EA005995B1 - Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие - Google Patents

Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие Download PDF

Info

Publication number
EA005995B1
EA005995B1 EA200300178A EA200300178A EA005995B1 EA 005995 B1 EA005995 B1 EA 005995B1 EA 200300178 A EA200300178 A EA 200300178A EA 200300178 A EA200300178 A EA 200300178A EA 005995 B1 EA005995 B1 EA 005995B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
heparin
activity
range
salt
benzyl ester
Prior art date
Application number
EA200300178A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200300178A1 (ru
Inventor
Жак Диаз
Кристель Пеке
Элизабет Перрэн
Кристиан Висков
Original Assignee
Авентис Фарма С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8852768&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA005995(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Авентис Фарма С.А. filed Critical Авентис Фарма С.А.
Publication of EA200300178A1 publication Critical patent/EA200300178A1/ru
Publication of EA005995B1 publication Critical patent/EA005995B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
    • C08B37/0078—Degradation products
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/727—Heparin; Heparan
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение касается смесей полисахаридов на основе гепарина, способа их получения и фармацевтических композиций, их содержащих.

Description

Настоящее изобретение касается смесей полисахаридов на основе гепарина, способа их получения и фармацевтических композиций, их содержащих.
Гепарин представляет собой смесь сульфатированных мукополисахаридов животного происхождения, используемую, в частности, из-за ее антикоагуляционных и антитромботических свойств.
Однако гепарин обладает недостатками, которые ограничивают условия его применения. В частности, его значительная антикоагуляционная активность (активность анти-11а) может вызывать кровотечения.
Были предложены (ЕР 40144) низкомолекулярные гепарины, полученные щелочной деполимеризацией сложных эфиров гепарина; однако данные продукты еще имеют значительную активность анти-11а.
Изобретение относится к смесям полисахаридов на основе гепарина, обладающим активностью, более избирательной по отношению к активированному фактору X (фактор Ха) и активированному фактору II (фактор 11а), чем у гепарина.
Более конкретно, предметом настоящего изобретения являются смеси сульфатированных полисахаридов, имеющих обычную структуру полисахаридов, входящих в состав гепарина, и обладающих следующими характеристиками:
- они имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от 1500 до 3000 Да, активность анти-Ха в диапазоне от 100 до 150 МЕ/мг, активность анти-11а в диапазоне от 0 до 10 МЕ/мг и отношение активность анти-Ха/активность анти-11а больше 10,
- полисахариды, входящие в состав смесей, содержат от 2 до 26 сахаридных звеньев и содержат на одном из их концов звено 2-О-сульфата 4,5-ненасыщенной глюкуроновой кислоты, в форме соли щелочного или щелочно-земельного металла.
В качестве солей щелочного или щелочно-земельного металла предпочтительными являются соли натрия, калия, кальция и магния.
Среднюю молекулярную массу определяют методом жидкостной хроматографии при высоком давлении с использованием двух последовательно соединённых колонок, например колонок, поставляемых под названием Т8К С3000 ХЬ и Т8К С2000 ХЬ. Детекцию осуществляют рефрактометрически. Используемый элюент представляет собой нитрат лития, и расход составляет 0,6 мл/мин. Систему калибруют по стандартам, полученным хроматографическим фракционированием эноксапарина (ΑνΕΝΤΙδ) на полиакриламид-агарозном геле (ΙΒΕ). Упомянутое получение осуществляют согласно методике, описанной в статье ВаггслгеКГГс е! со11., ТйготЬ. Век., 12, 27-36 (1977-78) или в статье Ό.Α. Байе е! со11., ТйготЬ. Век., 12, 257-271 (1977-78). Результаты вычисляют с использованием программного обеспечения СРС6 (Регкт Е1тег).
Активность анти-Ха измеряют амидолитическим методом на хромогенном субстрате, описанном в статье Те1еп е! со11., ТйготЬ. Век., 10, 399-410 (1977), с использованием в качестве эталона первого международного эталона низкомолекулярных гепаринов.
Активность анти-11а измеряют техникой, описанной Апбегкоп Ь.О. е! со11., ТйготЬ.Век., 15, 531-541 (1979), с использованием в качестве эталона первого международного эталона низкомолекулярных гепаринов.
Предпочтительно, смеси, такие как описанные выше, имеют активность анти-Ха в интервале от 125 до 150 МЕ/мг.
В частности, смеси, такие как описанные выше, имеют активность анти-Ха, находящуюся в интервале от 140 до 150 МЕ/мг, и среднюю молекулярную массу, находящуюся в диапазоне от 2000 до 3000 Да.
Предпочтительно, смеси согласно изобретению имеют активность анти-11а от 0 до 5 МЕ/мг.
Еще более предпочтительно, смеси имеют отношение активность анти-Ха/активность анти-11а больше 25.
Смеси олигосахаридов согласно изобретению могут быть получены деполимеризацией четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина в органической среде при помощи сильного органического основания с рКа>20 или имидазолата натрия, превращением деполимеризованной четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина в натриевую соль, омылением сложного эфира и, в случае необходимости, очисткой.
Четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина представляет собой предпочтительно соль бензэтония, цетилпиридиния или цетилтриметиламмония.
Обычно деполимеризацию осуществляют в среде инертного органического растворителя, такого как хлорсодержащий растворитель (например, дихлорметан), тетрагидрофуран, анизол, при температуре от -20 до 40°С.
В качестве сильного органического основания с рКа больше 20 можно использовать 1,5,7триазабицикло[4.4.0]дец-5-ен, 2-трет-бутилимино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,3,2-диазафосфорин, основания семейства гуанидина и фосфазенов.
Основания семейства гуанидинов представляют собой предпочтительно основания формулы
- 1 005995
Я4 /
К4 ЯЗ в которой К1 обозначает водород или алкил, К2, К3, К4 и К5, одинаковые или разные, обозначают алкильный радикал.
Более конкретно, К1 обозначает водород и К2, К3, К4 и К5 представляют собой метильные радикалы.
Сильные органические основания, принадлежащие к семейству фосфазенов, определены, например, согласно К.БскетеДидег е! со11., Лпдс\\'.С11ст. Ιηΐ. Еб. Еид1., 26, 1167-1169 (1987), К.БскетеДидег е! со11., Аидете. Скет., 105, 1420 (1993).
Среди оснований семейства фосфазенов используют предпочтительно основания формулы
КЗ /
Я2—N \
К1 —Ν—Р—N—га
Ν—га / Я7 в которой радикалы К1-К7 являются одинаковыми или разными и представляют собой алкильные радикалы.
В предыдущих формулах алкильные радикалы содержат от 1 до 6 атомов углерода в неразветвленной или в разветвленной цепи.
Преимущественно, молярное отношение сильное органическое основание с рКа больше 20 или имидазолат натрия/четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина находится в интервале от 0,2 до 5, предпочтительно от 1 до 4.
Более конкретно, степень этерификации четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина находится в интервале от 50 до 100%, предпочтительно в интервале от 70 до 90%. Данная степень этерификации соответствует молярному проценту этерификации уроновых кислот гепарина.
Превращение деполимеризованной четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина в натриевую соль осуществляют обычно обработкой реакционной среды спиртовым раствором ацетата натрия, предпочтительно 10%-ным раствором ацетата натрия в метаноле (масса/объем), при температуре в интервале от 15 до 25°С. Массовый эквивалент добавляемого ацетата предпочтительно в три раза больше массы четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина, вводимой в реакцию деполимеризации.
Омыление обычно осуществляют при помощи гидроксида щелочного металла, такого как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид лития, в водной среде при температуре в интервале от 0 до 20°С, предпочтительно от 0 до 10°С. Обычно используют от 1 до 5 молярных эквивалентов гидроксида щелочного металла. Предпочтительно омыление осуществляют в присутствии 2-3 молярных эквивалентов гидроксида щелочного металла.
Конечный продукт, в случае необходимости, может быть очищен любым известным способом очистки деполимеризованных гепаринов, в частности способом, описанным в европейском патенте ЕР 0037319. Предпочтительно очищают при помощи пероксида водорода в водной среде при температуре от 10 до 50°С. Предпочтительно указанную операцию осуществляют в интервале от 20 до 40°С.
Четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина может быть получена согласно следующей реакционной схеме:
а) превращение гепарина в форме натриевой соли при помощи бензэтонийхлорида с получением гепарината бензэтония,
б) этерификация бензэтониевой соли, полученной перед этим, при помощи бензилхлорида и обработка спиртовым раствором ацетата натрия с получением натриевой соли сложного бензилового эфира гепарина,
в) превращение натриевой соли сложного бензилового эфира гепарина в четвертичную аммониевую соль, предпочтительно в соль бензэтония, цетилпиридиния или цетилтриметиламмония.
Реакцию стадии а) осуществляют в водной среде воздействием бензэтоний хлорида, взятого в избытке, на гепарин в форме натриевой соли при температуре, близкой к температуре в интервале от 15 до 25°С. Преимущественно, молярное отношение бензэтонийхлорид/гепарин в форме натриевой соли находится в интервале от 2 до 3 и более конкретно равно 2,5.
Используемый исходный гепарин в форме натриевой соли представляет собой предпочтительно свиной гепарин. Исходный гепарин может быть предварительно очищен с целью уменьшения процентного содержания в нем дерматансульфата согласно способу, описанному во французском патенте ЕК 2663639.
Этерификацию стадии б) осуществляют предпочтительно в среде хлорсодержащего органического растворителя (например, хлороформ, метиленхлорид) при температуре в интервале от 25 до 45°С, пред
- 2 005995 почтительно в интервале от 30 до 40°С. Сложный эфир в форме натриевой соли выделяют затем осаждением 10%-ным (масса/объем) раствором ацетата натрия в спирте, таком как метанол. Обычно используют от 1 до 1,2 объема спирта на один объем реакционной среды. Количество бензилхлорида и время реакции подобраны для получения степени этерификации в интервале от 50 до 100%, предпочтительно от 70 до 90%. Предпочтительно используют от 0,5 до 1,5 мас.ч. бензилхлорида на 1 мас.ч. бензэтониевой соли гепарина. Также предпочтительно время реакции находится в интервале от 10 до 35 ч.
Превращение одной соли в другую на стадии в) осуществляют при помощи хлорида четвертичного аммония, предпочтительно при помощи бензэтонийхлорида, цетилпиридинийхлорида или цетилтриметиламмоний-хлорида, в водной среде при температуре в интервале от 10 до 25°С. Преимущественно молярное отношение хлорид четвертичного аммония/натриевая соль сложного бензилового эфира гепарина находится в интервале от 2 до 3.
Смеси согласно изобретению в форме натриевой соли могут быть превращены в другую соль щелочного или щелочно-земельного металла. В случае необходимости, от одной соли к другой переходят, используя способ, описанный в американском патенте И8 4168377.
Смеси согласно изобретению нетоксичны и, таким образом, могут быть использованы в качестве лекарственных средств.
Смеси по настоящему изобретению могут быть использованы в качестве антитромботических препаратов. В частности, их используют для профилактики венозных тромбозов, осложнений, связанных с артериальным тромбозом, в частности в случае инфаркта миокарда. Их также используют при профилактике и лечении пролиферации гладких мышечных клеток, ангиогенеза и в качестве нейропротекторов атеросклероза и артериосклероза.
Настоящее изобретение касается также фармацевтических композиций, содержащих в качестве действующего начала смесь полисахаридов согласно изобретению, в случае необходимости, в сочетании с одним или несколькими инертными эксципиентами.
Фармацевтические композиции представляют собой, например, растворы, пригодные для подкожного или внутривенного инъецирования. Равным образом их используют для введения легочным путем (ингаляция).
Дозировка может варьировать в зависимости от возраста, веса и состояния здоровья пациента. Для взрослого она составляет обычно от 20 до 100 мг в день внутримышечно или подкожно. Следующие примеры иллюстрируют изобретение.
Пример А. Получение бензэтониевой соли сложного бензилового эфира гепарина.
Гепаринат бензэтония
К раствору 10 г гепарина в форме натриевой соли в 100 мл воды при температуре, близкой к 20°С, добавляют раствор 25 г хлорида бензэтония в 125 мл воды. Продукт фильтруют, промывают водой и сушат.
Сложный бензиловый эфир гепарина (натриевая соль)
К раствору 20 г гепарината бензэтония в 80 мл метиленхлорида добавляют 16 мл бензилхлорида. Раствор нагревают при температуре 30°С в течение 12 ч. Тогда добавляют 108 мл 10%-ного раствора ацетата натрия в метаноле, фильтруют, промывают метанолом и сушат. Таким образом получают 7,6 г сложного бензилового эфира гепарина в форме натриевой соли, степень этерификации которого равна 77%.
Сложный бензиловый эфир гепарина (бензэтониевая соль)
В колбу Эрленмейера А объемом 2 л вводят 36 г (0,0549 моль) сложного бензилового эфира гепарина (натриевая соль) и 540 мл дистиллированной воды. После гомогенизации при температуре около 20°С получают бледно-желтый раствор. При перемешивании на магнитной мешалке в колбе Эрленмейера В объемом 1 л готовят раствор 64,45 г (0,1438 моль) хлорида бензэтония в 450 мл воды. Раствор из колбы Эрленмейера В приблизительно за 35 мин при перемешивании приливают к раствору, находящемуся в колбе Эрленмейера А. Наблюдают образование обильного белого осадка. Колбу Эрленмейера В ополаскивают 200 мл дистиллированной воды и промывную воду вводят в колбу Эрленмейера А. Перемешивание прекращают и суспензию оставляют оседать в течение 12 ч. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют. К осевшему осадку (внешний вид кашицы) добавляют 560 мл воды и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (560 мл). С осевшим осадком два раза повторяют описанную операцию промывки приблизительно 560 мл дистиллированной воды. При последней операции промывки оставляют осадок в суспензии и фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Осадок затем промывают 4 раза 200 мл дистиллированной воды. Влажное белое твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 87,5 г бензэтониевой соли сложного бензилового эфира гепарина. Полученный выход составляет 94,9%.
Пример 1. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В колбу Эрленмейера А объемом 50 мл вводят 28 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 4 г (0,00238 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного как описано в примере А. После полного растворения добавляют 1,32 г
- 3 005995 (0,00948 моль) 1,5,7-триазабицикло[4.4.0]дец-5-ена. Перемешивают при температуре, близкой к 20°С, в течение 3 ч 30 мин. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 12 г ацетата натрия в 120 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение одного часа. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (62 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (49 мл). К осевшему осадку добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4. Полученный золотисто-желтый осадок промывают затем 2 раза 25 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 1,21 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 77,2%.
Омыление
В колбу Эрленмейера объемом 25 мл вводят 1,21 г (0,0018 моль) деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, и 11 мл воды. При перемешивании на магнитной мешалке вводят 0,18 мл (0,0018 моль) 30%-ного натрового щелока. После добавления смесь охлаждают до 4°С и перемешивают в течение 2 ч. Добавляют 1,43 г ЫаС1 и нейтрализуют раствор добавлением раствора 1 моль/л НС1 (14 мл). Смесь переливают в колбу Эрленмейера объемом 100 мл и добавляют 52 мл метанола. Наблюдают образование желтого осадка. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 12 ч при температуре, близкой к 20°С. Затем супернатант отбирают и удаляют (44 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 25 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (21 мл). К осевшему осадку добавляют 25 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Полученный светло-желтый осадок промывают затем 2 раза 10 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 0,66 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль). Полученный выход составляет 60%.
Очистка
В колбу Эрленмейера объемом 10 мл вводят 0,66 г неочищенного деполимеризованного гепарина, полученного перед этим, и 5,9 мл дистиллированной воды. Смесь поддерживают при 40°С при перемешивании на магнитной мешалке. Добавлением раствора 1 моль/л гидроксида натрия создают рН в интервале от 9 до 10 и добавляют 33 мкл 30%-ного водного раствора пероксида водорода. Приблизительно после 2 ч перемешивания добавляют 0,65 г хлорида натрия. Затем смесь нейтрализуют добавлением раствора 0,1 моль/л НС1. Затем раствор фильтруют и переливают в колбу Эрленмейера объемом 25 мл. Вливают 23,3 мл метанола. Наблюдают образование белого осадка. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 12 ч при температуре, близкой к 20°С. Затем отбирают и удаляют супернатант (5 мл). К осевшему осадку (внешний вид кашицы) добавляют 5 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (5 мл). К осевшему осадку добавляют 5 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Полученный белый осадок промывают затем 2 раза 5 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 0,51 г очищенной смеси полисахаридов (натриевая соль). Полученный выход составляет 77,2%.
Характеристики полученной смеси следующие:
- средняя молекулярная масса 1600 Да;
- активность анти-Ха 94 МЕ/мг;
- активность анти-11а <0,1 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а >100.
Пример 2. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В колбу Эрленмейера А объемом 100 мл вводят 70 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 10 г (0,00595 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного как описано в примере А. После полного растворения добавляют 1,7 мл (0,00587 моль) 2-трет-бутилимино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,3,2-диазафосфорина. При температуре, близкой к 20°С, позволяют реакции протекать приблизительно в течение 3 ч 30 мин. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 30 г ацетата натрия в 300 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (204 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 125 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение
- 4 005995 мин. Супернатант отбирают и удаляют (162 мл). К осевшему осадку добавляют 125 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем студенистый осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Полученный желтый студенистый осадок промывают затем 2 порциями метанола по 63 мл. Студенистое твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 3,34 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 85,3%.
Омыление
Омыляют 1,67 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу омыления, описанному в примере 1. Получают 0,94 г светложелтого порошка. Выход неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль) составляет 61%.
Очистка
Очищают 0,94 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу очистки, описанному в примере 1. Получают 0,71 г белого порошка. Выход составляет 75,5%.
Полученная очищенная смесь полисахаридов (натриевая соль) обладает следующими характеристиками:
- средняя молекулярная масса 2500 Да;
- активность анти-Ха 146,6 МЕ/мг;
- активность анти-11а 2,15 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а 68.
Пример 3. Деполимеризация и превращение в натриевую соль
В колбу Эрленмейера А объемом 50 мл вводят 28 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 4 г (0,00238 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного согласно примеру А. После полного растворения и охлаждения до 2°С добавляют 0,333 г (0,00239 моль) 1,5,7-триазабицикло[4.4.0]дец-5-ена. При температуре, близкой к 20°С, позволяют реакции протекать приблизительно в течение 3 ч 30 мин. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 12 г ацетата натрия в 120 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (90 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (61 мл). К осевшему осадку добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4. Полученный осадок промывают затем 2 раза 25 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 1,19 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Твердое вещество имеет интенсивную желтую окраску. Полученный выход составляет 75,9%.
Омыление
Омыляют 1,19 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу омыления, описанному в примере 1. Получают 0,78 г светложелтого порошка. Выход неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль) составляет 71,5%.
Очистка
Очищают 0,7 8 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу очистки, описанному в примере 1. Получают 0,58 г белого порошка. Выход составляет 72,5%.
Полученная очищенная смесь полисахаридов (натриевая соль) обладает следующими характеристиками:
- средняя молекулярная масса 2700 Да;
- активность анти-Ха 100,1 МЕ/мг;
- активность анти-Па 3,3 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а 27,3.
Пример 4. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В колбу Эрленмейера А объемом 50 мл вводят 28 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 4 г (0,00238 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного как описано в примере А. После полного растворения и при 2°С добавляют 0,6 мл (0,00222 моль) 2-трет-бутилимино-трис(диметиламино)фосфорана. При температуре, близкой к 0°С, позволяют реакции протекать приблизительно в течение 3 ч 30 мин. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 12 г ацетата натрия в 120 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к мета
- 5 005995 нольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (108 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтоватой кашицы) добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (60 мл). К осевшему осадку добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем желтовато-белый осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4.
Полученный осадок промывают затем 2 раза 25 мл метанола. Твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 1,22 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 77,8%.
Омыление
Омыляют 1,22 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, согласно протоколу омыления, описанному в примере 1. Получают 0,69 г очень светлого желтого порошка. Выход неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль) составляет 61,6%.
Очистка
Очищают 0,69 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль), полученного перед этим, согласно протоколу очистки, описанному в примере 1. Получают 0,67 г белого порошка. Выход составляет 97,1%.
Полученная очищенная смесь полисахаридов (натриевая соль) обладает следующими характеристиками:
- средняя молекулярная масса 2900 Да;
- активность анти-Ха 14 5,2 МЕ/мг;
- активность анти-11а 4,5 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а 32,6.
Пример 5. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В колбу А объемом 50 мл вводят 28 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 4 г (0,00238 моль) бензилгепарината (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль). После полного растворения и при 40°С добавляют 0,95 г (0,00949 моль) имидазолата натрия. При орошении дихлорметаном позволяют реакции протекать приблизительно в течение 4 ч. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 12 г ацетата натрия в 120 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч. Прозрачную часть оранжевого супернатанта отбирают и удаляют (88 мл). К осевшему осадку (внешний вид оранжевой кашицы) добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (51 мл). К осевшему осадку добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем оранжевый осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4. Полученный осадок промывают затем 2 раза 25 мл метанола. Твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 1,34 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 7 6,6%.
Омыление
Омыляют 1,2 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, согласно протоколу омыления, описанному в примере 1. Получают 0,63 г бежевого порошка. Выход неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль) составляет 52,5%.
Очистка
Очищают 0,63 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу очистки, описанному в примере 1. Получают 0,42 г чистого бежевого порошка. Выход составляет 66,7%.
Полученная очищенная смесь полисахаридов (натриевая соль) обладает следующими характеристиками:
- средняя молекулярная масса 2250 Да;
- активность анти-Ха 134,5 МЕ/мг;
- активность анти-11а 1,5 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а 90,5.
Пример 6. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В колбу Эрленмейера А объемом 50 мл вводят 28 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 4 г (0,00238 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного как описано в примере А. После полного растворения добавляют 1,33 г (0,00956 моль) 1,5,7-триазабицикло[4.4.0]дец-5-ена. Перемешивают при температуре, близкой к 20°С, в
- 6 005995 течение 3 ч 30 мин. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 12 г ацетата натрия в 120 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке реакционную смесь, находящуюся в колбе Эрленмейера А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (56 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 60 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 30 мин. Супернатант отбирают и удаляют (70 мл). К осевшему осадку добавляют 50 мл метанола и перемешивают в течение 15 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4. Полученный золотисто-желтый осадок промывают затем 2 раза 50 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 0,92 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 64%.
Омыление
В колбу Эрленмейера объемом 25 мл вводят 0,92 г (0,0014 моль) деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, и 17,5 мл воды. При перемешивании на магнитной мешалке вводят 0,38 мл (0,0037 9 моль) 30%-ного натрового щелока. После добавления смесь поддерживают при температуре, близкой к 20°С, и перемешивают в течение 5 ч. Добавляют 1,8 г №С1 и нейтрализуют раствор добавлением концентрированной НС1 (конечный объем раствора около 18 мл). Смесь переливают в колбу Эрленмейера объемом 100 мл и добавляют 46 мл метанола. Наблюдают образование желтого осадка. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 12 ч при температуре, близкой к 20°С. Затем отбирают и удаляют супернатант (52 мл). К осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 25 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 1 ч. Супернатант отбирают и удаляют (27 мл). К осевшему осадку добавляют 25 мл метанола и перемешивают приблизительно в течение 1 ч. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №4. Полученный осадок промывают затем 2 раза 10 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 3 ч сушки получают 0,42 г неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль). Полученный выход составляет 45,6 %.
Очистка
В колбу Эрленмейера объемом 10 мл вводят 0,42 г неочищенного деполимеризованного гепарина, полученного перед этим, и 3,8 мл дистиллированной воды. Смесь поддерживают при 38°С при перемешивании на магнитной мешалке. Добавлением раствора 0,1 моль/л гидроксида натрия, создают рН в интервале от 9 до 10 и добавляют 25 мкл 30%-ного водного раствора пероксида водорода. Приблизительно после 2 ч 30 мин перемешивания добавляют 0,5 г хлорида натрия. Затем смесь нейтрализуют добавлением раствора 0,1 моль/л НС1. Затем раствор фильтруют и переливают в колбу Эрленмейера объемом 25 мл. Вливают 11,3 мл метанола. Наблюдают образование белого осадка. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 12 ч при температуре, близкой к 20°С. Затем отбирают и удаляют супернатант (9,8 мл). К осевшему осадку (внешний вид кашицы) добавляют 5 мл метанола и перемешивают в течение 15 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 3 ч. Супернатант отбирают и удаляют (6,2 мл). К осевшему осадку добавляют 5 мл метанола и перемешивают в течение 20 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Полученный белый осадок промывают затем 2 раза 5 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После приблизительно 2 ч 20 мин сушки получают 0,39 г чистого деполимеризованного гепарина (натриевая соль). Полученный выход составляет 92,8%.
Характеристики деполимеризованного гепарина, полученного таким образом, следующие:
- средняя молекулярная масса 1950 Да;
- активность анти-Ха 115,6 МЕ/мг;
- активность анти-11а <2 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-11а >57.
Пример 7. Деполимеризация и превращение в натриевую соль.
В реактор А объемом 400 мл вводят 140 мл дихлорметана. При перемешивании медленно загружают 20 г (0,0119 моль) сложного бензилового эфира гепарина (степень этерификации: 77%, бензэтониевая соль), полученного как описано в примере А. После полного растворения методом Карла Фишера (Каг1 ЕЫ1сг) измеряют содержание воды в реакционной смеси. Полученная величина составляет 0,1% (воды). Добавляют 3,5 мл (0,0121 моль) 2-трет-бутилимино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,3,2диазафосфорина. При температуре, близкой к 25°С, позволяют реакции протекать приблизительно в течение 24 ч. В течение этого времени при 4°С в колбе Эрленмейера В готовят раствор 30 г ацетата натрия в 300 мл метанола. При перемешивании на магнитной мешалке половину реакционной смеси, находящейся в реакторе А, приливают к метанольному раствору ацетата натрия. Появляется квазипрозрачный студенистый желтый осадок. Перемешивание поддерживают в течение 1 ч и дают суспензии осесть в течение приблизительно 12 ч при 4°С. Прозрачную часть супернатанта отбирают и удаляют (220 мл). К
- 7 005995 осевшему осадку (внешний вид желтой кашицы) добавляют 220 мл метанола и перемешивают в течение 50 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 40 мин. Супернатант отбирают и удаляют (204 мл). К осевшему осадку добавляют 204 мл метанола и перемешивают в течение 40 мин. Затем студенистый осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла №3. Полученный желтый студенистый осадок промывают затем 2 порциями метанола по 100 мл. Студенистое твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После приблизительно 12 ч сушки получают 2,6 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль). Полученный выход составляет 7 0,6% (вычислен в расчете на обработанную половину реакционной смеси).
Омыление
Омыляют 2,6 г деполимеризованного гепарина (сложный бензиловый эфир, натриевая соль), полученного перед этим, согласно способу омыления, описанному в примере 1. Получают 1,48 г светложелтого порошка. Выход неочищенного деполимеризованного гепарина (натриевая соль) составляет 62,9%.
Очистка
В колбу Эрленмейера объемом 50 мл вводят 1,48 г неочищенного деполимеризованного гепарина, полученного перед этим, и 15 мл дистиллированной воды. Смесь поддерживают при 40°С при перемешивании на магнитной мешалке. Добавлением раствора 1 моль/л гидроксида натрия создают рН в интервале от 9 до 10. Раствор фильтруют через фильтрационную мембрану с размером пор 1 мкм. Затем добавляют 76 мкл 30%-ного водного раствора пероксида водорода. Приблизительно после 2 ч перемешивания добавляют 1,5 г хлорида натрия. Затем смесь нейтрализуют добавлением раствора 1 моль/л НС1. Раствор фильтруют через фильтрационную мембрану с размером пор 1 мкм. Вливают 38 мл метанола. Наблюдают образование белого осадка. Перемешивание прекращают и дают суспензии осесть в течение 1 ч при температуре, близкой к 20°С. Затем отбирают и удаляют супернатант (37 мл). К осевшему осадку добавляют 37 мл метанола и перемешивают в течение 45 мин. Дают осадку повторно осесть приблизительно в течение 45 мин. Супернатант отбирают и удаляют (34 мл). К осевшему осадку добавляют 34 мл метанола и перемешивают в течение 15 мин. Затем осадок в форме суспензии фильтруют через фильтр из пористого стекла № 3. Полученный белый осадок промывают затем 2 раза 25 мл метанола. Влажное твердое вещество отжимают и затем сушат при пониженном давлении (2,7 кПа) при температуре, близкой к 60°С. После 12 ч сушки получают 1,2 9 г чистого деполимеризованного гепарина (натриевая соль). Полученный выход составляет 87,2%.
Полученный очищенный деполимеризованный гепарин обладает следующими характеристиками:
- средняя молекулярная масса 22 50 Да
- активность анти-Ха 149,6 МЕ/мг;
- активность анти-Па 0,85 МЕ/мг;
- отношение активность анти-Ха/активность анти-Па 176.

