DK169017B1 - Kombinationspræparat til fælles anvendelse ved behandling af thrombotiske og thromboemboliske sygdomsbilleder indeholdende prostacykliner, analoger heraf eller prostaglandiner (PC/PCA/PG) og thromboxanreceptorantagonister (TXAA), samt anvendelse af PC/PCA/PG og TXAA til fremstilling af et lægemiddel - Google Patents

Description

DK 169017 B1

Opfindelsen angår et kombinationspræparat til fælles anvendelse ved behandling af thrombotiske og thromboemboliske sygdomsbilleder med tilstande af forhøjet intravasal blodpladeaktive-ring og dermed forhøjet blodpladeaggregations- og blodpladead-5 hæsionstilbøjelighed såvel som forhøjet blodstørkningstilbøje-lighed, hvilket præparat indeholder et prostacyklin, en prost acyklinanal og eller en prostaglandin (PC/PCA/PG) og en thromboxanrecep torantagonist (ΤΧΑΆ).

Opfindelsen angår også anvendelsen af PC/PCA/PG i kombination 10 med en thromboxanreceptorantagonist til fremstilling af præparater til anvendelse ved thrombotiske og thromboemboliske sygdomsbilleder: profylakse og terapi af koronare hjertesygdomme, koronare thromboser, hjerteinfarkt, perifer arteriesygdom, diabetiske karforandringer, arterioschlerose og thrombose, 15 slagtilfælde, profylakse og terapi af iskæmiske angreb på centralnervesystemet, migræne, behandling af chok, inhibering af bronkokonstriktion og inhibering af mavesyresekretion. Yderligere anvendelsesmuligheder for kombinationen er cytopro-tektion af mave- og tarmslimhinde, cytoprotektion i lever, ny-20 re og i pankreas, sænkning af pulmonar vaskulær modstand og det pulmonare blodtryk, fremme af nyregennemblødning, anvendelse i stedet for heparin eller som hjælpestof ved dialyse, hæmof il trering, holdbargørelse af til lagring bestemt blodplasma, især af blodpladeprodukter, inhibering af fødselsveer, 25 behandling af svangerskabstoksikoser, forhøjelse af den cerebrale gennemblødning etc. Desuden kan kombinationspræparatet anvendes som antiallergikum og som antiproliferativt virksomt stof.

Kombinationen kan f .eks. også anvendes sammen med calciumanta-30 gonister, thromboxansyntetasehæmmende midler, typiske antikoa-guleringsmidler, såsom heparin, cumarin eller aspirin og tilsvarende virksomme stoffer, med phosphodiesterase-hæmmende stoffer, med angiotensin-converting-enzyme- (ACE)-inhibitorer, med vasodilaterende virksomme stoffer, især med /?-receptor-35 blokkere, antiflogistika, antipyretika og antiallergika etc.

DK 169017 B1 2

Det er allerede kendt, at der til behandling af akutte og kroniske thrombotiske og thromboemboliske sygdomme anvendes prostaglandin E1, prostacyklin og prostacyklinanaloger [brugsinformation for prostavasin® fra Fa. Sanol Schwarz GmbH; Mon-5 cada. S., Br. J. Pharmacol. 76/1, 3-31 (1982); Schillinger, E., T. Krais, G. Stock, New Drug Annual: Cardivascular Drugs, Raven Press, i tryk].

Ud over fordelene ved disse behandlingsformer, der består i en stærk hæmning af alle stimulatorer af blodpladeaggregationen, 10 er disse behandlingsformer begrænset af cardiovaskulære bivirkninger, især den udprægede blodtryks sænkning.

Også den i CH-A-637298 beskrevne kombination af aggregations-hæmmende stof, antioxidant og/eller thromboxan A2 - syntetasein-hibitor forårsager en så kraftig blodtrykssænkning, at den 15 endog betegnes som antihypertensivt middel til behandling af højt blodtryk.

Der er for TXAA i de hidtidige kliniske undersøgelser ikke blevet anført tilstrækkeligt bevis for virkningen af dette behandlingsprincip .

