DE477532T1 - Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und -methylase Nla III. - Google Patents

Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und -methylase Nla III.

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DE477532T1
DE477532T1 DE91113911T DE91113911T DE477532T1 DE 477532 T1 DE477532 T1 DE 477532T1 DE 91113911 T DE91113911 T DE 91113911T DE 91113911 T DE91113911 T DE 91113911T DE 477532 T1 DE477532 T1 DE 477532T1
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nia
restriction endonuclease
recombinant
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vector
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Richard D Morgan
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New England Biolabs Inc
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New England Biolabs Inc
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses

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Claims (15)

Patentansprüche
1. DNA-Fragment mit einer Nukleotidsequenz, die die von N. lactamica NRCC 2118 erzeugte Restriktionsendonuklease NIa III kodiert.
2. DNA-Fragment nach Anspruch 1, die zusätzlich eine Nukleotidsequenz umfaßt, die die von N. lactamica NRCC 2118 erzeugte NIa &Pgr;&Igr;-Methylase kodiert.
3. DNA-Fragment nach Anspruch 1 oder 2, erhältlich aus dem Plasmid pRM125RM lOOc-4.
4. Rekombinanter Vektor, umfassend einen Vektor, in den ein DNA-Fragment inseriert worden ist, das die von N. lactamica NRCC 2118 erzeugte Endonuklease NIa III kodiert.
5. Rekombinanter Vektor, umfassend einen Vektor, in den das DNA-Fragment gemäß Anspruch 1 oder 2 inseriert ist.
6. Wirtszelle, transformiert mit dem rekombinanten Vektor gemäß Anspruch 4.
7. Wirtszelle, transformiert mit dem rekombinanten Vektor gemäß Anspruch 5.
8. Transformierte Wirtszelle nach Anspruch 6, wobei die Wirtszelle aus der aus E. eoji RRl, E. coji MM294 oder E. cdi ER 1398 bestehenden Gruppe ausgewählt ist.
9. Rekombinante Restriktionsendonuklease NIa III, welche die DNA-Sequenz CATG erkennt, wobei die EndonukJease a) aus H. Jactamica. NRCC 2118 erhältlich und b) von NIa I, NIa II und NIa IV frei ist.
10. Rekombinante Modifizierungsmethylase, erhältlich aus M. lactamica NRCC 2118, welche DNA vor dem Abbau durch die rekombinante Restriktionsendonuklease NIa &Igr;&Pgr; gemäß Anspruch 9 schützt.
11. Verfahren zur Herstellung der Restriktionsendonuklease NIa &Pgr;&Igr;, bei dem eine mit dem Vektor gemäß Anspruch 4 transformierte Wirtszelle unter für die Expression der Restriktionsendonuklease NIa &Igr;&Pgr; geeigneten Bedingungen kultiviert wird.
12. Verfahren zur Herstellung der Restriktionsendonuklease NIa EI, bei dem eine mit dem Vektor gemäß Anspruch 5 transformierte Wirtszelle unter den für die Expression der Restriktionsendonuklease NIa &Igr;&Pgr; geeigneten Bedingungen kultiviert wird.
13. Verfahren nach Anspruch 11, bei dem der rekombinante Vektor das Plasmid pRM125RM100c-4 umfaßt.
14. Verfahren nach Anspruch 11, bei dem der Wirt aus der aus E. coli RRl, E. coli MM294 oder E. cpji ER 1398 bestehenden Gruppe ausgewählt wird.
15. Rekombinante Restriktionsendonuklease NIa &Pgr;&Igr;, hergestellt durch das Verfahren gemäß Anspruch 11.
DE91113911T 1990-08-30 1991-08-20 Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und -methylase Nla III. Pending DE477532T1 (de)

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