Claims (20)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Смеси сульфатированных полисахаридов, имеющих общую структуру полисахаридов, входящих в состав гепарина и обладающих следующими характеристиками:
    они имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от 1500 до 3000 Да, активность анти-Ха в диапазоне от 100 до 150 МЕ/мг, активность анти-11а в диапазоне от 0 до 10 МЕ/мг и отношение активность анти-Ха/активность анти-Па больше 10, полисахариды, входящие в состав смесей, содержат от 2 до 26 сахаридных звеньев и содержат на одном из их концов звено 2-О-сульфата 4,5-ненасыщенной глюкуроновой кислоты, в форме соли щелочного или щелочно-земельного металла.
  2. 2. Смеси по п. 1, отличающиеся тем, что активность анти-Ха находится в диапазоне от 125 до 150 МЕ/мг.
  3. 3. Смеси по п.1 или 2, отличающиеся тем, что активность анти-Ха находится в диапазоне от 140 до 150 МЕ/мг и средняя молекулярная масса находится в диапазоне от 2000 до 3000 Да.
  4. 4. Смеси по любому из пп.1-3 в форме соли натрия, калия, кальция или магния.
  5. 5. Смеси по любому из пп.1-4, имеющие активность анти-Па в диапазоне от 0 до 5 МЕ/мг.
  6. 6. Смеси по любому из пп. 1-5, имеющие отношение активность анти-Ха/активность анти-Па больше 25.
  7. 7. Способ получения смесей по п.1, отличающийся тем, что четвертичную аммониевую соль сложного бензилового эфира гепарина деполимеризуют в органической среде при помощи сильного органического основания с рКа>20 или имидазолата натрия, превращают деполимеризованную четвертичную аммониевую соль сложного бензилового эфира гепарина в натриевую соль, омыляют сложный эфир и, в случае необходимости, очищают продукт.
  8. 8. Способ по п.7, для которого четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина представляет собой соль бензэтония, цетилпиридиния или цетилтриметиламмония.
  9. 9. Способ по п.7, для которого сильное органическое основание с рКа>20 выбрано среди 1,5,7триазабицикло[4.4.0]дец-5-ена, 2-трет-бутилимино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,3,2-диазафос- 8 005995 форина, оснований семейства гуанидина и фосфазенов.
  10. 10. Способ по п.9, для которого основания семейства гуанидинов представляют собой основания формулы
    Р4 КЗ в которой К.1 обозначает водород или алкил, К2, КЗ, К4 и К5, одинаковые или разные, обозначают алкильный радикал, при этом алкильные радикалы содержат от 1 до 6 атомов углерода в неразветвленной или в разветвленной цепи.
  11. 11. Способ по п.10, для которого К1 обозначает водород и К2, КЗ, К4 и К5 представляют собой метильные радикалы.
  12. 12. Способ по п.9, для которого основания семейства фосфазенов представляют собой основания формулы
    КЗ
    К2—ί/ *4 —Ν=Ρ—N—Н5
    Ν—Кб /
    в которой радикалы К1-К7 являются одинаковыми или разными и представляют собой алкильные радикалы, содержащие от 1 до 6 атомов углерода в неразветвленной или в разветвленной цепи.
  13. 13. Способ по одному из пп.7-12, для которого молярное отношение сильное органическое основание с рКа больше 20 или имидазолат натрия/четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина находится в интервале от 0,2 до 5.
  14. 14. Способ по одному из пп.7-13, для которого четвертичная аммониевая соль сложного бензилового эфира гепарина имеет степень этерификации в интервале от 50 до 100%.
  15. 15. Способ по одному из пп.7-14, для которого превращение четвертичной аммониевой соли сложного бензилового эфира гепарина в натриевую соль осуществляется обработкой реакционной среды спиртовым раствором ацетата натрия.
  16. 16. Способ по одному из пп.7-15, для которого омыление осуществляется при помощи гидроксида щелочного металла.
  17. 17. Способ по одному из пп.7-16, для которого очистка осуществляется при помощи пероксида водорода.
  18. 18. Смеси, такие как определенные в любом из пп.1-6, в качестве лекарственных средств.
  19. 19. Смеси, такие как определенные в любом из пп.1-6, в качестве антитромботических лекарственных средств.
  20. 20. Фармацевтические композиции, содержащие в качестве действующего начала смесь по одному из пп.1-6.
EA200300178A 2000-07-21 2001-07-18 Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие EA005995B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0009572A FR2811992B1 (fr) 2000-07-21 2000-07-21 Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
PCT/FR2001/002332 WO2002008295A1 (fr) 2000-07-21 2001-07-18 Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200300178A1 EA200300178A1 (ru) 2003-06-26
EA005995B1 true EA005995B1 (ru) 2005-08-25

Family

ID=8852768

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200300178A EA005995B1 (ru) 2000-07-21 2001-07-18 Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие

Country Status (36)

Country Link
EP (1) EP1307491B2 (ru)
JP (1) JP5279160B2 (ru)
KR (1) KR100853585B1 (ru)
CN (1) CN1230449C (ru)
AP (1) AP1703A (ru)
AR (1) AR029865A1 (ru)
AT (1) ATE470679T1 (ru)
AU (2) AU2001277602B2 (ru)
BR (1) BR0112612B1 (ru)
CA (1) CA2416673C (ru)
CL (1) CL2004001154A1 (ru)
CY (1) CY1110774T1 (ru)
DE (1) DE60142340D1 (ru)
DK (1) DK1307491T3 (ru)
DZ (1) DZ3411A1 (ru)
EA (1) EA005995B1 (ru)
EC (1) ECSP034442A (ru)
ES (1) ES2347134T5 (ru)
FR (1) FR2811992B1 (ru)
HK (1) HK1059273A1 (ru)
HR (1) HRP20030019A2 (ru)
HU (1) HUP0300755A3 (ru)
IL (2) IL153922A0 (ru)
MA (1) MA26928A1 (ru)
MX (1) MXPA03000579A (ru)
NO (1) NO20030296L (ru)
NZ (1) NZ524028A (ru)
OA (1) OA12340A (ru)
PL (1) PL202471B1 (ru)
PT (1) PT1307491E (ru)
SI (1) SI1307491T1 (ru)
TW (1) TWI307278B (ru)
UA (1) UA74836C2 (ru)
WO (1) WO2002008295A1 (ru)
YU (1) YU2903A (ru)
ZA (1) ZA200300898B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2708327C2 (ru) * 2015-06-26 2019-12-05 Контипро А.С. Производные сульфатированных полисахаридов, их способ получения, модификация и применение

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6969705B2 (en) 2000-07-21 2005-11-29 Aventis Pharma S.A. Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
DE60218642T2 (de) * 2002-06-20 2007-11-29 Chemi S.P.A., Cinisello Balsamo Verfahren zur Herstellung von Heparinestern
FR2845686B1 (fr) * 2002-10-10 2013-08-30 Aventis Pharma Sa Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
AR041555A1 (es) 2002-10-10 2005-05-18 Aventis Pharma Sa Mezclas de polisacaridos derivados de heparina, su preparacion y las composiciones farmaceuticas que las contienen
US20040171819A1 (en) 2002-10-10 2004-09-02 Aventis Pharma S.A. Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2857971B1 (fr) * 2003-07-24 2005-08-26 Aventis Pharma Sa Melanges d'oligosaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
US7956046B2 (en) * 2003-07-24 2011-06-07 Aventis Pharma S.A. Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
DE102004059134B4 (de) 2004-12-08 2011-12-15 Siemens Ag Expansionsvorrichtung für ein Röntgengerät und Röntgenstrahler
CA2652205A1 (en) * 2006-05-25 2007-12-06 Mallik Sundaram Low molecular weight heparin composition and uses thereof
CN101824099B (zh) * 2010-02-12 2011-11-30 淮安麦德森化学有限公司 一种粗品肝素钠的纯化方法
CN101824446B (zh) * 2010-02-24 2012-12-12 淮安麦德森化学有限公司 反向沉淀生产硫酸软骨素的方法
EP2399592A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in hip replacement surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings
EP2399590A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient undergoing major orthopaedic surgery
EP2399591A1 (en) 2010-06-25 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the extended prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient having undergone hip fracture surgery
EP2399593A1 (en) 2010-06-28 2011-12-28 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in orthopaedic surgery with improved benefit-risk profile
CN102399379B (zh) * 2010-09-09 2016-08-31 上海喜恩医药科技发展有限公司 一种肝素衍生的多糖混合物及其制备方法和药物组合物
CN103209997B (zh) * 2010-09-14 2016-03-16 国立大学法人宫崎大学 高纯度肝素及其制备方法
WO2012055843A1 (en) 2010-10-28 2012-05-03 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for the prevention of major venous thromboembolism in a patient undergoing major abdominal surgery
EP2446891A1 (en) 2010-10-28 2012-05-02 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in major abdominal surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings
EP2548561A1 (en) 2011-07-22 2013-01-23 Aventis Pharma S.A. Semuloparin for improving the survival of patients with locally advanced cancer
ES2445494B1 (es) * 2012-08-02 2015-03-06 Rovi Lab Farmaceut Sa Procedimiento de obtención de heparinas de bajo y muy bajo peso molecular
CN103175925B (zh) * 2013-03-20 2014-12-03 山东辰中生物制药有限公司 依诺肝素钠生产过程中肝素苄基酯的酯化率的检测方法
FR3016632A1 (fr) * 2014-01-21 2015-07-24 IFP Energies Nouvelles Procede de transformation de polysaccharides en molecules oxygenees en presence de superbases organiques neutres

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2478646A2 (fr) * 1980-03-20 1981-09-25 Choay Sa Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir
IL61201A (en) * 1979-10-05 1984-09-30 Choay Sa Oligosaccharides having no more than 8 saccharide moieties,their obtention from heparin and pharmaceutical compositions containing them
FR2482611B1 (fr) * 1980-05-14 1986-03-07 Pharmindustrie Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments
US4916219A (en) * 1985-03-28 1990-04-10 University Of Iowa Research Foundation Oligosaccharide heparin fragments as inhibitors of complement cascade
EP0337327A1 (en) * 1988-04-09 1989-10-18 Bioiberica, S.A. Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin
ES2077533B1 (es) * 1994-02-28 1996-07-01 Bioiberica Procedimiento de obtencion de fracciones de oligosacaridos por despolimerizacion quimica de heparina.
JP4897991B2 (ja) * 1999-07-23 2012-03-14 ラボラトリオス ファルマセウティコス ロビ ソシエダッド アノニマ 超低分子量ヘパリン組成物
ES2161615B1 (es) * 1999-07-23 2003-03-16 Rovi Lab Farmaceut Sa Composiciones de heparinas de muy bajo peso molecular.

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2708327C2 (ru) * 2015-06-26 2019-12-05 Контипро А.С. Производные сульфатированных полисахаридов, их способ получения, модификация и применение

Also Published As

Publication number Publication date
BR0112612B1 (pt) 2011-07-12
FR2811992B1 (fr) 2003-07-04
ES2347134T3 (es) 2010-10-26
KR20030040364A (ko) 2003-05-22
CN1447820A (zh) 2003-10-08
FR2811992A1 (fr) 2002-01-25
CA2416673C (fr) 2011-06-14
UA74836C2 (en) 2006-02-15
EP1307491A1 (fr) 2003-05-07
PL202471B1 (pl) 2009-06-30
MXPA03000579A (es) 2003-06-06
JP2004504451A (ja) 2004-02-12
AR029865A1 (es) 2003-07-16
CY1110774T1 (el) 2015-06-10
HUP0300755A2 (hu) 2003-12-29
AU7760201A (en) 2002-02-05
AP2003002744A0 (en) 2003-03-31
WO2002008295A1 (fr) 2002-01-31
KR100853585B1 (ko) 2008-08-21
CN1230449C (zh) 2005-12-07
ATE470679T1 (de) 2010-06-15
PL365561A1 (en) 2005-01-10
DK1307491T3 (da) 2010-10-11
PT1307491E (pt) 2010-09-10
TWI307278B (en) 2009-03-11
ECSP034442A (es) 2003-03-10
OA12340A (fr) 2006-05-15
DE60142340D1 (de) 2010-07-22
ES2347134T5 (es) 2014-06-24
BR0112612A (pt) 2003-07-29
CA2416673A1 (fr) 2002-01-31
MA26928A1 (fr) 2004-12-20
IL153922A0 (en) 2003-07-31
EA200300178A1 (ru) 2003-06-26
NO20030296D0 (no) 2003-01-20
HK1059273A1 (en) 2004-06-25
YU2903A (sh) 2006-03-03
HUP0300755A3 (en) 2004-03-01
SI1307491T1 (sl) 2010-10-29
JP5279160B2 (ja) 2013-09-04
EP1307491B1 (fr) 2010-06-09
CL2004001154A1 (es) 2005-05-27
IL153922A (en) 2010-05-17
EP1307491B2 (fr) 2014-05-07
NO20030296L (no) 2003-01-20
ZA200300898B (en) 2004-04-30
AP1703A (en) 2007-02-26
DZ3411A1 (fr) 2002-01-31
NZ524028A (en) 2004-12-24
AU2001277602B2 (en) 2007-07-19
HRP20030019A2 (en) 2005-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA005995B1 (ru) Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие
JP5389140B2 (ja) ヘパリン誘導多糖類混合物、その製造およびそれを含有する医薬組成物
US7812007B2 (en) Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5010063A (en) Heparin derivatives and process for their preparation
US20110212915A1 (en) Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
AU2004259111B2 (en) Heparin-derived oligosaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing said mixtures
KR101104107B1 (ko) 헤파린으로부터 유도된 다당류의 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약제학적 조성물
NZ537411A (en) Heparin-derived polysaccharide mixtures and preparation method

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU