EA022527B1

EA022527B1 - 2-ЗАМЕЩЕННЫЕ-8-АЛКИЛ-7-ОКСО-7,8-ДИГИДРОПИРИДО[2,3-d]ПИРИМИДИН-6-КАРБОНИТРИЛЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

Info

Publication number: EA022527B1
Application number: EA201390199A
Authority: EA
Inventors: Е. Премкумар Редди; М.В. Рамана Редди
Original assignee: Темпл Юниверсити - Оф Дзе Коммонвелт Систем Оф Хайер Эдьюкейшн
Priority date: 2010-08-05
Filing date: 2011-07-21
Publication date: 2016-01-29
Also published as: WO2012018540A1; AU2011286282B2; EP2600719B1; EA201390199A1; JP2013538196A; PT2600719E; EP2600719A4; US20130131058A1; IL224555A; KR20130098314A; CN103200822A; BR112013002375A2; CA2807498C; AU2011286282A1; US8987267B2; MX2013001427A; PL2600719T3; CA2807498A1; CN103200822B; BR112013002375B1

Abstract

Соединения формулы (I), а также их соли, в которых Rи Rопределены в настоящем описании, применимы в качестве антипролиферативных агентов и ингибиторов киназы. Кроме того, предоставлены способы синтеза для получения соединений формулы (I).

Description

Данное изобретение относится к соединениям, способам их получения, содержащим их композициям и к способам лечения нарушений пролиферации клеток, включающих, но не ограниченных, раком.

Предпосылки к созданию изобретения

Нарушения пролиферации клеток, такие как рак, стоят в ряду наиболее распространенных причин смерти в развитых странах. Несмотря на постоянные достижения, в случае заболеваний, для которых существует лечение, таких как рак, существующие методы лечения обладают нежелательными побочными реакциями и ограниченной эффективностью. Медицинские исследования постоянно направлены на поиск новых эффективных лекарственных препаратов для лечения нарушений пролиферации клеток, включая рак.

Краткое описание изобретения

Найдено, что некоторые соединения и композиции применимы для лечения рака и других нарушений пролиферации клеток. Биологически активные соединения данного изобретения представляют собой 2-замещенные-8-алкил-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрилы.

В некоторых вариантах осуществления предоставлены соединения формулы I или их соли.

В соединениях формулы I

К¹ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₈)циклоалкил,

К² представляет собой 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилинил, 4-морфолиноанилинил или

К³, в каждом случае независимо, представляет собой (С1-С6)алкокси, а К⁴ представляет собой Н или (С1-С₆)алкокси.

В конкретных вариантах осуществления К² представляет собой 4-(4-метилпиперазин-1ил)анилинил.

В некоторых вариантах осуществления К¹ представляет собой (С₃-С₈)циклоалкил.

В конкретных вариантах осуществления К¹ представляет собой циклопентил или циклогексил.

В некоторых вариантах осуществления К² представляет собой

В конкретных вариантах осуществления К¹ представляет собой циклопентил.

В определенных вариантах осуществления в каждом случае К³ представляет собой метокси. В некоторых вариантах осуществления К⁴ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления К⁴ представляет собой метокси.

В некоторых вариантах осуществления К² представляет собой 4-морфолиноанилинил.

В определенных вариантах осуществления К¹ представляет собой циклопентил.

- 1 022527

В определенных вариантах осуществления соединение формулы I выбирают из группы, включающей 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-7-оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил и 8-циклопентил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил.

В конкретных вариантах осуществления соединение формулы I представляет собой 8-циклопентил2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил или его соль.

Кроме того, в настоящем изобретении предоставлена фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает соединение формулы I, выбранное из группы, включающей 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2-((3,5диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-7оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил и их фармацевтически приемлемые соли.

Кроме того, в настоящем изобретении предоставлен способ лечения индивидуума от нарушения пролиферации клеток, включающий введение данному индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы I или его соли.

В некоторых вариантах осуществления нарушение пролиферации клеток выбирают из группы, включающей гемангиоматоз новорожденных, вторично-прогрессирующий рассеянный склероз, атеросклероз, хроническое прогрессирующее миелодегенеративное заболевание, нейрофиброматоз, ганглионейроматоз, образование келоидов, костную болезнь Педжета, фиброкистозную мастопатию, фибромы матки, болезнь Пейрони, болезнь Дюпюитрена, рестеноз, доброкачественную опухоль груди, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, Х-сцепленное лимфоклеточное пролиферативное нарушение, посттрансплантационное лимфоклеточное пролиферативное нарушение, дегенерацию желтого пятна, ретинопатию, пролиферативную витреопатию и нераковые лимфоклеточные пролиферативные нарушения.

В отдельных вариантах осуществления нарушение пролиферации клеток представляет собой рак. В некоторых вариантах осуществления рак выбирают из группы, включающей рак яичника, рак шейки матки, рак груди, рак предстательной железы, рак яичка, рак легких, рак почки, колоректальный рак, рак кожи, рак мозга, лейкоз, включая острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфоидный лейкоз и хронический лимфоидный лейкоз.

Кроме того, в настоящем изобретении предоставлен способ индуцирования апоптоза раковых клеток у индивидуума, страдающего раком, включающий введение данному индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы I или его соли.

В некоторых вариантах осуществления раковые клетки представляют собой опухолевые клетки. В конкретных вариантах осуществления клетки опухоли выбирают из группы, включающей клетки опухоли яичника, шейки матки, матки, влагалища, груди, предстательной железы, яичка, легких, почки, прямой и ободочной кишки, желудка, надпочечников, полости рта, пищевода, печени, желчного пузыря, кости, лимфатической системы, глаза, кожи и мозга.

Кроме того, в настоящем изобретении предоставлен способ получения соединения формулы I. В некоторых вариантах осуществления данный способ включает обработку соединения формулы II

амином, выбранным из группы, включающей 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилин, 4-морфолиноанилин и

- 2 022527

где К¹ представляет собой (С1-С₆)алкил или (С₃-С₈)циклоалкил,

Способ включает также получение соединения формулы I.

В некоторых вариантах осуществления соединение формулы II получают, вводя во взаимодействие соединение формулы III

с окислителем.

В некоторых вариантах осуществления соединение формулы III получают, вводя во взаимодействие соединение формулы IV

с 2-цианоуксусной кислотой в присутствии бензиламина и уксусной кислоты.

В некоторых вариантах осуществления соединение формулы IV получают путем селективного окисления соединения формулы V

В некоторых вариантах осуществления соединение формулы V получают восстановлением соединения формулы VI

В следующих вариантах осуществления соединение формулы VI получают, вводя во взаимодействие соединение формулы VII

- 3 022527

с амином формулы ΝΗ₂Κ?.

Кроме того, в настоящем изобретении предоставлен способ ингибирования киназной активности у млекопитающего, нуждающегося в подобном лечении, при этом данный способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Подробное описание изобретения

Предполагают, что соединения и композиции данного изобретения селективно ингибируют пролиферацию раковых клеток и уничтожают опухолевые клетки различных типов. Соединения изобретения ингибируют различные протеинкиназы. Хотя сообщалось, что похожие соединения ингибируют киназную активность (см., например, патент США № 6498163), соединения настоящего изобретения имеют, на удивление, непохожий профиль ингибирования киназы и ингибируют более широкий ряд протеинкиназ.

Предполагается, что соединения изобретения ингибируют пролиферацию опухолевых клеток, а в случае некоторых соединений вызывают гибель клеток. Причиной гибели клеток является индуцирование апоптоза. Предполагается, что данные соединения эффективны в отношении широкого ряда типов опухолей, включающих, но не ограниченных следующими: рак яичника, рак груди, рак предстательной железы, рак легких, рак почки, колоректальный рак, рак мозга и лейкоз.

Кроме того, предполагается, что соединения применимы для лечения нераковых нарушений пролиферации клеток, включающих, но не ограниченных следующими: гемангиоматозом новорожденных, вторично-прогрессирующим рассеянным склерозом, хроническим прогрессирующим миелодегенеративным заболеванием, нейрофиброматозом, ганглионейроматозом, образованием келоидов, костной болезнью Педжета, фиброкистозной мастопатией, фибромами матки, болезнью Пейрони, болезнью Дюпюитрена, рестенозом и циррозом.

Краткое описание чертежей

Предшествующее краткое описание, а также последующее подробное описание вариантов осуществления будет более понятно при прочтении в сочетании с прилагаемыми чертежами. В целях иллюстрации в графическом материале показаны некоторые варианты осуществления, которые могут быть предпочтительными. Однако должно быть понятно, что представленные варианты осуществления не ограничиваются показанным расположением и средствами.

Фиг. 1 представляет собой график, на котором показана эффективность 8-циклопентил-2-((4-(4метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрила в отношении ингибирования роста фрагментов опухоли Со1о-205, имплантированных самкам голых бестимусных мышей.

I. Определения

А. Общее.

Как использовано в описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают формы во множественном числе, если в контексте ясно не указано иное.

Использованные в настоящем описании термины лечить и лечение используются взаимозаменяемо, и подразумевается, что они указывают на задержку развития нарушения и/или уменьшение тяжести симптомов, которые будут развиваться или предположительно разовьются. Данные термины включают также улучшение существующих симптомов, предупреждение дополнительных симптомов или улучшение или предупреждение основных метаболических причин симптомов.

Использованный в настоящем описании индивидуум (в качестве субъекта лечения) означает как млекопитающих, так и не млекопитающих. Млекопитающие включают, например, людей, нечеловеческих приматов, например человекообразных обезьян и обезьян, крупный рогатый скот, лошадей, овец и коз. Не млекопитающие включают, например, рыб и птиц.

При использовании для описания терапевтического лечения индивидуума, страдающего раком или другим нарушением пролиферации клеток, выражение эффективное количество относится к количеству соединения формулы I, которое подавляет аномальный рост или пролиферацию, или иным образом вызывает апоптоз раковых клеток, предпочтительно клеток опухоли, приводя к терапевтически полезному и селективному цитотоксическому эффекту в отношении пролиферативных клеток.

Термин нарушение пролиферации клеток означает нарушение, при котором происходит нежела- 4 022527 тельная пролиферация клеток одного или более подтипов клеток в многоклеточном организме. При некоторых из подобных нарушений клетки производятся организмом с атипично повышенной скоростью.

В. Химическое.

В следующих параграфах некоторые определения включают примеры. Подразумевается, что данные примеры являются иллюстративными, а не ограничивающими.

Термин алкил сам по себе или как часть другого заместителя означает, если не установлено иначе, линейный, разветвленный или циклический углеводород (циклоалкил), содержащий обозначенное число атомов углерода (то есть С₁-С₆ означает от одного до шести атомов углерода), и включает линейные, разветвленные или циклические группы. Примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, неопентил, гексил, циклогексил и циклопропилметил. Предпочтительными алкильными группами являются (СгСДалкильные. в частности метил, этил и изопропил. Предпочтительные циклоалкильные группы включают (С₃-С₈)циклоалкильные, при этом наиболее предпочтительные (С₃-С₈)циклоалкильные группы представляют собой циклопентил и циклогексил.

Термин алкокси, используемый отдельно или в сочетании с другими терминами, означает, если не установлено иначе, алкильную группу, содержащую обозначенное число атомов углерода, как определено выше, связанную с остальной частью молекулы через атом кислорода, например, такую как метокси, этокси, 1-пропокси, 2-пропокси (изопропокси) и высшие гомологи и изомеры. Предпочтительными являются (С₁-С_з)алкокси, в частности этокси и метокси.

Термин циано относится к -С^Ы группе.

Термины гало или галоген сами по себе или как часть другого заместителя означают, если не установлено иначе, одновалентный атом фтора, хлора, брома или иода, предпочтительно фтора, хлора или брома, более предпочтительно фтора или хлора.

Термин ароматический, как правило, относится к карбоциклу или гетероциклу, состоящему из одного или более полиненасыщенных циклов ароматического характера (то есть имеющих (4п+2) делокализованных π (пи) электронов, где п является целым числом).

II. Соединения данного изобретения

Соединения данного изобретения включают соединения формулы I, а также его соли

В формуле I К¹ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₈)циклоалкил. В предпочтительных вариантах осуществления К¹ может представлять собой циклопентил или циклогексил, наиболее предпочтительно циклопентил.

К³, в каждом случае независимо, представляет собой (С₁-С₆)алкокси, предпочтительно метокси или этокси, наиболее предпочтительно метокси.

К⁴ представляет собой Н или (С1-С6)алкокси. В случае, когда К⁴ представляет собой (С1-С₆)алкокси, предпочтительно он является или этокси, или метокси, наиболее предпочтительно метокси.

В некоторых вариантах осуществления К³ в каждом случае представляет собой метокси, а К⁴ представляет собой водород. В других вариантах осуществления в каждом случае К³, так же как и К⁴, представляет собой метокси.

Были получены следующие соединения изобретения: 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2-((4морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопентил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил и 8циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1 -ил)фенил)амино)-7 -оксо-7,8-дигидропиридо [2,3-б]пиримидин-6карбонитрил.

- 5 022527

Прочие иллюстративные соединения, входящие в объем настоящего изобретения, включают следующие соединения и их соли: 8-циклогексил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклогексил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклогексил-7-оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопропил-7-оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклобутил-7-оксо-2-((3,4,5триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклобутил-2-((3,5диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопропил-2((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклопропил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6карбонитрил, 8-циклобутил-2-((4-(4-метилпиперазин-1 -ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо [2,3б]пиримидин-6-карбонитрил, 8-циклобутил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил и 8-циклопропил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8дигидропиридо [2,3 -ά] пиримидин-6-карбонитрил.

Необходимо понимать, что другие конкретные и предпочтительные варианты осуществления соединений данного изобретения объединяют признаки конкретных и предпочтительных вариантов осуществления данного изобретения, подробно описанные выше. Варианты осуществления, определенные подобными комбинациями, рассматриваются в качестве конкретных вариантов осуществления данного изобретения.

В других предпочтительных вариантах осуществления соединение формулы I или любой из его вариантов осуществления представляет собой выделенное соединение. В других предпочтительных вариантах осуществления соединение формулы I и композиции, содержащие данные соединения, включая фармацевтические композиции, по существу, не содержат фармацевтически неприемлемых примесей. Фармацевтически неприемлемая примесь представляет собой соединение или композицию, неприемлемую для применения в качестве фармацевтического препарата для терапевтического введения. Примеры включают токсические вещества, такие как галогенсодержащие растворители и тяжелые металлы, и потенциально инфекционные вещества, такие как бактерии, грибы, вирусы и споры бактерий и грибов.

III. Способы получения соединений данного изобретения и промежуточных соединений, используемых в синтезе соединений данного изобретения

В настоящем изобретении представлены способы получения соединения формулы I, промежуточных соединений, которые используются при получении подобных соединений, и способы получения подобных промежуточных соединений.

Данные соединения можно получить рядом способов синтеза. Показательные методики представлены на схемах 1-5. Легко можно понять, что данные соединения можно синтезировать, заменяя в соответствующих исходных веществах, реагентах и реактивах в приведенных далее синтезах, К¹, К², К³ и К⁴, определенных, как приведено выше в настоящем описании. Кроме того, будет ясно, что сам порядок стадий может быть изменен в зависимости от природы взаимодействий. Соединения-предшественники, промежуточные соединения и реагенты являются коммерчески доступными или могут быть получены из коммерчески доступных исходных веществ. Следующие схемы являются иллюстративными и никоим образом не предназначены для ограничения объема соединений и вариантов осуществления настоящего изобретения.

Синтез соединений формулы (2) показан на схеме 1. Соединения формулы (2) можно получить, вводя во взаимодействие коммерчески доступный 4-галогенпиримидинкарбоксилат, такой как соединение формулы (1), с амином Ρ?-ΝΗ₂, в присутствии основания в полярном или апротонном растворителе. Подходящие основания включают органические основания, например третичные амины, такие как диизопропилэтиламин (ΌΙΡΕΑ) или триэтиламин (ТЕА). Подходящие растворители могут включать тетрагидрофуран (ТГФ), ацетонитрил, п-диоксан или Ν,Ν-диметилформамид (ДМФА). Реакционную смесь можно нагревать в необходимых пределах до температуры, подходящей для данного растворителя.

- 6 022527

Синтез соединений формулы (3) показан на схеме 2. Сложный эфир (2) можно восстановить при помощи восстановителя, такого как алюмогидрид лития (ЬАН) в полярном растворителе, получая спиртовое промежуточное соединение. Другие подходящие восстановители включают диизобутилалюминийгидрид (ОГВАЬ-Н, 2 экв.), комплекс боран-ТГФ и так далее. Подходящие растворители включают тетрагидрофуран (ТГФ), диэтиловый эфир и так далее. Промежуточный спирт можно окислить до альдегида (3) при помощи окислителя, такого как двуокись марганца в галогенсодержащем растворителе. Другие подходящие окислители, способные окислить спирт до альдегида, такие как только в качестве примера периодинан Десса-Мартина, хорошо известны в данной области. Подходящие галогенсодержащие растворители включают дихлорметан, хлороформ и так далее.

В альтернативном варианте осуществления сложный эфир (2) можно перевести непосредственно в альдегид (3) обработкой ПГВАЬ-Н при подходящей температуре в растворителе, таком как дихлорметан, ТГФ или толуол.

Синтез соединений формулы (4) представлен на схеме 3. Согласно схеме 3 соединения формулы (3) можно конденсировать с цианоуксусной кислотой в уксусной кислоте, получая соединение формулы (4). В реакции конденсации можно использовать каталитическое количество бензиламина. Температура в реакции конденсации может изменяться от около 100 до около 120°С (кипячение с обратным холодильником).

Синтез соединений формулы (5) показан на схеме 4. Соединения формулы (4) можно окислить до сульфоксида путем обработки (4) окислителем. Подходящие окислители могут включать, но не ограничиваются, м-хлорпербензойной кислотой (т-СРВА), перекисью водорода, гипохлоритом натрия, периодатом натрия, трет-бутилгипохлоритом и надкислотами, такими как надуксусная кислота. В случае, когда необходимо контролировать степень окисления серы, можно применять стехиометрическое количество окислителя. Подходящие растворители включают уксусную кислоту и галогенсодержащие растворители, такие как хлороформ или дихлорметан и так далее. Предпочтительным окислителем является тСРВА в дихлорметане.

- 7 022527

Синтез соединения формулы I показан на схеме 5. Соединение формулы (5) можно обработать соединением амина формулы Β²-ΝΗ2. получая соединение формулы I. К² может быть таким, как определенный ранее в настоящем описании. Примеры растворителей, подходящих для данной реакции, включают бензоидные растворители, такие как толуол, о-ксилол, м-ксилол, п-ксилол, смеси ксилолов, анизол и их смеси. Другие подходящие растворители включают п-диоксан, 1,2-диметоксиэтан (ДМЭ), ТГФ и так далее. Подходящая температура для воздействия на реакцию может изменяться в интервале от около 65 до около 150°С, в зависимости от используемого растворителя. Можно применять молярный избыток амина К²-ЛН2, включая интервал от около 1,05 до около 2,0 экв.

Описанные выше реакции, если не указано иначе, обычно проводят при давлении от около одной до около трех атмосфер, предпочтительно при давлении окружающей среды (около одной атмосферы).

Настоящее изобретение включает также выделенные соединения формулы I. Выражение выделенное соединение относится к получению соединения формулы I или смесей соединения формулы I, где выделенное соединение отделено от использованных реагентов и/или побочных продуктов, образовавшихся в ходе синтеза данного соединения или соединений. Выделенный не означает, что данный препарат является технически чистым (гомогенным), но он достаточно чист в отношении соединения в той форме, в которой оно может быть применено в терапевтических целях. Предпочтительно выделенное соединение относится к препарату соединения формулы I или смеси соединений формулы I, который содержит указанное соединение или смесь соединений формулы I в количестве по меньшей мере 10 мас.% от общей массы. Предпочтительно данный препарат содержит указанное соединение или смесь соединений в количестве, составляющем по меньшей мере 50 мас.% от общей массы; более предпочтительно по меньшей мере 80 мас.% от общей массы и наиболее предпочтительно по меньшей мере 90, по меньшей мере 95 или по меньшей мере 98 мас.% от общей массы препарата.

Соединения данного изобретения и промежуточные соединения можно выделить из содержащих их реакционных смесей и очистить стандартными способами, такими как фильтрование, жидкостьжидкостная экстракция, твердофазная экстракция, перегонка, перекристаллизация или хроматография, включая колоночную флэш-хроматографию или ВЭЖХ. Предпочтительный способ очистки соединений формулы I или их солей включает кристаллизацию данного соединения или его солей из растворителя, получая предпочтительно данные соединения или их соли в кристаллической форме. После кристаллизации кристаллизационный растворитель удаляют способом, отличающимся от выпаривания, например фильтрованием или декантированием, а кристаллы после этого предпочтительно промывают при помощи чистого растворителя (или смесью чистых растворителей). Предпочтительные растворители для кристаллизации включают воду, спирты, в частности спирты, содержащие до четырех атомов углерода, такие как метанол, этанол, изопропанол и бутан-1-ол, бутан-2-ол и 2-метил-2-пропанол, простые эфиры, например диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, трет-бутилметиловый эфир, 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран и 1,4-диоксан, карбоновые кислоты, например муравьиную кислоту и уксусную кислоту, и углеводородные растворители, например пентан, гексан, толуол и их смеси, в частности водные смеси, такие как водный этанол. Предпочтительно используют чистые растворители, предпочтительно, по меньшей мере, аналитической степени чистоты, а более предпочтительно фармацевтической степени чистоты. В предпочтительном варианте осуществления способов данного изобретения продукты выделяют таким образом. В соединениях данного изобретения формулы I или их солях и их фармацевтических композициях соединение формулы I или его соль предпочтительно находится или получено из кристаллической формы, предпочтительно полученной согласно такому способу.

Описанные выше способы синтеза представляют конвергентную стратегию синтеза. Так, два компонента можно синтезировать и получить до конденсации или сочетания двух данных компонентов с образованием целевых соединений. Данные конвергентные схемы синтеза позволяют организовать стадии сборки каркаса требуемых соединений и получение производных способных к функционализации функциональных групп для того, чтобы урегулировать чувствительность функциональных групп, и/или для того, чтобы дать возможность вводить функциональные группы или элементы либо до, либо после сборки каркаса требуемых соединений при помощи описанных реакций конденсации или сочетания.

Специалисты примут во внимание, что некоторые ароматические заместители в соединениях данного изобретения, промежуточных соединениях, используемых в описанных выше способах или их

- 8 022527 предшественниках, можно вводить, применяя реакции ароматического замещения для введения или замены заместителя или используя превращения функциональных групп для модификации имеющегося заместителя или их сочетание. Подобные реакции можно осуществить либо до, либо непосредственно сразу после упомянутых выше способов, и они входят как часть аспекта способов данного изобретения. Реагенты и условия реакции подобных методик известны в данной области. Конкретные примеры методик, которые можно применять, включают, но не ограничены, электрофильной функционализацией ароматического цикла, например, при помощи нитрования, галогенирования или ацилирования; превращением нитрогруппы в аминогруппу, например при помощи восстановления, такого как каталитическое гидрирование; ацилированием, алкилированием или сульфонилированием амино- или гидроксильной группы; замещением аминогруппы другой функциональной группой путем перевода в промежуточную соль диазония с последующим нуклеофильным или свободно-радикальным замещением данной соли диазония; или замещением атома галогена другой группой, например, при помощи реакций замещения, катализируемых нуклеофилом или металлоорганическим соединением.

Кроме того, в упомянутых выше способах, некоторые функциональные группы, которые могли бы быть чувствительными к условиям реакции, можно защитить при помощи защитных групп. Защитная группа представляет собой производное химической функциональной группы, которая иначе была бы несовместима с условиями, необходимыми для осуществления конкретной реакции, которое, после проведения данной реакции, можно удалить для возвращения исходной функциональной группы, которая, таким образом, считается защищенной. Любую химическую функциональную группу, являющуюся структурным компонентом любого реагента, используемого для синтеза соединений данного изобретения, можно необязательно защитить при помощи химической защитной группы, если подобная защитная группа применима в синтезе соединений данного изобретения. Специалисту в данной области известно, когда есть необходимость в защитных группах, как выбрать подобные группы и способы, которые можно применять для их селективного введения и селективного снятия, поскольку способы выбора и использования защитных групп подробно описаны в химической литературе. Методики выбора, введения и снятия химических защитных групп можно найти, например, в РгоЮсйус Сгоирк ίη Огдашс δνηΐΐιοκίκ авторов Тйеобога Сгеепе, Рс1сг С.М. \УШк Ποίιη \УПеу δ 8опк, 1пс. 1999), полное раскрытие которой включено в настоящее описание ссылкой.

Помимо использования защитной группы, чувствительные функциональные группы можно вводить в качестве синтетических предшественников функциональных групп, которые требуются в промежуточном соединении или конечном продукте. Примером этого является ароматическая нитро(-ЫО₂) группа. Ароматическая нитрогруппа не вступает ни в одну из нуклеофильных реакций ароматической аминогруппы. Однако нитрогруппа может служить эквивалентом защищенной аминогруппы, поскольку она легко восстанавливается до аминогруппы в мягких условиях, являющихся селективными для нитрогруппы по сравнению с большинством прочих функциональных групп.

Специалисту в данной области будет понятно, что описанные способы не являются единственным способом синтеза соединений данного изобретения, и что для возможного применения в синтезе соединений данного изобретения доступен чрезвычайно широкий ряд реакций синтетической органической химии. Специалисту в данной области известно, как выбирать и осуществлять соответствующие синтетические подходы. Подходящие способы синтеза можно определить ссылкой на литературу, включая такие источники, как Сотргейепыуе Огдашс 8уп1йек1к, Εά. В.М. Тгок! аЛ I. Иешшд (Регдатоп Ргекк, 1991), СотргеЬепкКе Огдашс Рипс1юпа1 Сгоир ТгапкГогтаНопк, Εά. А.К. Ка1г11/ку. О. Ме1й-Сойп, аЛ

С.\У. Кеек (Регдатоп Ргекк, 1996), СотргейепкКе Огдашс Рипс1юпа1 Сгоир ТгапкГогтаНопк II, Εά. А.К. Ка1п1/ку аЛ КЛК. Тау1ог (Εά^τ) (Е1кеу1ег, 2^п<1 Εά^ί^οη, 2004), Сотргейепыуе Не1егосус11с Сйет1к1гу, Εά. А.К. Ка1гП/ку аЛ С.\У. Кеек (Регдатоп Ргекк, 1984), Сотргейепыуе Не1егосус1ю Сйет1к1гу II, Εά. А.К. КаЛПхку, С.\У. Кеек, аЛ Ε.Ρ.ν. Зспуеп (Регдатоп Ргекк, 1996), аЛ Аάνаηсеά Огдашс СЬетЛгу,. 4* Εά., 1. Магсй (1оЬп \УПеу & 8опк, 1992).

IV. Лечение нарушений пролиферации клеток с использованием соединений данного изобретения

В соответствии с другим вариантом осуществления данного изобретения предоставлен способ лечения индивидуума, страдающего нарушением пролиферации клеток, в частности раком, включающий введение указанному индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли либо самого по себе, либо в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.

В соответствии со следующим вариантом осуществления данного изобретения предоставлен способ индуцирования апоптоза раковых клеток, предпочтительно клеток опухоли, у индивидуума, страдающего раком, включающий введение указанному индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли либо самого по себе, либо в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.

Данное изобретение также направлено на применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в медицине.

Данное изобретение также направлено на соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли для лечения пролиферативного нарушения или для индуцирования апоптоза клеток опухоли.

- 9 022527

Изобретение направлено также на лекарственное средство, включающее соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, для применения при лечении пролиферативного нарушения или для индуцирования апоптоза клеток опухоли.

Данное изобретение также направлено на применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, для получения лекарственного средства для лечения нарушения пролиферации клеток, в частности рака, или для индуцирования апоптоза клеток опухоли у индивидуума, страдающего раком.

Конкретными и предпочтительными вариантами осуществления данного аспекта изобретения являются варианты осуществления, в которых соединение формулы I, применяемое в способе лечения либо отдельно, либо в качестве части композиции, представляет собой конкретный или предпочтительный вариант осуществления соединения формулы I в описании соединений и композиций данного изобретения, предоставленных в настоящем описании.

Соединения согласно данному изобретению можно вводить индивидуумам (млекопитающим, включая животных и людей), страдающих нарушениями пролиферации клеток, такими как рак, злокачественные и доброкачественные опухоли, нарушения пролиферации кровеносных сосудов, аутоиммунные нарушения и фиброзные нарушения. В конкретном варианте осуществления данного изобретения принимающий лечение индивидуум представляет собой человека.

Предполагается, что данные соединения эффективны в отношении широкого ряда типов опухолей, включающих, но не ограниченных следующими: раком яичника, раком шейки матки, раком груди, раком предстательной железы, раком яичка, раком легких, раком почки, колоректальным раком, раком кожи, раком мозга, лейкозом, включая острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфоидный лейкоз и хронический лимфоидный лейкоз.

Более конкретно, виды рака, которые можно вылечить при помощи соединений, композиций и способов данного изобретения, включают, но не ограничиваются следующими:

раковыми заболеваниями сердца, включая, например, саркому, например ангиосаркому, фибросаркому, рабдомиосаркому и липосаркому; миксомой; рабдомиомой; фибромой; липомой и тератомой;

раковыми заболеваниями легких, включая, например, бронхогенную карциному, например, сквамозных клеток, недифференцированных мелких клеток, недифференцированных крупных клеток, и аденокарциному; альвеолярной и бронхиолярной карциномой; бронхиальной аденомой; саркомой; лимфомой; хондроматозной гамартомой и мезотелиомой;

желудочно-кишечным раковым заболеванием, включая, например, раковые заболевания пищевода, например карциному сквамозных клеток, аденокарциному, лейомиосаркому и лимфому; раковыми заболеваниями желудка, например карциномой, лимфомой и лейомиосаркомой; раковыми заболеваниями поджелудочной железы, например протоковой аденокарциномой, инсулиномой, глюкагономой, гастриномой, карциноидными опухолями и випомой; раковыми заболеваниями тонкой кишки, например аденокарциномой, лимфомой, карциноидными опухолями, саркомой Капоши, лейомиомой, гемангиомой, липомой, нейрофибромой и фибромой; раковыми заболеваниями толстой кишки, например аденокарциномой, тубулярной аденомой, ворсинчатой аденомой, гамартомой и лейомиомой;

раковыми заболеваниями мочеполового тракта, включая, например, раковые заболевания почки, например, аденокарциному, опухоль Вильмса (нейробластому), лимфому, и лейкоз; раковыми заболеваниями мочевого пузыря и уретры, например карциномой сквамозных клеток, переходно-клеточной карциномой и аденокарциномой; раковыми заболеваниями предстательной железы, например аденокарциномой и саркомой; раковым заболеванием яичка, например семиномой, тератомой, эмбриональной карциномой, тератокарциномой, хориокарциномой, саркомой, карциномой интерстициальных клеток, фибромой, фиброаденомой, аденоматоидными опухолями и липомой;

раковыми заболеваниями печени, включая, например, гепатому, например гепатоклеточную карциному; холангиокарциномой, гепатобластомой, ангиосаркомой, гепатоклеточной аденомой; и гемангиомой;

раковыми заболеваниями костей, включая, например, остеогенную саркому (остеосаркому), фибросаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, хондросаркому, саркому Эвинга, злокачественную лимфому (ретикулярно-клеточную саркому), множественную миелому, злокачественную гигантоклеточную опухоль, хордому, остеохордому (костно-хрящевые экзостозы), доброкачественную хондрому, хондробластому, хондромиксофиброму, остеоид-остеому и гигантоклеточные опухоли;

раковыми заболеваниями нервной системы, включая, например, раковые заболевания черепа, например остеому, гемангиому, гранулему, ксантому и деформирующий остоз; раковыми заболеваниями оболочек мозга, например менингиому, менингиосаркому и глиоматоз; раковыми заболеваниями головного мозга, например астроцитомой, медуллобластомой, гиомой, эпендимомой, герминомой (пинеаломой), мультиформной глиобластомой, олигодендроглиомой, шванномой, ретинобластомой и врожденными опухолями; и раковыми заболеваниями спинного мозга, например нейрофибромой, менингиомой, глиомой и саркомой;

гинекологическими раковыми заболеваниями, включая, например, раковые заболевания матки, например карциному эндометрия; раковыми заболеваниями шейки матки, например карциномой шейки

- 10 022527 матки и предопухолевой дисплазией шейки матки; раковыми заболеваниями яичника, например карциномой яичника, включая серозную цистаденокарциному, муцинозную цистаденокарциному, неклассифицируемую карциному, опухоли колбочково-текальных клеток, опухоли клеток Сертоли-Лейдига, дисгерминому и злокачественную тератому; раковыми заболеваниями вульвы, например карциномой сквамозных клеток, интраэпителиальной карциномой, аденокарциномой, фибросаркомой и меланомой; раковыми заболеваниями влагалища, например светлоклеточной карциномой, карциномой сквамозных клеток, ботриоидной саркомой и эмбриональной рабдомиосаркомой, и раковыми заболеваниями фаллопиевых труб, например карциномой;

раковыми заболеваниями кроветворной системы, включая, например, раковые заболевания крови, например острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластический лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественную миелому и миелодиспластический синдром, лимфому Ходжкина, неходжскинскую лимфому (злокачественную лимфому) и макроглобулинемию Вальденстрома;

раковыми заболеваниями кожи, включая, например, злокачественную меланому, карциному базальных клеток, карциному сквамозных клеток, саркому Капоши, диспластические невусы, липому, ангиому, дерматофиброму, келоиды, псориаз и раковыми заболеваниями желез надпочечников, например нейробластомой.

Рак может представлять собой солидные опухоли, которые могут являться или могут не являться метастатическими. Кроме того, рак может возникать в виде лейкоза или диффузной ткани. Таким образом, термин опухолевая клетка, представленный в настоящем описании, включает клетку, пораженную любым из определенных выше нарушений.

Кроме того, предполагается, что данные соединения применимы для лечения нераковых нарушений пролиферации клеток, то есть нарушений пролиферации клеток, характеризуемых доброкачественными признаками. Подобные нарушения могут также называться цитопролиферативными или гиперпролиферативными в тех клетках, которые производятся телом с атипично высокой скоростью. Нераковые нарушения пролиферации клеток, которые предположительно можно вылечить при помощи соединений данного изобретения, включают, например, гемангиоматоз новорожденных, вторично-прогрессирующий рассеянный склероз, атеросклероз, хроническое прогрессирующее миелодегенеративное заболевание, нейрофиброматоз, ганглионейроматоз, образование келоидов, костную болезнь Педжета, фибрознокистозную мастопатию, фибромы матки, болезнь Пейрони, болезнь Дюпюитрена, рестеноз, доброкачественное пролиферативное заболевание груди, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, Х-сцепленное лимфоклеточное пролиферативное нарушение (болезнь Дункана), посттрансплантационное лимфоклеточное пролиферативное нарушение (РТЬП), дегенерацию желтого пятна и ретинопатии, такие как диабетическая ретинопатия и пролиферативная витреопатия (РУК).

Другие нераковые нарушения пролиферации клеток, которые предположительно можно вылечить при помощи соединений данного изобретения, включают наличие предраковых лимфопролиферативных клеток, связанных с повышенным риском развития в раковое нарушение. Многие нераковые лимфоклеточные пролиферативные нарушения связаны с латентными вирусными инфекциями, такими как вирус Эпштейна-Барра (ЕВУ) и гепатита С. Эти нарушения часто начинаются как доброкачественная патология и переходят в лимфоидную неоплазию с течением времени.

V. Соли соединений согласно данному изобретению

Соединения настоящего изобретения могут принимать форму солей. Термин соль включает соли свободных кислот или свободных оснований, являющихся соединениями данного изобретения. Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям, которые имеют профили токсичности в пределах интервала, допускающего использование в фармацевтических применениях. Тем не менее, фармацевтически неприемлемые соли могут обладать такими свойствами, как высокая кристалличность, которая используется в осуществлении настоящего изобретения на практике, например, таком как применение в способе синтеза, очистке или получении лекарственного средства из соединений настоящего изобретения.

Подходящие фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли можно получить из неорганической кислоты или из органической кислоты. Примеры неорганических кислот включают хлористоводородную, бромисто-водородную, иодисто-водородную, азотную, угольную, серную и фосфорную кислоты. Подходящие органические кислоты можно выбрать из органических кислот алифатического, циклоалифатического, ароматического, арилалифатического, гетероциклического, карбонового и сульфонового класса, примеры которых включают муравьиную, уксусную, пропионовую, янтарную, гликолевую, глюконовую, молочную, яблочную, винную, лимонную, аскорбиновую, глюкуроновую, малеиновую, фумаровую, пировиноградную, аспарагиновую, глутаминовую, бензойную, антраниловую, 4гидроксибензойную, фенилуксусную, миндальную, эмбоновую (памовую), метансульфоновую, этансульфоновую, бензолсульфоновую, пантотеновую, трифторуксусную, трифторметансульфоновую, 2гидроксиэтансульфоновую, п-толуолсульфоновую, сульфаниловую, циклогексиламиносульфоновую, стеариновую, альгининовую, β-гидроксимасляную, салициловую, галактаровую и галактуроновую кислоту. Примеры фармацевтически неприемлемых кислотно-аддитивных солей включают, например, пер- 11 022527 хлораты и тетрафторбораты.

Все эти соли можно получить стандартными способами из соответствующего соединения формулы I и подходящей кислоты. Предпочтительно данные соли имеют кристаллическую форму, а предпочтительно их получают кристаллизацией данной соли из подходящего растворителя. Специалист в данной области знает, как получить и выбрать подходящие солевые формы, например, как описано в НаибЬоок о£ РЬаттасеийса1 БаИз: РгорсШск,. §е1еейои, аиб Ике Ву Р.Н. δίαίιΐ аиб С.С. ХУсгтшН (\УПеу-УСН 2002).

VI. Фармацевтические композиции

Соединения данного изобретения можно вводить в виде фармацевтической композиции в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем. Активный ингредиент в подобных составах может составлять от 0,1 до 99,99 мас.%. Фармацевтически приемлемый носитель означает любой носитель, разбавитель или эксципиент, совместимый с другими ингредиентами данного состава и безвредный для реципиента.

Активный агент предпочтительно вводят с фармацевтически приемлемым носителем, который выбирают исходя из выбранного способа введения и стандартной фармацевтической практики. Активный агент можно ввести в состав дозированных форм согласно стандартным способам практического применения в области фармацевтических препаратов. См. А1рйоп8о Сеииато, еб., Кеттдои'к РЬагтаееи11еа1 Бшеиеек,. 18'¹' Ебйюи (1990), Маек РиЬИкЫид Со., Еа§1ои, РА. Подходящие дозированные формы могут включать, например, таблетки, капсулы, растворы, растворы для парентерального введения, пастилки, суппозитории или суспензии.

В случае парентерального введения активный агент можно смешать с подходящим носителем или разбавителем, таким как вода, масло (в частности, растительное масло), этанол, солевой раствор, водный раствор декстрозы (глюкозы) и растворы родственных сахаров, глицерин, или гликоль, такой как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Растворы для парентерального введения предпочтительно содержат водорастворимую соль активного агента. Кроме того, можно добавить стабилизаторы, антиоксиданты и консерванты. Подходящие антиоксиданты включают сульфит, аскорбиновую кислоту, лимонную кислоту и ее соли и натриевую соль ЭДТУ. Подходящие консерванты включают хлорид бензалкония, метилили пропилпарабен и хлорбутанол. Композиция для парентерального введения может иметь вид водного или неводного раствора, дисперсии, суспензии или эмульсии.

В случае перорального введения активный агент можно соединить с одним или более твердыми неактивными ингредиентами для получения таблеток, капсул, пилюль, порошков, гранул или других подходящих пероральных дозированных форм. Например, активный агент можно смешать по меньшей мере с одним эксципиентом, таким как наполнители, связывающие вещества, увлажнители, дезинтегранты, замедлители растворения, ускорители абсорбции, абсорбенты увлажняющих агентов или лубриканты. В соответствии с одним из вариантов осуществления таблетки активный агент можно объединить с карбоксиметилцеллюлозой кальция, стеаратом магния, маннитом и крахмалом, а затем сформовать в таблетки при помощи стандартных способов таблетирования.

Конкретная доза соединения согласно данному изобретению для получения терапевтического эффекта при лечении нарушения пролиферации клеток, безусловно, будет определяться конкретными обстоятельствами индивидуального пациента, включающими рост, массу, возраст и пол пациента, природу и стадию нарушения пролиферации клеток, агрессивность данного нарушения пролиферации клеток и способ введения соединения.

Например, можно применять суточную дозу, составляющую от около 0,05 до около 50 мг/кг/сутки, более предпочтительно от около 0,1 до около 10 мг/кг/сутки. Рассматриваются более высокие или более низкие дозы, поскольку в некоторых случаях может потребоваться применять дозы, выходящие за пределы данных интервалов. Данную суточную дозу можно разделить, например разделить поровну на двачетыре раза на суточную дозу. Композиции предпочтительно составляются в виде единичной дозированной формы, при этом каждая доза содержит от около 1 до около 500 мг, обычно от около 10 до около 100 мг активного агента на разовую дозу. Термин единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичной дозы для субъектов, являющихся людьми, и других млекопитающих, при этом каждая единица содержит определенное заранее количество активного вещества, рассчитанного таким образом, чтобы получать требуемый терапевтический эффект, в сочетании с подходящим фармацевтическим эксципиентом.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения можно составить таким образом, чтобы предоставить медленное или регулируемое высвобождение из них активного ингредиента с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в различных количественных соотношениях для получения желательного профиля высвобождения, других полимерных матриц, гелей, проницаемых мембран, осмотических систем, многослойных покрытий, микрочастиц, липосом и/или микросфер.

В общем, препарат с регулируемым высвобождением представляет собой фармацевтическую композицию, которая способна высвобождать активный ингредиент с необходимой скоростью для поддержания постоянной фармакологической активности в течение требуемого промежутка времени. Подобные дозированные формы предоставляют доставку лекарства в организм в течение определенного заранее промежутка времени и, таким образом, поддерживают концентрацию лекарства в терапевтическом ин- 12 022527 тервале в течение более длительных периодов времени, чем в случае обычных нерегулируемых препаратов.

В патенте США № 5674533 раскрыты фармацевтические композиции с регулируемым высвобождением в виде жидких дозированных форм для введения могуистеина, эффективного противокашлевого препарата периферического действия. В патенте США № 5059595 раскрыты активные агенты регулируемого высвобождения при использовании устойчивых к желудочному соку таблеток для терапевтического лечения органических психических расстройств. В патенте США № 5591767 описан чрескожный пластырь с жидким резервуаром для регулируемого введения кеторолака, нестероидного противовоспалительного агента с эффективными анальгезирующими свойствами. В патенте США № 5120548 раскрыто устройство доставки лекарственного средства с регулируемым высвобождением, состоящее из набухающих полимеров. В патенте США № 5073543 описаны препараты с регулируемым высвобождением, содержащие трофический фактор, заключенный в ганглиозид-липосомный носитель. В патенте США № 5639476 описан стабильный твердый препарат с регулируемым высвобождением, покрытие которого получено на основе водной дисперсии гидрофобного акрилового полимера. Известны биодеградируемые микрочастицы для применения в препаратах с регулируемым высвобождением. В патенте США № 5354566 описан порошок с регулируемым высвобождением, содержащий активный ингредиент. В патенте США № 5733566 описано применение полимерных микрочастиц, высвобождающих антипаразитические композиции.

Регулируемое высвобождение активного ингредиента можно стимулировать различными индукторами, например рН, температурой, ферментами, водой или другими физиологическими состояниями или соединениями. Существуют различные механизмы высвобождения лекарственного средства. Например, в одном из вариантов осуществления компонент с регулируемым высвобождением может набухать и образовывать пористые отверстия, достаточно большие для высвобождения активного ингредиента после введения пациенту. Термин компонент с регулируемым высвобождением в контексте настоящего изобретения определяют в настоящем описании как соединение или соединения, такие как полимеры, полимерные матрицы, гели, проницаемые мембраны, липосомы и/или микросферы, которые облегчают регулируемое высвобождение активного ингредиента в фармацевтической композиции. В другом варианте осуществления компонент с регулируемым высвобождением является биодеградируемым, что вызывается подверганием действию водной окружающей среды, рН, температуры или ферментов в организме. В другом варианте осуществления можно применять золь-гели, в которых активный ингредиент включен в золь-гелевую матрицу, твердую при комнатной температуре. Эту матрицу имплантируют пациенту, предпочтительно млекопитающему, температура тела которого достаточно высока, чтобы вызвать образование геля в золь-гелевой матрице, высвобождая при этом активный ингредиент в организм пациента.

Компоненты, применяемые для получения фармацевтических композиций, имеют высокую чистоту и, по существу, не содержат потенциально вредных примесей (например, по меньшей мере, качество Национального комитета по продовольствию, как правило, по меньшей мере, аналитическая степень чистоты, а обычно, по меньшей мере, фармацевтическая степень чистоты). В частности, для употребления человеком данную композицию предпочтительно производят или составляют по стандартам надлежащей производственной практики, определенных в руководствах по применению Управления по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными препаратами США. Например, подходящие препараты могут быть стерильными и/или, по существу, изотоническими и/или в полном соответствии со всеми нормами надлежащей производственной практики Управления по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными препаратами США.

VII. Способы введения соединений и композиций данного изобретения

Соединения можно вводить любым способом, включающим, но не ограниченным пероральным, ректальным, сублингвальным, буккальным, глазным, легочным и парентеральным введением или в виде перорального или назального спрея (например, ингаляция распыленных паров, капель или твердых частиц). Парентеральное введение включает, например, внутривенное, внутримышечное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, внутриназальное, внутривагинальное, внутрипузырное (например, в мочевой пузырь), внутрикожное, чрескожное, местное или подкожное введение. Кроме того, в объем данного изобретения входит инстилляция лекарственного препарата в тело пациента в регулируемом составе с тем, чтобы системное или местное высвобождение лекарства происходило позднее. Например, лекарство может находиться в депо для регулируемого высвобождения в систему кровообращения или для высвобождения на определенном участке роста опухоли.

Одно или более соединений, применимых в осуществлении на практике настоящего изобретения, можно вводить одновременно, одним и тем же или различными способами, либо в разное время в процессе лечения. Соединения можно вводить до, вместе или после других лекарственных препаратов, включая другие антипролиферативные соединения.

Лечение можно проводить в течение необходимого периода времени, либо в виде одного непрерывного курса, либо в виде отдельных курсов. Лечащему врачу известно, как усилить, уменьшить или прервать лечение на основании реакции пациента. Согласно одному из вариантов осуществления лече- 13 022527 ние проводят в течение от около четырех до около шестнадцати недель. По мере надобности схему лечения можно повторить.

VIII. Примеры

Следующие неограничивающие примеры предоставлены для иллюстрации данного изобретения. Приведенные синтетические подходы применимы к другим вариантам осуществления данного изобретения. Методики синтеза, описанные как общие методы, описывают то, что предположительно, в целом будет эффективно для осуществления указанного синтеза. Однако специалист в данной области примет во внимание, что может возникнуть необходимость изменить данную методику для любого данного варианта осуществления изобретения. Например, для определения оптимальной продолжительности реакции можно использовать мониторинг протекания реакции, такой как при помощи тонкослойной хроматографии (ТСХ), или ВЭЖХ. Продукты можно очищать стандартными методами, которые будут изменяться, например, в соответствии с количеством побочных продуктов и физических свойств соединений. В лабораторном масштабе все методы, которые могут использоваться, представляют собой перекристаллизацию из подходящего растворителя, колоночную хроматографию, ВЭЖХ с обычной или обращенной фазой или перегонку. Специалист поймет, как изменять условия реакции для того, чтобы синтезировать любое данное соединение в объеме изобретения без излишнего экспериментирования. См., например, Уодс1'5 ТеХЬоок о£ РгасИса1 Огдашс СкстПгу, Ьу А.Г Уодс1, с! а1., Ехрег1теи1а1 Огдашс СкстПгу: 81аиДагД аиД Мюгоксак, Ьу Ь.М. НагуооД с! а1. (2^иД ЕД., В1аскуе11 ЗшеиИйс РиЬИсайоик, 1998), аиД АДуапсеД Ргасйса1 Огдашс Скет181гу, Ьу 1. ЬеоиагД, е! а1. (2^пД ЕДШои, СКС Рге88 1 994).

Пример 1. Синтез 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо [2,3-Д]пиримидин-6-карбонитрила.

8-Циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3Д]пиримидин-6-карбонитрил получали по следующей методике.

А. Этиловый эфир 4-циклопентиламино-2-метилсульфанилпиримидин-5-карбоновой кислоты (7).

Коммерчески доступный этиловый эфир 4-хлор-2-метилсульфанилпиримидин-5-карбоновой кислоты (6) (25 г, 107 ммоль) растворяли в ТГФ. Затем к реакционной смеси добавляли триэтиламин (32,6 г, 322 ммоль) и циклопентиламин (10 г, 117 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Выпавшие соли отфильтровывали от растворителя и отбрасывали. После этого собранный растворитель упаривали в вакууме, получая масло. Полученное масло растворяли в этилацетате, промывали раствором бикарбоната натрия, а затем сушили над Ыа₂8О₄. Осушитель отфильтровывали и выпаривали полученный растворитель в вакууме, получая 23,3 г продукта (7).

Ή ЯМР (300 МГц, СОС1₃), δ 8,60 (с, 1Н), 8,25 (уш.с, 1Н), 4,49-4,54 (м, 1Н), 4,30 (кв, 2Н), 2,52 (с, 3Н), 2,00-2,10 (м, 2Н), 1,50-1,79 (м, 6Н), 1,35 (т, 3Н).

В. (4-Циклопентиламино-2-метилсульфанилпиридин-5-ил)метанол (8).

Алюмогидрид лития (10 г, 35,5 ммоль) суспендировали в ТГФ в атмосфере азота и охлаждали сухим льдом. Этиловый эфир 4-циклопентиламино-2-метилсульфанилпиримидин-5-карбоновой кислоты (7) (2,02 г, 53,3 ммоль) растворяли в ТГФ и прибавляли по каплям к охлажденному раствору ЬАН, поддерживая температуру в процессе прибавления ниже -20°С. Затем реакционную смесь доводили до ком- 14 022527 натной температуры и перемешивали в течение 5 ч. После перемешивания реакционную смесь гасили, добавляя воду (5 мл), 15% ЫаОН (10 мл), а затем еще раз воду (15 мл). Выпавший белый осадок отфильтровывали и упаривали фильтрат в вакууме, получая продукт (8) в виде твердого вещества желтого цвета (7,2 г). Продукт (8) использовали без дополнительной очистки или характеризации.

С. 4-Циклопентиламино-2-метилсульфанилпиримидин-5-карбальдегид (9).

(4-Циклопентиламино-2-метилсульфанилпиридин-5-ил)метанол (8) (5 г, 2 0,8 ммоль) растворяли в хлороформе, в который добавляли МпО₂ (10,39 г, 119 ммоль). После этого реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Добавляли дополнительную порцию МпО₂ (2,7 г, 31,3 ммоль) и перемешивали реакционную смесь еще в течение 12 ч. МпО₂ удаляли фильтрованием через слой целита, который хорошо промывали хлороформом. Хлороформ выпаривали в вакууме, получая требуемый продукт (9) в виде густой жидкости (4,7 г), которая затвердевала при стоянии в течение некоторого времени.

Ή ЯМР (300 МГц, СБС1₃), δ 9,65 (с, 1Н), 8,60 (уш.с, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 4,49-4,54 (м, 1Н), 2,52 (с, 3Н), 2,01-2,12 (м, 2Н), 1,50-1,82 (м, 6Н).

Ό. 8-Циклопентил-2-(метилтио)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил (10).

Смесь 4-циклопентиламино-2-метилсульфанилпиримидин-5-карбальдегида (9) (1 г, 4,2 ммоль), 1,2 экв. цианоуксусной кислоты и каталитического количества бензиламина растворяли в уксусной кислоте и кипятили с обратным холодильником примерно в течение 6 ч. По завершении реакции по данным ТСХ реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и продукт выпадал из реакционной смеси. Дополнительное количество продукта выпадало из реакционной смеси при добавлении гексана. Полученный осадок выделяли, промывали насыщенным раствором ЫаНСО₃, водой, а затем сушили в вакууме. Полученный сырой продукт (10) перекристаллизовывали из 2-пропанола.

Е. 8-Циклопентил-2-(метилсульфинил)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил (11).

Раствор 8-циклопентил-2-(метилтио)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрила (10) (3,5 ммоль) и МСРВА (5,25 ммоль) в СН₂С1₂ перемешивали при комнатной температуре примерно в течение 12 ч. По завершении реакции реакционную смесь промывали насыщенным раствором ЫаНСО₃. Органический слой сушили над №-ь8О₄. отфильтровывали от осушителя и концентрировали, получая требуемый продукт (11), который использовали без дополнительной очистки.

- 15 022527

Р. 8-Циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3Д]ииримидин-6-карбонитрил (12).

Смесь 8-циклопентил-2-(метилсульфинил)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-Д]пиримидин-6-карбонитрила (11) (1,65 ммоль) и 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилина (2 ммоль) в толуоле перемешивали при 100°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали, а образовавшийся осадок выделяли фильтрованием. После этого осадок промывали толуолом и сушили, получая требуемый продукт (12).

Ή ЯМР (300 МГц, СБС1з), 8,55 (с, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,40-7,45 (м, 2Н), 6,91-6,99 (м, 2Н), 3,23-3,27 (м, 4Н), 2,63-2,66 (м, 4Н), 2,43 (с, 3Н), 2,21-2,30 (м, 2Н), 1,85 (уш.с, 4Н), 1,62 (уш.с, 2Н). Т.пл.: 290-292°С.

Примеры с 2 по 6.

Соединения 13-16, приведенные далее в табл. 1, получали, следуя общим методикам схем 1-5, примером которых является получение соединения (12). В табл. 1 включены также спектральные данные 'Н ЯМР и данные температуры плавления соединений 13-16.

Таблица 1

№ соед.	Соединение	Название соединения	Данные ЯМР и т.пл.
						8,55 (с, 1Н),
						7,98 (с, 1Н),
				7,43-7,48 (м.
		< 1	I			2Н) , 6,93-6,99
	НРГ \|			А	8-циклопентил-2-((4-	(м, 2Н), 5,82-
	X				морфолинофенил)ами-	5,89 (м, 1Н),
		/	А		но)-7-оксо-7, 8-	3,87-3,92 (м.
13	и	V	_/		дигидропиридо[2,3-	4Н), 3,15-3,22
	т				ά.] пиримидин - 6-	(м, 4Н) , 2,22-
					карбонитрил	2,31 (м, 2Н),
	[ 1					1,80-1,91 (м.
	''0^					4Н) , 1,59-1,68
						(м, 2Н) .
						Т.пл.: 294-29б°С
						8,60 (с, 1Н), 7,99 (с, 1Н), 6,83-6,84 (м, 2Н), 6,30-6,31
		о		8-циклопентил-2- ((3,5-
	(м, 2Н), 5,88-

	нм	-Их.	I		5,94 (м, 1Н),
			диметоксифенил)ами-
						3,82 (с, бН),
14	А		А		но)-7-ОКСО-7,8-	2,23-2,36 (м.
			\ /		дигидр опиридо[2,3-
			...У			2Н), 2,05-2,18
	I	I			<3]пиримидин-б-	(м, 2Н) , 1,83-
	СН₃	СНэ			карбонитрил	1,93 (м, 2Н),
						1,62-1,64 (м.
						2Н) .
						Т.пл.: 150-151°С

- 16 022527

Пример 7. Анализ цитотоксичности для 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8 -дигидропиридо [2,3-П] пиримидин-6 -карбо нитрила.

Клетки (1х10⁵) высевали в 6-луночные чашки и спустя 24 ч прибавляли 8-циклопентил-2-((4-(4метилпиперазин-1 -ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо [2,3-П]пиримидин-6-карбонитрил (12) в пяти разных концентрациях при двукратном разбавлении (1-100 мкМ). Общее число жизнеспособных клеток определяли через 96 ч непрерывной обработки при окрашивании трипановым синим и подсчете числа неокрашенных клеток (жизнеспособных), оставшихся в каждой лунке, при помощи гемоцитометра. Процентную долю оставшихся жизнеспособных клеток рассчитывали следующим образом:

число жизнеспособных клеток (обработанных соединением)/число жизнеспособных клеток (обработанных ДМСО)-100.

Определяли О1₅₀ (концентрацию лекарственного препарата, приводящую к 50% чистой потери ингибирования роста). Результаты представлены в табл. 2.

- 17 022527

Таблица 2

Клеточная линия	Тип опухоли	еъ» (мкМ)
К562	смь	0,5
пи145	Предстательной железы	0, Ί5
ВТ474	ЕгЬВ2+груди	0, 25
ЗК-ВН-З	ЕгЬВ2+груди	0, б
МСК-3	ЕК+груди	0, 15
ВТ20	Груди	0,1
ΜΏΑ-ΜΒ-468	Груди (трижды негативная; КВ негативная)	1,5
2138С	мсь	0,025
3ΒΑΝΤΑ-519	мсь	0,075
5К-ОУ-3	Яичников	0, 75
Ц87	Глиобластома	0,1
М1А-РаСа-2	Поджелудочной железы	0, 25
НСТ-15	Толстой кишки (повышенный ΜΌΗ)	0,4
СОЬО-205	Толстой кишки	0,2
НЕЬА	Шейки матки	0, Ί5
А54 9	ызсьс	0,2
Ы417	зсьс	0, 25
N87	Желудка (ЕгЬВ2+)	0,9
£Νυ-5	Желудка	0,2
3Νυ-398	Желудка	0,5
3114-449	Желудка	0, 75
5Νυ-4'75	Желудка	0,3
4266	Множественная миелома	0,2
НАЛ	В-клеточная лимфома	0, 25
συκκΔΤ	Т-клеточная лимфома	0, 15
ЕЬП-1	Колоректальная	0,1

5И480

Колоректальная

0, 1

Пример 8. Анализ ЛКК5 киназы.

нг Ηίδ-меченной ЛКК5 полной длины (1пуйго§еп РУ4127), протеинкиназы, разбавляли киназным буфером (25 мМ ΗΕΡΕδ рН 7,5, 10 мМ МдС1₂, 0,5 мМ ЕОТА, 0,5 мМ №цУО₄. 5 мМ β-глицерофосфата, 2,5 мМ ΌΤΤ, 0,01% тритона Х-100) и инкубировали с соединением из табл. 3 в указанной концентрации при комнатной температуре в течение 30 мин. После этого инициировали киназные реакции, добавляя 1 мкг (3,28 мкМ) СНК-тидного субстратного пептида (ирз1а1с 12-414), 1 мкМ АТФ и 10 мкКи γ³² Р-АТФ. Реакционные смеси инкубировали при 30°С в течение 10 мин.

Затем реакции останавливали, добавляя 3%-ную фосфорную кислоту. Затем 10 мкл аликвоты переносили на фильтрующий материал р30 подходящей площади. Фильтрующий материал оставляли сохнуть в течение 20 мин при комнатной температуре, а затем трижды промывали 75 мМ фосфорной кислоты и дважды метанолом. Фильтрующий материал затем сушили в течение 30 мин при комнатной температуре. Потом фильтрующий материал экспонировали на рентгеновскую пленку или считывали при помощи сцинтилляционного счетчика. Затем значения подсчетов сцинтилляции наносили в виде графика как функцию логарифма концентрации лекарственного препарата при помощи программного обеспечения Рг18ш 4 Огарй Раб, а значения 1С₅₀ определяли, нанося на график сигмоидальные нелинейные кривые регрессии с переменным наклоном.

Как показано в табл. 3, соединения примеров 1-6 значительно ингибируют киназную активность ЛКК5. В сравнительных примерах, в которых отсутствовала нитрильная функциональная группа соединений данного изобретения, была показана малая или отсутствие способности ингибировать ЛКК5.

- 18 022527

Таблица 3

Анализ на ингибирование ЛКК5

Соед. №	Соединение	1С₅₀ (нМ)
12	8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3- б]пиримидин-б-карбонитрил	27,3
15	8-циклопентил-7-оксо-2-((3,4,5- триметоксифенил) амино)-7,8-дигидропиридо[2, 3- б]пиримидин-б-карбонитрил	49, 8
16	8-циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3— б]пиримидин-б-карбонитрил	43, 41
13	8-циклопентил-2-((4-морфолинофенил)амино)-Ί- оксо-7,8-дигидропиридо[2,З-б]пиримидин-б- карбонитрил	75
14	8-циклопентил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)- 7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,З-б]пиримидин-б- карбонитрил	75
Сравн. прим. 1	8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)-б-(метилсульфонил)пиридо[2,3- б]пиримидин-7(8Н)-он	>10000
Сравн. прим. 2	б-((4-хлорфенил)сульфонил)-8-циклопентил-2- ((4-(4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)пиридо[2,3-б]пиримидин-7(8Н) - он	>10000
Сравн. прим. 3	б-((4-хлорфенил)сульфонил)-8-циклогексил-2- ((4-(4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)пиридо[2, З-б]пиримидин-7(8Н)- он	1000
Сравн. прим. 4	8-циклопентил-2-((3,4- диметоксифенил)амино)пиридо[2,З-б]пиримидин- 7(8Н)-он	>1000

Сравн.	8-циклопентил-2-((2,4-	>5000
прим. 5	диметоксифенил)амино)пиридо[2,З-б]пиримидин- 7(8Н)-он

Пример 9. Эффективность 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрила ίη νίνο в отношении рака толстой кишки человека.

Фрагменты Со1о-205 имплантировали самкам бестимусных голых мышей и выращивали до размера 150 мм³. Затем мышей лечили плацебо (η=10) или 100 мг/кг препарата гидрохлорида 8-циклопентил-2((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрила в стерильной воде (N=10) при помощи ВБ инъекции по следующей схеме: дни ОЭ 1-21, дни отмены 22 и 23, дни возобновления дозы 24-28. Одну мышь подвергали эвтаназии на 25 день по причине несвязанного с лекарственным препаратом перитонита. Определяли объем опухолей и наносили среднюю величину на график в зависимости от дня лечения. См. фиг. 1.

Пример 10. Сравнение ингибирования киназы 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрилом с ингибированием киназы ΡΌ0332991.

ΡΌ0332991 имеет структуру

- 19 022527

По данным национального института рака ΡΌ0332991 представляет собой перорально доступный циклинзависимый ингибитор киназы (СЭК) на основе пиридопиримидина с сильной антинеопластической активностью. В частности, ΡΌ-0332991 селективно ингибирует циклинзависимые киназы (в особенности СПк4/циклин Ό1 киназу), которая способна ингибировать фосфорилирование белка ретинобластомы (КЬ), что препятствует вступлению КЬ-положительных клеток опухоли в δ-фазу клеточного цикла (остановка на фазе 01). Это приводит к подавлению репликации ДНК и уменьшает пролиферацию клеток опухоли.

Соединения из табл. 4 тестировали на способность ингибировать киназную активность перечисленных протеинкиназ. Соединения тестировали в 5-дозовом режиме 1С₅₀ при 10-кратном серийном разбавлении, начиная с 10 мкМ. Стауроспорин, известный ингибитор протеинкиназы, тестировали в 5-дозовом режиме 1С₅₀ при 3-кратном серийном разбавлении, начиная с 20 мкМ. Реакции проводили в 10 мкМ АТФ.

Таблица 4

1С50 (нМ)

Киназа	РЭ0332991	8-циклопентил-2-((4~ (4-метилпиперазин-1- ил)фенил)амино)-7- оксо-7,8- дигидропиридо[2,3- ά]пиримидин-6- карбонитрил	Стауро- спорин
АВЫ	ΝΕ	75, 64	66, 37
АВ52/АК5	ΝΕ	91,57	21,58
АКК 5	3388,00	7, 85	<1, 0
С-КлЛ	>10000	407,50	28,47
с-МЕТ	ΝΕ	ΝΕ	378, 10
с-Згс	ΝΕ	93,01	1, 49
СЕК2/циклин А	5986, 00	97,32	<1, 0
СЕК2/циклин Е	>10000	769, 50	2, 13
С ЕК 3/циклин Е	ΝΕ	3219,00	10, 13

- 20 022527

0ϋΚ4/циклин	ϋΐ	7, 41	4, 00	22,14
0ϋΚ4/циклин	ϋ3	25, 81	21,23	47,22
2ϋΚ5/ρ25		5987,00	263, 70	1, 91
2ϋΚ5/ρ35		5928,00	181,50	1, 89
СЭКб/циклин	Β1	12,75	18,39	14,19
СЭКб/циклин	ϋ3	36, 48	38, 67	128,00
СЭК7/циклин Η/ΜΝΑΤ1		Νϋ	>10000	195, 80
С ϋΚ 9/циклин	к	351,60	27,10	7,52
СПК9/циклин	τι	2245,00	85, 36	12,55
ЕРНА1		Νϋ	37,13	55, 56
ЕРНА2		Νϋ	113,70	108,20
ΕρΗΒΙ		Νϋ	26, 74	49, 32
ЕрЬВ2/НЕК5		Νϋ	130, 30	50,48
ЕрЬВ4		Νϋ	120, 40	165,30
ТОЕЕ1		Νϋ	68,15	3, 44
ГСЕЕ2		Νϋ	54,79	1,70
тогвз		Νϋ	123, 60	6, 45
ΕΌΓΚ4		Νϋ	3548,00	104,60
РОЕ		>10000	112,20	<1, 0
ΠιΤΙΝΕΟΓΚΙ		>10000	94,14	4,32
ЕЬТЗ		324,20	13,57	<1, 0
ЕЬТ^ЫЕСГКЗ		>10000	63,51	4, 99
ЕМЗ		1990,00	1, 46	1, 14
ГКК/РТК5		Νϋ	574,70	51,44
ΡΥΝ		>10000	26, 59	2,26
ЬСК		>10000	50,41	2, 07
ЫМК1		Νϋ	70,84	3, 26
ъок/зткю		2443,00	180,90	4, 68
ϋΥΝ		>10000	68,53	<1, 0
ЬУЫВ		Νϋ	6645,00	27,33
ыьк		Νϋ	45,27	51,44
РАКЗ		Νϋ	1929,00	<1, 0
РОСЕКЬ		980,30	2, 64	<1, 0

РКСши	126, 50	142,10	1, 63
РКСпи/РККОЗ	60, 87	55,76	<1, 0
РКС2/РККС2	Νϋ	Νϋ	1, 46
ΕΙΡΚ2	Νϋ	40,75	138,50
31К2/ЗЫР1ЬК2	Νϋ	96, 79	33,78
3ΝΑΚΚ/ΝΠΑΚ2	8667,00	20,71	3, 08
ΤΑΟΚ1	2844,00	78, 68	<1, 0
ΤΑΟΚ2ΙΤΑ01	1781,00	69, 64	4, 41
ΤΒΚ1	Νϋ	71,78	<1, 0
Т£РЪК2	Νϋ	62,28	17780,00
ττκ	696, 60	155, 80	71,49
ΥΕ3/ΥΕ31	3675,00	38,08	<1, 0
ΖΑΚ/МЪТК	Νϋ	29, 49	19480,00

ЫИ=не делали

Из табл. 4 видно, что 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил обладает значимо различным профилем ингибирования протеинкиназы по сравнению с ΡΌ0332991. Соединение данного изобретения является полиспецифиче- 21 022527 ским ингибитором протеинкиназы, представляя собой ингибитор более широкого ряда протеинкиназ, чем ΡΌ0332991.

Все цитированные в настоящем описании ссылки включены ссылкой во всей полноте. Настоящее изобретение можно осуществить в других конкретных формах, не выходя из его духа или существенных признаков, и, соответственно, следует обращаться не к предшествующему описанию, а к прилагаемой формуле изобретения, определяющей рамки данного изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль где К¹ представляет собой (С1-С₆)алкил или (С₃-С₈)циклоалкил,

К² представляет собой 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилинил, 4-морфолиноанилинил или

К³ в каждом случае независимо представляет собой (С1-С₆)алкокси и

К⁴ представляет собой Н или (С1-С₆)алкокси.
2. Соединение по п.1, где К² представляет собой 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилинил.
3. Соединение по п.2, где К¹ представляет собой (С₃-С₈)циклоалкил.
4. Соединение по п.3, где К¹ представляет собой циклопентил или циклогексил.
5. Соединение по п.1, где К² представляет собой
6. Соединение по п.5, где К¹ представляет собой цикло пентил.
7. Соединение по п.6, где К³ в каждом случае представляет собой метокси.
8. Соединение по п.7, где К⁴ представляет собой водород или метокси.
9. Соединение по п.1, где К² представляет собой 4-морфолиноанилинил.
10. Соединение по п.9, где К¹ представляет собой циклопентил.
11. Соединение по п.1, где соединение выбирают из группы, включающей 8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3й] пиримидин-6 -карбонитрил,

8-циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3й] пиримидин-6 -карбонитрил,

8-циклопентил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6карбонитрил,

8-циклопентил-7-оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6карбонитрил,

8-циклопентил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6карбонитрил и их фармацевтически приемлемые соли.
12. Соединение по п.11, где соединение представляет собой 8-циклопентил-2-((4-(4- 22 022527 метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил или его фармацевтически приемлемую соль.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и соединение по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемую соль.
14. Фармацевтическая композиция по п.13, где соединение по п.1 выбирают из группы, включающей

8-циклопентил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил,

8-циклогексил-2-((4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6-карбонитрил,

8-циклопентил-2-((3,5-диметоксифенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-б]пиримидин-6карбонитрил,

8-циклопентил-7-оксо-2-((3,4,5-триметоксифенил)амино)-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6карбонитрил,

8-циклопентил-2-((4-морфолинофенил)амино)-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-й]пиримидин-6-карбонитрил и их фармацевтически приемлемые соли.
15. Способ лечения пролиферативного нарушения у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.
16. Способ по п.15, где пролиферативное нарушение выбирают из рака, гемангиоматоза новорожденных, вторично-прогрессирующего рассеянного склероза, атеросклероза, хронического прогрессирующего миелодегенеративного заболевания, нейрофиброматоза, ганглионейроматоза, образования келоидов, костной болезни Педжета, фиброкистозной мастопатии, фибромы матки, болезни Пейрони, болезни Дюпюитрена, рестеноза, доброкачественной опухоли груди, доброкачественной гиперплазии предстательной железы, Х-сцепленного лимфоклеточного пролиферативного нарушения, посттрансплантационного лимфоклеточного пролиферативного нарушения, дегенерации желтого пятна, ретинопатии, пролиферативной витреопатии и неракового лимфоклеточного пролиферативного нарушения.
17. Способ по п.16, где рак выбирают из группы, включающей рак яичника, рак шейки матки, рак груди, рак предстательной железы, рак яичка, рак легких, рак почки, колоректальный рак, рак кожи, рак мозга и лейкоз.
18. Способ по п.17, где лейкоз выбирают из группы, включающей острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфоидный лейкоз и хронический лимфоидный лейкоз.
19. Способ индуцирования апоптоза раковых клеток у индивидуума, страдающего раковым заболеванием, включающий введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли.
20. Способ по п.19, где раковые клетки представляют собой клетки опухоли.
21. Способ по п.20, где клетки опухоли выбирают из группы, включающей клетки опухоли яичника, шейки матки, матки, влагалища, груди, предстательной железы, яичка, легких, почки, прямой и ободочной кишки, желудка, надпочечников, полости рта, пищевода, печени, желчного пузыря, кости, лимфатической системы, глаза, кожи и мозга.
22. Способ ингибирования киназной активности у млекопитающего, нуждающегося в подобном лечении, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.112 или его фармацевтически приемлемой соли.
23. Применение соединения по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемой соли в медицине для лечения пролиферативного нарушения.
24. Способ получения соединения по п.1, включающий обработку соединения формулы II амином, выбранным из группы, включающей 4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилин, 4-морфолиноанилин и

- 23 022527 где К¹ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₃-С₈)циклоалкил,

К³ в каждом случае независимо представляет собой (С1-С6)алкокси, а К⁴ представляет собой Н или (С1-С₆)алкокси, и получение соединения по п. 1 или его фармацевтически приемлемой соли.
25. Способ по п.24, где соединение формулы II получают, вводя во взаимодействие соединение формулы III с окислителем.
26. Способ по п.25, где соединение формулы III получают, вводя во взаимодействие соединение формулы IV с 2-цианоуксусной кислотой в присутствии бензиламина и уксусной кислоты.
27. Способ по п.26, где соединение формулы IV получают в результате селективного окисления соединения формулы V
28. Способ по п.27, где соединение формулы V получают восстановлением соединения формулы VI
29. Способ по п.28, где соединение формулы VI получают, вводя во взаимодействие соединение формулы VII

- 24 022527 с амином формулы ΝΗ₂Κ?, где К¹ определен в п.24.