DK168292B1 - Analogifremgangsmåde til fremstilling af beta-carbolin-3-carboxylsyrederivater - Google Patents

Description

i DK 168292 B1

Opfindelsen angår en analogi fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte /J-carbolin-3-carboxylsyrederivater.

Disse hidtil ukendte forbindelser har værdifulde farmakologiske 5 egenskaber. Navnlig virker de på centralnervesystemet og er egnede til brug i psykopharmaceutiske præparater.

I beskrivelsen til dansk patent nr. 98.436 omtales en fremgangsmåde til fremstilling af methyl-/J-carbolin-3-carboxylat.

10 I beskrivelsen til canadisk patent nr. 786.351 omtales /J-carbolin- 3-carboxylsyreamidderivater, der er substitueret i 1-stillingen med en al kyl gruppe, som ikke indeholder mere end 5 carbonatomer, en tri-fluormethyl-, phenyl- eller benzylgruppe, såvel som to forbindelser, 15 der ikke har nogen substituent i 1-stillingen, nemlig /J-carbolin- 3-carbohydrazid og Ø-carbolin-3-carboxylsyreamid.

Der er nu blevet fremstillet hidtil ukendte /J-carbol in-3-carboxyl-syrederivater, som har vist sig, i modsætning til f.eks. hidtil 20 kendte, klassiske sedativer, såsom benzodiazepinerne chlordiazepoxid og diazepam, at hæmme aggression uden at bevirke forringet motorisk koordination. Med andre ord udviser forbindelserne ikke benzodiaze-pinernes sedative eller andre uønskede muskel afslappende egenskaber. Derfor er forbindelserne velegnede til brug som ikke-sedative, 25 anti-konvulsionsmidler, anti-aggressionsmidi er og angstdæmpende midler til beskyttelse mod stress.

De hidtil ukendte j3-carbolin-3-carboxyl syrederivater har den almene formel I: 30 R . · ,^-x i Λ __ I V- c - ir x A JL δ i c

R H

hvor: DK 168292 B1 2 R betegner en alkoxygruppe, der eventuelt er substitueret med ét 11 12 11 12 eller flere halogenatomer, eller NR R , hvor R og R er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom, en al kyl-, aryl-, aralkyl- eller cycloal kylgruppe, der eventuelt 5 er substitueret med en hydroxy-, carboxamid- eller alkoxycarbony1gruppe; R4 betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe indeholdende op til 10 carbonatomer eller en phenylgruppe; 10

RA betegner H, F, Cl, Br, CN, NO,, NR13R14, NHCOR13, C00R13 eller 13 13 14 L

OR , hvor R og R hver betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe indeholdende op til 6 carbonatomer, og hvert molekyle eventuelt indeholder to eller flere identiske eller δ 15 forskellige R 'er; og g R betegner et hydrogenatom eller en alkoxycarbonylgruppe; forudsat dog: 20 at R11 og R12 ikke begge kan betegne et hydrogenatom, når R4, A 9 R og R hver betegner et hydrogenatom, og 4 A 9 3

at R , R og R ikke alle kan betegne et hydrogenatom, når R

25 betegner OCH^,

3 4 9 A

eller hvor R , R , R og R har sådanne betydninger, at de sammen med den tilknyttede /J-carbolin-3-carboxylsyre danner derivaterne: 30 2'-propenyl-/J-carbol in-3-carboxyl at, 5-hydroxymethyl-/J-carbol i n-3-carboxylsyreethylester, 5- methyl -Ø-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 8-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 35 6-methyl -4-ethyl -j3-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 6- methyl -4-phenyl -/3-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 8-methyl -i3-carbol in-3-carboxyl syre-N-methyl amid, 8-methyl-6-chlor-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 8-methyl-6-nitro-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester, eller 3 DK 168292 B1 4,6-dimethyl-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester.

Opfindelsen angår derfor en analogi fremgangsmåde til fremstilling af ovennævnte, hidtil ukendte /J-carbolin-3-carboxy1syrederivater, 5 hvilken analogifremgangsmåde er ejendommelig ved det i patentkravets kendetegnende del anførte.

Med mindre andet defineres, anvendes udtrykkene "alkyl-", "aryl-", "aralkyl-" og "alkoxy-gruppe" til definition af mættede eller 10 umættede ligekædede, forgrenede eller ringgrupper indeholdende op til 10 carbonatomer. Med udtrykkene "lavere alkyl-" og "lavere alkoxy-grupper" menes her mættede eller umættede ligekædede eller forgrenede grupper indeholdende op til 6 carbonatomer.

15 Udtrykket "cycloal kyl-grupper" anvendes her til definition af grupper, der indeholder fra 3 til 7 carbonatomer.

Foretrukne forbindelser med den almene formel I er de forbindelser, A J| i hvilke IT betegner en alkoxygruppe, IT betegner en lavere A g 20 al kyl gruppe eller en phenyl gruppe, og R og R betegner hydrogenatomer.

Eksempler på sådanne forbindelser er: 25 4-methyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 4-ethyl-jff-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4-n-propyl-/?-carbol i n-3-carboxylsyreethylester, 4-i sopropyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 4-n-butyl-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 30 4-phenyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 4-pentyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 4-methyl -/?-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-ethyl-/i-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 35 4-ethyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-ethyl-j9-carbolin-3-carboxylsyreisopropylester, 4-n-propyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 4-n-propyl-/{-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-i sopropyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyremethylester, 4 DK 168292 B1 4-i sopropyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-i sopropyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyrei sopropylester, 4-n-butyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 4-n-butyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyre-n-propylester, 5 4-phenyl-jS-carbol i n-3-carboxylsyremethyl ester, 4-phenyl-/?-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreisopropylester, 4-phenyl-jS-carbol in-3-carboxyl syre-n-butyl ester, 4-n-pentyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester.

10

En anden gruppe af foretrukne forbindelser er Ø-carbolin-3-car- 4 boxylsyreamider, hvor R betegner en lavere al kyl gruppe eller en A 9 phenylgruppe, og R og R betegner hydrogenatomer.

15 Eksempler på sådanne forbindelser er: 4-methyl -/3-carbol in-3-carboxamid, Ν' ,4-dimethyl -j3-carbol in-3-carboxamid, Ν' ,N' ,4-trimethyl -/J-carbolin-3-carboxamid, 20 4-ethyl-)3-carbolin-3-carboxamid, 4-ethyl -/f-carbol in-3-carboxyl syre-N-methyl amid, 4-n-propyl-j8-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 4-i sopropyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyre-N-methylamid, 4-n-butyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 25 4-phenyl -/i-carbol in-3-carboxamid, 4-phenyl-/J-carbol in-3-carboxylsyre-N-methylamid, 4-phenyl-/J-carbol in-3-carboxyl syre-N,N-dimethyl amid, 4- phenyl -Ø-carbolin-3-carboxyl syre-N-ethyl amid.

30 En yderligere gruppe af foretrukne forbindelser omfatter én eller

A

flere af de ovenfor angivne mulige R -substituenter i A-ringen. Eksempler på sådanne forbindelser er: 35 6-fluor-/J-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 7- nitro-/J-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 5- methyl -/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 8- methyl -/J-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 7-fluor-/J-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 5 DK 168292 B1 8-f1 uor-/?-carbol in-3-carboxylsyreethyl ester, 5-cyan-fi-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 5-chl or-/l-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 7- chl or-Ø-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 5 8-chlor-/J-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 5- nitro-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6- cyan-/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 5- methoxy-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6- methoxy-/J-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 10 7-methoxy-jØ-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 8- fluor-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-fluor-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 5- chlor-6-methoxy-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4,6 -d i met hyl -/3-carbol i n -3 - carboxyl syreethyl ester, 15 4-ethyl-6-methyl-/J-carbol i n-3-carboxylsyreethylester, 6- methyl -4-phenyl-/3-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4- ethyl-6-fluor-/l-carbol in-3-carboxyl syreethylester, 6-fluor-4-phenyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6- f1uor-0-carboli n-3-carboxylsyre-N-methylami d, 20 6-methoxy-jØ-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 7- nitro-/S-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 6- carbethoxy-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 7- cyan-/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 5- carbethoxy-/J-carbolin-3-carboxyl syreethylester, 25 5-hydroxymethyl-/J-carbolin-3-carboxyl syreethylester, 6- chlor-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-brom-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-brom-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-brom-4-ethyl -/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 30 6-brom-4-phenyl-/J-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-brom-4-methyl-/}-carboli n-3-carboxylsyremethylester, 6-brom-4-phenyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyremethylester, 6-brom-4-methyl-β-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 6-chlor-4-methyl-/8-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 35 6-chlor-4-ethyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-chlor-4-phenyl-/5-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-chlor-4-methyl-^-carbolΐη-3-carboxylsyremethylester, 6-chlor-4-phenyl-/8-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 6-chlor-4-phenyl-/l-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 6 DK 168292 B1 6-chl or-4-methyl -Ø-carbol i n-3-carØoxyl syrei sopropyl ester, 6-methoxy-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 4-ethyl-6-methoxy-/J-carbol in-3-carboxylsyremethylester, 6-methoxy-4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 5 6-methoxy-4-methyl-/J-carbol i n-3-carboxylsyreethylester, 4-ethyl-6-methoxy-/J-carboli n-3-carboxyl syre-n-propylester, 6-methoxy-4-phenyl-/J-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-ethoxy-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-ethoxy-4-ethyl-/J-carbol i n-3-carboxylsyreethylester, 10 6-ethoxy-4-phenyl-/J-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-nitro-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4-methyl-6-nitro-/J-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 4-ethyl -6-nitro-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-nitro-4-propyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 15 6-nitro-4-phenyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-4-methyl-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-4-ethyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-4-propyl-/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 6-amino-4-phenyl-/J-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 20 6-aeetamido-4-methyl-/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 6- f ormamido-4-methyl-/J-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-acetamido-4-ethyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-acetamido-4-phenyl-/3-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-methoxy-/?-carbolin-3-carboxylsyre-N,N-dimethylamid, 25 6-methoxy-/J-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 6-ami no-4-methyl-/J-carboli n-3-carboxylsyre-N-methylamid, 6-amino-4-phenyl-/9-carbolin-3-carboxyl syre-N-methyl amid, 6-acetamido-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 6-brom-/J-carboli n-3-carboxylsyre-N-methylamid, 30 6-nitro-/J-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 6-cyan-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-cyan-4-ethyl-/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 6-cyan-4-phenyl-/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 4-methyl-/S-carbolin-3,6-dicarboxylsyredimethylester, 35 4-methyl-/3-carbolin-3,6-dicarboxylsyrediethylester, 4-ethyl-/J-carboli n-3,6-di carboxyl syredimethyl ester, 4-phenyl-/J-carboli n-3,6-di carboxyl syredi ethyl ester, 4-phenyl-/J-carbolin-3,6-dicarboxylsyredimethylester, 8-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 7 DK 168292 B1 6.8- dinitro-j8-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 6.8- dibrom-^-carbolin-3-carboxylsyreethylesterhydrobromid, 6.8- dibrom-4-methyl-jS-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6.8- dibrom-4-ethyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 5 6-brom-8-methyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-chlor-8-methyl-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6- methoxy-j8-carbolin-3-carboxylsyremethyl ester, 8-methyl-6-nitro-)8-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6.8- dinitro-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 10 8-brom-6-ni tro-/l-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 7- amino-/S-carbolin-3-carboxyl syreethylesterdihydrochlorid, 6-brom-7-methoxy-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-Ø-carboli n-3-carboxyl syreethylester.

15 Anal ogifremgangsmåden ifølge opfindelsen kan i dens forskellige aspekter udføres som følger:

Dehydrogenering af en forbindelse med den almene formel II (metode (a)) kan udføres på forskellige i sig selv kendte måder.

20

En af disse måder omfatter, at udgangsmaterialet opløses eller suspenderes i en inert solvent. Egnede solventer er potentielt alle aprote solventer, hvorhos kogepunktet ligger over 100°C, og som er inerte med hensyn til udgangsmaterialet. Aromatiske solventer fore-25 trækkes og eksempler på sådanne solventer er xylen, anisol, toluen, chlorbenzen og diphenylether. Der tilsættes derefter elementært svovl i en mængde svarende til mindst 1 molækvivalent svovl pr. dobbeltbinding. Et lille overskud af svovl er ikke alene uskadeligt men fordelagtigt.

30

Reaktionsblandingen koges under tilbagesvaling i adskillige timer, og reaktionens forløb kan følges ved tyndtlagskromatografi.

Ved en anden fremgangsmåde dehydrogeneres udgangsmaterialet med 35 dichlordicyanbenzoquinon eller chloranil i benzen, xylen, dioxan, tetrahydrofuran, methylenchlorid eller dimethoxyethan ved temperaturer på fra 0° til 60°C i perioder på fra 0,5 til 4 timer.

Ved en tredie fremgangsmåde dehydrogeneres udgangsmaterialet i en 8 DK 168292 B1 kogende solvent, såsom xylen, mesitylen og cumen, f.eks. ved temperaturer på fra 120° til 180°C i nærværelse af en katalysator omfattende ædelt metal, såsom platin i fi ndelt form, palladium-black og palladium-carbon, og med reaktionstider på fra 2 til 16 timer.

