DK150518B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af adriamycinderivater - Google Patents

Description

150518 5 Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte antitumorgly-cosider, der tilhører anthracyclinrækken. De omhandlede glycosider, der har den i kravets indledning angivne almene formel, er nærmere betegnet sådanne adriamy-10 cinderivater, hvori en 3-amino-2,3,6-trideoxy-4- 0- methyl-L-hexopyrånose er bundet glycosidisk til adriamycin med formlen: ! f 9 c-ch2oh

15 f jr JC JC X0E

DCH- 0 OH i * OH

De to i kravets kendetegnende del med formlen angivne 20 forbindelser - d.v.s. forbindelserne V og VII - får man ved kondensation af daunomycinon med beskyttede 1- halogenderivater af aminodeoxysukkere, nemlig 2,3,6-trideoxy-3-trifluoracetamido-4-0-methyl-L-lyxo-hexo-pyranosylchlorid II-E og 2,3,6-trideoxy-3-trifluor- 25 acetamido-4-0-methyl-Cfc-L-arabinohexopyranosylchlorid III_E ^ Cl Cl

H3C/^0-7 HjC^oJ

H3C0 pr -5 HH

oo éo 30 · 1 cf3 cf3 (ii-e) (III-E) hvorved man opnår de beskyttede glycosider IV, henholdsvis VI: 150518 2

*'0H

5 OCH, 0 OH ; * 0 vpZJ f 10 H3c P”’ if. 1-.-0-0¾

V i R* - H

O OH jj

00¾ 0 OH I

0 20 H^CT^-O -y VI 1 E* - -C-CF,

H,COs^jTW

3 11511 VII lE'. H

hvoraf man ved fjernelse af beskyttelsesgruppen opnår forbindelserne V og VII.

25

Fremgangsmåden . ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at forbindelserne V henholdsvis VII omdannes til 14-bromderi-vatet, som ved hydrolyse giver forbindelserne VIII, henholdsvis IX.

30

Kondensationsreaktionen mellem daunomycinon og de beskyttede halogensukkere II-E og III-E, hvorunder glycosidbindingen dannes, gennemføres i et egnet organisk opløsningsmiddel, såsom chloroform eller 150518 3 1 methylenchlorid, under tilstedeværelse af et opløseligt sølvsalt som katalysator, såsom sølvtrifluormet-hansulfonat (AgS03CF3), og molekylærsigte som dehydra-tiseringsmiddel, svarende til den i GB-patentskrift 5 nr. 1.500.200 beskrevne fremgangsmåde.

Forbindelserne methyl-2,3,6-trideoxy-3-trifluoracet- amido-oC-L-lyxo-hexopyranosid II-A og methyl-2,3,6- trideoxy-3-tri-fluoracetamido-a£-L-arabino-hexopyrano-10 sid III-A er beskrevet i GB-patentskrift nr.

i·457·559· 0ch3 OCH

VT'·'0'/ h3°T^o-7 3 t^-SS-CT, S0 HE-CO-CF, RO i 3

15 ΙΙ-Α» E « Η ΙΙΙ-Α» H - H

Il-Βι R - CH3 III-Bi H . CH3 s3oo ra-oo-OPj 3 mi-cSlcr3

110 IIIO

h3c -y11»0B h3c o^» or 25 Li----J H,C0^W

H3C0 nh-C0~CF3 * NH-C0-CF3

II-D III-D

o hvori R « -C NOg *

Behandlingen af forbindelserne II-A henholdsvis ΙΙΙ-Α med diazomethanbortrifluoridetherat i methylendi- 4 150518 1 chlorid (som beskrevet af J.O. Deferrari et al. i

Methods in Carbohydrate Chemistry, bd. VI, p. 365, 1972, Academic Press, New York and London) giver de tilsvarende, hidtil ikke kendte 4-0-methylderivater 5 II-B henholdsvis III-B i godt udbytte. Ved syrehydrolyse opnås de tilsvarende forbindelser II-C henholdsvis III-C, som indeholder den frie OH-gruppe i stilling 1, hvilke forbindelser omsættes med p-nitroben-zoylchlorid i pyridin; derved opnås de tilsvarende 10 1-0-p-nitrobenzoylderivater II-D henholdsvis III- D, som ved behandling med tørt hydrogenchlorid i vandfrit methylenchlorid giver de tilsvarende 1-chlor-derivater II-E henholdsvis III-E.

15 Fremstillingen af forbindelserne V, henholdsvis VII

indledes med kobling af daunomycinon αΛαλ^ 1 I I "0Ϊ 20

OCHj 0 OH

som repræsentant for reaktanterne af anthracyclinotype 25 med 2,3,6-trideoxy-4-0-methyl-3-trifluoracetamido- L-lyxo-hexopyranosylchlorid II-E henholdsvis 2,3,6-trideoxy-4-0-methyl-3-trifluoracetamido-e6-L-arabino-hexopyranosylchlprid III-E som halogensukkerreagenser. Koblingsreaktionen giver de beskyttede glycosider 30 IV, henholdsvis VI, hvoraf man derpå ved mild alkalisk behandling til fjernelse af N-trifluoracetylgruppen opnår 4'-O-methyldaunomycin V, henholdsvis 4'-epi-4'-O-methyldaunomyoin VII, der isoleres som hydrochlo-rider. Herefter omdannes forbindelserne V, henholdsvis 5 150513 1 VII ad den ovenfor angivne vej til 4'-O-methyladriamy-cin VIII, henholdsvis 4'-epi-4'-O-methyladriamycin IX under anvendelse af den i US patentskrift nr.

3.803.124 beskrevne fremgangsmåde i en i et vist 5 omfang modificeret udgave, hvilken modificerede fremgangsmåde er anført i eksempel 1.

' I I jH

IV * R- H* R‘ - C0CP3

V |S.R<>R

VIII i R - OH, R' * II

H3C0 NHB’

20 OH

COCH2R

^ I I j %<* 25 4ot3 6 X Η><Ό VI« R- H’R* * C0CP3

VIII R - R* - H

IX * R - OH, R' - H

?3C7^0-7 30 ».CO 4^T^J

30 J NHR'

De nye forbindelser VIII og IX viser antimitotisk virkning og er værdifulde terapeutiske midler til behandling af forsøgstumorer hos dyr.

6 150518 1 Forbindelserne er prøvet på BDFi-mus (C57BL/6xDBA)i, hvori der i.p. var injiceret 105 celler/mus af L1210 ascitisk leukæmi. Behandlingen gennemførtes i.p. på 1. dag efter tumorinoculationen; stofferne opløstes 5 i destilleret vand som hydrochlorider.

Adriamycinderivaterne prøvedes mod LI210-leukæmi og ikke mod P388, fordi P388-leukæmi er for følsom for adriamycin og det derfor er meget vanskeligt 10 at vurdere de nye derivaters overlegenhed.

De i tabel 1 viste data viser, at 4'-O-methyladriamy-cin i to særskilte forsøg var mere aktivt end adriamycin: i en dosis på 4,4 og 6,6 mg/kg forårsagede dette 15 nye derivat en levetidsforøgelse på 130 til 212%, mens adriamycin i den optimale (ikke toksiske) dosis på 6,6 mg/kg forårsagede en levetidsforøgelse på 75%.

20 Denne højere aktivitet af 4'-0-methyladriamycin, i sammenligning med adriamycin, mod L1210-leukæmi er særdeles relevant. 41-epi-4'-O-methyladriamycin viste en antitumoraktivitet af samme størrelsesorden som adriamycin og en reduceret toksicitet.

25 Således viser de her opførte data, at substitution af hydroxygruppen: i aminosukkerens 4-stilling med en methoxygruppe frembringer en voldsom forøgelse af antitumoraktiviteteny epimerisering af 4'-substi-30 tuenten forårsager en formindskelse af den generelle toksicitet, som vist hos mus med tumorer.

150518 7 1 TABEL X - Aktivitet mod L1210-leukemi

Forbindelse Dosis *> τ/C % i Antal toks- 5 (mg/kg) 1.forsøg 2.forsøg siske døds- fald/total

Adriamycin 4,4 169 10 6,6 175 175 10,0 187 187 3/20 4'-O-methyladri- 4,4 2B7 312 amycin.HCl 6,6 231 275 1/20 15 (VIII) 10,0 75 62 17/18 41-epi-4'-O-me- 6,6. 169 thyladriamycin 10,0 187 .HC1 (IX) 15,0 181 2/10 20 22,5 87 9/10 *) .

'Middeloverlevelsestid for behandlede dyr divideret med middeloverlevelsestid for kontroldyr, x 100.

25 EKSEMPEL 1: 4'-O-methyladriamycin VIII (IMI 80).

En opløsning af forbindelsen V i en blanding af methanol og dioxan behandledes med brom, hvorved det tilsvarende 14-bromderivat opnåedes. Ved efterfølgende 30 behandling med en vandig natriumformi atopløsning ved stuetemperatur i 4 dage opnåedes 4'-O-methyladriamycin VIII, der isoleredes som hydrochlorid, smp. 177°C (dekomp.),[t<] 33 = +259° (c = 0,046 i CH30H).

EKSEMPEL 2: 4'-epi-4'-O-methyladriamycin IX (IMI

150518 δ 1 79).

Hydroxyleringen af forbindelsen VII via 14-bromderiva-tet opnåedes under anvendelse af den i eksempel 1 5 beskrevne fremgangsmåde. Ved denne fremgangsmåde opnåedes 4'-epi-4'-O-methyladriamycin IX som hydro-chlorid i form af orangerøde krystaller, smp. 170°C (dekomp.),[°G 33 = 0252° (c = 0,052 i CH3OH).