DE69200766T2

DE69200766T2 - Phenylamidinderivate als plättchenaggregationsinhibitoren.

Info

Publication number: DE69200766T2
Application number: DE69200766T
Authority: DE
Inventors: Robert Bruce Northbrook Il 60062 Garland; Masateru Northbrook Il 60062 Miyano; Lori Ann Des Plaines Il 60018 Schretzman; Jeffery Alan Skokie Il 60076 Zablocki
Original assignee: GD Searle LLC
Current assignee: GD Searle LLC
Priority date: 1991-03-06
Filing date: 1992-03-05
Publication date: 1995-05-04
Anticipated expiration: 2012-03-06
Also published as: CA2099994A1; MX9203551A; DE69200766D1; EP0502536B1; ES2065182T3; EP0502536A1; IE920710A1; KR100210206B1; CA2099994C; AU662142B2; JPH06505497A; WO1992015607A3; EP0574545B1; US5481021A; JP3258659B2; EP0574545A1; DK0574545T3; WO1992015607A2; AU1666692A; ATE114670T1

Description

Gebiet der Erfindung:

Diese Anmeldung ist eine CIP der US 5er. No. 07/665,119, eingereicht am 6. März 1991, derzeit anhängig.
Dies ist eine Erfindung auf dem Gebiet der Therapeutika für Säuger und betrifft Verbindungen zur Behandlung von Störungen, wie kardiovaskulären Störungen, bei Säugern. Von besonderem Interesse ist eine Klasse von Phenylamidinderivaten, die als Inhibitoren der Plättchenaggregation nützlich sind.

Hintergrund der Erfindung:

Fibrinogen ist ein Glycoprotein, das als normale Komponente in Blutplasma vorhanden ist. Es nimmt an der Plättchenaggregation und an der Fibrinbildung im Blutgerinnungsmechanismus teil.
Blutplättchen sind zelluläre Elemente, die sich in Vollblut finden und auch an der Blutgerinnung teilnehmen. Die Fibrinogenbindung an Plättchen ist für die normale Plättchenfunktion im Blutgerinnungsmechanismus wesentlich. Wenn ein Blutgefäß verletzt wird, wird die Plättchenbindung an Fibrinogen die Aggregation initiieren und einen Thrombus bilden. Die Wechselwirkung von Fibrinogen mit Plättchen erfolgt durch einen Membranglycoproteinkomplex, bekannt als gpIIb/IIIa; das ist ein wichtiges Merkmal der Plättchenfunktion. Inhibitoren dieser Wechselwirkung sind für die Modulierung der Plättchenthrombusbildung nützlich.
Es ist auch bekannt, daß ein anderes großes Glycoprotein mit dem Namen Fibronectin, das ein wichtiges extrazelluläres Matrixprotein ist, mit Fibrinogen und Fibrin in Wechselwirkung tritt, und mit anderen Strukturmolekülen wie Actin, Collagen und Proteoglycanen. Es zeigte sich, daß verschiedene relativ große Polypeptidfragmente in der Zellbindungsdomäne von Fibronectin Zellbindungsaktivität aufweisen. Siehe US-PS 4,517,686; 4,589,881 und 4,661,111. Es zeigte sich, daß gewisse relativ kurze Peptidfragmente aus dem gleichen Molekül Zellbindung an ein Substrat promovieren, wenn sie auf dem Substrat immobilisiert sind, oder daß sie die Bindung hemmen, wenn sie in solubilisierter oder suspendierter Form vorliegen. Siehe US-PS 4,578,079 und 4,614,517.
In US-PS 4,683,291 wird die Hemmung der Plättchenfunktion mit synthetischen Peptiden geoffenbart, die darauf ausgerichtet sind, Antagonisten hoher Affinität in bezug auf die Fibrinogenbindung an Blutplättchen zu sein. US-PS 4,857,508 offenbart Tetrapeptide, die als Inhibitoren der Plättchenaggregation nützlich sind.
Andere synthetische Peptide und deren Verwendung als Inhibitoren der Fibrinogenbindung an Plättchen werden geoffenbart von: Koczewiak et al., Biochem. 23, 1767-1774 (1984); Plow et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 82, 8057-8061 (1985); Ruggeri et al., Ibid. 83, 5708-5712 (1986); Ginsberg et al., J. Bio. Chem. 260 (7), 3931-3936 (1985); Haverstick et al., Blood 66 (4), 946-952 (1985); und Ruoslahti und Pierschbacher, Science 238, 491-497 (1987). Noch andere solche Hemmpeptide werden in EP 275 748 und 298 820 geoffenbart.
US-PS 4,879,313 offenbart Verbindungen, die als Inhibitoren der Plättchenaggregation nützlich sind und die Formel
haben, worin x = 6 bis 10, y = 0 bis 4, Z H, COOH, CONH&sub2; oder C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Ar = Phenyl, Biphenyl oder Naphthyl, jedes substituiert mit 1 bis 3 Methoxygruppen, oder unsubstituierte Phenyl-, Biphenyl-, Naphthyl-, Pyridyl- oder Thienylgruppe, und Asp = Asparaginsäurerest.
US-PS 4,977,168 offenbart Verbindungen mit der folgenden Strukturformel
worin R&sub1; Wasserstoff, eine niedere Alkylgruppe, eine niedere Hydroxyalkylgruppe, eine Benzylgruppe, eine Phenylgruppe oder eine 4-Hydroxyphenylgruppe darstellt;
R&sub2; eine niedere Alkyl-, niedere Alkenyl-, niedere Alkinyl- oder Benzylgruppe oder eine niedere Alkoxycarbonylalkyl-, niedere Carboxyalkyl oder niedere Hydroxyalkylgruppe darstellt;
R&sub3; und R&sub4;, die gleich oder verschieden sind, jeweils einen niederen Alkyl- oder niederen Hydroxyalkylrest, niederen Alkenyl- oder niederen Alkinylrest darstellen, oder zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen gesättigten Heterocyclus bilden, wie Morpholino, Thiomorpholino, Pyrrolidino, unsubstituiert oder substituiert mit einer Alkoxycarbonyl- oder Carboxygruppe, Piperazino, 4-(niederes Alkyl)piperazino, 4-(niederes Hydroxyalkyl)piperazino oder Piperidino, unsubstituiert oder substituiert mit einer der folgenden Gruppen: niederes Alkyl, Benzyl, Hydroxy, niederes Hydroxyalkyl, Amino, niederes Aminoalkyl, Hydroxyamino, Alkoxycarbonyl oder Carboxy;
Ar eine Phenyl-, alpha-Naphthyl- oder beta-Naphthylgruppe darstellt, gegebenenfalls substituiert, oder eine Heteroarylgruppe, ausgewählt aus den Resten Pyridyl, Chinolinyl oder Isochinolinyl, gegebenenfalls substituiert, sowie deren Isomere und Mischungen und deren Salze mit pharmazeutisch unbedenklichen Mineral- oder organischen Säuren,
die als antithrombotische Mittel nützlich sind. Diese Verbindungen unterscheiden sich strukturell von der vorliegenden Erfindung, weil sie Arylsulfonylaminoacylaminophenylalaninamid-Derivate sind, im Gegensatz zu den erfindungsgemäßen Verbindungen, die Alkansäure/ester-1-amidinophenylalkylcarbonylamino-Derivate sind.
US-PS 4,791,102 offenbart Verbindungen mit der folgenden Strukturformel
worin R&sub1; eine niedere Alkyl-, niedere Hydroxyalkyl- oder Benzylgruppe, eine Phenyl- oder 4-Hydroxyphenylgruppe darstellt;
R&sub2; und R&sub3;, die gleich oder verschieden sind, jeweils einen niederen Alkyl- oder Hydroxyalkyl-, niederen Alkenyl- oder niederen Alkinylrest darstellen, oder zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen gesättigten Heterocyclus bilden, wie Morpholino, Thiomorpholino, Pyrrolidino, unsubstituiert oder substituiert mit einer Alkoxycarbonyl- oder Carbonylgruppe, Piperazino, 4-(niederes Alkyl)piperazino oder Piperidino, unsubstituiert oder substituiert mit einer niederen Alkyl-, Benzyl-, Hydroxy-, niederen Hydroxyalkyl-, Amino-, niederen Aminoalkyl-, Alkoxycarbonyl- oder Carboxylgruppe;
Ar Phenyl darstellt, eine gegebenenfalls substituierte alpha-Naphthyl- oder beta-Naphthylgruppe, oder eine Heteroarylgruppe, ausgewählt aus Pyridyl, Chinolinyl, Isochinolinyl, gegebenenfalls substituiert,
die als selektive Hemmittel von Thrombin und Antithrombotika nützlich sind. Diese Verbindungen unterscheiden sich strukturell von der vorliegenden Erfindung, weil sie Arylsulfonylaminoacylaminophenylalaninamide sind, im Gegensatz zu den erfindungsgemäßen Verbindungen, die Alkansäure/ester-1-amidinophenylalkylcarbonylamino-Derivate sind.
EP 372 486 offenbart N-Acyl-beta-aminosäure-Derivate der Formel
und deren Salze. Diese Verbindungen sind zur Hemmung der Plättchenaggregation bei der Behandlung von Thrombose, Schlaganfall, Myocardinfarkt, Entzündung und Arteriosklerose und zur Hemmung von Metastasen nützlich.
EP 381 033 A1 offenbart Amidino- oder Guanidino-Aryl-substituierte Alkansäurederivate mit der folgenden Strukturformel
R¹-A-(W)a-X-(CH&sub2;)b-(Y)c-B-Z-COOR
die zur Behandlung von Thrombose, Apoplexie, Herzinfarkt, Entzündung, Arteriosklerose und Tumoren nützlich sind. Diese Verbindungen unterscheiden sich strukturell von der vorliegenden Erfindung, weil sie Aryl-essigsäure/ester-2-amidino/guanidino-phenylalkylcarbonylamino-Derivate sind, im Gegensatz zu den erfindungsgemäßen Verbindungen, die Alkansäure/ester-1-amidinophenylalkylcarbonylamino-Derivate sind.
EP 445,796 A2 offenbart Essigsäure-Derivate mit der Formel
H&sub2;N(NH)C-X-Y-CO-Z-CH(Q¹)COOQ²

(Formel A)

worin Q¹ für Wasserstoff, Methyl oder Phenyl steht; Q² für Wasserstoff, Phenyl-niederalkyl- oder Niederalkyl steht, das unter physiologischen Bedingungen abgespaltet werden kann; X für 1,4-Phenylen, 2,5- oder 3,6-Pyridylen oder 1,4-Piperidinylen steht, das an die Gruppe Y durch das C-Atom in der Position 4 gebunden ist; Y eine Gruppe der folgenden Formel ist
worin Q³ für Wasserstoff, Methyl, Phenyl, -COOH, -COO-, Niederalkyl, -CONH(CH&sub2;)&sub2;-COOH oder -CONH(CH&sub2;)&sub2;-COO-niederalkyl steht, Q&sup4; Wasserstoff, Methyl oder Phenyl ist, Z eine 1,4-Piperazinylengruppe, eine 1,4-Piperazinylengruppe, die an die CO-Gruppe durch das N-Atom in der Position 1 gebunden ist, oder eine Gruppe mit der Formel -NHCH(R¹)- oder -NHCH(COR²)- ist, worin R¹ für Wasserstoff, Methyl, Phenyl oder ein -COO-niederalkyl steht, R² für den Rest einer α-Aminocarbonsäure steht, gebunden durch die Aminogruppe, oder von einem Ester oder Amid davon, oder eine Gruppe mit der Formel -NHCH&sub2;CH&sub2;-Ar oder -CO-R², oder, wenn anwendbar, eine mono- oder di-niederalkylierte Carbamoylgruppe oder eine Pyrrolidinoylgruppe oder Piperidinoylgruppe, Ar für ein Phenyl steht oder ein Phenyl, das substituiert ist mit niederem Alkyl, niederem Alkoxy, -COOH, -COO-niederalkyl, -O(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub4;-COOH, -O(CH&sub2;)&sub1;&submin;&sub4;-COO-niederalkyl, -CONH&sub2;, -CONH-niederalkyl, -CON(niederalkyl)&sub2;, Pyrrolidinoyl oder Piperidinoyl,
von denen man sagt, daß sie Hemmwirkung auf die Bindung von Adhäsionsproteinen an Blutplättchen sowie Plättchenaggregation und Zell-Zell-Adhäsion haben. Diese Verbindungen unterscheiden sich strukturell von denen der vorliegenden Erfindung, weil sie eine zusätzliche -NHCH(R¹)- oder -NHCH(COR²)- oder eine Piperazinylengruppe an der Position "Z" der Formel A aufweisen. In der vorliegenden Erfindung ist eine zusätzliche -NHCH(R¹)- oder eine zusätzliche -NHCH(COR²)- oder eine Piperazinylengruppe nicht vorhanden.