5

Forestring (metode (b)) og den eventuelle transforestring (metode (b.l)) udføres også i overensstemmelse med metoder, som i sig selv er velkendte.

10 Forestringen udføres fortrinsvis ved at opløse eller suspendere jS-carbolin-3-carboxylsyren og et lille overskud af triethylamin i tetrahydrofuran, ved til reaktionsblandingen at tilsætte en ester af chlormyresyre, og ved at omsætte det således opnåede blandede anhydrid med den behørige alkohol.

15

Transforestringen kan udføres (1) med et overskud af en alkohol i nærværelse af kobber-(II)-bromid ved temperaturer over stuetemperatur, (2) under alkaliske betingelser ved anvendelse af det tilsvarende al kalimetal al kohol at eller (3) under sure betingelser 20 ved tilførsel af hydrogenchlorid til al kohol opløsningen til mætning af denne og ved temperaturer over stuetemperatur.

Amideringen af esteren (metode (c)) kan også udføres ved metoder, som i sig selv er velkendte.

25

Esteren, såsom en al kylester, kan suspenderes eller opløses i en solvent, der har et højt kogepunkt, f.eks. ethylenglycol eller dioxan, og der tilsættes en amin i overskud af den støkiometriske mængde. Det er ønskeligt at opvarme reaktionsblandingen.

30

Ved en anden fremgangsmåde udføres reaktionen mellem esteren og aminen i nærværelse af en solvent ved opvarmning af en blanding af forbindelserne. Hvis den således dannede alkohol har et lavere kogepunkt end kogepunktet for aminen, fjernes alkoholen ved for-35 dampning mens det dannes.

Esteren omsættes fortrinsvis med et aktiveret salt af aminen. Et sådant aktiveret salt kan opnås ved, at aminen omsættes med et Grig-nardreagens, f.eks. ethylmagnesiumiodid.

9 DK 168292 B1

Metode (d) udføres fortrinsvis ved at opløse eller suspendere j3-carbolin-3-carboxylsyren og et lille overskud af triethylamin i tetrahydrofuran og ved til reaktionsblandingen at tilsætte en ester af chlormyresyre.

5

Temperaturen af den således dannede blanding holdes fortrinsvis ved en værdi mellem -15° og 40°C, og efter nogen tid, sædvanligvis fra 1-3 timer, tilsættes forbindelsen, der har formlen IV.

10 Eksempler på egnede reaktive funktionelle derivater til brug i metode (d) er syrechlorider, som kan fremstilles på forskellige måder, f.eks. under anvendelse af thionylchlorid, triphenylphosphin og tetrachlormethan eller et phosphorhalogenid; anhydrider af carboxylsyren og en monoester af kulsyre, f.eks. ethyl esteren; og lavere al kyl estere af carboxylsyren.

Halogeneringen af forbindelserne med formlen I (metode (e)) udføres ligeledes i overensstemmelse med metoder, der i sig selv er kendte. Udgangsmaterialet kan således opløses i en inert solvent og omsættes 20 med det tilsvarende halogen, såsom chlor eller brom, eventuelt i nærværelse af en basisk katalysator, ved temperaturer under stuetemperatur. Inerte solventer er f.eks. chlorerede carbonhydrider, såsom methylenchlorid, chloroform, dichlorothylen osv. Egnede basiske katalysatorer er pyridin eller substituerede pyridiner, såsom dimethylaminopyridin. En basisk katalysator er unødvendig ved chlorering.

Den eventuelle alkoxylering af forbindelser med den almene formel I (metode (e.1)) udføres ligeledes i overensstemmelse med i sig selv kendte metoder.

Det kan være ønskværdigt at erstatte en bromsubstituent med en alkoxygruppe. Til fremstilling af alkoxyforbindelser opvarmes således en bromforbindelse med det tilsvarende al kalimetal alkoholat, f.eks. matriummethylat eller kaliumethylat, i nærværelse af N-methylpyrrol idon under beskyttende gas til temperaturer over 100°C.

Ni treri ngen af forbindelser med formlen I (metode (f)) udføres 10 DK 168292 Bl ligeledes i overensstemmelse med i sig selv kendte metoder. Udgangsmaterialet kan således omsættes ved temperaturer under stuetemperatur med meget koncentreret salpetersyre eller en blanding af koncentreret salpetersyre og svovlsyre. Den syre, der anvendes ved 5 nitreringsoperationen, tjener både som reagent og som solvent.

Den eventuelle reduktion af den fremkomne nitroforbindelse med den almene formel I (metode (f.1)) til de tilsvarende aminoforbindel ser med formel I udføres ligeledes i overensstemmelse med i sig selv 10 kendte metoder.

Ved en foretrukken udførelsesform udføres reduktionen med hydrogen i nærværelse af en metal katalysator, såsom Raney-nikkel, platin i findelt form eller palladium på en egnet bærer, såsom carbon eller kalksten, ved normalt tryk og ved stuetemperatur. Det er imidlertid også muligt at anvende hydrogen in statu nascendi, f.eks. ved at anvende en blanding af zink og saltsyre.

Omdannelsen af de ved metode (f.l) fremkomne aminoforbindel ser med 20 den aimene formel I udføres ligeledes i overensstemmelse med i sig selv kendte metoder, f.eks. ved en Sandmeyerreaktion, ved hvilken diazotiseringsproduktet direkte omdannes til det tilsvarende nitril (metode (f.2)) eller halogenid (metode (f.5)), ved omsætning med et al kalimetal cyanid henholdsvis al kalihalogenid, eventuelt i nær-25 værelse af de tilsvarende kobber(I)salte ved hævet temperatur.

Nitrilet med formlen I kan om ønsket hydrolyseres på i sig selv kendt måde til dannelse af den tilsvarende carboxylsyre (metode (f.3)). Hvis nitrilet har en estergruppe i 3-stillingen, vil denne J estergruppe også hydrolyseres, og der opnås en dicarboxyl syre.

Hydrolysen udføres fortrinsvis i alkalisk medium i nærværelse af en højere-kogende solvent, såsom ethylenglycol, ved reaktionsblandingens kogepunktstemperatur.

Forestring (metode (f.4)) af den ved metode (f.3) fremkomne carboxyl syreforbindelse kan udføres i overensstemmelse med den ovenfor beskrevne metode (b).

35 11 DK 168292 B1

En di carboxyl syre, der er fremstillet som ovenfor beskrevet, kan forestres uden forudgående rensning.

Acylering (metode (f.4)) af den carboxylsyre, der er fremstillet 5 ifølge metode (f.3), kan udføres med et carboxylsyreanhydrid, såsom eddikesyreanhydrid, f.eks. i nærværelse af en organisk base, såsom pyridin, og ved stuetemperatur eller under stuetemperatur, eller med myresyre, eventuelt i nærværelse af eddikesyreanhydrid, ved stuetemperatur eller over.

10

Oparbejdningen af de forbindelser, der er fremstillet i overensstemmelse med de ovenfor beskrevne metoder (a)-(f), kan udføres ifølge almindelig kendte metoder, f.eks. ved ekstraktion, krystallisation, kromatografi osv.

15

De udgangsmaterialer, der anvendes ved metoderne (a)-(f) kan fremstilles ved metoder, der er omtalt i litteraturen, f.eks. i beskrivelsen til canadisk patent nr. 786.351.

20 En foretrukken metode til fremstilling af udgangsmaterialerne omfatter, at substitueret eller usubstitueret tryptophan eller tryptophanester kondenseres med formaldehyd ved forhøjet temperatur til dannelse af en tetrahydro-/J-carbolin-3-carboxylsyreester.

2® Reaktionen mellem en tryptophanester og formaldehyd udføres fortrinsvis i et ikke-vandigt medium, f.eks. toluen. Det dannede vand fjernes ved fordampning.

Reaktionsproduktet kan anvendes direkte, dvs. uden oparbejdning, som 30 udgangsmateriale i metode (a).

En formyltryptophanester kan omsættes med phosphoroxychlorid eller polyphosphorsyre til dannelse af en 3,4-dihydro-/J-carbolin-3-car- boxylsyreester, som imidlertid disproportionerer til den tilsvarende 35 tetrahydro-forbindelse og den fuldt aromati serede forbindelse.

Nogle fremgangsmåder til fremstilling af udgangsmaterialer til brug ved de ovenfor beskrevne metoder (a)-(f) illustreres i de følgende eksempler A-E: 12 DK 168292 B1

Eksempel A

2,77 g 6-Nitrotryptophanethylester opvarmes til kogning i 30 ml toluen med 300 mg paraformaldehyd i 15 timer under anvendelse af en 5 vandseparator og koncentreres derefter ved fordampning in vacuo. Den rødbrune rest pulveriseres fint, suspenderes i 50 ml 2N saltsyre og omrøres i 15 timer ved 60°C. Efter afkøling indstilles pH-værdien til 10 med fortyndet natriumhydroxidopløsning, og opløsningen filtreres. Filtratet ekstraheres med ethyl acetat. Filtratresten og 10 de ethyl acetatekstrakter, som er blevet koncentreret ved fordampning, forenes og kromatograferes på sil i cage! med methylenchloride-acetone (1:1). Der opnås 1,6 g 7-nitrol,2,3,4-tetrahydro-jS-carbolin- 3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 255°C (sønderdeling).

*5 På lignende måde fremstilledes følgende forbindelser: 8-fluor-l,2,3,4-tetrahydro-^-carbolin-3-carboxyl syreethylester, 7- chlor-1,2,3,4-tetrahydro-/3-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 8- chlor-1,2,3,4-tetrahydro-/l-carboli n-3-carboxylsyreethylester 20 5-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-cyan-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 5-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n-3-carboxyl syreethylester, 8-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 8-methoxy-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester 2® og 5-chlor-2-hydroxymethyl-6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n- 3-carboxylsyreethylester.

Eksempel B 30 950 mg 5-Fluortryptophan opløses i 17,5 ml' 0’,25 N natrium- hydroxidopløsning og 4,6 ml 40% formalin og omrøres ved 50°C indtil fuldstænding omsætning (ca. 20 timer, efterprøvet med tyndtlags- kromatografi).

35 pH-Værdien af den fremkomne suspension indstilles til 5,5 med 2 N saltsyre, og efter henstand i nogen tid ved 0°C sugefrafiltreres præcipitatet, vaskes med vand og tørres til frembringelse af 6-fluor-1,2,3,4-tetrahydro-j3-carbolin-3-carboxylsyre. Råbi andingen 13 DK 168292 B1 opløses i en blanding af 30 ml ethanol og 20 ml benzen og forestres azeotropt, medens der tilføres hydrogenchlorid (efterprøvning ved tyndtlagskromatografi). Efter afdestiliering af solventen in vacuo suspenderes resten i vand, og pH-værdien indstilles ved 0°C til 10 5 med fortyndet ammoniak. Efter 60 minutter sugefiltreres opløsningen, og det frafiltrerede vaskes godt med vand. Efter tørring opnåedes 797 mg 6-f1uor-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethyl-ester med et smeltepunkt på 170-175°C .

På analog måde opnåedes 7-fluor-l,2,3,4-tetrahydro-/J-carbolin- 3-carboxyl syreethyl ester i et udbytte på 51% ud fra 6-fluortrypto-phan.

Eksempel C 15 1,13 g 2-(4-Chlorindol-3-ylmethyl)-2-aminomalonsyrediethylester-hydrochlorid og 80 mg paraformaldehyd koges under tilbagesvaling i ca. 15 minutter i 30 ml benzen, indtil ninhydrinreaktionen var forsvundet. Efter afkøling sugefrafiltreres det krystallinske præcipitat og omkrystalliseres fra benzen. Der opnåedes 1,05 g chlor-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboli n-3,3-di carboxyl syred i ethylester-hydrochlorid med et smeltepunkt på 157°C.

700 mg Af denne diester hydrolyseres ved opvarmning under tilbage- 25 svaling i 8 ml IN natriumhydroxidopløsning og 8 ml ethanol. Efter afdestiliering af alkoholen in vacuo og indstilling af pH-værdien af den vandige opløsning af di carboxyl syren til pH 4-4,5 med 1 N saltsyre, under samtidig decarboxylering, udfældes 5-chlor-l,2,3,4-tetrahydro-/l-carbolin-3-carboxylsyre i krystallinsk form. Udbyttet var 370 mg med et smeltepunkt på 315-317°C (sønderdeling). Ved azeo-trop forestring i benzen-ethanol i nærværelse af hydrogenchlorid opnås hydrochloridet af ethyl esteren i et kvantitativt udbytte. Ved behandling med fortyndet ammoniak opnås den frie base med et smeltepunkt på 296° (sønderdeling).

35

Eksempel D

7,8 g 4-Cyan-N-formyltryptophanethylester opløses ved 0°C i 40 ml phosphoroxychlorid og omrøres i 18 timer ved stuetemperatur.

14 DK 168292 B1

Opløsningen koncentreres derefter ved inddampning in vacuo, resten fordeler sig mellem vand og chloroform, og den vandige fase ekstra-heres derefter med mere chloroform. De forenede ekstrakter vaskes med vand, tørres med calciumsulfat og koncentreres ved inddampning 5 in vacuo. Kromatografi af inddampningsresten på silicagel med methylenchlorid-acetone (1:1) giver 300 mg 5-cyan-l,2,3,4-tetra-hydro-/J-carbolin-3-carboxyl syreethylester med et smeltepunkt på 248°C foruden 500 mg 5-cyan-/i-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 310°C ved disproportionering af 5-cyan-3,4-di-hydro-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylesteren.

Eksempel E

12 mmol 6-Methoxy-N-formyltryptophanethylester opløses i 75 ml ^ chloroform, og under udelukkelse af fugt tilsættes 13 g polyphos- phorsyreester i 25 ml chloroform, og det hele omrøres i 5 timer ved stuetemperatur. Efter henstand natten over ekstraheres chloroformopløsningen med 100 ml 1 N vandig natriumhydroxidopløsning og vaskes med vand, tørres, filtreres og koncentreres. Resten omrøres med 1 g 20 palladium på carbon (5%) i 160 ml xylen i 2 timer ved 100°C i en nitrogenstrøm. Efter afkøling sugefiltreres der. Ved ekstraktion af resten ved kogning med ethanol og frafiltrering af katalysatoren opnås 7-methoxy-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 274-275°C i et udbytte på 7%.

25 På analog måde fremstilles 6-carbethoxy-/?-carbolin-3-carboxylsyre- ethylester, smeltepunkt 290-292°C (ethanol/hexan), og 5-methoxy- /l-carbolin-3-carboxylsyreethylester, smeltepunkt 273-275°C (ethanol/ hexan).

30

De ved analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilIlede farmakologisk aktive forbindelser kan anvendes til formulation af farmaceutiske præparater, f.eks. til oral og parenteral indgivelse i pattedyr og mennesker, i overensstemmelse med galenisk farmaci's 35 traditionelle metoder.

Traditionelle tilsætningsmidler er sådanne farmaceutisk acceptable organiske eller uorganiske bærersubstanser, der er egnede til parenteral eller enteral tilførsel, og som ikke på skadelig måde reagerer 15 DK 168292 B1 med de aktive forbindelser.

Eksempler på sådanne bærere er vand, saltopløsninger, alkoholer, polyethylenglycoler, polyhydroxy-ethoxyleret castorolie, gelatine, 5 lactose, amylose, magnesiumstearat, talkum, kisel syre, fedtsyremono-glycerider og -diglycerider, pentaerythritolfedtsyreestere, hydroxy-methylcellulose og polyvinylpyrrolidon.

De farmaceutiske præparationer kan steriliseres og om ønsket blandes 1° med sådanne hjælpemidler som f.eks. smøremidler, konserveringsmidler, stabiliseringsmidler, befugtningsmidler, emulgeringsmidler, salte til påvirkning af osmotisk tryk, puffere og/eller farvende substanser og lignende, som ikke på skadelig måde reagerer med de aktive forbindelser.

15

Til parenteral anvendelse er injicerbare opløsninger eller suspensioner, fortrinsvis vandige opløsninger med den aktive forbindelse opløst i polyhydroxyethoxyleret castorolie, specielt egnede.

20 Ampuller er hensigtsmæssige enhedsdoser.

Til oral anvendelse er tabletter, drageer eller kapsler, der indeholder talkum og/eller en kulhydratbærer eller binder eller lignende, idet bæreren fortrinsvis er lactose og/eller majsstivelse 25 og/eller kartoffelstivelse, specielt egnede. En sirup, elixir eller lignende, hvori der anvendes en sødet vehikel, kan anvendes.

I almindelighed udleveres forbindelserne fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse i enhedsdosisform omfattende fra 0,05 til 10 mg i en farmaceutisk acceptabel bærer pr. enhedsdosis.

Dosis af forbindelserne fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse er 0,1-300 mg/dag, fortrinsvis 1-30 mg/dag, når de administreres til patienter, f.eks. mennesker, som et medikament.

35

Det er velkendt (Squires, R. F. og Braestrup, C., Nature (London) 266 (1977), 734), at specifikke steder i centralnervesystemet hos hvirveldyr udviser en specifik stor affinitet for binding af 1,4- og 1,5-benzodiazepiner. Disse steder kaldes benzodiazepinreceptorer.

DK 168292 Bl 16

De farmakologiske egenskaber af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen er blevet undersøgt ved at bestemme deres evne til at fortrænge radioaktivt mærket flunitrazepam fra sådanne benzodiazepinreceptorer.

5

Fortrængningsaktiviteten af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen er blevet bestemt ved ICg^-værdien og EDgg-værdien.

ICgg-værdien repræsenterer den koncentrat!on* hvorved der sker en 10 fortrængning af 50% af den specifikke binding af ^H-flunitrazepam (1,0 nM, 0°C) i prøver omfattende et samlet volumen på 0,55 ml af en suspension af hjernemembran, f.eks. fra rotter.

Fortrængningsprøven udføres på følgende måde: 15 0,50 ml Af en suspension af ubehandlet rotteforhjerne i 25 mM KHgPO^, pH = 7,1 (5-10 mg væv/prøve) inkuberes i 40-60 minutter ved 0°C sammen med ^H-diazepam (specifik aktivitet 14,4 Ci/ mmol, 1,9 3 nM) eller H-flunitrazepam (specifik aktivitet 87 Ci/mmol, 1,0 nM).

20 Efter inkubering filtreres suspensionen gennem Whatman® GF/C glasfiberfilter, filterresten vaskes to gange med kold pufferopløsning, og radioaktiviteten måles ved scintillationstælling.

Forsøget gentages, idet der forud for tilsætningen af det radio- pc aktivt mærkede benzodiazepin tilsættes en given mængde eller overskud af den forbindelse, hvis fortrængningsevne ønskes bestemt. På basis af de opnåede måleresultater kan IC5g-værdien beregnes.

EDRn-værdien repræsenterer den dosis (mg/kg) af en prøvesubstans, 3Π hvorved den specifikke binding af flunitrazepam til benzodiazepin-receptorer i en levende hjerne reduceres til 50% af'kontrolværdien.

Et sådant in vivo forsøg udføres på følgende måde:

Grupper af mus injiceres med prøvesubstansen i forskellige doser og OC 3 sædvanligvis subcutant. 15 Minutter senere gives H-flunitrazepam intravenøst til musene, og efter yderligere 20 minutter aflives musene, deres forhjernemembraner fjernes, og radioaktiviteten i forhjernemembranerne måles ved scintillationstælling. EDgQ-Værdien bestemmes ud fra dosis-responskurver.

17 DK 168292 B1

Opnåede resultater fremgår af efterfølgende tabel I og II.

Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen udviser antiaggressiv virkning på mus. Hæmningen af aggression er blevet bestemt på hanmus 5 (NMR fra Møllegaard, Danmark), der har en vægt på 20-22 g. Musene isoleres i 3 uger i plastbure, og når to mus derefter anbringes i samme bur, vil de spontant og næsten øjeblikkelig begynde at slås. Denne aggression hæmmes effektivt af en række psykoaktive medikamenter, herunder af benzodiazepiner (Valcelli, Mod. Probl. Pharmacopsych., 1979, 14, 143-156). Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen hæmmede fuldstændigt aggression ved en prøve, der er beskrevet af Buus Lassen, Europ. J. Pharmacol., 1978, 47, 45-49. Forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen blev indgivet sub-cutant og oralt, og den antiaggressive effekt blev bestemt efter ½ 1® time. Baseret på de opnåede resultater er EDgQ-værdien blevet beregnet.

Forsøgsresultater, der er opnået ved undersøgelse af nogle af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen og nogle velkendte 20 beroligende midler, fremgår af efterfølgende tabel I og II.

Hæmningen af motorisk koordination hos mus blev også undersøgt 30 minutter efter subcutan indgivelse i overensstemmelse med en metode, der er beskrevet i litteraturen (Buus Lassen et al., Acta pharmacol.

25 et toxicol., 1971, 39, 1-16).

Forsøgsresultater, der er opnået ved undersøgelse af nogle af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen og nogle velkendte beroligende midler, fremgår af efterfølgende tabel I.

30

Den akutte toxicitet for mus bestemtes som antallet af døde mus i løbet af 24 timer.

Forsøgsresultater, der er opnået ved undersøgelse af nogle forbin-delser fremstillet ifølge opfindelsen og nogle beroligende midler, fremgår af efterfølgende tabel I.

18 DK 168292 B1 -p w

•P

•f— o •r—

X

O O) •P o.x o o in \ o in

•P O O) LO CM

3 —J S Λ Λ

<C

v> •Γ- 5- 0 -P — 0 c

ΕΞ O

•r φ -p o co σ> c c o -X o o co φ -i- in \ o o

-I- I— Ό O σι r—1 *“H

x σι s- lu s λ A

<o c o P CO o

*t ^ -X

P

-Y

o ip c · cO o </) oiwcn «o-o coin in c ιλ o -X in t-c r-·. co •i- Φ m \

m C i- O CD

E O LU E

_j æ σ uj s: co co C i— I— · c o

3 O

r— > Irt lp O τι C > O O) x f injc „ ro XJ E O \ O O in CM OO O CO CM o c t— ω οι in m cm o· cm in co co in ιρ -Γ- & cm cm cm to ja Λ Λ Λ ε ο σ» <ο s- C Q ·Ρ Φ ·^ »· ι— Ό" C Ν > Ο ε ·> ο ε co m\ r-icMOOor>*^3-oo ja s- c ο τ—ίο·—tin·—irj-oo ΐ +j i-IC »—< I—c I—( CO *0"

O- A

CO

kC

\ ο«υ % )r\vx « 5 \_V £*= = = = = = = = = A ' σ\ 3 Ζ-βί ·—» CO / f·' ---> · ' φ —( = m in — > Γ=\ co = = in o/\ O m CM = s_\\// —. in 1 0 in 0 10

Dl // τ—1 ΓΟ = O CM = ^ O

'-' .. in -η = cm co = co m ^

s_ 1X00-1- 00 = CO

0 cm m ·— — — ·— —· cm a: >oooo = = = = = oo t- 0:00 = = = = 2: = = 19 DK 168292 B1 4-> 0)

+J

•r—

V

•r—

X

o cn

Sil o o 3 —j ε ^

.X

Jai

OO

ί ο 4->

0 C

E o O .p Ό to O)

C C O -X

rt Φ -i- in \ •i- i— -o Q cn

x σ> s- lu E

to c o p to o < S * o cn m p

+J -Y

ro ·

</) O

P 4- C

S- CO O V) o ·<- c«- cn co cn

— c oo o -X

•i- φ m \ HH c s- O O) E O UJ ε mm —I (ti o 2 °° LU 31 CO ^

CQ

<C

h- S-

•i . S

§ <, u. S

I— >00 *1 4- σ -i- ό P* 1 c > o OO LOOOO 2 ar-i-m-x mino <e co -o c α \ ^ ^ ia

C π LI SI A A A W

c»- ·<- Ε o Λ E O “ cn <o s- g C Q +J °

•i- Φ ·«“ ·> r— O O

c N > o E p i£ ti

ε to m\ cvj o p HH -J

m s- c o cn oo CSJ v 2C+j*h-hhc ή σ> ^ Φ r— 7 °ee x x nz x* u 0-0 “ = 31 ^ s- I ° i s fL § ; 1 1 VC 1* Γ i 3 Z-CrS *-s 3: —Ή O ® 00 M 3C CO CO Q- @ _ rn / 003: Φ Q *-> > /=\ CM O Z N S hh Φ « / \ 3= OOh-'O=>E-J> ?* (. ,) o o o m ·ι- HH ro o ·*“ <c \ // coco co jz -oQiQ.cn cn

V_y.. 3:313: CM S- CQ G) LU -O

x! ‘I* i z z i o -—- S ' * 3 DK 168292 Bl 20

TABEL II

r4 Hæmning af H- Pentylen- Ϊ 11 .j^3 Flunitrazepam-binding tetrazol ^-JroT~YoT"c. i r -· in vitro in vivo

H Afprøvnings- i ED5Q ED^q ED5Q

forbindelser i ng/ml mg/kg s.c. mg/kg

T

R3 R4 RA I

t i 0CH2CH=CH2 H H 1 1,4 >100 0C2H5 H 6-Br j 2,2 >250 >100 0C2H5 “{o) H 1 54 118 0C2H5 -CH(CH3)2 Η I 37 >250 0C2H5 CH3 6-N02 ! 0,4 43 0C2H5 C2H5 6"F 0>5 47 0C2H5 C2H5 6_NH2 ( 18 25 i >100

/ I I

OC2H5 H 6-C-0C2H5 I 1,3 233 oc2h5 H 5-OCH3 j 1 37 j >100 N-(CH3)2 H 6-0CH3 j 100 41 0C2H5 H 5-CH3 I 2,1 210 j > 50 0C2H5 H 5-CH20H I 2,3 38 ] > 30 0C2H5 CH3 6-CN ! 0,4 47 >100 0CH2CF3 Η H I 1,4 >250 0C2H5 CH3 6-NHCHO ί 8,9 47 | >100 0C2H5 H 6-C1 I 1,2 >250' ] 0-n-C3H7 CH3_H_j 15 69 j >100 21 DK 168292 B1

Omstående tabel II angiver, ud over afprøvningsresultater vedrørende in vitro henholdsvis in vivo EDg^-værdier for i forhold til fluni-trazepam bestemt specifik binding til benzodiazepinreceptorer i hjernevæv for forbindelser med formlen (I), også afprøvning af en 5 række af forbindelsernes anti-konvulsive virkning, nemlig deres EDjø-værdi er vedrørende ophævelse af den med pentylentetrazol (pentazol) i forsøgsdyr inducerede krampetilstand.

