta I En un aspecto, los análogos sustituidos de la (E)-N'-(1-feniletiliden)benzohidrazida de la presente invención, pueden prepararse genéricamente mediante el esquema de reacción sintético, como se muestra a continuación.

Los compuestos se representan en forma genérica, con los sustituyentes como se indican en las descripciones del compuesto en algún otro lugar en la presente. Un ejemplo más específico se expone a continuación.

En un aspecto, La Ruta I empieza con un derivado de ácido sustituido de manera adecuada (1.1). Los derivados de ácido sustituidos adecuados (1.1), son comercialmente disponibles o pueden prepararse fácilmente por alguien con experiencia en la técnica. En una reacción típica, el compuesto del tipo 1.1 se agrega al derivado de amina del tipo 1.2 en la presencia de una base adecuada, por ejemplo, carbonato de potasio, en un solvente adecuado, tal como THF. La reacción se agitó a temperatura ambiente (aproximadamente 15-30°C) durante un tiempo suficiente para terminar la reacción, por ejemplo, aproximadamente doce horas. Después de la terminación de la reacción, el solvente se elimina bajo vacío, y el compuesto del tipo 1.3 se aisla y purifica mediante cromatografía.

En un aspecto, los compuestos del tipo 1.4 pueden prepararse mediante una reacción de los compuestos del tipo 1.3 con un alcohol mediante una reacción de esterificación. En una reacción típica, un compuesto del tipo 1.3 se calienta a una temperatura adecuada (por ejemplo, reflujo, aproximadamente 65°C) en un solvente alcohólico adecuado, por ejemplo, metanol, en la presencia de un catalizador ácido, tal como ácido sulfúrico concentrado durante un tiempo suficiente para terminar la reacción, por ejemplo, durante la noche (aproximadamente 8-18 horas). Después de la terminación de la reacción, el solvente se elimina bajo vacío, y el compuesto del tipo 1.4, se aisla y purifica mediante cromatografía.

En un aspecto, los compuestos del tipo 1.4 pueden proporcionar los compuestos del tipo 1.5 mediante de la reacción con un derivado de hidracina apropiado (NH2NHR4). En una reacción típica, un compuesto del tipo 1.4 se agrega a un derivado de hidracina adecuado (NH2NHR4) y se calienta a una temperatura adecuada (por ejemplo, a reflujo, aproximadamente 65°C) en un solvente adecuado, por ejemplo, metanol, durante un tiempo suficiente para terminar la reacción (por ejemplo, aproximadamente 12 horas). Después de la terminación de la reacción, el solvente se elimina bajo vacío, y el compuesto del tipo 1.5, se aisla y purifica mediante cromatografía.

En un aspecto, los compuestos del tipo 1.5 pueden proporcionar los compuestos del tipo 1.7 mediante la reacción con un compuesto que contiene carbonilo apropiado (1.6). En una reacción típica, un compuesto del tipo 1.6 y un derivado de hidracina adecuado (1.5) se disuelven en un solvente adecuado, por ejemplo, metanol, en la presencia de un catalizador ácido adecuado (por ejemplo, ácido acético), y la mezcla se calienta utilizando un reactor de microondas a temperatura adecuada, por ejemplo, aproximadamente 120°C, durante un tiempo suficiente para terminar la reacción (por ejemplo, aproximadamente 30 minutos). Después de la terminación de la reacción y después del enfriamiento, el solvente se eliminó bajo vacío, y los compuestos del tipo 1.7, se aislaron y purificaron mediante cromatografía. 2. Ruta II En un aspecto, los análogos sustituidos de (?)-?/'-(1-feniletiliden)benzohidrazida de la presente invención, pueden prepararse genéricamente mediante el esquema de reacción sintético mostrado a continuación.

Los compuestos se representan en forma genérica, con los sustituyentes como se indicaron en las descripciones del compuesto en algún otro lugar en la presente. Un ejemplo más específico se expone a continuación.

En un aspecto, la Ruta II empieza con un derivado ácido sustituido adecuado (2.1). Los derivados de ácido sustituidos adecuados (2.1), están comercialmente disponibles o pueden prepararse fácilmente por alguien con experiencia en la técnica. En un aspecto, los compuestos del tipo 2.2 pueden prepararse mediante la reacción de los compuestos del tipo 2.1 con un alcohol mediante una reacción de esterificación. En una reacción típica, un compuesto del tipo 2.1 se calienta a una temperatura adecuada (por ejemplo, a reflujo, aproximadamente 70°C), en un solvente alcohólico adecuado, por ejemplo, metanol, en la presencia de un catalizador ácido, tal como ácido sulfúrico concentrado durante un tiempo suficiente para terminar la reacción, por ejemplo, durante la noche (aproximadamente 8-18 horas). Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó bajo vacío, y el compuesto del tipo 2.2, se aisló y se purificó mediante cromatografía.

En un aspecto, los compuestos del tipo 2.2 pueden proporcionar los compuestos del tipo 2.3 mediante una reacción con un derivado de hidracina apropiado (NH2NHR4). En una reacción típica, un compuesto del tipo 2.2 se agrega a un derivado de hidracina adecuado (NH2NHR4), y se calienta a temperatura adecuada (por ejemplo, a reflujo, aproximadamente 70°C) en un solvente adecuado, por ejemplo, metanol durante un tiempo suficiente para terminar la reacción, tal como durante la noche (8-18 horas). Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó bajo vacío, y el compuesto del tipo 2.3, se aisló y se purificó mediante cromatografía.

En un aspecto, los compuestos del tipo 2.3 pueden utilizarse para proporcionar los compuestos del tipo 2.5 mediante la reacción con un compuesto que contiene carbonilo apropiado (2.4). En una reacción típica, un compuesto del tipo 2.4 y un derivado de hidracina adecuado (2.3), se disuelven en un solvente adecuado, por ejemplo, metanol, en la presencia de un catalizador ácido adecuado (por ejemplo, ácido acético), y la mezcla se calentó utilizando un reactor de microondas a una temperatura adecuada, por ejemplo, aproximadamente 120°C, a un tiempo suficiente para terminar la reacción (por ejemplo, aproximadamente 30 minutos). Después de la terminación de la reacción y después del enfriamiento, el solvente se eliminó bajo vacío, y los compuestos del tipo 2.5, se aislaron y purificaron mediante cromatografía.

En un aspecto adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición de una histona desmetilasa. En un aspecto todavía adicional, la histona desmetilasa es un miembro de la familia específica de la lisina ("LSD") de las histonas desmetilasas. En aún otro aspecto, la histona desmetilasa es la LSD1. En aún otro aspecto, la histona desmetilasa es la LSD2. En un aspecto todavía adicional, el compuesto producido exhibe inhibición de la viabilidad celular.

En un aspecto adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición con una IC50 de menos que aproximadamente 1.0x10"4 M. En un aspecto todavía adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición con una IC50 de menos que aproximadamente 1.0?10"5 M. En aún otro aspecto adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición con una ICS0 de menos que aproximadamente ????"6 M. En aún otro aspecto, el compuesto producido exhibe una inhibición con una IC50 de menos que aproximadamente 1.0?10"7 ?. En un aspecto todavía adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición con una IC50 de menos que aproximadamente 1.0x10"8 M. En aún otro aspecto adicional, el compuesto producido exhibe una inhibición con una IC50 de menos que aproximadamente 1.0?10"9 M.

Está contemplado que cada uno de los métodos descritos pueda comprender además, pasos, manipulaciones y/o componentes adicionales. También está contemplado que cualquiera de uno o más de los pasos, manipulaciones y/o componentes pueden omitirse opcionalmente de la invención. Se entiende que un método descrito puede utilizarse para proporcionar los compuestos descritos. También se entiende que los productos de los métodos descritos pueden emplearse en los métodos descritos de uso.

D. Composiciones farmacéuticas En un aspecto, la invención se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos descritos. Esto es, puede proporcionarse una composición farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto descrito, o al menos un producto de un método descrito, y un portador farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto adicional, la invención se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad efectiva del producto de un método sintético descrito. En un aspecto adicional, la cantidad efectiva es una cantidad terapéuticamente efectiva. En un aspecto adicional, la cantidad efectiva es una cantidad profilácticamente efectiva. En un aspecto adicional, el compuesto es un compuesto descrito.

En ciertos aspectos, las composiciones farmacéuticas descritas comprenden los compuestos descritos (incluyendo las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), como un ingrediente activo, un portador farmacéuticamente aceptable, y, opcionalmente, otros ingredientes terapéuticos o adyuvantes. Las composiciones presentes incluyen aquéllas adecuadas para la administración oral, rectal, tópica y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular e intravenosa), aunque la ruta más adecuada en cualquier caso dado, dependerá del hospedero particular y la naturaleza y severidad de las condiciones para las cuales se administra el ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas pueden presentarse de manera conveniente en una forma de dosificación unitaria y prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia.

Como se utiliza en la presente, el término "sales farmacéuticamente aceptables", se refiere a sales preparadas de bases o ácidos no tóxicos, farmacéuticamente aceptable. Cuando el compuesto de la presente invención es un ácido, su sal correspondiente puede prepararse de manera conveniente de bases no tóxicas farmacéuticamente aceptables, incluyendo bases inorgánicas y bases orgánicas. Las sales derivadas de tales bases inorgánicas incluyen sales del aluminio, amonio, calcio, cobre (-ico y -oso), férricas, ferrosas, de litio, magnesio, manganeso (-ico y -oso), potasio, sodio, zinc y sales similares. Las particularmente preferidas son las sales de amonio, calcio, magnesio, potasio y sodio. Las sales derivadas de las bases no tóxicas orgánicas farmacéuticamente aceptables, incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, así como aminas cíclicas y aminas sustituidas, tales como aminas sustituidas naturales y sinterizadas. Otras bases no tóxicas orgánicas, farmacéuticamente aceptables, de las cuales pueden formarse las sales, incluyen resinas de intercambio iónico, tales como, por ejemplo, arginina, betaína, cafeína, colina, N.N'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperacina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y lo similar.

Como se utiliza en la presente, el término "ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables", incluye ácidos inorgánicos, ácidos orgánicos, y sales preparadas de los mismos, por ejemplo, ácido acético, bencensulfónico, benzoico, canforsulfónico, cítrico, etansulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metansulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluensulfónico y lo similar. Los preferidos son los ácidos cítrico, bromhídrico, clorhídrico, maleico, fosfórico, sulfúrico y tartárico.

En la práctica, los compuestos de la invención o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos de esta invención, pueden combinarse como el ingrediente activo en una mezcla íntima con un portador farmacéutico, de acuerdo con las técnicas de composición farmacéutica convencionales. El portador puede tomar una amplia variedad de formas, dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración, por ejemplo, oral o parenteral (incluyendo intravenosa). Así, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden presentarse como unidades discretas adecuadas para la administración oral, tales como cápsulas, sellos o tabletas, cada uno que contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo. Además, las composiciones pueden presentarse como un polvo, como gránulos, como una solución, como una suspensión en un líquido acuoso, como un líquido no acuoso, como una emulsión aceite en agua o como una emulsión líquida agua en aceite. Además de las formas de dosificación comunes expuestas anteriormente, los compuestos de la invención, y/o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, también pueden administrarse por medios y/o dispositivos de suministro de liberación controlada. Las composiciones pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos de farmacia. En general, tales métodos incluyen un paso de llevar en asociación el ingrediente activo con el portador que constituye uno o más de los ingredientes necesarios. En general, las composiciones se preparan mezclando de manera uniforme e íntima, el ingrediente activo con los portadores líquidos, o portadores sólidos finamente divididos o ambos. El producto puede formarse a continuación de manera conveniente en la presentación deseada.

Así, las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden incluir un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable de los compuestos de la invención. Los compuestos de la invención, o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, también pueden incluirse en composiciones farmacéuticas en combinación con uno o más de otros compuestos terapéuticamente activos.

El portador farmacéutico empleado puede, por ejemplo, ser un sólido, líquido o gas. Los ejemplos de portadores sólidos incluyen lactosa, térra alba, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, estearato de magnesio y ácido esteárico. Los ejemplos de portadores líquidos son jarabe de azúcar, aceite de cacahuate, aceite de oliva y agua. Los ejemplos de portadores gaseosos incluyen dióxido de carbono y nitrógeno.

En la preparación de las composiciones para la forma de dosificación oral, puede emplearse cualquier medio farmacéutico conveniente. Por ejemplo, puede utilizarse agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservadores, agentes colorantes y lo similar, para formar las preparaciones líquidas orales, tales como suspensiones, elíxires y soluciones; mientras que pueden utilizarse portadores tales como almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes de desintegración y lo similar, para formar las preparaciones sólidas orales tales como polvos, cápsulas y tabletas. Debido a su facilidad de administración, las tabletas y cápsulas son las unidades de dosificación oral preferidas, por lo que se emplean portadores farmacéuticos sólidos. Opcionalmente, las tabletas pueden recubrirse mediante técnicas acuosas o no acuosas estándar.

Una tableta que contiene la composición de esta invención puede prepararse mediante compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes o adyuvantes accesorios. Las tabletas comprimidas pueden prepararse mediante compresión, en una máquina adecuada, del ingrediente activo en una forma que fluye libremente tal como polvo o gránulos, mezclado opcionalmente con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, agente con superficie activa o de dispersión. Las tabletas moldeadas pueden hacerse moldeando en una máquina adecuada, una mezcla del compuesto pulverizado humectado con un diluyente líquido inerte.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden un compuesto de la invención (o sales farmacéuticamente aceptables del mismo), como un ingrediente activo, un portador farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente uno o más agentes terapéuticos adyuvantes adicionales. Las composiciones presentes incluyen composiciones adecuadas para la administración oral, rectal, tópica y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular e intravenosa), aunque la ruta más adecuada en cualquier caso dado, dependerá del hospedero particular, y la naturaleza y severidad de las condiciones para las cuales se administra el ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas pueden presentarse de manera conveniente en forma de dosificación unitaria y prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de farmacia.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención, adecuadas para la administración parenteral, pueden prepararse como soluciones o suspensiones de los compuestos activos en agua. Puede incluirse un agente tensoactivo adecuado tal como, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa. Las dispersiones también pueden prepararse en glicerol, polietilenglicoles líquidos y mezclas de los mismos en aceites. Además, puede incluirse un conservador para evitar el crecimiento dañino de microorganismos.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención, adecuadas para uso inyectable, incluyen soluciones acuosas o dispersiones estériles. Además, las composiciones pueden estar en la forma de polvos estériles para la preparación extemporánea de tales soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma final inyectable debe ser estéril y debe fluir de manera efectiva para la fácil aplicación con jeringa. Las composiciones farmacéuticas deben ser estables bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento; así, de manera preferida, deben conservarse contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido), aceites vegetales y mezclas adecuadas de los mismos.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en una forma adecuada para el uso tópico, tal como, por ejemplo, un aerosol, crema, ungüento, loción, polvo espolvoreable, lavados bucales, gárgaras y lo similar. Además, las composiciones pueden estar en una forma adecuada para utilizarse en dispositivos transdérmicos. Estas formulaciones pueden prepararse, utilizando un compuesto de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, vía métodos de procesamiento convencionales. Como un ejemplo, una crema o ungüento se prepara mezclando un material hidrófilico y agua, junto con aproximadamente 5% en peso a aproximadamente 10% en peso del compuesto, para producir una crema o ungüento que tenga una consistencia deseada.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden estar en una forma adecuada para la administración rectal, en donde el portador es un sólido. Es preferible que la mezcla forme supositorios de dosis unitaria. Los portadores adecuados incluyen manteca de cacao y otros materiales utilizados comúnmente en la técnica. Los supositorios pueden formarse de manera conveniente, mezclando primero la composición con los portadores ablandados o fundidos, seguido por enfriamiento y formación en moldes.

Además de los ingredientes portadores mencionados anteriormente, las formulaciones farmacéuticas descritas anteriormente pueden incluir, conforme sea apropiado, uno o más ingredientes portadores adicionales, tales como diluyentes, amortiguadores, agentes saborizantes, aglutinantes, agentes con superficie activa, espesantes, lubricantes, conservadores (incluyendo antioxidantes) y lo similar. Además, pueden incluirse otros adyuvantes para volver isotónica la formulación con la sangre del receptor pretendido. Las composiciones que contienen un compuesto de la invención y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, pueden prepararse también en una forma de un concentrado en polvo o líquido.

En las condiciones de tratamiento que requieren la inhibición o la modulación negativa de la actividad de la proteína LSD, un nivel de dosificación apropiada generalmente será de aproximadamente 0.01 a 500 mg por kg de peso corporal del paciente por día, y pueden administrarse en dosis únicas o múltiples. De manera preferida, el nivel de dosificación será de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 250 mg/kg por día; de manera más preferida 0.5 a 100 mg/kg por día. Un nivel de dosificación adecuado puede ser de aproximadamente 0.01 a 250 mg/kg por día, aproximadamente 0.05 a 100 mg/kg por día, o aproximadamente 0.1 a 50 mg/kg por día. Dentro de este intervalo, la dosificación puede ser de 0.05 a 0.5, 0.5 a 5.0 ó 5.0 a 50 mg/kg por día. Para la administración oral, las composiciones se proporcionan de manera preferida en la forma de tabletas que contienen 1.0 a 1000 miligramos del ingrediente activo, particularmente 1.0, 5.0, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 750, 800, 900 y 1000 miligramos del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación del paciente a ser tratado. El compuesto puede administrarse en un régimen de 1 a 4 veces por día, de manera preferida, una o dos veces por día. Ese régimen de dosificación puede ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima.

Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular, dependerá de una variedad de factores. Tales factores incluyen la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del paciente. Otros factores incluyen el tiempo y ruta de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos y el tipo y severidad de la enfermedad particular que se somete a terapia.

La presente invención está dirigida además, a un método para la fabricación de un medicamento para inhibir o modular de manera negativa la actividad de la proteína LSD (por ejemplo, tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada, o uno o más trastornos neurodegenerativos asociados con la disfunción de la LSD) en mamíferos (por ejemplo, humanos), que comprende combinar uno o más de los compuestos descritos, productos o composiciones descritos, con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. Así, en un aspecto, la invención se relaciona con un método para fabricar un medicamento que comprende combinar al menos un compuesto descrito o al menos un producto descrito con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas descritas pueden comprender además, otros compuestos terapéuticamente activos, que se aplican usualmente en el tratamiento de las condiciones patológicas mencionadas anteriormente.

Se entiende que las composiciones descritas pueden prepararse de los compuestos descritos. También se entiende que las composiciones descritas pueden emplearse en los métodos descritos de uso.

E. Métodos para utilizar los compuestos y composiciones Los compuestos descritos pueden utilizarse como agentes únicos o en combinación con uno ó más de otros fármacos en el tratamiento, prevención, control, alivio o reducción del riesgo de las enfermedades, trastornos y condiciones mencionadas anteriormente, para las cuales los compuestos de fórmula I o los otros fármacos tienen utilidad, en donde la combinación de fármacos juntos, es más segura o más efectiva que cualquier fármaco solo. Los otros fármacos pueden administrarse mediante una ruta y en una cantidad utilizada comúnmente, por lo tanto, de manera contemporánea o secuencial con un compuesto descrito. Cuando un compuesto descrito se utiliza de manera contemporánea con uno o más de otros fármacos, se prefiere una composición farmacéutica en forma de dosificación unitaria que contiene tales fármacos y el compuesto descrito. Sin embargo, la terapia en combinación también puede administrarse en programas superpuestos. También se considera que la combinación de uno o más ingredientes activos y un compuesto descrito, será más eficaz que cualquiera como un agente único.

Las composiciones farmacéuticas y los métodos de la presente invención pueden comprender además, otros compuestos terapéuticamente efectivos, como se indicó en la presente, que se aplican usualmente en el tratamiento de las condiciones patológicas mencionadas anteriormente. 1. Métodos de tratamiento Los compuestos descritos en la presente son útiles para tratar, prevenir, aliviar, controlar o reducir el riesgo de una variedad de trastornos, en donde el paciente o sujeto se beneficiaría de la inhibición o modulación negativa de una proteína LSD. En un aspecto, un tratamiento puede incluir la inhibición selectiva de la LSD a un grado efectivo, para afectar la actividad de desmetilación de la histona. Así, un trastorno puede asociarse con la actividad de la desmetilación de la histona, por ejemplo, la regulación epigenética disfuncional de los genes en una célula cancerosa. En un aspecto, se proporciona un método para tratar o prevenir un trastorno en un sujeto, que comprende el paso de administrar al sujeto al menos un compuesto descrito; al menos una composición farmacéutica descrita; y/o al menos un producto descrito en una dosificación y cantidad efectiva para tratar el trastorno en el sujeto.

También se proporciona un método para el tratamiento de uno o más trastornos, para los cuales se predice que la inhibición de la LSD sería benéfica, en un sujeto, que comprende el paso de administrar al sujeto al menos un compuesto descrito; al menos una composición farmacéutica descrita y/o al menos un producto descrito en una dosificación y cantidad efectiva para tratar el trastorno en el sujeto.

En un aspecto, se proporciona un método para tratar un trastorno de proliferación celular no controlada, que comprende: administrar a un sujeto, al menos un compuesto descrito; al menos una composición farmacéutica descrita; y/o al menos un producto descrito en una dosificación y cantidad efectiva para tratar el trastorno en el sujeto. En un aspecto adicional, se proporciona un método para tratar o prevenir un trastorno neurodegenerativo, que comprende: administrar a un sujeto al menos un compuesto descrito; al menos una composición farmacéutica descrita; y/o al menos un producto descrito, en una dosificación y cantidad efectiva para tratar el trastorno en el sujeto. También se proporciona un método para el tratamiento de un trastorno en un mamífero, que comprende el paso de administrar al mamífero, al menos un compuesto, composición o medicamento descrito.

La invención está dirigida al uso de composiciones químicas descritas para tratar enfermedades o trastornos en pacientes (de manera preferida, humanos), en donde se predice que la inhibición de la LSD tendría un efecto terapéutico, tal como trastornos de proliferación celular no controlada (por ejemplo, cánceres) y trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington y enfermedad de Parkinson, administrando uno o más compuestos o productos descritos.

Los compuestos descritos en la presente, son útiles para tratar, prevenir, aliviar, controlar o reducir el riesgo de una variedad de trastornos de proliferación celular no controlada. En un aspecto, el trastorno de proliferación celular no controlada está asociado con una disfunción de la histona desmetilasa. En un aspecto adicional, la disfunción de la histona desmetilasa es la desregulación de la LSD. En un aspecto todavía adicional, la disfunción de la histona desmetilasa es la desregulación de la LSD1. En aún otro aspecto, la disfunción de la histona desmetilasa es la desregulación de la LSD2.

También se proporciona un método para utilizarse un compuesto, composición o medicamento descrito. En un aspecto, el método de uso está dirigido al tratamiento de un trastorno. En un aspecto adicional, los compuestos descritos pueden utilizarse como agentes únicos o en combinación con uno o más de otros fármacos en el tratamiento, prevención, control, alivio o reducción del riesgo de las enfermedades, trastornos y condiciones mencionadas anteriormente, para los cuales el compuesto o los otros fármacos tienen utilidad, en donde la combinación de fármacos juntos es más segura y más efectiva que cualquier fármaco solo. Los otros fármacos pueden administrarse mediante una ruta y en una cantidad utilizada comúnmente, por lo tanto, de manera contemporánea o secuencial con un compuesto descrito. Cuando un compuesto descrito se utiliza de manera contemporánea con uno o más de otros fármacos, se prefiere una composición farmacéutica en forma de dosificación unitaria que contiene tales fármacos y el compuesto descrito. Sin embargo, la terapia en combinación también puede administrarse en programas superpuestos. También se considera que la combinación de uno o más ingredientes activos y un compuesto descrito, pueda ser más eficaz que cualquiera como un agente único.

Los ejemplos de los trastornos asociados con una disfunción de la histona desmetilasa, incluyen un trastorno de proliferación celular no controlada. En aún otro aspecto adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada es cáncer. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es una leucemia. En aún otro aspecto, el cáncer es un sarcoma. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un tumor sólido. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un linfoma.

Se entiende que el cáncer se refiere a, o describe la condición fisiológica en los mamíferos, que está caracterizada típicamente por el crecimiento celular no regulado. El cáncer puede ser resistente a múltiples fármacos (MDR) o sensibles a los fármacos. Los ejemplos de cánceres incluyen, de manera no exclusiva, carcinoma, linfoma, blastoma, sarcoma, y leucemia. Los ejemplos más particulares de tales cánceres incluyen cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de las células escamosa, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer gastrointestinal, cáncer pancreático, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer peritoneal, cáncer de hígado, por ejemplo, carcinoma hepático, cáncer de vejiga, cáncer colorrectal, carcinoma endometrial, cáncer de riñon y cáncer de tiroides.

En varios aspectos, los ejemplos adicionales de cánceres son carcinoma de las células básales, cáncer del tracto biliar; cáncer óseo; cáncer de cerebro y del CNS; coriocarcinoma; cáncer de tejido conectivo; cáncer esofágico; cáncer ocular; cáncer de la cabeza y cuello; cáncer gástrico; neoplasma intraepitelial; cáncer de laringe; linfoma incluyendo linfoma de Hodgkin y linfoma no de Hodgkin; melanoma; mieloma; neuroblastoma; cáncer de la cavidad oral (por ejemplo, labios, lengua, boca y faringe); retinoblastoma; rabdomiosarcoma; cáncer rectal; cáncer del sistema respiratorio; sarcoma; cáncer de piel; cáncer de estómago; cáncer testicular; cáncer uterino; cáncer del sistema urinario, así como otros carcinomas y sarcomas.

En un aspecto adicional, el cáncer es un cáncer hematológico.

En un aspecto todavía adicional, el cáncer hematológico se selecciona de leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide crónica (CML), leucemia linfocítica crónica (CLL), leucemia de las células pilosas, leucemia mielomonocítica crónica (CMML), leucemia mielomonocítica juvenil (JMML), linfoma de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin, mieloma múltiple, mieloma solitario, mieloma localizado y mieloma extramedular. En un aspecto todavía adicional, el cáncer se selecciona de leucemia linfocítica crónica, linfoma linfocítico pequeño, linfoma no de Hodgkin de las células B y linfoma de las células B grandes.

En un aspecto adicional, el cáncer es un cáncer de cerebro. En un aspecto todavía adicional, el cáncer de cerebro se selecciona de un glioma, meduloblastoma, tumor neuroectodérmico primitivo (PNET), neuroma acústico, glioma, meningioma, adenoma de la hipófisis, schwannoma, linfoma del CNS, tumor neuroectodérmico primitivo, craniofaringioma, cordoma, meduloblastoma, neuroblastoma cerebral, neurocitoma central, pineocitoma, pineoblastoma, tumor rabdoide teratoide atípico, condrosarcoma, condroma, carcinoma del plexo coroides, papiloma del plexo coroides, craniofaringioma, tumor neuroepitelial disembrioplástico, gangliocitoma, germinoma, hemangioblastoma, hemangiopercitoma y tumor metastático del cerebro. En aún otro aspecto adicional, el glioma se selecciona de ependimoma, astrocitoma, oligodendroglioma y oligoastrocitoma. En aún otro aspecto, el glioma se selecciona de astrocitoma pilocitico juvenil, astrocitoma de las células gigantes subependimales, ganglioglioma, subependimoma, xantoastrocitoma pleomórfico, astrocitoma anaplásico, glioblastoma multiforme, glioma del tallo cerebral, oligodendroglioma, ependimoma, oligoastrocitoma, astrocitoma cerebelar, astrocitoma infantil desmoplásico, astrocitoma de las células gigantes subependimales, astrocitoma difuso, glioma mezclado, glioma óptico, gliomatosis cerebri, tumor gliomatoso multifocal, tumor multiforme de glioblastoma multicéntrico, paraganglioma y ganglioglioma.

En un aspecto, el cáncer puede ser un cáncer seleccionado de los cánceres de la sangre, cerebro, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal, colon, recto, mama, riñon, sistema linfático, estómago, pulmón, páncreas y piel. En un aspecto adicional, el cáncer se selecciona de cáncer de próstata, glioblastoma multiforme, cáncer endometrial, cáncer de mama y cáncer de colon. En un aspecto adicional, el cáncer se selecciona de un cáncer de mama, ovario, próstata, cabeza, cuello y riñon. En un aspecto todavía adicional, el cáncer se selecciona de cánceres de la sangre, cerebro, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal, colon, recto, mama, hígado, riñon, sistema linfático, estómago, pulmón, páncreas y piel. En aún otro aspecto adicional, el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón y de hígado. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de un cáncer de mama, ovario, testículos y próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de mama. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un cáncer de ovario. En aún otro aspecto, el cáncer es un cáncer de próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de los testículos.

En varios aspectos, los trastornos asociados con una disfunción de la histona desmetilasa incluyen trastornos neurodegenerativos. En un aspecto adicional, la enfermedad neurodegenerativa se selecciona de enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Huntington.

Los compuestos son útiles además en un método para la prevención, tratamiento, control, alivio o reducción del riesgo de las enfermedades, trastornos y condiciones indicadas en la presente. Los compuestos son útiles además, en un método para la prevención, tratamiento, control, alivio o reducción del riesgo de las enfermedades, trastornos y condiciones mencionados anteriormente, en combinación con otros agentes.

La presente invención está dirigida además, a la administración de un inhibidor de la LSD para mejorar los desenlaces del tratamiento en el contexto de los trastornos de proliferación celular no controlada, incluyendo cáncer. Esto es, en un aspecto, la invención se relaciona con un método coterapéutico que comprende el paso de administrar a un mamífero, una cantidad efectiva y una dosificación de al menos un compuesto de la invención en conexión con la terapia para el cáncer.

En un aspecto adicional, la administración mejora los desenlaces del tratamiento en el contexto de la terapia para el cáncer. La administración en conexión con la terapia para el cáncer, puede ser continua o intermitente. La administración no necesita ser simultánea con la terapia, y puede ser antes, durante y/o después de la terapia. Por ejemplo, la terapia para el cáncer puede proporcionarse en el transcurso de 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7 días antes de o después de la administración del compuesto. Como un ejemplo adicional, la terapia para el cáncer puede proporcionarse en el transcurso de 1 , 2, 3 ó 4 semanas antes o después de la administración del compuesto. Como todavía otro ejemplo, la terapia cognoscitiva o del comportamiento, puede proporcionarse antes o después de la administración, dentro de un periodo de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 vidas medias del compuesto administrado.

En un aspecto, los compuestos descritos pueden utilizarse en combinación con uno o más de otros fármacos en el tratamiento, prevención, control, alivio o reducción del riesgo de enfermedades o condiciones para las cuales los compuestos descritos u otros fármacos pueden tener utilidad, en donde la combinación de los fármacos juntos es más segura o más efectiva que cualquier fármaco solo. Tales otros fármacos pueden administrarse, mediante una ruta y en una cantidad utilizada comúnmente, por lo tanto, de manera contemporánea o secuencial con un compuesto de la presente invención. Cuando un compuesto de la presente invención se utiliza de manera contemporánea con uno o más de otros fármacos, se prefiere una composición farmacéutica en una forma de dosificación unitaria que contiene tales otros fármacos y un compuesto descrito. Sin embargo, la terapia en combinación también puede incluir terapias en las cuales un compuesto descrito y uno o más de otros fármacos, se administran en diferentes programas superpuestos. También está contemplado que cuando se utilizan en combinación con uno o más de otros ingredientes activos, los compuestos descritos y los otros ingredientes activos, pueden utilizarse en dosis más bajas cuando cada uno se utiliza solo.

En consecuencia, las composiciones farmacéuticas incluyen aquellas que contienen uno o más de otros ingredientes activos, además de un compuesto de la presente invención.

Las combinaciones anteriores incluyen combinaciones de un compuesto descrito no solo con otro compuesto activo, sino también con dos o más de otros compuestos activos. De igual manera, los compuestos descritos pueden utilizarse en combinación con otros fármacos que se utilizan en la prevención, tratamiento, control, alivio o reducción del riesgo de las enfermedades o condiciones para las cuales los compuestos descritos son útiles. Tales otros fármacos pueden administrarse mediante una ruta y en una cantidad utilizada comúnmente de los mismos, de manera contemporánea o secuencial con un compuesto de la presente invención. Cuando un compuesto de la presente invención se utiliza de manera contemporánea con uno o más de otros fármacos, una composición farmacéutica que contiene tales otros fármacos, además de un compuesto descrito se prefiere. En consecuencia, las composiciones farmacéuticas incluyen aquellas que también contienen uno o más de otros ingredientes activos, además de un compuesto de la presente invención.

La relación en peso de un compuesto descrito al segundo ingrediente activo puede variarse, y dependerá de la dosis efectiva de cada ingrediente. Generalmente, se utilizará una dosis efectiva de cada uno. Así, por ejemplo, cuando un compuesto de la presente invención se combina con otro agente, la relación en peso de un compuesto descrito al otro agente variará generalmente de aproximadamente 1000:1 a aproximadamente 1 :1000, de manera preferida de aproximadamente 200:1 a aproximadamente 1 :200. Las combinaciones de un compuesto de la presente invención y otros ingredientes activos, generalmente también estará dentro del intervalo mencionado anteriormente, pero en cada caso, deberá utilizarse una dosis efectiva de cada uno de los ingredientes activos.

En tales combinaciones, un compuesto descrito y otros agentes activos, pueden administrarse de manera separada y en conjunto. Además, la administración de un elemento puede ser antes, de manera concurrente con, o posterior a la administración de otros agentes.

En consecuencia, los compuestos objeto pueden utilizarse solos o en combinación con otros agentes, que son conocidos por ser benéficos en las indicaciones del sujeto u otros fármacos que afectan los receptores o las enzimas que incrementan la eficacia, seguridad, conveniencia o reducen los efectos secundarios indeseados o la toxicidad de los compuestos descritos. El compuesto objeto y el otro agente pueden coadministrarse, ya sea en una terapia concomitante o en una combinación fija.

En un aspecto, el compuesto puede emplearse en combinación con agentes terapéuticos anticancerígenos u otros agentes terapéuticos conocidos.

En el tratamiento de las condiciones que requieren la inhibición o modulación negativa de la LSD, un nivel de dosificación apropiado será generalmente de aproximadamente 0.01 a 1000 mg por kg de peso corporal del paciente por día, que puede administrarse en dosis únicas o múltiples. De manera preferida, el nivel de dosificación será de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 250 mg/kg por día; de manera más preferida, de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 100 mg/kg por día. Un nivel de dosificación adecuado puede ser de aproximadamente 0.01 a 250 mg/kg por día, de aproximadamente 0.05 a 100 mg/kg por día, o de aproximadamente 0.1 a 50 mg/kg por día. Dentro de este intervalo, la dosificación puede ser de 0.05 a 0.5, 0.5 a 5 ó 5 a 50 mg/kg por día. Para la administración oral, las composiciones se proporcionan de manera preferida en la forma de tabletas que contienen 1.0 a 1000 miligramos del ingrediente activo, particularmente 1.0, 5.0, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 750, 800, 900 y 1000 miligramos del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente a ser tratado. Los compuestos pueden administrarse en un régimen de 1 a 4 veces por día, de manera preferida, una o dos veces por día. Este régimen de dosificación puede ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente particular puede variarse, y dependerá de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de ese compuesto, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, modo y tiempo de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos, la severidad de la condición particular y el hospedero que se somete a la terapia.

Así, en un aspecto, la invención se relaciona con métodos para inhibir o modular de manera negativa la LSD en al menos una célula, que comprende el paso de poner en contacto al menos una célula con al menos un compuesto de la invención, en una cantidad efectiva para modular o activar la respuesta de la actividad de la LSD, por ejemplo, LSD1 o LSD2, en al menos una célula. En un aspecto adicional, la célula es de mamífero, por ejemplo, de humano. En un aspecto adicional, la célula se ha aislado de un sujeto antes del paso de contacto. En un aspecto adicional, el contacto es vía la administración a un sujeto. a. Tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada En un aspecto, la invención se relaciona con un método para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero, el método comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad efectiva de al menos un compuesto descrito o un producto de un método descrito para hacer un compuesto, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, tratando por lo tanto el trastorno de la proliferación celular no controlada.

En un aspecto todavía adicional, la cantidad efectiva es una cantidad terapéuticamente efectiva. En todavía otro aspecto adicional, la cantidad efectiva es una cantidad profilácticamente efectiva.

En un aspecto adicional, el mamífero es un humano. En aún otro aspecto adicional, el método comprende además, el paso de identificar un mamífero en necesidad de tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada. En un aspecto todavía adicional, el mamífero se ha diagnosticado con la necesidad para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada, antes del paso de administración.

En un aspecto adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada está asociado con una disfunción de la histona desmetilasa. En un aspecto adicional, la histona desmetilasa es una histona desmetilasa específica de la lisina. En aún otro aspecto adicional, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD1. En aún otro aspecto, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD2.

En un aspecto adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada es un cáncer. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es una leucemia. En aún otro aspecto, el cáncer es un sarcoma. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un tumor sólido. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un linfoma. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de leucemia linfocítica crónica, linfoma linfocítico pequeño, linfoma no de Hodgkin de las células B y linfoma de las células B grandes. En un aspecto todavía adicional, el cáncer se selecciona de cánceres de la sangre, cerebro, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal, colon, recto, mama, hígado, riñon, sistema linfático, estómago, pulmón, páncreas y piel. En aún otro aspecto adicional, el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón y de hígado. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de un cáncer de mama, ovario, testículos y próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de mama. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un cáncer de ovario. En aún otro aspecto, el cáncer es un cáncer de próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de los testículos. b. Disminución de la actividad de la histona desmetilasa En un aspecto, la invención se relaciona con un método para disminuir la actividad de la histona desmetilasa en un mamífero, el método comprende el paso de administrar al mamífero, una cantidad efectiva de al menos un compuesto descrito o un producto de un método descrito para hacer un compuesto, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, disminuyendo por lo tanto la actividad de la histona desmetilasa en el mamífero.

En un aspecto todavía adicional, la cantidad efectiva es una cantidad terapéuticamente efectiva. En todavía otro aspecto, la cantidad efectiva es una cantidad profilácticamente efectiva.

En un aspecto adicional, el mamífero es un humano. En aún otro aspecto adicional, el método comprende además, el paso de identificar un mamífero en necesidad de disminuir la actividad de la histona desmetilasa.

En un aspecto todavía adicional, el mamífero se ha diagnosticado con una necesidad para disminuir la actividad de la histona desmetilasa antes del paso de administración.

En un aspecto adicional, la histona desmetilasa es una histona desmetilasa específica de la lisina. En aún otro aspecto adicional, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD1. En aún otro aspecto, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD2.

En un aspecto adicional, la necesidad para disminuir la actividad de la histona desmetilasa está asociada con una disfunción de la histona desmetilasa. En aún otro aspecto adicional, la disfunción de la histona desmetilasa está asociada con un trastorno de proliferación celular no controlada. En aún otro aspecto adicional, el método comprende además el paso de identificar un mamífero en necesidad de tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada. En un aspecto todavía adicional, el mamífero se ha diagnosticado con la necesidad para tratar un trastorno de proliferación celular no controlada antes del paso de administración.

En un aspecto todavía adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada es un cáncer. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es una leucemia. En aún otro aspecto, el cáncer es un sarcoma. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un tumor sólido. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un linfoma. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de leucemia linfocítica crónica, linfoma linfocítico pequeño, linfoma no de Hodgkin de las células B y linfoma de las células B grandes. En un aspecto todavía adicional, el cáncer se selecciona de cánceres de la sangre, cerebro, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal, colon, recto, mama, hígado, riñon, sistema linfático, estómago, pulmón, páncreas y piel. En aún otro aspecto adicional, el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón e hígado. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de un cáncer de mama, ovario, testículos y próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de mama. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un cáncer de ovario. En aún otro aspecto, el cáncer es un cáncer de próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de los testículos. c. Disminución de la actividad de la histona desmetilasa en las células En un aspecto, la invención se relaciona con un método para disminuir la actividad de la histona desmetilasa en al menos una célula, el método comprende el paso de poner en contacto al menos una célula con una cantidad efectiva de al menos un compuesto descrito o un producto de un método descrito para hacer un compuesto, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, o una sal, hidrato, solvato o polimorfo farmacéuticamente aceptable del mismo, disminuyendo por lo tanto la actividad de la histona desmetilasa en la célula.

En un aspecto todavía adicional, la cantidad efectiva es una cantidad terapéuticamente efectiva. En aún otro aspecto, la cantidad efectiva es una cantidad profilácticamente efectiva.

En un aspecto adicional, la célula es de mamífero. En un aspecto todavía adicional, la célula es humana. En aún otro aspecto adicional, el contacto es vía la administración a un mamífero. En un aspecto adicional, el método comprende además el paso de identificar a un mamífero que tiene la necesidad de disminuir la actividad de la histona desmetilasa en una célula. En un aspecto todavía adicional, el mamífero se ha diagnosticado con la necesidad para disminuir la actividad de la histona desmetilasa antes del paso de administración.

En un aspecto adicional, la histona desmetilasa es una histona desmetilasa específica de la lisina. En aún otro aspecto adicional, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD1. En aún otro aspecto, la histona desmetilasa específica de la lisina es la LSD2.

En un aspecto adicional, la necesidad para disminuir la actividad de la histona desmetilasa en una células está asociada con un trastorno de proliferación celular no controlado. En un aspecto todavía adicional, el trastorno de proliferación celular no controlada es un cáncer. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es una leucemia. En aún otro aspecto, el cáncer es un sarcoma. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un tumor sólido. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un linfoma. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de leucemia linfocítica crónica, linfoma linfocítico pequeño, linfoma no de Hodgkin de las células B y linfoma de las células B grandes. En un aspecto todavía adicional, el cáncer se selecciona de cánceres de sangre, cerebro, tracto genitourinario, tracto gastrointestinal, colon, recto, mama, hígado, riñon, sistema linfático, estómago, pulmón, páncreas y piel. En aún otro aspecto adicional, el cáncer se selecciona de un cáncer de pulmón y de hígado. En aún otro aspecto, el cáncer se selecciona de un cáncer de mama, ovario, testículos y próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de mama. En aún otro aspecto adicional, el cáncer es un cáncer de ovario. En aún otro aspecto, el cáncer es un cáncer de próstata. En un aspecto todavía adicional, el cáncer es un cáncer de los testículos. 2. Fabricación de un medicamento En un aspecto, la invención se relaciona con un método para la fabricación de un medicamento para la inhibición de la actividad de la histona desmetilasa en un mamífero, que comprende combinar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto descrito o un producto de un método descrito, con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

F. Parte experimental Los siguientes ejemplos se exponen para proporcionar a aquellos con experiencia ordinaria en la técnica, una revelación y descripción completas de cómo se hacen y evalúan los compuestos, composiciones, artículos, dispositivos y/o métodos reclamados en la presente, y pretenden ser simplemente ejemplares de la invención y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran como su invención. Se han hecho esfuerzos por asegurar la exactitud con respecto a los números (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero deben considerarse algunos errores y desviaciones. A menos que se indique de otra manera, las partes son partes en peso, la temperatura está en °C o es temperatura ambiente y la presión es a, o cerca de la atmosférica.

En los siguientes ejemplos se ¡lustran varios métodos para preparar los compuestos de esta invención. Las materias primas y los intermediarios requeridos son en algunos casos, comercialmente disponibles, o pueden prepararse de acuerdo con los procedimientos en la literatura o como se ilustra en la presente.

Se sintetizaron los siguientes compuestos ejemplares de la invención. Los Ejemplos se proporcionan en la presente para ilustrar la invenció, y no deben interpretarse como que limitan la invención de ninguna manera. Los Ejemplos se describen típicamente en una forma de base libre, de acuerdo con las convenciones de nomenclatura de la IUPAC. Sin embargo, algunos de los Ejemplos se obtuvieron o aislaron en la forma de sal.

Como se indicó, algunos de los Ejemplos se obtuvieron como mezclas racémicas de uno o más enantiómeros o diastereómeros. Los compuestos pueden separarse por alguien con experiencia en la técnica para aislar los enantiómeros individuales. La separación puede llevarse a cabo mediante el acoplamiento de una mezcla racémica de los compuestos a un compuesto enantioméricamente puro para formar una mezcla diastereomérica, seguido por la separación de los diastereómeros individuales mediante métodos estándar, tales como cristalización fraccionada o cromatografía. También puede prepararse una mezcla racémica o diastereomérica de los compuestos, directamente mediante métodos cromatográficos, utilizando fases estacionarias quirales. 1. Materiales y métodos de la química general Todos los reactivos grado analítico o anhidro, se compraron de fuentes comerciales y se utilizaron sin purificación adicional. Los solventes fueron grado analítico o anhidros (Sigma-Aldrich). Los compuestos químicos de especialidad y los bloques de construcción obtenidos de varios proveedores, fueron de la pureza más alta ofrecida (siempre= 95%).

La espectroscopia con RMN se realizó en un instrumento Varían Unity 400 con una sonda de banda ancha de 5 mm y utilizando secuencias de impulsos estándar. Los desplazamientos químicos (d) se reportaron en partes por millón (ppm) campo debajo de las referencias del solvente. Las constantes de acoplamiento (valores de J) se expresan en Hz.

La espectrometría de masas se realizó en un espectrómetro de masas con electrorrocío (ESI) con trampa de iones LCMS LCQ Finnigan. Todas las muestras se analizaron mediante ESl-MS positiva y se reportó la relación de masa a carga (m/z) del ion molecular protonado.

Las reacciones asistidas con microondas se realizaron en un Iniciador Biotage Initiator 2.5 a varias potencias.

Las reacciones de hidrogenación se realizaron en un aparato para hidrogenación Parr estándar.

Las reacciones se verificaron mediante HPLC o TLC. Cuando se verificaron mediante TLC, las reacciones se analizaron en placas con fondo flexible Baker recubiertas con 200 pm de gel de sílice que contiene un indicador fluorescente. La TLC preparativa se realizó en Uniplacas Analtech de 20 cm x 20 cm recubiertas con una capa de 1000 ó 2000 pm de gel de sílice, que contiene un indicador fluorescente (UV 254). Las mezclas de elución se reportaron como vo!umen:volumen. Las visualizaciones de las manchas se lograron utilizando luz UV.

La cromatografía instantánea se realizó en un CombiFlash RF 200 Isco Teledyne utilizando columnas de C-18 con sílice en fase normal o en fase inversa Rf Gold Redisep o Estándar, dimensionadas de manera apropiada. Los compuestos crudos se adsorbieron sobre gel de sílice, 70-230 mallas 40 A (para la fase normal) o Celite 503 (para la fase inversa) y se cargaron en cartuchos sólidos. Las mezclas de elución se reportaron como volumen:volumen. 2. Modelado molecular y métodos de selección virtual Todos los estudios computacionales emplearon PDB ID 2Z5U para las coordenadas estructurales de la LSD1. Se implementaron métodos ICM de acoplamiento virtual, programas Glide y GOLD. La estructura de la proteína se preparó mediante protonación en 3D, supresión de las moléculas de agua y reducción al mínimo de la energía, utilizando el campo de fuerza ICM y el potencial dieléctrico dependiente de la distancia con un gradiente de RMS de 0.1; los átomos pesados en la proteína se mantuvieron fijos y los residuos de histidina se consideraron como neutros. Los cálculos de selección virtual utilizaron los parámetros por defecto (a menos que se especifique de manera explícita de otra manera) con las calificaciones ICM y Glide como las funciones de calificación, respectivamente. En ambos casos, el FAD se definió como el ligando y una región con un sitio activo se definió mediante una esfera de un radio de 12 A alrededor del FAD unido en el complejo con la LSD1.

La confirmación de la exactitud y la eficiencia del protocolo de acoplamiento aplicado utilizó el fragmento del dinucleótido de adenina del cofactor del FAD, y el fragmento de flavina, y los inhibidores conocidos de la LSD1 (conjunto falso) como los controles positivos. Se llevaron a cabo dos corridas de acoplamiento separadas, con ICM y el programa de acoplamiento Glide; el acoplamiento GOLD se empleó para la nueva calificación.

La base de datos del compuesto se preparó utilizando Ligprep 2.1.23 (Schródinger, LLC, Nueva York, Nueva York). Se adoptaron dos rondas de VS, incluyendo acoplamiento HTVS y con precisión estándar (SP). Los mejores 10,000 compuestos clasificados por Glide se almacenaron y presentaron para experimentos de acoplamiento adicionales utilizando el acoplamiento ICM. El conjunto final de 2,000 éxitos se seleccionó basándose en las calificaciones ICM y los compuestos individuales se inspeccionaron visualmente para verificar las posiciones del acoplamiento y las interacciones entre los ligandos y la LSD1. Las funciones de calificación por consenso GOLD se emplearon además, para volver a calificar estos 2,000 éxitos seleccionados de Glide e ICM. Finalmente, se compraron 121 compuestos (si están disponibles) o se sintetizaron para los estudios de inhibición de la LSD1. 3. Métodos de simulación MD Todas las simulaciones se realizaron utilizando el campo de fuerza AMBER ff99SB (Hornak, V., et al. Proteins 2006, 65 (3), 712-25) para la LSD1 , el campo de fuerza Amber general ("gaff; véase Wang, J., et al. J Comput Chem 2004, 25 (9), 1 57-74) para el compuesto 12 y se empleó el modelo TIP3P (Jorgensen, W. L, Journal of Chemical Physics 1982, (77), 4156-4163) para el agua. Las simulaciones se aproximaron a las interacciones electrostáticas de largo alcance utilizando el procedimiento con el método de Eweld de partícula-malla (PME) (Essmann, U., et al. Journal of Chemical Physics 1995, (103), 8577-8593; Darden, T., et al. Journal of Chemical Physics 1993, (98), 10089-10092). Utilizando LEaP, los modos de unión generados del acoplamiento ICM en el complejo con LSD1 se solvataron a carga neutra y los complejos se redujeron al mínimo primero con PMEMD (Case, D. A., et al. AMBER11, San Francisco, 2010). Después de la reducción al mínimo, 200 ps de la simulación de la dinámica molecular no restringida, utilizando un corte de la interacción no unida de 9Á, se corrieron para ambos modos de unión con un límite periódico de presión constante, manteniendo 1 atm de presión y un escalamiento de la posición isotrópico, con un tiempo de relajación de 2 ps. Se utilizó SHAKE para restringir los enlaces que involucran hidrógeno, y se utilizó la dinámica de Langevin para regular la temperatura (Case, D. A., et al. AMBER11, San Francisco, 2010), manteniéndola a 26.85°C (300°K). Las energías libres relativas de unión para las comparaciones entre los dos modos de unión se predijeron utilizando MMPBSA.py* con 100 tomas a intervalos de 1 ps, empezando a 1 ps o 101 ps en la trayectoria. 4. Resultados de la selección virtual Las primeras estructuras cristalinas de la LSD1 que dilucidan las características arquitectónicas críticas fueron posteriores por Stavropoulos et al. {Nat Struct Mol Biol 2006, 13(7):626-32; Protein Data Bank o PDB ID 2H94; véase http://www.wwpdb.org ), Yang et al.(Mol Cell 2006, 23 (3), 377-87; PDB ID 2IW5), y Chen et al. (Proc Nati Acad Sci USA 2006, 103 (38), 13956-61 ; PDB ID 2HKO). Estas estructuras de 2.9 A, 2.57 A y 2.8 A, respectivamente, muestran una cavidad que se une al sustrato altamente cargada de manera negativa, suficientemente espaciosa para alojar la cola N terminal de la histona H3. Además, un dominio SWIRM N terminal y una inserción en el dominio catalítico central, denominado el Dominio Tower, se establecieron como motivos estructurales necesarios para la actividad enzimática y las interacciones con los cofactores tales como CoREST. Para los estudios descritos en la presente, la estructura PDB ID 2Z5U, se utilizó con un inhibidor de la LSD1 unido, tranilcipromina para los estudios computacionales, incluyendo la selección virtual, acoplamiento y dinámica molecular (Mimasu, S., et al. Biochem Biophys Res Commun 2008, 366 (1), 15-22). Con el fin de evaluar el espacio químico fuera de los derivados de tranilcipromina y poliamina, se utilizó HTVS con una biblioteca interna. La biblioteca se documentó de bibliotecas de vendedores disponibles al público, totalizando aproximadamente 13 millones de compuestos, utilizando los filtros acostumbrados desarrollados de manera interna. Los compuestos se filtraron basándose en la regla de cinco de Lipinski, con excepciones que ocurrieron en sólo 62,000 compuestos. Además, los compuestos estructuralmente redundantes se eliminaron, de manera que la biblioteca resultante contenía un conjunto diverso, pero aún manejable, de aproximadamente 2 millones de compuestos. Antes de la selección, los compuestos se prepararon utilizando el módulo LigPrep de la Serie de Schrodinger, así como la preparación inherente de ICM de los ligandos tridimensionales (3D), de manera que se utilizaron los estados de protonación fisiológicamente relevantes.

Los ligandos preparados se acoplaron entonces contra tres diferentes sitios en la LSD1 ; el sitio del FAD localizado en el dominio de la amina oxidasa y los fragmentos del dinucleótido de adenina y de flavina en este bolsillo. Los protocolos de acoplamiento utilizados por ICM y Glide se corrieron con el FAD, el dinucleótido de adenina, los fragmentos de flavina y los inhibidores conocidos de la LSD1 para verificar la exactitud. Además de las clasificaciones del algoritmo de acoplamiento, se utilizó la inspección visual de los resultados del acoplamiento, para evaluar la posición de la unión, la postura adecuada y la orientación. Tomadas juntas, las funciones de calificación de ICM y Glide fueron capaces de identificar de manera correcta los inhibidores conocidos dentro del primer 2% del conjunto falso utilizado. Se utilizó GOLD para volver a calificar y la función de ajuste GOLD produjo enriquecimientos similares.

Una selección virtual se montó contra el bolsillo que se une al FAD de la LSD1 , utilizando el protocolo de acoplamiento establecido y la base de datos de 2 millones de compuestos. Los primeros 10,000 compuestos se seleccionaron de las funciones de calificación ICM y Glide para el análisis adicional. Unos pocos compuestos idénticos se calificaron de manera similar entre los dos algoritmos; esta redundancia se filtró. Además, se realizó la inspección visual para filtrar los compuestos similares y para incrementar la diversidad de la selección final. El análisis visual también permitió la identificación de las interacciones clave dentro del bolsillo que se une al FAD de la LSD1. Éstas incluyen el enlace de hidrógeno con Ser289, Arg310 y Arg316, interacciones de van der Waals con Val590 y Leu625 e interacciones p con Trp756. Además, los compuestos con hidroxilo y grupos que retiran electrones, hidrofóbicos, parecieron mostrar un enriquecimiento incrementado en los resultados iniciales del acoplamiento. El bolsillo que se une al FAD de la LSD1 es una grieta profunda y estrecha en el interior de la proteína y está rodeada por residuos de aminoácidos hidrofóbicos. Así, el carácter hidrofóbico de los compuestos puede jugar un papel importante en el camino aleatorio del compuesto hacia el sitio activo.

Basándose en los criterios de selección discutidos anteriormente, 121 compuestos estructural mente distintos se obtuvieron y presentaron para la selección bioquímica contra la LSD1. El ensayo bioquímico, como se describió en la sección experimental, mide el H2O2 producido de la desmetilación oxidativa de un sustrato peptídico. De los 121 compuestos, se identificó una serie de compuestos relacionados, que mostraron una actividad potente en el ensayo bioquímico. Las calificaciones del acoplamiento, clasificaciones y resultados del ensayo bioquímico acompañante para la serie se presentan en los Cuadros 1 , 2 y 6-9.

De los diez compuestos activos en el Cuadro 1 (y los cuadros asociados que proporcionan datos bioquímicos y celulares, Cuadros 6, 8 y 9), que se descubrieron utilizando métodos de selección virtual, por ejemplo, los compuestos 1 , 2, 4 y 5 mostraron modos de unión similares dentro del sitio de unión del FAD de la LSD1. Además, las calificaciones del acoplamiento para los compuestos 1 , 2, 4 y 5 se correlacionan bien con la actividad bioquímica observada. Estos resultados sugieren que los inhibidores mejorados dirigidos hacia el bolsillo del dinucleótico de adenina, en el dominio de la amina oxidasa de la LSD1 eran accesibles.

Las calificaciones Glide son predictivas y se correlacionan bien con los compuestos que tienen sustituciones de arilo p-OH o m-CI (compuestos 1 y 5). Está claro de estos estudios que los grupos que retiran electrones, hidrofóbicos, tales como -Cl son tolerados, mientras que los sustituyentes de alquilo pequeños, tales como metilo (por ejemplo, compuesto 8) o el compuesto 10 que contiene uno bicíclico fusionado, tienen actividad menor. La introducción de cualesquier grupos donantes, particularmente el grupo funcional -OCH3 en la 2a posición, pierden actividad, debido a la falta de interacciones de enlace de H con Gly314 (por ejemplo, compuesto 6). La falta de actividad bioquímica del compuesto 6 fue altamente predictiva de las calificaciones del acoplamiento, en donde ICM y Glide proporcionaron energías de -18.39 y -6.63 kcal/mol, respectivamente. En el análisis del acoplamiento subsiguiente, se identificaron series de compuestos adicionales de benzohidracina, con los compuestos que contienen sulfona sustituida en la posición 4 con -C metil o aril hidracina, como se ejemplifica por el éxito virtual, compuesto 9, que exhibió una potente actividad de inhibición de la LSD1 , con una IC50 de 19 nM. La baja calificación del acoplamiento del compuesto 9 se debe principalmente al hecho del desplazamiento en la posición del anillo de 2-OH arilo. El compuesto 9, con un sustituyente de sulfona/morfolina, se eligió como una cadena principal para la optimización adicional, debido, en parte, a su estabilidad química.

El modo de unión del compuesto 12 con la sulfona/morfolina se describe con la postura de acoplamiento predicha de ICM. En este modelo, el grupo fenólico se ajusta bien en el bolsillo compuesto de los residuos Ser289, Gly314 y Arg316. El grupo carbonilo central parece estar involucrado en las fuertes interacciones del enlace de H con el grupo amino de Arg310, y el oxígeno de la morfolina muestra interacciones del enlace de H con Val590. Estos conjuntos de interacciones del enlace de hidrógeno también se observaron con los experimentos de acoplamiento con Glide y GOLD. Los experimentos adicionales mostraron que el anillo de ario sustituido con morfolina participa en las interacciones p-p con el residuo Trp756, mientras que el oxígeno de la morfolina se mantuvo en el enlace de H con Val590.

La optimización química también se enfocó en el diseño de los compuestos que contienen anillos de heteroariio en cualquier lado del compuesto 12. Los modelos computacionales que utilizan estos resultados, generaron una variedad de estructuras químicamente plausibles, de las cuales, una piridina sustituida se identificó como una porción apropiada capaz de interactuar con Ser289, Gly314 y Arg316, los residuos circundantes y propiedades ideales. Un representante es el compuesto 24, que tenía un potente actividad de la LSD1 de (28 nM) y también exhibió un modo de unión similar a aquél del compuesto 12.

Muchos de los compuestos representativos contienen una C-alquil hidracina para incrementar la estabilidad metabólica de la serie. Sin embargo, un grupo más voluminoso, como el grupo etilo del compuesto 21 , no es bien alojado por el bolsillo de unión, como se ilustra en las diferentes actividades bioquímicas de los compuestos 12 y 21. La sustitución arilo con metilsulfona (compuesto 25) y sustituida con un anillo de morfolina (compuesto 12) incrementó la eficacia bioquímica, por aproximadamente un orden de magnitud, cuando se compara con el compuesto 11. La adición de sólo un anillo de morfolina, mantiene algo de la actividad bioquímica, como se ¡lustra por el compuesto 23. El reemplazo de la sulfono-morfolina con sulfono-N-dimetilo, también mantuvo la actividad bioquímica, como se ilustra por el compuesto 18. Además, se encontró que el reemplazo del grupo 2-OH con un cloro no era bien alojado, y se demostró una caída significativa en la actividad entre los compuestos 12 y 16. Los resultados con el compuesto 24 sugieren que el uso de una piridina sustituida es alojado por la enzima, pero varias otras sustituciones y heterociclos generalmente resultaron en una caída en la actividad biológica, como se ilustra en los compuestos 13, 14, 15, 17, 19, 20 y 22.

Muchos de los compuestos representativos en el Cuadro 2 contenían una C-alquil hidracina para incrementar la estabilidad metabólica de la serie. Sin embargo, un grupo más voluminoso, por ejemplo, el grupo etilo del compuesto 21 , es menos bien alojado por el bolsillo de unión, como se ilustra en las diferentes actividades bioquímicas de los compuestos 12 y 21. La sustitución de arilo con la metilsulfona (por ejemplo, compuesto 25) y sustituida con un anillo de morfolina (compuesto 12) incrementa la eficacia biológica por aproximadamente un orden de magnitud cuando se compara con el compuesto 11. La adición de un heterociclo, por ejemplo, un anillo de morfolina, mantiene la actividad bioquímica, como se ilustra por el compuesto 23. El reemplazo de sulfono-morfolina con sulfono-N-dimetilo también mantuvo la actividad bioquímica, como se ilustra por el compuesto 18. Además, se encontró que el reemplazo del grupo 2-OH con un cloro no era alojado, con una caída significativa en la actividad entre los compuestos 12 y 16. Como se discutió anteriormente, el compuesto 24 sugiere que el uso de una piridina sustituida es alojado por la enzima. El análisis adicional sugiere que el hidroxilo del compuesto 12 está asociado con una actividad bioquímica incrementada, por ejemplo, cuando este grupo sustituyente es sustituido con un cloro (compuesto 16), la actividad disminuyó.

CUADRO 1 CUADRO 2 5. Resultados de la simulación de la dinámica molecular Las simulaciones de la dinámica molecular ("MD") se llevaron a cabo utilizando las dos posturas de acoplamiento diferentes del compuesto 12, para determinar si había una preferencia por una postura de acoplamiento con respecto a la otra. Estos datos pueden informar mejor cuales interacciones juegan un papel en los resultados obtenidos con los compuestos sintetizados. Los resultados del acoplamiento muestran que la postura con la clasificación más alta con el compuesto 12 se une al bolsillo de unión del dinucleótido vía interacciones directas del enlace de H con Ser289 o Arg316 vía su porción de hidroxilo (modo de unión 1 , véase el Cuadro 3). Sin embargo, hay otra postura calificada de manera favorable con el anillo de morfolina del compuesto 12 que ¡nteractúa con Ser289 y Arg316 (modo de unión 2, véase el Cuadro 3).

Se utilizó la MD utilizando la serie AMBER para evaluar la energía de unión para ambos modos de unión predichos. Las simulaciones para el modo de unión 1 mostraron las interacciones del electrón p conjugado entre el compuesto 12 y Arg 316, así como el potencial para un enlace de hidrógeno entre el hidroxilo y Ser289. El análisis del modo de unión 2 mostró el potencial de interacciones tt-p entre el compuesto 12 y Trp756 con enlaces de hidrógeno más favorables con Arg310 y Arg316. Además, se predijo que el modo de unión 1 tenía enlaces de hidrógeno con Val590, mientras que el modo de unión dos tenía interacciones de van der Waals que involucran el grupo cloro. El análisis MMPBSA de los 100 ps finales de la simulación mostró que se predijo que el modo de unión 2 tenía una energía libre de unión de— 40.8 kcal/mol, que es casi 20 kcal/mol más favorable que ~-21.0 para el modo de unión 1. Los primeros 100 ps de la simulación, probablemente reflejan en parte el equilibrio del complejo, de manera que las energías libres de unión no son tan favorables. Este hallazgo contrasta con las clasificaciones de las posturas de unión durante el proceso de acoplamiento. Es posible que esta diferencia surja de las diferencias en la estructura de la proteína durante el acoplamiento y la MD, con una estructura rígida utilizada para incrementar la velocidad del protocolo de acoplamiento y la estructura flexible utilizada para la MD.

CUADRO 3 MD Compuesto No. 12 Compuesto No. 12 (Modo de Unión 1) (Modo de Unión 2) 1-100 ps: -20.2154 -32.9117 AG unión (kcal/mol) 101-200 ps: -21.0263 -40.8046 AG unión (kcal/mol) 150-200 ps: 0.394 1.560 RMSD ligando (A) 6. Preparación de |a (E)-/V-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)benzohidrazida La 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (100 mg, 0.586 mmoles) y benzohidrazida (80 mg, 0.586 mmoles), se disolvieron en metanol (4 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (90 mg), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): d 7.95 (m, 2H), 7.67-7.62 (m, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.35 (dd, 1H, J = 2.4 & 8.8 Hz), 6.95 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 3.35 (s, 3H). ESI-MS: 289.0 [M+H]+. 7. Preparación de \a (B-JV-d -(2.6-dihidroxifenil)etiliden)benzohidrazida La 1-(2,6-dihidroxifenil)etanona (100 mg, 0.657 mmoles) y benzohidrazida (89 mg, 0.657 mmoles), se disolvieron en metanol (4 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (100 mg), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 7.59 (m, 2H), 7.49 (m, 1 H), 7.39 (m, 2H), 7.11 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 6.45 (m, 2H), 2.35 (s, 3H). ESI-MS: 271 .1 [M+H]+. 8. Preparación del ácido 3-(morfolinosulfonil)benzoico El ácido 3-(clorosulfonil)benzoico (250 mg, 1.133 mmoles), se agregó a morfolina (99 mg, 1.133 mmoles) en la presencia de carbonato de potasio (313 mg, 2.266 mmoles) en THF (5 mL) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se dejo agitar durante 12 horas a temperatura ambiente. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título (160 mg), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.34 (m, 1H), 8.32 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.99 (m, 1 H), 7.76 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 3.70 (m, 4H), 2.98 (m, 4H). ESI-MS: 272.0 [M+H]+. 9. Preparación del 3-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo El ácido 3-(morfolinosulfonil)benzoico (100 mg, 0.369 mmoles), se sometió a reflujo durante la noche en metanol en la presencia de H2SO4 concentrado catalítico a 65°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco mate (60 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.38 (t, 1H, J = 1.6 Hz), 8.27 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.64 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 3.95 (s, 3H), 3.73 (m, 4H), 3.00 (m, 4H). ESI-MS: 286.1 [M+H]+. 10. Preparación de la 3-(Morfolinosulfonil)benzohidrazida El 3-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo (120 mg, 0.421 mmoles) se agregó a hidracina (17.52 mg, 0.547 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 12 horas a 65°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y el enfriamiento de la mezcla de reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco mate (90 mg). 1H R N (400 Hz, CDCI3): d 8.16 (m, 1H), 8.12 (m, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.63 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 4.19 (m, 2H), 3.71 (m, 4H), 2.97 (m, 4H). ESI-MS: 286.1 [M+Hf. 11. Preparación de la ( -Af-d-fS-cloro^-hidroxifeniDetiliden)-3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (20 mg, 0.117 mmoles) y la 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (33.5 mg, 0.117 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (16 mg), como un sólido. 1H RMN (400 Hz, CD3OD): d 8.26 (m, 1H), 8.17 (d, 1H, J = 8.0Hz), 7.92 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.72 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.48 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 7.22 (m, 1 H), 6.91 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.72 (m, 4H), 3.01 (m, 4H), 2.43 (s, 3H). ESI-MS: 438.1 [M+H]+. 12. Preparación de la (E)-AH1-(3-cloro-2-fluorofeniDetiliden)-3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1-(3-cloro-2-fluorofenil)etanona (20 mg, 0.116 mmoles) y la 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (33.1 mg, 0.116 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL), en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (22 mg), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.43 (s, 1H), 8.37 (m, 1 H), 8.16 (m, 1H), 7.87 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.65 (m, 1H), 7.41 (m, 1 H), 7.10 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 3.71 (m, 4H), 2.95 (m, 4H), 2.38 (s, 3H). ESI-MS: 440.1 [M+H]+. 13. Preparación de la ( -A/'-(1- 2-cloropir¡din-4-i0etiliden)-3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1 -(2-cloropiridin-4-¡l)etanona (20 mg, 0.129 mmoles) y la 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (36.7 mg, 0.129 mmoles), se disolvieron en metanol (4 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea, proporcionando el compuesto del título en un 60% de rendimiento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.43 (m, 1 H), 8.39 (m, 2H), 8.15 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.93 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.70 (t, 1H, J= 7.6 Hz), 7.52 (m, 1 H), 3.73 (m, 4H), 3.02 (m, 4H), 2.35 (s, 3H). ESI-MS: 423.1 [M+H]+. 14. Preparación de la (E)-N'-(1-(2.5-diclorofenil)etiliden 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1-(2,5-diclorofenil)etanona (20 mg, 0.106 mmoles) y la 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (30.2 mg, 0.106 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. Después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea, proporcionando el compuesto del título en un rendimiento de 10 mg. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.29 (m, 1H), 8.09 (m, 1H), 7.81 (m, 1H), 7.57 (m, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.26 (m, 2H), 3.52 (m, 4H), 2.91 (m, 4H), 2.28 (s, 3H). ESI-MS: 456.1 [M+H]+. 15. Preparación del 4-hidracinil-3-(morfolinosulfonil)benzoato El 4-fluoro-3-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo (30 mg, 0.099 mmoles), se agregó a hidracina (4.44 mg, 0.138 mmoles) en metanol (8 mL), y se sometió a reflujo durante 5 horas a 65°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y el enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (20 mg). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.15 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 8.03 (dd, 1 H, J = 2.4 y 9.2 Hz), 7.48 (d, 1 H, J = 9.2 Hz), 3.86 (s, 3H), 3.67 (m, 4H), 3.04 (m, 4H). ESI-MS: 316.1 [M+H]+. 16. Preparación del 4-fluoro-3-(morfolinosulfonil)benzoato de El ácido 4-fluoro-3-(morfolinosulfonil)benzoico (50 mg, 0.173 mmoles), se sometió a reflujo durante la noche en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (1.117 mg, 8.64 pmoles) en metanol (8 mL) a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (20 mg). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.42 (dd, 1H, J = 2.0 y 6.4 Hz), 8.33 (m, 1H), 7.49 (t, 1H, J = 8.8 Hz), 3.94 (s, 3H), 3.71 (m, 4H), 3.16 (m, 4H). 17. Preparación del 3-bromo-4-clorobenzoato de metilo El ácido 3-bromo-4-clorobenzoico (200 mg, 0.849 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (5.49 mg, 0.042 mmoles) en metanol (10 mL) a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (130 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.29 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.91 (dd, 1 H, J = 2.0 y 8.4 Hz), 7.52 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 3.92 (s, 3H). ESI-MS: 250.9 [M+H]+. 18. Preparación del 3-(N.N-dimetilsulfamoil)benzoato de metilo El ácido 3-(A/,/V-dimetilsulfamoil)benzoico (200 mg, 0.872 mmoles), se sometió a reflujo durante la noche en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (5.64 mg, 0.044 mmoles) en metanol (10 mL) a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (125 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.42 (s, 1H), 8.27 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.97 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.65 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 3.96 (s, 3H), 2.74 (s, 6H). ESI-MS: 244.0 [M+H]+. 19. Preparación de la 3-bromo-4-clorobenzohidrazida El 3-bromo-4-clorobenzoato de metilo (120 mg, 0.481 mmoles) se agregó a hidracina (23.12 mg, 0.721 mmoles) en metanol (8 mL), y se sometió a reflujo durante 12 horas a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (30 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.02 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.60 (dd, 1 H, J = 2.0 y 8.0 Hz), 7.52 (d, 1H, J = 8.0 Hz). ESI-MS: 250.9 [M+Hf. 20. Preparación de la 3-(hidracincarbonil)-N.N-dimetilbencensulfonamida El 3-(/V,A/-dimetilsulfamoil)benzoato de metilo (150 mg, 0.617 mmoles), se agregó a hidracina (29.6 mg, 0.925 mmoles) en metanol (10 mL), y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (60 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.11 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.92 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.65 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 2.73 (s, 6H). ESI-MS: 244.0 [M+H]+. 21. Preparación de la (£)-3-bromo-4-cloro-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)benzohidrazida La 3-bromo-4-clorobenzohidrazida (30 mg, 0.120 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (20.51 mg, 0.120 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (15 mg). 1H RMN (400 MHz, acetona-d6): d 8.30 (s, ÍH), 7.98 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 7.73 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 7.61 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.29 (dd, H, J = 2.4 y 8.4 Hz), 6.93 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 2.55 (s, 3H). ESI-MS: 402.9 [M+H]+. 22. Preparación de la (B-3-(2-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)hidracincarbonil)-N,N-dimetilbencensulfonamida La 3-(hidracinacarbonil)-/V,/\/-dimetilbencensulfonamida (50 mg, 0.206 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (35.1 mg, 0.206 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (15 mg). 1H RMN (400 MHz, acetona-efe): d 8.29 (m, 2H), 8.01 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.83 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 7.62 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.32 (dd, 1H, J = 2.4 y 8.8 Hz), 6.96 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 2.73 (s, 6H), 2.58 (s, 3H). ESI-MS: 396.0 [M+H]+. 23. Preparación de la 5-bromo-6-cloronicotinohidrazida El 5-bromo-6-cloronicotinato de metilo (100 mg, 0.399 mmoles), se agregó a hidracina (19.19 mg, 0.599 mmoles) en metanol (8 mL) y se calentó durante la noche a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (20 mg). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.33 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 8.01 (d, 1 H, J = 2.4 Hz). 24. Preparación de la (B-5-bromo-6-cloro-N'-(1-(5-cloro-2-h¡droxifenil)etiliden)nicotinohidrazida La 5-Bromo-6-cloronicotinohidrazida (15 mg, 0.060 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (10.22 mg, 0.060 mmoles), se disolvieron en metanol (4 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (8 mg). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): d 8.39 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 8.28 (s, 1 H), 7.63 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.32 (dd, 1 H, J = 2.4 y 8.8 Hz), 7.06 (d, 1 H, J = 6.8 Hz), 6.92 (d, 1 H, J = 9.2 Hz), 6.81 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 2.47 (s, 3H). ESI-MS: 404.0 [M+H]+. 25. Preparación del 5-cloronicotinato de metilo El ácido 5-cloronicotínico (200 mg, 1.269 mmoles), se sometió a reflujo durante la noche en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (8.20 mg, 0.063 mmoles) en metanol (10 ml_) a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (120 mg). 1H R N (400 MHz, CDCI3): d 9.07 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.72 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.26 (m, 1H), 3.95 (s, 1 H). 26. Preparación del 5-cloronicotinato de metilo El ácido 5-cloronicotínico (200 mg, 1.269 mmoles), se sometió a reflujo durante la noche en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (8.20 mg, 0.063 mmoles) en metanol (8 mL) a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (120 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.07 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.72 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 8.26 (m, 1H), 3.95 (s, 1 H). 27. Preparación de la 5-cloronicotinohidrazida Se agregó hidracina (17.93 mg, 0.560 mmoles), a 5-cloronicotinato de metilo (80 mg, 0.466 mmoles) en metanol (8 mL) y se calentó durante la noche a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna, proporcionando el compuesto del título (40 mg).

H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.85 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 8.70 (d, H, J = 2.4 Hz), 8.22 (t, 1 H, J = 2.0 Hz). ESI-MS: 172.0 [M+H]+. 28. Preparación de la ( -5-cloro-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)nicotinohidrazida La 5-cloronicotinohidrazida (30 mg, 0.175 mmoles) y la 1-(5- cloro-2-hidroxifenil)etanona (29.8 mg, 0.175 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (20 mg). 1H RMN (400 MHz, acetona-efe): d 9.06 (s, 1H), 8.77 (s, 1 H), 8.37 (s, 1H), 7.62 (d, 1 H, J = 2.8 Hz), 7.31 (dd, 1H, J = 2.0 y 8.4 Hz), 6.95 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 2.58 (s, 3H). ESI-MS: 324.0 [M+H]+. 29. Preparación de la (B-A/'-(1-(5-cloro-2-hidrox¡fen¡l)propiliden)-3-fmorfolinosulfonil)benzohidrazida La 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (40 mg, 0.140 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)propan-1-ona (25.9 mg, 0.140 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (20 mg). 1H RMN (400 MHz, acetona-efe): d 8.26 (m, 2H), 8.00 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.84 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.64 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.33 (m, 1 H), 6.98 (d, 1 H, J = 9.2 Hz), 3.69 (m, 4H), 3.10 (c, 2H, J = 7.6 Hz), 2.99 (m, 4H), 1.26 (t, 3H, J = 7.6 Hz). ESI-MS: 452.1 [M+Hf. 30. Preparación de la (B-3-(morfolinosulfonil)-N'-(1-(Diridin-3-il)etiliden)benzohidrazida La 3-(Morfolinosulfonil)benzohidrazida (40 mg, 0.140 mmoles) y la 1-(piridin-3-il)etanona (16.98 mg, 0.140 mmoles), se disolvieron en metanol (4 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (15 mg). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.53 (s amplio, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.59 (m, 1 H), 8.39 (m, 1 H), 8.17 (m, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.89 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.67 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.32 (m, 1 H), 3.70 (m, 4H), 3.00 (m, 4H), 2.39 (s, 3H). ESI-MS: 389.0 [M+H]+. 31. Preparación de la 3-morfolinobenzohidrazida Se agregó 3-morfolinobenzoato de metilo (100 mg, 0.452 mmoles) a hidracina (14.48 mg, 0.452 mmoles) en metanol (10 mL), y se sometió a reflujo durante 12 horas a 65°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título como un sólido (52 mg). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): d 9.69 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.27 (m, 2H), 7.07 (m, 1H), 4.45 (s amplio, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.14 (m, 4H). ESI-MS: 222.1 [M+H]+. 32. Preparación de la (B-AH1-(5-cloro-2-hidroxifeninetil¡den)-3-morfolinobenzohidrazida La 1-(5-Cloro-2-hidroxifenil)etanona (40 mg, 0.234 mmoles) y la 3-morfolinobenzohidrazida (51.9 mg, 0.234 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título (60 mg), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): d 7.65 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.42- 7.32 (m, 4H), 7.20 (m, 1 H), 6.94 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 3.77 (m, 4H), 3.19 (m, 4H), 2.48 (s, 3H). ESI-MS: 374.1 [M+H]+. 33. Preparación de la 5-(metilsulfonil)nicotinohidrazida Se agregó 5-(metilsulfonil)nicotinato de metilo (100 mg, 0.465 mmoles) a hidracina (17.87 mg, 0.558 mmoles) en metanol (10 mL), y se sometió a reflujo durante 12 horas a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título (83 mg, 80% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 9.20 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 9.17 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.61 (s, 1 H), 3.11 (s, 3H). ESI-MS: 216.1 [M+H]+. 34 Preparación de la (E)-/V-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etil¡den)- 5-(metilsulfonil)nicotinohidrazida La 1-(5-cloro-2-h¡droxifenil)etanona (50 mg, 0.293 mmoles) y la 5-(metilsulfonil)nicotinohidrazida (63.1 mg, 0.293 mmoles), se disolvieron en metanol (4 mL) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título (70 mg, 63.0% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): d 11.86 (s, 1H), 9.37 (s, 1 H), 9.27 (s, 1H), 8.76 (s, 1 H), 7.68 (s, 1H), 7.36 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.97 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.42 (s, 3H), 2.53 (s, 3H). ESI-MS: 368.8 [M+H]+. 35. Preparación de la 3-(metilsulfonil)benzohidrazida Se agregó 3-(metilsulfonil)benzoato de metilo (100 mg, 0.467 mmoles) a hidracina (22.44 mg, 0.700 mmoles) en metanol (10 mL), y se sometió a reflujo durante 12 horas a 70°C. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título (80 mg, 80% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 8.28 (s, 1H), 8.07 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 8.01 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.62 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 3.04 (s, 3H). ESI-MS: 215.1 [M+H]+. 36. Preparación de la (a-/v 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(metilsulfonil)benzohidrazida La 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (55 mg, 0.322 mmoles) y la 3-(metilsulfonil)benzohidrazida (69.1 mg, 0.322 mmoles), se disolvieron en metanol (5 ml_) en la presencia de ácido acético como un catalizador, y la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 20°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Tras la terminación de la reacción y después de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título (75 mg, 63.4% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 8.49 (s, 1 H), 8.26 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 8.18 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.80 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.60 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.27 (m, 1H), 6.93 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.19 (s, 3H), 2.49 (s, 3H). ESI-MS: 367.8 [M+H]+. 37. Preparación del ácido 3-((4-metilpiperidin-1-¡OsulfoniQbenzoico Se agregó 4-metilpiperidina (180 mg, 1.813 mmoles) al ácido 3-(clorosulfonil)benzoico (200 mg, 0.906 mmoles) en la presencia de carbonato de potasio (251 mg, 1.813 mmoles) en THF (Volumen: 5 mi) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el compuesto del título como un sólido. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz): d 8.32 (m, 1H), 8.27 (m, 1H), 7.96 (m, 1 H), 7.72 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 3.72 (m, 2H), 2.27 (m, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.29 (m, 1H), 1.21 (m, 2H), 0.88 (d, 3H, J = 6.4 Hz). ESI-MS: 284.1 [M+H . 38. Preparación del 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzoato de metilo El ácido 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzoico (120 mg, 0.424 mmoles) se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (2.74 mg, 0.021 mmoles) en metanol a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzoato de metilo (100 mg, 0.319 mmoles, 75% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.39 (m, 1 H), 8.25 (m, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.62 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 3.95 (s, 3H), 3.77 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 1.67 (m, 2H), 1.29 (m, 3H), 0.90 (d, 3H, J = 4.8 Hz). ESI-MS: 298.1 [M+H]+. 39. Preparación de la 2-(morfolinosulfonil)benzohidrazida Se agregó hidracina (22.46 mg, 0.701 mmoles)al 2-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo (100 mg, 0.350 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 12 horas a 70°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el compuesto del título, la 2-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (40 mg, 0.129 mmoles, 36.8% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 7.86 (m, 1 H), 7.66-7.56 (m, 2H), 7.52 (dd, 1 H, J = 1.2 y 7.6 Hz), 7.40 (m, 1 H), 4.09 (m, 2H), 3.70 (m, 4H), 3.15 (m, 4H). ESI-MS: 286.1 [M+H]+. 40. Preparación de |a 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzohidrazida Se agregó 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzoato de metilo (100 mg, 0.336 mmoles) a hidracina (21.55 mg, 0.673 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna para proporcionar la 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzohidrazida (70 mg, 0.217 mmoles, 64.4% de rendimiento). 1H RMN (CD30D, 400 MHz): d 8.16 (m, 1 H), 8.05 (m, 1H), 7.91 (m, 1H), 7.70 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 3.74 (m, 2H), 2.28 (m, 2H), 1.69 (m, 2H), 1.32-1.16 (m, 3H), 0.90 (d, 3H, J = 6.0 Hz). ESI-MS: 298.1 [M+H]+. 41. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-((4-metilpiper¡din-1-il)sulfonil)benzohidrazida La 3-((4-metilpiperidin-1-il)sulfonil)benzohidrazida (70 mg, 0.235 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (40.2 mg, 0.235 mmoles), se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-((4-metilpiperidin-1 -il)sulfonil)benzohidrazida (15 mg, 0.032 mmoles, 13.60% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.11 (m, 2H), 7.81 (m, 1H), 7.59 (m, 1 H), 7.39 (m, 1H), 7.19 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 3.69 (m, 2H), 2.41 (m, 2H), 2.24 (m, 2H), 1.63 (m, 2H), 1.24 (m, 4H), 0.87 (d, 3H, J = 4.4 Hz). Masa [M+H]+: 450.2. 42. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-fluorofenil)etilidenV 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1-(5-cloro-2-fluorofenil)etanona (20 mg, 0.116 mmoles) y la 3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (33.1 mg, 0.116 mmoles), se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-fluorofenil)etiliden)-3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (10 mg, 0.022 mmoles, 19.22% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 Hz): d 8.26 (m, 1H), 8.09 (m, 1H), 7.80 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.58 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.37 (m, 1H), 7.21 (m, 1 H), 6.95 (m, 1 H), 3.61 (m, 4H), 2.90 (m, 4H), 2.29 (s, 3H). Masa [M+H]+: 440.1. 43. Preparación del 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzoato de metilo El ácido 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzoico (200 mg, 0.783 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (5.06 mg, 0.039 mmoles) en metanol a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzoato de metilo (150 mg, 0.535 mmoles, 68.3% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.47 (m, 1 H), 8.25 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 8.02 (dt, 1 H, J = 1.2 y 8.0 Hz), 7.63 (t, 1 H, J = 7.6 Hz), 3.96 (s, 3H), 3.27 (m, 4H), 1.77 (m, 4H). Masa [M+H]+: 270.1. 44. Preparación del 3-(N-metilsulfamoil)benzoato de metilo El ácido 3-(N-metilsulfamoil)benzoico (200 mg, 0.929 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (6.01 mg, 0.046 mmoles) en metanol a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 3-(N-metilsulfamoil)benzoato de metilo (120 mg, 0.497 mmoles, 53.5% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.51 (m, 1H), 8.25 (m, 1H), 8.06 (dt, 1 H, J = 1.2 y 8.0 Hz), 7.63 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 3.96 (s, 3H), 2.69 (s, 3H). Masa [M+H]+: 230.1. 45. Preparación de la 3-(pirrolidin-1-ilsulfon¡0benzohidrazida Se agregó 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzoato de metilo (150 mg, 0.557 mmoles) a hidracina (35.7 mg, 1.114 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 12 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna para proporcionar la 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida (110 mg, 0.396 mmoles, 71.1% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.18 (m, 1H), 8.03 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.97 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.78 (s amplio, 1H), 7.63 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 4.17 (s amplio, 2H), 3.25 (m, 4H), 1.77 (m, 4H). Masa [M+H]+: 270.1. 46. Preparación de la 3-(hidracincarbonil)-N-metilbencensulfonamida Se agregó hidracina (43.3 mg, 1.352 mmoles) al 3-(N-metilsulfamoil)benzoato de metilo (155 mg, 0.676 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 12 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna para proporcionar la 3-(hidracincarbonil)-N-metilbencensulfonamida (120 mg, 0.502 mmoles, 74.3% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.25 (m, 1 H), 8.01 (m, 2H), 7.64 (m, 2H), 4.63 (m, 1H), 4.17 (m, 2H), 2.69 (d, 3H, J = 5.2 Hz). ESI-MS: 230.0 [M+H]+. 47. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-2-(morfolinosulfoníl)benzohidrazida La 2-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (30 mg, 0.105 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (17.94 mg, 0.105 mmoles) se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-2-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (10 mg, 0.022 mmoles, 21.28% de rendimiento), como un sólido.

H RMN (CD3OD, 400 MHz): d 7.95 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.95-7.70 (m, 2H), 7.66 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.56 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 7.25 (dd, 1H, J = 2.8 y 8.8 Hz), 6.91 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 3.66 (m, 4H), 3.2 (m, 4H), 2.36 (s, 3H). Masa [M+H]+: 438.1. 48. Preparación de la (E)-3-(2-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)hidracincarbonil)-N-metilbencensulfonamida La 3-(hidracincarbon¡l)-N-metilbencensulfonamida (120 mg, 0.523 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifen¡l)etanona (89 mg, 0.523 mmoles), se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con mlcroondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-3-(2-(1-(5-cloro-2-h¡droxifenil)etiliden)hidrac¡ncarbonil)-N-metilbencensulfonamida (75 mg, 0.192 mmoles, 36.8% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.21 (m, 1H), 8.06 (m, 1H), 7.95 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.59 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.39 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.18 (m, 1 H), 6.90 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 2.56 (s, 3H), 2.36 (s, 3H). Masa [M+H]+: 382.1. 49. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)et¡liclen -3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzoh¡draz¡da La 3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida (105 mg, 0.390 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (66.5 mg, 0.390 mmoles), se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(pirrolidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida (70 mg, 0.163 mmoles, 41.7% de rendimiento), como un sólido.

H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.18 (m, 1 H), 8.13 (m, 1H), 7.95 (d 1 H, J = 7.6 Hz), 7.65 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.41 (m, 1 H), 7.21 (m, 1H), 6.93 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.23 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 1.75 (m, 4H). Masa [M+H]+: 422.1. 50. Preparación del 3-(1 ,1-dióx¡dotiomorfolino)benzoato de metilo El ácido 3-(1 ,1-dióxidotiomorfol¡no)benzoico (100 mg, 0.392 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (2.53 mg, 0.020 mmoles) en metanol (5 mL) a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 3-(1 ,1-dióxidotiomorfolino)benzoato de metilo (99 mg, 0.353 mmoles, 90% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 7.58 (m, 2H), 7.36 (t, 1 H, J Hz), 7.09 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.89 (m, 4H), 3.11 (m, 4H). Masa [M+H]+ 270.1. 51. Preparación de la 3-? .1-dióxidotiomorfolino)benzohidrazida Se agregó 3-(1 ,1-dióxidotiomorfolino)benzoato de metilo (95 mg, 0.353 mmoles) a hidracina (22.61 mg, 0.705 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 12 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la 3-(1 , 1-dióxidotiomorfolino)benzohidrazida (32 mg, 0.109 mmoles, 31.0% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 7.34 (m, 1H), 7.29 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 7.18 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 6.70 (dd, 1 H, J = 4.8 y 8.0 Hz), 3.85 (m, 4H), 3.05 (m, 4H). Masa [M+H]+: 270.1. 52. Preparación de la (E)-N 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(1 , 1 -dióxidotiomorfolino)benzohidrazida La 3-(1 ,1-dióxidotiomorfolino)benzohidrazida (30 mg, 0.111 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (19.00 mg, 0.111 mmoles), se disolvieron en metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el compuesto del título, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(1 , 1 -dióxidotiomorfolino)benzohidrazida (15 mg, 0.035 mmoles, 31.3% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 7.65 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 7.47 (m, 1 H), 7.41 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.36-7.27 (m, 3H), 6.94 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 3.87 (m, 4H), 3.17 (m, 4H), 2.48 (s, 3H). Masa [M+H]+: 422.2. 53. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-nitrofenil)etiliden)-3- (morfolinosulfonil)benzohidrazida La 1-(5-cloro-2-nitrofenil)etanona (30 mg, 0.150 mmoles) y la 3- (morfolinosulfonil)benzohidrazida (42.9 mg, 0.150 mmoles), se disolvieron en Metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el producto, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-nitrofenil)etiliden)-3- (morfolinosulfonil)benzohidrazida (15 mg, 0.030 mmoles, 20.09% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.20 (m, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.88 (m, 1 H), 7.66 (m, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.39 (m, 1 H), 3.69 (m, 4H), 2.99 (m, 4H), 2.29 (s, 3H). Masa [M+H]+: 468.0. 54. Preparación del 3-sulfamoilbenzoato de metilo El ácido 3-sulfamoilbenzoico (150 mg, 0.746 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (4.82 mg, 0.037 mmoles) en metanol (5 ml_) a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 3-sulfamoilbenzoato de metilo ( 15 mg, 0.524 mmoles, 70.2% de rendimiento), como un sólido.

H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.53 (m, 1H), 8.18 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 8.08 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.57 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 3.92 (s, 3H). Masa [M+H]+: 216.0. 55. Preparación del 4-(morfolinosulfoninbenzoato metilo El ácido 4-(morfolinosulfonil)benzoico (150 mg, 0.553 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (3.57 mg, 0.028 mmoles) en metanol a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea, proporcionando el 4-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo (135 mg, 0.464 mmoles, 84% de rendimiento). 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.21 (m, 2H), 7.82 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.4 (m, 4H), 3.02 (m, 4H). Masa [M+H]+: 286.0. 56. Preparación de la 3-(hidrac¡ncarbonil)bencensulfonamida Se agregó 3-sulfamoilbenzoato de metilo (110 mg, 0.511 mmoles) a hidracina (32.8 mg, 1.022 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea (metanol/DCM al 5%), para proporcionar la 3-(hidracincarbonil)bencensulfonamida (57 mg, 0.260 mmoles, 50.8% de rendimiento), como un sólido blanco. 1H RMN (CD30D, 400 MHz): d 8.32 (m, 1 H), 8.04 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.97 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.63 (t, 1 H, J = 8.0 Hz). Masa [M+H]+: 216.0. 57. Preparación de la 4-(morfolinosulfonil)benzohidrazida Se agregó 4-(morfolinosulfonil)benzoato de metilo (135 mg, 0.473 mmoles) a hidracina (30.3 mg, 0.946 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea (metanol/DCM al 3%), para proporcionar la 4-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (102 mg, 0.350 mmoles, 74.0% de rendimiento), como un sólido blanco. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 7.94 (m, 2H), 7.79 (m, 2H), 3.72 (m, 4H), 2.99 (m, 4H). Masa [M+H]+: 286.0. 58. Preparación de \a (E)-3-(2-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etil¡den)hidracincarbonil)bencensulfonamida La 3-(hidracincarbonil)bencensulfonamida (50 mg, 0.232 mmoles) y la 1 -(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (39.6 mg, 0.232 mmoles), se disolvieron en metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el producto, la (E)-3-(2-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)hidracincarbonil)bencensulfonamida (36 mg, 0.094 mmoles, 40.4% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 8.34 (s, 1 H), 8.15 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 8.02 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.73 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.64 (m, 1 H), 7.51 (s amplio, 2H), 7.32 (dd, 1 H, J = 2.4 y 8.4 Hz), 6.92 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 2.49 (s, 3H). Masa [M+H]+: 368.0. 59. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifeninetiliclen)-4-(morfolinosulfonil)benzohidrazida La 4-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (100 mg, 0.350 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (59.8 mg, 0.350 mmoles), se disolvieron en metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el producto, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-4-(morfolinosulfonil)benzohidrazida (80 mg, 0.177 mmoles, 50.6% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 8.16 (m, 2H), 7.89 (m, 2H), 7.67 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.35 (dd, 1H, J = 2.4 y 8.8 Hz), 6.95 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 3.64 (m, 4H), 2.92 (m, 4H), 2.49 (s, 3H). Masa [M+H]+: 438.0. 60. Preparación del ácido 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzoico Se agregó ácido 3-(clorosulfonil)benzoico (200 mg, 0.906 mmoles) a 1-metilpiperacina (100 mg, 0.997 mmoles), en la presencia de carbonato de potasio (251 mg, 1.813 mmoles) en THF (Volumen: 5 mi) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a temperatura ambiente. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (CH3OH/CH2CI2 al 3%), proporcionando el producto, el ácido 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzoico (100 mg, 0.320 mmoles, 35.3% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 7.77 (m, 2H), 7.63-7.55 (m, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.46 (m 4H), 2.31 (s, 3H). Masa [M+H]+: 285.1. 61. Preparación del 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzoato de metilo El ácido 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzoico (250 mg, 0.879 mmoles), se sometió a reflujo en la presencia de ácido sulfúrico concentrado (5.68 mg, 0.044 mmoles) en metanol a 70°C durante la noche. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío, y el material crudo se utilizó para la reacción adicional sin purificación. 62. Preparación de la 3-((4-metilpiperacin-1 - ¡OsulfoniQbenzohidrazida Se agregó 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzoato de metilo (200 mg, 0.670 mmoles) a hidracina (43.0 mg, 1.341 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea (metanol/DCM al 3%), para proporcionar la 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzohidrazida (125 mg, 0.406 mmoles, 60.6% de rendimiento), como un sólido blanco. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 10.08 (s, 1H), 8.12 (m, 2H), 7.84 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.72 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 4.57 (m, 1 H), 2.88 (m, 4H), 2.32 (m, 4H), 2.10 (s, 3H). Masa [M+H]+: 298.9. 63. Preparación de la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)- 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzohidrazida La 3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzohidrazida (85 mg, 0.285 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (48.6 mg, 0.285 mmoles), se disolvieron en metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el producto, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-((4-metilpiperacin-1-il)sulfonil)benzohidrazida (70 mg, 0.152 mmoles, 53.4% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CD30D, 400 MHz): d 8.29 (s, 1H), 8.21 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.99 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.78 (t, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.59 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.27 (dd, 1 H, J = 2.4 y 9.2 Hz), 6.92 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 3.09 (m, 4H), 2.54 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.28 (s, 3H). Masa [M+H]+: 450.9. 64. Preparación de la 3-(piperidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida Se agregó 3-(piperidin-1-ilsulfonil)benzoato de metilo (150 mg, 0.529 mmoles) a hidracina (50.9 mg, 1.588 mmoles) en metanol, y se sometió a reflujo durante 8 horas a 65°C. Después de enfriamiento, la reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, el solvente se eliminó mediante vacío y a continuación el compuesto se purificó mediante cromatografía instantánea (metanol/DCM al 3%), para proporcionar la 3-(piperidin-l-ilsulfonil)benzohidrazida (70 mg, 0.245 mmoles, 46.2% de rendimiento), como un sólido blanco. 1H RMN (CD30D, 400 MHz): d 8.17 (t, 1H, J = 1.2 Hz), 8.05 (dt, 1H, J = 1.2 y 8.0 Hz), 7.90 (dt, 1H, J = 1.2 y 8.0 Hz), 7.69 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 2.99 (m, 4H), 1.62 (m, 4H), 1.43 (m, 2H). Masa [M+H]+: 284.1. 65. Preparación de la (E)-N 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(piperidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida La 3-(piperidin-1-ilsulfonil)benzohidrazida (65 mg, 0.229 mmoles) y la 1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etanona (39.1 mg, 0.229 mmoles), se disolvieron en metanol (Volumen: 4 mi) en la presencia de ácido acético como un catalizador y a continuación, la mezcla de reacción se calentó vía irradiación con microondas a 120°C durante 30 minutos. La reacción se verificó mediante TLC. Después de la terminación de la reacción, seguido de enfriamiento, el solvente se eliminó mediante vacío y el material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (CH3OH/CH2CI2 al 2%), proporcionando el producto, la (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(piperidin-l-ilsulfonil)benzohidrazida (55 mg, 0.124 mmoles, 53.9% de rendimiento), como un sólido. 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d 8.09 (m, 2H), 7.85 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.62 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.41 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 7.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.93 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 2.97 (m, 4H), 2.41 (s, 3H), 1.61 (m, 4H), 1.40 (m, 2H). Masa [M+H]+: 436.9. 66. Materiales y métodos bioquímicos y celulares generales La actividad de la LSD1 se determinó utilizando un Kit de Ensayo de Selección del Inhibidor de la LSD1 (Cayman Chemical Número de Artículo 700120) comprado de Cayman Chemical Company (Ann Arbor, Michigan). La monoamina oxidasa A y la monoamina oxidasa B recombinantes (expresadas en células de insecto BTI infectadas con baculovirus) (No. de Catálogo M7316 y M7441, respectivamente) se compraron de Sigma-Aldrich Co. LLC. (St. Louis, Missouri). El Kit de Ensayo MAO-Glo™ se compró de Promega Corporation (Madison, Wisconsin). El Sistema de Ensayo Luminiscence ATPIite™ (por ejemplo, No. de Catálogo V1401) se compró de PerkinElmer Inc. (Waltham, Massachusetts). 67. Cultivo celular Las líneas celulares del cáncer se obtuvieron de la ATCC. Las células se cultivaron de acuerdo con los procedimientos proporcionados. Las líneas celulares utilizadas incluyeron aquéllas mostradas en el Cuadro 4 siguiente. Además de los suplementos indicados en el Cuadro 4, los medios también se suplementaron con penicilina/estreptomicina al 1% (100 lU/mL de penicilina y 100 g/mL de estreptomicina). Las células se cultivaron a 37°C y 5% de C02. La ATCC es la Colección Americana de Cultivos Tipo (Manassas, Virginia).

CUADRO 4 Línea Número Organo / tejido / Medio de Cultivo celular ATCC® patología* AN3 CA HTB-111™ Adenocarcinoma Uteri Medio Esencial Mínimo de Eagle no/ endometrio suplementado con FCS al 10%** BT-20 HTB-19™ Carcinoma/Mama Medio Esencial Mínimo de Eagle suplementado con FCS al 10% BT-549 HTB-122™ Carcinoma ductal/ Medio RPMI-1640 suplementado Mama con 0.023 lU/ml de insulina y FCS al 10% HCT 116 CCL-247™ Carcinoma/Colon/ Medio de McCoy 5a Modificado Colorrectal suplementado con FCS al 10% HER218*" No se aplica Adenocarcinoma/Mam Medio RPMI-1640 suplementado a y FCS al 10% MCF7 HTB-22™ Adenocarcinoma/Mam Medio Esencia! Mínimo de Eagle a suplementado con 0.01 mg/ml de insulina bovina y FCS al 10%.

MDA-MB- HTB-26™ Adenocarcinoma/Mam Medio L-15 de Leibovitz 231 a suplementado con FCS al 10% Línea Número Organo / tejido / Medio de Cultivo celular ATCC® patología* MDA-MB- HTB-129™ Efusión pleural; Medio L-15 de Leibovitz 435S probablemente suplementado con 0.01 mg/ml de melanoma insulina bovina, «0.01 mg/ml de glutationa y FCS al 10% MDA-MB- HTB-132™ Adenocarcinoma/Mam Medio L-15 de Leibovitz 468 a suplementado con FCS al 10% PANC-1 CRL-1469™ Carcinoma/ Medio de Eagle Modificado por páncreas/conducto/ Dulbecco suplementado con FCS epitelioide al 10% PC-3 CRL-1435™ Adenocarcinoma de Medio F-12K suplementado con próstata FCS al 10% SK-N-MC HTB-10™ Neuroepitelioma/Cereb Medio Esencial Mínimo de Eagle ro suplementado con FCS al 10% T-47D HTB-133™ Carcinoma/Mama/Con Medio RPMI-1640 suplementado ducto con 0.2 unidades/ml de insulina bovina y FCS al 10% U-87 MG HTB-14™ Astrocitoma, Medio Esencial Mínimo de Eagle astrocitoma/Cerebro suplementado con FCS al 10% * Todas las fuentes de los órganos/tejidos fueron de origen humano.

** FCS es Suero de Becerro Fetal *** Derivado de la línea celular MCF7 caracterizada por un receptor de estrógeno no y altos niveles de HER2 (Massarweh S, et al. (2008) Cáncer Research 68: 826-33). 68. Ensayo con la Historia Desmetilasa de LSD1 El ensayo primario para la actividad inhibidora del compuesto fue el Kit del Ensayo de Selección del Inhibidor de la LSD1 (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, Michigan; Cayman Chemical Número de Artículo 700120). Brevemente, los compuestos de prueba se diluyeron a 20X la concentración de prueba deseada en DMSO al 100% y 2.5 µ?_ de la muestra del fármaco diluida se agregaron a una placa negra de 384 pozos. La solución madre de la enzima LSD1 se diluyó 17 veces con amortiguador de ensayo y se agregaron 40 µ? de la enzima LSD1 diluida a los pozos apropiados. La mezcla de reacción comprendió peroxidasa de rábano picante, péptido K4 de dimetilo (que corresponde a los primeros 21 aminoácidos de la cola N terminal de la histona H3) y a continuación, se agregó la 10-acetil-3,7-dihidroxifenoxacina a los pozos. La generación de resorufina (generada por la reacción con el H2O2 producido en la reacción) se analizó en un lector de microplacas Envision con una longitud de onda de excitación de 530 nm y una longitud de onda de emisión de 595 nm. 69. Ensayo con la monoamina oxidasa ("MAO") La inhibición de la actividad de la monoamina oxidasa se llevó a cabo utilizando el Kit de Ensayo MAO-Glo™ de acuerdo con el protocolo sugerido por el fabricante. Brevemente, 6.25 pL del compuesto de prueba se agregaron a cada pozo de una placa de 384 pozos. Se agregó la enzima (ya sea MAO A o B) (12.5 pL en 2x de amortiguador que contiene 1 pg de proteína) y se dejó incubar durante 5 minutos. Finalmente, se agregaron 6.25 µ?_ de 4x del sustrato de MAO a cada pozo. Después de una hora de incubación, se agregaron 25 µ?_ del reactivo de detección de Luciferina a cada pozo, y se incubó durante 20 minutos. La luminiscencia se midió a continuación en un lector de microplacas Envision. Los datos representativos utilizados para determinar la IC50 para la inhibición de cada isoformo de la MAO y los datos representativos para varios compuestos se resumen en el Cuadro 8 siguiente. 70. Ensayo de viabilidad celular La viabilidad celular se determinó utilizando el Sistema de Ensayo Luminescence ATPIite™ (PerkinElmer Inc., Waltham, Massachusetts) utilizando las varias líneas celulares descritas anteriormente y en el Cuadro 4. Brevemente, las células se sembraron en placas de 96 pozos y a continuación se trataron con diferentes concentraciones del inhibidor (concentración final de DIVISO del 0.1%). Después de 96 horas de incubación, se agregó directamente el reactivo de detección ATPIite al medio de cultivo. La luminiscencia se leyó 5 minutos más tarde en un lector de microplacas Envision. Los datos de la IC5o representativa para la inhibición del crecimiento celular con varias líneas celulares se proporcionan en los Cuadros 6, 7 y 9. 71. PCR en tiempo real Brevemente, las células T-47D se sembraron en placas de 96 pozos y se trataron con concentraciones de los inhibidores como se indicó. La PCR en tiempo real de los lisados celulares, la Transcripción inversa y syber green de un solo color se realizó utilizando el kit Cells-to-Ct (Life Technologies). Los niveles del transcripto de la hemo oxigenasa (HMOX) se normalizaron a la hipoxantina fosforribosiltransferasa (HPRT) y ß-actina. Los cebadores utilizados en la PCR en tiempo real se muestran a continuación en el Cuadro 5, y los datos representativos del efecto de los compuestos descritos en la expresión de la HMOX se proporcionan en los Cuadros 6 y 7.

CUADRO 5 Designación Objetivo de la Amplificación Secuencia del cebador HMOX_F Hemo oxigenasa AACTTTCAGAAGGGCCAGGT HMOX_R Hemo oxigenasa GTAGACAGGGGCGAAGACTG HPRT_F Hipoxantina fosforribosiltransferasa TGCTGAGGATTTGGAAAGGGTG HPRT_R Hipoxantina fosforribosiltransferasa CCTTGAGCACACAGAGGGCTAC B-Actin_F ß-actina CTGGAACGGTGAAGGTGACA B-Actin_R ß-actina AAGGGACTTCCTGTAACAACGCA 72. Cálculo de la ICsn Los valores de la IC50 se determinaron utilizando el programa GraphPad Prism 5. Los datos se introdujeron como una gráfica X-Y en el programa, como el por ciento de inhibición para cada concentración del fármaco. Los valores de la concentración del fármaco se transformaron con logaritmo y se llevó a cabo la regresión no lineal utilizando la opción de "dosis- respuesta sigmoidal (pendiente variable)" dentro del programa GraphPad para modelar los datos y calcular los valores de la IC50. Los valores de la IC50 reportados son la concentración del fármaco a la cual se alcanzó el 50% de inhibición. 73. Actividad del compuesto La capacidad de los compuestos representativos descritos para modular varias actividades bioquímicas y celulares se determinó utilizando los ensayos descritos anteriormente. Los resultados se muestran en los Cuadros siguientes. La IC50 (µ?) para la inhibición de la actividad de la LSD1 o el crecimiento celular utilizando células T-47D se muestra en los Cuadros 6 y 7. Además, el efecto de los compuestos representativos en la expresión de la hemo oxígenasa (HMOX) también se muestra en los Cuadros 6 y 7. La IC50 para la inhibición de las monoaminas oxidasas A ("MAO A") y B ("MAO B") por los compuestos representativos en comparación con un compuesto de control, tranilcipromina, se muestra en el Cuadro 8. El efecto del Compuesto No. 12 (con referencia al número del compuesto utilizado en el Cuadro 7, o (E)-N'-(1-(5-cloro-2-hidroxifenil)etiliden)-3-(morfolinosulfonil)benzohidrazida) en el crecimiento celular de varias líneas celulares se muestra en el Cuadro 9. Si el resultado de una IC50 u otro ensayo se indican como "n.d.", no se determinó en el ensayo indicado.

El compuesto 12 se utilizó para evaluar la sensibilidad en un panel de líneas de células de cáncer (Cuadro 9). La sensibilidad de la línea celular para el compuesto 12 en este ensayo de viabilidad varió por un logaritmo, con valores de IC50 de alrededor de 300 nM a justo por debajo de 3 µ?. Para la comparación entre los compuestos representativos, los valores de IC50 se determinaron en células T-47D (véase los Cuadros 6 y 7). Con pocas excepciones, se observó que las células T-47D eran sensibles a los compuestos de prueba que eran activos en el ensayo bioquímico de la LSD1, y fueron menos sensibles a los compuestos que mostraron menos actividad en el ensayo de la LSD1.

Con el fin de agregar un nivel adicional de análisis de la inhibición de la LSD1 en un cultivo de células por estos compuestos, se realizaron experimentos de arreglo de la expresión para evaluar los cambios transcripcionales inducidos por el compuesto 12 (datos no mostrados). Estos datos indicaron que la hemo oxigenasa 1 (HMOX1) fue uno de los genes sobrerregulados de manera más eficiente a través de múltiples líneas celulares, después del tratamiento con este compuesto. Puesto que se sabe que HMOX1 es regulada por la metilación de H3 en el promotor (Krieg, A. J., et al. Mol Cell Biol 2010, 30 (1), 344-53), se determinó el efecto de los compuestos de prueba en la expresión de HMOX1 en las células T-47D (véase los Cuadros 6 y 7). Los datos muestran que los compuestos representativos que están asociados con la sobrerregulación de la expresión de la H OX1 también están asociados con la actividad inhibidora en el ensayo de la LSD1 , y el ensayo de la viabilidad celular.

La LSD1 tiene una alta homología estructural con la familia de enzimas de la monoamina oxidasa (17.6% para la monoamina oxidasa A y B; MAO A y B, respectivamente; por ejemplo, véase Gooden, D. M., et al. Bioorg Med Chem Lett 2008, 18 (10), 3047-51). La actividad selectiva de los compuestos representativos para la LSD1 , en comparación con la MAO A o MAO B, es una propiedad deseable para los compuestos terapéuticos que seleccionan la LSD1. La especificidad del compuesto 1 y el compuesto 12 se probó en ensayos bioquímicos de la MAO, descritos en la presente (los resultados representativos se resumen en el Cuadro 8). En este ensayo, el inhibidor conocido de la MAO, tranilcipromina exhibió actividad contra ambas de la MAO A y B. En contraste, el compuesto 1 exhibió una actividad comparable a la tranilcipromina contra la MAO B, pero no mostró actividad contra la MAO A. Sin embargo, el compuesto 12 no exhibe actividad contra alguna enzima MAO (>300µ?). Los compuestos 18 y 24 también se probaron, y no exhibieron actividad contra la MAO A o B, y los resultados se proporcionan en el Cuadro 8. Estos resultados demuestran que los compuestos representativos tiene especificidad por la LSD1 , con un efecto reducido de manera significativa en las enzimas MAO. Deberá notarse que tanto la MAO A como B difieren de la LSD1 en que el FAD está unido de manera covalente a la enzima a través de un enlace tioéter con Cys406 y Cys397, respectivamente (Kearney, E. B., et al. European Journal of Biochemistry 1971 , (24), 321-327; y Bach, A. W., et al. Proc Nati Acad Sci USA 1988, (85), 4934-4938).

CUADRO 6 Estructura Actividad Crecimient Expresión de la de la o Celular, HMOX (veces LSD1, ICS0 ICS0 (µ?) que aumenta la (uM) inducción) No. Estructura Actividad Crecimient Expresión de la de la o Celular, HMOX (veces LSD1, ICM IC50 (µ?) que aumenta la CUADRO 7 10 No. Estructura Actividad Crecimient Expresión de la o Celular, de la HMOX LSD1, ICM ICso (pM) (veces que (µ?) aumenta la inducción) 11 0.128 0.352 31.3 i92 Estructura Actividad Crecimient Expresión de la o Celular, de la HMOX LSD1, ICS0 ICSO(MM) (veces que (µ?) aumenta la CUADRO 8 Estructura MAO A, IC50 MAO B, IC50 (µ?) (µ?) >300 > 300 Cl X^ Línea celular Crecimiento celular, IC50 (µ?) AN3 Ca 0.356 BT-20 0.489 BT-549 1.010 HCT 116 0.614 HER218 0.612 Hs-578-? 1.700 HT29 0.429 MCF-7 0.637 MDA-MB-231 1.040 MDA-MB-235 0.728 MDA-MB-435 1.440 MDA-MB-468 2.730 MIA PaCa-2 0.468 PANC-1 1.104 PC-3 2.160 SK-N-MC 0.329 T-47D 0.649 U87 1.160 74. Efectos antitumorales proféticos in vivo: Modelo del xenoinierto de la línea celular El siguiente ejemplo del efecto in vivo de los compuestos descritos es profético. Generalmente, los agentes que modulan la regulación de la cromatina, incluyendo los inhibidores de la histona desmetilasa, muestran eficacia en los modelos preclínicos del cáncer. Se espera que los efectos in vivo de los compuestos descritos en los ejemplos anteriores se muestren en varios modelos animales de cáncer, conocidos por la persona con experiencia, tales como los modelos de xenoinjerto del tumor. Estos modelos son realizados típicamente en roedores, con más frecuencia en el ratón, pero pueden realizarse en otras especies de animales como sea conveniente para los objetivos del estudio. Se espera que los compuestos, productos y composiciones descritos en la presente muestren efectos in vivo en varios modelos animales de cáncer, conocidos por las personas con experiencia en la técnica, tales como modelos de xenoinjerto del tumor.

Los efectos in vivo de los compuestos pueden valorarse con un estudio de xenoinjerto del tumor en el ratón, un posible protocolo del estudio se describe en la presente. Brevemente, las células (2 a 5 x 106 en 100 mL de medio de cultivo) se implantaron de manera subcutánea, por ejemplo, mediante inyección subcutánea, en el flanco de las patas traseras derechas de ratones desnudos atímicos nu/nu (5 a 6 semanas, 18-22 g). Para los compuestos de prueba de la presente invención, una línea celular típica utilizada para el estudio de xenoinjerto del tumor sería AN3 CA o BT-20.

Otras líneas celulares adecuadas para estos estudios son células BT-549, HCT 116, HER218, MCF7, MDA-MB-231 , MDA-MB-235, MDA-MB-435S, MDA-MB-468, PANC-1, PC-3, SK-N-MC, T-47D y U-87 MG. Las células son cultivadas antes de recolectar para este protocolo, como se describe en la presente.

Después del implante, los tumores se dejaron crecer a aproximadamente 100 mm3, típicamente aproximadamente 6-18 días postimplante, antes de que los animales se aleatorizaran en los grupos de tratamiento (por ejemplo, vehículo, control positivo y varios niveles de dosis del compuesto de prueba); el número de animales por grupo es típicamente 8-12. El día 1 del estudio corresponde al día en que los animales reciben su primera dosis. La eficacia de un compuesto de prueba puede determinarse en los estudios de varias duraciones, dependiendo de los objetivos del estudio. Los periodos típicos del estudio son por 14, 21 y 28 días. La frecuencia de la dosificación (por ejemplo, si los animales son dosificados con el compuesto de prueba diario, cada dos días, cada tercer día u otras frecuencias) se determinó para cada estudio, dependiendo de la toxicidad y la potencia del compuesto de prueba. Un diseño típico del estudio involucraría la dosificación diaria (L-V) con el compuesto de prueba, con una recuperación en el fin de semana. Durante el estudio, los volúmenes del tumor y los pesos corporales se midieron dos veces a la semana. Al final del estudio, los animales se sometieron a eutanasia y los tumores se recolectaron y congelaron para los análisis adicionales. De manera alterna, los tumores pueden procesarse inmediatamente para el análisis, por ejemplo, fijarse en formalina amortiguada, incluirse en parafina y seccionarse para la tinción con hematoxilina/eosina, y el análisis inmunohistoquímico adicional para los marcadores deseados para oncología.

Por ejemplo, se espera que los compuestos de la invención, o una sal, solvato, polimorfo, hidrato y la forma estereoquímica isomérica farmacéuticamente aceptables del mismo, muestran tales efectos in vivo. 75. Efectos antitumorales proféticos in vivo: Modelo del injerto del tumor De manera alterna, puede ser deseable valorar la eficacia in vivo de los compuestos descritos en modelos animales de explante del tumor o injerto del tumor (por ejemplo, véase Rubio-Viqueira B., et al. Clin Cáncer Res. (2006) 12:4652-4661 ; Fiebig, H.H., Maier, A. y Burger, A.M. Eur. J. Canc. (2004) 40:802-820; y DeRose, Y.S., et al. "Patient-derived tumor grafts authentically reflect tumor pathology, growth, metástasis and disease outcomes". (2011) Nat. Med., en prensa). Estos modelos pueden proporcionar información de calidad más alta sobre los efectos in vivo de los compuestos terapéuticos. Se cree que los modelos de injerto del tumor son modelos in vivo más auténticos de muchos tipos de cáncer, por ejemplo, cáncer de mama humano, con los cuales examinar la biología de los tumores y cómo se metastatizan. El injerto de los tejidos del tumo del paciente real en ratones inmunodeficientes (denominados "injertos de tumor") proporciona una mejora con respecto al implante de las líneas celulares, en términos de fenocopiar los tumores humanos y predecir las respuestas al fármaco en los pacientes (Clarke, R. Breast Cáncer Res (2009) 11 SupI 3, S22; Press, J.Z., et al. Gynecol Oncol (2008) 110:56-264; Kim, M.P., ef al. Nat Protoc (2009) 4:670-1680; Daniel, V.C., et al. Cáncer Res (2009) 69:3364-3373 y Ding, L, et al. Nature (2010) 464:999-1005).

Brevemente, las muestras de tejido se recolectarán de los pacientes con consentimiento informado en el Hospital para el Cáncer Huntsman/Universidad de Utah, bajo un protocolo IRB aprobado. Las muestras se recolectarán y se volverán anónimas por la instalación del Centro de Recursos y Aplicación de Tejidos del Instituto para el Cáncer Huntsman, antes de obtenerse para el implante. Se anticipó que todos los tumores primarios serán de individuos que no habían recibido quimioterapia antes de la recolección del tejido, y todas las efusiones metastáticas serán de individuos que se habían tratado con quimioterapia, terapia con hormonas y/o terapia con radiación. El Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucionales de la Universidad de Utah revisará y aprobará todos los experimentos con ratones, se anticipa que se utilizará un mínimo de tres ratones por grupo experimental, y sólo se utilizarán ratones hembra para los estudios que involucran tumores de cáncer de mama. Un solo fragmento de tumor fresco o congelado (~8 mm3), o aproximadamente 106 células en matrigel, se implantaron en las almohadillas de grasa inguinal mamaria limpias de ratones NOD/SCID hembra de 3-4 semanas de edad. Al mismo tiempo, se implantaron de manera subcutánea gránulos de estrógeno interescapulares en ratones con tumores ER+. El crecimiento del tumor se midió semanalmente utilizando calibradores. Cuando los ratones alcanzaron aproximadamente 150-2,000 mm3, los ratones se sometieron a eutanasia, y los fragmentos de tejido se retransplantaron en otra cohorte de ratones, se congelaron para el uso posterior y/o se analizaron para la histología, expresión del gen y número de copias de ADN. Los volúmenes del tumor se calcularon utilizando la fórmula 0.5 * longitud ? (ancho)2. para los experimentos para determinar la dependencia del estrógeno, los tumores ER+ se implantaron en ratones como se describió anteriormente, en la presencia o ausencia de gránulos de estrógeno intraescapulares y con o sin un procedimiento quirúrgico concurrente para retirar los ovarios, que se realizó de acuerdo con métodos estándar.

Los tejidos de tumor recolectados recientemente, de pacientes o de los ratones, se cortaron en piezas de ~8 mm3 y se almacenaron en nitrógeno líquido, en una solución de FBS al 95% y DMSO al 5%, para el implante posterior. De manera alterna, el tejido se digirió con solución de colagenasa (1 mg/ml de colagenasa [Tipo IV, Sigma] en RP I 1640 suplementado con PBS al 2.5%, HEPES 10 m , 10 pg/mL de penicilina-estreptomicina) a 37°C durante 40-60 minutos, mientras se agita a 250 rpm. El tejido digerido se filtrado para eliminar los desechos y se lavó en medio de células epiteliales de mama humana (HBEC) (DMEM F/12 suplementado con HEPES 10 mM, FBS al 5%, 1 mg/mL de BSA, 0.5 pg/mL de hidrocortisona, 50 pg/mL de Gentamicina, 1 pg/mL de ITS-X100) tres veces. La pelotilla se resuspendió en medio de congelación (FBS al 5% y DMSO al 10% en medio HBEC) y se almacenaron en nitrógeno líquido.

Para valorar el efecto de un compuesto descrito, los tumores en los ratones se dejaron crecer a aproximadamente 100 mm3, típicamente, aproximadamente 6-18 días postinmplante, antes de que los animales se aleatorizaran en los grupos de tratamiento (por ejemplo, vehículo, control positivo y varios niveles de dosis del compuesto de prueba); el número de animales por grupo es típicamente de 8-12. El día 1 del estudio corresponde con el día en que los animales reciben su primera dosis. La eficacia de un compuesto de prueba puede determinarse en los estudios de varias duraciones, dependiendo de los objetivos del estudio. Los periodos típicos del estudio son por 14, 21 y 28 días. La frecuencia de la dosificación (por ejemplo, si los animales son dosificados con el compuesto de prueba diario, cada dos días, cada tercer día u otras frecuencias) se determinó para cada estudio, dependiendo de la toxicidad y potencia del compuesto de prueba. Un diseño típico del estudio involucraría la dosificación diaria (L-V) con el compuesto de prueba, con una recuperación en el fin de semana. Durante el estudio, los volúmenes del tumor y los pesos corporales se midieron dos veces a la semana. Al final del estudio, los animales se sometieron a eutanasia y los tumores se recolectaron y congelaron para los análisis adicionales. De manera alterna, los tumores pueden procesarse inmediatamente para el análisis, por ejemplo, fijarse en formalina amortiguada, incluirse en parafina y seccionarse para la tinción con hematoxilina/eosina, y el análisis inmunohistoquímico adicional para los marcadores deseados para oncología.

Por ejemplo, se espera que los compuestos de la invención, o una sal, solvato, polimorfo, hidrato y la forma estereoquímica isomérica, farmacéuticamente aceptables del mismo, muestran tales efectos in vivo. 76. Ejemplos proféticos de la composición farmacéutica "Ingrediente activo" como se utiliza a través de estos ejemplos, se relaciona con uno o más de los compuestos de la invención, o una sal, solvato, polimorfo, hidrato y la forma estereoquímicamente isomérica, farmacéuticamente aceptables del mismo. Los siguientes ejemplos de la formulación de los compuestos de la presente invención en tabletas, suspensiones, inyectables y ungüentos son proféticos.

Los ejemplos típicos de las recetas para la formulación de la invención se proporcionan a continuación. Varias otras formas de dosificación pueden aplicarse en la presente, tales como cápsulas de gelatina llenas, emulsión/suspensión líquida, ungüentos, supositorios o forma de tableta masticable, empleando los compuestos descritos en cantidades de dosificación deseadas, de acuerdo con la presente invención. Pueden utilizarse varias técnicas convencionales para preparar las formas de dosificación adecuadas, para preparar las composiciones farmacéuticas proféticas, tales como aquéllas descritas en la presente y en los textos de referencia estándar, por ejemplo, las Farmacopeas Británica y de los Estados Unidos, Ciencias Farmacéuticas de Remington (Mack Publishing Co.) y la Farmacopea Adicional de Martindale (Londres The Pharmaceutical Press).

La descripción de esta referencia se incorpora como referencia en la presente. a. Composición farmacéutica para la administración oral Una tableta puede prepararse como sigue: Componente Cantidad Ingrediente activo 10 a 500 mg Lactosa 100 mg Celulosa cristalina 60 mg Estearato de magnesio 5 Almidón (por ejemplo, almidón de Cantidad necesaria para proporcionar papa) el peso total indicado a continuación Total (por cápsula) 1000 mg De manera alterna, aproximadamente 100 mg de un compuesto descrito, 50 mg de lactosa (monohidrato), 50 mg de almidón de maíz (nativo), 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP 25) (por ejemplo, de BASF, Ludwigshafen, Alemania) y 2 mg de estearato de magnesio se utilizaron por tableta. La mezcla del componente activo, la lactosa y el almidón se granuló con una solución al 5% (m/m) de la PVP en agua. Después de secar, los gránulos se mezclaron con estearato de magnesio durante 5 minutos. Esta mezcla se moldeó utilizando una prensa para tabletas acostumbrada (por ejemplo, formato de la tableta: diámetro 8 mm, radio de curvatura 12 mm). La fuerza de moldeo aplicada es típicamente de 15 kN.

De manera alterna, un compuesto descrito puede administrarse en una suspensión formulada para uso oral. Por ejemplo, aproximadamente 100-5000 mg del compuesto deseado descrito, 1000 mg de etanol (96%), 400 mg de goma xantana y 99 g de agua se combinaron con agitación. Una sola dosis de aproximadamente 10-500 mg del compuesto deseado descrito de acuerdo con la presente invención, puede proporcionarse por 10 mi de la suspensión oral.

En estos Ejemplos, el ingrediente activo puede reemplazarse con la misma cantidad de los compuestos de acuerdo con la presente invención, en particular, por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos ejemplificados. En algunas circunstancias, puede ser deseable utilizar una cápsula, por ejemplo, una cápsula de gelatina llena, en lugar de una forma de tableta. La elección de la tableta o cápsula dependerá, en parte, de las características fisicoquímicas del compuesto particular descrito utilizado.

Los ejemplos de portadores alternos útiles para hacer las preparaciones orales son lactosa, sacarosa, almidón, talco, estearato de magnesio, celulosa microcristalina, metil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, carboximetil celulosa, glicerina, alginato de sodio, goma arábica, etc. Estos portadores alternos pueden sustituirse por aquéllos proporcionados anteriormente, como se requiera para las características deseadas de disolución, absorción y fabricación.

La cantidad de un compuesto descrito por tableta para utilizarse en una composición farmacéutica para uso humano, se determina de los datos toxicológicos y farmacocinéticos obtenidos en modelos animales adecuados, por ejemplo, ratas y al menos una especie que no es roedor, y se ajusta basándose en los datos de los ensayos clínicos en humanos. Por ejemplo, podría ser apropiado que un compuesto descrito esté presente a un nivel de aproximadamente 10 a 1000 mg por tableta de dosificación unitaria. b. Composición farmacéutica para uso inyectable Una composición parenteral puede prepararse como sigue: Componente Cantidad Ingrediente activo 10 a 500 mg Carbonato de sodio 560 mg* Hidróxido de sodio 80 mg* Agua estéril, destilada Cantidad suficiente para preparar el volumen total indicado a continuación.

Total (por cápsula) 10 mi por ampolla * Cantidad ajustada como se requiera para mantener el pH fisiológico en el contexto de la cantidad del ingrediente activo, y forma del ingrediente activo, por ejemplo, una forma de sal particular del ingrediente activo.

De manera alterna, puede utilizarse una composición farmacéutica para la inyección intravenosa, con la composición que comprende aproximadamente 100-5000 mg de un compuesto descrito, 15 g de polietilenglicol 400 y 250 g de agua en solución salina, con opcionalmente hasta aproximadamente 15% de Cremophor EL, y opcionalmente, hasta 15% de alcohol etílico, y opcionalmente, se usan hasta 2 equivalentes de un ácido farmacéuticamente adecuado, tal como ácido cítrico o ácido clorhídrico. La preparación de tal composición inyectable puede lograrse como sigue: El compuesto descrito y el polietilenglicol 400 se disuelven en el agua con agitación. La solución se filtra estéril (tamaño del poro 0.22 µ??) y se llena en botellas para infusión esterilizadas con calor bajo condiciones asépticas. Las botellas para infusión se sellan con sellos de caucho.

En un ejemplo adicional, puede utilizarse una composición farmacéutica para la inyección intravenosa, con la composición que comprende aproximadamente 100-5000 mg de un compuesto descrito, solución salina estándar, opcionalmente hasta aproximadamente 15% en peso de Cremophor EL, / opcionalmente, hasta 15% en peso de alcohol etílico, y opcionalmente, se usan hasta 2 equivalentes de un ácido farmacéuticamente adecuado, tal como ácido cítrico o ácido clorhídrico. La preparación puede lograrse como sigue: un compuesto descrito deseado se disuelve en la solución salina con agitación. Opcionalmente, se agrega el Cremophor EL, alcohol etílico o el ácido. La solución se filtra estéril (tamaño del poro 0.22 m) y se llena en botellas para infusión esterilizadas con calor bajo condiciones asépticas. Las botellas para infusión se sellan con sellos de caucho.

En este Ejemplo, el ingrediente activo puede reemplazarse con la misma cantidad de cualquiera de los compuestos de acuerdo con la presente invención, en particular, por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos ejemplificados.

La cantidad de un compuesto descrito por ampolla para el uso en una composición farmacéutica para uso humano, se determina de los datos toxicológicos y farmacocinéticos obtenidos en modelos animales adecuados, por ejemplo, rata y al menos una especie que no es roedor, y se ajusta basándose en los datos del ensayo clínico en humanos. Por ejemplo, podría ser apropiado que un compuesto descrito esté presente a un nivel de aproximadamente 10 a 1000 mg por tableta de dosificación unitaria.

Los portadores adecuados para las preparaciones parenterales son, por ejemplo, agua, solución salina fisiológica, etc., que pueden utilizarse con tris(hidroximetil)aminometano, carbonato de sodio, hidróxido de sodio o lo similar, que sirva como un solubilizante o un agente para el ajuste del pH. Las preparaciones parenterales contienen de manera preferida, 50 a 1000 mg de un compuesto descrito por unidad de dosificación.

Será evidente para aquellos con experiencia en la técnica, que pueden hacerse varias modificaciones y variaciones en la presente invención, sin apartarse del alcance o espíritu de la invención. Otras modalidades de la invención serán evidentes para aquellos con experiencia en la técnica, de la consideración de la especificación y la práctica de la invención descrita en la presente. Se pretende que la especificación y los ejemplos se consideren ejemplares únicamente, con un alcance verdadero y el espíritu de la invención siendo indicados por las siguientes reivindicaciones.

Claims (23)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto que tiene una estructura representada por fórmula: en donde m es 0 ó 1 ; n es un entero de 0 a 3; Z se selecciona de manera independiente de N y CH; Ri se selecciona de halo, haloalquilo de C1-C3 y polihaloalquilo de C1-C3; cada uno de R2, R3 y 4 se selecciona de manera independiente de hidrógeno, halo, hidroxilo, ciano, amino, alcalcoxi de C2-C6, alcoxi de C1-C6, alquilo de C1-C6, polihaloalquilo de C1-C6 y haloalquilo de C1-C6; R5 se selecciona de NR6 R7, alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy, y se sustituye con 0-3 grupos seleccionados de manera independiente de halo, hidroxilo, amino, alcalcoxi de C2-C6, alcohol alquílico de C1-C6, alcoxi de C1-C6, alquilo de C1-C6, polihaloalquilo de C1-C6, haloalquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy; Cy es un heterocicloalquilo seleccionado de aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, azepanilo, oxazolidinilo, imidazolidinilo, pirazolidinilo, piperacinilo, oxazinanilo, morfolinilo, hexahidropirimidinilo y hexahidropiridacinilo; y cada uno de R6 y R7 se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y heterocicloalquilo de C3-C6; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R5 se selecciona de: alquilo de C1-C6, cicloalquilo de C3-C6 y Cy, en donde cada uno de R8a, Ret», Rec, Rea y Ree se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, halo, amino, ciano, hidroxilo, alcoxialquilo de C2-C6, alcoxi de C1-C3, haloalquilo de C1-C3 y polihaloalquilo de C1-C3 y alquilo de C1-C6, y cada uno de Rga, R9b, R9c y R9d se seleccionan de manera independiente de hidrógeno, amino, halo, hidroxilo, alquilo de C1-C3, alcoxi de C1-C3, haloalquilo de C1-C3, polihaloalquilo de C1-C3, aziridinilo, azetidinilo, y pirrolidinilo.

3. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

4. - El uso de un compuesto de la reivindicación 1, para preparar un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

5. - El uso de un compuesto de la reivindicación 1, para preparar un medicamento para disminuir la actividad de la histona desmetilasa en un mamífero.

6. - Un compuesto seleccionado del grupo que consiste de: 210 211 o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

7. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la reivindicación 6 y un portador farmacéuticamente aceptable.

8. - El uso de un compuesto de la reivindicación 6, para preparar un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

9.- Un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

10.- Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la reivindicación 9 y un portador farmacéuticamente aceptable.

11. - El uso de un compuesto de la reivindicación 9, para preparar un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

12. - Un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

13. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la reivindicación 12 y un portador farmacéuticamente aceptable.

14. - El uso de un compuesto de la reivindicación 12, para preparar un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

15. - Un compuesto que tiene una estructura representada por una fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

16. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la reivindicación 15 y un portador farmacéuticamente aceptable.

17. - El uso de un compuesto de la reivindicación 15, para preparar un medicamento para el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

18. - Un compuesto de la reivindicación 1 , para usarse en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

19. - Un compuesto de la reivindicación 1 , para usarse en la disminución de actividad de histona desmetilasa en un mamífero.

20. - Un compuesto de la reivindicación 6, para usarse en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

21. - Un compuesto de la reivindicación 9, para usarse en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

22. - Un compuesto de la reivindicación 12, para usarse en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.

23. - Un compuesto de la reivindicación 15, para usarse en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular no controlada en un mamífero.