DE68909062T2

DE68909062T2 - Verfahren und Mittel zur Verhinderung der Färbung der Zähne.

Info

Publication number: DE68909062T2
Application number: DE1989609062
Authority: DE
Inventors: Anthony Cerami; Michael A Yamin
Original assignee: Rockefeller University
Current assignee: Rockefeller University
Priority date: 1988-01-29
Filing date: 1989-01-30
Publication date: 1994-03-17
Anticipated expiration: 2009-01-31
Also published as: AU620072B2; EP0327919A2; EP0327919B1; JPH0256413A; JPH0737373B2; ES2059576T3; DE68909062D1; CA1332572C; EP0327919A3; AU2893589A

Description

Diese Erfindung wurde mit anteiliger Unterstützung durch Stipendien der National Institutes of Health und der Brookdale Foundation erstellt.

VERWANDTE VERÖFFENTLICHUNGEN

Die Anmelder sind Mitautoren folgender den Gegenstand der vorliegenden Erfindung betreffender Artikel:
"COVALENT ATTACHMENT OF SOLUBLE PROTEINS BY NONENZYMATICALLY GLYCOSYLATED COLLAGEN: ROLE IN THE IN SITU FORMATION OF IMMUNE COMPLEXES", Brownlee M., Pongor S., Cerami A., (1983), J.Exp.Med, 158, Seiten 1730-1744; und "AGING OF PROTEIN: ISOLATION AND IDENTIFICATION OF FLUORESCENT CHROMOPHORE FROM THE REACTION OF POLYPEPTIDES WITH GLUCOSE", Pongor, et al, Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 81, Seiten 2684-2688, (Mai 1984). Beide Veröffentlichungen sind hier als Hinweis enthalten.

GRUNDLAGE DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung betrifft im allgemeinen die Reaktion, welche zwischen Glucose und Proteinen stattfindet, und insbesondere die Hemmung der ausgehend von nichtenzymatisch glycosylierten Proteinen zu weiteren Glycosylierungs-Endprodukten führenden Reaktion durch verschiedene Aminoguanidin-Derivate.
Die nichtenzymatische Bräunungsreaktion, welche in der Mundhöhle stattfindet, führt zur Verfärbung von Zähnen. Derzeit gebräuchliche Anti-Plaque-Mittel beschleunigen diese nichtenzymatische Bräunungsreaktion und in der Folge die Verfärbung der Zähne.
Die Anziehungskraft eines mit perlweißen Zähnen einhergehenden perfekten Lächelns kann nicht bestritten werden. Um dieses Aussehen zu erreichen, werden viele Dollars aufgewandt, und bei vielen Personen gibt sich die auf der Zahnoberfläche auftretende natürliche Verfärbung oft merkbar zu erkennen. Ebenso wird eine Zahnverfärbung bei den meisten Personen, welche bestimmte Antiplaque-Mittel zur Verhindung von Munderkrankungen einnehmen, in großem Maße beschleunigt. Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, Mittel bereitzustellen, welche die auf der Zahnoberfläche als Ergebnis einer nichtenzymatischen Bräunung sowohl von Natur aus und auch als Folge der Verwendung von Antiplaquemitteln auftretende Verfärbung verhindern. Die hier verwendeten Ausdrücke "Zahn" und "Zähne" beziehen sich sowohl auf natürlich vorkommende als auch auf künstliche Zähne sowie auf künstliche Zahnoberflächen und -rekonstruktionen.
Zahnkaries, Gingivitis und Periodontoseerkrankung sind weit verbreitet und betreffen nahezu alle Personen in bestimmtem Ausmaß, und dies kosmetisch, medizinisch und finanziell. Diese Erkrankungen kommen durch die Wirkung bestimmter Mikroorganismen, in erster Linie Bakterien, zustande, welche auf Mundoberflächen Kolonien ausbilden und deren Tätigkeit zur Demineralisierung des Zahnbeins mit Folge von Karies sowie zu chronischer Reizung und Infektion des Zahnfleisches (Gingivitis), insbesondere in den die Zähne umgebenden Taschen, was zur Periodontose führt, Anlaß gibt. Als Ergebnis beider Vorgänge können Schmerzen, Entstellungen und phychische Entkräftung auftreten.
Die Entwicklung von Zahn- und Zahnfleischerkrankungen ist ein komplexer Vorgang, zu dem Zähne und Zahnfleischoberfläche, Bestandteile und Eigenschaften des Speichels, Ernährung und die vielfältigen Bakterienarten im Mund und auch viele andere Faktoren beitragen. Im allgemeinen führt die Inkubation einer frisch gereinigten Zahnoberfläche im Mund am Anfang zur Ablagerung eines Materials, genannt Pellikel (Häutchen), auf der Oberfläche, welches sich aus vom Speichel und Bakterienzellen herrührendem Protein und Polysaccharid zusammensetzt. Wenn die koloniebildenden Bakterien wachsen, erzeugen sie über die Zersetzung von Nahrungszukkern ein Polysaccharid. Diese Polysaccharid begünstigt die Haftung der Bakterien an der Zahnoberfläche und begünstigt ebenso die Mineralisierung von Kalziumsalzen aus dem Speichel in dem Häutchen. Mit fortschreitendem Vorgang wird die als Plaque bekannte Bakterienmasse ein Zentrum für die Demineralisierung des Zahnbeins und der Reizung der Gewebe. Durch die Bakterien während der Zuckerfermentierung erzeugte Säuren lösen des Zahnbein und die Plaquemasse verhindert, daß Puffersubstanzen im Speichel diese Säuren neutralisieren. Daraus ergibt sich Zahnkaries. Die Bakterien in der Plaque und solche, die in den die Zähne umgebenden Taschen leben, erzeugen Endotoxin und andere wohlbekannte bakterielle Produkte, welche das Gewebe stark reizen und dazu führen, daß das Gewebe hierauf reagiert, und dies führt zur Rückbildung des Zahnfleisches, zur Demineralisierung des Zahnbeins und zu lokaler Reizung.
Eine der Folgen langzeitigen Zusammenwirkens von Proteinen in der Pellikel und in der Plaque mit Zuckern im Mund ist der Vorgang der nichtenzymatischen Bräunung, welcher die Verfärbung der Zahnoberfläche zur Folge hat. Die nichtenzymatische Bräunung, auch als Maillard-Reaktion bekannt, wurde von Lebensmittelchemikern ausgiebig untersucht, da sie verantwortlich ist für die braune Farbe, welche sich während des Kochens und während der Langzeitlagerung von Lebensmitteln bildet. In dieser Reaktion reagieren Aminogruppen in Lebensmittelproteinen und anderen Molekülen mit Zuckern unter Ausbildung covalenter Addukte, die Umlagerungen erfahren, was zu hochpolymerisierten, gefärbten Produkten führt. Während dieser Vorgang bei Lebensmitteln gut bekannt ist, wurde erst kürzlich seine Bedeutung im Hinblick auf den menschlichen Körper und auf die Folgen des langzeitigen Zusammenwirkens von Glucose und Aminogruppen von Proteinen und anderen Makromolekülen im Körper erfaßt. Die Maillard-Reaktion in vivo wurde in den letzten paar Jahren ausgiebig untersucht, nitchtenzymatische Bräunung und Quervernetzung von Proteinen in vivo hat sich als ein wichtiger Mechanismus erwiesen, von welchem die Folgeerscheinungen von Diabetes und das Altern herrühren (siehe M. Brownlee et al, "Nonenzymatic glycosylation and the pathogenesis of diabetic complications", Annals of Internal Medicine, 101, Seiten 527-537 (1986)). Erhöhter Glucosespiegel bei Diabetes beschleunigt Folgeerscheinungen unter Ausbildung permanenter Quervernetzung von Proteinen, jedoch führt letztlich auch ein normaler Glucosespiegel bei Nichtdiabetikern zu denselben Komplikationen.
Methoden zur Verhinderung der nichtenzymatischen Bräunung in vivo mit Agenzien wie Aminoguanidin und anderen Hemmstoffen wurden untersucht (Brownlee et al., "Aminoguanidin prevents diabetes-induced arterial wall protein cross-linking", Science, 232, Seiten 1629-1632 (1968), Cerami et al., US- Patent Nr. 4 758 583, entsprechend EPA 0 222 313 sowie EPA 0 316 852, entsprechend US-Patent Nr. 4 908 446).
Lange Jahre wurden bestimmte Agenzien zur Verringerung des Ausmaßes von Munderkrankungen, darunter Dentalkaries, Gingivitis und Periodontose, untersucht und verwendet. Regelmäßiges Bürsten und Behandlung mit Zahnseide reichen offensichtlich nicht auf, jedenfalls nicht in dem von Durchschnittspersonen geübten Ausmaß. Abriebsmittel wie Kieselerde wurden Bestandteile von Zahnpasten bei dem Versuch, die Plaque physikalisch zu entfernen und damit die Wirksamkeit des Bürstens zu verbessern. In Mundspülmitteln für den regelmäßigen Gebrauch wurden antimikrobielle Agenzien eingearbeitet, um die Bakterien im Mund zu töten. Solche Agenzien sind unter anderem Sanguinarin, ein Extrakt aus Sanguinaria (blood root), welcher bestimmte Mundbakterien tötet, bestimmte Arten von aktivem Peroxid zur Abtötung von Mikroorganismen, Alkohol enthaltende Spülmittel und andere Bestandteile sowie kürzlich eine Klasse von kationischen antimikrobiellen Agenzien mit beachtenswerten Antiplaque-Eigenschaften.
Diese letzteren Agenzien, die kationischen Antiseptika, schließen Mittel wie Alexidin, Cetylpyridiniumchlorid, Chlorhexidin-Gluconat, Hexetidin und Benzalkoniumchlorid ein. Viele wurden auf ihre Wirksamkeit geprüft, jedoch hat sich eines, nämlich Chlorhexidingluconat, als Antiplaquemittel von niedriger Toxizität am aussichtsreichsten erwiesen (siehe Hull, "Chemical Inhibition of Plaque", J.Clin. Periodontol., 7, Seiten 431-432 (1980); Bain, "Chlorhexidine in Dentistry: A Review," New England Dent.J., 76, Seiten 49-54 (1980); Tonelli et al., "Chlorhexidine: a Review of the Literature, "J.West.Soc.Periodent., 31, Seiten 5-10 (1993)), und dies Mittel ist seit kurzem in den Vereinigten Staaten erhältlich als verordnungsfähige Formulierung, bekannt als Periodex , welche 0,12% Chlorhexidingluconat in einer Lösung von Wasser, Alkohol, Glycerin, Aromastoff, Süßmittel und Farbstoffen enthält. Chlorhexidingluconat hat sich als Formulierung in solchen Spülmitteln als Antiplaquemittel als besonders ausrichtsreich erwiesen, man hat daran aber eine nachteilige Nebenwirkung ermittelt: Die Verfärbung von Zähnen. Well auch diese Nebenwirkung keine medizinische Bedeutung hat, stellt sie ein großes psychologisches Problem dar, denn verfärbte Zähne schauen häßlich aus und bieten dem Mitmenschen ein unerwünschtes Bild.
Die Zahnverfärbung durch Chlorhexidin und andere Antiplaquemittel rührt offensichtlich von einer Verstärkung der Maillard-Reaktion her. Nordbo, J.dent.Res., 58, Seite 1429 (1979) berichtet, daß Chlorhexidin und Benzalkoniumchlorid die Bräunungsreaktionen in vitro katalysieren. Ein Zuckerderivat und eine Aminogruppenquelle enthaltende Gemische, denen Chlorhexidin zugegeben wurde, zeigten verstärkte Farbbildung, was der Maillardreaktion zuzuschreiben war. Man weiß auch, daß die Verwendung von Chlorhexidin zu erhöhtem Zahnhäutchenbelag führt. Nordbo erwog, daß Chlorhexidin auf zweierlei Weise zur Zahnverfärbung führt: Erstens durch verstärkte Bildung von Belag mit erhöhtem Aminogruppengehalt und zweitens durch Katalyse der Maillard-Reaktion unter Ausbildung gefärbter Produkte. So besteht ein Bedarf daran, die durch Chlorhexidingluconat und andere kationische Mundspülmittel verursachte Verfärbung zu verhindern, wobei deren gute antimikrobielle und plaqueverhindernde Wirkung nicht gestört werden soll.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Erfindungsgemäß wird die Verwendung einiger Agenzien in einer Zusammensetzung zur Verhinderung der durch die nichtenzymatische Bräunung von Proteinen in der Mundhöhle verursachte Zahnverfärbung offenbart. Insbesondere werden Agenzien zur Hemmung der nichtenzymatischen Bräunung in Spülmitteln und Zahnpasta zusammen mit bekannten Antiplaquemitteln wie Chlorhexidin formuliert. Außerdem kann das Agens oral oder parenteral verabreicht werden, da es sich in den Schleimhäuten konzentriert und anschließend mit dem Schleim in die Mundhöhle abgegeben wird.
Die in den erfindungsgemäßen Verfahren und Formulierungen verwendbaren Agenzien haben die Fähigkeit, mit dem Carbonylteil des frühen Glycosilierungsproduktes zu reagieren, welches durch die anfängliche Glycosilierung des Zielproteins in der nichtenzymatischen Bräunungsreaktion gebildet wird. Bevorzugte Agenzien weisen einen aktiven stickstoffhaltigen Substituenten auf. Darunter befinden sich solche mit einer Hydrazingruppe als aktivem Stickstoffsubstituenten. Weitere Agenzien sind Aminosäuren und deren Ester und Amide.
Spezifische erfindungsgemäß verwendbare Agenzien sind Aminoguanidin, α-Hydrazinohistidin, Lysin sowie die substituierten Aminoguanidin-Derivate mit der Strukturformel
in der R eine Gruppe der Formel
darstellt und
R&sub1; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe ist oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen sein kann,
R&sub2; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, eine Aminogruppe, eine Hydroxygruppe oder eine Aminoalkylengruppe der Formel
ist, worin n eine ganze Zahl von 2-7 ist und R&sub6; und R&sub7; unabhängig voneinander eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines heterocyclischen Ringes mit 1-2 Hereroatomen bilden, von denen mindestens eines Stickstoff ist und das zweite der genannten Heteroatome ausgewählt ist aus der Gruppe von Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel; mit dem Vorbehalt, daß wenn das zweite der genannten Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, dieser gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert sein kann, der identisch zu dem Bereich der Verbindung am ersten Stickstoffatom des Piperazinrings ist;
R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4;, R&sub5; von Wasserstoff verschieden ist; oder
R eine Acylgruppe oder eine Niederalkyl-Sulfonylgruppe mit bis zu 10 Kohlenstoffatomen und R&sub1; Wasserstoff ist;
sowie deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.
Bestimmte Verbindungen der Formel I werden durch die Formel II dargestellt
in welcher
R&sub1; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen, ein Hydroxyethylgruppe ist oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen sein kann;
R&sub2; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen, eine Aminogruppe, eine Hydroxygruppe oder eine Aminoalkylengruppe der Formel
ist, worin n eine ganze Zahl von 2-7 ist und R&sub6; und R&sub7; unabhängig voneinander eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines heterocyclischen Ringes mit 1-2 Heteroatomen darstellen, von welchen mindestens eines Stickstoff ist, und wobei das zweite der genannten Heteroatome ausgewählt ist aus der Gruppe von Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel; mit dem Vorbehalt, daß, wenn das zweite der genannten Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, dieses gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert ist, welcher identisch zu dem Bereich der Verbindung am ersten Stickstoffatom des Piperazinrings ist.
R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; von Wasserstoff verschieden ist;
sowie deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.
So stellen bestimmte erfindungsgemäße Verbindungen substituierte Aminoguanidinderivate dar.
Bestimmte erfindungsgemäß verwendbare Aminoguanidinderivate werden durch die Formel III dargestellt
Worin R&sub8; eine Aminogruppe, Wasserstoff, eine 2-Hydroxyethylgruppe oder eine Niederalkylgruppe ist, R&sub9; und R&sub1;&sub0; Wasserstoff, eine 2-Hydroxyethylgruppe oder eine Niederalkylgruppe sind und m eine ganze Zahl von 2-4 ist. Bestimmte Verbindungen aus dieser Gruppe werden ebenso durch die Formel
wiedergegeben, worin R&sub1;&sub1;, R&sub1;&sub2; und R&sub1;&sub3; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe sind und m eine ganze Zahl von 2-4 ist.
Besonders bevorzugte Verbindung sind solche, in denen R&sub8;, R&sub9; und R&sub1;&sub0; sämtliche Wasserstoff sind und in denen m den Wert 2 hat.
Andere erfindungsgemäße neue Verbindungen sind solche Verbindungen der Formel II, in denen R&sub6; und R&sub7; zusammen mit dem Stickstoffatom eine Morpholingruppe bilden. Diese werden damit durch die Formel
wiedergegeben, worin
R&sub1; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe darstellt und n eine ganze Zahl von 2-7 ist;
R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; von Wasserstoff verschieden ist;
sowie deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.
Ebenso handelt es sich um die Gruppe von Verbindungen der Formel II, in denen R&sub1; eine Hydroxyethylgruppe ist. Diese werden damit durch die Formel
wiedergegeben, in denen R&sub2; Wasserstoffoder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, eine Aminogruppe, eine Hydroxygruppe oder eine Aminoalkylengruppe der Formel
ist, worin n eine ganze Zahl von 2-7 ist und R&sub6; und R&sub7; unabhängig voneinander eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen mit dem Stickstoffatom eine Morpholin- oder Piperidingruppe bilden;
R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe von 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist;
sowie deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen reagieren offensichtlich mit dem Glycosylierungsprodukt und hindern dasselbe dabei daran, später die fortgeschrittenen Glycosylierungs-Endprodukte der nichtenzymatischen Bräunung zu bilden, welche die Verfärbung der Zähne in der Mundhöhle zur Folge haben.
Dementsprechend ist es eine Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung, die von der nichtenzymatischen Bräunung in der Mundhöhle herrührende Verfärbung der Zähne zu hemmen, indem man ein Agens verwendet, das zur Reaktion mit dem Carbonylteil des durch die anfängliche Glycosylierung bei der nichtenzymatischen Bräunungsreaktion gebildeten frühen Glycosylierungsproduktes befähigt ist .
Ein weitere Aufgabe der Erfindung besteht darin, Agenzien bereitzustellen, welche fähig sind, an der Reaktion mit den genannten frühen Glycosylierungsprodukten teilzunehmen.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung besteht darin, Zusammensetzungen bereitzustellen, welche Agenzien enthalten, die zur Teilnahme an der Reaktion mit den genannten frühen Glycosylierungsprodukten befähigt sind und für die Anwendung in der Mundhöhle zugerichtet sind.
Andere Aufgaben und Vorteile werden für den Fachmann aus der Betrachtung der folgenden Beschreibung, die nun unter Hinweis auf die folgenden erläuternden Abbildungen folgt, ersichtlich.

KURVE BESCHREIBUNG DER ABBILDUNG

FIGUR 1 ist eine Photographie, welche die Ergebnisse der Inkubation von Gelatine/Papierscheibchen mit reduzierenden Zuckern unter Simulierung des Umfeldes einer mit Protein überzogenen Zahnoberfläche vor Augen führt.

BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORMEN IM EINZELNEN

Erfindungsgemäß wurden Zusammensetzungen entwickelt, von welchen man annimmt, daß sie die von der nichtenzymatischen Bräunung in der Mundhöhle herrührende Zahnverfärbung hemmen. Insbesondere betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Hemmung der von der nichtenzymatischen Bräunung in der Mundhöhle herrührenden Zahnverfärbung, welches die Verabreichung einer Zusammensetzung in einer die Bildung fortgeschrittener Glycosylierungs-Endprodukte wirksam hemmenden Menge an Patienten beinhaltet, die solcher Therapie bedürftig sind, wobei die Zusammensetzung ein Agens enthält, welches zur Reaktion mit dem Carbonylteil des bei der beginnenden Glycosylierung in der nichtenzymatischen Bräunungsreaktion gebildeten frühen Glycosylierungsprodukts befähigt ist.
Entsprechend werden die zur Reaktion mit dem Carbonylteil des bei der beginnenden Glycosylierung in der nichtenzymatischen Bräunungsreaktion gebildeten frühen Glycosylierungsprodukts befähigten Agenzien zu Zusammensetzungen für die Anwendung in der Mundhöhle formuliert. Besonders geeignete Formulierungen sind Mundspülmittel und Zahnpasten, welche das wirksame Agens enthalten.
Bei der erfindungsgemäßen Praxis werden übliche Formulierungstechniken angewandt unter Verwendung nichttoxischer, pharmatzeutisch verträglicher Trägerstoffe, wie sie typischerweise in für die Formulierung solcher Mundspülmittel und Zahnpasten gut bekannten Mengen und Kombinationen Verwendung finden.
Das zur Reaktion mit dem Carbonylteil des durch die frühe Glycosylierung bei der nichtenzymatischen Bräunungsreaktion gebildeten frühen Glycosylierungsprodukts befähigte Agens wird in die Bildung fortgeschrittener Glycosylierungs-Endprodukte wirksam hemmender Menge in die Zusammensetzungen eingebaut. Diese Menge ist je nach den bestimmten verwendeten Agenzien selbstverständlich unterschiedlich, liegt jedoch typischerweise im Bereich von 0,01 bis 1,0 Gewichts-%, bezogen auf die jeweilige Formulierung.
Außerdem können die vorgenanntermaßen wirkenden Agenzien über orale Einnahme verabreicht werden, da sie sich in den Schleimhäuten nach solcher Art der Einnahme anreichern. Diese Anreicherung in den Schleimhäuten führt zu ihrer Abgabe in den Speichel. Das Endergebnis liegt darin, daß sie in der Mundhöhle funktionell vorliegen, wo sie ihre erwünschte Verfahrenswirkung ausüben können. Für solche Verabreichung kann das jeweilige Agens in jeglicher üblichen oralen Dosierungsform eingebaut sein. Eine besonders erwünschte Dosierungsform ist die Einbringung des Agens in eine Vitamintablette oder Fluoridtablette, um so die Aufnahmebereitschaft seitens des Patienten und insbesondere jungendlicher Patienten zu steigern.
Spezifische erfindungsgemäß verwendbare Agenzien sind Aminoguanidin, α-Hydrazinohistidin, Lysin und die durch die Formel
veranschaulichten Aminoguanidin-Derivate, worin R eine Gruppe der Formel
darstellt,
R&sub1; ein Wasserstoffatom oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe ist, oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke von 2-4 Kohlenstoffatomen sein kann;
R&sub2; ein Wasserstoffatom oder eine Niederalkylgruppe ist, oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke von 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, eine Aminogruppe, eine Hydroxygruppe oder eine Aminoalkylengruppe der Formel ist, worin n eine ganze Zahl von 2-7 ist und R&sub6; und R&sub7; unabhängig von einander ein Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen darstellen oder zusammen einen Teil eines Cycloalkyl- oder heterocyclischen Rings mit 1-2 Heteroatomen bilden, von denen mindestens einer Stickstoff ist, und wobei der zweite der genannten Heteroatome ausgewählt ist aus der Gruppe von Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel, mit dem Vorbehalt, daß wenn das zweite der genannten Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, dieses gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert ist, welcher identisch zu dem Bereich der Verbindung am ersten Stickstoff des Piperazinrings ist;
R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, mit dem Vorbehalt, daß mindesten einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; von Wasserstoff verschieden ist; oder
R eine Acylgruppe oder eine Niederalkylsulfonylgruppe von bis zu 10 Kohlenstoffatomen und R&sub1; Wasserstoff ist;
sowie deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.
Andere erfindungsgemäß verwendbare Agenzien sind diejenigen der Formel
worin
R&sub1; Wasserstoffatom oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe ist, oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke von 2-4 Kohlenstoffatomen bilden kann;
R&sub2; Wasserstoffatom oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke von 2-4 Kohlenstoffatomen bildet, eine Aminogruppe, eine Hydroxygruppe oder eine Aminoalkylengruppe der Formel
ist, worin n eine ganze Zahl von 2-7 ist und R&sub6; und R&sub7; unabhängig von einander eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen oder zusammen mit dem Stickstoffatom eine Morpholino- oder Piperidingruppe bilden;
R&sub3; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet;
R&sub4; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2-4 Kohlenstoffatomen bildet oder eine Aminogruppe ist;
R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen ist, mit dem Vorbehalt, daß mindesten einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; von Wasserstoff verschieden ist;
sowie deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.
Die hier genannten Niederalkyl- und Niederalkoxygruppen enthalten 1-6 Kohlenstoffatome und beinhalten die Gruppen Methyl, Methoxy, Ethyl, Ethoxy, Propyl, Propoxy, Butyl, Butoxy, Pentyl, Pentyloxy, Hexyl, Hexyloxy und deren entsprechende verzweigtkettige Isomere.
Da hier genannten Acylgruppen sind Reste von Niederalkyl-, Aryl- und Heteroaryl-Carbonsäuren mit 1-10 Kohlenstoffatomen. Es sind typischerweise die Reste Acetyl, Propionyl, Butanoyl, Valeroyl, Hexanoyl und deren entsprechende längerkettige und verzweigtkettige Analoge. Die Acylgruppen können auch eine oder mehrere Doppelbindungen und/oder eine zusätzliche funktionelle Säuregruppe, wie z.B. bei Glutaroyl- oder Succinylgruppen der Fall, enthalten. Die oben genannten Heteroarylgruppen beziehen sich auf aromatische heterocyclischen Gruppen mit 3-6 Kohlenstoffatomen und einem oder mehreren Heteroatomen wie Sauerstoff, Stickstoff oder Schwefel.
Die Niederalkyl-Sulfonylgruppen in den erfindungsgemäßen Verbindungen enthalten 1-7 Kohlenstoffatome und sind typischerweise Gruppen wie Methylsulfonyl, Ethylsulfonyl, n- Propylsulfonyl, t-Butylsulfonyl und ähnliche.
Der hier verwendete Ausdruck "Aryl" bezieht sich auf phenyl- und niederalkyl-substituierte Phenylgruppen mit 6-10 Kohlenstoffatomen, wobei diese eine oder mehrere substituierende Gruppen, ausgewählt aus Chlor, Brom, Fluor, Carboxyl-, Niederalkyl-, Hydroxy- oder Nieder-Monoalkylamino-, Nieder-Dialkylamino-, Nieder-Alkoxygruppen, tragen.
Die Verbindungen können die Bildung fortgeschrittener Glycosylierungs-Endprodukte an Zielproteinen hemmen, indem sie mit dem Carbonylteil des frühen Glycosylierungsprodukts eines solchen Proteins, gebildet in der beginnenden Glycosylierung, reagieren.
Man geht von der Theorie aus, daß die Carbonylgruppe nahe der Verbindungsstelle zwischen Zucker und Proteinsegmenten des frühen Glycosylierungsproduktes eine aktive Stelle umfaßt, welche die weitere Quervernetzung des Proteins unter Bildung fortgeschrittener Glycosylierungs-Endprodukte bedingt. So geht man davon aus, daß die Reaktion der erfindungsgemäßen Verbindungen mit dieser Carbonylgruppe den Spätstadiums-Maillard-Effekt hemmt.
Da die erfindungsgemäße Zusammensetzung für in vivo- oder therapeutische Anwendung ausersehen ist, ist zu bemerken, daß die hier verwendeten Verbindungen oder Agenzien biokompatibel sind. Pharmazeutische Zusammensetzungen können mit einer pharmazeutisch wirksamen Menge der erfindungsgemäßen Agenzien oder Verbindungen zubereitet werden und können einen pharmazuetisch verträglichen Trägerstoff enthalten, der aus bekannten für diesen Zweck verwendeten Materialien ausgewählt ist. Solche Zusammensetzungen können in vielfältiger Form zubereitet werden, je nach Verabreichungsweise. Zum Beispiel kann eine Verbindung aus dem im Handel erhältlichen Bicarbonatsalz in das Hydrochloridsalz überführt werden, um seine Löslichkeit zu verbessern und um seine Reizwirkung zu mindern. Verschiedene andere pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze der Verbindungen von Formel I, II und III können in ähnlicher Weise verwendet werden. Solche Säureadditionssalze können sich von einer Vielfalt organischer und anorganischer Säuren ableiten, wie von Schwefel-, Phosphor-, p-Toluolsulfon-, Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Jodwasserstoff-, Sulfamin-, Zitronen-, Milch-, Malein-, Bernstein-, Wein, Zimt-, Essig-, Benzoe-, Glucon-, Asorbin- und verwandten Säuren. Ebenso kann man eine flüssige Form verwenden, oder man kann für orale Verabreichung Tabletten, Kapseln usw. zubereiten.
Die durch Formel I veranschaulichten Aminoguanidinderivate werden bequemerweise nach bekannten Syntheseverfahren hergestellt. Bestimmte Verbindungen nach Formel I sind bekannte im Chemikalienfachhandel leicht verfügbare Verbindungen und/oder nach hierfür spezifischerweise veröffentlichten Syntheseverfahren herstellbar. Die neuen Verbindungen der Formeln III und IV werden auf analoge Weise hergestellt. Zum Beispiel sind 1,3-Diaminoguanidin-monohydrochlorid und 2-Hydrazino-2-imidazolin-hydrobromid von Aldrich Chemical Company erhältlich. Essigsäurehydrazin und L-Glutaminsäure-gamma-hydrazinhydrat sind bei Sigma Chemical Company erhältlich. Methansulfonylhydrazid kann man bei Lancaster Chemical Co. beziehen. N-Hydroxy-hydrazin-carboximidamidtosylat kann nach der Verfahrensweise von J.Med.Chem., 27, 236-238 (1984) synthetisiert werden. In ähnlicher Weise ist die das 1-Methylhydrazin-carboximidamid-tosylat beschreibende Verfahrensweise in J.Med.Chem., 25 505-518 (1982) veröffentlicht. Das N-(3-Dimethylaminopropyl)-hydrazin-carboximidamid-dihydrobromidhydrat ist in US-Patent Nr. 4 544 759 (1985) erwähnt.
Andere in der chemischen und Patentliteratur beschriebene und durch Formel I veranschaulichte Verbindungen sind:
N-Methylhydrazincarboximidamid;
N-Ethylhydrazincarboximidamid;
N-Propylhydrazincarboximidamid;
N-Butylhydrazincarboximidamid;
N-Hexylhydrazincarboximidamid;
N,N'-Dimethylhydrazincarboximidamid;
N,N'-Diethylhydrazincarboximidamid;
N,N'-Diisopropylhydrazincarboximidamid;
N-(3-Diethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid;
N-(2-Diethylaminoethyl)hydrazincarboximidamid;
N-(2-Dimethylaminoethyl)hydrazincarboximidamid;
N-[2-(4-Methyl-piperazinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(1-Pyrrolidinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(1-Piperazinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(1-Hexahydroazepinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(4-Methyl-1-hexahydro-1,4-diazepinyl)propyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(1-Hexahydroazocinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(1-Octahydroazoninyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
N-[2-(4-Dimethyl-1-pyrrolidinyl)ethyl]hydrazincarboximidamid;
Essigsäurehydrazid;
Asparaginsäure-β-hydrazid;
Glutaminsäure-γ-hydrazid; und
Methansulfonsäurehydrazid.
Das zugrunde liegende US-Patent Nr.4 908 446 beschreibt die Herstellung der Verbindungen der Formel III.
Die folgenden Beispiele beschreiben die erfindungsgemäß anwendbaren Verfahrensweisen und Zusammensetzungen im einzelnen.

BEISPIEL 1

Um die Fähigkeit von Inhibitoren für die nichtenzymatische Bräunung zur Hemmung der durch kationische Antiplaque-Agenzien verstärkten Zahnverfärbung zu prüfen, wurden unter Verwendung von Rinder-Serumalbumin (BSA; Konzentration 25 mg/ml) als der nichtenzymatischen Bräunung in Gegenwart des Zuckers Glucose (100 m Mol) unterliegendes Testprotein Versuche durchgeführt.
Als Inhibitor für die nichtenzymatische Bräunung wurde Aminoguanidin-hydrochlorid und als bekanntermaßen die nichtenzymatische Bräunung förderndes Antiplaque-Agens Chlorhexidin-gluconat verwendet. Letzteres lag in Form des Mundspülarzneimittels Peridex vor, in welchem es mit einer Konzentration von 0,12% zusammen mit bestimmten anderen inerten Bestandteilen, unter anderem Ethanol (11,6%), enthalten ist. Die Endkonzentration von Chlorhexidin in den Versuchsgemischen betrug 0,024%, wobei 11,6%-iges Ethanol als Vergleichssubstanz in allen Peridex -freien Gemischen verwendet wurde.
Verschiedene Inkubationsgemische, enthaltend Kombinationen der vorstehend genannten Bestandteile, wurden in einem 0,5-molaren Phosphatpuffer bei pH 7,4, enthaltend 3 millimolares Natriumazid zur Verhinderung des Wachstums von Mikroorganismen, zubereitet. Die Gemische wurden bei 37ºC drei Wochen lang stehen gelassen, nach dieser Zeite wurde das BSA in jedem Gemisch durch Zugabe gesättigter Ammoniumsulfatlösung ausgefällt. Der Niederschlag wurde mit gesättigter Ammonsulfatlösung gewaschen und die BSA-Fällung in phosphatgepufferter Lösung aufgelöst. In jeder BSA-Probe wurde das Ausmaß an nichtenzymatischer Bräunung durch Messung der relativen Fluorescenz mit einer Anregungswellenlänge von 370 nm und einer Emissionswellenlänge von 440 nm bestimmt. Dies ist ein Maßstab für die Menge an vorliegenden Produkten der nichtenzymatischen Bräunung, unter anderem Furoylfuranylimidazol (Pongor et al., Proceedings of the National Academy of Sience of the U.S.A., 81, Seiten 2684-2688 (1984); US-Patent Nr.4 665 192). Die Menge an BSA in der Lösung wurde nach einer Standardmethode gemessen und das Ausmaß der nichtenzymatischen Bräunung als Fluorescenz pro Milligramm Protein ausgedrückt.
In der folgenden Tabelle ist die Zusammensetzung der Inkubationsgemische und die in 2 Beispielen erhaltene spezifische Fluorescenz aufgeführt. Da die Fluorescenz in jedem Versuch in relativen Einheiten gemessen wird, können die Werte innerhalb jedes Versuchs direkt verglichen werden, jedoch nicht solche verschiedene Versuche betreffend. TABELLE 1 HEMMUNG DER NICHTENZYMATISCHEN BRÄUNUNG DURCH AMINOGUANIDIN Inkubationsgemisch enthaltend BSA und: spezifische Versuch Fluorescenz Ohne Zugabe Glucose Glucose+Chlorhexidin +100 mMol Aminoguanidin
Auf diesen Ergebnissen geht klar hervor, daß die Inkubation von Glucose mit BSA gegenüber dem Vergleichsinkubationsversuch zu nichtenzymatischer Bräunung führt und daß die Einbeziehung von Chlorhexidin das Ausmaß an Bräunung signifikant erhöht. Diese durch Chlorhexidin bewirkte verstärkte Bräunung wird durch Einbeziehung von Aminoguanidin so vollständig gehemmt wie die Bräunung in Abwesenheit von Chlorhexidin. Dieselben Ergebnisse wurden bei Vergleich der sichtbaren Spektren der BSA-Lösungen erzielt. So hemmt Aminoguanidin die nichtenzymatische Bräunung und insbesondere die durch Chlorhexidin bewirkte verstärkte nichtenzymatische Bräunung.

BEISPIEL 2

Zum weiteren Studium der Fähigkeit der Inhibitoren für die nichtenzymatische Bräunung, die Proteinverfärbung auf einer Oberfläche, wie sie auf der Zahnoberfläche eintritt, zu verhindern, wurde der folgende Oberflächenbräunungsversuch durchgeführt. Als Ersatz für eine mit einem Häutchen überzogene Zahnoberfläche wurde nicht belichtetes und entwikkeltes photographisches Papier verwendet und damit eine fixierte Proteinoberfläche (Gelatine, d.h. Collagen) auf einer Papierunterlage bereitgestellt. Es wurden Scheibchen von 5 mm Durchmesser ausgestanzt und eine Woche lang bei 50ºC in eine Lösung von 100 mMol Glucose-6-phosphat in 0,5-molarem Phosphatpuffer pH 7,4 mit 3 millimolarem Natriumazid eingetaucht. Glucose-6-phosphat stellt einen Zucker dar, welcher an der nichtenzymatischen Bräunung mit größerer Geschwindigkeit als Glucose teilnimmt. Zusätzlich zum Glucose-6-phosphat wurden Chlorhexidin und/oder Aminoguanidin einbezogen. Nach der Inkubation wurden die Gelatine-Papierscheibchen mit Wasser gespült, Braunfärbung festgestellt und photographiert.
Figur 1 zeigt die Ergebnisse eines solchen Versuchs. Die Inkubation der Scheibchen in Glucose-6-phosphat allein (P) zeigt leicht braune Farbe im Vergleich zu Scheibchen, die in Pufferlösung allein (nicht gezeigt) getränkt wurden. Beim Zusatz von Chlorhexidin (in Form von Peridex mit einer Endkonzentration von 0,04% Chlorhexidin) zeigte sich signifikante Bräunung (Q). Zusatz von Aminoguanidinhydrochlorid (100 mMol) zum Chlorhexidin hemmte die Bräunung der Gelatine (R) vollständig, genauso wie der Zusatz von Aminoguanidin in Abwesenheit von Chlorhexidin (S).
Die leichte Braunfärbung, bewirkt durch Glucose-6-phosphat auf der Gelatineoberfläche allein, und deren Verhinderung durch Aminoguanidin zeigt die Brauchbarkeit der vorliegenden Erfindung für die Verhinderung der nichtenzymatischen Bräunung auf Zahnoberflächen. Die verstärkte Bräunung in Gegenwart von Chlorhexidin und deren vollständige Verhinderung durch Aminoguanidin zeigt die Brauchbarkeit der vorliegenden Erfindung zur Verhinderung der durch Antiplaque-Agenzien verstärkten nichtenzymatischen Bräunung, welche mit Chlorhexidin eintritt.

BEISPIEL 3

Man geht davon aus, daß Chlorhexidin seine Antiplaquewirkung vermittels seiner Fähigkeit, auf der Zahnoberfläche zu haften und antimikrobiell zu wirken, ausübt. Folgender Versuch wurde durchgeführt, um sicherzustellen, daß das Aminoguanidin die antimikrobielle Wirkung von Chlorhexidin nicht mindert.
Der K10-Stamm von Escherichia coli wurde jeweils zehnfach in Serie verdünnten Lösungen von Chlorhexidin ausgesetzt (in Form von Peridex , entweder ohne Zusatz oder mit einer Endkonzentration von 1 mMol oder 10 mMol von Aminoguanidinhydrochlorid). Nach Exposition wurden die Bakterien auf M63/Glucoseagar ausgestrichten und bei 37ºC wachsen gelassen, danach wurden die Kolonien gezählt.
Die Ergebnisse zeigten, daß das Aminoguanidin die antimikrobielle Wirkung von Chlorhexidin in keiner der Verdünnungen, bei welchen bakterielles Wachstum gehemmt wurde, verminderte.

BEISPIEL 4

Mundspülmittel mit Chlorhexidin und Aminoguanidin:

Aminoguanidin 1.4 %
Chlorhexidingluconat 0,12 %
Ethanol 11,6 %
Saccharin-Natrium 0,15 %
FD&C Blau Nr. 1 0,001 %
Pfefferminzöl 0,5 %
Glycerin 10,0 %
Tween 60 0,3 %
Wasser auf 100 %

BEISPIEL 5

Zahnpaste mit Aminoguanidin:

Aminoguanidinhydrochlorid 5,5 %
Sorbit, 70% in Wasser 25 %
Saccharin-Natrium 0,15%
Natrium-laurylsulfat 1,75%
Carbopol 934, 6%-ige Dispersion in Wasser 15 %
Grünze-Minze-Öl (Oil of Spearmint) 1,0 %
Natriumhydroxid, 50% in Wasser 0,76%
zweibasisches Calciumphosphat-dihydrat 45 %
Wasser auf 100 %

BEISPIEL 6

Folgende Verfahrensweisen wurden angewandt, um die erfindungsgemäßen Verbindungen auf ihre Fähigkeit zu überprüfen, die durch Glucose eingeleitete Quervernetzung von Protein in vitro zu verhindern. Das verwendete Testprotein ist Rinderserumalbumin (BSA) mit einer Konzentration von 100 Milligramm pro Milliliter in einer 0,5-molaren Natriumphosphat- Pufferlösung von pH 7,4. Das Reaktionsgemisch enthält Glucose in einer Konzentration von 200 mMol. Natriumazid (3mMol) ist in allen Lösungen enthalten, um das Wachstum von Mikroorganismen zu verhindern.
Zur Auswertung der Verbindungen werden diese im vorstehenden Reaktionsgemisch mit entweder 1 mMol, 10 mMol oder 100 mMol eingesetzt. Ebenso wird eine zusätzliche Serie von Inkubationsgemischen ohne Glucose zubereitet, um als Ausgangsvergleich für jeden Inhibitor zu dienen. Ein Gemisch mit BSA plus Glucose in Abwesenheit jeglichen Inhibitors dient als Index für in jedem Gemisch auftretende maximale Quervernetzung.
Nach drei Wochen Inkubation der Gemische bei 37ºC muß das BSA in jedem Gemisch von den an deren Bestandteilen des Gemisches isoliert werden, bevor das Ausmaß der Bräunung bestimmt wird. Dies ist nötig, weil viele der Inhibitoren entweder selbst fluoreszieren oder die Fluorescenz des gebräunten BSA unterdrücken. Zur Bewirkung der Abtrennung wird das BSA durch Zugabe von 1,0 Milliliter gesättigtem Ammoniumsulfat zu jeweils 100 Mikroliter Inkubationsgemisch ausgefällt. Die erhaltene Fällung wird zentrifugiert und die überstehenden Lösungen verworfen. Die Fällung wird einmal mit gesättigtem Amoniumsulfat gewaschen, dann wird das BSA-Pellet in 1 Milliliter phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) wieder aufgelöst, wobei eine Endproteinkonzentration von etwa 10 Milligramm pro Milliliter zustandekommt.
Die tatsächliche Proteinkonzentration der BSA-Lösung wird mittels eines Standard-Farbbindungs-Proteintests bestimmt. Die Fluorescenz des BSA wird in einem Spektrofluorimeter bei einer Anregungswellenlänge von 370 Nanometern und einer Emissionslängenwelle von 440 Nanometern gemessen. Dies entspricht dem Nachweis von Chromophoren, unter anderem FFI, welche sich im BSA durch die Reaktion glycosylierter Aminogruppen als fortgeschrittene Glycosylierungs-Endprodukte gebildet haben.
Die spezifische Fluoreszenz des BSA wird als Fluoreszenz (in willkürlichen Einheiten) pro Milligramm BSA gemessen. Sie wird ausgedrückt als Fluoreszenzzunahme während der Inkubationszeit der Probe mit Glucose abzüglich dem entsprechenden Wert in Abwesenheit von Glucose. Das Ausmaß an Hemmung durch jede der Verbindungen wird als Prozentsatz ausgedrückt, wobei 0% eine fehlende Bräunungshemmung darstellt, d.h. dies entspricht der Fluorescenz, die sich in einem Inkubationsgemisch mit lediglich Glucose und BSA in Abwesenheit jeglicher Inhibitoren entwickelt hat. 100% Hemmung entspricht dem Ausmaß an Fluorescenz in Abwesenheit von Glucose.
Gemäß der vorstehenden Verfahrensweise wurden bei der Verwendung der Testverbindungen in einer Konzentration von 10 mMol folgende Ergebnisse erzielt.
Prozent Hemmung der Bräunung durch verschiedene Verbindungen in 10-millimolarer Konzentration:
85% 1,2,3-Triaminoguanidin-hydrochlorid
84% 1,3-Diaminoguanidin-monohydrochlorid
81% N-Hydroxyhydrazin-carboximidamid-tosylat
76% 2-Hydrazino-2-imidazolin-hydrobomid
65% L-Glutaminsäure-gamma-hydrazidhydrat
63% N,N"[1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propan-diyl)]bis-hydrazin-carboximidamid-tetrahydrobromid
59% N-(3-Dimethylaminopropyl)hydrazin-carboximidamiddihydrobromid-hydrat
59% N-(3-(4-Methylpiperazin-1-yl)propyl)hydrazin-carboximidamid-trihydrobromid
53% 1-Methylhydrazin-carboximidamid-tosylat
49% Methansulfonsäurehydrazid
48% Essigsäurehydrazid
45% 1-(2-Hydroxyethyl)hydrazin-carboximidamid-sulfat 2:1
44% Aminoguanidin-hemisulfat
43% 1-Amino-2-hydrazino-2-imidazolin-tosylat
42% N-(2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazin-carboximidamid-dihydrobromid
41% N-(3-(4-Morpholino)propyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid
40 % Aminoguanidin-hydrochlorid
33 % 2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-2-imidazolinsulfat 2:1
32% N-(2-(4-Morpholino)ethyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid
0% ohne Inhibitor

BEISPIEL 7

Die Auswertung von Testverbindungen in Konzentration 1 mMol wurde in derselben Weise wie in Beispiel 1 durchgeführt. Folgendes waren die Ergebnisse:
42% 2-Hydrazino-2-imidazolin-hydrobromid
37% N-Hydroxyhydrazin-carboximidamid-tosylat
37% 1,2,3-Triaminoguanidin-hydrochlorid
37% N,N"-[1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propan-diyl)]bis- hydrazin-carboximidamid-tetrahydrobromid
33% 1,2-Diamino-2-imidazolin-tosylat
31% 1,3-Diaminoguanidin-monohydrochlorid
26% Essigsäurehydrazid
24% L-Glutaminsäure-gamma-hydrazidhydrat
23% N-(3-Dimethylaminopropyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid-hydrat
23% N-(3-(4-Methylpiperazin-1-yl)propyl)hydrazin-carboximidamid-trihydrobromid
22% beta-Aspartyl-hydrazid
21% 1-(2-Hydroxyethyl)hydrazin-carboximidamid-sulfat 2:1
21% Methansulfonsäure-hydrazid
19% Aminoguanidin-hydrochlorid

BEISPIEL 8

Die Auswertung der Testverbindungen bei Konzentration 100 mMol wurde in derselben Weise in Beispiel 1 durchgeführt. Folgendes waren die Ergebnisse:
Prozent Hemmung der Bräunung durch verschiedene Verbindungen bei 100 mMol.
100% N,N"-[1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propan-diyl)]bis- hydrazin-carboximidamid-tetrahydrobromid
98% L-Glutaminsäure-gamma-hydrazidhydrat
98% 1,3-Diaminoguanidin-monohydrochlorid
97% N-(2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazin-carboximidamid-dihydrobromid
96% N-Hydroxyhydrazin-carboximidamid-tosylat
96% N-(3-(4-Methylpiperazin-1-yl)propyl)hydrazin-carboximidamid-trihydrobromid
95% 2-Hydrazino-2-imidazolin-hydrobromid
94% Aminoguanidin-hemisulfat
93% Methansulfonsäure-hydrazid
93% N-(3-(4-Morpholino)propyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid
92% N-(3-Dimethylaminopropyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid-hydrat
91% Aminoguanidin-methansulfonat
90% N-(2-(4-Morpholino)ethylhydrazin-carboximidamid- dihydrobromid
90% 1-Amino-2-hydrazino-2-imidazolin-tosylat
88% Aminoguanidin-hydrochlorid
81% 2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-2-imidazolinsulfat 2:1
Die in vitro-Versuche aus den Beispielen 6-8 zeigen, daß diese Agenzien verwendet werden können, um die pathologischen Symptome zu vermindern, welche mit der fortgeschrittenen Glycosylierung von Proteinen und der Bildung von Quervernetzungen zwischen Proteinen und anderen Makromolekülen einhergehen.

BEISPIEL 9

Bestimmte Aminoguanidinderivate werden auf folgende Weise synthetisiert.

N-(3-(4-Morpholino)propyl)hydrazin-carboximidamid- dihydrobromid

Hydrazincarboximidothiosäure-ethylester-hydrobromid (10,0 Gramm) und 3-(4-Morpholino)propylamin (7,56 Gramm) werden in Ethanol (20 Milliliter) gelöst, zwei Tage bei Raumtemperatur aufbewahrt und anschließend 30 Minuten lang unter Rückfluß erhitzt. Es wird Isopropanol (20 Milliliter) zugegeben, das Gemisch gekühlt und mit 48%-iger Bromwasserstoffsäure (6 Milliliter) behandelt. Weiteres Ethanol (50 Milliliter) und Isopropanol (20 Milliliter) werden zugegeben und das Gemisch zwei Tage lang bei -20ºC aufbewahrt. Der kristalline Niederschlag wird angerieben, ausfiltriert und mit Ethanol und Isopropanol gewaschen, wobei 14,91 Gramm kristalliner Feststoff erhalten werden. Zur Reinigung dieses Materials werden 11 Gramm in 16,5 Milliliter Wasser gelöst, zur Entfernung von unlöslichem Material filtriert und mit 5,5 Milliliter Methanol und 100 Milliliter Isopropanol verdünnt. Nach Aufbewahrung bei Raumtemperatur und bei 4ºC wird der Niederschlag abgefiltert und mit Isopropanol gewaschen, wobei 9,0 Gramm farblose Kristalle der Titelverbindung mit dem Schmelzpunkt 129-130ºC erhalten werden.
Nach analoger Verfahrensweise werden die folgenden Aminoalkyl-hydrazincarboximidamid-Derivate hergestellt (wobei anstelle von 3-(4-Morpholino)propylamin folgende Reagenzien eingesetzt werden):
Ausgehend von 2-(4-Morpholino)ethylamin die Verbindung N-(2-(4-Morpholino)ethyl)hydrazincarboximidamid-dihydrobromid, Schmelzpunkt 169-171ºC.
Ausgehend von 3-(4-Methylpiperazin-1-yl)propylamin die Verbindung N-(3-(4-Methyl-1-piperazinyl)propyl)hydrazincarboximidamid-trihydrobromid, Schmelzpunkt 212ºC.
Ausgehend von 2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropylamin die Verbindung N-(2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid-dihydrobromid, Schmelzpunkt 105-107ºC.
Ausgehend von 1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propylamin) die Verbindung N,N"-[1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propan-diyl)]- bis-hydrazincarboximidamid-tetrahydrobromid, Schmelzpunkt 241-244ºC.
Ausgehend von 3-Dimethylaminopropylamin die Verbindung N-(3-Dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid-dihydrobromid, Schmelzpunkt 82-84ºC.

BEISPIEL 10

1-(2-Hydroxyethyl)hydrazincarboximidamid-sulfat 2:1

Carboximidamid-thiosäure-methylester-sulfat (Carbimidothioic acid methyl ester sulfate) 2:1 (6,955 Gramm) und 2-Hydroxyethylhydrazin (9,13 Gramm) werden eine Stunde lang gerührt und auf 40ºC gehalten. Methanol (20 Milliliter) wird zugegeben und das Gemisch vier Stunden unter Rückfluß erhitzt. Beim Abkühlen scheiden sich Kristalle ab. Bei der Filtration werden 5,34 Gramm farblose Kristalle erhalten. Dreimaliges Umkristallisieren aus 88%-igen Methanol liefert 4,111 Gramm der Titelverbindung als farblose Kristalle, Schmelzpunkt 178,5-180ºC.

BEISPIEL 11

2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-2-imidazolin-sulfat (2:1)

2-Methylthio-2-imidazolin-sulfat (2:1) (1,98 g) und 2-Hydroxyethylhydrazin (2,12 g) werden in Ethanol (3 ml) eine Stunde auf Rückfluß erhitzt und dann drei Stunden lang bei 25ºC gerührt. Die Lösung wurde mit Ethanol (20 ml) verdünnt und 18 Stunden bei 4ºC aufbewahrt. Die abgeschiedenen Kristalle wurden abfiltriert und mit Ethanol gewaschen. Gewicht 811 mg, F. 190-4ºC.
In ähnlicher Weise werden aus den entsprechenden S-Methyl- isothiuronium-Derivaten folgende Verbindungen oder deren Säureadditionsalze hergestellt.
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-3-methyl-1-imidazolin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-4,4-dimethyl-1-imidazolin;
1,3-Dimethyl-2-(1-(2-hydroxyethyl)hydrazino)imidazolin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-5,5-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-5-hydroxy-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-5,5-dibutyl-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-3-methyl-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
1,3-Dimethyl-2-(1-(2-hydroxyethyl)hydrazino)-3,4,5,6-tetrahydropyrimidin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-4,5,6,7-tetrahydro-1,3(1H)- diazepin;
2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-4,4,7,7-tetramethyl-4,5,6,7- tetrahydro-1,3(1H)-diazepin;
N-Methyl-1-(2-hydroxyethyl)hydrazin-carboximidamid;
N,N'-Dimethyl-1-(2-hydroxyethyl)hydrazin-carboximidamid;
1-Pyrrolidincarboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid;
N-Methyl(1-pyrrolidin)carboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid;
1-Piperidincarboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid;
1-Hexahydroazepincarboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid;
1-(4-Methylpiperazin)carboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid;
1-(4-Methylhexahydro-1,4-diazepin)carboximidosäure-1- (2-hydroxyethyl)hydrazid; und
4-Morpholincarboximidosäure-1-(2-hydroxyethyl)hydrazid.

BEISPIEL 12

1,2-Diamino-2-imidazolin-p-toluolsulfonat

1-Aminoimidazolidin-2-thion (2,34 g) und Methyl-p-toluolsulfonat (4,1 g) werden in Ethanol (15 ml) 10 Minuten auf Rückflußtemperatur erhitzt, dann 16 Stunden bei Raumtemperatur aufbewahrt. Der kristalline Niederschlag wird abfiltriert, mit Isopropanol gewaschen und ergibt 4,613 g 1-Amino-2-methylthio-2-imidazolin-p-toluolsulfonat als farblose Nadeln, wovon 3,79 g in Methanol (15 ml) gegeben und mit konzentriertem wäßrigen Ammoniak behandelt werden. Nach 6-stündigem Rühren wird das Gemisch mit 20 ml Isopropanol verdünnt. Nach weiteren 12 Stunden werden 5 ml Flüssigkeit bei Atmosphärendruck abdestilliert und 10 ml Isopropanol zum Rückstand gegeben. Die sich beim Abkühlen abscheidenden Kristalle werden abfiltriert und mit Isopropanol gewaschen, wobei 2,323 g 1,2-Diamino-2-imidazolin-p-toluolsulfonat vom Schmelzpunkt 190-190,5ºC erhalten werden.

BEISPIEL 13

1-Amino-2-hydrazino-2-imidazolin-p-toluolsulfonat

1-Amino-2-methylthio-2-imidazolin-p-toluolsulfonat (2,123 g) in Ethanol (4ml) wurde mit Hydrazin (0.67 ml) behandelt und 2 Stunden bei 25ºC gerührt. Es wurde Isopropylalkohol (6 ml) zugegeben und nach 10-minütigem Rühren der kristalline Niederschlag abfiltriert und mit Isopropylalkohol gewaschen, wobei 1,55 g 1-Amino-2-hydrazino-2-imidazolin-p-toluolsulfonat erhalten wurden, Schmelzpunkt 168-169ºC.

BEISPIEL 14

Die erfindungsgemäßen Aminoguanidinderivate wurden gemäß der Verfahrensweise von Stoner, Agents and Actions, 17, Seiten 5-9 (1985) getestet, um deren fehlende Fähigkeit zur Hemmung des Enzyms Diaminoxidase sicherzustellen. Dieses Enzym ist für die Entgiftung von Histamin verantwortlich und deshalb ist für jede Therapie anzustreben, die Hemmung dieses Enzyms zu vermeiden.
Prozent Hemmung bei Konzentration 10 Mikromol:
92% Aminoguanidinhydrochlorid
0% 1-(2-Hydroxyethyl)hydrazincarboximidamid-sulfat 2:1
0% 1-Methylhydrazincarboximidamid-tosylat
84% N-Hydroxyhydrazincarboximidamid-tosylat
59% 2-Hydrazino-2-imidazolin-hydrobromid
92% 1,3-Diaminoguanidin-monohydrochlorid
0% N-(3-Dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid- dihydrobromid-hydrat
0% N-(3-(4-Methylpiperazin-1-yl)propyl)hydrazincarboximidamid-trihydrobromid
12% N-N"-3,3'-[1,4-Piperazin-diyl-bis(3,1-propan-diyl)]- bis-hydrazincarboximidamid-tetrahydrobromid
82% 1,2,3-Triaminoguanidin-hydrochlorid
5% N-(3-(4-Morpholino)propyl)hydrazincarboximidamid- dihydrobromid
0% N-(2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid-dihydrobromid
9% 1,2-Diamino-2-imidazolin-tosylat
9% Methansulfonsäure-hydrazid
75% L-Glutaminsäure-gamma-hydrazidhydrat
32% beta-Aspartylhydrazid
0% Essigsäurehydrazid

Claims

1. Verwendung eines zur Umsetzung mit den Carbonylbestandteilen eines durch die anfängliche Glykosylierung in der nicht-enzymatischen Bräunungsreaktion gebildeten frühen Glykosylierungsproduktes fähigen Mittels zur Herstellung einer Zusammensetzung zur Inhibierung der aus der nichtenzymatischen Bräunung im Mundbereich resultierenden Verfärbung der Zähne, worin das Mittel aus Aminoguanidin, α-Hydrazinohistidin, Lysin und den substituierten Aminoguanidinderivate mit der Strukturformel

worin R eine Gruppe der Formel

und R&sub1; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe ist, oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen sein kann, R&sub2; Wasserstoff oder eine Nieder alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino, Hydroxy oder eine Aminoalkylengruppe der Formel

ist, worin n eine ganze Zahl von 2 bis 7 und R&sub6; und R&sub7; unabhängig eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines von 1 bis 2 Heteroatome enthaltenden heterocyclischen Ringes bilden, von welchen zumindest eines Stickstoff ist und das zweite der Heteroatome aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel ausgewählt ist; mit dem Vorbehalt, daß wenn das zweite der Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, es gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert sein kann, der identisch zu dem Bereich der Verbindung an dem ersten Stickstoffatom des Piperazinrings ist; R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet; R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist; R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; ein anderer als Wasserstoff ist; oder R eine Acyl- oder eine Niederalkylsulfonylgruppe mit bis zu 10 Kohlenstoffatomen und R&sub1; Wasserstoff ist, und deren pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalzen ausgewählt ist.

2. Verwendung nach Anspruch 1, worin das Mittel Aminoguanidin ist.

3. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung Essigsäurehydrazid ist.

4. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung Asparaginsäure-β-hydrazid ist.

5. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung Glutaminsäure-τ-hydrazid ist.

6. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung Methansulfonsäurehydrazid ist.

7. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung die folgende Formel hat

worin R&sub1; Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine Hydroxyethylgruppe ist oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen sein kann; R&sub2; Wasserstoff oder eine Nieder alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino, Hydroxy oder eine Aminoalkylengruppe der Formel

ist, worin n eine ganze Zahl von 2 bis 7 und R&sub6; und R&sub7; unabhängig eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines von 1 bis 2 Heteroatome enthaltenden heterocyclischen Ringes bilden, von welchen zumindest eines Stickstoff ist und das zweite der Heteroatome aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel ausgewählt ist; mit dem Vorbehalt, daß, wenn das zweite der Heteroatome des heterocyclischen Ringes Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, es gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert sein kann, der identisch zu dem Bereich der Verbindung an dem ersten Stickstoff des Piperazinringes ist; R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet; R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist; R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; mit dem Vorbehalt, daß zumindest einer der Rest R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; ein anderer als Wasserstoff ist, und deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.

8. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N- Hydroxyhydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

9. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung 1,3- Diaminoguanidin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

10. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung 2- Hydrazino-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

11. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung 1,2- Diamino-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

12. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung 1-(2- Hydroxyethyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

13. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung 2-(1- (2-Hydroxyethyl)hydrazino)-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

14. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N-(2- (4-morpholino)ethyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

15. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N-(2- (4-Morpholino)propyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

16. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N- (2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

17. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N,N"- [1,4-Piperazindiylbis(3,1-propandiyl)]-bishydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

18. Verwendung nach Anspruch 7, worin die Verbindung N-[3- (4-Methyl-1-piperazinyl)propyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

19. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Zusammensetzung als Mundwasser formuliert ist.

20. Verwendung nach Anspruch 1, worin das Anti-Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

21. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Zusammensetzung als Zahnpaste formuliert ist.

22. Verwendung nach Anspruch 1, worin die Zusammensetzung zur oralen Verabreichung formuliert ist.

23. Zusammensetzung zur Inhibierung der Verfärbung von Zähnen, wie sie aus der nicht-enzymatischen Bräunung im Mundraum resultieren, welche eine wirksame Menge zur Inhibierung der Bildung von fortgeschrittenen Glykosylierungsendprodukten einer Zusammensetzung enthält, enthaltend ein aus Aminoguanidin, α-Hydrazinohistidin, Lysin und den substituierten Aminoguanidinderivate mit der Strukturformel

worin R eine Gruppe der Formel

und R&sub1; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Hydroxyethylgruppe ist oder zusammen mit R&sub2; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen sein kann, R&sub2; Wasserstoff oder eine Nieder alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub1; oder R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino, Hydroxy oder eine Aminoalkylengruppe der Formel

ist, worin n eine ganze Zahl von 2 bis 7 und R&sub6; und R&sub7; unabhängig eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines von 1 bis 2 Heteroatome enthaltenden heterocyclischen Ringes bilden, von welchen zumindest eines Stickstoff ist und das zweite der Heteroatome aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel ausgewählt ist; mit dem Vorbehalt, daß, wenn das zweite der Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, es gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert sein kann, der identisch zu dem Bereich der Verbindung an dem ersten Stickstoffatom des Piperazinringes ist; R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet; R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist; R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; ein anderer als Wasserstoff ist; oder R eine Acyl- oder eine Niederalkylsulfonylgruppe mit bis zu 10 Kohlenstoffatomen und R&sub1; Wasserstoff ist, und deren pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalzen ausgewähltes Mittel und ein Anti-Plaque-Mittel.

24. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung Aminoguanidin ist.

25. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung Essigsäurehydrazid ist.

26. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung Asparaginsäure-β-hydrazid ist.

27. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung Glutaminsäure-τ-hydrazid ist.

28. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung Methansulfonsäurehydrazid ist.

29. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin die Verbindung die folgende Formel hat

ist, worin n eine ganze Zahl von 2 bis 7 und R&sub6; und R&sub7; unabhängig eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen sind oder zusammen einen Teil eines Cycloalkylringes oder eines von 1 bis 2 Heteroatome enthaltenden heterocyclischen Ringes bilden, von welchen zumindest eines Stickstoff ist und das zweite der Heteroatome aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel ausgewählt ist; mit dem Vorbehalt, daß, wenn das zweite der Heteroatome des heterocyclischen Rings Stickstoff ist und einen Piperazinring bildet, es gegebenenfalls durch einen Substituenten substituiert sein kann, der identisch zu dem Bereich der Verbindung an dem ersten Stickstoffatom des Piperazinrings ist; R&sub3; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub2; oder R&sub4; eine Niederalkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet; R&sub4; Wasserstoff, eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist oder zusammen mit R&sub3; eine Nideralkylenbrücke mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen bildet, oder eine Aminogruppe ist; R&sub5; Wasserstoff oder eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; mit dem Vorbehalt, daß mindestens einer der Reste R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4; oder R&sub5; ein anderer als Wasserstoff ist, und deren pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze.

30. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N-Hydroxyhydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

31. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung 1,3-Diaminoguanidin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

32. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung 2-Hydrazino-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

33. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung 1,2-Diamino-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

34. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung 1-(2-Hydroxyethyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

35. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung 2-(1-(2-Hydroxyethyl)hydrazino)-2-imidazolin oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

36. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N-(2-(4-morpholino)ethyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

37. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N-(2-(4-Morpholino)propyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

38. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N-(2,2-Dimethyl-3-dimethylaminopropyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

39. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N,N"-[1,4-Piperazindiylbis(3,1-propandiyl)]-bishydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

40. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Verbindung N-[3-(4-Methyl-1-piperazinyl)propyl)hydrazincarboximidamid oder ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz davon ist.

41. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin die Zusammensetzung als eine Mundspülung formuliert ist.

42. Zusammensetzung nach Anspruch 23, formuliert als ein Mundwasser.

43. Zusammensetzung nach Anspruch 23, formuliert als Zahnpaste.

44. Zusammensetzung nach Anspruch 23, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

45. Zusammensetzung nach Anspruch 24, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

46. Zusammensetzung nach Anspruch 29, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

47. Zusammensetzung nach Anspruch 30, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

48. Zusammensetzung nach Anspruch 31, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.

49. Zusammensetzung nach Anspruch 32, worin das Anti- Plaque-Mittel Chlorhexidin ist.