DK151270B - Fremgangsmaade til fremstilling af glucoseisomerase. - Google Patents

Fremgangsmaade til fremstilling af glucoseisomerase. Download PDF

Info

Publication number
DK151270B
DK151270B DK503480AA DK503480A DK151270B DK 151270 B DK151270 B DK 151270B DK 503480A A DK503480A A DK 503480AA DK 503480 A DK503480 A DK 503480A DK 151270 B DK151270 B DK 151270B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
mycelium
growth
medium
glucose
gray
Prior art date
Application number
DK503480AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK151270C (da
DK503480A (da
Inventor
Mitko Stoychev Popov
Galina Mihaylovna Djedjeva
Ivan Ognyanov Todorov
Nelly Stoycheva Stoeva
Original Assignee
Inst Po Mikrobiologia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Po Mikrobiologia filed Critical Inst Po Mikrobiologia
Publication of DK503480A publication Critical patent/DK503480A/da
Publication of DK151270B publication Critical patent/DK151270B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK151270C publication Critical patent/DK151270C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/90—Isomerases (5.)
    • C12N9/92—Glucose isomerase (5.3.1.5; 5.3.1.9; 5.3.1.18)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/465—Streptomyces

Description

151270
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af glucoseisomerase, ved dyrkning af en stamme af slægten Streptomyces i 36-72 timer ved en temperatur på 24-36°C i et næringsmedium med en begyndelses-pH-værdi mellem 6,5 og 9,0, og indeholdende xylose.
5 Det er kendt, at enzymet glucoseisomerase omdanner D-glucose til D-fructose, som anvendes i stigende grad indenfor fødevareindustrien og i diætfødevarer i et antal udviklede lande. Glucoseisomerase giver i kombination med et kompleks af amylolytiske enzymer (a-amylase og glucoamylase) muligheden for at opnå glucose-fructose-sirupper og fruc-10 tose direkte fra stivelse under anvendelse af enzymer. Nogle metoder til frembringelse af glucoseisomerase har været kendt siden 1957, da det for første gang blev demonstreret, at det var muligt direkte at omdanne D-glucose til D-fructose ved hjælp af celler fra bakteriestammen Pseudomonas hydrophila N.491 og N.492. Til frembringelse af glucose-15 isomerase er mikroorganismer af Streptomycesslægten mest anvendt. Det er blevet konstateret, at tilstedeværelsen af forskellige mineralsalte i vækstmediet er en nødvendig betingelse for biosyntesen af enzymet glucoseisomerase. I de i litteraturen og i patentskrifter beskrevne kulturmedier er magnesiumsalte tilstede i formen af MgSO^f^O og 20 cobalt i form af CoC^^HgO (18). De koncentrationer, i hvilke disse salte tilsættes til vækstmediet, afhænger af producentmikroorganismen og varierer oftest fra 0,02 til 0,5% for MgSO^H^O og fra 0,005 til 0,024% for CoCIg'BHgO (14). Hos nogle Streptomycesarter er cobalt absolut nødvendig for dannelsen af glucoseisomerase, skønt aktivering 25 udføres på grund af magnesiumioner (13,16,17).
Der kendes dog visse mikroorganismer, som er i stand til at producere en tilstrækkelig mængde enzym i fravær af cobaltioner i vækstmediet. Jfr. ref. (2) og (9).
Tilsætningen af cobalt- og magnesiumioner til glucoseopløsninger 30 under isomeriseringen påvirker også i høj grad enzymaktiviteten. Det er blevet vist, at disse metaller er cofaktorer af enzymet, og at glucoseisomerase kan henføres som et metalenzym (3). Det er blevet konstateret, at 1 molekyle glucoseisomerase, der hidrører fra Str.sp.YT N.5, indeholder 4,1 cobaltatomer og 33 magnesiumatomer. Det formodes (3), -f*+ ·|·ψ 35 at kombinationen af Mg og Co med glucoseisomerase er nødvendig for enzymets transformation til en aktiv form. Det antages også, at der under denne proces sker en ændring i konformationen af enzymet.
Nogle forskere antager, at introduktionen af cobaltioner, navnlig sam- 151270 2 men med magnesiumioner, i høj grad forøger glucoseisomerases termostabilitet (3,10).
-H-
Tilstedeværelsen af højere mængder Co i fructosesirupper er uønsket (5), skønt spor af Co++ er nødvendig til ernæring af mennesket 5 (12). Indholdet af Co++-ioner i fructosesirup er ca. 1 mWl (1), men det er godtgjort, at denne koncentration virker toxisk på rotter. Til separation af cobalt-ioner fra glucoseisomerasesirupper, efter isomerise-ringsprocessen, er det nødvendigt at anvende ionbytterresiner for maximal separation. Det er nødvendigt at konstruere industrielle 10 automatiske ionbytningssystemer til denne yderligere proces. Der kan anvendes nogle fuldstændig automatiserede ionbytningssystemer, der omfatter to kation-aniondele (stærk sur kationresin Duolite C25-D og svag basisk anionresin Duolite S-56). Dette ionbytningssystem kræver periodisk regeneration med syre og baser og kræver yderligere store 15 mængder af rensevand.
Indholdet af cobaltioner i glucosefructosesirupper, der er blevet bearbejdet i ionbytningssystemet, kontrolleres ved hjælp af et automatisk absorptionsspektrofotometer ved hjælp af prøver, der kontinuerligt udtages fra strømmen. Driften af kationsystemet skal således reguleres.
20 Ved denne bearbejdningsproces må Co -ioner effektivt fjernes, således, at de ikke overstiger 5 ppm (8). Denne proces komplicerer produktionen og influerer på effektiviteten og fremstillingsomkostningerne af produktet.
Det har nu vist sig, at en hidtil ukendt mikroorganismestamme 25 Streptomyces sp. 765 producerer glucoseisomerase i godt udbytte uden at cobalt-ioner er nødvendig til biosyntesen af enzymet og til isomeriseringen af D-glucose til D-fructose. Den frembragte glucoseisomerase har et hensigtsmæssigt pH-optimum (7,0), temperaturoptimum (80°C) og betragtelig termostabilitet. Fremgangsmåden ifølge 30 opfindelsen er i overensstemmelse hermed ejendommelig ved, at der som mikroorganisme anvendes stammen Streptomyces sp. 765 deponeret ved The State Institute for Drugs Control under nummeret 143.
Streptomyces sp. N.765 er blevet isoleret fra bulgarisk jord. 874 Streptomyces-stammer er blevet undersøgt for glucoseisomerasepro-35 duktion. Undersøgelsen er blevet udført på det modificerede syntetiske vækstmedium nr. 1 efter Krassilnikov, idet selektionen er gennemført på to substratniveauer under anvendelse af xylose og xylan. Under disse betingelser er der blevet fundet 18 Streptomyces-stammer, som kan udvikle og frembringe enzymet glucoseisomerase. Blandt dem er stammen 3 151270
Streptomyces sp. N.765, som er i stand til at producere enzymet gluco-seisomerase i fravær af Co++ i vækstmediet. Stammen er deponeret i The State Institute for Drugs Control - bul. Vladimir Zaimov N.26, 29.sept.1979 under betegnelsen N.143, og stammen har følgende 5 morfologiske og biokemiske egenskaber:
Pi vækstmedium 1 med en mineralsk nitrogenkilde (iflg. G.F.Gause og medarbejdere) er kolonierne sædvanligvis ovale i form med ikke-for-mede rande, konveks i centret, opsvulmet med et kraterlignende hulrum med stærkt udtrykte radiale folder. Væksten er god. Sporangierne i 10 unge kulturer er aflange, monopodialt anbragt med 3-5 snoninger og i ældre kulturer er de kondenseret i sorghum.
Sporerne er aflange med afrundede ender: når de forstørres mere end 16.000 gange kan der observeres nogle hårlignende dannelser på deres overflade. Ved en mindre forstørrelse ser sporerne glatte ud.
15 Størrelsen varierer mellem 0,9 og 1,2 pm i længde og bredden ligger mellem 0,4 og 0,6 μm.
Farven af luftmyceliet og substratmyceliet bestemmes ifølge farveskalaen af A.C.Bondartsev og skalaen ifølge Tresner og Backus.
Med de forskellige vækstmedier skifter farven af luftmyceliet fra hvid 20 (d ) lysgrå til violet (a -d ), afhængig af carbon- og nitrogenkilde. På vækstmedium 1 med en mineralsk nitrogenkilde (ifølge G.F.Gause og medarbejdere) er farven fra lysgrå til musegrå (a -a ), og på et vækstmedium med en organisk nitrogenkilde (ifølge G.F.Gause og P 3 medarb.) er farven lysgrå til gråviolet (a -a ).
25 På vækstmedium med forskellige carbon- og nitrogenkilder er luftmyceliet grålig-grønt.
På vækstmedium 1 med en mineralsk nitrogenkilde (ifølge G.F.Gause og medarb.) er substratmyceliet due-farvet til ultramarin (l6-v1).
30 På kulturmedium 2 med en organisk nitrogenkilde (ifølge G.F.Gause og medarb.) er det ultramarin (v ) og efter forlænget dyrkning bliver Ί det sort (a ).
På kulturmedium med forskellige carbon- og nitrogen kilder er substratmyceliet fra mørkrødt til sort.
35 På kødkulturmedium-peptone-agar. Lav vækst. Luftmycelium lyserødt og teglstensrødt langs kanten. Substratmyceliet teg I sten s rødt.
På kartoffelvækstmedium-glucose-agar. Væksten meget god. Luftmycelium grå-blåt. Substratmycelium blåt til mørkblåt.
4 151270
Pa Tchapek-vækstmedium med sucrose. Lav vækst. Luftmyceliet lyserødt. Substratmyceliet lyst teg I sten s rødt.
Pi Tchapek-vækstmedium med glucose. Middel vækst. Luftmycelium lysblåt. Substratmycelium farveløs med en skygge af luftmyceliets farve.
5 På vækstmedium med sucrose. God vækst. Luftmycelium himmelblåt.
Substratmycelium mørkblåt til sort.
På vækstmedium amyliumagar. God vækst. Luftmycelium gråt. Sub-stratmyceiium blåt.
På amylum-ammoniumkultur ifølge Mishustin. Meget god vækst.
10 Luftmycelium gråt. Substratmycelium vinrødt til mørk vinrødt.
På syntetisk medium ifølge N.A.Krassilnikov. Middel vækst. Luftmycelium lys askefarvet. Substratmycelium lyserødt-violet.
På CPI ifølge N.A.Krassilnikov. God vækst. Luftmycelium grå-blåt. Substratmycelium rød-brunt.
15 På CPU ifølge N.A.Krassilnikov. Vækst lav til middel. Luftmyceli um blåt. Substratmycelium mørk cremefarvet.
På CPI 11 ifølge N.A.Krassilnikov. God vækst. Luftmycelium grå til ultramarin. Substratmyceiium vinrødt.
På CPIV ifølge N.A.Krassilnikov. Lav vækst. Luftmycelium lysgråt.
20 Substratmycelium farveløst, med en skygge af luftmyceliefarve.
På CPV ifølge N.A.Krassilnikov. God vækst. Luftmycelium gråt. Substratmycelium mørkviolet.
På syntetisk vækstmedium ifølge Vaxman. Middel vækst. Luftmycelium gråt til musegråt. Substratmycelium mørk cremefarvet til rødbrunt.
25 På kød-amylumagar. Lav vækst. Luftmycelium hvidt. Substratmyce lium cremefarvet.
På peptoneagar. God vækst. Luftmycelium gråt. Substratmycelium farveløst med en grå skygge af luftmyceliets farve.
På glucose-asparaginagar. Meget god vækst. Luftmycelium gråt til 30 ultramarin. Substratmycelium blåviolet til mørk blåt.
På glycerin-asparagin-agar. God vækst. Luftmycelium ultramarin. Substratmycelium mørkviolet til sort.
På tyrosinvækstmedium. God vækst. Luftmycelium blågråt, ultramarin. Substratmycelium rødbrunt.
35 På tyrosin-casein-nitratagar. Lav vækst. Luftmycelium hvidt. Sub stratmycelium cremefarvet.
På glucose-tyrosinagar. Middel vækst. Luftmycelium cremegråt. Substratmycelium violet.
5 151270 På saccharose-nitratagar. God vækst. Luftmycelium gråt til ultramarin. Substratmycelium blåt til mørkblåt.
På glycerol-calcium-malatagar. God vækst. Luftmycelium blåt til ultramarin.
5 På peptone-oksekødagar. Middelgod vækst. Luftmycelium gråt.
Substratmycelium farveløs med en grå skygge af luftmyceliets farve.
På havregrynagar. Middel vækst. Luftmycelium gråt. Substratmycelium vinrødt.
På tomatagar. God vækst. Luftmycelium gråt. Substratmycelium 10 mørk beige, terracottafarve.
På blyacetatagar. Lav vækst. Luftmycelium brunt. Substratmycelium farveløs med en skygge af luftmyceliets farve.
På jern-peptoneagar. God vækst. Luftmycelium gråt. Substratmycelium farveløs med en skygge af luftmyceliets farve.
15 På gær-maltagar. Middel vækst. Luftmycelium gråt, musegråt. Sub stratmycelium mørk cremefarvet.
Stammetolerance mod NaCI. Den viser lav tolerance mod koncentrationen af natriumchlorid i mediet. Maximal koncentration er 4 %. Ved denne koncentration er væksten af stammen lav. Luftmycelium er lysblå.
20 Substratmycelium er mørkblåt. En koncentration på over 2% NaCI har en negativ påvirkning på sporuleringsgraden.
Den koagulerer fedtfattig mælk. Den smelter ikke gelatine. Den vokser godt pi sucrosemedium, men den inverterer ikke sucrose. Den vokser godt på en amylumagar, og den hydrolyserer stivelse godt. Den 25 dekomponerer ikke cellulose og reducerer nitrater til nitritter. Den frigør hydrogensulfid. Den vokser på kartoffel. Hæmolyse - negativ. Tyrosinase - positiv, den danner melanoider.
Det er konstateret, at på Pridham og Gottliebs basale vækstmedium er væksten god i nærværelse af følgende carbonkilder: glucose, fruc-30 tose, lactose, levulose, xylose, mannose, cellulose, galactose, mannit, inosit, arabinose, dextrin, ribose og glycerol.
Stammen absorberer salicin i mindre skala.
Den vokser ikke på vækstmedium med sorbit, sucrose og raffinose.
Der kan iagttages nogle forskelle i pigmenteringen af luftmyceliet og 35 substratmyceliet afhængigt af carbonkiiden.
Stammens vækst er god på Pridham og Gottliebs modificerede basale vækstmedium med følgende nitrogenkilder: NH^CI, (NH^SO^; (NH^) 2HP04; (NH^HgPC^ og carbamid.
6 151270 Væksten er moderat på et vækstmedium med (NH^NOg og Na9HP0A. Stammen vokser slet ikke på vækstmedium med NaNO~ og NaN02.
Stammen vokser meget godt på vækstmedium med følgende 5 aminosyrer: glutaminsyre, asparaginsyre, alanin, valin, asparagin.
Væksten er moderat på et vækstmedium med leucin, cystin, prolin, hydroxyprolin, phenylalanin og tyrosin. Afhængig af nitrogen kilden iagttages nogle forskelle i pigmenteringen af luftmyceliet og substratmyceliet.
10 Ifølge nogle egenskaber ligner Streptomycesstammen N.765
Streptomyces coelicolor, der tilhører Grey-serierne ifølge Bergey's -1974 (Actinomyces coelicolor af Coelicolor-gruppen efter N.A.Krassilnikov -1970). Sidstnævnte skelnes fra førstnævnte ved nogle morfologiske, dyrkningsmæssige og fysiologisk-biokemiske egenskaber, der er 15 beskrevet i artens karakterisering i Bergey's (1974) og N.A.
Krassilnikov (1970). Streptomyces coelicolor har f.eks. fra 1 til 3 spiralsnoninger, den smelter gelatine langsomt og peptoniserer fedtfattig mælk. Dens tyrosinase er negativ. Derfor er Streptomyces-stammen N.765 ikke identisk med den lignende Streptomyces coelicolor 20 (Actinomyces coelicolor), og det er derfor den betegnes Streptomyces sp. N.765. Den tilhører Gray-serierne ifølge Bergey's (1974) og Coelicolor-gruppen efter N.A.Krassilnikov (1970).
Producentstammen kan dyrkes i 500 ml erlenmeyerflasker indeholdende 50 ml fermenteringsmedium i fra 36 til 96 timer ved en 25 temperatur på fra 24 til 36°C, en begyndelses pH-værdi på fra 6,5 til 9,0, på et rysteapparat med 180 til 320 omdrejninger pr. minut.
Isomeriseringen af glucose til fructose ved hjælp af glucoseisomera-se fra stammen Streptomyces sp. N.765 kan udføres ved en direkte behandling med frisk mycelium (adskilt ved centrifugering ved 12000 30 omdrejninger pr. minut og 3 gange vask med 0,05 M phosphatbuffer med pH. 7,0) eller med tørret mycelium (lufttørrede eller acetonetørrede celler), med enzymopløsning (opnået efter ultralydsdesintegration eller autolyse af cellemateriale og separation af supernatant ved centrifugering ved 15000 omdrejninger pr. minut) med medium efter centrifugering 35 indeholdende ekstracellulær isomerase eller med celler, der er gjort immobile på en hård bærer.
Den fructose, der dannes i reaktionsblandingen, bestemmes ifølge cystein-carbazol-metoden (4), og stammens aktivitet udtrykkes i mg fructose pr. ml kulturvæske eller i internationale glucoseisomerase- 7 151270 enheder (GIU). Én GlU-enhed er lig med den mængde enzym, der ved 70°C og pH 7,0, 1M glucose-opløsning i 0,05M phosphatbuffer og _2 2x10 M IVIgSO^ ♦ 7H20 på 1 minut omdanner 1 pmol glucose til 1 pmol fructose.
5 Fordelene ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er følgende:
Stammen Streptomyces sp. N765 frembringer enzymet glucoseisome-rase i fravær af cobaltioner i fermeteringsmediet. Det opnåede enzym omdanner D-glucose til D-fructose i fravær af cobaltioner i isomerise-ringsblandingen, hvilket i høj grad letter den teknologiske proces, og 10 det er ikke nødvendigt at anvende ionbytningssystemer til udskillelse af cobalt fra de fructoseholdige sirupper. Sammenlignet med de fra patentlitteraturen kendte stammer, som producerer glucoseisomerase, og som ikke kræver cobaltioner i dyrkningsmediet og i isomeriseringsblan-dinger(2a,b,c;9a,b), udmærker Streptomyces sp N.765 sig ved sin glu-15 coseisomeraseaktivitet, enzymets gunstige pH-optimum (7,0), høje temperaturoptimum (80°) og enzymets betragtelige termostabilitet mellem 40 og 70°C.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres yderligere ved følgende eksempel.
20
Eksempel
Streptomyces sp. N. 765 kan opretholdes på følgende medier.
1. Xylose-vækstmedium 25 xylose 20 g agar 20 g KN03 1,0 g K2HP04 0,5 g
MgS04-7H20 0,5 g 30 NaCI 0,5 g
CaC03 1/0 g
FeS04 0,001 g vand til 1 liter. 1 2. Kartoffel-glucoseagar kartoffelekstrakt fra 300 g kogte kartofler glucose 10 g agar 20 g vand til 1 liter.
8 151270
Det anbefales, at der til bibeholdelse af stammen skiftevis anvendes begge vækstmedier.
Til et velspiret materiale fra en 10-15 dage gammel kultur på vækstmedium 1 eller 2 (1 anbefales) tilsættes 6 ml inokuleringsvækst- 5 medium, der har følgende sammensætning: xylose 1% oksekødekstrakt 2%
MgS04-7H20 0,1% K2HP04 0,3% 10
Cellemassen udvaskes, og reagensglasset anbringes på et rysteapparat i 24 timer ved 30°C og 240 omdr./min. Fra den således adapterede kultur podes vækstmedium med følgende sammensætning: xylose 1% 15 majsekstrakt 3% (tørvægt)
Na-acetat 0,5%
Dyrkningen udføres i 500 ml Erlenmeyerflasker med fermenteringsmedium. Dyrkningen udføres i 60 timer ved 30°C på et rysteapparat ved 20 240 omdr./min. Begyndelses pH-værdien er 8,5.
Efter 60 timers dyrkning af Streptomyces sp N.765 opnås 160 til 240 g fugtig biomasse pr. 1 liter kulturvæske.
Isomerisering af glucose til fructose ved hjælp af glucoseisomerase fra stammen Streptomyces sp N.765 udføres ved en temperatur på 70°C, „2 25 pH 7,0 i nærværelse af MgS04*7H20 i en koncentration på 2 x 10 M og en substratkoncentration på 1 M.
Aktiviteten af stammen Streptomyces sp N.765 er 75-130 mg fructose pr. 1 ml kulturvæske eller 7.000 - 12.000 GIU pr. 1 liter kulturvæske.
9 151270
REFERENCER
1. Cotter W.P.,Lloyd N.E., Hinman C.W. 1971. Patent USA 3.623.953.
2. a) CPC International Inc. 1975. Britisk patent 1.411.763.
b) CPC International Inc. 1975. Britisk patent 1.411.764.
5 c) CPC International Inc. 1975. Britisk patent 1.411.765.
3. Danno G. Agr.Biol.Chem. 1971, 35, 7, 997 4. Dische, Z., Borenfreud E., 1951, J.Biol.Chem., 192, 583.
5. Jacobziner H.,Raybin H.W. 1961. Arch.Pediat. 78,200 6. Levy H., Levinson V., Shade A. 1950 Arch.Biochem., 27,34 10 7. Marschall R.O., Kooi E.R. 1957. Science, 125,N.3249,648 8. Mi-Car Internatioal Inc. Isomerized Syrup process. 1975 MFG Information.
9, a) R.J.Reynolds Tobacco Co. 1973 Britisk patent 1.328.970 b) R.J.Reynolds Tobacco Co. 1974. Britisk patent 1.362.365 15 10. Sergio S., Kåre L., 1975. Appl.Microbiol.29,6,745 11. Somers E.,1974. J.Food Sci. 39,215 12. Schraeder H.A., Nason A.P.,Tipton,I.H. 1967. J.Chronic.Des. 20,869 13. Stradberg G.W.,Smiley K.L.1971 .Appl.Microbiol.,21,588 20 14. Takasaki Y. Agr.Biol.Chem. 1966, 30,12,1247 15. Takasaki Y.,Kosegu Y. ,Kanbayashi A. 1969. Agr.Biol.Chem. 31,11,1527.
16. Takasaki Y.,Kosogu Y. 1969.Academic Press Inc. N.Y. s.561 17. Tsumura N.,Hagi N.,Sato T.1967.Agr.Biol.Chem.,31,902 25 18. Yamanaka K. 1961. Agr.Biol.Chem.,25,4,272.

Claims (2)

151270 Patentkrav.
1. Fremgangsmåde til fremstilling af glucoseisomerase, ved dyrkning af en stamme af slægten Streptomyces i 36-72 timer ved en 5 temperatur på 24-36°C i et næringsmedium med en begynde!-ses-pH-værdi mellem 6,5 og 9,0, og indeholdende xylose, kendetegnet ved, at der som mikroorganisme anvendes stammen Streptomyces sp. 765 deponeret ved The State Institute for Drugs Control under nummeret 143.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det anvendte næringsmedium har følgende sammensætning: xylose 1,0-2,0 vægtprocent baseret på vægten af nærings medium majsekstrakt 1,5-4,0 vægtprocent baseret på vægten af nærings-15 medium Na-acetat 0,25-1,0 vægtprocent baseret på vægten af næringsmedium
DK503480A 1979-11-29 1980-11-26 Fremgangsmaade til fremstilling af glucoseisomerase. DK151270C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG7945720A BG32192A1 (en) 1979-11-29 1979-11-29 Method for obtaining of glucoseisomerase
BG4572079 1979-11-29

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK503480A DK503480A (da) 1981-05-30
DK151270B true DK151270B (da) 1987-11-16
DK151270C DK151270C (da) 1988-05-16

Family

ID=3906780

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK503480A DK151270C (da) 1979-11-29 1980-11-26 Fremgangsmaade til fremstilling af glucoseisomerase.

Country Status (15)

Country Link
JP (1) JPS56131383A (da)
AT (1) AT378204B (da)
BE (1) BE886407A (da)
BG (1) BG32192A1 (da)
CA (1) CA1171010A (da)
CH (1) CH648592A5 (da)
DD (2) DD161153A3 (da)
DE (1) DE3044357A1 (da)
DK (1) DK151270C (da)
ES (1) ES8406088A1 (da)
FR (1) FR2473549B1 (da)
GB (1) GB2063884B (da)
IT (1) IT1145317B (da)
NL (1) NL8006509A (da)
YU (1) YU297780A (da)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3224024C2 (de) * 1982-06-28 1986-09-11 Uop Inc., Des Plaines, Ill. Verfahren zur Immobilisierung von Glucoseisomerase und immobilisiertes Glucoseisomerase-System

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1103394A (en) * 1965-05-11 1968-02-14 Agency Ind Science Techn A method of manufacturing syrup containing fructose from glucose by the use of an enzymatic process
IL38715A (en) * 1971-04-22 1974-11-29 Miles Lab Production of glucose isomerase
BE788843A (fr) * 1971-09-17 1973-03-15 Cpc International Inc Production de preparations enzymatiques d'isomerase de xylose (dextrose)
US3957587A (en) * 1973-11-21 1976-05-18 Cpc International Inc. Production of xylose (dextrose) isomerase enzyme preparations

Also Published As

Publication number Publication date
BE886407A (fr) 1981-03-16
ATA573680A (de) 1984-11-15
GB2063884B (en) 1983-04-20
DD161124A3 (de) 1985-01-09
DD161153A3 (de) 1985-02-27
IT1145317B (it) 1986-11-05
IT8050273A0 (it) 1980-11-28
CA1171010A (en) 1984-07-17
DK151270C (da) 1988-05-16
CH648592A5 (de) 1985-03-29
ES497272A0 (es) 1984-07-01
FR2473549B1 (fr) 1985-07-05
BG32192A1 (en) 1982-06-15
JPS56131383A (en) 1981-10-14
YU297780A (en) 1983-02-28
FR2473549A1 (fr) 1981-07-17
GB2063884A (en) 1981-06-10
DE3044357A1 (de) 1981-07-02
DK503480A (da) 1981-05-30
NL8006509A (nl) 1981-07-01
AT378204B (de) 1985-07-10
ES8406088A1 (es) 1984-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
USRE32153E (en) Highly thermostable glucoamylaseand process for its production
Hayashida Selective submerged productions of three types of glucoamylases by a black-koji mold
US4284722A (en) Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same
Abedin et al. Optimization and statistical evaluation of medium components affecting dextran and dextransucrase production by Lactobacillus acidophilus ST76480. 01
US4657865A (en) Pullulanase-like enzyme, method for preparation thereof, and method for saccharification of starch therewith
US4102743A (en) Process for the removal of sucrose from a sugar mixture
DK151270B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af glucoseisomerase.
Achi et al. Production of a raw starch saccharifying amylase by Bacillus alvei grown on different agricultural substrates
CA1081633A (en) Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same
US5387516A (en) Heat stable debranching enzyme from a Bacillus microorganism
EP0871719A1 (en) Psychrophilic protease and psychrophilic bacteria
JP3761236B2 (ja) 新規なβ−グルコシダーゼ、その製造法および用途
JPH03160995A (ja) トレハルロースの製造法
US4348481A (en) Method of obtaining glucose isomerase
KR830002800B1 (ko) 열에 안정한 글루코아밀라제의 제법
AU595144B2 (en) Process for producing glucose isomerase
USRE28885E (en) Method for isomerizing glucose syrups
US3813320A (en) Methods of making glucose isomerase and of converting glucose to fructose
US3265586A (en) Starch saccharifcation process
HU190348B (en) Process for preparing glucose-isomerase
US4317883A (en) Method for obtaining of glucose isomerase
KR960007741B1 (ko) 신규 α-1, 6-글루코시다제 및 그의 제조방법
KR810001443B1 (ko) 시렆의 제조방법
JPH0466084A (ja) 酸性アミラーゼ及びその製造法
JPH04211369A (ja) 好塩性アルカリアミラーゼおよびその製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed