DE3390563C2 - - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft den Gegenstand der Ansprüche.

Aminopterin und sein N-10-Methylderivat Methotrexat sind seit langem als wirksame Turmorwachstumshemmer bekannt. Methotrexat ist seit mehr als 30 Jahren als klinisch brauchbares Medikament gegen Krebs akzeptiert. Die Medikamente wirken stoffwechselhemmend und hemmen die Dihydrofolat-Reduktase (DHFR). Sie wirken sowohl auf neoplastisches als auch normales Wirtsgewebe.

In Cancer Treatment Reports, 62, 1047 (1978) von J. I. DeGraw und F.M. Sirotnack, in der GB-PS 15 34 238 vom 29. November 1978 sowie in der US-Patentanmeldung Serial-Nr. 75 913 vom 17. September 1979 wird berichtet, daß 10-Deazaminopterin bei experimentellen Tumoren von Mäusen eine stärkere Antitumoraktivität als Aminopterin und Methotrexat zeigte. Insbesondere wurde gefunden, daß es ein breiteres Aktivitätsspektrum aufweist, in Tumorgewebe besser eindringt und sich dort günstiger verteilt und daß es bessere kinetische Parameter für Tumorgewebe gegenüber Normalgewebe aufweist. Die genannte US-Patentanmeldung lehrt ferner, daß die Antitumorwirkung und das Wirksamkeitsspektrum von 10-Deazaminopterin durch den Einbau von kurzkettigen Alkylgruppen am 10-Stellung-Kohlenstoffatom verstärkt werden.

Es wurden ferner Änderungen des Pteridinrings der Folsäure untersucht. Über die Synthese und Antifolat-Wirksamkeit von 8-Deazafolsäure wurde von J. I. DeGraw, R. L. Kisliuk, Y. Gaumont und D. M. Baugh in J Med Che, (1974), 17, 470 berichtet, und über 8-10-Dideazafolsäure wurde von J. I. DeGraw, R. L. Kisliuk, V. H. Brown und Y. Gaumont in Chem Biol Pteridines (1779) 6, 229 berichtet. Diese beiden Verbindungen waren zwar wirksame Antifolate, hatten jedoch keinen merklichen Einfluß auf die DHFR. In J Org Chem (1981) 46, 1777 berichten A. Strinivasan und A. D. Broom über die Herstellung von 8-Deazaminopterin und 8-Deazamethotrexat, es wird dort jedoch nichts über die biologische Wirksamkeit der Verbindungen berichtet.

Vor einiger Zeit wurde offenbart, daß 8,10-Dideazaminopterin biologische Wirksamkeit aufweist (J. I. DeGraw et al, J Hetero Chem, (1982), 19, 1587). Anläßlich des International Symposium on Pteridine and Folic Acid Analogs in Schottland im Septemer 1982 wurde auf einer Lehrtafel die Herstellung des n-Propyl-Analogons gezeigt. Es wurde jetzt gefunden, daß 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin und 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin eine überraschend starke das Tumorwachstum hemmende Wirksamkeit gegenüber den unsubstituierten und n-Propyl-Analoga aufweisen.

Die Verbindungen enthaltenden tumorwachstumshemmenden Zusammensetzungen weisen eine therapeutisch wirksame Menge einer oder mehrerer der Verbindungen in Kombination mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger auf. Lebende Tiere einschließlich Menschen werden gegen Krebs behandelt durch Gabe von therapeutisch wirksamen Mengen solcher Zusammensetzungen, typischerweise in Form einer parenteralen Dosiseinheit je Lebewesen.

Die pharmazeutisch akzeptablen Salze dieser Verbindungen umfassen Säureanlagerungssalze und Carboxylatsalze. Diese Salze sind insofern "pharmazeutisch akzeptabel", als sie nichttoxisch und dem Ausgangsstoff (bzw. den Ausgangsstoffen) funktionell äquivalent sind. Säureanlagerungssalze werden gebildet durch Umsetzen von einer oder mehreren der freien NH₂-Gruppen des Methyl- oder Ethyl-8,19-dideazaminopterin mit einer geeigneten Säure. Geeignete Säuren umfassen anorganische Säuren, wie Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Salpeter-, Schwefel- oder Phosphorsäure; organische Carbonsäuren, wie Glykol-, Hydroxymalein, Malein-, Wein-, Zitronen-, Salicyl-, o-Acetyloxybenzoe-, Nikotin- und Isonikotinsäure; sowie organische Sulfonsäuren, wie Methan-, Ethan-, 2-Hydroxyethan-, p-Toluol- oder Naphthalin-2-Sulfonsäure.

Carboxylatsalze werden gebildet durch Umsetzen einer geeigneten Base mit einer oder mehreren der freien Carboxylgruppen des Methyl- oder Ethyl-8,10-dideazaminopterins. Geeignete Basen sind Alkalimetall- oder Erdalkalimetallhydroxid, Kaliumhydroxid, Calsiumhydroxid, Magnesiumhydroxid und entsprechende Carbonate; ferner Stickstoffbasen, wie Ammonium, und Alkylamine, wie Trimethylamin und Triethylamin.

Die Verbindungen gemäß der Erfindung können auf folgenden Wegen synthetisiert werden:

Das gezeigte Reaktionsschema wendet die Synthese des 10-Ethylderivats an und ist nur beispielhaft.

In Schritt 1 wird das Alkyliodid (2) mit einem Homoterephtalatester (1) umgesetzt. Dabei kann jeder übliche Homoterephthalatester eingesetzt werden, und das Zwischen-Anion bei der Alkylierung wird durch eine geeignete Base wie etwa Alkalihydrid, -hydroxid oder -alkoxid in einem polaren aprotischen Lösungsmittel wie N-N-Dimethylformamid (DMF) oder Tetrahydrofuran (THF) gebildet. Die Reaktion wird mit Säure beendet, und die Zwischenverbindung α-Alkylhomoterephthalat wird isoliert.

In Schritt 2 wird die Brommethylverbindung (4) eingesetzt, um das Anion des Dimethyl-α-Alkylhomoterephthalats zu alkylieren. Jeder übliche Ester des sauren Teils von (3) kann eingesetzt werden, und das Anion kann durch Alkalihydride, -alkoxide, -hydroxide und andere für den Fachmann offensichtliche Basen gebildet werden. Ein geeignetes polares aprotisches Lösungsmittel wie Dimethylformamid wird eingesetzt. Die so erhaltene 10-Carboxylatverbindung wird in Dimethylsulfoxid- oder Hexamethylphosphoramid-Lösungsmittel mit einem Alkalimetallhalogenid oder -cyanid behandelt zur Abspaltung des 10-Carboxylatesters unter nachfolgender Decarboxylierung der 10-Carbonsäure zum Erhalt eines 2,4-Diaminopteroinsäure-Zwischenprodukts (6). Der anwendbare Temperaturbereich für das Verfahren ist 100-200°C, bevorzugt ca. 170-180°C. Die Pteroinsäure-Verbindung (6) wird dann mit Diethyl-L-Glutamat (7) gekuppelt. Die Aktivierung des Carboxylatanteils von (6) erreicht man über das Mischanhydrid, wie es in Anwesenheit von Isobutylchlorformiat und Triethylamin gebildet wird. Weitere Chlorformiatester zusammen mit weiteren organischen Basen eignen sich ebenfalls für diesen Zweck. Der so erhaltene Pteroylglutamat-Diester (8) wird durch Behandeln mit einem Alkalihydroxid oder Carbonat in wäßrigem alkoholischem Medium, bevorzugt in wäßrigem 2-Methoxyethanol, hydrolysiert zum Erhalt des 10-Alkyl-8,10-dideazaminopterins (9).

Die physiologischen Eigenschaften der 8,10-Dideazaminopterine nach der Erfindung gleichen denjenigen von Methotrexat. Infolgedessen können sie in ähnlicher Weise wie Methotrexat zur Verwendung als Tumorwachstumshemmer formuliert werden. Diese Formulierungen umfassen die 8,10-Dideazaminopterine in einem pharmazeutisch akzeptablen flüssigen Trägermedium wie Mineralöl oder physiologischer Kochsalzlösung gelöst/suspendiert oder mit pharmazeutisch akzeptablen festen Trägermedien wie Talkum, Magnesiumstearat, Stärken und Zucker vermischt und ggf. zu Verabreichungsformen wie Tabletten, Kapseln und Zäpfchen geformt. In Verbindung mit der Beschreibung solcher Trägermedien bedeutet "pharmazeutisch akzeptabel", daß das Trägermedium nichttoxisch sowie im wesentlichen inert ist und die Funktionalität der wirksamen Bestandteile nicht nachteilig beeinflußt. Die Bezeichnung "Trägermedium" umfaßt Stoffe, die auf dem Gebiet der pharmazeutischen Formulierung manchmal als Verdünner oder Vehikel bezeichnet werden. Die 8,10-Dideazaminopterine werden hauptsächlich als wäßrige Lösungen ihrer Natriumsalze zur intravenösen oder subkutanen Verabreichung eingesetzt.

Die Dosis und die Dosierungsregel hängen von dem behandelten Tumor, der Art und Weise der Verabreichung, der betroffenen animalischen Spezies und dem Gewichts des Objekts ab. Die Dosis liegt typischerweise im Bereich von ca. 0,1-500 mg/Tag. Typischerweise erfolgt die Behandlung täglich, bis eine Remission des Tumors eintritt. Erhaltungsbehandlungen während der Remission erfolgen typischerweise mit Unterbrechungen.

Die Verbindungen können parenteral (z. B. intravenös, intraarteriell, intraperitoneal, intramuskulär, durch Lumbalinjektion, subkutan) oder oral verabreicht werden. Sie sind wirksam bei der Behandlung von Leukämien, Lymphomen sowie festen Tumoren wie Chorionkarzinom, Hydatidenmole, Choreoadenom destruens, akuter Leukämie der Lymphozyten, Wucherflechte, Knochensarkom, Lymphosarkom und weiteren Nicht-Hodgkinschen Lymphomen, Brusttumoren, bronchogenen Karzinomen, Hodentumoren und Burkittschem Lymphom.

Die 8,10-Dideazaminopterine gehören zur Klasse von Tumorwachstumshemmern, die als Gegen-Stoffwechselprodukte bezeichnet werden. Wie Methotrexat sind sie eng mit der DHFR verbunden und hindern das Enzym daran, die Umwandlung von Dihydrofolat zu Tetrahydrofolat zu aktivieren. Die Blockierung dieses Wegs inhibiert die DNS-Synthese, wodurch die Reproduktion von bösartigen Zellen inhibiert wird. Somit bedeutet der Ausdruck "therapeutisch wirksame Menge" im vorliegenden Zusammenhang eine Menge einer oder mehrerer der Verbindungen nach der Erfindung, die bei Verabreichung an einen Patienten Tumorwachstum hemmt. Die Verbindungen nach der Erfindung haben somit die gleiche Funktion wie Methotrexat in der Therapie, weisen jedoch gegenüber Methotrexat eine verstärkte Antitumor- Wirksamkeit und ein größeres Wirksamkeitsspektrum auf.

Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung.

Beispiel 1 Herstellung von 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin Schritt 1 Dimethyl-α-Methylhomoterephthalat

Eine Lösung von Dimethylhomoterephthalat (4,16 g, 20 mmol) in 15 ml trockenem Tetrahydrofuran wurde während 15 min tropfenweise einem gerührten Gemisch aus Kaliumhydrid (2,5 g einer 35%-Ölsuspension, 22 mmol) in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran bei 0°C zugefügt. Nach 30 min hatte sich eine homogene gelbe Suspension gebildet. Methyliodid (2,79 g, 22 mol) wurde dann über einen Zeitraum von 5 min zugefügt und das resultierende Gemisch während 30 min gerührt. Das Gemisch wurde mit 2 ml 50%iger Essigsäure gelöscht, mit 500 ml Wasser verdünnt und mit Ether extrahiert. Der Etherextrakt wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und verdampft, wobei ein Öl zurückblieb. Der Stoff wurde auf Kieselgel chromatografiert unter Elution durch Ether-Hexan (1 : 9), wobei ein klares Öl (71%) erhalten wurde; m/e 222 (M⁺); NMR-Spektroskopie (CDCl₃) 1,50 (3 H, d, CH₃), 3,65 (3H, s, OCH₃), 3,93 (3 H, s, OCH₃-Benzoat).

Schritt 2 4-Amino-4-desoxy-10-carbomethoxy-10-methyl-8,10- dideazapterat (Dimethylester)

Einem gerührten Gemisch von 5,24 g einer 22,3% Ölsuspension von KH (29,2 mmol) und 24 ml trockenem DMF bei 0°C wurde langsam 6,48 g (29,2 mmol) des in Schritt 1 hergestellten Dimethyl-α-Methylhomoterephthalats zugefügt. Nach 30 min wurde die gelbe Lösung auf -40°C gekühlt, und es wurde über einen Zeitraum von 10 min 3,6 g (9,2 mmol) des Brommethyldeazapterins in 48 ml DMF zugefügt. Das Gemisch wurde auf Umgebungstemperatur gebracht und 2 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgetrennt, und der Rückstand wurde zwischen 100 ml CHCl₃ und 25 ml Wasser geteilt. Die CHCl₃- Lösung wurde getrocknet (MgSO₄), im Vakuum konzentriert und auf Kieselgel chromatografiert unter anfänglicher Elution durch CHCl₃ zur Abtrennung von nichtumgesetztem Ester, gefolgt von Elution des Produkts durch CH₃OH/CHCl₃ (1 : 6), wobei 2,85 g (78%) eines gelben festen 4-Amino-4-desoxy-10-methyl-10- carbomethoxy-8,10-dideazapteroats erhalten wurde; m/e 395 (M⁺); NMR-Spektroskopie (d₆-DMSO) 1,50 (3H, s, CH₃), 3,53 (1H, d, C-9H), 3,59 (3H, s, OCH₃), 3,72 (1H, d, C-9H), 3,86 (3H, s, Benzoat OCH₃), 7,32 (1H, d, C-7H), 7,47 (1H, d, C-8H), 7,54 (2H, d, 3′,5′-H′s), 7,96 (2H, d, 2′,6′-H′s).

Analyse C₂₂H₂₁O₅O₄ · H₂O
Errechnet: C 58,1; H 5,61; N 16,9;
Gefunden: C 58,4; H 5,30; N 17,10.

Schritt 3 4-Amino-4-desoxy-10-methyl-8,10- dideazapteroinsäure

Der 10-Methyldiester von Schritt 2 (2,85 g, 7,22 mmol) und 1,06 g (21,7 mmol) NaCN in 50 ml DMSO wurden bei 175-180°C unter N₂ 2,5 Stunden gerührt. Das dunkle Gemisch wurde abgekühlt und das Lösungsmittel im Vakuum abgetrennt. Der Rückstand wurde in 45 ml Wasser gelöst, die Lösung filtriert und das Filtrat mit HOAc angesäuert. Der Niederschlag wurde aufgefangen, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei 2,28 g (96%) 4-Amino-4-desoxy-10-methyl-8,10-dideazapteroinsäure verblieb; m/e 323 (M⁺); NMR-Spektroskopie (d₆-DMSO) 1,23 (3H, d, CH₃), 3,06 (2H, m, 9-CH₂), 3,50 (1H, m, 10-H), 7,27 (1H, d, 7-H), 7,39 (3H, m, 8-H, 3′,5′-H′s), (2H, d, 2′,6′-H′s).

Schritt 4 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylester

Ein Gemisch aus 2,38 g (7,3 mmol) der in Schritt 3 hergestellten Diamino-10-methylpteroinsäure, 2,03 ml (14,7 mmol) Triethylamin und 54 ml trockenes DMF wurden tropfenweise mit 1,9 ml (14,7 mmol) Isobutylchlorformiat behandelt. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt, und ein Gemisch aus 3,52 g (14,7 mmol) Diethyl-L-Glutamat · HCl, 2,93 ml (14,7 mmol) Triethylamin und 18 ml DMF wurde zugefügt. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 24 Stunden gerührt, und das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde aufgeteilt zwischen 50 ml gesättigtem NaHCO₃ und 50 ml CHCl₃, gefolgt von zwei weiteren CHCl₃-Extraktionen. Der CHCl₃-Extrakt wurde getrocknet (MgSO₄) und verdampft. Das Rohmaterial wurde auf 110 g Kieselgel unter anfänglicher Elution durch CHCl₃ chromatografiert, gefolgt von Abtrennung des Produkts durch MeOH/CHCl₃ (2,5 : 97,5) unter Erhalt von 2,01 g (54%) 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylester in Form eines gelben Harzes; m/e 508 (M⁺); NMR-Spektroskopie (CDCl₃) 1,23 (9H, m, 10-CH₃), COOCH₂CH₃), 2,4 (4H, m, CH₂CH₂COOCH₂CH₃), 3,1-3,5 (3H, m, 10-H, 9-CH₂), 4,3 (4H, q, COOCH₂CH₃), 4,8 (1H, d, CONHCH), 7,2-7,4 (4H, m, 3′-H, 4′H, 7-H, 8-H), 7,8 (2H, 2′-H, 6′-H).

Schritt 5 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin

Eine Lösung aus 0,43 g des in Schritt 4 hergestellten 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylesters in 6,5 ml 2-Methoxyethanol wurde mit 4,3 ml 1N NaOH behandelt. Die Lösung wurde 3 Stunden auf Raumtemperatur gehalten und mit 35 ml H₂O verdünnt. Die Lösung wurde mit HOAc angesäuert zur Ausfällung des Produkts. Nach Kühlung für 24 Stunden wurde der Niederschlag gesammelt, mit H₂O gewaschen und getrocknet unter Erhalt von 0,265 g (70%) 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin, ebenfalls als hellgelber mikrokristalliner Feststoff; m/e als Tetratrimethylsilylderivat 740, (M⁺).

Beispiel 2 Herstellung von 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin Schritt 1 Dimethyl-α-Ethylhomoterephthalat

Unter Anwendung des Verfahrens nach Schritt 1 von Beispiel 1, wobei jedoch Methyliodid durch Ethyliodid ersetzt wurde, wurde Dimethyl-α-Ethylhomoterephthalat in einer Ausbeute von 72% erhalten; m/e 236; NMR-Spektroskopie (CDCl₃) 0,9 (3H, t, CH₃), 2,0 (2H, m, CH₂CH₃), 3,5 (1H, m, CHC₂H₅) 3,70 (3H, s, OCH₃), 3,90 (3H, s, Benzoat OCH₃).

Schritt 2 4-Amino-4-desoxy-10-carbomethoxy-10-ethyl-8,10- dideazapteroinsäure-Dimethylester

Unter Anwendung des Verfahrens nach Schritt 2 von Beispiel 1 und Einsatz des Produkts nach Schritt 1 des vorliegenden Beispiels wurde 4-Amino-4-desoxy-10-carbomethoxy-10-ethyl-8,10- dideazapteroinsäure-Dimethylester in einer Ausbeute von 74% erhalten; m/e 409 (M⁺); NMR-Spektroskopie (d₆-DMSO) 0,73 (3H, t, CH₃), 2,20 (2H, m, CH₂CH₃), 3,67 (5H, m, 9-CH₂, COOCH₃), 3,90 (3H, s, Benzoat OCH₃).

Schritt 3 4-Amino-4-desoxy-10-ethyl-8,10- dideazaminopterinsäure

Unter Anwendung des Verfahrens nach Schritt 3 von Beispiel 1 und Einsatz des Produkts nach Schritt 2 des vorliegenden Beispiels wurde 4-Amino-4-desoxy-10-ethyl-8,10-dideazaminopterinsäure erhalten, und analytische Proben wurden durch Rekristallisation aus DMSO erhalten.

Errechnet für C₁₈H₁₉N₅O₂: C 64,1; H 5,68; N 20,8
Gefunden: C 63,9; H 5,78; N 20,5;

UV-Absorptionsmaximum: 238 nm, ε = 35,374; 343 nm, ε = 5,134.

Schritt 4 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylester

Unter Anwendung des Verfahrens nach Schritt 4 von Beispiel 1 und Einsatz des Produkts von Schritt 3 des vorliegenden Beispiels wurde 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylester in einer Ausbeute von 34% erhalten, m/e 522 (M⁺).

Schritt 5 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin

Der 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin-Diethylester des vorhergehenden Schritts wurde unter den Bedingungen von Schritt 5 in Beispiel 1 hydrolysiert unter Erhalt von 10-Ethyl-8,10- dideazaminopterin als

C₂₃H₂₆N₆O₅ · 1,25 H₂O.
Errechnet: C 56,5; H 5,87; N 17,2;
Gefunden: C 56,6; H 5,91; N 17,0;

UV-Absorptionsmaximum: 238 nm, ε = 37,652; 343 nm, ε = 5,298.

Beispiel 3

Die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen als Tumorwachstum hemmende Mittel kann dadurch demonstriert werden, daß sie der Untersuchung durch L-1210-Leukämie bei Mäusen unterworfen werden. Dies ist eine Standarduntersuchung, die dazu dient, die Wirksamkeit von Verbindungen als tumorwachstumshemmende Mittel zur Behandlung von Menschen zu bestimmen. Die Untersuchung wurde von D. J. Hutchinson, D. C. Robinson, D. Martin, O. O. Ittenson und Dillenberg in Journal Cancer Research (1962), 22, 57-72, beschrieben. Mit diesem Verfahren wird eine Verbindung auf ihre Wirksamkeit hinsichtlich der Steigerung der mittleren Lebensdauer behandelter Tiere und unbehandelter Kontrolltiere, die beide mit L-1210-Leukämiezellen infiziert sind, untersucht. Die Testverbindung, auf einen pH-Wert 7 eingestellt, wird zuerst in Natriumhydroxid gelöst und dann erst mit destilliertem Wasser auf 10 ml verdünnt. Mäuse erhalten jeden zweiten Tag einmal täglich eine von insgesamt fünf Injektionen, beginnend einen Tag nach der Transplantation von 10⁶ Tumorzellen je Maus. Die Resultate dieser Untersuchung mit verschiedenen 8,10-Dideazaminopterin-Analoga waren wie folgt:

Aus den vorstehenden Resultaten ist ersichtlich, daß die Lebensdauer der Mäuse durch die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen erheblich verlängert wurden und daß diese Verbindungen gegenüber den nichtalkylierten und n-Propyl- Analoga eine überraschende Wirksamkeit ohne toxische Wirkungen zeigen. Die %ILS-Daten repräsentieren Vergleiche von logarithmischen Werten, so daß Differenzen hinsichtlich %ILS, die gering erscheinen, große Differenzen hinsichtlich der zelltoxischen Wirksamkeit maskieren. Wie ersichtlich, ist somit das Ethylderivat 40mal wirksamer als die unsubstituierte Verbindung und 100mal wirksamer als das n-Propylderivat in bezug auf die Reduzierung der Anzahl von Tumorzellen; d. h. z. B., daß die Anzahl Zellen, die nach der Behandlung mit dem 10-Ethylanalogon noch übrig ist, nur 1/40 bzw. 1/100 der bei der Behandlung mit den genannten Analoga zurückbleibenden Zellen beträgt. Die Untersuchung und die vorliegenden Schlußfolgerungen sind von F. M. Schabel in Symposium on Proliferation and Spread of Neoplastic Cells, M. D. Anderson, Tumor Institute, Houston, Texas (1968), S. 379 ff., beschrieben worden.

Herstellung von 10-Propyl-8,10-dideazaminopterin Schritt 1 Dimethyl-α-Propylhomoterephthalat

Dimethylhomoterephthalat wurde wie in Beispiel 1, Schritt 1, alkyliert, jedoch mit Propylbromid, unter Erhalt des α-Propylprodukts in einer Ausbeute von 74% als ein Öl, m/e 250 (M⁺); NMR-Spektroskopie (CDCl₃) 0,91 (3H, t, CH₃), 1,26 (2H, m, -CH₂CH₃), 1,75-2,05 (2H, m, -CH₂C₂H₅), 3,62 (1H, t, -CH- C₃H₇), 3,66 (3H, s, OHC₃), 3,91 (3H, s, Benzoat OCH₃).

Schritt 2 4-Amino-4-desoxy-10-carbomethoxy-10-propyl- 8,10-dideazapteroinsäure-Dimethylester

Das Verfahren gemäß Schritt 2 von Beispiel 1 wurde durchgeführt, wobei jedoch Dimethyl-α-Propylhomoterephthalat mit der Brommethylverbindung umgesetzt wurde. Der Produkt-Diester wurde als gelber Feststoff mit einer Ausbeute von 45% erhalten; m/e 423 (M⁺); NMR-Spektroskopie (d₆-DMSO) 0,72 (3H, t, CH₃), 1,05 (2H, m, -CH₂CH₃), 1,92 (2H, m, -CH₂C-COOMe) 3,57 (3H, s, COOCH₃), 3,63 (2H, m, 9-H′s), 3,85 (3H, s, Benzoat COOCH₃).

Schritt 3 4-Amino-4-desoxy-10-propyl-8,10- dideazaminopteroinsäure

Der Dimethylester von Schritt 2 wurde wie in Schritt 3 des Beispiels 1 decarboxyliert unter Erhalt des 10-Propylprodukts als gelber Feststoff mit einer Ausbeute von 81%; m/e 351 (M⁺); NMR-Spektroskopie (d⁶-DMSO) 0,82 (3H, t, CH₃), 1,15 (2H, m, CH₂, CH₃), 1,63 (2H, m, -CH₂CH), 3,1 (2H, m, 9-CH₂), 3,5 (1H, m, 10-H), 7,20 (1H, d, 7-H), 7,31 (1H, d, 8-H), 7,36 (2H, d, 3′,5′-H′s), 7,79 (2H, d, 2′,6′-H′s).

Schritte 4 und 5 10-Propyl-8,10-dideazaminopterin

Die Pteroinsäure wurde mit Diethyl-L-Glutamat in der in Schritt 4 von Beispiel 1 beschriebenen Weise kondensiert. Der Rohester wurde in einer Ausbeute von 38% erhalten; Dünnschichtchromatografie (CHCl₃-MeOH, 9 : 1) R _f 0,40; m/e 536 (M⁺). Der Ester wurde wie in Schritt 5 von Beispiel 1 verseift unter Erhalt des Produkts 10-Propyl-8,10-dideazaminopterin in einer Ausbeute von 53%, m/e des Tetratrimethylsilylderivats 768 (M⁺).

Claims (4)

1. 8,10-Dideazaminopterine der allgemeinen Formel in der R die Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet und deren pharmazeutisch akzeptable Salze.

2. 10-Methyl-8,10-dideazaminopterin.

3. 10-Ethyl-8,10-dideazaminopterin.

4. Arzneimittel enthaltend eine Verbindung nach Anspruch 1 zusammen mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger.