DE69010838T2

DE69010838T2 - Neue Benzoxazolon-Verbindungen und ihre Verwendung als Mikrobizid.

Info

Publication number: DE69010838T2
Application number: DE69010838T
Authority: DE
Inventors: Hsu Adam Chi-Tung
Original assignee: Rohm and Haas Co
Current assignee: Rohm and Haas Co
Priority date: 1989-11-09
Filing date: 1990-11-02
Publication date: 1994-12-22
Anticipated expiration: 2010-11-03
Also published as: CA2028755A1; DE69010838D1; BR9005673A; AU650630B2; ATE108782T1; EP0427484A1; JPH03206083A; AU6583990A; DK0427484T3; SG136194G; EP0427484B1; ES2060964T3; PH27377A

Description

Die Erfindung richtet sich auf neue Benzoxazolone, die eine Halogen-substituierte Alkyn(halopropargyl)-Gruppe enthalten und die Verwendung solcher Verbindungen als Microbiozide. Insbesondere sind die erfindungsgemäßen Verbindungen auf solche gerichtet der Formel (I)
in der X Jod oder Brom ist und
Y Wasserstoff, Halogen, (C&sub1;-&sub4;)Alkyl, (C&sub1;-C&sub4;)- Alkoxy, CN, OCO(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, OCOPh oder Halo(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl ist und die ein oder zwei dieser Substituenten enthalten kann.
Der Ausdruck "Microbiozid" (oder Biozid), wie er nachfolgend verwendet wird, soll einschließen, jedoch nicht beschränkt sein auf Bakterien, Pilze, Algen, und die microbiozidale Aktivität bezieht sich auf beides, die Eliminierung und auch auf das Hemmen oder Verhindern des Wachstums microbieller Organismen wie Bakterien, Pilze oder Algen.
Verbindungen der Formel
in der R H, Cl oder NO&sub2; ist, sind beschrieben in CZ-A-194354 (Chem. Abs. 97:23779c). Es ist angegeben, daß sie fungizide Aktivität haben.
EP-A-230874 richtet sich auf ähnliche Verbindungen der Formel
in der X = H oder Br ist. Diese Verbindungen sollen herbizide Aktivität haben.
Kein Dokument erwähnt Benzoxazolone.
Benzoxazolone der Formel
sind beschrieben in J. Pharm. Sc., 57; 1763 (1968), Chem. Abs. 89: 179902h und Chem. Abs. 94: 192196d, eine microbiozide Aktivität ist jedoch an keiner Stelle erwähnt. In Chem. Abs. 94: 192196d sind ebenfalls Benzoxazolone der Formel
beschrieben, in der X = CN, CONH&sub2;, COHNPh ist. Es ist angegeben, daß diese Verbindung fungizide Aktivität hat. Es sollte beachtet werden, daß diese Verbindung keine Propargylgruppe aufweist.
Eine erste Ausführungsform der vorliegenden Erfindung schafft eine Verbindung der Formel (I)
in der X Jod oder Brom ist und
Y einen oder zwei Substituenten darstellt, von denen jeder unabhängig Wasserstoff, Halogen, (C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, (C&sub1;-C&sub4;)Alkoxy, CN, OCO(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, OCOPh oder Halo(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl ist.
Eine andere Ausführungsform der Erfindung richtet sich auf die Verwendung der Verbindung oder einer Zusammensetzung, die diese Verbindung enthält, als Microbiozid und microbiozide Zusammensetzungen, die diese Verbindung enthalten.
Eine weitere Ausfuhrungsform der Erfindung schafft ein Verfahren zum Herstellen dieser Verbindungen durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (III)
mit einem Propargylhalid X¹-CH&sub2;-C C-X, in der X¹ Brom oder Chlor ist und X Jod, Brom oder Wasserstoff ist und dann, wenn X = H ist, Halogenieren des erhaltenen Produktes, um die erfindungsgemäße Verbindung herzustellen. Wenn X Brom oder Jod ist, wird das Propargylhalid hergestellt durch Halogenieren einer Verbindung der Formel X¹-CH&sub2;-C CH und anschließendes Umsetzen des halogenierten Produktes direkt mit der zuvor angegebenen Verbindung (III).
Wie beschrieben, genugen die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I)
in der X Jod oder Brom ist und
Y Halogen, H, NO&sub2;, (C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, (C&sub1;-C&sub4;)Alkoxy, CN, OCO(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, OCOPh oder Halo(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl ist.
Y kann ein einzelner Substituent am aromatischen Ring sein. Alternativ kann der Ring auch zweifach substituiert sein, wobei die Substituenten Y gleich oder unterschiedlich sein können. Vorzugsweise ist X Jod. Verbindungen, in denen Y ausgewählt ist aus Wasserstoff, Chlor und NO&sub2;, sind ebenfalls bevorzugt. Die besonders bevorzugten Verbindungen schließen 3-(3-Iodpropargyl)-2-benzoxazolon ein.
Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Formel I und entweder einen landwirtschaftlich akzeptablen Träger, ein Kosmetikmittel, ein Schneidöl, eine Seife oder ein Waschmittel, einen Stabilisator, ein filmbildendes Material oder dergleichen enthalten, können in einem weiten Bereich zum Schutz oder der Steuerung einer großen Zahl Mikroorganismen verwendet werden, einschließlich Pilzen, Bakterien, Algen, Viren und Hefen. Vorzugsweise werden die Zusammensetzungen verwendet zum Schutz von Holz, Farben, Klebstoff, Leim, Papier, Textilien, Leder, Kunststoff, Karton, Gleitmitteln, Kosmetika, Nahrungsmitteln, Dichtungsmitteln, frischwasser und industriellem Kühlwasser gegenüber Mikroorganismen.
Die Erfindung schafft auch ein Verfahren zum Hemmen oder Verhindern des Wachstums von Bakterien, Pilzen oder Algen an einem Ort, der damit verunreinigt ist oder gegenüber Verunreinigung empfindlich ist, durch Einbringen in den Ort oder auf die Stelle einer Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 enthält, in einer wirksamen Menge, um das Wachstum dieser Bakterien, Pilze oder Algen gegenteilig zu beeinflussen.
Die nachfolgende Liste spezifiziert Industriezweige und Verwendungsszwecke der Verbindungen oder Zusammensetzungen: Industriezweig Anwendung Klebstoffe, Dichtungsmittel Landwirtschaft/Nahrungskette Baustoffe Klebstoffe Versiegelungsmittel Dichtungsmittel Konservierungshilfsmittel landw. aktiver Bestandteil landw. chemisches Konservierungsmittel landw. Konservierungsformulierungen Tierfutterkonservierung Molkereichemikalien Düngerkonservierung Nahrungsmittelkonservierung Nahungsmittel-Verarbeitungschemikalien Kornkonservierung Schutz von Produkten nach der Ernte Zuckerherstellung Tabak Asphalt/Beton Zement-Modifiziermittel Baustoffe Dachbedeckungsmassen synthetischer Stuck Wandabdeckungsmaasen Zementverbindungen Kosmetika und Toilettenartikel Desinfektionsmittel, Antiseptika Emulsionen, Dispersionen Haushaltsprodukte industrielle Verfahren, Gemischtes Industriewasser-Behandlung Kosmetika Rohstoffe für Kosmetika und Toilettenartikel Toilettenartikel antiseptische Mittel Desinfektionsmittel wässrige Dispersion dispergierte Pigmente Latex fotografische Emulsionen Pigmentaufschlämmung Polymer-Latices Weichspüler Poliermittel Wachse Waschpasten Rohstoffe flüssige Waschmittel Handseifen Elektro-Tauchlackierungsfarben, Bäder, Waschflüssigkeiten Elektro-Tauchlackierungsvorbehandlung, Nachwaschflüssigkeiten Konservierung ind. Flüssigkeiten Pasteurisierbäder Konservierung von Verarbeitungs-Hilfsmitteln Luftwäscher Kühltürme Kühlwasser Wasserkühlung Wäschereiwesen Leder, Lederprodukte Gleitmittel, hydraulische Hilfsmittel med. Geräte Metallbearbeitung und verbundene Anwendungen Geruchskontrolle (aktiver Bestandteil) Konservierung/Behandlung von Holzkühltürmen und Einbauten derselben Behälterheizungen Brauerei-Pasteurisierung geschlossene Kühlwassersysteme Haushaltswaschprodukte Waschmittel Waschwasser Wäscherei-Desinfektionsmittel Leder und Häute Leder- und Hautprodukte Autoschmiermittel und Flüssigkeiten Gleitmittel für Transportbänder Fette Hydraulikflüssigkeiten Gleitmittel Diagnoseenzyme Diagnosekits medizinische Geräte Schneidflüssigkeiten Metallreinigung Metallbearbietungs-Flüssigkeiten Klimaanlagen Tierstreu Katzenstreu chem. Toiletten Deodorants Befeuchter Farben und Beschichtungen Papier- und Zelluloseindustrie und deren Produkte Papierfabriken Erdölaufbereitung, Brennstoffe ind. Deodorants Desinfektionsmittel Toilettenschüsseln Emulsionen Farben Absorptionsmittel von Papier, Holz und Pulpe Verpackungsmaterialien aus Papier und Holzschliff Papier Papiererzeugnisse Papierbehandlung Seifeneinwickler Holzschliff Holzschlifferzeugnisse Schleimbekämpfungsmittel bei der Papierfabrikation Zellulose und Papieraufschlämmungen Flugzeugtreibstoffe (Düsentreibstoff, Flugbenzin) Rohöle Heizöl, Dieselöl, Turbinenbrennstoff Kohleaufschlämmungen Dieselölzusätze Dieselöle Öle Benzin Heizöle Kohlenwasserstoffe Kerosin Flüssiggas petrochemische Rohstoffe Fotografie-Chemikalien und Verfahren Drucken Desinfektionsmittel (aktiv) Seifen, Waschmittel, Reiniger Erdölprodukte, Lagerung, Transport und Herstellung von wiederaufgearbeiteten Erdölprodukten Ölrückstände Turbinenöle fotografische Verfahren, Waschwasser, Spülwasser Fotoverarbeitung Druckplattenherstellungs-Chemikalien (Entwickler, Stabilisatoren use.) Spritzlösungen (Drucken) Druckfarbenbestandteile (Pigmente, Harze, Lösemittel usw.) Druckfarben Desinfektionsmittel Molkerei-Desinfektionsmittel Dental-Desinfektionsmittel Desinfektionsmittel - Fermentierung Desinfektionsmittel für Nahrungsmittelherstellung Desinfektionsmittel für Nahrungsmittelbearbeitung med. Desinfektionsmittel veterinärmed. Desinfektionsmittel neutrale Desinfektionsmittel Reiniger Waschmittel Haushaltsreiniger Industriereiniger flüssige Seifen Öl- und Fettentfernungsmittel Seifenpulver Textilien und Textilerzeugnisse Textilverarbeitung Rohmaterialien für Reinigungsprodukte Seifen oberflächenaktive Mittel, gebundene Vliese Juteleinen Kanvas leinen Kanvaserzeugnisse Teppich-Rückseitenbeschichtungen Teppiche Kleidung beschichtete Gewebe Vorhänge Vorhang- und Wandbekleidungsstoffe technische Textilien Fasern Geotextilien Textilerzeugnisse Maschenware Netze Vliese Seile Reisedecken Textilzubehör Textilerzeugnisse Textilien Aufpolsterung Gewebe Garne Farbfixiermittel Farben Fasergleitmittel Handmodifiziermittel Schlichtmittel Textilbearbeitungsflüssigkeiten Therapeutische Mittel (aktiv oder konservierend) Wasserreinigung Anwendungen im Holzbereich Gemischtes Tiergesundheit/Veterinärwesen Wasserkultur Dentalbereich menschliche Gesundheit Pharmazeutika/therapeutische Mittel Kohlebetten Ionenaustauscherharze Filter Membranen umgekehrte Osmosemembranen Ultrafilter Wasserreinigung Wasserreinigungsrohre, Rohre Lasuren gegen Holzverfärbung Holz Holzprodukte Alkohole wasser- oder gelhaltige Schüttungen keramische Erzeugnisse Kontaktlinsen-Reinigungsbehälter elektrische Schaltkreise Elektrochemikalien enzymatische Nahrungsmittelherstellung Enzyme industrielle Enzyme Gelkissen Unterwasser-Antifoulants schimmelhemmende Mittel Holz Kunststoffe Wäscherei Bergbau natürlicher Kautschuklatex Ölfeld-Injektionswasser mit Förderverstärkungsmitteln, Bohrflüssigkeiten, Brechflüssigkeiten Rohre Kunststoffe polymere Systeme Polymere und Harze (synthetische und natürliche) Konservierungsreagenzien Kautschuk Kautschukerzeugnisse Hautentferner feste Schutz- und Schmuckfilme Walzen Schwimmbäder Abwasserbehandlung Wasserbetten.
Die zu verwendenden Mengen der Verbindung hängen von dem Verwendungszweck ab. Die geeigneten Mengen für eine spezielle Anwendung sind gleich den Mengen, die für andere microbiozide Verbindungen verwendet werden. Üblicherweise kann eine Zusammensetzung jegliche Menge von 0,001 bis 99,99 Gew.% der Verbindung enthalten, üblicher sind von 0,01 bis 5%.
Die Verbindung kann in Kombination mit anderen microbioziden Mitteln verwendet werden. Der Ausdruck "Microbiozide" wird hier als Aquivalent zu "antimicrobiell" gesehen.
Die Verbindungen (I) der vorliegenden Erfindung können hergestellt werden durch folgende Umsetzung: halogenation
Eine Vielzahl von Halogenierungsreaktionen können zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) verwendet werden. Eine geeignete Methode ist hier beschrieben. Eine Losung oder Suspension von Verbindungen der Formel (II) in Lösemitteln wie Aceton, Methylethylketon oder Tetrahydrofuran wird mit N-Bromsuccinimid oder -Jodsuccinimid in Gegenwart eines Katalysators wie Silbernitrat umgesetzt. Die Reaktion läuft üblicherweise in einer Zeit von 20 Minuten bis 24 Stunden ab. Die Reaktion wird üblicherweise bei einer Temperatur zwischen 0ºC und 25ºC ausgeführt.
Verbindungen der Formel (II) können nach folgender Reaktionsgleichung hergestellt werden: Base Lösemittel oder
Eine Lösung oder Suspension einer Verbindung der Formel (III) in einem Lösemittel wie Aceton oder Methylketon wird mit einer Base behandelt, wie Kaliumcarbonat oder Natriumcarbonat, nachfolgend mit einem Propargylierungsmittel wie Propargylbromid oder Propargylchlorid der Formel (IV). Die zuvor beschriebene Behandlung erfolgt üblicherweise bei Raumtemperatur in inerter Atmosphäre wie Stickstoff und unter Rühren. Die Reaktionsmischung wird dann 1 bis 24 Stunden lang unter Rückfluß gehalten in Abhängigkeit von der speziellen Identität der Verbindung (III). Die Reaktionsmischung wird dann auf Raumtemperatur abgekühlt und in üblicher Weise aufgearbeitet. Die Reagenzien der Formel (IV) sind im allgemeinen kommerziell erhältlich oder können durch in der Literatur beschriebene Verfahren hergestellt werden. Die Ausgangsstoffe der Formel (III) sind ebenso kommerziell erhältlich oder können nach in der Literatur beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch hergestellt werden in einer Stufe aus Verbindungen der Formel (III) durch Umsetzen mit einem Halopropargylierungsmittel wie 3-Iodpropargylbromid oder 3-Jodpropargylchlorid in Gegenwart einer Base wie Natriumcarbonat oder Kaliumcarbonat. Die Reaktionssequenz kann wie folgt dargestellt werden: Base Lösemittel
Die Verbindungen der Formel (V) können hergestellt werden nach in der Literatur beschriebenen Verfahren wie folgt: Halogenierungsmittel Base und Lösemittel ggfs Katalysator
Die folgenden Beispiele beschreiben die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindung 3-(3-Iodpropargyl)-2-benzoxazolon.

