DK153845B - Fremgangsmaade til fremstilling af cephalosporin- eller penicillinderivater - Google Patents

Description

1 DK 153845 B

Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cephalosporin- og penicillinderivater, som er nyttige mellemprodukter ved fremstilling af hovedsageligt kendte 0-lactam-antibiotica (d.v.s. cephalosporiner og penicilliner).

Det er kendt at 7a-alkoxycephem- og 6oc-alkoxypenam-forbindelser er nyttige antibiotica, og de nedenstående fremgangsmåder er blevet foreslået til fremstilling af disse uden at ødelægge cephém- eller penamkernen: a) diazotering af 7-aminocephalosporansyre og efterfølgende omdannelse til det tilsvarende alkoxyderivat /Japansk fremlæggelsesskrift 2

DK 153845 B

nr. 931/72; J. Amer.Chem. Soc. 94 1408 (1972}7- b) Alkylthiolering eller fluorering efterfulgt af acylering af en 6-benzylidenaminopenam-forbindelse eller en 7-benzylidenamino-cephem-forbindelse og efterfølgende omdannelse til alkoxyderivatet p. Org. Chem., 38 943 og 2857 (1973)7- c) Omsætning af en 7-benzylidenaminoforbindelse med en alkylperoxy-forbindelse (Japansk fremlæggelsesskrift nr. 42691/72).

d) N-chlorering af en 7-acylaminocephem-forbindelse eller en 6-acylaminopenam-forbindelse og efterfølgende omdannelse til den tilsvarende acyliminoforbindelse efterfulgt af tilsætning af methanol P* Amer. Chem. Soc., 95, 2401 og 2403 (1973)7-

Der er imidlertid de ulemper ved disse fremgangsmåder, at der er involveret mange reaktionstrin og kræves komplicerede udskillelses- og rensningsprocedurer; endvidere opnås der lave udbytter ved proces (a), medens processerne (b) - (d) ikke kan udføres økonomisk i industriel målestok på grund af blandt andet de lave temperaturer, som kræves for reaktionen.

Der er nu fundet en hidtil ukendt fremgangsmåde til indførelse af alkoxygrupper i 7oc-stillingen af en cephem-kerne eller 6a-stillingen af en penam-kerne, som ikke lider af disse ulemper, og hvorved der især dannes meget få biprodukter og der ikke kræves lave temperaturer tinder reaktionen. De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen dannede cephalosporin- eller penicillin-derivater er hidtil ukendte forbindelser og er nyttige som mellemprodukter ved fremstillingen af cephalosporin- og penicillin-antibiotica.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles cephalosporin-eller'penicillinderivater med den almene formel

3 DK 153845 B

R3 R2

\_/ OR

HO—^ \-CH-N--^ (X)

,A s~Y

hvori Z betyder gruppen

| ^CHP ^CH

—C(CH3)2, eller ^C-R6 ^^C-R6 R betyder alkyl med 1-6 carbonatomer, R1 betyder en carboxybeskyttende gruppe, 2 3 4 5 R , R , R og R er ens eller forskellige og hver betyder 2 3 hydrogen eller alkyl med 1-4 carbonatomer, eller R og R og/ 4 5 eller R og R tilsammen danner en carbocyclisk ring kondenseret med benzenringen, hvortil de er knyttet, og g R betyder methyl, alkanoyloxymethyl eller lavere-alkylsubsti-tueret 5-leddet heterocyclylthiomethyl, og fremgangsmåden er ejendommelig ved, at en forbindelse med formlen

DK 153845 B

r3 JZ

HO-V \-CH=N-!-r^S^\ \=U H Z (II) /Λ o>-v

R5 R

COOR1 1 2 3 4 5 hvori Z, R , R , R , R og R har den ovenstående betydning, oxideres med et metaloxid eller en quinon og omsættes med en alkano1 med 1-6 carbonatomer.

Det foretrækkes især at fremstille sådanne cephalosporin- eller 2 penicillmderivater med formlen (I), hvori R er methyl, R og 4 3 5 1 R begge er hydrogen, R og R begge er t-butyl, og Z og R har den ovenstående betydning.

Fra DE offentliggørelsesskrift nr. 22 58 278 er det kendt at fremstille en halogeniminoforbindelse med formlen

G

_/ Halogen

/ \ I ^ SN

\_/ « 1,1,1 , r\ ^ COOM' hvori J, G og K hver for sig betyder nitro, methylsulfonyl, halogen, cyan eller hydrogen, M' er en carboxybeskyttende gruppe, og Z fuldender en penam- eller 2-cephemring, ved først at aktivere et tilsvarende 7-iminocephalosporin- eller 6-iminopenicillinderivat med stærk base og derpå tilsætte et bromerings- eller chlo-reringsmiddel. Halogenatomet i halogeniminoforbindelsen (III) kan derpå udskiftes med methoxy, azido, cyan eller et andet halogen ved omsætning med et egnet nucleophilt reagens, f.eks. med methanol til indførelse af methoxy.

5 DK 153845 B

Fremgangsmåden ifølge DE 22 58 278 har kun en overfladisk lighed med den hidtil ukendte fremgangsmåde ifølge opfindelsen. Ved den foreliggende fremgangsmåde har udgangsmaterialet med formlen (II) en para-hydroxygruppe på benzenringen. Dette udgangsmateriale behandles med et oxidationsmiddel, som tilsyneladende giver en qui-noid forbindelse med formlen R3' R2

0=/ \=CH - N*v_XSX

X Mj C00R1

Tilsætningen af alkanolen giver det ønskede derivat med formlen (I) med den indførte alkoxygruppe.

I modsætning hertil dannes ved proceduren ifølge DE 22 58 278 en halogenforbindelse med formlen (III) under anvendelse af aktivering (proton-udstrækning), og en nucleophil substitution indfører derpå den ønskede alkoxy- eller anden substituent.

Forskellen i reaktionsprocedurernes kemi afspejles i, at definitionerne for gruppen K (formel [III] i DE 22 58 278) ikke inkluderer en hydroxysubstituent.

Benzylidenaminogruppen i 7- eller 6-stilling på cephem- eller penamkernen af 7-benzylidenaminocephem- eller 6-benzylidenamino-penam-forbindelsen, som er udgangsmateriale for fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan være i a- eller 8-konfigurationen. 7-benzylidenaminocephem- eller 6-benzylidenaminopenam-forbindelsen selv er en Schiff-base dannet ved omsætning af en formylsubsti-tueret benzen eller et formylsubstitueret, aromatisk, kondenseret polycyclisk carbonhydrid, f.eks. naphthalen eller anthracen, og en 7-aminocephem- eller 6-aminopenam-forbindelse. Benzenen eller det

6 DK 153845 B

aromatiske kondenseret polycycliske carbonhydrid skal have en hy-droxygruppe i en stilling konjugeret med formylgruppen. Eksempler på egnede formylforbindelser er p-hydroxybenzaldehyd, 4-formyl-2-naph-thol, 5-formyl-l-naphthol og 9-formyl-10-hydroxyanthracen. Benzenringen eller det kondenseret polycycliske aromatiske system kan om ønsket også bære yderligere alkyl-substituenter med 1-4 car-bonatomer. Hydroxygruppen og formylgruppen behøver ikke at være knyttet til den samme aromatiske ring, forudsat at de er i konjugerede stillinger med hinanden. Cephem- eller penamkernen bærer

1 C

de angivne substituenter -COOR og R .

Gruppen tjener til at beskytte carboxygruppen i 4-stillingen på cephemkernen eller 3-stillingen på penamkernen og er fortrinsvis en gruppe, som let kan fjernes i et efterfølgende trin uden nedbrydning af cephem- eller penamkernen, eller en gruppe som kan forblive i slutproduktet efter reaktion af den ifølge opfindelsen fremstillede forbindelse til dannelse af et cephalosporin- eller penicil-lin-antibioticum. Eksempler på sådanne beskyttende grupper inkluderer: Lige eller forgrenet alkyl, fortrinsvis lavere-alkyl, såsom methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl og t-butyl; substitueret methyl, såsom alkoxymethyl (fortrinsvis lavere-alkoxymethyl) eller benzyl-oxymethyl, f.eks. methoxymethyl, ethoxymethyl, benzyloxymethyl og p-nitrobenzyloxymethyl; alkanoyloxyalkyl (fortrinsvis lavere-alkanoyloxy-lavere-alkyl), f.eks. acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, 1-acetoxyethyl, 1-acetoxypropyl og 1-pivaloyloxyethyl; benzoyloxy-methyl; cyanmethyl; 2,2,2-trichlorethyl; phthalimidomethyl; eventuelt substitueret benzyl, f.eks. benzyl, p-methoxybenzyl eller p-nitrobenzyl; benzhydryl; eventuelt substitueret phenacyl, f.eks. phenacyl, p-bromphenacyl, p-methoxyphenacyl eller p-n.itrophenacyl; og trialkylsilyl (fortrinsvis tri-(lavere-alkyl)-silyl), såsom trimethylsilyl.

De oxidationsmidler, som anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er metaloxider, såsom blydioxid og mangandioxid; og quinoner, især benzoquinoner med elektrofile substituenter, f.eks. dichlor-dicyanbenzoquinon og chloranil. Blydioxid og dichlordicyanbenzo-quinon er særlig foretrukne i betragtning af deres relativt lette tilgængelighed, billighed og reaktivitet.

7

DK 153845 B

Den alkoxygruppe, som indføres i cephem- eller penamforbindelsen i 7a- eller 6a-stilling, kan være en lige eller forgrenet alkoxygruppe med 1-6 carbonatomer. Som eksempler på alkanoler, som kan anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen til at indføre denne gruppe, kan nævnes: methanol, ethanol, n-propanol, 2-propa-nol, n-butanol, 2-butanol, 2-methyl-l-propanol, 2-methyl-2-pro-panol, n-pentanol og n-hexanol.

Oxidationen og alkoxyleringen kan ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres i to adskilte trin, idet udgangsmaterialet først oxideres, og den lavere alkanol derpå tilsættes. Alternativt kan om ønsket den lavere alkanol være til stede i reaktionsblandingen under hele oxidationstrinnet.

Ved udførelsen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen foretrækkes det, at forbindelsen med formlen (il) bringes i kontakt med et oxidationsmiddel i et egnet opløsningsmiddel. Arten af det opløsningsmiddel, som anvendes ved reaktionen, er ikke kritisk for opfindelsen, forudsat at opløsningsmidlet ikke deltager i reaktionen. Som følge heraf kan der anvendes forskellige inerte organiske opløsningsmidler som f.eks.: aromatiske carbcnhydrider, såsom benzen eller toluen; halogenerede carbonhydrider, såsom chloroform eller methylenchlorid; og ethere, såsom dioxan eller tetrahydrofu-ran. De aromatiske carbonhydrider, såsom benzen, foretrækkes. Oxidationsmidlet kan anvendes i en støkiometrisk mængde i forhold til den cephem- eller penamforbindelse, som skal oxideres, men for at fremskynde reaktionen foretrækkes det at anvende et overskud af oxidationsmiddel, fortrinsvis 1,2-10 gange den støkiometriske mængde.

Reaktionstemperaturen er ikke kritisk for opfindelsen, og reaktionen skrider godt frem ved temperaturer fra stuetemperatur til 80°C; men reaktionen vil foregå ved temperaturer både højere og lavere end dette område. Den tid, der kræves for reaktionen, vil variere afhængigt af udgangsmaterialerne, oxidationsmidlets art, det eventuelle opløsningsmiddels art og reaktionstemperaturen, men den vil normalt tage fra 10 minutter til flere timer. Den cephem- eller penamforbindelse med formlen (II), som anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan dannes in situ ved omsætning af en

8 DK 153845 B

7-aminocephalosporin- eller β-aminopenicillinforbindelse med et arylaldehyd for udførelsen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen, og denne forbindelse kan anvendes uden mellemliggende isolering.

Det ved oxidationen dannede produkt kan om ønsket udvindes ved enhver konventionel procedure; f.eks. kan oxidationsmidlet filtreres fra reaktionsblandingen, og opløsningsmidlet afdestilleres fra filtratet under formindsket tryk til opnåelse af det oxiderede produkt. Dette produkt kan derpå renses ved enhver konventionel metode, f.eks. søjlechromatografi. Imidlertid foretrækkes det at anvende det oxiderede produkt i den opløsning, hvori det er fremstillet, uden mellemliggende isolering eller rensning, til den efterfølgende reaktion med alkanolen.

Alkoxyleringstrinnet i fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan udføres ved at bringe en opløsning af det oxiderede produkt i kontakt med en alkanol. Reaktionen vil skride frem ved anvendelse af det oxiderede produkt og alkanolen i et støkiometrisk forhold, men et overskud af den lavere alkanol (fortrinsvis 10-100 gange den støkiometriske mængde) vil forøge reaktionshastigheden og foretrækkes derfor. Temperaturen ved denne reaktion er ikke kritisk, og af denne grund udføres reaktionen fortrinsvis ved stuetemperatur, selv om højere eller lavere temperaturer kan anvendes om ønsket. Da imidlertid reaktionen fremskyndes af varme, kan det i nogle tilfælde være fordelagtigt at opvarme reaktionsblandingen til en temperatur på 40-50°C for at reducere reaktionstiden. Reaktionstiden afhænger af udgangsmaterialets art, af alkanolens art. og af reaktionstemperaturen, men vil normalt være fra 0,5 til flere timer.

De således fremstillede 7P-benzylidenamino-7a-alkoxycephem- eller ββ-benzylidenamino-6α-alkoxypenam-forbindelser kan udvindes fra reaktionsblandingen på enhver konventionel måde. En foretrukken procedure omfatter: afdestillation af opløsningsmidlet og overskuddet af alkanol fra reaktionsblandingen til opnåelse af det amorfe produkt og efterfølgende rensning af dette amorfe produkt ved enhver konventionel metode, f.eks. søjlechromatografi.

9 DK 153845 B

Den således opnåede 7p-benzylidenamino-7a-alkoxycephem- eller 6p-benzylidenamino-6a-alkoxypenam-forbindelse kan derpå omdannes til et cephalosporin- eller penicillin-antibioticum ved kendte metoder. F.eks. kan forbindelsen omsættes direkte med et acylerings-middel eller kan først omsættes med f.eks. 2,4-dinitrophenylhydra-zin og p-toluensulfonsyre til dannelse af et 7-amino-7-methoxy-cephalosporin- eller 6-amino-6-methoxypenicillin-derivat, som derpå omsættes med et acyleringsmiddel til dannelse af det tilsvarende 7-acylamino-7-methoxycephalosporin- eller 6-acylamino-6-methoxy-penicillin-derivat. Den beskyttende gruppe på 4-carboxygruppen eller 3-carboxygruppen kan derpå fjernes på konventionel måde til dannelse af en forbindelse med stærk antibakteriel aktivitet.

Opfindelsen belyses nærmere ved de efterfølgende eksempler, hvoraf eksempel 1-22 er udførelseseksempler på fremgangsmåden ifølge opfindelsen, medens eksempel 23 illustrerer den måde, på hvilken en ifølge opfindelsen fremstillet forbindelse kan omdannes til et nyttigt cephalosporin-antibioticum.

EKSEMPEL 1 (A) Fremstilling af 2,2,2-trichlorethyl-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxvlat

Til 10 g 2,2,2-trichlorethyl-7p-amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxy-lat-hydrochlorid sattes ca. 70 ml vand. Derpå tilsattes omkring 2,5 g natriumhydrogencarbonat til frigørelse af den frie base, og efter omrøring blev produktet ekstraheret med ethylacetat.

10

DK 153845 B

Ekstrakten blev tørret over vandfrit natriumsulfat og koncentreret ved inddampning ved en temperatur under 35°C.

Den således opnåede frie base blev derpå opløst i 40 ml methanol, hvorefter der sattes 5 g 4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzaldehyd til opløsningen. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 4 timer, hvorefter uopløseligt materiale blev opløst ved hurtig opvarmning af blandingen, og blandingen blev derpå koncentreret ved inddampning til halvdelen af dens oprindelige volumen. Den koncentrerede reaktionsblanding blev afkølet, hvorved der udskiltes krystaller. Disse krystaller blev udvundet ved filtrering og vasket med koldt methanol, hvorved der blev opnået 7 g 2,2,2-trichlorethyl-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat. Produktet blev derpå omkrystalliseret fra en lille mængde methanol, hvorved det rene produkt blev opnået som svagt gule krystaller med et smeltepunkt på 94°C.

Elementanalyse: beregnet for c25H3i°4N2SC13: C 53,43%; H 5,56%; N 4,95% fundet: C 53,51%; H 5,61%; N 5,08%.

(B) Fremstilling af 2,2,2-trichlorethyl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy- 3,5-di-t-butylbenzylidenamino-3--methyl-3-cephem-4-carboxylat

En blanding af 1 g 2,2,2-trichlorethyl-7p-(4-hydroxy-3,5-di-t-butyl-benzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat, fremstillet som beskrevet under trin A, og 5 g blydioxid i 75 ml benzen blev opvarmet under tilbagesvaling og omrøring i 15-20 minutter. Efter afkøling blev uopløseligt materiale frafiltreret og vasket med benzen. Det kombinerede filtrat og vaskeopløsningerne blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til omkring 20 ml, og der sattes 10 ml absolut methanol til koncentratet. Efter henstand i 1 time ved stuetemperatur blev opløsningen koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af det ønskede produkt. Produktet blev renset ved søjlechromatografi på tør silicagel (som var blevet tørret ved 110°C under formindsket tryk i 4 timer) og elueret med en blanding af cyclohexan og ethylace-tat (3:1), hvorved der blev opnået 700 mg 2,2,2-trichlorethyl-7oc-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat som et blegbrunt amorft pulver.

11 DK 153845 B

Massespektrum: M+ 590 NMR spektrum (CHCl^)rfppm: 1,45 /C · (CH^) ^ , singlet7, 2,21 (CH^ i 3-stilling, singlet), 3,35 (Hg i 2-stilling, kvartet), 3,60 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4,90 (COgCHgCClj, kvartet), 5,0β (H i 6-stilling, singlet), 5.55 (OH i 4-stilling på benzen, singlet), 7,65 (benzen-H, singlet), 8.55 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel cyclohexan/ ether (2:1) - = 0,5.

EKSEMPEL 2

Fremstilling af benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat

En blanding af 880 mg benzhydryl-7P-amino-3-acetoxymethyl-3-cephem- 4-carboxylat og 460 mg 4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzaldehyd blev opvarmet under tilbagesvaling i 50 ml benzen i 1,5-2 timer, idet der kontinuert blev fjernet vand ved anvendelse af en vandfælde, til dannelse af den tilsvarende Schiff-base in situ. Denne Schiff-base blev derpå anvendt i det følgende trin af fremgangsmåden uden mellemliggende isolering.

Til reaktionsblandingen sattes 5 g blydioxid, og blandingen blev kraftigt omrørt i 15 minutter, medens den blev opvarmet til 85°C på et oliebad. Efter afkøling blev reaktionsblandingen filtreret, og der sattes 20 ml absolut methanol til filtratet. Reaktionsblandingen fik derpå lov at stå ved stuetemperatur i 1 time, hvorefter den blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt. Dette produkt blev renset ved søjlechromatografi ^50 g silicagel tørret ved opvarmning under formindsket tryk, elueringsmiddel: cyclohexan/ethylacetat (3:l}7> hvorved der blev opnået 0,9 g benzhydryl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy- 3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat.

DK 153845 B

NMR spektrum (CHCl^ £ ppm: 1.45 /C.(CH3)5, singlet7 1,98 (CH2OCOCH3 i 3-stilling, singlet), 3,35 (H2 i 2-stilling, kvartet), 3,55 (OCH3 i 7-stilling, singlet), 4,80 (CH20C0CH3 i 3-stilling, kvartet), 5,03 (H i 6-stilling, singlet), 5,50 (OH i 4-stilling på benzen, singlet), 6,97 /COOCH(C6H5)2, singlet7, 7,30 /C00CH(C6HL)2, singlet7, 7,63 (H i 2,é-stilling på benzen, singlet), 8.45 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel n-hexan/ethyl-acetat (3:1) - Rf = 0,4.

EKSEMPEL 3

Fremstilling af benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxv-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-(1-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiornethyl- 3-cephem-4-carboxylat____ 7,0 benzhydryl-7-amino-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl- 3-cephem-4-carboxylat og 3,5 g 4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzalde-hyd sattes til 70 ml benzen. Blandingen blev derpå opvarmet under tilbagesvaling i 1,5 timer, medens det under reaktionen dannede vand blev fjernet af en vandfælde.

Den resulterende opløsning indeholdende en Schiff-base sattes til en blanding af 50 g blydioxid og 300 ml benzen, hvilken blanding i forvejen var blevet opvarmet under omrøring til 65°C. Blandingen blev derpå omrørt kraftigt ved 65°C i 15 minutter, hvorefter den blev afkølet og filtreret. Der sattes 50 ml absolut methanol til filtratet, og blandingen fik lov at stå ved stuetemperatur, hvorefter den blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt. Det rå produkt blev renset ved søjlechromatografi på tørret silicagel /élueringsmiddel: ben-zen/ethylacetat (10:l}7, hvorved der blev opnået 4,65 g benzhydryl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino )-3-( 1-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat som et lyst rødligbrunt amorft pulver.

13 DK 153845 B

NMR spektrum (CHCl^)6 ppm: 1,45 /C-(CH^)^, singlet7, 3,58 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 3,61 (H2 i 2-stilling, singlet), 3,79 (N-CHj i tetrazol i 3-stilling, singlet), 4,31 (-CH2S- i 3-stilling, kvartet), 5,09 (H i 6-stilling, singlet), 5,63 (OH i 4-stilling i benzen, singlet), 6,98 /G00CH(C6H5)22, singlet7, 7,38 /C00CH(C6H5)2, singlet7, 7,72 (H i 2,6-stilling i benzen, singlet), 8,60 (-CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel benzen/ethyl-acetat (10:1) - = 0,4.

Den ovenfor beskrevne procedure blev i det væsentlige gentaget, undtagen at Schiff-basen og blydioxidet blev omsat ved en temperatur på 5-10°C (ved afkøling med is) og der blev i hovedsagen de samme resultater.

14

Js^mesL A DK 1 5 3 8 4 5 B

Fremstilling af benzhydryl-7oc-methoxy-7P- (4-hydroxy-3-methyl-5-t-butylbenzylidenamino) -5-acetoxvmethyl-5-cephem-4-carboxylat_

En blanding af 438 mg benzhydryl-7-amino-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat og 192 mg 4-hydroxy-3-methyl-5-t-butylbenz-aldebyd blev opvarmet under tilbagesvaling i 1,5 timer i 15 ml benzen, idet det dannede vand kontinuert blev fjernet af en vandfælde, til dannelse af den tilsvarende Schiff-base. Reaktionsblandingen blev derpå afkølet, og der tilsattes 1 g blydioxid. Blandingen blev kraftigt omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter den blev filtreret, og der sattes 4 ml absolut methanol til filtratet. Opløsningen fik lov at stå ved stuetemperatur i 18 timer, hvorefter den blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk, og remanensen blev renset ved søjlechromatografi på silicagel (som var blevet tørret ved opvarmning under formindsket tryk) under anvendelse af en 3:1 blanding, af cyclohexan og ethylacetat som elueringsmiddel«, Der blev opnået 120 mg benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3-methyl-5-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et bleggult amorft pulver.

NMR spektrum (CDCl^) £ ppm: 1,42/C.(CHj)3, singlet/, 1,98(CH2C00CH·^ i 3-stilling, singlet), 2,23(0¾ i 3-stilling i benzen, singlet), 3,39(¾ i 2-stilling, kvartet), 3,58(00¾ i 7-stilling, singlet), 4,85(CHo0C0CEL i 3-stilling, kvartet), 5,07(H i 6-stilling, singlet), 5,50(OH i 4-stilling i benzen, singlet), 6,98/C00CH(C6H5)2, singlet/, 7,37/C00CH(C6H5)2, singletJ, 7,59(H i 2,6-stilling i benzen, singlet), 8,53(CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel cyclohexan/ ethylacetat (3:1) - Rf = 0,40.

DK 153845 B

15 EKSEMPEL 5 (A) Fremstilling af benzhydryl-7p-(4-hydroxy-3,5-dimethylbenzyliden- amino)-5-acetoxymethyl-5~cephem-4-carboxylat_

En blanding af 658 mg benzhydryl-7-amino-3-acetoxymethyl-3-cephem- 4-carboxylat og 225 mg 4-hydroxy-3,5-dimethylbenzaldehyd blev opvarmet under tilbagesvaling i 25 ml toluen i 2 timer, idet vand kontinuert blev fjernet med en vandfælde. Reaktionsblandingen blev derpå afkølet, og benzhydryl-7P-(4-hydroxy-3,5-dimethyl-benzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4--carboxylat udskiltes som farveløse krystaller, der blev udvundet ved filtrering og vasket med en lille mængde toluen. Udbytte 690 mg; smeltepunkt 187-188 C (under dekomponering).

(B) Fremstilling af benzhydryl-7oc-methoxy-7P- (4-hydroxy-3, 5-dimethylbenzvlidenamino)-3-acetoxymethyl-5-cephem-4-carboxvlat 300 mg benzhydryl-7P-(4-hydroxy-3,5-dimethylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 20 ml varm benzen, og der sattes 0,9 g blydioxid til opløsningen. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter den blev filtreret. Der sattes 3 ml methanol til filtratet, og blandingen blev efterladt ved stuetemperatur i 18 timer. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret ved inddampning under formindsket tryk, og remanensen blev renset ved søjlechromatografi under anvendelse af en blanding af cyclohexan og ethylacetat (2:1) som elueringsmiddel og silicagel, som i forvejen var blevet tørret under opvarmning under formindsket tryk. Benzhydryl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-dimethylbenzylidenamino)-3-ac etoxymethyl-3-c ephem-4-carboxylat blev opnået som et bleggult pulver i et udbytte på 10 mg.

NMR spektrum (CDCl^) ppm: 1.98 (OCOCH^ i 3-stilling, singlet), 2,25 (CH^ i 3,5-stilling i benzen, singlet), 3,38 (H2 i 2-stilling, kvartet), 3,56 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4,93 (CErjOCOCH^ i 3-stilling, kvartet), 5,06 (H i 6-stilling, singlet), 6.98 /C00CH(C6H5)2, singlet/,

DK 153845 B

7,35 /C00CH(C6H5)2, singlet/, 7,50 (H i 2,6-stilling, singlet), 8,48 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel cyclohexan/ ethylacetat (2:1) - = 0,4.

EKSEMPEL 6

Fremstilling af benzhydryl-7oc-ethoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butvlbenzvlidenamino)-5-acetoxvmethyl-3-cephem-4-carboxylat 2 g benzhydryl-7p-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3- acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 50 ml benzen, og 5 g blydioxid sattes til opløsningen. Blandingen blev derpå opvarmet under omrøring i 15 minutter, afkølet og filtreret. Der sattes 20ml ethanol til filtratet, og den resulterende blanding blev efterladt ved stuetemperatur i 1,5 timer. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret ved inddampning ved stuetemperatur, og remanensen blev renset ved søjlechromatografi på tørret silicagel under anvendelse af cyclohexan/ethylacetat (3il) som eluerings-middel. Der blev opnået 700 mg benzhydryl-7a-ethoxy-7P-(4-hydroxy- 3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et rødligt orange pulver.

NMR spektrum (CDCl^) $ ppm: 1,22 (ΟΟΗ2ΟΗ^ i 7-stilling, triplet), 1,45 /C*(CH3)3, singlet/, 2,00 (CH20C0CEj i 3-stilling, singlet), 3,41 (H2 i 2-stilling, dublet), 3,83 (0CH2CH^ i 7-stilling, kvartet), 4,90 (-CH20Ac i 3-stilling, kvartet), 5,05 (H i 6-stilling, singlet), 5,62 (phenolisk OH, singlet), 6,98 /C00CH(C6H5)2, singlet7, 7,38 /C00CH(CgHc)2, singlet/, 7,72 (H i 2,6^stilling i benzen-kernen, singlet), 8,56 (CH=N-, singlet).

17

DK 153845 B

EKSEMPEL 7

Fremstilling af benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-diisopropyl-benzylidenamino)-3-acetoxymethvl-3-cephem-4-carboxvlat_ 500 mg benzhydryl-7-(4-hydroxy-3,5-diisopropyrbenzylidenamino)- 3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 15 ml benzen, og der sattes 1 g frisk fremstillet blydioxid dertil. Den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 20 minutter, hvorefter uopløseligt materiale blev frafiltreret. Der sattes 4 ml methanol til filtratet, og blandingen blev efterladt ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret ved inddampning under formindsket tryk, og det således opnåede produkt blev renset ved søjlechromatografi på tørret silica-gel (tørret ved 110°C under formindsket tryk i flere timer) under anvendelse af cyclohexan/ethylacetat (3:1) som elueringsmiddel. Produktet, benzhydryl-7a-methoxy-7p-(4-hydroxy-3,5-diisopropyl-benzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat, blev opnået som et bleggult amorft pulver i et udbytte på 202 mg.

NMR spektrum (CDCl^) ξ ppm: 1,30 /CH-(CH3)2, dublet/, 2,00 (CH^OCOCH^ i 3-stilling, singlet), 3,14 multiplet/, 3,42 (H2 i 2-stilling, kvartet), 3.61 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4,88 (CH20C0CH3 i 3-stilling, kvartet), 5,13 (H i 6-stilling, singlet), 7,03 /C00CH(C6H5)2, singlet/, 7,41 /ϋ000Η(06Η5)2, singlet/, 7.61 (H i 2,6-stilling i benzen, singlet), 8,60 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel, cyclohexan/ ethylacetat (3:1) - R^ = 0,3.

EKSEMPEL 8 18

DK 153845 B

Fremstilling af benzhydryl-7oc-methoxy-7P- (4-hydroxy-3,5-di-t-butylb enzy 1 i denamino) -3- (5-methyl-l, 3,4-thiadiazol-2-yl-thiomethyl) - 3-ce-phem-4-carboxylat_ 300 mg benzhydryl-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)- 3-(5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl-thiomethyl)-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 10 ml benzen, og der sattes 600 mg blydioxid dertil. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter og derpå filtreret. Der sattes 4 ml methanol til filtratet, og blandingen fik lov at stå ved stuetemperatur i 1 time. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret, og remanensen renset ved søølechromato-grafi på tørret silicagel under anvendelse af cyclohexan/ethylacetat (2:l) som elueringsmiddel. Der blev opnået 180 mg benzhydryl-7ce-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-(5-methyl- 1,3,4-thiadiazol-2-yl-thiomethyl)-3-cephem-4-carboxylat som et bleggult pulver.

NMR spektrum (CDCl^) £ ppm: 1,44 /C.(CH3)3, singlet/, 2.66 (CH^ i 5-stilling på thiadiazol i 3-stilling, singlet), 3,57 (H2 i 2-stilling og OCH^ i 7-stilling, singlet), 4.32 (-CH2S- i 3-stilling, kvartet), 5,06 (H i 6-stilling, singlet), 5,60 (phenolisk OH, singlet), 6,95 /C00CH(C6H5)2, singletj, 7.33 /C00CH(C6H5)2, singlet/, 7.66 (H i 2,6-stilling på benzen-kernen, singlet), 8,53 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel cyclohexan/ ethylacetat (2:1) - = 0,4.

EKSEMPEL 9 p-Toluensulfonylethyl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino )-3-methyl-3-ceT)hem-4-carboxylat_ 1,0 g p-toluensulfonylethyl 7β-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzyliden-

19 DK 153845 B

amino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 40 ml benzen, og der sattes 2 g blydioxid til opløsningen. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter og derpå filtreret. Efter koncentrering af filtratet ved inddampning under formindsket tryk til halvdelen af dets oprindelige volumen tilsattes 20 ml methanol, og blandingen blev efterladt ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret, og remanensen renset ved søjlechromatografi på tørret silicagel under anvendelse af cyclohexan/ethylacetat (10:1 og 5:1) som elueringsmidler. Der blev opnået 0,45 g p-toluensulfonylethyl-7a-methoxy-7£-(4-hydroxy- 3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat som et pulver.

NMR spektrum (CDCl^) £ ppm: 1,41 /C*(CH^)^, singlet/, 2,00 (CH^ i 3-stilling, singlet), 2,40 (CgH^’CH^ i ester, singlet), 3,21 (Hg i 2-stilling, kvartet), 3.53 (COOCHgCHgSOg i ester, triplet), 3.54 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4.55 (COOCHgCHgSOg i ester,0 triplet), 4,96 (H i 6-stilling, singlet), 5.59 (phenolisk OH, singlet), 7.59 (SOg-CgH^-CH^ i ester, kvartet), 7,63 (H i 2,6-stilling i benzen-kernen, singlet), 8,44 (CH=N-, singlet.

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel cyclohexan/ ethylacetat (5:l)-Rf=0,5.

EKSEMPEL 10

Fremstilling af benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-5-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat

En opløsning af 113,5 mg 2,3-dichlor-5,6-dicyanbenzoquinon i 8,6 ml benzen sattes til 350 mg benzhydryl-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino )-3-acetoxymethyl-3~cephem~4-carboxylat, og den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret, og remanensen ekstra- 20

DK 153845 B

heret med en 5:1 blanding af cyclohexan og ethylacetat. Ekstrakten blev koncentreret, og koncentratet opløst i 5 ml benzen. Derpå sattes 4 ml methanol til opløsningen, og blandingen blev efterladt ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter den blev koncentreret under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt.

Det rå produkt blev renset ved søjlechromatografi under anvendelse af tørt silicagel og et elueringsmiddel bestående af cyclo-hexan/ethylacetat (3:1), hvorved der blev opnået 156 mg benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektralanalyse og tyndtlagschromatografi af dette produkt gav samme resultater som de, der er rapporteret i eksempel 2.

EKSEMPEL 11

Fremstilling af benzhydryl-7a-methoxy-7p-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino )-3-acetoxvmethvl-3-cephem-4-carboxylat 330 mg benzhydryl-7P~(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat og 113,5 mg 2,3-dichlor-5,6-dicyanbenzoquinon opløstes i 8,6 ml methanol, og den resulterende opløsning blev omrørt i et isbad i 10 minutter. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret, og koncentratet ekstraheret med benzen. Benzenekstrakten blev koncentreret, og remanensen chromatograferet på en tør silicagelsøjle med cyclohexan/ethylacetat (3:1) som elueringsmiddel. Der blev opnået 161 mg benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-c ephem- 4-carboxylat som et amorft pulver, hvis NMR-spektrum og tyndtlagschromatografi stemte overens med værdierne for det i eksempel 2 fremstillede produkt.

EKSEMPEL 12

Fremstilling af 2,2,2-ΪΓίο1ι1θΓθΐ]2ν1-7ο(;-ιιιβΐ1ιοχν-7β-(4-1^ηοχν-3,5-di-t-butylbenzvlidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxvlat 1 mg 7β- (4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat (opnået som beskrevet i trin A af eksempel l) og 113,5 mg 2,3-dichlor-5,6-dicyanbenzoquinon opløstes i 7,6 ml

21 DK 153845 B

methanol, og den resulterende opløsning blev omrørt i et isbad i 10 minutter. Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret, og koncentratet ekstraheret med benzen. Benzenekstrakten blev koncentreret, og remanensen chromatograferet på en tør silicagelsøøle under anvendelse af cyclohexan/ethylacetat (3:1) som eluerings-middel, hvorved 2,2,2-trichlorethyl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat blev opnået som et amorft pulver i et udbytte på 162 mg.

Resultaterne af NMR-spektroskopi og tyndtlagschromatografi af dette produkt var identiske med de, der blev opnået i eksempel 1.

EKSEMPEL 13

Fremstilling af benzhydryl-7a^methoxy-7P-(4-hydroxy-3-t-butyl-l-naphthvlmethvlenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxvlat 1,0 g benzhydryl-7P-(4-hydroxy-3-t-butyl-l-naphthylmethylenamino)- 3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 25 ml benzen, og der sattes 2 g blydioxid til opløsningen under omrøring i et isvandbad. Blandingen blev omrørt i yderligere 20 minutter i isvandbadet, hvorefter uopløseligt materiale blev frafiltreret og 10 ml methanol sattes til filtratet. Efter at blandingen havde fået lov at stå ved stuetemperatur natten over, blev den koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt. Dette rå produkt blev renset ved søjlechromatografi på tørt silicagel under anvendelse af benzen/ethylacetat (10:1) som elueringsmiddel, hvorved der blev opnået 536 mg benzhydryl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3-t-butyl-l-naphthylmethylenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et pulver.

NMR spektrum (CDCl-j) ppm: 1,43 /C·(CH^)^, singlet/, 1.93 (CE^OCOCEj i 3-stilling, singlet), 3,32 (EL, i 2-stilling, kvartet), 3,56 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 5,06 (H i 6-stilling, singlet), 6.93 /C00CH(CgH^)2, singletj, 7s28 /C00CH(C6H5)2, multiplet/o

22 DK 153845 B

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel benzen/ ethylacetat (10:1) - = 0,4.

EKSEMPEL 14

Fremstilling af benzhydryl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3-t-butyl- 5,6,7,8-tetrahydro-l-naphthylmethylenamino)-3-acetoxymethyl-3-c ephem-4-carboxylat_ 260 mg benzhydryL-^-^-hydroxy^-t-butyl^^^jS-tetrahydro-l-naphthylmethylenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 10 ml 1,2-dichlorethan, og der sattes 520 mg blydioxid til opløsningen under omrøring i et isvandbad. Blandingen blev derpå omrørt i yderligere 20 minutter i isvandbadet. Uopløseligt materiale blev frafiltreret, og der sattes 5 ml methanol til filtratet. Efter henstand ved stuetemperatur i 1,5 timer blev blandingen koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt. Dette rå produkt blev renset ved søj-lechromatografi på tørret silicagel under anvendelse af benzen/ ethylacetat (30:1) som elueringsmiddel, hvorved der blev opnået 155 mg benzhydryl-7oc-methoxy-7P“(4-hydroxy-3-t-butyl-5,6,7,8-tetrahydro-l-naphthylmethylenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et pulver.

NMR spektrum (CDCl^) fi ppm: 1,33 ZC*(CH3)3, singlet7, 1.70 (H2 i 6,7-stilling i 5,6,7,8-tetrahydronaphthylmethylen- kernen, bred singlet), 1,90 (CH20C0CH3 i 3-stilling, singlet), 2.70 (H2 i 5,8-stilling i 5,6,7,8-tetrahydronaphthylmethylen-kernen, bred dublet), 3,40 (H2 i 2-stilling, kvartet), 3,48 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4,79 (CH20C0CH3 i 3-stilling, kvartet), 4,96 (H i 6-stilling, singlet), 6,84 /C00QH(C6H5)2, singlet7, 7,23 /ΟΟΟΟΗ(Ο^Η^)2, bred singlet7, 7,67 (H i 2-stilling i 5,6,7,8-tetrahydronaphthylmethylen-kernen, singlet), 8.70 (CH=N-, singlet).

DK 153845 B

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel benzen/ethyl-acetat (10:1) - = 0,5* EKSEMPEL 15

Fremstilling af p-bromphenacyl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzvlidenamino)-3-acetoxvmethvl-5-cephem-4-carboxylat_ 1,0 g p-bromphenacyl 7β-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)- 3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 30 ml 1,2-dichlorethan, opløsningen blev derpå afkølet i et is/salt-bad, og da opløsningens indre temperatur nåede -5°C tilsattes 2,0 g blydioxid under omrøring. Blandingen blev derpå omrørt i 30 minutter, idet temperaturen holdtes mellem 0 og -5°C. Uopløseligt materiale blev frafiltreret, der sattes 10 ml methanol til filtratet, og blandingen blev efterladt ved stuetemperatur natten over«, Reaktionsblandingen blev derpå koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af det rå produkt, som blev renset ved søjlechromatografi på tørret silicagel under anvendelse af benzen/ethylacetat (10:1) som elueringsmiddel. Der blev opnået 628 mg p-bromphenacyl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3j5-di-t-butyl-benzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3"Cephem-4-carboxylat som et pulver.

NMR spektrum (CDCl^) β ppm; 1,46 jC·(CH^)2 , singlet/» 2,06 (CH^OCOCH^ i 3-stilling, singlet), 3,43 (H£ i 2-stilling, kvartet), 3,54 (OCH^ i 7-stilling, singlet), 4,99 (CHo0C0CHL i 3-stilling, bred singlet), 5,08 (H i 6-stilling, singlet), 5,49 (C00CH2C0C6H4Br, kvartet), 5,61 (phenolisk OH, singlet), 7,67 (H i 2,6-stillinger i benzen-kernen, singlet), 7,72 (COOCHpCOCgHiBr, kvartet), 8,52 (CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel); udviklingsmiddel benzen/ethylacetat (10;l) - R^ = 0,5°

DK 153845 B

24 EKSEMPEL 16

Fremstilling af p-bromphenacyl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino )-3-/T"l-methyl-lH-tetrazol-5-yl) -thipmethyl7- 3-c ephem-4-carboxvlat_ 724 mg p-bromphenacyl-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)- 3-/Tl-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl7-3-cephem-4-carboxylat opløstes i 20 ml tetrahydrofuran, og der sattes 1,6 g blydioxid til denne opløsning under omrøring i et isvandbad. Blandingen blev omrørt i yderligere 30 minutter i isvandbadet, hvorefter uopløseligt materiale blev frafiltreret, og der sattes 10 ml methanol til filtratet. Efter at blandingen havde fået lov at stå ved stuetemperatur i 1 time, blev den koncentreret ved ind-dampning under formindsket tryk til opnåelse af et råt produkt. Dette rå produkt blev renset ved søjlechromatografi på tørret silicagel under anvendelse af benzen/ethylacetat (10:1) som elue-ringsmiddel, hvorved der blev opnået 512 mg p-bromphenacyl-7oc-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-/Jl-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl7-3-cephem-4-carboxylat som et bleggult pulver.

NMR spektrum (CDCl^) ppm: 1,39 2?'(CH3)3, singlet/, 3,48 (OCEj i 7-stilling, singlet), 3.61 (H2 i 2-stilling, singlet), 3,81 (N-CEj i tetrazol i 3-stilling, singlet), 4,38 (-C^S- i 3-stilling, singlet), 5,03 (H i 6-stilling, singlet), 5.45 (C00CH2C0C6H4Br’ singlet), 5,55 (phenolisk OH, singlet), 7.61 (H i 2,6-stillinger i benzen-kernen, singlet), 7,66 (COOCE.COCÆBr, kvartet), 8.46 (-CH=N-, singlet).

Tyndtlagschromatografi (silicagel): udviklingsmiddel benzen/ethyl-acetat (10:1) - = 0,3.

DK 153845 B

EKSEMPEL 17 (A) Fremstilling af 2,2,2-trichlorethyl 6p-(3,5-di-t-butyl-4- hydroxybenzylidenamino)-penicillinat_

En blanding af 1 g 2,2,2-trichlorethyl-6P-aminopenicillinat og 674 mg 3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzaldehyd i 40 ml benzen blev opvarmet under tilbagesvaling i 1 time i en beholder forsynet med en vandfælde. Efter dette tidsrum blev reaktionsblandingen koncentreret, og remanensen opløst i en lille mængde af en 1:10 blanding af ethylacetat og cyclohexan. Uopløseligt materiale blev frafiltreret, og filtratet blev renset ved søjlechromatografi på tørt silicagel (3 x 32 cm) under anvendelse af ethylacetat/cyclo-hexan (1:10) som elueringsmiddel. Der blev opnået 1,11 g 2,2,2-trichlorethyl-ββ-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-penicillinat som en bleggul sirup.

NMR spektrum ppm (CDCl^) 8.46 (IH, dublet, J=2, CH=N), 7,56 (2H, singlet, benzenring H), 5,61 (IH, dublet, J=4, 5-stilling H), 5,50 (IH, bred, OH), 5,33 (IH, kvartet, J=2 og 4,6-stilling H), 4,85 og 4,65 (hver, IH, dublet, J=12, CH2CC13), 4.47 (IH, singlet, 3-stilling), 1,69 og 1,53 (hver, 3H, singlet, 2-stilling CH^), 1,39 (18H, singlet, t-butyl).

(B) Fremstilling af 2,2,2-trichlorethyl-6p-(3,5-di-t-butyl-4- hvdroxvbenzvlidenamino)-6oc-methoxypenicillinat _

Til 1,89 g 2,2,2-trichlorethyl-6p-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzyli-denamino)-penicillinat (fremstillet på den måde, som er beskrevet i trin A) i 40 ml benzen sattes 3,8 g blydioxid. Efter omrøring af blandingen ved stuetemperatur i 20 minutter blev uopløseligt materiale frafiltreret, og filtratet blev derpå koncentreret ved inddampning ved stuetemperatur til omkring halvdelen af dets oprindelige volumen. Der sattes 15 ml methanol til dette koncentrat, og blandingen fik lov at stå ved stuetemperatur i 1 time, hvorefter opløsningsmidlet blev afdestilleret. Remanensen blev renset ved

26 DK 153845B

søjlechromatografi under anvendelse af tørt silicagel (3 x 36 cm) og eluering med ethylacetat/cyclohexan (l:10). Der blev opnået 725 mg 2,2,2-^ίοΙι1θΓβΐ1ψ1-6β-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzyliden-amino)-6a-methoxypenicillinat som et bleggult pulver.

IR spektrum \) (Nujol )αη”^: 3650, 1770, 1690, 1636.

illcUk NMR spektrum ζ ppm (CDCl^) 8,47 (IH, singlet, 6-stilling CH=N), 7.66 (2H, singlet, benzenring H), 5,59 (IH, singlet, 5-stilling H), 4,78 (2H, singlet, CH2CC13), 4.55 (IH, singlet, 3-stilling H), 3.55 (3H, singlet, 6-stilling OCH^), 1.66 (3H, singlet, 2-stilling CH3), 1,53 (3H, singlet, 2-stilling CH^), 1,43 (18H, singlet, t-butyl).

EKSEMPEL 18

Fremstilling af pivaloyloxymethyl-6p-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxy-benzvlidenamino)-6o:-methoxypenicillinat_

Pivaloyloxymethyl-δβ-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-penicillinat blev fremstillet som beskrevet i trin A af eksempel 17, undtagen at der anvendtes pivaloyloxymethyl-6β-aminopeni-cillinat i stedet for 2,2,2-trichlorethyl-6β-aminopenicillinatet.

Trin B af eksempel 17 blev derpå gentaget, undtagen at 2,2,2-trichlor ethyl-δβ- ( 3,5-di-t-butyl-4-hydr oxybenzylidenamino) -penicillinatet blev erstattet med en lige så stor vægtmængde pival oyloxymethyl-6β-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-penicillinat. Der blev opnået 750 mg pivaloyloxymethyl-6β-(3,5“ di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-6a-methoxypenicillinat.

IR spektrum max(CHCl3)cnf ^ 3630, 1760, 1630.

NMR spektrum ppm (CDCl^) 8,45 (IH, singlet, 6-stilling CH=N), 7,64 (2H, singlet, benzenring H),

27 DK 153845 B

5,84 (2H, singlet, COOCH^O-), 5,58 (IH, singlet, benzenring H), 5.53 (IH, singlet, 5-stilling H), 4.45 (IH, singlet, 3-stilling H), 3,55 (3H, singlet, 6-stilling OCH^), 1.60 (3H, singlet, 2-stilling CH^), 1.45 (21H, singlet, 2-stilling CH^ og benzenring-t-butyl), 1,22 (9H, singlet, pivaloyl).

EKSEMPEL 19

Fremstilling af benzhydryl-6p-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxy-benzyliden-amino)-6a-methoxypenicillinat___

Benzhydryl-ββ-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-penicillinat blev fremstillet ifølge den procedure, som er beskrevet i trin Å af eksempel 17, hvorefter trin B af eksempel 17 blev gentaget under anvendelse af en lige så stor vægtmængde af dette i stedet for 2,2,2-trichlorethyl“^- (3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino) -penicillinatet. Der blev opnået 400 mg benzhydryl-ββ-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-6a-methoxypenicillinat.

IR spektrum \) max (Nuøol)cnf *": 3640, 1770, 1750, 1630.

MMR spektrum ppm (CDCl·^) 8,42 (IH, singlet, 6-stilling CH=N), 7.60 (2H, singlet, 6-stilling benzenring H), 7,25 (10H, singlet, benzhydrylester-benzenring H), 6,87 (IH, singlet, COOCH 02), 5,51 (2H, singlet, benzenring OH og 5-stilling H), 4,44 (IH, singlet, 3-stilling H), 3.46 (3H, singlet, 6-stilling OCH^), 1.53 (3H, singlet, 2-stilling CH^), 1,38 (21H, singlet, 2-stilling CH·^ og t-butyl).

EKSEMPEL 20 (A) Fremstilling af 2,2,2~trichlorethyl-7P-(3, 5~di-t-butyl-4-hvdroxvbenzvlidenamino)-3-methvl-2-cephem-4°carboxylat

En nnl «Rniησ nf o· 9.9. rJhl nr»«i:Vnr1 ra7fi=ami =.9= 28

DK 153845 B

cephem-4-carboxylat og 1,3 g 3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzaldehyd i 60 ml benzen blev opvarmet under tilbagesvaling i 1,5 timer i en beholder udstyret med en vandfælde. Efter dette tidsrum blev opløsningsmidlet afdampet, og der sattes en lille mængde cyclo-hexan til remanensen. Uopløseligt materiale blev frafiltreret, og filtratet renset ved søjlechromatografi på tørt silicagel (4,5 x 15 cm) under anvendelse af ethylacetat/cyclohexan (1:10) som elueringsmiddel. Der blev opnået 1,84 g 2,2,2-trichlorethyl-7β-(3,5-di~t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-3-methyl-2-cephem- 4-carboxylat.

UMR spektrum S ppm (CDCl-^) 8.53 (IH, dublet, J=2, CH=N), 7,60 (2H, singlet, benzenring H), 6,04 (IH, bred, 2-stilling H), 5.53 (IH, bred, OH), 5,45 (2H, multiplet, 6- og 7-stilling H), 4,88 (IH, bred, 4-stilling H), 4,79 (2H, dublet, CH^Cl^), 1,95 (3H, singlet, 3-stilling CH^), 1,44 (18H, singlet, t-butyl).

Under anvendelse af i hovedsagen samme procedure fremstilledes også den tilsvarende benzhydrylester.

(B) Fremstilling af 2,2,2-trichlorethyl-7P-(3,5-di-t-butyl-4- hydroxvbenzylidenamino)-7a-.ethoxv-5-methyl-2-cephem-4-carboxvlat

Til en opløsning af 1,45 g 2,2,2-trichlorethyl-7P-(3,5-di-t-butyl-4=hydroxybenzylidenamino)-3-methyl-2-cephem-4-carboxylat i 50 ml benzen sattes 2,5 g blydioxid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 25 minutter. Efter dette tidsrum blev uopløseligt materiale frafiltreret, og der sattes 20 ml methanol til filtratet. Blandingen fik .derpå lov at stå ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter den blev koncentreret, og remanensen renset ved søjlechroma-tografi på tørt silicagel (3 x 25 cm) under anvendelse af ethylacetat/cyclohexan (1:5) som elueringsmiddel. Der blev opnået 126 mg 2,2,2-trichlorethyl-7P-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-7oc-methoxy-3-methyl-2-cephem-4-carboxylat.

29 DK 153845B

NMR spektrum <T ppm (CDCl^) 8,46 (IH, singlet, 7-stilling CH=N), 7,66 (2H, singlet, benzenring H), 5.91 (IH, bred, 2-stilling H), 5.59 (IH, bred, benzenring H), 5,36 (IH, singlet, 6-stilling H), 4.91 (IH, bred, 4-stilling H), 4,78 (2H, dublet, CHgCCl^), 3.53 (3H, singlet, 7-stilling OCH^), 1,93 (3H, singlet, 3-stilling CH^), 1.44 (18H, singlet, t-butyl).

EKSEMPEL 21

Fremstilling af ’ben,zhyåry±-7§- (3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzyliden-amino)-7a:~methoxv-5-methvl-2-cephem-4-carboxvlat__

Den i eksempel 20 beskrevne procedure blev gentaget, undtagen at 2,2,2-trichlorethylesteren blev erstattet med den tilsvarende benzhydrylester. Der blev opnået benzhydryl-7P-(3,5-di-t-butyl- 4-hydroxybenzylidenamino)-7a-methoxy-3-methyl-2-cephem-4-carboxylat i et udbytte på 21,8%.

IR spektrum λ) max(CHCl3)cm"1: 3650, 1765, 1745, 1690, 1660, 1630.

NMR spektrum S ppm (CDCl^) 8,42 (IH, singlet, CH=N), 7.60 (2H, singlet, 7-stilling benzenring H), 7,24 (10H, singlet, C00CHPh2), 6.83 (IH, singlet, C00CHPh2), 5.83 (IH, bred, 2-stilling H), 5.54 (IH, singlet, benzenring H), 5,26 (IH, singlet, 6-stilling H), 4,81 (IH, bred, 4-stilling H), 3.45 (3H, singlet, 7-stilling OCH^), 1,73 (3H, singlet, 2-stilling CH^), 1,38 (18H, singlet, t-butyl).

EKSEMPEL 22

30 DK 153845 B

Fremstilling af benzhydryl-3-acetoxymethyl--7P-(3,5-di-t-butyl-4-hvdroxvbenzylidenamino) -7tt-methoxy-2-ce-phem-4-carboxvlat_

Ifølge hovedsagelig samme procedure som beskrevet i eksempel 20 blev benzhydryl-3-acetoxymethyl-7p-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxy-benzylidenamino)-7a-methoxy-2-cephem-4-carboxylat fremstillet i et udbytte på 24,6 % ud fra benzhydryl-3-acetoxymethyl-7P-(3,5-di-t-butyl-4-hydroxybenzylidenamino)-2-cephem-4-carboxylat.

IR spektrum"0 max(CHCl3)cm“1: 3650, 1770, 1745, 1635.

NMR spektrum S ppm (CDCl^) 8,43 (IH, singlet, CH=N), 7,62 (2H, singlet, 7-stilling benzenring H), 7,24 (10H, singlet, C00CHPh2), 6,83 (IH, singlet, C00CHPh2), · 6,26 (IH, bred, 2-stilling H), 5,51 (IH, singlet, benzenring OH), 5,17 (IH, singlet, 6-stilling H), 5,08 (IH, bred, 4-stilling H), 4,47 (2H, singlet, 3-stilling -CH20-), 3,39 (3H, singlet, 7-stilling OCH^), 1,85 (3H, singlet, 0C0CH3), 1,37 (18H, singlet, t-butyl).

EKSEMPEL 23

Dette eksempel illustrerer fremstillingen af et nyttigt cephalo-sporin-antibioticum ud fra det i eksempel 2 fremstillede 3-cephem-derivat.

200 mg af det i eksempel 2 fremstillede benzhydryl-7a-methoxy-7P-(4-hydroxy-3,5-di-t-butylbenzylidenamino)-3-acetoxymethyl-3-cephem- 4-carboxylat opløstes i 5 ml dichlorethan. Derpå sattes 100 mg thienylacetylchlorid til denne opløsning, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Reaktionsblandingen blev derpå renset ved tyndtlagschromatografi (silicagelj 20 x 20 cm, tykkelse 0,2 cm;

31 DK 153845 B

udviklingsmiddel ethylacetat/benzen, 1:4), idet det stof, der fandtes ved omkring Rf 0,45 blev ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk, hvorved der blev opnået 60 mg benzhydryl-3-acetoxymethyl-7<x-methoxy-7P-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat.

MR spektrum (CDCl^) <f ppm 2,0 (3-stilling OCOCH^, singlet), 3,30 og 3,45 (2-stilling H2, AB type), 3,48 (7-stilling OCH^, singlet), 3,9° (£HJ CH.C0, singlet), 4,90 og 5,05 (3-stilling -C^OCOCl·^, AB type), 5.08 (6-stilling H, singlet), 6.9 - 7,5 (thiophen H, multiplet), 7,05 Ζϋ000Η(06Η5)2, singlet/, 7,35 /ϋ000Η(06Η5)2, singlet/.

Benzhydrylesteren blev derpå hydrolyseret med trifluoreddikesyre i anisol på den sædvanlige måde til opnåelse af 3-acetoxymethyl- 7oc-methoxy~7P-(2-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylsyre.

Claims (7)

32 DK 153845 B

1. Fremgangsmåde til fremstilling af cephalosporin- eller penicillinderivater med den almene formel R3 R2 ~H-~—c« R5 R4 ' ^ COOR·1· hvori Z betyder gruppen I Vs>vCH,? ^CH —c(ch3)2, eller ^^C-R6 ^^C-R6 R betyder alkyl med 1-6 carbonatomer, R1 betyder en carboxybeskyttende gruppe, 2 7 Δ 5 R , R , R og R er ens eller forskellige og hver betyder hydrogen eller alkyl med 1-4 carbonatomer, eller R2 og R3 og/eller Il 5 R og R tilsammen danner en carbocyclisk ring kondenseret med benzenringen, hvortil de er knyttet, og C R betyder methyl, alkanoyloxymethyl eller lavere-alkyl-substitu-eret 5-leddet heterocyclylthiomethyl, kendetegnet ved, at en forbindelse med formlen

33 DK 153845 B ,5wz HO i \-CH=N-1- \=J N Z (II) /1* COOR1 12 3 4 r hvori Z, R , R , R , R og R; har den ovenstående betydning, oxideres med et metaloxid eller en quinon og omsættes med en alkanol med 1-6 carbonatomer.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, 2 4 3 5 at R og R begge er hydrogen, R og R begge er t-butyl, og R er methyl.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at oxidationen udføres ved hjælp af blydioxid.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2,kendetegnet ved, at oxidationen udføres ved hjælp af dichlordicyanbenzo-quinon.

5. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1-4, kendetegnet ved, at oxidationen udføres i et inert opløsningsmiddel.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at det inerte opløsningsmiddel er benzen.

7. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1-6, kendetegne t ved, at reaktionen med alkanolen udføres som et separat trin efter oxidationen.