DK142420B - Fremgangsmåde til fremstilling af i det væsentlige krystallinsk natriumcephalotin. - Google Patents

Description

(11) FREMUE6G ELSESSKRIFT 1^2420 DANMARK «υ c 07 d B01/12 §(21) Ansegning nr. 5211 /il (22) Indleveret den 24. nOV· 1977 (24) Løbedag 24. nOV. 1977 (44) Ansegningen fremlagt og frem I æggeleesskriftet offentliggjort den 2 i · OKU. t you

DIREKTORATET FOR J

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Pnontet begæret fra den, (71) ELI LILLY AND COMPANY, 507 East McCarty Street, Indianapolis, Indiana 46204, US.

(72) Opfinder: Michael David _Cise, 5502 Camden Street, Indianapolis, India= na, US: Michael Larry Roy, 4925 Winston Drive, Indianapolis, Indiana, US.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Ingeniørfirmaet Hofman-Bang & Boutard.

(54) Fremgangsmåde til fremstilling af i det væsentlige krystallinsk natri= umcephalotin.

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af i det væsentlige krystallinsk natriumcephalotin til parenteral indgivelse ved en frysetørringsproces, ved hvilken en opløsning af natriumcephalotin i vand indeholdende 2-10 pct. af en alkohol med 1-5 C-atomer eller acetone afkøles til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, i løbet af 1-5 timer, hvorefter den opvarmes til -3 - -10°C og holdes ved denne temperatur i 3 timer eller længere. Herefter afkøles til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, før den frosne opløsning udsættes for et højt vakuum, og en moderat mængde varme indføres til sublimering af det frosne opløsningsmiddel. Det fremkomne pulver opløses hurtigt i acceptable farmaceuti- 2 142420 ske fortjncidingsmidler.

Frysetørring er en gammel og ofte anvendt proces til fjernelse af opløsningsmidler fra et opløst stof. Frysetørring giver en metode til fjernelse af et opløsningsmiddel uden samtidig ødelæggelse af varmefølsomme opløste stoffer. Antibiotika og andre farmaceutiske midler og fødevarer, især pulverkaffe, har været fremstillet ved denne metode i mange år. Normalt fryser man en opløsning, hvorfra man ønsker at udvinde det opløste stof. Denne udsættes herefter for et højt vakuum, og temperaturen hæves, således at der kan tilføres den varme, der er nødvendig til sublimering af det frosne opløsningsmiddel. Omgivelserne holdes under den temperatur, der fører til en nedsmeltning af den frosne opløsning. I praksis koordineres temperaturen i omgivelserne med det anvendte vakuum til opnåelse af de højeste sublimationshastigheder, der kan anvendes,uden at der samtidig sker en smeltning af den frosne masse.

Vand er det opløsningsmiddel, der generelt anvendes i frysetørringsprocesser. Andre opløsningsmidler eller kombinationer deraf kan anvendes, men udvalget af opløsningsmidler er begrænset til de, der fryser inden for det temperaturområde, der i praksis kan anvendes ved fremgangsmåden, og som kan sublimere under vakuum.

Ved frysetørring af antibiotika og andre farmaceutiske midler har det været praksis at følge den klassiske proces omtalt ovenfor, ved hvilken man fremstiller en opløsning, fryser denne til fast stof, udsætter dette for højt vakuum, tilfører varme og sluttelig sublimerer opløsningsmidlet. Når imidlertid en sådan konventionel metode anvendes, kræves der ved anvendelse af natrium-cephalotin en cyklustid på mere end 24 timer for at opnå e.t stabilt krystallinsk produkt.

Ifølge opfindelsen kan natriumcephalotin udvindes fra organiske opløsningsmidler, såsom de, der er identificeret ovenfor, i en i det væsentlige krystallinsk tilstand.

Imidlertid giver et sådant krystallinsk natriumcephalotinprodukt andre problemer. F. eks. er der ingen kendt effektiv måde til at sterilisere krystaller af natriumcephalotin udvundet fra organi- 3 U2Å20 ske opløsningsmidler, således at hele krystallisationsprocessen skal udføres i et aseptisk miljø. I den omfattende fremgangsmåde, der kræves for sterilt at krystallisere natriumcephalotin, er der mange muligheder for tilførsel af forurenende stoffer. Endvidere er der indtil dato ikke udviklet et apparat til påfyldning af tørt materiale i en ampul, som måler materialestrømmen ind i hver ampul med så god en præcision, som der kan opnås ved påfyldning af en væske.

I USA-patent nr, 4 029 655 beskrives en fremgangsmåde, som omfatter en meget hurtig afkøling af en vandig opløsning til kimdannelse af natriumcephalotin, blandt andre cephalosporiner, i .

løbet af det tidsrum, hvor frysningen foregår. Ved en sådan kim- . dannelse udkrystalliserer hovedmængden af natriumcephalotin fra opløsningen, umiddelbart før opløsningen fryser. Som følge heraf foreligger natriumcephalotin allerede som krystaller, når sublimationsprocessen påbegyndes, og man er ikke afhængig af, at kry- . c stallisationen skal foregå, medens opløsningsmidlet fjernes. Opløsningsmidlet sublimerer væk, og natriumcephalotin forbliver tilbage.

Ovennævnte fremgangsmåde giver et stabilt, sterilt og krystallinsk natriumcephalotin til parenteral indgivelse, men der kræves mere end 24 timer til fuldendelse af én cyklus. Som følge heraf er planlægningen af anvendelse af frysetørringsudstyret og personalets arbejdsplan utilfredsstillende på grund af den uregelmæssige drift. Ifølge den kendte teknik kræves der 28-36 timer fra start af frysetørringsoperationen, indtil denne er tilendebragt. Denne relativt lange tid betyder øgede udgifter samt irritation og utilfredshed blandt personalet.

Med den foreliggende opfindelse tilvejebringes en fremgangsmåde , . til fremstilling af i det væsentlige krystallinsk natriumcephalotin til rekonstitution til parenteral indgivelse ved en frysetørringsproces, der kan udføres på mindre end 24 timer, og som er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

4 142420

Ved fremgangsmåden, ifølge opfindelsen anvendes en frysetørrings-operation, hvor 20-40 vægtprocent natriumcephalotin er opløst i et opløsningsmiddelsystem bestående af 2-10 pct. alkohol med f-3 carbonatomer eller acetone og 98-90 pct. vand. En sådan opløsning fremstilles ved at opvarme opløsningen til en temperatur på over 70°C, hvorved der sker en fuldstændig opløsning af produktet. Den fremkomne opløsning kan om ønsket steriliseres ved filtrering. Opløsningen afkøles herefter hurtigt til en tempera-tpr på -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C. Køleperioden kan tilendebringes på 1-3 timer.

Efter hurtig afkøling til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, opvarmes den frosne opløsning til mellem -3°C og -10°C og holdes ved denne temperatur i 3 timer eller mere til sikring af en fuldstændig krystallisation.

Når den frosne opløsning har været holdt ved -3 --10°C i 3 timer eller mere, afkøles igen til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C.

Efter de således beskrevne kritiske trin anvendes en konventionel frysetørringsoperation til sublimering af isen, hvilket giver natriumcephalotin-krystaller med et fugtighedsindhold på højst 1 pct. og et indhold af alkohol eller acetone på højst 1 pct.

Sådanne krystaller har en passende lagerstabilitet på 3 år eller derover ved stuetemperatur og opløses på et minut eller mindre i et acceptabelt farmaceutisk fortyndingsmiddel i koncentrationer passende for parenteral indgivelse. Forøgelsen af frysetørrings-hastigheden af natriumcephalotin fremstillet ved fremgangsmåden beskrevet ovenfor, i forhold til konventionelt fremstillede na-triumcephalotin-krystaller frysetørret fra en vandig opløsning, fører til en reduktion af den tid, der kræves til at tilendebringe frysetørringsproceduren, på mellem 15 og 50%.

Det ejendommelige træk ved den foreliggende opfindelse er kombinationen af anvendelse af et opløsningsmiddelsystem bestående af vand og en alkohol med 1-3 carbonatomer eller acetone og etablering af en overmættet opløsning af natriumcephalotin i et sådant opløsningsmiddelsystem og en hurtig afkøling af opløsningen til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C. Nærværelsen af alkohol med 1-3 carbonatomer 5 142420 eller acetone 1 opløsningsmiddelsystemet virker som antiopløs-ningsmiddel og reducerer opløseligheden af natriumcephalotin.

Det har overraskende vist sig, at natriumcephalotin er væsentligt mindre opløseligt i et opløsningsmiddelsystem bestående af vand og en alkohol med 1-3 carbonatomer eller acetone end i vand alene.

Ved derfor at opvarme en frossen opløsning til mellem -3°C og -10°C kan kimdannelsen og krystallisationen udføres på 3 timer eller lidt mere sammenlignet med de 14-20 timer, der kræves, når der ikke er alkohol eller acetone til stede.

Opløsningsmiddel-systemet, der anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan indeholde 2-10 pct. af en alkohol med 1-3 carbonatomer eller acetone og 90-98 pct. vand (volumen/volumen). Det foretrukne opløsningsmiddelsystem indeholder 3-5 volumenprocent af en alkohol eller acetone og 95-97 pct. vand. I praksis opløses natriumcephalotin fortrinsvis i vand, og et volumen af en alkohol eller acetone, fortrinsvis 95 pct. ethanol, svarende til 4 pct. af natriumcephalotinopløsningens volumen, tilsættes.

Anvendelige alkoholer med 1-3 carbonatomer omfatter methanol, J ‘ ' ethanol, n-propanol og isopropanol. ~

En koncentration af natriumcephalotin på 20-40 vægtpct. i opløsningsmiddelsystemet er tilfredsstillende til udvikling af store krystaller ved frysetørringen. Det foretrukne område er 25-35 vægtpct. En særlig foretrukken opløsning af natriumcephalotin .

er en 30 vægtpct. opløsning. I praksis opnås en særlig foretrukken koncentration af natriumcephalotin ved at opløse 30 g natriumcephalotin i vand til 100 g opløsning og tilsætte; 3,55 ml 95 pct. alkohol, hvilket giver en opløsning indeholdende ca. 29 vægtpct. af det opløste stof.

Sterilisation af opløsningen af natriumcephalotin i vand og alkohol eller acetone kan opnås ved at filtrere opløsningen igennem sterile filtreringsorganer, der kendes af fagmanden, og opsamle filtratet i en på forhånd steriliseret beholder. Som illustration kan nævnes, at steril filtrering kan udføres under anvendelse af en varmesteriliseret filterpresse forsynet med en asbestdug eller en filtreringsmembran af celluloseacetat eller-nitrat eller med 6 142620 en filterdug med en porøsitet på under 0,22 yum.

Hurtig afkøling af opløsningen af natriumcephalotin kan bedst udføres ved at udsætte opløsningen for en omgivelsestemperatur på -40°C. Temperaturen af opløsningen kan bestemmes ved at anbringe et termometer ca. midt i opløsningen, således at man får en indikation af temperaturen i dette punkt.

Når man har opnået en temperatur på -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, opvarmes den frosne opløsning til -3°C --30°C

til initiering af kimdannelsen og krystallisationen af natrium-cephalotin. Den frosne opløsning holdes ved en temperatur i dette område i 3 timer eller mere til fuldstændig krystallisation.

Efter en sådan periode afkøles den frosne opløsning igen til -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, til fuldstændig frysning.

Der har ikke vist sig nogen tilsyneladende gunstig virkning ved at holde den frosne masse ved -20°C eller derunder, fortrinsvis -40°C, efter at frysningen er tilendebragt. På dette tidspunkt er praktisk taget al natriumcephalotin til stede i den frosne masse sop fri krystaller. En konventionel frysetørringsoperation udføres herefter til sublimering af opløsningsmidlet fra den frosne masse, hvilket giver en remanens af i det væsentlige krystallinsk natriumcephalotin.

Den frosne natriumcephalotin-præparation, hvori kimdannelsen af krystallerne i det væsentlige er komplet, udsættes for omgivelser, hvor trykket kan reduceres til et praktisk maksimum på højst 1 mmHg. Det foretrækkes at reducere trykket til langt mindre end 1 mmHg. De bedste resultater opnås, når det absolutte tryk ligger på 0,05 - 0,2 mmHg. Sidstnævnte tryk opnås sædvanligvis let, både i laboratorieudstyr · og i kommercielt frysetørringsapparatur, hvis udformning, konstruktion og drift er velkendt for fagmanden. Efter at trykket i omgivelserne er reduceret til driftbetingelserne, tilføres varme. Temperaturen af omgivelserne hæves til et punkt, hvor den maksimale sublimering kan finde sted uden at smelte den frosne masse. Som en generel regel er temperatur og tryk omvendt proportionale, hvilket betyder, at jo mere effektivt man kan reducere trykket, jo højere temperatur kan anvendes ved sublimeringen. Som en anvendelig regel kan det anføres, at en maksi- 7 142420 mal temperatur i omgivelserne på 50°C kan opnås med et særdeles effektivt vakuumsystem, hvor det absolutte tryk holdes på ca.

0,05 mmHg (50yum). I ethvert tilfælde skal temperaturen øges langsomt for at undgå at overbelaste trykreduktionssystemet, hvilket kan føre til en uønsket smeltning af den frosne masse. Fortrinsvis skal temperaturen af omgivelserne ved sublimeringen holdes på 10-40°C, medens det absolutte tryk holdes på 0,2 mmHg eller derunder.

Sublimering af is fra den frosne masse fortsættes, indtil vandindholdet i natriumcephalotinkrystallerne er under 1 pot. og indholdet af alkohol eller acetone er under 1 pot. En sådan specifikation sikrer fysisk stabilitet af de fremkomne krystaller. Natriumcephalosporin krystalliserer ikke som et hydrat.

Det fremstillede natriumcephalotin foreligger i det væsentlige krystallinsk. For eksempel viser en fysisk analyse af natriumcephalotin en krystallinitet på mellem 92 og 100 pet. I hvert tilfælde opnås en tilstrækkelig høj grad af krystallinitet til at give et lagerstabilt produkt, dvs. ingen gulning af produktet og tab af mikrobiologi sk kraft i op til 3 écr ved stuetemperatur. Når fremgangsmåden udføres under anvendelse af steril filtrering af natriumcephalotinopløsningen, og frysetørringen udføres under aseptiske betingelser, kan natriumcephalotinkrystallerne fyldes sterilt i på forhånd steriliserede ampuller i passende mængder til rekonstitution til parenteral indgivelse.

I en anden udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen . fyldes et afmålt volumen alkohol· eller acetone-vandopløsning efter passende steril filtrering ned i en på forhånd steriliseret ampul sammen med det afmålte volumen indeholdende den natriumcephalo-tinmængde, der ønskes i en sådan ampul efter frysetørringsoperationen. Ampullen bearbejdes herefter på samme måde som beskrevet ovenfor, hvorefter den er klar til steril tilpropning og lukning.

I praksis foretrækkes det, at man lander sterile forhold fylder et afmålt volumen af steril (alkohol eller acetone)-vand-nat riumcepha-lotinopløsning i en på forhånd steriliseret ampul, idet der opnås mindst to gunstige resultater: For det første kan man fylde en mere δ 142420 præcis og ensartet mængde natriumcephalotin i en ampul, når stoffet er flydende, end når det har form af faste krystaller. Og for det andet er det lettere at opnå og holde sterile betingelser ved en væ- · skepåfyldningsoperation end ved en tørpåfyldningsoperation. Endvidere er luftforurening et mindre problem, når man håndterer væsker end når man håndterer tørre stoffer.

Opfindelsen illustreres nærmere i følgende eksempler.

Fremgangsmåde I

500 gram natriumcephalotin med et vandindhold på 1 pct. opløstes i 1166,6 gram vand til injektion, U.S.P.

Den fremkomne vandige opløsning af natriumcephalotin opvarmedes til 62°C til fuldstændig opløsning af produktet, og opløsningen filtreredes igennem en 0,45 jim Millipore membran ned i en egnet beholder.

Den fremkomne vandige opløsning indeholdt 30 pct. natriumcephalotin og anvendtes i 50 ml prøver i følgende eksempler.

EKSEMPEL I

50 ml 30 pct. (vægt/vægt) natriumcephalotinopløsning kombineredes med 2 ml 95 pct. alkohol (svarende til 4 volumenprocent).

Ethanol-vand-opløsningen af natriumcephalotin fyldtes i på forhånd steriliserede medicinflasker i en mængde på 3»56 ml pr. flaske. Mængden af opløsning blev beregnet til at give ampuller å 1 gram natriumcephalo tin.

De fyldte flasker anbragtes i en konventionel frysetørringsenhed, og temperaturen af opløsningen blev hurtigt sænket til -35°C i løbet af mindre end 3 timer, og herefter opvarmedes til -7°C så hurtigt som muligt. Efter at den frosne masse havde nået en temperatur på -7°C, blev flaskerne holdt i 3 timer eller mere ved denne temperatur.

g 142420

Herefter afkøledes flaskerne til -45°C.

Trykket i frysetørringsmaskinen reduceredes til under 0,2 mmHg absolut, og temperaturen blev hævet til +10°C til sublimering af ethanol-vand- opløsningsmidlet. Til slut øgedes temperaturen til 25°C, idet man forsøgte at undgå at smelte den frosne masse i flaskerne. Da sublimationsprocessen var tilendebragt, blev vakuum brudt, og produktet undersøgtes for vandindhold, ethanolindhold og rekonstitutionstid.

Typiske vandindhold i de individuelle flasker var 0,10 og 0,11 pct.

To flasker, der analyseredes for ethanol, viste mindre end 0,5 pct. indhold heraf.

Fem flasker undersøgtes for rekonstitutionstid, og der krævedes 30-60 sekunder til opløsning af natriumcephalotin i 4 ml vand til injektion, U.S.P.

EKSEMPEL II

2 ml methanol sattes til 50 ml af den 30 pct. vandige natriumce-phalotinopløsning fremstillet ovenfor (svarende til 4 volumenprocent) .

Methanol-vand-opløsningen af natriumcephalotin blev fyldt i på forhånd steriliserede medicinflasker i en mængde på 3>56 ml pr. flaske. Mængden af opløsning blev beregnet til at kunne give ampuller å 1 gram natriumcephalotin.

De fyldte flasker anbragtes i en konventionel frysetørringsenhed, og temperaturen af opløsningen sænkedes til -35°C i løbet af mindre end 3 timer, og herefter opvarmedes til -7°C så hurtigt som muligt. Efter at den frosne masse havde nået en temperatur på -7°C, blev flaskerne holdt i 3 timer eller mere ved denne temperatur.

Flaskerne afkøledes herefter til -35°C.

10 142420

Trykket i frysetørringsmaskinen reduceredes til under 0,2 mmHg, og temperaturen hævedes til 20°C til sublimering af methanol-vand-opløsningsmidlet. Til slut blev temperaturen hævet til 25°C, idet der blev passet på ikke at smelte den frosne masse. Når sublimeringsprocessen var tilendebragt, blev vakuum brudt, og produktet blev analyseret for vandindhold,.methanolindhold og rekonstitutionstid. Typiske vandindhold lå på 0,10 og 0,11 pct.

To flasker blev afprøvet for methanol-restindhold, og dette var mindre end 0,5 pct. Fem flasker undersøgtes for rekonstitutions-tid, hvilken var mellem 30 og 60 sekunder for at opløse natrium-cephalotin i 4 ml vand til injektion, U.S.P.

EKSEMPEL III

2 ml acetone blev sat til 50 ml 30 pct. natriumcephalotinopløs-ning fremstillet som ovenfor. (Svarende til 4 volumenprocent).

Ac et one-vand-opløsningen af natriumcephalotin blev fyldt i på forhånd steriliserede medicinflasker i en mængde på 3,56 ml pr. flaske. Mængden af opløsning blev beregnet således, at der opnåedes 1 gram natriumcephalotin pr. ampul.

De fyldte flasker blev anbragt i en konventionel frysetørringsenhed, og temperaturen af opløsningen blev sænket hurtigt til -35°C i løbet af mindre end 3 timer, og temperaturen fik lov til at stige til -7°C så hurtigt som muligt. Efter at den frosne masse havde nået en temperatur på -7°C, blev flaskerne holdt .i yderligere 3 timer ved denne temperatur.

Herefter afkøledes flaskerne til -35°C.

Trykket i frysetørreren blev reduceret til under 0,2 mm Hg, og temperaturen blev hævet til 10°C til sublimation af acetone-vand-opløsningsmidlet. Til slut fik temperaturen lov til at stige til 25°C, idet man sørgede for ikke at smelte den frosne masse.

Da sublimationen var tilendebragt, blev vakuum afbrudt, og de behandlede flasker analyseredes for vandindhold, acetoneindhold og rekonstitutionstid.

11 142420

Typiske vandindhold fra de individuelle flasker var 0,10 og 0,11 pct. To flasker blev afprøvet for acetonerest, og denne viste sig at være mindre end 0,5 pct. Fem flasker undersøgtes for rekonstitutionstid, og denne lå på mellem 50 og 60 sekunder for at opløse na-triumcephalotin i 4 ml vand til injektion, U.S.P.

EKSEMPEL IV

2,5 ml isopropanol sattes til 50 ml 30 pct. natriumcephalotinop-løsning som ovenfor (svarende til 5 volumenprocent).

I s opr opanol-vancUopløsningen af natriumcephalotin fyldtes i på forhånd steriliserede flasker i en mængde på 3,6 ml pr. flaske. Mængden af opløsning var .beregnet således, at der opnåedes 1 gram natriumcephalotin pr. ampul.

De fyldte flasker anbragtes i en konventionel frysetørringsenhed, og temperaturen af opløsningen sænkedes hurtigt til -35°C i løbet af mindre end 3 timer, hvorefter temperaturen fik lov til at stige til -7°C så hurtigt som muligt. Flaskerne blev holdt ved denne temperatur i 3 timer. Herefter afkøledes til -35°C.

Trykket i frysetørreren blev reduceret til under 0,2 mm kviksølv, og temperaturen hævedes til 10°C til sublimation af isopropanol-vand-opløsningsmidlet. Temperaturen fik til sidst lov til at stige til 25°C, idet man sørgede for, at den frosne masse ikke smeltede. Når sublimationsprocessen var tilendebragt, blev vakuum afbrudt, og flaskerne undersøgtes for vandindhold, iso-propanolindhoid og rekonstitutionstid. Typiske vandindhold i de individuelle flasker var 0,10 og 0,11 pct. To flasker undersøgtes for isopropanol-restindhold, og dette var mindre end 0,5 pct.

Fem flasker undersøgtes for rekonstitutionstid, hvilken lå på 30 - 60 sekunder for at opløse natriumcephalotin i 4 ml vand til injektion, U.S.P.

Claims (3)

12 142420 Patentkrav;

1. Fremgangsmåde til fremstilling af i det væsentlige krystallinsk natriumcephalotin til rekonstitution for parenteral indgivelse ved en frysetørringsproces, hvorved man (a) opløser 20-40 pot. (vægt/vægt) natriumcephalotin i et opløsningsmiddel; (b) afkøler opløsningen fra (a) til -20°C eller derunder; (c) opvarmer (b) til en temperatur mellem -3°C og -10°C; (d) holder temperaturen af præparationen (c) ved -3°C --10°C i en periode på 3 timer eller mere; (e) afkøler præparationen (d) til -20° C eller derunder; (f) reducerer trykket i de omgivelser, hvori præparationen (e) holdes, til et maksimum på 1 mm Hg absolut; (g) hæver temperaturen af omgivelserne, hvori præparationen (f) holdes, til maksimalt 50°C, idet der undgås en smeltning af præparationen; og (h) sublimerer opløsningsmidlet fra præparationen (g), indtil de fremkomne krystaller, af natriumcephalotin har et vandindhold på højst 1 pct. og et alkohol- eller acetoneindhold på højst 1 pct., kendetegnet ved, at processen gennemføres * ved anvendelse af et opløsningsmiddel bestående af 2-10 pct0 af en alkohol med 1-3 carbonatomer eller acetone og 98-90 pct. vand (volumen/volumen).

2. Fremgangsmåde ifølge kravl, kendetegnet ved, at temperaturen i trin (b) er -40°C.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at