Ved undersøgelse af forbindelsernes anti-konvulsive virkning indgi -10 ves der i forsøgsdyrene (mus) ved subcutan injektion pentazol i en mængde på 150 mg/kg i saltsur opløsning (pH = 2-3) 15-30 minutter efter intraperitoneal indgivelse af afprøvningsforbindelsen. Den subcutant injicerede pentazol inducerer i forsøgsdyrene kloniske og toniske kramper, som hos ubehandlede dyr medfører døden. Antallet af 15 dyr (mus), som inden for de første 30 minutter efter pentazoliudgivelsen udviser kramper eller dør, registreres.

De i tabel II angivne ED^-værdier blev bestemt ifølge Litchfield og Wilcoxon's metode (J. Pharmacol. Exp. Ther., 96 (1949) 99-103) som 20 den mængde antagonistisk virkende stof, der beskytter 50% af dyrene mod kramper og/eller død.

Selv om ikke alle forbindelserne i tabel II er blevet afprøvet for deres anti-konvulsive virkning, er alle forbindelserne imidlertid 25 blevet undersøgt for deres affinitet for benzodiazepinreceptorer i hjernevæv, og da denne affinitet for samtlige afprøvede forbindelser er god, og affiniteten er en nødvendig forudsætning for antikon-vulsiv virkning, synes der hermed tilvejebragt en rimelig sandsynliggørelse af, at samtlige forbindelser har en nyttig, 50 anti-konvulsiv virkning i betragtning af deres fælles /}-carbolincar-boxylsyrekerne.

Forbindelsernes gode affinitet for benzodiazepinreceptorer beviser i alle tilfælde deres gode psykotrope virkning.

35

Det fremgår af tabel I, at i modsætning til benzodiazepinerne chlordiazepoxid og diazepam, hæmmer forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen aggression uden at bevirke forringet motorisk koordination. Med andre ord udviser forbindelserne fremstillet ved 22 DK 168292 B1 analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen ikke benzodiazepinernes sedative eller andre uønskede muskel afslappende egenskaber. Derfor er forbindelserne fremstillet ved analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen egnede til brug som ikke-sedative antikonvulsionsmidler, 5 antiaggressionsmidler og angstdæmpende midler eller til beskyttelse mod stress.

Hæmning af udforskningsmotilitet hos gnavere er en meget anvendt undersøgelse for sedativ effekt. En forbindelse fremstillet ifølge opfindelsen og to velkendte beroligende midler er blevet underkastet en sådan undersøgelse.

30 Minutter efter subkutan indgivelse af fysiologisk saltvand og prøvesubstanser i rotter overførtes de til et nyt bur, og 1® motiliteten måltes de første 10 minutter. EDgQ-værdien er den dosis, hvorved motiliteten hæmmes med 50% i forhold til kontrollerne.

Følgende prøveresultater opnåedes:

20 TABEL III

Prøvesubstans ED5Q, mg/kg 25 /i-carbolin-3-carboxylsyreethyl ester >100

Chlordiazepoxid * (LIBRIUM®) 1,2

Diazepam * (STES0LID®) 0,4 30 * Indgivet som kommercielle injektionspræparationér.'

Som det fremgår af tabel III, er ED^Q-værdien for forbindelsen fremstillet ved anal ogi fremgangsmåden ifølge opfindelsen meget 35 * ^ højere end værdien for de velkendte beroligende midler.

Nogle af forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen har i rotter vist en opvågningseffekt uden af fremkalde den abnorme opførsel, der fremkaldes af de klassiske, misbrugte, central stimulerende midler 23 DK 168292 B1 (f.eks. amphetaminer).

Rotters lokomotoriske aktivitet udviser en circadisk rytme. Normal bevægelse, pleje og spisning finder sted under mørkeperioden og 5 hvile under lysperioden. Hvis CNS-stimulerende midler gives til rotter, som har været nogle timer i deres bure, observeres en udtalt hypermotilitet under lysperioden (Buus Lassen, Psychopharmacologia 1973, 29, 55-64; Kallman og Isaac, Psychopharmacologia 1975, 40, 313-318).

10

Fysiologisk saltvand og prøvesubstanser blev indgivet s.c. eller p.o. til rotter, der holdtes i velkendte bure. Moti1 i ten måltes i 4 timer (2 perioder af 2 timer) efter indgivelsen. Motiliteten hos grupper, der modtog prøvesubstanser, sammenlignedes (Student's ^ t-test) med motiliteten hos den saltvandsbehandlede kontrolgruppe. Fysiologisk saltvand inducerede en forbigående forøgelse af moti1 i -tet, der omfatter bevægelse, snusning og pleje; ca. 30 min. efter indgivelse aftog motiliteten, og rotterne tilbragte det meste af deres tid hvilende sammen i en gruppe. Amphetamin 0,5-5 mg/kg s.c.

2° fremkaldte en betydelig hypermotilitet bestående af vedvarende, stereotyp snusen, rejsende sig op og slikken på burvæggene. Diazepam 10-20 mg/kg s.c. influerede ikke på motilitet.

Ø-Carbolin-3-carboxylsyreethylester, 20-100 mg/kg s.c. og Ø-carbo-lin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 20-100 mg/kg p.o., forøgede motiliteten signifikant (P < 0,001). Rotter, der fik disse forbindelser, forekom under forsøgsperioden at være mere årvågne end kontrolgruppen og viste flere perioder med bevægelse, spisning og pleje, hvilket er rotters normale adfærdsmønster under den vågne tilstand i ^ mørkeperioden. Dette betyder, at forbindelserne fremstillet ifølge opfindelsen har fremkaldt en normal vågen adfærd under hvileperioden, medens amphetamin inducerede en abnorm adfærd, som aldrig forekom hos saltvandsbehandlede kontrol rotter. Disse resultater indicerer en potentiel anvendelse af forbindelserne fremstillet ved

OC

anal ogi fremgangsmåden ifølge opfindelsen som psykisk aktiviserende midler.

Anal ogi fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler, hvor alle temperaturer er angivet 24 DK 168292 B1 ukorrigeret i grader Celsius; med mindre andet anføres, er alle dele og procenter i vægtdele og vægtprocenter.

Eksempel 1 5

En opløsning af 15,0 g L-tryptophan i 90 ml 0,6 N NaOH og 6,07 ml 40% formalin opvarmes 25 timer til 53°C. Dernæst titreres den opløsning, der opnås ved reaktionen, til en pH-værdi på 5,5 med 21 ml 3N HC1 og henstår i et køleskab ved 4°C i 18 timer. Præcipitatet 10 fjernes dernæst ved filtrering og vaskes med 150 ml koldt vand. Udbyttet af tetrahydro-/J-carbolin-3-carboxylsyre er 14,8 g efter tørring i 24 timer, og smeltepunktet er 295,5°C.

7,5 g Af den således opnåede forbindelse plus 700 ml 99,9% ethanol ^ plus 21 ml koncentreret HC1 tilbagesvales i 24 timer og inddampes til tørhed. Udbyttet af tetrahydro-/?-carbolin-3-carboxylsyreethyl-ester er 7,25 g.

7 g Af denne ester sættes til 100 ml tetrachlorethan plus 10 g ^ chloranil, og blandingen tilbagesvales i 1 time og 20 minutter.

Efter ekstraktion med to portioner på 30 ml 0,2 N HCl, titreres de vandige faser til en pH-værdi på 9 med koncentreret ammoniak og ekstraheres med to portioner 300 ml ether. Efter afdampning fordeles remanensen mellem en vandig fase med pH 4,5 og ethylacetat.

25

Efter afdampning af ethyl acetatet opnås 1,5 g j8-carbolin-3-carboxyl-syreethylester, der identificeres ved massespektrometri baseret på en molekylvægt på 240. Smeltepunktet er 230-233°C.

30

Ovennævnte reaktion kan illustreres ved følgende reaktionsskema (VI).

35 25 DK 168292 B1

-Π CH2 ^JCOOH _^^\.C00H

5 l^/ilSN jj ^ h2co Γ II (I Ni ch3ch2oh

Η I H

H

(VI)

10 O

OaX'— OcjOrL- ,s; x i^·

Eksempel 2 20 13 g Polyphosphorsyre, 5 ml phosphoroxychlorid og 1,0 g D,L-N-formyltryptophan blandes og henstår i 2 timer i et varmt oliebad ved en temperatur på 65°C. Efter afkøling tilsættes 100 ml isvand. Efter henstand filtreres blandingen, og filtratet hældes på 25 en søjle med 25 g "D0WEX" 50 (tør mesh 100-200, 4% tværbinding) som tidligere var blevet vasket med tre 50 ml portioner 1M HC1 og fire 50 ml portioner destilleret vand. Søjlen vaskes derefter med to 55 ml portioner vand. Ø-carbolin-3-carboxylsyren ekstraheres derefter med en blanding af 10 ml koncentreret vandig ammoniak og 40 ml 30 destilleret vand. Søjlen vaskes med yderligere 20 ml vand. Den således opnåede 70 ml opløsning inddampes i en rotati'onsfordamper og tilvejebringer 0,5 g rødt fast materiale. Produktet opløses i 50 ml 99% ethanol og mættes dernæst med hydrogenchlorid. Derefter koges blandingen under tilbagesvaling i 1 time og inddampes in vacuo.

35 Remanensen renses ved kromatografi på silicagel under frembringelse af et udbytte på 105 mg ethyl-j8-carbolin-3-carboxylat. Smeltepunkt 229°C.

26 DK 168292 B1

Eksempel 3 0,5 g )5-Carbolin-3-carboxylsyre, 30 ml n-pentanol og 5,0 ml koncentreret svovlsyre blandes og henstår i 3 timer på et dampbad. Efter 5 afkøling tilsættes 30 ml vand og ammoniak til indstilling af pH-værdien på ca. 6. Den vandige fase, som separaredes fra pen-tanolfasen, vaskes med 5% natriumbicarbonatopløsning. Pentanolfasen tørres med tør magnesiumsulfat og inddampes. Udbyttet er 0,4 g n-pentyl-jØ-carbolin-3-carboxylat, der har et smeltepunkt på 10 209-212°C. Forbindelsen omkrystalliseredes fra xylen under frembrin gelse af 0,3 g produkt, der har et smeltepunkt på 216-219°C.

På en lignende måde fremstilles følgende forbindelser med den almene formel IX.

15

—C00R

(IX) I ^

H

25 Smeltepunkterne af forbindelserne vil fremgå af efterfølgende tabel IV:

TABEL IV

30 R Smeltepunkt, °C

n-C3H7 195-97 iso-C3H7 200-02 CH2-CH=CH2 191-94 35 sec-C4Hg 215-17 neo-CgHjj 297-300 n-CyH15 140-41 (HBF4-salt) 5 27 DK 168292 B1 TABEL IV (fortsat)

R Smeltepunkt, °C

CH2CgH5 234-38 CH2CH20H 221-23 CH2CF3 261-64 10 _

Eksempel 4 0,2 g j5-Carbolin-3-carboxylsyre, 1 g phenol og 1 ml phosphoroxychlo-15 rid blandes i en kolbe. Den således opnåede homogene blanding henstår i 2 timer på et dampbad. Efter afkøling tilsættes 5 ml isvand, og blandingen omrøres i 4 timer. Reaktionsblandingen neutraliseres dernæst med fast natriumbicarbonat til præcipitation af et lysebrunt fast stof. Væsken fjernes fra det faste stof ved sugning, 20 og det faste stof vaskes med 1% natriumbicarbonatopløsning og dernæst med vand og endelig med ether. Udbyttet er 0,1 g phenyl-/1-carbolin-3-carboxylat, der har et smeltepunkt på 237-239°C. Forbindelsen viste sig ved HPLC og TLC at være ren.

25 På analog måde fremstilledes paramethoxyphenyl-j8-carbolin-3-car- boxylat ud fra /J-carbolin-3-carboxylsyre, paramethoxyphenol og phos-phoroxychlorid. Smeltepunktet af den dannede substans er 242-244°C.

Eksempel 5 30 0,4 g Af en 55% suspension af natriumhydrid i mineralolie sattes til en suspension af 2,1 g ^-carbolin-3-carboxylsyre i 25 ml dimethyl formamid og efter en periode på 5 minuttter tilsattes 1,2 ml ethylchloracetat. Blandingen tilbagesvales i 4 timer, og dimethyl-35 formamid afdampes dernæst in vacuo. Efter tilsætning af 100 ml vand til remanensen, ekstraheres blandingen med chloroform under frembringelse af 1 g carbethoxymethyl-j8-carbolin-3-carboxylat, der har et smeltepunkt på 202-203°C.

28 DK 168292 B1 På lignende måde fremstilles 2-N,N-dimethylaminoethyl-0-carbo-lin-3-carboxylat, smp. 165-168°C.

Eksempel 6 5

En blanding af 2 g /l-carbolin-3-carboxylsyre, 20 ml thionylchlorid og 2 ml di methyl formamid koges under tilbagesvaling i 1 time. Overskuddet af thionylchlorid fjernes ved destillation under reduceret tryk. Der sjettes 20 ml diethylamin under afkøling til en 10 suspension af destillationsresten i 20 ml triethylamin, og bland

ingen koncentreres under reduceret tryk. Resten behandles med vandig ammoniak (pH 8,5), og den således opnåede blanding ekstraheres med chloroform (6 x 25 ml). Ekstraktet vaskes med vand (2 x 25 ml), tørres (KgCO^), affarves med en lille mængde aktivt kul og filtre-15 res. Filtratet inddampes til tørhed, og resten holdes ved 60°C

natten over. Det faste stof (1,56 g; 62%) omkrystalliseres fra toluen under frembringelse af /f-carbol in-3-carboxylsyre-N,N-diethyl-amid, der har et smeltepunkt på 170,0°C.

20 Eksempel 7

En suspension af 5 g /3-carbolin-3-carboxylsyre i en blanding af 900 ml tetrahydrofuran og 3,6 ml triethylamin koges under tilbagesvaling 1 15 minutter og afkøles til stuetemperatur. Frisk destilleret 25 ethylchlorformiat (2,5 ml) opløst i 100 ml tetrahydrofuran tilsættes dråbevis under omrøring over en periode på 1½ time. Efter at reaktionsblandingen er blevet omrørt i yderligere 30 minutter tilsættes et stort overskud af methylamin. Omrøring fortsættes i 1 time, hvorefter blandingen filtreres og koncentreres til ca. 50 ml under 30 reduceret tryk. Tilsætning af vand (250 ml) bevirker, at amidet udfælder. Blandingen henstår ved 5°C natten over, filtreres og tørres ved 60°Ci 15 timer. Det således dannede /}-carbolin-3-carbo-xylsyremethylamid (4,1 g; 77%) omkrystalliseres fra toluen. Smeltepunktet er 275°C.

35

Eksempel 8 2 g Ethyl -/?-carbolin-3-carboxyl at og 5 g Ø-phenethylamin opvarmes i 2 timer ved 196°C. Den afkølede, delvis krystalliserede blanding 29 DK 168292 B1 behandles med varmt vand, som dekanteres. Resten omkrystalliseres fra xylen under frembringelse af j3-carbolin-3-carboxyl$yre-N-(2-phenethyljamid (2,5 g) med et smeltepunkt på 297-298°C.

5 Eksempel 9

En opløsning af 6,0 g N-methylanilin i 50 ml ether efterfulgt af en opløsning af 4,0 g ethyl-£-carbo1in-3-carboxylat i 100 ml tetra-hydrofuran sættes til ethylmagnesiumiodid, der er fremstillet ud fra 1,5 g magnesium og 9 g ethyl i odid i 75 ml ether.

Blandingen koncentreres til det· halve volumen og tilbagesvales derefter i 1 time. Efter afkøling hældes reaktionsblandingen i 100 ml 2N HC1. Efter tilsætning af kaliumcarbonat og ekstraktion til 15 chloroform isoleres 3,5 g N-methyl-N-phenyl-^-carbolin-3-carboxamid (smeltepunkt 237-240°C).

Eksempel 10

Eksempel 7 gentages med den undtagelse, at triethylamin og ethyl -chlorformiat anvendes i dobbelte mængder, dvs. 7,2 ml henholdsvis 5,0 ml. Smeltepunktet af det således fremstillede 9-carbethoxy-jS-carbolin-3-carboxylsyreethylamid er 161-163°C.

pc

De fysiske egenskaber af nogle forbindelser ifølge opfindelsen er anført i efterfølgende tabel V: 30 35 30 DK 168292 B1

TABEL V

Fysiske resultater ^ _ s r" 5 I l[ « XR12 i9 R12 R9 Smeltepunkt,

10 _°C

H CH3 H 285-287 H C2H5 H 248,0-248,5 H n-C3H7 H 252-254 H iso-C3H7 H 235-237 15 H n-C4Hg H 230-231 H tert-C4Hg H 263,5-265 H n-C6H3 H 139-141 H C6H5 H 304-307 H CH2C6H5 H 276-278 20 H CH2CH2C6H5 H 216,5-217,5 CH2 H CH^ H 248-250 xch2 CH3 CH3 H 196-198 25 C2H5 C2H5 H 169,5-170 CH3 CgHg H 238-240 H OH H 237,5-239 H CH2CH20H H 235-236 H CH2C00H H >320 30 H CH2C00C2H5 H 207-209 H CH2C0NH2 H 314-316 H CH2CH2CH2C00H H 277-280 H C2H5 C00C2H5 161-163 35

Eksempel 11 (fremstilling af udgangsforbindelse)

En blanding af 10 g /?-carbolin-3-carboxylsyreamid i 250 ml phosphoroxychlorid omrøres ved stuetemperatur^ indtil alt amid er gået i opløsning. Opløsningen koges derefter under tilbagesvaling i 31 DK 168292 B1 4 timer, og derefter afdampes overskuddet af phosphoroxychlorid in vacuo. Der sættes is og vand til resten til et volumen på ca. 1 liter, og der tilsættes koncentreret ammoniak, indtil pH-værdien er 8,5. Præcipitatet frafiltreres og vaskes med vand. Efter tørring er 5 udbyttet af /l-carbolin-3-carbonitril 9,1 g efter omkrystallisering fra xylen. Smeltepunktet er 294-300°C.

Eksempel 12 20 10,2 g 4-Methyl-l,2,3,4-tetrahydro-j8-carbolin-3-carboxylsyreethyl- ester opløses/suspenderes i 300 ml xylen, og blandingen koges i 10 minutter i et Dean-Stark apparat til fjernelse af fugtighed. Efter afkøling til 100-110°C, tilsættes 2,1 molækvival enter svovl, og blandingen koges under tilbagesvaling i 5 timer. Reaktionsforløbet 15 følges ved DC. Dernæst afdampes xylenen Jri vacuo. Remanensen opløses i chloroform og renses ved kromatografi (chloroform-ethanolgradient) på silica til fjernelse af ikke-omsat svovl. Der opnås 4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, der har et smeltepunkt på 235-239°C, i et udbytte på 72%.

20

Eksempel 13 4

De R -substituerede jS-carbolin-3-carboxylsyreethylestere, som har den almene formel I, og som er anført i den efterfølgende tabel VI, 25 syntetiseres ud fra de tilsvarende 4-substituerede 1,2,3,4-tetra-hydro-j8-carbolin-3-carboxylsyreethylestere på en lignende måde som fremgangsmåden beskrevet i eksempel 13.

TABEL VI 30

R4 R3 Udbytte, % Smeltepunkt, °C

C2H5 OC2H5 83 174-194 (sønderdeling) n-C3H7 " 56 142-160 (sønderdeling) 35 iso-C3H7 " 61 190-192 n-C4Hg " 50 166-169 C6H5 " 85 237-242 C5Hn " 51 172-175

Eksempel 14 32 DK 168292 B1 3,1 g 4-Ethyl-1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carboli n-3-carboxylethyl ester opløses i 50 ml tør toluen, og blandingen afkøles til 15°C, og efter 5 tilsætning af 5 g dichlordicyanbenzoquinon omrøres den i 1 time ved 15°C. Efter fortynding med 150 ml ethylacetat ekstraheres reaktionsblandingen adskillige gange, med 5% vandig ammoniak og vaskes dernæst til neutralitet med saltvand. Efter tørring med natriumsulfat, filtrering og afdampning af solventen in vacuo opnås 2,95 g 4-ethyl-10 Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, som omkrystalliseres fra diiso- propylether. Der opnås 2,25 g af den omkrystalliserede forbindelse, som sønderdeles ved 174-190°C .

Eksempel 15 15 6,21 g 4-Methyl-1,2,3,4-tetrahydro-/J-carboli n-3-carboxylsyreethyl-ester opløses i 120 ml varm mesithylen, og efter tilsætning af 4,1 g Pd/c (10¾) koges det under tilbagesvaling (165°C) i 7 timer. Efter afkøling fjernes katalysatoren ved filtrering og katalysatoren ^ vaskes grundigt med methylenchlorid, og de forenede filtrater koncentreres jm vacuo. Efter omkrystalli sering fra acetone opnås 4,98 g 4-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, der har et smeltepunkt på 234-237°C.

^ Eksempel 16

Metode A 4 1 g R -substitueret Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester suspen- ^ deres/opløses i 10 ml af en alkohol og opvarmes til 50°C i 5-24 timer efter tilsætning af 20 mg kobber (I I) bromid.’ Reaktionen følges ved TLC. Til udvinding af den dannede forbindelse tilsættes isvand, og det således dannede præcipitat fjernes ved filtrering, vaskes med vand, tørres og omkrystalliseres dernæst.

35

Metode B

100 mg natrium opløses i 10 ml alkohol og dernæst tilsættes 1 g af et ethyl esterderivat. Reaktionsblandingen opvarmes til 60-80°C. For 33 DK 168292 B1 at udvinde den dannede forbindelse tilsættes isvand, og forbindelsen oparbejdes som beskrevet under metode A.

Metode C 5

Hydrogenchloridgas indføres i en opløsning eller suspension af 1 g ethyl esterderivat i 10 ml af en alkohol under afkøling med is og indtil mætning. Reaktionsblandingen omrøres derefter i 6-24 timer ved stuetemperatur. Reaktionstiden bestemmes ved TLC. Under opar-bejdning blandes reaktionsblandingen med is/vand, og pH-værdien indstilles til 9-10 ved tilsætning af koncentreret vandig ammoniak under afkøling med is. Det præcipiterede produkt oparbejdes yderligere som beskrevet under metode A.

1® På denne måde fremstilles følgende forbindelser:

Ifølge metode A: 4-methyl-Ø-carbolin-carboxylsyre-n-propylester, smeltepunkt 210-213°C, og ^ 4-ethyl-/J-carbol i n-3-carboxyl syremethyl ester, smeltepunkt 208-210°C,

Ifølge metode C: 25 4-isopropyl-/?-carbolin-3-carboxyl syremethylester, 4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyremethylester, smeltepunkt 243-246°C, og og ifølge metode B: 30 4-i sopropyl-/?-carboli n-3-carboxylsyrebenzylester, 4-ethyl-Æ-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-ethyl -/J-carbolin-3-carboxyl syrei sopropyl ester, 4-n-propyl-j3-carbolin-3-carboxylsyremethylester, 35 4-n-propyl-/?-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-i sopropyl -jS-carbol in-3-carboxyl syremethyl ester, 4-n-butyl -/J-carbolin-3-carboxyl syremethyl ester, 4-n-butyl-Ø-carboli n-3-carboxyl syre-n-propylester, 4-cyclohexyl-^-carbolin-3-carboxyl syremethylester, 34 DK 168292 B1 4-cyclohexyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyrepropylester, 4-phenyl -j8-carbolin-3-carboxylsyremethyl ester, 4-phenyl -Ø-carbol in-3-carboxylsyre-n-propylester, 4-phenyl-/J-carboli n-3-carboxylsyrei sopropylester, 5 4-phenyl-j8-carbolin-3-carboxylsyre-n-butylester, 4-n-pentyl -j3-carbol i n-3-carboxyl syremethyl ester,

Eksempel 17 10 i g 4-Methyl-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester suspenderes eller opløses i 20 ml ethylenglycol. 20-25 Molækvival enter af en amin sættes til blandingen, og den således opnåede blanding omrøres i 16-24 timer ved temperaturer, der ligger i området fra stuetemperatur til 110°C, idet tiden og temperaturen afhænger af reaktiviteten I5 af den pågældende amin. Reaktionen følges ved TLC.

Under oparbejdning hældes reaktionsblandingen på is/vand, og præci-pitatet fjernes enten ved frafiltrering eller ekstraktion. Overskuddet af højtkogende amin, som opnås sammen med slutproduktet 20 under ekstraktion, fjernes ved højvacuumdestillation. Efter omkrystallisering opnås følgende forbindelser: 4-methyl-j3-carbolin-3-carboxamid (udbytte 95%, smeltepunkt 279-290°C), 25 N,4-dimethyl-j3-carbolin-3-carboxamid (udbytte 86,5%, smeltepunkt 285-286°C) og N,N,4-trimethyl-j8-carbolin-3-carboxamid (udbytte 76,8%, smeltepunkt 251-254°C, 4-ethyl-Ø-carbolin-3-carboxamid, Ν' -ethyl -4-ethyl -j3-carbol in-3-carboxamid, 3® N'-methyl-4-n-propyl-jS-carbol in-3-carboxamid, Ν'-methyl-4-i sopropyl-β-carbolin-3-carboxamid, N'-methyl-4-n-butyl-Ø-carbolin-3-carboxamid, Ν',N'-dimethyl-4-phenyl-jS-carbol in-3-carboxamid, N' -ethyl -4-phenyl -jS-carbol in-3-carboxamid, 35 DK 168292 B1 4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxamid og Ν'-methyl-4-phenyl-jø-carbolin-3-carboxamid, 5 Eksempel 18 720 mg 6-F1uor-1,2,3,4-tetrahydro-^-carbolin-3-carboxyl syreethyl-ester og 130 mg tørt svovl opvarmes til kogning under nitrogen i 5 ml xylen. Efter afslutning af dehydrogeneringen (ca.20 timer, check 10 ved tyndt!agskromatografi), koncentreres opløsningen ved fordampning in vacuo, og resten kromatograferes på silicagel med chloroform: ethanol (95:5). Der opnås 300 mg 6-fluor-/S-carbolin-3-carboxyl-syreethylester med smeltepunkt på 284°C (sønderdeling). Efter reaktion med saltsyre, opnås hydrochloridet, som smelter ved 295°C under 15 sønderdeling.

Eksempel 19 400 mg 7-Ni tro-1,2,3,4-tetrahydro-/J-carboli n-3-carboxylsyreethyl- 20 ester opløses i 40 ml varm xylen, og efter tilsætningen af 400 mg palladium-carbon (10%), tilbagesvales i 30 timer. Katalysatoren frafiltreres ved sugning og udvaskes godt med varm xylen. Filtratet koncentreres in vacuo, og resten kromatograferes på silicagel med chloroform-ethanol (10:2). Der opnås 260 mg 7-nitro-jØ-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 321°C (sønderdeling).

Eksempel 20 2,58 g 5-Methyl-1,2,3,4-tetrahydro-^-carbolin-3-carboxylsyreethyl- 30 ester opløses i 40 ml absolut toluen, afkøles til 15°C, der sættes 2,72 g dichlordicyanobenzoquinon dertil, og det hele omrøres i 1 time ved denne temperatur. Blandingen fortyndes derefter med ethyl- acetat, ekstraheres adskillige gange ved rystning med fortyndet vandig ammoniak og derefter med mættet almindelig saltopløsning, 35 tørres over calciumsulfat og koncentreres in vacuo. Kromatografi på silicagel med en chloroform-ethanolgradient giver 1,56 g 5-methyl-jS-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester med et smeltepunkt på 221-223°C (sønderdeling).

Eksempel 21 36 DK 168292 B1

Analogt med eksempel 18 fremstilles ud fra 1,2,3,4-tetrahydro-Ø-carbolin-3-carboxyl syreestere, der er substitueret i A-ringen, føl-5 gende jS-carbolinderivater med den almene formel I: 8-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 80% af det teoretiske udbytte, smeltepunkt 230-233°C; 7- fIuor-/}-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester, 10 6-fluor-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 8- fluor-/6-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 5-cyan-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester, smeltepunkt 310° (sønderdeling); 5-chlor-£-carbolin-3-carboxylsyreethylester, *5 smeltepunkt 274° (sønderdeling); 7- chlor-£-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 8- chl or-/S-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 7- cyan-£-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 5- carbethoxy-/}-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 20 5-hydroxymethyl-£-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 8- methyl-jS-carboli n-3-carboxylsyreethylester, I smeltepunkt 230-233°C; ! 5-nitro-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester, s 6-cyan-j8-carboli n-3-carboxylsyreethylester, ί or i 6-methoxy-/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, smeltepunkt 235-238°C; 6- fluor-4-methyl-/J-carbol in-3-carboxylsyreethylester, smeltepunkt 292-298°C (sønderdeling); 5- chlor-6-methoxy-/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, smeltepunkt 282° (ethanol/hexan); I 4,6-dimethyl-j8-carbol in-3-carboxylsyreethylestef, smeltepunkt 192-197°C; 4-ethyl -6-methyl -/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 6- methyl-4-phenyl-/?-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 33 4-ethyl-6-fluor-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-fluor-4-propyl-Ø-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 6-fluor-4-phenyl -Ø-carbol in-3-carboxylsyreethylester.

Eksempel 22 37 DK 168292 B1 1 g 6-Brom-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes til 30 ml ethylenglycol, som er blevet mættet med methylamin, og blandingen 5 opvarmes i 4 timer under udelukkelse af fugt ved 130-140°C. Efter afkøling fortyndes blandingen med 70 ml vand, sugefiltreres og vaskes i rækkefølge med vand, methanol og ether. Filterkagen eks-traheres ved kogning i methanol og filteres medens varm. Efter koncentrering af filtratet ved inddampning, opnås 268 mg 6-brom-j8-10 carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid med et smeltepunkt >310°C i et udbytte på 30% .

Eksempel 23 15 Følgende N-methylamider fremstilles ifølge den fremgangsmåde, der er beskrevet i eksempel 22: 6-fluor-j8-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, udbytte: 30% af det teoretiske udbytte, smeltepunkt 20 275-285°C; 6-methoxy-/i-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 55%, smeltepunkt 210-215°C; 6 -n i tro-/3- carbol i n -3 - carboxyl syre - N-methyl amid, 45%, smeltepunkt 280°C (sønderdeling); 25 7-nitro-/}-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 20%, smeltepunkt >300°C (sønderdeling) og 8-methyl-/J-carbolin-3-carboxyl syre-N-methylamid, 72%, smeltepunkt 317-319°C; 30 6,8-dinitro-j8-carbolin-3-carboxylsyre-N-methylamid, 20%, smeltepunkt 300°C (sønderdeling).

Eksempel 24 35 450 mg ø-Carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes langsomt til 4,31 g brom, og blandingen omrøres i 20 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med 30 ml chloroform filtreres blandingen ved sugning og vaskes med chloroform. Filterkagen opvarmes tre gange med ethanol og filtreres ved sugning. Derefter isoleres 411 mg 6,8- DK 168292B1 38 dibrom-^-carbolin-3-carboxylsyreethylesterhydrobromid med et smeltepunkt >250°C.

Eksempel 25 5

Analogt med eksempel 24 fremstilles ud fra 4-alkyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylestere følgende forbindelser: 6.8- dibrom-4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 10 45%, 6.8- di brom-4-ethyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 62%, smeltepunkt 235-237°C,

Eksempel 26 15 0,5 g 4-Methyl-0-carbolin-3-carboxyl syreethyl ester (smeltepunkt 235-239°C) opløses i 25 ml chloroform og 1,7 ml pyri din, og der tilsættes dråbevis en opløsning af 1 ml brom i 21 ml chloroform ved 0°C. Efter henstand i 1 time under afkøling med is og efter fortyn-20 ding med 50 ml methylenchlorid ekstraheres blandingen ved vask med en natriumthiosulfatopløsning, fortyndet vandig ammoniakopløsning og vand. Efter tørring med natriumsulfat, frafiltrering og afdestille-ring af solventen in vacuo, opnås 6-brom-4-methyl-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester i et udbytte på 38%. Smeltepunkt 231-232°C 25 (fra acetone).

Eksempel 27

Analogt med eksempel 26 fremstilles 6-brom-8-methyl-/3-carbolin-3-30 carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 301-304°C (fra ethanol) i et udbytte på 87% ud fra 8-methyl-j3-carbolin-3-carboxylsyreethyl-ester.

Eksempel 28 35

Analogt med eksempel 27 fremstilles ud fra de tilsvarende Ø-carbo-1 in-3-carboxylsyreethylestere følgende forbindelser: 6-brom-/?-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 39 DK 168292 B1 47%, smeltepunkt 315°C (pyridin); 6-brom-4-ethyl-Ø-carboli n-3-carboxyl syreethylester, smeltepunkt 255-257°C; 6-brom-4-phenyl-/l-carbol i n-3-carboxyl syreethylester, 5 6-brom-7-methoxy-/}-carbol in-3-carboxyl syreethylester, smeltepunkt 265-268°C.

Eksempel 29 10 Analogt med eksempel 26 fremstilles ud fra 4-alkyl-Æ-carbolin- 3-carboxylsyremethylestere følgende forbindelser: 6-brom-4-methyl-jS-carbolin-3-carboxyl syremethylester, smeltepunkt 247-249°C (methanol); 15 6-brom-4-phenyl -/J-carbol in-3-carboxyl syremethyl ester.

Eksempel 30

Analogt med eksempel 26 fremstilles 6-brom-4-methyl-0-carbolin-3-20 carboxylsyre-n-propylester ud fra 4-methyl-j8-carbolin-3-carboxyl-syre-n-propylester.

Eksempel 31 25 1 g 4-Methyl-/l-carbolin-3-carboxylsyreethylester opløses i 120 ml chloroform mættet ved 0°C med chlorgas og omrøres i 3 timer under afkøling med is. Overskuddet af chlor og dele af chloroformen afdestilieres derefter under sugning in vacuo, det krystallinske præcipitat frafiltreres, suspenderes i 50 ml ethyl acetat og der 30 tilsættes vandig ammoniak (5%, 10 ml). Efter 10 minutter er det krystallinske produkt opløst. Efter separering åf de to faser og vask af den organiske fase med vand tørres resten med natriumsulfat, filtreres, og solventen afdestilieres in vacuo. Resten krystalliseres fra ethyl acetat. Der opnås 0,73 g 6-chlor-4-methyl-/J-carbolin-35 3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 225-228°C.

Eksempel 32 40 DK 168292 B1

Analogt med eksempel 31, fremstilles følgende forbindelser ud fra de tilsvarende Ø-carbolin-S-carboxylsyreethylestere: 5 6-chl or-jS-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 61%, smeltepunkt 270°C (pyridin); 6-chlor-4-ethyl-/?-carboli n-3-carboxyl syreethylester, 6-chlor-8-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 10 80%, smeltepunkt 300-303°C (methylenchlorid/ethylacetat); 6-chlor-4-phenyl-j8-carbolin-3-carboxylsyreethylester.

Eksempel 33 15 Analogt med eksempel 31, fremstilles ud fra 4-alkyl-0-carbolin-3-carboxylsyremethylestere følgende forbindelser: 6-chl or-4-methyl -/3-carbol i n-3-carboxyl syremethyl ester, 6-chlor-4-phenyl-/f-carbolin-3-carboxylsyremethylester.

20

Eksempel 34

Analogt med eksempel 31 fremstilles 6-chlor-4-phenyl-/i-carbolin- 3- carboxylsyre-n-propylester ud fra 4-phenyl-/J-carbol in-3-carboxyl -25 syre-n-propylester, og 6-chlor-4-methyl-/5-carbolin-3-carboxylsyre- isopropylester fremstilles ud fra 4-methyl-/f-carbolin-3-carboxyl-syre i sopropy1ester.

Eksempel 35 30

En opløsning af 0,6 g 6-brom-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxyl-syreet hyl ester, 2,8 g frisk fremstillet natri ummethyl at og 2 g kob-ber(I)iodid i 20 ml N-methylpyrrol idon opvarmes under argonbeskyttelsesgas i 16 timer ved 150-155°C. Efter afkøling udrøres blan-35 dingen i 100 ml iskoldt, semi-mættet natriumdihydrogenphosphatopløs-ning, det udfældede produkt frafiltreres, vaskes med vand og tørres. Efter rensning ved kromatografi på silicagel opnås 0,36 g 6-methoxy- 4- methyl-£-carbolin-3-carboxylsyremethylester med et smeltepunkt på 216-220°C (di isopropyl ether).

Eksempel 36 41 DK 168292 B1

Analogt med eksempel 35 fremstilles 6-methoxy-4-methyl-/?-carbo-1in-3-carboxylmethylester, 6-methoxy-4-ethyl-Ø-carbolin-3-carboxyl-5 syremethylester og 6-methoxy-4-phenyl-0-carbolin-3-carboxyl$yre-methylester ud fra de tilsvarende 4-substituerede 6-brom-Ø-car-bolin-3-carboxylsyremethylestere.

Eksempel 37 10

Ved alkalisk transforestring fremstilles de tilsvarende ethyl propyl- og isopropyl estere ud fra 3-carboxylsyremethylesterne. Følgende forbindelser opnås: 15 6-methoxy-4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 4-ethyl-6-methoxy-Ø-carbolin-3-carboxylsyre-n-propylester, 6-methoxy-4-phenyl -jS-carbolin-3-carboxylsyreethylester.

Eksempel 38 20

Analogt med eksempel 35 fremstilles følgende forbindelser ud fra de til svarende 6-brom-4-al kyl-/1-carboli n-3-carboxylsyreethylestere: 6-ethoxy-4-methyl-j8-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 25 6-ethoxy-4-ethyl-ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-ethoxy-4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester.

Eksempel 39 30 1 g ji-Carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes langsomt ved stuetem peratur til 20 ml koncentreret salpetersyre (65%). Efter endt tilsætning opvarmes blandingen til 70-75°C, hvorefter der dannes en klar opløsning. Efter ca. 30 minutter bliver opløsningen uklar.

Efter en total omrøringstid på 1,5 timer ved 70-75°C får opløsningen 35 lov til at afkøle, og sedimentet hældes på 100 g is. Efter sugefiltrering udføres omkrystallisering fra pyridin. 6-Nitro-£-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 320-325°C isoleres i et udbytte på 55%.

