DK143603B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af aminoalkylestere af penicilliner - Google Patents

Description

(19) DANMARK )

i§ (12) FREMLÆGGELSESSKRIFT HD 143603 B

DIREKTORATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. 2873/73 (51) |nt.CI.3 C 07 D 499/44 (22) Indleveringsdag 24. maj 1973 (24) Løbedag 24. maj 1973 (41) Aim. tilgængelig 26. nov. 1973 (44) Fremlagt 14. s ep. 1981 (86) International ansøgning nr. -(86) International indleveringsdag -(85) Videreførelsesdag -(62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 25· maj 1972, 24668/72, GE 3· dec. 1972, 56003/72, GB

(71) Ansøger BEECHAM GROUP LIMITED, Brentford, GB.

(72) Opfinder John Peter Clayton, GB: Kenneth David Hardy, GB:

Angela Wendy Capel Guest, GB.

(74) Fuldmægtig Plougmann & Vlngtoft Patent bureau.

(54) Analogifremgangsmåde til frem= stilling af aminoalkylestere af penicilliner.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af aminoalkylestere af penicilliner.

HQ Penicilliner og cephalosporiner er antibakterielle midler med y3 udbredt anvendelse, og de administreres ofte oralt, såfremt absorp- ^ tionen i blodstrømmen er tilstrækkelig god. Der er nu fundet en ro gruppe aminoalkylestere af penicilliner, af hvilke mange absor- beres meget bedre end de til grund liggende forbindelser.

*

Q

2 143603

Der er tale om forbindelser med den almene formel II

.S CEU

\ 3 R— CH-CH C --CHj

i-i-OH-C^° /C0-Y

of "-o^ch2-h^ h

Z

hvor Y betegner g-alkyl, phenyl, benzyl, C-^ g-alkoxy eller benzyloxy, Z betegner hydrogen eller g-alkyl, C^- eller Cg--cycloalkyl, phenyl eller benzyl, eller Y + Z sammen med den gruppe -N-CO-, til hvilken de er knyttede, udgør en lactam- eller oxalac-tamring, og R betegner phenylacetamido, α-amino-phenylacetamido, 2- eller 3-thienylacetamido eller phenoxyacetamido.

Eksempler på C1 g-alkylgrupper og C-^ g-alkoxygrupper som gruppen Y i den ovenfor angivne formel II kan f.eks. være methyl, ethyl, n-eller isopropyl, n-, sek.-, iso- eller tert.butyl, methoxy, ethoxy, n- eller isopropoxy, n- eller isobutoxy, sek.butoxy eller tert.butoxy. Gruppen Y er fortrinsvis en C^g-alkoxy- eller benzyloxygruppe.

Gruppen Z i den almene formel II kan f.eks. være C-^ g-alkyl eller cyclopentyl eller cyclohexyl.

Grupperne Y + Z i den almene formel II kan sammen med den gruppe -N-CO-, til hvilken de er knyttede, også danne en lactam- eller oxalactamring. Et foretrukket eksempel på en sådan ring er 3-benz-oxazolidinonringen med formlen V

-N-

I V

ΑοΛ/ o

Dansk fremlæggelses skrift nr. 132.759 angår estere af oc-aminopeni-cilliner, hvor estergruppen er en alkanoyloxyalkyl- eller alkoxycar- 3 143603 bonyloxyalkylgruppe. I nedenstående tabel III er det vist, at en typisk repræsentant for de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede aminoalkylestere af penicilliner efter oral administration giver væsentlig højere blodniveauer end den samme tilgrundliggende penicillin esterificeret med estergrupper af den art, der er omhandlet i fremlæggelsesskriftet.

I britisk patentskrift nr. 675.422 beskrives penicillinestere, der er nært beslægtede med de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede penicillinestere. De estere, der er beskrevet i det britiske patentskrift, er imidlertid beregnet til administration ved injektion, og alle de biologiske data, der fremgår af patentskriftet, er opnået efter administration ved injektion. Fordelen ved de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen omhandlede forbindelser er, at de giver høje blodniveauer efter oral administration.

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med den ovenfor angivne almene formel II eller syreadditionssalte deraf, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at

a) en forbindelse med den almene formel VI

, S CH, / 3

R-CH-dH C

I I rcH^o .

C--N-CH—

0S "-0H

eller et reaktivt esterificeringsdérivat deraf, i hvilken formel R har de i forbindelse med den almene formel II anførte betydninger, omsættes med en forbindelse med den almene formel VII

^co-r

H0 - CH? - N VII

\ z eller et reaktivt esterificeringsderivat deraf, i hvilken formel Y og Z har de i forbindelse med den almene formel II anførte betydninger , eller 4 143603

b) en forbindelse med den almene formel X

XCH3

H2N CH—CH · C^CH X

il I 5

I 1 1 n COY

C-N-C\r^U s1

0 ^ u^0CHPN

Z

eller et silylderivat deraf, i hvilken almene formel Y og Z har de i forbindelse med den almene formel II angivne betydninger, omsættes med et reaktivt N-acyleringsderivat af en forbindelse med den almene formel XI

R2-OH XI

2 hvor R betegner phenylacetyl, 2- eller 3-thienylacetyl, phenoxy-acetyl, eller α-aminophenylacetyl, hvis aminogruppe er beskyttet, og den eventuelt tilstedeværende silylgruppe fjernes ved hydrolyse eller alkoholyse, og den eventuelt tilstedeværende beskyttede aminogruppe omdannes til en fri aminogruppe under sure eller neutrale betingelser.

Det i sammenhæng med forbindelserne VI og Vil ovenfor anvendte udtryk "reaktivt esterificeringsderivat" skal angive sådanne derivater af forbindelserne VI og VII, som ved omsætning med hinanden tager del i en kondensationsreaktion, som fører til dannelsen af en esterbinding i forbindelsen med den almene formel II.

Eksempler på reaktive esterificeringsderivater af forbindelsen VI er salte, især natrium-, kalium- og triethylammoniumsalte, syrehalo-genider, især syrechlorider, syreanhydrider eller blandede anhydri-der, f.eks. med en lavere alkylester af carbonsyre, eller det reaktive mellemprodukt, som dannes med et earbodiimid eller en carbo-nyldiimidazol.

Som eksempler på reaktive esterificeringsderivater af forbindelsen VII kan nævnes alkylsulfonyl- eller arylsulfonylestere og halogeni-der med den almene formel VII A

^00- Y

W-CH2-n VII A

\ . 143603

O

hvor W betegner et halogenatom, og Y og Z har den i forbindelse med den almene formel II angivne betydning. Foretrukne halogenider er bromidet, chloridet og iodidet.

Det vil sædvanligvis være hensigtsmæssigt at omsætte natrium-, kalium- eller triethylammoniumsaltet af en forbindelse med den almene formel VI med et halogenid med den almene formel VII A i et opløsningsmiddel, f.eks. dimethylformamid eller acetone.

Mr den frie syre med den almene formel VI eller et salt deraf omsættes med hydroxylforbindelsen med den almene formel VII, forløber reaktionen sædvanligvis langsomt og uhensigtsmæssigt. Det foretrækkes i sådanne tilfælde, at hydroxygruppen er omdannet til en alkyl-sulfonyl- eller arylsulfonylester. I sådanne tilfælde er tilstedeværelsen af en base sædvanligvis nødvendig til opnåelse af høje udbytter.

Et andet reaktivt esterificeringsderivat af forbindelsen VI er et syrehalogenid, især et syrechlorid. Denne forbindelse kan omsættes med hydroxyforbindelsen VII i nærværelse af et syrebindende middel til dannelse af de her omhandlede estere.

Når gruppen R i forbindelsen VI eller dens reaktive esterificeringsderivat indeholder en fri aminogruppe, bør denne beskyttes før esterificeringsreaktionen.

Eksempler på beskyttede aminogrupper er den protonerede aminogruppe (NH.j+) , som efter esterificeringsreaktionen kan omdannes til en fri aminogruppe ved simpel neutralisation, benzyloxycarbonylamino-gruppen eller en substitueret benzyloxycarbonylaminogruppe, scan efter reaktionen kan omdannes til NH2 ved katalytisk hydrogenering, og forskellige grupper, som efter esterificeringsreaktionen gendannes til aminogruppen ved mild hydrolyse. (Alkalisk hydrolyse er almindeligvis ikke anvendelig, da der under alkaliske betingelser kan ske hydrolyse af estergruppen.)

Eksempler på grupper, som efter hovedreaktionen kan omdannes til NH2 ved mild sur hydrolyse, er enamingrupper med den almene for- 143603 y* υ mel VIII eller tautomere modifikationer deraf samt a-hydroxyaryli-dengrupper med den almene formel IX eller tautomere modifikationer deraf: o . Λ /'\ 5 i I Cl!

R - C. H C. H

V

VIII IX

I formlerne VIII og IX betegner de stiplede linjer hydrogenbin- 3 4 dinger. I formlen VIII er R en lavere alkylgruppe, R er et hy- 3 drogenatom eller danner sammen med R en carbocyclisk ring, og 5 R er lavere alkyl, aryl eller lavere alkoxy. I formlen IX er B resten af en substitueret eller usubstitueret benzen- eller naphthalenring.

Et eksempel på en beskyttet aminogruppe, som kan omdannes til NH2 efter esterificeringsreaktionen, er azidogruppen. I dette tilfælde kan den afsluttende omdannelse til NH2 opnås ved enten katalytisk hydrogenering eller elektrolytisk reduktion.

Udtrykket "silylderivat" af forbindelsen X skal her betegne et reaktionsprodukt mellem forbindelsen X og et silyleringsmiddel, f.eks. en halogentrialkylsilan, en dihalogendialkylsilan, en halo-gentrialkoxysilan, en dihalogendialkoxysilan eller en tilsvarende aryl- eller aralkylsilan eller sådanne forbindelser som hexamethyldi-silazan. Almindeligvis foretrækkes halogentrialkylsilaner, især trimethylchlorsilan. De silylerede derivater af esteren X er yderst følsomme over for fugtighed og hydroxyliske forbindelser, og efter omsætningen med det reaktive derivat af forbindelsen med den almene formel XI kan silylgruppen i det acylerede mellemprodukt fjernes ved hydrolyse eller alkoholyse.

Et hensigtsmæssigt relativt N-acyleringsderivat af syren XI er et syrehalogenid, som kan fremstilles ved behandling af syren XI med thionylchlorid eller phosphorpentachlorid. Alternativt er det ofte 143603 7 hensigtsmæssigt at anvende et blandet anhydrid. Blandede anhydrider, som er særlig velegnede til dette formål, er alkoxymyresyreanhydrider, som hensigtsmæssigt fremstilles ved behandling af et alkalimetal eller tert.aminsalt af syren XI med den relevante chlormyre-syrealkylester i vandfrit medium ved eller under stuetemperatur.

Andre reaktive N-acyleringsderivater af syren XI er f.eks. det reaktive mellemprodukt, som dannes ved reaktionen in situ med et carbodiimid eller carbonyldiimidazol.

De ved den ovennævnte fremgangsmåde anvendte eetere X er også hidtil ukendte forbindelser. De kan fremstilles ved den her først beskrevne fremgangsmåde, hvor R i den almene formel II er en amino-gruppe.

Specielt kan forbindelser med den almene formel X fremstilles, omend i dårligt udbytte, ved direkte kobling af 6-aminopenicillansyre eller med en forbindelse med den almene formel VII A i nærværelse af en base. Ved denne fremgangsmåde sker der en vis epimerisering ved Cg, og processen er derfor ikke fuldstændig tilfredsstillende. Meget bedre udbytter af forbindelserne X kan opnås ved kobling af et N-beskyttet derivat af 6-aminopenicillansyre (f.eks. triphe-nylmethylderivatet) med en forbindelse med den almene formel VII A og efterfølgende fjernelse af beskyttelsesgruppen, f.eks. ved mild sur hydrolyse i tilfælde af triphenylmethylderivatet.

Andre typer N-beskyttede 6-aminopenicillansyrer er 6-acylaminopeni-eillansyrer. Metoder til fjernelse af 6-acylsidekæden fra f.eks. benzylpenicillin og phenoxymethylpenicillin er velkendte, jfr. f.eks. britisk patentbeskrivelse nr. 1.189.022, og omfatter sædvanligvis behandlingen af en ester af 6-acylaminopenicillansyre med PCl^ til dannelse af en iminochloridbinding på 6-amidonitrogenatomet og efterfølgende behandling af iminochloridet med en alkohol til dannelse af en iminoether, hvorefter aminobindingen hydrolyseres til dannelse af 6-aminopenicillansyreesteren. I det foreliggende tilfælde er det muligt at gå ud fra en ester af penicillin G· eller penicillin V (f.eks. fremstillet ved omsætning af natrium- eller kaliumsaltet af penicillinen med en forbindelse med den almene formel VII A) og fraspalte acylsidekæden til dannelse af den tilsvarende ester af 6-aminopenicillansyre.

143603 Λ Ο

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved følgende eksempler:

Eksempel 1.

(E-Ethoxycarbonyl-ir-methyl)aminomethylester af penicillin G.

3,72 g (0,01 mol) penicillin G-kaliumsalt suspenderet i 50 ml dime tbylf ormamid behandles med 1,52 g (0,01 mol) U-chlormethyl-ΪΓ--methylurethan, og blandingen omrøres i 2 timer ved stuetemperatur. Opløsningen hældes ud i 150 ml isvand, hvorved der dannes en tyk olie, hvorfra den overstående væske dekanteres. Den som remanens tilbageblivende olie opløses i 100 ml ethylacetat og vaskes med en vandig opløsning af 10 ml lN-natriumbicarbonat og derefter med 20 ml vand.

Den organiske fase tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes under reduceret temperatur og tryk. Den som remanens vundne olie krystalliserer, hvorved der fås 1,4-6 g (32,4$ af det teoretiske) produkt i form af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 78 - 82°C.

Analyse:

Beregnet for G2J^ZriS306S: C 56,10 H 6,05 IT 9,34 S 7,14

Fundet: C 55,95 H 6,09 E 9,18 S 7,02.

ITMR-spektrum (CD^SO / = 1,19 (3H t. CH^CHgO-), 1,52 (6H.d. gem.

dimethyler), 2,96 (3H.s. CH^-IT^), 3,56“T2H.s. PhCE^CO-), 4,10 (2H. q. CH^CHqO-), 4,37 (IH.s. C^-proton), 5,47 4H.m. (β-lactamproto-ner”+“-0CH2]J=), 7,29 (5H. s. aromatisk), 8,8 (IHju. -C0NH-) ppm.

Eksempel 2.

E-Benzoylaminomethylester af penicillin G.

11,1 g (0,03 mol) kalium-penicillin G i 20 ml vandfrit dimethyl-formamid behandles med 5,10 g (0,03 mol) N-chlormethyl-h-methyl-benzamid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter den hældes ud på 250 ml isvand og ekstraheres tre gange med 9 143903 hver gang 100 ml ethylacetat. De samlede ekstrakter vaskes med 60 ml 0,5N natriumbicarbonatopløsning og 100 ml mættet saltvand, hvorefter de tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Den filtrerede opløsning inddampes til et lille rumfang, og der isoleres 10,00 g (71,4$ af det teoretiske) hvidt krystallinsk fast stof med smeltepunkt 124 - 127°C. Ved omkrystallisation af ethylacetat og ether smelter stoffet ved 128 - 130°C.

Analyse:

Beregnet for ^24^25^3^^5 ^ ^1,65 H 5,39 N 8,99 S 6,86 Pundet: C 61,71 H 5,59 N 9,06 S 6,90.

NMR-spektrum (CDCl^) £ =8,2 - 7,2 - (lOH.m. aromatiske protoner).

5,8 - 5,4 (4H.m. β-lactam- og ester-methylenprotoner), 4,36 (IH.s. Cj-proton), 3,59 (2H.s. PhCHp CO-), 1,42 (6H.s. gem.dimethylprotoner) ppm.

Eksempel 3.

N-Benzoylaminomethylester af penicillin G.

3,78 g (0,01 mol) penicillin G-kaliumsalt i 30 ml tørt acetone afkøles til -10°C og behandles med 0,96 ml chlormyresyreethylester og 1 dråbe pyridin. Blandingen omrøres ved -10°C i 1/2 time og behandles derefter med en opløsning af 1,51 g (0,01 mol) N-hydroxy-methylbenzamid i 20 ml tørt acetone. Reaktionsblandingen omrøres i 1 time ved stuetemperatur. Blandingen filtreres, og det klare filtrat inddampes. Remanensen opløses i ethylacetat, vaskes med 10 ml IN natriumbicarbonatopløsning efterfulgt af 2 ganges vask med hver gang 10 ml vand, tørres og inddampes. Remanensen fortyndes med det dobbelte volumen ethylacetat efterfulgt af tørt ether, indtil opløsningen bliver uklar, hvorefter den lades henstå til krystallisation. Produktet isoleres i form af 1,91 g (41,5$ af det teoretiske) farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 127 - 128°C (sønderdeling).

IR- og NMR-spektre er identiske med værdierne for produktet fremstillet ifølge eksempel 2.

10 143603

Eksempel 4.

3-Benzoxazolidinon-methylester af penicillin G.

3,73 g (0,01 mol) kalium-penicillin G i 30 ml tørt acetone, afkølet til -10°C, behandles med 0,96 ml chlormyresyreethylester og 2 dråber pyridin, og blandingen omrøres 1/2 time ved -10°C. Der tilsættes en opløsning af 1,65 g (0,01 mol) 3-hydroxymethyl-benz-oxazolidinon i 20 ml tørt acetone, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 1,05 timer. Blandingen filtreres gennem Celite, og filtratet inddampes. Remanensen opløses i 50 ml ethylacetat, vaskes med 10 ml ITT natriumbicarbonatopløsning og derefter to gange med hver gang 20 ml vand, tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes i vakuum. Den olieagtige remanens opløses i benzen, fortyndes med tørt ether og henstilles til krystallisation. Der fås 1,34 g (26,7$ af det teoretiske) produkt i form af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 157 - 159°0.

Analyse:

Beregnet for C^H^OgE^S: 0 59,87 H 4,81 ff 8,73 S 6,65 Fundet: 0 60,22 H 5,06 IT 8,72 S 6,31.

ffMR-spektrum (CD^) SO: = 1,36 og 1,59 (6H.d. gem.dimethyler), 3,58 (2H.s. PhCHp-) 4,48 (iH.s. C^-proton) 5,54 (2H.m. β-lactampro-toner) 6,02 (2H.s. OCHpff) 7,28 (9H.m. aromatiske protoner) ppm.

Eksempel 5.

3-Benzoxazolidinon-methylester af penicillin G.

1,86 g (0,005 mol) kalium-penicillin G i 10 ml dimethylformamid afkøles til 0°C og behandles med en opløsning af 0,91 g (0,005 mol) 3-chlormethyl-benzoxazolidinon i dimethylformamid, hvorefter blandingen omrøres i 1 time ved stuetemperatur. Blandingen hældes ud i 100 ml isvand, og det udfældede faste stof frafiltreres, vaskes med vand og tørres. Det faste stof omkrystalliseres af benzen/ether, hvorved der fås 1,8 g (74,9$ af det teoretiske) af den ønskede ester i form af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 166 - 168°0. Dette materiale er ifølge ffMR-spektrum identisk med det, som fremstilles ifølge eksempel 4.

143603 11

Eksempel 6.

(N-Acetyl-N-methyl)aminomethylester af penicillin G.

7,46 g (0,02 mol) penicillin G-kaliumsalt suspenderet i 30 ml dime thylf ormamid afkøles til 0°C og behandles med 2,64 g (0,02 mol) N-chlormethyl-N-methylacetamid i 10 ml dime thylf ormamid. Blandingen omrøres ved 0°C i 1,05 time og hældes ud på 300 ml isvand.

Den udfældede olie opløses i 100 ml ethylacetat, vaskes med 20 ml IN natriumbiearbonatopløsning efterfulgt af 10 ml vand, tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes til et lille rumfang. Remanensen fortyndes med tørt ether og henstilles til krystallisation. Produktet filtreres, vaskes med tørt ether og tørres i vakuum, hvorved der fås 4,77 g (56,9$ af det teoretiske) af den ønskede ester i form af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 92°C (sønderdeling).

Analyse:

Beregnet for C20H25N305S: 0 57,26 H 6,01 N 10,02 S 7,64 Pundet: C 57,25 H 5,96 N 9,88 S 7,66 NMR-spektrum (CDCl^) S = 1,46 (6H.s. gem.dimethyler), 2,19 (3H.m. -COOHj), 3,09 (3H.d. CH3N=), 3,64 (2H.s. Ph.-CHg-), 4,40 (IH.s. Gy -proton), 5,55 (4H.m. β-lactamprotoner + -0. CHp N=), 7,31 (5H.s. aromatiske protoner).

Eksempel 7.

N-Acetylaminomethylester af penicillin G.

3,72 g (0,01 mol) kalium-penicillin G omrøres i 20 ml vandfrit ethylacetat og afkøles til -10°C. Der tilsættes 1 dråbe N-methylmor-pholin efterfulgt af 0,96 ml (0,01 mol) chlormyresyreethylester, og blandingen omrøres ved -10°C i 15 minutter. 0,89 g (0,01 mol) hydroxy-methylacetamid suspenderet i 20 ml ethylacetat tilsættes på 6n gang, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 2 1/2 time. Produktet isoleres som beskrevet i eksempel 3 , hvorved der fås 1,21 g (24$ af det teoretiske) af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 130°C.

12 143603 HME-spektrum [CDOl^ +(CD^)2S0] £ = 1,47 og 1,57 (6H.cL. gem.dimethy-ler), 2,00 (3H.s. -C0CH3) 5,65 (2H.s. PhCTgCO-), 4,37 (lH.s. C3--proton), 5,30 [2H.d. (J = 7Ηζ)-000ΗοΜΗ-], 5,4 - 5,8 (2H.m. β-lactam-protoner), 7,32 (5H.s. aromatiske protoner).

Eksempel 8.

N-Propionylaminomethylester af penicillin G.

7,56 g (0,02 mol) kalium-penicillin G i 40 ml ethylacetat omdannes til det blandede anhydrid og omsættes med 2,06 g (0,02 mol) hydroxy-methylpropionamid som beskrevet i eksempel 7 , hvorved der fås 3,54 g (4796. af det teoretiske) af den ønskede ester, som efter omkrystallisation af ethylacetat/ether giver et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 128°C.

M3.-spektrum (CDOlj) £ = 1,0 - 1,25 (3H.t. -C0CH2CH3) 1,45 (6H.s. gem.dimethyler), 2,00 - 2,4 (2H.q. -COCHp-) 3,65 (2H.s. PhCH^OO-), 4,38 (IH.s. C3-proton), 5,3 (2H.d. -C00CH2iiH-) 5,4 - 5,8 (2H.m. β-lactamprotoner), 7,35 (5H.s. aromatiske protoner).

Eksempel 9.

Benzoxazolidinon-3-methylester af ampicillinhydrochlorid.

a).Benzoxazolidinon-3-methylester af 6-aminopenicillansyre-p-to-luensulfonat.

2,16 g (0,01 mol) 6-aminopenicillansyre suspenderet i 10 ml dime-thylformamid behandles med 2 ml triethylamin og omrøres ved stuetemperatur i 1/2 time. 1,83 g (0,01 mol) 3-chlormethylbenzoxazoli-dinon opløst i 10 ml dimethylformamid tilsættes ved 0°0, og blandingen omrøres i 3 1/2 time ved stuetemperatur. Blandingen fortyndes med 30 ml ethylacetat og filtreres. Det klare filtrat vaskes med 4 x 15 ml vand, tørres over vandfrit magnesiumsulfat og behandles med en opløsning af 1,7 g (0,009 mol) p-toluensulfonsyre i 20 ml ethylacetat. Produktet henstilles til krystallisation, filtreres, vaskes med ethylacetat og tørres, hvorved der fås 3,25 g (60,7$ af det teoretiske) estersalt i form af et farveløst krystallinsk fast stof med smeltepunkt 162°C (sønderdeling).

13 143803

Analyse:

Beregnet for C^Hg^OgSg: C 51,56 H 4,71 IT 7,85 S 11,97 Pundet: C 51,58 H 4,90 N 7,54 S 11,59- NMR-spektrum [(CD^)2S0] 4 = 1,58 og 1,60 (6H.d. gem.dimethyler), 2,50 (5H.s. p-substitueret -CH^), 4,65 (iH.s. C^-proton), 5,16 (lH.d. C^-proton), 5,56 (lH.d. Cg-proton), 6,04 (2H.s. -CH2N=), 7,37 (8H.m. aromatiske protoner).

b) Benzoxazolidinon-3-methylester af ampicillinhydrochlorid.

5,36 g (0,01 mol) benzoxazolidinon-3-methylester af 6-aminopenicil-lansyre-p-toluensulfonat blandes med 240 ml ethylacetat og 160 ml 2%'s natriumbicarbonatopløsning og rystes grundigt. Den vandige fase fraskilles, og den organiske fase vaskes med 110 ml vand indeholdende 6 ml 2%'s natriumhydrogencarbonatopløsning. Den organiske fase tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes. Remanensen genopløst i 60 ml ethylacetat afkøles til 0°C. 5,4 g (0,02 mol) natrium-N-(l-methoxycarbonyl-propen-2-yl)-D-a-amino-phenylacetat i 80 ml ethylacetat afkøles til -15°C og behandles med 0,1 ml N-methylmorpholin efterfulgt af 1,92 ml (0,02 mol) chlormyresyreethylester og omrøres ved -15°C i 6 minutter. Esterbase-opløsningen tilsættes på én gang, og blandingen omrøres i 10 minutter ved -15°C efterfulgt af 1 times omrøring ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen vaskes med 20 ml 0,5N natriumbicarbonatopløsning efterfulgt af 2 ganges vask med hver gang 10 ml vand, tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes. Remanensen opløses i 40 ml acetone og 36 ml vand. Opløsningen omrøres og indstilles på pH-værdi 2,5 med 5N HCl til konstant værdi (ca. 1/2 time). Opløsningen inddampes til det halve volumen til fjernelse af acetone og ekstraheres med 40 ml ethylacetat. Denne ekstrakt fortyndes med 32 ml petroleumsether (kogeinterval 40 - 60°C) og ekstraheres med 10 ml vand ved pH-værdi 3. De samlede vandige faser blandes med 10 g natriumchlorid, og det øverstliggende olieagtige lag fraskilles, den vandige fase ekstraheres med 20 ml ethylacetat, som hældes sammen med olien. Denne organiske opløsning tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes til det halve rumfang. 40 ml isopropanol tilsættes, og der inddampes til halvt volumen. Remanensen fortyndes med en overskydende mængde tørt ether, og det udskilte faste stof frafiltreres, vaskes med ether og tørres, hvor- 14 143603 ved der fås 2 g (18/8% af det teoretiske) af et produkt i form af et farveløst fast stof.

NMR-spektrum t(CD3)2SO] δ = lf25 og 1,43 (6H.d. gem.dimethyler), 4,45 (lH.s. C^-proton) 5,21 (IH.s. α-proton), 5,50 (2H.m. (3-lactam) , 6,01 (2H.s. OCH2N=), 7,40 (9H.m. aromatiske protoner), 9,09 (4H.m. -NH-protoner).

Forsøgsrapport.

Blodniveauer i dødningehovedaber.

Til dødningehovedaber doseres ad oral vej en dosis svarende til 100 mg/kg af basisantibiotiket i den frie syreform og afprøves imod Sarcina lutea udtrykt i basisantibiotikum. I tabel I er anført antibiotikumkoncentrationer i blodet 0,25, 1,0, 2,0, 4,0 og 6,0 timer efter doseringen af flere forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Tabel I

Forbindelse Koncentration ,ug/ml timer efter dosering fremstillet _;_'_ ifølge eksempel nr. 0,25 0,5 1,0 2,0 4,0 6,0 1 17,2 17,2 12,1 5,5 0,54 0,08 6 3,7 · 5,06 2,4 0,7 0,15 0,07 7 1,57 1,54 1,01 0,83 0,36 0,19 8 1,51 1,43 1,31 0,89 0,34 0,11

Esterhydrolyse.

Esterne inkuberes i en ækvivalent koncentration ^ug/ml) af basisantibiotiket ved 37°C i en HCl-opløsning ved pH-værdi 2,0, en phosphatpuffer ved pH-værdi 7,0 eller i humant blod, hvorefter de isoleres og undersøges ved bio-elektroforese.

15 143603 (Hydrolysehastighederne ved pH-værdi 2,0 kan ikke måles for penicillin G-estere på grund af hurtig nedbrydning af det dannede penicillin G.)

Resultaterne for repræsentative forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er anført i nedenstående tabel II.

Tabel II

Forbindelse Koncentration Hydrolysesystem ,ug/ml basisantibioti-fremstillet /kum efter ifølge ek- 3 mi- 8 mi- 15 mi- 25 sempel nr. nut- nut- nut- mi ter ter ter nut- _ter 1 5/ug/ml phosphatpuffer pH 7 3,5 - 3,6 3,4 ' humant blod 2,3 2,9 3,7 3,7 3 100 /ug/ml phosphat pH 7 100 94 94 100 HC1 pH 2 51 55 27 12 5 100,ug/ml phosphat pH 7 10 10 10 10 503ug/ml HC1 pH 2 10 10 10 10 humant blod 0,5 1,2 1,6 1,6 6 100,ug/ml phosphat pH 7 50 80 82 86 HC1 pH 2 95 61 42 13 9 100 ,ug/ml phosphat pH 7 10 10 10 10 7 HC1 pH 2 10 10 10 10

Sammenligningsdata.

Spidskoncentrationerne hos dødningehovedaber (opnået som beskrevet i eksempel 3) for forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1, (U-ethoxycarbonyl-N-methyl)aminomethylesteren af penicillin G), er i tabel III sammenlignet med de tilsvarende spidsværdier for andre : kendte estere af penicillin G.

Claims (1)

16 143503 Tabel III Forbindelse Spidskoncentration i dødninge- bo vedaber undersøgt som penicillin G- (^ug/ml) Forbindelse fremstillet ifølge eksempel 1 17,2 Ac e toxy-α-me thyl-me thylester 5,7 Acetoxymethylester 4,2 Fivaloyloxymethylester 3,9 Penicillin & 3,1 Patentkrav. Analogifremgangsmåde til fremstilling af aminoalkylestere af penicilliner med den almene formel II /CH3 R-CH-OH nTT I CH3 I . coy TT .0-ΪΓ CH-c^ 0__0H 0 c -~Z hvor Ύ betegner C-^ g-alkyl, phenyl, benzyl, C-^ g-alkoxy eller ben-zyloxy, Z betegner hydrogen eller C^g-alkyl, C^- eller Cg-cyclo-alkyl, phenyl eller benzyl, eller Y + Z sammen med den gruppe -N-CO-, til hvilken de er knyttede, udgør en lactam- eller oxa-lactamring, og R betegner phenylacetamido, α-amino-phenylacetamido, 2- eller 3-thienylacetamido eller phenoxyacetamido, kendetegnet ved, at a) en forbindelse med den almene formel VI /S CH- / \ / 3 R-CH--CH XC.---- I I I 3 VI , C-H-CH-COOH 0^