EA019372B1 - Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способ их обнаружения - Google Patents

Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способ их обнаружения Download PDF

Info

Publication number
EA019372B1
EA019372B1 EA201100145A EA201100145A EA019372B1 EA 019372 B1 EA019372 B1 EA 019372B1 EA 201100145 A EA201100145 A EA 201100145A EA 201100145 A EA201100145 A EA 201100145A EA 019372 B1 EA019372 B1 EA 019372B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
plants
alkyl
stress
group
compounds
Prior art date
Application number
EA201100145A
Other languages
English (en)
Other versions
EA019372B9 (ru
EA201100145A1 (ru
Inventor
Арно Шульц
Клаус Бартш
Хансйорг Крэмер
Мартин Хиллс
Эрвин Хакер
Крис Розингер
Original Assignee
Байер Кропсайенс Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Байер Кропсайенс Аг filed Critical Байер Кропсайенс Аг
Publication of EA201100145A1 publication Critical patent/EA201100145A1/ru
Publication of EA019372B1 publication Critical patent/EA019372B1/ru
Publication of EA019372B9 publication Critical patent/EA019372B9/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H3/00—Processes for modifying phenotypes, e.g. symbiosis with bacteria
    • A01H3/04—Processes for modifying phenotypes, e.g. symbiosis with bacteria by treatment with chemicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/02—Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/04—Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
    • A01N25/32—Ingredients for reducing the noxious effect of the active substances to organisms other than pests, e.g. toxicity reducing compositions, self-destructing compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/18—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing the group —CO—N<, e.g. carboxylic acid amides or imides; Thio analogues thereof
    • A01N37/28—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing the group —CO—N<, e.g. carboxylic acid amides or imides; Thio analogues thereof containing the group; Thio analogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N41/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a sulfur atom bound to a hetero atom
    • A01N41/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a sulfur atom bound to a hetero atom containing a sulfur-to-oxygen double bond
    • A01N41/04—Sulfonic acids; Derivatives thereof
    • A01N41/06—Sulfonic acid amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/48—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/56—1,2-Diazoles; Hydrogenated 1,2-diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/72—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
    • A01N43/80—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms five-membered rings with one nitrogen atom and either one oxygen atom or one sulfur atom in positions 1,2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N61/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing substances of unknown or undetermined composition, e.g. substances characterised only by the mode of action
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Cultivation Of Plants (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способам обнаружения соединений, которые повышают защиту растений к абиотическим стрессам, действующим на эти растения, таким как, например, температура (холод, мороз или жара), влажность (сухость, засуха или аноксия) или химическая нагрузка (например, недостаток или избыток минеральных солей, тяжелых металлов, газообразных ядов), путем повышения экспрессии содержащегося в растениях протеина. Изобретение также относится к использованию этих соединений для повышения защиты растений к абиотическим стрессам.

