EA005200B1

EA005200B1 - Новые соединения карбамат и тиокарбамат подофиллотоксина, способ их получения и содержащие их фармацевтические композиции

Info

Publication number: EA005200B1
Application number: EA200300029A
Authority: EA
Inventors: Клод Моннере; Эмманюэль Бертунеск; Филипп Мересс; Ганем Атасси; Алан Пьер; Джон Хикман; Брюно Пфеффер; Пьер Ренар
Original assignee: Ле Лаборатуар Сервье
Priority date: 2000-06-20
Filing date: 2001-06-19
Publication date: 2004-12-30
Also published as: TR200400592T4; KR100513575B1; US20040101574A1; BR0111854A; JP3909017B2; SK682003A3; ATE261975T1; EP1292597B1; CA2413515A1; AR028961A1; HK1055424A1; WO2001098307A1; HUP0301612A3; US6878746B2; DE60102378D1; ES2217159T3; DK1292597T3; EA200300029A1; NO20026004D0; KR20030025246A

Abstract

Соединения формулы (I)в которой Rпредставляет собой группу, выбираемую из водорода, алкила, арила, арилалкила, гетероарила, гетероарилалкила, алкоксикарбонила, арилоксикарбонила, арилалкоксикарбонила, гетероциклоалкоксикарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, арилалкилсульфонила и фосфоно,Rпредставляет собой атом кислорода или серы,Rпредставляет собой атом водорода или алкильную, циклоалкильную или арилалкильную группу,Х представляет собой линейную или разветвленную (С-С)алкиленовую группу,Rпредставляет собой группу, выбираемую из амино, необязательно замещенной одной или двумя группами, группу формулы -N(R)-X-OR, в которой R, Xи Rимеют значения, указанные в описании, группу формулы -N(R)-X-NRR, в которой R, X, Rи Rимеют значения, указанные в описании, гидрокси, алкокси, арилокси, группу формулы -O-X-OR, в которой Rи Xимеют значения, указанные в описании, группу формулы -O-X-NRR, в которой R, Rи Xимеют значения, указанные в описании,их изомеры, а также их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием. Лекарственные препараты.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям карбамату и тиокарбамату подофиллотоксина, к способу их получения и к содержащим их фармацевтическим композициям.

Соединения по изобретению представляют собой производные подофиллотоксина, природного лигнана, известного благодаря его применению при лечении рака. Другие синтетические производные, такие как этопозид и тенипозид, в настоящее время применяются в качестве химиотерапевтических агентов при лечении, в особенности, мелкоклеточного рака легких. Эти различные соединения действуют, ингибируя каталитическую активность топоизомеразы II.

Были осуществлены различные модификации этих соединений, такие как модификации, описанные в патентных заявках ΙΡ 948782, XV О 97/13776 и И8 3,634,459. Однако требования, предъявляемые к противораковым терапевтическим средствам, вызывают необходимость постоянного развития новых противоопухолевых и цитотоксических агентов с целью получения лекарственных препаратов, которые одновременно являются более активными, более растворимыми и лучше переносятся. Дополнительно к тому факту, что эти соединения новы, они имеют неожиданную активность ίη νίΐτο и ίη νίνο, которая превосходит наблюдавшуюся до этого. Соединения, открытые заявителем, соответственно, имеют свойства, которые делают их особенно полезными при лечении рака. Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)

Я₁ представляет собой атом водорода,

К₂ представляет собой атом кислорода,

К₃ представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкильную группу,

Х представляет собой линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкиленовую группу,

К4 представляет собой группу, выбираемую из амино, необязательно замещенного одной или двумя одинаковыми или различными группами, выбираемыми из линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, группу формулы -Ν(Κ₃)-Χ₁-ΟΚ₅, в которой

К₃ имеет вышеуказанные значения, Χ₁ представляет собой линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкиленовую группу и К₅ представляет собой атом водорода, группу формулы -Ο-Χ|-ΟΡ₅. в которой К₅и Χ₁ имеют вышеуказанные значения, их изомеры и их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, причем изомеры следует понимать как обозначающие энантиомеры и диастереоизомеры.

Дополнительно были изучены соединения формулы (I)

в которой й представляет собой группу, выбираемую из водорода, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, арила, арил-(С₁-С₆)алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, гетероарила, гетероарил-(С1-С6)алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкоксикарбонила, арилоксикарбонила, арил-(С₁-С₆)алкоксикарбонила, в котором остаток алкокси может быть линейным или разветвленным, гетероциклоалкоксикарбонила, линейного или разветвленного (С1-С6)алкилсульфонила, арилсульфонила, арил-(С1-С6)алкилсульфонила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, и фосфоно,

К₂ представляет собой атом кислорода или серы,

К₃ представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкильную группу, циклоалкильную группу или арил-(С1-С6) алкильную группу, в которой алкильный остаток может быть линейным или разветвленным,

Х представляет собой линейную или разветвленную (С1-С6)алкиленовую группу,

К4 представляет собой группу, выбираемую из амино, необязательно замещенного одной или двумя одинаковыми или различными группами, выбираемыми из линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, арила и арил-(С₁С6)алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, группу формулы -Ν(Κ₃)-Χ₁-ΟΚ₅, в которой К₃ имеет значения, указанные здесь ранее, Χ₁представляет собой линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкиленовую группу и К₅ представляет собой группу, выбираемую из водорода, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, арила и арил-(С1-С6алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, группу формулы -N(Κ₃)-Х₁-NΚ₆Κ7, в которой К₃ и Χ₁ имеют значения, указанные здесь ранее, и К₆ и Р-. которые могут быть одинаковыми или различными, каждый представляет собой группу, выбираемую из водорода, линейного или разветвленного (С1-С₆)алкила, арила и арил-(С1-С₆)алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, гидрокси, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкокси, арилокси, группу формулы -О-Х₁-ОК₅, в которой К₅и Х₁ имеют значения, указанные здесь ранее, и группу формулы -Ο-Χ₁-ΝΚ₆Β₇, в которой К.,·, К₇ и Х₁ имеют значения, указанные здесь ранее, их изомеры и их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, причем арил обозначает группу, выбираемую из фенила, бифенила, нафтила, дигидронафтила, тетрагидронафтила, инденила, инданила и бензолциклобутила, каждая их этих групп необязательно имеет один или более одинаковых или различных заместителей, выбираемых из галогена, гидрокси, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, линейного или разветвленного (С1-С6)алкокси, циано, нитро, амино, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкиламино, ди-(С₁С₆)алкиламино, в которых каждый алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, карбокси, линейным или разветвленным (С1-С6)алкоксикарбонилом, линейным или разветвленным (С₁-С₆)тригалоалкилом, линейным или разветвленным (С₁-С₆)алкилкарбонилокси, линейным или разветвленным (С₁-С₆)алкилкарбонилом, и аминокарбонилом, в котором аминоостаток необязательно замещен одной или двумя одинаковыми или различными линейной или разветвленной (С1-С6)алкильными группами, гетероарил обозначает ароматическую моноциклическую группу, ароматическую бициклическую группу или бициклическую группу, в которой одно или более колец является ароматическим, а другое кольцо частично гидрогенизовано, каждая из этих групп имеет от 5 до 12 членов кольца и содержит в системе колец 1, 2 или 3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы, возможно, чтобы упомянутый гетероарил был необязательно замещен заместителями, описанными для арильной группы, циклоалкил обозначает моноциклическую или бициклическую группу, которая является насыщенной или ненасыщенной, но не имеет ароматического характера, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода и необязательно замещена одной или более одинаковыми или различными группами, выбираемыми из галогена, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкила, линейного или разветвленного (С₁-С₆)тригалоалкила, гидрокси, амино, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкиламино и ди-(С₁-С₆)алкиламино, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, гетероциклооалкил обозначает группу, как указано выше, содержащую в системе колец 1 или 2 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы, упомянутый гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, такими, как описанные для циклоалкильной группы.

Изомеры следует понимать как обозначающие энантиомеры и диастереоизомеры.

Среди фармацевтически приемлемых солей можно упомянуть, без привнесения какихлибо ограничений, соляную кислоту, бромоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, уксусную кислоту, трифтороуксусную кислоту, молочную кислоту, пирувовую кислоту, малоновую кислоту, сукциновую кислоту, глутаровую кислоту, фумаровую кислоту, винно-каменную кислоту, малеиновую кислоту, лимонную кислоту, аскорбиновую кислоту, оксалиловую кислоту, метансульфоновую кислоту, камфорную кислоту, пр.

Среди фармацевтически приемлемых оснований можно упомянуть, без привнесения каких-либо ограничений, гидроксид натрия, гидроксид калия, триэтиламин, трет-бутиламин, пр.

Заместитель К₁ по изобретению имеет предпочтительное значение - атом водорода.

Заместитель К₂ по изобретению имеет предпочтительное значение - атом кислорода.

В особенно преимущественном осуществлении предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I), в которой Х представляет собой линейную (С₁С6)алкиленовую группу.

Заместители К₃ изобретению имеют предпочтительное значение - атом водорода и линейная или разветвленная (С₁-С₆)алкильная группа.

По преимущественному осуществлению изобретения, предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I), в которой К₄ представляет собой группу, выбираемую из амино, замещенной одной или двумя одинаковыми или различными линейными или разветвленными (С1-С6)алкильными группами, группы формулы -Ν(Κ₃)-Χ₁-ΟΚ₅, в которой К₃ представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С₁-С₆)алкильную группу и Х₁ и К₂ имеют значения, указанные для формулы (I), и группы формулы -О-Х₁-ОК₅, в которой Х₁и К₅ имеют значения, указанные для формулы (I).

В особенно преимущественном осуществлении предпочтительные соединения по изобретению представляют собой соединения формулы (I), в которой представляет собой группу -№(Кз)-Х1-ОВ.5 или -О-Х₁-ОК₅, в которых К₃представляет собой атом водорода, Х1 представляет собой линейную (С₂-С₄)алкиленовую цепочку, а К₅ представляет собой атом водорода.

Предпочтительными соединениями по изобретению являются (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат, (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 3-(диметиламино)пропилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 2-(2-гидроксиэтокси)этилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 2-[(2-гидроксиэтил)амино]этилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-д][1,3]диоксол-5-ил 2-(диметиламино)этилкарбамат.

Изомеры и аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием предпочтительных соединений образуют неотъемлемую часть изобретения.

Соединения формулы (I) получают способом, согласно которому в качестве исходного материала применяется соединение формулы (II)

которое подвергают при основных условиях либо воздействию соединения формулы (III) Κ'1-Χ (III), в которой

К'₁ представляет собой группу, выбираемую из линейного или разветвленного (С₁С6)алкила, арила, арил-(С1-С6)алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, гетероарила, гетероарил-(С₁-С₆) алкила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, линейного или разветвленного (С₁-С₆)алкилкарбонила, арилкарбонила, арил-(С1-С6)алкилкарбонила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, гетероциклоалкилкарбонила, линейного или разветвленного (С₁-С₆) алкилсульфонила, арилсульфонила и арил-(С1С6)алкилсульфонила, в котором алкильный остаток может быть линейным или разветвленным, и

Х представляет собой атом водорода или атом галогена, с получением соединений формулы (ΊΥ/Λ)

в которой К'₁ имеет значения, указанные здесь ранее, либо воздействию соединения формулы (Υ) о-ь (V), в которой

Ο представляет собой необязательную защитную группу для гидрокси-функций, а

Р представляет собой уходящую группу, традиционную в органической химии, с получением соединений формулы (IV/!})

ОС в которой Ο имеет значения, указанные здесь ранее, совокупность соединений формул (Ρν/Ά) и (IV/!}) составляет соединения формулы (IV)

в которой Т представляет собой группу К'₁или Ο, как указано здесь ранее, это соединение формулы (IV) обрабатывают в основной среде соединением формулы (VI) РР-О-С(К₂)С1 (VI), в которой

РР представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, а

К₂ представляет собой атом кислорода или атом серы, с получением соединений формулы (VII)

о-т в которой Т, РР и К₂ имеют значения, указанные здесь ранее, это соединение формулы (VII) подвергают реакции в основной среде с соединением формулы (VIII)

Κ4-Χ-ΝΗ-Κ3 (VIII), в котором К₄, К₃ и Х имеют значения, указанные для формулы (I), с получением, соответственно, соединений формулы (^а), частного случая соединений формулы (I), или соединений формулы (IX), по которой Т представляет собой группу К¹! или группу 6,

в которых К'₁, 6, К₂, К₃, К₄ и Х имеют значения, указанные здесь ранее, гидрокси-функцию этих соединений формулы (IX) депротектируют по традиционным способам органической химии с получением соединений формулы ^/Ь), частного случая соединений формулы (I)

в которой К₂, К₃, К₄ и X имеют значения, указанные для формулы (I), соединения (Ьа) и Н/Ь) составляют совокупность соединений по изобретению, эти соединения очищают, при необходимости, согласно традиционной методике очистки, их можно разделять согласно традиционной методике раз деления и их переводят, при желании, в их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.

При этом предметом настоящего изобретения является способ получения соединений формулы (I), который отличается тем, что в ка честве исходного продукта применяют соединение формулы (II)

которое подвергают при основных условиях воздействию соединения формулы (V) 6-Ь (V), в которой представляет собой традиционную защитную группу для гидрокси-функций, а

Ь представляет собой традиционную в органической химии уходящую группу, с получением соединений формулы (!У/В)

ОН

ОС в которой 6 имеет вышеуказанные значе ния, полученное соединение формулы (IV) обрабатывают в основной среде соединением формулы (VI)

РЬ-О-С(К)С1 (VI), в которой

РЬ представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, а

К₂ представляет собой атом кислорода, с получением соединений формулы (VII)

0-с в которой 6, РЬ и К₂ имеют вышеуказанные значения, полученное соединение формулы (VII) подвергают взаимодействию в основной среде с соединением формулы (VIII)

Κ₄-Χ-ΝΗ-Κ₃ (VIII), в котором К₄, К₃ и Х имеют значения, указанные для формулы (I), с получением соединения формулы (IX)

(IX) в которой С, Κ₂, Κ₃, К₄ и Х имеют выше указанные значения, гидрокси-функцию полученного соединения формулы (IX) депротектируют любым традиционным в органической химии способом с получением соединений формулы (I)

в которой Κ₁, Κ₂, Р₃. К₄ и Х имеют значения, указанные для формулы (I), полученные соединения очищают в случае необходимости согласно традиционной методике очистки, при желании, их можно разделять согласно традиционной методике разделения, и, при желании, переводят в их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.

Соединения формул (II), (V), (VI) и (VIII) либо являются коммерчески доступными, либо их получают по традиционным способам орга нического синтеза.

Соединения формулы (I) проявляют особенно ценные противоопухолевые свойства.

Они имеют отличную цитотоксичность ίη νίΐτο на линиях клеток из крысиных или человеческих опухолей и активны ίη νίνο. Характерные свойства этих соединений позволяют при менять их терапевтически в качестве противо опухолевых агентов.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим в качестве активного ингредиента по меньшей мере одно активное соединение формулы (I), его оптический изомер или аддитивную соль с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, отдельно или в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми, инертными, нетоксичными эксципиентами или носителями. Среди композиций по изобретению можно упомянуть более конкретно те, которые пригодны для орального, парентерального (внутривенного, внутримышечного или под кожного) на- или чрескожного, назального, ректального наязычного, глазного или респираторного применения, в особенности таблетки, драже, подъязычные таблетки, мягкие желатиновые капсулы, твердые желатиновые капсулы, суппозитории, кремы, мази, кожные гели, инъекционные или питьевые препараты, аэрозоли, глазные или назальные капли, пр. Применяемая дозировка варьируется согласно возрасту и весу пациента, пути приема, природе и сложности нарушения и назначению возможных одновременных лечений и колеблется от 0,5 до 500 мг в день за один или более приемов. Следующие примеры иллюстрируют изобретение, но ни коим образом его не ограничивают. Применяемые исходные материалы либо являются известными продуктами, либо их получают известными способами.

Получение 1. Карбонат (58,5а8,8а8,9В)-9(4-{[(бензоилокси)карбонил]окси}-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро [3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 4-нитрофенила.

Стадия 1. Карбонат 4-[(5В,5а8,8а8,98)-9гидрокси-6-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':

6.7] нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил]-2,6-диметоксифенил бензоила.

0,55 ммоль триэтиламина и 0,37 ммоль бензоилхлороформата последовательно добавляют к раствору 0,25 ммоль (58,5а8,8а8,98)-9-гидрокси-5-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-5,8,8а,9тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-6(5аН)-она в 10 мл безводного дихлорометана при 0°С и в атмосфере аргона. После перемешивания на протяжении 1 ч реакционную смесь промывают водой. Органическую фазу затем сушат, фильтруют и затем концентрируют при сниженном давлении. Хроматография на силикагеле (циклогексан/этилацетат: 60/40) дает возможность выделить ожидаемый продукт.

Стадия 2. Карбонат (58,5а8,8а8,9В)-9-(4{[(бензоилокси)карбонил] окси}-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':

6.7] нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 4-нитрофенила.

0,155 мл безводного пиридина добавляют к раствору 1,71 ммоль п-нитрофенилхлороформата в 5 мл безводного дихлорометана. В реакционной смеси образуется белый осадок. Затем по каплям в атмосфере аргона добавляют раствор 0,502 ммоль соединения, полученного на стадии 1, в 5 мл дихлорометана. Перемешивают на протяжении 45 мин при комнатной температуре, затем на реакционную смесь выливают 15 мл воды. Органическую фазу промывают водой, сушат над Мд8О₄, фильтруют и концентрируют при сниженном давлении. Хроматография на силикагеле (циклогексан/этилацетат: 4/1) дает возможность выделить ожидаемый продукт.

Точка плавления=125-130°С

Пример 1. (58,5а8,8а8',9В)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гекса гидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат.

Стадия 1. Карбонат 4-[(5К,5а8,8а8,98)-9({[ [2-(диметиламино)этил](метил)амино] карбонил}окси)-6-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро [3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил]-2,6-диметоксифенилбензоил.

0,228 ммоль Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина и 0,228 ммоль триэтиламина последовательно добавляют к раствору 0,171 ммоль соединения по получению 1 в 5 мл безводного дихлорометана при комнатной температуре и в атмосфере аргона. После перемешивания на протяжении 1 ч реакционную смесь гидролизируют. Органическую фазу затем промывают водой, затем сушат над Мд8О₄, фильтруют и концентрируют при сниженном давлении. Хроматография на силикагеле (дихлорометан/метанол: 97/3) дает возможность выделить ожидаемый продукт.

Точка плавления=102-103°С

Стадия 2. (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат.

5% палладий-на-углероде (90,8 мг) добавляют к раствору 0,138 ммоль соединения, полученного на стадии 1, в 8 мл этилацетата. Реакционную смесь перемешивают в атмосфере водорода (атмосферное давление) на протяжении ч 45 мин, затем фильтруют через Се1йе для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют при сниженном давлении. Неочищенный продукт хроматографируют на силикагеле (дихлорометан/метанол: 96/4), выделяя ожидаемый продукт.

Точка плавления=184-186°С

Масс-спектр (Е8/М8): ш/х=529 [М+Н]⁺, 551 |М+№1|'

Пример 2. (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат.

Стадия 1. Карбонат 4-[(5К,5аК,8а8,98)-9({[ [2-(диметиламино)этил](метил)амино] карбонил}окси)-6-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил]-2,6-диметоксифенилбензоил.

0,184 ммоль Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина и 0,184 ммоль триэтиламина последовательно добавляют к раствору 0,141 ммоль соединения по получению 1 в 4 мл безводного дихлорометана. После перемешивания на протяжении ч 30 мин при комнатной температуре в атмосфере аргона в реакционную смесь добавляют 3 мл тетрагидрофурана и 1М раствор фторида тетрабутиламмония (0,285 ммоль) в тетрагидрофуране. После реакции на протяжении 2 ч добавляют 0,3 ммоль фторида тетрабутиламмония. Перемешивают на протяжении 3 ч 30 мин и реакционную смесь выливают на воду (15 мл) и разводят дихлорометаном (10 мл). Водную фазу экстрагируют дихлорометаном и объединенные органические фазы промывают водой и концентрированным водным раствором №С1, и затем сушат над Мд8О₄, фильтруют и концентрируют при сниженном давлении. Хроматография на силикагеле (дихлорометан/метанол: 97/3) дает возможность выделить ожидаемый продукт.

Масс-спектр (Ό№/ΝΗ₃): ш/х=663 [М+Н]⁺Стадия 2. (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат.

Продукт получают согласно способу на стадии 2 примера 1, используя в качестве субстрата соединение, полученное на стадии 1.

Масс-спектр (О1С/ХН₃): щ//=529 [М+Н]⁺Пример 3. (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 3-(диметиламино)пропилкарбамат.

Продукт получают согласно способу в примере 1, стадии 1 и 2, используя диметиламинопропиламин вместо Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина в качестве реагента на стадии 1.

[а]_с(СНС1₃)=-23°

Масс-спектр (П1С/ЫН₃): щ//=529 [М+Н]⁺Пример 4. (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(2-гидроксиэтокси)этилкарбамат.

Продукт получают согласно способу в примере 1, стадии 1 и 2, используя 2-аминоэтоксиэтанол вместо Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина в качестве реагента на стадии 1.

Масс-спектр (О1С/ХН₃): ш/х=683 [М+ХН₄]⁺Пример 5. (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[384':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-[(2-гидроксиэтил)амино]этилкарбамат.

Продукт получают согласно способу в примере 1, стадии 1 и 2, используя 2-аминоэтиламиноэтанол вместо Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина в качестве реагента на стадии 1.

Пример 6. (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-Гидрокси3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5ил 2-(диметиламино)этилкарбамат.

Продукт получают согласно способу в примере 1, стадии 1 и 2, используя диметиламиноэтиламино вместо Ν,Ν,Ν'-триметилэтилендиамина в качестве реагента на стадии 1.

Фармакологическое изучение соединений по изобретению

Пример 7. Активность ίη νίίτο.

Соединения по изобретению тестировали на различных линиях клеток человека и крыс: крысиная лейкемия Б1210.

эпидермоидная карцинома А-431, немелкоклеточная карцинома легких А549, мелкоклеточная карцинома легких Н69, карцинома толстой кишки НТ29, эпидермальная буккальная карцинома КВ -3-1.

Клетки культивируют в полной среде ΒΡΜΙ 1640, включающей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 50 ед./мл пенициллина, 50 мкг/мл стрептомицина и 10 мМ Нерек, рН 7,4. Клетки распределяли на микропластинках и подвергали действию цитотоксических соединений на протяжении четырех периодов деления, что составляет от 48 до 96 ч. Количество жизнеспособных клеток определяют затем при помощи колориметрического анализа, Тетразольного Анализа Микрокультур (1. Сагт1ейае1 и др., Сапсег Век.: 47, 936-942, (1987)). Результаты выражают в виде 1С₅₀, цитотоксической концентрации, которая ингибирует пролиферацию обрабатываемых клеток на 50%. В этих тестах соединение по примеру 6 имеет такие значения 1С₅₀:

Пример 6	1С₅₀ (мкМ)
Б1210	А-431	А549	Н69	НТ29	КВ-3-1
0,038	0,071	0,046	0,096	0,121	0,085

Пример 8. Действие на клеточный цикл.

Клетки Ь1210 инкубируют на протяжении 21 ч при 37°С в присутствии различных концентраций тестируемых соединений. Клетки затем фиксируют, используя 70% этанол (об.\об.), дважды промывают в ΡΒ8 и инкубируют 30 мин при 20°С в ΡΒ8, содержащем 100 мкг/мл РНКазы и 50 мкг/мл йодида пропидия. Результаты выражают в виде процентного соотношения клеток, которые накопили фазу С2+Μ через 21 ч, по сравнению с контролем (контроль: 20%). При концентрации 100 нМ соединение по примеру 6 индуцирует 86% накопление клеток в фазе Ο2+Μ через 21 ч.

Пример 9. Активность ίη νΐνο.

Противоопухолевая активность соединений при лейкемии Р388.

Линия Р388 (крысиная лейкемия) поставлялась Национальным Институтом Рака (Να1юпа1 Сапсег 1пк1йи1е) (Федерик, США). Опухолевые клетки (10 клеток) вводили на 0 день в перитониальную полость мышей ΒΌΡ1 женского пола (ЗГГа-С’гебо. Франция) весом от 18 до 20 г (группы по 6 животных). Продукты вводили внутривенно на 1 день. Противоопухолевую активность выражают в % Т/С:

Среднее время выживания обработанных животных %Т/С=----------------------------------------------х 100

Среднее время выживания контрольных мышей

Соединение по примеру 6 является активным против лейкемии Р388 и индуцирует Т/С в 203% при 6,25 мг/кг.

Противоопухолевая активность соединений при карциноме легких Льюиса (Ье^1к).

Карцинома Льюиса (ЬЬС) представляет собой плотную опухоль, которая появлялась спонтанно в легких мыши С57В1/6 и поддерживается последовательными трансплантациями фрагментов подкожным путем. ЬЬС получали от Отдела лечения рака Банка опухолей Национального Института Рака (Όίνίκίοη оГ Сапсег

Тгеа1теп1, Титог Верокйогу, Νηΐίοηηΐ Сапсег

1пк1йи1е), Федерик, ΜΌ, США. При получении от ИГа-Сгебо (Лион, Франция) мыши были возрастом от 4 до 6 недель и весили от 20 до 22 г в начале эксперимента.

На первый день эксперимента (Ό0) опухоли удаляли и разрезали на фрагменты по 30 мг приблизительно, которые сразу же вводили подкожным путем мышам Β6Ό2Ρ1. Мышей, которым были имплантированы фрагменты, затем случайным образом разделяли на обрабатываемые группы и контрольную группу (по 7 животных в группе). Параметр, применяемый для оценки противоопухолевой активности, представляет собой повышение времени выживания. Дополнительно, в конце эксперимента, на 90 день, подсчитывали количество выживших животных в каждой группе.

Продукты вводили согласно схеме, показанной ниже. Результаты выражали в % Т/С, подсчитанных, как в предыдущем тесте.

Продукт	Доза, мг/кг	Путь введения	Схема	Т/С%	Выжив- шие Ώ90
Пример 1	25	Внутривенно	Э 4, 8, 12	165	111
Пример 6	3,12	Внутривенно	ϋ 4, 8, 12	168	111

Пример 10. Фармацевтическая композиция: раствор для инъекций.

Соединение по примеру 10 мг

Дистиллированная вода для препаратов для инъекций 25 мл

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединения формулы (I) в которой В! представляет собой атом водорода, В2 представляет собой атом кислорода, В3 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,

Х представляет собой линейную или разветвленную (С1-С6)алкиленовую группу,

В4 представляет собой группу, выбираемую из амино, необязательно замещенного одной или двумя одинаковыми или различными группами, выбираемыми из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, группы формулы -Ν(Β₃)-Χι-ΟΒ₅, в которой В₃ имеет вышеуказанные значения, Χι представляет собой линейную или разветвленную (С1-С₆)алкиленовую группу и В₅ представляет собой атом водорода, группы формулы -О-Х₁-ОВ₅, в которой К₅и Х₁ имеют вышеуказанные значения, их изомеры и их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, причем изомеры следует понимать как обозначающие энантиомеры и диастереоизомеры.
2. Соединения формулы (I) по п.1, отличающиеся тем, что Х представляет собой линейную (С₂-С₄)алкиленовую группу, их изомеры, а также их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
3. Соединения формулы (I) по п.1, отличающиеся тем, что К₄ представляет собой группу -Ы(К₃)-Х₁-ОК₅ или -О-Х₁-ОК₅, в которых К₃представляет собой атом водорода, Х1 представляет собой линейную (С₂-С₄)алкиленовую цепочку, а К₅ представляет собой атом водорода, их изомеры, а также их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
4. Соединения формулы (I) по п.1, которые представляют собой (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':

6.7] нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил-2-(диметиламино)этил(метил)карбамат, (58,5а8,8аК,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4':

6.7] нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 2-(диметиламино)этил(метил)карбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 3-(диметиламино)пропилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 2-(2-гидроксиэтокси)этилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 2-[(2-гидроксиэтил)амино]этилкарбамат, (58,5а8,8а8,9К)-9-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-8-оксо-5,5а,6,8,8а,9-гексагидрофуро[3',4': 6,7]нафто[2,3-б][1,3]диоксол-5-ил 2-(диметиламино)этилкарбамат, и их изомеры, а также их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
5. Способ получения соединений формулы (I), отличающийся тем, что в качестве исходного продукта применяют соединение формулы (II) которое подвергают при основных условиях воздействию соединения формулы (V) σ-Ь (V), в которой С представляет собой традиционную защитную группу для гидроксифункций, а

I. представляет собой традиционную в ор ганической химии уходящую группу, с получением соединений формулы ^ν/Β) в которой С имеет вышеуказанные значения, полученное соединение формулы (IV) обрабатывают в основной среде соединением формулы (VI)

Рй-О-С(В2)С1 (VI), в которой Рй представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, а

В₂ представляет собой атом кислорода, с получением соединений формулы (VII) в которой С, Рй и В₂ имеют вышеуказанные значения, полученное соединение формулы (VII) подвергают взаимодействию в основной среде с соединением формулы (VIII)

Β4-Χ-ΝΗ-Β₃ (VIII), в котором В₄, В₃ и Х имеют значения, указанные для формулы (I), с получением соединения формулы (IX) о-с (IX) в которой С, В₂, В₃, К₄ и Х имеют вышеуказан ные значения, гидроксифункцию полученного соединения формулы (IX) депротектируют любым традиционным в органической химии способом с получением соединений формулы (I) в которой К_ь К₂, К₃, Кд и Х имеют значения, указанные для формулы (I), полученные соединения очищают в случае необходимости согласно традиционной методике очистки, при желании, их можно разделять согласно традиционной методике разделения, и, при желании, переводят в их аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
6. Фармацевтические композиции, включающие в качестве активного ингредиента по меньшей мере одно соединение по любому из пп.1-4, отдельно или в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми, инертными, нетоксичными эксципиентами или носителями.
7. Фармацевтические композиции по п.6, содержащие по меньшей мере один активный ингредиент по любому из пп.1-4, предназначенные для лечения рака.