EA017549B1 - Стабильные жидкие композиции антител против вируса бешенства - Google Patents
Стабильные жидкие композиции антител против вируса бешенства Download PDFInfo
- Publication number
- EA017549B1 EA017549B1 EA200970533A EA200970533A EA017549B1 EA 017549 B1 EA017549 B1 EA 017549B1 EA 200970533 A EA200970533 A EA 200970533A EA 200970533 A EA200970533 A EA 200970533A EA 017549 B1 EA017549 B1 EA 017549B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- zeg
- antibody
- rabies virus
- compositions
- months
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 211
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 title claims abstract description 21
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title abstract description 13
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title abstract 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 42
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims description 39
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 30
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 30
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 30
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 30
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 30
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 claims description 19
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 16
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 4
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 claims description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 3
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 claims 4
- 230000002064 post-exposure prophylaxis Effects 0.000 abstract 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 23
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 15
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 13
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 12
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 10
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 6
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 102200158977 rs116107386 Human genes 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 4
- 101100167365 Caenorhabditis elegans cha-1 gene Proteins 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- 101100460719 Mus musculus Noto gene Proteins 0.000 description 3
- 101100187345 Xenopus laevis noto gene Proteins 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000012502 diagnostic product Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 2
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 206010002515 Animal bite Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N Citric acid monohydrate Chemical compound O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000969594 Homo sapiens Modulator of apoptosis 1 Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102100021440 Modulator of apoptosis 1 Human genes 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 229920002642 Polysorbate 65 Polymers 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 229940124861 Rabies virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100537665 Trypanosoma cruzi TOR gene Proteins 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012443 analytical study Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007068 beta-elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229960002303 citric acid monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000852 deltoid muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 210000001840 diploid cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000001698 laser desorption ionisation Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001816 polyoxyethylene sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 235000010988 polyoxyethylene sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229940099511 polysorbate 65 Drugs 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960000999 sodium citrate dihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 238000001269 time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтическим композициям антител, в частности к жидким фармацевтическим композициям, содержащим антитела против вируса бешенства. Композиции могут использоваться для профилактики бешенства после контакта с источником заражения.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине. В частности, изобретение направлено на стабильные композиции специфичных антител против бешенства.
Уровень техники
В последние десять лет успехи биотехнологии сделали возможными идентифицировать, разработать и получить ряд антител для диагностики, профилактики и лечения многих различных заболеваний и нарушений. Примером таких антител служат антитела против вируса бешенства, описанные в документе \νϋ 2005/118644. Коктейль антител, включающий два таких антитела, СК57 и СК4098, является особенно эффективным и может использоваться для профилактики бешенства после контакта с источником заражения. В документе νθ 2005/118644 такие антитела были получены и использовались в РВ8.
Как и у любого белка, биологическая активность антитела, например степень его связывания или нейтрализующая активность, зависит от конформационной целостности, по меньшей мере, сердцевинной последовательности аминокислот, которая остается неповрежденной при защите множества функциональных групп белка от разрушения. Химическая и физическая нестабильность может вносить свой вклад в разрушение антитела. Поскольку антитела больше и сложнее, чем обычные органические и неорганические лекарственные препараты, то создание композиций таких антител имеет дополнительные трудности. На стабильность антител могут влиять такие факторы, как ионная сила, рН, температура, многократные циклы заморозки/оттаивания, концентрация антитела и силы трения. Активность антитела может быть потеряна в результате физической нестабильности, включая денатурацию, агрегацию (образование как растворимых, так и нерастворимых комплексов), осаждение и адсорбцию, а также в результате химической нестабильности, включая, например, рацемизацию, бета-элиминацию или дисульфидный обмен, гидролиз, дезамидирование и окисление, а также многое другое. Такая нестабильность потенциально может привести к образованию побочных продуктов антител или их производных, имеющих пониженную биологическую активность, повышенную токсичность и/или повышенную иммуногенность.
Хотя в предшествующих работах в данной области техники указывался ряд примеров вспомогательных веществ, которые могут быть надлежащим образом использованы при получении композиций антител для конкретных антител, невозможно предсказать, какие именно вспомогательные вещества должны быть добавлены и в каком количестве они должны быть добавлены для решения конкретных проблем нестабильности, которые может иметь конкретное антитело. Кроме того, сложно определить оптимальные условия, такие как концентрация антитела, рН и температура хранения, которые позволяют сохранить химическую и биологическую стабильность конкретного антитела в конкретной композиции. Принимая во внимание все факторы, которые могут изменяться, нахождение подходящих вспомогательных веществ и оптимальных условий для создания композиции из одного моноклонального антитела имеет множество сложностей. Очевидно, поиск подходящих вспомогательных веществ и оптимальных условий для создания композиции из двух различных моноклональных антител является даже более сложным и проблематичным. В частности, в уровне техники не было представлено долговременно стабильного фармацевтического препарата, содержащего два различных рекомбинантных моноклональных антитела.
Соответственно в данной области существует потребность в композициях, в которых не только одно моноклональное антитело, но и два конкретных различных моноклональных антитела против вируса бешенства были бы стабильными в условиях хранения в продолжительный период времени. Стабильность при хранении также должна сохраняться в случае сил трения, действующих во время транспортировки, и при изменении климатических условий, в частности при повышенной температуре и влажности воздуха. Кроме того, композиция должна подходить для предполагаемого пути введения, должна хорошо переноситься и иметь простую структуру.
Цель изобретения заключается в получении таких композиций.
Сущность изобретения
Композиции, соответствующие требованиям цели изобретения, были, как ни удивительно, найдены в форме водных растворов, которые, помимо двух различных моноклональных антител, содержали цитратный буфер, агент, регулирующий изотоничность и поверхностно-активное вещество. Неожиданно, было обнаружено, что фосфатный буфер приводит к нестабильности конкретных антител, причем эта нестабильность еще сильней увеличивалась при добавлении поверхностно-активного вещества. Таким образом, в изобретении представлены композиции специфичных антител против бешенства СК.57 и СК4098, или их функциональные варианты. Композиции содержат, помимо активного ингредиента (антитела или антител), цитратный буфер, агент, регулирующий изотоничность, и поверхностно-активное вещество. Композиции изобретения являются стабильными в течение одного года при -70 и при 5°С.
Краткое описание чертежей
Показана стабильность антитела СК57 против вируса бешенства (фиг. 1), СК4098 (фиг. 2) и смеси СК57 и СК4098 (фиг. 3) после хранения в течение 0 (белые столбцы), 2 (черные столбцы) и 4 недель (заштрихованные столбцы) при 40±2°С/75±5% относительной влажности согласно измерениям НР-8ЕС. Были протестированы следующие буферные системы (слева направо): цитратная (20 мМ, рН 6,0); цитратная (20 мМ, рН 6,5); фосфатная (20 мМ, рН 7,0); фосфатная (20 мМ, 0,01% вес./об. полисорбат 80, рН 7,0).
- 1 017549
Подробное описание изобретения
Композиции по изобретению содержат по меньшей мере одно из антител, предпочтительно оба антитела СК57 (тяжелая цепь 8ЕО ΙΌ N0:1 и легкая цепь 8Е0 ΙΌ N0:2) и СК4098 (тяжелая цепь 8Е0 ΙΌ N0:3 и легкая цепь 8Е0 ΙΌ N0:4). Идентификация, выделение, получение и характеристика моноклональных антител против вируса бешенства СК57 и СК4098 подробно описаны в документе XV0 2005/118644, который включен в настоящий документ в качестве ссылки. Функциональные варианты этих антител могут обладать похожими физико-химическими свойствами, из-за высокой степени их подобия, и, следовательно, также входят в рамки изобретения. В настоящем изобретении функциональные варианты определяются как антитела с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере на 95%, предпочтительно по меньшей мере на 97%, например по меньшей мере на 98 или 99% гомологична СК59 или СК4098, и такие антитела способны конкурентно связываться с мишенью, распознаваемой родительской молекулой (родительской молекулой является СК59 или СК4098 соответственно), и обладают активностью по нейтрализации вируса бешенства. Мишенью антитела является антиген (для рассматриваемых антител - вирус бешенства, в частности его 0-белок), который ниже обозначен как эпитоп. Мишени родительских молекул были описаны в документе ν0 2005/118644, а определение конкуренции за связывание мишени может осуществляться стандартными методами, известными специалисту в данной области. Предпочтительно функциональные варианты представляют собой антитела человека, и предпочтительно молекулы 1дС1. В предпочтительных вариантах осуществления аминокислотная последовательность функционального варианта по меньшей мере на 95, 97, 98 или 99% идентична родительскому антителу. Термин функциональный вариант в настоящем документе, таким образом, относится к моноклональному антителу, которое содержит аминокислотную последовательность, отличающуюся на одну или несколько аминокислот по сравнению с аминокислотными последовательностями родительского моноклонального антитела. Функциональный вариант может содержать консервативные замены последовательности, включая аминокислотные замены, вставки или делеции. Изменения аминокислотной последовательности могут быть осуществлены с помощью стандартных методик, известных в данной области, таких как сайт-направленный мутагенез, молекулярное клонирование, сайтнаправленный мутагенез с использованием олигонуклеотидов и случайный ПЦР-опосредованный мутагенез в нуклеотидных последовательностях, кодирующих антитела. Консервативные аминокислотные замены включают такие замены, при которых аминокислотный остаток заменяется другим аминокислотным остатком, обладающим сходными структурными и химическими свойствами. Семейства аминокислот, имеющие сходные боковые цепи, были описаны в данной области. Такие семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин, триптофан), неполярными боковыми цепями (например, глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин), боковыми цепями с бета-ветвлением (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан). Специалисту в данной области будет очевидно, что, помимо приведенных выше классификаций аминокислот, также могут использоваться и другие классификации. Кроме того, вариант может содержать неконсервативные аминокислотные замены, например замену аминокислоты аминокислотным остатком, обладающим отличающимися структурными и химическими свойствами. Подобные небольшие вариации также могут включать делеции или вставки аминокислот или то и другое. Руководство по определению того, какие аминокислотные остатки могут быть заменены, вставлены или удалены без потери иммунологической активности, может быть найдено с помощью хорошо известных в технике компьютерных программ. Компьютерные алгоритмы, такие как, в частности, Оар или ΒοδΙ.ΓίΙ, известные специалистам в данной области техники, могут использоваться для оптимального выравнивания сравниваемых аминокислотных последовательностей и определения подобных или идентичных аминокислотных остатков.
Функциональные варианты могут иметь такую же, а также отличную (большую или меньшую) степень связывания по сравнению с родительским антителом, но при этом они сохраняют способность к специфическому связыванию вируса бешенства или его фрагмента, и могут обладать такой же, большей или меньшей нейтрализующей активностью в отношении вируса бешенства, чем родительское антитело.
В конкретном варианте осуществления композиция по изобретению содержит первое моноклональное антитело против вируса бешенства, которое имеет каппа-легкую цепь, и второе моноклональное антитело против вируса бешенства, которое имеет лямбда-легкую цепь. Благодаря этому можно легко определить концентрацию антитела каждого антитела, поскольку специфичный иммуноферментный анализ может быть выполнен для каждой из каппа- и лямбда-легкой цепи.
Термин моноклональное антитело, используемый в данном документе, относится к композиции молекул антител, состоящих из одной молекулы. Моноклональное антитело демонстрирует специфичность связывания и обладает аффинностью только к одному конкретному эпитопу. Моноклональные антитела по изобретению (СК.57 и СК4098, а также их функциональные варианты), используемые в композициях по настоящему изобретению, являются антителами человека и относятся к классу антител ΙβΟ. предпочтительно к 1дС1.
- 2 017549
Способы получения моноклональных антител хорошо известны в уровне техники и описаны, например, в работе ЛиНЬоФек: А ЬаЬогаЮгу Мапиа1, Ебйеб Ьу: Е. Наг1о\\' аиб Ό, Ьаие (1988), Со1б 8рппд НатЬот ЬаЬогаЮгу, Со1б 8ртшд НагЬог, Ыете Уотк, которая включена в данный документ в качестве ссылки.
Термин специфически связывает означает иммуноспецифическое связывание с антигеном или его фрагментом и отсутствие иммуноспецифического связывания с другими антигенами. Моноклональное антитело, которое иммуноспецифически связывается с антигеном, может связываться другими пептидами или полипептидами с более низкой аффинностью, что определяется, например, посредством радиоиммунологического анализа (РИА), твердофазного иммуноферментного анализа (ЕЬ18А), В1АСОВЕ, или других исследований, известных в данной области. Моноклональные антитела или их фрагменты, которые иммуноспецифически связываются с антигеном, могут иметь перекрестную реакцию с родственными антигенами. Предпочтительно моноклональные антитела или их фрагменты, которые иммуноспецифически связываются с антигеном, не имеют перекрестной реакции с родственными антигенами.
Под фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом понимается любое инертное вещество, которое объединяется с активной молекулой, такой как моноклональное антитело, для получения приемлемой или удобной лекарственной формы. Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество - вспомогательное вещество, являющееся нетоксичным для реципиента при используемых дозах и концентрациях, а также совместимое с другими ингредиентами композиции, содержащей моноклональное антитело.
Термин побочный продукт охватывает нежелательные продукты, которые уменьшают или понижают долю терапевтического/профилактического антитела в заданной композиции. Характерные побочные продукты включают агрегаты антитела, фрагменты антитела, например продуцируемые при разрушении антитела путем дезамидирования или гидролиза, или смесь вышеупомянутого. Обычно агрегаты представляют собой комплексы, которые имеют больший молекулярный вес, чем мономерные антитела. Продукты разрушения антитела включают, например, фрагменты антитела, например, возникающие при дезамидировании или гидролизе. Обычно продукты разрушения представляют собой комплексы, молекулярный вес которых меньше, чем у мономерного антитела. В случае антитела 1дС вес таких продуктов распада обычно меньше чем около 150 кДа.
Термин стабильная/стабилизированная композиция, как используется в данном документе, относится к композиции, в которой находящееся в ней антитело сохраняет свою физическую стабильность/идентичность/целостность и/или химическую стабильность/идентичность/целостность и/или биологическую активность после хранения. Различные аналитические методики измерения стабильности белков известны из уровня техники, их обзор приведен, например, в работе Рерббе аиб Рто1еш Эгид ИеЦуету, 247-301, Ушсеи! Ьее Еб., Магсе1 Иеккет, 1ис., Иете Уотк, Ν.Υ., РиЬ§. (1991) аиб 1оие§, А. Абу. Итид ИеНуету Веу. 10:29-90 (1993). Стабильность может быть измерена при выбранной температуре или других условиях хранения для выбранного периода времени. Стабильность может определяться с помощью по меньшей мере одного метода, выбранного из группы, состоящей из визуального осмотра, δΌδ-РАСЕ, 1ЕЕ, НР8ЕС, ВРЕ1Т и каппа/лямбда ЕЬ18А. Моноклональное антитело сохраняет свою физическую стабильность в фармацевтической композиции, если оно не демонстрирует признаков агрегации, осаждения и/или денатурации при визуальном изучении цвета и/или прозрачности, или при измерении посредством рассеивания ультрафиолетового излучения, δΌδ-РАСЕ или посредством эксклюзионной хроматографии (высокого давления) (НРδЕС). При использовании композиций по изобретению предпочтительно, чтобы 5% или менее, обычно 4% или менее, предпочтительно 3% или менее, более предпочтительно 2% или менее и в особенности 1% или менее антител образовывали агрегаты согласно измерению посредством НРδЕС или любого другого подходящего метода измерения образования агрегатов. Например, антитело считается стабильным в конкретной композиции, если мономер антитела имеет степень чистоты > около 90%, предпочтительно > около 95%, в частности > около 98% согласно измерению посредством НРδЕС после определенного периода времени при определенных условиях хранения вышеупомянутой конкретной композиции. Таким образом, антитела СВ57 и СВ4098 являются стабильными в композициях изобретения после хранения при 5±3°С в течение по меньшей мере 18 месяцев, т.е. мономерный пик НРδЕС-хроматограммы включает площадь, составляющую >95% общей площади всех пиков (в табл. 9 показано, что площадь основного пика даже >99%). Химическая стабильность может быть оценена путем определения и количественного измерения химически измененных форм белка. Химические изменения могут включать изменение размера (например, клипирование), которое можно оценить посредством, например, (НР^ЕС, δΌδ-РАСЕ и/или ионизации лазерной десорбцией с использованием матрицы/времяпролетной масс-спектрометрии вторичных ионов (МАЬП1/ТОЕ Μδ). Другие виды химического изменения включают изменение заряда (например, возникающего вследствие дезамидирования), которое может быть измерено посредством, например, ионообменной хроматографии. Антитело сохраняет свою биологическую активность в фармацевтической композиции в заданный момент времени, если биологическая активность антитела в заданный момент времени составляет по меньшей мере около 90% (в пределах ошибок измерения) биологической активности, демонстрированной в момент окончания приготовления фармацевтической композиции, что определяется посредством, например, реакции свя
- 3 017549 зывания или вируснейтрализующего анализа.
Около при использовании в настоящем изобретении означает ±10%, если не указано другое.
В первом аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, активный ингредиент предпочтительно в терапевтически эффективном количестве и по меньшей мере фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Предпочтительно фармацевтическая композиция содержит цитратный буфер, изменяющий тоничность агент, поверхностно-активное вещество и два моноклональных антитела против вируса бешенства, при этом антитела являются отличными друг от друга. Композиция может быть твердой, например замороженной или лиофилизированной, но предпочтительно является жидкой, например водной. Композиция может содержать по меньшей мере два различных моноклональных антитела против вируса бешенства, в частности (1) СК.57 (антитело с тяжелой цепью 8ЕО Ш N0:1 и легкой цепью 8Е0 Ш N0:2) или его функциональный вариант и (и) СК.4098 (антитело с тяжелой цепью 8Е0 Ш N0:3 и легкой цепью 8Е0 Ш N0:4) или его функциональный вариант.
В конкретном варианте осуществления композиция по изобретению обладает вируснейтрализующей активностью, находящейся в диапазоне от около 250 до около 1500 МЕ/мл, например от около 300 до около 1400 МЕ/мл, обычно от около 380 до около 1350 МЕ/мл. Специалист в данной области вполне может измерять нейтрализацию вируса бешенства. Нейтрализация может быть, например, измерена в соответствии с описанным в работе ЬаЬога1огу 1сс11пк|ис5 ίη гаЫек, о Ебйеб Ьу: Е.-Х. МеНш, М.М. Кар1ап аиб Н. Корго№к1 (1996), 4111 ебйюи, СЬар1ег8 15-17, \Уог1б НеаНЬ 0гдашха11оп. Оеиеуа.
Подходящим и известным способом исследования нейтрализующей активности является КЕЕ1Тисследование.
В одном из вариантов осуществления нейтрализующая активность вируса бешенства у композиций по изобретению после 12 месяцев хранения при 5±3°С составляет по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 90%, более предпочтительно по меньшей мере 95%, предпочтительнее по меньшей мере 98% и, в частности, 100% нейтрализующей активности для вируса бешенства у композиций до начала хранения. В определенных вариантах осуществления нейтрализующая активность вируса бешенства у композиций по изобретению после 3 месяцев хранения при 25±2°С составляет по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95%, более предпочтительно по меньшей мере 98% и, в частности, 100% нейтрализующей активности для вируса у композиций изобретения до начала хранения.
Композиции по изобретению содержат поверхностно-активное вещество, также известное как стабилизатор. Поверхностно-активные вещества могут включать полисорбаты, но не ограничиваются ими. Специалисту известно, что в качестве поверхностно-активных веществ могут использоваться другие поверхностно-активные вещества, например неионогенные и ионогенные детергенты, если они являются фармацевтически приемлемыми, т.е. подходящими для введения людям. В предпочтительном варианте осуществления изобретение предоставляет композицию по изобретению, в которой поверхностноактивным веществом является полисорбат, такой как полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 65 или полисорбат 80, при этом предпочтительным является полисорбат 80. В одном из вариантов осуществления полисорбат 80 присутствует в композициях в количестве от около 0,0005 до около 0,05% вес./об., предпочтительно от около 0,005 до около 0,03% вес./об., более предпочтительно от около 0,008 до около 0,015% вес./об. В предпочтительном варианте осуществления полисорбат 80 присутствует в количестве около 0,01% вес./об.
В определенных вариантах осуществления изобретение относится к композициям по изобретению, в которых цитратный буфер, например, буфер дигидрат цитрата натрия (2,5 мг/мл)/моногидрат лимонной кислоты (0,3 мг/мл) присутствует в концентрации от около 5 до около 25 мМ, предпочтительно от около 7 до около 20 мМ, более предпочтительно от около 8 до около 15 мМ и, в частности, от около 9 до около 12 мМ. В предпочтительном варианте осуществления цитратный буфер присутствует в концентрации около 10 мМ.
В определенных вариантах осуществления изобретение относится к композициям по изобретению, в которых рН находится в диапазоне от около 5,2 до около 6,8, обычно от около 5,5 до около 6,5, предпочтительно от около 5,7 до около 6,3, более предпочтительно от около 5,8 до около 6,2 и, в частности, от около 5,9 до около 6,1. В предпочтительном варианте осуществления рН составляет около 6,0.
В конкретном неограничивающем варианте осуществления изменяющий тоничность агент является хлоридом натрия. В качестве изменяющих тоничность агентов могут, например, использоваться другие соли или, например, сахара и т.п., если, как известно квалифицированному специалисту, они являются фармацевтически приемлемыми. В определенных вариантах осуществления изобретения изменяющий тоничность агент присутствует в концентрации от около 50 до около 250 мМ, обычно от около 75 до около 225 мМ, предпочтительно от около 100 до около 200 мМ и более предпочтительно от около 125 до около 175 мМ. В предпочтительном варианте осуществления изменяющий тоничность агент присутствует в концентрации около 150 мМ. В определенных вариантах осуществления осмоляльность композиций по изобретению находится в диапазоне от около 250 до около 350 мОсм/кг, предпочтительно от около 270 до около 330 мОсм/кг, более предпочтительно от около 280 до около 320 мОсм/кг и, в частности, от
- 4 017549 около 290 до около 310 мОсм/кг. В предпочтительном варианте осуществления осмоляльность составляет около 300 мОсм/кг. Другими словами, композиции предпочтительно являются изотоническими, т.е. имеют в основном такое же осмотическое давление, что и кровь человека. Изотоничность может быть измерена, например, с помощью осмометра парового давления или криоскопического осмометра. Осмоляльность композиций изобретения может, например, регулироваться посредством одного или более изменяющих тоничность агентов.
Концентрация каждого антитела в композициях по изобретению предпочтительно находится в диапазоне от около 0,1 до 2,0 мг/мл, обычно в диапазоне от около 0,1 до 1 мг/мл. В определенных неограничивающих вариантах осуществления концентрация каждого антитела составляет 0,15 (±20%) мг/мл. В других неограничивающих вариантах осуществления каждое антитело присутствует в концентрации 0,3 (±20%) мг/мл (т.е. итого 0,6 мг/мл для двух антител).
В определенных вариантах осуществления (белковое) соотношение двух антител находится между 5:1 и 1:5, предпочтительно между 2:1 и 1:2 и, в частности, составляет около 1:1.
Кроме того, композиция по изобретению может содержать другие вспомогательные вещества, включая, но не ограничиваясь, перечисленным ниже: аминокислоты и их соли, сахара, белки, разбавители, солюбилизирующие компоненты, рН-модификаторы, болеутоляющие средства, дополнительные буферы, другие органические и неорганические соли, антиоксиданты и т.п. Однако является предпочтительным, чтобы композиции по настоящему изобретению не содержали других вспомогательных веществ помимо цитратного буфера, изменяющего тоничность агента и поверхностно-активного вещества.
В композициях по изобретению моноклональные антитела против вируса бешенства СК57 и СК4098 являются стабильными при температуре от около 2 до около 8°С в течение по меньшей мере 1 года, обычно в течение по меньшей мере 18 месяцев. Предпочтительно они могут быть стабильными при температуре около 2-8°С в течение по меньшей мере 2 лет, более предпочтительно 3 лет.
Кроме того, моноклональные антитела против вируса бешенства являются стабильными в композициях по изобретению при температуре около 25±2°С в течение по меньшей мере 2 месяцев. Помимо этого, моноклональные антитела против вируса бешенства являются стабильными в композициях по изобретению при температуре около 40±2°С в течение по меньшей мере 2 недель.
В определенных вариантах осуществления композиции подходят для внутримышечного, внутрикожного, подкожного введения, локальной инъекции в рану или комбинации вышеперечисленного. Следовательно, композиции предпочтительно являются стерильными. Способы стерилизации композиций хорошо известны в данной области и включают, например, фильтрацию через стерильные мембраны или автоклавирование ингредиентов композиции при температуре около 120°С в течение 30 мин.
В предпочтительных вариантах осуществления композиции в основном не содержат эндотоксин. Эндотоксины представляют собой низкомолекулярные комплексы с массой около 10 кДа, связанные с внешней клеточной стенкой грамотрицательной бактерии, которые могут вызывать пирогенные реакции после парентерального введения пациенту. Соответственно ΡΌΆ установила верхний предел, составляющий 5 ЕЭ на дозу на килограмм массы тела в единичный одночасовой период для внутривенного применения лекарств (см., например, Тйс ипйеб 8!а!е§ Рйагтаеоре1а1 СоиуеШюи (И8Р), Рйагтаеоре1а1 Рогит 26 (1):223 (2000)). В определенных вариантах осуществления концентрация эндотоксина в композиции составляет менее чем около 5,0 единиц эндотоксина на миллилитр (ЕЭ/мл) (при концентрации, составляющей менее чем около 5,0 ЕЭ/мл, в данном документе считается, что композиция в основном не содержит эндотоксин), предпочтительно менее чем около 2,5 ЕЭ/мл, более предпочтительно менее чем около 1,0 ЕЭ/мл, даже более предпочтительно менее чем около 0,5 ЕЭ/мл и, в частности, менее чем около 0,30 ЕЭ/мл. В определенном варианте осуществления содержание эндотоксина в композиции находится в диапазоне от около 0,001 до около 5,0 ЕЭ/мл. Методы измерения эндотоксинов известны специалисту в данной области техники и включают, но не ограничиваются нижеперечисленным: гельтромбовые исследования, турбидиметрические (спектрофотометрические) исследования и хромогенные исследования.
Профилактика после контакта с источником заражения (РЕР) требуется для людей, возможно, взаимодействовавших с животным, зараженным бешенством. Возможные взаимодействия включают укусы (т.е. проникновение зубов через кожу), включая укусы животных, и не связанные с укусом взаимодействия. Композиции по изобретению могут вводиться индивиду, для которого это необходимо, с целью профилактики и/или лечения инфекции вируса бешенства, например профилактики после контакта с источником заражения. Композиции по изобретению могут использоваться вместе с другими молекулами, подходящими для диагностики, профилактики и/или лечения вируса бешенства. Например, они могут вводиться вместе с вакциной против вируса бешенства. В качестве альтернативного варианта вакцина также может вводиться до или после введения композиций по изобретению. Введение композиций по изобретению с вакциной подходит для профилактики после контакта с источником заражения. Вакцины против вируса бешенства включают (но не ограничиваются перечисленным ниже) вакцину на очищенных клетках куриных эмбрионов (РСЕС) (КаЬЛуегТ КаЫрцг), вакцину на диплоидных клетках человека (НИСУ; вакцина 1тоуах) и антирабическую адсорбированную вакцину (КУЛ). Предпочтитель
- 5 017549 но вводится единственный болюс композиций по изобретению. Терапевтический режим профилактики после контакта с источником заражения у индивидуумов, ранее не иммунизировавшихся против вируса бешенства, включает введение пяти доз вакцины против бешенства внутримышечно в дельтовидную мышцу на 0, 3, 7, 14 и 28 день после контакта. Композиции по изобретению должны вводиться в раны или около них в день 0 или, в противном случае, как можно быстрее после контакта с источником заражения, при этом оставшийся объем вводиться внутримышечно в месте, удаленном от вакцины. Не подвергавшимся вакцинации индивидуумам рекомендуется введение антител против вируса бешенства. Вводится терапевтически эффективное количество антитела или антител, которое является, по меньшей мере, частично эффективным для РЕР бешенства, т.е. для нейтрализации вируса бешенства.
В еще одном аспекте изобретение относится к фармацевтической стандартной лекарственной форме, содержащей эффективное количество композиции по изобретению, для профилактической обработки индивида после контакта с источником заражения посредством введения лекарственной формы индивиду. В предпочтительном варианте осуществления индивидом является человек. Человек может быть взрослым или ребенком. Термин фармацевтическая стандартная лекарственная форма при использовании в данном документе относится к физически дискретной единице, которая может служить в качестве единичной дозы для индивидов, подвергающихся лечению, при этом каждая единица содержит заранее определенное количество активного компонента, которое согласно расчетам позволит достичь желаемого терапевтического/профилактического эффекта, вместе с требуемым фармацевтическим носителем, разбавителем или наполнителем.
Стандартная лекарственная форма может представлять собой контейнер, содержащий композицию. Подходящие контейнеры включают запечатанные ампулы, пузырьки, флаконы, шприцы и пробирки, но не ограничиваются перечисленным выше. Контейнеры могут быть изготовлены из ряда материалов, например из стекла или пластика, и могут иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может быть пузырьком, имеющим пробку, поддающуюся прокалыванию с помощью иглы для подкожных инъекций). В предпочтительном варианте осуществления контейнер является пузырьком. Пузырек предпочтительно вмещает объем от около 0,3 до около 3 мл. Предпочтительно пузырек содержит антитела против вируса бешенства в количестве от около 0,1 до около 2,0 мг. В одном из вариантов осуществления пузырек содержит итого 750-2000 МЕ моноклональных антител, нейтрализующих вирус бешенства, в одном пузырьке. Пузырек такого типа может применяться для введения взрослым, тогда как пузырек, содержащий всего 250-750 МЕ моноклональных антител, нейтрализующих вирус бешенства, в одном пузырьке, может быть подходящим для введения детям. Антитела обычно входят в рецептуру композиций изобретения в терапевтически эффективном количестве. Схемы приема могут изменяться в целях обеспечения оптимального желаемого ответа (например, терапевтического ответа). Подходящий диапазон доз может составлять, например, 10-30 МЕ/кг массы тела, в частности 20 МЕ/кг массы тела.
Фармацевтическая стандартная лекарственная форма может находиться в наборе, дополнительно содержащем инструкции по применению. Набор может дополнительно содержать контейнеры, в которых находятся фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, и может включать материалы, целесообразные с коммерческой точки зрения и с точки зрения потребителя, включая фильтры, иглы, шприцы. С наборами могут быть связаны инструкции, обычно включаемые в серийные комплекты терапевтических, профилактических и диагностических продуктов, которые содержат информацию, например, о показаниях, применении, дозировке, производстве, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, относящихся к использованию таких терапевтических, профилактических и диагностических продуктов. В определенных вариантах осуществления набор содержит инструкции по использованию подходящего объема для достижения дозировки от около 5 до около 40 МЕ/кг, например 20 МЕ/кг.
Кроме того, в настоящем изобретении рассматривается способ улучшения хранения двух моноклональных антител против вируса бешенства в одной, например отдельной, композиции путем разработки рецептуры антител (СК57 и СК4098 или их функциональные варианты) в виде жидкой фармацевтической композиции по изобретению. Композиция может храниться при температуре от около 2 до около 40°С, например между около 2-8°С. Однако композиции также могут храниться при температурах ниже 2°С, например около -20, -70°С и т.д. Путем хранения антител в специальных композициях по изобретению количество образуемого побочного продукта для антител снижается. Исходя из практических соображений, предпочтительным является хранение отдельных антител СК.57 и СК4098 в замороженном виде, например при -70±10°С, до их смешивания, тогда как итоговый продукт (смесь СК57 и СК4098) предпочтительно хранится в жидкой форме при 5±3°С.
В еще одном аспекте изобретение также относится к жидким фармацевтическим композициям, содержащим единственное моноклональное антитело против вируса бешенства, например СК57 или СК4098, или функциональный вариант одного из них. Предпочтительно данные композиции содержат все вышеописанные в данном документе элементы и вспомогательные вещества. Таким образом, в предпочтительных вариантах осуществления они содержат цитратный буфер (5-25 мМ) и имеют рН, равный 5,5-6,5, например около 6,0; содержат изменяющий тоничность агент (например, хлорид натрия, 50-250 мМ, например около 150 мМ); содержат поверхностно-активное вещество, например полисорбат 80
- 6 017549 (0,0005-0,05%, например около 0,01%), и являются предпочтительно в основном изотоническими, стерильными и в основном не содержащими эндотоксин. Элементы и вспомогательные вещества, которые могут отличаться от описанных выше для композиций, содержащих два различных моноклональных антитела против вируса бешенства, указаны ниже.
В определенных вариантах осуществления композиции по изобретению могут содержать единственное моноклональное антитело против вируса бешенства в количестве от около 0,1 до около 6,0 мг/мл, обычно от около 1,0 до около 4,0 мг/мл, например от около 2,0 до около 3,0 мг/мл. В конкретном варианте осуществления композиция имеет вируснейтрализующую активность против вируса бешенства, находящуюся в диапазоне от около 300 до около 1600 МЕ/мг, например от около 500 до около 1250 МЕ/мг. Композиции, содержащие единственное антитело в соответствии с описанным выше, могут быть объединены/смешаны друг с другом с целью получения композиций по изобретению, содержащих два антитела, т.е. смеси антител.
Примеры
В целях иллюстрации изобретения представлены следующие примеры. Примеры не предназначены для ограничения объема изобретения любым способом. Как правило, при осуществлении на практике настоящего изобретения применяются, если не указано обратное, обычные методики из области химии, молекулярной биологии, технологии рекомбинантных ДНК, иммунологии, например технологии антител и стандартные методики приготовления полипептидов, в соответствии, например, с описанным в работах 8атЬгоок, Бтйксй апб Машабк, Мо1еси1аг Ε1οηίη§: Со1б 8рпп§ НатЬот ЬаЬота1огу Ргекк (1989); АпНЬобу Епщпссппд Рго1осо1к (МеШобк ίη Мо1еси1аг Вю1оду), уо1. 51, Еб.: Раи1 8., Нитапа Ргекк (1996); ЛпНЬобу Епщпееппд: А РтасИса1 Арртоасй (РтасИса1 Арртоасй 8епек. 169), Ебк.: МсСаГГеПу 1. е! а1., Нитапа Ргекк (1996); АпбЬоб1ек: А ЬаЬота1огу Мапиа1, Наг1оте апб Ьапе, Со1б 8рпп§ НагЬог ЬаЬота1огу Ргекк (1999); апб Сиггеп! Рго!осо1к шМо1еси1аг Вю1оду, Ебк. АикиЬе1 е! а1., 1оЕп Абеу & 8опк (1992).
Аминокислотные последовательности антител СК57 и СК4098 приведены в табл. 10. Идентификация, клонирование, подготовка и получение характеристик этих нейтрализующих вирус бешенства антител были подробно описаны в документе АО 2005/118644. Антитела широкомасштабно производились в основном тем же способом. Исходная культура клеток РЕК.С6, стабильно экспрессирующих антитело против вируса бешенства, была разморожена, клетки были культивированы и культуры были выращены и использованы для засевания в биореакторе. Биореактор первоначально функционировал в пакетном режиме, затем в пакетном режиме с подачей субстрата. Среда, содержащая соответствующее антитело, выращивалась, очищалась посредством центрифугирования и фильтровалась до начала дальнейшей нисходящей обработки. Процесс нисходящей очистки состоял из стандартных шагов хроматографии и фильтрации, после чего производился буферный обмен с буфером композиции, имеющим нехватку полисорбата 80 и концентрации, с целью получения требуемой концентрации антитела. После добавления полисорбата 80 и фильтрации полученное лекарственное вещество (антитело СК.57 или антитело СК4098) хранилось при -80°С до последующего использования. В целях производства фармацевтического продукта лекарственные вещества были разбавлены буфером композиции, были измерены концентрации антител и два разбавленных раствора антител были смешаны и профильтрованы перед итоговым заполнением.
В целях изучения стабильности были приготовлены и проанализированы различные композиции лекарственных веществ (отдельные антитела) и фармацевтического продукта (смесь антител). Образцы различных композиций были проанализированы в различные моменты времени и при различных температурах с использованием различных аналитических методов, хорошо известных в данной области.
НР8ЕС, 8И8-РАСЕ (редуцированный и нередуцированный), концентрация белка (А280), 1ЕБ, внешний вид, рН и осмоляльность использовались для оценки стабилизирующего воздействия различных буферов композиций на антитело СК57, антитело СК4098 и их смеси.
НР8ЕС частично использовалась для оценки наличия продуктов распада антител по причине агрегации или протеолиза. 8И8-РАСЕ частично использовался для оценки целостности исходного антитела и наличия примесей и потенциальных продуктов распада. Концентрация белка измерялась для оценки поддержания концентрации белка в композиции в допустимых пределах. 1ЕБ использовалось для оценки наличия и целостности изоформ антител, которые могут присутствовать в композициях, и для их наблюдения с течением времени для оценки изменений, которые могут появиться по причине дезамидирования или потери сиаловой кислоты. Внешний вид композиции проверялся на основании визуального наблюдения чистоты, цвета и наличия частиц. рН измерялся для оценки поддержания рН композиции в допустимых пределах от около 5,5 до около 6,5. Осмоляльность измерялась для оценки поддержания осмоляльности композиции в допустимых пределах от около 250 до около 350 мОсм/кг.
В первом исследовании тестировались различные буферные системы. Для этой цели композиции антител против вируса бешенства, смешанные в цитратных буферах, сравнивались с композициями антител против вируса бешенства, смешанными в фосфатных буферах. Композиции, содержащие СК57 (0,1 мг/мл), СК4098 (0,15 мг/мл) или комбинацию/смесь (смесь 1:1,5) СК57 (0,1 мг/мл) и СК4098 (0,15 мг/мл) в 20 мМ цитратном буфере (рН 6,0) или 20 мМ цитратном буфере (рН 6,5), были стабильными при хранении в течение 4 недель при 5±3°С/относительной влажности окружающей среды,
- 7 017549
25±2°С/60±5% относительной влажности и 40±2°С/75±5% относительной влажности, что было показано с помощью НР8ЕС-анализа. Для всех композиций чистота мономера антител составляла (% площади) >96%, что определялось посредством НР8ЕС (см. фиг. 1-3). Композиции, содержащие СК57 (0,1 мг/мл), СК4098 (0,15 мг/мл) или комбинацию (смесь 1:1,5) СК57 (0,1 мг/мл) и СК4098 (0,15 мг/мл) в 20 мМ фосфатном буфере (рН 7,0), имели чистоту мономера антитела, которая была значительно ниже после хранения в течение 4 недель при 40±2°С/75±5% относительной влажности по сравнению с композициями в цитратных буферах для того же периода времени и при тех же температурных условиях (см. фиг. 1-3). Когда в фосфатный буфер добавлялся полисорбат 80 (0,01% вес./об.), чистота мономера антитела уменьшалась еще больше до значений около 70% для СК4098 и около 85% для СР57 и комбинации после хранения вплоть до 4 недель при 40±2°С/75±5% относительной влажности (см. фиг. 1-3). Результаты ясно показывают, что стабильность отдельных антител, так же как и стабильность смеси антител, намного выше в цитратных буферах по сравнению с фосфатными буферами. В фосфатных буферах антитела разрушались посредством фрагментации. Антитела были одинаково стабильными в композициях, содержащих цитратные буферы с рН 6,0 и 6,5. Кроме того, был сделан вывод о том, что добавление полисорбата 80 в фосфатные буферы вызывает дополнительное загрязнение антител. Результаты, полученные с помощью НР8ЕС, были подтверждены другими методами анализа, включая 1ЕР и δΌδ-РАОЕ (редуцированный и нередуцированный) (данные не показаны). На основании исследования в качестве буферной системы был выбран цитрат.
В целях определения оптимальной концентрации поверхностно-активного вещества в композициях были проанализированы основанные на цитрате композиции, содержащие полисорбат 80 в различных концентрациях (см. табл. 1). Композиции получали следующим образом. Антитела СК.57 и СР4098 (лекарственные вещества) получали в основном так, как описано выше. Они фильтровались через фильтр 0,1 мкм. Концентрация белка была одинаковой до и после фильтрации согласно измерению посредством определения концентрации белка А280. Концентрация СР57 составляла 2,5 мг/мл и концентрация СР4098 составляла 1,0 мг/мл. Затем приготовляли буфер, содержащий 10 мМ цитрат (рН 6,0) и 50 мМ хлорид натрия, и буфер, содержащий 10 мМ цитрат (рН 6,0), 50 мМ хлорид натрия и 5% полисорбат 80. Композиции получали в соответствии с табл. 2. Итоговый объем достигался с буфером, содержащим 10 мМ цитрат (рН 6,0) и 50 мМ хлорид натрия. Определялась осмоляльность всех композиций и добавлялся хлорид натрия для доведения композиций до осмоляльности около 300 мОсм/кг (изоосмотической), т.е. итоговая концентрация хлорида натрия в композициях составляла 150 мМ. В конце все композиции фильтровались с помощью 0,22-мкм фильтров и разливались (400 мкл) в 2-мл пробирки Эппендорф для всех тестов, за исключением проверки внешнего вида, вибрационного исследования и анализа рН, в которых использовались 5-мл ампулы для инъекций (заполненные 2 мл образца), закрытые пробками и запечатанные алюминиевыми крышками. Композиции хранились в устойчивых камерах при 5±3°С/относительной влажности окружающей среды, 25±2°С/60±5% относительной влажности или 40±2°С/75±5% относительной влажности. В указанные моменты времени два образца вынимались и анализировались ίη топор1о согласно расписанию, приведенному в табл. 3.
Как уже отмечалось выше, концентрация белка была одинаковой до и после фильтрации согласно измерению посредством определения концентрации белка А280.
Результаты НР8ЕС-анализа показаны в табл. 4. Белковые компоненты разделялись посредством НР8ЕС с использованием метода изократического элюирования, который позволяет осуществлять быстрый анализ и получать компоненты белка в высоком разрешении, а также обладает повышенной воспроизводимостью. Результаты показали, что в момент 1=0 недель все композиции имели чистоту согласно НР8ЕС, составляющую 98-100%. Все композиции продемонстрировали сравнимую чистоту в момент 1=13 недель (и для всех промежуточных временных точек между 1=0 и 1=13 недель) относительно 1=0 недель при 5±3°С/относительной влажности окружающей среды (т.е. при 2-8°С/относительной влажности окружающей среды), что указывает на наличие стабильности при этой температуре по меньшей мере в течение 13 недель. Только для композиции 2 чистота в моменты 1=8 и 1=13 недель была чуть ниже 98%. Более того, на основании табл. 4 был сделан вывод о том, что при 25±2°С/60±5% относительной влажности все композиции во все моменты времени имели чистоту выше 95%, что указывает на то, что антитела также были стабильными в течение по меньшей мере 13 недель при этой температуре. При повышенной температуре 40±2°С/75±5% относительной влажности все композиции имели чистоту >95% в первые две недели, что указывает на то, что антитела были стабильными в течение по меньшей мере двух недель при повышенной температуре. Во все моменты времени после двух недель все композиции показали чистоту выше около 90%, что указывает на то, что антитела были относительно стабильными в течение по меньшей мере 13 недель при данной повышенной температуре. Примеси, обнаруженные с помощью этого метода, включали агрегаты и фрагменты мономеров антител. Результаты также указывали на то, что композиции с 0,01% (вес./об.) полисорбата 80 имели большую чистоту, чем подобные композиции с 0,03% (вес./об.) полисорбата 80 (сравнивают чистоту композиций 1 и 2, композиций 3 и 4 и композиций 5 и 6). Для обеих концентраций полисорбата наблюдались одни и те же примеси.
Результаты анализа δΌδ-РАОЕ согласовывались с данными, полученными посредством НР8ЕС. На
- 8 017549 основании нередуцированного и редуцированного анализа 8Ό8-ΡΑΟΕ композиции, хранившиеся при 5±3°С/относительной влажности окружающей среды и 25±2°С/60±5% относительной влажности, не показали признаков значимого распада во все моменты времени при сравнении с контрольным образцом, тогда как у композиций, хранившихся при 40±2°С/75±5% относительной влажности, был обнаружен незначительный распад в различные моменты времени (данные не показаны). Не наблюдалось различий для всех композиций при различных концентрациях полисорбата 80.
Идентификация образцов антител посредством 8Ό8-ΡΑΟΕ подтверждает только целостность антител, но не дает сведений об их нативном или денатурированном состоянии. ΙΕΕ демонстрирует изоэлектрическую точку антител и также является полезным для указания конформационной микрогетерогенности антител.
Комбинация ΙΕΕ с 8Ό 8-РАСЕ является мощным инструментом обнаружения даже небольших различий в структуре и свойствах антител. На основании результатов ΙΕΕ для всех композиций не было найдено значимых различий при использовании различных концентраций полисорбата 80 (данные не показаны). В случае, когда композиции хранились при 40±2°С/75±5% относительной влажности, небольшой распад (вероятнее всего, по причине дезамидирования) наблюдался с момента времени 1=6 недель.
Визуальное исследование прозрачности и цвета для всех композиций, хранившихся при 5±3°С/относительной влажности окружающей среды, 2±2°С/60±5% относительной влажности и 40±2°С/75±5% относительной влажности, показало, что композиции практически не содержали частиц вплоть до 1=13 недель, тем не менее, было обнаружено, что количество композиций с частицами немного возрастает при хранении при более высоких температурах. Композиции, содержавшие СК57 и СК4098 и 0,01% (вес./об.) полисорбата 80, содержали меньше частиц по сравнению с композициями, содержавшими СК.57 и СК4098 и 0,03% (вес./об.) полисорбата 80. В результате вибрационного исследования не было обнаружено различий между внешним видом композиций. Значения рН всех композиций не испытывали значительных изменений во время хранения при указанных температурах в течение указанных периодов времени.
Значения осмоляльности всех композиций продемонстрировали очень небольшое увеличение при изучении стабильности при хранении в условиях 25±2°С/60±5% относительной влажности и 40±2°С/75±5% относительной влажности. Не наблюдалось значимых различий между композициями, содержащими 0,01% (вес./об.) полисорбата 80, по сравнению с композициями, содержащими 0,03% (вес./об.) полисорбата 80.
В целом, результаты исследования показывают, что отдельные антитела против вируса бешенства, а также комбинации/смеси антител против вируса бешенства обладают наилучшей стабильностью после 13 недель в условиях 5±3°С/относительной влажности окружающей среды, 25±2°С/60±5% относительной влажности и 40±2°С/75±5% относительной влажности в композициях, основанных на цитратном буфере, содержащих 0,01% (вес./об.) полисорбата 80.
В дальнейшем исследовании изучались композиции, содержавшие цитрат (10 мМ, рН 6,0), хлорид натрия (150 мМ), 0,01% (вес./об.) полисорбат 80 и единственное антитело СК57 (1,2 мг/мл) или СК4098 (1,2 мг/мл), при двух температурных режимах 5±3 и -70±10°С. Композиции помещались (250 мкл) в 1,2 мл пробирки для анализов ΙΕΕ, 8^8-ΡΑСΕ (редуцированного и нередуцированного) и ΗΡ8ΕΟ Для анализа рН и внешнего вида использовались 2-мл пробирки, заполненные 2 мл композиции. Композиции хранились в устойчивых камерах при 5±3 или 70±10°С. В указанные моменты времени (1, 2 и 3 месяца) образцы вынимались и подвергались анализу. Результаты исследования можно видеть в табл. 5 и 6.
Анализ 8^8-ΡΑСΕ (как редуцированный, так и нередуцированный) композиций СК57 и СК4098 при обеих температурах показал, что целостность антител остается неизменной в течение периода по меньшей мере 3 месяцев, поскольку не было обнаружено дополнительных полос распада по сравнению с 1=0 месяцев. Эти результаты были подтверждены как ΙΕΕ, так и ΗΡ8ΕС-анализам, что показывает, что структура антител и уровень агрегатов соответственно не отличались от 1=0 месяцев после 3 месяцев в условиях 5±3°С/относительной влажности окружающей среды или -70±10°С. Кроме того, концентрация белка и рН не изменялись значительно с течением времени. Визуальное исследование каждой композиции показало прозрачную бесцветную жидкость, практически не содержащую частиц.
Анализ композиций, хранившихся при -70±10°С, которые были подвергнуты дополнительному циклу заморозки/оттаивания после 1 месяца или 3 месяцев хранения, не показал отличий по сравнению с 1=0 месяцев на основании вышеупомянутых исследований, т.е. 8^8-ΡΑСΕ (редуцированного и нередуцированного), ΗΡ8Εί.’. ΙΕΕ, внешнего вида, ΘΌ280 и рН (данные не показаны).
Таким образом, результаты указывают на то, что антитела СК57 и СК4098 являются стабильными в условиях 5±3°С/относительной влажности окружающей среды и в условиях -70±10°С в композициях, содержащих цитратный буфер (10 мМ, рН 6,0), полисорбат 80 (0,01% вес./об.) и хлорид натрия (150 мМ), благодаря чему подтверждаются вышеописанные результаты. Кроме того, дополнительный цикл заморозки/оттаивания после долговременного хранения (1=1 или 1=3 месяца) образцов антител, хранившихся при -70±10°С, не оказал влияния на стабильность антитела СК57 или СК4098.
- 9 017549
В похожем исследовании стабильности изучались композиции, содержавшие цитрат (10 мМ, рН 6,0), хлорид натрия (150 мМ), 0,01% (вес./об.) полисорбат 80 и единственное антитело СК57 (2,47 мг/мл) или СК4098 (2,48 мг/мл), при двух различных температурах, а именно 5±3 и -70±10°С, в течение даже более длительного периода чем 3 месяца. Композиции фильтровались через 0,22-мкм фильтр и заливались в полипропиленовые пробирки (4 мл). Кроме того, комбинация СК57 и СК4098 в соотношении 1:1 по содержанию белка (0,3 мг/мл каждого антитела, суммарная концентрация белка 0,6 мг/мл) изучалась при хранении при двух различных температурах, а именно 5±3 и -70±10°С, в течение периода вплоть до 6 месяцев. Композиции, содержавшие смесь/комбинацию антител, фильтровались через 0,22-мкм фильтр и заливались в стеклянные пузырьки (2,6 мл). Композиции тестировались с использованием следующих методов анализа: 8Ό8-ΡΑ6Ε (редуцированного и нередуцированного), ΙΕΕ, НР8ЕС, КРИТ, внешнего вида, рН (см. табл. 7 и 8). Композиции с комбинацией СК57/СК4098 также тестировались с помощью анализов каппа/лямбда ЕЫ8А и осмоляльности (см. табл. 9). Кроме того, в момент 1=0 месяцев определялись уровни эндотоксина в композициях, содержащих отдельные антитела и смесь антител. Уровни эндотоксина оценивалась посредством исследования с помощью лизата амебоцитов Ити1и5 (ЬАЕ) с использованием методики гель-тромб. Композиция, содержавшая СК57, включала < 0,30 ЕЭ/мл, композиция, содержавшая СК4098, включала < 0,30 ЕЭ/мл, и композиция, содержавшая смесь двух антител, включала < 0,24 ЕЭ/мл. Композиции хранились в устойчивых камерах при -70±10, 5±3, 25±2 или 40±2°С в течение указанных периодов времени.
Композиции, содержавшие единственное антитело, анализировались в течение 6-месячного периода, и результаты сравнивались с первоначальными, полученными в момент 1=0 месяцев. Спектры полос ΙΕΡ и 8Ό8-ΡΑ6Ε для композиций СК57 и СК4098, хранившихся при -70±10 и 5±3°С в течение 1, 2, 3 и 6 месяцев, были сравнимы со спектрами полос для композиций СК57 и СК4098 соответственно, в момент 1=0 месяцев (см. табл. 7 и 8). Дополнительных полос выявлено не было. Спектры НΡ8ΕС для обоих антител, хранившихся при -70±10 и 5±3°С в течение 6 месяцев, хорошо согласовывались со спектрами для времени хранения 1=0 месяцев. Целевая спецификация площадь основного пика >95% выполнялась во всех случаях. Димерные пики сохранялись на <1% (площади поверхности), и ни для одного тестируемого образца не было выявлено пиков распада.
На основании результатов, полученных посредством этих трех месяцев, был сделан вывод об отсутствии распада как для СК57, так и для СК4098, в течение 6-месячного хранения -70±10 и 5±3°С указанных композиций.
Кроме того, содержание белка и рН СК57 и СК4098 были стабильными для композиций в течение периода тестирования, составлявшего 6 месяцев, как при -70±10°С, так и при 5±3°С. Анализ активности (КРЕГТ-анализ) показал повышение значения активности для обоих антител в моменты времени 2, 3 и 6 месяцев по сравнению с 1=0 месяцев и 1=1 месяц при обоих условиях (т.е. при -70±10 и 5±3°С). Такое явное увеличение активности было вызвано нестабильным контрольным 8КЮ-образцом, который использовался в качестве положительного контроля в исследовании (см. ЬаЬота1огу 1сс11пк|ис5 ίη таЫек, Ε6йеб Ьу: Р.-Х. МеНш, М.М. Кар1ап апб Н. Корго\\ък| (1996), 41й ебйюп, Сйар1ет8 15-17, \Уог1б Неа11й ОгдашхаОоп. Сепета). Эффект был устранен путем выражения результатов в виде 50% нейтрализующих конечных точек титрования (данные не показаны). На основании этих результатов был сделан вывод о том, что СК57 и СК4098 продемонстрировали стабильные конечные точки титрования и, следовательно, стабильную активность вплоть до 6 месяцев при обоих условиях хранения указанных композиций.
Таким образом, на основании результатов СК57 и СК4098 считались стабильными в течение по меньшей мере 6 месяцев при условиях хранения в реальном времени -70±10°С, а также в течение по меньшей мере 6 месяцев в условиях повышенной температуры 5±3°С, в композициях, содержавших цитрат (10 мМ, рН 6,0), хлорид натрия (150 мМ) и 0,01% (вес./об.) полисорбата 80.
Стабильность анализировалась для более продолжительных периодов. На основании результатов по стабильности, полученных посредством 8^8-ΡΑСΕ (ΝΚ+Κ), ΙΕΡ, ΗΡ-δΕΟ КРЕГТ и ΟΌ280, был сделан вывод о том, что оба антитела СК57 и СК4098 являются стабильными в течение по меньшей мере 18 месяцев при условии хранения -70±10°С, а также в течение по меньшей мере 12 месяцев (аналогичные результаты наблюдались после 9 месяцев, данные не показаны) при увеличенной температуре 5±3°С, в композициях, содержащих цитрат (10 мМ, рН 6,0), хлорид натрия (150 мМ) и 0,01% (вес./об.) полисорбата 80.
Композиции, содержавшие смесь антител СК57 и СК4098, анализировались в течение 6-месячного периода, и результаты сравнивались с первоначальными, полученными в момент времени 1=0 месяцев. После 6 месяцев внешний вид смеси при 5±3 и 25±2°С оставался в пределах целевых требований, т.е. смесь/комбинация представляла собой прозрачную бесцветную жидкость, практически не содержащую частиц (см. табл. 9). Кроме того, было выяснено, что смесь антител остается в пределах целевых требований при хранении в течение 3 месяцев при 40±2°С.
рН и осмоляльность контролировались при 1=0 и 1=6 месяцев для 5±3 и при 25±2°С, и в моменты времени, соответствовавшие 1 и 3 месяцу, для исследования при 40±2°С. Все данные были в пределах целевых требований.
- 10 017549
Кроме того, смесь антитела продемонстрировала стабильную активность в течение 6 месяцев при 5±3 и 25±2°С (см. табл. 9). Немного меньшее значение активности было получено после 3 месяцев для 40±2°С. Все данные были в пределах целевых требований, соответствовавших диапазону от около 380 до около 1350 МЕ/мл.
Общее количество белка, присутствовавшего в смеси антител, согласно определенному с помощью ΘΌ280, было стабильным в течение 3-месячного периода тестирования при 40±2°С и 6-месячного периода для 5±3 и 25±2°С.
Результаты ЕЬ18А для 1дС каппа и лямбда (т.е. представленные как доля обоих антител в смеси антител) сохранялись в пределах целевых требований в течение 6 месяцев при 5±3 и 25±2°С и в течение 3 месяцев при 40±2°С. На основании этих результатов был сделан вывод о том, что содержание СК57 и СР.4098 в смеси антител не изменяется в течение 6-месячного периода при 5±3 и 25±2°С и в течение 3 месяцев при 40±2°С. Гелевая структура 1ЕЕ для смеси антител, хранившихся при 5±3°С в течение 6 месяцев, была сравнимой со структурой в момент 1=0 месяцев (см. табл. 9). Дополнительная полоса наблюдалась после 3 и 6 месяцев в образцах, хранившихся при 25±2°С, и несколько дополнительных полос было обнаружено после 1 и 3 месяцев в образцах, хранившихся при 40±2°С (см. табл. 9). Эти дополнительные полосы, полученные при повышенных температурах хранения, могут служить первыми указаниями на наличие распада.
После 6 месяцев спектры полос 8Ό8-ΡΑΟΕ (редуцированного и нередуцированного) для смеси антител, хранившейся при 5±3°С, были сравнимы со спектром полос в момент 1=0 месяцев (см. табл. 9). Дополнительных полос выявлено не было. Смесь антител, хранившаяся при 25±2°С в течение 3 месяцев, показала в условиях редуцированного 8Ό8-ΡΆΟΕ спектр полос, идентичный спектру полос для момента 1=0 месяцев. В нередуцирующих условиях слабая полоса для размера около 43 кДа наблюдалась после хранения в течение 3 месяцев при 25±2°С. После 6 месяцев хранения при 25±2°С редуцирующий и нередуцирующий анализ 8Ό8-ΡΆΟΕ показал слабые полосы в районе ~40 кДа. Похожий результат был получен посредством анализа 8Ό8-ΡΆΟΕ (как редуцированного, так и нередуцированного) для смеси антител, хранившейся 40±2°С. Кроме того, полосы меньшего размера для 10-15 кДа были обнаружены при этом условии хранения. На основании этих результатов был сделан вывод о том, что при 25±2 и 40±2°С с течением времени может иметь место некоторый распад тяжелых и/или легких цепей СК57 и СК4098.
Спектры НЕ8ЕС для смеси антител, хранившейся при 5±3 и при 25±2°С в течение 6 месяцев, были сравнимы со спектрами в момент 1=0 месяцев. Целевая спецификация площадь основного пика > 95% выполнялась во всех случаях. Димерные пики сохранялись на < 1% (площади поверхности), ни для одного тестируемого образца не было выявлено пиков распада. Смесь антител, хранившаяся при 40±2°С, продемонстрировала небольшой распад после 3 месяцев, а также немного увеличенный димерный пик (2,6% (площади поверхности)) по сравнению со смесями антител, хранившимися при двух более низких температурах. Однако даже при 40±2°С целевая спецификация площадь основного пика > 95% выполнялась для всех временных периодов хранения (см. табл. 9).
На основании результатов, полученных посредством трех последних методов, был сделан вывод о том, что при хранении смеси антител в течение 6 месяцев при 5±3 или 25±2°С в ней не наблюдалось значительного распада антител, тогда как небольшие агрегация и распад наблюдались после хранения в течение 3 месяцев при 40±2°С.
Таким образом, был сделан вывод о том, что смесь антител является стабильной в течение по меньшей мере 6 месяцев при условиях хранения 5±3 и 25±2°С и в течение по меньшей мере 3 месяцев при условии хранения 40±2°С.
На основании результатов после 12 месяцев (аналогичные результаты наблюдались после 9 месяцев, данные не показаны), полученных посредством 8Ό8-ΡΑΟΕ (ΝΚ+Κ.). ΙΕΕ, ΗΡ-ЗЕС, ΚΕΕΙΤ, каппа/лямбда ЕЬ18А, был сделан вывод о том, что смесь антител является стабильной в течение по меньшей мере 12 месяцев при условии хранения 5±3°С.
На основании результатов после 18 месяцев, полученных посредством аналитических исследований (8Ό8-ΡΑΟΕ, ΙΕΕ, ΗΡ-ЗЕС, ЕЫ8А; данные не показаны), был сделан вывод о том, что смесь антител является стабильной в течение по меньшей мере 18 месяцев при условии хранения 5±3°С.
- 11 017549
Состав композиций антител
Таблица 1
| Номер | Антитело | цитратный буфер (мМ) | ИаС1 (мН) | Полисорбат 80 (¾ вес/объем) | РН |
| 1 | 0,3 мг/мл СК57 | 10 | 150 | 0, 01 | 6, 0 |
| 2 | 0,3 мг/мл СК57 | 10 | 150 | 0, 03 | 6, 0 |
| 3 | 0,3 мг/ип СН4098 | 10 | 150 | 0, 01 | 6, 0 |
| 4 | 0,3 мг/мл СК4098 | 10 | 150 | 0, 03 | 6, 0 |
| 5 | 0,3 мг/мл СВ.57 + 0,3 мг/мл СВ.4098 | 10- | 150 | 0, 01 | 6, 0 |
| б | 0,3 мг/мл СВ57 + 0,3 мг/мл СК4098 | 10 | 150 | 0, 03 | 6, 0 |
Приготовление композиций
Таблица 2
| Номер | Антитело СК57 (2,5 мг/мл} (мл) | Антитело СК4098 (1,0 мг/мл) (мл) | 5% вес/объем полисорбата 80 (мл) | Итоговый объем (мл) |
| 1 | 4,20 | 0, 00 | 0, 70 | 35,00 |
| 2 | 4,20 | 0, 00 | 2,10 | 35,00 |
| 3 | 0, 00 | 10, 50 | 0,70 | 35, 00 |
| 4 | 0,00 | 10, 50 | 2,10 | 35, 00 |
| 5 | 4, 20 | 10, 50 | 0, 70 | 35,00 |
| 6 | 4,20 | 10, 50 | 2,10 | 35, 00 |
Таблица 3
Анализ образцов различных композиций в указанные моменты времени посредством указанных методов
| Момент | 5+30С/относительная | 25±2°С/бО+5% | 40+2°С/75+5% |
| времени | влажность | относительная | относительная |
| (недели) | окружающей среды | влажность | влажность |
| 0 | А-С | А-С | А-С |
| 2 | В, Е | В, Е | В, Е |
| 6 | Б-Е | В-Е | В-Е |
| 8 | В~Е | В-Е | В-Е |
| 13 | С-Е | С-Е | С-Е |
А: концентрация белка (А280).
В: НР8ЕС.
С: δΌδ-РАСЕ (редуцированный и нередуцированный).
Ό: ΙΕΕ.
Е: внешний вид.
Е: рН.
С: осмоляльность.
- 12 017549
Таблица 4
Чистота мономера антитела (% по площади) согласно НР8ЕС
| Номер | Температура | 1-0 недель | 1=2 недель | 1=6 недель | 1=8 недель | 1=13 недель |
| 1 | 5±3°С/ относительная влажность окружающей среды | 98,9 | ΝΏ | 98,7 | 98,5 | 98,6 |
| 25±2сС/60±5% относительная влажность | 98,9 | ΝΟ | 98,4 | 98,2 | 96,7 | |
| 40±2°С/75=ь5% относительная влажность | 98,9 | 98,0 | 93,7 | 94,3 | 90,4 | |
| 2 | 5±3°С/ относительная влажность окружающей среды | 98,3 | ΝΤ) | 98,2 | 96,9 | 97,6 |
| 25±2°С/60±5% относительная влажность | 98,3 | ΝΟ | 97,5 | 96,9 | 95,4 | |
| 40±2°С/75±5% относительная влажность | 98,3 | 97,5 | 93,4 | 94,1 | 89,9 | |
| 3 | 5±3°С/ относительная влажность окружающей среды | 100 | ΝΟ | 100 | 100 | 99,9 |
| 25±2°С/6О±5% относительная влажность | 100 | ΝΏ | 99,4 | 99,5 | 97,9 | |
| 40±2°С/75±5% относительная влажность | 100 | 99,4 | 92,3 | 94,2 | 91,8 | |
| 4 | 5±3°С/ относительная влажность окружающей среды | 98,6 | ΝΌ | 99,1 | 97,9 | 98,6 |
| 25±2°С/60±5% относительная влажность | 98,6 | ΝΟ | 98,5 | 97,8 | 96,8 | |
| 40±2йС/75±5% относительная влажность | 98,6 | 98,5 | 91,9 | 94,4 | 91,6 | |
| 5 | 5±3°С/ относительная влажность окружающей среды | 99,4 | Νϋ | 99,2 | 99,3 | 99,2 |
| 25±2°С/бО±5% относительная влажность | 99,4 | ΝΠ | 98,4 | 98,7 | 97,4 | |
| 40±2°С/75±5% относительная влажность | 99,4 | 98,4 | 91,6 | 93,6 | 89,5 |
- 13 017549
| 6 | 5±ЗйС/ относительная влажность окружающей среды | 99,3 | 99,1 | 98,8 | 99,0 | |
| 25±2°С/60±5% относительная влажность | 99,3 | ΝΟ | 98,1 | 98,3 | 96,9 | |
| 40±2°С/75±5% относительная влажность | 99,3 | 98,4 | 91,6 | 93,8 | 90,6 |
Таблица 5
ΝΏ: не определено.
Анализ образцов различных композиций в указанные моменты времени посредством указанных методов
| антитело (температура хранения) | 8О5-РА6Е редуцированный | 8Ώ5-ΡΑ6Ε нередуцированный | НР8ЕС % мономеров | ΙΕΡ | ||||||||||||
| месяцы | 0 | 1 | 2 | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 |
| СК57 (5±3°С) | 98,9 | 98,5 | 98,2 | 98,3 | ||||||||||||
| СК.57 (-70±10°С) | 98,9 | 98,5 | 98,3 | 98,4 | ||||||||||||
| СК4098 (5±3°С) | 99,7 | 99,4 | 99,2 | 99,6 | ||||||||||||
| СК4098 (-70±10°С) | 99,7 | 98,9 | 99,5 | 99,6 |
Таблица 6
-: не было обнаружено неожидаемых полос.
Анализ образцов различных композиций в указанные моменты времени посредством указанных методов
| антитело (температура хранения) | А280 мг/мп (%А320/А280) | Внешний вид | рН | |||||||||
| Месяцы | 0 | 1 | 2 | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 |
| СК57 (5±3°С) | 1, 33 0,40% | 1,40 0, 74% | 1, 40 1,01% | 1, 42 0, 59% | + | + | + | + | 6,0 | N0 | ΝΟ | 5, 9 |
| СК57 (-70±10°С) | 1, 33 0,40% | 1,34 1, 42% | 1,34 0, 60% | 1,34 0,62% | + | + | + | + | 6, 0 | Νϋ | N0 | 6, 0 |
| СВ4098 (5±3°С) | 1,21 0,67% | 1,22 1,02% | 1,31 1,21% | 1,29 0, 98% | + | + | 4· | + | 6,1 | N0 | Νϋ | 6, 1 |
| СР.4098 (-70±10°С) | 1,21 0, 67% | 1,21 1,4 9% | 1,20 1,37% | 1,24 0,97% | + | + | + | + | 6,1 | N0 | Νυ | 6,1 |
+: одобрено (прозрачная, бесцветная, практически не содержащая частиц). ΝΏ: не определено.
- 14 017549
Таблица 7 Проверка стабильности СК57
| Тест | Целевые требования | Условие хранения | 1=0 | 1 месяц | 3 месяца | 6 месяцев | 12 месяцев | 18 месяцев |
| рН | 6 ±0,5 | -704? | 6,1 | ΝΒ | ΝΒ | 6,1 | 6,0 | 6,1 |
| 5°С | ΝΩ | ΝΒ | ΝΒ | 6,1 | 6,0 | ΝΒ | ||
| Внешний вид | Чистая бесцветная жидкость, практически не содержащая частиц | -70”С | + | + | 4- | + | + | + |
| 5°С | + | + | 4- | + | 4- | Νβ | ||
| Количество по Οϋ280 | 1-5 мг/мл | ~70“С | 2,47 | 2,57 | 2,47 | 2,57 | 2,55 | 2,48 |
| 5’С | ΝΒ | 2,55 | 2,27 | 2,68 | 2,59 | N0 | ||
| Нередуцированный 5О8-РАОЕ | Спектр полос соответствует Ψ8#, и не содержит дополнительных полос примесей | -70'>С | 4- | + | 4- | + | + | 4- |
| 5°С | ΝΒ | + | 4- | 4- | 4- | Νβ | ||
| Редуцированный 808-РАСЕ | Спектр полос соответствует и не содержит дополнительных полос примесей | -70“С | + | + | + | + | + | + |
| 5°С | ΝΒ | 4- | 4- | + | + | Νβ | ||
| ΙΕΡ | Спектр полос соответствует (должны быть отмечены дополнительные полосы) | -70“С | + | + | 4- | 4- | + | + |
| 5°С | ΝΟ | 4- | + | 4- | 4- | Νβ |
| НР-8ЕС | основной пик по площади > 95% | -70°С | 99,5 | 99,7 | 99,4 | 99,7 | 99,8 | 99,7 |
| 5°С | N0 | 99,6 | 99,4 | 99,6 | 99,4 | Νϋ | ||
| Активность | 500-1250 МЕ/мг | -70°С | 937 | 974 | 1581 | 2130 | 927 | 1440 |
| 5°С | N0 | 922 | 1523 | 1629 | 1054 | Νβ |
N0: не определено.
#: рабочий стандарт (νδ) для СК57 и νδ СК4098. +: согласуется с целевыми требованиями.
Проверка стабильности СК4098
Таблица 8
| Тест | Целевые требования | Условие хранения | (=0 | 1 месяц | 3 месяца | 6 месяцев | 12 месяцев | 18 месяцев |
| рН | 6 ±0,5 | -70°С | 6,1 | Νβ | ΝΒ | 6,1 | 6,0 | 6,1 |
| 5°С | Νβ | Νβ | ΝΒ | 6,1 | 6,0 | Νβ | ||
| Внешний вид | Чистая бесцветная жидкость, практически не содержащая частиц | -7042 | 4- | 4- | 4- | 4- | 4- | + |
| 5°С | 4- | 4- | + | 4- | 4- | ΝΒ | ||
| Количество по ОВ280 | 1-5 мг/мл | -70°С | 2,48 | 2,58 | 2,49 | 2,57 | 2,56 | 2,4! |
| 5°С | Νβ | 2,65 | 2,52 | 3,03 | 2,76 | ΝΒ | ||
| Нередуцированный 8О8-РАСЕ | Спектр полос соответствует Ψ8#, и не содержит дополнительных полос примесей | -70°С | + | + | + | + | + | + |
| 5’С | Νβ | 4- | 4- | 4- | 4- | ΝΒ | ||
| Редуцированный 8β8-ΡΑ6Ε | Спектр полос соответствует ЗУ8#, и не содержит дополнительных полос примесей | -70’С | + | + | + | 4- | + | 4- |
| 5“С | Νβ | 4- | + | 4- | + | Νβ | ||
| ΙΕΓ | Спектр полос соответствует (должны быть отмечены дополнительные полосы) | -704? | 4- | + | + | 4- | 4- | + |
| 5’С | Νβ | 4- | + | + | + | ΝΒ |
- 15 017549
| НР-5ЕС | основной пик по площади > 95% | -70°С | 99,6 | 99,7 | 99,7 | 99,8 | 99,7 | 99,7 |
| 5°С | ΝΟ | 99,7 | 99,5 | 99,5 | 99,3 | N17 | ||
| Активность | 500-1250 МЕ/мг | -70°С | 924 | 971 | 1698 | 1695 | 991 | 1093 |
| 5С | Νϋ | 922 | 1523 | 1629 | 1054 | ΝΡ |
ΝΏ: не определено.
#: рабочий стандарт (^8) для СК57 и \У8 СК4098. +: согласуется с целевыми требованиями.
Проверка стабильности смеси антител
Таблица 9
| Тест | Целевые требования | условие хранения | 1=0 месяцев | 1 месяц | 2 месяца | 3 месяца | 6 месяцев | 12 месяцев |
| Осмоляльность | 300 ± 50 мОсмол/кг | 5°С | 307 | Νϋ | Νϋ | Νϋ | 310 | 315 |
| 25°С | Νϋ | ΝΟ | ΝΟ | Νϋ | 314 | Νϋ | ||
| 40°С | Νϋ | 308 | Νϋ | 312 | ΝΟ | Νϋ | ||
| рН | 6 ±0,5 | 5°С | 5.7 | ΝΟ | Νϋ | Νϋ | 5,7 | 5,7 |
| 25“С | Νϋ | ΝΟ | ΝΟ | Νϋ | 5,7 | ΝΟ | ||
| 40°С | Νϋ | 5,7 | ΝΏ | 5,8 | Νϋ | Νϋ | ||
| Внешний вид | Чистая бесцветная жидкость, практически не содержащая частиц | 5°С | + | + | + | 4- | 4- | 4- |
| 25°С | ΝΟ | + | 4- | +' | 4- | Νϋ | ||
| 40°С | Νϋ | 4“ | ΝΟ | + | Νσ | ΝΟ | ||
| количество по 00280 | 0,48-0,72 мг/мл | 5°С | 0,60 | 0,60 | 0,60 | 0,61 | 0,60 | 0,61 |
| 25°С | ΝΟ | 0,61 | 0,60 | 0,60 | 0,60 | Νϋ | ||
| 40°С | Νϋ | 0,62 | ΝΟ | 0,60 | Νϋ | Νϋ | ||
| соотношение СР.57/СК4098 | 0,6-1,4 | 5°С | 0.9 | 0,8 | 0,9 | 0,9 | 0,9 | 1,0 |
| 25С | ΝΟ | 0,8 | 0,9 | 0,9 | 0,9 | Νϋ | ||
| 40°С | ΝΟ | 0,8 | ΝΟ | 0,9 | Νϋ | Νϋ | ||
| Нередуцированный 805-РАСЕ | Спектр полос соответствует XV 8#. и не содержит дополнительных полос примесей | 5“С | + | 4- | + | + | 4- | + |
| 25°С | ΝΟ | + | + | +4 | Νϋ | |||
| 40°С | ΝΟ | +2 | ΝΟ | ΝΟ | ΝΟ | |||
| Редуцированный 508- РАСЕ | Спектр полос соответствует и не содержит дополнительных полос примесей | 5°С | 4- | 4- | + | + | + | 4- |
| 25°С | ΝΟ | 4- | + | 4- | +4 | Νϋ | ||
| 40“С | Νϋ | +2 | Νϋ | ΝΟ | Νσ | |||
| НР-8ЕС | основной пик по площади > 95% | 5°С | 99,6 | 100 | 99,5 | 99,5 | 99,9 | 99,2 |
| 25°С | ΝΟ | 99,6 | 99,5 | 99,5 | 99,4 | Νϋ | ||
| 40°С | Νϋ | 99,0 | Νϋ | 95,1 (пик дегр. 2,6%) | Νϋ | Νϋ | ||
| ΙΕΕ | Спектр полос соответствует \¥8# (должны быть отмечены дополнительные полосы) | 5°С | + | 4- | + | 4- | 4- | + |
| 25’С | Νϋ | 4- | 4- | + | +' | Νϋ | ||
| 40°С | Νϋ | +* | Νϋ | +’ | Νϋ | Νσ | ||
| Активность | 380-1350 МЕ/мг | 5“С | 1006 | 933 | 1089 | 1401 | 999 | 830 |
| 25°С | Νϋ | 937 | 1015 | 1001 | 847 | ΝΟ | ||
| 40°С | Νϋ | 807 | ΝΟ | 621 | ΝΟ | Νϋ | ||
| Стерильность | соответствует | 5®С | 4- | Νϋ | Νϋ | Νϋ | ΝΟ | 4- |
ΝΏ: не определено.
#: рабочий стандарт (\У8) для смеси антител СК57 и СК4098.
+: согласуется с целевыми требованиями.
+1: прозрачная бесцветная жидкость, > 10 частиц/мл.
+2: спектр полос сравним с \У8# и содержит слабо выраженную дополнительную полосу, соответствующую примеси с размером около 43 кДа.
+3: спектр полос сравним с \У8# и содержит слабо выраженную дополнительную полосу, соответствующую примеси с размером около 10, 15 и 43 кДа.
+4: отклонение от нормы, слабые полосы проявляются в районе 40 кДа.
- 16 017549 +5: спектр полос сравним с ^8# и содержит слабо выраженную дополнительную полосу, соответствующую примеси с размером около 10, 15 кДа и в диапазоне 25-50 кДа.
+6: спектр полос соответствует \У8#, высокая интенсивность окрашивания полос для изоэлектрической точки в области 8,0-8,5.
+7: отклонение от нормы, слабые полосы проявляются ниже значения изоэлектрической точки 7,5, отличающаяся интенсивность окрашивания в области 8,0-8,5 для изоэлектрической точки.
+8: спектр полос соответствует \У8#, слабые дополнительные полосы (изоэлектрическая точка 7,2, 7,3, 8,6).
+9: спектр полос соответствует \У8#, слабые дополнительные полосы (изоэлектрическая точка в диапазоне 6,3-7,4 и 8,6)
Таблица 10
| Последовательности | ! СВ57 и | СК4098 | ||||
| А. СВ.57 тяжелая цепь Ю N0: 1) | ||||||
| аУфЬУСЗСАЕ | УККРСЗЭУКУ | ЗСКАЗССТКЫ | ΚΥΤνΝνίνΗςΑ | РС0С1ЕКМСС | ΙΙΡΙΓεΤΑΝΥ | 60 |
| А£ЕГ0СКЬТ1 | ТАОЁЗТЗТАУ | МЕЬЗЗЬРЗЕО | ТАУУГСАНЕМ | 1ϋΝ50ΤΥΥΥΕ | 120 | |
| ТЬУТУЗЗАЗТ | ксрзугреар | ЗЗКЗТЗССТА | ΑΒΟΟίνΚΏΥΓ | РЕРУТУЗИЫЗ | САЪТЗСУНТГ | 180 |
| РАУЬСЗЗСЕУ | ЗЬЗЗУУТУРЗ | ззьстстпс | ИУМНКРЗМТК | УОКЙУЕРКЗС | ОКТНТСРРСР | 240 |
| АРБЬТССРЗУ | ГЬЕРРКРКОТ | ЬМГЗКТРЕУТ | €νννυν£ΗΕΕ | РЕУКГМИУУО | (□νΕνΗΝΑΚΤΚ | 300 |
| ΡΡΕΕ£ΥΝ5ΤΥ | куузуьтуън | СШЬЫСКЕУК | СКУЗЫКАЬРА | ΡΙΕΚΤΙ3ΚΑΚ | ΰ^ρκΕΡανγτ | 360 |
| ЬРРЗЕЕЕМТК | ысузьтси/к | СЕУРЗЕ1АУЕ | ИЕЗНСОРЕКШ | УКТТРРУЬОЗ | ОСЗГГЬУЗКЪ | 420 |
| туокзкнодо | МУГЗСЗУМНЕ | ΑΕΗΝΗΥΤ£Κ5 | ЬЗЬЗРСК | 457 |
Легкая цепь {5Еф10 N0: 2)
| ОЗАЬТОРКЗУ | 365ΡΟ(25νΤΙ | 8СТСТ5501С | сумρνδΗγςς | НРСКАРКЬШ | УВАТКЕРЗСУ | 60 |
| РПКГЗСЗКЗС | НТАЗЬТХЗСЬ | САЕОЕАБУУС | СЗУАСОУТРС | УУЕСССТКЬТ | УЪСфРКААРЭ | 120 |
| УТЬЕРРЗЗЕЕ | ЬСАМКАТЬУС | ПЗРЕУРСАУ | ТУАККАОЗЗР | УКАСУЕТТТР | 5Κ05ΝΝΚΥΑΑ | 180 |
| ЗЗУЬЗЪТРЕО | ИКЗНВ5У5С<2 | УТНЕСЗГУЕК | ТУАРТЕСЗ | 213 |
В. СК.4098
Тяжелая цепь (8Ер ΙΟ ΝΟ: 3)
| ОУ^ЬУЕЗССС | АУОРСВЗЬН! | ЗСААЗСГТГЗ | ЗУСМНИУРОА | РСКСЬЕИУАУ | 1ЬУО(35ПКГУ | 60 |
| АиЗУКСКЕТТ | ЗКОМЗККТЬУ | ЬСММЗЬЕАЕЕ | ТАУУУСАКУА | УАСТНЕОУГОС | 0СТ1УТУЗЗА | 120 |
| ЗТКСРЗУЕРЬ | АРЗЗКЗТЗСС | ТААЪССЬУКЕ | УГРЕРУТУЗИ | НБСАЬТЗСУН | ТГРАУЬСЗЗС | 180 |
| ЪУЗЬЗЗУУТУ | РЗЗЗЬСТфТУ | КЫУННКРЗЫ | ΤΚνΟΚΕνΕΡΚ | ЗСОКТНТСРР | СРАРЕЫССР | 240 |
| ЗУГЬГРРКРК | итъюзктРЕ | утсуууеузн | ΕϋΡΕνΚΓΝΗΥ | уосуеунмак | ΤΚΡΡΕΕ0ΥΝ8 | 300 |
| τγρννΞνιτν | ЬН£ОНЬЫСКЕ | УКСКУЗЫКАЬ | ΡΑΡΙΕΚΤΙ3Κ | АКОДРЕЕР£У | УТЬРРЗЯЕЕМ | 360 |
| ТКК^УЗЪТСТ | УКСГУР5В1А | УЕНЕЗМСОРЕ | КНУКТТРРУЬ | ЭЗОСЗГГЪУЗ | КЬТУСКЗКИЗ | 420 |
| ОСЕУЕЗСЗУМ | НЕАЬНМНУТ2 | КЗЬЗЕЗРСК | 449 |
Легкая цепь (8Е(? ΪΟ N0: 4)
| Р1СЖ£8Р35 | ЬЗАЗУСОЕУТ | 1ТСЕАЗСС1Е | МОЫЖУСОКР | СКАРКЬЫУА | АЗЗРОЗСУРЗ | 60 |
| ЕГЗСЗСЗСТЭ | ЕТ1Т153Ь£Р | ЕОЕАТУУСОО | ЬМЗУРРТГСЗ | СТКУЕ1КТУА | АРЗУЕ1ЕРРЗ | 120 |
| ОЕОЬКЗСТАЗ | УУСЬЬЫМГУР | ΕΕΑΚνΟΗΚνϋ | ΝΑίΰ3ΟΝ3(2Ε | ЗУТЕ^ЕЗКПЗ | тузьззтьть | 130 |
| 3ΚΑϋΥΕΚΗΚν | УАСЕУТНОСЬ | ЗЗРУТКЗГНР | СЕС | 213 |
- 17 017549
Список последовательностей <110> СгисеИ НоНапй Β.ν.
Магцззеп, КШет ЕдЬегЕ
Ваккег, А1еханйег ВегЕЬоШ Непдгтк <120? ЖИДКИЕ КОМПОЗИЦИИ АНТИТЕЛ ПРОТИВ БЕШЕНСТВА <130? 0148 ИО 00 οκυ <150? ЕР 06125400.9 <151? 2006-12-05 <150? ОЗ 60/872,892 <151? 2006-12-05 <160? 4 <170? РаВепЫп νεΕ3ίοϋ 3.5 <210? 1 <211? 457 <212? Белок <213? Ното вартепз <220?
<221? СЕ57 тяжелая цепь <222? (1)..(457) <400? 1
| С1п 1 | Уа1 | <31п | Ьеи | Уа1 5 | С1п | Зег | С1у | А1а | С1и 10 | Уа1 | Ьуз | Ьуз | Рго | (31у 15 | Зег |
| Зег | Уа1 | Ьуз | Уа1 20 | Зег | Суз | Ьуз | А1а | Зег 25 | 61у | (31у | ТЬг | РЬе | АЗП 30 | Агд | Туг |
| ТЬг | Уа1 | Азп 35 | Тгр | Уа1 | Агд | (31п | А1а 40 | Рго | С1у | С1п | <31у | Ьеи 45 | С1и | Тгр | Мек |
| (31у | О1у 50 | Не | 11е | Рго | 11е | Р11е 55 | (31у | ТЬг | А1а | Азп | Туг 60 | А1а | С1п | Агд | РЬе |
| 31П 65 | С1у | Агд | Ьеи | ТЬг | 11е 70 | ТЬг | А1а | Азр | С1и | Зег 75 | ТЬг | Зег | ТЬг | А1а | Туг 80 |
| МеЕ | О1и | Веи | Зег | Зег 85 | Ьеи | Агд | Зег | Азр | Азр 90 | ТЬг | А1а | Уа1 | Туг | РЬе 95 | Суз |
| А1а | Агд | <Э1и | Азп 100 | Ьеи | Азр | Азп | Зег | С1у 105 | ТЬг | Туг | Туг | Туг | РЬе 110 | Зег | <31у |
| Тгр | РЬе | Азр 115 | Рго | Тгр | <Э1у | (31п | О1у 120 | ТЬг | Ьеи | Уа1 | ТЬг | Уа1 125 | Зег | Зег | А1а |
- 18 017549
| Зег ТЬг Ьуз | <31у | Рго | Зег Уа1 135 | РЬе | Рго Ьеи | А1а | Рго 5ег 14 0 | Зег | Ьуз | Зег | |||||
| 130 | |||||||||||||||
| ТЬг 145 | Зег | С1у | О1у | ТЬг | А1а 150 | А1а | Ьеи | <31у | Суз | Ьеи 155 | Уа1 | Ьуз | Азр | Туг | РЬе 160 |
| Рго | С1и | Рго | Уа1 | ТЬг 155 | νδΐ | Зег | Тгр | Азп | Зег 170 | С1у | А1а | Ьеи | ТЬг | Зег 175 | С1у |
| Уа1 | ЕНз | ТЬг | РЬе 180 | Рго | А1а | Уа1 | Ьеи | С1п 185 | Зег | Зег | <31у | Ьеи | Туг 190 | Зег | Ьеи |
| Зег | Зег | Уа1 195 | Уа1 | ТЬг | Уа1 | Рго | Зег 200 | Зег | Зег | ьеи | С1у | ТЬг 205 | О1п | ТЬг | Туг |
| Не | Суз 210 | Азп | Уа1 | Азп | ΗΪΞ | Ьуз 215 | Рго | Зег | Азп | ТЬг | Ьуз 220 | Уа1 | Азр | ьуз | Агд |
| Уа1 225 | С1и | Рго | Ьуз | Зег | Суз 230 | АЗр | Ьуз | ТЫ | Н13 | ТЬг 235 | Суз | Рго | Рго | Суз | Рго 240 |
| А1а | Рго | <31и | Ьеи | Ьеи 245 | 61у | С1у | Рго | Зег | Уа1 250 | РЬе | ьеи | РЬе | Рго | Рго 255 | Ьуз |
| Рго | Ьуз | Аар | ТЬг 260 | Ьеи | МеЬ | 11е | Зег | Агд 265 | ТЬг | Рго | С1и | Уа1 | ТЬг 270 | Суз | Уа1 |
| Уа1 | Уа1 | Азр 275 | Уа1 | Зег | ΗΪ3 | □1и | Азр 280 | Рго | С1и | 7а1 | ьуз | РЬе 285 | Азп | Тгр | Туг |
| Уа1 | Азр 290 | 61у | Уа1 | С1и | Уа1 | Н1в 295 | Азп | А1а | Ьуз | ТЬг | ьуз 300 | Рго | Агд | 61и | С1и |
| С1П 305 | Туг | Азп | Зег | ТЬг | Туг 310 | Агд | Уа1 | νβΐ | Зег | Уа1 315 | Ьеи | ТЬг | Уа1 | Ьеи | Η1Ξ 320 |
| <31п | Азр | Тгр | Ьеи | Азп 325 | <31у | Ьуз | С1и | Туг | Ьуз 330 | Суз | Ьуз | Уа1 | Зег | Азп 335 | Ьуз |
| А1а | Ьеи | РГО | А1а 340 | Рго | Т1е | (31и | Ьуз | ТЬг 345 | 11е | Зег | Ьуз | А1а | ьуз 350 | С1у | С31п |
| Рго | Агд | <31и 355 | Рго | С1П | ν31 | Туг | ТЬг 360 | Ьеи | Рго | Рго | Зег | Агд 365 | (31и | 61и | МеЬ |
| ТЬг | Ьуз 370 | Азп | С1п | Уа1 | Зег | Ьеи 375 | ТЬг | Суз | Ьеи | νβΐ | Ьуз 380 | С1у | РЬе | Туг | Рго |
| Бег 385 | Азр | Не | А1а Уа1 | С1и 390 | Тгр С1и Зег | Азп С1у 395 | О1п | Рго | С1и | Αδη Азп 400 | |||||
| Туг | Ьув | Т11Г | ТЫ | Рго | Рго | \7а1 | Ьеи | Аер | Зег | Азр | С1у | Зег | РЬе | РЬе | Ьеи |
| 405 | 410 | 415 | |||||||||||||
| Туг | Зег | Ьув | Ьеи | ТЫ | Уа1 | Азр | Ьув | Зег | Агд | Тгр | О1п | О1п | С1у | Азп | Уа1 |
| 420 | 425 | 430 | |||||||||||||
| РЬе | Зег | Суз | Зег | Уа1 | МеЬ | Η1Ξ | С1и | А1а | Ъеи | Н13 | Азп | Η1Ξ | Туг | ТЫ | С1п |
| 435 | 440 | 445 | |||||||||||||
| Ьуз | Зег | Ьеи | Зег | Ьеи | Зег | Рго | С1у | Ъуз |
450 455
| <210> <211> <212> <213> | 2 218 Белок Ното заргепз |
<220>
<221> СК57 легкая цепь <222> (1),.(216) <400> 2
| <31п Зег 1 | А1а Ьеи | ТЫ <31п Рго Агд Зег Уа.1 | Зег | С1у Зег | Рго | <31у 15 | <31п | ||||||||
| 5 | 10 | ||||||||||||||
| Зег | Уа1 | ТЫ | Не | Зег | Суз | ТЫ | С1у | ТЫ | Зег | Зег | Авр | 11е | 61у | С1у | Туг |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Агп | РЬе | Уа1 | Зег | Тгр | Туг | <31п | С1п | ΗΪ3 | Рго | С1у | Ьув | А1а | Рго | Ьув | Ьеи |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| МеЬ | Не | Туг | Азр | А1а | ты | Ьув | Агд | Рго | Зег | С1у | Уа1 | Рго | Азр | Агд | РЬе |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Зег | 31у | Зег | Ьув | Зег | 61у | Азп | ТЫ | А1а | Зег | Ьеи | ТЬг | Не | Бег | <31у | Ьеи |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| С1п | А1а | С1и | Авр | 61и | А1а | Азр | Туг | Туг | Сув | Су5 | Зег | Туг | А1а | в1у | Авр |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Туг | ТЫ | Рго | С1у | Уа1 | Уа1 | РЬе | 01у | (31у | <Э1у | ТЫ | Ьув | Ьеи | ТЬг | νβΐ | Ьеи |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| С1у | С1п | Рго | Ьув | А1а | А1а | Рго | Зег | Уа1 | ТЫ | Ьеи | РЬе | Рго | Рго | Зег | Зег |
| 115 | 120 | 125 |
- 20 017549
| С1и 61и | Беи | <31п | А1а Аэп | Буз А1а ТЬг 135 | Беи Уа1 | Суз 140 | Беи | Не | Зег | Азр | |||||
| 130 | |||||||||||||||
| РЬе | 1уг | Рго | 61у | А1а | Ча1 | ТЬг | Уа1 | А1а | Тгр | Буз | А1а | Азр | Зег | Зег | РГО |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Ча1 | Буз | А1а | 61у | Уа1 | 01и | ТЬг | ТЬг | ТЬг | Рго | Зег | Буз | С1п | Зег | Аз η | Аз η |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Буз | Туг | А1а | А1а | Зег | Зег | Туг | Беи | Зег | Беи. | ТЬг | Рго | С1и | <31п | Тгр | Буе |
| 1В0 | 185 | 1Э0 | |||||||||||||
| Зег | Н13 | Агд | Зег | Туг | Зег | Суз | 61п | Ча1 | ТЬг | Шз | С1и | С1у | Зег | ТЬг | Уа! |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| <31и | Був | ТЬг | Уа1 | А1а | Рго | ТЬг | <31и | Суз | Зег |
210 215
| <210> <211> <212> <213> | 3 449 Белок Ното зархепз |
<220э <221> СК409В тяжелая цепь <222> (1)..(449) <400> 3
| С1п 1 | Уа1 Θΐη Ъеи | Уа1 5 | <31и Зег | С1у О1у 01у А1а 10 | Уа1 | С1п Рго | С1у 15 | Агд | |||||||
| Зег | Беи | Агд | Беи | Зег | Суа | А! а | А1а | Зег | 01у | РЬе | ТЫ | РЬе | Зег | Зег | Туг |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| <31 у | Мес | Шз | Тгр | Уа1 | Агд | θΐη | А1а | Рго | (31у | Буз | С1у | Беи | 61и | Тгр | Уа1 |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| А1а | Уа1 | Не | Беи | Туг | Азр | С31у | Зег | Азр | Буз | РЬе | Туг | А1а | Азр | Зег | Уа1 |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Буз | 61у | Агд | РЬе | ТЬг | Не | Зег | Агд | Азр | Азп | Зег | Буз | Азп | ТЬг | Беи | Туг |
| 65 | 70 | 75 | ВО | ||||||||||||
| Беи | С1П | Мес | Азп | Зег | Ъеи | Агд | А1а | 61и | Азр | ТЬг | А1а | Уа1 | Туг | Туг | Суз |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| А1а | Буе | Уа! | А1а | Ча1 | А1а | <Э1у | ТЬг | Шз | РЬе | Азр | Туг | Тгр | <31у | О1п | О1у |
| 100 | 105 | НО |
- 21 017549
| ТЬг Беи Уа1 | ТЬг Уа1 | Зег | Бег А1а 120 | Зег ТЪг | Вуз | <31у | Рго 125 | Зег | νβΐ | РЬе | |||||
| 115 | |||||||||||||||
| Рго | Беи 130 | А1а | Рго | Зег | Зег | Буз 135 | Зег | ТЬг | Зег | <31у | <31у 140 | ТЬг | А1а | А1а | Веи |
| (31у 145 | Суз | Беи | Уа1 | Вуз | Азр 150 | Туг | РЬе | Рго | В1и | Рго 155 | νβΐ | ТЪг | Уа1 | Зег | Тгр 160 |
| Азп | Зег | С1у | А1а | Беи 165 | ТЪг | Зег | 61у | Уа1 | Ηί3 170 | ТЬг | РЬе | Рго | А1а | Уа1 175 | Беи |
| С1п | Зег | Зег | С1у 1ео | Беи | Туг | Зег | Беи | Зег 185 | Зег | Уа1 | ν31 | ТЬг | Уа1 190 | Рго | Зег |
| Зег | Зег | Беи 195 | <31у | ТЪг | С1п | ТЬг | Туг 200 | 11е | Суз | Азп | Уа1 | Азп 205 | ΗΪ3 | Вуз | Рго |
| Зег | Аг η 210 | ТИг | Буз | Уа1 | Азр | Буз 215 | Агд | Уа1 | <31и | Рго | Вуз 220 | Зег | Суз | Азр | Буз |
| ТЪг 225 | ΗΪ5 | ТЪг | Суз | Рго | Рго 230 | Суз | Рго | А1а | Рио | С1и 235 | Беи | Беи | С1у | С1у | Рго 240 |
| Зег | Уа1 | РЬе | Беи | РЬе 245 | Рго | Рго | Буз | Рго | вуз 250 | Азр | ТЬг | Беи | меь | Не 255 | Зег |
| Агд | ТЬг | Рго | <31и 260 | Уа1 | ТЬг | Суз | Уа1 | Уа1 265 | Уа1 | Авр | Уа1 | Зег | ΗΪ3 270 | О1и | Азр |
| Рго | <31и | Уа1 275 | Буз | РЬе | Аз η | Тгр | Туг 280 | ν&ι | Азр | 61у | ν&ι | <31и 285 | Уа1 | Н1з | Азп |
| А1а | Буз 290 | ТЬг | Буз | Рго | Агд | <31и 295 | <31и | С1п | Туг | Азп | Зег 300 | ТЪг | Туг | Агд | Уа1 |
| Уа1 305 | Зег | Уа1 | Беи | ТЪг | Уа1 310 | Беи | Н1з | С1п | Авр | Тгр 315 | Беи | Азп | В1у | Буз | О1и 320 |
| Туг | Буз | Суз | Буз | Уа1 325 | Зег | Азп | Вуз | А1а | Беи 330 | РГО | А1а | Рго | 11е | 31и 335 | Вуз |
| ТЬг | Не | Зег | Буз 340 | А1а | Вуз | Б1у | <31п | Рго 345 | Агд | <Э1и | Рго | <31п | Уа1 350 | Туг | ТЬг |
| Беи | Рго | Рго 355 | Зег | Агд | <31и | С1и | МеЕ 360 | ТЪг | Буз | АЗП | <31п | Уа1 365 | Зег | Беи | ТЪг |
- 22 017549
| Суз | Ьеи 370 | Уа1 | Ъуз | 01у | РИе Туг 375 | Рго | Бег Азр | Не | А1а Уа1 380 | О1и | Тгр | (Э1и | |||
| Зег | АЗ П | 01у | е1п | Рго | 01и | АЗП | АЗП | Туг | Ъуз | ТЪг | ТИг | Рго | Рго | Уа1 | Ьеи |
| 385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
| Аар | Зег | Азр | О1у | Зег | РИе | РЬе | ьеи | Туг | Зег | Ъуз | Ьеи | ТЬг | Уа1 | Азр | Ъуз |
| 405 | 410 | 415 | |||||||||||||
| Зег | Агд | Тгр | <Э1п | 01п | 01у | Аз η | Уа1 | РЪе | Зег | Суз | Зег | Уа1 | МеЬ | Н1з | С1и |
| 420 | 425 | 430 | |||||||||||||
| А1а | Ъеи | Н1В | Авп | Н1з | Туг | ТЬгг | С1п | Ъув | Зег | Ьеи | Зег | Ьеи | 5ег | Рго | 01у |
435 449 445 ъуз
| <210> <211э <212> <213> | 4 213 Белок Ното зар!епз |
<220>
<221> СК4098 легкая цепь <222> (1) . . (213) <400> 4
| Азр 1 | Не | О1п | МеЬ | ТЬг 5 | Θΐη | Зег | Рго | Зег | Зег 10 | Ъеи | Бег | А1а | Зег | Уа1 15 | С1у |
| Азр | Агд | Уа1 | ТЪг 20 | 11е | ТНг | Суз | Агд | А1а 25 | Зег | 01п | С1у | 11е | Агд 30 | АЗП | Азр |
| Ьеи | 01у | Тгр 35 | Туг | 61п | Θΐη | Ъуз | Рго 40 | 31у | Ъуз | А1а | Рго | Ъуз 45 | Ъеи | Ъеи | Не |
| Туг | А1а 50 | А1а | Зег | Бег | Ъеи | 01П 55 | Зег | 01у | Уа1 | Рго | Бег 60 | Агд | РЬе | Зег | 01у |
| Зег 65 | 01у | Зег | О1у | тьг | Азр 70 | РЬе | ТИг | Ъеи | ТИг | Не 75 | Зег | Зег | Ъеи | С1п | Рго 80 |
| С1и | Азр | РЪе | А1а | ТЬг 85 | Туг | Туг | Сув | 31п | 01п 90 | Ьеи | Азп | Зег | Туг | Рго 95 | Рго |
| ТЪг | РИе | 01у | 01у 100 | О1у | Т11Г | Ьуз | Уа1 | С1и 105 | Не | Ъуз | ТИг | Уа1 | А1а 110 | А1а | Рго |
- 23 017549
| Зег | Уа1 | Рке 115 | Не | Рке | Рго | Рго Зег Азр <31и С1п Ьеи Ьуз | Зег | С1у | ТЬг | ||||||
| 120 | 125 | ||||||||||||||
| А1а | Зег | Уа1 | νβΐ | Суз | Ъеи | Ьеи | Азп | Азп | РЬе | Туг | Рго | Агд | <31и | А1а | Ьуз |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Уа1 | С1п | Тгр | Ьуз | Уа1 | Азр | Азп | А1а | Ьеи | <31п | Зег | С1у | Азп | Зет | <31п | С1и |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Зег | Уа1 | 1Г1Г | Ши | Шп | Азр | Зег | Ьуз | Азр | Зег | Т11Г | Туг | Зег | Ьеи | Зет | Зег |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Т11Г | Ьеи | ТЬг | Ьеи | Зег | Ьуз | А1а | Азр | Туг | Ши | Ьуз | Н13 | Ьуз | Уа1 | Туг | А1а |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Суз | С1и | Уа1 | ТНг | ΗΪ3 | <31П | Шу | Ьеи | Зег | Зег | Рго | Υ31 | ТЬг | Ьуз | Зег | РЬе |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| Азп | Агд | Шу | Ши | Суз |
210
Claims (13)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Фармацевтическая композиция из двух моноклональных антител против вируса бешенства, которая является стабильной в течение по меньшей мере 12 месяцев при температуре от около 2 до около 8°С, содержащая:(ί) моноклональное антитело против вируса бешенства СЕ57 (тяжелая цепь - 8ЕО ΙΌ N0:1 и легкая цепь - 8Е0 ΙΌ N0:2) или антитело, последовательность которого по меньшей мере на 95% гомологична ему, способное к конкурентному связыванию с мишенью, распознаваемой антителом СЕ57, и обладающее вируснейтрализующей активностью против вируса бешенства;(ίί) моноклональное антитело против вируса бешенства СЕ4098 (тяжелая цепь - 8Е0 ΙΌ N0:3 и легкая цепь 8Е0 ΙΌ N0:4) или антитело, последовательность которого по меньшей мере на 95% гомологична ему, способное к конкурентному связыванию с мишенью, распознаваемой антителом СЕ4098, и обладающее вируснейтрализующей активностью против вируса бешенства;при этом композиция содержит цитратный буфер в концентрации от около 5 до около 25 мМ, хлорид натрия в концентрации от около 50 до около 250 мМ и поверхностно-активное вещество.
- 2. Композиция по п.1, в которой рН изменяется в диапазоне от около 5,5 до около 6,5, предпочтительно составляет около 6,0.
- 3. Композиция по любому из пп.1 или 2, в которой поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат, предпочтительно полисорбат 80.
- 4. Композиция по п.3, в которой полисорбат 80 присутствует в количестве от около 0,005 до около 0,05% вес./об., предпочтительно около 0,01% вес./об.
- 5. Композиция по любому из предшествующих пунктов, осмоляльность которой находится в диапазоне от около 250 до около 350 мОсм/кг, предпочтительно составляет около 300 мОсм/кг.
- 6. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой каждое из двух моноклональных антител против вируса бешенства содержится в количестве от около 0,1 до около 2,0 мг/мл.
- 7. Композиция по любому из предшествующих пунктов, которая обладает активностью по нейтрализации вируса бешенства, составляющей от около 250 до около 1500 МЕ/мл.
- 8. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой соотношение двух антител находится в диапазоне между 5:1 и 1:5, предпочтительно между 2:1 и 1:2, например около 1:1.
- 9. Композиция по любому из предшествующих пунктов, которая является стерильной.
- 10. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой чистота мономеров антител составляет по меньшей мере 95%, согласно определению посредством НР8ЕС, после двух недель хранения при температуре 40±2°С и относительной влажности 75±5%.
- 11. Фармацевтическая стандартная лекарственная форма, содержащая эффективное количество композиции по любому из предшествующих пунктов, для постконтактной с источником заражения вирусом бешенства профилактической обработки индивида посредством введения лекарственной формы индивиду.
- 12. Фармацевтическая композиция моноклонального антитела против вируса бешенства СЕ 57 (тяжелая цепь - 8Е0 ΙΌ N0:1 и легкая цепь - 8Е0 ΙΌ N0:2) или антитела, последовательность которого по меньшей мере на 95% гомологична ему, способного к конкурентному связыванию с мишенью, распозна- 24 017549 ваемой антителом СК57, и обладающего вируснейтрализующей активностью против вируса бешенства, при этом композиция является стабильной в течение по меньшей мере 18 месяцев при температуре от около 2 до около 8°С и при температуре от около -60 до -80°С, при этом композиция содержит цитратный буфер в концентрации от около 5 до около 25 мМ, хлорид натрия в концентрации от около 50 до около 250 мМ и поверхностно-активное вещество.
- 13. Фармацевтическая композиция моноклонального антитела против вируса бешенства СК4098 (тяжелая цепь - 8Еф Ю N0:3 и легкая цепь - 8Еф Ю N0:4) или антитела, последовательность которого по меньшей мере на 95% гомологична ему, способного к конкурентному связыванию с мишенью, распознаваемой антителом СК4098, и обладающего вируснейтрализующей активностью против вируса бешенства, при этом композиция является стабильной в течение по меньшей мере 18 месяцев при температуре от около 2 до около 8°С и при температуре от около -60 до -80°С, при этом композиция содержит цитратный буфер в концентрации от около 5 до около 25 мМ, хлорид натрия в концентрации от около 50 до около 250 мМ и поверхностно-активное вещество.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US87289206P | 2006-12-05 | 2006-12-05 | |
| EP06125400 | 2006-12-05 | ||
| PCT/EP2007/063244 WO2008068246A1 (en) | 2006-12-05 | 2007-12-04 | Liquid anti-rabies antibody formulations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200970533A1 EA200970533A1 (ru) | 2009-10-30 |
| EA017549B1 true EA017549B1 (ru) | 2013-01-30 |
Family
ID=39092188
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200970533A EA017549B1 (ru) | 2006-12-05 | 2007-12-04 | Стабильные жидкие композиции антител против вируса бешенства |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7959922B2 (ru) |
| EP (1) | EP2088997B1 (ru) |
| JP (1) | JP5410985B2 (ru) |
| KR (1) | KR101522036B1 (ru) |
| CN (1) | CN101557799B (ru) |
| AU (1) | AU2007328960B2 (ru) |
| CA (1) | CA2668947C (ru) |
| CU (1) | CU23795A3 (ru) |
| EA (1) | EA017549B1 (ru) |
| IL (1) | IL199004A (ru) |
| MX (1) | MX2009005414A (ru) |
| WO (1) | WO2008068246A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200902772B (ru) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005000894A2 (en) | 2003-06-25 | 2005-01-06 | Crucell Holland B.V. | Binding molecules for the treatment of myeloid cell malignancies |
| ES2468021T3 (es) * | 2004-05-27 | 2014-06-13 | Crucell Holland B.V. | Moléculas de unión que pueden neutralizar el virus de la rabia y usos de las mismas |
| CA2881717C (en) | 2006-06-06 | 2018-06-12 | Cecilia Anna Wilhelmina Geuijen | Human binding molecules having killing activity against staphylococci and uses thereof |
| CA2668947C (en) | 2006-12-05 | 2017-02-07 | Crucell Holland B.V. | Liquid anti-rabies antibody formulations |
| JP2010085126A (ja) * | 2008-09-29 | 2010-04-15 | Adtec Kk | 狂犬病ウイルス中和抗体価判定具および狂犬病ウイルス中和抗体価の測定方法 |
| WO2011028961A2 (en) | 2009-09-04 | 2011-03-10 | Xoma Technology Ltd. | Anti-botulism antibody coformulations |
| CN104023743B (zh) | 2011-10-25 | 2017-05-03 | 普罗西纳治疗有限公司 | 抗体制剂和方法 |
| LT2822590T (lt) | 2012-03-07 | 2017-01-25 | Eli Lilly And Company | Il-17 antikūno kompozicija |
| KR20140119396A (ko) | 2013-03-29 | 2014-10-10 | 삼성전자주식회사 | 단백질 약물의 액상 제형 |
| CN110913906A (zh) | 2017-05-02 | 2020-03-24 | 默沙东公司 | 抗lag3抗体的制剂和抗lag3抗体与抗pd-1抗体的共制剂 |
| JOP20190260A1 (ar) | 2017-05-02 | 2019-10-31 | Merck Sharp & Dohme | صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها |
| JP7159642B2 (ja) * | 2018-06-26 | 2022-10-25 | 東ソー株式会社 | カラムの抗体に対する保持力の測定方法 |
| EP4165082A4 (en) | 2020-06-12 | 2024-07-10 | Nanjing Leads Biolabs Co Ltd | TNFR2-BINDING ANTIBODIES AND THEIR USES |
| CN114748618B (zh) * | 2022-04-02 | 2024-07-19 | 重庆智翔金泰生物制药股份有限公司 | 包含针对狂犬病病毒g蛋白的双特异性抗体的药物制剂及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005118644A2 (en) * | 2004-05-27 | 2005-12-15 | Crucell Holland B.V. | Binding molecules capable of neutralizing rabies virus and uses thereof |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE99958T1 (de) | 1989-06-08 | 1994-01-15 | Wistar Inst | Monoklonale antikoerper zur behandlung nach einem kontakt mit tollwutvirus. |
| DE4006630A1 (de) | 1990-03-03 | 1991-09-12 | Behringwerke Ag | Humane monoklonale antikoerper gegen tollwutviren, ihre herstellung und verwendung |
| ES2190543T3 (es) | 1996-10-08 | 2003-08-01 | Bisys B V U | Procedimientos y sistemas que permiten seleccionar peptidos y proteinas que tienen una afinidad especifica respecto a un blanco. |
| US20040013672A1 (en) | 2000-05-16 | 2004-01-22 | Thomas Jefferson University | Recombinant antibodies, and compositions and methods for making and using the same |
| RU2292353C2 (ru) | 2001-08-21 | 2007-01-27 | Томас Джефферсон Юниверсити | Рекомбинантные антитела и композиции, а также способы их создания и использования |
| PT1523496E (pt) | 2002-07-18 | 2011-09-29 | Merus B V | Produção de misturas de anticorpos de forma recombinante |
| AU2004270409A1 (en) | 2003-09-04 | 2005-03-17 | Crucell Holland B.V. | Antigenic peptides of rabies virus and uses thereof |
| EP1686137A4 (en) * | 2003-10-09 | 2009-10-28 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | PROCESS FOR STABILIZING PROTEIN SOLUTIONS |
| ATE518888T1 (de) * | 2003-10-09 | 2011-08-15 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Stabilisierte lösung mit hoher igm-konzentration |
| US20070184050A1 (en) * | 2003-12-25 | 2007-08-09 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Stable water-based medicinal preparation containing antibody |
| EP1871803B1 (en) * | 2005-04-18 | 2013-02-20 | Yeda Research And Development Company Limited | Stabilized anti-hepatitis b (hbv) antibody formulations |
| CA2668947C (en) | 2006-12-05 | 2017-02-07 | Crucell Holland B.V. | Liquid anti-rabies antibody formulations |
-
2007
- 2007-12-04 CA CA2668947A patent/CA2668947C/en active Active
- 2007-12-04 EP EP07847749.4A patent/EP2088997B1/en active Active
- 2007-12-04 CN CN2007800448444A patent/CN101557799B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-04 EA EA200970533A patent/EA017549B1/ru unknown
- 2007-12-04 WO PCT/EP2007/063244 patent/WO2008068246A1/en active Application Filing
- 2007-12-04 KR KR1020097013012A patent/KR101522036B1/ko active IP Right Grant
- 2007-12-04 AU AU2007328960A patent/AU2007328960B2/en not_active Ceased
- 2007-12-04 US US12/312,967 patent/US7959922B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-04 JP JP2009539730A patent/JP5410985B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-04 MX MX2009005414A patent/MX2009005414A/es active IP Right Grant
-
2009
- 2009-04-21 ZA ZA2009/02772A patent/ZA200902772B/en unknown
- 2009-05-27 IL IL199004A patent/IL199004A/en active IP Right Grant
- 2009-06-04 CU CU20090099A patent/CU23795A3/es not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005118644A2 (en) * | 2004-05-27 | 2005-12-15 | Crucell Holland B.V. | Binding molecules capable of neutralizing rabies virus and uses thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2007328960A1 (en) | 2008-06-12 |
| ZA200902772B (en) | 2012-09-26 |
| EA200970533A1 (ru) | 2009-10-30 |
| CN101557799A (zh) | 2009-10-14 |
| CA2668947A1 (en) | 2008-06-12 |
| EP2088997B1 (en) | 2016-08-24 |
| US20100034829A1 (en) | 2010-02-11 |
| US7959922B2 (en) | 2011-06-14 |
| IL199004A (en) | 2015-10-29 |
| IL199004A0 (en) | 2010-02-17 |
| AU2007328960B2 (en) | 2013-01-17 |
| CU23795A3 (es) | 2012-03-15 |
| MX2009005414A (es) | 2009-06-01 |
| JP2010511665A (ja) | 2010-04-15 |
| CN101557799B (zh) | 2012-08-22 |
| CA2668947C (en) | 2017-02-07 |
| KR101522036B1 (ko) | 2015-05-20 |
| WO2008068246A1 (en) | 2008-06-12 |
| EP2088997A1 (en) | 2009-08-19 |
| JP5410985B2 (ja) | 2014-02-05 |
| KR20090089881A (ko) | 2009-08-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA017549B1 (ru) | Стабильные жидкие композиции антител против вируса бешенства | |
| KR101195295B1 (ko) | 고농도 항체 및 단백질 제형 | |
| ES2936387T3 (es) | Formulaciones de anticuerpos anti-il13 | |
| ES2965486T3 (es) | Formulaciones de anticuerpos anti-C5 de alta concentración | |
| ES2819011T3 (es) | Formulación de inmunoglobulina y procedimiento de preparación de la misma | |
| BR102015027387A2 (pt) | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency | |
| JP2020534255A (ja) | 治療用タンパク質の凍結乾燥医薬配合物のためのプロセス | |
| UA123107C2 (uk) | Стабільна рідка композиція гонадотропіну | |
| CN111375057A (zh) | 一种包含抗Her2单克隆抗体的药物配制剂 | |
| JP7467438B2 (ja) | 抗ｒｓｖ抗体の製剤及びその使用方法 | |
| ES2907222T3 (es) | Método para preparar hiper-inmunoglobulina anti-neumocócica | |
| ES2602275T3 (es) | Formulaciones líquidas de anticuerpo anti-rabia | |
| RU2807524C2 (ru) | Составы антител к rsv и способы их применения | |
| EP3873526B1 (en) | Anti-rabies monoclonal antibodies and cocktail thereof | |
| RU2795769C1 (ru) | Антипневмококковый гипериммунный глобулин для лечения и предотвращения пневмококковой инфекции | |
| KR20200060969A (ko) | 인플루엔자 바이러스 질환을 치료하기 위한 투여 요법 | |
| BR122023005826B1 (pt) | Solução aquosa estável compreendendo um anticorpo anti-c5, uso da mesma para tratar uma condição associada ao complemento e kit terapêutico compreendendo a mesma | |
| CN118217387A (zh) | SARS-CoV-2突变毒株ECD免疫原性蛋白/肽的四价免疫原性制剂 | |
| EA043419B1 (ru) | Способ получения лиофилизированного фармацевтического состава на основе терапевтического белка | |
| JP2019531329A (ja) | 女性の性機能障害を治療する医薬組成物および方法 |