DE3887212T2

DE3887212T2 - Verfahren zur Herstellung von Derivaten von 6,7-Diazyl-7-desacetylforskolin.

Info

Publication number: DE3887212T2
Application number: DE3887212T
Authority: DE
Inventors: Yuh-Ichiro Ichikawa; Aya Ishikawa; Chikara Komuro; Kazuhisa Narita; Akira Shiozawa; Tochiro Tatee; Hirotaka Yamamoto
Original assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Current assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Priority date: 1987-06-29
Filing date: 1988-06-28
Publication date: 1994-06-01
Anticipated expiration: 2008-06-29
Also published as: EP0297496A2; EP0297496B1; ES2061564T3; KR890000513A; DE3887212D1; KR950011419B1; HU201921B; CN1030583A; CZ279431B6; CN1016869B; CZ462688A3; EP0297496A3

Description

Hintergrund der Erfindung

1. Gebiet der Erfindung

Die gegenwärtige Erfindung betrifft ein neues Verfahren für die Herstellung eines 6,7- Diacyl-7-deacetylforskolinderivats, das als zu künftiges Medikament angesehen wird.

2. Beschreibung des Stands der Technik

Bekannte Verfahren für die Herstellung eines 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolinderivats schließen ein Verfahren ein, das direkte Acylierung der Hydroxylgruppe an Position 7 der Verbindung der allgemeinen Formel (II) (EP-A-22241 3) umfaßt.
Das direkte Acylierungsverfahren nach dem Stand der Technik ist in sofern unvorteilhaft, als die Selektivität der Acetylierung der Hydroxylgruppe in Position 7 gegenüber Position 1 niedrig ist.
In WO-A-8503637 und in J.Chem.Soc.Perkin Trans.l 1982, 767-771 ist ein 1,6- Diacetylforskolinderivat mit einer Vinylgruppe in Position 13 der Verbindung der allgemeinen Formel (III) offenbart. In diesen Dokumenten wird jedoch kein selektiver Hydrolyseprozeß für die Herstellung eins 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolinderivats beschrieben.

Zusammenfassung der Erfindung

Die Erfinder der vorliegenden Erfindung haben Untersuchungen durchgeführt und gefunden, daß ein durch die allgemeine Formel:
dargestelltes 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolinderivat, wobei R¹ und R² jeweils für eine Acylgruppe und R³ für eine aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen steht, unerwartet in guter Qualität durch Acylierung der Hydroxygruppen in Position 1 und 7 eines durch die allgemeine Formel
dargestellten 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivats, wobei R² und R³ wie oben definiert sind, mit einem Acylierungsmittel unter Bildung eines durch die allgemeine Formel
dargestellten 1,6,7-Triacyl-7-deacetylforskolinderivats und Solvolyse des 1,6,7- Triacyl-7-deacetylforskolinderivats hergestellt werden kann, wodurch die Acylgruppe in Position 1 des Derivats selektiv entfernt wird.
Die gegenwärtige Erfindung wurde auf der Grundlage dieses Ergebnisses vollendet.

Detaillierte Beschreibung der Erfindung

Beispiele der Acylgruppe von R¹ und den allgemeinen Formeln (I) und (III) schließen Formyl-, Acetyl- Propionyl-, Butyryl-, Pentanoyl-, Hexanoyl- Glycyl- Dimethylaminoacetyl-, Piperidinoacetyl-, t-Butoxycarbonylaminoacetyl- Glykoloyl-, 2- Morpholinopropionyl-, 2-Aminopropionyl-, 3-Dimethylaminopropionyl-, 3- Benzyloxycarbonylaminopropionyl-, 2,3-Dihydroxypropionyl-, 2-Pyrrolidinobutyryl-, 3- Thiomorpholinobutyryl-, 4-Dimethylaminobutyryl-, 5-Methylaminopentanoyl-, 6- Dimethylaminohexanoyl-, Tyrosyl-, Hemisuccinyl-, Thienoyl-, Prolyl-, Histidyl-, Lysyl-, Ornithyl-, 2-Dimethylaminopropionyl-, 3-Dimethylamino-2-methylpropionyl- und 4- Dimethylamino-2-methylbutyrylgruppen ein.
Beispiele für die Acylgruppe von R² in den allgemeinen Formeln (I), (II) und (Ill) schließen Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-, Pentanoyl-, Hexanoyl-, Glycyl- Dimethylaminoacetyl-, Piperidinoacetyl-, t-Butoxycarbonylaminoacetyl-, Glykoloyl-, 2- Morpholinopropionyl-, 2-Aminopropionyl-, 3-Dimethylaminopropionyl-, 3- Benzyloxycarbonylaminopropionyl-, 2,3-Dihydroxypropionyl-, 2-Pyrrolidinobutyryl-, 3- Thiomorpholinobutyryl-, 4-Dimethylaminobutyryl-, 5-Methylaminopentanoyl-, 6- Dimethylamonohexanoyl-, Hemisuccinyl-, Thienoyl-, Prolyl-, Histidyl-, Lysyl-, Tyrosyl-, Ornithyl-, 2-Dimethylaminopropionyl-, 3-Dimethylamino-2-methylpropionyl-, 4- Dimethylamino-2-methylbutyryl- und 2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-carbonylgruppen ein.
Beispiel der aliphatischen Gruppe R³ schließen aliphatische Gruppen mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen wie Vinyl-, Ethyl- und Cyclopropylgruppen ein.
Beispiele der Verbindung der allgemeinen Formel (II) schließen 7-Deacetyl-6-dimethylaminoacetylforskolin, 7-Deacetyl-6-glycylforskolin, 7-Deacetyl-6-piperidinoacetylforskolin, 7-Deacetyl-6-(2-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 7- Deacetyl-6-alanylforskolin, 7-Deacetyl-6-(2-aminobutyryl)forskolin, 7-Deacetyl-6- (4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(2,3-dihydroxypropionyl)forskolin, 7- Deacetyl-6-hemisuccinylforskolin, 7-Deacetyl-6-histidylforskolin, 7-Deacetyl-6- prolylforskolin, 7-Deacetyl-6-lysylforskolin, 7-Deacetyl-6-glykoloylforskolin, 7- Deacetyl-14,15-dihydro-6-dimethylaminoacetylforskolin, 7-Deacetyl-14,15- dihydro-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-6-(4- dimethylaminobutyryl)-forskolin, 13-Cyclopropyl-7-deacetyl-6-(3- dimethylaminopropionyl)- 14,15-dinorforskolin, 13-Cyclopropyl-7-deacetyl-6-(4- dimethylaminobutyryl)-14,15-dinorforskolin, 7-Deacetyl 14,15-dihydro-6 piperidinoacetylforskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(t-butoxycarbonylaminoacetyl)forskolin, 7-Deacetyl-6 (2-benzyloxycarbonylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(2-t-butoxycarbonylaminobutyryl)forskolin, 7-Deacetylforskolin-6-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-carboxylat)-7-Deacetyl-6-(3-methoxycarbonylpropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-6-(3-dimethylamino- 2-methylpropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-6-(4-dimethylamino-2-methylbutyryl)forskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-6-(4-dimethylamino-2-methylbutylryl)forskolin, 13-Cyclopropyl-7-deacetyl-6-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)- 14,15-dinorforskolin und 13-Cyclopropyl-7-deacetyl-6-(4-dimethylamino-2-methylbutyryl)-14,15-dinorforskolin ein.
Beispiele für die durch die allgemeine Formel (III) dargestellte Verbindung schließen 1- Formyl-6-dimethylaminoacetyl-7-deacetyl-7-formylforskolin, 1-Acetyl-6-dimethylaminoacetylforskolin, 1-Propionyl-6-dimethylaminoacetyl-7-deacetyl-7-propionylforskolin, 1-Acetyl-6-piperidinoacetylforskolin, 1-Butyryl-6-piperidinoacetyl-7-deacetyl-7-butyrylforskolin, 1-Acetyl-6-(2-dimethylaminopropionyl)forskolin, 1- Pentanoyl-6-(2-dimethylaminopropionyl)-7-deacetyl-7-pentanoylforskol-in, 1-Acetyl- 6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 1-Hexanoyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-7- deacetyl-7-hexanoylforskolin, 1-Dimethylaminoacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)- 7-deacetyl-7-dimethylaminoacetylforskolin, 1-Piperidinoacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-7-deacetyl-7-piperidinoacetylforskolin,1-(t-Butoxycarbony-laminoacetyl)- 6-(3-dimethylaminopropionyl)-7-deacetyl-7-(t-butoxycarbonylacetyl)fo-rskolin, 1- Acetyl-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 1-(2-Morpholinopropionyl)-6-(2-morpholinopropionyl)-7-deacetyl-7-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 1-Acetyl-6-(4- dimethylaminobutyryl)forskolin, 1-(3-Dimethylaminopropionyl)-6-(4-dimethylaminobutyryl)-7-deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 1-(3- Benzyloxycarbonylaminopropionyl)-6-(4-dimethylaminobutyryl)-7-deacet-yl-7-(3- benzyloxycarbonylaminopropionyl)forskolin, 1-(2-Pyrrolidinobutyryl)-6-(4-dimethylaminobutyryl)-7-deacetyl-7-(2-pyrrolidinobutyryl)forskolin, 1-Acetyl-6-hemisuccinylforskolin, 1-(3-Thiomorpholinobutyryl)-6-hemisuccinyl-7-deacetyl-7-(3-thiomorpholinobutyryl)forskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-dimethylaminoacetylforskolin, 1-(4-Dimethylaminobutyryl)-14,15-dihydro-6-dimethylaminoacetyl-7-dea-cetyl-7- (4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 1-(6-Dimethylaminohexanoyl)-14,15-dihydro-6-(3-dimethylaminopropionyl)-7-deacetyl-7-(6-dimethylaminohexanoyl)forskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 1-Propionyl-14,15-dihydro-6-(4-dimethylaminobutyryl)-7-deacetyl-7-propionylforskolin, 1-Acetyl-13-cyclopropyl-6-(3- dimethylaminopropionyl)-14,15-dinorforskolin, 1-Acetyl-13-cyclopropyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)-14,15-dinorforskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-piperidinoacetylforskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 1-Acetyl-6- (3-dimethylamino-2-methylpropionyl)forskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)forskolin, 1-Acetyl-13-cyclopropyl-6-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)-14,15-dinorforskolin, 1-Acetyl-6-(4-dimethylamino-2- methylbutyryl)forskolin, 1-Acetyl-14,15-dihydro-6-(4-dimethylamino-2-methylbutyryl)forskolin und 1-Acetyl-13-cyclopropyl-6-(4-dimethylamino-2-methylbutyryl)- 14,15-dinorforskolin ein.
Beispiele für das in der vorliegenden Erfindung verwendbare Acylierungsmittel schließen Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure, Buttersäure, Valeriansäure, Capronsäure, Glycin, N,N-Dimethylglycin, Piperidinoessigsäure, N-t-Butoxycarbonylglycin, Glykolsäure, 2-Morpholinopropionsäure, Alanin, 3-Dimethylaminopropionsäure, 3- Benzyloxycarbonylaminopropionsäure, 2,3-Dihydroxypropionsäure, 2- Pyrrolidinobuttersäure, 3-Thiomorpholinobuttersäure, 4-Dimethylaminobuttersäure, 5- Methylaminovaleriansäure, 6-Dimethylaminocapronsäure, Tyrosin, Bernsteinsäure, Prolin, Histidin, Lysin, Ornithin, Thiophencarbonsäure, 2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4- carbonsäure, 3-Dimethylamino-2-methylpropionsäure, 4-Dimethylamino-2-methylbutyrsäure und reaktive Derivate davon ein.
Solche reaktiven Derivate schließen Säurehalogenide, Säureanhydride, gemischte Säureanhydride und Leuch's Anhydride ein.
Die Acylierung der Verbindung der allgemeinen Formel (II) wird unter Verwendung von etwa 2 bis 50 Mol, bevorzugt etwa 2 bis etwa 4 Mol eines Acylierungsmittels pro Mol der Verbindung in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis zum Siedepunkt des Lösungsmittels, bevorzugt von etwa 0ºC bis Raumtemperatur während einiger Minuten bis etwa 24 Stunden, bevorzugt einige Minuten bis etwa 2 Stunden durchgeführt. Beispiele für die verwendbaren Lösungsmittel schließen Benzol, Chloroform, Ether, Dichlormethan, 1,1,1-Trichlorethan, 1,2-Dichlorethan, Tetrachlorkohlenstoff und Ethylacetat ein.
Die selektive Deacylierung in Position 1 der durch die obige Acylierung in Position 1 hergestellten Verbindung der allgemeinen Formel (III) wird durch ein aus den Reaktionen Alkoholyse, Aminolyse und Hydrolyse, ausgewähltes Verfahren durchgeführt, bevorzugt durch Hydrolyse. Die Hydrolyse wird in Gegenwart eines hydrolysierenden Mittels in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis zum Siedepunkt des Lösungsmittels, bevorzugt etwa 0ºC bis Raumtemperatur während einer Minute bis zu etwa 1 2 Stunden, bevorzugt etwa 5 Minuten bis etwa 3 Stunden, durchgeführt. Es ist bevorzugt, daß die Reaktionszeit kurz ist, wenn die Reaktionstemperatur hoch ist, während die Zeit lang sein soll, wenn die Temperatur niedrig ist. Beispiele des bei der Hydrolyse verwendbaren Lösungsmittels schließen wasserlösliche Lösungsmittel wie Alkohol (Methanol, Ethanol, Propanol, Isopropanol, Butanol usw.), Acetonitril. Dimethylsulfoxid, N, N-Dimethylformamid, Aceton, Tetrahydrofuran und Mischungen davon mit bis zu 50 Vol.% Wasser ein, bevorzugt wäßrigen, etwa 0,5 bis etwa 20 Vol% Wasser enthaltenden C&sub1;-C&sub4;-Alkohol. Das hydrolysierende Mittel ist eine Base oder eine Säure.
Die in der Hydrolyse verwendbare Base schließt ein Alkalihydroxide wie Natriumhydroxid und Kaliumhydroxid; Alkalicarbonate wie Kaliumcarbonat; Alkalibicarbonate wie Natriumbicarbonat und Amine wie Ammoniak und Triethylamin, während die Säure Mineralsäuren wie Schwefelsäure und Chlorwasserstoff umfaßt. Eine solche Säure oder Base ist in einem Lösungsmittel in einer Konzentration von etwa 0.01 bis etwa 50%, bevorzugt etwa 0.05 bis etwa 10% enthalten.
Wenn einer von R¹ und R² eine in β-Position eine Aminogruppe tragende Propionylgruppe ist, z. B. eine Dimethylaminopropionylgruppe, ist es bevorzugt, die Reaktionsmischung nach der Acylierung oder der selektiven Deacylierung mit einem dem Aminosubstituenten entsprechenden Amin in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur von 0ºC bis Raumtemperatur während einer Minute bis zu 12 Stunden zu behandeln, um dadurch die Bildung von Nebenprodukten zu verhindern. Beispiele für das in dieser Behandlung verwendbare Lösungsmittel schließen Benzol, Tetrachlorkohlenstoff, Dichlormethan, Chloroform, 1,2-Dichlorethan, 1,1,1-Trichlorethan, Ether, Diisopropylether, Ethylacetat, Aceton, Propanol, Ethanol und Methanol ein.
Weiterhin kann das obige Amin in einer Menge von etwa 0,1 bis etwa 3 Mol pro Mol der Verbindung der allgemeinen Formel (II) verwendet werden.
Je nach den Bedingungen kann eine übermäßige selektive Deacetylierung unter Bildung der Verbindung (II) eintreten. Die übermäßige Deacetylierung kann jedoch durch Neutralisierung nach Ende der selektiven Deacetylierung vermieden werden.
Nach der Vervollständigung der Reaktion kann das so hergestellte 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolinderivat isoliert werden durch Konzentrieren der Reaktionsmischung, gegebenenfalls Verdünnen des erhaltenen Rückstands mit Wasser oder einer wäßrigen Kochsalzlösung, Extraktion der erhaltenen Mischung mit einem organischen Lösungsmittel, Waschen der organischen Phase, Trocknen und Konzentrieren der gewaschenen Phase und Umkristalliesieren des erhaltenen Rückstands. So kann erfindungsgemäß die gewünschte Verbindung einfach ohne Anwendung von Chromatographie oder ähnlichem gereinigt werden.
Die Ausbeuten der durch das erfindungsgemäße Verfahren und durch das in EP-A- 222413 beschriebene Verfahren hergestellten Zielverbindungen (Beispiele 1-1 oder 1- 2) sind in Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1 Ausbeute 6-(4-Dimethylaminobutyryl)forskolin [Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin] 6-(3-Dimethylaminopropionyl)forskolin [Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin] Verfahren der vorliegenden Erfindung Verfahren nach dem Stand der Technik
Aus den in der obigen Tabelle gezeigten Ergebnissen ergibt sich offensichtlich daß ein 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolin durch das erfindungsgemäße Verfahren in hoher Ausbeute hergestellt werden kann.
Das in der oben erwähnten EP-222413 beschriebene Verfahren ist wie folgt:
Eine Lösung von 6-Acyl-7-deacetylforskolin in Dichlormethan wird mit Acetylchlorid in Gegenwart von Pyridin umgesetzt. Nach Vervollständigung der Reaktion wird das Reaktionsprodukt durch Kieselgelchromatographie gereinigt.

Beispiel 1-1

6-(4-Dimethylaminobutyryl)forskolin

30 ml Acetanhydrid wurde unter Eiskühlung zu einer Mischung aus 31.7 g 7-Deacetyl- 6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 0.5 g 4-Dimethylaminopyridin und 1 20 ml Pyridin gegeben. Die Mischung wurde während 2 Tagen bei Raumtemperatur gerührt. Nach Reaktionsende wurde die Reaktionsmischung konzentriert.
Das Konzentrat wurde in 600 ml Methanol gelöst und anschließend wurden 250 ml 1 N wäßrige Natronlauge zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur während 35 Minuten gerührt und zur Isolierung von 31.2 g roher Kristalle abfiltriert. Die rohen Kristalle wurden aus Aceton um kristallisiert und ergaben 28.7 g 6-(4- Dimethylaminobutyryl)forskolin (Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin: 83%].
¹R(KBr)ν: 3450, 1730, 1710 cm&supmin;¹.
Das Reaktionsprodukt vor der Hydrolyse in der obigen Synthese wurde durch Kieselgelsäulenchromatographie gereinigt und ergab 1 Acetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin.
¹H-NMR (CDCl&sub3;)δ: 5.84 (1H, t, J=3.5 Hz), 5.57 (1H, brs), 5.56 (1H, d, J=4.8 Hz), 2.41 (6H, s), 2.03 (6H, s), 1.64 (3H, s) 1.52 (3H, s), 1.34 (3H, s), 1.04 (3H, s) 0.97 (3H, s).

Beispiel 1-2

6-(3-Dimethylaminopropionyl)forskolin

Ein Mischung aus 12 g 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 35 mg 4- Dimethylaminopyridin, 48 ml wasserfreiem Pyridin und 5.9 ml Acetanhydrid wurden bei Raumtemperatur während 2 Stunden gerührt. Anschließend wurden 35 mg 4- Dimethylaminopyridin zugegeben und die Mischung während weiterer 3 Stunden gerührt. Nach Reaktionsende wurden 5 ml Methanol zu der Reaktionsmischung gegeben und die Mischung wurde konzentriert.
Das Konzentrat wurde mit 120 ml Methanol und 25 ml Wasser verdünnt und anschließend mit 40 ml 1 N wäßriger Natronlauge versetzt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur während 30 Minuten gerührt. Zu der Mischung wurden 50 ml 1 N Salzsäure zum Abbrechen der Reaktion gegeben, und die Mischung wurde konzentriert. Das Konzentrat wurde mit Wasser verdünnt, mit konzentriertem wäßrigem Ammoniak basisch gestellt und mit Diisopropylether extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde zur Isolierung von 13.4 g eines Rückstands konzentriert. Dieser Rückstand wurde in Dichlormethan gelöst und anschließend mit Dimethylamin versetzt. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur während einer Stunde gerührt. Nach Reaktionsende wurde die Reaktionsmischung unter Bildung eines Rückstands konzentriert. Der Rückstand wurde aus Ethanol und dann aus Cyclohexan/Dichlormethan unter Bildung von 7.04 g 6-(3- Dimethylaminopropionyl)forskolin um kristallisiert [Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl-6- (3-dimethylaminopropionyl)forskolin: 54%].
IR(KBr)ν: 3200, 1735, 1710 cm&supmin;¹.
Das vor der Hydrolyse in der obigen Synthese von 6-(3- Dimethylaminopropionyl)forskolin erhaltene Reaktionsprodukt wurde durch Kieselgelsäulenchromatographie gereinigt und ergab 1 -Acetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin.
IR(Nujol)ν: 3500, 1735, 1710&supmin;¹. ¹H-NMR (CDCl&sub3;) δ: 5.85 (1H, q, J=4.8 Hz, J=2.9 Hz), 5.57 (1H, brs), 5.55 (1H, d, J=4.8 Hz), 2.32 (6H, s), 2.023 (3H, s), 2.020 (3H, s), 1.65 (3H, s), 1.53 (3H, s), 1.34 (3H, s), 1.04 (3H, s), 0.98 (3H, s).
MS (Hydrochlorid ) m/z (relative Intensität) 552 (M&spplus; der freien Base, 18), 160 (22), 118 (70) 116 (33), 59 (39), 58 (100)

Beispiel 1-3

1-Acetyl-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin

Eine Lösung von 945 mg Acetylchlorid in Dichlormethan wurde in sechs Portionen bei Raumtemperatur während einer Zeit von 9 Stunden zu einer Mischung aus 700 mg 7- Deacetyl-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 1 g Pyridin und 30 ml Dichlormethan gegeben. Nach Reaktionsende wurde Wasser zu der Reaktionsmischung gegeben und die Mischung mit 20%-iger wäßriger Natronlauge basisch gestellt und mit Dichlormethan extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab einen Rückstand. Der Rückstand wurde aus Hexan/Toluol zur Isolierung von 606 mg 1- Acetyl-6-(2-morpholinopropionyl)forskolin als farblose feste Diastereomerenmischung um kristallisiert, (Ausbeute: 75%).
IR(Nujol)ν: 3490, 1715, 1715, 1230 cm&supmin;¹. MS m/z (relative Intensität): 593 (M&spplus;, 0.03), 549 (0.7), 518 (0.5), 410 (0.7), 228 (0.9), 191 (1.2), 160 (8), 115 (23), 114 (100), 70 (9)

6-(-2-Morpholinopropionyl)forskolin

0.75 ml wäßrige 1 N Natronlauge wurden zu einer Mischung aus 372 mg 1 -Acetyl-6- (2-morpholinopropionyl)forskolin und 20 ml Methanol gegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur während 30 Minuten gerührt. Nach Ende der Reaktion wurde die Reaktionsmischung konzentriert. Das Konzentrat wurde mit einer gesättigten wäßrigen Kochsalzlösung verdünnt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde unter Bildung von 388 mg eines festen Rückstands konzentriert. Dieser Rückstand wurde aus Hexan/Ethylacetat um kristallisiert und ergab 21 4 mg 6-(2-Morpholinopropionyl)forskolin (Ausbeute: 62%).
IR(Nujol)ν: 3170, 1735, 1710 cm&supmin;¹ MS m/z (relative Intensität): 551 (M+, 0.2), 518 (2), 158 (20), 115 (100), 114 (100) 70 (47)

Beispiel 1-4

6-Piperidinoacetylforskolin

520 mg Acetanhydrid wurden unter Eiskühlung zu einer Mischung aus 1 88 mg 7- Deacetyl-6-piperidinoacetylforskolin, 1 0 mg 4-Dimethylaminopyridin und 4 ml Pyridin gegeben. Die Mischung wurde während 3.5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Ende der Reaktion wurde unter Eiskühlung Methanol zu der Reaktionsmischung gegeben. Die Mischung wurde zur Isolierung eines öligen Rückstands konzentriert. Eine gesättigte Kochsalzlösung wurde zum Rückstand gegeben. Die erhaltene Mischung wurde mit konzentriertem wäßrigem Ammoniak basisch gestellt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab 224 mg eines Feststoffs. 1 20 mg dieses Produkts wurden in 5 ml Methanol gelöst, anschließend wurden 0.20 ml 1 N wäßrige Natronlauge zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur während während 25 Minuten gerührt. Nach Ende der Reaktion wurde die Mischung konzentriert. Das Konzentrat wurde mit gesättigter Kochsalzlösung verdünnt und mit Ethylactat extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab 113 mg eines Rückstands. Dieser Rückstand wurde aus Hexan/Ethylacetat umkristallisiert und ergab 59 mg 6- Piperidinoacetylforskolin [Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl-6- piperidinoacetylforskolin: 54%].
IR(Nujol)ν: 3180, 1745, 1710 cm&supmin;¹ ¹H-NMR (CDCl&sub3;)δ: 5.85 (1H, q, J=4.2 Hz, J=2.7 Hz), 5.55 (1H, d, J=4.4 Hz), 4.61 (1H, br, s), 3.18 and 3.14 (each 1H, d, J=16 Hz), 2.5 (4H, m), 2.03 (3H, s), 1.66 (3H, s) 1.44 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.03 (3H, s) 0.96 (3H, s) MS m/z: 535 (M&spplus;)
Das Reaktionsprodukt vor der selektiven Hydrolyse mit Natriumhydroxid in der obigen Synthese wurde durch Kieselgelsäulenchromatographie gereinigt und ergab 1-Acetyl- 6-piperidinoacetylforskolin.
MS m/z: 577 (M&spplus;)

Beispiel 1-5

6-(3-Dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolinhydrochlorid

Eine Mischung aus aus 200 mg 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin, 7 mg 4-Dimethylaminopyridin, 2 ml wasserfreiem Pyridin und 0.4 ml Acetanhydrid wurde während 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Ende der Reaktion wurde unter Eiskühlung 1 ml Methanol zu der Reaktionsmischung gegeben und die Mischung wurde konzentriert.
Das Konzentrat wurde mit gesättigter Kochsalzlösung verdünnt, mit konzentriertem wäßrigem Ammoniak basisch gestellt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab 1 -Acetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin (231 mg). Das Konzentrat wurde mit 2 ml Methanol verdünnt, anschließend wurden unter Eiskühlung 0.4 ml 0.25 N wäßrige Natronlauge zugegeben. Die Mischung wurde unter Eiskühlung während während 1.5 Stunden gerührt. 0.6 ml 1 N Salzsäure wurden zum Abbrechen der Reaktion zugegeben, und die Mischung wurde konzentriert. Das Konzentrat wurde mit Wasser verdünnt, mit konzentriertem wäßrigem Ammoniak basisch gestellt und mit Ethylactat extrahiert. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Trockenmittels abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab 202 mg eines Rückstands. Dieser Rückstand wurde in 2 ml Dichlormethan gelöst, anschließend wurde 0.15 ml 4 N Salzsäure in Dioxan zugegeben. Die Mischung wurde konzentriert und ergab 210 mg eines festen Rückstands. Dieser Rückstand wurde aus Methanol/Ethylacetat (2 : 3) umkristallisiert und ergab 112 mg 6-(3- Dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin [Ausbeute bezogen auf 7-Deacetyl- 6-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin: 48%].

Referenzbeispiel 1

7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropinyl)-14,15-dihydroforskolin

Eine Mischung von 703 mg 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 23 mg 5% Palladium-Kohle-Katalysator und 20 ml Methanol wurde in einer Wasserstoffatmosphäre bei Raumtemperatur während 1 Stunde 40 Minuten bis zur vollständigen Reaktion gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zur Entfernung des Katalysators abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab 689 mg eines festen Rückstands. Dieser Rückstand wurde aus Chloroform/Isopropylether (1 : 5) umkristallisiert und ergab 541 mg 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin (Ausbeute: 77%)
Schmp. 163-165ºC
IR(Nujol)ν: 3200, 1735, 1705 cm&supmin;¹
¹H-NMR (CDCl&sub3;)δ: 5.94 (1H, t, J=4 Hz), 4.50 (1H, brs), 4.18 (1H, d,, J=5 Hz), 2.26 (6H, s), 1.53 (3H, s), 1.42 (3H, s), 1.31 (3H, s), 1.10 (3 H, s), 0.97 (3H, t, J=7 Hz), 0.95 (3H, s). MS m/z (relative Intensität): 469 (M&spplus;, 5), 159 (13), 118 (48), 116 (12), 91 (30), 69 (13), 59 (10) 58 (100) 57 (11), 55 (13).
Die zweite Erfindung der vorliegenden Erfindung betrifft ein neues Verfahren für die Herstellung eines 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivats, das als Medikament bekannt ist, bzw. das Ausgangsmaterial der ersten Erfindung.
Bekannte Verfahren für die Herstellung eines 6-Acyl-7-deacetylforskolins schließen ein Verfahren ein, das Behandlung von 7-Acyl-7-deacetylforskolin mit Alkali in einem Lösungsmittel bei Raumtemperatur umfaßt, wodurch die Wanderung der Acylgruppe in Position 7 nach Position 6 bewirkt wird (s. EP-A-22241 3).
Im obigen Verfahren nach dem Stand der Technik wird 7-Deacetylforskolin durch Hydrolyse von 7-Acyl-7-deacetylforskolin als Nebenprodukt gebildet. Daher ist dieses Verfahren hinsichtlich der Ausbeute problematisch und außerdem dahingehend unvorteilhaft, daß das im Verfahren erhaltene Produkt durch Chromatographie gereinigt werden muß, wodurch das Verfahren ungeeignet ist für die Produktion im großen Maßstab.
Die Erfinder der vorliegenden Erfindung haben Untersuchungen durchgeführt und festgestellt, das ein durch die folgende allgemeine Formel:
dargestelltes 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivat, wobei R¹&sup0; für eine Hydroxygruppe steht, die verestert sein kann; R² steht für eine Acylgruppe und R³ steht steht für eine aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen, ohne Verwendung von Alkali hergestellt werden kann lediglich durch Erhitzen eines durch die folgenden allgemeine Formel:
dargestellten 7-Acyl-7-deacetylderivats, wobei R¹&sup0;, R² und R³ wie oben definiert sind, um so die Wanderung der Acylgruppe von Position 7 nach Position 6 zu bewirken.
R¹&sup0; der obigen allgemeinem Formeln (1) und (2) schließt ein eine Hydroxygruppe;
Acyloxygruppen wie Formyloxy-, Acetoxy-, Propionyloxy-, Butyryloxy-, Benzoyloxy-, 4- Methoxybenzoyloxy-, Dimethylaminoacetoxy-, Piperidinoacetoxy-, Diethylaminoacetoxy-, Morpholinoacetoxy-, (4-Hydroxypiperidino)acetoxy-, Dipropylaminoacetoxy-, 2-Ethylaminopropionyloxy-, Thiomorpholinoacetoxy-, 2- Morpholinopropionyloxy-, Isopropylamionacetoxy-, 2-Dimethylamionpropionyloxy-, t- Butylaminoacetoxy-, 3-Dimethylaminopropionyloxy-, (4-Methylpiperazino)acetoxy-, 2- Dimethylaminobutyryloxy-, 3-Dimethylaminobutyryloxy3-Dimethylaminobutyryloxy-, 4- Dimethylaminobutyryloxy-, Glykoloyloxy-, 2,3-Dihydroxypropionyloxy-, Thioglykoloyloxy-, Hemisuccinyloxy-, Hemiglutaryloxy-, Glycyloxy-, 2- Aminopropionyloxy-, 3-Aminopropionyloxy-, 2-Methylaminobutyryloxy-, Nicotinoyloxy-, Furoyloxy-, Histidyloxy- und Lysyloxygruppen; Silyloxygruppen wie Trimethylsilyloxy-, t- Butyldiphenylsilyloxy- und t-Butyldimethylsilyloxygruppen; substituierte Alkoxygruppen wie 2-Methoxyethoxymethoxy-, Methoxy-, Methylthiomethoxy-, Methoxymethoxy- und Benzyloxygruppen- und substituierte Alkoxycarbonyloxygruppen wie Benzyloxycarbonyl- und t-Butoxycarbonylgruppen.
R² schließt ein Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-, Dimethylaminoacetyl-, Butylaminoacetyl-, Diethylaminoacetyl-, Pyrrolidinoacetyl-, Piperazinoacetyl- Morpholinoacetyl-, Piperidinoacetyl-, N-Cyclohexyl-N-methylaminoacetyl-, (4- Methylpiprazino)acetyl-, Dipropylaminoacetyl-, (4-Hydroxypiperidino)acetyl-, Thiomorpholinoacetyl-, lsopropylaminoacetyl-, t-Butylaminoacetyl-, Glycyl- Benzyloxylcarbonylaminoacetyl-, 2-Aminopropionyl-, 3-Aminopropionyl-, 2- Dimethylaminopropionyl-, 3-Dimethylaminopropionyl-, 2-Pyrrolidinopropionyl-, 3- Piperazinopropionyl-, 2-Butylaminopropionyl-, 3-Diethylaminopropionyl-, 2- Morpholinopropionyl-, 3-Piperidinopropionyl-, 3-(t-Butoxycarbonylamino)propionyl- 2-Aminobutyryl-, 3-Aminobutyryl-, 4-Dimethylaminobutyryl-, 4-Aminobutyryl-, 2- Dimethylaminobutyryl-, 3-Diethylaminobutyryl-, 4-Isopropylaminobutyryl-, 2- Butylaminobutyryl-, 3-Pyrrolidinobutyryl-, 4-Morpholinobutyryl-, 2-Piperazinobutyryl-, 3-Dimethylaminopentanoyl-, 4-Diethylaminopentanoyl-, 5-Pyrrolidinopentanoyl-, 2- Piperidinohexanoyl-, 3-Morpholinohexanoyl-, 4-(4-Methylpiperazino)hexanoyl-, 5-(6- Butylamino)hexanoyl-, 6-Methylaminohexanoyl-, 3-Dimethylamino-2-methylpropionyl-, 3-Pyrrolidino-2-methylpropionyl-, 3-Dimethylamino-2-ethylpropionyl-, 4- Dimethylamino-2-ethylpropionyl-, 4-Dimethylamino-2-methylbutyryl-, 4-Amino-2- propylbutyryl, Hemisuccinyl, Hemiglutaryl, Thioglykolyl, Thienoyl- Isonicotinoyl Prolyl-, Histidyl-, Lysyl-, Tyrosyl, Methionyl, Ornithyl, Glykoloyl, Lactoyl und 2,3 Dihydroxypropionylgruppen.
Beispiele der aliphatischen Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen von R³ schließen Vinyl-, Ethyl- und Cyclopropylgruppen ein.
Beispiele der durch die allgemeine Formel (2) dargestellten Verbindung schließen 7- Deacetyl-7-dimethylaminoacetylforskolin, 7-Deacetyl-7-glycylforskolin, 7-Deacetyl- 7-piperidinoacetylforskolin, 7-Deacetyl-(2-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7- Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-7-(2-morpholinopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-7-alanylforskolin, 7-Deacetyl-(2-aminobutyryl)forskolin, 7-Deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 7-Deacetyl-7-(2,3- dihydroxypropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-7-hemisuccinylforskolin, 7-Deacetyl-7- histidylforskolin, 7-Deacetyl-7-propionylforskolin, 7-Deacetyl-7-lysylforskolin, 7- Deacetyl-7-glykoloylforskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-7-dimethylaminoacetylforskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro- 7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin, 13- Cyclopropyl-7-deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dinorforsk-olin, 13- Cyclopropyl-7-deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)-14,15-dinorforskol-in, 7- Deacetyl-14,15-dihydro-7-pyrrolidinoacetylforskolin, 7-Deacetyl-14,15-dihydro-7- (2-morpholinopropionyl)forskolin, 1-Acetylforskolin, 1-t-Butyldimethylsilylforskolin, 1- Benzoylforskolin, 1-Benzylforskolin, 1-Methylforskolin, 1-Trimethylsilylforskolin, 1-t- Butyldiphenylsilylforskolin, 1-(2-Methoxyethoxymethyl)forskolin, 1- Methylthiomethylforskolin, 1-Methoxymethylforskolin, 1-Benzyloxycarbonylforskolin, 1- (t-Butoxycarbonyl)forskolin, 1-Acetyl-7-deacteyl-7-propionylforskolin, 1-t- Butyldimethylsilyl-7-butyryl-7-deacetylforskolin, 1-Benzyl-7-deacetyl-7- pentanoylforskolin, 7-Deacetyl-7-hexanoyl-1-(2-methoxyethoxymethyl)forskolin, 1- Benzoyl-14,15-dihydroforskolin, 14,15-Dihydro-1-trimethylsilylforskolin, 1-Methoxy- 14,15-dihydro-7-deacetyl-7-propionylforskolin, 1-t-Butyldiphenylsilyl-13- cyclopropyl-14,15-dinor-7-deacetyl-7-butyrylforskolin, 1-Benzyl-13-cyclopropyl- 14,15-dinor-7-deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 1-(t- Butoxycarbonyl)-13-cyclopropyl-14,15-dinor-7-deacetyl-7-(4- dimethylaminobutyryl)forskolin, 1-Methylthiomethyl-13-cyclopropyl-14,15-dinor-7- deacetyl-7-dimethylaminoacetylforskolin, 14,15-Dihydroforskolin, 13-Cyclopropyl- 14,15-dinorforskolin, 7-Deacetylforskolin-7-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4- carbonyl), 7-Deacetyl-7-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)forskolin, 14,15- Dihydro-7-deacetyl-7-(3-dimethylamino-2-methylpropionyl)forskolin, 7-Deacetyl-7- (4-dimethylamino-2-methylbutyrylforskolin und 14,15-Dihydro-7-deacetyl-7-(4-dimethylamino-2-methylbutyryl)forskolin ein.
Entsprechend der Erfindung muß für den Fall, daß kein Losungsmittel verwendet wird, die Verbindung der allgemeinen Formel (2) auf mindestens 100ºC, bevorzugt 1 30 bis 300 ºC, noch bevorzugter 150 bis 250ºC erhitzt werden. Bei Verwendung eines Lösungsmittels beträgt die Reaktionstemperatur mindestens etwa 50ºC, bevorzugt etwa 70ºC bis zum Siedepunkt des Lösungsmittels.
Obwohl die Heizzeit in Abhängigkeit von der Temperatur variiert, beträgt sie im allgemeinen mindestens 1 Minute, bevorzugt 5 Minuten bis 10 Stunden, noch bevorzugter 15 bis 60 Minuten bei Durchfuhrung ohne Losungsmittel, und 3 bis 8 Stunden bei Durchführung mit Lösungsmittel.
Die Methode zum Erhitzen der Verbindung der allgemeinen Formel (2) ist nicht speziell eingeschränkt, und das Erhitzen der Verbindung kann entweder direkt oder in einem Lösungsmittel durchgeführt werden. Beim direkten Erhitzen wird die Umlagerung bevorzugt im geschmolzenen Zustand durchgeführt. Andererseits ist das Lösungsmittel in den Fällen, in denen ein Lösungsmittel verwendet wird, bevorzugt ein wasserfreies, um durch Hydrolyse verursachte Deacylierung der Verbindung zu verhindern, obwohl das Lösungsmittel entweder eines sein kann, in dem die Verbindung der Formel (2) löslich ist oder eines, in dem die Verbindung unlöslich ist. Bevorzugte Beispiele für das wasserfreie Lösungsmittel schließen N,N-Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Sulfolan, 1-Methyl- 2-pyrrolidon, 1,1,2,2-Tetrachlorethan, Nitrobenzol, Chlorbenzol, flüssiges Paraffin, 1,1,2, 2-Tetrachlorethylen, Octylacetat, Diglyme, Triglyme, Essigsäure, Pyridin, Acetonitril, Triethylamin und Butyronitril ein.
Nach Ende der Reaktion wird die Reaktionsmischung auf Raumtemperatur abgekühlt und zur Isolierung von 6-Acyl-7-deacetylforskolin umkristallisiert.
Wenn R² eine Propionylgruppe mit einem Aminorest in β-Position ist, z. B. eine 3- Dimethylaminopropionylgruppe, ist bevorzugt, daß die Reaktionsmischung nach Ende der Umlagerung mit einem dem Aminorest entsprechenden Amin bei einer Temperatur von 0 ºC bis Raumtemperatur während 1 Minute bis 1 2 Stunden behandelt wird, um die Bildung eines Nebenprodukts zu verhindern. Beispiele für das bei dieser Behandlung verwendbare Lösungsmittel schließen Benzol, Tetrachlorkohlenstoff, Dichlormethan, Chloroform, 1,2-Dichlorethan, 1,1,1-Trichlorethan, Ether, Diisopropylether, Ethylacetat, Acetonitril, Butyronitril, N,N-Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Sulfolan,1 -Methyl- 2-pyrrolidon, Pyridin und Aceton ein. Die Menge des zu verwendenden Amins kann 0.1 bis 3 Mol pro Mol der verwendeten Verbindung der Formel (2) betragen.
Die Ausbeute (bezogen auf reines Produkt) und Reinheit der nach dem erfindungsgemäßen Verfahren oder nach dem Verfahren nach EP-A-22241 3 erhaltenen Verbindung (Beispiele 2-1 oder 2-4) sind in Tabelle 2 gemeinsam mit der Ausbeute eins Nebenprodukts (7-Deacetylforskolin) gezeigt. Tabelle 2 Ausgangsmaterial 7-Deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin Bsp. Zielverbindung Ausbeute Reinheit Nebenprodukt Vgl.-Bsp. *bestimmt durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie
Aus den in der obigen Tabelle 2 gezeigten Ergebnissen geht offensichtlich hervor, daß nach dem erfindungsgemäßen Verfahren 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivate in großer Reinheit und hoher Ausbeute ohne Bildung von Nebenprodukten hergestellt werden können.
Das oben erwähnte Verfahren nach EP-A-222413 umfaßt Behandlung von 7-Deacetyl- 7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin oder 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin mit Natriumhydroxid in einer Acetonitril/Wasser-Mischung (45 : 55).

Beispiel 2-1

7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin

29.05 g 7-Deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin wurden auf 160ºC erhitzt, während 10 Minuten im geschmolzenen Zustand gerührt, auf Raumtemperatur abgekühlt und ergaben eine Reaktionsmischung. Diese Reaktionsmischung wurde aus einer Dichlormethan/Methylethylketonmischung um kristallisiert und lieferte 14.71 g 7- Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin. Die Mutterlauge der Umkristallisation wurde konzentriert und ergab einen Rückstand. Dieser Rückstand wurde aus Diisopropylether um kristallisiert und ergab weitere 9.64 g 7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin (Gesamtausbeute: 84%).
IR(KBr)ν: 3150, 1730, 1710 cm&supmin;¹

Beispiel 2-2

7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin

49 mg 7-Deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)-forskolin wurden auf 140ºC erhitzt.
Obwohl der Schmelzpunkt höher ist als 140ºC, war es nach kurzzeitigem Erhitzen geschmolzen.
Nach einer Stunde wurde das Erhitzen abgebrochen, und es wurden 35 mg 7-Deacetyl- 6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin erhalten (Ausbeute: 71%).

Beispiel 2-3

7-Deacetyl-6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin

Eine Mischung aus 1.00 g 7-Deacetyl-7-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin und 1 5 ml N,N-Dimethylformamid wurde unter Erhitzen auf 150ºC gerührt.
Nach einer Stunde wurde die Reaktion abgebrochen und es wurden 720 mg 7-Deacetyl- 6-(4-dimethylaminobutyryl)forskolin erhalten (Ausbeute 72%).

Beispiel 2-4

7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin

40.10 g 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin wurden auf 150ºC erhitzt und während 10 Minuten im geschmolzenen Zustand gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und in 500 ml Dichlormethan gelöst. Gasförmiges Dimethylamin wurde unter Eiskühlung in die Lösung eingeleitet. Nach Ende der Reaktion wurde die Reaktionsmischung konzentriert und ergab einen festen Rückstand. Dieser Rückstand wurde mit Diisopropylether gewaschen und lieferte 19.8 g 7-Deacetyl-6-(3- dimethylaminopropionyl)forskolin (Ausbeute 48%).
Die Mutterlauge des Waschens wurde konzentriert und ergab 23.41 g eines Rückstands. Der Rückstand wurde derselben Behandlung zur Umlagerung unterworfen wie oben beschrieben und ergab weitere 9.71 g 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin (Gesamtausbeute: 74%).

Beispiel 2-5

7-Deacetyl-6-piperidinoacetylforskolin

145 mg 7-Deacetyl-7-piperidinoacetylforskolin wurden auf 180ºC erhitzt und während 30 Minuten in geschmolzenem Zustand stehengelassen. Die erhaltene Reaktionsmischung wurde abgekühlt und aus einer Hexan/Ethylacetat-Mischung zur Isolierung von 83 mg 7-Deacethyl-6-piperidinoacetylforskolin um kristallisiert (Ausbeute: 57%).

Beispiel 2-6

7-Deacetyl-6-(2,3-dihydroxypropionyl)forskolin

190 mg einer Mischung von 7-Deacetyi-7-(2,3-dihydroxypropionyl)forskolin- Diastereomeren wurde auf 210ºC erhitzt und in geschmolzenem Zustand stehengelassen. Nach 10 Minuten wurde die Reaktion abgebrochen und ergab eine Mischung von 7- Deacetyl-6-(2,3-dihydroxypropionyl)forskolin-Diastereomeren.

Beispiel 2-7

6-Acetyl-7-deacetylforskolin

120 mg Forskolin wurden auf 240ºC erhitzt und während 5 Minuten im geschmolzenen Zustand stehengelassen. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt und aus einer Hexan/Chloroform-Mischung zur Isolierung von 56 mg 6-Acetyl-7-deacetylforskolin umkristallisiert (Ausbeute: 47%).

Beispiel 2-8

7-Deacetyl-1,6-diacetylforskolin

145 mg 1-Acetylforskolin wurden auf 240ºC erhitzt und in geschmolzenem Zustand stehengelassen.
Nach 5 Minuten wurde die Reaktion abgebrochen und lieferte 7-Deacetyl-1,6-diacetylforskolin.

Beispiel 3-1

7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin

297 mg 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 20 ml Acetonitril werden gemischt und unter Erhitzen (81,6ºC) rückfließend erhitzt. Nach 4 Stunden wird die Reaktionslösung unter reduziertem Druck konzentriert. Der erhaltene Rückstand wird mit 20 ml Dichlormethan verdünnt. 2 ml 50%-ige wäßrige Dimethylaminlösung werden zu der Lösung gegeben und während 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wodurch 7- Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin erhalten wird.

Beispiel 3-2

1.12 g 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin und 30 ml Essigsäure werden gemischt und während 1 Stunde unter Erhitzen (118ºC) und Rühren rückfließend erhitzt und ergeben 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forsko(in.

Beispiel 3-3

1.02 g 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin und 20 ml Pyridin werden gemischt und während 30 Stunden unter Erhitzen (115ºC) und unter Rühren rückfließend erhitzt zur Herstellung von 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin.

Beispiel 3-4

394 mg 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin und 10 ml 1,1,2,2- Terachlorethan werden gemischt und während 22 Stunden bei 130ºC gerührt zur Herstellung von 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin.

Beispiel 3-5

7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin

Eine Mischung aus 101 mg 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolin und 10 ml Acetonitril wurde während 6 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt, 0.20 ml 50%-iges wäßriges Dimethylamin wurden zugegeben, und es wurde bei Raumtemperatur während 2.5 Stunden gerührt zur Herstellung von 7-Deacetyl-6-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin.

Referenzbeispiel 2

7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolinhydroc-hlorid

Eine Mischung von 1.00 g 7-Deacetyl-7-(3-dimethylaminopropionyl)forskolin, 26 mg 5% Palladium-Kohle-Katalysator und 20 ml Methanol wurde in einer Wasserstoffatmosphäre bei Raumtemperatur während 2 Stunden bis zur vollständigen Reaktion gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zur Entfernung des Katalysators abfiltriert. Das Filtrat wurde konzentriert und ergab einen öligen Rückstand. Dieser Rückstand wurde mit 5 ml Dichlormethan verdünnt, und 0.6 ml 4N Salzsäure in Dioxan wurden zugefügt. Die Mischung wurde konzentriert und der Rückstand aus Methanol umkristallisiert, wobei 339 mg 7-Deacetyl-7-(3-dimetylaminopropionyl)-14,15-dihydroforskolinhydrochlorid erhalten wurden.
Schmp. 260-261ºC (Zersetzg.)
IR(Nujol)ν: 3230, 2720, 1735, 1710 cm&supmin;¹,
MS m/z (relative Intensität): 469 (M&spplus; der freien Base, 6)
159 (11), 118 (41), 116 (12), 86 (16), 84 (25)
71 (11), 69 (11), 58 (100), 57 (16), 55 (16).

Claims

1. Ein Verfahren für die Herstellung eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 6,7-Diacyl-7-deaceylforskolinderivats, wobei R¹ und R² je für eine Acylgruppe und R³ für eine aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen steht, das Eliminierung der Acylgruppe durch Solvolyse in Position 1 eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 1,6,7-Triacyl-7-deacetyderivats umfaßt, wobei R¹, R² und R³ wie oben definiert sind.

2. Ein Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Solvolyse eine Hydrolyse ist.

3. Ein Verfahren nach Anspruch 2, wobei die Hydrolyse in Gegenwart eines hydrolysierenden Mittels in einem Lösungsmittel durchgeführt wird.

4. Ein Verfahren nach Anspruch 3, wobei das Lösungsmittel ein wasserlösliches Lösungsmittel ist, das bis zu etwa 50 Vol% Wasser enthalten kann.

5. Ein Verfahren nach Anspruch 3, wobei das hydrolysierende Mittel Base oder Säure ist.

6. Ein Verfahren nach Anspruch 5, wobei die Konzentration der Base oder Säure im Lösungsmittel etwa 0.01 bis etwa 50% beträgt.

7. Ein Verfahren nach Anspruch 3, wobei das Lösungsmittel ein wäßriger C&sub1;-C&sub4;-Alkohol ist, der etwa 0.5 bis etwa 20 Vol% Wasser enthält, und wobei das hydrolysierende Mittel Alkalihydroxide, Alkalicarbonate, Alkalibicarbonate, Ammoniak oder Amin ist und im Lösungsmittel in einer Konzentration von etwa 0.05 bis 10% enthalten ist.

8. Ein Verfahren nach Anspruch 1, wobei R¹ eine Acetylgruppe. R² eine Dimethylaminopropionylgruppe und R³ eine Vinyl- oder Ethylgruppe ist.

9. Ein Verfahren für die Herstellung eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 6,7-Diacyl-7-deacetylforskolinderivats, wobei R¹ und R² je für eine Acylgruppe und R³ für eine aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen steht, das Umsetzung eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivats, wobei R² und R³ die oben definiert sind, mit einem Acylierungsmittel zur Acylierung der Hydroxylgruppen an den Positionen 1 und 7 und Eliminierung der Acylgruppe an Position 1 durch Solvolyse umfaßt.

10. Durch die allgemeine Formel:

dargestellte 1,6,7-Triacyl-7-deacetylforskolinderivate, wobei R¹ und R² je für eine Acylgruppe und R³ für ein aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen steht wobei die Verbindung ausgeschlossen ist, in der gleichzeitig R¹ und R² je für eine Acetylgruppe und R³ für eine Vinylgruppe steht.

11. Ein Verfahren für die Herstellung eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 6-Acyl-7-deacetylforskolinderivats, wobei R¹&sup0; füreine Hydroxygruppe steht, die verestert sein kann; R² steht für eine Acylgruppe und R³ steht für eine aliphatische Gruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen: wobei das Verfahren Erhitzen eines durch die allgemeine Formel

dargestellten 7-Acyl-7-deacetylforskoliderivats umfaßt wobei R¹&sup0;, R² und R³ wie oben definiert sind.