20 At komme til bedre antiaggregatorisk virksomme principper via en plasmaspejlhævning af det endogene prostacyklin i kombination med et TXAA [Chan, C-C., A. Ford-Hutchinson, Europ. J. of Pharmacol. 110, 323-328, (1985)3 må betragtes som utilstrækkeligt, især da en doserbarhed og i det hele taget en sikker og 25 reproducerbar hævning af det endogene prostacyklin ikke er mulig. Derudover har man ved endogent prostacyklin ikke muligheden, som ved anvendelse af syntetisk PC/PCA/PG, at skille pro-stacyklinets ønskede virkninger fra bivirkninger.

Det har nu overraskende vist sig, at de for PC/PCA/PG typiske 30 bivirkninger og den ikke tilstrækkelige virkning af TXAA undgås eller udlignes, når man anvender PC/PCA/PG og TXAA sammen ved behandlingen af de ovenfor nævnte sygdomsbilleder. Medens DK 169017 B1 3 den blodpladehæmmende antithrombotiske og antithrombogenetiske virkning hos begge klasser af virksomt stof gensidigt forstærkes, sker der en formindskelse af de cardiovaskulære bivirkninger af PC/PCA/PG på grund af den ved kombinationen mulige 5 mængdereduktion af de enkelte virksomme stoffer. Derved forstørres den terapeutiske bredde af de enkelte virksomme stoffer.

Der kan anvendes vægtmængder af prostacyklin/prostacyklinana-log/prostaglandin og af thromboxanreceptorantagonist, som ved 10 fælles anvendelse er meget nedsat i forhold til de hidtidigt anvendte nødvendige doseringer af de enkelte virksomme stoffer.

PC/PCA/PG og ΤΧΑΆ anvendes kombineret i en dosisenhed eller adskilt og samtidigt eller sekventielt i et vægtforhold fra i 15 det væsentlige ca. 1:1 til 1:10.000 (f.eks. i samme bærer, i en tablet eller også i en olieagtig opløsning såsom en benzyl-benzoat/ricinus-blanding).

Den sekventielle behandling skal tillægges særlig betydning, da man ved sådanne behandlinger, hvor der optræder eller kan 20 forventes en aftagen af PC/PCA/PG-virkningen (Tachyphylaxie, [Sinzinger, H., S. Reiter, Prostagl. Leukotr. and Medicine 13/3, 281-288 (1984)]), ved skiftevis op- og nedtrapningsbehandling med PC/PCA/PG og TXAA kan forhindre en sådan virkningsformindskelse .

25 Som forbindelser fra prostacyklin-/prostacyklinanalog- /prostagl andinrækken, der egner sig til anvendelse i kombinations-præparatet ifølge opfindelsen, kommer alle de stoffer på tale, som har bl odpi adeaggregat ionshæmmende egenskaber og f.eks. er beskrevet i: 30 R.C. Nickolson, M.H. Town og H. Vorbruggen, Med. Res. Rev. 5 (1985), B.I.R. Whittle og S. Moncada, Progress in Medicinal Chemistry 21, 236 (1984), P.A. Aristoff, Advances in Prosta- DK 169017 B1 4 glandin, Thromboxane and Leukotriene Research Vol. 14, 1985, side 309, B. Radiichel og H. Vorbruggen, Advances in Prostaglandin, Thromboxane and Leukotriene Research Vol. 14, 1985, side 263, 5 i de europæiske patentansøgninger med offentliggørelsesnumrene 0011591, 0055208, 0069692, 0086404, 0099538, 0119949 såvel som i DE offentliggørelsesskrift 34 08 699 og DE offentliggørelsesskrift 35 10 978.

