DK157770B - Stabiliseret farvningsoploesning af romanowsky-typen samt fremgangsmaade til fremstilling af en saadan oploesning - Google Patents
Stabiliseret farvningsoploesning af romanowsky-typen samt fremgangsmaade til fremstilling af en saadan oploesning Download PDFInfo
- Publication number
- DK157770B DK157770B DK454481A DK454481A DK157770B DK 157770 B DK157770 B DK 157770B DK 454481 A DK454481 A DK 454481A DK 454481 A DK454481 A DK 454481A DK 157770 B DK157770 B DK 157770B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- solution
- staining
- amount
- stabilized
- additive
- Prior art date
Links
- 239000000243 solution Substances 0.000 title claims description 41
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 title claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 claims abstract description 11
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 150000003973 alkyl amines Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- -1 ammonium halide Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 22
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 11
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims description 10
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 7
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 6
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 5
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 5
- JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N dibutylamine Chemical compound CCCCNCCCC JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CBPYOHALYYGNOE-UHFFFAOYSA-M potassium;3,5-dinitrobenzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1 CBPYOHALYYGNOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WEHWNAOGRSTTBQ-UHFFFAOYSA-N dipropylamine Chemical compound CCCNCCC WEHWNAOGRSTTBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N tripropylamine Chemical compound CCCN(CCC)CCC YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 15
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SEACYXSIPDVVMV-UHFFFAOYSA-L eosin Y Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C([O-])=C(Br)C=C21 SEACYXSIPDVVMV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- XZXYQEHISUMZAT-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-hydroxy-5-methylphenyl)methyl]-4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C(CC=2C(=CC=C(C)C=2)O)=C1 XZXYQEHISUMZAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N ammonium bromide Chemical compound [NH4+].[Br-] SWLVFNYSXGMGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229940107816 ammonium iodide Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- SZYJELPVAFJOGJ-UHFFFAOYSA-N trimethylamine hydrochloride Chemical class Cl.CN(C)C SZYJELPVAFJOGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Inks, Pencil-Leads, Or Crayons (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Emulsifying, Dispersing, Foam-Producing Or Wetting Agents (AREA)
- Silver Salt Photography Or Processing Solution Therefor (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
DK 157770 B
Opfindelsen angår en stabiliseret farvningsopløsning af Romanowsky-typen samt en fremgangsmåde til fremstilling af en sådan opløsning.
Farvningssystemer af Romanowsky-typen, f.eks. Wright's 5 opløsning og Giemsa's opløsning, indeholder methylenblåt og et eosin-farvestof i methanolopløsning sammen med andre beslægtede farvestoffer. Typiske beslægtede farvestoffer omfatter Azure A, Azure B og Azure C.
For at kunne anvende en sådan farvningsopløsning er 10 det almindeligvis nødvendigt at fremstille en opløsning af det tørre farvestof i methanol, hvorpå opløsningen påføres en blodprøveudstrygning eller lignende. Dernæst sættes der trinvis en pufferopløsning og en skylleopløsning til den farvede prøveudstrygning, indtil der fremkommer en synlig 15 fysisk ændring.
Nærværelsen af et andet farvestof ud over methylenblåt især Eosin Y, er ønskelig til forbedring af opløsningens farvningsegenskaber. Andre beslægtede farvestoffer, dvs. Azure A, Azure B og Azure c, er også ønskelige på grund af 20 deres forbedring af opløsningernes evne til at farve en blodprøve. Standardmetoden til anvendelse af farvestoffet består i at fremstille opløsningen og tillade den at henstå i et vist tidsrum. Azurfarvestofferne i farvningspulveret er ikke meget opløselige i methanol. Imidlertid nedbrydes 25 methylenblåt til azurfarvestoffer i nærværelse af eosin ved ældning i opløsning. Det vil normalt tage ca. to ugers henstand at opnå optimale farvningsresultater. Uheldigvis ved-* bliver farvestofferne at oxideres, og de resulterende oxi dationsprodukter gør opløsningen uegnet til det tilsigtede 30 formål. Desuden resulterer tilfældig udfældning i farvningsopløsningen ved ældning i dårlig farvningskvalitet. Medens farvningsopløsningen således kræver ca. to uger for at blive fuldt ud effektiv, har den kun en opbevaringslevetid på ca. 3 til ca. 12 måneder.
35 Formålet med opfindelsen er at tilvejebringe en sta biliseret farvningsopløsning af Romanowsky-typen med sig-
DK 157770B
2 nifikant forøget opbevaringstid, hvilken opløsning er af den art, der indeholder azurfarvestoffer, methylenblåt og et eosinfarvestof i methanolopløsning.
Til opnåelse af dette formål er farvningsopløsningen 5 ifølge opfindelsen ejendommelig ved nærværelsen af en stabiliserende mængde af et ammoniumhalogenid, et primært, sekundært eller tertiært alkylamin-hydrohalogenid eller en kombination deraf, hvor alkylkæderne indeholder fra 1 til 6 C-atomer, idet halogenet er valgt blandt chlor, brom og iod.
10 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af en farvningsopløsning af Romanowsky-typen indeholdende azurfarvestoffer, methylenblåt og et eosinfarvestof i methanolopløsning, er ejendommelig ved, at der til opløsningen sættes en stabiliserende mængde af et ammoniumhalogenid, et 15 primært, sekundært eller tertiært alkylamin-hydrohalogenid eller en kombination deraf, hvor alkylkæderne indeholder fra 1 til 6 C-atomer, idet halogenet er valgt blandt chlor, brom og iod.
De mest udbredt anvendte farvningsopløsninger af 20 Romanowsky-typen kendes som Wright's og Giemsa's opløsninger. Begge indeholder azurfarvestoffer, methylenblåt og et eosinfarvestof i methanolopløsning. Den førstnævnte opløsning har et absorbansforhold mellem azurfarvestoffer og methylenblåt til eosin på ca. 1,70 til ca. 2,10, og den anden opløs-25 ning har et absorbansforhold på fra ca. 1,70 til ca. 1,80 (absorbansforholdet svarer til Α650/Α525).
Reproducerbar farvningsevne, konstant farvningsabsor-bans og absorbansforhold (som bestemt med et spektrofotome-ter) og fraværelse af udfældninger af indikatorer for en 30 stabil farvningsopløsning. Forskellige additiver har, jfr. ovenfor, vist sig at forbedre stabiliteten af de her omhandlede opløsninger, og denne stabilitet forbedres i forhold til den benyttede mængde additiv. De stabilisatorer, der har vist sig at være effektive, er ammoniumhalogeniderne, 35 dvs. ammoniumchlorid, ammoniumbromid og ammoniumiodid, samt de primære, sekundære og tertiære alkylamin-hydrohalogenider,
DK 157770B
3 hvori alkylkæderne indeholder fra 1 til 6 C-atomer, og hvor halogenet er chlor, brom eller iod. De alkylamin-hydrohalo-genider, der er egnede til anvendelse i forbindelse med den foreliggende opfindelse, omfatter hydrochloriderne af di-5 ethylamin, dipropylamin, dibutylamin, tripropylamin og tri-butylamin. Hydrobromiderne og hydroiodiderne af disse aminer kan også anvendes. Ud over tilvejebringelsen af reproducerbar farvningsevne og konstant absorbans opnås der tillige eliminering af farvnings-fældningsproblemer i nærværelse af 10 sekundære og tertiære alkylamin-hydrochlorider (bortset fra dimethylamin- og trimethylaminhydrochlorider).
Mængden af stabiliserende additiv er ikke kritisk, omend en mængde fra 0,1 til 1,2% (vægt/vægt beregnet på opløsningen) foretrækkes. Anvendelsen af diethylamin-hydro-15 chlorid ved en koncentration på ca. 0,6% (vægt/vægt) er særlig effektiv derved, at der herved opnås den ønskede stabilisering med de laveste omkostninger. Desuden giver denne sammensætning god farvningsevne, er i høj grad opløselig og er meget effektiv til formindskelse af ændringer i 20 bestanddelene. Endvidere elimineres fældningsproblemerne med farvningsopløsninger fuldstændigt, og farvningssystemet indeholdende den omhandlede stabilisator opnår en forøgelse af opbevaringslevetiden til 2,5-3 år.
Opfindelsen illustreres nærmere i det følgende udfø-2 5 relseseksempel.
Eksempel
Der fremstilles en opløsning ved opløsning af 3,0 g af Wright's farvningspulver (MCB, Norwood, Ohio) i 1000 ml 30 methanol. Pulverets sammensætning er 37% Eosin Y, 33% methy-lenblåt og 30% azurfarvestoffer og azur-eosinat.
Efter 20 minutters omrystning ved stuetemperatur og henstand af opløsningen i 2 uger fjernes uopløst pulver ved filtrering. Den filtrerede farvningsopløsning fortyndes 35 derpå til 0,575 absorbans ved 650 nm (Beckman-spektrofoto- 4
DK 157770 B
meter, 1 cm kuvette) inden tilsætning af den stabilisator, der skal afprøves.
Absorbansforholdet (A650M525) for en belastet Wright's farvningsopløsning med tilsætning af en bestemt 5 stabilisator er angivet i tabel I. De pågældende forhold fås ved gennemførelse af spektrofotometrisk scanning af farvningsopløsninger efter en fortynding på 1:400. Absorbansforholdet fra 650 nm til 525 nm (maksimumsspids ved eller nær 525 nm) fastlægges til måling af stabiliteten af 10 farvningsopløsningerne. Forholdet viser sig at formindskes ved nedbrydning af farvningen.
Ud fra resultaterne i tabel I kan der drages følgende slutninger:
Kontrol-farvningsopløsningerne (ingen tilsætning af 15 stabilisator) nedbrydes langsomt ved 23°C og hurtigt ved 50°C ved ældning som angivet ved faldet i absorbansforholdet. Stabilisatorerne formindsker graden af farvnings-nedbrydning. De stabiliserede farvningsopløsninger har forholdsvis højere absorbansforhold end den tilsvarende kontrolopløsning 20 under de samme belastningsbetingelser, dvs. temperatur og alder.
Tabel II viser et typisk eksempel på en stabiliseret farvningsopløsning. Denne opløsning med en tilsætning på 0,6% Et2NH2+Cl“ giver god farvningsevne både før og efter 25 belastning ved 50°C i 28 dage. Kontrolopløsningen giver uafbalanceret farvning efter belastning ved 50c i 28 dage. Resultaterne viser, at stabilisatoren i farvningsopløsningen ikke har nogen skadelig indflydeide på farvningen af blod-udstrygningsprøver. Farvnings-opbevaringslevetiden forlænges 30 ved anvendelse af tilsætningen af stabilisatoren.
5 DK 157770 B
I o VO 00 CM
rH O O 00 α m - - ~
dP + CM I-Η rH
00 K
« S; o co vo ro r-- u o o o σ' ω oo -
CM CM CM__H
CO CM O
o· rH O O O' O o -
faO ft in CM i—I O
S -U
01 c! VO rH 00 n o ® o o oo O ώ co - ~ '
ft, CM CM CM H
i o σ' -d· i—] o o oo m o o -
03 · + in CM H rH
JJ η Λ> CM
rC P ^ §
3 8 o 04 e § 8 S
id 'Ί ω co - 3 H CM CM CM i-l P rQ O m vo f5 co rH o o <1· 03 p p o o -
““top m cm H rH
jS tu S P
rH lp m j- O vo <f <D 3ί ft 0 o O O' 00
Kr. O Ni co ^ £P Cm__OM__CM__rH__Ή 0 ·Η , VO m 00 Ή C ,-H e r^. vo m H _ « u o Γ _Γ _r
"Τλω <*> + m rH rH rH
H S“ « ,2 VpTi o Z vo m H O CO - __ϋ__d__zi__d— £ v^j ro 5 oo 00 ^ o ^ °i °°-
,5 ho p in Ή rH O
2 P s P
rH P w π VO C0 VO
Sjnp o o r~ vo
iP ® O M CO
o ρ __i!__d__-__-_ 4-10 O O' <t
w M O 00 in CM
C W) μ o >
JOP dpcq in iHiHiH
p g °Ί- ftf O O CM
° U O » °°. °°- ^ ^ __id__ni__ni__c-1
O O VO
rH o oo co oo i—I O - " ~
bo 0 in rH H O
S P
to p o in vo
ft pj o 00 C" VO
o O CO -
pLj CM rH rH rH
O
o é (U 00
H O Γ— CM
Ό
i—I O
rC - O) p xi ω o h d
Eh η ό___
DK 157770 B
6 " — 1 i I I-j-1
W
co co Ό co co <_i . . d p -
d OOP ' d SS
d d +1+14-) *5 "2 +\ +\ o ni r» »-i o Λ oj\o Η Η - - ·Η Hr-ι - * ^ cq ft co co P cQ ft__o ^ r—i *rj co co d r- co t4_i H p. » JjJ ~
- Π O II Q Q I I I CD O
ri d d d +|+| d d d +1+1 grC T) O MU coco d O bO p νοσι
Sr-1 (I I) - CO . S i—I <D g) - “ n ^ cd ,d η S coco V dj cd rQ H S__r> -+ § 'O ίο in b0 y in co S lo - -
^ +3 O O ^ O O
di p o +l +1 d oo ^ υ +! +j ajR d coin'd £5 d <fo cl '2 JJ - - d P -- u <Λ £)-----rri H O--- φ hn o omH u o mo bob^P d - - ·η S P -
C« rP P O OO-P ,—ι O O O
•5 -¾ 'd g s +i +i « ® g g +i +i g .S B S. ^ .§ Z * °- S__ g 1__ O CO 4-1 ^ CM O^
“dP α)ϋ+1°ρ .S
d 5 s p O CO dif o
gi -s S?__"Is·__d_jiL
s S * s 1 ° " -g h -g. n ^ V £ | s S ?i “ b s +] +]
54-lJJd ,4 OCO-+ ^ iJ iHO
'd 18 P W in <f" ·- M co" in
g P ft S. £ e S. S
£ «> w doS^-ri g d o +1 +j W)°5P H m m II· P b0 voo S 'g ’d id__-+" ·+" ^ U -S ^__^ É e ^ § s. ^ S g b. s i22>£ w g S H in ^ g * § §
λ s < “__» a__±_^L
·» M ° " g « I u *- g I 5 i s s « i I i t s s .
S S i u ° « g 33 S ti ° "- - S
db "ft <j- <(· > ft ft CO-+P
lu ” η---O O---R
+<w u o co · p β H ° ° g •riJ3 p - - >i ^ p - - p ΰ I p* oomo S S ° ti S 5 +i +| h d + +1 +1 d^ ggooodll ggoog
ΛΛ W p. S-P* p. ** O
q o. in -+ o <finw i—* --——^ 0] ---- -P , J_, .- I p d o d 1 +1 w od g
ft P r—1 P ft a S
Ed o P-d S P 1 d
Od + dPdP .ridlri o ®
U d CMOlO d Ό O rldd o o vO
d^ffi - wdP + .·· rri MS O gdd I-J έΡ'ΐ- ° jj i—1 d CM dr—I rridK + d I -ri P P rri || d -ri g ΟΜΡΚ1 d'ri ΟΡΡΟΙ bo pd dPg p d p o E> Ti ϋ Μι > Ό 14 -il---* * ---+
Claims (10)
1. Farvningsopløsning af Romanowsky-typen indeholdende azurfarvestoffer, methylenblåt og et eosinfarvestof i metha- 5 nolopløsning, kendetegnet ved nærværelsen af en stabiliserende mængde af et ammoniumhalogenid, et primært, sekundært eller tertiært alkylamin-hydrohalogenid eller en kombination deraf, hvor alkylkæderne indeholder fra 1 til 6 C-atomer, idet halogenet er valgt blandt chlor, brom og iod. 10
2. Farvningsopløsning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det stabiliserende additiv er valgt fra gruppen bestående af hydrochloridet, hydrobromidet og hydroio-didet af diethylamin, dipropylamin, dibutylamin, tripropyl- 15 amin eller tributylamin.
2. Farvningsopløsning ifølge krav 2, kendetegnet ved, at hydrochloridsaltet af alkylaminen anvendes som stabilisator. 20
4. Farvningsopløsning ifølge krav 1-3, kende-- tegnet ved, at det stabiliserende materiale er di- ethylamin-hydrochlorid.
5. Farvningsopløsning ifølge krav 1-4, kende tegnet ved, at stabilisatoren er til stede i en mængde fra 0,1 til 1,2 vægt% af opløsningen.
6. Farvningsopløsning ifølge krav 5, kendete g- 30 net ved, at stabilisatoren er til stede i en mængde på ca. 0,6 vægt% af opløsningen.
7. Fremgangsmåde til fremstilling af en farvningsopløsning af Romanowsky-typen indeholdende azurfarvestoffer, 35 methylenblåt og et eosinfarvestof i methanolopløsning, kendetegnet ved, at der til opløsningen sættes DK 157770 B en stabiliserende mængde af et ammoniumha logen id, et primært, sekundært eller tertiært alkylamin-hydrohalogenid eller en kombination deraf, hvor alkylkæderne indeholder fra 1 til 6 C-atomer, idet halogenet er valgt blandt chlor, brom og iod. 5
8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at der som additiv anvendes diethylamin-hydrochlorid.
9. Fremgangsmåde ifølge krav 7 eller 8, kende-10 tegnet ved, at additivet tilsættes i en mængde fra 0,1 til 1,2 vægt% af opløsningen.
10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at additivet tilsættes i en mængde på ca. 0,6 15 vægt% af opløsningen.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/196,365 US4290769A (en) | 1980-10-14 | 1980-10-14 | Stabilized Romanowsky stain solution |
| US19636580 | 1980-10-14 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK454481A DK454481A (da) | 1982-04-15 |
| DK157770B true DK157770B (da) | 1990-02-12 |
| DK157770C DK157770C (da) | 1990-07-09 |
Family
ID=22725096
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK454481A DK157770C (da) | 1980-10-14 | 1981-10-13 | Stabiliseret farvningsoploesning af romanowsky-typen samt fremgangsmaade til fremstilling af en saadan oploesning |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4290769A (da) |
| EP (1) | EP0049833B1 (da) |
| JP (1) | JPS5794052A (da) |
| AT (1) | ATE11341T1 (da) |
| AU (1) | AU521371B2 (da) |
| CA (1) | CA1156541A (da) |
| DE (1) | DE3168348D1 (da) |
| DK (1) | DK157770C (da) |
| ES (1) | ES506210A0 (da) |
| FI (1) | FI71620C (da) |
| IE (1) | IE51644B1 (da) |
| IL (1) | IL63177A0 (da) |
| NO (1) | NO154134C (da) |
| ZA (1) | ZA814884B (da) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4382075A (en) * | 1981-04-03 | 1983-05-03 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilized Romanowsky stain solution |
| US4363632A (en) * | 1981-12-28 | 1982-12-14 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilized solution producing a Romanowsky effect |
| US4392864A (en) * | 1982-02-01 | 1983-07-12 | Miles Laboratories, Inc. | Stabilized Romanowsky stain solution |
| HU186309B (en) * | 1983-09-02 | 1985-07-29 | Reanal Finomvegyszergyar | Reagent for determining the thrombacyta and leucocyte number |
| US4741898A (en) * | 1985-04-01 | 1988-05-03 | Fisher Scientific Company | Stabilized stain composition |
| DE3533515A1 (de) * | 1985-09-20 | 1987-04-02 | Merck Patent Gmbh | Stabilisator fuer faerbeloesungen |
| US6858432B2 (en) * | 2002-08-29 | 2005-02-22 | Wescor, Inc. | Method and staining reagent for staining hematology sample in an automated staining apparatus |
| JP5255283B2 (ja) | 2006-01-18 | 2013-08-07 | アークレイ株式会社 | 発色剤の液体試薬、及び、その安定化方法 |
| EP2601513B1 (en) * | 2010-08-05 | 2014-05-14 | Cambridge Research & Instrumentation, Inc. | Enhancing visual assessment of samples |
| AU2012271330B2 (en) | 2011-06-17 | 2015-04-02 | Roche Diagnostics Hematology, Inc. | Solutions for histoprocessing of biological samples |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH1371667A4 (de) * | 1966-10-12 | 1970-08-31 | Mitsubishi Chem Ind | Reaktivfarbstoffhaltige Klotz- oder Färbeflotte bzw. Druckpaste für Textilmaterialien |
| JPS5489060A (en) * | 1977-12-27 | 1979-07-14 | Shiyouichi Takagi | Color developing and stabilizing method of eggs and meats of marine products and livestock |
-
1980
- 1980-10-14 US US06/196,365 patent/US4290769A/en not_active Expired - Lifetime
-
1981
- 1981-06-22 CA CA000380321A patent/CA1156541A/en not_active Expired
- 1981-06-25 IL IL63177A patent/IL63177A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1981-07-16 ZA ZA814884A patent/ZA814884B/xx unknown
- 1981-07-24 AU AU73390/81A patent/AU521371B2/en not_active Ceased
- 1981-10-01 NO NO813333A patent/NO154134C/no unknown
- 1981-10-02 DE DE8181107851T patent/DE3168348D1/de not_active Expired
- 1981-10-02 AT AT81107851T patent/ATE11341T1/de not_active IP Right Cessation
- 1981-10-02 EP EP81107851A patent/EP0049833B1/en not_active Expired
- 1981-10-09 JP JP56160384A patent/JPS5794052A/ja active Granted
- 1981-10-12 FI FI813157A patent/FI71620C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-10-13 ES ES506210A patent/ES506210A0/es active Granted
- 1981-10-13 IE IE2398/81A patent/IE51644B1/en not_active IP Right Cessation
- 1981-10-13 DK DK454481A patent/DK157770C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK157770C (da) | 1990-07-09 |
| DE3168348D1 (en) | 1985-02-28 |
| ZA814884B (en) | 1982-11-24 |
| IL63177A0 (en) | 1981-09-13 |
| AU521371B2 (en) | 1982-04-01 |
| ATE11341T1 (de) | 1985-02-15 |
| FI813157L (fi) | 1982-04-15 |
| FI71620B (fi) | 1986-10-10 |
| EP0049833A2 (en) | 1982-04-21 |
| JPS6345542B2 (da) | 1988-09-09 |
| FI71620C (fi) | 1987-01-19 |
| NO154134B (no) | 1986-04-14 |
| JPS5794052A (en) | 1982-06-11 |
| IE812398L (en) | 1982-04-14 |
| EP0049833B1 (en) | 1985-01-16 |
| ES8303503A1 (es) | 1983-02-01 |
| DK454481A (da) | 1982-04-15 |
| ES506210A0 (es) | 1983-02-01 |
| NO154134C (no) | 1986-07-23 |
| EP0049833A3 (en) | 1982-05-05 |
| CA1156541A (en) | 1983-11-08 |
| NO813333L (no) | 1982-04-15 |
| IE51644B1 (en) | 1987-01-21 |
| US4290769A (en) | 1981-09-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK157770B (da) | Stabiliseret farvningsoploesning af romanowsky-typen samt fremgangsmaade til fremstilling af en saadan oploesning | |
| Hecht et al. | Energy at the threshold of vision | |
| DE1422855A1 (de) | Photographischer Entwickler | |
| Havre | The flame photometric determination of sodium, potassium and calcium in plant extracts with special reference to interference effects | |
| Diehl et al. | Studies on fluorescein—II: The solubility and acid dissociation constants of fluorescein in water solution | |
| EP0086951B1 (en) | Stabilized romanowsky stain solution and method of preparation thereof | |
| US3495963A (en) | Simultaneous staining and strengthening of glass | |
| JP4120606B2 (ja) | 硬度測定用試薬 | |
| Sugawara et al. | A new method of spectrophotometric determination of iodine in natural waters | |
| EP0220438B1 (de) | Stabilisator für Färbelösungen | |
| Serrat | Colorimetric method for determination of chlorine with 3, 3′, 5, 5′-tetramethylbenzidine | |
| Korthoven et al. | Automatic interpretation of gamma-ray data obtained in non-destructive activation analysis | |
| EP0063293B1 (en) | Stabilized romanowsky stain solution | |
| JP2005291896A (ja) | 残留塩素測定用組成物 | |
| Beilenson et al. | A comparison of the absorption spectra of some typical unsymmetrical cyanine dyes | |
| DE1597474A1 (de) | Optisch sensibilisiertes lichtempfindliches Material | |
| Crescitelli et al. | The gecko visual pigment: the anion hypsochromic effect | |
| Mead et al. | Properties of electrolytic solutions, XIX. Conductance of mixed electrolytes in ethylene chloride. Tetrabutyl-and tetramethyl-ammonium picrates | |
| JP2019535006A5 (da) | ||
| JPH0151143B2 (da) | ||
| US20030147777A1 (en) | Test composition and device for the determination of cyanuric acid in water | |
| WO2024144968A1 (en) | Stabilized n,n-diethyl-p-phenylenediamine solution and method for detecting chlorine | |
| Jones | Colorimetric Evaluation of Derris and Cube Roots | |
| DE2519654A1 (de) | Stabilisierte waessrige loesungen optischer aufheller | |
| Archer et al. | Spectrophotometric determination of hexafluoroarsenate with ferroin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |