DE69903911T2 - alpha-GLUCOSIDASE HEMMER - Google Patents

alpha-GLUCOSIDASE HEMMER

Info

Publication number
DE69903911T2
DE69903911T2 DE69903911T DE69903911T DE69903911T2 DE 69903911 T2 DE69903911 T2 DE 69903911T2 DE 69903911 T DE69903911 T DE 69903911T DE 69903911 T DE69903911 T DE 69903911T DE 69903911 T2 DE69903911 T2 DE 69903911T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
molecular weight
touchi
glucosidase
foods
water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE69903911T
Other languages
English (en)
Other versions
DE69903911D1 (de
Inventor
Hiroyuki Fujita
Nobuhiro Fukushima
Takanori Kasai
Jun Kawabata
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nippon Supplement Inc
Original Assignee
Nippon Synthetic Chemical Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from JP10239326A external-priority patent/JP2000072687A/ja
Priority claimed from JP18763499A external-priority patent/JP3911366B2/ja
Application filed by Nippon Synthetic Chemical Industry Co Ltd filed Critical Nippon Synthetic Chemical Industry Co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of DE69903911D1 publication Critical patent/DE69903911D1/de
Publication of DE69903911T2 publication Critical patent/DE69903911T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/005Enzyme inhibitors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Description

    TECHNISCHES GEBIET
  • Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf einen α- Glucosidase-Inhibitor, der Touchi als einen aktiven Inhaltsstoff enthält, welcher in Arzneimitteln, Lebensmitteln, Gesundheitslebensmitteln und insbesondere in gesundheitsschützenden Lebensmitteln verwendet werden kann.
  • HINTERGRUND DER ERFINDUNG
  • Es ist beschrieben, dass ein α-Glucosidase-Inhibitor die α-Glucosidase inhibiert, welche an den Mikrovilli des Dünndarms lokalisiert ist, und welche den raschen Anstieg des Blutzuckers nach der Mahlzeit kontrolliert und dann den Insulinspiegel anhebt (Diabate Medicine, 10, 688 (1993)). Da es den Metabolismus von Kohlenhydraten (insbesondere aus Stärke und Saccharose herrührende Oligosaccharide) ebenfalls in Menschen und Tieren unterdrückt und eine inhibitorische Wirkung auf den Blutzuckeranstieg aufweist, ist es bei der Verbesserung eines hyperglykemischen Zustandes als auch bei verschiedenen durch Hyperglykemie induzierten Krankheiten, wie etwa Fettsucht und Diabetes wirksam. Ein Lebensmittel, welches durch Zugabe von α-Glucosidase dazu erhalten wird, ist eine geeignete Mahlzeit für einen Patienten mit derartigen Symptomen, und ebenfalls für einen gesunden Menschen zum Zwecke der Prophylaxe gegen derartige Symptome.
  • Als ein aus einem Lebensmittel herrührender α- Glucosidase-Inhibitor wurde z. B. ein enzymatisches Hydrolysat eines tierischen Proteins oder eines pflanzlichen Proteins in der japanischen ungeprüften Patentveröffentlichung Nr. 9-65836 (1997) offenbart und Tee-Polyphenol wurde in der japanischen ungeprüften Patentveröffentlichung Nr. 5-17364 (1993) offenbart.
  • Jedoch wies der in der japanischen ungeprüften Patentoffenveröffentlichung Nr. 9-65836 (1997) offenbarte α-Glucosidase-Inhibitor das Problem auf, dass er in einer großen Menge als Lebensmittel aufgenommen werden musste, um seine Aktivität entfalten zu können. Der in der japanischen ungeprüften Patentveröffentlichung Nr. 5-17364 (1993) offenbarte α-Glucosidase-Inhibitor wies die Probleme auf, dass es kompliziert war, das Polyphenol zu reinigen und es war notwendig, regelmäßig eine große Menge Tee zu konsumieren. Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, einen hervorragenden α-Glucosidase- Inhibitor zur Verfügung zu stellen, welcher eine hohe Aktivität hat und einfach eingenommen werden kann.
  • OFFENBARUNG DER Erfindung
  • Wir machten bei dieser Erfindung Fortschritte bei der Lösung der vorher beschriebenen Probleme und entdeckten schließlich, dass Touchi, welches als ein Inhaltsstoff von chinesischen Lebensmitteln verwendet wird, eine hervorragende α-Glucosidase-Inhibitoraktivität hat.
  • Konkret bezieht sich die vorliegende Erfindung auf einen α-Glucosidase-Inhibitor, mit Touchi als einen aktiven Inhaltsstoff (Anspruch 1);
  • den α-Glucosidase-Inhibitor nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass ein Extrakt, welcher durch Extraktion von Touchi mit Wasser und/oder Alkohol erhalten wird, als Touchi verwendet wird (Anspruch 2), und
  • den α-Glucosidase-Inhibitor nach Anspruch 2, wobei die Menge eines Bestandteils mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 in diesem durch Extraktion mit Wasser und/oder Alkohol erhaltenen Extrakt höchstens 20 Gew.-% ist (Anspruch 3).
  • BESTE ART DER DURCHFÜHRUNG DER ERFINDUNG
  • Das in der vorliegenden Erfindung eingesetzte Touchi ist herkömmlicherweise eines, welches durch Dämpfen von Sojabohnen und ihrer Fermentierung mit Koji (Aspergillus) erhalten wird. Touchi schließt ein Daitokuji natto, Hama natto, Tera natto, Shiokara natto, Ikkyuji natto, welche in Japan fermentierte Sojabohnen sind.
  • Während eine herkömmliche Fermentation durch Konservierung in Salz durchgeführt wird, kann ein ähnlich hergestelltes Produkt ohne Salz oder ein nach Abschluss der Fermentation entsalztes Produkt ebenfalls in der vorliegenden Erfindung eingesetzt werden.
  • Touchi wird in der herkömmlichen Form verwendet und Pulver, welches durch Pulverisierung nach dem Trocknen, und eine Ausschlämmung, welche durch Pulverisierung in Wasser erhalten wird, weisen ebenfalls eine Glukosidaseinhibierende Wirkung auf. Jedoch sind Extrakte, welche durch Extraktion von Touchi mit Wasser und/oder Alkohol erhalten werden, vom Standpunkt des Besitzes einer hohen α-Glucosidase-inhibierenden Aktivität bevorzugt.
  • Beispiele für den bei der Extraktion eingesetzten Alkohol sind Methanol, Ethanol, Propanol und Butanol. Methanol und Ethanol sind bevorzugt. Beispiele für das Extraktionsverfahren sind Rührextraktion, erhaltende Extraktion und superkritische Extraktion. Gewöhnlich wird Rührextraktion oder Immersionsextraktion eingesetzt. Falls Wasser und Alkohol kombiniert eingesetzt werden, ist das Verhältnis (Gewicht) von Wasser zu Alkohol bevorzugt 1/10 bis 10/1, mehr bevorzugt 1/5 bis 5/1.
  • Wenn die Extraktion mit Wasser durchgeführt wird, wird zu unbehandeltem Touchi, oder durch Pulverisierung erhaltenes Touchi, Wasser in einer 1 bis 20-fachen Menge hinzugegeben und Touchi wird durch Rührextraktion bei 40ºC bis 60ºC für 12 bis 20 Stunden oder bei 100ºC bis 140ºC für 1 bis 3 Stunden extrahiert.
  • Falls die Extraktion mit Alkohol oder einer Kombination von Wasser und Alkohol durchgeführt wird, wird zu Touchi, wie es ist, oder zu Touchi, welche durch Pulverisierung erhalten wird, Alkohol oder eine Mischung von Wasser und Alkohol in einer 1 bis 15-fachen Menge hinzugegeben, und Touchi wird durch Immersionsextraktion bei 40ºC bis 60ºC für 3 bis 10 Stunden, oder bei Raumtemperatur für 10 Stunden bis 7 Tage durchgeführt. Wenn nötig, kann Wasser und Alkohol abdestilliert werden, um die Konzentration davon einzustellen.
  • Ein nach den vorherigen Extraktionsschritten erhaltener Extrakt kann wie er ist verwendet werden. Alternativ kann er in der Form von Pulver nach dem Abdestillieren von Wasser und Alkohol verwendet werden.
  • Der Extrakt beträgt gewöhnlich 30 bis 90 Gew.-% der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000, wie später diskutiert wird.
  • Um eine Wirkung bei der Aufnahme einer geringen Menge zu erhalten, kann ein Extrakt einer Lösungsmittelfraktionierung unter Verwendung eines polaren organischen Lösungsmittels wie etwa Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol, Chloroform, Ethylacetat, Toluol, Hexan oder Benzol unterzogen werden, um einen aktiven Bestandteil zu konzentrieren, oder er kann durch wenigstens eine geeignete Reinigungsmethode aus der aus Aluminiumoxid-Säulenchromatographie, Silicagel- Säulenchromatographie, Ionenaustauscher-Chromatographie, hydrophobe Chromatographie, Hochleistungsflüssigchromatographie bestehenden Gruppe, gereinigt werden.
  • In der Erfindung ist es vom Standpunkt des Aufweisens einer hervorragenden Glucosidase-Inhibitoraktivität bevorzugt, dass die Menge der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 höchstens 20 Gew.-% in den vorher beschriebenen durch Wasser- und/oder Alkoholextraktion erhaltenen Extrakte von Touchi ist. Konkret ist es bevorzugt, ein Produkt zu verwenden, welches durch Entfernung aller Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 von dem vorherigen Extrakt erhalten wird, um in einer Menge von höchstens 20 Gew.-% davon (hiernach als gereinigtes Produkt bezeichnet), mehr bevorzugt von 0,1 bis 15 Gew.-% zu sein.
  • Das vorher angegebene Molekulargewicht der Probe wird durch Gelfiltrationschromatographie gemessen. Konkret wird unter Verwendung einer Aminosäure, eines Peptids und eines Proteins [Ala (Molekulargewicht 89), Ile-Tyr (Molekulargewicht 330), Asp-Gly-Leu-Tyr-Pro (Molekulargewicht 563), Neurotensin (Molekulargewicht 1637) und Ribonuclease (Molekulargewicht 13700), die als ein Referenzstandard mit einem bekannten Molekulargewicht verwendet werden, ein Extrakt unter den folgenden Bedingungen eluiert, um eine Retentionszeit zu bestimmen, und das Molekulargewicht wird unter Verwendung einer Eichkurve, welche durch logarithmisches Auftragen der Molekulargewichte auf der Ordinate und der Retentionszeiten auf der Abszisse erhalten wird, bestimmt.
  • In der Erfindung wird die Menge in "Gew.-% " der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000, als "Flächen-%" der Peaks, welche den Bestandteil mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 nach Teilen der Peaks an der Position des Molekulargewichts 3000 auf einem Elutionschromatogramm entsprechen, dargestellt.
  • Fraktionierungsbedingungen
  • Säule: Protein Pak60 (hergestellt durch Waters) 5 · 250 mm Fließmittel: wässrige Acetonitrillösung mit 50 Vol.-%, welche 0,1 Vol.-% TFA (Trifluoressigsäure) enthält
  • Flussrate: 1 mL/min
  • Detektion: RI
  • Probenmenge: 1 mg Tabelle 1 Beziehung zwischen Molekulargewicht und Elutionszeit
  • Bei den vorhergehenden Bedingungen wird, da eine Substanz mit einem Molekulargewicht von 3000 nach 25 Minuten eluiert wird, jede nach nicht mehr als 25 Minuten eluierte Substanz als Bestandteil angesehen, welche ein Molekulargewicht von wenigstens 3000 hat.
  • Die folgenden sind Beispiele für Verfahren zur Entfernung von Bestandteilen mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000.
  • [1] Ein Verfahren zur Entfernung von Fraktionen mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 mittels Gelfiltrationschromatographie
  • [2] ein Verfahren zur Entfernung von Fraktionen mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 mittels einer Membranbehandlung
  • [3] ein Verfahren zur Entfernung von Fraktionen mit einem hohen Molekulargewicht durch eine Lösungsmittelextraktion unter Verwendung eines polaren organischen Lösungsmittels wie etwa Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol, Chloroform, Ethylacetat, Toluol, Hexan oder Benzol.
  • Diese Verfahren können allein oder in Kombination von zwei oder mehreren davon verwendet werden.
  • Die Verfahren [1] bis [3] werden kurz erläutert.
  • In dem Verfahren [1] wird das vorher als ein Molekulargewichtsanalyseverfahren beschriebene Verfahren in einem industriellen Maßstab durchgeführt.
  • In dem Verfahren [2] wird ein Extrakt durch eine Membran mit einem Fraktionierungs-Molekulargewicht von etwa 3000 (UF-Membran) filtriert, derartige UF-Membranen sind "PLBC (Fraktionierungs-Molekulargewicht 3000)" erhältlich von Millipore und UF-Membran "SEP 1013 (Fraktionierungs- Molekulargewicht 3000)" erhältlich von Asahikasei.
  • In dem Verfahren [3] wird ein durch Extraktion erhaltener Extrakt in einem derartigen Maße mit Wasser und/oder Alkohol konzentriert, dass keine Präzipitation auftritt, dann werden 5 bis 10 Volumen Alkohol hinzugegeben, um jede Substanz mit einem hohen Molekulargewicht zu präzipitieren.
  • Der erfindungsgemäß erhaltene α-Glucosidase-Inhibitor hat eine inhibitorische Wirkung auf den Anstieg des Blutzuckers. Daher kann es als eine pharmazeutische Formulierung wie etwa als Ampullen, Granulat, Pillen, Kapseln oder Sirup verwendet werden; als ein Gesundheitslebensmittel, wie etwa eine Mahlzeit für einen Patienten mit einem Symptom, als auch als prophylaktisches Mittel dafür, ein Diabetes vorbeugendes Mittel, ein Anti-Fettsucht-Mittel, ein diätetisches Lebensmittel und ähnliches, welche durch Verdünnung eines Trägerstoffs ohne Toxizität erhalten werden; wie einen flüssigen Trägerstoff, wie etwa Wasser, Ethanol, Ethylenglycol oder Polyethylenglycol, und einen festen Trägerstoff, wie etwa Stärke, Zellulose oder Polyamidpulver. Zusätzlich kann eine Erhöhung des durch Aufnahme von Mahlzeiten erhöhten Blutzuckerniveaus durch Aufnahme der vorherigen Formulierung, welche einen erfindungsgemäßen α-Glucosidase-Inhibitor enthält, vor, während und zwischen den Mahlzeiten inhibiert werden.
  • Die Menge an Touchi, welche von einem Menschen aufgenommen wird, ist bevorzugt 1 bis 50 g pro Tag, mehr bevorzugt 5 bis 10 g pro Tag. Im Falle eines Extrakts erhalten durch Extraktion mit Alkohol, kann die Menge 1/10 der von unbehandeltem Touchi sein.
  • Ein gereinigtes Produkt wird bevorzugt in einer Menge von 0,00001 bis 5 g pro Tag, insbesondere 0,005 bis 0,5 g pro Tag bezogen auf die getrocknete Produktbasis eingesetzt, da es eine inhibitorische Aktivität, die 2 bis 1000-fach mehr als die des Extrakts ist, welcher mit Wasser und/oder Alkohol erhalten wird.
  • Ein erfindungsgemäßer α-Glucosidase-Inhibitor kann ebenfalls zu Lebensmittelprodukten wie den Folgenden hinzugefügt werden.
  • [1] Verarbeitete landwirtschaftliche und Meeresprodukte
  • Gelatinenudeln, pürierte süße Bohnenmarmelade, ein gelatinöses Lebensmittel, hergestellt aus Teufelszungenstärke, Brot, Nudeln (Instantnudeln, Pasta, rohe Nudeln, getrocknete Nudeln), Reiskuchen, Getreideprodukte, verarbeitete Sojabohnenprodukte (Tofu, Sojabohnenmilch, Natto, getrockneter Bohnenquark), verarbeitete Meeresprodukte [gekochte Fischpaste, Fischwürstchen (mit Krabbengeschmack), (Fisch-)Schinken, (Fisch-)Wurst, (Fisch-)Wiener Würstchen, Reisgarnierungen, Seegrasflocken für Reis mit Tee], Ei haltige Lebensmittel (Suppe, Reiskugeln und ähnliches), Dosenlebensmittel (Dosenthunfisch, ölkonservierte Sardinen, Yakitori-Spieße), eingeschweißte Lebensmittel (Curry, Stew, Spaghetti-Saucen).
  • [2] Molkereiprodukte
  • Milch, verarbeitete Milch, milchsäurevergärte Getränke, Butter, Käse, Kondensmilch, Milchpulver.
  • [3] Gewürze
  • Miso (fermentierte Sojabohnenpaste), Sojasauce, Geschmacksmittel und Gewürze, (pulverisierte) natürliche Gewürze, Sauce, Dressing, Barbecuesauce, süßes Sakegewürz, Curry, Stew, scharfe und milde Gewürze, Joghurt.
  • [4] Gesundheitslebensmittel (Nahrungsmittelzusätze)
  • 1] Saponin enthaltende Lebensmittel (Panax Ginseng Wurzel enthaltende Lebensmittel, Acanthopanax Senticosus Harms enthaltende Lebensmittel)
  • 2] Saccharide enthaltende Lebensmittel [Oligosaccharide (Fluctooligosaccharide enthaltende Lebensmittel, Isomaltoligosaccharide enthaltende Lebensmittel, Galactooligosaccharide enthaltende Lebensmittel), Polysaccharide enthaltende Lebensmittel (Cortinellus shiitake enthaltende Lebensmittel, Mucosaccharide enthaltende Lebensmittel, Protein enthaltende Lebensmittel, Chondroitinsulfat enthaltende Lebensmittel, Ganoderma lucidium enthaltende Lebensmittel (Reishi), Chitin/Chitosan enthaltende Lebensmittel].
  • 3] Mineralstoffe enthaltende Lebensmittel (Kalzium enthaltende Lebensmittel, Luzerne enthaltende Lebensmittel, Pflaumenextrakt enthaltende Lebensmittel, β-Carotin enthaltende Lebensmittel)
  • 4] Fett enthaltende Lebensmittel(Fett, das Vitamin E enthält [Weizen- und Hiobstränenkeimöl, Sojabohnenkeimöl, Reiskeimöl], Eicosapentanonsäure enthaltende Lebensmittel, Sojabohnenlecithin enthaltende Lebensmittel, γ-Linolensäure enthaltende Lebensmittel (Nachtkerzenöl, Borretschöl), Docosahexanonsäure enthaltende Lebensmittel).
  • 5] Protein enthaltende Lebensmittel(Sojabohnenprotein, Kasein, Milchprotein und verarbeitete Karpfen enthaltende Lebensmittel).
  • 6] Taurinaustern, verarbeitete Körbchenmuscheln, verarbeitete grüne Seemuschel enthaltende Lebensmittel.
  • (5) Andere
  • Verarbeitete Weichschildkröten, auf Aminosäurestoffwechselstörung ausgerichtete Lebensmittel, flüssige Lebensmittel (Patientenversorgung).
  • Es ist möglich, es zu Lebensmitteln zu geben, welche eine große Menge der folgenden Saccharide enthalten, aber dabei besteht die Möglichkeit, dass die erfindungsmäßige Wirkung nicht deutlich auftreten kann. Es wird bevorzugt, den Saccharidgehalt des beabsichtigen Lebensmittels auf ein Niveau so gering wie möglich im Falle der Zugabe zu den folgenden Lebensmitteln zu senken.
  • (6) Süßwaren
  • Kuchen, Mousse, (pulverisiertes) Dessert, Eiscreme, Bonbons, Schokolade, Gummibonbons, Kekse, Waffeln, Gelee.
  • (7) Getränke
  • Erfrischungsgetränke (kohlensäurehaltige Getränke, Fruchtsäfte, Sportgetränke, Gesundheitsgetränke), Luxusgetränke (Kaffee, Kakaogetränke, Gerstengetränke), Misosuppe, klare Suppe.
  • In den vorher erwähnten (1) bis (7) ist der Anteil von Touchi bevorzugt 1 bis 85 Gew.-%, mehr bevorzugt 10 bis 60 Gew.-% in den vorher erwähnten Lebensmitteln. Wenn ein Extrakt mit Wasser und/oder Alkohol verwendet wird, kann die Menge 1/10 (des Gewichts) von Touchi selbst sein. Insbesondere, wenn gereinigtes Touchi eingesetzt wird, ist die Menge bevorzug 0,00001 bis 20 Gew.-%, mehr bevorzugt 0,001 bis 10 Gew.-%.
  • Zusätzlich können Zusatzstoffe wie Süßungsmittel, Konservierungsstoffe, Dispersionsmittel und Antioxidationsmittel ebenfalls zugegeben werden, solange sie nicht die erfindungsgemäße Wirkung nachteilig beeinflussen. Ferner können weitere α-Glucosidase- Inhibitoren wie etwa Varienamin und Aminocyclitol ebenfalls eingeschlossen sein.
  • Die vorliegende Erfindung wird im folgenden weiter erläutert. In der folgenden Beschreibung steht, soweit nicht anders angegeben "%" für Gew.-%.
  • BEISPIEL 1
  • Ein kg getrocknetes Touchi wurde in 10 L einer 50%igen wässrigen Ethanollösung für einen Tag eingetaucht. Das erhaltene Exudat wurde unter Verwendung eines Rotationsverdampfers konzentriert und in Wasser gelöst und filtriert. Das erhaltene Filtrat wurde unter reduziertem Druck konzentriert, um einen Extrakt (E-1) zu erhalten.
  • Der Extrakt wurde bis zur Trockenheit unter Verwendung eines Rotationsverdampfers eingedampft, um 19,3 g eines Feststoffs zu erhalten. Der Feststoff wurde in einem Scheidetrichter gebracht und eine Mischung aus Ethylacetat und Wasser (Volumenverhältnis 1/2) in einer fünffach größeren Menge wie die des Feststoffs hinzugegeben. Es wurde eine wässrige Schicht (E-2) und eine Ethylacetatschicht (E-3) getrennt, um die α- Glucosidase inhibierende Aktivität zu untersuchen.
  • Die α-Glucosidase inhibierende Aktivität in jeder Fraktion (E-1, E-2 und E-3) wurde wie im Folgenden beschrieben, bestimmt.
  • (1) Präparation von Di-(tri-)saccharidhydrolase (α- Glucosidase) aus Rattendünndarm
  • Ein gefroren gelagerter Rattendünndarm (Jejunum) wurde aufgetaut und die Mucosa wurde durch Ausdrücken unter Verwendung einer Pinzette gesammelt. Zu der Mucosa wurden 0,1 M Kaliumphosphatpuffer (pH 7,0) mit 5 mM Ethylendiamintetraessigsäure in einer fünffach größeren Menge als die Mucosa hinzugegeben, und die Mischung wurde unter Kühlung homogenisiert. Nachfolgend wurde die Mischung zentrifugiert (4ºC, 21.000 · g, 60 Minuten), zu dem erhaltenen Präzipitat wurde 0,1 M Kaliumphosphatpufferlösung (pH 7,0) mit 1% Triton X-100 in einer Menge zugegeben, dass die Gesamtmenge der Mischung fünfmal größer als das Präzipitat wird, um einen Aufschluss durchzuführen (4ºC, 60 Minuten). Die Mischung wurde ultrazentrifugiert (4ºC, 110.000 · g, 90 Minuten) und der Überstand wurde mit 0,01 M Kaliumphosphatpufferlösung (pH 7,0) dialysiert (4ºC, 24 Stunden), um eine Enzymlösung zu erhalten.
  • (2) Enzym-(α-Glucosidase-) Aktivitätsuntersuchung
  • Die Enzymaktivität wurde unter Verwendung einer kommerziellen Ausrüstung bestimmt.
  • Eine Standardreaktionsmischung (1,0 ml gesamt) enthielt 0,7 ml der 60 mM Substratlösung (Saccharose, gelöst in einer 0,1 M Kaliumphosphatpufferlösung, pH 6,3), 0,2 ml der Testsubstanzlösung (nach vollständiger Entfernung von Wasser und des organischen Lösungsmittels, gefolgt von Lösung in 50%iger wässriger Dimethylsulfoxidlösung) und 0,1 ml der vorherigen Enzymlösung. Die Reaktion erfolgte bei 37ºC für 15 Minuten und wurde dann mit 1,5 ml 2 M Tris-Hydrochlorid-Pufferlösung (pH 7,0) beendet, um eine Testlösung zu erhalten.
  • Nachfolgend wurde in jede Vertiefung einer Mikroplatte mit 96 Vertiefungen 200 ul eines Farbentwicklungsreagens [Glucose B Test Wako, erhältlich von Wako Pure Chemical] und 50 ul der Testlösung (nach Abdestillieren des Lösungsmittels wie etwa Ethylacetat) gefüllt, und die Mischung wurde bei 37ºC für 30 Minuten inkubiert. Dann wurde die Extinktion bei 490 nm unter Verwendung eines Mikroplatten-Lesegerätes (Modell 550, hergestellt durch BIO RAD) gemessen. Als Leerwert wurde die Extinktion einer Probe, welche 0,1 M Kaliumphosphatpuffer (pH 6,3) anstatt der Substratlösung verwendet, wobei der Unterschied zwischen diesen zwei Werten als A4gos angegeben wird. Als Kontrollwert (A490C) wurde die Extinktion einer Probe, die 50 Gew.-% wässrige Dimethylsulfoxidlösung anstelle der Testlösung enthält, verwendet und die α-Glucosidase-Inhibitoraktivität wurde gemäß der folgenden Gleichung berechnet. Die Bestimmung erfolgte zweifach und der Mittelwert wurde als der gemessene Wert verwendet.
  • α-Glucosidase-Inhibitoraktivität (%) = {(A490C - A49S/A490C} · 100
  • Die α-Glucosidase-Inhibitoraktivität jeder Fraktion (E-1, E2-, E-3) ist in Tabelle 2 angegeben.
  • Die in der Tabelle gezeigten Ausbeuten sind relative Werte jeder Fraktion, basierend auf dem Gewicht des Ausgangsmaterials, welches durch Konzentration bis zur Trockenheit erhalten wird. Tabelle 2
  • BEISPIEL 2
  • 30 Gramm von 193 g des getrockneten Konzentrats der Fraktion (E-1), erhalten in Beispiel 1, wurde mit einer Membran unter den folgenden Bedingungen behandelt und eine Membrankonzentrierte Fraktion (E-5) wurde entfernt, um ein Membrandurchtrittsfraktion (E-4) zu erhalten, welche bis zur Trockenheit konzentriert wurde, um 5,8 g eines getrockneten Feststoffs zu erhalten. Das Molekulargewicht der Membrandurchtrittsfraktion (E-4) wurde gemessen und es wurde gefunden, dass die Menge der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 15% war.
  • Ähnlich wie in Beispiel 1 wurde die α-Glucosidase- Inhibitoraktivität gemessen und in Tabelle 3 angegeben. Die in der Tabelle gezeigten Ausbeuten sind relative Werte jeder Fraktion, basierend auf dem Gewicht des Ausgangsmaterials, welche durch Konzentration bis zur Trockenheit erhalten werden.
  • Bedingungen der Membranbehandlung
  • Instrument: REMOLINO (hergestellt von Millipore)
  • Membran: PLBC (Fraktionierungs-Molekulargewicht 3000, hergestellt von Millipore)
  • Druckbedingungen: Unter 5 kg mit Stickstoffgas Tabelle 3
  • Die Menge der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 war in E-1 80%.
  • BEISPIEL 3
  • 30 Gramm von 193 g des getrockneten Konzentrats der in Beispiel 1 erhaltenen Fraktion (E-1) wurde in 100 mL Wasser gelöst und Ethanol wurde zu 95 Vol.-% hinzugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen und ein gebildetes Präzipitat wurde als Fraktion (E-6) durch Filtration entfernt und das Ethanol in dem Filtrat wurde unter reduziertem Druck abdestilliert, um 4,2 g der Fraktion (E-7) zu erhalten. Das Molekulargewicht der Fraktion (E-7) wurde gemessen, wobei gefunden wurde, dass die Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 5% waren.
  • Ähnlich wie in Beispiel 1 wurde die α-Glucosidase- Inhibitoraktivität bestimmt und wird in Tabelle 4 angegeben. Tabelle 4
  • Die in der Tabelle gezeigten Ausbeuten sind relative Werte jeder Fraktion, basierend auf dem Gewicht des Ausgangsmaterials, welches bis zur Trockenheit konzentriert wird.
  • BEISPIEL 4
  • Ein kg getrocknetes Touchi wurde in 10 L Wasser eingetaucht und bei 130ºC für eine Stunde zur Sterilisation erwärmt. Das erhaltene Exsudat wurde filtriert und das Filtrat (E-8) wurde unter Verwendung eines Rotationsverdampfers bis zur Trockenheit konzentriert, um 215 g eines Feststoffs zu erhalten.
  • 30 Gramm der 215 g des getrockneten Konzentrats der Fraktion (E-8) wurde mit einer Membran in der gleichen Art und Weise wie in Beispiel 2 behandelt, um 5,5 g einer Membrandurchtrittsfraktion (E-9) und eine Membrankonzentrierte Fraktion (E-10) zu erhalten. Das Molekulargewicht der Membrandurchtrittsfraktion (E-9) wurde gemessen, um zu finden, dass die Menge der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 9,7% war. Ähnlich wie in Beispiel 1 wurde die α- Glucosidase-Inhibitoraktivität bestimmt, und wird in Tabelle 5 angegeben.
  • Die in der Tabelle gezeigten Ausbeuten sind relative Werte jeder Fraktion, basierend auf dem Gewicht des Ausgangsmaterials, welches bis zur Trockenheit konzentriert wird. Tabelle 5
  • Da der α-Glucosidase-Inhibitor der vorliegenden Erfindung Touchi als aktiven Bestandteil enthält, kann er einfach aufgenommen werden und weist eine hohe Inhibitoraktivität auf.
  • INDUSTRIELLE ANWENDBARKEIT
  • Es wird ein α-Glucosidase-Inhibitor zur Verfügung gestellt, welcher einfach aufgenommen werden kann und eine hohe Inhibitoraktivität aufweist. Da der erfindungsgemäße α-Glucosidase-Inhibitor Touchi als einen aktiven Bestandteil enthält, kann er einfach aufgenommen werden und weist eine hohe Inhibitoraktivität auf. Da er Touchi (chinesische fermentierte Sojabohnen) als aktiven Bestandteil enthält, kann dieser α-Glucosidase-Inhibitor leicht verwendet werden und zeigt eine hohe Inhibitoraktivität.
  • Ein α-Glucosidase-Inhibitor, der einfach verwendet werden kann, zeigt eine hohe α-Glucosidase-Inhibitoraktivität.
  • Da er Touchi (chinesische fermentierte Sojabohnen) als aktiven Bestandteil enthält, kann dieser α-Glucosidase- Inhibitor einfach verwendet werden und zeigt eine hohe Inhibitoraktivität.

Claims (3)

1. α-Glucosidase-Inhibitor mit Touchi als aktiven Bestandteil.
2. α-Glucosidase-Inhibitor nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass ein Extrakt, erhalten durch die Extraktion von Touchi mit Wasser und/oder Alkohol, als Touchi verwendet wird.
3. α-Glucosidase-Inhibitor nach Anspruch 2, wobei die Menge der Bestandteile mit einem Molekulargewicht von wenigstens 3000 in dem durch die Extraktion mit Wasser und/oder Alkohol erhaltenen Extrakt höchstens 20 Gew.-% ist.
DE69903911T 1998-08-26 1999-08-20 alpha-GLUCOSIDASE HEMMER Expired - Lifetime DE69903911T2 (de)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP10239326A JP2000072687A (ja) 1998-08-26 1998-08-26 α−グルコシダーゼ阻害剤
JP18763499A JP3911366B2 (ja) 1999-07-01 1999-07-01 α−グルコシダーゼ阻害剤
PCT/JP1999/004466 WO2000012109A1 (en) 1998-08-26 1999-08-20 α-GLUCOSIDASE INHIBITOR

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE69903911D1 DE69903911D1 (de) 2002-12-19
DE69903911T2 true DE69903911T2 (de) 2003-08-28

Family

ID=26504484

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE69903911T Expired - Lifetime DE69903911T2 (de) 1998-08-26 1999-08-20 alpha-GLUCOSIDASE HEMMER

Country Status (5)

Country Link
US (1) US6299911B1 (de)
EP (1) EP1025851B1 (de)
CN (1) CN1170550C (de)
DE (1) DE69903911T2 (de)
WO (1) WO2000012109A1 (de)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7108869B2 (en) * 2002-11-07 2006-09-19 Access Business Group International Llc Nutritional supplement containing alpha-glucosidase and alpha-amylase inhibitors
CN101371869B (zh) * 2007-08-24 2011-07-20 北京北大维信生物科技有限公司 一种来源于纳豆的α-葡萄糖苷酶抑制剂及其制备方法
CN101376655B (zh) * 2008-10-11 2011-04-20 中国海洋大学 Penicillazine衍生物及其制备方法与应用
EP2462943A4 (de) * 2009-08-03 2014-11-05 Kaneka Corp Dipeptidylpeptidase-4-hemmer
CN103169075B (zh) * 2011-12-21 2015-06-24 光明乳业股份有限公司 由植物乳杆菌ST-Ⅲ发酵的发酵豆制品和α-葡萄糖苷酶抑制剂
CN108684420A (zh) * 2018-05-21 2018-10-23 贵州曌梅果蔬种植有限公司 一种降低樱桃果实中氰甙含量的种植方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5885632A (en) * 1993-12-14 1999-03-23 Nichimo Co., Ltd. Process for preparing a product from a pulse crop as a starting material and a food containing the product prepared from a pulse crop as a starting material
JPH0965836A (ja) * 1995-08-31 1997-03-11 Hokuren Federation Of Agricult Coop:The α−グルコシダーゼ阻害剤、それを含む糖組成物、甘味料、食品及び飼料
EP0834262A4 (de) * 1996-04-10 1999-03-24 Nichimo Kk Stoff mit einer gesundheitsverbessernden komponente und verfahren zu seiner herstellung

Also Published As

Publication number Publication date
WO2000012109A1 (en) 2000-03-09
EP1025851A4 (de) 2001-07-04
EP1025851A1 (de) 2000-08-09
US6299911B1 (en) 2001-10-09
CN1275083A (zh) 2000-11-29
CN1170550C (zh) 2004-10-13
DE69903911D1 (de) 2002-12-19
EP1025851B1 (de) 2002-11-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69101080T2 (de) Diätfaser, Verfahren und physiologische aktive Zusammensetzung, die diese als aktives Ingredient enhält.
AU2005283330B2 (en) Carbohydrase inhibitors derived from chestnut and use thereof
WO2006003107A1 (de) Verwendung von äpfelsäureglucosiden als geschmacksstoffe
US8927033B2 (en) Hyperlipemia-ameliorating agent, anemia-ameliorating composition, uric-acid-level-reducing composition, and food or beverage
KR101974975B1 (ko) 생체 대사 파라미터를 개선하기 위한 조성물
DE60218064T2 (de) Neues peptid mit angiotensinkonvertase hemmender wirkung
US20070264368A1 (en) Carbohydrase inhibitors derived from fagaceous plants and use thereof
US20100247638A1 (en) organoleptically improved dietary fiber composition and a process thereof (teestar)
DE60038350T2 (de) Angiotensin-Converting-Enzyme-Hemmer
JP3557711B2 (ja) 脂質代謝改善に有効な食品及び製法
DE69903911T2 (de) alpha-GLUCOSIDASE HEMMER
JP4037035B2 (ja) 風味改善剤
EP2022503A1 (de) Verkapselte Vacciniumextrakte mit ausgewogener Magen-Darm-Freisetzung
US9737583B2 (en) Composition for prevention or treatment of acute renal failure including herbal extract or fraction thereof as active ingredient
WO2007007994A1 (en) Food composition for improving liver function comprising a lonicera caerulea l. var. edulis extract
DE69008050T2 (de) Ein physiologisch aktiver, von Malz herkömmlicher Stoff und Verfahren zu seiner Herstellung.
KR20220147428A (ko) 밀싹 추출물을 포함하는 근감소증 예방, 개선 또는 치료용 조성물
JP3911366B2 (ja) α−グルコシダーゼ阻害剤
JP3676637B2 (ja) α−グルコシダーゼ阻害剤の製造法
US20230021051A1 (en) Composition Containing Black Ginger Extract and Composition for Oral Administration
JP2002255843A (ja) 免疫賦活用組成物
JP2005179279A (ja) 腸内機能改善剤
JPH11137211A (ja) 風味の改良されたギムネマシルベスタエキスおよびそ の製造法
KR20060111341A (ko) 1-데옥시노지리마이신을 포함하는 비만 예방 또는 치료용조성물
KR20220120510A (ko) 황기 추출물로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 함유하는 근력강화, 근육증강, 근육분화, 근육재생, 근감소 또는 근피로의 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
8364 No opposition during term of opposition
8327 Change in the person/name/address of the patent owner

Owner name: NIPPON SUPPLEMENT, INC., OSAKA, JP