DE30814T1 - Hybridzellinie zur herstellung monoklonaler antikoerper gegen ein menschliches fruehes thymozyt-antigen - Google Patents

Claims (16)

\J i '. -; VQSS.lii ■ ν. ' ■- ^TAUCHNBR SIEBERTSTR. Λ, 'tiüOO MÜNCHEN TEL. (08Θ) 4-7 4O70 j Patent Application (Deutsche -übersetzung nach Artikel 67 EPü) " No. 80304-34-9.6 Publication No.: 0030814- Applicant: Ortho Pharmaceutical Corporation, Raritan, New Jersey (US) Translation of Claims as on file: Patentansprüche:

1. Monoklonaler Maus-Antikörper, welcher:

i) mit etwa 10 % normalen humanen Thymocyten rreagiert; ii) nicht mit irgendwelchen der normalen humanen peripheren Zellen in der T-Zellen und Null-Zellen umfassenden Gruppe reagiert; und

iii) nicht mit Knochenmarkzeilen reagiert.

2. HonöKlonaler Antikörper nach Anspruch Λ der Üasse IgG--

3- Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 1 oder 2, welcher das in Figur 1 gezeigte Reaktivitätsmuster gegenüber normalen humanen Thymocyten aufweist.

4. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis

3. welcher das in Tabelle 2 dargestellte Reaktivitätsmuster gegenüber peripheren T-Zellen und Thymocyten aufweist·

5· Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 4-, welcher das in Tabelle 3 gezeigte Reaktivitätsmuster mit T-Zellen-ALL-Stadien aufweist.

6. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 5» welcher ein T-Zellen-Antigen definiert, das auf 30 bis 50 % peripheren T-Zellen nach mitogener Stimulation erscheint-.

00308Η

7- Monoklonaler Anrikörper nach ei*aem der Ansprüche 1 bis 6, welcher durch ein Hybridom gebildet wird, das durch Fusion von Zellen von einer Maus-Myelom-Linie und Milzzellen von einer zuvor mit humanen leukämischen T-ALL-Zellen immunisierten Maus gebildet ist.

8«. Monoklonaler Antikörper, welcher von einem Hybridom ATCG CRL 8021 (OKT 9) gebildet wird.

9» Ein Hybridom, welches einen monoklonalen Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7 produziert, gebildet durch "10 Fusion von Milzzellen von einer zuvor mit humanen leukämischen T-ALL—Zellen immunisierten Maus und Zellen aus einer Maus— Myelom-Linie. *

10. Das Hybridom ATCC CRL 8021 (OET 9).

11. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonal em Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7, umfasserddie Stufen:

i) Immunisieren von Mäusen mit humanen leukämischen

T-ALL-Zellen; '

ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und Bereiten einer Suspension von Milzzellen; iii) Fusion der genannten Milzzellen· mit Maus-Myelom-

Zellen in Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht-vereinigten Myelom-Zellen nicht erhält;

v) Auswerten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis 7 angegebenen; Eigenschaften;

vi) Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden; und

vii) Gewinnen des Antikörpers aus dem Überstand über den genannten Klonen.

12. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalem Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7» umfassend, die Stufen:

i) Immunisieren von Mäusen mit humanen leukämischen T-ALL-Zellen;
ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und

Bereiten einer Suspension von Milzzellen; iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus-Myelom-

Zellen in Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in i getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die

nicht-vereinigten Myelom-Zellen nicht erhält; | v) Auswerten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des VorÜegens ; eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis 7 angegebenen Eigenschaften;

vi) Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden; vii) Überführen der genannten Elone auf intraperitonealem

Vege in Mäuse; und

viii) Ernten der malignen Asciten oder von Serum aus den

genannten Mäusen.

13. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalem Antikörper, welches ein Vermehren des Hybridoms ATCC CRL 8021 in einem geeigneten Medium und das Gewinnen des Antikörpers. aus dem Überstand über dem genannten Hybridom umfaßt.

14·. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalem Antikörper, welches ein Injizieren des Hybridoms ATCC CRL 8021 in eine Maus und das Gewinnen des Antikörpers aus den malignen Asciten oder aus dem Serum dieser Maus umfaßt.

15- Eine diagnostische Zusammensetzung zur Feststellung eines OKT 9⁺-Zellen-überschusses oder -Mangels, umfassend, im Gemisch mit einem diagnostisch annehmbaren Träger, eine zur Feststellung eines OKT 9 -Zellen-Überschusses oder —Mangels wirksame Menge eines Antikörpers nach einem der Ansprüche bis 8.

16. Eine therapeutische Zusammensetzung, enthaltend, im Gemisch mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger, eine zur Verminderung der Menge an OKT 9 -Zellen in einem Individuum mit einem Überschuß an den genannten OKT 9 -Zellen wirksame Menge des Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 8.

17» Ein Verfahren zur Feststellung eines Mangels oder eines Überschusses an OKT 9 —Zellen in einem Individuum, umfassend ein Reagieren einer T-Zellen- oder Thymocyten-Zusammensetzung des genannten Individuums mit einer diagnostisch wirksamen. Menge eines Antikörpers nach einem der Ansprüche1 bis 8 oder mit einer Zusammensetzung nach Anspruch I5 und Messen des Prozentsatzes der gesamten peripheren T-Zellen- und Thymocyten-Population, die mit dem Antikörper reagiert.

18» Ein Verfahren nach Anspruch 17» worin der Überschuß T-Zellen-ALL ist.

Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 "bis 8, oder Zusammensetzung nach Anspruch 16, zur Anwendung in der ■·· Behandlung eines Individuums mit einem Überschuß an OKT 9⁺— Zellen. '

20» Ein Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung gemäß Anspruch 15 oder 16, umfassend das Vermischen, einer diagnostisch oder therapeutisch wirksamen Menge eines Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 8 mit einem diagnostisch oder pharmazeutisch annehmbaren Träger»

BI „Pf/B 1984- 02 23/