FI70793C - Foerfarande foer framstaellning av en stabil 4'-(9-akridinylamino)metansulfon -m-anisidin(m-amsa)-komposition - Google Patents

Description

ο Π O 7 , ^ o

Menetelmä stabiilin 4'-(9-akridinyyliamino)metaanisulfoni-m—anisidiini (m—AMSA) —koostumuksen valmistamiseksi

Keksintö koskee menetelmää uuden stabiilin 4'-(9-akridinyyliamino) metaaanisulfoni-m-anisidiini(m-AMSA)-koostumuk-5 sen valmistmiseksi. Menetelmällä valmistetulla m-AMSA-koos-tumuksella on yllättävän suuri liukoisuus veteen ja mahdollistaa siten suonensisäistä antoa varten tarvittavien hyödyllisten kliinisten annostusmuotojen valmistamisen.

Akridiinijohdannaisella m-AMSA (4'-9-akridinyyliamino 10 metaanisulfon-m-anisidiini) on ilmoitettu (Cain, et. ai.

Europ. J. Cancer 10:539-549 (1974)) olevan merkittävä anti-tuumoriaktiivisuus eläinten kasvannaissysteemeissä. Tämä yhdiste on ollut kliinisten tutkimusten kohteena ja alustavat tulokset ovat olleet lupaavia.

15 Kun m-AMSA:n tapaista antituumorlainetta käytetään ihmisellä kliinisessä tarkoituksessa, on havaittu että aineen liukoisuus on usein määräävä tekijä päätettäessä annos-tustietä ja annostusmuotoja. Vesiliukoinen aine voidaan esimerkiksi yleensä antaa suonensisäisesti, kun taas veteen-20 liukenemattoman aineen kysymyksessä ollessa joudutaan rajoittumaan muihin parenteraalisiin antomuotoihin, kuten lihakseen ja ihonalaisesti antoon. Vesiliukoinen terapeuttinen aine mahdollistaa myös suun kautta nautittavien ja ei-suonen-sisäisten parenteraalisten annosmuotojen valmistuksen ihmis-25 käyttöön. Täten on epäilemättä hyödyllistä, jos terpeuttinen aine on vesiliukoinen, erityisesti kun huomioidaan, että suorin tapa päästä lääkkeen terapeuttisiin pitoisuuksiin veressä ihmiselimistössä on suonensisäinen anto.

m-AMSA:n vapaalla emäsmuodolla on hyvin rajoitettu ve-30 siliukoisuus, eikä sitä tästä johtuen voida antaa suonensisäisesti. On yritetty valmistaa happosuoloja tämän liukoi-suusongelman ratkaisemiseksi, mutta ilmoitettujen monohydro-kloridi- ja monometaanisulfonaattisuolojen vesiliukoisuus on myös osoittautunut riittämättömäksi, jotta ne soveltuisivat 35 kliiniseen käyttöön. Nykyisin kliinisessä käytössä oleva valmiste koostuu kahdesta steriilistä nesteestä, jotka yh- 2. t 'j f s Ό distetään juuri ennen käyttöä. Liuos, jossa on m-AMSA:ta vedettömässä N,N-dimetylasetamidissa on sisällytetty ampulliin. Erillinen pullo sisältää laimentimena käytettävää L(+)-maitohapon vesiliuosta. Sekoittamalla aikaansaatu 5 m-AMSA-liuos annetaan laskimoruiskeena.

Vaikkakin nykyisin käytetty kliininen valmiste voidaan antaa suonensisäisesti, on sillä useita haittapuolia.

Sen lisäksi, että sen valmistuksessa ja annossa on ilmeisiä vaikeuksia, se sisältää dimetylasetamidia liuottimena. Dime-10 tylasetamidin on todettu aiheuttavan erilaisia toksisuusoi-reita eläimillä ja se voi osoittautua sopimattomaksi tai ei-toivotuksi farmaseuttisena liuottimena.

Tämän keksinnön kohteena on menetelmä stabiilin, kiinteän, vesiliukoisen koostumuksen valmistamiseksi, joka koos-15 tumus veden tai vesipitoisen väliaineen kanssa kykenee muodostamaan stabiilin 4'-(8-akridinyyliamino)-metaanisulfoni-m-anisidiini (m-AMSA) -liuoksen, jonka m-AMSA-aktiivisuus on 5-7,5 mg/1 ja jota voidaan antaa suonensisäisesti (kuten myös muita teitä) ja joka ei sisällä tai vaadi dimetylasetami-20 dia farmaseuttisena liuottimena. Menetelmälle on tunnusomaista, että m-AMSA sekoitetaan D-(-)-maitohapon tai L-(+)-maitohapon kanssa, jolloin käytetään 1,5-4 moolia maitohappoa moolia kohti m-AMSA:ta, tai muodostetaan m-AMSA:n ja maitohapon vesipitoinen liuos, jolloin maitohapon ja m-AMSA:n 25 välinen moolisuhde on 1,5:1-4:1, ja lyofilisoidaan saatu vesipitoinen liuos.

Useat tavanomaiset farmaseuttisesti hyväksyttävät m-AMSA:n happosuolat liukenevat vain heikosti veteen eivätkä täten sovellu vesiliuosten valmistukseen suonensisäistä 30 antoa varten. Hydrokloridi- ja metaanisulfonaattisuolojen kohdalla tämä ilmenee alan kirjallisuudesta, kuten myös suoritetuista liukenevuuskokeista sellaisten suolojen, kuten levulinaatin, sitraatin ja laktobionaatin kohdalla (kaikkien tällaisten suolojen liukoisuus on alle 5 mg/ml).

35 Tutkittaessa m-AMSA:n happosuolojen liukenevuusominai- suuksia on valmistettu kiteinen m-AMSA:n L(+)-monolaktaatti- 3 I-* n r? O 7

/ VJ / ✓ vJ

suola (kiteytetty etanolista) ja huomattu sen myös olevan riittämättömän veteeniiukenevuudeltaan huoneenlämmössä hyväksyttävän suonensisäiseen antoon soveltuvan vesiliuoksen valmistukseen. Yllättävästi ja odottamatta on kuitenkin havait-5 tu, että kiinteä annos, joka käsittää seoksen, jossa on noin 1 mooli m-AMSA-emästä 1,5-4 moolia kohti maitohappoa omaa toivotun liukoisuuden ja kliiniseen käyttöön välttämättömät valmistus- ja pysyvyysominaisuudet.

Edellä kuvattuja kiinteitä koostumuksia voidaan käyt-10 tää joko kuivatäyttönä (kuivien komponenttien seos) tai lyo-filisoituna tuotteena. Kiinteä annosmuoto voidaan sopivasti ja nopeasti saattaa liuosmuotoon veden tai steriilin vesipitoisen liuottimen kanssa, jolloin saadaan todellinen m-AMSA:n liuos, jonka pituoisuus on vähintään 5 mg/ml ja 15 jolla on erinomaiset pysyvyysominaisuudet.

Vesiliukoisten koostumusten valmistaminen kuivatäyttö-seokseksi voidaan tehdä yksinkertaisesti sekoittamalla sopivat lähtöaineet oikeissa suhteissa. Siten m-AMSA/maitohappo-seos tehdään sekoittamalla m-AMSA-emäs ja D(-)- tai L(+)-20 maitohappo maitohapon ja m-AMSA:n moolisessa suhteessa 1,5-4/1. Edullinen seos on noin 1,5-2 moolia maitohappoa moolia kohti m-AMSA:ta.

Vesiliukoisten seosten valmistaminen lyofilisoiduksi seokseksi voidaan suorittaa saattamalla lähtöaineet vesi-25 liuoksessa oikeissa suhteissa standardilyofilisointiproses-siin. Lyofilisoitu m-AMSA/maitohappotuote valmistetaan muodostamalla m-AMSA:n vesipitoinen liuos käyttäen 1,5-4 (edullisesti 1,5-2,5) moolia maitohappoa moolia kohti m-AMSA-emästä ja tämän jälkeen lyofilisoimalla kyseinen vesiliuos 30 halutun kiinteän koostumuksen aikaansaamiseksi. Ennen lyo-filisointivaihetta on edullista suodattaa vesiliuos mahdollisten liukenemattomien epäpuhtauksien poistamiseksi. Voidaan myös lisätä mannitolin tapaisia tavanomaisia eksipient-tejä helpottamaan lyofilisoidun tuotteen liukenemista. Lyo-35 filisointi voidaan tehdä tavallisessa laboratoriossa tai teollisissa kylmäkuivaajissa sinänsä tunnetulla tavalla.

70 7 9 3

Valmistettaessa annosyksiköitä näistä koostumuksista m-AMSA-emästä voidaan käyttää minä hyvänsä terapeuttisesti tehoavana annoksena. Suositeltu annostusalue annosyksikössä on n. 20-200 milligrammaa m-AMSA-emästä.

5 Keksinnön esittämät kuivatäyttö- ja kylmäkuivatut seok set omaavat oleellisesti samat antituumoriominaisuudet, kuin nykyisin kliinisesti käytetyt m-AMSA:n muodot. Suuresta vesiliukoisuudestaan johtuen niitä kuitenkin voidaan käyttää sellaisten kliinisten annostusmuotojen valmistukseen, jotka 10 sopivat suonensisäiseen annostukseen, eivätkä sisällä ei- toivottua farmaseuttista liuotinta, kuten dimetylasetamidia. Koostumuksia voidaan käyttää yksittäisten kuivatäyttöpullo-jen tai steriiliin veteen tai steriiliin vesipitoiseen liuot-timeen liuotettavan kylmäkuivatun tuotteen valmistamiseksi 15 parenteraaliseksi annostusmuodoksi.

Koostumuksista voidaan muodostaa oraalisesti tai ei-suonensisäisesti annettavia parenteraalisia annostusmuotoja, kuin myös edullisia suonensisäisesti injektoitavia tuotteita. Koostumuksilla on hvväksyttävä stabiliteetti sekä kiin-20 teässä muodossa että veisliuoksessa, ja tämä mahdollistaa tehokkaan m-AMSA-annoksen antamisen käyttäen suhteellisen pientä parenteraalisen liuoksen tilavuutta ja siten myös las-kimoruiskeet suspension muodossa.

Nisäkkäiden kasvainten hoidossa koostumuksia voidaan 25 antaa joko oraalisesti tai parenteraalisesti, mutta edullisimmin parenteraalisesti, sopivina annoksina (m-AMSA-aktivi-teetin mukaan säädettynä määränä). Erityisen suositeltava annostusmuoto on vesiliuosmuotoon saatettu 5 mg/ml:n m-ASMA-aktiivisuuden omaava liuos.

30 Esimerkki 1 m-AMSA:n ja L( + )-maitohapon lyofilisointi m-AMSA-emäs (100 mg) ja L(+)-maitohappo (50,33 mg) liuotetaan 10 mitään vettä. Saatu liuos suodatetaan 0,22 ^itn suodattimen läpi liuoksen kirkastamiseksi. Suodos pan-35 naan tämän jälkeen sopiviin kovalaisiin pulloihin (esim.

5 ml liuosta/pullo). Pullot suljetaan osittain ja lyofili-soidaan seuraavissa olosuhteissa: 70793 esijäädytys - 55°C:ssa jäädytys - 50°C:ssa 2 tuntia; haihdutus - 40°C:ssa noin 68 tuntia n. 4*10 ^ torrin paineessa; ja 5 kuivaus + 30°C:ssa noin 48 tuntia.

Tämän jälkeen pullot suljetaan tyhjössä tai typpiatmosfää-rissä ja sintetöidään.

Lyofilisoidusta seoksesta voidaan veden kanssa (huoneenlämmössä) muodostaa liuos, jonka m-AMSA-aktiivisuus on 10 vähintään 5 mg/ml. Liukeneminen tapahtuu noin 3:ssa minuutissa. Pullossa olevalta lyofilisoidulla tuotteella on todettu olevan hyväksyttävä stabiliteetti kuukauden säilyttämisen jälkeen 37°C:ssa ja 56°C:ssa.

Esimerkki 2 15 m-AMSA:n ja L(+)-maitohapon lyofilisointi m-AMSA-emäs (150 mg) lietetään 20 ml saan steriiliä vettä. Tähän lisättiin kaksi ekvivalenttia L(+)-maitohappoa (75 mg) ja saatiin täydellinen liuos. Liuos suodatettiin 0,22 /im:n Millipore-suodattimen läpi. Kolme 5 ml:n erää kyl- 3 20 mäkuivattiin 17,5 cm :n kovalasipulloissa 24 tuntia labora-toriolyofilisaattorissa kiinteän tuotteen saamiseksi. Tuote voitiin saattaa liuosmuotoon vedellä 7,5 ja 5 mg/ml m-AMSA-aktiivisuuden omaaviksi liuoksiksi, jotka säilyivät kirkkaina ainakin 24 tuntia.

25 Esimerkki 3 m-AMSA:n ja L(+)-maitohapon kuivatäyttöseos m-AMSA-emäs (150 mg) ja L(+)-maitohappo (47 mg; 2 3 ekvivalenttia) sekoitettiin 50 cm :n kovalasipullossa. Lisäämällä ylläolevaan kuivatäyttötuotteeseen 19 ml 30 steriiliä vettä saatiin, ravistelemalla 1-3 minuuttia 16,5°C:ssa, 5 mg/ml m-AMSA-aktiivisuuden omaavaa liuosta. Liuos säilyi kirkkaina ainakin 24 tuntia.

Esimerkki 4 m-AMSA;n ja DL-maitohapon lyofilisointi 35 m-AMSA-emäs (150 mg) lietettiin 16,5 ml:aan steriiliä vettä 18°C;ssa. Tähän lisättiin sekoittaen 3,5 ml 20 %:sta 6 70793 DL-maitohapon liuosta (70 mg DL-maitohappoa; kaksi ekvivalenttia) . Seosta sekoitettiin kymmenen minuutin ajan, kunnes sen pH oli 3,9.

Liuos suodatettiin 0,22 mikronin Millipore-suodattimel-5 la. Yhden millilitran annoksia suodatettua liuosta pantiin 8,5 ml:n kovalasipulloihin ja lyofilisoitiin laboratoriolyo-filisaattorissa 24 tuntia.

Lyofilisoitu tuote saatettiin käyttömuotoonsa lisäämällä steriiliä vettä 7,5 mg/ml m-AMSA-aktiivisuuden omaavan 10 liuoksen saamiseksi, joka pysyi kirkkaana huoneenlämmössä ainakin 24 tuntia.

Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää seosta, jossa on 35 mg L(+)-maitohappoa ja 35 mg D(-)-maitohappoa.

Esimerkki 5 15 m-AMSA:n ja D(-)-maitohapon kuivatäyttöseos

Valmistettiin seos seuraavista aineista: m-AMSA-emästä -100 D(-)-maitohappoa (1,5 ekvivalenttia) - 35 mg

Esimerkki 6 20 m-AMSA:n ja D(-)-maitohapon lyofilisointi

Seuraavan koostumuksen omaava lyofilisoitu tuote valmistettiin käyttäen esimerkin 2 yleistä menettelyä.

m-AMSA-emästä -150 mg D(-)-maitohappoa (2 ekvivalenttia) - 75 mg.

Claims (5)

70793

1. Menetelmä stabiilin, kiinteän, vesiliukoisen koostumuksen valmistamiseksi, joka veden tai vesipitoisen väliai- 5 neen kanssa kykenee muodostamaan stabiilin 4'-(9-akridinyyli-amino)metaanisulfoni-m-anisidiini(m-AMSA)-liuoksen, jonka m-AMSA-aktiivisuus on 5-7,5 mg/ml, tunnettu siitä, että m-AMSA sekoitetaan D-(-)-maitohapon tai L-(+)-maitohapon kanssa, jolloin käytetään 1,5-4 moolia maitohappoa moolia koh-10 ti m-AMSA:ta, tai muodostetaan m-AMSA:n ja maitohapon vesipitoinen liuos, jolloin maitohapon ja m-AMSA:n välinen mooli-suhde on 1,5:1 - 4:1, ja lyofilisoidaan saatu vesipitoinen liuos.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -15 n e t t u siitä, että maitohappo on L-(+)-maitohappo.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä »tunnettu siitä, että maitohappo on DL-maitohappo.

4. Jonkin patenttivaatimuksen 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että maitohapon moolisuhde m-AMSA:an 20 on 1,5:1 - 2,5:1.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että m-AMSA:n ja maitohapon vesipitoinen liuos suodatetaan ennen lyofilisointia.