DK154342B - L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og aminer til brug som udgangsforbindelser ved deres fremstilling - Google Patents

L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og aminer til brug som udgangsforbindelser ved deres fremstilling Download PDF

Info

Publication number
DK154342B
DK154342B DK024581AA DK24581A DK154342B DK 154342 B DK154342 B DK 154342B DK 024581A A DK024581A A DK 024581AA DK 24581 A DK24581 A DK 24581A DK 154342 B DK154342 B DK 154342B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
mixture
added
acid
water
ethyl
Prior art date
Application number
DK024581AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK154342C (da
DK24581A (da
Inventor
Thomas Mott Brennan
Michael Ezell Hendrick
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Priority claimed from DK321981A external-priority patent/DK154652C/da
Publication of DK24581A publication Critical patent/DK24581A/da
Publication of DK154342B publication Critical patent/DK154342B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK154342C publication Critical patent/DK154342C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/32—Oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/30—Artificial sweetening agents
    • A23L27/31—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives
    • A23L27/32—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives containing dipeptides or derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/25—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/004—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reaction with organometalhalides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/27—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation
    • C07C45/29—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation of hydroxy groups
    • C07C45/292—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by oxidation of hydroxy groups with chromium derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/62—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by hydrogenation of carbon-to-carbon double or triple bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/63—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by introduction of halogen; by substitution of halogen atoms by other halogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/64—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by introduction of functional groups containing oxygen only in singly bound form
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/673—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by change of size of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C07C45/72—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction of compounds containing >C = O groups with the same or other compounds containing >C = O groups
    • C07C45/74—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction of compounds containing >C = O groups with the same or other compounds containing >C = O groups combined with dehydration
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C07C45/72—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms by reaction of compounds containing >C = O groups with the same or other compounds containing >C = O groups
    • C07C45/75—Reactions with formaldehyde
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/04—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C49/16—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/04—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C49/17—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/04—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C49/17—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing hydroxy groups
    • C07C49/173—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing hydroxy groups containing halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/29—Saturated compounds containing keto groups bound to rings
    • C07C49/293—Saturated compounds containing keto groups bound to rings to a three- or four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/385—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring
    • C07C49/39—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring of a three- or four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/385—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring
    • C07C49/395—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring of a five-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/385—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring
    • C07C49/403—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring of a six-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/385—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring
    • C07C49/413—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring of a seven- to twelve-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/385—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring
    • C07C49/523—Saturated compounds containing a keto group being part of a ring containing —CHO groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/647—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring having unsaturation outside the ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/22—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D331/00—Heterocyclic compounds containing rings of less than five members, having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D331/04—Four-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
    • C07D333/32—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/30—Hetero atoms other than halogen
    • C07D333/36—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D335/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D335/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/804—Low calorie, low sodium or hypoallergic
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/801—Peptide sweetners

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

DK 154342 B
Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte L-aspartyl-D-aminosyre-dipeptidamider med den i krav 1 definerede almene formel I samt fysiologisk acceptable kationiske salte og syreadditionssalte deraf. Disse forbindelser 5 udmærker sig ved deres kraftigt virkende sødende egenskaber. Endvidere angår opfindelsen hidtil ukendte forbindelser med formlen RNI^ til brdg som udgangsforbindelser ved fremstilling af de omhandlede amider.
I U.S.-patentskrift nr. 3.492.131 fandtes visse 10 lavere alkylestre af L-aspartyl-L-phenylalanin at være op til 200 gange så søde som sucrose og at være i det væsentlige frie for bitter bismag, der forringer tidligere sødemidler, såsom saccharin. Disse forbindelser fandtes senere kun at have begrænset stabilitet i vandi-15 <3e systemer som følge af diketopiperazindannelse, navnlig ved de neutral-sure pH-betingelser, der er fremherskende i de fleste levnedsmiddelsystemer.
Mazur et al., J.Med.Chem., 16, 1284 (1973) har anført, at lavere alkylestre af L-aspartyl-D-alanin og 20 visse homologe deraf, navnlig L-aspartyl-D-alanin-iso-propylester, har sødevirkninger på op til 125 gange virkningen af sucrose.
Sukehiro et al., Seikatsu Kagaku, 11, 9-16 (1977), Chem.Abstr., 87^ 168407h (1977) anfører visse amider af 25 L-aspartyl-D-alanin med formlen: .NH C , ^ ^NHR1 C00H S Ah3 30 hvor R er methyl, ethyl, η-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sekundær butyl, cyclohexyl eller carbonresten af methylestrene af glycin, d-alanin eller /-alånin. De mest virksomme forbindelser var dem, hvor R^ er en af de 35 ovennævnte butylgrupper eller cyclohexyl, der har en sødhed på henholdsvis 100-125 og 100 gange sødheden af sucrose. Da n-butylamidet fandtes at have en sødhed på 125 gange sucrose,og isobutyl- og sek.-butyl-amiderne er 100
DK 154342 B
2 x sucrose, er det konkluderet, at styrken af disse amider hovedsageligt påvirkes af antallet af carbonatomer i alky lgruppen, r\ og at strukturisomeri i alkylgruppen kun har lille indflydelse på sødhedsstyrken.
5 Det har nu uventet vist sig, at det ikke blot er størrelsen af amid-substituenten, der er af kritisk betydning for en høj sødhedsgrad hos L-aspartyl-D-alanin amider, men at det derimod er den nøjagtige rumlige beliggenhed af amid-substituenten, R, der er kritisk. Det 10 har vist sig, at visse L-aspartyl-D-alanin-amider, der er forgrenede ved α-carbonatomet (det carbonatom, der bærer amid-nitrogenatomet) og også forgrener igen ved det ene af eller begge β- og β*-carbonatomerne, har tydelige fordele.
15 Den foreliggende opfindelse tilvejebringer således visse hidtil ukendte forgrenede amider af L-aspartyl-D-alanin og visse andre L-aspartyl-D-a-alkyl-a-amino-syre-dipeptider, der har uventet høj sødhedsstyrke og er fri for uønskede smagsegenskaber ved de sædvanlige brugsni-20 veauer. De har også vist sig at have overraskende høj stabilitet både i fast form og i vandige systemer inden for det pH-område, der findes i de fleste levnedsmiddelsystemer, selv ved de forhøjede temperaturer, der anvendes ved bagning og sædvanlig levnedsmiddelforarbejdning.
25 De hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen er L-aspartyl-D-aminosyre-dipeptidamider med den almene formel (I) : 0
j®2 NH C
NyX" ^NHR (I)
Γ 11 T
COOH 0 Ra og de fysiologisk acceptable kationiske salte og syread-30 ditionssalte deraf, hvor Ra er methyl, ethyl, n-propyl eller isopropyl, og R er en forgrenet gruppe valgt blandt fenchyl, diisopropylcarbinyl, d-methyl-t-butylcarbinyl, d-ethyl-t-butylcarbinyl, di-t: -butylcarbinyl, 2-methyl-thio-2,4-dimethylpentan-3-yl, 3
DK 154342 B
3 R4 r3 R4 ^>CH2,m ^<c->
5 R
hvor mindst den ene af R"^, R4, R^ og R er alkyl med 1-4 C-atomer, og de øvrige er hydrogen eller alkyl med 1-4 C-atomer, og summen af C-atomerne i R^, R4, R^ og R^ højst er seks, og når både R"^ og R4 eller R^ og R^ er alkyl, er de me-10 thyl eller ethyl, X er O, S, SO, S02, C=0 eller CHOH, m er nul, 1, 2, 3 eller 4, og n og p hver er nul, 1, 2 eller 3, idet summen af n + p højst er 3, »1/ 15 /^R9 >—(CH2>m 7 8 9 2q hvor én af R , R og R er alkyl med 1-4 C-atomer, og de øvrige er hydrogen eller alkyl med 1-4 C-atomer, og sum- 7 8 9 men af C-atomerne i R , R og R højst er seks, og m har den ovenfor anførte betydning,
—I
25 J-**CH2*m f~l l—(cH2)q 30 hvor m har den ovenfor anførte betydning, og q er 0, 1, 2, 3 eller 4, r12 r13 35 4
DK 154342 B
12 13 12
hvor hver af R og R er methyl eller ethyl, eller R
13 er hydrogen, og R er alkyl med 1-4 C-atomer, Z er 0 eller NH, og t er 1 eller 2, 5 ^(CH2>w
R OH
10 hvor w er 0, 1, 2, 3 eller 4, R14 og R16 hver er alkyl 15 med 1-4 C-atomer, R er hydrogen, OH eller alkyl med 1-2 C-atomer, idet summen af C-atomerne i R^4, R^ og R^ højst er seks, og når R"1"4 og R^ begge er alkyl, er de methyl eller ethyl. og 15 O® 35
DK 154342 B
5
En anden særligt foretrukken gruppe af L-aspartyl-D-aminosyreamider med formlen (I) er dem, hvor R er en gruppe valgt blandt R3 r4 R3 r4 ^7^, 277t'''(CH2)n— r6"^> r6 10 7 Π R" R8 l—(CH2>m > , -( 15 P [~i L-(CH2)m -(CH2'q R12 r13 R14 r15 "ir v>'·
0 r16 OH
25 r17 r18 -
30 R20 R
3 9 12 20 hvor R -R , R -R , A, B, X, Z, m, n, p, q, t og w er som ovenfor defineret, og ganske særligt foretrukne er de forbindelser med formlen (I), hvor R har en af de før-__ ste fire betydninger fra den ovenstående gruppe.
OD
Særligt foretrukne amider med formlen (I) er L-aspartyl-D-alanin-amiderne, dvs. dem hvor Ra er methyl.
6
DK 154342 B
Ved fysiologisk acceptable kationiske salte af for-bindeiserne ifølge opfindelsen menes saltene dannet ved neutralisation af den frie carboxylsyregruppe i forbindelserne med formlen (Ϊ) med baser af fysiologisk accep-5 table metaller, ammoniak og aminer. Eksempler på sådanne metaller er natrium, kalium, calcium og magnesium. Eksem— pier på sådanne aminer er N-methyl-glucamin og ethanol-amin.
Ved udtrykket fysiologisk acceptable syreadditions-1Q salte menes de salte, der dannes mellem den fri aminogrup-pe i forbindelsen med formlen (I) og en fysiologisk accept tabel syre. Eksempler på sådanne syrer er eddikesyre, benzoesyre, hydrogenbromidsyre, saltsyre, citronsyre, fumar-syre, gluconsyre, mælkesyre, maleinsyre, æblesyre, salpens ter syre, phosphors} re, sacchar insyre, ravsyre og vinsyre.
Opfindelsen tilvejebringer endvidere hidtil ukendte forbindelser med formlen RNE^ til brug som udgangsforbindelser ved fremstilling af forbindelser med formlen (I) og ejendommelige ved, at R er en gruppe valgt blandt 20 (a) d-ethyl-t-butylcarbinyl, cyclopropyl-t-butylcarbinyl og cyclopentyl-t-butylcarbinyl, <*>> 4, „3' .R4 7
DK 154342 B
hvor er 1 eller 2, og ^, når m, er 1: R3', r4', r5 ' og R hver er methyl,og 1 31 når m1 er 2 i R er ethyl, og R4', R5'og R6'hver er hydrogen, 5 (c) 327^<-2>ηι^χ 10 CH^V-^Vpi CH> CH3 1 hvor, n^ er nul, er 1, og X1 er 0, S eller S02, eller 15 n1 og p1 hver er nul, og er S, S02 eller C=0.
Yderligere værdifulde hidtil ukendte mellemprodukter, der kan anvendes ved fremstilling af de omhandlede forbindelser, er D-aminosyreamiderne med formlen:
20 RaCHCONHRC
nh2
S C
hvor R er som ovenfor defineret, og R er en gruppe valgt blandt fenchyl, diisopropylcarbinyl, d-me-25 thyl-t-butylcarbinyl, d-ethyl-t-butylcarbinyl, di-t-bu-tylcarbinyl, cyclopropyl-t-butylcarbinyl, cyclopentyl-t-butylcarbinyl, dicyclopropylcarbinyl, R3° r40 30 8
DK 154342 B
hvor er 1, 2 eller 3, og når m, er 1: R30, R40, R50 og R60 hver er methyl, L 30 40 når m-, er 2: R er methyl, ethyl eller isopropyl, og R , 50 60 . , .. . _ 30 R og R hver er hydrogen, eller R og R3^ hver er methyl, og R4^ og R^ hver er c hydrogen, og når m^ er 3: (a) R3^ er isopropyl eller t-butyl, R4^, R3^ og R3^ hver er hydrogen, (b) R30 er ethyl, R50 er methyl, R40 og R60 hver er i o hydrogen, eller (c) R33 og R43 hver er methyl, og R3^ og R33 hver er hydrogen eller methyl, og D41 15 -< (CH2>n^2 ~>C!CH^P2 ch3 R61 20 hvor: n2 og p2 hver er nul, R41 og R31 hver er methyl, og X2 er S, S02, C=0 eller CHOH, eller n_ er 0, p~ er 1, R41 og R61 hver er methyl, og X9 er 0, 2 2 Δ 25 S eller S02, eller n, er 1, P-, er 1, R41 og R31 hver er hydrogen, og X~ er 2 2 * S eller SC>2.
Angivelsen "carbinyl" betyder anvendt heri delen -CH-. Således er for eksempel diisopropylcarbinyl grup-30 pen (i-C^Hy)2~CH-, og dicyclopropylcarbinylamin er (A)2chnh2.
De omhandlede dipeptidamider fremstilles, hensigtsmæssigt ved fremgangsmåder, der er egnede for kobling af aminosyrer. En foretrukken fremgangsmåde til 35 fremstilling af dipeptidamiderne med formlen (I) er skitseret nedenfor.
DK 154342 B
9 NHQ Ra L- t-^ + D-NI^CHCOOR11 (1)· kondensering COOR10 COOH H2° 5 eller carboxyl-akti-veret derivat .NHQ /NHQ a /K /~7T^ X.
COOR COHN^ ^COOH-► COOR COHN^^CONHR
/ (II) / (III) / afbeskyttelse (I) 15 I ovennævnte L-asparaginsyrederivater er Q en af de velkendte amino-beskyttende grupper, der kan fjernes selektivt, såsom dem, der er beskrevet af Boissonnas,
Advances inorganic Chem., 3, 159-190 (1963). Særligt fo- 9n retrukne amino-beskyttende grupper er benzyloxycarbonyl ^ u 10 og tert.-butyloxycarbonyl. R er fortrinsvis en alkyl- gruppe med 1-4 C-atomer eller benzyl. Den anvendte D-ana-lin, D-2-aminosmørsyre, D-valin eller D-norvalin kan foreligge i form af den fri aminosyre, hvori er hydro- gen, men er fortrinsvis et carboxyl-beskyttet derivat, 11 hvori R kan være en rest af en estergruppe, såsom methyl eller ethyl, men fortrinsvis er en silylgruppe, såsom trialkylsilyl, med 3-12 C-atomer. En på grund af økonomi og effektivitet særligt foretrukken gruppe er tri-3Q methylsilyl.
I det første trin af den ovennævnte reaktionsfølge bliver den dibeskyttede L-asparaginsyre kondenseret med den passende D-aminosyre eller et carboxyl-beskyttet derivat til dannelse af det dibeskyttede dipeptid med formlen 25 (II). Selvom dette trin kan gennemføres med den dibeskyttede asparaginsyre i nærværelse af kondensationsmidler, såsom dicyclohexylcarbodiimid, foretrækkes det at anve'nde 10
DK 154342 B
et a-carboxyl-aktiveret derivat af den dibeskyttede aspa-raginsyre. Sådanne foretrukne carboxyl-aktiverede derivater er chloridet, bromidet, anhydridet eller et blandet anhydrid. Særligt foretrukne på grund af effektivitet er de blandede anhydrider af de ovennævnte dibeskyttede L-5 asparaginsyrer med estre af chlorkulsyre, navnlig alkyl-estrene, hvori nævnte alkyl har 1-4 C-atomer. Særligt foretrukne blandede anhydrider på grund af økonomi er dem, der er fremstillet ud fra methyl- og ethyl-estrene af chlorkulsyre.
10
Ved en særligt foretrukken fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne med formlen (I] bliver β-ben-zyl-N-benzyloxycarbonyl-L-asparaginsyre omsat med ethyl-chlorcarbonat til dannelse af det tilsvarende blandede anhydrid ved på oir 'ådet i og for sig kendte metoder. I en separat beholder bliver D-aminosyren, RaCH (N^) COOH, der er vundet ud fra kommercielle kilder eller ved opdeling af den racemiske aminosyre ved kendte metoder [se f.eks. Yamada et al., J.Org.Chem., 38_, 4408 (1973)], omdannet til trimethylsilylesteren ved at bringe aminosyren i kontakt med en ækvimolær mængde af trimethylsilylchlorid i nærværelse af et reaktions-indifferent organisk opløsningsmiddel. Egnede opløsningsmidler til dette formål er for eksempel pyridin, dimethylformamid eller dimethylace-^ tamid, idet dimethylformamid er særligt foretrukket.
Ved en typisk reaktion ifølge denne fremgangsmåde bliver D-aminosyren, f.eks. D-alanin, opløst i dimethyl-formamid, og en ækvimolær mængde af trimethylchlorsilan tilsættes ved stuetemperatur. I en separat kolbe bliver ^ β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-asparaginsyre og et molært overskud af et syrebindende middel, fortrinsvis triethyl-amin, opløst i en blanding af dimethylformamid og tetra-hydrofuran, og en ækvimolær mængde af ethylchlorcarbonat tilsættes ved stuetemperatur eller lavere, fortrinsvis ^ ved ca. -25° til 25°C og navnlig ved ca. -10° til 0°C, til dannelse af det blandede anhydrid. Hertil sættes opløsnin-
DK 154342 B
11 gen af f.eks. D-alanin-trimethylsilylester, fortrinsvis ved en temperatur inden for det samme område. Reaktionen er sædvanligvis tilendebragt i løbet af 1-2 timer, hvorefter reaktionsblandingen hældes i vand eller vandig syre> f.eks. saltsyre, og produktet med formlen (II) ekstrahe-5 res med et med vand ikke-blandbart opløsningsmiddel, typisk chloroform, methylenchlorid eller ethylether, og isoleres ved standardmetoder. Det diblokerede dipeptid (II) er i almindelighed af tilstrækkelig renhed til at kunne anvendes i det næste trin, men det kan, om ønsket, 1 0 renses yderligere, for eksempel ved søjlechromatografi.
I det andet trin ved denne fremgangsmåde bliver det diblokerede dipeptid (II) omsat med en ækvimolær mængde af primær amin med formlen RNE^ til dannelse af det tilsvarende diblokerede dipeptidamid-mellemprodukt med form-15 len (III), hvor Ra, R, R1^ og Q er som ovenfor defineret.
Som i det første trin kan carboxylsyreformen af reaktanten (II) med held benyttes ved anvendelse af kondensationsmidler, for eksempel dicyclohexylcarbodiimid, til dannelse af mellemprodukterne med formlen (II). Det foretræk- p n kes imidlertid at omdanne forbindelsen med formlen (II) til et carboxyl-aktiveret derivat, for eksempel chloridetr bromidet eller et blandet anhydrid, idet sidstnævnte foretrækkes. Ved anvendelse af den særligt foretrukne forbindelse med formlen (II), hvor R10 er benzyl, og Q er 25 benzyloxycarbonyl, fremstilles således det blandede anhydrid. Ligesom ovenfor er de foretrukne anhydrider dem, der vindes ud fra estre af chlorkulsyre, og methyl- eller ethylestrene deraf er særligt foretrukne. De blandede anhydrider af forbindelsen (II) fremstilles ved at anvende
Of] reaktanter og betingelser, som beskrevet ovenfor for det første trin af denne reaktionsfølge. Ved en typisk reaktion bliver forbindelsen med formlen (II) og triethylamin i omtrent ækvimolære mængder kombineret i et reaktionsindifferent organisk opløsningsmiddel, for eksempel tetra-
o C
hydrofuran, blandingen afkøles til ca. -10°C, og ethyl-chlorcarbonat tilsættes til dannelse af det blandede an-
DK 154342B
12 hydrid. Hertil sættes derefter en ækvimolær mængde af aminen med formlen RN^ eller en opløsning deraf, for eksempel i det samme reaktions-indifferente opløsningsmiddel, og ved en temperatur inden for området fra ca. -50° til 25°C og fortrinsvis ved fra -35° til -5°C. Efter endt til-^ sætning af aminen får reaktionsblandingen lov at opvarme til ca. stuetemperatur og holdes ved denne temperatur, indtil omsætningen er i det væsentlige fuldendt, sædvanligvis fra ca. 1 til 20 timer. Det ønskede mellemprodukt med formlen (II) isoleres derefter og renses, om ønsket, 10 ved de samme metoder som beskrevet ovenfor for forbindelse (II) .
I det sidste trin af denne fremgangsmåde bliver den carboxyl-beskyttende gruppe, R^, og den amino-beskytten- de gruppe, Q, fjern? t til dannelse af de ønskede dipep- 1 5 tidamider med formlen (I).'
Den metode, der vælges til fjernelse af beskyttelsesgrupper fra dipeptidamidet med formlen (III), vil variere med en række faktorer, der vil være velkendte for fagmanden. To vigtige faktorer for et sådant valg er arten 20 af beskyttelsesgrupperne R"^ og Q og arten af amid-sub-stituenten, R. Når for eksempel R^ og Q er henholdsvis de særligt foretrukne grupper benzyl og benzyloxycarbonyl, og R ikke indeholder svovl, er en foretrukken fremgangsmåde til fjernelse af nævnte beskyttende grupper sædvan-25 ligvis ved hydrogenolyse. Når imidlertid R^ er benzyl eller alkyl som ovenfor defineret, og Q· er tert.-butyloxy-carbonyl, og R har en hvilken som helst af de ovennævnte betydninger, foretrækkes det i almindelighed at fjerne de beskyttende grupper ved hydrolyse. En kombination af hy-30 drolyse og hydrogenolyse foretrækkes i de tilfælde, hvor R"^ er alkyl, Q er benzyloxycarbonyl, og R ikke indeholder svovl.
Når hydrogenolyse vælges til fjernelse af beskyttende grupper fra mellemproduktet med formlen (III), fore-35 trækkes det at gennemføre reaktionen i nærværelse af en katalytisk mængde af en ædelmetalkatalysator, idet navn-
DK 154342 B
13 lig palladium foretrækkes, og i nærværelse af et reaktions-indifferent opløsningsmiddel. Eksempler på sådanne opløsningsmidler omfatter de lavere alkanoler, såsom methanol, ethanol, isopropanol og n-butanol, ethere, såsom tetrahydrofuran, ethylether, 1,2-dimethoxyethan og di- 5 ethylenglycol-dimethylether, estre, såsom ethylacetat, methylpropionat og dimethylsuccinat, og dimathylformamid. Særligt foretrukne blandt sådanne opløsningsmidler er, på grund af økonomi og effektivitet, methanol og ethanol.
Selvom hydrogenolysen kan gennemføres med held ved højere tryk og temperaturer, foretrækkes på grund af økonomi og bekvemmelighed anvendelse af tryk på ca. 1-10 atmosfærer og stuetemperatur. Ved den foretrukne temperatur og det foretrukne tryk er reaktionen i almindelighed fuldendt på fra ca. 30 minutter til ca. seks timer, hvorefter kataly- 15 satoren fjernes, typisk ved filtrering, og opløsningsmidlet fordampes, og det resulterende produkt bliver, om ønsket, renset ved standardmetoder, for eksempel ved omkrystallisation eller søjlechromatografi.
Når hydrolyse vælges til fjernelse af den ene af 20 10 eller begge de beskyttende grupper R og Q, kan der med noget held anvendes en hvilken som helst af de velkendte metoder til alkalisk hydrolyse eller syrehydrolyse af estre og lignende. Når imidlertid blokerende grupper skal fjernes ved hydrolyse, foretrækkes alkalisk hydrolyse, og særligt foretrukne betingelser består i anvendelse af mindst en ækvivalent mængde af en stærk base, for eksempel natriumhydroxid eller kaliumhydroxid i nærværelse af vand og en lavere alkanol, navnlig methanol eller ethanol, ved eller omtrent ved stuetemperatur. Under dis-30 se foretrukne betingelser er hydrolytisk fjernelse af R^°-gruppen i almindelighed fuldendt i løbet af nogle få timer eller mindre.
Når den amino-beskyttende gruppe Q er tert.-butyl- oxycarbonyl, foretrækkes det at anvende syrehydrolyse til 35 dens fjernelse. Særligt foretrukket er fortyndet vandig 14
DK 154342 B
saltsyre i nærværelse af methanol eller ethanol og opvarmning af blandingen under tilbagesvaling. Under disse betingelser er hydrolyse sædvanligvis fuldendt i løbet af nogle få timer eller mindre.
Isolering af produkterne med formlen (I) efter fjer- 5 nelse af beskyttende grupper ved en hvilken som helst af de ovennævnte hydrolysemetoder gør brug af på området kendte standardmetoder. For eksempel bliver efter syrehydrolyse reaktionsblandingen inddampet for at fjerne opløsningsmiddel, den vandige inddampningsrest vaskes med 10 et med vand ikke-blandbart, ikke-polært opløsningsmiddel, f.eks. ethylether eller chloroform, hvorefter det vandige lag gøres alkalisk, og produktet ekstraheres med et med vand ikke-blandbart opløsningsmiddel, såsom ethylacetat, og produktet vinde ved fordampning af opløsningsmiddel.
15
Om ønsket kan produJctet renses yderligere, for eksempel ved omkrystallisation eller søjlechromatografi. Når alkalisk hydrolyse til fjernelse af en beskyttende gruppe efterfølges af hydrogenolyse for at fjerne den amino-be-skyttende gruppe Q, bliver reaktionsblandingen fra den 20 alkaliske hydrolyse fortrinsvis neutraliseret ved tilsætning af syre, for eksempel saltsyre, og den neutraliserede reaktionsblanding underkastes hydrogenolyse som ovenfor beskrevet.
En anden foretrukken fremgangsmåde til fremstilling 25 af de omhandlede forbindelser med formlen (I) er vist nedenfor .
Ra Ra
I I
D-QNHCHCOOH + RNH2-► QNHCHCONHR
30 eller carboxyl-aktiveret (IV) derivat.
NHQ
a L' Λθ ^
~ , R COOR COOH
afbeskyttelse I
35 -1 NH2CHCONHR -►(IH)-Xl) (V)
DK 154342 B
15 a 10 hvor R , R, R og Q er som ovenfor defineret.
Den amino-beskyttede D-aminosyre eller dens carbo-xyl-aktiverede derivat omsættes med en ækvimolær mængde af amin RNI^ under anvendelse af metoder og betingelser 5 beskrevet ovenfor for fremstillingen af mellemprodukter (II) og (III) til dannelse af et amino-beskyttet D-amino-syreamid med formlen (IV). Den beskyttende gruppe Q fjernes ved hydrogenolyse eller hydrolyse som ovenfor beskrevet, og det resulterende fri aminoamid (V) kondenseres 10 med et diblokeret L-asparaginsyrederivat eller et carbo-xyl-aktiveret derivat deraf, som beskrevet ovenfor for fremstillingen af mellemprodukter med formlen (II), til dannelse af det diblokerede dipeptidamid med formlen (III), fra hvilket det ønskede dipeptidamid med formlen (I) vindes 15 som ovenfor beskrevet.
Ved en modifikation for denne fremgangsmåde kan et mellemprodukt med formlen (IV), hvor R indeholder en cyc-lisk eller acyclisk sulfid-del (-S-), oxideres til det tilsvarende sulfoxid eller den tilsvarende sulfon forud 20 for dets omdannelse til mellemprodukt (V) og påfølgende omsætninger som ovenfor beskrevet til dannelse af forbindelser med formlen (I), hvor R er et sulfoxid eller en sulfon.
Ved en tredie foretrukken fremgangsmåde til frem-25 stilling af forbindelserne ifølge opfindelsen bliver D-aminosyreamidet med formlen (V), beskrevet ovenfor, omsat med L-asparaginsyre-N-thiocarboxyanhydrid til direkte dannelse af forbindelserne med formlen (I). Ved gennemførelse af denne fremgangsmåde bliver mellemproduktet (V) 30 i et egnet opløsningsmiddel bragt i kontakt med en ækvimolær mængde af L-asparaginsyre-N-thiocarboxyanhydrid ved mildt alkalisk pH ved en temperatur på fra ca. -25° til 10“C til dannelse af forbindelsen med formlen (I). Det alkaliske pH for denne reaktion tilvejebringes ved hjælp 35 af en stærk base, for eksempel natriumhydroxid eller ka- 16
DK 154342 B
liumcarbonat. Egnede opløsningsmidler for denne reaktion er dem, der opløser mindst en del af reaktanterne under de anvendte reaktionsbetingelser uden i væsentlig grad at reagere med nogen af reaktanterne og tillader de ved reaktionen dannede produkter at blive isoleret relativtiet.
c
Eksempler på sådanne opløsningsmidler for denne reaktion er vand, tetrahydrofuran, 1,2-dimethoxyethan, diethylen-glycol-dimethylether, dimethylsulfoxid, dimethylformamid og kombinationer deraf, idet foretrukne opløsningsmidler er vand og dets blandinger med tetrahydrofuran. Et fore- 10 trukket alkalisk pH-område for denne reaktion ligger fra ca. 8 til 10, og et pH på ca. 9 er særligt foretrukket.
En særligt foretrukken temperatur ligger i området fra ca. -10“ til 0“C.
Under de ove ^nævnte foretrukne betingelser er reak- 15 tionen i almindelighed fuldendt i løbet af 1-2 timer. Produktet med formlen (I) isoleres derefter ved standardmetoder, idet for eksempel pH af reaktionsblandingen indstilles på det isoelektriske pH for produktet, sædvanligvis ca. pH 5,0-5,6, for at udfælde produktet med formlen 20 (I), hovedparten af opløsningsmidlet fjernes ved fordampning eller filtrering, og råmaterialet opslæmmes med et organisk opløsningsmiddel, for eksempel methanol, ethanol, ethylether, ethylacetat eller blandinger deraf. Produktet med formlen (I) isoleres derefter, for eksempel ved fil-
OC
trering. Det kan, om ønsket, renses yderligere, f.eks. ved omkrystallisation eller søjlechromatografi.
Sødhedsstyrken hos de omhandlede forbindelser blev bestemt ved sammenligning af deres smags-sødhed med sucrose. Vandige opløsninger af forbindelsen med formlen (I) fortyndet til et passende koncentrationsområde blev af et ekspert-smagepanel sammenlignet med en sucrosestandard. Sammenligninger blev i almindelighed foretaget med vandige sucroseopløsninger på 7-9%, dvs. 7-9 g pr.100 ml. Højere sucrosekoncentrationer har en tydelig mundfornemmelsey 35
DK 154342 B
17 der kan påvirke resultater, og lavere sucrosekoncentrationer er ikke retningsgivende for normale brugssituationer.
Hvis for eksempel en 0,014%'s opløsning af forbindelsen med formlen (I) vurderes som værende lige så sød som en 7% sucroseopløsning, er sødhedsstyrken for den pågældende 5 forbindelse 7/0,014 = 500 x sucrose. Alle de heri anførte sødhedsstyrkeværdier for de omhandlede forbindelser blev bestemt ved nævnte metode. Ved tærskelkoncentrationer (dvs. den laveste koncentration, ved hvilken sødhed først bemærkes, hvilket for sucrose sædvanligvis er ved koncen- 1 0 trationer inden for området 2-3%) er styrken af et sødemiddel, såsom forbindelserne ifølge opfindelsen, i almindelighed to gange den styrke, der observeres ved sammenligning af dets smagssødhed med 7-9% opløsninger af sucrose.
15
De fornødne aminer med formlen RN^, hvor R er som ovenfor defineret, er enten kommercielt tilgængelige, eller de kan vindes ud fra let tilgængelige precursore. For eksempel kan 2-alkylcyclohexylaminer og 2,6-dialkylcyclo-hexylaminer vindes ved katalytisk hydrogenering af de 20 tilsvarende alkylsubstituerede aniliner. Mange af aminerne vindes ved reduktiv aminering af den tilsvarende keton under anvendelse af forskellige på området kendte betingelser. For eksempel kan der anvendes reduktiv aminering ved den velkendte Leuckhart-reaktion, der gør brug af my-25 resyre og formamid som reducerende midler, se for eksempel Organic Reactions, Wiley and Sons, New York, Vol. 5, side 301, 1949. Alternativt kan den pågældende keton ami-neres reduktivt ved anvendelse af natriumcyanoborhydrid og ammoniumacetat, se for eksempel J.Amer.Chem.Soc., 93, 3f) 2897 (1971), eller ved hjælp af ethanolisk ammoniak i nærværelse af en hydrogeneringskatalysator, såsom Raney-nikkel, platin eller palladium, se for eksempel Organic Reactions, 4, 174 (1948). Mange af aminerne med formlen 18
DK 154342 B
RNH2 vindes ud fra de tilsvarende ketoner ved dannelse af en intermediær oxim dannet ved omsætning af ketonen med hydroxylamin eller dens salte under på området velkendte betingelser. Oxim-mellemproduktet reduceres derefter ved 5 katalytisk hydrogenering eller ved hjælp af natrium i nærværelse af en lavere alkanol ved forhøjet temperatur.
En særligt foretrukken fremgangsmåde, der navnlig er anvendelig til reduktion af oximer af svovlholdige ketoner, gør brug af reduktion af oximen i ethanol og et molært 10 overskud af natrium ved tilbagesvalingstemperatur for blandingen.
De fornødne keton-precursore for aminerne RNH2 er enten kommercielt tilgængelige, kendte på området eller fremstilles ved kendte metoder. For eksempel kan ketoner-15 ne med formlerne (Vx) og (VII) : 4 4 R3 R3^ °iSr(CH2lm
R6R^— 2 P
20 R R
(VI) (VII) hvor R3, R^, R5, R6, X, m, n og p er som ovenfor defineret, undtagen dem med formlen (VII), hvor X er C=0, vin-25 des ved alkylering af de tilsvarende forbindelser, hvor R , R , R og R hver er hydrogen, til opnåelse af forbindelser med de ovennævnte formler, hvor fra én til alle af R3, R^, R3 og R^ er alkyl som ovenfor defineret. Alky-leringen gennemføres for eksempel ved anvendelse af alky-30 leringsmidler, såsom det passende alkylhalogenid eller alkylsulfat under neutrale eller alkaliske betingelser
DK 154342 B
19 tilvejebragt med stærke baser, f.eks. natriumhydrid eller natriumamid. Ved anvendelse af samme fremgangsmåde kan forbindelser med formlerne (VI) og (VII), hvor kun 1, 2 eller 3 af substituenterne, der er i α-stilling til keto-5 grupen, er alkyl, omdannes til forbindelser med samme formel, hvor fra to til fire af , R4, R5 og R6 er alkyl. Gem-dialkylforbindelser med formlerne (VI) og (VII), 3 4 5 6 hvor enten R og R eller R og R er nævnte alkyl, kan vindes ud fra den passende monoalkylforbindelse ved at 10 blokere den usubstituerede α-stilling forud for alkyle-ring og derefter fjerne den blokerende gruppe. For eksempel kan 2,2-dimethylcyclohexanon vindes ved kondensation af 2-methylcyclohexanon med ethylformiat i nærværelse af natriummethoxid og alkylering af det resulterende mellem-15 produkt som nedenfor skitseret: 0 0 Λγ Y^V^oNa CH τ ^ ‘ u «4?
Ketoner med formlen (VI) eller (VII), hvor den ene 3 5 af eller både R og R er propyl eller butyl, kan vindes 20 ved kondensation af den tilsvarende α-usubstituerede forbindelse med det passende aldehyd eller den passende keton under alkaliske betingelser til en intermediær a-eller a,a'-alkyliden-keton, der derefter kan hydrogeneres til dannelse af den ønskede keton.
25 De nødvendige cyclobutanoner vindes ved metoder be skrevet af Conia et al., Bull.Soc.dhim.Frankrig, 726 (1963) , og Conia, Ind.chim.Belgien, 981 (1966).
En alternativ fremgangsmåde til fremstilling af ketonerne med formlerne (VI) og (VII) indebærer en ring-30 slutning af en acyclisk precursor, for eksempel ved hjælp 20
DK 154342 B
af den velkendte Dieckmann-ringslutning af dicarboxylat-estre og påfølgende hydrolyse og decarboxylering, se f. eks. Modern Synthetic Reactions, W.A.Benjamin, Menlo Park, Cal., 1972, side 740. De fremstillede a-keto-estre, 5 navnlig dem uden anden α-substituent, kan også, om ønsket^ alkyleres forud for hydrolyse og decarboxylering. Denne reaktion kan også anvendes til fremstilling af ketoner (VI) og (VII), der er usubstituerede ved carbonatomerne nabostillet til den carbonylgruppe, der kan alkyleres som 10 beskrevet ovenfor.
Til fremstilling af diketoner med formlen (VII), hvor X er C=0, bliver ketogruppen af acyclisk keto-dicar-boxylatester-precursor omdannet til en ketal eller thio-ketal, f.eks. dimethylketal, diethylthioketal, ethylendi-15 oxyketal eller eth^lendithioketal, forud for Dieckmann-ringslutning. Estergruppe-hydrolyse og decarboxylering giver en keton-ketal, der kan omdannes til den tilsvarende aminoketal ved ovenfor beskrevne fremgangsmåder efterfulgt af hydrolyse af ketalgruppen ved på området vel-20 kendte metoder. Den resulterende aminoketon kan, om ønsket, hydrogeneres til den tilsvarende hydroxyamin (X = CHOH) ved kendte metoder, f.eks. ved reduktion med natri-umborhydrid.
2,2,4,4-Tetraalkyl-3-hydroxycyclobutylaminer frem-25 stilles ud fra de tilsvarende 1,3-dioner ved fremgangsmåden ifølge U.S.-patentskrift nr. 3.125.569.
Aminerne med formlen-; 3 K4 R"7^~(CH2>n---
NH0 X
sVICHj,p hvor X er CHOH, og R -R, n og p er som ovenfor defineret^ 30 eller N-beskyttede derivater deraf, f.eks. N-benzyloxy-carbonyl-derivater, kan oxideres, f.eks. med chromtriox-id, til de tilsvarende forbindelser, hvor X er C=0. Alternativt kan hydroxyaminen omsættes først med et carbo-
DK 154342 B
21 xyl-aktiveret derivat af en N-beskyttet D-aminosyre, D-QNHCH(Ra)COOH, hvor Q og Ra er som ovenfor defineret, og det resulterende mellemprodukt med formlen (IV) , hvor R er nævnte hydroxy-holdige gruppe, oxideres, f.eks. med 5 chromtrioxid, til dannelse af den tilsvarende keton. Den resulterende keton med formlen (IV) omdannes derefter til det ønskede produkt med formlen (I), hvor R er en keto-holdig gruppe som ovenfor ønsket.
Visse af ketonerne med fomlen (VII) vindes også ud 10 fra acycliske precursore afledt af ketoner med formlen (VIII): | I (VIII) 5 4
R R
hvor R3, R4, R5 og R6 er som ovenfor defineret. For eksempel vindes fire-leddede ketoner med fomlen (VII), hvor 15 X er 0 eller S, ved bromering af (VIII) med to mol brom, og den resulterende a,a'-dibromforbindelse ringsluttes med f.eks. natriumhydroxid til dannelse af en oxetanon eller hydrogensulfid til dannelse af en thietanon. De tilsvarende fem-leddede ringketoner (VII) vindes, når 20 (VIII) først omsættes med formaldehyd til dannelse af en intemediær α-hydroxymethylforbindelse, der derefter bromeres ved a'-stillingen og ringsluttes med natriumhydroxid eller hydrogensulfid til dannelse af de tilsvarende forbindelser med formlen (VII), hvor X er henholdsvis O 25 eller S.
Visse af tetrahydropyran-4-onerne og tetrahydrothia-pyran-4-onerne med formlen (VII) vindes ved at sætte elementerne af vand eller hydrogensulfid til den passende substituerede divinylketon.
30 Keton-mellemprodukter med fomlen (IX) , der kan om dannes til aminer via oximen, vindes ved nedenfor skitse- 17 18 19 20 rede fremgangsmåder, hvor R , R , R og R er som ovenfor defineret.
22
DK 154342 B
K2o 2 r17 ®20 1 r17 r2° Xy7 „IsX^R18 r4[^18 _► COOC2H5 C°2C2H5 0H o 0 (X) (XI) (IX)
Den passende substituerede acetoeddikesyreester (X) kondenseres med formaldehyd, f.eks. under alkaliske betingelser, og det resulterende hydroxymethylerede mellem-5 produkt (XI) ringsluttes derefter, for eksempel ved opvarmning i nærværelse af en mild syre eller base under fjernelse af ethanol, efterhånden som den dannes.
Bromering af acetoeddikesyreestre med formlen (X) og påfølgende behandling af produktet med f.eks. natrium-10 hydroxid fører til ketoner med formlen (XII), der omdannes til den tilsvarende amin som ovenfor beskrevet.
R20 ° R17 R2° S R17 ^ y^::·*· C02C2H5 0 (XII)
Alternativt kan ketolactonerne (XII) fremstilles ved fremgangsmåden beskrevet i Zeit.Chemie, 13, 11 (1973), 15 Chem.Abstr., T_8, 135596e (1973), ved omsætning af den passende cyclobutan-l,3-dion med hydrogenperoxid.
Dibromderivatet af (VIII), beskrevet ovenfor, kan også behandles med alkalimetalhydroxider, f.eks. natriumhydroxid under milde betingelser, til dannelse af den 20 tilsvarende 1,3-dihydroxyketon, der omdannes til den tilsvarende l,3-dioxan-2,5-dion med formlen (XIII) ved omsætning med phosgen.
DK 154342 B
23
O
r2° jL r1? - k X^7 coci2 r1Vu18 V% 7r18
Br Br OH OH Y
O
(XIII) 5-Oximino-mellemproduktet for (XIII) giver ved behandling med natrium i ethanol som ovenfor beskrevet, den tilsvarende 5-aminoforbindelse.
5 Behandling af et monobromderivat af ketoner med formlen (VIII) med f.eks. ethylmalonat og påfølgende hydrolyse, decarboxylering og esterificering af det resulterende produkt giver mellemprodukter med formlen (XIV), der tjener som precursore for ketonerne (XV) som eksem-10 pelvis vist nedenfor.
R20 i R17 R20 S r1? R2?. X R17 η19Χ®18 rI^'^Vr18·^ JsjkfV8 C02C9H,. 11 C02C2H5 0 (XIV) (XV)
Ketolactonerne (XV) omdannes derefter til den tilsvarende 4-aminoforbindelse, f.eks. ved reduktion af oxi-men, som ovenfor beskrevet.
15 1,3-Dibromketon-derivaterne af (VIII), beskrevet ovenfor, kan også omdannes til den tilsvarende 1,3-dimer-captoketon ved omsætning med mindst to mol natriumhydro-sulfid. Behandling af dimercaptoketonen med sådanne reagenser som iod, hydrogenperoxid eller chlorundersyrling 20 under disulfiddannende betingelser, der er velkendte på området, fører til ketonerne med formlen (XVI), der omdannes til aminer ved reduktion af oximen ved anvendelse af f.eks. natrium i ethanol.
24
DK 154342 B
rV\^r3 r5>\ f^R4 s·—s (XVI)
Aminer med formlen (XVII) fremstilles direkte, for eksempel ved fremgangsmåden ifølge Nagase et al., Chem. Pharm.Bull. 17, 398 (1969), som nedenfor vist.
12 12 ~· 12 v CH«0 v NaCN v s 2
5 >—CHO ->-CEO — ► >-C
-13 r1%h 4 R^n^cN
2 . CH2OH
/h,o, h+ NB2 r12/ (XVII)
Anvendelse af ethylenoxid i stedet for formaldehyd i det første trin af den ovennævnte reaktionsfølge fører til de tilsvarende 3-amino-2-pyroner: NH„ „12
Lactamer svarende til de ovennævnte lacton-mellem-produkter eller dem med formlen (IX), (XII), (XV) eller (XVII) vindes ved omsætning af den passende lacton med ammoniak. For eksempel bringes den ovennævnte lacton i 15 kontakt med et overskud af vandfri ammoniak i ethanol, og blandingen henstilles med omrøring natten over ved stuetemperatur til dannelse af forbindelser med formlen:
DK 154342 B
25 NH? 19
Alternativt kan visse lactam-mellemprodukter frem^ stilles ved følgende reaktionsfølge.
r2°Å_.r17 (X) Cli2° . 19^ ^18 H2 w
(C,H,CH,),NH i Pd/C
\ C02C2% n(ch2c6h5)2
NH0 N
Δ H U
De resulterende ketoner omdannes derefter til de ønskede aminer ved metoder beskrevet ovenfor.
De isomere ketolactamer vindes ved den nedenstående reaktionsfølge: R2°X^7 l.Br.
10 ' 3 TT Pd/C >2 C02C2H5 2' ' C02C2H5 0
De tilsvarende fem-leddede lactamer vindes også ved fremgangsmåden ifølge U.S.-patentskrift nr. 3.125.569:
NOH PCI,- O
r2SA^r17 eller H so »“OL·.»17 p19>Y< r18 eller H2S04, r19>^< r18
5 polyphosporsyre i—NH
O
26
DK 154342B
Cycliske eller åbenkædede α-hydroxyketoner eller a,a'-dihydroxyketoner med formlen: 0=\ (CH0) eller 0 ^ r25citb R OH R Riy hvor R^-R^, m, A og B er som ovenfor defineret, frem-5 stilles ved bromering med ét eller to mol brom og behandling af brom- eller dibrom-mellemproduktet med en hydro-xybase, f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid som ovenfor beskrevet. Reaktionsfølgen er eksemplificeret nedenfor : 0 0 CH3 1 · Br2 k
10 I J 2. NaOH, * L J 0H
ethanol ^ χ· 2 Br2 t CH3>r^S<CH3 2. NaOH, HO^l Γ^ΟΗ ethanol N,/
Dicycloalkylketoner (XVIII) og alkylcycloalkylketo-ner (XIX) fremstilles ved omsætning af det passende syre-halogenid og Grignard-reagens under anvendelse af betin-15 gelser og reagenser, der er velkendte på området, f.eks. som nedenfor vist:
DK 154342 B
27 COCX MgCl /^CH2)m rf + [f —>·0 y,
McH2)q <CH2)m L/cb, (XVIII) / COCi R?^Y R\ fi rf + T^Mgci y*8 L(CH2>m -► ^(CH2>m (XIX)
Aminer med formlen RNH2, hvor R er som ovenfor defineret, vindes også ved den velkendte Hofmann-reaktion 5 ved omdannelse af det passende carboxamid med alkalime-talhypohalogenit. Denne fremgangsmåde er navnlig anvendelig til fremstilling af cyclopropylaminer. De tilsvarende cyclopropylamider vindes og omdannes til aminer, f.eks. som nedenfor vist: R6 R3 R®R3 10 /==C + N,CHC0oC„Hc -►R5—A R4
R5 R4 2 2 2 5 ' Y
c -3 C0oCoHc 6 3 2 2 5
1- m3 f Y
2. NaOBr NH2
Det første trin af den ovenstående reaktionsfølge til dannelse af cyclopropylcarboxylsyreestren er kendt på området, se for eksempel Mescheryakov et al., Chem.Abstr., 15 54, 24436 (I960).
De forbindelser med fomlen (I) eller deres inter-mediære amider, hvor R er
DK 154342 B
28 R3 r4 7^(CH2>n^.x ε6\-2>ΓΧ hvor X er SO eller SC^, vindes ud fra de tilsvarende forbindelser, hvor X er S, ved oxidation ved anvendelse af reagenser og betingelser, der vides at føre til sulfoxi-5 der og sulfoner ud fra sulfider. Alternativt kan den passende keton med fomlen (VII), hvor X er S, eller aminen afledt af nævnte keton, som ovenfor beskrevet, oxideres til sulfoxidet eller sulfonen forud for kobling til dannelse af dipeptidan ±det med fomlen (I) . Foretrukne rea-10 genser og betingelser for sådan oxidation af sulfider omfatter anvendelse af hydrogenperoxid i et opløsningsmiddel, for eksempel eddikesyre eller acetone. Når der anvendes ækvimolære mængder af reaktanter, er produktet sulfoxidet, der let omdannes til den tilsvarende sulfon 15 med et yderligere mol peroxid. Andre foretrukne oxidanter er kaliumpermanganat eller chromsyre, til fremstilling af sulfonerne, og m-chlorperbenzoesyre. Sidstnævnte reagens er særligt anvendeligt til omdannelse af de ovennævnte thioketoner (VII) til det tilsvarende sulfoxid under an-20 vendelse af ét mol af dette reagens, eller sulfonen, når der anvendes to mol af persyren.
Forbindelserne med formlen (I) og de fysiologisk acceptable salte deraf er fordelagtige som sødemidler på grund af deres høje styrke, deres fysiske tilstand og 25 stabilitet. De er sædvanligvis krystallinske, ikke-hygro-skopiske, vandopløselige faste stoffer. De er entydigt karakteriseret ved at have en sød smag fri for uønskede skarpe eller bitre smagskvaliteter ved sædvanlige brugsniveauer. De kan med fordel anvendes til at gøre spiseli-30 ge materialer søde. Udtrykket "spiselige materialer" anvendes til at angive alle ikke-toxiske stoffer, der i fast eller flydende fom kan konsumeres af mennesker el-
DK 154342 B
29 ler dyr. Illustrerende for sådanne stoffer er levnedsmidler, inklusive næringsstoffer, fremstillede madvarepro-dukter, tyggegummi og drikkevarer, levnedsmiddeladditiver omfattende smags/duftstoffer og farvningsmidler såvel 5 som smags/duftfremmende midler, og farmaceutiske præparater.
Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fremstilles i forskellige former egnet for anvendelse af sødemidler. Typiske former, der kan anvendes, er faste former, såsom 10 pulvere, tabletter, granuler og dragée, og flydende former, såsom opløsninger, suspensioner, sirupper og emulsioner, såvel som andre sædvanligt anvendte former, der er særligt egnet for kombination med spiselige materialer.
Disse former kan bestå af forbindelserne med formlen (I) 15 eller deres fysiologisk acceptable salte enten alene eller sammen med ikke-toxiske sødemiddelbærere, dvs. ikke-toxiske stoffer, der er almindeligt anvendt sammen med sødemidler. Sådanne egnede bærere omfatter væsker, såsom vand, ethanol, sorbitol, glycerol, citronsyre, majsolie, 20 jordnødolie, sojabønneolie, sesamolie, propylenglycol, majssirup, ahornsirup og flydende paraffin, og faste stoffer, såsom lactose, cellulose, stivelse, dextrin, modificerede stivelser, polysaccharider, såsom polydex-trose (se f.eks. U.S.-patentskrift nr. 3.766.165 og U.S.-25 patentskrift nr. 3.876.794), calciumphosphat (mono-, dieller tri-basisk) og calciumsulfat.
Ligeledes anvendelige og forenelige er kompositioner indeholdende en forbindelse ifølge opfindelsen kombineret med et kendt sødemiddel, såsom sucrose, saccharin, 30 cyclamat, og L-aspartyl-L-phenylalanin-methylester, der er anvendeligt til sødning af spiselige materialer. Særligt anvendelige er blandingerne af forbindelser med formlen (I) og saccharin eller et fysiologisk acceptabelt salt deraf, f.eks. natrium-, kalium-, calcium-35 eller ammoniumsaltet af saccharin. I nævnte blandinger med saccharin vil forbindelserne for formlen (I) begrænse eller helt maskere den velkendte uønskede bitre eftersmag af saccharinet.
DK 154342 B
30 Særligt anvendelige blandt sådanne sødemiddelkompo-sitioner er dem, der indeholder saccharin i blanding med forbindelser med formlen (I), der er mindst 400 gange så søde som saccharin, navnlig dem, hvor R er methyl, og R er dicyclopropylcarbinyl, 2,2,4,4-tetramethylthietan-3-yl eller 2,2,4,4-tetramethyl-l,l-dioxothietan-3-yl. Ganske særligt foretrukne er sådanne blandinger af saccharin og L-aspar tyl-D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid, navnlig sådanne blandinger, der indeholder sidstnævnte forbindelse med formlen (I) og saccharin i et vægtforhold 10 inden for omradet fra 1:1 til 1:9. Disse blandinger er ikke blot behageligt, sødtsmagende og behageligt fri for bitter eftersmag, man de er uventet betydeligt sødere end beregnet ved summering af sødheden af de individuelle komponenter i bian ingen. De udviser således en synergi- 15 stisk effekt, idet de er op til 33% mere søde end beregnet. I blandinger af saccharin eller dets salte og L-as-partyl-D-alanin-KT-(dicyclopropylcarbinyl)amid i forhold uden for det ovennævnte område er den synergistiske effekt betydeligt reduceret.
20
Opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler.
Eksempel 1 β-Benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartyl-D-alanin.
25 C c H c CH o0CCH nCHCONHGHCOOH 6 5 2 || 2| i
O NH CEU
f 3
Cbz 30 D-Alanin (5,0 g, 56,1 mmol) blev opløst i 100 ml Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), og til opløsningen blev der dråbevis ved stuetemperatur sat 6,74 g (62,4 mmol) trime-thylchlorsilan. I en separat kolbe indførtes β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartat (18,0 g, 50,4 mmol), tri- 3~*ethylamin (12,35 g, 122 mmol) og 110 ml af hver af DMF og tetrahydrofuran, og den resulterende opløsning blev afkø- 31
DK 154342 B
let til -15°C. Til opløsningen blev der sat ethylchlor-formiat (5,95 g, 55,1 mmol) , og den resulterende blanding blev omrørt i 10 minutter ved -10“C. Hertil blev der derefter dråbevis sat DMF-opløsningen af silyleret D-alanin fremstillet ovenfor, idet blandingen holdtes ved -5° til “ -10'C. Blandingen blev omrørt ved -5°C i 1 time, hvorefter 0,2N saltsyre blev tilsat, indtil blandingen var sur, og den resulterende blanding blev ekstraheret med chloro-· form. Chloroformekstrakterne blev samlet og vasket flere gange med fortyndet saltsyre for at fjerne resterende 1 0 DMF. Opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum for at tilvejebringe titelforbindelsen som en farveløs olie. Olien blev tritureret med ethylether (100 ml), hvorved vandtes farveløse krystaller efter tre timer. Opslæmningen blev filtreret, vasket med ether, derefter med hexan og luft^ 1 5 tørret, hvorved vandtes 9,18 g, smp. 158-159°C. Efter oparbejdning af modervæsken vandtes yderligere 4,45 g produkt, smp. 157-158°C. (Totalt udbytte 63%.) Tyndtlags-chromatografi (silicagelplader) under anvendelse af et 9:9:2 (efter volumen) ethylacetat/hexan/eddikesyre-opløs- 20 ningsmiddelsystem viste produkt og en spormængde af β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-asparaginat.
Eksempel 2 β-Methyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartyl-D-alanin.
25
En suspension af 69 g (0,78 mol) D-alanin i 200 ml DMF blev afkølet til 10°C, 92 g (0,85 mol) trimethylchlor-silan blev tilsat portionsvis, og den resulterende blanding blev omrørt ved 25°C i 1 time.
I en separat kolbe indførtes en opløsning af 158 g (0,86 mol) β-methyl-L-asparaginsyre-hydrochlorid i 1 liter vand. Hertil blev der sat 34,5 g (0,86 mol) natriumhydroxid efterfulgt af 80 g natriumbicarbonat, og den resulterende blanding blev omrørt kraftigt. Efter afkøling til 5-10°C blev der portionsvis tilsat 161 g (0,94 mol) benzyloxycarbonylchlorid, og omrøring blev fortsat i to timer ved denne temperatur. Reaktionsblandingen blev va- 35
DK 154342 B
32 sket med 100 ml ethylacetat, syrnet ved tilsætning af 80 ml koncentreret saltsyre og ekstraheret med ethylacetat (2 x 450 ml). Ekstrakten (900 ml) fandtes at indeholde 218 g (0,78 mol, 90% udbytte) af β-methyl-N-benzyloxycar-bonyl-L-aspartat. Det anvendtes i det næste trin uden yderligere rensning.
Ethylacetatekstrakterne blev afkølet til -20°C, og der blev tilsat 165 g (1,63 mol) triethylamin og 84 g (0,78 mol) ethylchlorformiat. Opløsningen blev omrørt ved -15° til -20"C i 30 minutter og derefter hurtigt behand- 10 let med DMF-opløsningen af D-alanin-trimethylsilylestren fremstillet ovenfor,, og den resulterende blanding fik lov at opvarme til stuetemperatur i løbet af en time med omrøring. Reaktionsblandingen blev vasket med vand (3 x 500 ml), og det organi ke lag blev tørret over natriumsulfat 15 og inddampet i vakuum til et volumen på 200 ml. Hexan, 400 ml, blev tilsat, og blandingen blev granuleret ved 5°C og filtreret, hvorved vandtes 218 g (80%) af titelforbindelsen som et hvidt pulver.
20
Eksempel 3 L-Aspar tyl-D-alanin-N-(cis,trans-2,6-dimethylcvclohexyl) amid.
A. Til en opløsning af 218 g (0,62 mol) β-methyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartyl-D-alanin i 1 liter ethylacetat blev der sat 69 g (0,68 mol) triethylamin, og blandingen blev afkølet til -20“C, hvorefter der blev tilsat 67 g (0,62 mol) ethylchlorformiat. Den resulterende opløsning blev omrørt i 30 minutter ved -15° til -20°C og derefter behandlet med 86 g (0,68 mol) cis,trans-2,6-di-methylcyclohexylamin, og omrøring blev fortsat i 30 minutter. Efter henstilling til opvarmning til stuetemperatur
DK 154342 B
33 blev blandingen vasket to gange med 500 ml's portioner af vand indeholdende 15 ml koncentreret saltsyre, to gange med 500 ml 5% vandig natriumbicarbonat og derefter med vand. Det organiske lag blev tørret (Na2S0^), koncentreret i vakuum til ca. 200 ml, og 400 ml hexan blev tilsat, 5 hvorefter β-methyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartyl-D-ala-nin-N-(cis,trans-2,6-dimethylcyclohexyl) amid udfældede, 229 g (80%), smp. 213-214°C.
B. Det i del A ovenfor vundne produkt, 229 g (0,50 mo]) blev opløst i 500 ml methanol, og en opløsning af 24 g 10 (0,60 mol) natriumhydroxid i 500 ml vand blev tilsat. Blandingen blev omrørt ved 30°C i en time, neutraliseret til ca. pH 7 med fortyndet saltsyre og indført i en autoklav. To gram 5% palladium/kul-katalysator blev tilsat, og blandingen blev hydrogeneret ved 25eC, 3,5 kg/cm (50 15 psi) i en time. Katalysatoren blev fjernet ved filtreringt filtratet blev inddampet i vakuum til 200 ml, koncentratet blev syrnet til pH 5,2 med koncentreret saltsyre og derefter granuleret ved 5°C i en time. Det resulterende bundfald blev frafiltreret, den våde kage blev opløst i 20 en blanding af 200 ml vand og 50 ml koncentreret saltsyre, kulbehandlet, filtreret, og filtratet blev indstillet på pH 5,2 med 50 vægt%'s natriumhydroxidopløsning. Efter granulering ved 5°C, filtrering, vask med koldt vand og tørring vandtes 132 g (85% trin-udbytte) af farveløst produkt, smp. 216-217°C. Det totale udbytte var 68%.
Sødhedsstyrke: 600 x sucrose.
Eksempel 4 3q L-Aspartyl-D-alanin-N-(2-methylcyclohexyl)amid (blanding af cis,trans-isomere).
A. Under vandfri betingelser blev der til en blanding
DK 154342 B
34 af 1,28 g (3 mmol) β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspar~ iyl-D-alanin, 40 ml tetrahydrofuran og 0,29 ml (3,6 mmol) pyridin afkølet til -20°C dråbevis sat 0,29 ml (3 mmol) ethylchlorformiat. Den resulterende opslæmning blev om-5 rørt ved -15°C i 10 minutter, og derefter blev der dråbevis i løbet af nogle få minutter tilsat 0,79 ml (6 mmol) af en blanding af de cis- og trans-isomere af 2-methyl-cyclohexylamin. Reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur, blev fortyndet med vand og ekstrahe-10 ret med chloroform. Det organiske lag blev vasket med fortyndet saltsyre, vand, natriumbicarbonatopløsning, vand igen og til slut med mættet vandig natriumchlorid.
Den vaskede ekstrakt blev tørret over natriumsulfat og inddamplet til tørhed, hvorved vandtes et farveløst fast 15 stof. Det faste st, f blev tritureret med ethylether, omrørt, filtreret og tørret, hvorved vandtes 1,3 g (83%) β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspar tyl-D-alanin-N-(2-me- thylcyclohexyl)amin, der kun viste én plet (R^ 0,65) ved TLC (ethylacetat/hexan/eddikesyre 10:9:1, efter volumen).
20 B.. Til en opløsning af det i Del A vundne produkt, 1,05 g (2 mmol), i 100 ml methanol blev der sat 0,5 g 5% palladium-på-kul-katalysator, og blandingen blev hydrogeneret i et Parr-rysteapparat ved stuetemperatur, 3,5 kg/ cm (50 psi) i 30 minutter, hvorefter hydrogenoptagning 25 ophørte. Reaktionsblandingen blev filtreret, og filtratet blev inddampet i vakuum, hvorved vandtes 610 mg af det ønskede produkt som et grålighvidt fast stof, der var en blanding af cis- og trans-isomere, smp. 206-209°C.
Sødhedsstyrke: 250 x sucrose.
30 Eksempel 5 L-Aspar tyl-D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid: I, R = CH , Ra = CH- >7
DK 154342 B
35 A. Dicyclopropylcarbinylamin.
I en 500 ml's rundbundet kolbe indførtes 41,7 g (0,60 mol) hydroxylamin-hydrochlorid og 80 ml vand. Under omrøring blev der tilsat 44 ml 10M natriumhydroxidopløs-5 ning og 44,4 g (0,40 mol) dicyclopropylketon. Blandingen blev omrørt under tilbagesvaling i tre timer. Efter afkøling blev der tilsat 60 ml methylenchlorid, og blandingen blev omrørt, indtil al oxim var opløst. Methylenchlorid-laget blev fraskilt og tørret over vandfrit magnesiumsul-10 fat. Opløsningsmidlet blev fordampet ved reduceret tryk, og inddampningsresten blev omkrystalliseret af 55 ml hex-an, hvorved vandtes 40,0 g dicyclopropylketoxim, smp. 69-72eC.
I en 500 ml's trehalset rundbundet kolbe indførtes 15 18,8 g (0,15 mol) dicyclopropylketoxim og 150 ml vandfri ethanol. Under effektiv omrøring blev der portionsvis og så hurtigt som muligt tilsat 19,2 g (0,83 mol) natriumkugler, idet tilbagesvaling opretholdtes under hele tilsætningen. Efter opløsning af natriummet blev reaktions-20 blandingen afkølet til 60“C, og 60 ml vand blev tilsat.
Efter afkøling blev der dråbevis under omrøring tilsat 78 ml koncentreret saltsyre. Ethanol blev afdestilleret ved reduceret tryk, og 50 ml vand blev tilsat for at opløse salte. Blandingen blev indstillet på pH 13 med 10M 25 natriumhydroxidopløsning og ekstraheret med tre 40 ml's portioner af methylenchlorid. Ekstrakterne blev samlet, tørret over vandfrit magnesiumsulfat, filtreret og inddampet ved reduceret tryk. Den som inddampningsrest vund-ne amin blev destilleret ved 88-90eC/95 mm Hg, hvorved 30 vandtes 11,0 g af det ønskede produkt.
B. C,HcCHo0C0CH,CHC0NHCHC0NHCH
6 5 2 2 i
NHCbz CH3 V
Til en 250 ml!s trehalset kolbe udstyret med prop, termometer, tørrerør og magnetisk omrøringsstang blev der sat 4,28 g (0,010 mol) β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-35 aspartyl-D-alanin, 75 ml tetrahydrofuran og 1,53 ml
DK 154342 B
36 (0,011 mol) triethylamin. Blandingen blev afkølet til -10°C, der blev tilsat 1,05 ml (0,011 mol) ethylchlor-formiat og omrørt i 20 minutter, afkølet til -35“C og tilsat 1,11 g (0,010 mol) dicyclopropylcarbinylamin. Re-aktionsblandingen fik lov til langsomt at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Blandingen blev hældt i 150 ml vand, ekstraheret med 250 ml ethyl-acetat, og den organiske fase blev vasket med 5% vandig natriumbicarbonat (2 x 75 ml), 3M saltsyre (2 x 75 ml), saltopløsning (1 x 100 ml) og tørret over vandfrit magne-siumsulfat. Den tørrede ekstrakt blev inddampet til tørhed i vakuum, hvorved vandtes et farveløst fast stof, der blev omkrystalliseret af 75 ml kogende ethylacetat, hvorved vandtes 3,78 g (72%) diblokeret amid, smp. 164-165“C.
^ Tyndtlagschromatoc, :afi (TLC) på silicagél, idet der blev elueret med 1:1 ethylacetat/hexan, gav en enkelt plet, R^ 0,40 med vanilin-sprøjtereagens. Yderligere 0,65 g vandtes fra modervæskerne.
C. Til en opslæmning af 2,58 g (4,9 mmol) af produktet 2q vundet i Del B i 250 ml methanol blev der sat 0,60 g 5% palladium-på-kul-katalysator (50% våd), og blandingen blev hydrogeneret i en time ved et indledende tryk på 71 2 psi (5,0 mg/cm ). Katalysatoren blev frafiltreret, og me-thanolen blev fordampet ved reduceret tryk, hvorved vand-25 tes 1,47 g (100%) af farveløst produkt, smp. 190-191°C.
TLC i 4:1:1 butanol/vand/eddikesyre (vol./vol.) og sprøjtning med ninhydrin gav en enkelt plet, 0,36.
Sødhed: 1200 x sucrose.
30 Eksempel 6 L-Aspartyl-D-alanin-N-(dl-t-butylcyclopropylcarbinyl)- amid: I, R = CHC(CH3)3, Ra = CH3
A
DK 154342 B
37 A. t-Butylcyclopropylcarbinylamin.
Til 0,5 mol af hver af cyclopropancarbonylchlorid og cuprochlorid i 500 ml tør ethylether blev der dråbevis under en nitrogenatmosfære sat 238 ml (0,5 mol) 2,1M t-5 butylmagnesiumchlorid i samme opløsningsmiddel ved -10°C. Reaktionsblandingen blev hældt i en blanding af 250 ml 3M saltsyre og 700 g is, det organiske lag blev fraskilt, vasket med vand, natriumbicarbonatopløsning og saltopløsning og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Etheren 10 blev fordampet ved reduceret tryk, og inddampningsresten blev destilleret ved atmosfæretryk, hvorved vandtes 45 g (72%) t-butylcyclopropylketon, kp. 145-153eC.
Af ketonen blev 45 g (0,36 mol) omsat med hydroxyl-aminhydrochlorid og natriumacetat i 1:1 ethanol/vand ved 15 fremgangsmåden ifølge Eksempel 5, Del A. Efter opvarmning under tilbagesvaling natten over blev reaktionsblandingen afkølet, og den udfældede oxim blev indsamlet og vasket med kold ethanol, hvorved vandtes 23,5 g t-butylcyclopro-pylketoxim. Yderligere 7,7 g vandtes fra modervæskerne.
20 De samlede udbytter blev omkrystalliseret af 1:1 ethanol/ vand, hvorved vandtes 25,2 g (50%) oxim, kp. 113,5-114eC.
Til en opløsning af 5,0 g (0,035 mol) oxim i 80 ml ethanol blev der sat 8,04 g (0,35 mol) natrium, og omsætning blev gennemført, og produktet blev isoleret som be-25 skrevet i Eksempel 5, Del A, hvorved vandtes 3,31 g rå dl-t-butylcyclopropylcarbinylamin. Denne blev destilleret ved atmosfæretryk, hvorved vandtes 2,01 g (45%) produkt med kp. 153-155°C.
^c(ch3)3
B. C /- Η c CH 0 OCOCH 0 CHCONHCHCONHCH
O D Δ ΔI J xv NHCbz CH3 y 30 Fremgangsmåden fra Eksempel 5, Del B blev gentaget, idet der anvendtes 0,76 g (6,6 mmol) dl-t-butylcyclopro-pylcarbinylamin i stedet for dicyclopropylcarbinylamin og proportionale mængder af de andre reagenser. Inddampning af ethylacetatekstrakterne i vakuum gav 3,12 g (97%) fast 35 diblokeret dipeptidamid. Dette blev renset ved søjlechro-
DK 154342 B
38 matografi på en 2,5 x 30 cm søjle, idet der blev elueret med 1:1 ethylacetat/hexan. Efter inddampning af fraktionerne indeholdende det ønskede produkt (påvist ved TLC) vandtes 2,33 g (72%) farveløst fast stof, smp.118-120°C.
5 C. Det rensede produkt fra Del B, 2,33 g, blev hydrogeneret over en palladium-på-kul-katalysator som beskrevet i Eksempel 5, Del C, hvorved vandtes 1,28 g (95%) af det ønskede dipeptidamid, smp. 180-182°C (dek.). Silica-gel-TLC (4:1:1 butanol/vand/eddikesyre): én plet, 0,43.
10 Sødhed: 1200 x sucrose.
Eksempel 7 L-Aspar tyl-D-alani n-N-(2,2,5,5-tetramethylcyclopent-1-15 yl)amid: CH3^3
Ir R = —X I r R3 = CH
20 A. 2,2,5,5-Tetramethylcyclopentylamin.
En blanding af 21,0 g (0,15 mol) 2,2,5,5-tetrame-thylcyclopentanon (kp. 63-68°C ved 40 mm), 40,5 g (0,8 mol) formamid og 4 ml myresyre blev opvarmet ved 160-190°C i 20 timer, idet der blev tilsat 10 ml's portioner 25 af myresyre, hver gang faste ammoniumcarbonataflejringer dannedes i kondensatoren. Under dette tidsrum blev vand fjernet fra reaktionsblandingen ved hjælp af et fraktioneringshoved med varierbar udtagning. Blandingen blev afkølet, ekstraheret med ethylacetat, og ekstrakterne blev 30 inddampet, hvorved der som inddampningsrest vandtes en mørk olie. Denne blev blandet med 60 ml 6N saltsyre, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i tre timer. Den resulterende opløsning blev indstillet til pH 13
DK 154342 B
39 med natriumhydroxid, ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev vasket med vand og saltopløsning, tørret (magnesiumsulfat) og inddampet til tørhed, hvorved vandtes 4,9 g rå amin, der blev destilleret, hvorved vandtes 1 g af den ønskede tetramethylamin, kp. 66-69°C (30 mm).
5 B. CgHgCHjOCOCH.CHCONHCHCONH —( | NHCbz CH3 (^3>2 10
Ved at anvende 856 mg (6,1 mmol) 2,2,5,5-tetrame-thylcyclopentylamin og proportionale mængder af de andre i Eksempel 5, Del B, anvendte reagenser vandtes det di-blokerede dipeptidamid med ovennævnte formel ved fremgangsmåden ifølge nævnte eksempel. 0,36 ved silicagel-15 ·* TLC (2:3 ethylacetat/hexan). Det blev renset ved søjle- chromatografi på silicagel, idet der blev elueret med ethylacetat/hexan (2:3), hvorved vandtes 495 mg efter inddampning af produktholdige fraktioner.
2g C. Det rensede diblokerede dipeptidamid vundet i Del B, 495 mg, blev opløst i 75 ml methanol og hydrogeneret over 300 mg 5% palladium-på-kul-katalysator som beskrevet i Eksempel 5, Del C. Efter fordampning af opløsningsmiddel vandtes 185 mg af det ønskede dipeptidamid som et grålighvidt fast stof, smp. 136-140°C.
25 Sødhed: 800 x sucrose.
Eksempel 8 3-Amino-2,2,4,4-tetramethyltetrahydrofuran.
30 a. 2,2,4,4-Tetramethyltetrahydrofuran-3-on.
4-Brom-il-hydroxy-2,2,4-trimethylpentan-3-on (fremstillet som beskrevet i Eksempel 11, Del A og B), 25 g (0,1 mol), blev opløst i 160 ml ethanol, og en opløsning af 8 g (0,2 mol) natriumhydroxid i 80 ml vand blev tilsat.
DK 154342 B
40
Den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter, fortyndet med vand, ekstraheret med ethyl-ether, ekstrakterne blev vasket med vand og saltopløsning og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet 5 blev fordampet, hvorved vandtes 17,7 g 2,2,4-trimethylpen-tan-l,4-diol som en farveløs væske, der blev identificeret ved ^H-NMR. Diolen blev opløst i 50 ml chloroform, og der blev dråbevis tilsat 1,5 ml koncentreret svovlsyre. Blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer, 10 idet vand/chloroform-azeotrop blev destilleret fra blandingen. Efter henstand natten over ved stuetemperatur blev reaktionsblandingen vasket med vand, det organiske lag blev tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum, hvorred vandtes 13,9 g farveløs væske. De-15 stillation gav 8,3 j af det ønskede produkt, kp. 70-72eC (50 mm), totalt udbytte 58%.
B. Den i Del A vundne keton, 8,0 g (0,056 mol), hy-droxylaminhydrochlorid, 8,0 g (0,113 mol), og natriumacetat, 2,3 g (0,113 mol), blev samlet med 85 ml ethanol, og 20 blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 48 timer.
Den resulterende blanding blev fortyndet med vand, ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev vasket med vand, tørret og inddampet, hvorved vandtes 9,0 g af en blanding af syn- og anti-oximer, identificeret ved dens 25 ^H-NMR-spektrum.
Den ovenfor vundne oxim, 1,3 g (8,28 mmol), blev opløst i 70 ml tør ethanol, der blev tilsat 1,9 g natriummetal, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling og holdt ved denne temperatur i 15 minutter. Opvarmning 30 blev fortsat i to timer med tilsætning af to yderligere portioner (1,9 g hver) af natrium. Reaktionsblandingen blev derefter forsigtigt fortyndet med vand og ekstraheret med ethylether. Etherlaget blev ekstraheret med fortyndet saltsyre, den vandige fase blev gjort alkalisk med 35 natriumhydroxid og genekstraheret med ether. Ekstrakterne blev destilleret, hvorved vandtes den ønskede amin, kp.
68-69“C (15 mm). Efter yderligere rensning ved fældning af hydrochloridsaltet af ethylether-methanol, basifice- 41
DK 154342 B
ring af saltet og fornyet ekstraktion med ether gav 0,87 g amin med en renhed på 93% ifølge gaschromatografi (0V-1-søjle).
Eksempel 9
Ved at anvende den passende amin med formlen RNH2 ved fremgangsmåden fra Eksempel 4 vandtes på tilsvarende måde de følgende amider af L-aspartyl-D-alanin..
NH0 10 / 2
.CH0-CH
X 2 \
COOH CONHCHCONHR
CH3 '5 . D, dipeptidamid Dipeptidamid(I) R- % ud- ,, °n * u<^“ s0^hed x ....... hytte. 3ltl*\·'. . . hytte, .sucrose
XvCH3 0,57b 56 213-215 - 220
20 trans kJ
C2Hs JV 0,57a 33 180-182 77 250 kJ dek.
25 trans ch3 ch3 0,50a 90 224-225 92 600 kJ dek.
3 q trans,trans ®3\ i v· ^2^5 c Δ 0 0,46c 50 185-187 59 200 c,t + t,t (fortsættes) 35 42
DK 154342 B
°ibl°k®ret„ I Dipeptidamid(I) dipeptidamid c * p* -i ' -1 — - . .....—
Rp % ud- ς o™ % ud- sødhed x hytte /P*' bytte sucrose 1 T 0,55 42 198-201 74 200 ^ dek.
c,t + t,t i CH(CHJ, rY J z 0,54a - 145-148 74 500 trans 10 1£(CH3)3 0,40° 100 148-150 75 450 0,54° dek.
c + t CH5 >I.CH(CH3)2 0,73° 100 136-138 63 300 TT dek.
c,t + t,t 15 (æ3)2æSjx^CH(CH3)2 0,34° - 143-145 65 150 c,t + t,t ! s i i 0,31C 100 199-202 44 250 os dl 20 CH3^vS<^CH3 0,36C 69 199-206 100 400 ^ ch3 c + t ch3v1_^ch3 0,33C 97 105-112 42 300 CH-, S* CHo (fortsættes) i
DK 154342 B
43
Diblokeret D1peptiaamid(I) dipeptidamid_c __ R' R- % ud- _ ep % ud- sødhed x 1 hytte. c hytte sucrose 5 003CHs °'56° 95 91 320
ch3^<CX
CH3 — CH3 0,55C 95 - 91 200 CE3'^0 dl 10 1 CH- 3 0,44a 100 185-186 86 220 I_1 dek.
trans [VC2H5 0,75a 96 89-93 82 250 *-* dek.
trans 15 |^yCH(CH3) 2 0,38C 88 206-208 89 625 trans ch3YY CH3 - 93 175-177 59 520 I-1 dek.
blandede isanere 20 CH3'>fs<' CH3 0,2C 94 95-99 100 350 ch3 «-O ch3 dl 0,4C 95 186-188 73 140 \y 3 3 dek.
dl (fortsættes)
DK 154342 B
44 °1&1°ί|ΓεϊΛ I Dipeptidamid(I) dipeptidamid_____ R_ % ud- ς or % ud- sødhedx r bytte p*' bytte sucrose 5 * 0,54a 100 179-181 81 250 /CHn dek.
(ch3)2ch ch(ch3)2 r
CH
10 / \ 0,66a 63 180-183 48 180 (ch3)3c ch3 dek.
dl /CE\ - 96 183-185 52 375 15 (OH.,) ,C CHq 1 dek.
3 3 3 [a]n+29,7 i (c=S, d I ch3oh) f
i I
/C\ 0,54a I 100+ 134-137 72 180 20 (ch3)3c ch2ch3 i (rå) dek- dl „ 0,72a 89 193-197 87 110 V CH3 dek.
25 dl i i CH - I 79 110-115 54 125 / \
(CH3)3C CH(CH3)2 · I
dl j
30 I
i (fortsættes)
DK 154342 B
45 R* dipeptldamld I DiPeptidamid(I) "
Rf % ud- _ o r I« ud- sødhed x ... bytte. bytte sucrose 5 CH3\/CH3 0,17 52 " 99 200 ch3 ch3 10 CH3 CH3 - - 144-148 - 400 ‘%s^> dek.
15 CH3 ^ CH3 ___-----
Configuration af amin, RNH2 er anført, hvor kendt: c = cis, t = trans, 1 = venstredrejende, dl = racemisk.
a 7:3 ethylacetat/hexan.
2^ ^10:9:1 ethylacetat/hexan/eddikesyre.
C1:1 ethylacetat/hexan.
ifengder for opløsningsmiddelsystemer er efter volumen .
JC DK 154342 B
46
Eksempel 10 L-Aspartyl-D-alanin-N-(3f5-dimethyl-tetrahydrothiopyran- 4-yl)amid: CH- 5 )“λ I, R = —( S , Ra = CH? λ7 CH3 10 blanding af cis/trans- og trans/trans-isomere A. 3,5-Dimethyltetrahydrothiopyran-4-on.
En blanding af 2 g natriumacetat og 25 ml ethanol blev mættet med luftformigt hydrogensulfid. Hertil blev der sat 7,0 g (0,0'3 mol) diisopropenylketon, idet der 15 blev afkølet i et .. sbad, indtil reaktionen ikke længere var eksoterm. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur, mens hydrogensulfid blev ledt gennem blandingen i fire timer og derefter henstillet natten over. Ethanol og overskud af H2S blev fordampet i vakuum, og inddampnings-20 resten blev optaget i ethylether, vasket successivt med vand, kaliumcarbonatopløsning, fortyndet saltsyre og igen vand. Etherekstrakterne blev tørret (Na2SO^) og inddampet, hvorved vandtes 6,8 g olie. Denne blev destilleret i vakuum gennem en 10 cm Vigreaux-kolonne, hvorved vandtes 25 1,67 g produkt, kp. 83-86eC/9 mm, der anvendtes i det næste trin uden yderligere rensning.
B. 4-Oximino-3,5-dimethyltetrahydrothiopyran.
En blanding af 1,67 g (0,011 mol) af den i Del A vundne cycliske keton, 1,6 g (0,023 mol) hydroxylaminhy-30 drochlorid og 1,9 g (0,023 mol) natriumacetat i 30 ml vand og 10 ml ethanol blev opvarmet under tilbagesvaling i tre timer og afkølet, og det udfældede materiale blev frafiltreret. Efter omkrystallisation af 1:1 methanol-vand vandtes 1,5 g oxim som et hvidt fast stof, smp. 60-35 85°C, der var en blanding af isomere af passende renhed til anvendelse i næste trin.
47
DK 154342 B
C. trans/trans- og cis/trans-4-Amino-3,5-dimethyltetra-hydrothiopyran.
Til en opløsning af 1,45 g (0,009 mol) af den i Del B vundne oxim i 15 ml ethanol blev der portionsvis sat 5 g natriumhagl efterfulgt af yderligere 25 ml etha-nol, og den resulterende blanding blev opvarmet under tilbagesvaling i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand, ekstraheret med ethylether, og ekstrakterne blev vasket med vand. Etherlaget blev ekstraheret med fortyndet saltsyre, og det vandige lag blev va- 10 sket med frisk ether. Det vandige lag blev gjort alkalisk ved tilsætning af natriumhydroxidopløsning og igen ekstraheret med ether. Det organiske lag blev tørret (MgSO^), og etheren blev fordampet, hvorved der som inddampnings-rest vandtes 1,1 g farveløs olie. Gas-væske-chromatografi i c (OV-l-søjle med temperaturprogrammering fra 80° til 100"C) vist , at produktet indeholdt to hovedkomponenter i et forhold på 60/40. ^H-NMR (CDCl^) viste, at produktet var en blanding af 4-amino-3-trans-5-trans-dimethyltetrahy-drothiopyran og den tilsvarende 3-cis-5-trans-isomer.
20 D. N-tert.-Butoxycarbonyl-D-alanin.
Til 7,0 ml af hver af tetrahydrofuran og vand blev der sat 2,71 g (11 mmol) N-(t-butoxycarbonyloxyimino)-2- phenylacetonitril (BOC-ON, Aldrich Chemical Co.), 0,89 g (10 mmol) D-alanin og 1,5 g (15 mmol) triethylamin, og 25 den resulterende tofase-blanding blev omrørt ved stuetemperatur. Efter ca. to timer blev blandingen homogen, og omrøring blev fortsat natten over. Blandingen blev fortyndet med vand, vasket med ethylacetat og syrnet med fortyndet saltsyre til pH 1,5. Den syrnede :opløsning blev 30 ekstraheret med ethylacetat, ekstrakterne blev vasket med vand og mættet saltopløsning og tørret over natriumsulfat Opløsningsmidlet blev fordampet ved reduceret tryk, hvorved vandtes 1,,9 g produkt som en farveløs olie, der var egnet til brug i det næste trin.
35 48
DK 154342 B
E. N-(3,5-Dimethyltetrahydrothiopyran-4-yl)-t-butoxycar-bonyl-D-alanin-amid.
CH- 5 )
D t-Boc-NH-CHCONH-{ S
Under vandfri betingelser blev der til en blanding af 1,7 g (8,9 mmol) N-t-Boc-D-alanin, vundet i Del D, 1 o 1,98 g (19 mmol) triethylamin og 40 ml tetrahydrofuran, afkølet til -10°C, dråbevis sat 0,96 g (8,9 mmol) ethyl- chlorformiat, og den resulterende blanding blev omrørt ved denne temperatur i 20 minutter. Hertil blev der sat 1,1 g (7,5 mmol) af blandingen af isomere af 4-amino~3,5-15 dimethyltetrahydrothiopyran vundet i Del C, og den resulterende blanding blev omrørt ved -10°C i 10 minutter og fik lov at opvarme til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand og ekstraheret med ethylace-tat. Det organiske lag blev vasket med natrlumbicarbonat- 20 opløsning, fortyndet saltsyre, vand og saltopløsning og derefter tørret (Na2SO^), og opløsningsmidlet blev fordampet ved reduceret tryk, hvorved vandtes produktet som et skum, 2,4 g. Tyndtlagschromatografi (TLC), silicagel- plader, eluering med 1:1 ethylacetat/hexan, viste hoved-25 plet for produktet ved R^ 0,5 med sporurenheder ved R^ O, 6 og 0,9.
P. N-(3,5-Dimethyltetrahydrothiopyran-4-yl)-D-alaninamid.
OH, y~\ NH2CHCONH-< s ®3 ) CH3 t-Boc-amidet vundet i Del E blev opløst i 15 ml ethanol, og der blev tilsat en blanding af 5 ml koncen- 35
DK 154342 B
49 treret saltsyre og 10 ml vand. Den resulterende blanding blev opvarmet under tilbagesvaling i 30 minutter, afkølet, og ethanolen blev fordampet i vakuum. Den vandige inddampningsrest blev vasket med ethylether, gjort alkalisk med natriumhydroxidopløsning og ekstraheret med 5 ether, og ekstrakterne blev tørret (Na2SO^). Fordampning af opløsningsmidlet gav 1,1 g (67%) farveløs olie, der krystalliserede ved henstand.
G. Kobling af D-alaninamid med L-asparaginsyre-N-thio-carboxyanhydrid.
10 D-Alaninamidet vundet i Del F, 1,1 g (5,1 mmol), blev opløst i 5 ml tetrahydrofuran, og der blev tilsat 5 ml vand. Den klare opløsning blev afkølet i is, og 0,89 g (5,1 mmol) L-asparaginsyre-N-thiocarboxyanhydrid blev tilsat på én gang. Hertil blev der sat det nødvendige 15 0,5M natriumhydroxid for at holde blandingen ved pH 9.
Efter omrøring i 30 minutter blev reaktionsblandingen vasket med ethylether og derefter med ethylaaetat, og vaskevæskerne blev bortkastet. Den vandige fase blev syrnet med fortyndet saltsyre til pH 5,6 og inddampet til tørhed 20 ved reduceret tryk. Inddampningsresten blev optaget i varm methanol (100 ml), filtreret, og methanolen blev fordampet. Inddampningsresten blev igen optaget i varm methanol, filtreret, og filtratet blev affarvet med aktiveret kul, filtreret gennem diatoméjord, og filtratet 25 blev inddampet, hvorved vandtes 1,67 g råprodukt i form af et pulver. Råproduktet blev opløst i varmt vand OLI ml) og filtreret, inddampet under en strøm af nitrogen til 5 ml og afkølet i is for at udfælde produktet som et gela-2Q tinøst fast stof. Produktet blev frafiltreret, suget tørt, vasket med 2 ml koldt vand, 2 ml kold methanol og til slut med en blanding af 1 ml methanol og 4 ml ethylether, hvorved vandtes et granulært produkt, der blev tørret i en vakuumovn ved 50°C, hvorved vandtes 0,3 ;g af det øn-skede produkt.
Sødhed: 200 x sucrose.
DK 154342 B
50
Eksempel 11 3-Amino-2,2,4,4-tetramethyltetrahydrothiophen.
A. l-Hydroxy-2,2,4-trimethylpentan-3-on.
Til natriummethoxid fremstillet ud fra 7,5 g natriummetal og 250 ml methanol blev der sat 72,5 g (2,4 mol) 5 paraformaldehyd efterfulgt af 250 g (2,2 mol) diisopro-pylketon, og den resulterende blanding blev opvarmet under tilbagesvaling i tre timer. Reaktionen blev undertrykt med vand, og der blev neutraliseret med saltsyre, ekstraheret med ethylether, vasket med vand og saltopløs- 10 ning, og opløsningsmidlet blev fordampet. Den som md-dampningsrest vundne olie (90 g) blev destilleret i vakuum, hvorved vandtes 28 g af det ønskede produkt med kp. 92-98eC ved 16-20 mm. GLC på OV-l-søjle ved 107°C, tilbageholdelsestid 314 sekunder, 96% rent.
Når ovennævnte fremgangsmåde blev gentaget i samme målestok, men idet reaktionsblandingen blev tilbagesvalet i 16 timer, vandtes 31 g produkt med en renhed på 96% i-følge GLC.
2o B. 4-Brom-l-hydroxy-2,2,4-trimethylpentan-3-on.
Til en omrørt tilbagesvalende opløsning af 69 g (0,48 mol) l-hydroxy-2,2,4-trimethylpentan-3-on i 500 ml chloroform blev der dråbevis sat en opløsning af 77 g (0,48 mol) brom i 100 ml chloroform. Efter endt tilsæt- 25 ning blev blandingen omrørt under tilbagesvaling i en time og fik derefter lov at afkøle og blev henstillet natten over ved stuetemperatur. Fordampning af opløsningsmidlet ved reduceret tryk gav 127 g produkt, der anvendtes i det næste trin uden rensning.
3 g C. 2,2,4,4-Tetramethyltetrahydrothiophen-3-on.
Produktet vundet i Del B, 79 g (0,3 mol), blev opløst i 300 ml tør pyridin, afkølet til 0*C, og der blev portionsvis ved 0°C tilsat 114 g (0,6 mol) p-toluensulfo-nylchlorid. Den resulterende blanding blev omrørt ved 35 denne temperatur i 3 timer og 15 minutter, hældt i is/ vand og ekstraheret med ethylether. Ekstrakterne blev vasket med fortyndet saltsyre, vand og saltopløsning og 51
DK 154342 B
derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløs-ningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes 111 g (98%) krystallinsk tosylat.
Tosylatet, 94 g (0,25 mol), blev opløst i en liter pyridin, og der blev tilsat 180 g (0,75 mol) natriumsul-5 fid-monohydrat, og blandingen blev opvarmet til 75°C og holdt ved denne temperatur i en time og blev henstillet ved stuetemperatur natten over. Vand blev tilsat, og blandingen blev ekstraheret med ether. Ekstrakterne blev vasket med saltsyre og saltopløsning og tørret (MgSO^), 10 og opløsningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes 35 g af titelforbindelsen, 89% udbytte. Produktet viste kun én plet ved silicagel-TLC, eluering med ethylacetat/hexan (1:4 efter volumen), 0,5. ^"H-NMR-spektret var i overensstemmelse med strukturen for titelforbindelsen.
15d. Leuckart-reduktion af keton.
Til en 100 ml rundbundet trehalset kolbe udstyre* med omrører, termometer og kondensator med -fraktioneringshoved blev der sat 10,0 g (0,063 mol) 2,2,4,4-tetra-methyltetrahydrothiophen-3-on, 15,2 ml (0,3& mol) formamid 20 og 3,5 ml (0,092 mol) myresyre, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling (163°C) med vandfjernelse. Reaktionsblandingen holdtes ved 160-180“C i 20 timer med tilsætning af myresyre (10 ml) med mellemrum. Beholdertempe- raturen steg til 200°C over denne periode. Reaktionsblan-25 dingen blev afkølet, der blev tilsat vand, og blandingen blev ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne blev inddampet i vakuum. Inddampningsresten blev tdlbagesvalet med 20 ml 6N saltsyre i to timer, afkølet, og den resulterende blanding blev vasket med ethylether, den vandige 30 fase blev indstillet pa pH 11 med natriumhydroxidopløs-ning og ekstraheret med ethylether. Ekstrakterne blev tørret og inddampet, hvorved vandtes 2 g 3-amino-2,2,4,4-tetramethyltetrahydrothiophen, der blev identificeret ved ^H-NMR og viste sig homogen ved silicagel-TLC.
35
DK 154342 B
52
Eksempel 12 L-Aspartyl -D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyltetrahydro-thiophen-3-yl)amid: CHn CHo 5 I, E = “Og , Ra = CH3 ch3 ch3 CH3 \^CH3 1 0 A. t-Boc-NHCH-CONHv?] ch3 ch3
Til en opløsning af 2,09 g (11 mmol) N-t-butoxycar- 1 5 bonyl-D-alanin i 75 ml tetrahydrofuran blev der sat 1,47 ml (10 mmol) triethylamin, og blandingen blev afkølet til -10°C. Ved denne temperatur blev der tilsat 0,96 ml (10 mmol) ethylchlorformiat, og omrøring blev fortsat i 15 minutter. Efter afkøling til -20°C blev der tilsat 1,6 g 20 (10 mmol) dl-3-amino-2,2,4,4-tetramethyltetrahydrothio-phen, og den resulterende blanding fik lov at opvarme til stuetemperatur. Ethylacetat blev tilsat, og blandingen blev vasket to gange med 50 ml's portioner af 5 vægt% vandig citronsyre, vandig natriumbicarbonat (1 x 50 ml) 25 og mættet saltopløsning (1 x 50 ml). Det organiske lag blev tørret (Na2SO^) og inddampet til tørhed ved reduceret tryk, hvorved vandtes 3 g N-(2,2,4,4-tetramethyltetra-hydrothiophen-3-yl)-t-butoxycarbonyl-D-alaninamid som en olie. Strukturen af produktet blev verificeret ved dets 30 ! H-NMR-spektrum. Produktet var i det væsentlige homogent ved silicagel-TLC. Dette produkt anvendtes uden yderligere rensning i det næste trin.
35
DK 154342 B
53 CH, CH,
V
B. CH,CH(NH,)CONH-\ I
V
CH, CH, 5 3 3
Til produktet fra Del A blev der sat '5 ml methanol og 30 ml 1M saltsyre, og blandingen blev opvarmet på dampbad i 30 minutter. Methanolen blev fordampet, og inddamp-^ ningsresten blev ekstraheret med ether. Etheren blev bortkastet, og den vandige fase blev indstillet på pH 11,0 med natriumhydroxidopløsning, ekstraheret med ethylacetat, ekstrakterne blev tørret (Na2SO^) og inddampet til tørhed^ hvorved vandtes 1,0 g N-(2,2,4,4-tetramethyltetrahydro- thiophen-3-yl)-D-alaninamid, der blev identificeret ved 15 dets NMR-spektrum. Det var homogent ved silicagel-TLC.
C. Kjbling til dannelse af dipeptidamid.
Det i Del B vundne D-alaninamid, 0,97 g (4,25 imnol), blev blandet med 10 ml vand, afkølet i is, :og pH af blan-dingen blev indstillet på 9,2 med 0,5N natriumhydroxid-opløsning. Hertil blev der portionsvis og under omrøring sat 0,8 g (4,25 mmol) L-asparaginsyre-N-thiocarboxyan-hydrid, idet blandingen holdtes ved pH 9 med natriumhydroxidopløsning (0,5N). Efter endt tilsætning blev den resulterende blanding omrørt ved 0eC i 45 minutter, ind- 25 stillet på pH 5,2 med saltsyre og inddampet til tørhed i vakuum. Inddampningsresten blev opslæmmet med methanol, filtreret for at fjerne udfældede faste stoffer, og methanol blev fordampet fra filtratet ved reduceret tryk.
2Q Ethylether blev sat til inddampningsresten .til dannelse af et fast stof. Dette blev frafiltreret, genopslæmmet med ethylether, igen filtreret, og det faste stof blev omkrystalliseret af 8 ml vand. Efter tørring i vakuumovn vandtes ca. 1 g produkt, smp. 124-126°C. Et yderligere 35 udbytte vandtes ved at oparbejde modervæskerne.
Sødheds 500 x sucrose.
54
DK 154342 B
Når venstredrejende 3-amino-2,2,4,4-tetramethylte-trahydrothiophen, opdelt ved standardmetoder, anvendtes ved ovennævnte fremgangsmåde i stedet for den racemiske amin, fandtes det resulterende L-asparagyl-D-alaninamid at være 800 gange sødere end sucrose.
5
Eksempel 13 3-Amino-2,2,4,4-tetramethylthietan.
A. 2,4-Dibrom-2,4-dimethylpentan-3-on.
Til 136 g (1,2 mol) diisopropylketon blev der sat ^ 2 ml phosphortribromid, og blandingen blev afkølet til 10°C. Hertil blev der dråbevis sat 384 g (2,4 mol) brom, og blandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur. Efter to timer ved denne temperatur blev blandingen opvarmet ved 55-60“C i en time og blev derefter afkølet og ^ fordelt mellem chloroform og vand. Vandet blev bortkastet^ og det organiske lag blev vasket med natriumcarbonatopløsning, indtil det var neutralt. Det organiske lag blev tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes 316 g (97%) af det ønskede produkt.
B. 2,2,4,4-Tetramethyl-3-oxothietan.
Natriummetal, 23 g (1,0 mol), blev opløst i 500 ml tør methanol, og den resulterende blanding blev afkølet til 10°C. Luftformigt hydrogensulfid blev ledt gennem blandingen, indtil den var mættet. Derefter blev der drå-0 s bevis tilsat 136 g (0,5 mol) af dibromketonen vundet i Del A, idet hydrogensulfid fortsat fik lov at passere gennem reaktionsblandingen. Efter endt tilsætning blev blandingen omrørt i to timer ved 10°C, fik lov at opvarme til stuetemperatur og blev omrørt natten over. Efter ud- o η hældning af reaktionsblandingen i vand blev den ekstraheret med ethylether, og ekstrakterne blev vasket med fortyndet saltsyre og saltopløsning. Efter tørring over magnesiumsulfat blev etheren fordampet, inddampningsresten blev opslæmmet med methanol, afkølet og filtreret, hvor-35 ved vandtes 46 g (64%) fast produkt, der anvendtes i næste trin uden yderligere rensning.
DK 154342 B
55 C. Reduktiv aminering af keton.
Til 75 ml tør methanol blev der sat 4,5 g (0,031 mol) 2,2,4,4-tetramethyl-3-oxothietan, 23,9 g (0,31 mol) ammoniumacetat og 1,36 g (0,0217 mol) natriumcyanoborhy- drid, og den resulterende blanding blev opvarmet under 5 tilbagesvaling i fire timer. Yderligere natriumcyanobor-hydrid (1,36 g) blev tilsat, og tilbagesvaling blev fortsat i tre dage med en tredie portion af samme reagens tilsat ved begyndelsen af den tredie dag. Den resulterende blanding blev syrnet til pH 2 med saltsyre og inddampet til tørhed på rotationsfordamper ved reduceret tryk. Ind-dampningsresten blev opløst i vand, vasket ;med ethylether, den vandige fase blev indstillet på pH 11 med natriumhydroxidopløsning og ekstraheret med ethylether. Ekstrak-^ terne blev vasket med saltopløsning, tørret (MgSO^) og inddampet til tørhed, hvorved vandtes 1,9 g (42%) af den ønske.de amin som et krystallinsk fast stof,. Strukturen af produktet blev verificeret ved dets ^H-NMR-spektrum.
D. 3-Amino-2,2,4,4-tetramethylthietan-l, 1-diioxid.
Den ovenfor i Del C vundne amin, 29 -g.-, (0,2 mol), 20 blev opløst i 50 ml acetonitril, og 250 ml vand blev tilsat. Idet blandingen holdtes ved pH 10 med natriumhydroxid, blev der i løbet af 30 minutter tilsat 35,8 g (0,21 mol) carbobenzoxychlorid, blandingen blev omrørt i en time, filtreret, og bundfaldet blev vasket med vand og tør-25 ret i vakuum ved 50°C, hvorved vandtes NCbz-aminen, R^ 0,7 (hexan/ethylacetat 4:1 vol./vol., phosphomolybdænsyre-sprøjtning) , 52,1 g (93,4%). Denne blev oplcøst i 700 ml methylenchlorid, og der blev langsomt, under opretholdelse af en temperatur under 45°C (20-42°C), tilsat 77 g (0,372 mol) m-chlorperbenzoesyre. Det udfældede faste stof blev frafiltreret, filtratet blev vasket med IN saltsyre og vandig natriumbicarbonatopløsning, tørret (MgS04), og opløsningsmidlet blev fordampet. Inddampningsresten 2g blev krystalliseret af acetone-vand, hvorved vandtes 42 g (73%) af det Cbz-beskyttede amin-l,l-diox:LcL, R^ 0,7 (hexan/ethylacetat 1:1 vol./vol., phosphomolybdænsyresprøjt-ning).
DK 154342 B
56
Den beskyttende gruppe blev fjernet ved hydrogeno-lyse af 5 g Cbz-amin i 250 ml methanol, 5 ml koncentreret saltsyre og 2 g 5% Pd/C (50% våd). Produktet blev isoleret på sædvanlig måde. Udbytte: 2,4 g (85%), Rf 0,6. Tilbageholdelsestiden ved gas-væske-chromatografi på en 1 5 meter OV-l-søjle ved 180°C var 1,3 minutter. Det totale udbytte for de tre trin startende fra 3-amino-2,2,4,4-tetramethylthietan var 65%.
Ved at anvende ækvivalente mængder af amin og m-chlorperbenzoesyre ved ovennævnte fremgangsmåde vandtes 1 0 på lignende måde det tilsvarende sulfoxid.
Eksempel 14 L-Aspar tyl -D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethylthietan-3-yl)-15 amid.
CH0 CH-JK a I, R = —<T ' R = CH3 CH3 ch3 20 ch3 ch3
A. t-Boc-NHCH(CH3)CONH
CH3 ch3 25 Til en opløsning af 2,09 g (11 mmol) N-t-butoxycar- bonyl-D-alanin i 75 ml tetrahydrofuran blev der sat 1,47 ml (10 mmol) triethylamin, og blandingen blev afkølet til -10"C. Ethylchlorformiat, 0,96 ml (10 mmol) blev tilsat, blandingen blev omrørt i 10 minutter og derefter afkølet 30 til -20*C, og 1,70 g (11 mmol) 3-amino-2,2,4,4-tetrame-thylthietan opløst i 5 ml tetrahydrofuran blev tilsat. Reaktionsblandingen fik lov at opvarme til stuetemperatur, ethylacetat blev tilsat, og blandingen blev vasket med 5 vægt% citronsyreopløsning (2 x 50 ml), natriumbi-35 carbonatopløsning indtil neutralitet og derefter med saltopløsning. Det organiske lag blev tørret (Na2S04), og opløsningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes 2,7 g 57
DK 154342 B
(78%) af det ønskede faste produkt. ^H-NMR-Spektret for produktet var i overensstemmelse med det ventede. Ved silicagel-TLC, eluering med 1:1 ethylacetat/hexan, viste produktet sig homogent, 0,77.
CH-, OH, 5 X 3
B. D-CH3CH (NH2) CONH—S
CH^* CH3
Ved at anvende fremgangsmåden beskrevet i Eksempel 10 10, Del F, blev det i Del A af dette eksempel fremstillede t-Boc-D-alaninamid hydrolyseret, hvorved vandtes det fri a-aminoamid i et udbytte på 43%. Produktet var homogent ved silicagel-TLC og gav et ^H-NMR-spektrum i overensstemmelse med dets struktur.
15 C. Kobling til dannelse af dipeptidamid.
En opløsning af 0,7 g (3,2 mmol) af det i Del B ovenfor fremstillede α-aminoamid blev blandet med 10 ml vand, indstillet til pH 10,1, afkølet i et isbad, og der blev portionsvis, idet blandingen holdtes ved pH 9 ved 20 tilsætning af 0,5N natriumhydroxidopløsning, tilsat 0,567 g (3,2 mmol) L-asparaginsyre-N-thiocarboxyanhydrid.
Blandingen blev derefter omrørt ved 0°C i 45 minutter, indstillet på pH 5,2 og inddampet til tørhed i vakuum.
Inddampningsresten blev opslæmmet i methanol, de faste 25 stoffer blev frafiltrerét, og filtratet blev inddampet.
Til inddampningsresten blev der sat 150 ml ethylether, og det udfældede produkt blev frafiltreret og tørret i vakuumovn natten over, hvorved vandtes 1,5 g råmateriale. Efter genopslæmning to yderligere gange med ethylether vandtes 0,9 g produkt (85%).
Sødhed;: 2000 x sucrose.
35
DK 154342B
58
Eksempel 15 L-Aspartyl -D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-l,1-dioxo-thietan-3-yl)-amid.
ch3 ch3 5 I, Ra = CH3, R =-<^^S02 ch3 ^ch3 CH-, CH-, A. t-Boc-NHCH (CH3) CONH-<^^S02 CH3 <=3
En opløsning af 31,6 g (0,10 mol) N-t-butoxycarbo-nyl-D-alanin-N- (2,2,4,4-tetramethylthietan-3·'- yl) amid, vun-det i Eksempel 14, Del A, i 500 ml chloroform afkøledes til 10-20°C,og 41,3 g (0,24 mol) m-chlorperbenzoesyre blev langsomt tilsat, idet reaktionstemperaturen holdtes under 45eC. Den resulterende blanding blev omrørt en time, fortyndet med chloroform og vasket successivt med 5% vandig 2Q natriumbicarbonat, 0,1N saltsyre, 5% natriumthiosulfat og mættet saltopløsning. Det vaskede organiske lag blev tørret (MgSO^) og inddampet til tørhed, hvorved der som ind-dampningsrest vandtes 33,7 g olie (97%) af passende renhed for anvendelse i det næste trin.
25 CH3 CH3 B. D-CH3CH (NH2) CONH so2 CH3 ch3 30 Det i Del A ovenfor vundne t-Boc-amid, 34,8 g (0,10 mol), opløst i en blanding af 50 ml koncentreret saltsyre og 100 ml af hver af vand og ethanol blev opvarmet under tilbagesvaling i en time. Blandingen blev afkølet, vasket med ethylether, den vandige fase blev ind-33 stillet på pH 12 med 50% vandig natriumhydroxid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne blev tørret (MgSO^) og inddampet i vakuum, hvorved vandtes 18,7 g (75%) krystallinsk fast stof. Dette blev omkrystalliseret
DK 154342 B
59 af carbontetrachlorid under genvinding af 80% produkt.
C. Diblokeret dipeptidamid.
Til en opløsning af 14,28 g (0f04 mol) β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartat i 700 ml tetrahydrofuran blev der sat 4,4 ml (0,04 mol) N-methylmorpholin, og 5 blandingen blev afkølet til -10eC. Ethylchlorformiat, 3,9 ml (0,04 mol), blev tilsat, blandingen blev omrørt ved -10°C i 15 minutter og afkølet til -20eC. En opløsning af 9,92 g (0,04 mol) D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl·- l,l-dioxothietan-3-yl)amid, fra Del B ovenfor, i 50 ml 10 tetrahydrofuran blev tilsat, og den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i en time. Reaktionsblandingen blev hældt i 700 ml ethylacetat, vasket successivt med IN saltsyre, natriumbicarbonatopløsnirig, 0,1N natriumhydroxid og saltopløsning. De vaskede ekstrakter blev 1 5 tørret (MgSO^) og inddampet i vakuum. Inddampningsresten blev opslæmmet i ethylether, og det faste stof blev frr-filtreret, hvorved vandtes 19,8 g (84%) diblokeret dipeptidamid, der blev omkrystalliseret af ethylenglycol-di-methylether/isopropylether under genvinding af 77%.
20 D. Til en opløsning af 10 g af produktet vundet i Del C ovenfor i 250 ml methanol blev der sat 3 g 5% Pd/C (50% våd) og 1 ml koncentreret saltsyre, og blandingen blev 2 hydrogeneret i en time ved 50 psi (3,52 mg/cm ). Katalysatoren blev frafiltreret, filtratet blev indstillet på 25 pH 5,2 med natriumhydroxidopløsning og inddampet i vakuum til næsten tørhed. Inddampningsresten blev blandet med ethylether, og det faste stof blev frailftreret og tørret i vakuumovn ved 45eC, hvorved vandtes 5,5 g, 89%, af det ønskede dipeptidamid.
3Ω Sødhed: 1000 x sucrose.
Eksempel 16 L-Aspartyl -B-alanin-N-· (2-methylthio-2,. 4-dimethylpentan- 3-yl)amid.
35 J
A. 2-Methylthio-2,4-dimethylpentan-3-on.
En opløsning af 200 ml methanol indeholdende 9,2 g (0,40 mol) natriummetal blev afkølet i et isbad og mættet 60
DK 1 54342 B
med luftformig methylmercaptan. Hertil blev der sat 77,2 g (0,40 mol) 2-brom-2,4-dimethylpentan-3-on ved stuetemperatur, og den resulterende blanding blev omrørt i to timer. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand, ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev vasket med 5 vand og saltopløsning og tørret over vandfrit natriumsulfat. Etheren blev fordampet, og inddampningsresten blev destilleret i vakuum, hvorved vandtes 50,4 g produkt^ kp. 76°C (20 mm).
B. 2-Methylthio-2,4-dimethyl-3-aminopentan.
10 En opløsning af 6,0 g (0,038 mol) 2-methylthio-2,4- dimethylpentan-3-on, 9,9 g formamid og 2,1 g 100% myresyre blev opvarmet under tilbagesvaling, idet vand dannet under reaktionen blev fjernet ved hjælp af et fraktioneringshoved. Efter 12 timer blev der tilsat yderligere 2,5 1 5 g myresyre, og tilbagesvaling blev fortsat i yderligere 24 timer på samme måde, på hvilket tidspunkt reaktionsblandingen nåede en temperatur på 190eC. Blandingen blev afkølet, fortyndet med vand og ekstraheret med ethylace-tat. Ekstrakterne blev vasket med vand og inddampet til 20 tørhed under reduceret tryk, hvorved der som inddampnings- rest vandtes 5,3 g olie. Olien blev tilbagesvalet med 40 ml 6N saltsyre i 6 timer, fortyndet med vand, vasket med ether, og den vandige fase blev gjort stærkt alkalisk.
med natriumhydroxid. Efter ekstraktion med ethylether og 25 inddampning af ekstrakten vandtes 3,3 g (56%) farveløs amin, der gav en enkelt spids ved gas-væske-chromatografi på en seks fod OV-l-søjle ved 110’C, tilbageholdelsestid 412 sekunder.
C. D-Alanin-N-(2-methylthio-2,4-dimethylpentan-3-yl) amid.
Til en opløsning af 3,2 g (0,017 mol) N-t-butoxy-carbonyl-D-alanin og 2,5 g (0,017) triethylamin i 100 ml tetrahydrofuran ved -15°C blev der sat 1,63 ml ethyl-chlorformiat. Efter omrøring i 15 minutter blev der tilsat 2,49 g (0,017 mol) 2-methylthio-2,4-dimethyl-3-amino-35 pentan, og blandingen blev omrørt i en time. Reaktionsblandingen blev fortyndet med ethylacetat, vasket med vand, 5% vandig citronsyre (vægt/volumen), natriumbicar-
DK 154342 B
61 bonatopløsning og saltopløsning. Den organiske fase blev inddampet, hvorved vandtes 6,0 g inddampningsrest. Denne blev optaget i 100 ml methanol, der blev tilsat 60 ml koncentreret saltsyre, og blandingen blev tilbagesvalet i en time. Efter fordampning af methanol blev inddampnings-5 resten optaget i vand, vasket med ether, den vandige fase blev indstillet på pH 12 med natriumhydroxid og ekstraheret med ethylether. Inddampning af ekstrakterne gav 3,2 g (87%) produkt som en farveløs olie, Rf 0,56 (butanol/vand /eddikesyre, 4:1:1 efter volumen).
10 D. En opløsning af 3,1 g (0,013 mol) D-alaninamid, vundet i Del C, i 30 ml acetone og 17 ml vand blev indstillet på pH 9,9 med natriumhydroxidopløsning og afkølet til -2eC. Hertil blev der sat 2,78 g (0,013 mol) L-asparagin-syre-N-thiocarboxyanhydrid i små portioner i løbet af 20 minutter, idet pH holdtes ved 9,9 med IN natriumhydroxid. Efter endt tilsætning blev den resulterende blanding omrørt i 30 minutter ved -2eC, vasket med ethylacetat syrnet til pH 2 med saltsyre og igen vasket med ethylacetat. Den vandige fase blev derefter indstillet på pH 5,2 20 0g inddampet til tørhed. Det rå dipeptidamid vandtes ved at opsiaanme inddampningsresten i methanol, filtrere, behandle filtratet med ether og filtrere, hvorved vandtes en anden portion. Totalt råproduktudbytte 4,7 g.
Råproduktet blev renset ved præparativ lagchromato-graf i på si'licagelplader (20 x 20 x 2 mm) , idet der blev elueret med butanol/vand/eddikesyre, 4:1:1 efter volumen. Båndet ved 0,42 blev udskåret og elueret med methanol, hvorved vandtes det rene L-aspartyl -D-alaninamid.
Sødhed: 150 x sucrose.
30
Eksempel 17 N-Benzyloxycarbonyl-D-2-aminosmørsyre.
I en 500 ml reaktionsbeholder udstyret med mekanisk omrører, termometer og to tilsætningstragte blev der ind-35 ført 20,0 g (0,194 mol) kommerciel D- (-) -i2-aminosmørsyre og en opløsning af 7,76 g (0,194 mol) natriumhydroxid i 97 ml vand. Blandingen blev omrørt indtil endt opløsning 62
DK 15 4 3 4 2 B
og afkølet til 5“C. Samtidigt blev der fra tilsætningstragtene tilsat 40,66 g (0,205 mol) 86% benzylchlorformi-at og en opløsning af 7,76 g natriumhydroxid i 58 ml vand.
Temperaturen holdtes ved 4-6°C under tilsætningen. Reak^- tionstemperaturen steg derefter langsomt til 14eC. Qmrø- 5 ring blev fortsat i 15 minutter, efter at temperaturen faldt, og reaktionsblandingen fik derefter lov at opvarme til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med 3 x 75 ml ethylether, og den vandige fase blev indstillet på pH 2 med koncentreret saltsyre (16 ml), hvil- 10 ket bragte produktet til at udskille som en olie. Olien blev ekstraheret med 3 x 100 ml ether, tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes en klar, farveløs, flydende inddampningsrest, der blev tørret natten over ved 0,3 mm Hg, hvorunder produktet kry-1 5 stalliserede og gav 41,24 g (89,6%) af titelforbindelsen.
En portion på 1,0 g blev omkrystalliseret af 5 ml xylen, idet det udfældede materiale blev vasket med xylen og pentan. Efter tørring natten over vandtes 0,77 g farveløse krystaller, R^ 0,57 ved TLC på silicagel (opløsnings-20 r middel: ethylacetat/hexan/eddikesyre 4:14:2 efter volumeiv plade sprøjtet med 3% vanillin), smp. 76-78eC, [<x]D + 10° (c = 2,8, ethanol).
Analyse:
Beregnet for C: 60,75, H: 6,37, N: 5,90 ^ Fundet: C; 60,61, H: 6,41, N; 5,97.
Resten af de rå krystaller (40 g) blev omkrystalliseret af xylen (150 ml), idet der blev vasket med xylen (3 x 25 ml) og pentan (2 x 25 ml) og tørret i vakuum ved 45°C, hvorved vandtes 28,69 g (71,7%) farveløse krystal-30 ler, smp. 78-79 C.
35
DK 154342 B
63
Eksempel 18 L-Aspartyl -D-2-aminosmørsyre-N-(dicyclopropylcarbinyl)-amid.
I, Ra = C^H,-, R = CH
5 "V
A. D-CH3 CH2CHCONHCH(Δ)2 NHCbz N-Benzyloxycarbonyl-D-2-aminosmørsyre, 4,75 g (0,020 mol), blev opløst i 200 ml tetrahydrofuran og afkølet under en nitrogenatmosfære til -15° C. N-Methylmor-pholin, 2,02 g (0,020 mol), blev tilsat, og den resulterende blanding blev omrørt ved -15° til -10°C i 30 minut-^ ter. Den resulterende opløsning af blandet anhydrid blev afkølet til -20°C, og 2,22 g (0,020 mol) dicyclopropyl-carbinylamin opløst i 10 ml tetrahydrofuran blev tiisa .. Omrøring blev fortsat i 15 minutter ved -20" til -15°C, hvorefter blandingen fik lov at opvarme til stuetempera-2Q tur, der blev tilsat 150 ml ethylacetat, og blandingen blev ekstraheret med 2 x 100 ml IN saltsyre, 2 x 100 ml 5% vandig natriumbicarbonatopløsning og 10JO ml mættet saltopløsning» Det organiske lag blev tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet ved reduceret tryk, hvorved vandtes 6,,62 g (100%) farveløst fast stof, R.p 0,68 ved TLC på silicagel (opløsningsmiddel: ethylacetat/hexarv 1:1 efter volumen, plade sprøjtet med 3% vanillin).
B. D-(CH3CH2CHCONHCH(Δ)2 nh2 ^ Det i Del A ovenfor vundne Cbz-amino-beskyttede amid, 6,62 g (0,020 mol), blev opløst i 250 ml methanol af reagensgrad. 5% Palladium-på-kul-katalysator, 1,5 g, blev tilsat, og blandingen blev hydrogenerét ved 50 psi 2 (3,52 kg/cm ) i 45 minutter. Katalysatoren blev frafil-treret, og filtratet blev inddampet i vakuum, hvorved vandtes en flydende inddampningsrest. IN Saltsyre, 25 ml, blev tilsat, blandingen blev omrørt og derefter ekstrahe
DK 154342 B
64 ret med 25 ml ethylether. Den vandige fase blev gjort stærkt alkalisk (pH 14) med 10M natriumhydroxid, og blandingen blev ekstraheret med 3 x 25 ml ether. Ekstrakterne blev samlet, tørret (MgSO^), og etheren blev fordampet, hvorved vandtes 3,29 g (83,9%) farveløst fast stof, smp.
5 63-64°C. Rp 0,60 (butanol/eddikesyre/vand, vol./vol., r 1 ninhydrin-sprøjtning), [a]D -46,7° (c = 2, IN HCl). H- NMR-spektret var i overensstemmelse med strukturen af D- 2-aminosmørsyre-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid.
1 C. Diblokeret dipeptidamid.
Til β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-asparagtat, 5,61 g (0,0157 mol), opløst i 50 ml tetrahydrofuran og afkølet til -15°C blev der sat 1,59 g (0,0157 mol) N-me-thylmorpholin. Hertil blev der dråbevis sat 1,70 g 15 (0,0157 mol) ethylchlorformiat, den resulterende blanding blev omrørt i 30 minutter ved -15°C, og en opløsning af D-2-aminosmørsyre-N-(dicyclopropylcarbinyl) amid i 15 ml tetrahydrofuran blev tilsat dråbevis. Omrøring blev fortsat i 15 minutter ved -15“C, og reaktionsblandingen fik 2q derefter lov at opvarme til stuetemperatur. Opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum, hvorved vandtes en fast inddampningsrest. Denne blev blandet med 150 ml ethyl-acetat, og den resulterende suspension blev vasket med 2 x 75 ml IN saltsyre. Det klare organiske lag blev va-25 sket med 2 x 75 ml 5% vandig natriumbicarbonat og 75 ml saltopløsning, tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum, hvorved vandtes 8,36 g (99,5%) farveløst fast stof, R^ 0,36 på TLC (ethylacetat/hexan, 1:1, vanillinsprøjtning). Gmkrystallisation af ethylacetat gav 3q 6,12 g (73%) krystaller, smp. 167-168“C.
D. Til en opløsning af det i Del C vundne diblokerede dipeptidamid i 250 ml methanol blev der sat 1,5 g 5% (vægt/vægt) Pd/C-katalysator (50% våd), og blandingen o blev hydrogeneret ved 50 psi (3,52 kg/cm ) i 45 minutter, 35 hvorunder den teoretiske mængde hydrogen blev optaget. Katalysatoren blev frafiltreret, og filtratet blev inddampet i vakuum til et volumen på ca. 75 ml. Koncentratet blev filtreret for at fjerne det udfældede produkt, der
DK 154342 B
65 blev vasket med methanol og tørret i vakuum, hvorved vandtes 2,85 g farveløst pulver, smp. 225-227eC (dek.). Yderligere 0,76 g vandtes fra modervæsken. Totalt udbytte: 100%. 0,56 (butanol/eddikesyre/varid, 4:1:1, Ninhydrin- sprøjtning).
5 Sødhed: 500 x sucrose.
Eksempel 19 L-Aspartyl—D-2-aminosmørsyre-N-(2,2,4,4-tetramethyl- 1.1- dioxothietan-3-yl)amid.
10 a I, R = c2h5, R = -<L/SD2 A. D-CH3 CH2 CHCONH-<^J^’ SO 2 15 NHCbz
Ved at anvende 3-amino-2,2,4,4-tetramethylthieta*i- 1.1- dioxid i stedet for dicyclopropylcarblnylamin ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del A, vandtes N-benzyl-oxycarbonyl-D-2-aminosmørsyre-N-(2,2,4,4-tetramethyl-l,1- 20 dioxothietan-3-yl) amid i et udbytte på 99%., R^ 0,50.
B. Hydrogenolyse af det ovennævnte produkt ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del B, gav D-2~aminosmørsyre-ti- (2,2,4,4-tetramethyl-l,l-dioxothietan-S^yl)amid i et trinudbytte på 18%, R^ 0,41.
25 c. Det tilsvarende diblokerede dipeptidamid
CgH5CH2OCOCH2CHCONHCH (C^) CONH -<^S02 , ifHCOOCH2CgH5 ' 0,68, vandtes i et trinudbytte på 99% ved fremgangsmå-30 den fra Eksempel 18, Del C.
D. Hydrogenolyse af produktet vundet i Del C ovenfor, (1,16 g), ved fremgangsmåden fra Eksempel 20, Del D, ved anvendelse af 0,4 g 5% Pd/C (50% våd) gav titelforbindelsen i et trinudbytte på 92%, smp. 165-167°C (dek.), R^ 35 0,4.
Sødhed:: 200 x sucrose.
DK 154342 B
66
Eksempel 20 L-Aspartyl -D-2-aminosmørsyre-N-(2,4-dimethyl-3-pentyl)-amid.
I, Ra = C2H5, r = -/ 5 A. D-CHqCHoCHC0NH-( 3 2I \_ nh2 >-
Ved at anvende den passende amin ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del A, og foretage hydrogenolyse af råproduktet ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del B, vandtes diisopropylcarbinylamidet af D-2-aminosmørsyre i et udbytte på 85% i form af en olie, 0,56.
B. Det tilsvarende diblokerede amid, ^ c6h5ch2ococh2chconhch(c2h5)conh-ch[ch(ch3)2]2 NHCOOCH2C6H5 vandtes i et trinudbytte på 76% ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del C, og dette blev hydrogeneret ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del D, hvorved vandtes titel-20 forbindelsen i et trinudbytte på 89% (totalt udbytte 68%), smp. 213-215°C (dek.), Rf 0,54.
Sødhed: 100 x sucrose.
Eksempel 21 L-Aspartyl -D-valin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid.
A
I, R = CH(CH-.)9, R = CH
"v A. (CH3) 2CH(jHCONHCH (Δ) 2 NHCbz 30
Ved at anvende kommercielt tilgængeligt D-valin i stedet for D-2-aminosmørsyre ved fremgangsmåden fra Eksempel 17 vandtes N-benzyloxycarbonyl-D-valin i et udbytte på 82% som et hvidt pulver, smp. 55-57eC, R^ 0,45. Dette 33 blev omsat med dicyclopropylcarbinylamin ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del A, hvorved vandtes det ønskede blokerede amid i et udbytte på 100%, R^ 0,35.
DK 154342 B
67 B. Hydrogenolyse af ovennævnte produkt ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del B, gav D-valin-lJ-(dicyclopro-pylcarbinyl)amid i et udhytte på 83,7%, Rf 0,53, som et farveløst fast stof.
C. Det tilsvarende diblokerede dipeptidamid: 5 C6H5CH2OCOCH2CHCONHCH[CH(CH3)2JC0NHCH(Δ)2 NHCOOCH2C6H5 vandtes i et udbytte på 92,4% ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, Del C, 0,5.5, som et grålighviett fast stof.
D. Hydrogenolyse af produktet fra Del C ovenfor ved fremgangsmåden fra Eksempel 18/ Del D, gav ititelforbin-delsen i et udbytte på 85% som et farveløst fast stof, R^ 0,54.
Sødhed: 110 x sucrose.
15
Eksempel 22 L-Aspar tyl -D-alanin-N- (2,2,4,4-tetramethyl·-3-pentyl). amid.
C(CH3>3 I, Ra = CH3, R - 20 C(CH3)3 A. 2,2,4,4-Tetramethyl-3-aminopentan.
Denne blev fremstillet ved fremgangsmåden fra J.
Chem.Soc., Perkin I, 2087 (1976), ibid, 1797 (1974). Pi-valonitril (33,2 g) og t-butylchlorid (44,4 g) blev under 25 nitrogen sat til en godt omrørt suspension af natriumsand (18,4 g) i en blanding af hexan (80 ml), tetrahydrofuran (20 ml) og methanol (1 ml) i løbet af 1 time ved 15-20°C. Blandingen blev omrørt i tre timer, en opløsning af chlorbenzen (2 g) i tetrahydrofuran (5 ml).blev tilsat 30 dråbevis i løbet af 10 minutter, og omrøring blev fortsat en time. Methanol (20 ml) blev tilsat forsigtigt i løbet af en halv time efterfulgt af vand, indtil faseadskillelse. Den vandige fase blev ekstraheret med éther, og de samlede organiske faser blev tørret og inddampet i vaku-35 um. Inddampningsresten blev destilleret, hvorved vandtes di-t-butylketonimin, kp. 62-63°C/19 mm.
DK 154342 B
68
Iminen (14 g) i tør ether (50 ml) blev sat til en suspension af lithiumaluminiumhydrid (1,7 g) i tør ether (50 ml). Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 24 timer, tilbagesvalet i to timer og afkølet. Vand (1,7 ml), 15% natriumhydroxidopløsning (5 ml) og vand (5 ml) blev 5 forsigtigt tilsat successivt, blandingen blev filtreret, koncentreret, og inddampningsresten blev destilleret, hvorved vandtes den ønskede amin, kp. 79-81“C /40 mm.
B. N-Benzyloxycarbonyl-D-alanin, 7,59 g (0,034 mol), blev sat til 170 ml methylenchlorid indeholdende 4,88 ml 10 (0,035 mol) triethylamin, og den resulterende opløsning blev afkølet til -10°C. Ethylchlorformiat, 3,35 ml (0,035 mol), blev tilsat, blandingen blev omrørt ved -10 til -5“C i 25 minutter, og derefter blev der tilsat 5,0 g (0,034 mol) 2,2,4,4-tetramethyl-3-aminopentan, og omrø-15 ring blev fortsat natten over, efter at blandingen havde fået lov at opvarme til stuetemperatur. Reaktionsblandingen blev vasket med 2 x 100 ml 5% vandig natriumbicarbo-nat og 2 x 100 ml 3M saltsyre, tørret (MgSO^), og opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum, hvorved vandtes 9,99 20 g (82%) N-Cbz-D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-3-pentyl)-amid, identificeret ved dets 1H-NMR-spektrum, R^ 0,72 (TLC, ethylacetat/hexan 1:1, phosphomolybdatsprøjtning).
C. Det ovennævnte Cbz-D-alaninamid, 9,99 g, blev op- 2,- løst i 250 ml methanol, der blev tilsat 1,6 g 5% Pd/C-ka- talysator (50% våd), og blandingen blev hydrogeneret ved 2 45-75 psi (12,8-21,3 kg/cm ) i 30 minutter. Katalysatoren blev frafiltreret, og filtratet blev inddampet i vakuum, hvorved vandtes et hvidt fast stof. Hertil blev der sat 100 ml IN saltsyre, blandingen blev omrørt i to timer, vasket med ethylether og derefter gjort alkalisk med 40% (vægt/vægt) natriumhydroxidopløsning. Den basiske opløsning blev ekstraheret med ethylether, etheren blev tørret over magnesiumsulfat og inddampet, hvorved vandtes 1,1 g 22 farveløst produkt identificeret som D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-3-pentyl)amid, R^ 0,59 (butanol/vand/eddike-syre 4:1:1, ninhydrin- og derefter phosphomolybdat-sprøj tninger).
DK 154342 B
69 D. Det diblokerede dipeptidamid blev fremstillet efter en 0,005 molær målestok ud fra ovennævnte amid og β-ben-zyl-N-Cbz-L-aspartat, idet der anvendtes triethylamin og ethylchlorformiat i acetone (50 ml) ved fremgangsmåden ^ fra Eksempel 20, Del C, udbytte 80%, 0,4 (TLC, ethyl- acetat/hexan Isl, phosphomolybdatsprøjtning). Det blev renset ved chromatografi på 25 g silicagel, idet der blev elueret med ethylacetat/hexan 2:3 efter volumen, hvorved vandtes 1,65 g renset flydende produkt.
1Q E. Det diblokerede dipeptidamid, 1,15 g (0,021 mol), blev underkastet hydrogenolyse i 150 ml methanol med 0,2 g 5% Pd/C ved fremgangsmåden fra Eksempel 18, 'Del D, hvorved vandtes 0,64 g (93%) af titelforbindelsen, smp. 145-149*C (dek.), Rf 0,50.
„ Sødhed: 450 x sucrose.
I D
Eksempel 23 L-Aspartyl -D-alanin-N- (2-hydroxy-2,4-dimethyl-3-penty 1) ·«· amid.
20 /CH<CH3>2 T, R® = CH3, R = -<"
Xf(CH3>2
OH
25 A. 2-Hydroxy-2,,4-dimethyl-3-pentanon.
Til en omrørt opløsning af 28,3 ml (0,2 mol) 2,4-dimethyl-3-pentanon i 100 ml chloroform blev der dråbevis sat 10,3 ml (0,2 mol) brom i 30 ml af samme opløsningsmiddel. Den resulterende blanding blev omrørt i nogle få 3Q minutter, opløsningsmidlet blev fordampet i-vakuum, ind-dampningsresten blev optaget i 100 ml ethanol. Vand, 50 ml, og 10M natriumhydroxid, 50 ml, blev tilsat. Den resulterende blanding blev omrørt under tilbagesvaling i en time, fortyndet med 200 ml vand og ekstraheret med 3 x 50 55 ml ethylether, Ekstrakterne blev tørret (MgSO^), inddampet til tørhed, og inddampningsresten blev destilleret, hvorved vandtes 15,95 g (61%) af hydroxy-ketonen, kp. 60-62°C/18 mm.
70
DK 154342 B
B. 3-Amino-2-hydroxy-2,4-dimethylpentan.
Hydroxy-ketonen fra Del A, 15 g (0,115 mol), blev reduceret i en tilbagesvalende blanding af formamid og myresyre ved fremgangsmåden fra Eksempel 11, Del D, hvor-5 ved vandtes 4,5 g (30%) af hydroxyaminen, kp.80-81°C/17 mm.
C. Diblokeret dipeptidamid.
Til en opløsning af 2,14 g (5,0 mmol) β-benzyl-N-benzyloxycarbonyl-L-aspartyl -D-alanin i 35 ml tetrahydro-1q furan afkølet til -15“C blev der sat 0,55 ml (5,0 mmol) N-methylmorpholin og 0,48 ml (5,0 mmol) ethylchlorformi-at. Blandingen blev omrørt ved -15“C til -10“C i to minutter, og 0,66 g (5,0 mmol) 3-amino-2-hydroxy-2,4-dimethylpentan blev tilsat. Blandingen fik lov at opvarme til 1 ^ stuetemperatur, blev omrørt natten over og oparbejdet som beskrevet i Eksempel 5, Del B, hvorved vandtes det dibe-skyttede dipeptidamid, 0,27 (TLC, ethylacetat/hexan 1:1, phosphomolybdænsyresprøjtning, varme), der anvendtes direkte i det næste trin.
20D. Produktet fra Del C ovenfor i 250 ml methanol blev hydrogeneret over 1,0 g 5% Pd/C ved 60 psi (17 kg/cm^) i to timer. Katalysatoren blev frafiltreret, og opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum. Inddampningsresten blev opløst i 10 ml methanol, og 300 ml ethylether blev lang-25 somt tilsat under omrøring for at fælde titelforbindelseiv der blev frafiltreret og tørret i vakuum til et glas, 1,02 g, smp.: sintrer ved ca. 110aC, 123-128eC (dek.),
Rf 0,31.
Sødhed: 125 x sucrose.
30 35
DK 154342 B
71
Eksempel 24 L-Aspartyl -D-alanin-N-(DL-2-amino-3,3-dimethyl-4-hydroxy-butansyrelacton)amid.
5 I, Ra = CH3, R =·/ ? CHV^H3 A. DL-2-Amino-3,3-dimethyl-4-hydroxysmørsyrélacton-hydro-chlorid.
1 o Fremstillet ved fremgangsmåden ifølge Wieland, Chem.
Ber., 81, 323 (1948): 2-Keto-3,3-dimethyl-4-hydroxysmørsyrelacton, 3,5 g, blev neutraliseret med fortyndet natriumhydroxid, og den vandige opløsning blev inddampet til tørhed i vakuum.
15 Inddampningsresten blev optaget i 100 ml varm ethanol, filtreret varmt, og en opløsning af 700 mg .natriummetal i 10 ml ethanol indeholdende 2 g hydroxylaminhydrochlorid blev tilsat. Natriumsaltet af 3,3-dimethyl—4-hydroxy-2-oximinosmørsyrelacton, 5 g, udfældede og blev omkrystal-20 liseret af methanol. Oximen blev dannet ved dekomponering af natriumsaltet i 2N saltsyre, hvorfra den langsomt krystalliserede. Efter omkrystallisation af benzen-hexan, smp. 160°C.
En opløsning af 25 g af oximen i 100 -ml ethanol 25 blev portionsvis sat til 5 g platinoxid suspenderet i 150 ml 2N saltsyre, og blandingen blev hydrogeneret ved atmosfæretryk i 2 dage. Katalysatoren blev :frafiltreret, filtratet blev inddampet, og inddampningsresten blev optaget i 150 ml ethanol. Behandling med 500-ml ethylether 30 fældede DL-2-amino-3,3-dimethyl-4-hydroxysmørsyrelacton-hydrochlorid, 22 g, der blev omkrystalliseret af ethanol/ ether, smp. 2;08-212°C.
B. Diblokeret dipeptidamid.
Aminolacton-hydrochloridet fra Del A, 1,65 g (0,010 35 mol), i 10 ml methylenchlorid og en ækvimolær mængde tri-ethylamin anvendtes ved fremgangsmåden fra Eksempel 5,
Del B, hvorved vandtes 2,38 g af
DK 154342 B
72
CgHjCHjOCOCHjCH-CONBCHICHjlCOHH-/ ? OTC02Ch2C6H5 ch><^H3 ^ som et klæbrigt fast stof, 0,26 (TLC, ethylacetat/hex-an 7:3 efter volumen, phosphomolybdænsyresprøjtning).
C. Produktet fra Del B ovenfor, 23,8 g, blev opløst i 200 ml methanol, 0,2 g 5% Pd/C-katalysator blev tilsat, blandingen blev hydrogeneret, og produktet blev isoleret jQSom beskrevet i Eksempel 5, Del C, hvorved vandtes 1,3 g farveløst fast stof, der blev vasket med ethylether og tørret, smp. 120-130eC (dek.), R- 0,18. Massespektret og 1 r H-NMR-data var i overensstemmelse med strukturen af titelforbindelsen .
15 Sødhed: 110 x sucrose.
Eksempel 25
Kulsyreholdig Coladrik.
En kulsyreholdig coladrik blev fremstillet svarende 20 til nedennævnte sammensætning. Den resulterende drik blev vurderet til at have en sødhedsintensitet sammenlignelig med en kontroldrik indeholdende 11% sucrose.
Bestanddel Vægt%
Koffein (1% vandig opløsning) 0,700 25 L-Aspartyl -D-alanin-N(cis,trans-2,6- dimethylcyclohéxyl)amid (10% vandig) 0,180
Cola-smagskoncentrat 0,080
Phosphorsyre (50% vandig) 0,040
Citronsyre (50% vandig) 0,066 30 Natriumcitrat (25% vandig) 0,210
Karamel-farve (25% vandig) 0,370
Citronolieekstrakt 0,012
Limeolieekstrakt 0,021
Kulsyreholdigt vand (3,5 volumen carbondioxid) tilstrække- 35 .¾½. I—,_ 100,000
DK 154342 B
73
Erstatning af L-aspartyl -D-alanin-N-(cis,trans- 2,6-dimethylcyclohexyl)amidet i ovennævnte komposition med 0,22% 10% vandig L-aspartyl -D-2-aminosmørsyre-N-(di-cyclopropylcarbinyl)amid eller 1,10% af 10% vandig L-as” 5 party]rD-valin-N-(dicyclopropylcarbinyl) amid gav kulsyreholdige coladrikke af lignende kvalitet.
Eksempel 26 Diætetisk hård kandis.
1 q En hård kandis blev fremstillet ved anvendelse af følgende sammensætning og fremgangsmåde:
Bestanddele ' gram L-Aspar tyl —D-alanin-N- (dicyclopropylcarbinyl) -amid 0,35 15 Vand 4,00 FD og C Red Nr.40 (10% vandig) 0,30
Kirsebærsmag 0,60
Citronsyre 6,00
Polydextrose2^ 420,00 2q Vand 180,00 x,) U.S. 3.766.165.
I et lille bæger opløstes sødemidlet 'i vand, der blev tilsat farve, smagsstof og citronsyre cog blandet 25 godt for at opløse. 1 et separat bæger indførtes polydex-trose og vand» Der blev omrørt under opvarmning til 140°C og derefter henstillet til afkøling til 120-125°C. Andre bestanddele fra det lille bæger blev tilsat, og der blev blandet og æltet grundigt. Massen overførtes til en olie-2Q belagt marmorplade og henstillet til afkøling til 75-80° C. Massen blev ekstraheret gennem en oliebélagt trykvalsa.
Ved anvendelse af 0,42 g L-aspartyl -£D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-l,l-dioxothietan-3-yl)amid eller 0,93 g L-aspartyl -D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-3-35 pentyl)amid som sødemiddel i stedet for L-aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid opnåedes tilsvarende resultater.
DK 154342 B
74
Eksempel 27
En gelatinedessert blev fremstillet ved anvendelse af følgende sammensætning og fremgangsmåde:
Bestanddele gram
Gelatine 225 Bloom 7,522
Citronsyre 1,848
Natriumcitrat 1,296
Jordbærsmag 0,298 L-Aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)-amid 0,036
Kogende vand 240,000
Koldt vand 240,000 491,000
De første fem bestanddele blev forblandet, der blev tilsat kogende vand og omrørt for at opløse fuldstændigt.
1 5
Der blev tilsat koldt vand og omrørt kraftigt. Der overførtes til serveringsskåle og blev afkølet i køleskab indtil størkning.
2Q Eksempel 28
Lavkalorie-bordsødemidler blev fremstillet svarende til følgende sammensætninger: A. Et pulverformet sødemiddel blev fremstillet ved at blande følgende bestanddele: 2j_ Bestanddele ' væg:t% L-Aspartyl -D-alanin-N-(2,2,4,4-tetramethyl-thietan-3-yl)amid 0,18
Krystallinsk sorbitol 49,76
Dextrin (dextrose-ækvivalent 10) 50,00
Mononatriumglutamat 0,02
Glucono-delta-lacton 0,02
Natriumcitrat ' 0,02 100,00
Af den resulterende blanding var ét gram ækvivalent i sødhed med ca. tre gram sucrose.
35 B. Et bordsødemiddel i flydende form blev fremstillet som følger:
DK 154342B
75
Bestanddele ' væg't% L-Aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)-amid 0,10
Vand 99,80
Natriumbenzoat 0,10 5 100,00
Af den resulterende opløsning var ét gram ækvivalent i sødhed med ca. 1,2 g krystallinsk sucrose.
Når sødemidlet med formlen (I) anvendt i Del A
ovenfor, var 0,59 g af en 1:4 blanding af L-aspar tyl -ΟΙ 0 alanin-N-(dicyclopropylcarbinyHamid og natriumsaccharin, blev der opnået lignende resultater. Ligeledes blev der opnået et tilsvarende flydende bordsødemiddel, når L-as·^ partyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amidet, anvendt i Del B ovenfor, blev erstattet med 0,20 g af en 1:6 blan-1 5 ding, efter vægt, af samme forbindelse og natriumsaccharin.
Eksempel 29-Frossen dessert.
20 En sukkerfri frossen vaniljedessert blev på sædvan lig måde fremstillet med følgende sammensætning:
Bestanddele vægt%
Fed creme (35% smørfedt) 23,00
Ikke-fedtholdige faste mælkestoffer 10,50 25 Mono- og diglycerid-emulgeringsmidler 0,25
Polydextrosex^ 11,20
Vand 54,51 L-Aspartyl -D-alanin-N-(2,2,6,6-tetramethyl-cyclohexy1)amid 0,04 30 Gelatine (225 Bloom) 0,50 100,00 x) U.S. 3.766.165.
Eksempel 30 35 Dåsepærer.
Friske pærer blev vasket, skrællet, udkærnet, skåret i stykker og nedlagt i en vandig opløsning indehol-
DK 154342 B
76 dende 0,05 vægt% ascorbinsyre. Den ituskårne frugt blev emballeret i skruelågsbeholdere, og beholderne blev fyldt med en sirup indeholdende følgende bestanddele:
Bestanddele vægt%
Sorbitol 25,000 5 L-Aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)-amid 0,025
Citronsyre 0,125
Vand tilst'r.
100,000 1 0
Beholderne blev lukket løst og anbragt i en autoklav indeholdende varmt vand og behandlet ved 100eC i 45 minutter. Beholderne blev fjernet, straks lukket tæt ved at tilskrue lågene og henstillet til afkøling.
15
Eksempel 31
Pulverformet drikkoncentrat.
Bestanddele vægt%
Citronsyre 31,78 20 Natriumcitrat 5,08
Jordbærsmag 57,72
Jordbær- FD- og -C-farve 0,54 L-Aspartyl -D-alanin-N-[(-)fenchyl]amid 2,44
Carboxymethylcellulose 2,44 25 100,00
Alle bestanddele blev blandet i en blander og sammenblandet indtil homogenitet. Ved anvendelse blev 1,73 g pulverdrikkoncentrat opløst i 4 fluid ounces (118 ml) vand.
30
Eksempel 32 Bagt kage.
En udmærket vaniljekage blev fremstillet efter følgende recept: 35
DK 154342 B
77
Bestanddele ' gram
Emulgeret klaret 16,09
Vand 20,83 Æg 23,00
Natriumbicarbonat 1,1Q
5
Vaniljeekstrakt, enkeltfold 0,28
Glucono-delta-lacton 1,75
Polydextrosex^, 70% vandig opløsning 80,00
Ikke-fedtholdig tørmælk 2,50
Kagemel 56,20 10 Sødmælkspulver 0,80
Hvedestivelse 1,4Q
. L-Aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)- amid 0,05 204,00 15 x) U.S. 3.766.165.
Fedtfri tørmælk, sødmælkspulver, polydextroseoplis-ning og emulgeret klaret blev samlet. Der blev blandet ved lav hastighed, indtil blandingen var cremeagtig og 2q glat (ca. 3 minutter), derefter blev æggene tilsat, og der blev pisket, indtil der var opnået en homogen cremeagtig blanding. Sødemidlet blev opløst i vand, sat til creme-homogenatet, og der blev blandet 2-3 minutter. De øvrige bestanddele blev tilsat, og der blev blandet, ind-2^ til blandingen var cremeagtig og glat (3-5.minutter).
120 g Dej anbragtes i lille forsmurt form og blev bagt ved 350eF (176°C) i 30 minutter.
Eksempel 33 2Q Synergistiske blandinger af L-aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl) amid, [I, Ra = CHg, R=GH(A)2]og saccharin.
Blandinger af [I, Ra = CH3, R = CH(A)21 og natrium-saccharin blev fremstillet og vurderet for smagsaccepta-32 bilitet og sødhedsintensitet ved sammenligning med vandige sucrosestandarder. Sødhedsstyrkefaktorer for natrium-saccharin og [I, Ra = CH^, R = CH(A)2] på henholdsvis 300 og 1200 x sucrose anvendtes til at beregne den teore-
DK 154342 B
78 tiske sødhed for blandingerne. En række smagspanel-vurderinger blev gennemført, idet vandige opløsninger af forsøgsblandingerne blev sammenlignet med sucroseopløsninger liggende inden for området fra 6 til 12% (vægt/volumen) og 0,033% natriumsaccharinopløsning. Resultaterne er an-5 ført i nedenstående tabel.
Blandlrig, ygtasle .mm.
[I, R KH-j, Natrium- Styrke x sucrose % Smags- ΙΗΤΗίΔ)^] .saccharin (T). teoretisk. (AIvirkelig .Synergi kvalitet 1 ; 1 750 1000 33 ren, sød, 10 ikke bitter 1 : 2 6QQ 80Q 33 sanine 1 ; 4 480 60Q 33 samme 1 ; 6 430 575 33 sød, mærkbar 15 bitterhed 1 : 8 400 530 33 sød, let bitterhed 1 : 9 390 500 33 saitme 1 : 10 381 475 25 sød, let til moderat 20 bitter, metallisk .smag.
Synergiprocenten blev beregnet ifølge formlen;
25 · A - T
% Synergi = —-— x 100 , hvor A er den virkelige sødhed bestemt ved at tage gennemsnittet af smagspanel-resultaterne, og T er den teore-30 tiske sødhed bestemt ud fra vægtsammensætningen af blandingerne, idet den teoretiske sødhed for f.eks. 1^-blandingen er (1/5 x 1200) + (4/5 x 300) = 480.
Af resultaterne fremgår, at med blandinger fra 1:1 til 1:9 var der en uventet forøgelse i sødhedsstyrke på 35 33% og en noget mindre synergistisk effekt med l:10-blan-dingen. Endvidere var der fuldstændig maskering af den velkendte bitre eftersmag af saccharin med blandinger fra
DK 154342 B
79 1:1 til 1:4 og effektiv maskering af bitterhed i blandin-ger indeholdende op til én del L-aspartyl -D-alanin-N-(dicyclopropylcarbinyl)amid og 9 dele natrxumsaccharin.
Når ovennævnte fremgangsmåde blev gentaget, men den anvendte forbindelse ifølge opfindelsen havde form- C a len (X), hvor R er methyl, og R er (CH3)2 jCH3!2 eller —<^^SC>2 10 (CH3>2 <CH3>2 blev der opnået tilsvarende resultater.
Eksempel 34
Tre portioner kulsyreholdige cola-drikke blev frem-15 stillet ved fremgangsmåden ifølge Eksempel 25, med den undtagelse at det anvendte sødemiddel i portion A var 0,020 g af 1:6—blandingen af [I, Ra = CH^, -R = CH(A)2]/ natriumsaccharin, portion B anvendte 12 g sucrose, og portion C anvendte 0,3412 g af en l:10-blanding af sac-20 a charin/cycloamat. Den for [I, R = CH3, R = CHiA^l/na- triumsaccharin-blandingen anvendte sødhedsfaktor var den i Eksempel 33 bestemte, dvs. 575 x sucrose. De tre drikke blev af et smagspanel vurderet nydelsesmæssigt efter en X ) skala med ni point med følgende resultater: 25
Drik Pointgerinemsnit A 7,1 B 8,0 C 6,7 ^x) 1 = stærkt mishag, 5 = hverken behag eller mishag, 9 = stærkt behag.
Når de samme tre sødemidler anvendtes på lignende måde i kulsyreholdige citron-lime-drikke, instant-choko-ladebudding, "marshmallow", grapegele, gelatine med orangesmag, vingummibolcher, tyggegummi eller vaniljekagekom- 35 positioner, blev der opnået lignende resultater.
DK 154342 B
80
Eksempel 35
Relativ stabilitet for repræsentative L-aspartyl~ D-alanin-amider ifølge opfindelsen blev bestemt ved pH 7 og pH 3 i 0,01M phosphatpuffer ved 90 °C. Koncentrationen af uændret sødemiddel blev bestemt med mellemrum på 24 5
timer ved højtryksvæskechromatografi på en 10 cm Lichro-R
sorb -C^g-søjle med 1 ml pr.minut af 0,01M ammoniumacetat indeholdende 15 volumen% methanol. Halveringstiden ved 90° beregnet for hver af forbindelserne med formlen (I) ^ ved pH 7 og pH 3 er anført i nedenstående tabel.
Forbindelse med formel Halveringstid ved 90°,timer (I, Ra = CH3) pH 7 pH 3 .....R ...... ........
15 54 fi 01 o (ch3)2ch ch(ch3)2 ' ' 51'5 20'2 20 CH-. I CHo VS< 49,3 19,6 ch3 LJ ch3 57,8 18,8 25
Ud fra data vundet på lignende måde, men ved for- skellige andre temperaturer, blev halveringstiden for de omhandlede forbindelser ved stuetemperatur vurderet til at være ti år eller mere ved disse pH-værdier.
30
Eksempel 36 2-Alkyl- og 2,6-Dialkylcyclohexylaminer.
Til en opløsning af 25 g 2,6-diisopropylanilin i 250 ml af hver af ethanol og vand blev der sat 10 g tør 35 5% ruthenium-på-kul-katalysator. Blandingen blev hydrogeneret i en autoklav ved 100*C, 1000 psi (70,4 kg/cm^), indtil hydrogenoptagning ophørte. Katalysatoren blev fra·^
DK 154342 B
81 filtreret, og filtratet blev inddampet for at fjerne op-løsningsmiddel. Inddampningsresten blev destilleret i vakuum, hvorved vandtes 11,2 g 2,6-diisopropylcyclohexyl-amin som en blanding af cis,trans- og trans, trans-isomere^ kp. 122-124°C ved 22 mm.
C
Ved at anvende den passende 2-alkylanilin eller 2,6-dialkylanilin som udgangsmateriale og hydrogenere ved ovennævnte metode vandtes også de nedenstående cyclo-hexylaminer: 2-methyl-6-ethylcyclohexylamin, kp. 82-87°C ved 19 mm (50% udbytte), 2-methyl-6-isopropylcyclohexylamin, kp. 86“C ved 14 mm (45% udbytte), trans-2-ethylcyclohexylamin, kp. 77-78*C (23 mm), 2,6-diethylcyclohexylamin, kp. 96eC (17 mm), 15
Eksempel 37 2-t-Butylcyclohexylamin.
i. 2-t-Butylcyclohexanon.
En opløsning af 31,25 g (0,20 mol) t-butylcyclo- 20 hexanol i 80 ml ethylether blev afkølet til 10“C. Hertil blev der dråbevis under omrøring sat en opløsning af 21,0 g (0,07 mol) natriumdichromat-dihydrat og 15,75 ml (0,30 mol) koncentreret svovlsyre i 100 ml vand, idet reaktionsblandingen holdtes under 25°C. Blandingen blev deref-25 ter opvarmet bil stuetemperatur, omrørt i to timer, hældt på is-vand, etherlaget blev fraskilt, den vandige fase blev igen ekstraheret med ether, og de samlede ekstrakter blev vasket med vand og natriumcarbonat og tørret (MgSO^).
Fordampning af etheren gav 30,6 g (99%) af den ønskede 30 . . keton.
ii. Leuckart-reduktion af keton.
En blanding af 2-t-butylcyclohexanon, 30,6 g (0,20 mol), formamid, 50 ml (1,2 mol), og myresyre (10 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling, idet vand blev fjernet, 35 efterhånden som det dannedes ved reaktionen, mens ketonen 82
DK 1 54342 B
blev returneret til reaktionsbeholderen. Myresyre (10 ml) blev tilsat efter behov for at bekæmpe aflejring af ammo-niumcarbonat i kondensatoren. Efter fire timer nåede reaktionstemperaturen 197°C, og destillation ophørte. Blandingen blev afkølet, fortyndet med vand (50 ml) og eks-5 traheret med ethylacetat (75 ml). Det organiske lag blev inddampet, koncentreret saltsyre blev tilsat (50 ml pr.
100 ml inddampningsrest), blandingen blev kogt natten over, afkølet og vasket med 50 ml ethylether. Den vandige fase blev indstillet til pH 11 med natriumhydroxid, afkø-1 o let, ekstraheret med ether (2 x 40 ml), og ekstrakterne blev tørret over natriumhydroxid-pastiller. Opløsningsmidlet blev fordampet, og inddampningsresten blev destilleret gennem en 10 cm søjle, hvorved vandtes 21,93 g af titel-aminen (71%), kp. 86-88“C (21 mm) som en blanding 1 5 af cis- og trans-isomere.
iii. dl-Fenchon og 1-fenchon blev reduceret til de tilsvarende fenchylaminer ved Leuckart-reduktionsmetoden fra Del ii ovenfor. (-)Fenchylamin vandtes som en vandhvid væske, kp. 55-60°C (6 mm), [a]n -21,9° i 30% udbytte.
20
Eksempel 38
Alkylcycloalkylcarbinylaminer og dicycloalkylcarbinyl-aminer.
Følgende eksempel er illustrerende for fremstil- 25 lingen af ovennævnte aminforbmdelser.
i. Til en blanding af 1,0 mol cyclopentylcar- bonylchlorid og 99 g (1,0 mol) cuprochlorid i 1000 ml tør ether under en nitrogenatmosfære blev der dråbevis sat 30 478 ml (1,0 mol) 2M t-butylmagnesiumchlorid i samme opløsningsmiddel. Tilsætningen blev gennemført ved -5° til -15°C. Den resulterende blanding blev hældt i 500 ml 3M saltsyre og 700 g is, det organiske lag blev fraskilt og vasket successivt med vand, natriumbicarbonatopløsning og 35 saltopløsning og tørret (MgS04). Den tørrede ethereks-trakt blev inddampet ved reduceret tryk, og inddampningsresten blev destilleret, hvorved vandtes t-butylcyclobu-tylketon.
DK 154342 B
83 ii. Ketonen (0,75 mol), blev blandet med hydro- xylamin-hydrochlorid, 38,3 g (1,16 mol), og natriumacetat; 123 g (1,50 mol), i tilstrækkeligt vand til at bevirke opløsning og blev derefter opvarmet på dampbad i en time, afkølet, og blandingen blev indstillet på pH 7,5 med na-triumhydroxidopløsning. Efter ekstraktion af blandingen med ether blev ekstrakterne tørret (MgS04) og inddampet til tørhed, hvorved vandtes oximen. Oximen blev opløst i vandfri ethanol (ca. to liter pr.mol oxim) , og opløsningen blev opvarmet under tilbagesvaling. Natriummetal (ca.
10 10 mol pr.mol oxim) blev tilsat portionsvis ved en hastighed, der var tilstrækkelig til at opretholde tilbagesvalingstemperatur. Efter at al natrium var tilsat, blev den resulterende blanding afkølet, og 200 ml éthanol efterfulgt af 300 ml vand blev tilsat. Blandingen blev syrnet 15 med saltsyre, inddampet for at fjerne ethanol, og inddamp ningsresten blev gjort alkalisk (pH 12—13) med 10M natriumhydroxid. Den alkaliske blanding blev ekstraheret flere gange med ether, og de samlede ekstrakter blev tørret (MgSO,). Tørt hydrogenchlorid blev ledt gennem de 20 q tørrede ekstrakter, indtil endt udfældning.. Det udfældede hydrochloridsalt blev frafiltrerét, vasket med ether og lufttørret. Saltet blev omdannet til den fri base ved hjælp af vandig natriumhydroxid, ekstraktion med ethyl- ether og inddampning af ekstrakterne. Produktet, t-butyl- 2 5 cyclopentylcarbinylamin (kp. 80-90°C, 21 mm), var af passende renhed til at kunne anvendes til -fremstilling af de omhandlede amider, men kunne, om ønsket, renses yderligere, f.eks. ved destillation eller søjlechroma- tografi.
30
De følgende aminer blev også fremstillet ved denne fremgang småde ·: 2,2-dimethyl-3-aminopentan, kp. 123-126“C, atmosfærisk tryk.
35 2,2,4 -trimethyl-3-aminopentan, kp. M9-150eC, at mosfærisk tryk.
DK 154342 B
84
Eksempel 39 trans-2-Ethylcyclopentylamin.
i. 2-Ethylcyclopentanon.
I en trehalset kolbe blev 5,0 g natriummetal opløst 5 i 250 ml tør ethanol, og der blev tilsat 31,24 g (0,20 mol) 2-carboethoxycyclopentanon. Til den resulterende gu-le opløsning blev der dråbevis sat 18,4 ml (0,23 mol) ethyliodid, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i to timer. Efter afkøling blev der tilsat 250 ml TO saltopløsning og 50 ml vand, og blandingen blev ekstraheret med ethylether (2 x 100 ml) . Efter tørring (MgSC>4) og fordampning af opløsningsmidlet vandtes 36,5 g (99%) 2-ethyl-2-carboethoxycyclopentanon.
Denne blev decarboxyleret ved opvarmning under til-15 bagesvaling med en blanding af 20Q ml koncentreret saltsyre og 100 ml vand. Efter fire timers tilbagesvaling var carbondioxidudviklingen tilendebragt. Blandingen blev afkølet, mættet med natriumchlorid, ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev tørret (MgSO^), og ether blev 20 fordampet. Inddampningsresten blev destilleret, hvorved vandtes 12,62 g (56%) 2-ethylcyclopentanon, kp. 97-98eC (100 mm).
ii. Det ovenfor vundne produkt blev omdannet til trans- 2-ethylcyclopentylamin ved fremgangsmåden fra Eksempel 38, 25 Del ii, kp. 150-151°O, i et udbytte på 35%. Produktets identitet blev bekræftet ved dets ^H-NMR-spektrum.
Eksempel 40 trans-2-Isopropylcyclopentylamin.
30 i. 2-Isopropylcyclopentanon.
Til en opløsning af 10 g natriummetal i 670 ml ethanol blev der dråbevis sat en blanding af 100 g (1,19 mol) cyclopentanon og 60 g (1,03 mol) acetone, og den re·*-suiterende blanding blev tilbagesvalet i 1,5 timer. Opløs-35 ningsmidlet blev fordampet i vakuum, inddampningsresten blev optaget i ether, opløsningen blev vasket med 3M saltsyre (5 x 200 ml), 5% natriumbicarbonat (3 x 200 ml) og
DK 154342 B
85 saltopløsning (1 x 200 ml) og tørret (MgSO^). Etheren blev fordampet ved mild opvarmning, hvorved vandtes 97 g mørk væske, der blev destilleret i vakuum., hvorved vand-tes 55 g 2-isopropylidencyclopentanon, kp,. 96-100°C (2,7 mm).
5
Til 12,75 g af ovennævnte produkt :i 250 ml metha- nol blev der sat 2,0 g 5% palladium-på-kul—katalysator, 2 og blandingen blev hydrogeneret ved 50 psl (3,5 kg/cm ).
Efter en time var hydrogenoptagningen endt. Katalysatoren blev fjernet, og opløsningsmidlet blev fordampet i vakuun* 10 hvorved vandtes 12,75 g farveløs væske. Denne blev destilleret, hvorved vandtes 9,64 g 2-isopropylcyclopentanon, kp. 74-76°C (20 mm).
Reduktion af 2-isopropylcyclopentanon ved fremgangsmåden fra Eksempel 38, Del ii, gav den tilsvarende 15 amin, kp. 167°C (atm.) i et udbytte på 31%.
Præparation A
L-Asparaginsyre-N-thiocarboxyanhydrid.
A. L-Asparaginsyre (582 g, 4,29 mol) blev lidt efter lidt og under Omrøring sat til 350,9 g (8,58 mol) 50% na- triumhydroxidopløsning ved 0°C. Methylmethylxanthat (550 g, 4,51 mol) i 405 ml methanol blev dereiter tilsat så hurtigt som muligt. Blandingen blev opvarmet ved 45°C i 1,5 timer, afkølet til stuetemperatur og vasket med to 2 5 portioner methylenchlorid. Methylenchlorid-vaskevæskerne blev bortkastet, og den vandige fase blev syrnet med kon-centreret saltsyre ved 0°C. Opløsningen blev ekstraheret med tre portioner ethylacetåt, og de samlede ekstrakter blev vasket med saltopløsning og tørret over vandfrit magnesiumsulfat,. Opløsningsmidlet blev fordampet i vakuum, hvorved vandtes en gul olie, der krystalliserede ved tilsætning af ethylendichlorid og n-hexan. N-Methoxy-thio-carbonyl-L-asparaginsyren blev frafiltreret, vasket med ... frisk n-hexan og tørret (420 g, 47%)..
35 i
DK 154342 B
86
Smp. 128-130eC, 1H-NMR (DMSO-dg), (δ) 2,73 (d, 2H, J = 6 Hz), 3,63 (s, 3H), 4,43 (dt, IH, J = 6 Hz, 8 Hz), 6,63 (d, IH, J = 8 Hz), infrarødt spektrum (KBr) 1715, 1515 cm-1.
B. N-Methoxythiocarbonyl-L-asparaginsyre (207,0 g, 5 1,00 mol) blev opløst i 1200 ml ethylacetat ved 0°C, og phosphortribromid (47 ml, 0,50 mol) blev tilsat i én portion. Kølebadet blev fjernet, og temperaturen fik lov at stige spontant til 35“C. Opløsningen blev oprørt i 10 minutter, hvorefter et granulært hvidt bundfald var dannet.
10
Reaktionsblandingen blev afkølet til 0-5 C, produktet blev frafiltreret, vasket med et lille volumen ether og tørret. Udbyttet af analytisk rent L-asparaginsyre-N- thiocarboxyanhydrid var 157,4 g (90%).
Smp. 200-205eC (dek.), [a]!?5 = -109,5°(c = 1, THF),
15 D
infrarødt spektrum (KBr) 3225, 1739, 1724, 1653, 1399 cm"1, 1H-NMR (DMSO-dg) ppm (δ) 2,83 (d, 2H, J = 5,0 Hz), 4,70 (t, IH, J = 5,0 Hz), 9,23 (bs, 2H, ex), massespek trum (m/e) 175 (M+), 87, 60.
20
Præparation B
2,2-Dimethylcyclohexylamin.
i. 2,2-Dimethylcyclohexanon.
Til en suspension af 13,5 g (0,25 mol) natriumme- thoxid i 500 ml ethylether blev der sat 30,8 g (0,28 mol) 25 2-methylcyclohexanon og 20,3 g (0,28 mol) ethylformiat. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 12 timer, filtreret under en nitrogenatmosfære, de faste stoffer blev vasket med ethylether og tørret i vakuumovn ved 75° C. Den tørrede kage blev formalet med morter og støder til et fint pulver, hvorved vandtes 17,5 g (43%) natrium- 2-formyl-6-methylcyclohexanon, der anvendtes i det næste trin.
Ovennævnte produkt, 17,5 g (0,11 mol) blev sat til en blanding af 2,88 g (0,13 mol) natriumhagl, 500 ml 35 vandfri ammoniak og ca. 0,1 g ferrichlorid. Den resulte-
DK 154342 B
87 rende grå suspension blev afkølet til -45~C og omrørt i en time ved tilbagesvalingstemperaturen for systemet.
Hertil blev der sat 20,86 g (0,15 mol) methyliodid, blandingen blev omrørt tre timer under tilbagesvaling og fik lov at inddampe under opvarmning til stuetemperatur nat- 5 ten over. Inddampningsresten blev suspenderet i 300 ml ethylether, tilbagesvalet for at uddrive .spor af ammoniak, og der blev tilsat vand for at opløse de faste stoffer. Etheren blev ekstraheret med vand (3 x 100 ml), de samlede vandige lag blev behandlet med 6 g fast natrium- 10 hydroxid og opvarmet for at vanddampdestxllere ketonen. Vanddampdestillatet blev ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev vasket med saltopløsning, børret, og ether blev fordampet, hvorved vandtes 2,2-dimethylcyclohexanon som en farveløs væske, 2,0 g.
1 ζ ii. Den ovenfor fremstillede keton blev omdannet til oximen, og sidstnævnte blev reduceret med natrium i ethanol som beskrevet i Eksempel 38, Del ii, hvorved vandtes 3,1 g 2,2-dimethylcyclohexylamin.
20
Præparation C
2,2,6,6-Tetrarnethylcyclohexylamin.
i. 2,2,6,6-Tetramethylcyclohexanon.
En 50% suspension af natriumhydrid irmineralolie, 25 14,3 g (0,30 mol), blev suspenderet i tetrahydrofuran, væsken blev dekanteret, og det faste stof blev gensuspenderet og dekanteret igen for at fjerne olien. Derefter blev der tilsat 15 g (0,12 mol) 2,6-dimetbylcyclohexanon efterfulgt af dråbevis tilsætning af en blanding af 11 g 30 t-butanol og 2Ό ml tetrahydrofuran (kraftig hydrogenudvikling) , og den resulterende blanding blev tilbagesvalet indtil hydrogenudviklingen var afsluttet. Hertil blev der dråbevis sat 37,8 g (0,30 mol) methylsulfat, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 24 timer. Efter 35 fortynding med vand, ekstraktion med ethylether, vask af ekstrakterne med vand, tørring og fordampning af opløsningsmiddel under 40“C vandtes 17 g tetramethylketon. Den- 88 ne blev destilleret, hvorved vandtes 14,6 g produkt, kp. 62-64°C (15 mm).
ii. Den ovenfor vundne 2,2,6,6-tetramethylcyclohexanon (8 g) blev omdannet til oximen, og sidstnævnte forbindelse blev reduceret ved fremgangsmåden fra Eksempel 38, Del 5 ii, hvorved vandtes 1,4 g af den ønskede amin som en farveløs væske, der var af passende renhed for anvendelse som mellemprodukt.
iii. 2,2,5,5-Tetramethylcyclopentanon.
Til en opslæmning af 2,0 mol natriumhydrid (vasket for at fjerne olie) i tetrahydrofuran blev der hurtigt sat 190 ml (2,0 mol) methylsulfat. Samtidigt blev der med langsom hastighed tilsat 35,7 g (0,425 mol), cyclopentanon i 50 ml af samme opløsningsmiddel. Reaktionsblandingen 15 opvarmede spontant til en svag tilbagesvaling, og hydrogenudvikling var kraftig. Efter endt tilsætning blev blandingen henstillet med omrøring natten over ved stuetemperatur. Efter opvarmning til tilbagesvaling i yderligere to timer blev der tilsat en blanding af t-butanol i 20 tetrahydrofuran, og tilbagesvaling blev fortsat i tre ti mer. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand, ekstraheret med ethylether, ekstrakterne blev vasket med vand og saltopløsning, tørret over vandfrit MgSO^, og opløsningsmidlet blev fordampet, hvorved vandtes 48,2 g råpro-25 dukt. Dette blev destilleret, hvorved vandtes 24,2 g te-tramethylketon, kp. 63-68eC, 40 mm.

Claims (3)

1. L-Aspartyl-D- aminosyre-dipeptidamider, kendetegnet ved, at de har den almen© formel (I): • r ^nhr (i)
3 COOH g R eller er fysiologisk acceptable kationiske salte eller syreadditionssalte deraf, hvor Ra er methyl, ethyl, n-propyl eller isopropyl, og 10 R er en forgrenet gruppe valgt blandt fenchyl, diisopro-pylcarbinyl, d-methyl-t-butylcarbinyl, d-ethyl-t-butyl-carbinyl, di-t-butylcarbinyl, 2-methylthro-2,4-dimethyl-pentan-3-yl, n4 r3,R ir . / (CH o) 15 -\ <CH,)_ \ 2 X RS-V" R 3 4 5 6 hvor mindst én af R , R , R og R er alkyl med 1-4 C- atomer, og de øvrige er hydrogen eller alkyl med 1-4 C- 3 4 5 6 20 atomer, og summen af C-atomerne i R , R „ R og R 3 4 5 6 højst er seks, og når både R og R eller R og R er alkyl, er de methyl eller ethyl, X er O, B, SO, SO2, C=0 eller CHDH, m er nul, 1, 2, 3 eller 4, og n og p hver er nul, 1, 2 eller 3, idet summen af n+p højst er 25 3, - ^ (CH0) 2'm 7 8 9 hvor én af R' , R og R er alkyl med 1-4 G-atomer, og de øvrige er hydrogen eller alkyl med 1-4 C-atomer, og sum- 7 8 9 35 men af C-atomerne i R , R og R højst er^seks, og m har den ovenfor anførte betydning, DK 154342 B 90 in 5 hvor m har den ovenfor anførte betydning, og g er 0, 1, 2, 3 eller 4, R12 r13 10 —(c*2>t >-2 o 12 13 12 15 hvor hver af R og R er methyl eller ethyl, eller R 13 er hydrogen, og R er alkyl med 1-4 C-atomer, Z er O eller NH, og t er 1 eller 2, 20 OH hvor w er 1, 2, 3 eller 4, R^ og R^8 hver er alkyl med 15 1-4 C-atomer, R er hydrogen, OH eller alkyl med 1-2 C- 25 atomer, idet summen af C-atomerne i R"^, og R^8 højst 14 15 er seks, og når både R og R er alkyl, er de methyl eller ethyl, og . ,- * ' R18 ·· tvir* _20 R ' K hvor R"^ og R"^ er alkyl med 1-4 C-atomer, R"*"8 og R28 er hydrogen eller alkyl med 1-2 C-atomer, A er OH, og B er hydrogen, OH eller methyl, når A og B tages separat, el- 35 ler A og B er tilsammen-CHo0C-,-CHoNHC-, -0-C-CH--, 2 li 2 » I» ^ O 0 0 -NHCCH--, -0C-, -NHC- eller -0C0-, idet summen af C-ato-II 2 II Jl II 0 0 0 o DK 154342 B 91 merne i R17, R18, R19 og R20 højst er seks, og når både R17 og R18 eller R19 og R20 er alkyl, er ode methyl eller ethyl.
2. Forbindelse med formlen RNH2 til brug som 5 udgangsforbindelse ved fremstillingen af en forbindelse med formlen (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en gruppe valgt blandt (a) d-ethyl-t-butylcarbinyl, cyclopropyl-t-butylcarbinyl og cyclopentyl-t-butylcarbinyl, 10 (b)
3' Rq -?>,s .«ν' 15 hvor m, er 1 eller 2, og <L ^ * når m, er 1: r3‘, r4', R5'og R hver er methyl,og 31 _ når m, er 2: R er ethyl, og -1· Λ ' C ' c I R R og R hver er hydrogen, 20 · · · (c) / ^(CH2)n,— 25 —( CH—^(CH2,Pl CH3 CH3 1 hvor, n1 er nul, p1 er 1, og er O, S eller SC>2, eller 30 n^ og p^ hver er nul, og er S, S02 eller C=0.
DK024581A 1980-01-21 1981-01-20 L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og aminer til brug som udgangsforbindelser ved deres fremstilling DK154342C (da)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11380080A 1980-01-21 1980-01-21
US11380080 1980-01-21
US20174580 1980-11-05
US06/201,745 US4411925A (en) 1980-01-21 1980-11-05 Branched amides of L-aspartyl-d-amino acid dipeptides
DK321981A DK154652C (da) 1980-01-21 1981-07-17 L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og d-amino-syreamider til brug ved deres fremstilling
DK321981 1981-07-17

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK24581A DK24581A (da) 1981-07-22
DK154342B true DK154342B (da) 1988-11-07
DK154342C DK154342C (da) 1989-05-22

Family

ID=27221754

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK024581A DK154342C (da) 1980-01-21 1981-01-20 L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og aminer til brug som udgangsforbindelser ved deres fremstilling
DK320688A DK161249C (da) 1980-01-21 1988-06-13 D-aminosyreamidforbindelser og deres anvendelse som mellemprodukter

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK320688A DK161249C (da) 1980-01-21 1988-06-13 D-aminosyreamidforbindelser og deres anvendelse som mellemprodukter

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4411925A (da)
EP (1) EP0034876B1 (da)
AR (1) AR227532A1 (da)
AU (2) AU527294B2 (da)
CA (1) CA1161839A (da)
DK (2) DK154342C (da)
FI (1) FI77044C (da)
HK (1) HK53386A (da)
MX (1) MX9203539A (da)

Families Citing this family (96)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4797298A (en) * 1980-01-21 1989-01-10 Pfizer, Inc. Branched amides of L-aspartyl-D-amino acid dipeptides
US4870190A (en) * 1980-01-21 1989-09-26 Pfizer Inc. Branched amides of L-aspartyl-D-amino acid dipeptides
ATE9995T1 (de) * 1981-07-10 1984-11-15 Pfizer Inc. Verzweigte amide von l-aspartyl-daminos[uredipeptiden und deren verbindungen.
US4465626A (en) * 1981-09-08 1984-08-14 Pfizer Inc. Process for preparation, isolation and purification of dipeptide sweeteners
US4571345A (en) * 1983-06-13 1986-02-18 Cumberland Packing Corp. 1,1-Diaminoalkane derived sweeteners
US4536396A (en) * 1983-09-06 1985-08-20 Pfizer Inc. Synergistic sweetening compositions
CH657129A5 (en) * 1983-12-20 1986-08-15 Sandoz Ag Process for preparing N-thienylchloroacetamides
US4692512A (en) * 1984-07-13 1987-09-08 The Procter & Gamble Company Alpha-L-aspartyl-D-phenylglycine esters and amides useful as high intensity sweeteners
US4883888A (en) * 1984-07-13 1989-11-28 The Procter & Gamble Company Oxa-fenchyl amines useful for preparing high intensity sweeteners
CA1276395C (en) * 1984-07-13 1990-11-13 John M. Janusz Oxa-fenchyl esters and amides of alpha-l-aspartyl-d- phenylglycine
US4564528A (en) * 1984-09-18 1986-01-14 Research Triangle Institute Aminomalonyl alanine compounds and use as dietary sweeteners
US4572799A (en) * 1985-04-15 1986-02-25 General Foods Corporation L-Aminodicarboxylic acid amides
US4692513A (en) * 1985-12-20 1987-09-08 The Procter & Gamble Company Alpha-L-aspartyl-D-heteroaromatic-substituted glycine esters and amides useful as high intensity sweeteners
HU201094B (en) * 1986-01-23 1990-09-28 Pfizer Process for producing immunostimulant acyltripeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient
US4855455A (en) * 1988-01-22 1989-08-08 W. R. Grace & Co.-Conn. Preparation of amino acid derivatives
US4851548A (en) * 1988-04-12 1989-07-25 Pfizer Inc. Superior catalysts for preparation of 3-amino-2,2,4,4-tetramethylthietane via the Leuckart reaction
DK0386963T3 (da) * 1989-03-08 1995-03-20 Pfizer Forebyggelse af afsmag i visse alitam-sødede drikkevarer
DK0461197T3 (da) * 1989-03-28 1994-06-27 Wrigley W M Jun Co Forbedret alitamstabilitet i tyggegummi ved indkapsling
WO1990011021A1 (en) * 1989-03-28 1990-10-04 Wm. Wrigley Jr. Company Chewing gum with longer lasting sweetness using alitame
US5057327A (en) * 1989-12-29 1991-10-15 Wm. Wrigley Jr. Company Chewing gum with longer lasting sweetness using alitame
US4997659A (en) * 1989-03-28 1991-03-05 The Wm. Wrigley Jr. Company Alitame stability in chewing gum by encapsulation
CN1045911A (zh) * 1989-03-28 1990-10-10 箭牌糖类有限公司 通过包胶法提高口香糖中埃利坦(Alitame)的稳定性
AU628536B2 (en) * 1989-03-28 1992-09-17 Wm. Wrigley Jr. Company Improved alitame stability using hydrogenated starch hydrolysate syrups
US5039530A (en) * 1990-03-01 1991-08-13 Wm. Wrigley Jr. Company Storage stable chewing gum containing alitame
US5034231A (en) * 1989-03-28 1991-07-23 Wm. Wrigly, Jr. Company Alitame stability using hydrogenated starch hydrolysate syrups
WO1990006061A1 (en) * 1989-03-28 1990-06-14 Wm. Wrigley Jr. Company Method of controlling release of alitame in chewing gum and gum produced thereby
US5286509A (en) * 1992-06-22 1994-02-15 The Coca-Cola Company L-aspartyl-D-α-aminoalkanoyl-(S)-N-alpha-alkylbenzyl amides useful as artificial sweeteners
US5225591A (en) * 1992-07-28 1993-07-06 The Coca-Cola Company Process for making 1-cyclopentylalyl amines useful for the synthesis of sweeteners
US5334396A (en) * 1992-10-19 1994-08-02 Wm. Wrigley Jr. Company Chewing gum sweetened with alitame and having a high level of lecithin
IL111990A0 (en) * 1993-12-22 1995-03-15 Coca Cola Co Novel intermediates for the synthesis of l-aspartyl d -alpha- aminoalkanoyl (s)-n -alpha- alkylbenzyl amides useful as artificial sweeteners
IL108595A (en) * 1994-02-08 1998-09-24 Yissum Res Dev Co History of Carboxylic Acid 2,2,3,3 Tetramethyl Cyclophen (ACMT) (Process for their Preparation and Pharmaceutical Preparations Containing Them)
JP3648784B2 (ja) * 1994-07-08 2005-05-18 味の素株式会社 新規アスパルチルジペプチド誘導体及び甘味剤
AU1515095A (en) * 1994-12-13 1996-07-03 Wm. Wrigley Jr. Company Improved chewing gum containing salatrim
JPH08231586A (ja) * 1994-12-28 1996-09-10 Ajinomoto Co Inc α−Ｌ−アスパルチルジペプチドアミド誘導体の製造法
DE19505933C2 (de) * 1995-02-21 2000-09-21 Degussa Verfahren zur Herstellung von L-Aspartyl-D-alanin-N-(thietan-3-yl)-amiden
US5739313A (en) 1995-11-13 1998-04-14 Regents Of The University Of Minnesota Radionuclide labeling of vitamin B12 and coenzymes thereof
US20060116330A1 (en) * 1997-07-08 2006-06-01 The Iams Company Methods of mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of mannoheptulose
US8563522B2 (en) * 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
US20020035071A1 (en) * 1997-07-08 2002-03-21 Josef Pitha Mimicking the metabolic effects of caloric restriction by administration of glucose antimetabolites
US6806363B1 (en) * 1999-04-16 2004-10-19 Mayo Foundation For Medical Education & Research Cobalamin conjugates useful as antitumor agents
BR0107933A (pt) 2000-01-28 2004-01-06 Procter & Gamble Compostos de arginina saborosos e seus usos para saúde cardiovascular
US20020012733A1 (en) * 2000-04-12 2002-01-31 The Procter & Gamble Company Compositions for reducing hypercholesterolemia and controlling of postprandial blood glucose and insulin levels
US6899905B2 (en) 2000-04-12 2005-05-31 Mid-America Commercialization Corporation Tasty, ready-to-eat, nutritionally balanced food compositions
US6720015B2 (en) * 2000-04-12 2004-04-13 Mid-America Commercialization Corporation Ready-to-eat nutritionally balanced food compositions having superior taste systems
US6716462B2 (en) 2000-04-12 2004-04-06 Mid-America Commercialization Corporation Nutritionally balanced traditional snack foods
US6846501B2 (en) 2000-04-12 2005-01-25 Mid-America Commercialization Corporation Traditional snacks having balanced nutritional profiles
US6726943B2 (en) 2000-04-12 2004-04-27 Mid-America Commercialization Corporation Nutritionally balanced snack food compositions
US6827954B2 (en) * 2000-04-12 2004-12-07 Mid-America Commercialization Corporation Tasty, convenient, nutritionally balanced food compositions
JP2004509633A (ja) * 2000-09-26 2004-04-02 ザ　プロクター　アンド　ギャンブル　カンパニー 脱水デンプン成分の作製で使用するための改良型乳化剤系
EP1334114A2 (en) * 2000-10-25 2003-08-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Transcobalamin binding conjugates useful for treating abnormal cellular proliferation
US6713114B2 (en) 2001-02-14 2004-03-30 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Frozen beverage topping
CA2439991C (en) 2001-03-16 2007-05-22 The Procter & Gamble Company Beverage brewing devices for preparing creamy beverages
US7090878B2 (en) 2001-05-31 2006-08-15 The Procter & Gamble Company Mineral fortified water
US20030049352A1 (en) * 2001-05-31 2003-03-13 Haile Mehansho Fortified drinking water
AU2002322275A1 (en) * 2001-06-20 2003-01-08 Mayo Foundation For Medical Education And Research Adenosyl-cobalamin fortified compositions
US6841185B2 (en) * 2001-10-19 2005-01-11 The Procter & Gamble Co. Flavored coffee compositions and methods of making the same
US20030180431A1 (en) * 2001-10-22 2003-09-25 The Procter Gamble Co. Flavored coffee compositions with stable flavors and method of making
US6632449B2 (en) 2001-11-20 2003-10-14 The Procter & Gamble Co. Compositions and kits comprising a defined boron compound and methods of their preparation
US8263150B2 (en) 2001-12-19 2012-09-11 The Procter & Gamble Company Beverage compositions having low levels of preservative with enhanced microbial stability
US20030203097A1 (en) * 2002-04-24 2003-10-30 The Procter & Gamble Company Acidic compositions comprising protein and fiber and processes of their preparation
US7393552B2 (en) * 2002-04-24 2008-07-01 The Procter & Gamble Company Compositions comprising protein and fatty acid
US20030203042A1 (en) * 2002-04-24 2003-10-30 Cook Lisa Ann Compositions comprising milk protein concentrate and fatty acid and processes of their preparation
US7279187B2 (en) * 2003-02-14 2007-10-09 The Procter & Gamble Company Mineral fortification systems
US20030045473A1 (en) * 2002-07-19 2003-03-06 Sarama Robert Joseph Compositions, kits, and methods for cardiovascular health
US6824810B2 (en) * 2002-10-01 2004-11-30 The Procter & Gamble Co. Creamer compositions and methods of making and using the same
US7018668B2 (en) * 2003-02-06 2006-03-28 Procter & Gamble Co. Low fat creamer compositions
ATE350307T1 (de) * 2003-03-03 2007-01-15 Procter & Gamble Wasserunlösliche materialien enthaltende flüssigkeitsbrühvorrichtung
US20050158294A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US8894991B2 (en) * 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US20050152884A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US7785635B1 (en) 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050260302A1 (en) * 2004-05-19 2005-11-24 The Procter & Gamble Company Nutritionally balanced traditional snack foods having a low glycemic response
US20060065127A1 (en) * 2004-09-24 2006-03-30 Dalton David A Liquid infusion pods containing insoluble materials
US20060228459A1 (en) * 2005-04-11 2006-10-12 The Iams Company Compositions comprising a cocoa butter component and an animal-derived fat component
EP1885383B1 (en) * 2005-05-31 2016-09-21 IAMS Europe B.V. Feline probiotic bifidobacteria
DK1880001T3 (da) * 2005-05-31 2011-09-12 Iams Company Feline probiotiske lactobacilli
EP2031982A2 (en) * 2006-06-23 2009-03-11 The Procter and Gamble Company Concentrated omega-3 fatty acids and mixtures containing them
GB0615620D0 (en) * 2006-08-05 2006-09-13 Astrazeneca Ab A process for the preparation of optically active intermediates
GB0615619D0 (en) * 2006-08-05 2006-09-13 Astrazeneca Ab Chemical process for preparation of intermediates
AU2011232759B2 (en) * 2006-08-05 2012-08-02 Astrazeneca Ab A process for the preparation of optically active cyclopropylamines
WO2008053444A2 (en) 2006-11-01 2008-05-08 The Procter & Gamble Company Treating a respiratory condition with bifidobacterium
CN101711158A (zh) 2007-02-01 2010-05-19 爱默思公司 使用葡萄糖抗代谢物、鳄梨或鳄梨提取物减轻哺乳动物炎症和应激反应的方法
DE102008016068A1 (de) 2008-03-28 2009-10-22 Prt Patent Registration Service & Trade Ltd. Fermentiertes Kaffegetränk mit Arginin
DE202008004253U1 (de) 2008-03-28 2008-07-17 Metsälä, Pertti Fermentiertes Kaffeegetränk mit Arginin
DE202008005965U1 (de) 2008-04-30 2008-12-11 Metsälä, Pertti Nahrungszusammensetzung
DE102008021586A1 (de) 2008-04-30 2009-11-12 Metsäla, Pertti Nahrungszusammensetzung hergestellt aus grünem Kaffee Gingko Biloba, und Maillard-Produkten des Arginin
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US8628812B2 (en) 2008-12-30 2014-01-14 Pepsico, Inc. Preservative system for acidic beverages based on sequestrants
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
US20120189739A1 (en) 2010-12-20 2012-07-26 Imperial Sugar Company Naturally-Sweetened Reduced-Calorie Base Syrup Compositions and Compositions Sweetened Therewith
CN102924332B (zh) * 2011-08-10 2015-12-16 浙江九洲药业股份有限公司 N-p-双酸氨基酸单酯的合成工艺改进
EP2599483A1 (en) * 2011-11-30 2013-06-05 Lunamed AG 4-Phenylbutyric acid formulation
CN103664639B (zh) * 2013-11-19 2015-05-20 中国科学院广州生物医药与健康研究院 胺类化合物及其制备方法和在制备抗流感病毒药物中的应用
CN104672093B (zh) * 2015-03-22 2016-04-13 成都塞恩斯医药科技有限公司 一种双环丙基甲胺的制备方法
CN105906591A (zh) * 2016-04-22 2016-08-31 中国药科大学 2-氨基-γ-丁内酯类盐酸盐的合成

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE544890C (de) * 1930-05-24 1932-02-23 Karl Friedrich Schmidt Dr Verfahren zum Abbau von Saeuren mit cyclischem Bau zu Aminen
DE942149C (de) * 1953-04-16 1956-04-26 American Home Prod Verfahren zur Herstellung substituierter Glycinamide
US3729487A (en) * 1968-10-17 1973-04-24 Ciba Geigy Corp 2-halo-3-aminothietane and 2h-thiete-1,1-dioxides
DE2034625A1 (da) * 1969-08-14 1971-02-25
NL7304290A (da) * 1972-03-29 1973-10-02
US3907766A (en) * 1972-07-17 1975-09-23 Takeda Chemical Industries Ltd L-aspartyl-aminomalonic acid diester
FR2254283A1 (en) * 1973-12-12 1975-07-11 Nofre Claude Alanine t-butylamides and salts - with sweetening power greater than cyclamates
US3971822A (en) * 1974-07-19 1976-07-27 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Aspartyl amide sweetening agents

Also Published As

Publication number Publication date
DK154342C (da) 1989-05-22
AU6638881A (en) 1981-07-30
EP0034876B1 (en) 1984-08-29
EP0034876A3 (en) 1981-12-23
AU8835682A (en) 1982-12-23
FI810148L (fi) 1981-07-22
EP0034876A2 (en) 1981-09-02
DK161249C (da) 1991-12-30
AR227532A1 (es) 1982-11-15
US4411925A (en) 1983-10-25
AU540094B2 (en) 1984-11-01
AU527294B2 (en) 1983-02-24
DK24581A (da) 1981-07-22
DK161249B (da) 1991-06-17
CA1161839A (en) 1984-02-07
FI77044C (fi) 1989-01-10
MX9203539A (es) 1992-09-01
DK320688D0 (da) 1988-06-13
DK320688A (da) 1988-06-13
FI77044B (fi) 1988-09-30
HK53386A (en) 1986-07-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK154342B (da) L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og aminer til brug som udgangsforbindelser ved deres fremstilling
US4399163A (en) Branched amides of L-aspartyl-D-amino acid dipeptides
EP0128654A2 (en) Gem-diaminoalkane derived sweeteners
US3725453A (en) L-4{40 -cyano-3-(2,2,2-trihaloacetamido) succinanilic acids
CN106478466B (zh) 一种氨基酸类表面活性剂的制备方法
US4622417A (en) L-aminodicarboxylic-(O-cycloalkyl)-L-aminocarboxylate alkyl ester sweeteners
EP0069811B1 (en) Branched amides of l-aspartyl-d-amino acid dipeptides and compositions thereof
CA1118432A (en) Process for the preparation of 4-hydroxy-5-alkyl and 2,5-dialkyl-3-oxo-2h-furans
DK154652B (da) L-aspartyl-d-aminosyre-dipeptidamider og d-amino-syreamider til brug ved deres fremstilling
US4676989A (en) Sweetening with cycloalkyl ethers and thioethers of dipeptides
CN108892645B (zh) 一种制备四甲基吡嗪的方法
CA1195690A (en) Branched amides of d-amino acids
CA1191839A (en) Branched amides of l-aspartyl-d-amino acid dipeptides
IE52197B1 (en) Branched amides of l-aspartyl-d-amino acid dipeptides and compositions thereof
US4189439A (en) Process of the preparation of hydroxyfurenones
FI82444C (fi) Amin, som aer anvaendbar som mellanprodukt vid framstaellning av l-aspartyl-d -aminosyradipeptidamider.
NZ203177A (en) Branched chain amines
NZ197781A (en) L-aspartyl-d-amino acid dipeptide amides and sweetening compositions
US4870190A (en) Branched amides of L-aspartyl-D-amino acid dipeptides
US5225591A (en) Process for making 1-cyclopentylalyl amines useful for the synthesis of sweeteners
JPH0586777B2 (da)
IE50915B1 (en) Branched amides of l-aspartyl-d-amino acid dipeptides and compositions thereof
JPS6230747A (ja) アルコキシアルキルアミンのｌ−アミノジカルボン酸アミド
JPH0236162A (ja) Ｎ−（ｌ−アスパルチル）アミノアルコール誘導体およびそれを含有する甘味料
JPS5826851A (ja) Ｌ−アスパルチル−ｄ−アミノ酸ジペプチドの分枝鎖を有するアミド類

Legal Events

Date Code Title Description
PUP Patent expired