DE4028771A1 - Verfahren zur trennung von parasiten, organellen o. dgl. von den sie umgebenden biologischen membranen - Google Patents

Verfahren zur trennung von parasiten, organellen o. dgl. von den sie umgebenden biologischen membranen

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06—Lysis of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
    • C12M47/06—Hydrolysis; Cell lysis; Extraction of intracellular or cell wall material

Description

Bisher wurde zur Isolierung von z. B. Parasiten aus Erythrocyten im einfach­ sten Fall eine Lyse der Zellen mit hypotonischem Medium durchgeführt, nach der ein Teil der Parasiten in der Lösung frei vorlag. In aufwendigeren Verfah­ ren wird die Erythrocytenmembran auf chemischem Weg, zum Beispiel mit Saponin (Miller, L. H., 1973; Journal of parasitology 59, 202-203), Hämolysin(Coleman, M. B., 1979; Journal of parasitology 65, 222-225) oder Ammonium­ chlorid (Martin, W. J., 1971; Nature 233, 260-261) entfernt. Weiterhin gibt es me­ chanische Verfahren, wie zum Beispiel die Entfernung der Membran mit Hilfe von Ultraschall (Prior, R. B., 1972; Experimental parasitology 32, 239-243), die nach einer Lyse der Zellen, oder ohne eine Lyse zur Anwendung kommen. Der Nachteil dieser Methoden ist, daß ein Teil der Parasiten nicht vollständig getrennt vorliegt, oder daß ein Teil der Parasiten beschädigt wird und daß diese Verfahren stellenweise zeitaufwendig sind.
Der Erfindung liegt das Problem zugrunde, eine bessere Trennung der Parasi­ ten von der Membran zu erreichen, die weniger Zeit beansprucht und bei der die Parasiten weniger in Mitleidenschaft gezogen werden.
Die erzielbaren Vorteile bei der Anwendung dieses Verfahrens sind, eine größere Ausbeute an unbeschädigten Parasiten, Organellen oder dergleichen. Es können bei diesem Verfahren auch ohne Probleme größere Mengen an Zel­ len verarbeitet werden. Die Wirkung beruht darauf, daß die Membranen beim Durchgang durch einen Strömungskanal mit turbulenter Strömung Scherkräf­ ten ausgesetzt sind, die diese zerreißen und von den Parasiten entfernen. Das ist insbesondere dann der Fall, wenn die Zellen vorher lysiert werden. Eine geringere Schädigung der Parasiten oder Organellen kommt dadurch zustande, daß die Membranen aufgrund ihrer Form und Größe den Scherkräften mehr ausgesetzt sind. Eine vorteilhafte Ausgestaltung der Erfindung ist im An­ spruch 2 angegeben! Diese Ausgestaltung ermöglicht es auch Membranen zum zerreißen zu bringen die allein durch die Scherkräfte nicht entfernt werden können.
Ein Ausführungsbeispiel der Erfindung ist in der Zeichnung im Längsschnitt dargestellt. Durch den Einlaß (3) wird die zu bearbeitende Lösung in den Strömungskanal (1) eines Plexiglas-Blockes mit entsprechendem Druck einge­ bracht. Am Ende des Strömungskanals (1) trifft die Lösung auf die Prallfläche (2) und fließt dann durch den Auslaß (4) in den Auffangbehälter (5). Danach wird in üblicher Weise separiert.

Claims (2)

1. Verfahren zur Trennung von Parasiten, Organellen oder dergleichen von den sie umgebenden biologischen Membranen, gekennzeichnet durch wenigstens einen Strömungskanal für turbu­ lente Strömung mit Lösung, in der die von biologischen Membranen umgebenden Parasiten, Organellen oder dergl. enthalten sind.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß am Ende oder am Anfang des Strö­ mungskanals eine Prallfläche vorhanden sein kann.
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