DK154858B - Proeveanalysestrimmel og fremgangsmaade til at undersoege blod fra okkult bloedning - Google Patents

Description

DK 154858 B

i

Prøveanalysestrimler og fremgangsmåde til at opdage blod fra okkult blødning i fæeesmateriale er velkendt. F.eks. beskriver US-PS nr. 3.996.006 strimler med et prøveoptagende ark mellem et frontpanel og et bagpanel med en eller fle-5 re åbninger i frontpanelet og én åbning i bagpanelet og svingbare dæklag til at dække disse åbninger. I forbindelse med en undersøgelse af fækalier for blod fra okkult blødning er det prøveoptagende ark typisk papir imprægneret eller trykt med guaiac,og en fremkaldelsesopløsning, såsom en peroxid-10 opløsning, påføres gennem åbningen i bagpanelet.

Kort fortalt foregår undersøgelsen som følger. En prøve af fækalt materiale smøres på guaiacpapiret gennem en åbning i frontpanelet. Derpå dækkes panelet, og bagpanelets klap åbnes. En fremkaldelsesopløsning, såsom hydrogenperoxid, 15 påføres guaiacpapiret via den tilsvarende åbning i bagpanelet. Hvis der er blod til stede i det fækale materiale, vil guaiacreaktionen farve papiret blåt. Den blå farve skyldes den ved hæmoglobin katalyse fremkaldte oxidation af guaiac.

Guaiac H2°2_\ "Oxideret" guaiac farvefri Hæmoglobin ^ Blå farve 20 En af de til denne undersøgelse knyttede mangler er, at falske positive og falske negative resultater kan forekomme. F.eks. vil en patient normalt påføre fæoe§prøver til guaiacpapiret hen over en periode på flere dage og aflevere eller poste prøvestrimler til sin læge eller et laborato-25 rium for vurdering. Medens strimmelen er i patientens hjem eller under transport, er strimmelen underkastet forskellige omgivelsesbetingelser, der på uheldig måde kan påvirke analyseresultatet. Enhver betingelse, såsom at strimmelen udsættes for varme eller sol, kunne medføre aktivitetstab for 30 enten guaiacen eller det hæmoglobin, der er til stede i blodet fra den okkulte blødning i fæcesprøven, og kunne resultere i en forkert negativ analyse. Alternativt, hvis strim- 2

DK 154858 B

melen udsættes for metalspor, såsom af kobber eller jern, der også er guaiackatalysatorer, kunne dette føre til en forkert positiv analyse. Analysestrimmelen kan udsættes for disse betingelser ved ethvert tidspunkt mellem fremstilling og un-5 . dersøgelse.

Der er tidligere blevet gjort forsøg på at forbedre et kontrolsystem for disse strimler. For øjeblikket handelsførte strimler stiller katalytiske substanser, der skal påføres en del af strimmelen umiddelbart før prøvernes fremkaldelse, 10 til rådighed. Disse katalytiske substanser leveres i flasker eller rør vedlagt analysesættet. Det nuværende kontrolsystem kræver derfor ekstra materialer og flere trin til at gennemføre analysen. Det er af største betydning, at påføring af kontrolkatalysatoren til den guaiacbaserede fæcesprøve umid-15 delbart før prøvens fremkaldelse ikke eliminerer muligheden for falske resultater. Hvis strimmelen ville blive udsat for skadelige betingelser, som anført ovenfor, til at ned^· bryde hæmoglobinet i fæces, ville dette naturligt være sket før fremkaldelsesopløsningen blev tilsat. Da kontrolstoffer-20 ne ikke tilsættes til strimmelen før det tidspunkt, hvor fremkaldelsen skal ske, var kontrolstoffet ikke underkastet de samme skadelige betingelser som fæce$prøven, og derfor vil der altid fremkomme en blå farve i strimmelens kontrolområde .

25 Det er følgelig den foreliggende opfindelses formål at tilvejebringe en analysestrimmel og en fremgangsmåde til at undersøge blod fra okkult blødning med en kvalitetskontrol efterprøvning eller præstationskontrolanordning, der giver en angivelse af analysesystemets korrekte funktion. Det er 30 herunder et mål for den foreliggende opfindelse at anvise en enkel, hurtig, bekvem, billig og indbygget kontrolprøve, der vil overvåge og kontrollere prøvereagenserne fra frem^· stillingsdatoen til fremkaldelsesdatoen.

3

DK 154858 B

Sagt i korthed indbefatter denne opfindelse en forbedret prøveanalysestrimmel, der indbefatter et kontrolområde med indbyggede eller på strimmelen tilstedeværende kontrolanordninger for positiv og negativ optræden. Disse indbefatter 5 to små områder eller pletter, der er trykt på et isoleret område af guaiacanalysepapiret i nogen afstand fra de dele af analysepapiret liggende under hver af åbningerne i frontpanelet på analysepapirets overflade og vendende mod det bageste panel. På denne måde er den positive plet (kontrol-10 organ eller monitor) af en sådan form og størrelse og placeret i en sådan placering i forhold til fæcesprøven eller -prøverne, at der ikke kan opstå nogen forveksling mellem dens blå farve og en positiv fæcesprøves blå farve. Den positive kontrolanordning eller monitor indeholder en trykt 15 plet af en blodkomponent. Den negative kontrolanordning eller monitor placeret ved siden af den positive kontrolanordning i det indrammede område er ikke udfyldt, et frilagt område af det uændrede med guaiac behandlede papir. På fordelagtig måde kan kontrolområdet fremhæves ved at indramme 20 de positive og negative monitorer med en klart farvet inaktiv kant.

Strimmelen ifølge opfindelsen benyttes på samme måde som den, der er beskrevet i US-PS 3.996.006 med den undtagelse, at lægen eller laboranten, der påfører en dråbe af fremkaldel-25 sesopløsningen på den side af analysepapiret, der vender mod det bageste panel,ved de steder, der er modstående til hver af åbningerne i frontpanelet, hvor fæcesprøverne er blevet smurt på, også påfører en opløsningsdråbe til det indrammede kontrolområde inden for den farvede rand. Hvis 30 guaiacanalysepapiret og fremkaldelsesmidlet fungerer korrekt, vil kontrolområdet eller monitoren, hvorpå blodkomponenten er trykt, få blå farve, medens den monitor, der ikke er blevet ændret, vil forblive hvid. Såfremt den monitor, hvorpå der er trykt en blodkomponent, ikke får blå farve, ville 35 dette angive, at blod-guaiac-fremkaldelsesmiddelreaktionen ikke foregår,således at ethvert negativt resultat ved ana- 4

DK 154858 B

lysen ville være usikkert. Såfremt det uændrede område ikke forbliver hvidt, ville dette endvidere angive, at et eller andet i analysepapiret forskelligt fra det fra en okkult blødning hidrørende blod i den påsmurte fæces fremkalder 5 guaiac-fremkaldelsesmiddelreaktionen til frembringelse af en blå farve, og at derfor ethvert positivt resultat af analysen ville være mistænkelig.

En detaljeret beskrivelse og en bedre forståelse af denne opfindelse får man ved at studere tegningen, der viser en 10 foretrukken udførelsesform for den foreliggende opfindelse.

På tegningen viser fig. 1 set fra oven- et emne forud for foldning til at tilberede en strimmel ifølge opfindelsen, fig. 2 emnet vist i fig. 1 set nedefra, 15 fig. 3 et perspektivbillede af strimmelen som vist forfra med et dæklag i åben stilling, fig. 4 et perspektivbillede af strimmelen som set bagfra med en bageste flig åbnet til at frilægge en analyseflade indbefattende kontrolområdet, 20 fig. 5 i forstørret målestok et delbillede af strimmelen med en bageste flig åbnet for at vise enkeltheder ved analysefladen, fig. 6 set fra oven et delbillede af et emne med et ændret frqntpanel, 25 fig. 7 et perspektivbillede af strimmelen set forfra under påføring af en prøve, der skal analyseres, fig. 8 et perspektivbillede af strimmelens bagside under påføring af en fremkaldelsesmiddelopløsning påført til analyse- 5

DK 154858 B

fladen indbefattende kontrolområdet, fig. 9 i forstørret målestok et forstørret delbillede, der viser en negativ reaktion, fig. 10 det samme som fig. 9, men visende en positiv reak-5 tion, fig. 11 det samme som fig. 9 og 10, men med en usikker analyse, og fig. 12 yderligere ændringer på den i fig. 4 viste udførelsesform.

10 I fig. 1 og fig, 2 ses et emne 10, der f.eks. er fremstillet af papir eller karton. Emnet har et frontpanel 12, et bageste panel 14 og et dæklag eller en klap 16. Emnet 10 har en foldelinie 18 mellem panelerne 12 og 14 for at lette foldning. En foldelinie 20 mellem _ panelet 14 og klappen 16 15 letter klappen 16's hængsling. Klappen 16 har en flig 22, der er tilpasset til at gå igennem en cirkulær slids 26 i panelet 14 for at låse klappen i lukket stilling.

Frontpanelet 12 har et par ved siden af hinanden anbragte åbninger 28 og 30. Et absorberende papirark 32 ligger hen 2Q over åbningerne 28 og 30. En klæbemiddelstrimmel 40 på bag panelet 14 klæber til én kant af arket 32. Arket 32 er imprægneret med eller har påtrykt en reagent, såsom guaiac.

En del af arket 32 har et kontrolområde 34 med et positivt kontrolområde eller monitor 34a og et negativt kontrolområ-25 de eller monitor 34b. For påføring af en fremkaldelsesmid delopløsning, f.eks. er peroxidopløsning, er det bageste panel 14 udstyret med en flig 42 modstående til åbningerne 28 og 30. Fligen 42 fjernes fra arket 32 for at frilægge analyseområdet, arket 32.

... 6

DK 154858 B

Til at danne den færdige strimmel som vist i fig. 3 foldes emnet langs foldelin’ien 18 for at bringe panelerne 12 og 14 sammen og holde dem sammen principielt ved hjælp af klæbemiddelstrimler 36. Klappen 16 er nu hængslet om foldelini-5 en 20 og fastgjort til panelet 12 ved hjælp af en klæbemid-delplet 37, såsom f.eks. lim.

Ved brug af strimmelen adskiller patienten klappen 16 fra panelet 12 ved pletten 37, åbner klappen og påsmører med en.applikator et tyndt lag af en prøve fra en del af hans 10 afføring på arket 32 gennem åbningen 30, se fig. 7. En anden del af afføringen påføres på tilsvarende måde til arket 32 gennem åbningen 28. Klappen lukkes derefter ved at låse fligen 22 i slidserne 24 og 26. Patienten afleverer strimmelen enten til sin læge eller et laboratorium. Lægen eller labo-15 ranten trækker fligen 22 fri af det bageste panel 14 og åb-nér denne udad. Gennem den således' dannede åbning påføres fremkaldelsesmiddelopløsningen til analysearket 32 på den modstående side af hver af åbningerne 28 og 30 til tilvejebringelse af områder 62a og 62b med plet. Fremkaldelses-20 middelopløsningen tilføjes også til" kontrolområdet 34' til at dække den positive og den negative monitor 34a henholdsvis 34b.

Derefter iagttages analyseresultaterne. Et negativt resultat er vist i fig. 9. Den positive monitor 34a, der indeholder 25 hæmin, fremkalder en blå farve som ventet. De andre befugte-de områder 62a, 62b og den negative monitor 34b er alle farvefri.

Et positivt resultat er vist i fig. 10. Den positive monitor får igen blå farve sammen med de fugtige områder 62a og 30 62b. Den negative monitor, der er uændret, forbliver farve fri. Fig. 11 viser en fejlanalyse. I dette tilfælde vil det, at den positive monitor ikke får blå farve,angive, at analysen ikke fungerer korrekt. Den positive monitor 34a skulle have skiftet farve til blå.

7

DK 154858 B

Fig. 6 viser et ændret frontpanel med kun én åbning/ og fig. 12 viser en anden ændret udførelsesform, hvori seks påsmøringer af afføring kan afprøves samtidigt.

Da guaiacbaserede analyser af blod fra okkult blødning i 5 fæces i realiteten analyserer for hæmoglobinets katalytiske virkning i blod, skal den positive monitor enten benytte hæmoglobin eller en katalysator, der vil reagere mod skadelige omgivelsesbetingelser på en måde, der svarer til hæmoglobin. Det foretrækkes, at analysestrimmelen ifølge op-10 findelsen benytter hæmin, en fra hæmoglobin afledt kataly sator , som katalysator i den positive monitor. Hæmoglobinmolekylets globindel har en lille, om overhovedet nogen, virkning på katalyseegenskaberne for det hæmin, det indeholder. Trykbare opløsninger af hæmin tilberedes nemt og 15 kræver vægtmæssigt ca. 25 gange mindre hæmin end hæmoglobin for den samme katalytiske aktivitet. Når hæminpletter-ne er trykt på det med guaiac behandlede papir,1 har de en stabilitet, der er sammenlignelig med eller større end strimmelens .

20 En opløsning tilberedes ved at opløse ca. 10 mg/ml af krystallisk hæmin i en kombination af vand, ammoniumhydroxid og isopropanol. Derefter trykkes hæminopløsningen som nøjagtigt til hinanden afpassede pletter på standardruller af guaiacpapir. Hvis det ønskes, vil et andet trykningstrin 25 nøjagtigt afsætte en ramme i en klar farve, såsom orange, omkring monitorerne. Farveintensiteten for orange kan indstilles ved en passende fortynding af trykfarven.

Claims (5)

1. Prøveanalysestrimmel med et frontpanel, et bageste panel, hvilket frontpanel· har en eller flere åbninger, et arkformet organ, der bærer en analysereagent mellem front- og bagpanelerne beliggende under hver af åbningerne, en hængslet klap 5 udformet til at ligge hen over en del af frontpanelet og åbningerne og et fligorgan i bagpanelet modstående til de nævnte åbninger og svingbart til at frilægge arkets underside, kendetegnet ved, at et kontrolområde har en positiv og en negativ monitor (kontrolanordning), hvilket kontrolområde er 10 placeret på en del af arket, der vender mod det bageste panel.

2. Strimmel ifølge krav 1, kendetegnet ved, at kontrolområdet er trykt på et isoleret område af arket i nogen afstand fra de dele af analysepapiret, der ligger under åbningerne i frontpanelet. 15 3·. 'Strimmel if-ølge krav 2, k e n'd'e t e g n e t ved, at den positive monitor indeholder en påtrykt plet af en blod-komponent, og den negative monitor er en frilagt plet af det uændrede ark, og at analysereagenten er guaiac.

4. Strimmel ifølge krav 3, kendetegnet ved, at 20 blodkomponenten er hæmin.

5. Strimmel ifølge krav 3, kendetegnet ved, at den positive og den negatiye monitor er indrammet af en klart farvet inaktiv ramme.

6. Fremgangsmåde til at bestemme tilstedeværelsen af fra 25 okkult blødning hidrørende blod på en prøveanalysestrimmel med et guaiacbehandlet ark for optagelse af en prøve, hvilket ark er anbragt mellem et frontpanel og et bageste panel med åbninger i frontpanelet og det bageste panel og svingbare klapper til at dække åbningerne, og som består af at DK 154858 B smøre fæcesmateriale på det med guaiac behandlede ark gennem en åbning på frontpanelet og påføre en fremkaldelsesmiddel-opløsning til det med guaiac behandlede ark på den tilsvarende åbning i bagpanelet, kendetegnet ved, at det 5 yderligere indbefatter påføring af en fremkaldelsesmiddelopløsning til et kontrolområde med positive og negative monitorer på en del af arket vendende mod det bageste panel.