DK159376B - Fremgangsmaade til fremstilling af et stabilt, fast, vandoploeseligt praeparat til rekonstituering med vand eller en vandig baerer som en stabil oploesning af 4'-(9-acridinylamino)methan-sulfon-m-anisid - Google Patents

Description

i

DK 159376 B

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling.af et stabilt, fast, vandopløseligt præparat til rekonstituering med.vand eller en vandig bærer som en stabil opløsning af 4'-(9-acridinylamino)methansulfon-m-anisid kaldet m-AMSA, hvilket præparat 5 besidder den kendte frie bases fordelagtige anti-tumor-egenskaber og endvidere har uventet "høj vandopløselighed, hvilket muliggør frem-_ stilling af nyttige kliniske doseringsformer til intravenøs-administrering.

Acridin-derivatet m-AMSA [4'-(9-acridinylamino)methansulfon-m-10 anisid] er beskrevet af Cain, et al. i Europ. J. Cancer 10:539-549 (1974) som i besiddelse af væsentlig anti-tumor-aktivitet i animalske tumor-systemer. Sidan da har denne forbindelse været underkastet klinisk vurdering med meget lovende initiale resultater.

Når et anti-tumor-middel såsom m-AMSA anvendes til human klinisk 15 brug, er det erkendt, at midlets opløselighed ofte er den kontrollerende faktor ved afgørelsen af administreringsvej og doseringsformer. Fx. kan et vandopløseligt stof i almindelighed administreres intravenøst, hvorimod et vanduopløseligt materiale er begrænset til andre former for parenteral administrering såsom intramuskulær og subkutan. Et terapeu-20 tisk middel med vandopløselighed letter også fremstilling af orale og non-intravenøse parenterale doseringsformer til human administrering.

Det er derfor afgørende fordelagtigt, såfremt et terapeutisk middel er vandopløseligt, især når man betragter, at den mest direkte vej til opnåelse af terapeutiske blodniveauer af et lægemiddel i det menneske-25 lige legeme er ved intravenøs administrering.

Den fri baseform af m-AMSA har meget begrænset opløselighed i vand og kan derfor ikke anvendes som en doseringsform til intravenøs administrering. Forsøg har været gjort på at fremstille syreadditionssalte for at løse dette opløselighedsproblem, men de rapporterede monohydro-30 chlorid- og monomethansulfonatsaite viste sig også at være util-stræk- — — — - keligt vandopløselige til. klinisk brug. Præparatet,-som for tiden er i klinisk brug, består af to sterile væsker, som kombineres lige inden brug. En opløsning af m-AMSA i vandfri Ν,Ν-dimethylacetamid er indeholdt i en ampul. Et separat hætteglas indeholder en vandig L(+)-mælkesyre-35 opløsning til brug som et fortyndingsmiddel. Efter blanding administreres den resulterende m-AMSA-opløsning ved. i.v. infusion.

Selvom det nuværende kliniske præparat tilvejebringer en intravenøs "doseringsform, lider det under adskillige ulemper. Udover de 2

DK 159376 B

indlysende vanskeligheder ved at fremstille og administrere doserings-formen, indeholder den dimethylacetamid som et vehikel. Det er rapporteret, at dimethylacetamid viser forskellige.toxiske symptomer i dyr og' derfor kan være uacceptabelt eller uønsket som et farmaceutisk·vehikel.

5 Det er således formålet med den foreliggende opfindelse at tilveje bringe vandopløselige, stabile, terapeutisk acceptable former af m-AMSA, - som kan administreres intravenøst (såvel som ad andre veje) og som ikke indeholder eller kræver dimethylacetamid som et farmaceutisk vehikel.

Det har nu overraskende vist sig, at stabile, faste, vandopløselige 10 præparater til rekonstituering med vand eller en vandig bærer som stabile opløsninger af m-AMSA, kan opnås ved en fremgangsmåde, som er ejendommelig ved, at man fremstiller en blanding af m-AMSA og mælkesyre som opløsel ighedsfremmende bestanddel, med et molært forhold mellem mælkesyre og m-AMSA fra ca. 1,5:1 til ca. 4:1, hvilken blanding fremstilles 15 ved, at man a) blander m-AMSA med D(-)-mælkesyre eller L(+)-mælkesyre i et forhold på ca. 1,5 til ca. 4 mol mælkesyre pr. mol m-AMSA, eller b) danner en vandig opløsning af m-AMSA og mælkesyre som opløselig-hedsfremmende bestanddel, idet det molære forhold mellem mælkesyren og 20 m-AMSA er fra ca. 1,5:1 til ca. 4:1, og frysetørrer den således fremstillede vandige opløsning.

Mange konventionelle farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af m-AMSA er kun lidt opløselige i vand og er således uegnede til fremstilling af vandige intravenøse opløsninger. Dette er indlysende dels fra 25 litteraturreferencer til hydrochlorid- og methansulfonatsaltene og dels fra opløselighedsforsøg, som i forbindelse med den foreliggende opfindelse er udført på salte såsom lævulinatet, citratet og laktobionatet (alle disse salte er opløselige ved en koncentration på <5 mg/ml).

Ved undersøgelsen af opløselighedsegenskaber af m-AMSA-syreaddi-30 tionssalte blev der-fremstillet det krystallinske L(+)-monol-aktatsalt-af — - m-AMSA (udkrystallisecet fra ethanol), og det viste sig også utilstræk keligt vandopløseligt ved stuetemperatur til at kunne tilvejebringe en acceptabel vandig opløsning til intravenøs administrering. Det har imidlertid overraskende og uventet vist sig, at en fast doseringsform inde-35 holdende en blanding af ca. et mol m-AMSA-base per 1,5 til 4 mol mælkesyre besidder de højst ønskværdige opløsel igheds-, rekonstituerings- og stabilitetsegenskaber, der er nødvendige ved klinisk anvendelse.

De ove“nfor beskrevne faste præparater kan anvendes i form af enten 3 DK 159376 B .

et tør-fyldt (blanding af tørre komponenter) eller lyofiliseret produkt.

Den faste doseringsform kan bekvemt og hurtigt rekonstitueres med vand eller en steril vandig vehikel til tilvejebringelse af i det mjndste en " . . _ 5 mg/ml sand opløsning af m-AMSA med fremragende stabilitetsegenskaber.

5 Fremstilling ifølge opfindelsen af de vandopløselige præparater som en tør-fyldt blanding kan udføres ved simpel blanding af de passende udgangsmaterialer i et passende forhold. Således fremstilles m-AMSA/-mælkesyre-præparatet ved at blande m-AMSA-base og D(-)- eller L(+)-mælkesyre i et forhold på 1,5 til 4 mol mælkesyre per mol m-AMSA. En 10 foretrukket udførelsesform omfatter en blanding af 1,5 til 2,5 mol mælkesyre per mol m-AMSA.

Fremstilling af de vandopløselige præparater som en lyofiliseret blanding kan gennemføres ved at underkaste en vandig opløsning af de passende udgangsmaterialer i et passende forhold en standard lyofilise-15 ringsproces. Således fremstilles det lyofili serede m-AMSA/mælkesyre-produkt ved dannelse af en vandig opløsning af m-AMSA og mælkesyre (D(-)-, L(+)- eller DL-mælkesyre) i et forhold på fra 1,5 til 4 (fortrinsvis 1,5 til 2,5) mol mælkesyre per mol m-AMSA base og efterfølgende lyofilisering af denne vandige opløsning til opnåelse af det 20 ønskede faste præparat. Før lyofili seringstrinet filtreres den vandige opløsning fortrinsvis til fjernelse af eventuelle uopløselige urenheder.

Der kan også tilsættes konventionelle tilsætningsstoffer såsom mannitol for at lette opløsning af det lyofili serede produkt. Lyofili sering kan gennemføres i konventionelle laboratorie- eller industri-lyofilisatorer 25 ifølge for fagmanden velkendte metoder.

Til fremstilling af enheds-doseringsformer af de foreliggende præparater kan m-AMSA-basen anvendes i en hvilken som helst terapeutisk effektiv dosis. Der foreslås et doseringsområde for m-AMSA-base i en enheds-doseringsform fra 20-200 mg.

30” De tør-fyldte“og lyofili serede præparater som tilvejebringes ifølge ~ opfindelsen udviser i det væsentlige de samme anti-tumor-egenskaber som de kendte, nu klinisk anvendte m-AMSA-former. Som følge af deres høje vandopløselighed kan de imidlertid anvendes til fremstilling af doseringsformer til intravenøs administrering, som ikke indeholder et 35 uønsket farmaceutisk vehikel såsom dimethylacetamid. Præparaterne kan anvendes til fremstilling af et enkelt hættegias-tørfyldnings-produkt “eller lyofiliseret produkt til rekonstituering med sterilt vand eller en steril vandig vehikel som en parenteral doseringsform.

4

DK 159376 B

De omhandlede præparater kan anvendes til fremstilling af orale eller non-intravenøse parenterale doseringsformer samt det foretrukne '-intravenøst injicerbare produkt. Præparaterne har acceptabel stabilijfcet . både i fast form og i vandig opløsning til at tillade administrering af 5 en effektiv dosis af m-AMSA i et relativt lille volumen parenteral opløsning, hvilket således muliggør bolus i.v. injektioner.

Ved behandlingen af tumorer i pattedyr eller mennesker kan præparaterne administreres enten oralt eller parenteralt, men fortrinsvis parenteralt, i doseringer (indstillet efter mængden af m-AMSA-base akti-10 vitet) og i.h.t. forskrifter, som tidligere er beskrevet i litteraturen.

En specielt foretrukket doseringsform er en rekonstitueret vandig opløsning med 5 mg/ml m-AMSA-aktivitet.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i de følgende eksempler.

15

Eksempel 1

Lyofilisering af m-AMSA og L(+)-mælkesyre m-AMSA-base (100 mg) og L(+)-mælkesyre (50,33 mg) opløses i 10 ml vand. Den resulterende opløsning filtreres gennem et 0,22 μ filter til 20 klaring. Filtratet sættes dernæst til passende flintglashætteglas (fx. 5 ml opløsning per hætteglas). Hættegi assene tilproppes delvis og underkastes lyofilisering ved de efterfølgende parametre: for-frysning ved -55°C, frysning ved -50°C i 2 timer, 25 sublimering ved -40°C i ca. 68 timer ved et tryk på ca. 5,3 Pa, tørring ved +30°C i ca. 48 timer.

Hætteglassene tilproppes så under vakuum eller nitrogenatmosfære og forsegles.

Det lyofiliserede præparat kan rekonstitueres med vand til opnåelse 30 af (ved stuetemperatur) tndet-mindste en 5 mg/ml opløsning med m-AMSA-aktTvitet. Rekonstitueringstiden er ca. 3 minutter. Lyofiliserede hætteglas blev fundet at udvise acceptabel stabilitet efter én måneds opbevaring ved 37°C og 56°C.

35 Eksempel 2

Lyofiliserinq af m-AMSA og L(+)-mælkesyre in-AMSA-base (150 mg) opslæmmedes i 20 ml sterilt vand. Der tilsattes to ækvivalenter L(+)-mælkesyre (75 mg) og der opnåedes en komplet 5

DK 159376 B

opløsning. Opløsningen filtreredes gennem et 0,22 μ Millipore-filter.

' 3

Tre 5 ml portioner lyofili seredes i 17,5 cm flintglasflasker i 24 timer på en laboratorie-lyofilisator til opnåelse af et fast produkt. Produktet kunne rekonstitueres med vand til 7,5 og 5 mg/ml m-AMSA-aktivitet 5 opløsninger, som forblev klare i mindst 24 timer.

Eksempel 3 _ Tør-fyldte blandinger af m-AMSA og L(+)-mælkesyre m-AMSA-base (100 ml) og L(+)-mælkesyre (47 mg, 2 ækvivalenter) 3 10 blandedes i et 50 cm flintglas-hættegias.

Til dette tør-fyldte produkt sattes 19 ml sterilt vand og en 5 mg/ml opløsning af m-AMSA-aktivitet opnåedes efter 1-3 minutters rystning ved 16,5°C. Opløsningen forblev klar i mindst 24 timer.

15 Eksempel 4

Lyofilisering af m-AMSA og DL-mælkesyre m-AMSA-base (150 mg) opslæmmedes i 16,5 ml sterilt vand ved 18°C.

Der tilsattes 3,5 ml af en 20% DL-mælkesyreopløsning (70 mg DL-mælke-syre, to ækvivalenter) under omrøring. Blandingen omrørtes i 10 minutter 20 til opnåelse af en opløsning med en pH-værdi på 3,9. Opløsningen passeredes gennem et 0,22 μ Millipore-filter. 1 ml portioner af den filtrerede opløsning sattes til 8,5 ml flintgi as-hættegi as og lyofili seredes på laboratorie-lyofilisatoren i 24 timer.

Det lyofiliserede produkt rekonstitueredes med sterilt vand til 25 opnåelse af 7,5 mg/ml opløsning af m-AMSA-aktivitet, som forblev klar i mindst 24 timer ved stuetemperatur.

Alternativt kan der anvendes en blanding af 35 mg L(+)-mælkesyre og 35 mg D(-)-mælkesyre.

30 Eksempel 5 Tør-fyldt~blånding af m-AMSA og D(-)-mælkesyre — _

Der fremstilledes en blanding af de følgende ingredienser: m-AMSA-base 100 mg D(-)-mælkesyre (1,5 ækvivalenter) 35 mg 35

DK 159376 B

6

Eksempel 6

Lyofilisering af m-AMSA og DM -mælkesyre

Der fremstilledes et lyofiliseret produkt af de følgende~præparater under anvendelse af den almene fremgangsmåde ifølge eksempel 2.

5 m-AMSA-base 150 mg D(-)-mælkesyre (2 ækvivalenter) 75 mg. -

Claims (5)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af et stabilt fast vandopløseligt præparat til rekonstituering med vand eller en vandig bærer, som en stabil opløsning af 4'-(9-acridinylamino)methansulfon-m-anisid KENDE-

5 TEGNET ved, AT man fremstiller en blanding af 4'-(9-a"cridinylamino)-methansulfon-m-anisid ojmælkesyré som opløsel ighedsfremmende bestand-_ del, med et molært forhold mellem mælkesyre og 4'-(9-acridiny1amino)-methansulfon-m-anisid fra ca. 1,5:1 til ca. 4:1, hvilken blanding fremstilles ved, at man 10 a) blander 4,-(9-acridinylamino)methansulfon-m-anisid med D(-)- mælkesyre eller L(+)-mælkesyre i et forhold på ca. 1,5 til ca. 4 mol mælkesyre pr. mol 4'-(9-acridinylamino)methansulfon-m-anisid eller b) danner en vandig opløsning af 4'-(9-acridinylamino)methan-sulfon-m-anisid og mælkesyre, som opløslighedsfremmende bestanddel, idet 15 det molære forhold mellem mælkesyren og 4,-(9-acridinylamino)- methansulfon-m-anisid er fra ca. 1,5:1 til ca. 4:1 og frysetørrer den således fremstillede vandige opløsning.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 KENDETEGNET ved, AT det molære forhold mellem mælkesyre og 4'-(9-acridinylamino)methansulfon-m-anisid er 20 fra 1,5:1 til ca. 2,5:1.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2 KENDETEGNET ved, AT mælkesyren er L(+)-mælkesyre.

4. Fremgangsmåde ifølge krav lb eller 2 KENDETEGNET ved, AT mælkesyren er DL-mælkesyre.

5. Fremgangsmåde ifølge krav lb eller 2 KENDETEGNET ved, AT den vandige opløsning filtreres før frysetørring. 30 _ - . — 35