DE60204800T2

DE60204800T2 - Bestimmte glycin-derivate als faktor xa inhibitoren zur verwendung in der behandlung von thrombose

Info

Publication number: DE60204800T2
Application number: DE60204800T
Authority: DE
Inventors: Robert Michael WILEY; Jon Daniel SALL; William Christopher MURRAY; Clinton Stephen YOUNG; Anne Jolie BASTIAN
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2001-12-12
Filing date: 2002-12-09
Publication date: 2006-05-04
Anticipated expiration: 2022-12-10
Also published as: ES2242086T3; EP1455787B1; DE60204800D1; WO2003049735A1; US20040249155A1; AU2002366563A1; ATE298236T1; US7297706B2; EP1455787A1; US20070072869A1; US7078415B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen, die als Pharmazeutika brauchbar sind, pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Verbindungen enthalten, ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen, Zwischenprodukte, die zur Herstellung der Verbindungen brauchbar sind und die Verwendung der Verbindungen als Pharmazeutika.
Die cardiovaskuläre Erkrankung bleibt ein weltweites Hauptgesundheitsproblem und ist eine gewöhnliche Ursache für eine schwere Erkrankung und Tod.
Eine Forschungsrichtung, die von den Forschern auf der Suche nach neuen Behandlungen für die cardiovaskuläre Erkrankung verfolgt wird, basiert auf der Hypothese, dass ein Inhibitor der Serinprotease, nämlich Faktor Xa, als Antikoagulationsmittel bei der Behandlung einer thrombotischen Erkrankung brauchbar sein kann.
Inhibitoren des Faktors Xa sind bekannt. Beispielweise beschreiben die WO 99/11657 A, WO 99/11658 A und WO 00/76971 A bestimmte Verbindungen, die eine aromatische Gruppe, einen Glycinrest, der eine cyclische Gruppe trägt, und eine lipophile Gruppe enthalten. Die WO 99/11657 A, die Verbindungen beschreibt, worin die aromatische Gruppe eine Aminoisochinolingruppe ist, beschreibt auch allgemein Aminoisochinolinverbindungen, die einen Glycinrest tragen, der eine acyclische Gruppe trägt.
Überraschenderweise wurde festgestellt, dass Verbindungen, die insbesondere Phenyl-, Indolyl- oder Benzo[b]thiophengruppen, einen Glycinrest, der eine Heteroalkylgruppe trägt, und eine 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidin-1-yl oder 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin-1-ylgruppe tragen, selektive Faktor Xa Inhibitoren sind und besonders vorteilhafte Eigenschaften aufweisen.
Demnach liefert die vorliegende Erfindung eine Verbindung der Formel (I)
worin
X¹ für CH oder N steht,
n für 1 oder 2 steht,
jedes R für Wasserstoff oder Methyl steht,
R¹ für Imidazol-1-yl oder X^aR^a steht,
worin
X^a für O, S oder NR^b steht,
R^a für ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₄ Alkylgruppe, eine Phenylgruppe oder eine Pyridylgruppe steht,
R^b für ein Wasserstoffatom oder eine C₁-C₄ Alkylgruppe steht oder zusammen mit R^a und dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen gesättigten vier- bis sechsgliedrigen Ring darstellt, der als Ringglied eines aus O, S und NR^c enthalten kann, worin R^c für Wasserstoff oder C₁-C₄ Alkyl steht, und
R² ausgewählt ist aus
worin
X² für ein Wasserstoffatom, Halogenatom oder eine Aminogruppe steht,
X³ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe, ein Fluoratom, ein Chloratom oder ein Bromatom steht,
X⁴ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder ein Halogenatom steht,
X⁵ für ein Chloratom, eine Methoxygruppe oder eine Methylgruppe steht, und
X⁶ für ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe steht,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Die Verbindungen der Formel (I) sind starke und selektive Inhibitoren der Serinprotease Faktor Xa, weisen eine gute gerinnungshemmende Aktivität in Humanplasma auf, weisen eine gute Plasmaexposition nach einer oralen Verabreichung an Säuger auf und besitzen besonders vorteilhafte pharmakologische und toxikologische Aktivitätsprofile.
In den Verbindungen der Formel (I) ist (CHR)_n vorzugsweise ausgewählt aus CH₂, CHCH₃ und CH₂CH₂.
R₁ steht vorzugsweise für Imidazol-1-yl, Hydroxy, C₁-C₄ Alkoxy, C₁-C₄ Alkylthio, Di-C₁-C₄-alkylamino, Phenylthio, Pyridylthio, Piperidin-1-yl oder Morpholino.
Bevorzugter steht R¹ für Imidazol-1-yl, Hydroxy, Methoxy, Methylthio, 2-Propylthio, Dimethylamino, Phenylthio, Pyrid-2-ylthio, Piperidin-1-yl oder Morpholino.
Beispiele für bestimmte Bedeutungen für (CHR)_nR₁ sind Imidazol-1-ylmethyl, Hydroxymethyl, 1-Hydroxyethyl, Methoxymethyl, 1-Methoxyethyl, Methylthiomethyl, Prop-2-ylthiomethyl, 2-Methylthioethyl, N,N-Dimethylaminomethyl, Phenylthiomethyl, Pyrid-2-ylthiomethyl, Piperidin-1-ylmethyl und Morpholinomethyl.
In den Gruppen, die durch R² dargestellt werden, steht X² vorzugsweise für ein Wasserstoffatom oder ein Halogenatom.
Am bevorzugtesten steht X² für ein Wasserstoffatom oder ein Fluoratom,
X³ für ein Wasserstoffatom, ein Fluoratom, ein Chloratom oder eine Methylgruppe,
X⁴ für ein Chloratom,
X⁵ für ein Chloratom oder eine Methoxygruppe, und
X⁶ für ein Chloratom.
Besondere bevorzugte Bedeutungen für R² sind 4-Chlorphenyl, 4-Methoxyphenyl, 3-Fluor-4-methoxyphenyl, Indol-6-yl, 3-Methylindol-6-yl, 3-Chlorindol-6-yl, 5-Fluorindol-2-yl, 5-Chlorindol-2-yl oder 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-yl.
Speziell erwähnt werden können Verbindungen der Formel (I), worin R² für 4-Methoxyphenyl, Indol-6-yl oder 5-Chlorindol-2-yl steht.
Eine besondere Bedeutung für X¹ ist CH. Eine weitere ist N. Wie hierin verwendet, steht der Ausdruck Halogenatom für Fluor, Chlor und Brom, falls nichts anderes angegeben ist.
Es ist ersichtlich, dass die Verbindungen der Formel (I) ein Asymmetriezentrum aufweisen, das die D-Konfiguration hat. Die D-Konfiguration bezieht sich auf die Konfiguration der Aminosäuren, aus der die Verbindungen hergestellt werden können. Die Verbindungen können daher in einem Gemisch mit dem entsprechenden L-Isomer vorkommen und isoliert werden, wie als razemisches Gemisch oder getrennt. Vorzugsweise werden die Verbindungen im wesentlichen frei vom L-Isomer isoliert.
Es ist auch ersichtlich, dass die Verbindungen der Formel (I) oder ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze in Form eines Solvats isoliert werden können und dass demnach alle solchen Solvate im Schutzumfang der Erfindung enthalten sind.
Die Verbindungen der Formel (I) und ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze können durch ein Verfahren hergestellt werden, das umfasst

(a) Umsetzung einer Verbindung der Formel (II)
oder eines Salzes hiervon mit einer Verbindung der Formel (III)
oder einem reaktiven Derivat hiervon, oder
(b) Umsetzung einer Verbindung der Formel (IV)
oder eines Salzes hiervon, mit einer Verbindung der Formel (V) HOOC-R² (V) oder einem Salz oder reaktiven Derivat hiervon,

Die Umsetzung zwischen einer Verbindung der Formel (II) mit einer Verbindung der Formel (III) kann bequem unter Verwendung von Reagenzien und Reaktionsbedingungen ausgeführt werden, die zur Bildung einer Amidbindung verwendet werden. Die Umsetzung wird bequemerweise in Gegenwart eines auf Benzotriazol basierenden Reagenzes ausgeführt, wie 1-Hydroxybenzotriazol oder 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol und eines Dehydratationsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid oder 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid in einem inerten organischen Lösemittel, wie Dimethylformamid und/oder Methylenchlorid. Die Umsetzung wird bequemerweise bei einer Temperatur von 0 bis 50°C, vorzugsweise bei Umgebungstemperatur ausgeführt. Falls ein Salz einer Verbindung der Formel (II) verwendet wird, wird die Umsetzung bequemerweise in zusätzlicher Gegenwart einer Base, wie Triethylamin ausgeführt. Andere geeignete Reagenzien und Lösemittel sind in der Technik bekannt, beispielsweise ein Säurehalogenid, wie das Chlorid, in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin.
Die Umsetzung zwischen einer Verbindung der Formel (IV) mit einer Verbindung der Formel (V) kann bequemerweise unter Verwendung von Reagenzien und Reaktionsbedingungen ausgeführt werden, die herkömmlich für die Bildung einer Amidbindung verwendet werden. Die Umsetzung wird bequemerweise in Gegenwart eines auf Benzotriazol basierenden Mittels, wie 1-Hydroxybenzotriazol oder 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol und einem Dehydratationsmittel, wie Dicyclohexylcarbodiimid oder 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid in einem inerten organischen Lösemittel, wie Dimethylformamid und/oder Methylenchlorid ausgeführt. Die Umsetzung wird bequemerweise bei einer Temperatur von 0 bis 50°C, vorzugsweise bei Umgebungstemperatur ausgeführt. Falls ein Salz einer Verbindung der Formel (IV) verwendet wird, wird die Umsetzung bequemerweise in der zusätzlichen Gegenwart einer Base ausgeführt, wie Triethylamin. Andere geeignete Reagenzien und Lösemittel sind in der Technik bekannt, beispielsweise ein Säurehalogenid, wie p-Anisoylchlorid in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin. Alternativ dazu kann die Verbindung der Formel (IV) mit einer Verbindung der Formel (V) in Gegenwart von Diethylcyanophosphonat umgesetzt werden. Diese Reaktion wird bequemerweise in einem organischen Lösemittel, wie Dichlormethan, in Gegenwart einer Base, wie Triethylamin ausgeführt. Die Temperatur liegt bequemerweise im Bereich von –25 bis 25°C.
Die Verbindung der Formel (II), worin X¹ für CH steht, ist beispielsweise aus WO 00/76971 A auf den Seiten 163–164 bekannt und wird als 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidin oder 1-Methyl-4,4'-bispiperidin bezeichnet.
Die Verbindung der Formel (II), worin X¹ für N steht, wird hierin als 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin bezeichnet.
Die Verbindungen der Formel (III) können hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (VI)
worin R⁴ für eine Carboxylschutzgruppe steht, beispielsweise eine C₁-C₆ Alkylgruppe, wie Methyl oder Ethyl, mit einer Verbindung der Formel (IV) unter Bildung einer Verbindung der Formel (VII)
wonach die Entfernung der Schutzgruppe erfolgt.
Die Verbindungen der Formel (IV) können hergestellt werden durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (II) mit einer Verbindung der Formel (VIII)
worin R⁵ für eine Aminoschutzgruppe steht, wie t-Butoxycarbonyl (Boc), unter Bildung einer Verbindung der Formel (IX)
wonach die Entfernung der Schutzgruppe erfolgt.
Die Verbindungen der Formeln (VI) und (VIII) sind bekannt oder können mittels herkömmlicher Verfahren zur Herstellung von Aminosäuren hergestellt werden, die an der Carboxy- oder Aminogruppe geschützt sind. Bestimmte Präparationen sind auch in den Beispielen beschrieben.
Die Verbindungen der Formel (V) sind gut bekannt.
Der Schutz von Amino- und Carbonsäuregruppen ist in McOmie, Protecting Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, NY, 1973 und Greene und Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, 2. Ausgabe, Herausgeber John Wiley & Sons, NY, 1991 beschrieben. Beispiele für Carboxyschutzgruppen sind unter anderem C₁-C₆ Alkylgruppen, wie Methyl, Ethyl, t-Butyl und t-Amyl, Aryl-C₁-C₄-alkylgruppen, wie Benzyl, 4-Nitrobenzyl, 4-Methoxybenzyl, 3,4-Dimethoxybenzyl, 2,4-Dimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethylbenzyl, Benzhydryl und Trityl, Silylgruppen, wie Trimethylsilyl und t-Butyldimethylsilyl und Allylgruppen, wie Allyl und 1-Trimethylsilylmethylprop-1-en-3-yl.
Beispiele für Aminschutzgruppen umfassen Acylgruppen, wie Gruppen der Formel RCO, worin R für C₁-C₆ Alkoxy, Phenyl-C₁-C₆-alkoxy oder ein C₃-C₁₀ Cycloalkoxy steht, worin eine Phenylgruppe wahlweise beispielsweise durch ein oder zwei Gruppen aus Halogen, C₁-C₄ Alkyl und C₁-C₄ Alkoxy substituiert sein kann.
Bevorzugte Aminoschutzgruppen umfassen Benzyloxycarbonyl (CBz) und t-Butoxycarbonyl (Boc).
Bestimmte hierin beschriebene Zwischenprodukte, beispielsweise die Verbindungen der Formeln (III) und (IV) dürften neu sein und werden daher als weitere Aspekte der Erfindung bereitgestellt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können durch jeden bequemen Weg verabreicht werden, beispielsweise in den Gastrointestinaltrakt (beispielsweise rektal oder oral), in die Nase, die Lungen, die Muskulatur oder die Gefäße oder transdermal. Die Verbindungen können in jeder bequemen Verabreichungsform verabreicht werden, beispielsweise Tabletten, Pulver, Kapseln, Lösungen, Dispersionen, Suspensionen, Sirupen, Sprays, Zäpfchen, Gelen, Emulsionen, Pflaster usw. Solche Zusammensetzungen können Komponenten enthalten, die in pharmazeutischen Präparationen herkömmlich sind, beispielsweise Verdünnungsmittel, Träger, pH Modifikationsmittel, Süßstoffe, Füllstoffe und weitere Wirkstoffe. Falls eine parenterale Verabreichung gewünscht wird, sind die Zusammensetzungen steril und liegen in einer Lösungs- oder Suspensionsform vor, die zur Injektion oder Infusion geeignet ist. Solche Zusammensetzungen bilden einen weiteren Aspekt der Erfindung.
Von diesem Aspekt aus betrachtet liefert die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die die Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungsmittel oder Träger enthält.
Gemäß einem weiteren Aspekt liefert die vorliegende Erfindung die Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon zur Verwendung in der Therapie.
Gemäß einem weiteren Aspekt liefert die vorliegende Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung einer thrombotischen Störung.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden in einem Verfahren zur Behandlung einer thromboembolischen Störung bei einem Patienten, der einer solchen Behandlung bedarf, verwendet, das die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon umfasst.
Der Patient kann ein Mensch oder ein nicht menschliches Tier sein, wie ein nicht menschlicher Säuger, beispielsweise eine Katze, ein Hund, ein Pferd, eine Kuh oder ein Schaf.
Die thrombotische Störung kann beispielsweise venöse Thrombose, Lungenembolie, arterielle Thrombose, Myokardischämie, Myokardinfarkt oder cerebrale Thrombose sein. Eine besondere Indikation ist beispielsweise die Prophylaxe der postoperativen venösen Thrombose nach einer orthopädischen Hochrisikooperation (wie Hüft- oder Knieersatz), primär die Behandlung der venösen Thrombose, sekundär die Prävention der ischämischen cardiovaskulären Komplikationen nach einem Myokardinfarkt (in Kombination beispielsweise mit gering dosiertem Aspirin) oder Prävention des embolischen Schlaganfalls bei nicht-valvulär atrialer Fibrillation. Die Verbindungen können auch gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren zur Behandlung des akuten Gefäßverschlusses verwendet werden, der mit einer thrombolytischen Therapie und Restenose assoziiert ist, beispielsweise nach einer transluminalen Coronarangiopla stie oder einer Bypasstransplantation der coronaren oder peripheren Arterien und bei der Aufrechterhaltung des vaskulären Zugangs bei Langzeithämodialysepatienten.
Die Dosis der Verbindung der Formel (I) hängt von der Art und Schwere des zu behandelnden Zustands, dem Verabreichungsweg und der Größe und Spezies des Patienten ab. Im allgemeinen werden Mengen im Bereich von 0,01 bis 100 μmol/kg Körpergewicht verabreicht.
Wie hierin verwendet umfasst der Ausdruck "Behandlung" die prophylaktische Verwendung. Der Ausdruck "wirksame Menge" bezieht sich auf die Menge der Verbindung der Formel (I), die zur Verringerung oder Hemmung der Entwicklung der Symptome der zu behandelnden thrombotischen Störung wirksam ist.
Die erfindungsgemäße Verbindung kann alleine oder in Kombination mit einem Antikoagulans, das einen unterschiedlichen Wirkmechanismus hat oder mit einem thrombolytischen Mittel verabreicht werden.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.
Die Abkürzungen werden gemäß der IUPAC-IUB Nomenklatur verwendet. In weiteren Abkürzungen steht Boc für tertiäres Butyloxycarbonyl, DCC für Dicyclohexylcarbodiimid, DIEA für N,N-Diisopropylethylamin, DMSO für Dimethylsulfoxid (peredeuteriert falls für NMR), DMF für Dimethylformamid, EDCI für 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid, ES-MS für Elektrospraymassenspektrum, EtOAc für Ethylacetat, Et₂O für Diethylether, HOAt für 1-Hydroxy-7-aza-benzotriazol, HOBt für 1-Hydroxybenzotriazol, HPLC für Hochdruckflüssigchromatographie, MeOH für Methanol, SCX für starken Kationenaustauscher, TEA für Triethylamin, TFA für Trifluoressigsäure und THF für Tetrahydrofuran. Die Reagenzien werden von einer Vielzahl an im Handel erhältlichen Quellen erhalten.
Die folgenden Abkürzungen werden durchgehend verwendet:
Die verwendeten Abkürzungen entsprechen der IUPAC-IUB Nomenklatur.
In weiteren Abkürzungen steht Boc für tertiäres Butyloxycarbonyl, CMA für Chloroform:Methanol:konzentriertes Ammoniumhydroxid (80:18:2), DEPC für Diethylcyanophosphonat, DCC für Dicyclohexylcarbodiimid, DIEA für N,N-Diisopropylethylamin, DMSO für Dimethylsulfoxid (gänzlich perdeuteriert für NMR), DMF für Dimethylformamid, EDCI für 1-[3-(Dimethylamino)propyl]-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid, ES-MS für Elektrospraymassenspektrum, EtOAc für Ethylacetat, Et₂O für Diethylether, HOAt für 1-Hydroxy-7-azabenzotriazol, HOBt für 1-Hydroxybenzotriazol, HPLC für Hochdruckflüssigchromatographie, MeOH für Methanol, SCX für starken Kationenaustauscher, TEA für Triethylamin, TFA für Trifluoressigsäure und THF für Tetrahydrofuran. Die Reagenzien werden aus einer Vielzahl an im Handel erhältlichen Quellen erhalten.
Allgemeine Lactonöffnungsverfahren
Verfahren 1: Auf eine Weise die zu der von L. N. Jungheim et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 96–108 beschriebenen ähnlich ist, wird bei 0°C eine Lösung aus N-Boc-D-Serin-β-lacton (1 Äquivalent, hergestellt gemäß E. R. Marinez, E. K. Salmassian, T. T. Lau, C. G. Gutierrez, J. Org. Chem. 1996, 61, 3548–3550) in THF (0,3 M) mit Natriumthioalkoxid (1,1 Äquivalente) behandelt. Nach dem Rühren für 30 min kann sich das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur erwärmen und für weitere 2–3 h rühren, ehe es mit 10 wässriger Natriumbisulfatlösung angesäuert wird. Die wässrige Phase wird mit Ethylacetat zweimal ex trahiert und die vereinigten organischen Phasen werden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Der rohe Rückstand wird durch Chromatographie über Silicagel unter Elution mit einem Gemisch aus 1 bis 2% Methanol in Dichlormethan mit 0,5% Essigsäure gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum konzentriert.
Verfahren 2: Auf eine Weise, die zu der von E. S. Ratemi, J. C. Vederas, Tetrahedron Lett. 1994, 35, 7605–7608, beschriebenen ähnlich ist, wird eine Lösung aus N-Trimethylsilylamin (1,3 Äquivalente) in Acetonitril (0,3 M) mit einer Lösung aus N-Boc-D-Serin-β-lacton (1 Äquivalent) in Acetonitril (0,1 M) behandelt. Nach dem Rühren für 3 h wird das Reaktionsgemisch im Vakuum konzentriert. Der rohe Rückstand wird in 3:1 Methanol/THF (0,05 bis 0,1 M) gelöst und mit 10% G/V wässriger Kaliumcarbonatlösung (etwa 25% des organischen Lösemittelvolumens) behandelt. Nach dem Rühren für 1,5 h wird das Reaktionsgemisch im Vakuum konzentriert und der entstehende Feststoff wird mit Dichlormethan behandelt, das eine kleine Menge Methanol enthält. Das organische Filtrat wird im Vakuum unter Bildung des Kaliumsalzes der Säure konzentriert, das ohne weitere Reinigung verwendet wird.
Allgemeine Kupplungsverfahren
Verfahren 1: Eine Lösung oder Suspension eines Amins, Aminhydrochloridsalzes oder Aminhydrobromidsalzes (1 Äquivalent, etwa 0,1 bis 0,2 M) in THF, Dichlormethan oder DMF (oder einem Gemisch aus einem dieser Lösemittel) wird mit entweder einer Carbonsäure (etwa 1 Äquivalent) oder einem Carbonsäurekaliumsalz entweder HOBt oder HOAt (etwa 1 Äquivalent), entweder TEA oder DIEA (0–5 Äquivalente) und entweder EDCI oder DCC (etwa 1 Äquivalent) behandelt. Nach dem Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch mit einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die wässrige Phase wird zweimal mit Ethylacetat oder Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden dann mit MgSO₄ oder Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Erforderlichenfalls wird das Produkt durch Chromatographie über Silicagel unter Elution mit einem Gradienten aus 0% bis 5–15% an 2 N Ammoniak/Methanol in Dichlormethan gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum konzentriert. Alternativ dazu kann das Produkt durch Umkehrphasen HPLC auf C-18 mittels eines 5 bis 95% Gradienten an Acetonitril in H₂O mit 0,01% HCl gereinigt werden. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und gefriergetrocknet.
Verfahren 2: Zu einer gerührten Lösung eines Amins oder Aminhydrochloridsalzes (1 Äquivalent), Triethylamin (1–3 Äquivalente) und einer Carbonsäure (etwa 1,2 Äquivalente) in Dichlormethan (0,2–0,5 M) bei 0°C wird langsam Diethylcyanophosphonat (etwa 1,2 Äquivalente) gegeben. Nach dem Rühren über Nacht werden die Lösemittel im Vakuum entfernt und der Rückstand wird zwischen einem organischen Lösemittel wie Ethylacetat oder Dichlormethan aufgeteilt und mit gesättigtem wässrigem NaHCO₃, gefolgt von Kochsalzlösung, gewaschen. Die organische Phase wird dann mit MgSO₄ oder Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Erforderlichenfalls wird das Produkt durch Chromatographie über Silicagel unter Elution mit einem Gradienten aus 0–10% an 2 N Ammoniak/Methanol in entweder Dichlormethan oder Chloroform gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum konzentriert.
Verfahren 3: Das Amin oder Aminhydrochloridsalz (1 Äquivalent) und Triethylamin (1–3 Äquivalente) werden in Dichlormethan (0,1–0,5 M) gelöst und ein Säurechlorid (etwa 1,2 Äquivalente) wird zugegeben. Nach dem Rühren über Nacht wird das Reaktionsgemisch mit gesättigter NaHCO₃ Lösung gestoppt. Die wässrige Phase wird zweimal mit Dichlormethan extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Erforderlichenfalls kann das Produkt durch Chromatographie über Silicagel unter Elution mit einem Gradienten aus 0% über 5–10% an 2 N Ammoniak/Methanol in Dichlormethan gereinigt werden. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum konzentriert. Alternativ dazu kann das rohe Produkt durch Umkehrphasen HPLC mittels eines 5 bis 95% Gradienten aus 0,01% HCl/H₂O in Acetonitril gereinigt werden. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und gefriergetrocknet.
Verfahren 4: Eine Lösung oder Suspension eines Amins oder Aminhydrochloridsalzes (1 Äquivalent, etwa 0,2 M) in THF, Dichlormethan oder DMF (oder ein Gemisch eines dieser Lösemittel) wird mit einer Carbonsäure (etwa 1 Äquivalent) und entweder TEA oder DIEA (0–3 Äquivalente) behandelt und für mehrere Minuten vermischt. Entweder HOBt oder HOAt (etwa 1 Äquivalent) und entweder EDCI oder DCC (etwa 1 Äquivalent) werden getrennt zusammen in einem Lösemittel gerührt und das entstehende Gemisch wird zu der anderen Lösung gegeben, oder andersherum. Nach dem Rühren über Nacht bei Raumtemperatur können die Lösemittel entfernt werden und dann wird das Gemisch mit einem organischen Lösemittel (wie Ethylacetat oder Dichlormethan) verdünnt und mit gesättigtem wässrigem Natriumbicarbonat gefolgt von Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Lösung wird dann mit MgSO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Wenn DCC als Kupplungsreagenz verwendet wird, nach dem Rühren über Nacht bei Raumtemperatur, kann das Gemisch zur Entfernung des Dicyclohexylharnstoffs entfernt werden und wird dann durch SCX Chromatographie wie unten beschrieben gereinigt.
Erforderlichenfalls kann das Produkt dann durch Chromatographie über Silicagel unter Elution mit einem Gradienten von 0% über 2–12% an 2 N Ammoniak/Methanol in Dichlormethan oder Chloroform gereinigt werden. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum konzentriert.
Allgemeine Schutzgruppenabspaltungsverfahren
Verfahren 1 (t-Butylcarbamat): Eine Lösung des t-Butylcarbamats (1 Äquivalent) in CH₂Cl₂ (0,2 M) wird mit Anisol (5 Äquivalente) und TFA (20 Volumenprozent) behandelt. Nach dem Rühren für 1 bis 3 Stunden bei Umgebungstemperatur wird das Reaktionsgemisch im Vakuum konzentriert. Der rohe Rückstand wird durch starke Kationenaustauschchromatographie (SCX) gereinigt. Die SCX Säule wird mit einer 5% Lösung aus Essigsäure in Methanol gewaschen und das TFA Salz wird in Methanol (möglicherweise mit einem Colösemittel wie Dichlormethan) gelöst und auf eine SCX Säule aufgebracht. Die Säule wird dann mit Methanol (möglicherweise mit einem Colösemittel wie Dichlormethan) gewaschen und dann wird die freie Base aus der Säule mit einer 2 N Lösung aus Ammoniak oder Triethylamin in Methanol (möglicherweise mit einem Colösemittel wie Dichlormethan) eluiert. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden dann vereinigt und im Vakuum unter Bildung des Produkts in Form der freien Base konzentriert.
Verfahren 2 (t-Butylcarbamat): HCl Gas wird in eine Lösung des t-Butylcarbamats in wasserfreiem MeOH (0,1 M) für etwa 10 bis 30 min geblasen und dann wird das Reaktionsgemisch im Vakuum konzentriert.
Verfahren 3: Eine Lösung des Benzylcarbamats und 20% Pd/C (15% G/G) in wasserfreiem EtOH (0,1 M) wird einer H₂ Atmosphäre bei Raumtemperatur unter Druck unterzogen und kann über Nacht rühren. Das Reaktionsgemisch wird über Diatomäenerde filtriert und das Filtrat wird im Vakuum konzentriert.
Allgemeine Salzbildungsverfahren
Verfahren 1: Die freie Base wird in 0,2 N wässrigem HCl (1–2 Äquivalente an HCl) gelöst. Die entstehende Lösung wird unter Bildung des Aminhydrochloridsalzes gefriergetrocknet.
Verfahren 2: Eine Lösung der freien Base in einer kleinen Menge an Dichlormethan wird mit 1,0–2,2 Äquivalenten an 1 M HCl in Ether behandelt. Nach dem Rühren für etwa 30 min wird das Reaktionsgemisch filtriert und der entstehende Feststoff wird mit Ether gewaschen und unter Bildung des Aminhydrochloridsalzes getrocknet.
Verfahren 3: Eine Lösung der freien Base in einer kleinen Menge MeOH wird mit einer 0,5 M Lösung an Ammoniumchlorid in MeOH (1 Äquivalent) behandelt. Die entstehende Lösung wird im Vakuum unter Bildung des Aminhydrochloridsalzes konzentriert.
Allgemeine analytische HPLC Verfahren
Verfahren 1: Vydac C18 (4,6 × 250 mm) oder Symmetry (4,6 × 150 mm) eluiert mit einem linearen Gradienten aus 90/10 bis 50/50 (0,1% TFA in Wasser/0,1% TFA in Acetonitril) über 45 min, 1 ml/min, λ = 214 nm.
Verfahren 2: Xterra RP18 4,6 × 150 mm Säule, Gradient 10–50% CH₃CN in H₂O mit 0,1% TFA, 1 ml/min, über 40 min, Waters 996 PDA und/oder Sedex ELS Detektion.
Verfahren 3: Xterra RP18 4,6 × 50 mm Säule, Gradient von 2–50% CH₃CN in H₂O mit 0,1% TFA, 1 ml/min, über 30 min, λ = 214 nm.
Verfahren 4: Xterra RP18 4,6 × 50 mm Säule, Gradient von 2–70% CH₃CN in H₂O mit 0,1% TFA, 1 ml/min, über 30 min, λ = 214 nm.
Herstellung der Aminosäurezwischenprodukte
N-Boc-O-Methyl-D-Threoninmethylester
Die Herstellung erfolgt ähnlich zu den in S. V. Andurkar, S. P. Stables, H. Kohn, Tetrahedron Asymm., 1998, 9(21), 3841–3854 beschriebenen Verfahren. Zu einer Lösung aus N-Boc-D-Threonin (36,5 mmol) in Acetonitril (500 ml), die vor äußerem Licht geschützt ist, werden Ag₂O (182,5 mmol) und CH₃I (365,0 mmol) gegeben. Nach dem Rühren für 3–4 Tage wird das Gemisch durch Diatomäenerde filtriert und im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wird dann über Silicagel unter Elution mit einem Gradienten aus 0% Ethylacetat in Hexan bis 100% Ethylacetat in Hexan chromatographiert. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter Bildung von 4,78 g (52,9%) der Titelverbindung konzentriert.
¹H NMR
Analyse für C₁₁H₂₁NO₅ × 0,1H₂O:
Berechnet: C 52,41, H 8,40, N 5,56.
Gefunden: C 52,44, H 7,89, N 5,70.
N-Boc-O-Methyl-D-allo-Threoninmethylester
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-allo-threonin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu den oben für die Herstellung von N-Boc-O-methyl-D-threoninmethylester beschriebenen äquivalent sind (70%).
¹H NMR
ES-MS m/z 248,0 (M + 1)⁺.
N-Boc-O-Methyl-D-Threonin
Zu eine Lösung aus N-Boc-O-Methyl-D-threoninmethylester (8,09 mmol) in 1,4-Dioxan (10 ml) wird eine Lösung aus LiOH (24,3 mmol) in Wasser (20 ml) gegeben. Nach dem Rühren für 2–3 h werden die Lösemittel im Vakuum entfernt und der Rückstand wird zwischen Wasser und Ether aufgeteilt. Die wässrige Phase wird mit fester Zitronensäure auf etwa pH 3 angesäuert und dann mit Ethylacetat extrahiert. Der Ethylacetatextrakt wird mit Wasser gewaschen, mit MgSO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum unter Bildung von 1,70 g (90%) der Titelverbindung konzentriert.
¹H NMR
Analyse für C₁₀H₁₉NO₅ × 0,1H₂O:
Berechnet: C 50,45, H 8,05, N 5,88.
Gefunden: C 50,67, H 8,01, N 5,73.
N-Boc-O-Methyl-D-allo-Threonin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-O-Methyl-D-allo-threoninmethylester mittels Verfahren, die im wesentlichen zu den oben für die Herstellung von N-Boc-O-Methyl-D-threonin beschriebenen äquivalent sind (99%).
¹H NMR
Analyse für C₁₀H₁₉NO₅ × 0,14H₂O:
Berechnet: C 50,05, H 7,98, N 5,84.
Gefunden: C 49,64, H 7,67, N 5,81.
N-Boc-D-allo-Threonin
Die Herstellung erfolgt aus D-Allo-threonin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu denen in R. T. Suhman, P. L. Ornstein, J. W. Paschal, P. D. Geselchen, J. Org. Chem, 1990, 55, 738–741 beschriebenen äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS m/z 218,2 (M – 1)^–.
Herstellung der Verbindungen der Formel (IX), X¹ = CH
1-(N-Boc-D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus Boc-D-Serin und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid (WO 00/76971) im wesentlichen mittels Verfahren, die zum allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 370,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₉N₃₅N₃O₄ × 0,3H₂O:
Berechnet: C 60,87, H 9,57, N 11,21.
Gefunden: C 60,87, H 9,37, N 11,19.
1-(N-Cbz-O-Methyl-D-serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Cbz-O-Methyl-D-serin (S. V. Andurkar, J. P. Stables, H. Kohn, Tetrahedron: Asymm, 1998, 9 (21), 3841–3854) und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 418,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₅N₃O₄ × 0,2H₂O:
Berechnet: C 65,59, H 8,47, N 9,98.
Gefunden: C 65,61, H 8,57, N 9,65.
1-(N-Boc-D-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus Boc-D-Threonin und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4, sind.
ES-MS, m/z 384,3 (M + 1)⁺.
1-(N-Boc-D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-allo-Threonin und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 384,5 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₀H₃₇N₃O₄ × 0,2H₂O:
Berechnet: C 60,73, H 9,43, N 10,62.
Gefunden: C 60,54, H 9,54, N 11,75.
1-(N-Boc-O-Methyl-D-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-O-Methyl-D-threonin und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 398,4 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₁H₃₉N₃O₄ × H₂O:
Berechnet: C 60,69, H 9,95, N 10,11.
Gefunden: C 60,55, H 9,55, N 11,21.
1-(N-Boc-D-Methionyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-Methionin und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 414,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₁H₃₉N₃O₃S × 0,3H₂O:
Berechnet: C 57,00, H 8,88, N 9,50.
Gefunden: C 57,34, H 8,89, N 8,81.
1-(N-Boc-S-Phenyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-S-Phenyl-D-cystein (L. N. Jungheim et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 96–108) und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 462,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₅H₃₉N₃O₃S × 1,2H₂O:
Berechnet: C 62,13, H 8,63, N 8,70.
Gefunden: C 62,05, H 8,32, N 8,75.
1-[N-Boc-S-(2-Pyridyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-S-(2-Pyridyl)-D-cystein (L. N. Jungheim et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 96–108) und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 463,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₈N₄O₃S × 0,7H₂O:
Berechnet: C 60,65, H 8,36, N 11,79.
Gefunden: C 60,95, H 8,02, N 11,07.
1-[N-Boc-S-(2-Propyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-S-(2-Propyl)-D-cystein und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-S-(2-Propyl)-D-cystein wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und Natrium-2-propanthiolat mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 428,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₂H₄₁N₃O₃S × H₂O:
Berechnet: C 59,29, H 9,73, N 9,43.
Gefunden: C 58,95, H 9,38, N 9,21.
1-[N-Boc-S-Methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-S-Methyl-D-cystein und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-S-Methyl-D-cystein wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und Natriumthiomethoxid mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 400,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₀H₃₇N₃O₃S × 1,2H₂O:
Berechnet: C 57,03, H 9,43, N 9,98.
Gefunden: C 57,03, H 8,85, N 9,92.
1-[N-Boc-β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(4-morpholinyl)-D-alaninkaliumsalz und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(4-morpholinyl)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und N-Trimethylsilylmorpholin mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 439,3 (M + 1)⁺.
1-(N-Boc-β-Dimethylamino-D-alaninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(1-dimethylamino)-D-alaninkaliumsalz und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(1-dimethylamino)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und N,N-Dimethyltrimethylsilylamin mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 397,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₁H₄₀N₄O₃:
Berechnet: C 63,60. H 10,17, N 14,13.
Gefunden: C 63,84, H 9,82, N 13,27.
1-[N-Boc-β-(1-Imidazolyl-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(1-imidazolyl)-D-alaninkaliumsalz und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(1-Imidazolyl)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und 1-(Trimethylsilyl)imidazol mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 420,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₂H₃₇N₅O₃ × 0,4H₂O:
Berechnet: C 61,91, H 8,93, N 16,41.
Gefunden: C 62,01, H 8,49, N 15,80.
[N-Boc-β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(1-piperidinyl)-D-alaninkaliumsalz und 4-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrobromid mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(1-piperidinyl)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und 1-(Trimethylsilyl)piperidin mittels Verfahren hergestellt, die zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 im wesentlichen äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 437,4 (M + 1)⁺.
Herstellung der Verbindungen der Formel (IV), X¹ = CH
1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 270,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₄H₂₇N₃O₂ × 2,0HCl × 2,8H₂O:
Berechnet: C 42,81, H 8,88, N 10,70.
Gefunden: C 43,15, H 9,13, N 10,13.
1-(O-Methyl-D-serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Cbz-O-Methyl-D-serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 3 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 284,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₅H₂₉N₃O₂ × 0,1C₂H₅OH × 0,7H₂O:
Berechnet: C 60,73, H 10,39, N 13,98.
Gefunden: C 60,57, H 9,89, N 13,73.
1-(D-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 1 beschriebenen, äquivalent sind.
Keine Daten.
1-(D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 284,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₅H₂₉N₃O₂ × 2,3HCl × 2,4H₂O:
Berechnet: C 43,89, H 8,86, N 10,24, Cl 19,87.
Gefunden: C 43,46, H 8,70, N 10,67, Cl 19,61.
1-(O-Methyl-D-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-O-Methyl-D-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 1 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 298,1 (M + 1)⁺.
1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 1 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 314,2 (M + 1)⁺.
1-(S-Phenyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-S-phenyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 362,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₀H₃₁N₃OS × 1,7HCl × 1,7H₂O:
Berechnet: C 52,89, H 8,01, N 9,25.
Gefunden: C 52,96, H 8,41, N 9,23.
1-[S-(2-Pyridyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-S-(2-Pyridyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 363,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₉H₃₀N₄OS × 1,9HCl × 5,0H₂O:
Berechnet: C 43,73, H 8,09, N 10,74.
Gefunden: C 43,67, H 8,14, N 10,70.
1-[S-(2-Propyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-S-(2-Propyl)-D-cysteinyl-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 328,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₇H₃₃N₃OS × 1,7HCl × 1,9H₂O:
Berechnet: C 48,18, H 9,16, N 9,92.
Gefunden: C 48,18, H 9,47, N 9,82.
1-(S-Methyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-S-Methyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 300,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₅H₂₉N₃OS × 1,8HCl × 1,8H₂O:
Berechnet: C 45,32, H 8,72, N 10,57.
Gefunden: C 45,38, H 9,07, N 10,41.
1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidintrihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 339,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₈H₃₄N₄O₂ × 3,0HCl × 1,3H₂O:
Berechnet: C 45,87, H 8,47, N 11,89.
Gefunden: C 45,80, H 8,08, N 11,84.
1-[β-Dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-Dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 297,3 (M + 1)⁺.
1-[β-(1-Imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-(1-Imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 320,2 (M + 1)⁺.
1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin gemäß Verfahren, die im wesentlichen zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 337,3 (M + 1)⁺.
Beispiele, X¹ = CH
Beispiel 1
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 413,2 (M + 1)⁺, 411,2 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₃H₃₂N₄O₃ × 1,2HCl × 1,6H₂O:
Berechnet: C 56,95, H 7,56, N 11,55, Cl 8,77.
Gefunden: C 57,23, H 7,57, N 11,15, Cl 8,74.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 14,1 min.
Beispiel 2
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 447,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₁N₄O₃Cl × 1,1HCl × 1,6H₂O:
Berechnet: C 53,54, H 6,90, N 10,86, Cl 14,43.
Gefunden: C 53,61, H 6,44, N 10,82, Cl 14,09.
Analytische HPLC (Verfahren 4): > 99%, t_r = 12,1 min.
Beispiel 3
1-[N-(3-Chlorindol-6-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid und 3-Chlorindol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 447,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₁N₄O₃Cl × 1,1HCl × 1,9H₂O:
Berechnet: C 52,99, H 6,94, N 10,75, Cl 14,28.
Gefunden: C 53,00, H 6,60, N 11,05, Cl 13,94.
Analytische HPLC (Verfahren 4): > 99%, t_r = 11,5 min.
Beispiel 4
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 464,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₀N₃O₃SCl × 1,3HCl × 0,6 H₂O:
Berechnet: C 52,90, H 6,27, N 8,05, Cl 15,65.
Gefunden: C 52,94, H 6,27, N 8,08, Cl 15,48.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 19,9 min.
Beispiel 5
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-O-methyl-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(O-Methyl-D-serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 427,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₄N₄O₃ × 1,0HCl × 1,8H₂O:
Berechnet: C 58,18, H 7,85, N 11,31, Cl 7,16.
Gefunden: C 58,20, H 7,89, N 11,38, Cl 7,12.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 98%, t_r = 15,9 min.
Beispiel 6
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-D-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 427,4 (M + 1)⁺, 425,3 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₄H₃₄N₄O₃ × 0,85HCl × 1,4H₂O:
Berechnet: C 58,17, H 7,49, N 11,31, Cl 6,08.
Gefunden: C 58,53, H 7,94, N 10,77, Cl 6,46.
Analytische HPLC (Verfahren 1): 98%, t_r = 15,2 min.
Beispiel 7
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 427,5 (M + 1)⁺, 425,5 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₄H₃₄N₄O₃ × 1,7HCl × 4,0H₂O:
Berechnet: C 51,42, H 7,86, N 10,00, Cl 10,75.
Gefunden: C 51,04, H 8,11, N 12,20, Cl 10,71.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 98%, t_r = 13,3 min.
Beispiel 8
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 461,5 (M + 1)⁺, 459,4 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₄H₃₇ClN₄O₃ × 0,95HCl × 1,0H₂O:
Berechnet: C 54,60, H 6,68, N 10,61, Cl 13,10.
Gefunden: C 55,15, H 6,78, N 10,68, Cl 13,42.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 98%, t_r = 22,2 min.
Beispiel 9
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-O-methyl-D-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(O-Methyl-D-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 2 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 441,5 (M + 1)⁺, 439,5 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₅H₃₆N₄O₃ × 1,6HCl × 1,7H₂O:
Berechnet: C 56,70, H 7,80, N 10,58, Cl 10,71.
Gefunden: C 56,81, H 8,18, N 10,17, Cl 10,77.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 98%, t_r = 18,8 min.
Beispiel 10
1-[N-(4-Methoxybenzoyl)-O-methyl-D-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(O-Methyl-D-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 4-Methoxybenzoesäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 2 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 432,5 (M + 1)⁺, 430,5 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₄H₃₇N₃O₄ × 1,5HCl × 3,5H₂O:
Berechnet: C 52,48, H 8,35, N 7,65, Cl 9,68.
Gefunden: C 52,26, H 8,24, N 7,62, Cl 9,77.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 17,4 min.
Beispiel 11
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-D-methioninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 457,3 (M + 1)⁺, 455,4 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₅H₃₆N₄O₂ × 1,4HCl × 0,75H₂O:
Berechnet: C 58,88, H 7,84, N 10,99, Cl 9,73.
Gefunden: C 58,49, H 7,48, N 10,86, Cl 9,57.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 93%, t_r = 22,4 min.
Beispiel 12
1-[N-(4-Methoxybenzoyl)-D-methioninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid und 4-Methoxybenzoesäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
FD⁺, m/z 447,4 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₇N₃O₃S × 1,1HCl × 0,9H₂O:
Berechnet: C 56,11, H 7,69, N 8,18, Cl 6,2.
Gefunden: C 56,56, H 7,77, N 8,27, Cl 6,43.
Analytische HPLC (Verfahren 1): 98%, t_r = 19,9 min.
Beispiel 13
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-S-phenyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(S-Phenyl-D-cysteinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 3 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 505,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₉H₃₆N₄O₂S × 1,0HCl × 0,6H₂O:
Berechnet: C 63,10, H 6,98, N 11,15, Cl 6,42.
Gefunden: C 63,14, H 6,94, N 10,06, Cl 6,23.
Analytische HPLC (Verfahren 2): > 97%, t_r = 27,4 min.
Beispiel 14
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-S-(2-pyridyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[S-(2-Pyridyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 506,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₈H₃₅N₅O₂S × 1,2HCl × 1,4H₂O:
Berechnet: C 58,52, H 6,84, N 12,19, Cl 7,40.
Gefunden: C 58,61, H 6,64, N 12,06, Cl 7,24.
Analytische HPLC (Verfahren 4): > 99%, t_r = 12,1 min.
Beispiel 15
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-S-(2-propyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[S-(2-Propyl)-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 471,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₈N₄O₂S × 1,2HCl × 1,0H₂O:
Berechnet: C 58,65, H 7,80, N 10,52, Cl 7,99.
Gefunden: C 58,65, H 7,68, N 10,49, Cl 7,80.
Analytische HPLC (Verfahren 4): > 98%, t_r = 12,9 min.
Beispiel 16
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-S-methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[S-Methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 3 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 443,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₄N₄O₂S × 1,0HCl × 0,8H₂O:
Berechnet: C 58,41, H 7,48, N 11,35, Cl 7,18.
Gefunden: C 58,33, H 7,31, N 11,14, Cl 7,06.
Analytische HPLC (Verfahren 2): > 98%, t_r = 18,7 min.
Beispiel 17
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-S-methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[S-Methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 477,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₃N₄O₂SCl × 1,0HCl × 0,8H₂O:
Berechnet: C 54,60, H 6,80, N 10,61, Cl 13,43.
Gefunden: C 54,70, H 6,60, N 10,49, Cl 13,30.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 92%, t_r = 22,2 min.
Beispiel 18
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl-S-methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[S-Methyl-D-cysteinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 494,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₄H₃₂N₃O₂S₂Cl × 1,0HCl × 0,8H₂O:
Berechnet: C 52,89, H 6,40, N 7,71, Cl 13,01.
Gefunden: C 52,97, H 6,31, N 7,88, Cl 12,88.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 97%, t_r = 23,6 min.
Beispiel 19
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 482,1 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₉N₅O₃ × 1,1HCl × 1,0H₂O:
Berechnet: C 60,08, H 7,86, N 12,98, Cl 7,23.
Gefunden: C 60,19, H 8,17, N 12,76, Cl 7,11.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 11,8 min.
Beispiel 20
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 516,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₈N₅O₃Cl × 1,1HCl × 2,0H₂O:
Berechnet: C 54,76, H 7,34, N 11,83, Cl 12,57.
Gefunden: C 54,81, H 6,85, N 11,88, Cl 12,78.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 94%, t_r = 15,5 min.
Beispiel 21
1-[N-(3-Chlorindol-6-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 3-Chlorindol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 516,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₈N₅O₃Cl × 1,0HCl × 1,8H₂O:
Berechnet: C 55,44, H 7,34, N 11,97, Cl 12,12.
Gefunden: C 55,38, H 6,95, N 11,92, Cl 12,30.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 96%, t_r = 13,4 min.
Beispiel 22
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 533,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₇N₄O₃SCl × 1,5HCl × 1,3H₂O:
Berechnet: C 53,05, H 6,78, N 9,17, Cl 14,50.
Gefunden: C 52,99, H 6,31, N 8,97, Cl 14,54.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 96%, t_r = 16,6 min.
Beispiel 23
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-β-dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-Dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 440,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₅H₃₇N_SO₂ × 1,0HCl × 2,2H₂O:
Berechnet: C 58,23, H 8,29, N 13,58.
Gefunden: C 58,19, H 8,06, N 13,52.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 9,5 min.
Beispiel 24
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-Dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 474,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₅H₃₆N₅O₂Cl × 1,2HCl × 1,7H₂O:
Berechnet: C 54,75, H 7,46, N 12,77.
Gefunden: C 55,01, H 7,07, N 12,40.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 98%, t_r = 15,8 min.
Beispiel 25
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-Dimethylamino-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 491,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₅H₃₅N₄O₂SCl × 1,2HCl × 1,5H₂O:
Berechnet: C 53,44, H 7,03, N 9,97.
Gefunden: C 53,20, H 6,64, N 9,80.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 16,7 min.
Beispiel 26
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-(1-imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidintrihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(1-Imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Eine Reinigung durch Umkehrphasenchromatographieoption ergibt das Hydrochloridsalz.
¹H NMR
ES-MS, m/z 497,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₃N₆O₂Cl × 3,0HCl × 1,0H₂O:
Berechnet: C 50,01, H 6,13, N 13,46.
Gefunden: C 49,64, H 5,75, N 12,24.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 16,1 min.
Beispiel 27
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-(1-imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-Imidazolyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Eine Reinigung durch Umkehrphasenchromatographieoption ergibt das Hydrochloridsalz.
¹H NMR
ES-MS, m/z 514,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₂N₅O₂SCl × 2,0HCl × 3,3H₂O:
Berechnet: C 48,31, H 6,33, N 10,83.
Gefunden: C 48,51, H 5,94, N 10,15.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 17,0 min.
Beispiel 28
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-(1-piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidindihydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Eine Reinigung durch Umkehrphasenchromatographieoption ergibt das Hydrochloridsalz.
¹H NMR
ES-MS, m/z 514,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₈N₄₀N₅O₂Cl × 2,1HCl × 5,0H₂O:
Berechnet: C 49,40, H 7,71, N 10,29.
Gefunden: C 49,74, H 7,59, N 9,59.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 17,0 min.
Beispiel 29
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-(1-piperidinyl)-D-alaninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperidin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 531,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₈H₃₉N₄O₂SCl × 1,0HCl × 0,9H₂O:
Berechnet: C 57,60, H 7,22, N 9,60.
Gefunden: C 57,56, H 7,02, N 9,41.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 18,5 min.
Herstellung der Verbindungen der Formel (IX), X¹ = N
1-(N-Boc-D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-allo-Threonin und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 385,5 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₉H₃₆N₄O₄ × 1,0H₂O:
Berechnet: C 56,69, H 9,52, N 13,92.
Gefunden: C 57,18, H 9,59, N 13,85.
1-(N-Boc-O-Methyl-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-O-Methyl-D-allo-threonin und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 398,8 (M + 1)⁺.
1-(N-Boc-D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-Serin und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 371,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₈H₃₄N₄O₄ × 0,2H₂O:
Berechnet: C 56,88, H 9,02, N 14,74.
Gefunden: C 57,02, H 9,05, N 14,43.
1-(N-Boc-Methionyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-D-methionin und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 äquivalent sind.
ES-MS, m/z 415,3 (M + 1)⁺.
1-[N-Boc-β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(4-morpholinyl)-D-alaninkaliumsalz und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(1-Morpholinyl)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und N-Trimethylsilylmorpholin mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 440,3 (M + 1)⁺.
1-[N-Boc-β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus N-Boc-β-(1-Piperidinyl)-D-alaninkaliumsalz und 1-(1-Methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 äquivalent sind. N-Boc-β-(1-piperidinyl)-D-alaninkaliumsalz wird aus Boc-D-Serin-β-lacton und 1-Trimethylsilylpiperidin mittels Verfahren hergestellt, die im wesentlichen zu dem allgemeinen Lactonöffnungsverfahren 2 äquivalent sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 438,3 (M + 1)⁺.
Herstellung der Verbindungen der Formel (IV), X¹ = N
1-(D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 285,4 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₄H₂₈N₄O₂ × 3,0HCl:
Berechnet: C 42,70, H 7,94, N 14,23, Cl 27,01.
Gefunden: C 42,29, H 7,84, N 14,26, Cl 26,84.
1-(O-Methyl-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-O-Methyl-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, sind.
¹H NMR
ES-MS, 299,4 m/z (M + 1)⁺.
1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 271,4 (M + 1)⁺.
Analyse für C₁₃H₂₆N₄O₂ × 3,0HCl × 1,0H₂O
Berechnet: C 39,25, H 7,86, N 14,09, Cl 26,74.
Gefunden: C 39,69, H 7,52, N 14,25, Cl 27,35.
1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin
Die Herstellung erfolgt aus 1-(N-Boc-D-methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 1 beschriebenen, sind.
ES-MS, m/z 315,2 (M + 1)⁺.
1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 340,3 (M + 1)⁺.
1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[N-Boc-β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem im allgemeinen Schutzgruppenabspaltungsverfahren 2 beschriebenen, sind.
¹H NMR
ES-MS, m/z 338,3 (M + 1)⁺.
Beispiele, X¹ = N
Beispiel 30
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das rohe Endprodukt wird mit wässriger 0,2 N HCl behandelt und mittels Präp-HPLC (80:20 bis 40:60 an 0,01% HCl in Wasser:Acetonitril) gereinigt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 479,3 (M + 1)⁺, 477,4 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₃H₃₁ClN₄O₃S × 1,1HCl × 3,3H₂O:
Berechnet: C 47,74, H 6,74, N 9,68.
Gefunden: C 47,31, H 6,01, N 9,66.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 22,1 min.
Beispiel 31
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Allo-Threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt. Das rohe Endprodukt wird mit wässriger 0,2 N HCl behandelt und mittels Präp-HPLC (80:20 bis 40:60 an 0,01% HCl in Wasser:Acetonitril) gereinigt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 462,2 (M + 1)⁺, 460,2 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₃H₃₂ClN₅O₃ × 1,1HCl × 4,5H₂O:
Berechnet: C 47,37, H 7,28, N 12,01.
Gefunden: C 47,27, H 6,37, N 11,95.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 96%, t_r = 21,0 min.
Beispiel 32
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-O-methyl-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(O-Methyl-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 493,1 (M + 1)⁺, 491,2 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₃H₃₁ClN₄O₃S × 1,0HCl × 1,0H₂O:
Berechnet: C 51,78, H 6,42, N 10,50.
Gefunden: C 51,93, H 7,02, N 10,28.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 96%, t_r = 22,8 min.
Beispiel 33
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-O-methyl-D-allo-threoninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(O-Methyl-D-allo-threoninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 476,1 (M + 1)⁺, 474,2 (M – 1)^–.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 96%, t_r = 21,4 min.
Beispiel 34
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 465,1 (M + 1)⁺, 463,1 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₂H₂₉ClN₄O₂S × 1,3HCl × 3,3H₂O:
Berechnet: C 49,26, H 6,93, N 10,45.
Gefunden: C 48,98, H 6,27, N 10,72.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 18,9 min.
Beispiel 35
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 448,2 (M + 1)⁺, 446,2 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₂H₃₀ClN₅O₂S × 1,1HCl × 3,0H₂O:
Berechnet: C 47,74, H 6,90, N 12,92.
Gefunden: C 48,47, H 6,18, N 12,70.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 18,9 min.
Beispiel 36
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-D-serinyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Serinyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 448,2 (M + 1)⁺, 446,2 (M – 1)^–.
Analyse für C₂₂H₃₀ClN₅O₃ × 1,1HCl × 3,0H₂O:
Berechnet: C 48,74, H 6,91, N 12,98.
Gefunden: C 48,47, H 6,18, N 12,70.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 99%, t_r = 18,9 min.
Beispiel 37
1-[N-(4-Methoxybenzoyl)-D-methioninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 6-Methoxybenzoesäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 449,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₆N₄O₃ × 1,8HCl × 1,2H₂O:
Berechnet: C 51,55, H 7,56, N 10,45, Cl 11,91.
Gefunden: C 51,23, H 7,28, N 10,16, Cl 12,39.
Analytische HPLC (Verfahren 1): > 98%, t_r = 14,4 min.
Beispiel 38
1-[N-(Indol-6-carbonyl-D-methioninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-(D-Methioninyl)-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid und 6-Indolcarbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 4 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem Salzbildungsverfahren 2 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 449,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₃H₃₆N₄O₃ × 1,8HCl × 1,2H₂O:
Berechnet: C 51,55, H 7,56, N 10,45, Cl 11,91.
Gefunden: C 51,23, H 7,28, N 10,16, Cl 12,39.
Analytische HPLC (Verfahren 1): 98%, t_r = 14,4 min.
Beispiel 39
1-[N-(Indol-6-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin und Indol-6-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 483,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₈N₆O₃ × 1,6HCl × 1,3H₂O:
Berechnet: C 55,33, H 7,54, N 14,89.
Gefunden: C 55,38, H 7,15, N 14,98.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 11,7 min.
Beispiel 40
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 517,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₇N₆O₃Cl × 1,0HCl × 1,5H₂O:
Berechnet: C 53,79, H 7,12, N 14,48.
Gefunden: C 53,52, H 6,89, N 14,18.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 10,7 min.
Beispiel 41
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-(4-morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(4-Morpholinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 534,2 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₆H₃₆N₅O₃SCl × 1,0HCl × 1,7H₂O:
Berechnet: C 51,94, H 6,77, N 11,65.
Gefunden: C 51,98, H 6,58, N 11,62.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 12,7 min.
Beispiel 42
1-[N-(5-Chlorindol-2-carbonyl)-β-(1-piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin und 5-Chlorindol-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Eine Reinigung durch Umkehrphasenchromatographieoption ergibt das Hydrochloridsalz.
¹H NMR
ES-MS, m/z 515,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₉N₆O₂Cl × 3,3HCl × 1,8H₂O:
Berechnet: C 48,56, H 6,93, N 12,58.
Gefunden: C 48,50, H 6,55, N 11,58.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 97%, t_r = 12,8 min.
Beispiel 43
1-[N-(6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonyl)-β-(1-piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazinhydrochlorid
Die Herstellung erfolgt aus 1-[β-(1-Piperidinyl)-D-alaninyl]-4-(1-methylpiperidin-4-yl)piperazin und 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-carbonsäure mittels Verfahren, die im wesentlichen äquivalent zu dem allgemeinen Kupplungsverfahren 1 sind. Das HCl Salz wird gemäß dem allgemeinen Salzbildungsverfahren 1 hergestellt.
¹H NMR
ES-MS, m/z 532,3 (M + 1)⁺.
Analyse für C₂₇H₃₈N₅O₂SCl × 1,0HCl × 1,8H₂O:
Berechnet: C 53,95, H 7,14, N 11,65.
Gefunden: C 54,11, H 6,90, N 11,26.
Analytische HPLC (Verfahren 3): > 99%, t_r = 14,5 min.
Enzymhemmtests:
Die Fähigkeit einer Testverbindung zur Hemmung von Faktor Xa kann in einem oder mehreren der folgenden Enzymhemmtests oder in anderen Standardtests evaluiert werden, die dem Fachmann bekannt sind.
Enzymhemmtest
Humaner Faktor Xa und humanes Thrombin werden von Enzyme Research Laboratories (South Bend, Indiana, USA) bezogen. Andere Proteasen werden von anderen kommerziellen Quellen bezogen, chromogene para-Nitroanilidpeptidproteasesubstrate werden von Midwest Biotech (Fishers, Indiana, USA) bezogen.
Die Bindungsaffinitäten für den humanen Faktor Xa werden als scheinbare Assoziationskonstanten (Kass) gemessen, die von den Proteasehemmkinetiken abgeleitet werden, wie dies vorher beschrieben wurde.^a,b,c,d Die scheinbaren Kass-Werte erhält man mittels automatisierter (BioMek-1000) Verdünnungen der Inhibitoren (Kass Bestimmungen werden jeweils dreifach bei jeder von 4 bis 8 Inhibitorkon zentrationen ausgeführt) in Platten mit 96 Vertiefungen erhalten und die Hydrolyseraten des chromogenen Substrats werden bei 405 nm mittels eines Thermomax Plattenlesegeräts von Molecular Devices (San Francisco) bestimmt. Für die Faktor Xa Hemmung ist das Testprotokoll folgendes: 50 μl Puffer (0,06 M Tris, 0,3 M NaCl, pH 7,4), 25 μl Inhibitortestlösung (in MeOH), 25 μl Humanfaktor Xa (32 nM in 0,03 M Tris, 0,15 M NaCl, 1 mg/ml HSA) und schließlich werden 150 μl BzIleGluGlyArgpNA (0,3 mM in Wasser) innerhalb von 2 Minuten zum Start der Hydrolyse zugegeben. Die Endkonzentration des Faktors Xa beträgt 3,2 nM. Freier [Xa] und gebundener [Xa] werden aus linearen Standardkurven auf derselben Platte unter Verwendung der SoftmaxPro Software für jede Inhibitorkonzentration bestimmt und der scheinbare Kass Wert wird für jede Inhibitorkonzentration berechnet, die eine Hydrolysehemmung zwischen 20% und 80% der Kontrolle hervorruft (3,2 nM Faktor Xa): Scheinbarer Kass = [E:I]/[E_f][I_f] = [E_b]/[E_f][I⁰ – I_b]. Die so erhaltenen scheinbaren Kass Werte entsprechen etwa der Inversion des Ki Wertes der jeweiligen Inhibitoren [1/scheinb Kass = scheinb Ki]. Die Variabilität der mittleren scheinbaren Kass Werte, die bei einer einzelnen Substratkonzentration bestimmt wird, beträgt ±15%. Der Testsystem-Km wird mit 0,347 ± 0,031 mM [n = 4] gemessen und Vmax beträgt 13,11 ± 0,76 μM/min.
Die Kass-Werte werden mit Thrombin und anderen Proteasen unter Verwendung desselben Protokolls mit den folgenden Enzym- und Substratkonzentrationen bestimmt: Thrombin 5,9 nM mit 0,2 mM BzPheValArgpNA, Faktor XIa 1,2 nM mit 0,4 mM PyroGluProArgpNA, Faktor XIIa 10 nM mit 0,2 mM HDProPheArgpNA, Plasmid 3,4 nM mit 0,5 mM HDValLeuLyspNA, nt-PA 1,2 nM mit 0,8 mM HDIleProArgpNA, Urokinase 0,4 nM mit 0,4 mM PyroGluGlyArgpNA, aPC 3 nM mit 0,174 mM PyroGluProArgpNA, Plasmakallikrein 1,9 nM mit D-ProPheArgpNA und Rindertrypsin 1,4 nM mit 0,18 mM BzPheValArgpNA.
Literaturzitate

(a) Sall D. J., J. A. Bastian, S. L. Briggs, J. A. Buben, N. Y. Chirgadze, D. K. Clawson, M. L. Denny, D. D. Giera, D. S. Gifford-Moore, R. W. Harper, K. L. Hauser, V. J. Klimkowski, T. J. Kohn, H-S. Lin, J. R. McCowan, A. D. Palkowitz, G. F. Smith, M. E. Richett, K. Takeuchi, K. J. Thrasher, J. M. Tinsley, B. G. Utterback, S-CB. Yan, M. Zhang. Dibasic Benzo[b]thiophenes Derivatives as a Novel Class of Active Site Directed Thrombin Inhibitors. 1. Determination of the Serine Protease Selectivity, Structure-Activity Relationships and Binding Orientation. J. Med. Chem. 40, 3489, 3493 (1997).
(b) Smith G. F., T. J. Craft, D. S. Gifford-Moore, W. J. Coffman, K. D. Kurz, E. Roberts, R. T. Shuman, G. E. Sandusky, N. D. Jones, N. Chirgadze and C. V. Jackson. A Family of Arginal Thrombin Inhibitors related to Efegatran. Sem. Thrombos. Hemost. 22, 173–183 (1996).
(c) Smith G. F., D. S. Gifford-Moore, T. J. Craft, N. Chirgadze, K. J. Ruterbories, T. D. Lindstrom, J. H. Satterwhite, Efegatran: A New Cardivascular Anticoagulat. In New Anticoagulants for the Cardiovascular Patient. Herausgeber R. Pifarre. Hanley & Belfus, Inc., Philadelphia (1997), Seiten 265–300.
(d) Sall D. J., D. A. Bailey, J. A. Bastian, N. Y. Chirgadze, A. C. Clemens-Smith, M. L. Denny, M. J. Fisher, D. D. Geira, D. S. Gifford-Moore, R. W. Harper, L. M. Johnson, V. J. Klimkowski, T. J. Kohn, H. S. Lin, J. R. McCowan, A. D. Palkowitz, M. E. Richett, G. F. Smith, D. W. Snyder, K. Takeuchi, J. E. Toth, M. Zhang. Diamino Benzo[b]thiophen Derivatives as a Novel Class of Active Site Directed Thrombin Inhibitors: 5. Potency, Efficacy and Pharmacokinetic Properties of Modified C-3 Side Chain Derivatives. J. Med. Chem., 43, 649–663 (2000).

Im allgemeinen zeigen die hierin beispielhaft dargestellten Verbindungen der Formel (I) einen Kass von mehr als 1 × 10⁶ l/mol im Enzymhemmtest. Beispielsweise weisen die Verbindungen oder ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze, die hierin beispielhaft dargestellt sind, Kass Werte von mehr als 1 × 10⁶ l/mol auf.
Die Fähigkeit einer Testverbindung zur Verlängerung der partiellen Thromboplastinzeit (Prothrombinzeit) kann in den folgenden Testprotokollen evaluiert werden.
Protokoll für den partiellen Thromboplastinzeittest (Prothrombintest)
Venöses Blut wird in 3,2% (0,109 mol) Trinatriumcitratvakutainerröhrchen mit 1 Volumen Antikoagulans und 9 Teilen Blut gesammelt. Die Blutzellen werden durch Zentrifugation bei 700 × g für 10 Minuten unter Bildung des Plasmas abgetrennt, das bei –70°C eingefroren wird, bis es benötigt wird.
Um den Test auszuführen werden 100 μl Plasma in ein Glasröhrchen pipettiert, 1 μl Testverbindung in DMSO wird zugegeben und kann sich über 2 Minuten auf 37°C erwärmen. 100 μl warmes (37°C) Manchesterreagenz (Gewebethromboplastin) (Helena Biosciences, UK) wird zugegeben und kann sich für 2 Minuten äquilibrieren. 100 μl warme (37°C) 25 mM Calciumchloridlösung wird zugegeben, um die Gerinnung zu initiieren. Das Teströhrchen wird dreimal alle 5 Sekunden um einen Winkel von 90° gekippt, um die Reagenzien zu mischen und die Zeit bis zur Gerinnselbildung wird gemessen. Die Daten aus einer Reihe an Beobachtungen und Testverbindungskonzentrationen werden durch ein statistisches SAS Analyseprogramm analysiert und es wird eine CT2 (Konzentration, die zur Verdopplung der Gerinnungszeit erforderlich ist) für jede Verbindung berechnet.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen verlängern signifikant die partielle Thromboplastinzeit (Prothrombinzeit).
Alternative Protokolle für die Prothrombinzeit und den APTT
Koagulationsbestimmungen: Die Prothrombinzeiten und die APTT Werte werden in Humanplasma mit einem STA Gerät (Stago) bestimmt. BioPT ist ein spezieller Nicht-Plasma Gerinnungstest, der mit humanem Gewebefaktor (Innovin) ausgelöst wird. Die mögliche Bindung an Albumin oder an Lipid wird durch den Vergleich der BioPT Effekte in Gegenwart/Abwesenheit von 30 mg/ml humanem Albumin (HSA) und 1 mg/ml Phosphatidylcholin (PC) untersucht. Die Inhibitoren werden in 50% wässrigem Methanol als Träger eingesetzt.
APTT Test

75 μl Plasma Citrol Baxter-Dade citratisiertes normales Humanplasma
25 μl Testlösung
75 μl Actin Baxter-Dade aktiviertes Cephaloplastin
Inkubation für 2 Minuten bei 37°C
75 μl CaCl₂ (0,02 M)

PT Test

75 μl Plasma
25 μl Testlösung
75 μl Kochsalzlösung
Inkubation für 1 Minute bei 37°C
75 μl Innovin Baxter-Dade rekombinanter, humaner Gewebefaktor

Claims

Verbindung der Formel (I)
worin X¹ für CH oder N steht, n für 1 oder 2 steht, jedes R für Wasserstoff oder Methyl steht, R¹ für Imidazol-1-yl oder X^aR^a steht, worin X^a für O, S oder NR^b steht, R^a für ein Wasserstoffatom, eine C₁-C₄ Alkylgruppe, eine Phenylgruppe oder eine Pyridylgruppe steht, R^b für ein Wasserstoffatom oder eine C₁-C₄ Alkylgruppe steht oder zusammen mit R^a und dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen gesättigten vier- bis sechsgliedrigen Ring darstellt, der als Ringglied eines aus O, S und NR^c enthalten kann, worin R^c für Wasserstoff oder C₁-C₄ Alkyl steht, und R² ausgewählt ist aus
worin X² für ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Aminogruppe steht, X³ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe, ein Fluoratom, ein Chloratom oder ein Bromatom steht, X⁴ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder ein Halogenatom steht, X⁵ für ein Chloratom, eine Methoxygruppe oder eine Methylgruppe steht, und X⁶ für ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe steht, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 1, worin (CHR)_n aus CH₂, CHCH₃ und CH₂CH₂ ausgewählt ist.
Verbindung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, worin R¹ für Imidazol-1-yl, Hydroxy, C₁-C₄ Alkoxy, C₁-C₄ Alkylthio, Di-C₁-C₄-alkylamino, Phenylthio, Pyridylthio, Piperidin-1-yl oder Morpholino steht.
Verbindung nach Anspruch 3, worin R¹ für Imidazol-1-yl, Hydroxy, Methoxy, Methylthio, 2-Propylthio, Dimethylamino, Phenylthio, Pyrid-2-ylthio, Piperidin-1-yl oder Morpholino steht.
Verbindung nach Anspruch 4, worin (CHR)_nR₁ steht für Imidazol-1-ylmethyl, Hydroxymethyl, 1-Hydroxyethyl, Methoxymethyl, 1-Methoxyethyl, Methylthiomethyl, Prop-2-ylthiomethyl, 2-Methylthioethyl, N,N-Dimethylaminomethyl, Phenylthiomethyl, Pyrid-2-ylthiomethyl, Piperidin-1-ylmethyl oder Morpholinomethyl.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, worin X² für ein Wasserstoffatom oder ein Halogenatom steht.
Verbindung nach Anspruch 6, worin X² für ein Wasserstoffatom oder ein Fluoratom steht, X³ für ein Wasserstoffatom, ein Fluoratom, ein Chloratom oder eine Methylgruppe steht, X⁴ für ein Chloratom steht, X⁵ für ein Chloratom oder eine Methoxygruppe steht, und X⁶ für ein Chloratom steht.
Verbindung nach Anspruch 6, worin R² für 4-Chlorphenyl, 4-Methoxyphenyl, 3-Fluor-4-methoxyphenyl, Indol-6-yl, 3-Methylindol-6-yl, 3-Chlorindol-6-yl, 5-Fluorindol-2-yl, 5-Chlorindol-2-yl oder 6-Chlorbenzo[b]thiophen-2-yl steht.
Verbindung nach Anspruch 8, worin R² für 4-Methoxyphenyl, Indol-6-yl oder 5-Chlorindol-2-yl steht.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, worin X¹ für CH steht.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, worin X¹ für N steht.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungsmittel oder Träger enthält.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, das umfasst (a) Umsetzung einer Verbindung der Formel (II)
oder eines Salzes hiervon mit einer Verbindung der Formel (III)
oder einem reaktiven Derivat hiervon, oder (b) Umsetzung einer Verbindung der Formel (IV)
oder eines Salzes hiervon, mit einer Verbindung der Formel (V) HOOC-R² (V)oder einem Salz oder reaktiven Derivat hiervon, gefolgt von der Bildung eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes, falls ein pharmazeutisch annehmbares Salz gewünscht wird.
Verbindung der Formel (III)
oder ein Salz hiervon, worin n, R, R¹ und R² wie in Anspruch 1 definiert sind.
Verbindung der Formel (IV)
oder ein Salz hiervon, worin n, X¹, R und R¹ wie in Anspruch 1 definiert sind.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zur Verwendung in der Therapie.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung einer thrombotischen Störung.