Description

Изобретение относится к способам обнаружения соединений, которые повышают защиту растений к абиотическим стрессам, действующим на эти растения, таких как, например, температура (холод, мороз или жара), влажность (сухость, засуха или аноксия) или химическая нагрузка (например, недостаток или избыток минеральных солей, тяжелых металлов, газообразных ядов), путем повышения экспрессии содержащегося в растениях протеина, а также к использованию этих соединений для повышения защиты растений к абиотическим стрессам.
Известно, что растения реагируют на природные условия стресса, такие как, например, холод, жара, сухость, ранение, патогенное поражение (вирусами, бактериями, грибком, насекомыми) и т.д., а также на гербициды с помощью специфических или неспецифических защитных механизмов |РПап/спЬюс11С1шс. 8. 393-462, 8рес1гит Акабетщскег Уег1ад, Не1бе1Ьегд, Вегйп, Ох&гб, Напк Не1б!, 1996; Вюскет1к!гу апб Мо1еси1аг Вю1оду οί Р1ап!к, 8. 1102-1203, Атепсап 8оае1у οί Р1ап1 Ркукю1од1к!к, ВоскуШе, Магу1апб, ебк Вискапап, Огшккет, 1опек, 2000].
Известны многочисленные протеины и кодированные ими гены в растениях, которые участвуют в защитных реакциях от абиотического стресса (например, холода, жары, сухости, соли). Они частично входят в состав цепей, воспринимающих сигналы (например, транскрипционные факторы, киназы, фосфатазы), или вызывают физиологическую реакцию растительной клетки (например, перенос ионов, дегазацию реактивного вида кислорода). К генам сигнальных цепей относятся абиотические стрессовые реакции и другие транскрипционные факторы классов ЭРЕВ и СВЕ (1ад1о-Ойокеп е! а1., 1998, 8с1епсе 280: 104-106). В реакции на солевой стресс участвуют фосфатазы типа АТРК и МР2С. Кроме того, солевой стресс часто активизирует биосинтез осмолитов, таких как пролин или сукроза. Здесь участвует, например, сукроза-синтаза и переносчик пролина (Накедата е! а1., 2000, Аппи Реу Р1ап! РИу81о1 Р1ап! Мо1 Вю1 51: 463-499). Для защиты растений от стресса, вызванного холодом и сухостью, частично используются подобные молекулярные механизмы. Известна аккумуляция так называемых протеинов позднего эмбриогенеза (ЬЕА-протеинов), к которым принадлежат, как важный класс, дегидрины (1пдгат апб Вайе1к, 1996, Аппи Веу Р1ап! Ркукю1 Р1ап! Мо1 Вю1 47: 277-403, С1оке, 1997, Рку8ю1 Р1ап! 100: 291-296). При этом речь идет о шапероне, который стабилизирует пузырьки, протеины и мембранные структуры в растении, подверженном стрессу (Вгау, 1993, Р1ап! РНу81о1 103: 1035-1040). Кроме того, часто происходит индукция альдегид-дейдрогеназы, которая при окислительном стрессе дегазирует возникающий реактивный вид кислорода (ВО8) (Ейск е! а1., 2005, Р1ап! Мо1 Вю1 57: 315-332). Факторы теплового удара (Н8Е) и протеины теплового удара (Н8Р) активизируются при тепловом стрессе и играют здесь такую же роль шаперонов, как дегидрины в стрессе, вызванном холодом и сухостью (Уи е! а1., 2005, Мо1 Се11к 19: 328-333).
Большинство описанных молекулярных механизмов активизируются через индукцию генной экспрессии. Вследствие этого появляется интересная возможность охарактеризовать специфическую реакцию на стресс растений с помощью транскрипционного анализа, например, с помощью профилирования генной экспрессии (СЕР) с помощью микрочипов ДНК или сопоставимой техники (Вепкшк е! а1., 2005, Оепоте 48: 598-605, Скеопд е! а1., 2002, Р1ап! Ркукю1оду 129: 661-677). В этих способах можно заготавливать образцы генной экспрессии специфической реакции на стресс и сравнивать их друг с другом.
Далее известно, что химические вещества могут повышать устойчивость растений к абиотическому стрессу. Такого рода вещества при этом вносятся или через протраву для семян, или разбрызгиванием на листья, или через обработку земли. Так, описано повышение абиотической устойчивости культурных растений к стрессу через обработку источниками Системной Приобретенной Устойчивости (8АВ) или производными абсцизиновой кислоты (8скабшд апб \¥ег ^0-200028055, АЬгатк апб Оик!а, И8-5201931, СкигскШ е! а1., 1998, Р1ап! Сго\\1к Веди1 25: 35-45). Также при применении фунгицидов, особенно из группы стробилуринов, наблюдается похожий эффект, который также часто проходит с повышением урожайности (ОгаЬег е! а1., ΌΕ-3534948, ВагИей е! а1., 2002, Рек! Мапад 8е1 60: 309).
Далее описывается влияние регуляторов роста на устойчивость к стрессу культурных растений (Моткоп апб Апбге^к, 1992, 1 Р1ап! Сго\\1к Веди1 11: 113-117, ВЭ-259027). При осмотическом стрессе защитное действие производится путем введения осмолитов, например, глицинбетаина, или их биохимических первых ступеней, например, производных холина (Скеп е! а1., 2000, Р1ап! Се11 Епуиоп 23: 609-618, Вегдтапп е! а1., ΌΕ-4103253). Также уже описано действие антиоксидантов, таких как нафтол и ксантин, на повышение устойчивости к абиотическому стрессу растений (Вегдтапп е! а1., ΌΌ-277832, Вегдтапп е! а1., ΌΌ-277835). Молекулярные причины антистрессового воздействия этих веществ в мире еще неизвестны.
Итак, известно, что растения имеют в своем распоряжении некоторые эндогенные механизмы реакции, которые могут оказывать эффективную защиту от различных вредителей и/или естественного абиотического стресса. Прогноз того, какие защитные реакции могут быть вызваны или смоделированы путем применения активных ингредиентов, до сих пор еще неизвестен.
Таким образом, существует потребность в способе направленного обнаружения молекулярных активных ингредиентов растительного эндогенного защитного механизма от абиотического стресса (как, например, жара, холод, сухость, засоленность, а также нагрузка кислотами и основаниями), вследствие чего могут быть найдены активные ингредиенты нового типа, идентифицированы новые свойства известных, но иначе действующих активных ингредиентов, или же могут быть оптимизированы уже из
- 1 019372 вестные молекулы или ведущие структуры при применении в качестве индукторов растительного эндогенного защитного механизма от источников абиотического стресса.
Определение используемых далее понятий
Понятие В1ай-анализ (В1а§! = Ваис Ьоеа1 А11дптеп! 8еагсй Тоо1 (базовый локальный регулирующий поисковый инструмент), используемое здесь, описывает применение подходящей компьютерной программы для классификации и нахождения потенциальных гомологических последовательностей (А1!8ейи1 е! а1., 1. Мо1. В1о1. 1990, 215: 403-410), причем сравнение (регулировка) между искомой последовательностью (запрашиваемой последовательностью) и всеми последовательностями одного или нескольких банков данных при получении желаемого совпадения производится в виде критериев значительности (функции нанесения отметок) (В. Ваийи!, ВютГогтаОк. 8 38-107, Уег1ад У11еу-УСН Уег1ад ОтЬН, Уешйет, 2001 ).
Понятие кДНК (комплементарная ДНК), используемое здесь, описывает целую линию ДНК, которая является дополнительной к РНК и через которую синтезируется энзиматическая обратная транскрипция ίη уйго. КДНК может или соответствовать общей длине РНК, или же представлять часть последовательности РНК, служащей в качестве матрицы.
Понятие кластер-анализ, используемое здесь, означает обобщение установленных отдельных данных с помощью разработанных для этого компьютерных программ, причем группы генов, которые кодируются для протеинов с подобной функцией, или же гены с подобным примером экспрессии представляются обобщенно. Этим самым достигается иерархическая минимизация сложных образцов данных, которые могут быть представлены в виде дендрограмм. Кластер-анализ делает возможным классифицированный подсчет полученного набора данных, который явно превосходит одно только накопление не связанных ни с чем данных.
Понятиями ДНК-чип и микрочип ДНК, которые здесь используются как синонимы, обозначаются носители, которые состоят из материала основы, например, из стекла или нейлона, на материале основы которых фиксируются фрагменты ДНК, причем получение ДНК может достигаться, например, при помощи а) фотолитографического способа (ДНК будет синтезироваться непосредственно на носителе-решетке), Ь) способа нанесения микропятен (синтезированные внешне олигонуклеиды или РСВпродукты наносятся на носитель и ковалентно связываются) или с) способа микрораспыления (синтезированные внешне олигонуклеиды или РСВ-продукты разбрызгиваются на носитель бесконтактно с помощью пистолета для распыления чернильной струи) (В. Ваийи!, Вю1пГогтайк, 8 197-199, Уег1ад УйеуУСН Уег1ад ОтЬН, ХУетНет!, 2001). ДНК-чип, который представляет геномную последовательность организма, обозначается как геномный ДНК-чип. Оценка с помощью этого ДНК-чипа полученных значений измерения обозначается как ДНК-чип-анализ.
Понятие гибридизация ДНК-чипа, которое здесь используется, означает соединение попарно двух отдельных линий комплементарных молекул нуклеиновой кислоты, причем основной в паре молекулярный партнер локализуется как ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) на ДНК-чипе в предпочтительно ковалентно связанной форме, в то время как другой представлен в виде РНК (рибонуклеиновой кислоты) или соответствующей ей кДНК (комплементарной ДНК) в растворе. Гибридизация связанных и несвязанных нуклеиновых кислот достигается на ДНК-чипе в водяном буферном растворе, в данном случае при дополнительных денатурированных условиях, например, в присутствии диметилсульфоксида при температуре 30-80°С, особенно предпочтительно при 45°С, в течение 10-20 ч, предпочтительно в течение 14-18 ч, особенно предпочтительно в течение 16 ч, при постоянном движении. Условия гибридизации могут быть постоянно выполнены, например, в печи для гибридизации. Движение в таких печах для гибридизации стандартно составляет 60 об./мин (оборотов в минуту).
Обозначенная понятием Е8Т-последовательность (свободный конец экспрессивной последовательности) последовательность нуклеиновых кислот, которое здесь используется, означает короткую последовательность из 200-500 оснований или пар оснований.
Используемые как синонимы понятия образец экспрессии, образец индукции, а также профиль экспрессии, которые здесь используются, описывают временно дифференцированную и/или тканевоспецифическую экспрессию растительной мРНК, причем образец получается непосредственно с помощью созданной интенсивности сигнала гибридизации из растения, содержащего РНК или ее соответствующую кДНК, с помощью технологии ДНК-чипа. Измеренные значения индукции получаются прямым расчетом с соответствующими сигналами, которые через использование синонимичных чипов при гибридизации получаются с необработанным/подверженным стрессу контрольным растением.
Понятие состояние экспрессии, которое достигается через произведенное профилирование генной экспрессии, используемое здесь, описывает полностью охваченную транскрипционную активность клеточного гена, которая измеряется с помощью ДНК-чипа.
Понятие общая РНК, которое здесь используется, описывает на основе применяемых способов разъяснения возможное представительство различных растительных эндогенных групп РНК, которые могут существовать в растительной клетке, например, цитоплазматических рРНК (рибосомных РНК), цитоплазматических тРНК (транспортных РНК), цитоплазматических мРНК (матричных РНК), а также соответствующих ядерных предшественников, хтРНК (хлоропластидных РНК) и мтРНК (митохондри
- 2 019372 альных РНК), которые охватывают также молекулы РНК, которые могут принадлежать к экзогенным организмам, как например, вирусам или паразитирующим бактериям и грибкам.
Понятие полезные растения, используемое здесь, обозначает культурные растения, которые выращиваются как растения для получения продуктов питания, кормов или для технических целей.
Понятие защитное средство, которое здесь используется, обозначает химическое соединение, не эндогенного растительного происхождения, которое устраняет или сокращает фитотоксичные свойства пестицидов, действующие на полезные растения, без существенного уменьшения воздействия пестицидов на организмы вредителей, например сорняков, бактерий, вирусов и грибков. Защитные средства, которые наряду с их известной прямой функцией способствуют также повышению устойчивости к абиотическим стрессам, выбираются преимущественно из нижеследующей определенной группы, причем выбор может происходить различным образом в зависимости от абиотического стресса, и использование только одного отдельного защитного средства или нескольких защитных средств может происходить из одной и той же или различных групп:
а) Соединений формулы (Ι)-(ΙΙΙ)
где символы и индексы имеют следующие значения: п' - натуральные числа от 0 до 5, предпочтительно от 0 до 3; Т - (С1 или С2)-алкандиильная цепь, незамещенная или замещенная одним или двумя (С1-С4) алкиловыми остатками или [(С1-С3)алкокси]карбонилом;
- незамещенный или замещенный двухвалентный гетероциклический остаток из группы частично ненасыщенных или ароматических гетероциклов с 5 кольцами с 1-3 атомами гетерокольца типа N или О, причем по меньшей мере один атом N и не более одного атома О содержатся в кольце, предпочтительно остаток из группы (\У1)-(\У4)
т' - 0 или 1 ;
Я17, Я19 - одинаковые или разные галогены, (С1-С4алкил, (С1-С4)алкокси, нитро или (С1С4)галоалкил;
20 24 24 24 25
Я , Я - одинаковые или разные ОЯ , 8Я или NЯ Я или насыщенный или ненасыщенный 3-7членный гетероцикл по меньшей мере с одним атомом N и до 3 гетероатомов, предпочтительно из группы О и 8, который через атом N связан с карбонильной группой в (II) или (III) и является незамещенным или замещен через остаток из группы (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси или при необходимости - замещенный фенил, предпочтительно через остаток формулы ОЯ , ЯНЯ или ^СН3)2, особенно формулы ОЯ ;
Я24 - водород или незамещенный или замещенный алифатический углеводородный остаток, предпочтительно в целом с 1-18 атомами С;
Я25 - водород, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или замещенный или незамещенный фенил;
Ях - Н, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил, (С1-С4)алкокси(С1-С8)алкил, циано или СООЯ26, где Я26 - водород, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил, (С1-С4)алкокси-(С1-С4)алкил, (С1-С6)гидроксиалкил, (С3С12)циклоалкил или Тг1-(С1-С4)-алкилсилил;
28 29
Я , Я , Я - одинаковые или разные водород, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил, (С3-С12)циклоалкил или замещенный или незамещенный фенил;
Я21 - (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С2-С4)алкенил, (С2-С4)галоалкенил, (С3-С7)циклоалкил, предпочтительно дихлорметил;
Я22, Я23 - одинаковые или разные водород, (С1-С4)алкил, (С2-С4)алкенил, (С2-С4)алкинил, (С1С4)галоалкил, (С2-С4)галоалкенил, (С1-С4)алкилкарбамоил-(С1-С4)алкил, (С2-С4)алкенилкарбамоил-(С1С4)алкил, (С1-С4)алкокси-(С1-С4)алкил, диоксоланил-(С1-С4)-алкил, тиазолил, фурил, фурилалкил, тиенил, пиперидил, замещенный или незамещенный фенил, или
Я22 и Я23 связаны вместе одним замещенным или незамещенным гетероциклическим кольцом, предпочтительно оксазолидин-, тиазолидин-, пиперидин-, морфолин-, гексагидропиримидин- или бензоксазин-кольцом;
Ь) одно или несколько соединений из группы:
1,8-ангидрид нафталевой кислоты, метил-дифенилметоксиацетат,
-(2-хлорбензил)-3 -(1 -метил-1 -фенилэтил)мочевина (кумилурон), О,О-диэтил 8-2-этилтиоэтил фосфордитиоат (дисульфотон),
- 3 019372
4-хлорфенил-метилкарбамат (мефенат),
О,О-диэтил-О-фенилфосфоротиоат (диэтолат), 4-карбокси-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран-4-уксусная кислота (СЬ-304415, СА8-Яедпо: 31541-57-8), цианометоксиимино(фенил)ацетонитрил (циометринил),
1,3-диоксолан-2-илметоксиимино (фенил)ацетонитрил (оксабетринил), 4'-хлор-2,2,2-трифторацетофенон-О-1,3-диоксолан-2-илметилоксим (флуксофеним),
4.6- дихлор-2-фенилпиримидин (фенхлорим), бензил-2-хлор-4-трифторметил-1,3-тиазол-5-карбоксилат (флуразол),
2-дихлорметил-2 -метил-1,3 -диоксолан (МС-191),
Ы-(4-метилфенил)-М'-( 1 -метил-1 -фенилэтил)мочевина (димрон), (2,4-дихлорфенокси) уксусная кислота (2,4-Ό), (4-хлорфеиокси)уксусная кислота, (Я,8)-2-(4-хлор-о-толилокси)пропионовая кислота (мекопроп),
4-(2,4-дихлорфенокси) масляная кислота (2,4-ΌΒ), (4-хлор-о-толилокси)уксусная кислота (МСРА), 4-(4-хлор-о-толилокси) масляная кислота,
4-(4-хлорфенилокси) масляная кислота,
3.6- дихлор-2-метоксибензольная кислота (дикамба),
1-(этоксикарбонил)этил 3,6-дихлор-2-метоксибензоат (лактидихлор) а также их соли и эфиры, предпочтительно (С1-С8);
с) Ν-ацилсульфонамиды формулы (IV) и их соли
где
Я30 - водород, связанный с углеводородным остатком, углеводородным оксиостатком, углеводородным тиоостатком или гетероциклилостатком предпочтительно через атом С, причем любой из последних названных 4 остатков является незамещенным или замещен одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, формилов, карбонамидов, сульфонамидов и остатков формулы -Ζ''-Я'1, причем любая углеводородная часть имеет от 1 до 20 атомов, а остаток Я30, содержащий С, включая заместители, имеет предпочтительно от 1 до 30 атомов С;
Я31 - водород или (С1-С4)-алкил, предпочтительно водород, или
Я30 и Я31 вместе с группой формулы -СО-Ν- остатка насыщенного или ненасыщенного 3-8-членного кольца;
Я32 - одинаковые или разные галогены, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, формил, СОNΗ2, 8О2НН2 или остаток формулы -ΖΙ:-ΚΙ:ι;
Я33 - водород или (С1-С4)алкил, предпочтительно Н;
Я34 - одинаковые или разные галогены, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, СНО, СОNН2, 8О2НН2 или остаток формулы ^С-ЯС;
Яа - углеводородный остаток или гетероциклил-остаток, причем каждый из двух названных последним остатков незамещенный или замещен одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, гидрокси, моно- и ди-[(С1-С4)алкил]амино, или алкиловый остаток, в котором несколько, предпочтительно 2 или 3, не смежных СН2-групп заменены соответственно атомом кислорода;
Яь, ЯС - одинаковые или разные углеводородные остатки или гетероциклилостаток, причем каждый из двух названных последним остатков незамещенный или замещен одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, гидрокси, фосфорил, галоген- моно- и ди-[(С1-С4)алкил]амино, или алкильный остаток, в котором несколько, предпочтительно 2 или 3, не смежных СН2-групп заменены соответственно атомом кислорода;
Ζ - двухвалентная группа формулы -О-, -8-, -СО-, -С8-, -СО-О-, -СО-8-, -О-СО-, -8-СО-, -8О-, -8О2-, -ЯЯ*-, -СО-КЯ*-, -ЫЯ*-СО-, -8О2-NЯ*- или -ЫЯ*-8О2-, причем данная справа связь каждой двухвалентной группы является связью к остатку Я4 и при этом Я* в названных последними 5 остатках означает не зависимые друг от друга соответственно Н, (С1-С4)-О-алкил или гало-(С1-С4)алкил;
ΖΙ:ι, Ζι: - независимая друг от друга прямая связь или двухвалентная группа формулы -О-, -8-, -СО-, -С8-, -СО-О-, -СО-8-, -О-СО-, -8-СО-, -8О-, -8О2-, -ΝΚ*-, -8Θ2-ΝΚ*-, -ΝΚ*-8Θ2-, -ϋΘ-ΝΚ*- или -ΝΚ*СО-, причем данная справа связь каждой двухвалентной группы является связью к остатку Яь или ЯС и при этом Я* в названных последними 5 остатках означает независимые друг от друга соответственно Н,
- 4 019372 (С1-С4)-О-алкил или гало-(С1-С4)алкил;
η - целое число от 0 до 4, предпочтительно 0, 1 или 2, особенно 0 или 1, и т - целое число от 0 до 5, предпочтительно 0, 1, 2 или 3, особенно 0, 1 или 2;
ά) амид ацилсульфамоилбензольной кислоты общей формулы (V), при необходимости также в форме соли
где
X3 - СН или Ν;
Я35 - водород, гетероциклил или углеводородный остаток, причем оба названными последними остатка замещаются одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, СНО, ΟΟΝΗ2. 8Ο2ΝΗ2 и Ζ''-Я';
Я36 - водород, гидрокси, (С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С2-С6)алкинил, (С1-С6)алкокси, (С2С6)алкенилокси, причем пять названных последними остатков при необходимости замещаются одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, гидрокси, (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси и (С1-С4)алкилтио, или
Я35 и Я36 вместе с несущим атом азота на насыщенном или ненасыщенном 3-8-членном кольце;
Я37 - галоген, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, СНО, ΕΟΝΗ^, 8Ο2ΝΗ2 или ΖΙ:-Κ.Ι:ι;
Я38 - водород, (С1-С4)алкил, (С2-С4)алкенил или (С2-С4)алкинил;
Я39 - галоген, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, фосфорил, СНО, №ΝΗ2, 8Ο2ΝΗ2 или Ζ°-Κ°;
Яа - (С2-С20)алкильный остаток, в котором углеводородная цепочка одно- или многократно прерывается атомом кислорода, гетероциклил или углеводородный остаток, причем два названных последними остатка при необходимости замещаются одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, гидрокси, карбокси, моно- и ди-[(С1-С4)алкил]амино; Яь, Яс одинаковый или разный остаток (С2-С20)алкил, в котором углеводородная цепочка одно- или многократно прерывается атомом кислорода, гетероциклил или углеводородный остаток, причем два названных последними остатка в данном случае замещаются одним или несколькими одинаковыми или разными остатками из группы галогенов, циаио, нитро, амино, гидрокси, фосфорил, (С1-С4)галоалкокси, моно- и ди- [(С1 -С4)алкил] амино;
Ζ - двухвалентная единица из группы О, 8, СО, С8, С(О)О, С(О)8, 8Ο, 8Ο2, ΝΕά, С(Ο)NЯά или 8Ο;\ΙΓ;
ΖΙ:ι, Ζι: - одинаковая или разная прямая связь или двухвалентная единица из группы О, 8, СΟ, С8, ϋ(Ο)Ο, ΟΟ)8, 8Ο, 8Ο2, NЯά, 8ΟΛΊΓ или С(С))\Я;;
Я1 - водород, (С1-С4)алкил или (С1-С4)галоалкил;
η - целое число от 0 до 4, и т - в случае, когда X означает СН, целое число от 0 до 5, и в случае, когда X означает Ν, целое число от 0 до 4.
е) Соединения типа амид ацилсульфамоилбензольной кислоты, например, нижеследующей формулы (VI), которые, например, известны из ΧΥΟ 99/16744,
сульфонамид),
ЭЭ 71 ЭЭ 71
Я = циклопропил и Я = 5-С1 - это (83-2), Я = этил и Я = Н - это (83-3), Я = изоциклопропил и Я22= 5-С1 - это (83-4) и Я21 = изопропил и Я22 = Н - это (83-5);
I) Соединения типа Ν-ацилсульфамоилфенилмочевина формулы (VII), которые известны, например, из ЕР-А-365484
РГ
где А для остатка состоит из групп
- 5 019372
или
К“ и К.11, независимые друг от друга, означают водород, С1-С8-алкил, С3-С8-циклоалкил, С3-С6алкенил, С3-С6-алкинил,
или через С1-С4алкокси или
замещенные С1-С4-алкокси, или
К“ и К1 совместно означают С4-С6-алкиленовый мостик или С4-С6-алкиленовый мостик, прерываемый через кислород, серу, 80, 8О2, ΝΗ или -Ы(С1-С4-алкил);
Κγ означает водород или С1-С4-алкил,
Ка и Кь означают независимо друг от друга водород, галогены, циан, нитро, трифторметил, С1-С4алкил, С1-С4-алкокси, С1-С4-алкилтио, С1-С4-алкилсульфинил, С1-С4-алкилсульфонил, -СООК·1, -ΟΟΝΚκ™, -СОКп, -ΞΟ^νΚκ™ или -0802-С1-С4-алкил, или Ка и Кь совместно означают С3-С4алкиленовый мостик, который может быть замещен галогеном или С1-С4-алкилом, или С3-С4-алкиленовй мостик, который может быть замещен галогеном или С1-С4-алкилом, или С4-алкадиениленовый мостик, который может быть замещен галогеном или С1-С4-алкилом, и
К9 и Кь означают независимо друг от друга водород, галогены, С1-С4-алкил, трифторметил, метокси, метилтио или -СООК1, причем
Кс означает водород, галогены, С1-С4-алкил или метокси,
К6 означает водород, галогены, нитро, С1-С4-алкил, С1-С4-алкокси, С1-С4-алкилтио, С1-С4алкилсульфинил, С1-С4-алькилсульфонил, -СООК-· или -ΟΟΝΚκ™,
Кс означает водород, галогены, С1-С4-алкил, -СООК-ζ трифторметил или метокси, или К6 и Кс совместно означают С3-С4-алкиленовый мостик,
Кг означает водород, галогены или С1-С4-алкил,
Кх и К означают независимо друг от друга водород, галогены, С1-С4-алкил, С1-С4-алкокси, С1-С4алкилтио, -СООК/ трифторметил, нитро или циан,
К Кк и Кт означают независимо друг от друга водород или С1-С4-алкил,
Кк и Кт совместно означают С4-С6-алкиленовый мостик или С4-С6-алкиленовый мостик, прерываемый через кислород, ΝΗ или -К(С1-С4-алкил)-, и
Кп обозначает С1-С4-алкил, фенил или фенил, замещаемый через галоген, С1-С4-алкил, метокси, нитро или трифторметил, предпочтительно
1-[4-(№2-метоксибензоилсульфамоил] -3 -метилмочевина,
1-[4-(Ν-2- метоксибензоилсульфамоил)фенил] -3,3-диметилмочевина,
1-[4-(Ν-4,5 -димето ксибензоилсульфамоил) фенил] -3 -метилмочевина, 1-[4-(№нафтоилсульфамоил)фенил] -3,3-диметилмочевина,
д) Соединения типа амид ацилсульфамоилбензольной кислоты формулы (VIII), известные из ЕР-А1019368, при необходимости также в виде соли
где
К1 обозначает метил, метокси или трифторметокси;
К2 обозначает водород, хлор или метил;
К3 обозначает водород, этил или пропаргил;
- 6 019372
Я4 обозначает этил, циклопропил, изопропил или пропаргил, или
Я3 и Я4 образуют вместе группу (СН2)4, включая стереоизомеры и соли, употребительные в сельском хозяйстве.
Соединения формулы (I) известны, например, из ЕР-А-0333131 (ΖΑ-89/1960), ЕР-А-0269806 (И8-А4891057), ЕР-А-0346620 (АИ-А-89/34951), ЕР-А-0174562, ЕР-А-0346620 (№О-А-91/08202), №О-А-91/07874 или \СО-А 95/07897 ^А 94/7120) и цитируемой в них литературы или могут быть изготовлены согласно описанным в них способам или аналогичными способами.
Соединения формулы (II) известны из ЕР-А-0086750, ЕР-А-094349 (И8-А-4,902,340), ЕР-А-0191736 (И8-А-4881966) и ЕР-А-0492366 и цитируемой в них литературы или могут быть изготовлены согласно описанным в них способам или аналогичными способами.
Подобные соединения далее описаны в ЕР-А-0582198 и \СО 2002/34048.
Соединения формулы (III) известны из многочисленных заявок, например, И8-А-4021224 и И8-А4021229.
Соединения группы (Ь) известны далее из СЫ-А-87/102789, ЕР-А-365484, а также из Руководства по пестицидам, Британский Совет по защите урожая и королевское химическое общество, 11-ое издание, Фарнхем, 1997.
Соединения группы (с) описаны в \СО-А-97/45016. группы (б) в ХУО-А-99/16744. группы В (е) в ЕРА-365484 и группы (д) в ЕР-А-1019368.
В цитируемых работах содержатся подробные сведения по способам изготовления и исходным материалам и называются предпочтительные соединения. На эти работы взяты конкретные ссылки, они в качестве цитат считаются составной частью данного описания.
Предпочтительно в качестве защитных средств выступают известные соединения формулы (I) и/или (II), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
Я24 - водород, (С1-С18)алкил, (С3-С12)циклоалкил, (С2-С8)алкенил и (С2-С18)алкинил, причем группы, содержащие С, могут быть замещены одним или несколькими, предпочтительно до трех, остатками Я50;
Я50 - одинаковые или различные галогены, гидрокси, (С1-С8)алкокси, (С1-С8)алкилтио, (С2С8)алкенилтио, (С2-С8)алкинилтио, (С2-С8)алкенилокси, (С2-С8)алкинилокси, (С3-С7)циклоалкил, (С3С7)циклоалкокси, циано, моно- и ди-(С1-С4)алкил)амино, карбокси(С1-С8)алкоксикарбонил, (С2С8)алкенилоксикарбонил, (С1-С8)алкилтиокарбонил, (С2-С8)алкинилоксикарбонил, (С1-С8)алкилкарбонил, (С2-С8)-алкенилкарбонил, (С2-С8)-алкинилкарбонил, 1-(гидроксиамино)-(С1-С6)алкил, 1-[(С4С4)алкилимино](С1-С4)алкил, 1-[(С1-С4)алкоксиимино]-(С1-С6)алкил, (С1-С8)алкилкарбониламино, (С2С8)алкенилкарбониламино, (С2-С8)алкинилкарбониламино, аминокабронил, (С1-С8)алкиламинокарбонил, ди-(С1-С4)алкиламинокарбонил, (С2-С6)алкениламинокарбонил, (С2-С6)-алкиниламинокарбонил, (С1С8)алкоксикарбониламино, (С1-С8)алкиламинокарбониламино, (С1-С6)алкилкарбонилокси, незамещенный или замещенный через Я51, (С2-С6)алкенилкарбонилокси, (С2-С6)алкинилкарбонилокси, (С1С8)алкилсульфонил;
Фенил, фенил-(С1-С6)-алкокси, фенил-(С1-С6)алкоксикарбонил, фенокси, фенокси-(С1-С6)алкокси, фенокси-(С1-С6)алкоксикарбонил, фенилкарбонилокси, фенилкарбониламино, фенил-(С1С6)алкилкарбониламино, причем названные последними 9 остатков в фенильном кольце незамещенные или замещенные одно- или многократно, предпочтительно до 3 раз, остатком Я52; 81Я'3, -О-81Я'3, Я'381(СгС8)-алкокси, -СО-О-ЫЯ'2, -О-Ы=СЯ'2, -Ы=СЯ'2, -О-ЫЯ'2) -ΝΚ'2, СН(ОЯ')2, -О-(СН2)т-СН(ОЯ')2, -СЯ'(ОЯ')2, -О-(СН2)тСЯ'(ОЯ)2 или ЯО-СНЯ'СНСОЯ-(С1-С6)алкокси,
Я51 - одинаковые или разные галогены, нитро, (С1-С4)алкокси и незамещенный или замещенный одним или несколькими, предпочтительно до трех, остатками Я52 фенил;
Я52 - одинаковые или разные галогены, (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)галоалкокси или нитро;
Я' - одинаковые или разные водород, (С1-С4)алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими, предпочтительно до трех, остатками Я52 фенил или два остатка Я', образующие вместе одну (С2-С6)алкандиил цепочку;
Я - одинаковые или разные (С1-С4)алкил или два остатка Я, образующие вместе одну (С2С6)алкандиил цепочку;
Я' - водород или (С1-С4)алкил;
т - 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6.
Особенно предпочтительны в качестве защитных средств известные соединения формулы (I) и/или (II), у которых символы и индексы имеют следующие значения:
Я24 - водород, (С1-С8)алкил, (С3-С7)циклоалкил, причем остатки, содержащие С, являются незамещенными или могут быть замещены одно- или многократно галогенами или одно- или двухкратно, предпочтительно двухкратно, остатками Я50;
Я50 - одинаковые или различные гидрокси, (С1-С4-алкокси, карбокси, (С1-С4)алкоксикарбонил, (С2С6)алкенилоксикарбонил, (С2-С6)алкинилоксикарбонил, 1-(гидроксиамино)-(С1-С4)алкил, 1-[(С3С4)алкиламино]-(С1-С4)алкил и 1-[(С1-С4)алкоксиамино]-(С1-С4)алкил; -81Я'3, -О-Ы=СЯ'2, -Ы=СЯ2, -ΝΡ'; и -О-НЯ'2, где Я' означает одинаковые или разные водород, (С1-С4)алкил или попарно (С4-С5)алкандиил
- 7 019372 цепочки,
К , К , К - одинаковые или разные водород, (С1-С8)алкил, (С1-С6)галоалкил, (С3-С7)циклоалкил или фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы галогенов, циано, нитро, амино, моно- и ди-[(С1-С4)алкил]амино, (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)алкокси, (С1-С4)галоалкокси, (С1-С4)алкилтио и (С1-С4)алкилсульфонил;
Кх - водород или СООК26, где К26 означает водород, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил, (С1-С4алкокси)-(С1-С4)алкил, (С1-С6)гидроксиалкил, (С3-С7)циклоалкил или Тг1-(С1-С4)алкилсилил,
К17, К19 - одинаковые или разные галогены, метил, этил, метокси, этокси, (С1 или С2)галоалкил, предпочтительно водород, галоген или (С1 или С2)галоалкил.
Совсем предпочтительны в качестве защитных средств известные соединения, в которых символы и индексы в формуле (I) имеют следующие значения:
К17 - галоген, нитро или (С1-С4)галоалкил;
п' - 0, 1, 2 или 3;
К18 - остаток формулы ОК24,
К24 - водород, (С1-С8)алкил или (С3-С7)циклоалкил, причем вышеуказанные остатки, содержащие С, являются незамещенными или одно- или многократно, предпочтительно до двух раз, замещенными оди наковыми или разными галогенными остатками или до двух раз, предпочтительно однократно, одинаковыми или разными остатками из группы гидрокси, (С1-С4)алкокси, (С1-С4)алкоксикарбонил, (С2С6)алкенилоксикарбонил, (С2-С6)алкинилоксикарбонил, 1-(гидроксиамино)-(С1-С4)-алкил, 1-[(С1С4)алкилимино]-(С1-С4)алкил, 1-[(С1-С4)алкоксиамино]-(С1-С4)алкил и остатками формулы -81К'3, -ОЫ=К'2, -Ы=СК'2, -ΝΕ'2 и -О-ИК'2, причем остаток К' в указанных формулах означает одинаковые или разные водород, (С1-С4)алкил или попарно (С4 или С5)алкандиил;
28 29
К , К , К - одинаковые или разные водород, (С1-С8)алкил, (С1-С6)галоалкил, (С3-С7)циклоалкил или фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы галогенов, (С1С4)алкила, (С1-С4)алкокси, нитро, (С1-С4)галоалкила и (С1-С4)галоалкокси, и
Кх - водород или СООК26, где К26 - водород, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил, (С1-С4)алкокси-(С1-С4)алкил, (С1-С6)гидроксиалкил, (С3-С7)циклоалкил или три-(С1-С4)алкилсилил.
Совсем предпочтительны в качестве защитных средств также известные соединения формулы (II), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
К19 - галоген или (С1-С4)галоалкил;
п' - 0, 1, 2 или 3, причем (К19)п - это предпочтительно 5-С1;
К20 - остаток формулы ОК24;
Т - СН2 или СН(СОО-(С1-С3-алкил)) и
К24 - водород, (С1-С8)алкил, (С1-С8)галоалкил или (С1-С4)алкокси-(С1-С4)алкил, предпочтительно водород или (С1-С8)алкил.
Особенно предпочтительны при этом в качестве защитных средств известные соединения формулы (I), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
№ - это (№1);
К17 - галоген или (С1-С2)галоалкил;
п' - 0, 1, 2 или 3, причем (К17)п3 предпочтительно 2,4-С12;
К18 - остаток формулы ОК24;
К24- водород, (С1-С8)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)гидроксиалкил, (С3-С7)циклоалкил, (С1С4)алкокси-(С1-С4)алкил или три-(С1-С2)алкилсилил, предпочтительно (С1-С4)алкил;
К27 - водород, (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил или (С3-С7)циклоалкил, предпочтительно водород или (С1-С4)алкил, и
Кх - СООК26, где К26 - водород, (С1-С8)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)гидроксиалкил, (С3С7)циклоалкил, (С1-С4)алкокси-(С1-С4)алкил или три-(С1-С2)алкилсилил, предпочтительно водород или (С1-С4)алкил.
Особенно предпочтительны также в качестве защитных средств известные соединения формулы (I), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
№ - это (№2);
К17 - галоген или (С1-С4)галоалкил;
п' - 0, 1, 2 или 3, причем (К17)п3 предпочтительно 2,4-С12;
К18 - остаток формулы ОК24;
К24- водород, (С1-С8)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)гидроксиалкил, (С3-С7)циклоалкил, (С1-С4алкокси)-С1-С4-алкил или три-(С1-С2)-алкилсилил, предпочтительно (С1-С4)алкил, и
К27 - водород, (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С3-С7)циклоалкил или незамещенный или замещенный фенил, предпочтительно водород, (С1-С4)алкил или фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы галогенов, (С1-С4)алкила, (С1-С4)галоалкила, нитро, циано или (С1-С4)алкокси.
Особенно предпочтительны также в качестве защитных средств известные соединения формулы (I), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
- 8 019372
Ψ - это (Ψ3);
К17 - галоген или (С1-С2)галоалкил; п' - 0, 1, 2 или 3, причем (К17)п - предпочтительно 2,4-С12; К18 остаток формулы ОК24;
К24- волород, (С1-С8)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)гидроксиалкил, (С3-С7)циклоалкил, (С1С4)алкокси-(С1-С4)алкил или три-(С1-С2)алкилсилил, предпочтительно (С1-С4)алкил, и
К28 - (С1-С8)алкил или (С1-С4)галоалкил, предпочтительно С1-галоалкил.
Особенно предпочтительны также в качестве защитных средств известные соединения формулы (I), в которых символы и индексы имеют следующие значения:
Ψ - это (Ψ4);
К17 - галоген, нитро, (С1-С4)алкил, (С1-С2)галоалкил, предпочтительно СР3, или (С1-С4)алкокси;
п' - 0, 1 , 2 или 3;
т' - 0 или 1 ;
К18 - остаток формулы ОК24;
К24 - водород, (С1-С4)алкил, карбокси-(С1-С4)-алкил, (С1-С4)алкоксикарбонил-(С1-С4)алкил, предпочтительно (С1-С4)алкокси-СО-СН2-, (С1-С4)алкокси-СО-С(СН3)Н-, НО-СО-Сн2- или НО-СО-С(СН3)Н-, и
К29 - водород, (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С3-С7)циклоалкил или фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими остатками из группы галогенов, (С1-С4)алкила, (С1-С4)галоалкила, нитро, циано и (С1-С4)алкокси.
Следующие группы соединений, известных как защитные средства, особенно пригодны в качестве активных ингредиентов для повышения стойкости растений к абиотическим стрессам:
a) Соединения типа дихлорфенилпиразолин-3-угольной кислоты (т.е. формулы (I), где Ψ = (\¥1) и (К17)п = 2,4-С12), предпочтительно соединения, такие как 1-(2,4-дихлорфенил)-5-(этоксикарбонил)-5метил-2-пиразолин-3-этилэфир угольной кислоты (1-1, мефенпир-диэтил), мефенпир-диметил и мефенпир (1-0), и подобные соединения, как они описаны в \УО-А 91/07874;
b) Производные дихлорфенилпиразол-угольной кислоты (т.е. формулы (I), где Ψ = (\¥2) и (К17)п =
2.4- С12), предпочтительно соединения, такие как 1-(2,4-дихлорфенил)-5-метилпиразол-3-этилэфир угольной кислоты (1-2), 1-(2,4-дихлорфенил)-5-изопропилпиразол-3-этилэфир угольной кислоты (1-3), 1-(2,4дихлорфенил)-5-(1,1-диметилэтил)пиразол-3-этилэфир угольной кислоты (1-4), 1-(2,4-дихлорфенил)-5фенилпиразол-3-этилэфир угольной кислоты (1-5) и подобные соединения, как они описаны в ЕР-А0333131 и ЕР-А-0269806;
c) Соединения типа триазол-угольной кислоты (т.е. формулы (I), где Ψ = (\¥3) и (К.17)п = 2,4-С12), предпочтительно такие соединения, как фенхлоразолэтил, т.е. 1-(2,4-дихлорфенил)-5-трихлорметил-(1Н)-
1.2.4- триазол-3-этилэфир угольной кислоты 0-6), и подобные соединения (см. ЕР-А-0174562 и ЕР-А0346620);
й) Соединения типа 5-бензил- или 5-фенил-2-изоксазолин-3-угольной кислоты или 5,5-дифенил-2изоксазолин-3-угольной кислоты, такие как изоксадифен ^-12), (где Ψ = (\¥4)), предпочтительно соединения, такие как 5-(2,4-дихлорбензил)-2-изоксазолин-3-этилэфир угольной кислоты 0-7) или 5-фенил-2изоксазолин-3-этилэфир угольной кислоты 0-8) и подобные соединения, такие как описаны в \УО-А91/08202, или 5,5-дифенил-2-изоксазолин-этилэфир угольной кислоты (4-9, изоксадифенэтил), или -ппропилэфир ^-10), или 5-(4-фторфенил)-5-фенил-2-изоксазолин-3-этилэфир угольной кислоты ^-Ш), как они описаны в \УО-А-95/07897.
е) Соединения типа 8-хинолиноксиуксусная кислота, например формулы (II), где (К19)п = 5-С1, К20 = ОК24 и Т = СН2, предпочтительно соединения (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-(1-метилгексил)эфир (П-1, клоквинтоцет-мексил), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-( 1,3-диметил-бут-1 -ил)эфир (П-2), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-4-аллил-оксибутилэфир (П-3), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-1-аллилокси-проп-2-ил эфир (П-4), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота этилэфир (П-5), (5- хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота этилэфир (П-6), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота аллилэфир (П-7), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-2-(2-пропилидениминокси)-1-этилэфир (П-8), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота-2-оксо-проп-1-ил эфир (П-9), (5-хлор-8-хинолинокси)уксусная кислота (П-10) и их соли, такие как, например, описано в ΨΘ-А2002/34048, и подобные соединения, как они описаны в ЕР-А-0860750, ЕР-А-0094349 и ЕР-А-0191736 или ЕРА-0492366.
ί) Соединения типа (5-хлор-8-хинолинокси)малоновая кислота, т.е. формулы (II), где (К19)п = 5-С1, К20= ОК24, Т = -СН(СОО-алкил), предпочтительно соединения (5-хлор-8-хинолинокси)малоновой кислоты диэтилэфир (П-11), (5-хлор-8-хинолинокси)малоновой кислоты аллилэфир, (5-хлор-8-хинолинокси)малоновой кислоты-метил-этилэфир и подобные соединения, как они описаны в ЕР-А-0582198.
д) Соединения типа дихлорацетамид, т.е. формулы (III), предпочтительно М,М-диаллил-2,2
- 9 019372 дихлорацетамид (дихлорамид (ΙΙΙ-1) из И8-А 4137070), 4-дихлорацетил 3,4-дигидро-3-метил-2Н-1,4бензоксазин (Ιν-2, беноксакор из ЕР 0149974), №,№-диаллил-№-дихлорацетилглицинамид (ΌΚΑ-24 (ΙΙΙ-3) из НИ 2143821), 4-дихлорацетил-1окса-4-азаспиро[4,5]декан (ΑΌ-67),
2.2- дихлор-Ы-( 1,3-диоксолан-2-илметил)-Ы-(2-пропенил)ацетамид (РРО-1292), 3-дихлорацетил-2,2,5-триметилоксазолидин (К-29148, ΙΙΙ-4), 3-дихлорацетил-2,2-диметил-5-фенилоксазолидин,
3-дихлорацетил-2,2-диметил-5-(2-тиенил)оксазолидин,
3- дихлорацетил-5-(2-фуранил)-2,2-диметилоксазолидин (фурилазол (ΙΙΙ-5), ΜΟΝ 13900),
-дихлорацетил-гексагидро-3,3,8а-триметилпирроло [ 1,2-а]пиримидин-6(2Н)-он (дициклонон, ВА8 145138),
11) Соединения группы (Ь), предпочтительно
1,8-ангидрид нафталевой кислоты (Ь-1), метилдифенилметоксиацетат (Ь-2), цианометоскиимино(фенил)ацетонитрил (циометринил) (Ь-3),
1- (2-[хлорбензил)-3-(1-метил-1-фенилэтил)мочевина (кумилурон) (Ь-4),
Ο,Ο-диэтил 8-2-этилтиоэтил фосфордитиоат (дисульфотон) (Ь-5),
4- хлорфенилметилкарбамат (мефенат) (Ь-6),
Ο,Ο-диэтил-О-фенилфосфоротиоат (диэтолат) (Ь-7), 4-карбокси-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран-4-уксусная кислота (СЬ-304415, СА8-Кедпо: 31541-57-8) (Ь-8),
1.3- диоксолан-2-илметоксиимино(фенил)ацетонитрил (оксабетринил) (Ь-9), 4'-хлор-2,2,2-трифторацетофенон Ο-1,3-диоксолан-2-илметилоксим (флуксофеним) (Ь-10),
4.6- дихлор-2-фенилпиримидин (фенхлорим) (Ь-11), бензил-2-хлор-4-трифторметил-1,3 -тиазол-5 -карбоксилат (флуразол) (Ь-12),
2- дихлорметил-2-метил-1,3-диоксолан (ΜΟ-191) (Ь-13), №(4-метилфенил)-№-( 1 -метил-1 -фенилэтил)мочевина (димрон) (Ь-14), (2,4-дихлорфенокси)уксусная кислота (2,4-Ό), (4-хлорфенокси)уксусная кислота, (К,8)-2-(4-хлор-о-толилокси)пропионовая кислота (мекопроп),
4-(2,4-дихлорфенокси)масляная кислота (2,4-ΌΒ), (4-хлор-о-толилокси)уксусная кислота (МСРА),
4-(4-хлор-о-толилокси)масляная кислота,
4-(4-хлорфенокси)масляная кислота,
3.6- дихлор-2-метоксибензольная кислота (дикамба),
1-(этоксикарбонил)этил 3,6-дихлор-2-метоксибензоат (лактидихлор), а также их соли и эфиры, предпочтительно (С1-С8).
Предпочтительны далее в качестве защитных средств известные соединения формулы (Ιν) или их соли, где
К30 - водород, (С1-С6)алкил, (С3-С6)циклоалкил, фуранил или тиенил, причем каждый из последних названных 4 остатков является незамещенным или замещенным одним или несколькими заместителями из группы галогенов, (С3-С4)алкокси, галоген-(С3-С6)алкокси и (С3-С4)алкилтио и в случае циклического остатка также (С3-С4)алкил и (С3-С4)галоалкил,
К31 -водород,
К32 - галоген, галоген-(С1-С4)алкил, галоген-(С1-С4)алкокси, (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси, (С1С4)алкилсульфонил, (С1-С4)алкоксикарбонил или (С1-С4)алкилкарбонил, предпочтительно галоген, (С1С4)галогеналкил, а также трифторметил, (С1-С4)алкокси, галоген-(С1-С4)алкокси, (С1-С4)алкоксикарбонил или (С1-С4)алкилсульфонил,
К33 - водород,
К34 - галоген, (С1-С4)алкил, галоген-(С1-С4)алкил, галоген-(С1-С4)алкокси, (С3-С6)циклоалкил, фенил, (С1-С4)алкокси, циано, (С1-С4)алкилтио, (С1-С4)алкилсульфинил, (С1-С4)алкилсульфонил, (С1С4)алкоксикарбонил или (С1-С4)алкилкарбонил, предпочтительно галоген, (С1-С4)алкил, (С1С4)галогеналкил, а также трифторметил, галоген-(С1-С4)алкокси, (С1-С4)алкокси или (С1-С4)алкилтио, п - 0, 1 или 2 и т - 1 или 2.
Особенно предпочтительны в качестве защитных средств известные соединения формулы (Ιν), где К30 = Η£-Ο^Η2-, К31 = К33 = Н, К34 = 2-ОМе (Ιν-1), К30 = Η^-Ο42Η2-, К31 = К33 = Н, К34 = 2-ОМе-5-С1 (Ιν-2), К30 = циклопропил, К31 = К33 = Н, К34 = 2-ОМе (Ιν-3), К30 = циклопропил, К31 = К33 = Н, К34 = 2-ОМе-5-С1 (Ιν-4), К30 = циклопропил, К31 = К33 = Н, К34 = 2-Ме (Ιν-5), К30 = трет-бутил, К31 = К33 = Н, К34 = 2-ОМе (Ιν-6).
Далее предпочтительны в качестве защитных средств известные соединения формулы (V), в которой
X3 - СН;
К35 - водород, (С1-С6)алкил, (С3-С6)циклоалкил, (С2-С6)алкенил, (С5-С6)циклоалкенил, фенил или 3
- 10 019372
6-членный гетероциклил, имеющий до трех гетероатомов, из группы: азот, кислород и сера, причем шесть названных последними остатков при необходимости замещены одним или несколькими одинаковыми или разными заместителями из группы галогенов, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)галоалкокси, (СдС2)алкилсульфинил, (С1-С2)алкилсульфонил, (С3-С6)циклоалкил, (С1-С4)алкоксикарбонил, (С1-С4)алкилкарбонил и фенил. А в случае циклических остатков также (С1-С4)алкил и (С1-С4)галоалкил;
К36 - водород, (С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С2-С6)алкинил, причем три названных последними остатка при необходимости замещены одним или несколькими одинаковыми или разными заместителями из группы галогенов, гидрокси, (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси и (С1-С4)алкилтио;
К37 - галоген, (С1-С4-галоалкил, (С1-С4)галоалкокси, нитро, (С1-С4)алкил, (С1-С4)алкокси, (С1С4)алкилсульфонил, (С1-С4)алкоксикарбонил или (С1-С4)алкилкарбонил;
К38 - водород;
К39 - галоген, нитро, (С1-С4)алкил, (С1-С4)галоалкил, (С1-С4)галоалкокси, (С3-С6)циклоалкил, фенил, (С1-С4)алкокси, циано, (С1-С4)алкилтио, (С1-С4)алкилсульфинил, (С1-С4)алкилсульфонил, (С1С4)алкоксикарбонил или (С1-С4)алкилкарбонил;
п - 0, 1 или 2 и т - 1 или 2.
Предпочтительны в качестве защитных средств известные соединения формулы (VI) (83-1), (83-2), (83-3), (83-4) и (83-5).
Предпочтительны также соединения формулы (VII) 1-[4-(Ы-2-метоксибензоилсульфамоил)фенил]-
3-метилмочевина (νΐΐ-1), 1-[4-(Ы-2-метоксибензоилсульфамоил)фенил]-3,3-диметилмочевина (νΐΐ-2), 1[4-(Ы-4,5-диметилбензоилсульфамоил)фенил]-3-метилмочевина (νΐΐ-3) и 1-[4-(Ы-нафтоилсульфамоил)фенил] -3,3-диметилмочевина (νΐΐ-4).
Также предпочтительны соединения формул νΐΐΐ-1- νΐΐΐ-4
из которых, в свою очередь, соединение νΐΐΐ-3 (4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2метоксибензоил)бензолсульфонамид) особенно предпочтительно для применения в качестве средства для повышения стойкости растений по отношению к абиотическим стрессам.
Особенно предпочтительными соединениями для применения в качестве средства для повышения стойкости растений по отношению к абиотическим стрессам являются такие, которые выбираются из группы, состоящей из известных в качестве защитных средств соединений, из соединений формул ΐ-1 (мефенпирдиэтил), ΐ-9 (изоксадифенэтил), ΐΐ-1 (клоквинтоцет-мексил), Ь-11 (фенклорим), Ь-14 (димрон) и νΐΐΐ-3 (4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид, совсем предпочтительными являются соединения ΐ-1 и νΐΐΐ-3).
Уже известные в качестве защитных средств соединения, ранее идентифицированные/известные при определенных условиях, могут также вводиться в растения, измененные генной технологией.
Растения, измененные генной технологией (называемые также трансгенными), отличаются, как правило, особенно выгодными свойствами, например, устойчивостью к определенным пестицидам, прежде всего, к определенным гербицидам, устойчивостью к болезням растений или к возбудителям болезней растений, таким как определенные насекомые или микроорганизмы, например, грибки, бактерии или вирусы. Другие особые свойства касаются, например, массы убираемого урожая, его качества, сохраняемости, состава и специальных составляющих. Так, известны трансгенные растения с повышенным со держанием крахмала или измененным качеством крахмала, или таковые с другим составом жирных ки слот в урожае.
Предпочтительным является применение известных соединений, идентифицированных/известных в качестве защитных средств, или их солей в существенных для экономики трансгенных культурах полезных и декоративных растений, например, хлебных злаков, таких как пшеница, ячмень, рожь, овес, просо, рис и кукуруза, или также культурах сахарной свеклы, хлопка, сои, рапса, картофеля, томатов, гороха и других видов овощей, особенно предпочтительно в культурах кукурузы, пшеницы, ячменя, ржи, овса, риса, рапса, сахарной свеклы и сои, еще предпочтительней в культурах кукурузы, пшеницы, риса, рапса,
- 11 019372 сахарной свеклы и сои.
Наряду с этим, трансгенные растения могут также обрабатываться с помощью веществ, идентифицированных микрочипом ДНК, так же, как молекулами, уже известными в качестве защитных средств, стойкость которых к абиотическим стрессам уже была повышена мерами генной технологии, так что наблюдается синергическое действие эндогенно кодированной стойкости и экзогенно приложенное действие повышения стойкости.
Обычный путь получения новых растений, которые обнаруживают модифицированные свойства по сравнению с ранее существующими растениями, заключается, например, в классических способах выращивания и производства мутантов. Альтернативно можно создавать новые растения с отличными свойствами методами генной технологии (см., например, ЕР-А-0221044, ЕР-А-0131624). Описания, например, приводятся в некоторых случаях:
- Генноинженерное изменение культурных растений с целью модификации синтезированного в растении крахмала (например, νϋ 92/11376, νϋ 92/14827, νϋ 91/19806),
- Трансгенные культурные растения, устойчивые к определенным гербицидам типа глуфозината (сравните, например, ЕР-А-0242236, ЕР-А-242246), или глифосфата (νϋ 92/00377), или сульфонилмочевины (ЕР-А-0257993, И8-А-5013659),
- Трансгенные культурные растения, например, хлопок, со способностью вырабатывать токсины ВаеШик 11шппд1епк1к (Βΐ-токсины), которые делают растения устойчивыми к определенным вредителям (ЕР-А-0142924, ЕР-А-0193259).
- Трансгенные культурные растения с модифицированным составом жирных кислот (νϋ 91/13972).
Многочисленные молекулярно-биологические технологии, с помощью которых могут быть получены новые трансгенные растения с отличными свойствами, в принципе известны, смотрите, например, 8ашЬтоок с1 а1., 1989, Мо1еси1аг С1ошпд, А БаЬогаЮгу Мапиа1, 2. ЛиП. Со1б 8ртшд НагЬог ЬаЬога1огу Ргекк, Со1б 8рппд НагЬог, ΝΥ; или νίΜίΑ-ιαΙ^ι· Оепе ипб К1опе, УСН Vе^ηЬе^т 2. ЛиПаде 1996 или СЬпк1ои, Ттепбк ш Р1ап1 8аепее 1 (1996)423-431).
Для подобных генноинженерных манипуляций можно ввести молекулы нуклеиновой кислоты в плазмиду, что позволяет мутагенез или изменение последовательности через рекомбинацию последовательностей ДНК. С помощью вышеназванных стандартных методов можно, например, производить базовые замены, удалять частичные последовательности или присоединять натуральные или синтетические последовательности. Для связи фрагментов ДНК между собой можно смешивать адаптеры и линкеры фрагментов.
Создание растительной клетки с уменьшенной активностью генного продукта может быть достигнуто, например, с помощью экспрессии по крайней мере одной соответствующей античувствительной РНК, одной чувствительной РНК для достижения эффекта взаимного подавления или экспрессии по крайней мере одного соответственно сконструированного рибозима, который расщепляет специфический транскрипт вышеназванного генного продукта.
К тому же, для молекулы ДНК может быть применено то, что охватывается вся кодированная последовательность генного продукта, включая возможные фланкированные последовательности, так же, как молекула ДНК, которая охватывает только часть кодированной последовательности, причем эта часть должна быть достаточной длины для того, чтобы производить в клетке античувствительный эффект. Возможно также применение последовательностей ДНК, которые обнаруживают высокую степень гомологии кодированных последовательностей генного продукта, но не полностью идентичны.
При экспрессии молекул нуклеиновой кислоты в растении синтетический протеин может локализоваться в любом отделении растительной клетки. Но, чтобы достигнуть локализации в определенном отделении, можно, например, кодированную область связать с последовательностями ДНК, которые обеспечивают локализацию в определенном отделении. Такие последовательности известны специалистам (см., например, Вгаип е1 а1., ЕМВО 1. 11 (1992), 3219-3227; Vо1ΐе^ е1 а1., Ргос. №11. Леаб. 8ек И8А 85 (1988), 846-850; 8оппета1б е1 а1., Р1ап1 1. 1 (1991 ), 95-106).
Трансгенные растительные клетки могут регенерировать известными способами в целое растение. У трансгенных растений речь может идти принципиально о растении каждого вида, т.е. как о однодольныых, так и о двудольных растениях.
Так могут быть получены трансгенные растения, которые проявляют измененные свойства через чрезмерную экспрессию, подавление или ингибирование гомологичных (= природных) генов или генных последовательностей или экспрессию гетерологичных (= чужеродных) генов или генных последовательностей.
Предпочтительно они могут быть идентифицированы с помощью микрочипа ДНК, или также известные молекулы в качестве защитных средств могут быть введены в трансгенные культуры, которые устойчивы против гербицидов из группы сульфонилмочевины, глуфосинатаммония или глифосфатизопропиламмония и аналогичных активных ингредиентов, и/или обнаруживают эндогенную устойчивость против абиотических стрессов на базе генноинженерных изменений.
При применении активных ингредиентов согласно изобретению в трансгенных культурах часто проявляются воздействия, наряду с наблюдаемым воздействием в других культурах на растения
- 12 019372 вредители, которые специфичны для применения в каждой трансгенной культуре, например, измененный или специально расширенный спектр сорняков, который может быть уничтожен, измененные количества, которые могут быть введены при применении, предпочтительная комбинация с гербицидами, против которых устойчива трансгенная культура, а также влияние на рост и урожайность трансгенного культурного растения.
Поэтому предметом изобретения является также применение соединений, идентифицируемых микрочипом ДНК, или уже известных в качестве защитных средств соединений для повышения устойчивости против абиотических стрессов в трансгенных культурных растениях, главным образом с целью увеличения выхода.
Объектом предлагаемого изобретения является способ нахождения соединений, повышающих стойкость растений против абиотических стрессов, причем повышение транскрипции или экспрессии отдельных или нескольких эндогенных растительных генов, таких как, например, гены, кодированные для протеинов из группы цитрохром-оксидаз, например цитохромоксидаза Р450, гликозилтрансфераз, уриказ, например уриказа II (Е.С. 17.3.3), пептидаз, различных мембранных протеинов, аминогидролаз, например, различных общеизвестных стрессовых протеинов, оценивается как признак для индукции.
Объектом предлагаемого изобретения является, в частности, способ нахождения соединений, которые индуцируют транскрипцию генов с кодированной устойчивостью к стрессам для растительного эндогенного энзима, отличающийся тем, что:
a) Испытуемые растения подвергают одному или нескольким абиотическим стрессам,
b) Контрольные растения при прочих равных условиях, как испытуемые растения а), дополнительно приводят в контакт с испытуемым соединением, или в форме протравленного посевного материала, или разбрызгивания в определенный момент периода развития, или с помощью обработки корня,
c) РНК удаляют из испытуемых и контрольных растений,
б) РНК маркируется непосредстенно радиоактивно или нерадиоактивно, или же РНК в одновременном энзиматическом транскрибировании маркируется в соответствующей кДНК радиактивно или нерадиоактивно, или же полученная немаркированная кДНК транскрибируется энзиматически в соответствующую радиоактивно или нерадиоактивно маркированную кРНК,
е) растительный микрочип ДНК, содержащий последовательности ДНК, гибридизирует с веществами, содержащимися в соответствии с шагом б),
I) профили экспрессии генов производят для экспрессии различных стрессовых протеинов, сравниваемых для испытуемых растений в соответствии с шагами а) и Ь),
д) производят количественную оценку разницы экспрессии, измеренных в соответствии с шагом I), и
II) производят окончательную систематизацию профилей экспрессии, подчиненных шагу д), путем кластер-анализа.
В случае ранее указанного шага б) энзиматическое транскрибирование содержащейся кДНК в кРНК рассматривается как предпочтительный шаг способа, так как благодаря этому может быть достигнуто повторное увеличение образца гибридизации. Таким же образом предпочтительна маркировка посредством нерадиоактивных нуклеотидов, особенно предпочтительна маркировка посредством биотинилированных ИТР и/или СТР, причем подтверждение в связи с полученной реакцией гибридизации происходит через связь стрептавидин-фикоэритрина в качестве фторофора и биотинилированной кРНК. Подтверждение специфичной флуоресценции фикоэритрина, которая служит основанием для количественной оценки измеренной разницы экспрессии, происходит в связи с гибридизацией с помощью лазерного сканера.
Предпочтительным объектом предлагаемого изобретения является способ с соблюдением вышеназванных шагов а)- 1), в котором в случае намеренного повышения при тепловом стрессе генов для экспрессии цитрохром-оксидаз, таких как цитохромоксидаза Р450, гликозилтрансфераз, уриказ, таких как уриказа II (Е.С. 17.3.3), пептидаз, различных мембранных протеинов амидогидролаз, сравнивают растения, подвергнутые и неподвергнутые тепловому стрессу, предпочтительны гены для экспрессии Νкарбамил-Ь-аминокислотной аминогидролазы (2ш.11840.1.Л1_а!), серинкарбоксипептидазы (Ζιη.18994.2.Λ1_;·ι_;·ιΙ). уриказы II (Е.С. 1.7.3.3) и гликозилтрансферазы ^т.12587.1.81_5_а!), совершенно предпочтительны гены для экспрессии Ν-карбамил-Е-аминокислотной аминогидролазы (Ζιη.1 1840.1.А1_а!) и серинкарбоксипептидазы ^т.18994.2.А1_а_а!), (обозначение согласно геномной решетке кукурузы фирмы ЛГГуте1пх (АГГуте1пх Шс., 3380 Сеи1га1 ЕхртеББ^ау, 8аи1а С1ага, СА, ϋδΆ)), и в котором экспрессия генов повышается по сравнению с контрольными растениями, подвергнутыми тепловому стрессу, при обработке, например, с коэффициентом 1,5 или более, предпочтительно с коэффициентом 1,5-30, предпочтительней 1,5-20, особенно предпочтительно 1,5-10, совсем предпочтительно 1,5-5, причем повышение измененных профилей экспрессии отдельных генов может лежать независимо друг от друга в различных ранее названных областях значений.
Также предпочтительным объектом предлагаемого изобретения является способ, содержащий ранее названные шаги а)-1), в котором в случае рассматриваемого повышения при стрессе от сухости, например, генов для экспрессии протеинов позднего эмбриогенеза, таких как дегидрины, универсальные про
- 13 019372 теины универсального стресса (Ζιη.818.1.Λ1_;·ιΙ). несимбиотический гемоглобин (Ζιη.485.1.Λ1_;·ιΙ). протеины с адресацией Ζιη.818.2.Λ1_;·ι_;·ιΙ (геномная решетка кукурузы фирмы АГГуте1пх (АГГутеШх 1пс., 3380 Сеп1га1 Ехргс55\\ау. 8аи!а С1ага, СА, И8А)) и протеины с адресацией Ζιη. 18682.1.А1_8_а1 (геномная решетка кукурузы фирмы АГГутс1пх (АГГутеШх 1пс., 3380 Ссп1га1 Е.хргс55\\ау. 8ап1а С1ага, СА, И8А)), сравниваются растения, подвергнутые стрессу от сухости и неподвергнутые стрессу от сухости, предпочтительно гены для экспрессии универсальных протеинов стресса ^т.818.1.А1_а1), несимбиотического гемоглобина ^т.485.1.А1_а1), протеинов с адресацией '^т.818.2.А1_а_а1 (обозначение согласно геномной решетке кукурузы фирмы АГГуте1пх (АГГуте1пх 1пс., 3380 Сеп!га1 Ехргек^ау, 8ап1а С1ага, СА, И8А)) и протеинов с адресацией Ζιη. 18682.1.А1_5_а1 ((геномная решетка кукурузы фирмы АГГутс1п.х (АГГутеШх 1пс., 3380 Сеп!га1 Ехргекктау, 8ап1а С1ага, С А, И8А)), и при этом экспрессия генов повышается по сравнению с контрольными растениями, подвергнутыми стрессу от сухости, при обработке, например, с коэффициентом 1,5 или более, предпочтительно с коэффициентом 1,5-30, предпочтительней 1,5-20, особенно предпочтительно 1,5-10, совсем предпочтительно 1,5-8, причем повышение измененных профилей экспрессии отдельных генов может лежать независимо друг от друга в различных ранее названных областях значений.
Объектом предлагаемого изобретения является далее применение указанного микрочипа ДНК, который используется на базе генетической информации растений, предпочтительно генетической информации полезных растений, особенно предпочтительно таких полезных растений, как, например, кукуруза, хлебные злаки, такие как пшеница, ячмень, рожь, овес, рис и соя, предпочтительно кукурузы, пшеницы, ячменя, ржи, риса и сои, особенно предпочтительно ячменя, кукурузы, пшеницы, риса и сои, совершенно предпочтительно кукурузы, пшеницы и сои, для нахождения измененного образца экспрессии генов. При этом рассматриваются относительные изменения генного образца для генов различных стрессовых протеинов в растениях, содержащих тестируемые соединения, по сравнению с контрольными растениями, не содержащими тестируемые соединения, при тех же идентичных условиях стресса.
Кроме того, объектом предлагаемого изобретения является применение промоторов описанных индикаторных генов в соединении со специальными репортерными генами (например, 6ϋδ, СЕР, луцифераза и т.д.) для нахождения веществ с позитивным воздействием на устойчивость к абиотическим стрессам культурных растений. При этом создаются трансгенные испытуемые растения, которые содержат упомянутую конструкцию промотор-репортерный ген. Активные ингредиенты, которые повышают устойчивость растений к абиотическим стрессам с помощью описанного механизма, индуцируют экспрессию репортерных генов и могут быть идентифицированы с помощью колориметрических, флуориметрических или подобных, пригодных для этого анализов.
Далее объектом изобретения является применение описанных индикаторных генов для повышения устойчивости к абиотическим стрессам трансгенных культурных растений. При этом гены с подходящим промотором, который имеет желательную силу и специфичность, сливаются, и конструкция в однодольных или двудольных культурных растениях трансформируется. Полученные трансгенные растения отличаются повышенной устойчивостью к абиотическому стрессу, например холоду, жаре, сухости и т.д.
Следующим объектом предлагаемого изобретения является также применение соединений, которые с помощью микрочипа ДНК при рассмотрении профиля экспрессии генов идентифицированных и/или уже известных в качестве защитных средств соединений, которые в случае условий абиотических стрессов, как, например, абиотических стрессов, воздействующих на эти растения, таких как температура (холод, мороз или жара), влага (сухость, засуха или аноксия), или химическая нагрузка (недостаток или избыток минеральных солей, тяжелых металлов, газообразных ядов), позитивны, т.е. снижают экспрессию относительно их индуктивного влияния на отдельные гены или несколько генов растительного эндогенного защитного механизма, как, например, в случае теплового стресса на цитрохромоксидазы, например, цитохромоксидазу Р450, на гликозилтрансферазы, на уриказы, например, уриказу II (Е.С. 17.3.3), на пептидазы, на различные мембранные протеины, на амидогидролазы и/или различные стрессовые протеины, и/или, например, позитивны в случае стресса от сухости, т.е. снижают экспрессию относительно их индуктивного влияния на отдельные гены или несколько генов универсального стрессового протеина, несимбиотического гемоглобина ^т.485.1.А1_а1), протеина с адресацией '^т.818.2.А1_а_аГ (геномная решетка кукурузы фирмы АГГутс1пх (АГ1уте1пх 1пс., 3380 Сеп!га1 Ехргекк^ау, 8ап1а С1ага, СА, И8А)) и протеина с адресацией Ζη. 18682.1.А1_5_а! (обозначение согласно геномной решетке кукурузы фирмы АГ1уте1пх (АГ1уте1пх 1пс., 3380 Сеп!га1 Ехргек^ау, 8ап1а С1ага, СА, И8А)), идентифицируются как активные ингредиенты для повышения устойчивости к стрессу полезных растений.
Объектом изобретения является также применение веществ, идентифицированных с помощью микрочипа ДНК, как уже известных в качестве защитных средств молекул для повышения устойчивости к абиотическим стрессам различных культурных растений, например, кукуруза, хлебные злаки, такие как пшеница, ячмень, рожь, овес, рис и соя, предпочтительно кукуруза, пшеница, ячмень, рожь, рис и соя, особенно предпочтительно кукуруза, пшеница, рис и соя, совершенно предпочтительно кукуруза, пшеница и соя.
Далее объектом предлагаемого изобретения является также применение соединений, которые идентифицируются с помощью микрочипа ДНК при рассмотрении профиля экспрессии генов, и/или уже из
- 14 019372 вестных в качестве защитных средств соединений, которые в растениях прямо или косвенно, например, через цепи, передающие сигналы, способствуют повышению устойчивости к абиотическим стрессам, таких как, например, температура (холод, мороз или жара), влага (сухость, засуха или аноксия) или химическая нагрузка (недостаток или избыток минеральных солей, тяжелых металлов, газообразных ядов), повышению выхода, удлинению периода вегетации, возможности более раннего обсеменения, повышению качества или применению в рамках выращивания с использованием менее жизненных близкородственных линий.
Далее объектом предлагаемого изобретения является также способ повышения выхода в культурах полезных растений, удлинения периода вегетации, возможности более раннего обсеменения, повышения качества или применения в рамках выращивания с использованием менее жизненных близкородственных линий, отличающийся тем, что полезные растения обрабатывают с помощью протравливания посевного материала, распрыскивания на листья или введения в наземную часть одного или нескольких соединений, которые идентифицируются с помощью микрочипа ДНК, и/или уже известных в качестве защитных средств соединений.
При этом предпочтительны такие соединения, которые уже известны в своем применении как так называемые защитные средства в защите растений, как, например, из группы соединений, известных как защитные средства, состоящей из соединений формул 1-1 (мефенпирдиэтил), 1-9 (изоксадифенэтил), ΙΙ-1 (хлоквинтоцет-мексил), Ь-11 (фенхлорим), Ь-14 (димрон), νΐΙΙ-3 (4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2метоксибензоил)бензолсульфонамид), особенно предпочтительны соединения 1-1 и νΐΙΙ-3 (4циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид)).
При помощи отдельного или комбинированного применения вышеназванных соединений полезные растения могут быть эффективно защищены от воздействия абиотических стрессов, что выражается, например, также в повышенном выходе.
Далее объектом предлагаемого изобретения является также способ повышения стойкости полезных растений в культурах полезных растений к абиотическим стрессам посредством отдельного или комбинированного применения соединений, идентифицированных с помощью микрочипа ДНК при рассмотрении профиля экспрессии генов, и/или соединений, уже известных в качестве защитных средств.
Следующие примеры описывают изобретение в частности.
Пример 1.
Доказательство воздействия защитных средств на растения, которые были высажены намеренно в условиях стресса от сухости, через профилирование генной экспрессии (СЕР):
Абиотический фактор стресса = стресс от сухости
Семена кукурузы сорта Лоренцо были протравлены соединением 4-циклопропиламинокарбонил№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид (= νΐΙΙ-3). Для этого 10 г семян с 20 мг активного ингредиента, растворенными в 2 мл метиленхлорида, были инкубированы при легком потряхивании до испарения растворителя (около 30 мин). Семена контрольной группы были протравлены только лишь растворителем. Затем обработанные семена были помещены в горшки с землей (диаметр: 10 см, по 10 семян на горшок), и ростки кукурузы в течение 10 дней росли в климатической камере при определенных световых условиях, влажности и температуре [белый свет, длительность дня (16 ч светлых, 8 ч темноты), влажность воздуха 70%, 24°С]. Использовалось 2x10 горшков для контрольной группы и для опыта со стрессом от сухости. Во время выращивания растения увлажняли целых 2 дня путем запруживания воды снизу в ванне в течение 20 мин. Через 10 дней после прорастания семян растения кукурузы были подвергнуты стрессу от сухости. Для этого растения контрольной группы 1 (непротравленные активным ингредиентом) и испытуемой группы (протравленные активным ингредиентом) только еще 7 дней увлажнялись, как описано выше. У растений контрольной группы 2 (непротравленных активным ингредиентом) и испытуемой группы 2 (протравленных активным ингредиентом) поддерживалась нормальная схема увлажнения. После 3 недель в условиях стресса от сухости проба оценивалась, как следует ниже. Надземные части растения обрезались и высушивались в течение ночи при 50°С. На следующий день определялась масса листьев на горшок (сухая масса) в [г].
Измеренные значения усреднялись для каждых 10 горшков группы растений. Числовые значения, приведенные в табл. 1, обозначают относительные значения в [%] для результатов измерения в контрольной группе 2 (непротравленной активными ингредиентами, с нормальной схемой увлажнения).
- 15 019372
Таблица 1. Проба стресса, вызванного сухостью, у растений кукурузы без протравливания и с протравливанием активным ингредиентом
Группа растений Обработка Относительная масса, % сухая
Контрольная группа 1 -8/+Т 50
Контрольная группа 2 -8/-Т 100
Испытуемая группа 1 +8/+Т 80
Испытуемая группа 2 +8/-Т 100
= Соединение УШ-3 (=4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид),
Т = стресс от сухости
Средняя сухая масса была у растений из непротравленных и протравленных семян без стрессовых условий одинаковой (контрольная группа 2, испытуемая группа 2).
Растения из группы с протравливанием соединением УШ-3 (= 4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2метоксибензоил)бензолсульфонамидом) показывают в среднем компактную наружность, как растения контрольной группы, но которая не отражается на сухой массе. Под воздействием стресса от сухости средняя масса листьев (сухая масса) растений, протравленных активным ингредиентом, была, однако, значительно повышенной по сравнению с непротравленными контрольными растениями (контрольная группа 1, испытуемая группа 1).
Пример 2.
Абиотический фактор стресса = тепловой стресс
Семена кукурузы сорта Лоренцо были протравлены, как и в примере 1, соединением 4циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид (= УШ-3) или обрабатывались только растворителем без активного ингредиента. Выращивание ростков производилось в течение 10 дней в климатической камере при определенных условиях, тех же, что описаны в примере 1. Для пробы теплового стресса использовались 2x10 горшков с растениями кукурузы. Контрольная группа состояла из непротравленных растений (обработанных растворителем), испытуемая группа из растений, протравленных активным ингредиентом. Для создания условий теплового стресса обе группы растений выдерживались в течение 2 дней в климатическом шкафу при 45°С, белом свете, длительности дня - 16 ч светлых, 8 ч темноты, влажности воздуха 70%. Во избежание высыхания при высокой температуре растения увлажнялись один раз в день путем запруживания снизу воды в ванне. После этого мог наблюдаться тепловой стресс, а именно - особенно в контрольной группе - побеги многих растений были сломаны, и листья плашмя лежали на земле.
Проба количественно оценивалась по следующим критериям. После тепловой обработки подсчиты вались сломанные растения и оценивался результат на горшок:
< 20% выращенных растений сломано: слабое повреждение °
20-50% выращенных растений сломано: среднее повреждение · > 50% выращенных растений сломано: сильное повреждение ·
Затем все растения в течение 2 недель культивировались в стандартных условиях. Потом измерялся прирост длины отдельных растений, и определялась степень выживания растений на горшок:
>50% степень выживания: слабое повреждение °
20-50% степень выживания: среднее повреждение · <20% степень выживания: сильное повреждение ·
Результаты оценки проб собраны в табл. 2. Непротравленные контрольные растения были сильно повреждены тепловым стрессом. Особенно поразительным было ломание побегов у большинства растений, а также незначительная степень выживания. Испытуемые растения, протравленные активным ингредиентом, особенно выделялись значительно улучшенным состоянием. Хотя также у этих растений в итоге были явны повреждения от сильного теплового стресса, степень выживания была все же значительно выше, чем в контрольной группе.
- 16 019372
Таблица 2. Проба теплового стресса у растений кукурузы без протравливания и с протравливанием активным ингредиентом
Группа растений Обработка
Контрольная группа -8/+Н Промежуточный результат (сломанные растения):
•♦♦•♦♦•ООО
Окончательный результат (степень выживания)
Испытуемая группа +8/+Н Промежуточный результат (сломанные растения):
οοοοοοοΰοο
Окончательный результат (степень выживания)
= Соединение νΐΙΙ-3 (=4-циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид),
Н = тепловой стресс
Пример 3.
Абиотический фактор стресса = стресс от холода (теплица)
Семена кукурузы сорта Лоренцо были посеяны в 10-см горшки в землю по 10 семян на горшок. Все испытуемые группы состояли из 4 таких горшков. Посеянные семена испытуемых групп 1 и 2 были прежде опрысканы 50 или 100 [г в расчете на гектар] соединения 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамид (= νΐΙΙ-3). Семена контрольной группы оставались необработанными. Растения выращивались в контролируемых условиях в климатической камере [белый свет (продолжительность дня: 16 ч светлых, 8 ч темноты), дневная температура 22°С, ночная температура 14°С, влажность воздуха 60%].
После прорастания, когда растения достигли высоты около 1 см, 2 горшка из каждой группы в течение 6 ч инкубировались в другой климатической камере в условиях стресса от холода при -2°С. Затем эти растения были снова поставлены из другой камеры в первую климатическую камеру.
Через 24 ч в стандартных условиях проба была оценена. Можно было наблюдать, что стресс от холода вызвал хлороз (желтоватую окраску) на концах листьев у побегов в необработанной контрольной группе. У растений, обработанных активным ингредиентом, эти симптомы не наблюдались совсем или наблюдались только очень ограниченно.
Все растения испытуемой группы и контрольной группы, которые содержались исключительно в стандартных условиях, не подвергаясь стрессу от холода, не обнаружили никаких симптомов повреждения.
Для количественной оценки пробы были подсчитаны растения с осветлением на концах листьев. Общее число растений на испытательную группу и обработку от стресса, вызванного холодом, было 20 на каждые 2 горшка.
Результаты оценки пробы приведены в табл. 3.
Таблица 3. Проба на стресс от холода (в теплице) у растений кукурузы, необработанны? и обработанных предварительно активным ингредиентом - соединением νΐΙΙ-3 (= 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамид).
Г руппа растений Обработка активным ингредиентом (предварительно) [г /га] Количество поврежденных растений (хлороз)
Контрольная группа 0 9
Испьггуемая группа 1 50 1
Испытуемая группа 2 100 0
Все растения были подвергнуты обработке от стресса, вызванного холодом. Общее число растений
- 17 019372 на группу составило 20.
Результаты показывают, что обработка активным ингредиентом соединением νΙΙΙ-3 (= 4циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид) может значительно уменьшить симптомы повреждения, вызванные стрессом от холода, или полностью предотвратить при повышенной дозировке наступление этих симптомов.
Пример 4.
Абиотический фактор стресса = стресс от холода (открытый грунт)
Семена кукурузы (Беп! Сот) были протравлены 0,003 мг и 0,03 мг соединения 4циклопропиламинокарбонил-Л-(2-метоксибензоил) бензолсульфонамид) (= νΙΙΙ-3) на г семян и посеяны на 34 м2 испытательного участка. Контрольный участок содержал непротравленный посевной материал. Примерно через 8 дней после посева ростки были в стадии облиствения и подвергались в течение 5 дней следующим температурным условиям:
Максимальная Минимальная
1-ый день 16,1°С 7,2’С
2-ой день 17,8°С 2,7°С
3-ий день 16,7°С 0,6°С
4-ый день 16,7°С 1,ГС
5-ый день 22,8С 12,2°С
После этого периода холода испытательные участки были оценены. При этом оценивались все отдельные растения, и растения, обнаруживающие по крайней мере 20% симптомов, вызванных холодом, на общей площади листа (ожог и/или хлороз), оценивались как поврежденные.
Результаты сведены в табл. 4. На контрольном участке без протравливания активным ингредиентом все растения (100%) обнаружили описанные симптомы, вызванные холодом. На испытательном участке с протравливанием активным ингредиентом повреждения от холода были значительно снижены.
Здесь можно было наблюдать только еще около 12% симптомов повреждения растений. Максимальное действие защиты от мороза было в области значений, которая в таблице соответствует данной массе протравливания активным ингредиентом
Таблица 4. Проба на стресс, вызванный холодом, (в открытом грунте) у растений кукурузы, непротравленных и протравленных активным ингредиентом - соединением νΙΙΙ-3 (= 4-циклопропиламинокарбонил-Н-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид)
Группа растений Повреждение от холода * [%]
Необработанная 100
Протравка 0,003 мг соединения (νΐΙΙ-3= 4-циклопропиламинокарбонилТ<-(2-метоксибензоил)бензолсульфонамид) на семена 12
Протравка 0,03 мг соединения (VIII3= 4- циклопропиламинокарбонил-М-(2- метоксибснзоил)бензолсульфонамид) на семена 12
*: Доля растений с повреждением от холода > 20%, приходящаяся на общее количество растений на испытательном участке
Пример 5. Характеристика генов, индуцированных испытуемыми веществами в условиях абиотического стресса, через профилирование экспрессии генов (СЕР)
Семена кукурузы сорта Лоренцо были протравлены, как описано в примере 1, соединением νΙΙΙ-3 (= 4-циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил) бензолсульфонамид) или растворителем. Растения выдерживались в 10 дней в климатической камере (условия: смотрите пример 1).
Затем растения были подвергнуты следующим стрессовым условиям:
(1) Тепловой стресс: 6 ч при 45°С (2) Стресс от сухости: 7 дней без увлажнения, 24°С
Контрольные растения в каждой экспериментальной группе содержались в стандартных условиях, описанных в примере 1 (температура, увлажнение). После того, как они были подвергнуты стрессу, листья с растений, подвергнутых стрессу, как и листья с контрольных растений, не подвергнутых стрессу, были собраны, быстро заморожены в жидком азоте и до обработки хранились при -80°С. Все пробы бы
- 18 019372 ли выполнены с повторением по 2 горшка.
Изготовление маркированных зондов РНК для гибридизации чипа ДНК достигалось согласно протоколам (экспресс-анализ, техническое руководство) фирмы АГГутейгх (АГГутейгх 1пс., 3380 Сеп!га1 Ехргекк^ау, 8ап!а С1ага, СА, И8А). Из 500 мг собранных листьев была прежде всего изолирована вся РНК. 10 мг из всей РНК было использовано для синтеза первой и второй линии кДНК. КДНК была расширена Т7-полимеразой и одновременно с этим маркирована биотином-ИТР. 20 мг этой биотинилированной кДНК было введено для гибридизации геномной решетки кукурузы фирмы АГГуте1пх. Эта микрорешетка ДНК содержит последовательности ДНК, которые в совокупности представляют 13339 генов. Затем микрорешетки ДНК были промыты в жидкостной станции АГГуте1пх, окрашивались стрептавидин/фикоэритрином (молекулярные пробы, Ρ/Ν 8-866) и сканировались лазерным сканером, принадлежащим Адйеп! (Адйеп! сканером генной решетки). Полученные флуоресцентные данные были проанализированы набором 5 программных микрорешеток фирмы АГГуте1пх. После последующего контроля качества все анализы чипа ДНК накапливались в банке данных. Для нахождения относительных значений экспрессии (факторов индукции, репрессии) абсолютные значения экспрессии генов из каждого эксперимента со стрессом сравнивались с соответствующими контрольными пробами (т.е., без абиотического стресса и протравливания, только с растворителем), и при этом закладывались в основание критерии значимости, выданные программным обеспечением АПуте1пх. Полученные отсюда 4 значения экспрессии на ген усреднялись через расчет медианы. Эти медианы (средние значения) указаны как факторы индукции в таблицах результатов. Сравнение сходства профилей экспрессии различных экспериментов и кластер-анализа проводилось посредством программного обеспечения Сепейа!а Ехргекыопк! фирмы Сепейа1а (Сепейа1а, Маи1Ьеег81г. 46, СН-4016 Ва§е1, 8\\'Ц/ег1апй).
При анализе профили экспрессии находили специально через гены, которые были индуцированы с помощью испытуемых веществ только в связи с абиотическим стрессом, но не только через вещества или через стресс. Такие гены можно рассматривать как индикаторы дополнительного антистрессового действия веществ, которое превышает уже известное действие защитных средств. Результаты анализа приведены в следующих таблицах. Образцы индукции описанных индикаторных генов позволяют целевое нахождение активных ингредиентов для повышения устойчивости культурных растений к абиотическим стрессам.
а) В условиях теплового стресса, т.е. испытуемые (протравленные А-циклопропиламинокарбонил№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамидом из расчета 2 мг/га семена) растения кукурузы выдерживались 7 дней после прорастания в течение 6 ч при температуре 45°С.
Обзор индуцированных генных групп составил следующий представленный в табл. 5 образец.
Таблица 5
№ пробы Условие А Условие В Условие С
Ζτη.11840.1. А1_а1 1,74 1,75 4,10
Ζηι.4274.1.81_а1 1,32 1,22 1,93
Ζτη/3040.1.81_а( 1,52 1,33 2,48
гт. 12587,1.81.5_а1 1,30 1,45 2,33
2т.18994.2.Л1_а_а1 1,16 1,46 2,66
Ζγπ. 13498,1.81 _а! 2,56 1,73 4,45
Соответствующий номер пробы означает:
Ζιη.11840.1. А1_а!: предполагаемая Ν-карбамил-Ь-аминокислотная амидогидролаза
Ζт.4274.1.81_а!: цитохром Р450
Ζт.3040.1.81_а! уриказа II (Е.С.1.7.3.3); узелковая специфическая уриказа
Ζт 12587.1.81.§_а!: гликозилтрансфераза
Ζιη18994.2.Λ1_.5_Ηΐ: предполагаемая серинтрансфераза
Ζт. 13498.1.81 а!: мембранный протеин
Условие А: тепловой стресс (6 ч, 45°С)
Условие В: семена протравлены 4-циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамидом (УШ-3) / без теплового стресса
Условие С: семена протравлены 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамидом (УШ-3) + тепловой стресс (6 ч, 45°С)
Таким образом, даже при легкой основной индукции анализируемой генной активности во всех случаях наблюдалость значительное повышение экспрессии генов, которое лежит для названных здесь генов в пределах от 1,5 до 2,35 (экспрессия при условии С/экспрессия при условии А). В случае только одного испытуемого соединения УШ-3, т.е. без испытания тепловым стрессом, измеряемый уровень экспрессии лежит в пределах области, индуцированной тепловым стрессом, или ниже, или немного выше
- 19 019372 области, индуцированной тепловым стрессом.
Полученный из табл. 5 образец индукции, который представляет непосредственно полученное значение экспрессии, обнаруживает характерные индукции через воздействие соединения 4циклопропиламинокарбонил-Ы-(2-метоксибензоил) бензолсульфонамид (= νΐΐΐ-3), причем в сильной степени воздействие отражается на предполагаемой Ν-карбамил-Ь-аминокислотной амидогидролазе |Ζιη.11840.1.Α1_;·ιΙ| и на предполагаемой серинтрансферазе |2т.18994.2.А1_а1|.
Ь) В условиях стресса от сухости, т.е. испытуемые (протравленные Λ-циклопропиламинокарбонил№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамидом из расчета 2 мг/га семена) растения кукурузы выдерживались 7 дней после прорастания в течение 7 ч при температуре 24°С.
Обзор индуцированных генных групп составил следующий представленный в табл. 6 образец.
Таблица 6
№ пробы Условие А Условие В Условие С
2т.818.1.А1_а1 1,06 1,12 8,47
гт.Зб33.4.А1_а1 1,12 0,74 3,03
2т. 18273.1.81_а1 1,66 0,95 2,91
2лп.13229.1.81_а1 1,55 1,02 3,39
Ζιϊι. 12035.1-А1_а1 1,86 0,90 3,66
Ζιη.485.1.ΑΙ_Μ 0,89 1,00 5,49
2т.818.2.А1_а1 0,93 1,10 5,40
2т.10097.1.А1_а1 1,23 1,27 3,29
Ζπι.18682.1.Α1_3ί 1,25 1,12 4,19
Соответствующий номер пробы означает:
Ζт.818.1.А1_аΐ универсальный стрессовый протеин Ζт.3633.4.Α1_аΐ протеин, индуцированный ранением (фрагмент)
Ζт. 18273.1.81-31 регуляторное подобие протеина
Ζт.13229.1.81_аΐ протеин 02 сопротивления заболеваниям типа ΝΒ8-ΕΒΒ (фрагмент)
Ζт. 12035.1.А1_а1 наподобие АТ3С10120
Ζт.485.1.Α1_аΐ несимбиотический гемоглобин (НВТ) (ΖΕΑΜΡ СЬВ1)
Ζт.818.2.Α1_аΐ экспрессированный протеин
Ζт. 10097.1.А1_а1 экспрессированный протеин
Ζт. 18682.1.А1_а1 неизвестный протеин
Условие А: стресс от сухости (7 ч, 24°С)
Условие В: семена протравлены 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамидом ('УШ-3)/без стресса от сухости
Условие С: семена протравлены 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамидом (νΐΐΐ-3) + стресс от сухости (7 ч, 24°С).
Таким образом, даже при легкой основной индукции анализируемой генной активности во всех случаях наблюдалость значительное повышение экспрессии генов, которое лежит для названных здесь генов в пределах от 1,75 до 8,0 (экспрессия при условии С/экспрессия при условии А). В случае только одного испытуемого соединения νΐΐΐ-3, т.е. без испытания стрессом от сухости, измеряемый уровень экспрессии лежит в пределах области, индуцированной стрессом от сухости, или ниже, или немного выше области, индуцированной тепловым стрессом, в отдельных случаях даже ниже экспрессии не подверженных стрессу растений (при значениях <1,0).
Полученный из табл. 6 образец индукции, который представляет непосредственно полученное значение экспрессии, обнаруживает характерные индукции в присутствии соединения 4циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил) бензолсульфонамид, причем в сильной степени воздействие отражается на универсальном стрессовом протеине ^т.818.1.А1_а1] и на несимбиотическом гемоглобине (НВТ) (ΖΕΑΜΡ ОЬВ1) £т.485.1.А1_а1].

Claims (5)

1. Применение соединения, выбранного из группы, состоящей из мефенпирдиэтила, изоксадифенэтила, хлоквинтоцетмексила, фенхлорима, димрона и 4-циклопропиламинокарбонил-№(2метоксибензоил)бензолсульфонамида, для повышения устойчивости растений к абиотическим стрессам с целью повышения урожайности, удлинения периода вегетации, обеспечения более раннего обсеменения, повышения качества урожая.
2. Применение соединения по п.1, выбранного из группы, состоящей из мефенпирдиэтила и 4циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамида.
3. Применение по п.1 или 2 для повышения устойчивости к абиотическим стрессам, где растение
- 20 019372 представляет собой кукурузу, пшеницу, ячмень, рожь, овес, рис, сою, подсолнечник, рапс или сахарную свеклу.
4. Способ повышения урожайности в полезных растениях, подвергающихся абиотическим стрессам, отличающийся тем, что полезные растения обрабатывают методом протравливания посевного материала, разбрызгивания на листья или введения в наземную часть одного или нескольких соединений, выбранных из группы, состоящей из мефенпирдиэтила, изоксадифенэтила, хлоквинтоцетмексила, фенхлорима, димрона и 4-циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамида.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что соединение выбирают из группы, состоящей из мефенпирдиэтила и 4-циклопропиламинокарбонил-№(2-метоксибензоил)бензолсульфонамида.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA201100145A 2005-11-29 2006-11-10 Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способ их обнаружения EA019372B9 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102005057250A DE102005057250A1 (de) 2005-11-29 2005-11-29 Wirkstoffe zur Steigerung der Stressabwehr in Pflanzen gegenüber abiotischem Stress und Methoden zu ihrer Auffindung

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EA201100145A1 EA201100145A1 (ru) 2011-06-30
EA019372B1 true EA019372B1 (ru) 2014-03-31
EA019372B9 EA019372B9 (ru) 2014-07-30

Family

ID=37983293

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201100145A EA019372B9 (ru) 2005-11-29 2006-11-10 Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способ их обнаружения
EA200801456A EA015077B1 (ru) 2005-11-29 2006-11-10 Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способы их обнаружения

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200801456A EA015077B1 (ru) 2005-11-29 2006-11-10 Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способы их обнаружения

Country Status (17)

Country Link
US (3) US20070124839A1 (ru)
EP (2) EP1956885A2 (ru)
JP (1) JP5297810B2 (ru)
KR (1) KR101362803B1 (ru)
CN (1) CN101316505B (ru)
AR (1) AR057179A1 (ru)
AT (1) ATE550930T1 (ru)
AU (1) AU2006319516B2 (ru)
BR (1) BRPI0619386B1 (ru)
CA (1) CA2631353C (ru)
DE (1) DE102005057250A1 (ru)
EA (2) EA019372B9 (ru)
ES (1) ES2383741T3 (ru)
IL (2) IL191646A (ru)
PL (1) PL2289310T3 (ru)
TW (1) TW200738885A (ru)
WO (1) WO2007062737A2 (ru)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7127678B2 (en) * 2000-12-21 2006-10-24 Microsoft Corporation System and method to specify device specific user interface information in the firmware of a USB device
DE102005057250A1 (de) * 2005-11-29 2007-06-06 Bayer Cropscience Gmbh Wirkstoffe zur Steigerung der Stressabwehr in Pflanzen gegenüber abiotischem Stress und Methoden zu ihrer Auffindung
US20090011935A1 (en) * 2006-03-14 2009-01-08 Basf Se Method of Inducing Tolerance of Plants Against Bacterioses
US20100173900A1 (en) * 2007-06-29 2010-07-08 Basf Se Strobilurins for Increasing the Resistance of Plants to Abiotic Stress
US20100144524A1 (en) * 2007-11-19 2010-06-10 Hoobler Ray J Systems and Methods for Applying Particle Films to Control Stress on Plant Tissues
EP2145537A1 (en) 2008-07-09 2010-01-20 Bayer CropScience AG Plant growth regulator
EP2191716A1 (de) * 2008-11-29 2010-06-02 Bayer CropScience AG Herbizid-Safener-Kombination
FR2940886B1 (fr) * 2009-01-13 2012-08-24 Procedes Roland Pigeon Utilisation d'une composition minerale liquide pour ameliorer la reponse adaptative des plantes a un changement des conditions d'environnement
EP2255626A1 (de) * 2009-05-27 2010-12-01 Bayer CropScience AG Verwendung von Succinat Dehydrogenase Inhibitoren zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress
WO2011113052A2 (en) 2010-03-12 2011-09-15 Monsanto Technology Llc Plant health compositions comprising a water-soluble pesticide and a water-insoluble agrochemical
AR081242A1 (es) 2010-04-28 2012-07-18 Univ California Receptores pyr/pyl modificados activados por ligandos ortogonales
FR2961826B1 (fr) * 2010-06-24 2012-08-03 Agronomique Inst Nat Rech Dispositif pour determiner ou etudier l'etat de stimulation des defenses naturelles de plantes ou parties de plantes
EP2471363A1 (de) * 2010-12-30 2012-07-04 Bayer CropScience AG Verwendung von Aryl-, Heteroaryl- und Benzylsulfonamidocarbonsäuren, -carbonsäureestern, -carbonsäureamiden und -carbonitrilen oder deren Salze zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen
AR087888A1 (es) * 2011-09-14 2014-04-23 Dow Agrosciences Llc Plantas con caracteristicas relacionadas al estres y metodos para producirlas
US20140378306A1 (en) 2011-09-16 2014-12-25 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2 isoxazoline-3 carboxylates for improving plant yield
AR087874A1 (es) 2011-09-16 2014-04-23 Bayer Ip Gmbh Uso de acilsulfonamidas para mejorar el rendimiento de las plantas
CN103781352A (zh) * 2011-09-16 2014-05-07 拜耳知识产权有限责任公司 苯基吡唑啉-3-甲酸酯类用于提高植物产量的用途
WO2013050324A1 (de) 2011-10-06 2013-04-11 Bayer Intellectual Property Gmbh Abiotischen pflanzenstress-reduzierende kombination enthaltend 4- phenylbuttersäure (4-pba) oder eines ihrer salze (komponente (a)) und eine oder mehrere ausgewählte weitere agronomisch wirksame verbindungen (komponente(n) (b)
EP2943065B1 (en) * 2012-12-14 2017-06-21 Vib Vzw Agrochemical compositions for inducing abiotic stress tolerance
ES2734235T3 (es) 2013-03-05 2019-12-04 Bayer Cropscience Ag Uso de combinaciones que comprenden cloquintocet-mexilo para la mejora del rendimiento en plantas
CN112120036A (zh) 2013-03-05 2020-12-25 拜耳作物科学股份公司 酰基磺酰胺用于提高植物产量的用途
CN105051196B (zh) 2013-03-14 2018-07-17 加利福尼亚大学董事会 正交配体激活的修饰的pyr/pyl受体
US8999890B2 (en) 2013-03-15 2015-04-07 KamTec, LLC Signaling compositions, methods, and systems for effecting plant burndown and herbicide enhancement
US9464283B2 (en) 2013-03-15 2016-10-11 KamTec, LLC Signaling compositions, methods, and systems for effecting plant growth and crop enhancement
WO2014152496A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-25 KamTec, LLC Signaling compositions, methods, and systems for effecting plant growth and burndown, and enhancement of crops and herbicides
DE102013012500A1 (de) 2013-07-26 2015-01-29 Skw Stickstoffwerke Piesteritz Gmbh Verwendung von Phosphorsäureamiden als Mittel zur Verbesserung der Trockenstresstoleranz
DE102013012498A1 (de) 2013-07-26 2015-01-29 Skw Stickstoffwerke Piesteritz Gmbh Verwendung von einfachen 1,2,4-Triazol-Derivaten als Mittel zur Verbesserung der Trockenstresstoleranz
DE102013021933A1 (de) 2013-12-20 2015-06-25 Skw Stickstoffwerke Piesteritz Gmbh Verwendung von Pyrazol-Derivaten als Mittel zur Verbesserung der Trockenstresstoleranz
WO2017072013A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Composition comprising a safener, a fungicide and metalaxyl
CN105255896B (zh) * 2015-11-21 2019-01-11 长沙绿天生物技术有限公司 一种水稻基因启动子、表达盒、表达载体及其应用
DE102016107338A1 (de) 2016-04-20 2017-10-26 Skw Stickstoffwerke Piesteritz Gmbh Verwendung von Imidamid-Derivaten als Mittel zur Verbesserung der Trockenstresstoleranz
BR112019002733A2 (pt) 2016-08-11 2019-05-14 Bayer Cropscience Ag derivados de pirazolinil substituídos, processos para sua preparação e seu uso como herbicidas e/ou reguladores de crescimento da planta
WO2019025153A1 (de) * 2017-07-31 2019-02-07 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung von substituierten n-sulfonyl-n'-aryldiaminoalkanen und n-sulfonyl-n'-heteroaryldiaminoalkanen oder deren salzen zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
CN107466848A (zh) * 2017-10-17 2017-12-15 沧州市农林科学院 耐盐小麦叠氮化钠诱变培育方法
BR112020015523A2 (pt) * 2018-02-05 2021-02-02 Crop Microclimate Management Inc. métodos e composições para aumentar a tolerância ao estresse abiótico em plantas
CN108660238A (zh) * 2018-04-04 2018-10-16 山西省农业科学院生物技术研究中心 基于gbs技术的燕麦抗旱性相关snp分子标记及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD277832A1 (de) * 1988-12-13 1990-04-18 Forschzent Bodenfruchtbarkeit Mittel zur erhoehung der stresstoleranz von kulturpflanzen
WO2000028055A2 (en) * 1998-11-05 2000-05-18 Eden Bioscience Corporation Hypersensitive response elicitor-induced stress resistance
US20010001095A1 (en) * 1996-07-26 2001-05-10 University Of Maryland Eatern Shore Method for treating plants
WO2004092398A2 (en) * 2003-04-15 2004-10-28 Basf Plant Science Gmbh Nucleic acid sequences encoding proteins associated with abiotic stress response and plant cells and plants with increased tolerance to environmental stress

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4137070A (en) 1971-04-16 1979-01-30 Stauffer Chemical Company Herbicide compositions
US4021224A (en) 1971-12-09 1977-05-03 Stauffer Chemical Company Herbicide compositions
US4021229A (en) 1972-09-05 1977-05-03 Stauffer Chemical Company Sulfonamide herbicide antidote compositions and method of use
MA19709A1 (fr) 1982-02-17 1983-10-01 Ciba Geigy Ag Application de derives de quinoleine a la protection des plantes cultivees .
EP0094349B1 (de) 1982-05-07 1994-04-06 Ciba-Geigy Ag Verwendung von Chinolinderivaten zum Schützen von Kulturpflanzen
WO1984002919A1 (en) 1983-01-17 1984-08-02 Monsanto Co Plasmids for transforming plant cells
BR8404834A (pt) 1983-09-26 1985-08-13 Agrigenetics Res Ass Metodo para modificar geneticamente uma celula vegetal
MX159669A (es) 1983-12-12 1989-08-02 Ciba Geigy Ag Procedimiento para la preparacion de derivados de acilamida
DE3525205A1 (de) 1984-09-11 1986-03-20 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Pflanzenschuetzende mittel auf basis von 1,2,4-triazolderivaten sowie neue derivate des 1,2,4-triazols
BR8600161A (pt) 1985-01-18 1986-09-23 Plant Genetic Systems Nv Gene quimerico,vetores de plasmidio hibrido,intermediario,processo para controlar insetos em agricultura ou horticultura,composicao inseticida,processo para transformar celulas de plantas para expressar uma toxina de polipeptideo produzida por bacillus thuringiensis,planta,semente de planta,cultura de celulas e plasmidio
DE3680212D1 (de) 1985-02-14 1991-08-22 Ciba Geigy Ag Verwendung von chinolinderivaten zum schuetzen von kulturpflanzen.
DE3534948A1 (de) 1985-10-01 1987-04-09 Bayer Ag Fungizide und wachstumsregulatorische mittel
DE3686633T2 (de) 1985-10-25 1993-04-15 David Matthew Bisaro Pflanzenvektoren.
ES2018274T5 (es) 1986-03-11 1996-12-16 Plant Genetic Systems Nv Celulas vegetales resistentes a los inhibidores de glutamina sintetasa, preparadas por ingenieria genetica.
US5013659A (en) 1987-07-27 1991-05-07 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase
IL83348A (en) 1986-08-26 1995-12-08 Du Pont Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase
DE3633840A1 (de) 1986-10-04 1988-04-14 Hoechst Ag Phenylpyrazolcarbonsaeurederivate, ihre herstellung und verwendung als pflanzenwachstumsregulatoren und safener
CN87102789A (zh) 1987-04-13 1988-11-02 内蒙古粮食科研所 膨化人工乳加工工艺
DE3808896A1 (de) 1988-03-17 1989-09-28 Hoechst Ag Pflanzenschuetzende mittel auf basis von pyrazolcarbonsaeurederivaten
DE3817192A1 (de) 1988-05-20 1989-11-30 Hoechst Ag 1,2,4-triazolderivate enthaltende pflanzenschuetzende mittel sowie neue derivate des 1,2,4-triazols
EP0365484B1 (de) 1988-10-20 1993-01-07 Ciba-Geigy Ag Sulfamoylphenylharnstoffe
US5201931A (en) 1988-12-01 1993-04-13 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The National Research Council Of Canada Abscisic acid-related plant growth regulators - germination promoters
DD277835A1 (de) 1988-12-13 1990-04-18 Forschzent Bodenfruchtbarkeit Mittel zur erhoehung der stresstoleranz von kulturpflanzen
DD277935A1 (de) 1988-12-13 1990-04-18 Karl Marx Stadt Tech Textil Anordnung zur horizontalen verbindung von mauerwerksteilen mit unterschiedlicher waermedaemmung
DE3939010A1 (de) 1989-11-25 1991-05-29 Hoechst Ag Isoxazoline, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als pflanzenschuetzende mittel
DE3939503A1 (de) 1989-11-30 1991-06-06 Hoechst Ag Neue pyrazoline zum schutz von kulturpflanzen gegenueber herbiziden
JPH03234915A (ja) 1990-02-07 1991-10-18 Mabuchi Motor Co Ltd 小型モータの軸受装置及びその製造方法
WO1991013972A1 (en) 1990-03-16 1991-09-19 Calgene, Inc. Plant desaturases - compositions and uses
WO1991019806A1 (en) 1990-06-18 1991-12-26 Monsanto Company Increased starch content in plants
AU655197B2 (en) 1990-06-25 1994-12-08 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant plants
EP0492366B1 (de) 1990-12-21 1997-03-26 Hoechst Schering AgrEvo GmbH Neue 5-Chlorchinolin-8-oxyalkancarbonsäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Antidots von Herbiziden
SE467358B (sv) 1990-12-21 1992-07-06 Amylogene Hb Genteknisk foeraendring av potatis foer bildning av staerkelse av amylopektintyp
DE4103253C2 (de) 1991-02-04 2000-03-23 Aua Agrar Und Umweltanalytik G Mittel zur Erhöhung der Streßtoleranz von land- und forstwirtschaftlichen Kulturpflanzen
DE4104782B4 (de) 1991-02-13 2006-05-11 Bayer Cropscience Gmbh Neue Plasmide, enthaltend DNA-Sequenzen, die Veränderungen der Karbohydratkonzentration und Karbohydratzusammensetzung in Pflanzen hervorrufen, sowie Pflanzen und Pflanzenzellen enthaltend dieses Plasmide
TW259690B (ru) 1992-08-01 1995-10-11 Hoechst Ag
DE4331448A1 (de) 1993-09-16 1995-03-23 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Substituierte Isoxazoline, Verfahren zu deren Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung als Safener
DE19621522A1 (de) 1996-05-29 1997-12-04 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Neue N-Acylsulfonamide, neue Mischungen aus Herbiziden und Antidots und deren Verwendung
GB9613753D0 (en) * 1996-07-01 1996-09-04 Broekaert Willem F Plant protection method
JPH10239954A (ja) 1997-02-21 1998-09-11 Canon Inc 画像形成装置
DE19742951A1 (de) 1997-09-29 1999-04-15 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Acylsulfamoylbenzoesäureamide, diese enthaltende nutzpflanzenschützende Mittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
EP1013767A1 (en) * 1998-12-22 2000-06-28 American Cyanamid Company Method of screening for agrochemicals
AR031027A1 (es) 2000-10-23 2003-09-03 Syngenta Participations Ag Composiciones agroquimicas
US20040110637A1 (en) * 2001-01-31 2004-06-10 Frank Ziemer Method of safening crops using isoxazoline carboxylates
DE10127328A1 (de) * 2001-06-06 2002-12-19 Bayer Cropscience Gmbh Herbizide Mittel enthaltend Benzoylpyrazole und Safener
EP1382247A1 (en) * 2002-07-18 2004-01-21 Bayer CropScience GmbH Combinations of cyclohexanedione oxime herbicides and safeners
DE10337497A1 (de) * 2003-08-14 2005-03-10 Bayer Cropscience Ag 4-Biphenylsubstituierte-Pyrazolidin-3,5-dion-Derivate
DE10354628A1 (de) * 2003-11-22 2005-06-16 Bayer Cropscience Ag 2-Ethyl-4,6-dimethyl-phenyl-substituierte Tetramsäure-Derivate
US20080132415A1 (en) * 2004-12-14 2008-06-05 Allen Jayla R Method For Increasing Maize Yields
DE102005057250A1 (de) 2005-11-29 2007-06-06 Bayer Cropscience Gmbh Wirkstoffe zur Steigerung der Stressabwehr in Pflanzen gegenüber abiotischem Stress und Methoden zu ihrer Auffindung

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD277832A1 (de) * 1988-12-13 1990-04-18 Forschzent Bodenfruchtbarkeit Mittel zur erhoehung der stresstoleranz von kulturpflanzen
US20010001095A1 (en) * 1996-07-26 2001-05-10 University Of Maryland Eatern Shore Method for treating plants
WO2000028055A2 (en) * 1998-11-05 2000-05-18 Eden Bioscience Corporation Hypersensitive response elicitor-induced stress resistance
WO2004092398A2 (en) * 2003-04-15 2004-10-28 Basf Plant Science Gmbh Nucleic acid sequences encoding proteins associated with abiotic stress response and plant cells and plants with increased tolerance to environmental stress

Also Published As

Publication number Publication date
EA019372B9 (ru) 2014-07-30
TW200738885A (en) 2007-10-16
US20140349849A1 (en) 2014-11-27
CA2631353C (en) 2015-09-08
JP2009517415A (ja) 2009-04-30
CN101316505A (zh) 2008-12-03
IL191646A (en) 2014-08-31
US8901040B2 (en) 2014-12-02
EP2289310A1 (de) 2011-03-02
CA2631353A1 (en) 2007-06-07
IL191646A0 (en) 2008-12-29
IL233573A0 (en) 2014-08-31
US20070124839A1 (en) 2007-05-31
EP2289310B1 (de) 2012-03-28
AU2006319516A1 (en) 2007-06-07
WO2007062737A3 (de) 2007-07-26
KR20080075504A (ko) 2008-08-18
AR057179A1 (es) 2007-11-21
CN101316505B (zh) 2015-06-24
EA200801456A1 (ru) 2008-12-30
PL2289310T3 (pl) 2012-08-31
BRPI0619386B1 (pt) 2022-04-12
US9920383B2 (en) 2018-03-20
EA201100145A1 (ru) 2011-06-30
DE102005057250A1 (de) 2007-06-06
AU2006319516B2 (en) 2013-03-07
ES2383741T3 (es) 2012-06-25
EA015077B1 (ru) 2011-04-29
WO2007062737A2 (de) 2007-06-07
EP1956885A2 (de) 2008-08-20
JP5297810B2 (ja) 2013-09-25
IL233573A (en) 2015-01-29
BRPI0619386A2 (pt) 2011-10-04
ATE550930T1 (de) 2012-04-15
US20100267566A1 (en) 2010-10-21
KR101362803B1 (ko) 2014-02-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019372B1 (ru) Активные ингредиенты для повышения защиты растений от стресса, вызванного абиотическими факторами, и способ их обнаружения
Burgess et al. Action of the fungicide phosphite on Eucalyptus marginata inoculated with Phytophthora cinnamomi
Worrall et al. Treating seeds with activators of plant defence generates long‐lasting priming of resistance to pests and pathogens
Zhang et al. LUX ARRHYTHMO mediates crosstalk between the circadian clock and defense in Arabidopsis
Davis et al. Contrasting nutrient–disease relationships: potassium gradients in barley leaves have opposite effects on two fungal pathogens with different sensitivities to jasmonic acid
González-Verdejo et al. Selection of housekeeping genes for normalization by real-time RT–PCR: analysis of Or-MYB1 gene expression in Orobanche ramosa development
Cellini et al. N-Acyl homoserine lactones and lux solos regulate social behaviour and virulence of Pseudomonas syringae pv. actinidiae
Winter et al. Trichothecene production is detrimental to early root colonization by Fusarium culmorum and F. graminearum in fusarium crown and root rot of wheat
Hargarten et al. Physical and metabolic consequences of Hessian fly infestation are more severe on nonhost Brachypodium distachyon than on host-plant resistant wheat
Sun et al. Rice gene expression profiles responding to larval feeding of the striped stem borer at the 1st to 2nd instar stage
JP5366474B2 (ja) Ｄ−アロースを有効成分とする植物のジベレリンシグナル経路抑制剤およびその利用
Choi et al. Novel genes in response to varying water deficit in oil crop Camelina sativa
Namu et al. Response of selected Kenyan rice cultivars to infection by root knot nematode (Meloidogyne incognita)
MX2008006919A (en) Active ingredients for increasing a plant&#39;s defence in relation to abiotic stress, and methods for detecting said active ingredients
Tufan Dülger et al. Risk Assessment of Tetraconazole Fungicide at the Molecular Level in Hordeum vulgare L.
Deng et al. Induced sysmatic resistance of potato to common scab by MeJA
JP2011132158A (ja) 植物用耐病性増強剤
Mejia Dissection of defense responses of skl, an ethylene insensitive mutant of Medicago truncatula
O’Sullivan et al. Sensitivity of Septoria to fungicides–what’s new
Rani et al. Opportune period for screening wheat germ plasm against powdery mildew in Punjab
Boulot et al. ORGANIC ACID POTENTIALS VERSUS FUNGICIDES INFLUENCE IN BARLEY POWDERY MILDEW CONTROL.
Khilari et al. Response of Temperature and pH on growth of Trichoderma koningii and Gliocladium virens
Mallick et al. Biochemical evaluation of wheat genotypes for stress tolerance

Legal Events

Date Code Title Description
TH4A Publication of the corrected specification to eurasian patent
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment