EA016611B1

EA016611B1 - Способ лечения мастоцитоза

Info

Publication number: EA016611B1
Application number: EA200870454A
Authority: EA
Inventors: Рене Л. Дежарле; Кристофер Дж. Моллой; Карл Л. Менти; Карл Р. Иллиг; Шелли К. Баллентайн; Цзиньшэн Чэнь; Санатх К. Мигалла; Марк Дж. Уолл; Кеннет Дж. Уилсон; М. Джонатан Рудольф
Original assignee: Янссен Фармацевтика Н.В.
Priority date: 2006-04-20
Filing date: 2007-04-19
Publication date: 2012-06-29
Also published as: BRPI0710542B8; NO342001B1; NZ572200A; EA200870454A1; IL194846A; EP2015748B1; BRPI0710542A2; CN101610768A; EP2015748A2; AU2007240400B2; CN102670605A; SG171592A1; CN102670605B; CN101610768B; JP2009534418A; ECSP088842A; ZA200809874B; CA2649755A1; GT200800225A; CO6382175A2

Abstract

Настоящее изобретение описывает способ лечения мастоцитоза за счет введения субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его сольвата, гидрата, таутомерной формы или фармацевтически приемлемой соли. Лечение можно проводить с дополнительным введением химиотерапевтического средства и дополнительным применением радиационной терапии.

Description

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к способам лечения мастоцитоза.

Предпосылки изобретения

Протеинкиназы представляют собой ферментные компоненты путей сигнальной трансдукции, которые катализируют перенос концевого фосфата из АТФ к гидроксигруппе тирозинового, серинового и/или треонинового остатков белков. Таким образом, соединения, которые ингибируют функции протеинкиназы, являются ценными инструментами для оценки физиологических последствий активации протеинкиназы. Сверхэкспрессия или нарушенная экспрессия нормальных или мутантных протеинкиназ у млекопитающих стала предметом широких исследований, и было продемонстрировано, что она играет существенную роль в развитии многих заболеваний, включая диабет, ангиогенез, псориаз, рестеноз, глазные заболевания, шизофрению, ревматоидный артрит, атеросклероз, сердечно-сосудистые заболевания и рак.

Благоприятные кардиотонические эффекты ингибирования киназ также были исследованы. Обобщая вышесказанное, ингибиторы протеинкиназ находят особое применение в лечении заболеваний человека и животных.

Тирозинкиназный рецептор С-Κί! и его лиганд Фактор Стволовых Клеток (8СР) являются существенными для гематопоэза, меланогенеза и фертильности. 8СР действует на разных уровнях гематопоэтической иерархии, промотируя клеточное выживание, пролиферацию, дифференциацию, адгезию и функциональную активацию. Особое значение он имеет в тучных клетках и эритроидных линиях дифференцировки, но также действует на обладающие многими различными потенциалами стволовые и недифференцированные клетки-предшественники, мегакариоциты и подкласс лимфоидных клетокпредшественников (см. Ιη! 1. Вюейеш Се11 ΒίοΙ. 1999 Ос!; 31 (10): 1037-51). Спорадические мутации СΚΙΤ, а также аутокринные/паракринные механизмы активации пути 8СР/С-К1Т задействованы в различных злокачественных процессах. Активация С-Κί! способствует развитию метастазов путем усиления роста опухоли и снижения апоптоза. Кроме того, С-Κί! часто мутируется и активируется в желудочнокишечных стромальных опухолях (О18Т§), и лиганд-опосредованная активация С-Κί! имеет место в некоторых типах рака легкого (см. Ьеик Век. 2004 Мау; 28 8ирр1 1:811-20). С-Κί! рецептор также экспрессируется на более чем 10% бластах в 64% бе ηονο острых миелогенных лейкозов (АМЬ) и 95% рецидивов АМЬ. С-кй опосредует пролиферацию и антиапоптозные эффекты при АМЬ (см. Сигг Нета!о1 Вер. 2005 1аи; 4(1): 51-8).

Экспрессия С-Κί! была документально подтверждена в различных злокачественных заболеваниях человека, включая маслоцитоз, мастоцитарный лейкоз, желудочно-кишечную стромальную опухоль, синоназальную природный киллер/Т-клеточную лимфому, семиному, дисгерминому, карциному щитовидной железы; мелкоклеточную карциному легких, злокачественную меланому, аденоидную кистозную карциному, карциному яичников, острый миелогенный лейкоз, анапластическую крупно-клеточную лимфому, ангиосаркому, карциному эндометрия, педиатрический Т-клеточный АЬ1, лимфому, карциному молочной железы и карциному предстательной железы. См. Нешпсй, М1сйае1 С. е! а1. Ве\зе\у Аг!ю1е: ΙηΗίόίίίοη οί ΚΙΤ Тугокше 1<ша5е Асбтйу: А Nονе1 Мо1еси1аг Арргоасй !о !йе Тгеа!теп! οί 1<1Т-Ро5Ште Ма1щпапае5. 1оита1 οί Сйшса1 Онсо1оду. νο1 20, Νο 6 (Магсй 15), 2002: рр 1692-1703.

Краткое описание изобретения

Настоящее изобретение обеспечивает способ лечения мастоцитоза.

Другие характеристики и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из представленного ниже описания изобретения и из формулы изобретения.

Подробное описание изобретения

Термины включающий, включающий в себя и содержащий используются в настоящей заявке в их открытом, неограниченном значении.

Аббревиатуры

Как они использованы в настоящей заявке, представленные ниже аббревиатуры имеют следующие значения (дополнительные аббревиатуры указаны далее в описании, где это необходимо):

АТФ аденозинтрифосфат

Вос или ВОС трет-бутоксикарбонил

ЭСМ дихлорметан

ДМФА диметилформамид

ЭМ8О диметилсульфоксид

ЭГЕА диизопропилэтиламин

ЕЭСЧ гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида

ЕЭТА этилендиаминтетрауксусная кислота

Е!ОАс этилацетат

- 1 016611

РР поляризация флуоресценции

НОВТ или НОВ! гидрат 1-гидроксибензотриазола

ЖХ/МС (Ε8Ι) жидкостная хроматография/масс-спектр (ионизация электроспреем)

МеОН метиловый спирт

ЯМР ядерный магнитный резонанс

КТ комнатная температура

ТРА трифторуксусная кислота

ТГФ тетрагидрофуран

ТСХ тонкослойная хроматография

Определения

Настоящее изобретение включает способ применения соединения {2-циклогекс-1-енил-4-[1-(2диметиламиноацетил)пиперидин-4-ил]фенил}амид 4-циано-1Н-имидазол-2-карбоновой кислоты со следующей формулой:

для лечения мастоцитоза (указанное в настоящей заявке как соединение по настоящему изобретению).

Варианты воплощения изобретения

Варианты воплощения настоящего изобретения включают соединение {2-циклогекс-1-енил-4-[1-(2диметиламиноацетил)пиперидин-4-ил]фенил}амид 4-циано-1Н-имидазол-2-карбоновой кислоты со следующей формулой (I)

и его сольват, гидрат, таутомер или фармацевтически приемлемую соль.

Как он использован в настоящей заявке, термин соединение по настоящему изобретению также включает сольват, гидрат, таутомер или фармацевтически приемлемую соль этого соединения.

Фармацевтически приемлемые соли

Как указано, соединения по настоящему изобретению также могут присутствовать в форме фармацевтически приемлемых солей.

Для применения в медицине соли соединений по настоящему изобретению относятся к нетоксичным фармацевтически приемлемым солям. Одобренные ΡΌΑ фармацевтически приемлемые солевые формы (см. 1п!етпа1юпа1 1. Рйатт. 1986, 33, 201-217; 1. Рйатт. 8сг, 1977, 1аи, 66(1), р1) включают фармацевтически приемлемые кислотные/анионные или основные/катионные соли.

Фармацевтически приемлемые кислотные/анионные соли включают, но не ограничиваются этим, ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, битартрат, бромид, эдетат кальция, камсилат, карбонат, хлорид, цитрат, дигидрохлорид, эдетат, эдисилат, эстолят, эсилат, фумарат, глицептат, глюконат, глутамат, гликоллиларсанилат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, гидроксинафтоат, иодид, изетионат, лактат, лактобионат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилбромид, метилнитрат, метилсульфат, муцинат, напсилат, нитрат, памоат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат, сульфат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат и триэтиодид. Органические или неорганические кислоты также включают, но не ограничиваются этим, иодисто-водородную, перхлорную, серную, фосфорную, пропионовую, гликолевую, метансульфоновую, гидроксиэтансульфоновую, щавелевую, 2-нафталинсульфоновую, п-толуолсульфоновую, циклогексансульфаминовую, сахариновую или трифторуксусную кислоту.

Фармацевтически приемлемые основные/катионные соли включают, но не ограничиваются этим, соли алюминия, 2-амино-2-гидроксиметилпропан-1,3-диола (также известного как трис(гидроксиметил)аминометан, трометан или ТРИС), аммиака, бензатина, трет-бутиламина, кальция, глюконата кальция, гидроксида кальция, хлорпрокаина, холина, холинбикарбоната, холинхлорида, циклогексиламина, диэтаноламина, этилендиамина, лития, ЫОМе, Ь-лизина, магния, меглумина, ΝΗ₃,

- 2 016611

ΝΗ₄ΟΗ, Ν-метил-Э-глюкамина, пиперидина, калия, калий-трет-бутоксида, гидроксида калия (водный), прокаина, хинина, натрия, карбоната натрия, натрий-2-этилгексаноата (8ΕΗ), гидроксида натрия или цинка.

Стереохимические изомеры

Специалистам в данной области должно быть понятно, что соединение по настоящему изобретению содержит один или несколько асимметрических атомов углерода в своей структуре. Предполагается, что в объем настоящего изобретения включены отдельные энантиомерные формы соединения по настоящему изобретению, рацемические смеси и смеси энантиомеров, в которых присутствует энантиомерный избыток.

Термин отдельный энантиомер, как он использован в настоящей заявке, означает все возможные гомохиральные формы, которые могут иметь соединения по настоящему изобретению и их Ν-оксиды, аддитивные соли, четвертичные амины и физиологически функциональные производные.

Стереохимически чистые изомерные формы можно получить путем применения принципов, известных из уровня техники. Диастереоизомеры можно разделить методами физического разделения, такими как фракционированная кристаллизация, и хроматографическими методами, и энантиомеры можно отделить друг от друга при помощи селективной кристаллизации диастереомерной соли с использованием оптически активных кислот или оснований или при помощи хиральной хроматографии. Чистые стереоизомеры также можно получить синтетическим путем из соответствующих стереохимически чистых исходных веществ или с использованием стереоселективных реакций.

Термин изомер относится к соединениям, которые имеют одинаковую композицию и молекулярную массу, но отличаются физическими и/или химическими свойствами. Такие вещества имеют одинаковое количество и тип атомов, но отличаются по структуре. Структурные различия могут быть в строении (геометрические изомеры) или в способности вращать плоскость поляризованного света (энантиомеры).

Термин стереоизомер относится к изомерам с идентичным строением, которые различаются по расположению их атомов в пространстве. Энантиомеры и диастереомеры являются примерами стереоизомеров.

Термин хиральный относится к структурной характеристике молекулы, которая делает невозможным ее наложение на ее зеркальное отражение.

Термин энантиомер относится к одному из пары молекулярных частиц, которые являются зеркальным отражением друг друга и не являются взаимоналагаемыми.

Термин диастереомер относится к стереоизомерам, которые не являются зеркальными отражениями.

Символы К и 8 представляют конфигурацию заместителей вокруг хирального атома (атомов) углерода.

Термин рацемат или рацемическая смесь относится к композиции, состоящей из эквимолярных количеств двух энантиомерных видов, где композиция лишена оптической активности.

Термин гомохиральный относится к состоянию энантиомерной чистоты.

Термин оптическая активность относится к степени, в которой гомохиральная молекула или нерацемическая смесь хиральных молекул вращает плоскость поляризованного света.

Должно быть понятно, что различные замещающие стереоизомеры, геометрические изомеры и их смеси, используемые для получения соединения по настоящему изобретению, являются либо коммерчески доступными, либо их можно получить синтетическим путем из коммерчески доступных исходных веществ, или их можно получить в виде изомерных смесей и затем получить в виде разделенных изомеров с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области.

Изомерные обозначения К и 8 используются, как описано в настоящей заявке, для указания конфигурации атома (атомов) относительно ядра молекулы и предназначены для использования, как определено в литературе (ЮТАС ВесошшепбаИопк Гог Еипбашеп1а1 81егеосйеш151гу (8ес1юп Ε), Риге Арр1. Сйеш., 1976, 45:13-30).

Соединение по настоящему изобретению можно получить в виде индивидуального изомера либо путем изомер-специфического синтеза, либо путем выделения из изомерной смеси. Традиционные методы разделения включают образование свободного основания каждого из изомеров изомерной пары с использованием оптически активной соли (с последующей фракционированной кристаллизацией и восстановлением свободного основания), образование сложного эфира или амида каждого из изомеров изомерной пары (с последующим хроматографическим разделением и удалением хирального вспомогательного вещества) или разделение изомерной смеси либо исходного вещества, либо конечного продукта с использованием препаративной ТСХ (тонкослойной хроматографии) или хиральной ВЭЖХ колонки.

Сольваты

Соединение может образовывать сольваты, например с водой (т.е. гидраты) или традиционными органическими растворителями. Как он использован в настоящей заявке, термин сольват означает физическую ассоциацию соединений по настоящему изобретению с одной или несколькими молекулами растворителей. Такая физическая ассоциация включает различные степени ионного и ковалентного свя

- 3 016611 зывания, включая водородное связывание. В некоторых случаях сольват может быть выделен, например, когда одна или несколько молекул растворителей включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Термин сольват охватывает как сольваты в фазе раствора, так и сольваты, которые могут быть выделены. Неограничивающие примеры подходящих сольватов включают этаноляты, метаноляты и т.п.

Предполагается, что в объем настоящего изобретения включены сольваты соединения по настоящему изобретению. Таким образом, в способах лечения по настоящему изобретению, термин введение охватывает средства лечения, ослабления или предотвращения синдрома, расстройства или заболевания, описанного в настоящей заявке, при помощи соединений по настоящему изобретению или их сольватов, которые очевидным образом включены в объем настоящего изобретения, если только нет иного специального указания.

Ν-оксиды

Соединение по настоящему изобретению может быть преобразовано в соответствующую Νоксидную форму, следуя процедурам, известным из уровня техники для преобразования трехвалентного азота в его Ν-оксидную форму. Указанную реакцию Ν-окисления, как правило, осуществляют путем взаимодействия исходного вещества с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например, пероксид водорода, пероксиды щелочных и щелочно-земельных металлов, например, пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие как, например, бензолкарбопероксокислота или галогензамещенная бензолкарбопероксокислота, например 3-хлорбензолкарбопероксокислота, пероксоалка новые кислоты, например пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например третбутилгидропероксид. Подходящие растворители включают, например, воду, низшие спирты, например, этанол и т.п., углеводороды, например, толуол, кетоны, например, 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, и смеси таких растворителей.

Таутомерные формы

Соединение по настоящему изобретению также может существовать в его таутомерной форме. Такая форма, хотя и не указана явным образом в настоящем описании, рассматривается как включенная в объем настоящего изобретения.

Получение соединения по настоящему изобретению

В ходе любого процесса получения соединения по настоящему изобретению может быть необходимым и/или желательным защитить чувствительные или реакционноспособные группы в какой-либо из молекул. Это достигается при помощи традиционных защитных групп, таких, которые описаны в Рто1ес11пд Сгоирк, Р. Кос1еи8к1, ТЫете Меб1са1 РиЬйкйетк, 2000; и Т.У. Стееие & Р.С.М. ХУиК Рто1есбуе Сгоирк ίη Отдашс 8уи1йе818, 3гб еб. ХУПеу 1и!ет8С1еисе, 1999. Защитные группы можно удалить на удобной для этого последующей стадии с использованием способов, известных из уровня техники.

Способы получения

Схема 1

I

Схема 1 иллюстрирует общую процедуру получения соединения формулы (I) по настоящему изобретению. Соединения формулы 1-2 можно получить путем ортогалогенирования, предпочтительно бромирования, аминосоединений формулы 1-1 с последующими катализируемыми металлом реакциями сочетания с бороновыми кислотами или боронатными сложными эфирами (реакции Сузуки, где Н²М представляет собой Н²В(ОН)2 или эфир бороновой кислоты) или оловосодержащими реагентами (реакции Стилле, где Н²М представляет собой К.²8и(алкил)3) (обзор реакций см. в Ν. М1уаита, А. διιζιι1<ί. Сйет. Неу., 95:2457 (1995), 1. К. 81111е, А1ще\\. Сйет, 1и!. Еб. Еи§1, 25:508024 (1986) и А. δϋζυΗ т Ме1а1Са1а1у^еб Соирйид Кеасбоик, Е. Эехбепсй, Р. 81аид, Ебк., Убеу-УСН, ХУешйепп (1988)). Соединения формулы 1-1 могут быть коммерчески доступными, или можно использовать указанные опосредованные палладием реакции перекрестного связывания, описанные выше, для получения соединений формулы 11 из исходного вещества 1-0.

Предпочтительные условия для бромирования соединения 1-1 представляют собой Νбромсукцинимид (ΝΒ8) в подходящем растворителе, таком как Ν,Ν-диметилформамид (ДМФА), дихлорметан (ЭСМ) или ацетонитрил. Катализируемые металлом сочетания, предпочтительно реакции Су зуки, можно осуществить в соответствии со стандартными процедурами, предпочтительно в присутствии

- 4 016611 палладиевого катализатора, такого как тетракис (трифенилфосфин)палладий(О) (Рб (РРй₃)₄), водного основания, такого как водный раствор №ьСО₃. и подходящего растворителя, такого как толуол, этанол, диметоксиэтан (ΌΜΕ) или ДМФА.

Соединения формулы I можно получить путем взаимодействия соединений формулы 1-2 с карбоновыми кислотами УСООН, в соответствии со стандартными процедурами для образования амидной связи (обзор реакций см. в: М. Вобапкку апб А. Вобапкку, Тйе Ртаебее οί Рерббе 8уп1йе515, 8рппдет-Уег1ад, ΝΥ (1984)) или путем взаимодействия с хлорангидридами кислот ХУСОС1 или активированными сложными эфирами УСО₂Кд (где Кд представляет собой удаляемую группу, такую как пентафторфенил или Νсукцинимид). Предпочтительные реакционные условия для сочетания с ХУСООН представляют собой следующие: когда У представляет собой фуран, оксалилхлорид в ЭСМ с ДМФА в качестве катализатора с получением хлорангидрида кислоты УСОС1, а затем сочетание в присутствии триалкиламина, такого как ΌΙΕΑ; когда У представляет собой пиррол, гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3этилкарбодиимида (ЕЭС1) и гидрохлорид 1-гидроксибензотриазол-6-сульфонамидометила (НОВ1); и когда У представляет собой имидазол, предпочтительные условия включают гексафторфосфат бромтрипирролидинофосфония (РуВгОР) и диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ) в ЭСМ.

Должно быть понятно, что необязательное замещение, присутствующее в кольце А в формуле I, может присутствовать в исходных веществах 1-1 или 1-3, и в таких случаях будет переноситься в процессе синтеза, в общем виде представленного на схеме 1. Альтернативно, различные заместители в соединениях формулы I могут быть введены различными путями, описанными ниже, с получением необязательного замещения, указанного для формулы I. Удаляемая группа Ь₁, присутствующая в кольце А в формуле 1-0 или 1-3, может быть замещена до или на любой стадии способа, представленного на Схеме 1. Когда такие удаляемые группы (предпочтительно, фтор или хлор) являются активированными нитрогруппой формулы 1-3 для нуклеофильной атаки, их можно подвергнуть прямому нуклеофильному ароматическому замещению аммиаком и азидным анионом или аминами, спиртами, тиолами и другими нуклеофилами в присутствии подходящего основания, такого как К₂СО₃, Ν,Ν-диизопропилэтиламин (ΌΓΕΑ) или ΝΕΐ₃. Когда удаляемая группа является подходящей для катализируемого металлом сочетания (предпочтительно бром или трифторметансульфонилокси), можно осуществить ряд реакций перекрестного связывания (таких как реакции Сузуки и Стиле, указанные выше для введения К²). Другие катализируемые металлом реакции сочетания, которые можно использовать, включают ароматическое и гетероароматическое аминирование и амидирование (обзор реакций см.: 8. Ь. Виейта1б, е! а1., Тор. Сигг. Сйет., 219:131-209 (2001) и 1. Р. Наг1\\щ ш Огдапора11абшт Сйешщбу Гог Отдаше 8упГйе5щ, ХУбеу ШГегаеГепее, ΝΥ (2002). Дополнительные катализируемые металлом реакции перекрестного связывания с 2,4,6триметилциклотрибороксаном можно использовать, если Ь₁ представляет собой бром, иод или хлор, активированный при помощи нитро, для образования необязательного метильного замещения (см. М. Стау, е! а1, Тебайебтоп Ьей., 41:6237-40 (2000)).

В некоторых случаях, изначальные заместители могут быть далее дериватизированы, как описано ниже, с получением конечного замещения формулы I.

Альтернативный способ введения азотсодержащих гетероциклических заместителей по кольцу А представляет собой образование гетероцикла из аминогруппы в кольце А. Аминогруппа может изначально присутствовать в исходном веществе в защищенной или незащищенной форме или может быть результатом восстановления нитрогруппы, которая также может либо изначально присутствовать в исходном веществе, либо может быть присоединена при помощи реакции нитрирования. Кроме того, аминогруппа может быть образована путем восстановления азидной группы, которая может присутствовать в исходном веществе или может быть образована в результате нуклеофильного ароматического замещения активированного галогенангидрида азидным анионом, как указано выше. Аминогруппа также может быть результатом нуклеофильного ароматического замещения активированного галогенангидрида (например, в нитрогалогеновом соединении) аммиаком или анионом защищенного эквивалента аммиака, например, трет-бутилкарбамата. При введении амина в защищенной форме, защиту амина можно удалить в соответствии со стандартными, известными из литературы способами. (Примеры аминозащитных групп и способов удаления защиты см.: Тйеобота У. Сгеепе апб Ре!ег С. М. ХУиК 1ойп Уйеу апб 8оп§, Ше., ΝΥ (1991).) Реакция образования кольца включает обработку аминогруппы анилина подходящим необязательно замещенным диэлектрофилом, предпочтительно дигалогенангидридом или дикарбонильным соединением, с образованием двух замещений по аминогруппе с получением необязательно замещенного гетероцикла. В случае дигалогенангидридов, можно добавить любое количество подходящих оснований в качестве акцепторов кислоты, таких как карбонат калия, гидроксид натрия или триалкиламин, такой как триэтиламин. Таким образом, обработка бис(2-галогенэтил)амином, таким как бис(2хлорэтил)амин или бис(2-бромэтил)амин, даст пиперазиновое кольцо (см., например, 1. Меб. Сйет., 29:640-4 (1986) и 1. Меб. Сйет., 46:2837 (2003)). Необязательное замещение по азоту амина такого реагента приведет к включению необязательного замещения по концевому амину пиперазина. Например, обработка ^№бис(2-хлорэтил)анилином даст Ν-фенилпиперазиногруппу. Обработка бис(2галогенэтил)эфиром или бис (2-галогенэтил)тиоэфиром обеспечит образование морфолинового или тиоморфолинового кольца, соответственно.

- 5 016611

Другой альтернативный способ прямого замещения для введения гетероциклических заместителей по кольцу А включает получение гетероцикла из альдегида (т.е. из формильной группы в кольце А) . Формильная группа может изначально присутствовать в исходном веществе в защищенной или незащищенной форме или может быть образована в результате любого количества реакций формилирования, известных из литературы, включая реакцию У1кте1ет-Нааск (химизм реакции формилирования см. в: С. А. О1ай. е! а1.. Сйет Рем.. 87: (1987)) или путем пара-формилирования нитроароматических соединений (см.: А. Ка1тЙ8ку апб Ь. Х1е. Те!гайебгоп Ье11.. 37:347-50 (1996)).

И наконец. должно быть понятно. что соединения формулы I могут быть далее дериватизированы. Защитные группы в соединениях формулы I могут быть удалены в соответствии со стандартными процедурами синтеза (Тйеобога У. Сгеепе апб Ре1ег С. М. УиК 1ойп \УПеу апб 8оп§. 1пс., ΝΥ (1991)). и затем соединения можно подвергнуть дальнейшей дериватизации. Примеры дальнейшей дериватизации соединений формулы I включают. но не ограничиваются этим: когда соединения формулы I содержат первичный или вторичный амин. такой амин можно подвергнуть взаимодействию с альдегидами или кетонами в присутствии восстановителя. такого как триацетоксиборогидрид натрия (см. Айбе1-Мад1б 1. Огд. Сйет. 61. рр. 3849-3862. (1996)) для восстановительного алкилирования; с хлорангидридами кислот или карбоновыми кислотами и агентом образования амидной связи. как описано выше. с получением амидов; с сульфонилхлоридами с получением сульфонамидов; с изоцианатами с получением мочевин; с арил- или гетероарилгалогенидами в присутствии палладиевого катализатора. описанного выше (см. указанный выше ссылочный документ Висй\та1б апб Наг1\\1д) с получением арил- и гетероариламинов. Кроме того. когда соединения формулы I содержат арилгалогенид или гетероарилгалогенид. эти соединения можно подвергнуть реакциям с бороновыми кислотами с использованием металлического катализатора (например. реакции сочетания Сузуки или Стиле. описанные выше) или аминами или спиртами (реакции сочетания Висйета1б или Наг1\\1д. см. указанный выше ссылочный документ Висйета1б апб Наг1\\щ). Когда соединения формулы I содержат цианогруппу. эта группа может быть гидролизована до амидов или кислот в кислотных или щелочных условиях. Основные амины могут быть окислены до Ν-оксидов. и наоборот. Ν-оксиды могут быть восстановлены до основных аминов. Когда соединения формулы I содержат сульфид. который может быть ациклическим или циклическим. такой сульфид может быть далее окислен до соответствующих сульфоксидов или сульфонов. Сульфоксиды можно получить путем окисления с использованием подходящего окислителя. такого как один эквивалент (мета-хлорпербензойной кислоты) МСРВА. или обработкой с использованием №|Ю₍ (см.. например. 1. Ведал. е! а1. 1. Меб. Сйет. 46:4676-86 (2003)). а сульфоны можно получить с использованием двух эквивалентов МСРВА или обработкой 4-метилморфолин Ν-оксидом и каталитическим тетроксидом осмия (см.. например. Заявку РСТ УО 01/47919).

Схема 2а

где Ζ представляет собой СН

УУСО₂Н или

1Л/С0С1 или ’ЛЮО₂Р.Ч

Условия, описанные на Схеме 1

2-5 необязательная дальнейшая дериватизации, как описано для схемы 2а

Схема 2а иллюстрирует путь к соединениям формулы I. Р представляет собой -ΝΟ,,Οι,Κ³-. -О-. 8. 8О или 8О₂. и АА представляет собой -ΝΗ₂ или -Ν0₂. Ό¹ и Ό² представлены только в целях иллюстрации; специалистам. должно быть понятно. что Ό⁵ Ό Ό⁷ Ό⁸ также могут присутствовать. Кетоны формулы 2-1 можно преобразовать в винилтрифлат формулы 2-2 путем обработки ненуклеофильным основанием. таким как ЙОА с последующим улавливанием полученного енолята агентом образования трифлата. таким как трифторметансульфоновый ангидрид или. предпочтительно. Ν-фенилтрифторметансульфонимид. Сочетание по методу Сузуки бороновых кислот или боронатных сложных эфиров формулы 2-3 с винилтрифлатами формулы 2-2 может обеспечить соединения формулы 2-4. где Ζ представляет собой С (8уп1йе818. 993 (1991)) .

Для соединений формулы 2-4 обработка при помощи Рб/С может привести к восстановлению олефина (а также нитро. если АА представляет собой NО₂) с получением Ζ - СН. АА - ΝΗ₂. Соединения

- 6 016611 формулы 2-4, где Р представляет собой -8О₂, можно получить из соединений формулы 2-4, где АА представляет собой -ΝΟ₂ и Р представляет собой сульфид (Р представляет собой -8-), путем окисления при помощи МСРВА или другими способами, показанными на схеме 1. Нитрогруппу затем можно восстановить при помощи Рб/С с восстановлением как нитро, так и олефина.

Соединения формулы 2-4 (АА представляет собой ΝΗ₂) затем преобразовывают в соединения формулы 2-5 (которые также представляют собой соединения формулы I, если не требуется никаких дальнейших модификаций), как показано на схеме 1.

Соединения формулы 2-5 могут быть далее модифицированы с получением дополнительных соединений формулы I. Например, в случаях, когда Р представляет собой -ΝΟ,,Οι,Κ³-. Ο,,Οη представляет собой простую связь и В³ представляет собой защитную группу ВОС (СО21Ви), при этом ВОС группу можно удалить в соответствии со стандартными процедурами, например, при помощи трифторуксусной кислоты (ТРА) в ЭСМ (Огееие и ^и18, 1Ыб.), с получением вторичного амина, который затем может быть далее дериватизирован с получением соединений формулы I. Дальнейшая дериватизация включает, но не ограничивается этим взаимодействия с альдегидами или кетонами в присутствии восстановителя, такого как триацетоксиборогидрид натрия, с получением соединений формулы II, где Р представляет собой Ж.’Н2К³ (А. Р. АЬбе1-Мад1б, 1Ыб); с хлорангидридами кислот или с карбоновыми кислотами и агентом образования амидной связи (как показано на схеме 1) с получением соединений формулы II, где Р представляет собой -ЫСОК³; с сульфонилхлоридами (как показано на схеме 1) с получением соединений формулы I, где Р представляет собой -Ν8Ο2Κα; с изоцианатами (как показано на схеме 1) с получением соединений формулы II, где Р представляет собой -ЫСОНКК¹; или используя реакции замещения с использованием металлического катализатора, в общем виде представленные на схеме 1, с получением соединений формулы I, где Р представляет собой -ΝΚ. (8. Ь. Висйта1б, е1 а1., 1Ыб.; 1. Η. НайЖд, 1Ыб.). Для описанного выше примера К_а и К_|:, независимо представляют собой водород, алкил, циклоалкил, галогеналкил, арил, аралкил, гетероарил и гетероаралкил.

Схема 2ι

Схема 2ι иллюстрирует модификацию схемы 2а для синтеза частично ненасыщенных соединений формулы I. Е представляет собой -ΝΟ^^Κ³’-, -О- (Ό¹ и Ό² представляют собой Н), -8- (Ό¹ и Ό² представляют собой Н), -(Ό¹ и Ό² представляют собой Н) или -8Ο2-(Ό^! и Ό² представляют собой Н) и КАА представляет собой -ΝΗ2 или -ΝΟ₂. Соединения формулы 2-4 получают, как показано на схеме 2. Когда КАА представляет собой -ΝΟ₂, нитрогруппа должна быть восстановлена способом, который не восстанавливает олефины, например при помощи железа и хлорида аммония. Когда КАА формулы 2-4 представляет собой аминогруппу, тогда нет необходимости в какой-либо еще стадии, и соединения формулы 2-4 представляют собой также соединения формулы 2-7. Для полученных соединений формулы 2-7, где Е представляет собой -8О₂-или -8О-, следует осуществить окисление сульфида в соединении 2-4, где КАА представляет собой -ЫО₂, как описано выше, с последующим восстановлением нитрогруппы.

Схема 3 иллюстрирует получение промежуточных соединений для синтеза соединений формулы I, где кольцо А представляет собой пиридил и К⁵ представляет собой необязательное замещение в кольце А или один из гетероциклических заместителей, как определено в формуле I. К представляет собой ΝΗ₂или другие функциональные группы, такие как NΟ₂, СООН или СООК, которые в результате могут быть преобразованы в аминогруппу способами, известными из литературы, такими как восстановление для NΟ₂ (как обсуждалось для схемы 1) или перегруппировка Куртиуса для СООН (см. обзор в Отдашс Кеас

- 7 016611

Ιίοπδ. 3:337 (1947)). Ь³ и Ь⁴ представляют собой галогены. (К, который представляет собой СООН, также может быть образован из К, который представляет собой СООК, путем простого катализируемого основанием или кислотой гидролиза.) Как правило, селективность и порядок введения К² и К⁵ достигаются при помощи относительной реакционноспособности галогенов Ь³ и Ь⁴, выбранных в соединении (3-1), характеристической селективности гетероцикла и/или используемых реакционных условий. Пример использования оносительной реакционноспособности галогенов Ь³ и Ь⁴ при селективном введении К² и К⁵включает ситуацию, когда в соединениях формулы 3-1, где Ь³ представляет собой группу фтора и Ь⁴представляет собой группу брома, может быть достигнуто селективное замещение группы фтора с последующим замещением оставшейся группы брома с использованием катализируемой металлом химии замещения (такой, как реакции перекрестного связывания Сузуки или Стиле, как в общем виде представлено ниже). Подобным образом, в соединениях формулы 3-1, где один из Ь³ и Ь⁴ представляет собой группу иода, а другой представляет собой группу брома или хлора, достигается селективная катализируемая металлом химия замещения (такая, как реакции перекрестного связывания Сузуки или Стиле или реакции аминирования Бухвальда/Хартвига, как обсуждается ниже) по группе иода с последующим замещением оставшейся группы брома или хлора с использованием другой катализируемой металлом реакции замещения.

Как показано на схеме 3, удаляемая группа Ь³ в формуле 3-1 может быть сначала замещена с получением соединений формулы 3-3 или удаляемая группа Ь⁴ может быть сначала замещена с получением соединений формулы 3-2. Соединения 3-2 или 3-3 затем можно подвергнуть взаимодействию для замещения Ь или Ь для получения соединений формулы 3-4.

Таким образом, можно использовать прямое нуклеофильное замещение или катализируемое металлом аминирование соединения формулы 3-1 с использованием вторичного амина, аммиака или защищенного амина, такого как трет-бутилкарбамат (см. обзор в Мобетп Атшабоп МеБюбх: К1СС1, А., Ε6.; \УПеу-УСН: ^ешйет, 2000), для введения К⁵ в формулы 3-2 или 3-3, где К⁵ представляет собой первичный или вторичный амин, аминогруппу (ΝΗ₂) и аминовый эквивалент или защищенную аминогруппу. Катализируемое металлом сочетание соединения 3-1 с бороновыми кислотами или боронатными сложными эфирами (реакция Сузуки, М представляет собой группу бороновой кислоты или группу боронатного сложного эфира) или с литийорганическими соединениями (реакция Стилле, М представляет собой 8пК³, где К представляет собой алкил, и другие заместители определены выше, как показано на схеме 1, может обеспечить соединения формул 3-2 или 3-3.

Соединение 3-2 может быть далее преобразовано в соединение 3-4 с использованием катализируемой металлом реакции сочетания Сузуки или Стиле, как описано выше. Ь⁴ в соединении 3-3 также затем может быть замещен группой К⁵ с получением соединений формулы 3-4, снова, путем прямого нуклеофильного замещения или катализируемого металлом взаимодействия нуклеофилом, или при помощи такой же катализируемой металлом реакции перекрестного связывания, как описано выше. Когда К⁵ в формуле (3-2, 3-3 или 3-4) представляет собой защищенный амин и К является отличным от аминогруппы, можно осуществить удаление защиты для демаскирования функциональной аминогруппы. Такая функциональная аминогруппа затем может быть дериватизирована, как показано на схеме 1. Когда Кгруппа в формуле 3-4 является отличной от аминогруппы (такой, как функциональная группа, описанная выше), ее можно преобразовать в аминогруппу в соответствии со способами, известными из литературы (см., например, Сотртейепщуе Отдашс Ттапз&ттабопк: Ьатоск, К.8.; \УПеу апб 8оп§ 1пс., И8А, 1999), и полученный амин 3-5 можно использовать в реакции образования амидной связи, как показано на схеме (1), с получением соединений формулы I. Когда К в формуле 3-4 представляет собой аминогруппу, ее можно использовать непосредственно в амидном связывании, как описано выше. Схема 4а

4-1 4-2 4-3 4-4

Схема 4Ь

4-6

4-7

4-8

Схемы 4а и 4Ь иллюстрируют получение промежуточных соединений, которые затем подвергают модификации в соответствии со схемой 3, исходя из моногалоген-замещенного соединения формулы 4-1 и 4-5, путем введения второй удаляемой группы по завершении замещения первой. Такие соединения также можно использовать для синтеза соединений формулы I, где кольцо А представляет собой пири

- 8 016611 дин, и К⁵ представляет собой либо необязательное замещение в кольце А, либо один из гетероциклических заместителей. Как показано на схеме 3, остальные положения в пиридиновом кольце могут быть замещены, как показано в формуле I. К представляет собой ΝΗ2 или другие функциональные группы, такие как ΝΟ2, СООН или СООК, которые в результате могут быть преобразованы в аминогруппу способами, известными из литературы, такими как восстановление или перегруппировка Куртиуса, как показано на схеме 3. Ь³ и Ь⁴ представляют собой галогены. В таких соединениях Т представляет собой либо Н, либо представляет собой функциональную группу, такую как ОН, которую можно преобразовать в удаляемые группы Ь³ или Ь⁴, такие как галоген, трифлат или мезилат, способами, известными из литературы (см., например, Νίοοίαί. Е., е! а1., I. Не1етосус11с Сйеткйу, 31, (73), (1994)). Замещение Ь³ в соединении формулы 4-1 или Ь⁴ в формуле 4-5 способами, описанными для схемы 3, может дать соединения формул 4-2 и 4-6. В этом момент заместитель Т соединений 4-2 или 4-6 можно преобразовать в удаляемую группу Ь⁴ или Ь³ (предпочтительно, галоген) стандартными способами с получением соединений формул 4-3 и 4-5. Например, когда Т представляет собой ОН, предпочтительными реагентами для осуществления такого преобразования являются тионилхлорид, РС15, РОС1₃ или РВг₃ (см., например, Ко1йет, йеи Нейод., Кее1. Ттау. СЫт. Рауз-Вак; 285, (1953) и Ийои, В, е! а1., 1. Сйет. 8ос. Регкт Тгапк. 1,1370, (1980)). Когда Т представляет собой Н, он может быть непосредственно галогенирован (предпочтительно бромирован) с получением соединений формулы 4-3 или 4-7 (см., например, СашЬапо, V. е! а1., 8уп1Век15, 14, 2175, (2001)). Предпочтительные условия для бромирования представляют собой ΝΒ8 в подходящем растворителе, таком как ЭСМ или ацетонитрил.

Соединения формул 4-3 или 4-7 можно преобразовать в соединения формул 4-4 или 4-8 путем введения остальных групп К² или К⁵, соответственно, способами, описанными выше, и затем в соединения формулы I способами, описанными для схемы 3 для преобразования соединений формул 3-4 и 3-5 в соединения формулы I.

Следующее соединение и его синтез представлены в таблице ниже и следующим за ней примере. Они представлены только в иллюстративных целях и никоим образом не предназначены для ограничения настоящего изобретения.

	Наименование	Структура
I	{2-циклогекс-1-еНИл-4-[1-(2диметиламиноацетил)пиперидин- 4 ил]фенил)амид 4-циано-1Нимидазол-2-карбоновой кислоты	¹ о

Пример получения соединения формулы (I) {2-Циклогекс-1-енил-4-[1-(2-диметиламиноацетил)пиперидин-4-ил]фенил}амид 4-циано-1Н-имидазол-2карбоновой кислоты

¹ О

Смесь (2-циклогекс-1-енил-4-пиперидин-4-илфенил)амида 4-циано-1Н-имидазол-2-карбоновой кислоты в форме соли трифторуксусной кислоты (655 мг, 1,30 ммоль) в ЭСМ (15 мл) охлаждали до 0°С и добавляли Ό]ΕΛ (0,92 мл, 5,2 ммоль). Затем добавляли гидрохлорид диметиламиноацетилхлорида (211 мг, 1,3 моль) по порциям в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч.

Растворитель удаляли в вакууме и полученный остаток распределяли между насыщенным солевым раствором и ЭСМ. Органический слой отделяли, сушили (№₂8О₄) и концентрировали. Полученный остаток очищали на диоксиде кремния (5% МеОНВСМ) с получением 432 мг (70%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

Ή-ЯМР (СЭСк; 400 МГц) : δ 9,49 (с, 1Н), 8,24 (д, 1Н, 1 = 2,3 Гц), 7,70 (с, 1Н), 7,12 (дд, 1Н, 1 = 8,4, 2,1 Гц), 7,01 (с, 1Н), 5,82 (м, 1Н), 4,75 (д, 1Н, 1 = 13,4 Гц), 4,13 (д, 1Н, 1 = 13,4 Гц), 3,57 (д, 1Н, 1 = 14,2 Гц), 3,18 (д, 1Н, 1 = 14,2 Гц), 3,12 (тд, 1Н, 1 = 13,3, 2,4 Гц), 2,73 (дддд, 1Н, 1 = 11,9, 11,9, 3,8, 3,8 Гц), 2,65 (ддд, 1Н, 1 = 13,3, 13,3, 2,4 Гц), 2,40 (с, 6Н), 2,18-2,32 (м, 4Н), 1,60-1,98 (м, 8Н). Масс-спектр (Е8ф т/ζ): рассчитано для С₂₆Н₃₂^О₂, 461,3 (М+Н), найдено 461,2.

- 9 016611

Биологическая активность Ιη νίΐτο анализы

Следующие репрезентативные ίη νίΐτο анализы осуществляли для определения биологической активности соединений формулы I в отношении С-Κίΐ. Они представлены для иллюстрации изобретения, не ограничивая его.

Анализ с-Κΐΐ киназы на основании поляризации флуоресценции

Соединения по настоящему изобретению также являются специфическими ингибиторами с-Κίΐ. Выбор предпочтительных соединений формулы I для использования в качестве ингибиторов с-Κίΐ осуществляли следующим образом с использованием ίη νίΐτο анализа киназы для измерения ингибирования выделенного киназного домена с-кП рецептора человека в протоколе поляризации флуоресценции (ГР). В анализе с-кП использовали флуоресцеинмеченный фосфопептид и антифосфотирозиновое антитело, включенные в набор Ракета Рйо8рйо-Туго81пе Кшазе Κίΐ (Отееп), поставляемый фирмой ΙηνίίΓΟβοη. Когда с-кП фосфорилировала поли 61и₄Туг, флуоресцеин-меченный фосфопептид вытеснялся из антифосфотирозинового антитела фосфорилированным поли О1и₄Тут, таким образом, снижая значение ГР скП киназную реакцию инкубировали при комнатной температуре в течение 45 мин в следующих условиях: 1 нМ с-кП (РгоЦтазе, 1οΐ 8Р005), 100 мкг/мл поли О1ц₄Тут, 50 мкМ АТФ, 5 мМ МдС1₂, 1 мМ ΌΤΤ, 0,01% Т\уеег1-20. 1% ΌΜ8Θ или соединения в 100 нМ Иерее, рН 7,5. Киназную реакцию останавливали добавлением БИТА. Добавляли флуоресцеин-меченный фосфопептид и анти-фосфотирозиновое антитело и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре и регистрировали данные поляризации флуоресценции. Данные представляли собой средние значения для трех образцов. Анализ ингибирования и данных ИК₅₀ осуществляли при помощи ОтарйРаб Рпеш с использованием функции нелинейной регрессии и уравнения с несколькими параметрами и сигмоидальной кривой доза-ответ (наклонная линия изломанного очертания). ИК50 для ингибирования киназы представляет дозу соединения, которая обеспечивает 50% ингибирование активности киназы по сравнению с контролем введения носителя ΌΜ8Θ.

Анализ С-Κΐΐ с использованием ВК-1

Клетки ВВ-1 представляют собой клеточную линию мастоцитомы собаки, которая экспрессирует функционально-активный мутант ШТ (Ма Υ., ВЛ. Бо^ку, X. ХУамщ 1.Б. Β1οιιηΙ Κ. Ба^ку, О.Н. Саидйеу. Скекттд о£ асЩЩнщ тШаПощ ίη С-к11'к ^иxΐатетЬ^аηе собшд гещои ίη сашпе та8ΐ се11 меор1ает8. 1. Iηνе8ΐ Эегта1о1 112:165-170, 1999.). Пролиферацию ВВ-1 клеток можно ингибировать при помощи ингибиторов ШТ, и существует хорошая взаимосвязь между активностью соединения в ферментных анализах ШТ и ингибированием пролиферации ВВ-1. Для оценки ингибирования пролиферации ВВ1 клеток, клетки ВВ-1 суспендировали (1 миллион клеток/мл) в ΌΜΕΜ (модифицированная Дульбекко среда Игла), содержащей 10% ГС8, и засевали при плотности 100 мкл/лунка в 96-луночные культуральные планшеты с прозрачным дном (Со81аг 3 610), содержащие 50 мкл такой же среды, дополненной серийными разведениями испытываемых соединений. Сразу после посева (время ноль), 6 лунок, содержащих клетки, обрабатывали 100 мкл реагента Рготеда Се11 ТйегС1о и инкубировали в течение 10 мин при встряхивании.

Интенсивность сигнала Се11 ТйегС1о (1 с/лунка) определяли с использованием люминометра. Остальные клетки культивировали в течение 72 ч (37°С и 5% СО₂). После 72-часового интервала для клеточного роста в каждую лунку добавляли по 100 мкл реагента Рготеда Се11 ТйегС1о. Планшеты инкубировали еще в течение 10 мин при встряхивании и интенсивности сигнала Се11 ТйегС1о (1 с/лунка) определяли с использованием люминометра. Клеточную пролиферацию определяли по разнице между сигналами на время ноль и на время 72 ч. Значения ИК₅₀ для испытываемых соединений рассчитывали как концентрации, обеспечивающие 50% ингибирование роста.

Биологические данные Биологические данные для С-ΚΙΤ

Активность выбранных соединений по настоящему изобретению представлена ниже. Все данные активности представлены в мкМ, и они имеют следующие погрешности: С-Κίΐ киназа: +10%.

Номер соединения	Наименование	Поляризация флуоресцен- ции С-К1Т ИК₆₀ (мкМ)	Пролиферация С-К1Т ВК-1 ик₅₀ (мкМ)
I	{2-циклогекс-1-енил-4-[1-(2диметиламиноацетил)пиперидин4-ил]фенил}амид 4-циано-1Н- имидазол-2-карбоновой кислоты	0,039	0,09

- 10 016611

Способы лечения/профилактики

Настоящее изобретение включает применение соединений по настоящему изобретению для ингибирования активности С-Κίΐ киназы в клетке или у субъекта или для лечения расстройств, связанных с активностью или экспрессией С-Κίΐ киназы у субъекта.

В одном варианте воплощения, относящемуся к этому аспекту, настоящее изобретение обеспечивает способ снижения или ингибирования киназной активности С-Κίΐ в клетке, включающий стадию контактирования клетки с соединением по настоящему изобретению. Настоящее изобретение также обеспечивает способ снижения или ингибирования киназной активности С-Κίΐ у субъекта, включающий стадию введения субъекту соединения по настоящему изобретению. Настоящее изобретение, кроме того, обеспечивает способ ингибирования клеточной пролиферации в клетке, включающий стадию контактирования клетки с соединением по настоящему изобретению.

Киназную активность С-Κίΐ в клетке или у субъекта можно определить с использованием процедуры, хорошо известной из уровня техники, такой как анализ С-Κίΐ киназы, описанный в настоящей заявке.

Термин субъект, как он использован в настоящей заявке, относится к животному, предпочтительно, к млекопитающему, наиболее предпочтительно, к человеку, являющемуся объектом лечения, наблюдения или эксперимента.

Термин контактирование, как он использован в настоящей заявке, относится к добавлению соединения к клетке, так чтобы соединение поглощалось клеткой.

В других вариантах воплощения, относящихся к этому аспекту, настоящее изобретение обеспечивает как профилактический, так и терапевтический способы лечения субъекта, подверженного риску (или восприимчивого к) развития клеточно-пролиферативного расстройства или расстройства, связанного с СΚίΐ.

В одном примере изобретение обеспечивает способы профилактики у субъекта клеточнопролиферативного расстройства или расстройств, связанного с С-Κίΐ, включающие введение субъекту профилактически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Введение указанного профилактического средства можно осуществлять до проявления симптомов, характерных для клеточнопролиферативного расстройства или расстройства, связанного с С-Κίΐ, так чтобы предотвратить или, альтернативно, замедлить прогрессирование заболевания или расстройства.

В другом примере изобретение относится к способам лечения у субъекта клеточнопролиферативного расстройства или расстройства, связанного с С-ΚΙΤ, включающим введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Введение указанного терапевтического средства можно осуществлять одновременно с проявлением симптомов, характерных для расстройства, так чтобы указанное терапевтическое средство служило в качестве лечения для компенсации клеточно-пролиферативного расстройства или расстройств, связанных с С-Κίΐ.

Термин профилактически эффективное количество относится к количеству активного соединения или фармацевтического средства, которое ингибирует или замедляет у субъекта проявление расстройства, чего добивается исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист.

Термин терапевтически эффективное количество, как он использован в настоящей заявке, относится к количеству активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский ответ у субъекта, которого добивается исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, который включает ослабление симптомов заболевания или расстройства, подлежащего лечению.

Способы определения терапевтически и профилактически эффективных доз для фармацевтических композиций, включающих соединение по настоящему изобретению, раскрыты в настоящей заявке и известны из уровня техники.

Как он использован в настоящей заявке, термин композиция охватывает продукт, включающий определенные указанные ингредиенты в определенных количествах, а также любой продукт, который является результатом, непосредственно или опосредованно, комбинаций указанных ингредиентов в указанных количествах.

Как они использованы в настоящей заявке, термины расстройства, связанные с С-Κίΐ или расстройства, связанные с С-Κίΐ рецептором или расстройства, связанные с тирозинкиназным рецептором С-Κίΐ, включают заболевания связанные с С-Κίΐ активностью или включающие С-Κίΐ активность, например, сверхактивность С-Κίΐ, и состояния, которые сопутствуют таким заболеваниям. Термин сверхактивность С-Κίΐ относится к любому из нижеперечисленного: 1) С-Κίΐ экспрессии в клетках, которые в норме не экспрессируют С-Κίΐ; 2) С-Κίΐ экспрессии клетками, которые в норме не экспрессируют С-Κίΐ; 3) повышенной С-Κίΐ экспрессии, приводящей к нежелательной клеточной пролиферации; или 4) мутациям, приводящим к функциональной активации С-Κίΐ. Примеры расстройств, связанных с С-Κίΐ включают расстройства, являющиеся результатом чрезмерной стимуляции С-Κίΐ из-за аномально высокого количества С-Κίΐ или мутаций в С-Κίΐ, или расстройства, являющиеся результатом аномально высокого количества активности С-Κίΐ из-за аномально высокого количества С-Κίΐ или мутаций в С-Κίΐ. Известно,

- 11 016611 что чрезмерная активность С-Κίί связана с патогенезом многих заболеваний, включая клеточнопролиферативные расстройства, неопластические расстройства и типы рака, перечисленные ниже.

Термин клеточно-пролиферативные расстройства относится к нежелательной клеточной пролиферации одной или нескольких клеточных субпопуляций в многоклеточном организме, принося вред (т.е. дискомфорт или пониженную предполагаемую продолжительность жизни) многоклеточным организмам. Клеточно-пролиферативные расстройства могут возникать у различных видов животных и у человека. Как это использовано в настоящей заявке, клеточно-пролиферативного расстройства включают неопластические расстройства.

Как это использовано в настоящей заявке, неопластическое расстройство относится к опухоли, являющейся результатом аномального или неконтролируемого клеточного роста. Примеры неопластических расстройств включают, но не ограничиваются этим, гематопоэтические расстройства, такие как, например, миелопролиферативные расстройства, такие как тромбоцитемия, идиопатический тромбоцитоз (ЕТ), агногенная миелоидная металпазия, миелофиброз (МЕ), миелофиброз с миелоидной метаплазией (МММ), хронический идиопатический миелофиброз (1МЕ) и истинная полицитемия (РУ), цитопении и пред-злокачественные миелодиспластические синдромы; типы рака, такие как глиомы, рак легких, рак молочной железы, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак желудка, желудочно-кишечные стромальные опухоли (С18Т), рак пищевода, рак прямой кишки, рак поджелудочной железы, рак яичников и гематоглогикальные злокачественные заболевания, включая миелодисплазии, множественную миелому, лейкозы и лимфомы. Примеры гематологических опухолей включают, например, лейкозы, лимфомы (не-Ходжкинскую лимфому), болезнь Ходжкина (также называемую как лимфома Ходжкина) и миелому - например, острый лимфоцитарный лейкоз (ЛЬЕ), острый миелоидный лейкоз (ЛМЬ), острый промиелоцитарный лейкоз (АРЬ), хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ), хронический миелоидный лейкоз (СМЬ), хронический нейтрофильный лейкоз (СХЪ), острый недифференцированный лейкоз (АИЬ), анапластическую крупно-клеточную лимфому (АЕСЬ), пролимфоцитарный лейкоз (РМЬ), юношеский миеломоноцитарный лейкоз (ЛММЬ), Т-клеточный АЬЬ взрослых, АМЬ с миелодисплазией по трем линиям (АМЬ/ТМЭЗ), смешанно-дифференцированный лейкоз (ММЬ), миелодиспластические синдромы (МО§8), миелопролиферативные расстройства (МРЭ) и множественную миелому (ММ).

В следующем варианте воплощения, относящемся к этому аспекту, изобретение охватывает комбинированную терапию для лечения или ингибирования развития клеточно-пролиферативного расстройства или расстройства, связанного с С-Κίΐ, у субъекта. Комбинированная терапия включает введение субъекту терапевтически или профилактически эффективного количества соединения по настоящему изобретению и одного или нескольких других антиклеточно-пролиферативных терапевтических средств, включая химиотерапию, радиационную терапию, генную терапию и иммунотерапию.

Еще в одном варианте воплощения настоящего изобретения соединение по настоящему изобретению можно вводить в сочетании с химиотерапией. Как это использовано в настоящей заявке, химиотерапия относится к терапии, включающей химиотерапевтическое средство. Различные химиотерапевтические средства можно использовать в комбинированных способах лечения, раскрытых в настоящей заявке. Химиотерапевтические средства, рассматриваемые как иллюстративные средства, включают, но не ограничиваются этим: соединения платины (например, цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин); таксановые соединения (например, паклитаксел, доцетаксол); кампототециновые соединения (иринотекан, топотекан); алкалоиды барвинка (например, винкристин, винбластин, винорелбин); противоопухолевые нуклеозидные производные (например, 5-фторурацил, лейковорин, гемцитабин, капецитабин); алкилирующие средства (например, циклофосфамид, кармустин, ломустин, тиотепа); эпиподофилотоксины/подофилотоксины (например, этопозид, тенипозид); ингибиторы ароматазы (например, анастрозол, летрозол, эксеместан); антиэстрогеновые соединения (например, тамоксифен, фулвестрант), антифолаты (например, преметрексед динатрий); гипометилирующие средства (например, азацитидин); биологические средства (например, гемтузамаб, цетуксимаб, ритуксимаб, пертузумаб, трастузумаб, бевацизумаб, эрлотиниб); антибиотики/антрациклины (например, идарубицин, актиномицин Ό, блеомицин, даунорубицин, доксорубицин, митомицин С, дактиномицин, карминомицин, дауномицин); антиметаболиты (например, аминоптерин, клофарабин, цитозин арабинозид, метотрексат); тубулинсвязывающие средства (например, комбретастатин, колхицин, нокодазол); ингибиторы топоизомеразы (например, камптотецин). Другие полезные средства включают верапамил, антагонист кальция, который, как было обнаружено, является полезным в сочетании с антинеопластическими средствами для установления химиочувствительности в опухолевых клетках, резистентных к общепринятым химиотерапевтическим средствам, и для усиления эффективности таких соединений при чувствительных к лекарственным средствам опухолевым заболеваниям. См. §1шр8оп \УС. Тйс са1сшшсйаппе1 Ыоекег уегарашй апб сапсег сйешоШегару. Се11 Са1сшш. 1985 Эес; 6 (6): 449-67. Кроме того, предусматривается, что химиотерапевтические средства, которые должны появиться на рынке, являются полезными в сочетании с соединением по настоящему изобретению.

В другом варианте воплощения настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению можно вводить в сочетании с радиационной терапией. Как это использовано в настоящей заявке, радиационная терапия относится к терапии, которая включает воздействие на субъекта, нуждающегося в

- 12 016611 этом, облучения. Такая терапия известна специалистам в данной области. Подходящая схема радиационной терапии аналогична той, которая уже используется в клинической терапии, где радиационную терапию применяют отдельно или в сочетании с другими химиотерапевтическими средствами.

В другом варианте воплощения настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению можно вводить в сочетании с генной терапией. Как это использовано в настоящей заявке, генная терапия относится к терапии, нацеленной на конкретные гены, задействованные в развитии опухоли. Возможные генно-терапевтические стратегии включают восстановление дефектных опухоль-ингибирующих генов, трансдукцию или трансфекцию клеток антисмысловой ДНК, соответствующей генам, кодирующим факторы роста и их рецепторы, стратегии на основе РНК, такие как рибозимы, РНК ловушки, антисмысловые матричные РНК и малые интерферирующие молекулы РНК (δίΡΗΚ), а также так называемые суицидные гены.

В других вариантах воплощения настоящего изобретения, соединения по настоящему изобретению можно вводить в сочетании с иммунотерапией. Как это использовано в настоящей заявке, иммунотерапия относится к терапии, нацеленной на конкретный белок, задействованный в развитии опухоли, через антитела, специфические к такому белку. Например, моноклональные антитела против сосудистого эндотелиального фактора роста используются в лечении различных типов рака.

Когда используют второе фармацевтическое средство в дополнение к соединению по настоящему изобретению, эти два фармацевтических средства можно вводить одновременно (например, в отдельных или объединенных композициях), последовательно в любом порядке, примерно в одно и то же время или по отдельным схемам дозирования. В последнем случае, эти два соединения можно вводить в течение такого времени и в таком количестве и таким способом, чтобы этого было достаточно для обеспечения достижения благоприятного или синергетического эффекта. Должно быть понятно, что предпочтительный способ и порядок введения и соответствующие дозируемые количества и режимы для каждого компонента такой комбинации зависят от конкретного химиотерапевтического средства, вводимого в сочетании с соединением по настоящему изобретению, пути их введения, конкретного опухолевого заболевания, подлежащего лечению, и конкретного хозяина, которого лечат.

Как должно быть понятно специалистам в данной области, подходящие дозы химиотерапевтических средств, как правило, находятся на уровне или меньше доз, которые уже применяются в клинической терапии, при этом такие химиотерапевтические средства вводят отдельно или в сочетании с другими химиотерапевтическими средствами.

Оптимальный способ и порядок введения и дозируемые количества и режим легко определит специалист в данной области с использованием традиционных способов и с учетом информации, изложенной в настоящей заявке.

Только в качестве примера, соединения платины для получения благоприятного результата вводят при дозах от 1 до 500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например, от 50 до 400 мг/м², в частности, для цисплатина при дозе около 75 мг/м² и для карбоплатина около 300 мг/м² на курс лечения. Цисплатин не абсорбируется перорально, и поэтому его доставку осуществляют через инъекцию внутривенно, подкожно, внутриопухолевую инъекцию или интраперитонеально.

Только в качестве примера, таксановые соединения для получения благоприятного результата вводят при дозах от 50 до 400 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например, от 75 до 250 мг/м², в частности, для паклитаксела при дозах от около 175 до 250 мг/м² и для доксетаксела от около 75 до 150 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, камптотециновые соединения для получения благоприятного результата вводят при дозах от 0,1 до 400 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например от 1 до 300 мг/м², в частности, для иринотекана при дозах от около 100 до 350 мг/м² и для топотекана от около 1 до 2 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, алкалоиды барвинка для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от 2 до 30 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, в частности, для винбластина при дозах от около 3 до 12 мг/м², для винкристина при дозах от около 1 до 2 мг/м² и для винорелбина при дозах от около 10 до 30 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, противоопухолевые нуклеозидные производные для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от 200 до 2500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например 700 до 1500 мг/м². 5-фторурацил (5-Ρϋ) обычно применяют путем внутривенного введения при дозах в пределах от 200 до 500 мг/м² (предпочтительно от 3 до 15 мг/кг/день). Гемцитабин для получения благоприятного результата вводят при дозах от около 800 до 1200 мг/м² и капецитабин для получения благоприятного результата вводят при дозах от около 1000 до 2500 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, алкилирующие средства для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от 100 до 500 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например, 120 до 200 мг/м², в частности, для циклофосфамида при дозах от около 100 до 500 мг/м², для клорамбуцила при дозах от около 0,1 до 0,2 мг/кг массы тела, для кармустина при дозах от около 150 до 200 мг/м² и для ломустина при дозах от около 100 до 150 мг/м² на курс лечения.

- 13 016611

Только в качестве примера, подофилотоксиновые производные для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от 30 до 300 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например, от 50 до 250 мг/м², в частности, для этопозида при дозах от около 35 до 100 мг/м² и для тенипозида от около 50 до 250 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, антрациклиновые производные для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от 10 до 75 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела, например от 15 до 60 мг/м², в частности, для доксорубицина при дозах от около 40 до 75 мг/м², для даунорубицина при дозах от около 25 до 45 мг/м² и для идарубицина при дозах от около 10 до 15 мг/м² на курс лечения.

Только в качестве примера, антиэстрогеновые соединения для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от около 1 до 100 мг в сутки, в зависимости от используемого конкретного средства и состояния, подлежащего лечению. Тамоксифен для получения благоприятного результата вводят перорально при дозах от 5 до 50 мг, предпочтительно от 10 до 20 мг два раза в день, продолжая лечение в течение времени, достаточного для достижения и поддержания терапевтического эффекта. Торемифен для получения благоприятного результата вводят перорально при дозах от около 60 мг один раз в день, продолжая лечение в течение времени, достаточного для достижения и поддержания терапевтического эффекта.

Анастрозол для получения благоприятного результата вводят перорально при дозе около 1 мг один раз в день. Дролоксифен для получения благоприятного результата вводят перорально при дозах около 20-100 мг один раз в день. Ралоксифен для получения благоприятного результата вводят перорально при дозе около 60 мг один раз в день. Эксеместан для получения благоприятного результата вводят перорально при дозе около 25 мг один раз в день.

Только в качестве примера, биологические средства для получения благоприятного результата можно вводить при дозах от около 1 до 5 мг на квадратный метр (мг/м²) площади поверхности тела или, в иных случаях, как это известно из уровня техники. Например, трастузумаб для получения благоприятного результата вводят при дозах от 1 до 5 мг/м², в частности, от 2 до 4 мг/м² на курс лечения.

Дозы можно вводить, например один раз, два раза или более на курс лечения, который можно повторять, например, каждые 7, 14, 21 или 28 дней.

Соединения по настоящему изобретению можно вводить субъекту системно, например, внутривенно, перорально, подкожно, внутримышечно, внутрикожно или парентерально. Соединения по настоящему изобретению также можно вводить субъекту местным путем. Неограничивающие примеры систем местной доставки включают использование интралюминальных медицинских устройств, которые включают внутрисосудистые катетеры для доставки лекарственных средств, проволоки, фармакологические стенты и эндолюминальные выстилки. Соединение по настоящему изобретению также можно вводить субъекту в сочетании с таргетирующим агентом для достижения высокой локальной концентрации соединения на мишеневом участке. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно формулировать в композицию для быстрого высвобождения или медленного высвобождения с целью поддержания лекарственных средств или агентов в контакте с тканями, которые являются мишенями для них, в течение времени от нескольких часов до нескольких недель.

Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтические композиции, включающие соединение по настоящему изобретению в ассоциации с фармацевтически приемлемым носителем.

Фармацевтическая композиция может содержать от около 0,1 до 1000 мг, предпочтительно от около 100 до 500 мг, соединения и может быть в любой форме, подходящей для выбранного способа введения.

Фраза фармацевтически приемлемый относится к молекулярным структурам и композициям, которые не вызывают неблагоприятных, аллергических или нежелательных реакций при их введении животным или человеку, как это является подходящим. Применение в ветеринарии равным образом включено в объем настоящего изобретения, и фармацевтически приемлемые композиции включают композиции как для клинического, так и/или ветеринарного применения.

Носители включают необходимые и инертные фармацевтические эксципиенты, включая, но не ограничиваясь этим, связующие, суспендирующие вещества, смазывающие вещества, отдушки, подсластители, консерванты, красители и покрытия. Композиции, подходящие для перорального введения, включают твердые формы, такие как пилюли, таблетки, каплеты, капсулы (при этом каждая форма включает композиции немедленного высвобождения, рассчитанного по времени высвобождения и замедленного высвобождения), гранулы и порошки, и жидкие формы, такие как растворы, сиропы, эликсиры, эмульсии и суспензии. Формы, полезные для парентерального введения, включают стерильные растворы, эмульсии и суспензии.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению также включают фармацевтические композиции для медленного высвобождения соединений по настоящему изобретению. Такая композиция включает носитель для медленного высвобождения (типично, полимерный носитель) и соединение по настоящему изобретению.

Биоразлагаемые носители медленного высвобождения хорошо известны из уровня техники. Они представляют собой вещества, которые могут образовывать частицы для захвата в них активного соеди

- 14 016611 нения(соединений) и которые медленно разлагаются/растворяются в подходящей среде (например, водной, кислотной, щелочной и т.д.) и, таким образом, разлагаются/растворяются в жидкостях организма с высвобождением включенного в них активного соединения(соединений). Такие частицы, предпочтительно, представляют собой наночастицы (т.е. в пределах от около 1 до 500 нм в диаметре, предпочтительно около 50-200 нм в диаметре, и наиболее предпочтительно около 100 нм в диаметре).

Настоящее изобретение также обеспечивает способы получения фармацевтических композиций по изобретению. Соединение по настоящему изобретению, в качестве активного ингредиента, тесно смешивают с фармацевтическим носителем, в соответствии с традиционными методами составления фармацевтических композиций, при этом носитель может принимать самые различные формы, в зависимости от формы препарата, желательной для введения, например перорального или парентерального, такого как внутримышечное. Для получения композиций в пероральной лекарственной форме можно использовать любую обычную фармацевтическую среду. Так, для жидких пероральных препаратов, таких как, например, суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки включают воду, гликоли, масла, спирты, отдушки, консерванты, красители и т.п.; для твердых пероральных препаратов, таких как, например, порошки, капсулы, каплеты, желатиновые капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают крахмалы, сахара, разбавители, добавки для гранулирования, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и т.п. Благодаря простоте их введения, таблетки и капсулы представляют собой наиболее выгодные пероральные стандартные лекарственные формы, в этом случае очевидно использование твердых фармацевтических носителей. Если желательно, на таблетки может быть нанесено сахарное покрытие или энтеросолюбильное покрытие с использованием стандартных способов. Для парентеральных препаратов носитель обычно включает стерильную воду, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например, такие как способствующие растворению или консерванты. Также можно получить суспензии для инъекций, в этом случае можно использовать подходящие жидкие носители, суспендирующие вещества и т. п. В препаратах медленного высвобождения, носитель для медленного высвобождения, типично полимерный носитель, и соединение по настоящему изобретению сначала растворяют или диспергируют в органическом растворителе. Полученный органический раствор затем добавляют в водный раствор с получением эмульсии типа масло-в-воде. Предпочтительно водный раствор включает поверхностно-активное вещество(вещества). Затем органический растворитель выпаривают из эмульсии типа масло-в-воде с получением коллоидной суспензии частиц, содержащей носитель для медленного высвобождения и соединение по настоящему изобретению.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат, на единицу лекарственной формы, например, таблетку, капсулу, порошок, инъекцию, чайную ложку и т.п., количество активного ингредиента, необходимое для доставки эффективной дозы, указанной выше. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат, на единицу лекарственной формы, например, таблетки, капсулы, порошка, инъекции, суппозитория, чайной ложки и т.п., от около 0,01 мг до 200 мг/кг массы тела в день. Предпочтительно, эти пределы составляют от около 0,03 до около 100 мг/кг массы тела в день, наиболее предпочтительно, от около 0,05 до около 10 мг/кг массы тела в день. Соединение можно вводить по схеме от 1 до 5 раз в день. Дозы, однако, могут варьировать в зависимости от требований пациентов, тяжести состояния, подлежащего лечению, и используемого соединения(соединений). Можно использовать как ежедневное введение, так и постпериодическое.

Предпочтительно такие композиции представляют собой стандартные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, стерильные парентеральные растворы или суспензии, аэрозоли или жидкие спреи с отмеренными дозами, капли, ампулы, автоинжекторные устройства или суппозитории; для перорального, парентерального, интраназального, сублингвального или ректального введения или для введения путем ингаляции или инсуффляции. Альтернативно, композиция может присутствовать в форме, подходящей для введения раз в неделю или раз в месяц; например, нерастворимую соль активного соединения, такую как деканоатная соль, можно адаптировать для получения депо препаратов для внутримышечной инъекции. Для получения твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим носителем, например традиционными ингредиентами для таблетирования, такими как кукурузный крахмал, лактоза, сахароза, сорбит, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, дикальцийфосфат, или смолами и другими фармацевтическими разбавителями, например, водой, с получением твердой предварительно сформулированной композиции, содержащей гомогенную смесь соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Когда такие предварительно сформулированные композиции указаны как гомогенные, это означает, что активный ингредиент диспергирован равномерно по всему объему композиции так, чтобы композицию легко можно было подразделить на равно эффективные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Такую твердую предварительно сформулированную композицию затем делят на стандартные лекарственные формы описанного выше типа, содержащие от 0,1 до около 500 мг активного ингредиента по настоящему изобретению. Таблетки или пилюли, включающие композицию по настоящему изобретению, могут иметь покрытие или могут быть скомпаундированы каким-либо иным образом с получением лекарственной формы, обеспечивающей преимущество пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля могут включать внутренний дозируемый и внешний дозируе

- 15 016611 мый компонент, последний в форме конверта для первого. Эти два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для защиты от разложения в желудке и позволяет внутреннему компоненту проходить неповрежденным в двенадцадиперстную кишку или замедляет его высвобождение. Для таких энтеросолюбильных слоев или покрытий можно использовать различные вещества, и такие вещества включают различные полимерные кислоты с такими веществами, как шеллак, ацетиловый спирт и ацетат целлюлозы.

Жидкие формы, в которые может быть включено соединение по настоящему изобретению, для введение пероральным путем или путем инъекции включают, водные растворы, сиропы с подходящими отдушками, водные или масляные суспензии и эмульсии с такими вкусовыми веществами, как пищевые масла, такие как масло семян хлопчатника, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические носители. Подходящие диспергирующие или суспендирующие вещества для водных суспензий включают синтетические и природные смолы, например, трагакант, аравийскую камедь, альгинат, декстран, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон или желатин. Жидкие формы, в которых используют подходяще ароматизированные суспендирующие или диспергирующие вещества, также могут включать синтетические и природные смолы, например трагакант, аравийскую камедь, метилцеллюлозу и т.п. Для парентерального введения желательными являются стерильные суспензии и растворы. Изотонические препараты, которые, как правило, содержат подходящие консерванты, используют, когда желательно внутривенное введение.

Для получения благоприятного результата соединения по настоящему изобретению можно вводить в виде разовой суточной дозы или общую суточную дозу можно вводить в виде раздельных доз два, три или четыре раза в сутки. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно вводить в интраназальной форме путем местного применения подходящих интраназальных носителей или посредством наносимых на кожу пластырей для чрескожной доставки, хорошо известных специалистам в данной области. Для введения в форме чрескожных систем доставки, введение, конечно, должно быть скорее непрерывным, чем прерывистым, в течение всего периода применения такой схемы лекарственного лечения.

Например, для перорального введения в форме таблетки или капсулы, активный лекарственный компонент можно объединить с пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и т.п. Кроме того, когда это желательно или необходимо, в смесь также могут быть включены подходящие связующие, смазывающие вещества, разрыхлители и красители. Подходящие связующие включают, без ограничения, крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, трагакант или олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Разрыхлители включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п.

Суточная доза продуктов по настоящему изобретению может варьировать в широких пределах от 1 до 5000 мг на взрослого человека в день. Для перорального введения композиции предпочтительно представляют в форме таблеток, содержащих, 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250 и 500 мг активного ингредиента для симптоматического регулирования дозы для пациента, которого лечат. Эффективное количество соединения по настоящему изобретению обычно обеспечивается при дозах на уровне от около 0,01 до около 200 мг/кг массы тела в день. В частности, пределы составляют от около 0,03 до около 15 мг/кг массы тела в день, и более конкретно, от около 0,05 до около 10 мг/кг массы тела в день. Соединения по настоящему изобретению можно вводить по схеме вплоть до четырех или более раз в день, предпочтительно от 1 до 2 раз в день.

Оптимальные дозы для введения легко может определить специалист в данной области, и они варьируют в зависимости от конкретного используемого соединения, способа введения, активности препарата, способа введения и развития состояния заболевания. Кроме того, факторы, связанные с конкретным пациентом, которого лечат, включающие возраст пациента, массу тела, режим питания и время введения, могут привести к необходимости регулирования дозы.

Соединения по настоящему изобретению также можно вводить в форме липосомных систем доставки, таких как мелкие однослойные везикулы, крупные однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы могут быть образованы из различных липидов, включая, но не ограничиваясь этим, амфипатические липиды, такие как фосфатидилхолины, сфингомиелины, фосфатидилэтаноламины, фосфатидилхолины, кардиолипины, фосфатидилсерины, фосфатидилглицерины, фосфатидиновые кислоты, фосфатидилинозиты, диацилтриметиламмонийпропаны, диацилдиметиламмонийпропан и стеариламин, нейтральные липиды, такие как триглицериды, и их сочетания. Они могут содержать холестерин, либо могут не содержать холестерина.

Другим альтернативным способом введения соединения по настоящему изобретению может быть конъюгирование соединения с таргетирующим агентом для направления такого конъюгата к предполагаемому месту его действия, т.е. к клеткам сосудистого эндотелия или к опухолевым клеткам. Можно использовать таргетирующие агенты как на основе антител, так и не на основе антител. Благодаря спе

- 16 016611 цифическому взаимодействию между таргетирующим агентом и соответствующим связывающимся с ним партнером соединение по настоящему изобретению можно вводить с высокими локальными концентрациями на целевом участке или около этого участка, и, таким образом, можно лечить расстройство на целевом участке более эффективно.

Таргетирующие агенты на основе антител включают антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связываются с мишеневым или достижимым компонентом опухолевой клетки, опухолевой васкулатуры или опухолевой стромы. Мишеневый или достижимый компонент опухолевой клетки, опухолевой васкулатуры или опухолевой стромы, предпочтительно, представляет собой поверхностноэкспрессируемый, поверхностно-достижимый или поверхностно-локализованный компонент. Таргетирующие агенты на основе антител также включают антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связываются с внутриклеточным компонентом, который представляет собой высвобожденную форму некротической опухолевой клетки. Предпочтительно такие антитела представляют собой моноклональные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связываются с нерастворимым внутриклеточным антигеном(антигенами), присутствующим в клетках, которые могут быть индуцированы таким образом, что становятся проницаемыми, или в тенях клеток по существу всех опухолевых и нормальных клеток, но не присутствует или не является достижимым на внешней поверхности нормальных живых клеток млекопитающего.

Как он использован в настоящей заявке, термин антитело в широком смысле относится к любому иммунологическому агенту связывания, такому как [дС, ЦМ, ЦА, ЦЕ, Р(аЬ')₂, моновалентному фрагменту, такому как РаЬ', РаЬ, ОаЬ, а также к полученным при помощи инженерии антителам, таким как рекомбинатные антитела, гуманизированные антитела, биспецифические антитела и т. п. Антитело может быть либо поликлональным, либо моноклональным, хотя моноклональное является предпочтительным. Существует широкий ряд антител, известных из уровня техники, которые обладают иммунологической специфичностью к клеточной поверхностности по существу любого типа солидных опухолей (см., таблицу, представляющую моноклональные антитела для солидных опухолей, в патенте США № 5855866 на имя Тйогре е! а1.). Специалистам в данной области известны способы получения и выделения антител против опухоли (см. патент США № 5855866 на имя Тйогре е! а1. и патент США № 6342219 на имя Тйогре е! а1.).

Методы конъюгирования терапевтических составляющих с антителами хорошо известны из уровня техники. (См., например, Атоп е! а1., Мопос1опа1 АийЬоб1е8 Рог Iттиηоίа^де!^ηд ОГ Эгидк ίη Сапсег Тйегару, ш Мопос1опа1 АпйЬоб1е8 апб Сапсег Тйегару, Ке1кГе1б е! а1. (ебк.), рр. 243-56 (А1ап К. Ыкк, Ечс. 1985); Не11к!гот е! а1., АпйЬоб1е8 Рог Эгид Оейуегу, т Соп1го11еб Эгид Оейуегу (2пб Еб.), КоЬткоп е! а1. (ебк.), рр. 623-53 (Магсе1 Эеккег, Ечс. 1987); Тйогре, АпйЬобу Сатегк ОГ Су!о!охк Адеп!к Ш Сапсег Тйегару: А Кеу1еу, т Мопос1опа1 Ап!1Ьоб1е8 '84: Вю1одюа1 апб Сйшса1 Аррйсайопк, Ртсйега е! а1. (ебк.), рр. 475-506 (1985)). Подобные методы также можно применять для присоединения соединений по настоящему изобретению к таргетирующим средствам, отличным от антител. Специалистам в данной области должны быть известны, или они могут их определить, способы образования конъюгатов с таргетирующими средствами, отличными от антител, такими как малые молекулы, олигопептиды, полисахариды или другие полианионные соединения.

Хотя можно использовать любой связывающийся фрагмент, который является приемлемо стабильным в крови, для связывания соединения по настоящему изобретению с агентом таргетирования, биологически-высвобождаемые связи и/или селективно расщепляемые спейсеры или линкеры являются предпочтительными. Биологически-высвобождаемые связи и селективно расщепляемые спейсеры или линкеры остаются приемлемо стабильными в кровотоке, но являются высвобождаемыми, расщепляемыми или гидролизуемыми только, или преимущественно, в определенных условиях, т.е. в определенном окружении или в контакте с конкретным веществом. Такие связи включают, например, дисульфидные и трисульфидные связи и кислотно-лабильные связи, как описано в патентах США №№ 5474765 и 5762918, и фермент-чувствительные связи, включая пептидные связи, сложные эфиры, амиды, сложные фосфодиэфиры и гликозиды, как описано в патентах США №№ 5474765 и 5762918. Такие конструктивные особенности селективного высвобождения способствуют замедленному высвобождению соединений из конъюгатов на представляющем мишень участке.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения расстройства, связанного с С-Кй, в частности, опухоли, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению, конъюгированного с агентом таргетирования.

Когда белки, такие как антитела или факторы роста, или полисахариды используют в качестве агентов таргетирования, их предпочтительно вводят в форме композиций для инъекций. Раствор антитела для инъекций вводят в вену, артерию или в спинальную жидкость в течение времени от 2 до около 45 мин, предпочтительно от 10 до 20 мин. В некоторых случаях, внутрикожное и внутриполостное введение является предпочтительным, когда опухоли ограничены областью вблизи определенных участков кожи и/или конкретной полости тела. Кроме того, можно использовать интратекальное введение, когда опухоли локализованы в головном мозге.

Терапевтически эффективная доза соединения по настоящему изобретению, конъюгированного с

- 17 016611 агентом таргетирования, зависит от индивидуума, типа заболевания, состояния заболевания, способа введения и других клинических факторов. Эффективные дозы можно легко определить с использованием данных, полученных с использованием животных моделей, включая представленные в настоящей заявке.

Хотя представленное выше описание изобретения раскрывает принципы настоящего изобретения с описанием примеров, представленных в иллюстративных целях, должно быть понятно, что при реализации на практике настоящего изобретения охватываются все обычные варианты, адаптации и/или модификации, входящие в объем представленной ниже формулы изобретения, и их эквиваленты.

Claims

1. Способ лечения мастоцитоза, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы или его сольвата, гидрата, таутомера или фармацевтически приемлемой соли.

2. Способ лечения мастоцитоза, включающий введение субъекту терапевтически эффективного ко- или его сольват, гидрат, таутомер или фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

3. Способ лечения мастоцитоза, включающий введение субъекту соединения по настоящему изо- бретению или его сольвата, гидрата, таутомера или фармацевтически приемлемой соли, конъюгированного с агентом таргетирования.

4. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный способ дополнительно включает введение хи миотерапевтического средства.

5. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный способ дополнительно включает применение радиационной терапии.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2