Beispiel 1

Ein 2-l-Rundkolben mit mechanischem Rührer, Kondensator und Trockenrohr auf dem Kondensator wird mit 20 g (0,148 Mole) Benzoxazolon, 575 ml trockenem Aceton, 40,9 g (0,296 Mole) wasserfreiem Kaliumcarbonat und 26 g (0,175 Mole 80% in Toluol) Propargylbromid beschickt. Die Reaktionsmischung wird unter Rühren 24 Stunden am Rückfluß erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und filtriert und das Filtrat zu einem braunen Rückstand eingeengt. Nach Kristallisation mit Methylenchlorid/Hexan wurde ein gelbbrauner Feststoff mit einer Ausbeute von 22,8 g (89%) und einem Schmelzpunkt von 96- 98ºC erhalten. Aus einem NMR-Spektrum ergibt sich, daß das gewünschte Zwischenprodukt 3-Propargyl-Benzoxazol-2-2-one erhalten wurde.
Zur Lösung von 3-Propargyl-Benzoxazol-2-one (7 g, 0,04 Mole) in 100 ml trockenem Aceton in einem 300 ml Rundkolben mit Magnetrührer wurden 11,1 g (0,048 Mole) N-Iodsuccinimid zugesetzt und anschließend 0,3 g (0,00176 Mole) Silbernitrat. Die Reaktionsmischung wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Der Feststoff wurde abfiltriert und das Filtrat bis auf einen Rückstand in einem Rotationsverdampfer eingeengt. Der rohe Feststoff wurde in Ethylacetat aufgelöst und mit Wasser und Sole gewaschen. Die organische Schicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Abfiltrieren des Trocknungsmittels und Abdampfen des Lösemittels wurde der erhaltene Feststoff aus Hexan/Ethylacetat umkristallisiert mit einer Ausbeute von 9,1 g (75,8%) weißem Feststoff mit einem Schmelzpunkt von 162-164ºC. Aus dem NMR-Spektrum ergibt sich die gewünschte Verbindung.
Die folgenden Beispiele zeigen die microbiozide Aktivität von verschiedenen erfindungsgemäßen Verbindungen: 3-(3-Iodpropargyl)-2-benzoxazolon (Y=H,X=J), 3-(3-Jodpropargyl)-6-chlor-2-benzoxazolon (Y=CL, X=J), 3-(3-Brompropargyl)-6-chlor-2-benzoxazolon (Y=Cl, X=Br) und 3-(3- Brompropargyl)-2-benzoxazolon (Y=H, X=Br).

Beispiel 2

In vitro bakterizide und fungizide Prüfungen

Aktivität gegen verschiedene Bakterien und Pilze wurde bestimmt unter Verwendung einer minimalen Hemmungskonzentrationsprüfung (MIC), der die minimale Konzentration der geprüften Verbindung ergibt, die erforderlich ist, um vollständiges Wachstum des Prüforganismus zu verhindern.
Ein MIC-Wert wurde erhalten durch Verwendung eines Nährbodens mit Zweifach-Reihenverdünnung, die wie folgt ausgeführt wurde: Eine Stammlösung oder Dispersion der Prüfverbindung mit einer Konzentration von 1% wurde in einem Lösemittelgemisch Aceton:Methanol:Wasser mit einem Verhältnis 5:3:2 hergestellt. Ein Volumen der Stammlösung wurde auf das Kulturmedium aufgebracht, um eine Anfangsprüfkonzentration von 500 ppm Verbindung zu erzeugen.
Wenn die Prüfung begonnen werden sollte, wurde jedes Gefäß der Verdünnungsreihe, ausgenommen das erste Gefäß, mit einem gleichen Volumen von verbindungsfreier Nährlösung versehen. Das erste Gefäß enthält das doppelte Volumen von Nährlösung mit der Anfangskonzentration der zu prüfenden Verbindung. Eine Hälfte der Nährlösung wurde aus dem ersten Gefäß in das zweite Gefäß überführt. Nach Mischung wurde die Hälte des erhaltenen Volumens aus dem zweiten Gefäß in das dritte Gefäß überführt. Der Gesamtzyklus wurd ausreichend oft wiederholt, um Konzentrationsreihen von 500, 250, 125, 63, 31, 16, 8 und 4 ppm (oder 25, 12,5, 6,2, 3,1, 1,6, 0,8, 0,4, 0,2) zu ergeben.
Jeder Behälter wurde mit einer Zellsuspension des geeigneten Prüforganismus geimpft. Bakterien wuchsen in Nährlösung und Pilze auf Agarscheiben für eine ausreichende Zeit und bei einer geeigneten Temperatur für die betreffenden zu prüfenden Spezies. Am Ende der Wachstumsperiode wurde der Bakterien enthaltende Nährboden durchgewirbelt, um die Zellen zu dispergieren. Im Falle von Pilzen wurden die Sporen geerntet durch Pipettieren von Wasser auf die Scheibe und Abnehmen der Sporen mit einem sterilen Spatel. Die Zellen/Sporen-Suspension wurde standardisiert durch Steuern der Inkubationszeit, Temperatur und dem Volumen des Verdünnungsmittels. Die Suspension wurde dann verwendet, um die Gefäße mit dem Nährboden und der Verbindung zu impfen. Die Gefäße wurden dann bei geeigneter Temperatur inkubiert. Nach der Inkubationszeit wurden die Gefäße geprüft bezüglich Wachstum bzw. kein Wachstum. Die minimale Hemmungskonzentration (MIC) ist definiert als die geringste Konzentration der Verbindung, die das Wachstum des Prüforganismus vollständig hemmt.
Die geprüften Organismen waren Bacteria Pseudemonas fluorescens (Ps.fl) - ATCC 948, Pseudomonas aeruginosa (Ps.ae) - ATCC 15442, Escherichia Coli (E.coli) - ATCC 11229 und Staphylococcus aureus (S.aur) - ATCC 6538 und fungi Aspergillus niger (A.niger) - ATCC 6275, Penicillium funiculosum (P.fun.) - ATCC 11797, Cladosporium resinae (A.res.) - ATCC 52833, Aureobasidium pullulans (A.Pull.) - ATCC 9248, Cloeophyllum trabeuor (G.trab.) - ATCC 11539 und zwei Stämme Sacharomyces cereresae (S.cer.) - ATCC 560 und Rhorotorularubra (R.rubra) - ATCC 2503. Ergebnisse Organismus MIC (ppm) für jede Verbindung

Beispiel 3

In vitro Pflanzenfungizidprüfungen

Die Wirksamkeit von drei der zuvor beschriebenen vier Verbindungen wurde geprüft durch Steuern ausgewählter Pflanzungen von Pilzen nach dem folgenden Verfahren. Die zur Prüfung verwendeten Organismen waren:
PYU Phytium ultimum (Oomycete)
PHY Phythophthora capsici (Oomycete)
PIR Piricularia oryzae (Ascomycete)
HEL Cochliobolus sativus (Ascomycete)
BOC Botrytis cinerea (Ascomycete)
FUS Fusarium roseum (Ascomycete)
SEP Septoria nodorum (Ascomycete)
RHI Rizoctonia solani (Basidiomycete)
XAN (Xanthomonas campestris (Bakterium)

Verfahren:

1. Kulturerhaltung: alle 8 Pilze und das bei dieser Prüfung verwendete Bakterium wurden überführt und aufrechterhalten auf Kartoffeldextrose Agarplatten (2 Platten/Organismus). Die Organismen wurden mit folgenden Perioden verwendet: a. 1 Woche alt: PYU, PHY, RHI; b. 2 Wochen alt: XAN, PIR, BOC, HEL, FUS, SEP, COL, MON, CER, UST, ALT; c. 3 Wochen alt: PSH, VEN. Phytium ultimum und Phytophthora capsici wurden auf Asparaginsucrose-Nährbodenkulturen (ASB) überführt. Rhizoctonia solani, Fusarium roseum, und Zanthomonas campestris wurden aufrechterhalten in Hefeextrakt-Nährboden (YDB) in einer Schüttelvorrichtung. Kulturflaschen wurden geimpft mit 6 ml Pilzpfropfen jeweils (ausgenommen Phytium, das geimpft wurde mit nur 3 Pfropfen), entnommen von PDA-Platten. Alle flüssigen Schüttelkulturen wurden verwendet nach 2 Tagen Wachstum.
2. Inoculum-Herstellung. Conidia und Mycelium von PIR, BOC, HEL, SEP, COL, MON, CER, PSH, UST und ALT wurden leicht abgekratzt in YDB, so daß die meisten Sporen zum Impfen verwendet wurden. XAN-Brutkultur (1 ml Kultur pro 100 ml Brut) wurde gegossen in YDB, PYU, PHY, RHI und FUS-Kulturen waren am Boden und alle außer Phythium und Phytophthora filtriert. 10 ml der Kulturlösung von R. solani und F. roseum wurden zu 90 ml YDB zugefügt und 10 ml von P. capsici wurden zu 90 ml ASB zugesetzt. 2 ml der Kulturlösung von P. ultimum wurden zu 98 ml ASB zugesetzt. 175 µl (Einzeldosis) oder 100 µl (Dosis-Antwortprüfung) von Impfbrühe wurde in jede Ausnehmung von Mikrotiterplatten angeordnet. Die mit Medien beschickten Platten wurden über Nacht tiefgekühlt.
3. Zugabe der Prüfverbindung. 10 mg der genannten Prüfverbindung wurde angeordnet in 1 ml 1:1 Aceton:Methanol. 5 µl dieser Lösung wurden auf die Mikrotiterplatten pipettiert, die 245 ml steriles Wasser in dem Muster aufwiesen. 25 µl der erhaltenen Lösung wurden auf die geimpften Platten überführt. Die Ergebnisse sind nachfolgend wiedergegeben als % Befall relativ zu unbehandelten Kontrollproben. % Befall im Vergleich zur Gegenprobe Verbindung Dosis (ppm)

Beispiel 4

In vivo Planzenbefall-Kontrollprüfung

3-(3-Jodpropargyl)-2-benzoxazolon wurde in der fungiziden Aktivität in vivo geprüft gegen weichen Gurkenmehltau (CDM), Reismehltau (RB), Weizenspelzenflecken ( WGB), Tomatenmehltau (TLB), Weizenpulvermehltau (WPM), Weizenstengelrost (WSR) und Weizenblattrost (WLR). Bei den Prüfungen auf Pflanzen (ausgenommen bei Reispflanzen, die zum Prüfen von Reismehltau verwendet wurden) wurden die Pflanzen etwa 24 Stunden vor dem Aufbringen der fungiziden Zusammensetzung getrimmt, um eine gleichmäßige Pflanzenhöhe zu haben und ein gleichmäßiges Aufbringen der Verbindung und Impfen mit Pilzen zu ermöglichen. Die Prüfverbindung wurde gelöst in einer 2:1:1-Mischung von Wasser:Aceton:Methanol und auf die Pflanzen gespritzt. Sie konnte 4-6 Stunden trocknen, dann wurden die Pflanzen mit dem Pilz geimpft. Jede geprüfte Vergleichspflanze wurde mit der Wasser-Aceton-Methanol-Mischung besprüht und mit dem Pilz geimpft. Die verbleibenden Angaben für diese Technik bei allen Versuchen werden nachfolgend angegeben, und die Ergebnisse sind als % Befall im Vergleich zur Gegenprobe angegeben (Prozentsatz der mit den erfindungsgemäßen Verbindungen behandelten Pflanzen, die keinen Befall oder Symptome im Veergleich zu unbehandelten Gegenprobenpflanzen aufweisen).

Weicher Gurkenmehltau (CDM)

Pseudoperonospora cubensis wurde aufrechterhalten auf Blättern von lebenden Marketer-Gurkenpflanzen bei einer konstanten Raumtemperatur von 65ºF bis 75ºF in feuchter Luft mit mäßiger Belichtung während 7 bis 8 Tagen. Eine Wassersuspension mit Sporen von befallenen Blättern wurde erhalten und die Sporenkonzentration eingestellt auf etwa 100.000 pro ml Wasser.
Marketer-Gurkensetzlinge wurden geimpft durch Besprühen der Unterseite der Blätter mit einem DeVilbiss-Sprüher, bis kleine Tropfen auf den Blättern zu beobachten waren. Die geimpften Pflanzen wurden inkubiert in einer Nebelkammer für 24 Stunden bei etwa 70ºF und anschließend inkubiert für 6 bis 7 Tage in einem temperaturgesteuerten Raum unter Nebel bei 65ºF bis 75ºF. 7 Tage nach Impfung wurde der prozentuale Befall im Vergleich zur Gegenprobe bestimmt.

Reismehltau (RB)

Nato-Reispflanzen wurden geimpft mit Piricularia oryzae (etwa 20.000 Sporen pro ml) durch Bespritzen der Blätter und Stengel mit einer Luftbrüste, bis ein gleichmäßiger Film der Impflösung auf den Blättern erkennbar war. Die geimpften Pflanzen wurden bebrütet in feuchter Umgebung (75ºF bis 85ºF) während 24 Stunden und dann in Gewächshausatmosphäre bei 70ºF bis 75ºF gebracht. 7 bis 8 Tage nach der Impfung wurde der prozentuale Befall im Vergleich zur Gegenprobe bestimmt.

Weizenspelzenflecken (WGB)

Septoria nodorum wurde hergestellt durch Inkubieren von Platten, die Sporulatum mycelium enthalten, für 48 Stunden in Dunkelheit bei 20ºC, bis ein weißes Mycel sichtbar war. Die Platten wurden dann bei 21ºC unter kontinuierlicher Belichtung 15 bis 20 Tage inkubiert, bei welchem Zustand das Mycel pinkfarben war.
Eine Suspension von Sporen in entionisiertem Wasser wurde eingestellt auf eine Konzentration von 150-300 Sporen pro ml. Weizenpflanzen wurden geimpft durch Einsprühen der Blätter mit der Sporensuspension mittels einer Handsprühvorrichtung. Ebenfalls wurden nach dem Besprühen die Pflanzen mit einem Mineralöl eingesprüht und 5 Minuten gewartet. Die geimpften Pflanzen wurden 72 Stunden in einem Luftraum bei 20ºC inkubiert mit Belichtungsperioden von 16 Stunden Licht und 8 Stunden Dunkelheit. Die Pflanzen wurden dann in eine Wachstumskammer bei 20ºC für 7 bis 9 Tage gebracht und in einem Zyklus 16 Stunden Licht und 8 Stunden Dunkelheit entwickelt, ehe die prozentuale Befallsbestimmung im Vergleich zur Gegenprobe erfolgte.
Phytophthora infestans wurde kultiviert auf 4 Wochen alten Pixie-Tomatenpflanzen in einer gesteuerten Umgebung bei 65ºF bis 70ºF auf 100% relativer Feuchte. Nach Lagerung wurden die Sporen von den Blättern mit Wasser abgewaschen und mit einem DeVilbiss-Atomizer auf 3 Wochen alte Pixie-Tomatenpflanzen gespritzt, die zuvor mit Versuchsfungiziden besprüht waren. Die geimpften Pflanzen wurden in einem feuchten Raum bei 70ºF und konstantem Nebel 24 Stunden zur Infektion gehalten. Die Pflanzen wurden dann in einen klimatisierten Raum, wie zuvor oben angegeben, überführt und nach 3 weiteren Tagen Inkubationszeit bewertet. Das Befallniveau wurde notiert als % im Vergleich zu den Vergleichsproben 4 Tage nach Impfung und 5 Tage nach Aufsprühen der Verbindung.

Weizenpulvermehltau (WPM)

Erysiphe graminis (f.sp.tritici) wurde kultiviert auf Pennol-Weizensetzlingen in einem klimatisierten Raum bei 65ºF bis 75ºF. Mehltausporen wurden abgeschüttelt von Kulturpflanzen auf Pennol-Weizensetzlinge, die zuvor besprüht waren mit der fungiziden Verbindung. Die geimpften Setzlinge wurden in einem temperaturgesteuerten Raum bei 65ºF bis 75ºF gehalten und berieselt. Der prozentuale Befall im Vergleich zur Kontrollprobe wurde 8 bis 10 Tage nach Impfung bewertet.

Weizenstengelrost (WSR)

Puccinia graminis (f.sp.tritici Race 15B-2) wurde kultiviert auf Wanzer-Weizensetzlingen für 14 Tage in einem Gewächshaus. Eine wässrige Suspension von Sporen von infizierten Pflanzen wurde erhalten, und die Sporenkonzentration wurde eingestellt auf etwa 200.000 Sporen pro ml entionisiertem Wasser. Wanzer-Weizenpflanzen, die zuvor mit den Fungizidverbindungen behandelt waren, wurden geimpft durch Aufbringen der Stengelrostsporen der Suspension bis zum Ablauf mit einer DeVilbiss-Sprühpistole mit 5 lbs pro inch² Luftdruck. Nach dem Impfen wurden die Pflanzen in feuchter Umgebung bei etwa 75ºF gehalten und 12 Stunden Dunkelheit ausgesetzt mit anschließend einer minimalen Belichtung von 3 bis 4 Stunden mit einer Intensität von etwa 500 x 10,764 Lux (500 footcandles). Die Temperatur der Kammer überschritt nicht 85ºF. Am Ende der Belichtungszeit wurden die Pflanzen in ein Gewächshaus überführt, wo sie 2 Wochen wachsen konnten. Nach dieser Zeit erfolgte die Befallbestimmung gegenüber Vergleichsproben.

Weizenblattrost (WLR)

Puccinia recondita (f.sp.tritici Races PKB und PLD) wurden kultiviert auf 7 Tage altem Weizen (cultivar Fielder) während 14 Tagen in einem Gewächshaus. Sporen wurden gesammelt von den Blättern mit einem Vakuumzyklon oder durch Abschütteln auf eine Aluminiumfolie. Die Sporen wurden gereinigt durch Sieben durch ein 200 Micron aufweisendes Sieb und gelagert oder frisch verwendet. Zur Lagerung wurden versiegelte Beutel in einem Tiefgefrieraggregat verwendet. Als gelagert wurden die Sporen einem Wärmeschock für 2 Minuten bei 40ºF vor Verwendung ausgesetzt. Eine Sporensuspension wurde hergestellt aus trockenem Uredia durch Zugeben von 20 mg (9,5 Millionen) pro ml Soltrolöl. Die Suspension wurde in Gelatinekapseln eingebracht (0,7 ml Größe) und in eine Ölspritzvorrichtung eingebracht. Eine Kapsel wurde verwendet pro Fläche von 20 von 2 inch Kulturgefäßen mit 7 Tage altem Fielder-Weizen. Nach mindestens 15 Minuten Warten zum Verdampfen des Öls von den Weizenblättern wurden die Pflanzen in einer dunklen Nebelkammer (18 bis 20ºC und 100% relative Luftfeuchtigkeit) 24 Stunden gehalten. Die Pflanzen wurden dann in ein Gewächshaus für eine Latenzperiode und dann nach 10 Tagen der Befall beurteilt. Schützende und heilende Prüfungen wurden geimpft 1 Tag und 2 Tage vor dem Besprühen der Pflanzen mit zu prüfenden Chemikalien. % Befall im Vergleich zur Gegenprobe Verbindung Dosis (ppm)

Claims

1. Verbindung der formel (I)

in der X Jod oder Brom ist und Y einen oder zwei Substituenten darstellt, von denen jeder unabhängig Wasserstoff, Halogen, (C&sub1;-C&sub4;)-Alkyl, (C&sub1;-C&sub4;)-Alkoxy, CN, OCO(C&sub1;-C&sub4;)-Alkyl, OCOPh oder Halo(C&sub1;-C&sub4;)-Alkyl ist.

2. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß X Jod ist.

3. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Y Wasserstoff oder Chlor ist.

4. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel

5. Zusammensetzung enthaltend eine Verbindung nach Anspruch 1 und einen zweiten Bestandteil, der ein landwirtschaftlich verträglicher Träger, ein kosmetisches Mittel, ein Schneidöl, eine Metallbearbeitungsflüssigkeit, eine Seife oder ein synthetisches Detergens, ein Stabilisator oder ein filmbildendes Material ist.

6. Zusammensetzung nach Anspruch 5, dadurch ge kennzeichnet, daß die Verbindung in einer Menge von 0,001 bis 99,9g Gew.-%, vorzugsweise von 0,01 bis 5 Gew. -%, vorhanden ist.

7. Verfahren zum Herstellen einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4 durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (III)

mit einer Verbindung der Formel X¹-CH&sub2;-C C-X, in der X¹ Brom oder Chlor ist und X Jod, Brom oder Wasserstoff ist, und dann, wenn X Wasserstoff ist, weiteres Umsetzen des Reaktionsproduktes mit einem Jodierungsmittel oder Bromierungsmittel.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung der Formel X¹-CH&sub2;-C C-X in den Fällen, in denen X Brom oder Jod ist, hergestellt wird durch Umsetzen einer Verbindung der Formel X¹-CH&sub2;-C CH mit einem Jodierungs- oder Bromierungsmittel.

9. Nicht-therapeutische Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4 oder einer Zusammensetzung nach Ansprüchen 5 oder 6 als Microbiozid.

10. Nicht-therapeutisches Verfahren zum Verhindern oder Hemmen des Wachstums von Bakterien, Pilzen oder Algen an einem Ort, der damit verunreinigt ist oder gegenüber Verunreinigung empfindlich ist durch Einbringen in den Ort oder auf die Stelle einer Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1-4 enthält, in einer wirksamen Menge, um das Wachstum dieser Bakterien, Pilze oder Algen gegenteilig zu beeinflussen.