DE69616088T2 - Produkt aus von beta-cesein wesentlich freier milch aus nicht-menschlichen sängetieren und dessen verwendung - Google Patents

Produkt aus von beta-cesein wesentlich freier milch aus nicht-menschlichen sängetieren und dessen verwendung

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DE69616088T2
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    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/19—Dairy proteins
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
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    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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Description

    Bereich der Erfindung
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Produkt, abgeleitet von Milch, die im wesentlichen frei von Beta Casein ist, von nicht-menschlichen Säugern. Die Erfindung betrifft weiterhin die Verwendung eines solchen Produkts bei der Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, besonders im Hinblick auf seine Anwendung in Bezug auf eine Ernährung, insbesondere für die frühe Kindheit.
    • Stand der Technik
  • Die Technik zum Erhalt von Produkten, insbesondere Nahrungsmittelprodukten, für die frühe Kindheit ist gut bekannt, beginnend von nicht-menschlicher Milch, wie z. B. Kuh-, Schaf- und Ziegenmilch. Die Basiskomponente von Milch ist durch Casein gekennzeichnet, das in seiner Basis-Terminologie eine Gruppe von Proteinen darstellt, die durch Milchpräzipitation bei saurem pH und bis zur Raumtemperatur, spezifisch pH 4,6 und 20ºC erhältlich sind. Caseine stellen ungefähr 80% des gesamten Kuhmilchproteins und 40% p/v der menschlichen Milch dar. Casein kann in drei Hauptgruppen unterteilt werden: Alpha, Beta und Kappa. Es existiert auch eine vierte Gruppe, die durch Gamma-Casein repräsentiert wird, das von Beta- Casein abgeleitet ist, im Anschluß an die Entfernung der ersten zweiundzwanzig Aminosäuren. Daher wird für die vorliegende Erfindung Gamma-Casein als ein Teil von Beta-Casein betrachtet werden.
  • Beta-Casein stellt ungefähr 70% p/v von allem Casein, das in der menschlichen Milch vorhanden ist, dar, wohingegen es in Kuhmilch ungefähr 25% p/v darstellt. Von Rinder-Beta- Casein sind verschiedene genetische Varianten bekannt und wurden charakterisiert, die A1, A2, A3, B, C, D und E einschließen. Für die industrielle Herstellung von Milch wurde hauptsächlich die genetische Variante von Milch A1 bevorzugt, um die Menge von produzierter Milch zu erhöhen. Diese Variante, die mehr Proteine als andere enthält, wurde von verschiedenen ausgewählten Tieren erhalten, insbesondere Kühen. Durch Gendatensequenzanalyse wurde die Aminosäuresequenz in Position 63-68 für Kuh-Beta-Casein A1 identifiziert, die der 54-59 Sequenz von menschlichem Beta-Casein entspricht. Eine ähnliche Situation wurde im Hinblick auf die Variante A2 entdeckt. Beide Varianten A1 und A2 von Beta Casein zeigen ebenfalls Sequenzhomologie in dieser Region (mindestens 90%) mit einem spezifischen Protein von Insulin-produzierenden Zellen in der Bauchspeicheldrüse (GLUT2). Gemäß dem Erfinder rufen die Sequenz 63-68 von A1 und A2 Beta Casein und, allgemeiner, die analogen Sequenzen von anderen Typen von Casein, wie zum Beispiel A1, A2, A3, B, C, D und E eine Immunantwort über die Produktion von Anti-Beta-Casein-Antikörpern und Lymphocyten hervor, die solche Sequenzen erkennen. Für Neugeborene und Kinder in den ersten Lebensmonaten kann eine Ernährung, die diese immunogenen Caseine enthält, unter Umständen eine spezifische Immunantwort gegenüber GLUT2 in den Insulin-produzierenden Zellen der Bauchspeicheldrüse durch einen Mechanismus von molekularen Mimikri mit der homologen Sequenz von Beta Casein induzieren. Auf der Basis von solch einer Hypothese wurde eine Studie durchgeführt, die darauf abzielte, Rindermilchprodukte zu erhalten, die frei von nicht- menschlichem Beta Casein sind und, genauer, Beta Casein enthaltende Produkte von nicht- menschlichen Säugern, die nicht dazu führen, immunogen im Hinblick auf das GLUT2- Protein aufgrund des Fehlens von solcher Sequenzhomologie zu sein.
    • Zusammenfassung der Erfindung
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein Produkt, abgeleitet von Milch oder Milch selber, frei von nicht-menschlichem Beta Casein mit den immunogen Charakteristika, die im Stand der Technik angegeben sind.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist ein von Milch-abstammendes Produkt oder Milch selber, das mindestens ein modifiziertes Beta Casein von nicht-menschlichen Säugern ohne die oben genannte immunogene Charakteristik umfaßt.
  • Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Verwendung eines solchen Produkts in Bezug auf die Ernährung.
  • Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Verwendung eines Produkts aus Milch oder Milch selber, frei von nicht-menschlichem Säuger Beta Casein, um ein Nahrungsmittel für die frühkindliche Diät zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes zu erhalten.
  • Weitere Aufgaben der Erfindung werden von der genauen Beschreibung der Erfindung ersichtlich werden.
    • Genaue Beschreibung der Erfindung
  • In der beigefügten Beschreibung sind die gemäß der Erfindung wichtigen Aminosäuresequenzen unterstrichen.
  • Die Aminosäuresequenz von Interesse für die vorliegende Erfindung ist im folgenden beschrieben. Wie oben angegeben, besteht gemäß dem Erfinder eine Korrelation zwischen Aussetzen gegenüber Kuhmilch und der Entwicklung von Insulin-abhängiger Diabetes aufgrund von molokularem Mimikri zwischen den Aminosäuresequenzen von Beta Casein A1 und A2 und einer spezifischen Sequenz des GLUT2-Proteins, das in den Insulin-produzierenden Zellen gefunden wird. Solch eine Sequenz wurde als wie folgt identifiziert:
  • Pro-Gly-Pro-Ile-His-Asn (wobei die unterstrichene Sequenz SEQ ID NO: 1 ist) für das A1 Beta Casein, inseriert in das größere Fragment: Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile- His-Asn (SEQ ID NO: 3).
  • Wie bereits angegeben, ist eine solche Sequenz ebenfalls in Gamma Casein vorhanden. Andere Sequenzen, die immunogen Peptiden von Beta Casein entsprechen die unterschiedlich von den oben genannten sind, werden als Beispiele angegeben. Kuh Beta Casein A2 von bos taurus (63-68), Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn (wobei die unterstrichene Sequenz SEQ ID NO: 2 ist), inseriert in das größere Fragment: Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn (SEQ ID NO: 4).
  • Beta Casein von bos indicus (63-68): Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn (unterstrichene Sequenz SEQ ID NO: 2).
  • Im Vergleich dazu weist menschliches Beta Casein die folgende Sequenz auf (48-59): Ser- Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Val-Gly-Pro-Ile-Pro-Tyr (SEQ ID NO: 6). Der für die vorliegende Erfindung relevante Peptidteil wurde als (54-59): Val-Gly-Pro-Ile-Pro-Tyr (wobei die unterstrichene Sequenz SEQ ID NO: 5 ist) identifiziert. Die Peptidsequenzen von GLUT2, dem Glukosetransporter innerhalb von Insulin-produzierenden Betazellen in der Bauchspeicheldrüse sind wie folgt:
  • (409-420) Ser-Phe-Phe-Glu-Ile-Gly-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Trp
  • (412-423) Glu-Ile-Gly-Pro-Glv-Pro-Ile-Pro-Trp-Phe-Met-Val
  • (414-425) Gly-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Trp-Phe-Met-Val-Ala-Glu
  • Der Erfinder schlägt vor, daß die Sequenz von A1, B und C Beta Casein und Gamma Casein, Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) und die größeren Fragmente, die diese enthalten, wie zum Beispiel die Sequenzen von Beta Casein A2, A3 und E, Pro-Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 2) für die Induktion einer Immunantwort gegen Beta Casein verantwortlich sind, die durch Kreuzreaktivität gegen die homologen Sequenzen von GLUT2 gerichtet wäre, was Schaden gegenüber den Zellen verursacht, die Insulin produzieren.
  • Daher wäre es ein präventiver Ansatz gegen Insulin-abhängige Diabetes, Milch oder im allgemeinen ein Lebensmittelprodukt herzustellen, das nicht-immunogenes Beta Casein umfaßt, zur Verabreichung in Diäten, insbesondere für Neugeborene und in der frühen Kindheit.
  • Alle Caseine, die nicht die Sequenz Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) oder Pro-Gly-Pro- Ile-Pro (SEQ ID NO: 2) enthalten, werden als nichtpathogen betrachtet und können daher dazu verwendet werden, um ein diätetisches Lebensmittel in Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung herzustellen:
  • - einige oder alle Aminosäuren, die in der oben angegebenen Sequenz vorhanden sind, werden modifiziert;
  • - Beta Casein enthält keine solche Sequenz (z. B. sie wurde entfernt)
  • - Beta Casein wird modifiziert, indem eine solche Sequenz mit einer Sequenz von menschlichem Beta Casein substituiert wird;
  • Alle Modifikationen können durch die Anwendung von gut bekannter Technik von genetischem Engineering und der klassischen biologischen Technik von Kreuzung-Selektion, wie in Patent WO 93/04171 beschrieben, gemacht werden.
  • Die erhaltene Milch, die modifiziertes Casein, wie oben angegeben, umfaßt, kann als solche verabreicht werden oder kann mit bekannten Verfahren behandelt werden, wie, das/die (das) beteiligte(n) Casein(e) abgetrennt werden kann/können und dazu verwendet werden, Lebensmittel und pharmazeutische Produkte herzustellen.
  • Insbesondere können die Produkte, die ein solches Casein enthalten, zur Verabreichung in der frühen Kindheit und später als eine Diät zur Prävention von Insulin-abhängiger Diabetes verwendet werden.
  • Die Nahrungsmittelprodukte der Erfindung können zum Beispiel, Pasta, Milch und Milchabgeleitete Produkte und Proteine sein, so wie diejenigen, die zu Nahrungsmitteln hinzugefügt werden, wovon alle bereits auf dem Markt sind, wobei die Modifikation die Substitution der immunogenen Caseine mit den Caseinen der vorliegenden Erfindung ist.
  • Ebenfalls Teil der vorliegenden Erfindung sind pflanzliche und/oder synthetische Proteine, wie zum Beispiel diejenigen, die von Soja abgeleitet sind. Gemäß der Lehre der Erfindung ist es möglich, ein pharmazeutisches oder Nahrungsmittelprodukt herzustellen, insbesondere für die frühe Kindheit, das frei von Beta Casein mit der Aminosäuresequenz Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) oder Pro-Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 2) ist. Es ist ebenfalls möglich, ein Nahrungsmittelprodukt oder eine Milch gemäß der folgenden Alternativen herzustellen:
  • - frei von Beta Casein, umfassend die Aminosäuresequenz Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 7) oder Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 8) und integriert mit Peptiden, die durch die Hydrolyse von tierischen, pflanzlichen und/oder synthetischen Proteinen abgeleitet sind und denen diese oben angegebenen Sequenzen fehlen und Gemischen davon (FR 86-00325, WO 94/06306, WO p (02539));
  • - frei von Beta Casein, umfassend die Aminosäuresequenz Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 7) oder Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 8) und integriert mit Peptiden, die von der Hydrolyse von tierischen und/oder pflanzlichen und/oder synthetischen Proteinen abstammen, denen solche Sequenzen fehlen und Gemischen davon;
  • - worin Beta Casein die Aminosäuresequenz Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 7) oder Gly-Pro- Ile-Pro (SEQ ID NO: 8) fehlt, wobei es von Tierarten erhalten wurde, die genetische Proteine mit solchen Sequenzen nicht herstellen;
  • - Milch der natürlicherweise Beta Casein fehlt, hergestellt durch genetisch modifizierte Tiere gemäß Patent WO 93/04171;
  • - Milch umfassend menschliches Beta Casein, erhalten von genetisch manipulierten Mikroorganismen oder Tieren, wie zum Beispiel denen, die in dem oben genannten Patent beschrieben sind.
  • Die Proteinfraktionen können durch chemisch-physikalische Behandlungen von Milch abgeleitet sein und von lyophylisiertem Casein, zum Beispiel durch differentielle Löslichkeit, Flüssigkeit-Flüssigkeitsextraktion, Membrantrennung, chromatographische Trennung wie beschrieben in Patenten FR 86-00325 und WO 92/00017.
  • Die Integrationen können durch die Verwendung von rekombinantem Beta Casein, das mit einem der gut-bekannten Klonierungsverfahren hergestellt wurde, unter der Verwendung von Hefe, Bakterien, Pilzen oder transgenen Tieren, wie zum Beispiel denjenigen beschrieben in Patent WO 93/04171, durchgeführt werden.
  • Ein Verfahren zur Entfernung von Beta Casein aus Milch ist das chromatographische Verfahren, wie unten beschrieben.
  • Mittels eines solchen Verfahrens wird das Beta Casein mittels Chromatographie in zwei Schritten abgetrennt, ausgehend von saurem Casein, wobei die verbleibenden Fraktionen von Alpha und Kappa Casein erhalten werden.
  • Das Verfahren kann unter der Verwendung des bereits in dem Gebiet erhältlichen Wissens optimiert werden. Solch ein Verfahren schließt die Verwendung eines Ionenaustauschharzes als Basisphase, zum Beispiel Sepharose® von Pharmacia ein, mit der Konzentration ebenfalls in Säulen. Die mobile Phase wird durch Puffer A gebildet:
  • - Natriumacetat mit Konzentration von nicht weniger als 10 mM;
  • - Harnstoff bei Konzentration von nicht weniger als 2 M;
  • - pH zwischen 5 und 6.
  • Das saure Casein kann in Puffer A bei pH von nicht weniger als 6 gelöst werden, mit der Zugabe eines spezifischen reduzierenden Mittels, DTT, (Dithiothreitol). Das Gemisch sollte für 24 Stunden stehengelassen werden, auf einen pH zwischen 5 und 6 eingestellt werden und in Säulen plaziert werden. Die Beta Casein Fraktion interagiert nicht mit dem Harz und wird in QCM NaCl eluiert. Es ist daher nicht nötig, Phasen von zunehmender Ionenkonzentration durchzuführen, unter der Berücksichtigung, daß der vorliegende Prozeß lediglich eine einfache Abtrennung von Beta Casein von den anderen Fraktionen einschließt, das durch Elution mit Puffer B in isokratischer Form gesammelt wird:
  • - Natriumacetat bei Konzentrationen von nicht weniger als 10 mM;
  • - Harnstoff bei Konzentrationen von nicht weniger als 2M;
  • - 0,8 M NaCl;
  • - pH zwischen 5 und 6.
  • Die Fraktionen werden später dialfiltriert, um Harnstoff und andere Salze zu entfernen; nach Konzentrationen werden die Caseine durch Säurepräzipitation gesammelt und das erhaltene nasse Produkt wird lyophilisiert.
    • Kurze Beschreibung der Zeichnungen
  • Fig. 1 zeigt das Chromatogramm in Bezug auf die Ausgangsbeladung von Beispiel 1;
  • Fig. 2 zeigt einen chromatographischen Peack, der Beta Casein betrifft;
  • Fig. 3 betrifft das Fehlen des Beta Caseins in dem Chromatogramm.
  • Die folgenden Beispiele sind als eine solche Technik verdeutlichend anzusehen, daher sollten sie nicht als eine Begrenzung des Bereichs der vorliegenden Erfindung betrachtet werden.
    • Beispiel 1:
  • Trennung von Beta Casein von saurem Casein und Sammeln der verbleibenden Alpha und Kappa Caseinfraktionen.
    • Präparation
  • - 200 g saures Casein + 3000 ml Puffer C: 20 mM Natriumacetat, 4 M Harnstoff, 10 mM (Dithiothreitol) DTT, pH 7.
  • Das Casein sollte langsam in dem Puffer gelöst werden, wobei er auf pH 7 mit 2M NaOH bei jeder Zugabe gehalten wird.
  • Unter Rühren bei 5ºC für ungefähr 12 Stunden belassen.
  • Filtriere die Lösung in Vor-Filter Millex AP-50 (Millipore)
  • Wasche den Vor-Filter mit 1000 ml Puffer C und sammle.
  • Stelle die Beladung (4000 ml) auf pH 5,5 mit HCl 6M ein und stelle die Ionenstärke (2,2 mS) auf 4,5 mS ein.
    • Präparations-Chromatographie
  • - FPLC Waters 600 Controller
  • - Meßgerät: Perkin Elmer UV/VIS Spectophotometer Lambda 3B 280 nm
  • - Säule: XK 50 Pharmacia (Maximaldruck 3 bar) 5 cm, Höhe 100 cm
  • - Harz: S-Sepharose Pharmacia Höhe 85 cm, Volumen 1670 ml
  • - Eluenten:
  • Puffer A Natriumacetat 20 mM
  • Harnstoff 4 M
  • pH 5,5, Ionenstärke 1,5 mS
  • Puffer B Natriumacetat 20 mM
  • Harnstoff 4M
  • pH 5,5
  • Natriumchlorid 1 M Ionenstärke 57,1 mS
  • Alle Puffer werden unter Verwendung eines Millex Vor-Filter AP 50 in Serie mit Filter 0,45 um Millipak 20 (Millipore) gebunden, filtriert.
  • - Temperatur: Raumtemperatur
  • - Konditionierung: 8000 ml
  • Puffer A: 97% Puffer B: 3% Ionenstärkemix: 4,5 mS
  • Fluß: 30 ml/min P = 42 PSI
  • Zeit: 4 Stunden, 25 Minuten
  • - Beladung: 200 g saures Casein, gelöst in Puffer C (Gesamtvolumen 4000 ml)
  • Fluß: 20 ml/min P = 50 PSI
  • Zeit: 3 Stunden, 20 Minuten
  • - Elution: Erste Phase (isokratisch) 8000 ml
  • Puffer A: 97% Puffer B: 3%
  • Fluß: 30 ml/min P = 42 PSI
  • Zeit: 4 Stunden, 25 Minuten
  • Zweite Phase (isokratisch) 9000 ml
  • Puffer A: 20% Puffer B: 80%
  • Fluß: 30 ml/min P = 42 PSI
  • Zeit: 5 Stunden
    • Beispiel 2 - Kontrolltest
  • Eine Menge des Produkts aus Beispiel 1 wird durch Chromatographie getestet, um das Fehlen von Beta Casein in dem Isokratischen der zweiten Phase zu untersuchen. Solches Fehlen wird, wie durch das Chromatogramm von Fig. 3 gezeigt, bestätigt. Als Vergleich wird in Fig. 1 das Chromatogramm gezeigt, das sich auf die Ausgangsbeladung bezieht, wohingegen in Fig. 2 der Peak dargestellt ist, der die Anwesenheit von Beta Casein, das nur von der Elution der ersten Phase abstammt, betrifft.
    • Analytische Chromatographie
  • - HPLC Perkin Elmer Biocompatible Binäre Pumpe 250
  • - Meßgerät: Perkin Elmer LC95 280 nm
  • - Säule: Mono S HR 5/5 Pharmacia
  • - Schleife: 100 ul
  • - Eluent: Puffer A* Natriumacetat 20 mM
  • Harnstoff 6 M
  • pH 5
  • Puffer B* Natriumacetat 20 mM
  • Harnstoff 6 M
  • Natriumchlorid 1 M
  • pH 5
  • - Temperatur: Raumtemperatur
  • - Fluß: 1 ml/min
  • - Konditionierung: 8'00" Puffer A* 100% Puffer B* 0%
  • - Elution: Gradient 5'00" Puffer B* 50% (Zunahme von B* 1% min)
    • Beispiel 3
  • Das Produkt von Beispiel 1 wurde durch das folgende Verfahren der Diafiltration von Harnstoff gereinigt.
  • - Ultrafiltration S.G.I.
  • - Zellulosemembran S-10 10.000 Da Amicon
  • - Dialysepuffer: demineralisiertes Wasser
  • Natriumacetat 10 mM pH?7
  • Ionenstärke 0,8 mS
  • Gesamtvolumen 250 l (5 Waschungen)
  • - Durchfluß: 32 + 37 l/h
  • - Temperatur: 10ºC
  • - Produktkonzentration 50 l auf 20 l
  • Das Produkt wurde wie folgt getestet, um das Fehlen von Harnstoff zu überprüfen:
  • Harnstofftest:
  • - UV-Verfahren (Boehringer Mannheim)
  • - Spektrophotometer: Lambda 3B 340 nm (Perkin Elmer)
  • Lösung 1 = Triethanolaminpuffer, pH 8,0 Oxoglutarat, NADH
  • Lösung 2 = Urase
  • Lösung 3 = Dehydrogenase Glutamat
  • Die Lyophilisierung wird mit dem harnstofffreien Produkt, unter der Verwendung einer Christ Model Beta 1-16 Ausrüstung, durchgeführt.
    • SEQUENZPROTOKOLL
  • (1) ALLGEMEINE INFORMATION
  • (i) ANMELDER:
  • (A) NAME: BIOSISTEMA di Pier Luigi Sarapani & C. Sas
  • (B) STRASSE: Via Per Luco die Marsi
  • (C) STADT: Avezzano
  • (D) STAAT: L'Aquila
  • (E) LAND: Italien
  • (F) POSTLEITZAHL: 67051
  • (ii) TITEL DER ERFINDUNG: Produkt, abgeleitet von Milch, im wesentlichen frei von Beta Casein von nicht-menschlichen Säugern und dessen Verwendung.
  • (iii) ZAHL DER SEQUENZEN: 8
  • (iv) COMPUTERLESBARE FORM:
  • (A) MEDIUMTYP: Floppy disk
  • (B) COMPUTER: IBM PC compatible
  • (C) BETRIEBSSYSTEM: PC-DOS/MS-DOS
  • (D) SOFTWARE: PatentIn Release #1.0, Version #1.25 (EPO)
  • (vi) DATEN DER VORHERIGEN ANMELDUNG
  • (A) ANMELDENUMMER: IT RM 95 A 000850
  • (B) ANMELDETAG: 27. Dezember 1995
  • (vi) DATEN DER LAUFENDEN ANMELDUNG
  • (A) ANMELDUNGSNUMMER:
  • (B) ANMELDETAG:
  • (C) KLASSIFIKATION:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 1:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 5 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 1:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 2:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 5 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 2:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 3:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 12 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 3:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 4:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 12 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 4:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 5:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 5 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 5:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 6:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 12 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 6:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 7:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 4 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 7:
  • (2) INFORMATION FÜR SEQ ID NO: 8:
  • (i) SEQUENZCHARAKTERISTIKA:
  • (A) LÄNGE: 4 Aminosäuren
  • (B) TYP: Aminosäure
  • (C) STRANGFORM: Einzel
  • (ii) MOLEKÜLTYP: Peptid
  • (xi) BESCHREIBUNG DER SEQUENZ: SEQ ID NO: 8:

Claims (14)

1. Diätetische oder pharmazeutische Produkte abgeleitet von Milch oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, frei von nicht- menschlichem Beta-Casein.
2. Diätetische oder pharmazeutische Produkte abgeleitet von Milch oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, die frei von Beta-Casein aus nicht-menschlichen Säugetieren sind, das molekulares Mimikry mit dem Protein GLUT 2 zeigt und daher immunogenisch ist, und zu welchem nicht- immunogenische Beta-Caseine, ausgewählt von den tierischen, pflanzlichen und/oder synthetischen und Mischungen davon hinzugefügt sind, wobei die Caseine nicht die Sequenz: Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) und Pro-Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 2) umfassen oder die Sequenzen Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-His-Asn (SEQ ID NO: 3) und Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn (SEQ ID NO: 4), die diese umfassen.
3. Diätetische oder pharmazeutische Produkte abgeleitet von Milch oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, frei von Caseinen umfassend die Sequenz: Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) und Pro-Gly-Pro-Ile- Pro (SEQ ID NO: 2) oder die Sequenzen: Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-His- Asn (SEQ ID NO: 3) und Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn (SEQ ID NO: 4), die sie umfassen.
4. Diätetische oder pharmazeutische Produkte abgeleitet von Milch, oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, umfassend Caseine, die nicht die Sequenz präsentieren: Pro-Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 1) und Pro-Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 2), wobei die Caseine ausgewählt sind aus solchen in denen:
- einige oder alle der Aminosäuren in den Sequenzen modifiziert sind;
- die Sequenzen entfernt sind;
- die Sequenzen ersetzt sind durch die homologe Sequenz in menschlichem Beta-Casein und verwandten Gemischen.
5. Diätetische oder pharmazeutische Produkte abgeleitet von Milch oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, umfassend Caseine, die die Sequenz Val-Glu-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 5) präsentieren oder eine längere Sequenz, die sie umfaßt: Ser-Leu-Val-Tyr-Pro-Phe-Val-Glu-Pro-Ile-Pro-Tyr (SEQ ID NO: 6).
6. Produkt nach Ansprüchen 1-5 und integriert mit pflanzlichen, tierischen und/oder synthetischen Beta-Caseinen mit Peptiden, die aus der Hydrolyse von tierischen, pflanzlichen und/oder synthetischen Proteinen erhalten sind, denen die Sequenz Pro-Gly-Pro-Ile- His (SEQ-ID NO: 1) oder Pro-Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 2) und Gemischen davon fehlt, zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes.
7. Diätetische oder pharmazeutische Produkte erhalten von Milch, oder Milch selber zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes, umfassend Caseine, in denen Beta-Casein die Aminosäuresequenz Gly-Pro-Ile-His (SEQ ID NO: 7) oder Gly-Pro-Ile-Pro (SEQ ID NO: 8) fehlt, weil es durch Tierarten hergestellt ist, die genetisch keine Proteine mit solch einer Sequenz produzieren.
8. Milch, der natürlicherweise Beta-Casein fehlt, hergestellt durch genetisch veränderte Tiere, zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes.
9. Milch, die menschliches Beta-Casein enthält, erhalten von genetisch veränderten Mikroorganismen oder Tieren, zur Verwendung in Diäten zur Vorbeugung von Insulinabhängiger Diabetes.
10. Verfahren zum Erhalt eines diätetischen Produktes nach Anspruch 4, wobei die Aminosäuresequenzen durch Anwendung von Techniken so wie genetischem Engineering und biologischer Kreuz-Selektion modifiziert werden.
11. Verwendung von Beta-Casein oder Peptidfragmenten, die keine molekulare Mimikry mit dem Protein GLUT 2 zeigen, zur Herstellung von diätetischen oder pharmazeutischen Produkten zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes.
12. Verwendung von Beta-Casein oder Peptidfragmenten nach Anspruch 11 zur Herstellung eines diätetischen Nahrungsmittels oder pharmazeutischen Produkts zur Vorbeugung von Insulin-abhängiger Diabetes.
13. Verwendung von Produkten nach einem der Ansprüche 4-7 zur Herstellung eines diätetischen Nahrungsmittels oder pharmazeutischen Produkts zur Vorbeugung von Insulinabhängiger Diabetes.
14. Verwendung von Milch nach einem der Ansprüche 8-9 zur Herstellung eines diätetischen Nahrungsmittels oder pharmazeutischen Produkts zur Vorbeugung von Insulinabhängiger Diabetes.
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