Eksempel 40 42 DK 168292 B1

Analogt med eksempel 39 opnås ved stuetemperatur 8-methyl-6-nitro-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 296°C 5 (sønderdeling) i et udbytte på 72% ud fra 8-methyl-ø-carbolin-3-car-boxylsyreethylester.

Eksempel 41 10 5,5 g Ø-Carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes til en blanding af 30 ml 100% salpetersyre og 0,3 ml koncentreret svovlsyre i løbet af 15 minutter ved 5°C under omrøring. Efter 1 time hældes den klare opløsning på masser af is, og den præcipiterede substans frafiltre-res under sugning. Filterresten omkrystalliseres fra varmt dimethyl-15 sul foxid og krystallisatet vaskes med alkohol og derefter med diethyl ether. Der opnås 3,7 g 6,8-dinitro-/?-carbolin-3-carboxylsyre-ethylester med et smeltepunkt på 341-345°C (sønderdeling).

Eksempel 42 20 285 mg 6-Nitro-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes til 5,8 g brom og omrøres i 2 dage ved stuetemperature. Blandingen fortyndes derefter med 15 ml chloroform og filtreres under sugning. Resten omkrystalliseres fra pyridin og kromatograferes på silicagel med 25 chloroform-methanol (9:1). Der opnås 65 mg 8-brom-6-nitro-/5-carbo-1 in-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 291-292°C.

Eksempel 43 30 3,2 g 4-Methyl-/l-carbolin-3-carboxylsyremethylester sættes i løbet af 10 minutter til en isafkølet blanding af 10 ml koncentreret salpetersyre og 5 ml rygende salpetersyre. Efter 2 timers afkøling med is udrøres reaktionsopløsningen i 150 ml isvand, gøres alkalisk (pH 10-11) med koncentreret vandig ammoniak under afkøling med is, 35 ekstraheres med ethyl acetat, vaskes indtil neutralitet med vand, tørres under anvendelse af natriumsulfat og filtreres, og solventen afdestilleres in vacuo. Råproduktet (3,42 g) krystalliseres fra acetone. Der opnås 2,28 g 4-methyl-6-nitro-^-carbolin-3-carboxylsyreethyl ester med et smeltepunkt på 272-275°C.

Eksempel 44 DK 168292 Bl 43

Analogt med eksempel 43 fremstilles følgende forbindelser ud fra de tilsvarende 4-substituerede /J-carbolin-3-carboxyl syreethylestere: 5 4-ethyl-6-ni tro-j8-carboli n-3-carboxylsyreethylester, smeltepunkt 274-282°C (sønderdeling); 6-nitro-4-propyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyrethylester, 6-nitro-4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 10

Eksempel 45 0,1 g 7-Nitro-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester suspenderes i 30 ml ethanol og hydrogeneres efter tilsætningen af 1 ml 5N saltsyre 15 ved normalt tryk under anvendelse af 25 mg platindioxid, indtil den teoretiske hydrogenmængde er blevet absorberet. Katalysatoren fra-filtreres og vaskes godt med varm ethanol. Filtratet behandles med aktiveret kul og koncentreres indtil, der indtræffer turbiditet. Efter afkøling opnås 95 mg 7-amino-j9-carbolin-3-carboxylsyreethyl-20 esterdihydrochlorid med et smeltepunkt på 270°C (sønderdeling).

Eksempel 46 1,02 g 4-Methyl-6-nitro-j9-carbolin-3-carboxylsyreethylester opløses 25 eller suspenderes i 30 ml ethanol og 6 ml tetrahydrofuran og hydrogeneres efter tilsætningen af 150 ml palladium-carbon (10%) ved 24°C og normalt tryk. I løbet af 3,5 timer absorberes 210 ml hydrogen. Opløsningen frafiltreres katalysatoren, og solventen afdestil-leres in vacuo. Råproduktet omkrystalliseres fra methanol-chloro-30 form. Der opnås 816 mg 6-amino-4-methyl-j3-carbolin-3-carboxylsyre-ethylester med et smeltepunkt på 225-238°C (sønderdeling).

Eksempel 47 35 Analogt med eksempel 46 fremstilles følgende 6-amino-forbindel ser ud fra de tilsvarende 6-nitro-ø-carbolin-3-carboxylsyreethylestere: 6-ami no-4-ethyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-4-propyl-Ø-carbolΐη-3-carboxylsyreethylester, 44 DK 168292 B1 6-amino-4-phenyl-£-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-amino-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester, smeltepunkt 224-227°C.

5 Eksempel 48 0,6 g 6-Amino-4-methyl-j8-carbolin-3-carboxylsyreethylester opløses i 6 ml pyridin og 1,5 ml eddikesyreanhydrid, og det hele omrøres i 16 timer ved stuetemperatur. Blandingen udrøres derefter i 30 ml isvand 10 og ekstraheres fuldstændigt med ethyl acetat. Ekstrakterne vaskes indtil neutralitet med en semi-mættet natriumchloridopløsning, tørres under anvendelse af natriumsulfat, filtreres, og solventen afdestilieres in vacuo. Resten (0,78 g) omkrystalliseres fra acetonedi isopropyl ether. Der opnås 0,49 g 6-acetamido-4-methyl-/?-carbo-*5 1 in-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 273-278°C .

Eksempel 49

Analogt med eksempel 48 fremstilles 6-formamido-4-methyl-^-car-20 bol i n-3-carboxyl syreethyl ester ud fra 0,45 g af den tilsvarende 6-aminoforbindelse i 5 ml pyridin med 1 ml myresyre og 2 ml eddikesyreanhydrid ved 0°C. Udbytte: 0,24 g; smeltepunkt 210-216°C, ethyl acetat.

25 Eksempel 50

Analogt med eksempel 48 fremstilles følgende 6-acetamido-forbin-delser ud fra de tilsvarende 6-aminoderivater: 50 6-acetamido-4-ethyl-/i-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 6-acetamido-4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyrethyl ester.

Eksempel 51 35 4 ml Di methyl formamid, 250 mg kobber( I) iodid og 160 mg 6-brom- j8-carbolin-3-carboxylsyreethylester sættes til en opløsning, der er fremstillet under argon, af 230 mg natrium i 3 ml absolut methanol, og det hele opvarmes i 6 timer ved 145°C. Opløsningen koncentreres derefter in vacuo, resten vaskes med vand, tørres og kromatograferes 45 DK 168292 B1 på silicagel mød chloroform-methanol (8:2). Der opnså 67 mg 6-methoxy-j3-carbolin-3-carboxylsyre-N,N-dimethylamid med et smeltepunkt på 195°C (sønderdeling).

5 Eksempel 52 1,81 g 6-Amino-4-methyl-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester suspenderes i 15 ml ethylenglycol, og under afkøling med is tilføres methylamin, indtil mætningspunktet er nået. Blandingen omrøres der-efter ved stuetemperatur i 16 timer, udrøres i 100 ml isvand, og produktet frafiltreres, tørres og omkrystalli seres fra ethanol-chloroform. Der opnås 1,42 g 6-amino-4-methyl-/J-carbolin-3-carboxyl-syre-N-methylamid med et smeltepunkt på 281-285°C.

15 Eksempel 53

Analogt med eksempel 52 fremstilles følgende N-methylamider ud fra de tilsvarende 4-substituerede 6-amino-/J-carbol i n-3-carboxyl syre-ethylestere: 20 6-amino-4-phenyl -/?-carbol i n-3-carboxyl syre-N-methylamid, 6-acetamido-4-methyl-j8-carbolin-3-carboxyl syre-N-methylamid.

Eksempel 54 25 0,3 g 6-Amino-4-methyl-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester suspenderes i 5 ml ethyl englycol, og efter tilsætningen af 3 ml di-methylamin opvarmes det hele i 22 timer ved 100°C. Efter afkøling udhældes blandingen i 30 ml isvand, ekstraheres med ethylacetat, vaskes med vand indtil neutralitet, tørres under anvendelse af natriumsulfat, filtreres, og solventen afdestilieres in vacuo. Råproduktet præcipiteres som et fint brunt pulver. Der opnås 0,2 g 6-amino-4-methyl-/8-carbolin-3-carboxylsyre-N,N-dimethylamid med et smeltepunkt på 235-245°C (sønderdeling).

35

Eksempel 55

Analogt med eksempel 48 fremstilles 6-acetamido-4-methyl-/f-car-bolin-3-carboxylsyre-N-methylamid ud fra 6-amino-4-methyl-j3-carbolin 46 DK 168292 B1 3-carboxylsyre-N-methylamid med eddikesyreanhydrid.

Eksempel 56 5 12 g jØ-Carbolin-3-carboxylsyremethylester suspenderes i 130 ml methanol, dertil tilsattes 130 ml 40% vandig methylamin, og det hele koges under tilbagesvaling i 2 timer. Efter afkøling sugefiltreres blandingen. Ved ekstraktion med 300 ml varm methanol og krystallisering fra dimethylformamid/hexan isoleres ^-carbolin-3-carboxyl-10 syre-N-methylamidet med et smeltepunkt på 264-266°C fra filterresten i et udbytte på 43%.

Eksempel 57 15 1 g 6-Brom-/i-carbolin-3-carboxylsyreethyl ester sættes til 30 ml ethylenglycol, som er blevet mættet med methylamin, og det hele I opvarmes i 4 timer ved 130-140°C under udelukkelse af fugt. Efter afkøling fortyndes blandingen med 70 ml vand, sugefiltreres og vaskes i rækkefælge med vand, methanol og ether. Filterkagen ekstra-2° heres ved kogning i methanol og filtreres varmt. Efter koncentrering ved inddampning af filtratet opnås 268 mg 6-brom-/J-carbolin-3-carbo-xylsyre-N-methylamid med et smeltepunkt >310°C.

Eksempel 58 25

Analogt med eksempel 56 opnås jS-carbolin-3-carboxylsyre-N-ethylamid med et smeltepunkt på 244-246°C (fra ethanol/hexan) i et udbytte på 42% ud fra 0,2 g ^-carbolin-3-carboxylsyremethylester med ethylamin.

Eksempel 59 5 ml 2 Molær vandig natriumnitritopløsning sættes dråbevis under intensiv afkøling med is til en suspension af 2,7 g 6-amino-4-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester i 15 ml 3N svovlsyre.

^ Efter 20 minutters forløb sættes diazoteringsopløsningen hurtigt dråbevis til en opløsning ved 60°C af 1,2 g kobber(I)cyanid i 8 ml 4,5 molær natriumcyanidopløsning. Efter opvarmning i 30 minutter ved 60°C får opløsningen lov til at henstå ved stuetemperatur i 2 timer og sugefiltreres derefter. Filtreringsresten ekstraheres ved kogning 47 DK 168292 B1 med methanol. De forenede filtrater koncentreres ved inddampning og kromatograferes på silicagel med chloroform/ethanol (95:5). Der opnås 6-cyan-4-methyl-j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 268-276°C (sønderdeling) i et udbytte på 25%.

5

Eksempel 60

Analogt med eksempel 59 opnås følgende 6-cyano-forbindel ser ud fra de tilsvarende 6-amino-Ø-carbolin-3-carboxyl syreethyl estere: 10 6-cyan-4-ethyl-Ø-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-cyan-4-phenyl-/9-carboli n-3-carboxylsyreethylester, 6-cyan-/?-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester.

15 Eksempel 61 2,81 g 6-Cyan-4-methyl-0-carbolin-3-carboxylsyreethylester opvarmes med 4,6 g kaliumhydroxid i 20 ml ethylenglycol i 16 timer ved 150°C. Efter afkøling til 0°C tilsættes 10 ml eddikeresyre dråbevis, 20 blandingen fortyndes med 100 ml vand, og efter mætning med natrium-chlorid ekstraheres den med ethylacetat. Ekstrakterne vaskes indtil neutralitet med en mættet opløsning af almindeligt salt, tørres under anvendelse af natriumsulfat, filtreres, og solventen afdestil-leres in vacuo. Råproduktet opløses i 30 ml 10% methanol i sk saltsyre 25 og koges i 5 timer under tilbagesvaling. Efter afdestillering af solventen in vacuo tilsættes 20 ml fortyndet vandig ammoniak, og blandingen ekstraheres med ethylacetat. Efter vask indtil neutralitet, tørring og afdestillering af solventen omkrystalliseres råproduktet fra di isopropyl ether. Der opnås 1,36 g 4-methyl-Ø-carbolin-30 3,6-dicarboxylsyredimethylester med et smeltepunkt på 199-204°C .

Eksempel 62

Analogt med eksempel 61 fremstilles følgende forbindelser ud fra de 35 tilsvarende 4-substituerede 6-cyan-i8-carbolin-3-carboxylsyreethyl- estere: 4-methyl-/J-carbolin-3,6-dicarboxylsyrediethylester, 4-ethyl -Ø-carbol i n-3,6-di carboxyl di methyl ester, 48 DK 168292 B1 4-phenyl-j3-carbolin-3,6-dicarboxylsyrediethylester, 4-phenyl-/J-carbolin-3,6-dicarboxyl syredimethylester.

Eksempel 63 5 1 mmol 6-Amino-^-carbolin-3-carboxylsyreethylester diazoteres ved 0°C i 2 ml 24% vandig brombrintesyre med 1 mmol natriumnitrit i 1 ml vand. Denne blanding sættes dråbevis til en opløsning af 40 mg kobber(I)bromid i 1 ml 48% vandig brombrintesyre ved stuetemperatur.

10 Efter afsluttet tilsætning opvarmes blandingen til 80°C, og temperaturen forøges til 100°C, indtil nitrogenudvikling er ophørt. 10 ml vand tilsættes derefter, og der udføres filtrering ved sugning. Resten omrøres med ammoniak og filtreres ved sugning. Filtreringsresten ekstraheres derefter ved kogning med ethanol og koncentreres i 15 ved inddampning. Ved kromatografi på silicagel med et eluerings- i j middel bestående af 9 dele chloroform og 1 del ethanol opnås 6-brom- j3-carbolin-3-carboxylsyreethylester med et smeltepunkt på 308-313°C i et udbytte på 35%.

i 20 Eksempel 64 i ! I 10,0 mg /J-Carbolin-3-carboxylsyremonomethylamid microniseres (males fint) og blandes homogent med: 25 80,0 mg lactose (DAB (German Pharmacopoeia 7); USP XVII), 29,6 mg mikrocrystallinsk cellulose, og 0,4 mg magnesiumstearat (USP XVII), ! og presses til tabletter uden forudgående granulering. Disse 30 tabletter har en vægt på 120 mg med en diameter på ca. 7 mm og en tykkelse på 2,7-2,9 mm.

Eksempel 65 35 50,0 mg Ø-Carbolin-3-carboxylsyremonomethylamid (microniseret, partikelstørrelse 2-8 øm) blandes homogent med 150 mg lactose (USP XVII) og fyldes i hård-gelatinkapsler (6 x 16mm).

DK 168292 Bl

Eksempel 66 49 10 g Fintmalet 4-methyl-/l· carbol i n-3 - carboxy 1 sy reethy lester opløses i 200 g polyhydroxyethoxyleret castorolie ved 50°C, og opløsningen 5 fyldes op til 1 liter med en 0,25 % vandig opløsning af natrium-chlorid. Opløsningen filtreres ved hjælp af et membranfilter til aseptisk tilstand og fyldes i ampuller til intravenøs indgivelse.

Eksempel 67 10 2,5 g 5-Cyan-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester opløses i 200 g polyoxyethylen-sorbitanmonooleat ved 60°C, og opløsningen fyldes op til 1 liter med en 0,25% opløsning af natriumchlorid i vand, filtreres og fyldes i ampuller under aseptiske forhold.

15 20 25 30 35

Claims (11)

1. 50 DK 168292 B1 Patentkrav. Anal ogi fremgangsmåde til fremstilling af ø-carbolin-3-carboxyl-syrederivater med den almene formel I: 5 RA 7 A B I C I (I) 1° l9 I R H hvor:
2. 15 R° betegner en alkoxygruppe, der eventuelt er substitueret med ét eller flere halogenatomer, eller NR^R12, hvor R** og R12 er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom, en I al kyl-, aryl-, aralkyl- eller cycloal kyl gruppe, der eventuelt er substitueret med en hydroxy-, carboxamid- eller 20 alkoxycarbonylgruppe; 4 R betegner et hydrogenatom, en al kylgruppe indeholdende op til 10 carbonatomer eller en phenylgruppe; 25 ra betegner H, F, Cl, Br, CN, NO,, NR13R14, NHCOR13, C00R13 eller 13 13 14 * OR , hvor R og R hver betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe indeholdende op til 6 carbonatomer, og hvert molekyle eventuelt indeholder to eller flere identiske eller A forskellige R 'er; og 30 9 R betegner et hydrogenatom eller en alkoxycarbonylgruppe; forudsat dog: 35 at R** og R*2 ikke begge kan betegne et hydrogenatom, når R4, A 9 R og R hver betegner et hydrogenatom, og
3. 4 A 9 3 at R , R og R ikke alle kan betegne et hydrogenatom, når R betegner 0CH3, 51 DK 168292 B1 eller hvor R3, R4, R9 og RA har sådanne betydninger, at de sammen med den tilknyttede j3-carbolin-3-carboxylsyre danner derivaterne: 5 2 '-propenyl -/3-carbol in-3-carboxyl at, S-hydroxymethyl-ZJ-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 5- methyl-£-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 8-methyl -|3-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 6- methyl-4-ethyl-/l-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 10 6-methyl-4-phenyl-/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 8-methyl-jS-carbol i n-3-carboxyl syre-N-methyl amid, 8-methyl-6-chlor-/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester, 8-methyl-6-nitro-jS-carbolin-3-carboxylsyreethylester, eller 4,6-dimethyl-/3-carbol in-3-carboxylsyreethylester, 15 kendetegnet ved, a) at en forbindelse med den almene formel II: 20 ^ ^ I o 8 3 ttA ~ A I B c l (II) ^ N c
4. 25 I, h2 E
5. 3. A 9 hvor R , R , R og R har de indledningsvis angivne betydninger, dehydrogeneres på i og for sig kendt måde til dannelse af forbindelsen (I), hvori R3, R4, RA og R9 har de indledningsvis 30 angivne betydninger, b) at en forbindelse med den almene formel III: 35 DK 168292 B1 52 R4 I 0 5 f ,1-f C - OH RA ~ A I B - j C (III) R9 H 10 hvor R4, R^ og R9 har de indledningsvis angivne betydninger, 3' 3' forestres med en alkohol med formlen R OH, hvor R betegner al kyl, der eventuelt er substitueret med ét eller flere halogenatomer, til dannelse af forbindelsen (I), hvor *5 R4, R^ og R9 har den indledningsvis angivne betydning og R^ 3' betegner den til R svarende alkoxygruppe, og eventuelt b.l) at den under b) dannede forbindelse (I) med de dér angivne betydninger af R4, R^, R9 og R^ transforestres med en 20 alkohol med formlen R^ , hvor R^ betegner al kyl, der eventuelt er substitueret med ét eller flere halogenatomer,
6. 4 A 9 til dannelse af forbindelsen (I), hvor R , R og R betegner det samme og R betegner den til R svarende alkoxygruppe, I 25 cj at en ester, f.eks. en al kyl ester, af en forbindelse med den I almene formel III: i i R4 30 j fe p c “ 0H RA--A I B ,| C (III)
7. 35 R9 ’ H
8. 4 A 9 hvor R , R og R har den indledningsvis angivne betydning, omsættes med en amin med formlen IV: 5 R11 53 DK 168292 B1 / HN (IV) \ 12 R1^ 11 12 hvor R og R har den indledningsvis angivne betydning, Λ til dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvor R , R^ og R® betyder det samme, og R3 betegner NR^R*2, og 12 og R har samme betydning som i (IV), 10 d) at en forbindelse med den almene formel III: R4 15 1! (6 c " 0H ra a B I c (III) Μ,ύ BT H 20
9. 4 A 9 hvor R , R og R har den indledningsvis angivne betydning, eller et reaktivt funktionelt derivat heraf omsættes med en amin med formlen IV: 25 11 R11 / HN (IV) \ i? R“ 11 12 30 hvor R og R c har den indledningsvis angivne betydning, til dannelse af forbindelsen (I), hvor R4, og R^ betyder det samme, og R3 betegner NR^R12, og R11 og R12 har samme betydning som i (IV), 35 e) at en forbindelse med den almene formel I': 54 DK 168292 B1 R4 i ° 5. r^i — c - r3 3 δ' II R A B C I \ (Γ) ^ 9 R H 10 3 4 9 hvor R , R og R har den indledningsvis angivne Λ ' betydning, og R kan have samme betydning som det dér n angivne R , halogeneres med fluor, chlor eller brom til 3 4 dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvor R , R , RA og R9 har de indledningsvis angivne betydninger, idet A dog R omfatter mindst ét yderligere fluor-, chlor- eller δ ' bromatom i forhold til R , og eventuelt, e.l) at den under d) dannede forbindelse med formlen (I) 2° alkoxyleres med en alkohol R*30H med op til 6 carbonatomer til dannelse af den til halogensubstitutionen og den benyttede alkohol svarende alkoxyforbindelse med formlen
10. 3. A 9 (I), men ellers med samme betydning af R , R , R og R , 25 f) at en forbindelse med den almene formel I": R4 I 0 11 , R “~r7 a Jl b J| c I a") Vt R H 35 hvor R3, R4 og R9 har den indledningsvis angivne betydning, og R kan have samme betydning som det dér angivne RA, nitreres på i og for sig kendt måde til dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvor R , R , RA og R9 har de indledningsvis angivne betydninger, idet 55 DK 168292 B1 dog RA omfatter mindst én yderligere ΝΟ,-gruppe i forhold A" c til R , og eventuelt f.l) at den under f) dannede forbindelse (I) med mindst én
11. 5 NOg-substituent i A-ringen reduceres på i og for sig kendt måde til dannelse af den til NOg-substitutionen svarende aminoforbindelse med formlen (I) men ellers •a δ a 9 med samme betydning af R , R , R og R , og eventuelt 10 f.2) at den under f.l) dannede forbindelse (I) med mindst én aminosubstituent i A-ringen omdannes til den tilsvarende nitrilforbindelse, f.eks. ved diazotering ved en Sandmeyerreaktion under anvendelse af Cu(I)- cyanid, og eventuelt 15 f.3) at den under f.2) dannede nitrilforbindelse hydrolyseres til dannelse af den til nitril forbindel sen svarende carboxyl syreforbindelse og eventuelt en carboxyl syregruppe i 3-stillingen, såfremt udgangs-20 forbindelsen dér har en estergruppe, og eventuelt f.4) at den under f.3) dannede carboxyl syreforbindelse 13' forestres med en alkohol med formlen R OH, hvor R betegner al kyl med op til 6 carbonatomer, eller 25 acyleres med et carboxylsyreanhydrid af carboxylsyrer med op til 6 carbonatomer til dannelse af den tilsva- 3 rende al kylesterforbindelse med formlen (I), hvor R , R4, RA og R9 har de indledningsvis angivne betydninger, idet dog RA omfatter mindst én C00R13-gruppe, 13 30 hvor R betegner en al kylgruppe med op til 6 carbon atomer, eller eventuelt f.5) at den under f.l) dannede aminoforbindelse med formlen (I) omsættes med et alkalimetalsalt af fluor, 35 chlor eller brom til dannelse af den til aminoforbin- delsen og det benyttede salt svarende halogenforbindelse med formlen (I) men ellers med samme betydning af R3, R4, RA og R9, eller eventuelt 56 DK 168292 B1 f. 6) at den under f.l) dannede aminoforbindelse med formlen (I) acyleres med et acyleringsmiddel til dannelse af den til aminoforbindel sen og det benyttede acyleringsmiddel svarende acylamidfor- 5 bi ndel se med formlen (I), hvor RA i stedet for udgangsaminogruppen eller -grupperne omfatter 13 13 NHCOR , hvor R betegner en al kyl gruppe med op til 3 6 carbonatomer, men ellers med samme betydning af R , R4, RA og R9, og 10 g. l) at j3-carbolin-3-carboxylsyre omsættes med 2-propenol til dannelse af 2'-propenyl-0-carbolin-3-carboxylat, g.2) at 5-hydroxymethyl-l,2,3,4-tetrahydro-j3-carbolin-3- 15 carboxylsyreethylester dehydrogeneres til dannelse af 5- hydroxymethyl-/?-carbolin-3-carboxylsyreethylester, i I g.3) at 5-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-0-carbolin-3-carboxyl- syreethylester dehydrogeneres til dannelse af 20 5-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, g.4) at 8-methyl-l,2,3,4-tetrahyro-j8-carbolin-3-carboxyl- syreethylester dehydrogeneres til dannelse af 8-methyl -/J-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester, 25 g.5) at 6-methyl-4-ethyl-1,2,3,4-tetrahydro-/l-carbolin-3- carboxylsyreethylester dehydrogeneres til dannelse af 6- methyl-4-ethyl-/3-carbolin-3-carboxylsyreethylester, 30 g.6) at 6-methyl-4-phenyl-1,2,3,4-tetrahydro-/i-carbolin-3- carboxylsyreethylester dehydrogeneres til dannelse af 6-methyl-4-phenyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethyl-ester, 35 g.7} at 8-methyl-Ø-carbolin-3-carboxylsyreethylester omsættes med methylamin til dannelse af 8-methyl -j3-carbol in-3-carboxyl syre-N-methyl amid, g.8} at 8-methyl -/J-carbol in-3-carboxyl syreethyl ester 57 DK 168292 B1 omsættes med chl or til dannelse af 6-chlor-8-methyl-/J-carbolin-3-carboxylsyreethylester, g.9) at 8-methyl-/8-carbolin-3-carboxylsyreethylester 5 nitreres til dannelse af 8-methyl-6-nitro-£-carbolin- 3-carboxylsyreethylester, og g.10) at 4,6-dimethyl-l,2,3,4-tetrahydro-0-carbolin-3-car- boxylsyreethylester dehydrogeneres til dannelse af 10 4,6-dimethyl -j8-carbol i n-3-carboxyl syreethyl ester. 15 20 25 30 35