F.eks. skal nævnes: 10 Prostacyklin PGI2 / 15-cyklopentyl-(j-pentanor-5 (E) -carbacylin (0N0-41 483; Prost. and Med. 10, 53 (1983), 5- { (E) - (IS, 5S, 7R) -7-hydroxy-6- [ (3S,4S) -3-hydroxy-4-methyl-no-na-1,6-diinyl]-bicyklo[3.3.0]-octan-3-yliden}-pentansyre (EP 15 nr. 0086404), (5E) - (16S) -13,14-didehydro-16,20-dimethyl-18,18,19,19-tetrade-hydro-2,3,4-trinor-l, 5-inter-m-phenylen-6a-carba-prostaglandin I2 (DE offentliggørelsesskrift nr. 3408699) , 57-{(E)-(IS,5S, 6R,7R)-7-hydroxy-6-[(3S,4RS)-3-hydroxy-4-me-20 thyl-l-octen-6-inyl] -bicyklo [3.3.0] -octan-3-yliden}-pentansyre (Iloprost, EP nr. 0011591), 7-{ (E) - (IS, 5S, 6S, 7R) -7-hydroxy-6- [ (3S, 4S) -3-hydroxy-4-methyl-nona-1, 6-diinyl]bicyklo [3.3.0] -octan-3-yliden} -5-oxa-heptan-syre (EP nr. 0099538), 25 (5Z, 13E, 9a, 11a, 15S) -2,3,4-trinor-inter-m-phenylen-6,9-epoxy- 11,15-dihydroxy-15-cyklohexyl-16,17,18,19,20-pentanor] -prosta-diensyre (C G 4305, Arzn. Forsch. 1983, 1240) såvel som det tilsvarende natriumsalt (C G 4203, Drugs Future 9, 494, (1984)), 30 j8-thia-imino-prostacyklin (Hoe 892, Prost. and Med. 10, 231 (1983)), I ----------- - - . _____ DK 169017 B1 5 9-methyl-carbacyklin (J. Org. Chem. 48, 534 (1983)), 5- {(E)-(IS,5S,6S,7R)-7-hydroxy-6-[(3S,4S)-3-hydroxy-4-methyl-nona-1,6-diinyl]-bicyklo[3.3.0]-octan-3-yliden}-3-oxa-pentan-syre (EP nr. 0119949), 5 5 -{(Z)-(1S,5S,6S,7R)-7-hydroxy-6-((3S,4S)-3-hydroxy-4-methyl- nona-1,6-diinyl] -bicyklo [3.3.0] -octan-3~yliden}-3-oxa-5-fluor-pentansyre (EP nr. 0099538), 7-oxo-16-methyl-18,19-didehydro-PGl2 (DE offentliggørelses skrift nr. 3 035 454), 10 7-oxo-PGI2 (DE offentliggørelsesskrift nr. 3 035 454), Prostaglandin E-^, 6- keto-prostaglandin E]_, (5Z, 13E) - (9R, HR, 15S) -9-chlor-15-cyklohexyl-ll, 15-dihydroxy- 16.17.18.19.20- pentanor-5,13-prostadiensyre (DE offentliggø-15 relsesskrift nr. 3 510 978), 175.20- dimethyl-trans-2,3-didehydro-PGE1 (0N0 1206, Drugs Future 7, 116 (1982)).

I stedet for de anførte prostansyrer kan deres fysiologisk forligelige salte med uorganiske eller organiske baser, som 20 f.eks. natriumhydroxid, kaliumhydroxid, tris-(hydroxymethyl)-aminomethan, glucamin, N-methylglucamin, morpholin, lys in, arginin, også anvendes.

Som thromboxanreceptorantagonister kommer alle forbindelser på tale, som har en tilstrækkelig affinitet til thromboxanrecep-25 toren og ingen eller i det anvendte dosisområde kun ubetydelig thromboxanagonistisk aktivitet, sådan som de f.eks. er beskrevet i: JP 5017-315; US 4472-586-A; US 4263-207; US 4394-515-A; DK 169017 B1 6 US 4282-365; BE-883-713; JP 7093-962; JP 0004-154-A; EP-43-292; EP--82-646-A; DE 3346-047-A; WO 8400-754-A; US 4474-804-A; DE 3401-986-A; DE 3127-343: BE-897-763-A; EP--74-861; AU 8425607-A; EP--78-668; DE 3339-019-A; EP-137-426-A og af N.H.

5 Wilson og R.L. Jones i Advances in Prostaglandin, Thromboxane and Leukotriene Research 14, 420-423 (1985) såvel som af K. Stegmeier et al. i: Thrombosis Research 35, 379-395 (1984).

F.eks. skal der nævnes: 4-[2-(benzensulfonamido)-ethyl]-phenoxyeddikesyre (BM 13 177) 10 [K. Stegmeier et al. i: Thrombosis Research 35, 379-395, 1984].

[Ια(Z) , 2/3,5a] - (±) -7- [5- [ [ (1,1-biphenyl) -4-yl]methoxy] -2- (4-morpholinyl)-3-oxocyklopentyl]-4-hepatonsyre (AH 23848) (Br.

J. Pharmac. (1985), 86, 259) 15 [1/3,2α (5Z) , 3a, 4/3] -7- [ [2- [ (phenylamino) carbonyl] hydrazino] - methyl] -7-oxabicyklo [2.2.1] hept-2-yl] -5-heptensyre (SQ 29.548) (Prostaglandins 29, 785 (1985)) 4- (4-chlorbenzensulfonylamino) -ethyl-benzen-eddikesyre (BM 13 505) (Intern. Conf. Leukotrienes and Prostanoids in Health and 20 Disease, Tel Aviv, Oct. 1985, side 10) 7-[3-[[[(phenylamino)carbonyl]hydrazonol]methyl]bicyklo[2.2.- 1] -hept-2-yl] -, [la, 2/3, (Z),3a,4a] (EP 045) og 7-{ (IS, 2S, 3S,-4R,) -3- [1- (3-phenylthioureidoimino) ethyl] -bicyklo [2.2.1] hep-tan-2-yl}-5-heptensyre (EP 092) [begge stoffer beskrevet af 25 R.A. Armstrong et al. i Br. J. Pharmacol. 84, 595-607, 1985].

Dibenzo [b, f] thiepin-3-methanol, 5,5-dioxid (L 640035) [C-C.

Chan i: Europ. J. Pharmacol. 110 (3), 323-328, 1985].

2,7(IH)-isoquinolindisulfonamid, N7-(3-chlorphenyl)-N2-[[7- I * ^---- DK 169017 B1 7 [ [ (3-chlorphenyl) amino] sulfonyl] -3,4-dihydro-2 (IH) -isoquinoli-nal]sulfonyl]-3,4-dihydro (SKF 88046) [B.M. Weichman et al. i: Prostaglandins Leukotrienes and Medicine 15, 167-175, 1984].

PC/PCA/PG anvendes i mængder, der ligger betydeligt under de 5 ellers til hæmningen af den intravasale blodpladeaggregation anvendte mængder.

Ved anvendelsen af Iloprost som PCA kan man ifølge den fore-liggende opfindelse som regel klare sig med 10 til 1000 μgl fortrinsvis med 50 til 250 μg per dag.

10 Applikationen kan f.eks. foregå enteralt eller parenteralt in-halativt eller også transdermalt eller lokalt.

Ved den intravenøse infusion af Iloprost behøves f.eks. mængder fra ca. 50 til ca. 150 μg per dag.

Ved den orale applikation anvendes ca. fra 125 til ca. 250 μg 15 per dag.

En dosisenhed af Iloprost indeholder ca. 100 μg per ml som stamopløsning til fortynding i sædvanlige infusionsbæreopløsninger til den intravenøse anvendelse.

Til den orale anvendelse indeholder en dosisenhed 25 til 50 20 μg, ved nøleformuleringer eller retardformuleringer 25 til 250 μg, som tablet, dragé, kapsel, pille, suspension eller opløsning, som på sædvanlig måde kan fremstilles med de i den gale-niske farmaci almindelige tilsætninger og bærestoffer. Til den lokale, topiske eller transdermale anvendelse kommer f.eks.

25 systemer som hudplastre eller suppositorier på tale.

Der kan i kombinationspræparaterne ifølge opfindelsen også anvendes biologisk ækvivalente mængder af andre prostacyklin-analoger eller prostaglandiner.

DK 169017 B1 8

Thromboxanreceptorantagonisterne anvendes i kombinationspræparaterne ifølge den foreliggende opfindelse i mængder, som i reglen ligger under de hidtil i undersøgelser med mennesker anvendte mængder [Riess, Η., E. Hiller, B. Reinhardt, C. Bråu-5 ning i; Thrombosis Research 35, 371-378, 1984] . Sædvanligvis er 100 - 2000 mg/dag, fortrinsvis 200 - 800 mg/dag, BM 13 177, eller 1 - 100 mg/dag, fortrinsvis 2-50 mg/dag, AH23848 eller SQ 29548 eller en biologisk ækvivalent mængde af en anden thromboxanreceptorantagonist tilstrækkelig.

10 TXAA kan f.eks. indgives enteralt eller parenteralt, inhala-tivt, men også transdermalt eller lokalt.

Til den foretrukne orale applikation kommer især tabletter, dragéer, kapsler, piller, suspensioner eller opløsninger på tale, som på sædvanlig måde kan fremstilles med de i den gale-15 niske farmaci sædvanlige tilsætninger og bærestoffer.

Til den lokale anvendelse kan der f.eks. anvendes transdermale systemer, såsom hudplastre.

En dosisenhed til den orale eller parenterale anvendelse indeholder ca. 50 - 300 mg, som nøleformulering 100 - 1000 mg BM 20 13 177/dag eller en biologisk ækvivalent mængde af en anden thromboxanreceptorantagonist.

Den fælles behandling med PCA og TXAA foregår, alt efter om det drejer sig om en akut, subakut eller en kronisk sygdoms-hændelse, over nogle dage til uger og måneder, hvor PCA og 25 TXAA indgives i en dosisenhed eller adskilt og samtidigt eller sekventielt.

De efterfølgende eksempler belyser den galeniske formulering: m i — DK 169017 Bl 9 EKSEMPEL 1

Sammensætning af en kombinationstablet.

% Mængde/tablet _M_ 5 1. Iloprost 0,01 0,05 (som opløsning i ethanol 50%) 2. BM 13 177 50,0 250,0 3. Lactose 34,99 174,95 4. Majsstivelse 10,0 50,0 10 5. Polyvinylpyrrolidon 2500 3,0 15,0 6 . Stsarinsvre_2,0_10,0_ 100 % 500,00 mg

Bestanddelene 3, 4 og 5 sigtes, blandes og granuleres sammen med opløsningen af 1. Efter tørring iblandes 2 og 6 efter hin-15 anden, og pressemassen udpresses til runde tabletter med en diameter på 11 mm.

EKSEMPEL 2

Sammensætning af en kombinationstablet.

% Mængde/tablet 20 _[mg]_ 1. Iloprost 0,02 0,05 (som opløsning i ethanol 50%) 2. SQ 29 458 4,0 10,0 3. Lactose 65,98 164,95 25 4. Majsstivelse 20,0 50,0 5. Polyvinylpyrrolidon 2500 6,0 15,0 6. Stearinsyre_4,0_10,0_ 100 % 250,00 mg

Bestanddelene 3, 4 og 5 sigtes, blandes og granuleres sammen 30 med opløsningen af 1. Efter tørring iblandes 2 og 6 efter hin- DK 169017 B1 10 anden, og pressemassen udpresses til runde tabletter med en diameter på 11 mm.

EKSEMPEL 3

Sammensætning af en kombinationstablet.

5 % Mængde/tablet _fmcrl 1. Iloprost 0,02 0,05 (som opløsning i ethanol 50%) 2. AH 23 848 1,0 2,5 10 3. Lactose 68,98 172,45 4. Majsstivelse 20,0 50,0 5. Polyvinylpyrrolidon 2500 6,0 15,0 6. Stearinsyre_4,0_10,0_ 100 % 250,00 mg 15 Bestanddelene 3, 4 og 5 sigtes, blandes og granuleres sammen med opløsningen af 1. Efter tørring iblandes 2 og 6 efter hinanden, og pressemassen udpresses til runde tabletter med en diameter på 11 mm.

EKSEMPEL 4 20 Sammensætning af en kombinationstablet.

% Mængde/tablet _Cxncrl 1. Iloprost-Na-salt 0,0104 0,052 (opløst i destilleret vand) (s 0,05 mg Iloprost) 25 2. BM 13 177 50,0 250,0 3. Lactose 34,99 174,95 4. Majsstivelse 10,0 50,0 5. Polyvinylpyrrolidon 2500 3,0 15,0 6. Stearinsyre_2,0_10,0_ 30 100 % 500,00 mg DK 169017 B1 11

Bestanddelene 3, 4 og 5 sigtes, blandes og granuleres sammen med opløsningen af 1. Efter tørring iblandes 2 og 6 efter hinanden, og pressemassen udpresses til runde tabletter med en diameter på 11 mm.

5 EKSEMPEL 5

Sammensætning af en kombinationstablet.

% Mængde/tablet _[mql 1. Iloprost 0,33 1,66 10 som inklusionsforbindelse (==0,05 mg Iloprost) med ex-, β- eller γ-cyklodextrin 3% (g/g) 2. BM 13 177 50,0 250,0 3. Mikrokrystallinsk cellulose 35,67 178,34 15 4. Majsstivelse 12,0 60,0 5 . Stearinsyre_2,0_10,0_ 100 % 500,00 mg

Receptbestanddelene med undtagelse af stearinsyren sigtes og blandes i 15 minutter. Stearinsyre (sigtet) tilsættes og blan-20 des yderligere 3 minutter med de øvrige receptbestanddele. Pressemassen udpresses til runde tabletter med en diameter på 11 mm.

FARMAKOLOGISKE UNDERSØGELSER

1. Thrombocytfunktion in vitro (Human-PRP) .

25 ---------------------------------------- BM 13 177 (i teksten BM) og Iloprost afprøves med hensyn til deres virkning på thrombocyt aggregat ionen og thrombo-cytformændringen (shape change) mod stimulatorerne U 46 619 (9,11-dideoxy,9a-llQ'-methanoepoxy--PGF2Q,, stabil TXA2-30 agonist) og ADP, og IC^Q-værdieme bestemmes. Derefter af prøves i flere uafhængige forsøg virkningen af en kombina- DK 169017 B1 12 tion af begge stoffer på aggregationen (U 46 619 og ADP) i forskellige koncentrationer; især afprøves kombinationen af lave doser og af doser, der ligger omkring IC50-værdierne for de to stoffer.

5 Metodik

Blodpladeaggregation og formændring måles som lysoptiske fænomener i stimulerede PRP-prøver (blodpladerigt plasma) . Således registreres formændringen som prøvens densitets-10 forøgelse ved blodpladernes omdannelse fra den diskoide hvileform til en sfærocytform med udvikling af pseudopo-dieagtige membrandannelser og vises på en skriver. Aggregationen registreres fotometrisk som densitetsformindskelse ved sammenklumpning og "udfældning" af blodpladeaggre-15 gater og vises på en skriver.

Resultater

Iloprost hæmmer koncentrationsafhængigt den af U 46 619 inducerede blodpladeaggregation og formændringen. IC50 for 20 aggregat ionshæmningen er 1,3 - 2,6 nM, og for formæn dringshæmningen er IC^Q 0,52 - 1,3 nM.

Den anden bølge af den af ADP inducerede aggregation hæmmes koncentrationsafhængigt med en IC50 på 0,26 - 0,65 nM.

BM 13 177 hæmmer koncentrationsafhængigt den af U 46 619 25 inducerede blodpladeaggregation og formændringen. IC50 er for aggregat ionen 1,65 - 6,6 μΜ og for formændringen 1,65 - 3,3 μΜ.

Den anden bølge af den ADP-inducerede aggregation hæmmes koncentrat ions afhængigt med en IC50 på 0,33 til 0,66 μΜ.

DK 169017 B1 13

Kombination af thromboxanreceptorantagonist og Iloprost

Ved kombinationen af BM 13 177 med Iloprost bliver den af U 46 619 inducerede blodpladeaggregation og blodpladeform-ændringen og den anden bølge af den af ADP-inducerede ag-5 gregation ved koncentrationer af begge virksomme stoffer, som ligger i tærskelområdet eller under tærskelområdet, stærkt hæmmet. Hæmningseffekterne af begge virksomme stoffer forstærkes derved (se tabel).

Tabel 10 Eksempel 1: Aggregation ved hjælp af 100 ng/ml U 46 619.

Virksomt stof Koncentration % Hæmning 1 BM 13 177 0,66 μΜ 16% 15 _ 2 Iloprost 0,1 ng/ml 2% 1+2 65% 20 Eksempel 2: Formændring ved hjælp af 50 ng/ml U 46 619.

Virksomt stof Koncentration % Hæmning 1 BM 13 177 0,66 μΜ 28% 25 ___ DK 169017 B1 14 2 Iloprost 0,1 ng/ml ingen hæmning 1+2 61% 5 Eksempel 3: 2. bølge af aggregation ved hjælp af 0,5 x 10-6M ADP.

Virksomt stof Koncentration % Hæmning 10 1 BM 13 177 0,165 μΜ ingen hæmning 2 Iloprost 0,1 ng/ml ingen hæmning 1+2 60% 15 _ 2. Intravasal thrombocytaggregation hos narkotiserede rotter.

Metodik 20 -------

Indflydelsen på den intravasale thrombocytaggregation undersøges på urethan-narkotiserede rotter.

Collagen (100 μg/kg i.v. bolus) frembringer transitoriske thrombocytopenier (en forbigående nedgang af blodpladekon-25 centrationen) , målt ved kontinuerlig blodprøve fra A. ca- rotis (50 μΐ/min) og thrombocytoptælling i en Technicon-Autocounter. Som mål for hæmningen af den intravasale blodpladeaggregation tjener ændringen af den collagenindu- DK 169017 B1 15 cerede thrombocytopeni (% nedgang) i sammenligning med begyndelsesværdien (= 2. collageninjektion) .

Resultater 5 Iloprost (0,1 - 0,33 - 1,0 Mg/kg/min) hæmmer dosisafhængigt den collageninducerede thrombocytopeni. BM 13 177 hæmmer thrombocytopenien i den laveste dosis (0,5 mg/kg/-min) med 27 + 6% (middelværdi ± standardafvigelse) , en virkning, der ikke kan forøges ved dosisforøgelse (1,0 -10 2,0 mg/kg/min) . Kombinationen af en tærskeldosis af Ilo prost (0,1 Mg/kg/min) med den laveste undersøgte dosis af BM 13 177 (0,5 mg/kg/min) giver en i forhold til enkeltindgivelserne signifikant {oc = 0,05; Lord-Test) stærkere inhibering på 45 + 2%.

15 3. Mesenterialarteriolethrombose hos narkotiserede marsvin.

Metodik

Hos narkotiserede marsvin præpareres en mesenterialslange 20 til vitalmikroskopi. Efter elektrisk læsion af en arterio le påføres topisk under kontrolbetingelser og efter stofpåføring ADP, indtil der findes en thrombogen dosis (ok-klusion på grund af bl odplade thrombus) .

Parameter: Forhøjelse af den thrombogene ADP-koncentration 25 mod begyndelsesværdi; intravenøs infusion af Iloprost, intravenøs injektion af BM 13 177.

Resultater

Hos elektrisk forud beskadigede mesenterialarterioler hos 30 narkotiserede marsvin forhøj er BM 13 177 (25 mg/kg intra- 16 DK 169017 B1 venøst) den til udløsning af okkluderende blodpladethrom-ber nødvendige ADP-koncentration signifikant med ca. faktoren 4.

Iloprost forhøj er i tærskeldosen på 0,1 ^g/kg/min intrave-5 nøst den thrombogene ADP-koncentration med faktoren 2,8.

Kombinationen af BM 13 177 (25 mg/kg intravenøst) efterfulgt af en intravenøs infusion af Iloprost (0,1 rø/kg/-min) forhøj er den thrombogene ADP-koncentration med faktoren 12.

10 I en forsøgsmodel for den arterielle blodpladeinducerede thrombose medfører kombinationen af TXA2-antagonisten BM 13 177 og prostacyklinanalogen Iloprost en forstærket an-tithrombogenetisk virkning.

4. Jugularvenethrombose hos narkotiserede rotter.

15 ----------------------------------------------

Metodik

Ved belastning af jugularvenen hos urethan-narkotiserede rotter med et til -15°C nedkølet metalstempel (200 g, 2 20 min) beskadiges karrene i forvejen. Den i løbet af 3 timer på dette sted voksende thrombe bestemmes kvantitivt (Hb-indhold bestemt ved fugtig vægt) ved bestemmelser af dens Hb-indhold (forskel mellem beskadiget og ubeskadiget karsegment) .

25 Infusionen af teststofferne begynder 15 minutter før be skadigelse af venen og fortsættes indtil forsøgets afslutning.

Resultater 30 Infusionen af Iloprost i en som enkeltindgivelse ikke sig nifikant virksom dosis (30 ng/kg/min intravenøst) i kombi- — r - __ ____ DK 169017 B1 17 nation med en ligeledes som monoterapi uvirksom dosis BM 13 177 (20 mg/kg intravenøs bolus + 50 ^g/kg/min intravenøst) giver en signifikant reducering af thrombernes HB-indhold til værdier hos ubeskadigede kontroldyr.

5 BM 13 177 som monoterapi er i jugularvenethrombosemodellen for rotter ikke antithrombotisk virksom. Kombinationen med en hæmodynamisk og antiaggregatorisk uvirksom dosis af Iloprost undertrykker thrombevæksten fuldstændigt.

5. Blodtryk hos spontant hypertone (SH)-rotter.

10 --------------------------------------------

Metodik

Hos vågne SH-rotter, som har fået implanteret et venekateter til indføring af stof og et arteriekateter til blod-15 tryksmåling, iagttages under infusion af prøvestofferne opførselen af blodtryk og hjertefrekvens.

Iloprost indføres ved infusion i en tærskeldosis på 0,3 /zg/kg/min (20% sænkning af det diastoliske blodtryk) sammen med en høj dosis af BM 13 177, 2 mg/kg/min (se blod-20 pladehæmning in vivo, på 27% hæmning ved 2 mg/kg intrave nøs infusion) i 20 minutter (n = 6 dyr).

Resultater

De af Iloprost bevirkede hæmodynamiske forandringer, blod-25 tryksfald og stigning af hjertefrekvensen, påvirkes kun ubetydeligt af BM 13 177.

Mens den maksimale blodtrykssænkning på grund af Iloprost ikke påvirkes af BM 13 177, forsvinder denne virkning hurtigere efter afslutning af infusionen ved kombinationsbe-30 handling.

Claims (12)

1. Kombinationspræparat til fælles anvendelse ved thromboti-ske og thromboemboliske sygdomsbilleder, kendetegnet ved, at det indeholder prostacyklin, en prostacyklinana-log eller en prostaglandin (PC/PCA/PG) og en thromboxanrecep- 10 torantagonist (TXAA).

2. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at PC/PCA/PG og TXAA foreligger i et vægtforhold fra 1:1 til 1:10.000.

3. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at

15 PC/PCA/PG og TXAA foreligger i adskilte dosisenheder.

4. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at PC/PCA/PG og TXAA foreligger sammen i en dosisenhed.

5. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at en PC/PCA/PG-dosisenhed indeholder 25 - 250 /*g Iloprost= 5-{(E)- 20 (1S,5S,6R,7R)-7-hydroxy-6-[(E) -(3S,4RS)-3-hydroxy-4-methyl-l-octen-6-inyl] -bicyklo [3,3,0] -octan-3-yliden}-pentansyre eller en biologisk ækvivalent mængde af en anden PC/PCA/PG.

6. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at en TXAA-dosisenhed indeholder 50 - 1000 mg BM 13 177 = 4-[2-(ben- 25 zensulfonamido) -ethyl] -phenoxyeddikesyre eller en biologisk ækvivalent mængde af en anden TXAA.

7. Anvendelse af PC/PCA/PG og TXAA til fremstilling af et lægemiddel til samtidig, adskilt eller tidsmæssigt trindelt brug ved behandling af thrombotiske og thromboemboliske sygdomsbil- DK 169017 B1 leder.

8. Anvendelse af PC/PCA/PG og TXAA i en dosisenhed til fremstilling af et præparat til brug ved behandling af thromboti-ske og thromboemboliske sygdomsbilleder.

9. Anvendelse ifølge krav 7 eller 8, kendetegnet ved, at PC/PCA/PG og TXAA foreligger i et vægtforhold fra 1:1 til 1:10.000.

10. Anvendelse af 25 - 250 /xg Iloprost=5-{(E) - (IS, 5S, 6R, 7R) - 7-hydroxy-6-[(E)-(3S,4RS)-3-hydroxy-4-methyl-l-octen-6-inyl]- 10 bicyclo[3.3.0]-octan-3-yliden}-pentansyre som PC/PCA/PG eller en biologisk ækvivalent mængde af en anden PC/PCA/PG til fremstilling af præparater ifølge krav 1.

11. Anvendelse af 50 - 1000 mg BM 13 177 = 4-[2-benzensulfon-amido) -ethyl] -phenoxyeddikesyre som TXAA eller en biologisk 15 ækvivalent mængde af en anden TXAA til fremstilling af præparater ifølge krav 1.

12. Anvendelse af PC/PCA/PG og TXAA til fremstilling af et lægemiddel til sekventiel brug til undgåelse af virkningsaftageisen af blodpladeaggregationshæmningen ved behandling af 20 thrombotiske og thromboemboliske sygdomsbilleder.