Zusammenfassung der Erfindung:

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Klasse von Verbindungen, dargestellt durch die Formel
oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin
R&sub1; ausgewählt ist aus Phenyl; substituiertem Phenyl, worin jeder Substituent ausgewählt sein kann aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Trifluormethyl, Hydroxy und Carboxyl; Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei das Alkyl substituiert sein kann mit Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen; Carboxyl; und einer vollständig ungesättigten heteromonocyclischen Ringstruktur mit 5 oder 6 Ringkohlenstoffatomen, worin eines der Ringkohlenstoffatome durch Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel ersetzt ist und der heteromonocyclische Ring an einen Benzolring kondensiert ist;
R&sub2; gleich ist Hydrido; Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen; Phenyl; Phenylalkyl, worin das Alkyl 1 bis 6 Kohlenstoffatome hat und der Phenylring unabhängig ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen und Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;
R&sub3; und R&sub4; jedes unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Hydrido, Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und Halogen;
W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen; Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;
Z Hydrido, Carboxyl, Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkylcarboxyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und
m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.
Die Erfindung betrifft weiters pharmazeutische Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Formel I enthalten. Solche Verbindungen und Zusammensetzungen sind für die Hemmung der Blutplättchenaggregation nützlich. Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Hemmung der Plättchenaggregation bei einem Säuger, der solcher Behandlung bedarf.
Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist eine Verbindung der Formel
oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon,
worin R&sub1; ausgewählt ist aus Phenyl oder substituiertem Phenyl, worin jeder Substituent ausgewählt sein kann aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Trifluormethyl, Hydroxy und Carboxyl;
R&sub2; gleich ist Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;
R&sub3; und R&sub4; jedes unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Hydrido, Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und Halogen;
W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;
Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und
m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.
Beispiele für diese Ausführungsform sind folgende Verbindungen:
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-dimethylester;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-diethylester;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-a-aspartyl]-L-phenylalanin-acetat;
N-[N-[5-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentinyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1oxo-4Z-pentenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-N-methyl-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1,4-dioxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-4-hydroxy-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[6-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-5Z-hexenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[4-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxobutyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin;
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-monohydrochlorid;
3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-oxo-4-[(2-phenylethyl)amino]butansäure-acetat;
3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino)-4-[[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure; und
N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin.
Eine andere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist eine Verbindung der Formel
oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei das Alkyl substituiert sein kann mit Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen;
R&sub2; Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
R&sub3; und R&sub4; jedes unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Hydrido, Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und Halogen;
W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;
Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und in eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.
Beispiele für diese Ausführungsform sind die folgenden Verbindungen:
3S-[[5-(4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure und
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-valin.
Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist eine Verbindung der Formel
oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; Carboxyl ist;
R&sub2; gleich ist Hydrido; Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen; Phenyl; Phenylalkyl, worin das Alkyl 1 bis 6 Kohlenstoffatome hat und der Phenylring unabhängig ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen und Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;
R&sub3; und R&sub4; jedes unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Hydrido, Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und Halogen;
W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;
Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist und in eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.
Beispiele für diese Ausführungsform sind die folgenden Verbindungen:
3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(phenylmethyl)amino]-4-oxobutansäure;
3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(2-phenylethyl)amino]-4-oxobutansäure;
3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure; und
3S-[[5-(4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Hydrido" ein einzelnes Wasserstoffatom (H). Diese Hydridogruppe kann z.B. an ein Sauerstoffatom gebunden sein, um eine Hydroxylgruppe zu bilden, oder, als anderes Beispiel, zwei Hydridogruppen können an ein Kohlenstoffatom gebunden sein, um eine Gruppe -CH&sub2;- zu bilden.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkyl", allein oder innerhalb anderer Ausdrücke wie "Phenylalkyl" und "Alkylcarboxyl", einen linearen oder verzweigten gesättigten Kohlenwasserstoffrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispiele für solche Reste sind Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl, Butyl, 2-Methylpropyl, 1-Methylpropyl, 1,1-Dimethylethyl, Pentyl, 3-Methylbutyl, 1-Methylbutyl, 1-Ethylpropyl, 2,2-Dimethylpropyl, 1,1-Dimethylpropyl, Hexyl und 4-Methylpentyl.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkoxy" lineare oder verzweigte Oxy enthaltende Reste, die jeweils Alkylanteile mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen haben. Beispiele für solche Gruppen sind Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Butoxy, 1-Methylethoxy, 2-Methylpropoxy, 1-Methylpropoxy, 1,1-Dimethylethoxy, Pentenyloxy, 3-Methylbutoxy, 1-Methylbutoxy, 1-Ethylpropoxy, 2,2-Dimethylpropoxy, 1,2-Dimethylpropoxy, Hexenyloxy und 4-Methylpentoxy.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkenyl" lineare oder verzweigte ungesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, die zumindest eine Kohlenstoff- Kohlenstoff-Doppelbindung aufweisen, welche Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung in der Alkenyleinheit cis- oder trans-Geometrie haben kann. Beispiele für solche Gruppen sind Ethenyl, Propenyl, Butenyl, Isobutenyl, Pentenyl, 3-Methyl-1-butenyl, 2-Methyl-2-butenyl, 2,3-Dimethyl-2-butenyl und Hexenyl.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkinyl" lineare und verzweigte ungesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, die eine Kohlenstoff-Kohlenstoff- Dreifachbindung enthalten. Beispiele für solche Reste sind Ethinyl, Propinyl, Butinyl, Pentinyl und Hexinyl.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Halogen" Halogenatome. Beispiele für solche Atome sind Chlor (Cl), Fluor (F), Brom (Br) und Iod (I).
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkoxycarbonyl" den Rest der Formel ROCO-, worin R für eine Alkylgruppe steht. Beispiele für solche Reste sind Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propanoxycarbonyl, Pentanoxycarbonyl und Hexenyloxycarbonyl.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkylcarboxyl" den Rest mit der Formel RCOO-, worin R für eine Alkylgruppe steht. Beispiele für solche Gruppen sind Methylcarboxyl und Ethylcarboxyl.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Alkylcarbonylaminoalkyl" den Rest der Formel RCONHR, worin R für eine Alkylgruppe steht. Der Aminoteil des Restes RCONHR kann weiter mit Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert sein.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "heteromonocyclisch" vollständig ungesättigte, unsubstituierte Kohlenwasserstoffreste mit 5 bis 6 Ringkohlenstoffatomen, worin 1 der Ringkohlenstoffatome durch Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel ersetzt ist und worin die heteromonocyclische Struktur an einen unsubstituierten Benzolring kondensiert ist. Beispiele für solche Reste sind Indolyl, Benzofuranyl, Benzothiophenyl und Chromenyl. Die Bindung der heteromonocyclischen Struktur, worin diese Struktur an einen Benzolring kondensiert ist, an den verbleibenden Teil des durch die Formel I dargestellten Moleküls kann durch ein Ringkohlenstoffatom der heteromonocyclischen Struktur erfolgen.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Phenyl" ein monocyclisches Aren, in dem ein Wasserstoffatom von einem Kohlenstoffatom des Ringes entfernt wurde.
Substitution an diesem Phenylrest kann an jedem verfügbaren Ringkohlenstoffatom erfolgen.
Wie er hier verwendet wird, bedeutet der Ausdruck "Phenylalkyl" einen Phenylrest, der mit einer Alkylgruppe substituiert ist. Die Bindung des Phenylalkylrestes an den verbleibenden Teil des durch die Formel I dargestellten Moleküls erfolgt durch den Alkylteil des Phenylalkylrestes.
Die keilförmige Bindung der Formel I ( ) unterscheidet die L- und D-Konfiguration für die Isomere und bezeichnet die L-Konfiguration an dem chiralen Zentrum. Die L-Konfiguration wird auch als S-Konfiguration bezeichnet.
Während die Verbindungen hier eine L-Konfiguration am chiralen Zentrum haben, wie in Formel I gezeigt, können andere Isomere in den Verbindungen der Formel I existieren, und solche andere isomere Formen sollen eingeschlossen sein. Tautomere Formen sind ebenfalls eingeschlossen, ebenso pharmazeutisch unbedenkliche Salze solcher Isomere und Tautomere.
In den Strukturen und Formeln hier kann die über eine Bindung eines aromatischen Ringes gezeichnete Bindung an jedwedem verfügbarem Atom am aromatischen Ring sein.
Der Ausdruck "pharmazeutisch unbedenkliches Salz" bezieht sich auf ein Salz das durch Inkontaktbringen einer Verbindung der Formel (I) mit einer Säure hergestellt wird, deren Anion im allgemeinen als für den menschlichen Verzehr geeignet betrachtet wird. Beispiele für pharmazeutisch unbedenkliche Salze sind u.a. Hydrochlorid, Hydrobromid, Hydroiodid, Sulfat, Phosphat, Acetat, Propionat, Lactat, Maleat, Malat, Succinat und Tartrat. Alle diese Salze können nach herkömmlichen Methoden beispielsweise durch Umsetzung einer geeigneten Säure mit der entsprechenden Verbindung der Formel (I) hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel I können nach Methoden hergestellt werden, die der Peptidsynthese in Lösungsphase analog sind [siehe: The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology (E. Gross und J. Meienhofer, eds.), Vol. 1-5, Academic Press, New York], kombiniert mit Standardsynthesemethoden. Eine allgemeine Synthesesequenz wird im Schema A dargestellt. Die Amidbindungen wurden unter Verwendung von Standard-Kupplungsmitteln hergestellt, z.B. 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) (Schema A). Die Cyanogruppe wird in das Amidin über das Thioamidat in nahezu quantitativer Ausbeute übergeführt. Das Thioimidat wird gebildet, indem man zuerst die Cyanogruppe mit Schwefelwasserstoff (H&sub2;S) behandelt, gefolgt von Alkylierung mit Methyliodid. Dann ergibt die Behandlung des Thioimidats mit Ammoniumacetat das Amidin als Salz (HI). Die Endverbindungen wurden durch Reinigung mittels Umkehrphasen-Hochdruckflüssigchromatographie [High Performance Liquid Chromatography Protein and Peptide Chemistry (F. Lottspeich, A. Henscher, K.P. Hupe, eds.) Walter DeGruyter, New York, 1981] erhalten.
Die Benzonitrilsäure des Schemas A, worin Y = Alkenyl, Alkinyl, Alkyl, Alkylcarbonyl oder Alkylhydroxy mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, kann folgendermaßen hergestellt werden: Das Halogenbenzonitril (R&sub3;,R&sub4; = H) wird an eine omega-Alken- oder Alkinsäure unter Verwendung einer auf Palladium (0) basierenden Kupplungsreaktion ["Heck-Reaktion" - Palladium Reagents in Organic Syntheses (Richard F. Heck), Academic Press, New York, 1985] gekuppelt. Die bevorzugten Bedingungen für die Palladium-Kupplungsreaktion unterschieden sich für die Alkinsäure- und die Alkensäure-Kupplungskomponenten. Die bevorzugten Bedingungen für die Alkinsäure-Kupplungskomponente hängen vom Y-Substituenten ab. Wenn Y = Alkinyl mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, verwendeten die bevorzugten Bedingungen für die Palladium-Kupplungsreaktion Tetrakis(triphenylphosphin)-palladium(0) als Katalysator und Piperidin als Lösungsmittel [Schema B, für ähnliche Bedingungen siehe: H.A. Dieck und F.R. Heck, J. Organometallic Chem. 259-263 (1975)]. Wenn Y = Alkenyl mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, verwendeten die bevorzugten Bedingungen für die Alkensäure-Kupplungskomponente die Phasentransferbedingungen von Jeffery und Larock [Schema B, T. Jeffery, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1287-89 (1984); R.C. Larock Tetrahedron Lett. 2603-2606 (1989)]. Diese Bedingungen [Phasentransfermittel-Tetrabutylammoniumsalz, Katalysator-Palladium (II)-acetat, Base-Kaliumacetat, Lösungsmittel-Dimethylformamid] sind außerordentlich milde Bedingungen, die eine gute Ausbeute des gekuppelten Olefins ergaben.
Verbindungen, in denen Y = Alkyl, wurden durch eine selektive Reduktion der Doppelbindung durch katalytische Reduktion über Palladium auf Calciumcarbonat erhalten. Interessanterweise wird, wenn die Phasentransferbedingungen für Jeffery und Larock bei der Alkinsäure-Kupplungskomponente verwendet werden, ein Enol-Lacton in guter Ausbeute isoliert (Schema C). Das Enol- Lacton kann direkt zum Dipeptid oder Dipeptid-"mimic" durch Refluxieren in Acetonitril gekuppelt werden, um Y = Alkylcarbonyl und Alkylhydroxy-Derivate zu erhalten (nach Reduktion, Schema C). Die erforderlichen omega-Alkensäuren sind im Handel erhältlich, oder sie können durch Oxidation des omega-Alkenols synthetisiert werden [E.J. Corey und G. Schmidt, Tetrahedron Lett. 399 (1979)]. Die erforderlichen omega-Alkinsäuren sind entweder im Handel erhältlich, oder sie können aus den omega-Halogenalkansäuren und Lithiumacetylid synthetisiert werden [W.J. DeJarlais, E.A. Emken, Synthetic Commun. 653 (1980); J. Cossy, J.P. Pete, Tetrahedron Lett. 573 (1986)].
Eine andere Methode zur Herstellung der (Cyanophenyl)alkensäure-Einheit kann angewendet werden, wobei eine Standard-Wittigreaktion (Wittig Reaction - Recent Review - B.E. Maryanoff, A.B. Reitz, Chem. Rev. 863-927 (1989)) mit Cyanobenzaldehyd und einem omega-substituierten (Carboxyalkyl)triphenylphosphoniumbromid als den beiden Reaktionskomponenten (Schema D) [für ähnliche Bedingungen siehe: J. Am. Chem. Soc. 397 (1970); Ibid. 6831 und 7185 (1973)] herangezogen wird.
Die Substituenten R&sub3;,R&sub4; = Halogen, Alkyl, Hydroxy oder Alkoxy können eingeführt werden, wo Y=Alkyl an der Benzonitril-Stufe (z.B. Verbindung 4, Schema K), wobei Brom, Iod oder Chlor verwendet wird, um den Ring zu halogenieren (Schema E). Die Alkylgruppe kann durch Lithiumhalogen-Austausch bei niedriger Temperatur, gefolgt von Quenchen mit einem geeigneten Aldehyd eingeführt werden [siehe: W.E. Parham, C.K. Bradsher, Acct. Chem. Res. 300 (1982)]. Der resultierende Alkohol kann in R&sub3;,R&sub4; = Alkyl durch Hydrogenolyse umgewandelt werden [Reductions in Organic Chemistry (M. Hudlicky, ed.), John Wiley & Sons, New York, 1984], wie im Schema E gezeigt wird. Die Substituenten R&sub3;,R&sub4; = Hydroxy oder Alkoxy können durch Lithiumhalogen-Austausch bei niedriger Temperatur gefolgt von Quenchen mit dem elektrophilen Bis(trimethylsilyl)peroxid [(TMSO)&sub2; - Schema E) M. Taddei und A. Ricci, Synthesis 633-635 (1986)] eingeführt werden, was den Silylether ergibt. Der Silylether kann in R&sub3;,R&sub4; = OH durch Behandlung mit Salzsäure übergeführt werden [M. Taddei und A. Ricci, Ibid.]. Das R&sub3;,R&sub4; = OR kann durch Behandlung des Derivats, in dem R&sub3;,R&sub4; = OH, mit einer schwachen Base (K&sub2;CO&sub3;) und einem geeigneten Alkylhalogenid gebildet werden [R&sub8;-Hal, 2 Äquivalente, siehe: C.F.H. Allen und J.W. Gates jr., Organic Syntheses Coll. Vol. 3 140 (1955)], was auch den Ester bilden wird. Der Ester kann selektiv in Gegenwart des Ethers mit einem Äquivalent Natriumhydroxid (Schema E) gespaltet werden.
Weitere Verbindungen, bei denen Y = Carbonylalkyl, können an der Benzonitrilstufe bei folgender Substitution für das Ausgangsmaterial, Verbindung 4 (Schema K) eingeführt werden: Die Ketosäure, deren Synthese im Schema F gezeigt wird, würde anstelle der Verbindung 4 verwendet. Der im Handel erhältliche beta-Ketoester kann mit Bis(2,4-pentandionato)nickel(II), Ni(acac)&sub2; und Methylacrylat behandelt werden, um das Addukt zu ergeben, wie im Schema F gezeigt [J.H. Nelson, P.N. Howells, G.C. DeLullo, G.L. Landen und R.A. Henry, J. Org. Chem. 1246-1249 (1980)]. Die Methylester können gespaltet werden, und die beta-Ketosäure kann unter den angegebenen Bedingungen decarboxyliert werden [Lithiumchlorid-Dimethylsulfoxid, LiCl-DMSO, A.B. Holmes, C. Swithenbank, S.F. Williams, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 265 (1986)].
Verbindungen, in denen Y = Alkylcarbonylaminoalkyl, können an der Benzonitrilstufe mit der folgenden Substitution für das Ausgangsmaterial Verbindung 4 (Schema K) eingeführt werden: Das Benzonitrilalkylcarbonylaminoalkyl, dessen Synthese im Schema G gezeigt wird, würde anstelle der Verbindung 4 verwendet. Die omega-Benzonitril-Alkansäuren sind im Handel erhältlich, oder ihre Herstellung ist in der Literatur bekannt (z.B. 4-Cyanohydrozimtsäure - Schultz, E.M., US-PS 3,860,639). Die bei der Kupplung verwendeten Aminosäuren sind entweder im Handel erhältlich (z.B. Glycin, Sarcosin, beta-Alanin), oder sie können leicht aus den omega-Aminosäuren durch reduktive Aminierung synthetisiert werden.
Verbindungen, in denen R&sub2; = Alkyl, Phenyl oder Phenylalkyl, können nach der allgemeinen Methode im Schema H hergestellt werden. Die entsprechenden sekundären Amine können gekauft oder leicht durch eine Michael-Reaktion [Advanced Organic Chemistry (J. March, ed.) John Wiley & Sons, New York 1985] aus einem primären Amin und tert-Butylacrylat oder reduktive Aminierung [Reductions in Organic Chemistry (M. Hudlicky, ed.), John Wiley & Sons, New York 1984] unter Verwendung des entsprechenden primären Amins und Aldehyds synthetisiert werden.
Verbindungen, in denen Z = Alkylcarboxyl, können durch Homologation von im Handel erhältlichen Aminosäuren unter Heranziehen der Arndt-Eistert-Reaktion [Meir und Zeller, Angew. Chem. Int. Ed. Eng. 32-43 (1975); M. Rodriguez et al. Tetrahedron Lett. 5153 (1990); W.J. Greenlee, J. Med. Chem. 434 (1985) und dort zitierte Literatur] oder unter Verwendung anderer bekannter Synthesen homologierter Aminosäuren [z.B. Phenylalanin wird durch die Addition eines Malonatanions zu einem aktivierten Aziridin, das aus Phenylalanin erhalten wurde, homologiert - Tseng C.C., Terashima S. und Yamada S.-I., Chem. Pharm. Bull. 29-40 (1977)] hergestellt werden.
Verbindungen, in denen das Benzamidin durch ein Naphthylamidin ersetzt wird, können durch Substitution der Cyanonaphthylsäuren von Schema I oder J für das Ausgangsmaterial 4 des Schemas K hergestellt werden. 6-Cyano-2-naphthol kann aus 6-Brom-2-naphthol hergestellt werden [T. Aoyama et al., Chem. Pharm. Bull. 1458-71 (1985)]. Im Schema J wurde das Naphthyltriflat unter Verwendung von N-Phenyltrifluormethansulfonamid und Triethylamin hergestellt [J.B. Hendrickson, R. Bergeron, Tetrahedron Lett. 4607-10 (1973)]. Das Naphthyltriflat wurde an tert-Butylacrylat unter Verwendung von Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) als Katalysator und Acetonitril-Triethylamin als Lösungsmittel gekuppelt [bezüglich verwandter Bedingungen siehe: H.A. Dieck und F.R. Heck, J. Organometallic Chem. 259-263 (1975)].
Eine spezifische Synthese des Anti-Blutplättchen-Mittels 9 wird im Schema K gezeigt. Die Zahlen der Verbindungen entsprechen den Verbindungsnummern im Beispiel 1. Die Beispiele 2-27 wurden unter Verwendung der Methode des Beispiels 1 mit den spezifischen Änderungen, wie in jedem Beispiel angeführt, und nach der allgemeinen Methode, die im Schema A beschrieben wird, hergestellt. Die Beispiele 2 bis 27 illustrieren weiters die Natur der Verbindungen in dieser Erfindung. Es wird klar sein, daß diese Verbindungen nicht auf die hier geoffenbarten Methoden zu ihrer Herstellung beschränkt sind.
Die Endprodukte können in Alkylester (W = Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen) durch Behandlung der entsprechenden Carbonsäure-Derivate mit dem entsprechenden Alkohol unter saurer Katalyse wie im Beispiel 2 übergeführt werden. Schema A Schema A (Fortsetzung) Schema B Jeffery-Bedingungen für Y = Älkyl n = ganze Zahl von 0 bis 4 Schema C Jeffery-Bedingungen Schema D n = ganze Zahl 0 bis 4 Schema E
Im obigen Schema ist R&sub7; Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, und R&sub8; ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Schema F Hitze Schema G p = ganze Zahl 1 bis 4 Schema H Schema I Base p = ganze Zahl 1 bis 4 Schema J Schema K Schema K (Fortsetzung)
Diese Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Hemmung der Plättchenaggregation und mehr im besonderen ein Behandlungsverfahren, das die Verabreichung von Verbindungen der Formel I, um diese Hemmung zu erreichen, beinhaltet.
Für die Hemmung der Plättchenaggregation können Verbindungen der Formel I oral, parenteral oder als Inhalationsspray oder rektal in Dosierungseinheitsformulierungen verabreicht werden, die herkömmliche nicht-toxische pharmazeutisch unbedenkliche Träger, Adjuvantien und Vehikel enthalten. Der Ausdruck parenteral schließt wie er hier verwendet wird, z.B. subkutan, intravenös, intramuskulär, intrasternal, Infusionstechniken oder intraperitoneal ein.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auf jedem geeigneten Weg verabreicht werden, vorzugsweise in Form einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die für diesen Weg ausgerichtet ist, und in einer Dosis, die für die beabsichtigte Behandlung wirksam ist. Therapeutisch wirksame Dosen der erfindungsgemäßen Verbindungen, die erforderlich sind, um das Fortschreiten eines medizinischen Zustandes zu verhindern oder zu hemmen, werden von einem Durchschnittsfachmann auf diesem Gebiet leicht festgestellt.
Folglich bietet die Erfindung eine Klasse neuer pharmazeutischer Zusammensetzungen, umfassend eine oder mehrere erfindungsgemäße Verbindungen zusammen mit einem oder mehreren nicht- toxischen, pharmazeutisch unbedenklichen Trägern und/oder Verdünnungsmitteln und/oder Adjuvantien (zusammen hier als "Trägermaterialien" bezeichnet) und, auf Wunsch, anderen Wirkstoffen.
Das Dosierungsschema für die Behandlung eines Zustandes mit den erfindungsgemäßen Verbindungen und/oder Zusammensetzungen basiert auf einer Vielzahl von Faktoren, darunter der Typus, das Alter, Gewicht, Geschlecht und der medizinische Zustand des Patienten, die Schwere des Zustandes, der Verabreichungsweg und die speziell verwendete Verbindung. Das Dosierungsschema kann also in einem weiten Bereich variieren. Dosierungsmengen in der Größenordnung von 0,01 mg bis etwa 150 mg pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag sind für die Behandlung der oben angeführten Zustände nützlich (etwa 10 mg bis etwa 10500 mg pro Patient pro Tag). Für die orale Verabreichung kann eine Tagesdosis von etwa 0,01 bis 150 mg/kg Körpergewicht, insbesondere von etwa 1 bis 30 mg/kg Körpergewicht passend sein. Für die Verabreichung durch Injektion wäre eine bevorzugte Tagesdosis etwa 0,01 bis 50 mg/kg Körpergewicht.
Für orale Verabreichung kann die pharmazeutische Zusammensetzung beispielsweise in Form von einer Tablette, Kapsel, Suspension oder Flüssigkeit vorliegen. Die pharmazeutische Zusammensetzung wird vorzugsweise in einer Dosierungseinheit gemacht, die eine spezielle Menge Wirkstoff enthält. Beispiele für solche Dosierungseinheiten sind Tabletten oder Kapseln. Diese können beispielsweise eine Wirkstoffmenge von etwa 1 bis 250 mg, vorzugsweise von etwa 25 bis 150 mg enthalten. Eine geeignete Tagesdosis für einen Säuger kann in einem weiten Bereich variieren, in Abhängigkeit vom Zustand des Patienten und anderen Faktoren.
Der Wirkstoff kann auch durch Injektion als Zusammensetzung verabreicht werden, in der z.B. Kochsalz, Dextrose oder Wasser als geeigneter Träger verwendet werden können. Eine geeignete Tagesdosis wäre typischerweise etwa 0,01 bis 50 mg/kg Körpergewicht, pro Tag in mehrfachen Dosen injiziert, in Abhängigkeit vom behandelten Zustand.
Für die Verabreichung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen für gewöhnlich mit einem oder mehreren Adjuvantien vereinigt, die für den beabsichtigten Verabreichungsweg geeignet sind. Die Verbindungen können mit Lactose, Sucrose, Stärkepulver, Celluloseestern von Alkansäuren, Cellulosealkylestern, Talk, Stearinsäure, Magnesiumstearat, Magnesiumoxid, Natrium- und Calciumsalzen von Phosphor- und Schwefelsäuren, Gelatine, Gummi arabicum, Natriumalginat, Polyvinylpyrrolidon und/oder Polyvinylalkohol vermischt und zu Tabletten oder Kapseln für geeignete Verabreichung verarbeitet werden. Die Verbindungen können auch in Wasser, Polyethylenglycol, Propylenglycol, Ethanol, Maisöl, Baumwollsamenöl, Erdnußöl, Sesamöl, Benzylalkohol, Natriumchlorid und/oder verschiedenen Puffern gelöst werden. Andere Adjuvantien und Verabreichungsarten sind auf dem Gebiet der Pharmazie gut und in großem Umfang bekannt.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in fester Form hergestellt werden, wie Körner, Pulver oder Suppositorien, oder in flüssiger Form, wie Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können herkömmlichen pharmazeutischen Prozessen unterworfen werden, wie Sterilisierung und/oder sie können herkömmliche pharmazeutische Adjuvantien wie Konservierungsmittel, Stabilisatoren, Benetzungsmittel, Emulgatoren, Puffer, etc. enthalten.
Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung weiter illustrieren, sie sollen den Schutzumfang nicht einschränken. In den Beispielen sind die Temperaturen in Grad Celsius, sofern nicht ausdrücklich etwas anderes angegeben wird.

Beispiel 1:

A. Herstellung von 5-(p-Cyanophenyl)-4-pentensäure (Verbindung 3 im Schema K).

Tetrabutylammoniumchlorid (Hydrat, 17,8 g) wurde durch Azeotropbildung mit Benzol (250 ml-Rundkolben, mit Dean-Stark-Apparat ausgestattet) getrocknet. Das Benzol wurde im Vakuum entfernt, wobei sich wasserfreies Tetrabutylammoniumchlorid (17,0 g, 61,2 mmol) ergab. In diesen Kolben unter Argon wurden Triphenylphosphin (820 mg, 3,13 mmol), Palladiumacetat (703 mg, 3,13 mmol), 4-Brombenzonitril (16,9 g, 92,8 mmol), Kaliumacetat (36,8 g, 375 mmol) und 100 ml entgastes wasserfreies Dimethylformamid (durch 10minütiges Hindurchperlenlassen von Argon entgast, über Molekularsieben getrocknet) zugesetzt. Eine Lösung von 4-Pentensäure (6,27 g, 62,6 mmol) und entgastem wasserfreiem DMF (35 ml) wurde dann zu dem schnell gerührten Reaktionsgemisch bei 23ºC zugesetzt. Nach 21 h bei 23ºC wurde das Reaktionsgemisch langsam in eine Natriumcarbonatlösung (3%, 400 ml) gegossen und mit Ethylacetat (500 ml) extrahiert. Die wäßrige Schicht wurde mit Entfärbungskohle behandelt und filtriert. Dann wurde die wäßrige Schicht mit 10%iger HCl auf einen pH-Wert von 2 angesäuert, was die Titelverbindung als weißen Feststoff (6,82 g, 54%) ergab: Fp. 150-167ºC. Diese Vorgangsweise ergibt die Titelverbindung in ausreichender Reinheit, um ohne Komplikationen zum nächsten Schritt weitergehen zu können. Eine Analysenprobe wurde erhalten, indem man die Probe weiterer Reinigung durch Flash-Chromatographie (Ethylacetat:Methylenchlorid:Essigsäure, 1:4:0,05) und Umkristallisieren aus Ethylacetat (2 Mal) unterwarf. Das resultierende Produkt hatte die folgenden Eigenschaften: Fp. 154-156ºC. Analyse: Berechnet für C&sub1;&sub2;H&sub1;&sub1;NO&sub2;: C 71,63; H 5,51; N 6,96. Gefunden: C 71,50; H 5,54; N 6,80.

B. Herstellung von 5-(p-Cyanophenyl)pentansäure (Verbindung 4 im Schema K):

Eine Lösung von 1,47 g (7,32 mmol) des Produktes des Abschnitts A in 90 ml Methanol wurde über 200 mg 5% Pd/CaCO&sub3; bei 5 psi Wasserstoff 1,2 h hydriert. Nach Entfernung des Katalysators durch Filtration und Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum, wurde der Rückstand mit Ether trituriert, gefolgt von Hexan, was die Titelverbindung als weißen Feststoff ergab. Das resultierende Produkt hatte die folgenden Eigenschaften: Fp. 101-102ºC. Analyse: Berechnet für C&sub1;&sub2;H&sub1;&sub3;NO&sub2;: C 70,92; H 6,45; N 6,89. Gefunden: C 70,71; H 6,56; N 6,87.

C. Herstellung von 5-(p-Cyanophenyl)pentanoyl-(S)-aspartyl(O-t-butyl)-(S)-phenylalanin(O-t- butyl) (Verbindung 6 im Schema K):

Zu einer Lösung von 650 mg (3,20 mmol) des Produktes des Abschnitts B in 30 ml Methylenchlorid bei 23ºC wurden 727 mg (3,52 mmol) N,N-Dicyclohexylcarbodiimid zugesetzt, unmittelbar gefolgt von 1,26 g (3,20 mmol) Asp(O-t-butyl)-Phe(O-t-but). Das Gemisch wurde 20 h unter Argonatmosphäre gerührt. Nach Verdünnung mit Ether (100 ml) wurden die Feststoffe abfiltriert, und das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (300 ml) gelöst, mit KHSO&sub4; (1N, 1x80 ml), gesättigtem KHCO&sub3; (1x80 ml), Kochsalzlösung (1x80 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Reinigung durch Flash-Chromatographie (Gradient 1 l Ethylacetat:Hexan 3:7, gefolgt von 1,5 l Ethylacetat:Hexan 1:1) ergab 1,48 g (80%) der Titelverbindung als Öl.

D. Herstellung von N-[N-[5-(4-Aminoiminomethyl)phenyl-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-acetat-Salz (Verbindung 10 im Schema K).

Schwefelwasserstoff wurde durch eine Lösung von 740 mg (1,28 mmol) des Produktes des Abschnitts C in Pyridin:Triethylamin (12 ml:1,2 ml) 3 min bei 23ºC durchperlen gelassen. Nach 24 h bei 23ºC in einem geschlossenen Kolben wurde die Reaktionsmischung unter einem steten Stickstoffstrom eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ethylacetat (200 ml) verdünnt, mit KHSO&sub4; (2N, 2x50 ml), Kochsalzlösung (1x50 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Das Einengen im Vakuum ergab eine quantitative Ausbeute von Thioamid (Verbindung 7 im Schema K).
Thioamid (Verbindung 7 im Schema K) (690 mg, 1,13 mmol) wurde in einer Lösung von Aceton:Iodmethan (14 ml:1 ml) gelöst. Die Reaktionsmischung wurde erhitzt, um 25 min Rückfluß zu erreichen. Das Einengen im Vakuum ergab eine quantitative Ausbeute der Verbindung 8 im Schema K als HI-Salz.
Eine Lösung der Verbindung 8 des Schemas K (705 mg, 1,13 mmol) und Ammoniumacetat (130 mg, 1,69 mmol) im Methanol (10 ml) wurde erhitzt, um 3,5 h Rückfluß zu erreichen. Nach dem Abkühlen auf 23ºC wurde die Reaktionsmischung unter einem steten Stickstoffstrom unter dem Abzug eingeengt, was eine quantitative Ausbeute der Verbindung 9 des Schemas K ergab.
Eine Mischung der Verbindung 9 des Schemas K (390 mg, 0,656 mmol), Trifluoressigsäure (9 ml) und Wasser (1 ml) wurde 1 h bei 23ºC gerührt, dann unter einem langsamen Stickstoffstrom über Nacht eingedampft. Das Produkt wurde auf einer "reverse-phase" C-18 funktionalisierten Silicagelsäule (1,9 cm x 15 cm) unter Verwendung eines linearen Gradienten aus 10% Methanol/Wasser 0,5% Essigsäure zu 100% Methanol (40 min) bei einer Fließgeschwindigkeit von 3 ml/min gereinigt, um die Titelverbindung (Verbindung 10 des Schemas K) zu erhalten. Das Produkt wurde durch H-NMR, C-NMR und FAB-Massenspektrometrie (fast atom bombardment mass spectrometry) (MH&spplus;=483) verifiziert.
Das resultierende Produkt hatte folgende Eigenschaften: Analyse berechnet für C&sub2;&sub5;H&sub3;&sub0;N&sub4;O&sub6; plus 1,0 H&sub2;O und 0,8 Essigsäure: C 58,24; H 6,47; N 10,21. Gefunden: C 58,37; H 6,17; N 10,36. Beispiel 2: Herstellung von N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-N-L-α-aspartyl-L- phenylalanin-dimethylester.
Die Verbindung von Beispiel 1, Abschnitt D, wurde in reinem Methanol, das eine Spur Schwefelsäure enthielt, verestert, um die Titelverbindung zu erhalten, die wie im Beispiel 1, Abschnitt D gereinigt wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 24,4, 29,5, 34,5, 34,6, 35,2, 36,5, 49,0, 51,2, 51,5, 53,4, 124,8, 126,3, 127,3, 127,9, 128,6, 128,7, 135,5, 149,2, 166,5, 170,9, 171,2, 174,5, 176,6; FAB-Massenspektrometrie (MH&spplus; = 511). Beispiel 3: Herstellung von N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-N-L-α-aspartyl-L- phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Methode von Beispiel 1 mit den folgenden Modifizierungen hergestellt: Die 6-(p-Cyanophenyl)-5-hexensäure wurde unter Heranziehen der Standard-Wittig- Chemie aus im Handel erhältlichen Ausgangsmaterialien unter Anwendung der folgenden Vorgangsweise hergestellt: Kaliumbis(trimethylsilyl)amid (231 ml einer 0,66 M Lösung in Toluol, 152,5 mmol) wurde tropfenweise zu einer Suspension von 4-(Carboxybutyl)triphenylphosphoniumbromid in 500 ml trockenem THF bei 23ºC unter Stickstoffatmosphäre zugesetzt. Nach 1 h bei 23ºC wurde die Reaktion auf -70ºC abgekühlt, und 4-Cyanobenzaldehyd (10,0 g, 76,3 mmol) in 50 ml trockenem THF wurde über 20 min zugesetzt. Man ließ die Reaktion auf 23ºC erwärmen und rührte 20 h. Nach Einengen der Reaktionsmischung wurde der Rückstand in Ether (500 ml) gelöst, mit Wasser (300 ml) und wäßrigein Natriumcarbonat (300 ml, 5%ig) gewaschen. Die vereinigten wäßrigen Schichten wurden auf pH 1 angesäuert, mit Ether extrahiert (2x300 ml) und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum wurde das Rohprodukt durch Behandlung mit Iodmethan (2 Äquiv.) in Dimethylformamid unter Verwendung von Kaliumcarbonat (2,5 Äquiv.) als Base verestert. Nach Einengen wurde der Rückstand in Ethylacetat (300 ml) gelöst, mit Wasser (2x100 ml), Kochsalzlösung (100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Ethylacetat:Hexan 1:1) gereinigt. Ein kleiner Teil (2,2 mmol) des gereinigten Materials wurde unter Anwendung der Bedingungen des Beispiels 1 (Abschnitt B) reduziert, was Methyl-6-(p-cyanophenyl)-hexanoat ergab. Der Methylester (2,6 mmol) wurde unter Verwendung von wäßrigem Natriumhydroxid (1N, 1,1 Äquiv.) in Methanol bei 23ºC 20 h gespaltet. Nach Einengen wurde der Rückstand in Wasser (50 ml) gelöst, mit HCl (1N) auf pH 2 angesäuert, mit Ether (2x200 ml) extrahiert, mit Wasser (1x100 ml) gewaschen, mit Kochsalzlösung (1x100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Einengen im Vakuum ergab 6-(p-Cyanophenyl)hexansäure als weißen Feststoff: Fp. 61-62ºC. Dieses Ausgangsmaterial wurde anstelle des Produktes des Abschnitts B des Beispiels 1 bei der Vorgangsweise nach Abschnitt C, Beispiel 1 verwendet, um die Titelverbindung nach Vervollständigung der Sequenz von Reaktionen nach der Art von Beispiel 1 mit der genannten Substitution zu erhalten. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 26,2, 29,1, 29,2, 31,3, 36,1, 36,3, 36,4, 49,2, 49,3, 126,2, 127,7, 128,9, 129,4, 130,1, 130,4, 138,5, 151,0, 167,3, 176,7, 177,1, 178,178.
Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub2;N&sub4;O&sub6; 0,3 H&sub2;O: C 62,21; H 6,55; N 11,16. Gefunden: C 62,27; H 6,48; N 11,03. Beispiel 4: Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-oxo-4- [(2-phenylethyl)amino]butansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art von Beispiel 1 hergestellt, wobei Asp(O-t-but)-2-phenethylamid anstelle der Verbindung 5 des Schemas K im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 24,9, 30,0, 34,9, 35,0, 35,9, 40,9, 49,8, 125,2, 126,3, 127,9, 128,4, 128,6, 129,3, 138,7, 149,7, 166,3, 171,7, 174,9, 175,4; FAB-Massenspektroinetrie (MH&spplus; = 439). Beispiel 5: Herstellung von N-[N-[5-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]- L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, wobei die folgenden Änderungen gegenüber dem Abschnitt A des Beispiels 1 vorgenommen wurden: 3-Brombenzonitril wurde anstelle von 4-Brombenzonitril verwendet, und die Reaktion wurde bei 50ºC durchgeführt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 24,8, 29,9, 34,7, 35,1, 35,6, 36,8, 49,5, 53,8, 125,2, 126,8, 127,6, 128,4, 129,2, 134,3, 136,2, 143,9, 166,7, 171,6, 174,6, 174,8, 175,4; FAB-Massenspektrometrie (MH&spplus; = 483). Beispiel 6: Herstellung von 3S-[[5-F4-(Aminoiminomethyl]phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2- 4-(methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, wobei Asp(O-t-butyl)-2- (p-methoxyphenyl)ethylamid anstelle der Verbindung 5 des Schemas K im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 25,6, 30,7, 34,6, 35,7, 35,8, 36,3, 41,7, 50,24, 53,7, 55,1, 114,5, 127,2, 128,5, 129,9, 130,2, 131,4, 132,2, 150,4, 167,2, 172,5, 176,4, 176,6; FAB-Massenspektrometrie (MH&spplus; = 469). Beispiel 7: Herstellung von 3S-[[5-[4-(aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, wobei Asp(O-t-butyl)-isobutylamid anstelle der Verbindung 5 des Schemas K im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 19,9, 25,6, 28,8, 30,7, 35,8, 35,9, 36,6, 47,6, 50,6, 125,9, 128,6, 130,0, 150,5, 167,5, 172,5, 175,5, 176,1; FAB-Massenspektrometrie (MH&spplus; = 391). Beispiel 8: 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, wobei Asp(O-t-butyl)-2-(3-indolyl)ethylamid anstelle der Verbindung 5 des Schemas K im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet wurde. Die Reinheit des Produktes wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 24,5, 24,9, 29,9, 35,0, 35,1, 35,6, 40,2, 49,7, 111,2, 111,7, 118,2, 118,8, 121,5, 122,4, 125,1, 127,3, 127,8, 129,2, 136,6, 149,7, 166,3, 171,9, 174,9, 175,4; FAB-Massenspektroinetrie (MH&spplus; = 478). Beispiel 9: Herstellung von N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-N-L-α-aspartyl-L- valin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, wobei Asp(O-t-butyl)- Val(O-t-butyl) anstelle der Verbindung 5 des Schemas K im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 16,6, 18,0, 24,8, 29,8, 30,2, 34,8, 34,9, 35,4, 49,4, 57,5, 125,0, 127,7, 129,1, 149,5, 167,1, 172,1, 174,9, 175,0, 175,5; FAB-Massenspektroinetrie (MH&spplus; = 435). Beispiel 10: Herstellung von N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentinyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, mit den folgenden Modifizierungen: 5-(p-Cyanophenyl)-4-pentinsäure wurde unter Anwendung der folgenden Vorgangsweise hergestellt. Eine Lösung von 4-Pentinsäure (2,15 g, 22 mmol), 4-Brombenzonitril (3,64 g, 20 mmol) und Piperidin (40 ml) wurde durch 5minütiges Hindurchperlenlassen von Stickstoff durch die Lösung vor der Zugabe von Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (240 mg, 0,2 mmol) entgast. Das Reaktionsvial wurde verschlossen und 1,5 h auf 80ºC erhitzt. Nach dem Abkühlen auf 23ºC wurde das Reaktionsgemisch mit Ethylacetat (200 ml) verdünnt, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ethylacetat (300 ml) verdünnt, mit 5%iger HCl (2x100 ml) gewaschen, mit Wasser (1x100 ml) gewaschen und mit 3%igem Natriumcarbonat (2x200 ml) extrahiert. Die basische wäßrige Schicht wurde mit Entfärbungskohle behandelt, filtriert und auf pH=2 angesäuert. Der resultierende Feststoff wurde filtriert, mit Wasser gewaschen, getrocknet und durch Flash-Chromatographie (Gradient Ethylacetat:Methylenchlorid:Essigsäure 1:9:0,005) und fraktionierte Umkristallisation (Methylenchlorid-Ether) gereinigt, um 5-(p-Cyanophenyl)-4-pentinsäure als weißen Feststoff zu erhalten: Fp. 1490-152ºC. Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 mit den folgenden Modifizierungen hergestellt: 5-(p-Cyanophenyl)-4-pentinsäure wurde anstelle der Verbindung 4 des Schemas K verwendet. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (DMSO-D6) Delta 16,5, 34,8, 37,9, 52,1, 56,5, 80,5, 94,5, 126,8, 128,6, 128,7, 128,8, 128,9, 130,3, 132,4, 139,0, 166,2, 171,0, 171,1, 174,1, 176,2. Analyse berechnet für C&sub2;&sub5;H&sub2;&sub6;N&sub4;O&sub6;.0,5 H&sub2;O: C 61,59; H 5,58; N 11,49. Gefunden: C 61,63; H 5,73; N 11,50. Beispiel 11: Herstellung von N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentenyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 hergestellt, mit den folgenden Modifizierungen: Die umkristallisierte Verbindung 3 des Schemas K wurde verwendet, Abschnitt B des Beispiels 1 ausgelassen. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 27,9, 33,8, 35,0, 36,0, 48,7, 53,2, 124,8, 125,7, 125,8, 127,2, 127,4, 128,3, 128,4, 132,0, 135,4, 142,5, 165,5, 170,6, 173,6, 173,9, 174,1. Kristalle, die sich während des Einengens der Produkt enthaltenden Chromatographie-Fraktionen bildeten, wurden gesammelt, mit Wasser gewaschen und getrocknet (80ºC, 0,1 mm), Fp. 215-218ºC. Analyse berechnet für C&sub2;&sub5;H&sub2;&sub8;N&sub4;O&sub6;: C 62,49; H 5,87; N 11,66. Gefunden: C 62,71; H 6,07; N 11,55. Beispiel 12: Herstellung von N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-diethylester.
Die Endverbindung des Beispiels 1, Abschnitt D, wurde verestert durch Behandlung mit reinem Ethanol, gesättigt mit HCl-Gas, für 20 h. Nach Einengen im Vakuum wurde die Titelverbindung durch Reinigung nach Art des Beispiels 1, Abschnitt D erhalten. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) Delta 13,6, 16,9, 25,2, 29,5, 34,8, 35,1, 35,4, 37,1, 50,3, 53,7, 61,0, 61,3, 123,9, 126,7, 127,8, 128,1, 128,9, 129,0, 135,5, 149,1, 165,6, 169,6, 170,5, 170,6, 176,1. Beispiel 13: Herstellung von N-[N-[4-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxobutyl]-L-α-aspartyl]- L-phenylalanin.
A. Herstellung von 4-(p-Cyanophenyl)butansäure: Die Verbindung von A. wurde auf die gleiche Art wie im Beispiel 1 hergestellt, mit den folgenden Modifizierungen: 4-(p-Cyanophenyl)butansäure wurde anstelle von 5-(p-Cyanophenyl)pentansäure verwendet.
4-(p-Cyanophenyl)butansäure wurde folgendermaßen hergestellt: Eine Mischung von 3-Buten-1-ol (3,03 g, 42,0 mmol), 4-Brombenzonitril (7,27 g, 39,9 mmol), Triethylamin (6,05 g, 59,9 mmol), Tri-o-tolylphosphin (0,841 g, 2,77 mmol), Palladiumacetat (0,224 g, 1 mmol) und Acetonitril (40 ml) wurde in einem Teflon-abgeschlossenen Vial 20 h auf 80ºC erhitzt. Nach Abkühlen auf 23ºC wurde die Reaktionsmischung im Vakuum konzentriert, mit Na&sub2;CO&sub3; (5%ig, 300 ml) verdünnt, mit Ethylacetat (2x300 ml) extrahiert, mit Kochsalzlösung (1x100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum ergab die Reinigung des resultierenden Rückstandes durch Flash-Chromatographie (Ethylacetat:Hexan 1:1) 4,06 g (58,7%) 4-(p-Cyanophenyl)-3-buten-1-ol. Das Produkt wurde durch Reduktion der Doppelbindung unter Anwendung der Bedingungen des Beispiels 1B in 4-(p-Cyanophenyl)butan-1-ol übergeführt. 4-(p-Cyanophenyl)butan-1-ol (1,49 g, 8,51 mmol) wurde durch Behandlung mit 8N Jones-Reagenz (4 ml) in Aceton (30 ml) bei 10ºC, 10 min, zu 4-(p-Cyanophenyl)butansäure oxidiert. Die Reaktion wurde mit Isopropanol (5 ml) gequencht, im Vakuum eingeengt, mit H&sub2;O (80 ml) verdünnt, mit Ethylacetat (2x200 ml) extrahiert und mit KHCO&sub3; (2x250 ml) gewaschen. Die wäßrige Schicht wurde mit HCl (1N) angesäuert, mit Ether (2x400 ml) extrahiert und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Einengen im Vakuum ergab 1,07 g (78% bezogen auf das verbrauchte Ausgangsmaterial) 4-(p-Cyanophenyl)butansäure.
B. Herstellung von N-[N-[4-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxobutyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin: Zu einer Lösung von 4-(p-Cyanophenyl)butansäure (1,07 g, 5,27 mmol), Dimethylformamid (10 ml) und Pyridin (2 ml) wurde N,N'-Disuccinimidylcarbonat (1,35 g, 5,26 mmol) und 4-Dimethylaminopyridin (64,4 mg, 0,527 mmol) unter Argonatmosphäre bei 23ºC zugesetzt. Nach 4 h wurde Asp(O-t-butyl)-Ph(O-t-butyl) (2,06 g, 5,27 mmol) zugesetzt, sofort gefolgt von N,N'-Diisopropylethylamin (0,680 g, 5,26 mmol). Nach 20 h bei 23ºC wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (250 ml) gelöst, mit KHSO&sub4; (1N, 100 ml) gewaschen, mit Kochsalzlösung (1x100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Ethylacetat:Hexan 2:3) gereinigt, um 1,70 g (56%) des gekoppelten Produktes zu erhalten. Die Titelverbindung wurde durch Konversion des Benzonitrils zum Benzamidin nach den Bedingungen des Beispiels 1D gefolgt von Entfernung der Schutzgruppen wie im Beispiel 1D hergestellt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) Delta 26,8, 34,7, 34,8, 35,4, 37,0, 50,0, 53,8, 125,8, 126,6, 127,8, 128,2, 129,2, 129,4, 136,8, 149,2, 166,6, 171,5, 172,6, 173,0, 174,3. Beispiel 14: Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl]phenyl]-1-oxopentyl]-amino]-4-[(2- carboxyethyl)-(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure.
A. Herstellung von 3S-[[5-[4-Cyanophenyl]-1-oxopentyl]-L-asparaginsäure-β-t-butylester: Zu einer Lösung von 5-(p-Cyanophenyl)pentansäure (2,50 g, 12,3 mmol), Dimethylformamid (10 ml) und Pyridin (2 ml) wurde N,N'-Disuccinimidylcarbonat (3,15 g, 12,3 mmol) und 4-Dimethylaminopyridin (34 mg, 0,278 mmol) unter Argon bei 23ºC zugesetzt. Nach 4 h wurde L-Asparaginsäure-p-t-butylester (2,33 g, 12,3 mmol) zugesetzt, sofort gefolgt von N,N'-Diisopropylethylamin (2,15 ml, 12,3 mmol). Nach 20 h bei 23ºC wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (250 ml) gelöst, mit KHSO&sub4; (1N, 100 ml) gewaschen, mit Kochsalzlösung (1x100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum ergab Triturieren mit Ethylacetat:Hexan (1:1) 4,3g (93%) der Titelverbindung.
B. Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)-(2-methylpropyl)amino]-4-oxabutansäure: Zu einer Lösung von 3S-[[5-[4-Cyanophenyl]-1- oxopentyl]-L-asparaginsäure-α-t-butylester (1,01 g, 2,70 mmol), Dimethylformamid (10 ml) und Pyridin (2 ml) wurde N,N'-Disuccinimidylcarbonat (0,685 g, 2,67 mmol) und 4-Dimethylaminopyridin (0,030 g, 0,245 mmol) unter Argonatmosphäre bei 23ºC zugesetzt. Nach 4 Stunden wurde N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]- N'-(2-methylpropyl)amin (0,545 g, 2,71 mmol) zugesetzt, sofort gefolgt von N,N'-Diisopropylethylamin (0,480 ml, 2,7 mmol). Nach 20 h bei 23ºC wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Ethylacetat (250 ml) gelöst, mit KHSO&sub4; (1N, 100 ml) gewaschen, mit Kochsalzlösung (1x100 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum ergab Reinigung des Rückstandes durch Flash-Chromatographie (Ethylacetat-Hexan 1:1) ergab das gekoppelte Produkt (1,00 g, 67%). Die Titelverbindung wurde durch Konversion des Benzonitrils zum Benzamidin nach den Bedingungen des Beispiels 1D gefolgt von Entfernung der Schutzgruppen wie im Beispiel 1D hergestellt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) Delta 19,3, 19,4, 25,3, 26,8, 28,1, 30,4, 31,7, 33,2, 35,3, 36,6, 36,7, 43,5, 44,0, 46,4, 46,5, 53,1, 55,7, 126,1, 128,0, 129,4, 149,8, 167,1, 171,0, 171,1, 172,9, 173,8, 174,3, 174,5, Analyse berechnet für C&sub2;&sub3;H&sub3;&sub4;N&sub4;O&sub6; plus 1,5 CF&sub3;CO&sub2;H: C 49,33; H 5,57; N 8,85. Gefunden: C 49,32; H 5,64; N 8,83. Beispiel 15: Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2- carboxyethyl)(phenylmethyl)amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 14 hergestellt, wobei N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-benzylamin anstelle von N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-(2-methylpropyl)amin in der Methode 14B verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) (Amid-Rotamere) Delta 24,9, 29,8, 31,3, 32,4, 34,8, 36,3, 42,8, 43,1, 46,1, 46,3, 48,7, 52,1, 125,1, 127,1, 127,3, 127,8, 128,6, 128,7, 129,1, 136,8, 137,0, 149,1, 166,7, 172,5, 174,9; FAB-Massenspektrometrie (MH&spplus; = 497). Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub2;N&sub4;O&sub6; plus 1 CF&sub3;CO&sub2;H und 1,0 H&sub2;O: C 53,50; H 5,61; N 8,91. Gefunden: C 53,46; H 6,07; N 8,76. Beispiel 16: Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2- carboxyethyl)(2-(4-methoxyphenyl)ethyl)amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 14 hergestellt, wobei N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amin anstelle von N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-(2-methylpropyl)amin in der Methode 14B verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) (Amid-Rotamere) Delta 25,4, 30,5, 32,2, 32,7, 33,5, 34,5, 35,4, 36,5, 43,4, 44,3, 46,4, 50,8, 54,8, 114,1, 114,3, 125,5, 128,1, 129,6, 130,0, 130,2, 130,6, 149,9, 158,8, 166,8, 171,8, 172,9, 173,6, 174,4, 174,5. Analyse berechnet für C&sub2;&sub8;H&sub3;&sub8;N&sub4;O&sub7; plus 1,0 CF&sub3;CO&sub2;H und 0,5 H&sub2;O: C 54,29; H 5,77; N 8,44. Gefunden: C 54,26; H 5,78; N 8,24. Beispiel 17: Herstellung von 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2- carboxyethyl)(2-phenylethyl)amino]-4-oxobutansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 14 hergestellt, wobei N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-2-(phenyl)ethylamin anstelle von N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-(2-methylpropyl)amin in der Methode 14B verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) (Amid-Rotamere) Delta 22,3, 27,2, 28,7, 29,3, 30,5, 33,7, 34,1, 34,5, 40,6, 41,5, 43,4, 45,8, 46,1, 48,4, 122,8, 123,9, 124,1, 125,3, 125,8, 126,0, 126,1, 126,3, 135,6, 136,4, 147,3, 164,6, 169,5, 172,3, 172,6, 174,2. Analyse berechnet für C&sub2;&sub7;H&sub3;&sub4;N&sub4;O&sub6; plus 1,0 CF&sub3;CO&sub2;H und 1,0 H&sub2;O: C 54,20; H 5,80; N 8,72. Gefunden: C 53,89; H 5,85; N 8,94. Beispiel 18: Herstellung von N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-N-methyl-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 14 hergestellt, wobei N-Methyl-L-phenylalanin anstelle von N-(2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-(2-methylpropyl)amin in der Methode 14B verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) (Amid-Rotamere) Delta 24,8, 24,9, 29,9, 30,0, 32,8, 33,0, 34,0, 34,1, 34,9, 35,5, 35,7, 35,8, 45,6, 46,0, 46,2, 59,9, 63,4, 125,5, 126,2, 126,3, 126,4, 126,6, 127,6, 128,1, 128,6, 128,7, 129,1, 137,2, 137,5, 149,5, 166,9, 171,6, 171,7, 172,3, 173,5, 174,0. Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub2;N&sub4;O&sub6; plus 1,0 CF&sub3;CO&sub2;H und 1,0 H&sub2;O: C 53,50; H 5,61; N 8,91. Gefunden: C 53,75; H 5,45; N 8,89. Beispiel 19: Herstellung von R-[[[[2S-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-3-carboxy-1-oxopropyl]amino]benzolpentansäure.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 14 hergestellt, wobei R-4-Amino-5-phenylpentansäure anstelle von N-[2-Carbo-t-butoxyethyl]-N'-(2-methyl)propylamin in der Methode 14B verwendet wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (DMSO-D&sub6;) Delta 25,4, 29,7, 30,1, 30,8, 31,2, 35,5, 35,6, 37,1, 50,4, 126,4, 126,8, 128,9, 129,7, 130,0, 139,5, 149,7, 166,7, 171,1, 172,5, 172,8, 175,1. Analyse berechnet für C&sub2;&sub7;H&sub3;&sub4;N&sub4;O&sub6; plus 1,25 CF&sub3;CO&sub2;H und 1,0 H&sub2;O: C 52,87; H 5,45; N 8,36. Gefunden: C 53,14; H 5,71; N 8,25. Beispiel 20: Herstellung von N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1,4-dioxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin.
A. Zu einer Lösung von Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (100 mg, 0,09 mmol), Triethylamin (1,45 g, 14,3 mmol) in 50 ml Acetonitril wurde 4-Brombenzonitril (1,82 g, 10 mmol) und 4-Pentinsäure (1,0 g, 10,2 mmol) zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 4 h auf 82ºC erwärmt, gefolgt von Abkühlen auf 23ºC. Nach Einengen im Vakuum wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Gradient - 1 Liter Hexan:Ethylacetat (4:1) gefolgt von Hexan:Ethylacetat 1:1) gereinigt, was das Enol-Lacton (1,48 g, 74%) ergab. Analyse berechnet für C&sub1;&sub2;H&sub9;NO&sub2;: C 72,35; H 4,55; N 7,03. Gefunden: C 72,18; H 4,61; N 7,04.
B. Eine Mischung des Enol-Lactons (287 mg, 1,43 mmol), Asp(O-t-butyl)-Phe(O-t-butyl) (565 mg, 1,43 mmol) und Acetonitril (15 ml) wurde 40 h auf 82ºC erwärmt, gefolgt von Abkühlen auf 23ºC. Nach Einengen im Vakuum wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Hexan: Ethylacetat 1:1) gereinigt, was das Amid (748 mg, 88,4%) ergab.
C. Die Titelverbindung wurde durch Umwandlung des Benzonitrils in das Benzamidin nach den Bedingungen des Beispiels 1D, gefolgt von Entfernung der Schutzgruppen wie im Beispiel 1D hergestellt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (DMSO-d&sub6;) 28,9, 36,6, 37,1, 48,3, 49,8, 54,6, 125,8, 127,0, 127,6, 127,7, 129,4, 130,1, 138,1, 140,7, 165,9, 169,9, 171,0, 172,6, 174,1, 206,2. Analyse berechnet für C&sub2;&sub5;H&sub2;&sub8;N&sub4;O&sub7; plus H&sub2;O: C 58,36; H 5,88; N 10,89. Gefunden: C 58,69; H 5,90; N 10,79. Beispiel 21: Herstellung von N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-4-hydroxy-1-oxopentyl]-L- α-aspartyl]-L-phenylalanin.
Die Ketongruppe des Produktes (622 mg, 105 mmol) des Beispiels 20B wurde durch Behandlung mit NaBH&sub4; (65,0 mg, 1,72 mmol) in Isopropanol (5 ml) 2 h bei 23ºC zum Alkohol reduziert. Die Reaktion wurde durch Zugabe von 5%iger HCl (5 ml) und anschließendes 1stündiges Rühren bei 23ºC gequencht. Die Reaktionsmischung wurde mit Ethylacetat (150 ml) verdünnt, mit Wasser (50 ml), mit Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Gradient Ethylacetat:Hexan 3:2 bis Ethylacetat 100%) gereinigt, um den Alkohol (152 mg) zu erhalten.
Die Titelverbindung wurde durch Umwandlung des Benzonitrils zum Benzamidin nach den Bedingungen des Beispiels 1D gefolgt von Entfernung der Schutzgruppe wie im Beispiel 1D hergestellt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;OD) Delta 27,2, 29,3, 35,9, 37,9, 38,7, 42,9, 50,7, 54,1, 55,4, 82,2, 127,8, 127,9, 128,9, 129,4, 130,1, 130,2, 131,4, 138,7, 145,3, 168,4, 170,1, 173,2, 174,8, 179,6. Beispiel 22: Herstellung von N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4Z-pentenyl]-L-α-asartyl]-L-phenylalanin.
Eine Lösung von (267 mg, 0,46 mmol) N-[5-(p-Cyanophenyl)-1-oxo-4-pentinyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin des Beispiels 10 in 50 ml THF wurde über Chinolin-behandeltem 5% Pd/CaCO&sub3; bei 5 psi Wasserstoff 50 min hydriert. Nach Abfiltrieren des Katalysators und Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum wurde der Rückstand mit Ether (200 ml) verdünnt, mit KHSO&sub4; (1N, 2x50 ml) gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;). Nach Einengen im Vakuum wurde der Rückstand durch Flash-Chromatographie (Hexan:Ethylacetat 7:3) gereinigt, um das cis-Alken (232 mg, 87%) zu erhalten.
Die Titelverbindung wurde durch Umwandlung des Benzonitrils zum Benzamidin nach den Bedingungen des Beispiels 1D gefolgt von Entfernung der Schutzgruppen wie im Beispiel 1D hergestellt. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 27,1, 37,8, 38,4, 40,1, 52,6, 56,7, 128,3, 129,4, 130,4, 130,9, 131,0, 131,8, 132,0, 135,8, 139,2, 145,7, 168,9, 174,6, 176,9, 177,6. Analyse berechnet für C&sub2;&sub5;H&sub2;&sub8;N&sub4;O&sub6; plus 0,5 H&sub2;O und 0,3 HOAc: C 60,58; H 6,00; N 11,04. Gefunden: C 60,55; H 5,91; N 10,97. Beispiel 23: Herstellung von N-[N-[6-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-5Z-hexenyl]-L-α-asartyl]-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 mit den folgenden Modifizierungen hergestellt: 6-(m-Cyanophenyl)-5-(Z)-hexensäure wurde unter Heranziehung der Standard-Wittig- chemie nach der Methode des Beispiels 3 mit den folgenden Änderungen hergestellt: Natriumbis(trimethylsilyl)amid anstelle von Kaliumbis(trimethylsilyl)amid und 3-Cyanobenzaldehyd anstelle von 4-Cyanobenzaldehyd. 6-(m-Cyanophenyl)-5-(Z)-hexensäure wurde nach Reinigung durch Flash-Chromatographie (Hexan:Ethylacetat:Essigsäure 8:2:0,005) und fraktionierte Kristallisation (Ether-Hexan) [Anm.: nach dieser Methode kann man E- und Z-Isomere im präparativen Maßstab trennen] erhalten.
Der Reduktionsschritt des Beispiels 1C wurde weggelassen. Das Endprodukt wurde verifiziert durch C-NMR (DMSO-d&sub6;) Delta 25,1, 27,6, 34,5, 37,0, 37,1, 49,9, 54,7, 125,8, 125,9, 127,4, 127,5, 127,7, 128,1, 128,7, 128,9, 129,2, 129,4, 133,2, 134,1, 137,7, 138,2, 166,1, 170,2, 171,9, 172,8, 174,6. Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub0;N&sub4;O&sub6;: C 63,15; H 6,11; N 11,33. Gefunden: C 62,95; H 6,11; N 11,21. Beispiel 24: Herstellung von N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]- L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Methode des Beispiels 23 hergestellt, außer daß der Reduktionsschritt des Beispiels 1C weggelassen wurde. Das Produkt wurde verifiziert durch C-NMR (CD&sub3;CO&sub2;D) Delta 26,2, 29,2, 31,6, 36,1, 36,5, 37,0, 38,1, 50,8, 55,3, 126,4, 127,9, 128,9, 129,1, 129,5, 130,5, 135,4, 137,5, 145,4, 167,8, 172,8, 176,0, 176,1, 176,7. Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub2;N&sub4;O&sub6; plus 0,25 H&sub2;O: C 62,32; H 6,54; N 11,18. Gefunden: C 62,32; H 6,87; N 11,13. Beispiel 25: Herstellung von N-[N-[2-[[6-(Aminoiminomethyl)-2-naphthalinyl]oxy]-1-oxoethyl]- L-α-aspartyl]-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 mit den folgenden Modifizierungen hergestellt: 2-[[6-(Cyano)-2-naphthalinyl]oxy]essigsäure wurde anstelle von 5-(p-Cyanophenyl)pentansäure im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet.
Analyse berechnet für C&sub2;&sub6;H&sub2;&sub6;N&sub4;O&sub7; plus 0,25 CF&sub3;CO&sub2;H und 0,5 H&sub2;O: C 58,51; H 5,05; N 10,30. Gefunden: C 58,52; H 5,04; N 10,15. Beispiel 26: Herstellung von N-[N-[3-[6-(Aminoiminomethyl)-2-naphthalinyl]-1-oxopropyl]-L-α- aspartyl]-L-phenylalanin.
Die Titelverbindung wurde nach der Art des Beispiels 1 mit den folgenden Modifizierungen hergestellt: 3-[6-(Cyano)-2-naphthalinyl]propionsäure wurde anstelle von 5-(p-Cyanophenyl)pentansäure im Abschnitt C des Beispiels 1 verwendet.
Analyse berechnet für C&sub2;&sub7;H&sub2;&sub8;N&sub4;O&sub6; plus 0,25 H&sub2;O: C 63,71; H 5,64; N 11,01. Gefunden: C 63,58; H 5,74; N 10,87.

Beispiel 27:

Die Plättchen-Rezeptor-Bindungsaffinität und die Aggregationshemmwirksamkeit repräsentativer erfindungsgemäßer Verbindungen können mit Hilfe der nachstehenden Assays gezeigt werden.

In-vitro-Plättchenaggregation in PRP:

Man ließ gesunde weibliche oder männliche Hunde 8 h vor der Blutabnahme fasten; dann wurden 30 inl Vollblut unter Verwendung einer "butterfly"-Nadel und einer 30 cm³-Kunststoffspritze mit 3 ml 0,129 M gepuffertem Natriumcitrat (3,8%ig) abgenommen. Die Spritze wurde während der Blutentnahme sorgfältig gedreht, um mit dem Citrat zu mischen. Plättchenreiches Plasma (PRP) wurde durch 3,17 Minuten Zentrifugation bei 975 x g bei Raumtemperatur zubereitet, wobei man die Zentrifuge zum Haltepunkt auslaufen ließ ohne zu bremsen. Das PRP wurde mit einer Kunststoffpipette vom Blut entfernt und in ein steriles konisches 50 ml Corning-Zentrifugenröhrchen mit Kunststoffverschluß gebracht, das auf Raumtemperatur gehalten wurde. Plättchenarmes Plasma (PPP) wurde durch 15 min Zentrifugation des verbleibenden Blutes bei 2000 x g bei Raumtemperatur zubereitet, wobei man die Zentrifuge zum Haltepunkt auslaufen ließ, ohne zu bremsen. Das PRP wurde mit PPP auf einen Zählwert von 2-3x10&sup8; Blutplättchen pro ml eingestellt. 400 ul der PRP-Zubereitung und 50 ul der zu prüfenden Verbindung oder Kochsalzlösung wurden 1 Minute bei 37ºC in einem BioData Aggregometer (BioData, Horsham, PA) vorinkubiert. 50 ul Adenosin-5'-diphosphat (ADP) (50 um Endkonzentration) wurden in die Küvetten gegeben, und die Aggregation wurde 1 Minute aufgezeichnet. Alle Verbindungen wurden zweifach geprüft. Die Ergebnisse werden wie folgt berechnet: Prozent der Kontrolle = [(maximale OD minus Anfangs-OD der Verbindung) dividiert durch (maximale OD minus Anfangs-OD der Kontroll-Kochsalzlösung)]x100. Die % Hemmung = 100 - (Prozent der Kontrolle).
Die geprüften Verbindungen und ihre mittleren Hemmkonzentrationen (IC&sub5;&sub0;) werden in der Tabelle A angeführt. Die IC&sub5;&sub0;-Werte (wenn eine Verbindung 50% Hemmung zeigte) wurden durch lineare Regression der Dosis-Wirkung-Kurve berechnet. Die Testergebnisse für die repräsentativen erfindungsgemäßen Verbindungen werden in Tabelle A angegeben.

Fibrinogen-Bindungsassay:

Die Fibrinogen-Bindung wurde im wesentlichen wie bei Plow et al., Blood 70, 110-115 (1987) beschrieben durchgeführt. Kurz gesagt, wurde Blut von Menschen, denen man während der letzten zwei Wochen keine Anti-Plättchen-Medikamente gegeben hatte, in 1/10 Volumen CCD-Puffer (100 mM Natriumcitrate, 136 mM Glucose, pH 6,5) gesammelt. Das Blut wurde 3 min bei 1000 x g zentrifugiert und plättchenreiches Plasma mit einer Kunststoffpipette in ein Kunststoffröhrchen transferiert und auf Eis gelegt. Nach 15 Minuten wurde 1/2 Volumen des eiskalten CCD-Puffers zugesetzt, und die Probe wurde 10 min bei 900 x g bei 2ºC zentrifugiert. Der Überstand wurde abdekantiert, und das Plättchenpellet wurde vorsichtig in 1/2 des ursprünglichen Volumens an eiskaltem modifiziertein Tyrode-Puffer (137 mM NaCl, 2,6 mM KCl, 12 mM NaHCO&sub3;, 5,5 mM Glucose, 15 mM HEPES, 0,5% BSA, pH 7,4) resuspendiert. Nach 30minütiger Inkubation bei 37ºC wurde der Plättchen-Zählwert mit modifiziertem Tyrode-Puffer auf 4x108 Plättchen/ml eingestellt. Den Testproben (Endkonzentration = 1x10&sup8; Plättchen/ml) wurde in der Reihenfolge zugesetzt: ADP (10 uM), CaCl&sub2; (2 mM), Testverbindung und ¹²&sup5;I-Fibrinogen (0,3 uM) zu den vorgenannten Endkonzentrationen in einem Volumen von 200 ul. Die Proben wurden 40 min bei 37ºC inkubiert, und 50 ul-Aliquote wurden bei 8000 x g durch eine 20%ige Sucroselösung (400 ul) zentrifugiert. Die Röhrchen wurden schnell gefroren, und die das Plättchenpellet enthaltenden Spitzen wurden abgeschnitten und hinsichtlich des gebundenen ¹²&sup5;I-Fibrinogens durch gamma-Szintillationszählung untersucht. Die spezifische Bindung wurde in jedem Test durch Subtrahieren der Menge ¹²&sup5;I-Fibrinogen, die in Gegenwart eines 60fachen Überschusses an unmarkiertem Fibrinogen gebunden ist, von der Gesamtbindung bestimmt. Die Wirksamkeit der Testverbindungen (IC&sub5;&sub0;) wurde als die Konzentration der Verbindung bestimmt, die erforderlich ist, um 50% der ¹²&sup5;I-Fibrinogenbindung zu hemmen.

Hemmung der ex vivo Collagen-induzierten Aggregation durch erfindungsgemäße Verbindungen:

ZWECK - Der Zweck des Assays besteht darin, die Effekte von Anti-Plättchen-Verbindungen auf die ex vivo Collagen-induzierte Plättchenaggregation zu bestimmen, wenn intravenös oder oral an Hunde verabreicht wird.
Blutproben vor der Behandlung (Kontrolle) werden von anästhesierten oder bei Bewußtsein befindlichen Hunden (Beagles) entnommen und zentrifugiert, um plättchenreiches Plasma (PRP) zuzubereiten. Die Aggregationsantwort auf Collagen wird in einem Aggregometer gemessen und als Kontrolle verwendet. Verbindungen werden intragastrisch (mittels einer Kapsel oder eines Magentubus oder intravenös) verabreicht. Blutproben werden in vorbestimmten Intervallen nach Verabreichung der Verbindung genommen, PRP zubereitet und die Aggregation bei Collagen bestimmt. Die Hemmung der Aggregation durch die Verbindung wird bestimmt durch Vergleich der Aggregationsreaktion nach der Verabreichung der Verbindung mit der Reaktion vor der Behandlung. Die Studie wird maximal 24 h oder bis die Plättchenaggregation den Wert der Kontrolle erreicht fortgesetzt. (Wenn die Aggregation nach 7 h noch gehemmt ist, wird eine Blutprobe am folgenden Morgen genommen und untersucht). Die Dauer der Aktivität wird bestimmt durch die Zeitdauer, in der die Plättchenaggregation nach Verabreichung der Verbindung gehemmt ist. Die Testergebnisse für repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen in dem genannten Assay werden in Tabelle A angegeben.
N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin wurde in einem Modell der intravenösen Infusion bei Hunden geprüft, und ED&sub5;&sub0; war 0,32 ug/kg/min.
In der Tabelle A bedeutet die Bezeichnung "NT" "nicht untersucht". TABELLE A In-vitro Plättchenaggregation in PRP Ex-vivo Collagen-induzierte Aggregation Verbindung Hunde-PRP IC&sub5;&sub0; Mikro M % Hemmung Testkonz. Human-Fg-Bindung IC&sub5;&sub0; Mikro M geprüfte Dosis mg/kg Max. % Hemmung Weg N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-acetat 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-oxo-4-[(phenylethyl)amino]butansäure-acetat N-[N-[5-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure Verbindung Hunde-PRP IC&sub5;&sub0; Mikro M % Hemmung Testkonz. Human-Fg-Bindung IC&sub5;&sub0; Mikro M geprüfte Dosis mg/kg Max. % Hemmung Weg 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-valin N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-dimethylester N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(phenylmethyl)amino]-4-oxobutansäure Verbindung Hunde-PRP IC&sub5;&sub0; Mikro M % Hemmung Testkonz. Human-Fg-Bindung IC&sub5;&sub0; Mikro M geprüfte Dosis mg/kg Max. % Hemmung Weg N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[2-[[3-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]methylamino]-1-oxoethyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(2-phenylethyl)amino]-4-oxobutansäure 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4Z-pentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino-4-[(2-carboxyethyl)(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure Verbindung Hunde-PRP IC&sub5;&sub0; Mikro M % Hemmung Testkonz. Human-Fg-Bindung IC&sub5;&sub0; Mikro M geprüfte Dosis mg/kg Max. % Hemmung Weg N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-N-methyl-L-phenylalanin R-[[[[2S-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-3-carboxy-1-oxopropyl]amino]benzolpentansäure N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1,4-dioxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-4-hydroxy-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[6-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-5Z-hexenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin Verbindung Hunde-PRP IC&sub5;&sub0; Mikro M % Hemmung Testkonz. Human-Fg-Bindung IC&sub5;&sub0; Mikro M geprüfte Dosis mg/kg Max. % Hemmung Weg N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-diethylester N-[N-[4-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxobutyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[2-[[6-(Aminoiminomethyl)phenyl]-2-naphthalinyl]oxy]-1-oxoethyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin N-[N-[3-[6-(Aminoiminomethyl)-2-naphthalinyl]-1-oxopropyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin

Claims

1. Verbindung der Formel

oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; ausgewählt ist aus Phenyl; substituiertem Phenyl, worin jeder Substituent ausgewählt sein kann aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Trifluormethyl, Hydroxy und Carboxyl; Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei das Alkyl substituiert sein kann mit Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen; Carboxyl; und einer vollständig ungesättigten heteromonocyclischen Ringstruktur mit 5 oder 6 Ringkohlenstoffatomen, worin eines der Ringkohlenstoffatome durch Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel ersetzt ist und der heteromonocyclische Ring an einen Benzolring kondensiert ist;

R&sub2; gleich ist Hydrido; Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen; Phenyl; Phenylalkyl, worin das Alkyl 1 bis 6 Kohlenstoffatome hat und der Phenylring unabhängig ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen und Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;

R&sub3; und R&sub4; jedes unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Hydrido, Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und Halogen;

W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen; Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;

Z Hydrido, Carboxyl, Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkylcarboxyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und

m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.

2. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel

oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; ausgewählt ist aus Phenyl oder substituiertem Phenyl, worin jeder Substituent ausgewählt sein kann aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Trifluormethyl, Hydroxy und Carboxyl;

R&sub2; gleich ist Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;

W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

Y gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, worin das Alkyl ein- oder mehrfach mit einem Substituenten substituiert sein kann, der unabhängig ausgewählt ist aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Hydroxy und Oxo; Alkenyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Alkinyl mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen;

Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und

m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.

3. Verbindung nach Anspruch 2, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-dimethylester ist.

4. Verbindung nach Anspruch 2, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-diethylester ist.

5. Verbindung nach Anspruch 2, worin Z Carboxyl ist.

6. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

7. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-acetat ist.

8. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

9. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentinyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

10. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

11. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4Z-pentenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

12. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-N-methyl-L-phenylalanin ist.

13. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1,4-dioxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

14. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

15. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-4-hydroxy-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

16. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[6-[3-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-5Z-hexenyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

17. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[4-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxobutyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

18. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin-monohydrochlorid ist.

19. Verbindung nach Anspruch 5, die N-[N-[6-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxohexyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

20. Verbindung nach Anspruch 2, worin Z Hydrido ist.

21. Verbindung nach Anspruch 20, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-oxo-4-[(2-phenylethyl)amino]butansäure-acetat-Salz ist.

22. Verbindung nach Anspruch 20, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminoinethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure ist.

23. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel

oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; gleich ist Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wobei das Alkyl substituiert sein kann mit Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen;

R&sub2; Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und

m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.

24. Verbindung nach Anspruch 23, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure ist.

25. Verbindung nach Anspruch 23, die N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-valin ist.

26. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel

oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, worin R&sub1; Carboxyl ist;

W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist und

m eine ganze Zahl von 0 bis 4 ist.

27. Verbindung nach Anspruch 26, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(phenylmethyl)amino]-4-oxobutansäure ist.

28. Verbindung nach Anspruch 26, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(2-phenylethyl)amino]-4-oxobutansäure ist.

29. Verbindung nach Anspruch 26, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure ist.

30. Verbindung nach Anspruch 26, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[(2-carboxyethyl)(2-methylpropyl)amino]-4-oxobutansäure ist.

31. Verbindung nach Anspruch 1, die 3S-[[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-4-[[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]amino]-4-oxobutansäure ist.

32. Verbindung nach Anspruch 1, die N-[N-[2-[[3-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopropyl]methylamino]-1-oxoethyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

33. Verbindung nach Anspruch 1, die R-[[[[2S-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]amino]-3-carboxy-1-oxopropyl]amino]benzolpentansäure ist.

34. Verbindung, die N-[N-[2-[[6-(Aminoiminomethyl)-2-naphthalinyl]oxy]-1-oxoethyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

35. Verbindung, die N-[N-t3-[6-(Aminoiminomethyl)-2-naphthalinyl]-1-oxopropyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

36. Pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Hemmung der Plättchenaggregation nützlich ist, umfassend eine wirksame Menge zumindest einer Verbindung nach Anspruch 1 zusammen mit einem oder mehreren nicht-toxischen, pharmazeutisch unbedenklichen Trägern.

37. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 36, worin die Verbindung die Formel

aufweist, oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon, wobei R&sub1; ausgewählt ist aus Phenyl oder substituiertem Phenyl, worin jeder Substituent ausgewählt sein kann aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Halogen, Alkoxy mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Trifluormethyl, Hydroxy und Carboxyl;

R&sub2; gleich ist Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen;

W Hydrido oder Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

Z Hydrido, Carboxyl oder Alkoxycarbonyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; und

m 0 bis 4 ist.

38. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 37, worin die Verbindung N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl) phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

39. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 37, worin die Verbindung N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentinyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin ist.

40. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 37, worin die Verbindung N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentenyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin ist.

41. Verwendung zumindest einer Verbindung nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Plättchenaggregation bei einem Säuger, der dessen bedarf.

42. Verwendung nach Anspruch 41, worin die Verbindung N-[N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxopentyl]-L-α-aspartyl]-L-phenylalanin ist.

43. Verwendung nach Anspruch 41, worin die Verbindung N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4-pentinyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin ist.

44. Verwendung nach Anspruch 41, worin die Verbindung N-[5-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]-1-oxo-4E-pentenyl]-N-L-α-aspartyl-L-phenylalanin ist.